TW201828986A - 穩定的液體調配物 - Google Patents

Abstract

所揭示的是一種穩定的液體調配物，其包含一抗體或其抗原結合部分、一醋酸鹽緩衝液、甘胺酸及一表面活性劑，其中該穩定的液體調配物不包含糖、糖醇和金屬鹽中之至少一者，該穩定的液體調配物即使在高抗體含量下仍是穩定的，且滲透壓與黏性極佳，且皮下投藥是可行的。

Description

穩定的液體調配物

技術領域 本發明關於穩定的液體調配物。

相關技藝的說明 已使用相當長的一段時間的蛋白質調配物，尤其是用於靜脈內注射的抗體調配物。蛋白質，尤其是抗體，傾向於形成聚集體及/或二聚體並且變得破碎或變性。當包含該等的調配物以靜脈內注射時，可能發生嚴重的副作用，舉例來說，過敏性休克。已經做了許多嘗試來防止其聚集與碎裂並改善其穩定性。舉例來說，經常將用於靜脈內注射的抗體凍乾以改善其儲存期間的穩定性，但是此類調配物必須在使用前用稀釋劑復原。該復原過程不方便且耗時，增加產品污染的可能性。

作為包含該抗體的習用調配物，已知各式各樣液體調配物。美國專利號8932591揭示包含抗-hTNFa抗體、多元醇、表面活性劑與緩衝液系統(檸檬酸鹽與磷酸鹽)之穩定的液體藥學調配物。然而，此具有約50 mg/mL的低抗體含量的調配物在投藥的份量與頻率係受到限制，並且仍然需要改善穩定性。

美國公開案號2005-0260204揭示包含抗體、組胺酸、多元醇及/或NaCl的抗體調配物。然而，此包含NaCl作為張力劑的液體調配物可能遇到諸如沉澱與凝膠化的問題，並且仍然需要改善穩定性。

韓國專利申請案公開號10-2014-0134689揭示包含下列的液體調配物：在緩衝液系統(琥珀酸鹽)中的有效量的指向TNF-a的抗體或其抗原結合部分、表面活性劑、張力劑(NaCl或KCl)及選自胺基酸(精胺酸)與環糊精的穩定劑。然而，該液體調配物包含NaCl或KCl作為張力劑，於是可能導致諸如沉澱與凝膠化的問題，並且由於約50 mg/mL的低抗體含量，投藥的份量與頻率可能受到限制。

於是需要能夠解決習用液體調配物的問題並且包含抗體的穩定的液體調配物。

發明概要 據此，本發明係意圖提供穩定的液體調配物。

此外，本發明係意圖提供即使在具有高抗體含量時仍穩定的穩定的液體調配物。

此外，本發明係意圖提供具有極佳滲透壓與黏度的穩定的液體調配物。

此外，本發明係意圖提供適用於皮下投藥的穩定的液體調配物。

在本發明的具體例中，一穩定的液體調配物包含一抗體或其抗原結合部分、一醋酸鹽緩衝液、甘胺酸及一表面活性劑，其中該穩定的液體調配物可不包含糖、糖醇和金屬鹽中之至少一者。

在本發明的具體例中，(A)該抗體可包含一單株抗體。

在本發明的具體例中，(A)抗體可包含一完全人類抗體。

在本發明的具體例中，(A)該抗體可包含一結合至TNF-α的抗體。

在本發明的具體例中，(A)該抗體可包含下列中之至少一者：英利昔單抗(infliximab)、阿達木單抗(adalimumab)、賽妥珠單抗(certolizumab pegol)以及戈利木單抗(golimumab)。

在本發明的具體例中，(A)該抗體可包含一輕鏈可變區，其包含：一含有SEQ ID NO:1胺基酸序列的CDR1區域、一含有SEQ ID NO:2胺基酸序列的CDR2區域及一含有SEQ ID NO:3胺基酸序列的CDR3區域，以及一重鏈可變區，其包含：一含有SEQ ID NO:4胺基酸序列的CDR1區域、一含有SEQ ID NO:5胺基酸序列的CDR2區域及一含有SEQ ID NO:6胺基酸序列的CDR3區域。

在本發明的具體例中，(A)該抗體可包含下列：一含有SEQ ID NO:7胺基酸序列的輕鏈可變區和一含有SEQ ID NO:8胺基酸序列的重鏈可變區。

在本發明的具體例中，(A)該抗體可包含下列：一含有SEQ ID NO:9胺基酸序列的輕鏈和一含有SEQ ID NO:10胺基酸序列的重鏈。

在本發明的具體例中，(A)該抗體可具有50至150 mg/mL的濃度。

在本發明的具體例中，(B)該醋酸鹽緩衝液可包含醋酸鹽。

在本發明的具體例中，醋酸鹽的份量可為1至30 mM。

在本發明的具體例中，該穩定的液體調配物可不包含下列中之至少一者：組胺酸、檸檬酸鹽、磷酸鹽、馬來酸鹽、酒石酸鹽及琥珀酸鹽。

在本發明的具體例中，(C)該甘胺酸可具有100至300 mM的濃度。

在本發明的具體例中，該穩定的液體調配物可不包含下列中之至少一者：丙胺酸、精胺酸、天門冬醯胺、天門冬胺酸、半胱胺酸、麩胺酸、麩醯胺酸、組胺酸、異亮胺酸、亮胺酸、離胺酸、甲硫胺酸、苯丙胺酸、脯胺酸、絲胺酸、蘇胺酸、色胺酸、酪胺酸及纈胺酸。

在本發明的具體例中，(D)該表面活性劑可包含聚山梨酯、泊洛沙姆、或其等的混合物。

在本發明的具體例中，(D)該表面活性劑可包含下列中之至少一者：聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯40、聚山梨醇酯60及聚山梨醇酯80。

在本發明的具體例中，(D)該表面活性劑可包含聚山梨醇酯80。

在本發明的具體例中，(D)該表面活性劑可具有0.01至1% (w/v)的濃度。

在本發明的具體例中，該穩定的液體調配物的pH可介於4.5至5.5的範圍內。

在本發明的具體例中，該穩定的液體調配物的滲透壓可介於200至400 mmol/kg的範圍內。

在本發明的具體例中，該穩定的液體調配物可不包含防腐劑、螯合劑、或其等的混合物。

在本發明的具體例中，一穩定的液體調配物包含50至150 mg/mL的一抗體或其抗原結合部分、一含有1至30 mM醋酸鹽的醋酸鹽緩衝液、100至300 mM的甘胺酸及0.01至1% (w/v)的一表面活性劑，其中該穩定的液體調配物可不包含糖、糖醇和金屬鹽中之至少一者。

在本發明的具體例中，一穩定的液體調配物包含(A) 50至150 mg/mL的一抗體或其抗原結合部分，其包含一輕鏈可變區，其包含：一含有SEQ ID NO:1胺基酸序列的CDR1區域、一含有SEQ ID NO:2胺基酸序列的CDR2區域及一含有SEQ ID NO:3胺基酸序列的CDR3區域；以及一重鏈可變區，其包含：一含有SEQ ID NO:4胺基酸序列的CDR1區域、一含有SEQ ID NO:5胺基酸序列的CDR2區域及一含有SEQ ID NO:6胺基酸序列的CDR3區域、(B)一醋酸鹽緩衝液，其包含1至30 mM的醋酸鹽、(C) 100至300 mM的甘胺酸及(D) 0.01至1% (w/v)的一表面活性劑；其中該穩定的液體調配物可不包含糖、糖醇和金屬鹽中之至少一者。

在本發明的具體例中，一穩定的液體調配物包含(A) 100 mg/mL的一抗體或其抗原結合部分，其包含一輕鏈可變區，其包含：一含有SEQ ID NO:1胺基酸序列的CDR1區域、一含有SEQ ID NO:2胺基酸序列的CDR2區域及一含有SEQ ID NO:3胺基酸序列的CDR3區域；以及一重鏈可變區，其包含：一含有SEQ ID NO:4胺基酸序列的CDR1區域、一含有SEQ ID NO:5胺基酸序列的CDR2區域及一含有SEQ ID NO:6胺基酸序列的CDR3區域、(B)一醋酸鹽緩衝液，其包含10 mM醋酸鹽、(C) 250 mM甘胺酸及(D) 0.1% (w/v)的一表面活性劑，其中該穩定的液體調配物可不包含糖、糖醇和金屬鹽中之至少一者。

在本發明的具體例中， 該穩定的液體調配物可用於皮下投藥。

在本發明的另一個具體例中，提供一預填注射筒(pre-filled syringe)，其填有該穩定的液體調配物。

在本發明的又另一個具體例中，提供一自動注射器(auto-injector)，其內包含該預填注射筒。

根據本發明，穩定的液體調配物即使在高抗體含量下仍是穩定的、可展現極佳的滲透壓與黏性，並適用於皮下投藥。

特定實施例的說明[ 穩定的液體調配物]

在本發明的具體例中，一穩定的液體調配物包含一抗體或其抗原結合部分、一醋酸鹽緩衝液、甘胺酸及一表面活性劑，並且可不包含糖、糖醇和金屬鹽中之至少一者。

「穩定的」或「穩定性」

如本案所用，術語「穩定的」或「穩定性」意指根據本發明的抗體在其製備方法及/或其儲存期間實質上保留物理穩定性、化學穩定性及/或生物活性。本領域可容易地進行用於測量抗體穩定性的各式各樣分析技術。

物理穩定性可經由本領域已知的任何方法評估，包含測量樣本的光的明顯衰減(吸光度或光密度)。此類光衰減的測量係與調配物的濁度有關。就物理穩定性而言，可測量高分子量組分含量、低分子量組分含量、完整蛋白質含量、亞可見顆粒的數目等。

化學穩定性可藉由，舉例來說，偵測和定量呈現化學修飾形式的抗體來評估。化學穩定性包含，舉例來說，可藉由離子交換層析評估的電荷變化(譬如由去醯胺化作用或氧化作用所產生)。就化學穩定性而言，可測量電荷變化體(酸性或鹼性峰)。

生物活性可經由本領域已知的任何方法評估，包括，舉例來說，使用ELISA測量抗原結合親和力。

如本案所用，用語「不包含(not comprise)」或「無包含(without comprising)」意指該相應組分絕對沒有被包含。再者，上述用語意指該相應組分實質上並不被包含，即，在不影響抗體活性或液體調配物的穩定性與黏度的範圍內被包含，舉例來說，以0至1% (w/v)、0至1 ppm(w/v)或0至1ppb (w/v)的份量被包含，其係以液體調配物的總重量為基準。

(A) 抗體

抗體是包含四條多肽鏈的免疫球蛋白分子，其係構形成俾使兩條重鏈和兩條輕鏈藉由二硫鍵彼此連接。具有其他變化結構的天然存在的抗體，舉例來說，羊駝抗體(camelid antibodies)也包含在以上定義中。每條重鏈是由重鏈可變區和重鏈不變區構成。該重鏈不變區是由三個區域(CH1、CH2和CH3)構成。每條輕鏈是由輕鏈可變區和輕鏈不變區構成。該輕鏈不變區是由一個區域(CL)構成。該重鏈可變區和輕鏈可變區可再細分為稱作互補決定區(CDR)的高度可變區，其與稱作框架區(FR)的更加保守的區配置在一起。該重鏈可變區和輕鏈可變區的各者是由三個CDRs和四個FRs構成，彼等係從胺基端至羧基端以下列順序排列：FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4。

在本發明的具體例中，該抗體可包含多株抗體、單株抗體、重組抗體、單鏈抗體、雜交抗體、嵌合抗體、人源化抗體、完全人類抗體或其等的片段。在本發明的具體例中，該抗體可包含單株抗體。可使用本領域已知的方法製備嵌合人類-小鼠單株抗體。舉例來說，英利昔單抗可藉由美國專利號6,284,471中揭示的方法製備。製作完全人類抗體以降低人源化抗體或嵌合抗體的副作用，轉殖基因小鼠和噬菌體展示技術已被證實是該等的成功製備方法。在本發明的具體例中，該抗體可包含完全人類抗體。完全人類單株抗體可藉由已知的方法製備。舉例來說，阿達木單抗可藉由美國專利號6,090,382中揭示的方法製備。

在本發明的具體例中，該抗體可包含一結合至TNF-a或TNF-a表位的抗體。該結合至TNF-a或TNF-a表位的抗體可包括英夫利昔單抗、阿達木單抗、塞妥單抗、戈利木單抗、或其等的混合物。在本發明的具體例中，該抗體可包含阿達木單抗。

在本發明的具體例中，該抗體可包含一輕鏈可變區，其包含：一含有SEQ ID NO:1胺基酸序列的CDR1區域、一含有SEQ ID NO:2胺基酸序列的CDR2區域及一含有SEQ ID NO:3胺基酸序列的CDR3區域，以及一重鏈可變區，其包含：一含有SEQ ID NO:4胺基酸序列的CDR1區域、一含有SEQ ID NO:5胺基酸序列的CDR2區域及一含有SEQ ID NO:6胺基酸序列的CDR3區域。

在本發明的具體例中，該抗體可包含：一含有SEQ ID NO:7胺基酸序列的輕鏈可變區，以及一含有SEQ ID NO:8胺基酸序列的重鏈可變區。

在本發明的具體例中，該抗體可包含：一含有SEQ ID NO:9胺基酸序列的輕鏈，以及一含有SEQ ID NO:10胺基酸序列的重鏈。

在本發明中，該抗體的濃度可為50 mg/mL或更多。該抗體的濃度可在對根據本發明的液體調配物的穩定性與黏度實質上沒有不利影響的範圍內自由調整。在本發明的具體例中，該抗體的濃度可落於50至150 mg/mL的範圍內，舉例來說，50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、69、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、95、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、118、119、120、121、122、123、124、125、126、127、128、129、130、131、132、133、134、135、136、137、138、139、140、141、142、143、144、145、146、147、148、149或150 mg/mL。在本發明的另一個具體例中，該抗體的濃度可落於下列範圍內：55至145 mg/mL、60至140 mg/mL、65至135 mg/mL、70至130 mg/mL、75至125 mg/mL、80至120 mg/mL、85至115 mg/mL、90至110 mg/mL或95至105 mg/mL。當該抗體的濃度落於以上範圍內時，由於該抗體的含量高，決定投藥之藥量和頻率的自由度可提高，而且該調配物在穩定性、黏度及其製備容易性方面可為較佳的。

(B) 醋酸鹽緩衝液

該醋酸鹽緩衝液可包含醋酸鹽。醋酸鹽的例子可包含，但不限於，醋酸鈉、醋酸鋅、醋酸鋁、醋酸銨及醋酸鉀。醋酸鹽緩衝液可藉由將醋酸鹽與醋酸混合來製備。在本發明的具體例中，醋酸鹽緩衝液可包含醋酸鈉。

在本發明的具體例中，穩定液體調配物可不包含額外的緩衝液。在本發明的具體例中，穩定液體調配物可不包含組胺酸、檸檬酸鹽、磷酸鹽、馬來酸鹽、酒石酸鹽、琥珀酸鹽或其等的混合物。當代替醋酸鹽緩衝液或除醋酸鹽緩衝液以外的額外緩衝液被包含時，該調配物的穩定性和黏度可能劣化。尤其，在UV輻射或惡劣條件下，該調配物的穩定性可能變差，在其皮下注射時可能引起相對劇烈的疼痛。

在本發明的具體例中，醋酸鹽緩衝液中的醋酸鹽的份量可在對根據本發明的液體調配物的穩定性、黏度與滲透壓實質上沒有不利影響的範圍內自由調整。舉例來說，醋酸鹽的份量可落於下列範圍內：0.1至45 mM、1至30 mM、1至25 mM、或5至15 mM，舉例來說，0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44或45 mM。當醋酸鹽的份量落於以上範圍內時，調配物的穩定性、滲透壓與黏性可為極佳的。

同時，醋酸鹽的份量為儲存在單一容器(小瓶或預填注射筒)內的調配物的醋酸鹽含量。在用於多次分發或多次投藥的容器中，取決於分發次數或投藥次數，醋酸鹽的份量可能增加數倍。相反地，當使用小型容器時，可減少醋酸鹽的份量，以適用於此。

(C) 甘胺酸

在本發明的具體例中，穩定的液體調配物包含甘胺酸作為胺基酸。甘胺酸可作用為穩定劑，並可有助於調整生理滲透壓。在本發明的具體例中，該穩定的液體調配物可不包含下列中之至少一者：丙胺酸、精胺酸、天門冬醯胺、天門冬胺酸、半胱胺酸、麩胺酸、麩醯胺酸、組胺酸、異亮胺酸、亮胺酸、離胺酸、甲硫胺酸、苯丙胺酸、脯胺酸、絲胺酸、蘇胺酸、色胺酸、酪胺酸及纈胺酸。當代替甘胺酸或除甘胺酸以外的額外胺基酸被包含時，溶解度可能變差，於是使得不可能製備液體調配物或破壞穩定性。

在本發明的具體例中，(C)甘胺酸的份量可落於100至300 mM、150至300 mM、或200至300 mM的範圍內，舉例來說，100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、118、119、120、121、122、123、124、125、126、127、128、129、130、131、132、133、134、135、136、137、138、139、140、141、142、143、144、145、146、147、148、149、150、151、152、153、154、155、156、157、158、159、160、161、162、163、164、165、166、167、168、169、170、171、172、173、174、175、176、177、178、179、180、181、182、183、184、185、186、187、188、189、190、191、192、193、194、195、196、197、198、199、200、201、202、203、204、205、206、207、208、209、210、211、212、213、214、215、216、217、218、219、220、221、222、223、224、225、226、227、228、229、230、231、232、233、234、235、236、237、238、239、240、241、242、243、244、245、246、247、248、249、250、251、252、253、254、255、256、257、258、259、260、261、262、263、264、265、266、267、268、269、270、271、272、273、274、275、276、277、278、279、280、281、282、283、284、285、286、287、288、289、290、291、292、293、294、295、296、297、298、299或300 mM。當甘胺酸的份量落於以上範圍內時，該調配物的滲透壓、穩定性(亞可見顆粒)與黏性可變得極佳。

(D) 表面活性劑

表面活性劑的例子可包含，但不限於，聚氧乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯(譬如聚山梨醇酯(Polysorbate))、聚氧乙烯烷基醚(譬如Brij)、烷基苯基聚氧乙烯醚(譬如Triton-X)、聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物(譬如泊洛沙姆(Poloxamer)、普朗尼克(Pluronic))及十二烷基硫酸鈉(SDS)。在本發明的具體例中，(D)該表面活性劑可包含聚山梨醇酯、泊洛沙姆或其等的混合物。在本發明的具體例中，(D)該表面活性劑可包含聚氧乙烯山梨糖醇酐脂肪酸酯(聚山梨醇酯)。在本發明的具體例中，(D)該表面活性劑可包含下列中之至少一者：聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯40、聚山梨醇酯60及聚山梨醇酯80。在本發明的具體例中，(D)該表面活性劑可包含聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯80或其等的混合物。在本發明的具體例中，(D)該表面活性劑可包含聚山梨醇酯80。

在本發明的具體例中，(D)表面活性劑的濃度可在對根據本發明的穩定液體調配物的穩定性與黏度沒有不利影響的範圍內自由調整。在本發明的具體例中，(D)表面活性劑的濃度可落於0.001至5% (w/v)、0.01至1% (w/v)、0.02至1% (w/v)、或0.05至0.5% (w/v)的範圍內，舉例來說，0.001、0.002、0.003、0.004、0.005、0.006、0.007、0.008、0.009、0.01、0.02、0.03、0.04、0.05、0.06、0.07、0.08、0.09、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1、1.5、2、2.5、3、3.5、4、4.5或5% (w/v)。當(D)表面活性劑的濃度落於以上範圍內時，可展現極佳的穩定性和黏度。

未包含或額外的組分

在本發明的具體例中，該穩定的液體調配物可不包含糖、糖醇和金屬鹽中之至少一者。

糖，例如單醣、雙醣、寡醣、多醣或其等之兩或多者的混合物可不包含在其中。單醣的例子可包含，但不限於，葡萄糖、果糖、半乳糖等。雙醣的例子可包含，但不限於，蔗糖、乳糖、麥芽糖、海藻糖等。寡醣的例子可包含，但不限於，果寡醣、半乳寡醣、甘露寡糖等。多醣的例子可包含，但不限於，澱粉、肝醣、纖維素、幾丁質、果膠等。

糖醇的例子可包含，但不限於，甘油、赤蘚糖醇、蘇糖醇、阿拉伯糖醇、木糖醇、核糖醇、甘露醇、山梨糖醇、半乳糖醇、岩藻糖醇、艾杜糖醇、肌醇、倭勒米糖醇(volemitol)、異麥芽糖醇、麥芽糖醇、乳糖醇、麥芽三糖醇、麥芽四糖醇、聚乙醇胺等。

在本發明的具體例中，可不包含糖或糖醇，例如山梨糖醇、甘露醇、海藻糖、蔗糖、或其等之兩或多者的混合物。

當包含糖或糖醇時，液體調配物的黏度可能增加，藉其患者在皮下注射期間可能經歷更劇烈的疼痛。

在本發明的具體例中，可不包含金屬鹽，例如NaCl、KCl、NaF、KBr、NaBr、Na₂ SO₄ 、NaSCN、K₂ SO₄ 或其等的混合物。當包含該等化合物時，可能發生沉澱，所得調配物可能具有明膠形狀並可能展現很差的穩定性。

在本發明的具體例中，可不包含螯合劑(譬如EDTA)。當包含螯合劑時，氧化速率可能增加。

在本發明的具體例中，可不包含防腐劑。防腐劑的例子可包含十八烷基二甲基苄基氯化銨、氯化六甲雙銨(hexamethonium chloride)、苯扎氯銨(benzalkonium chloride)、苄索氯銨(benzethonium chloride)、酚、丁醇、苄醇、對羥基苯甲酸烷基酯、兒茶酚、間苯二酚、環己醇、3-戊醇、間甲酚等等。當包含此類防腐劑時，可能無助於改善穩定性。

在本發明的具體例中， 該穩定的液體調配物可在對抗體的活性和調配物的穩定性和黏度實質上沒有不利影響的範圍內再包含本領域已知的添加劑。舉例來說，可再包含水性載體、抗氧化劑或其等之兩或多者的混合物。水性載體是藥學上可接受(投至人體後是安全無毒)的載體，並可用於製備液體調配物。水性載體的例子可包含，但不限於，注射用無菌水(SWFI)、注射用抑菌水(BWFI)、無菌鹽水溶液、林格氏液、右旋糖、及類似物。抗氧化劑的例子可包含，但不限於，抗壞血酸及類似物。

pH

在本發明的具體例中，穩定的液體調配物的pH可為4.5至5.5，舉例來說，4.5、4.6、4.7、4.8、4.9、5.0、5.1、5.2、5.3、5.4或5.5。在本發明的具體例中，該pH可使用醋酸鹽緩衝液來調整。明確地說，當包含預定份量的醋酸鹽緩衝液時，即使不使用額外的pH控制劑，亦可顯現以上範圍內的pH。使用包含組胺酸、檸檬酸鹽、磷酸鹽、馬來酸鹽、酒石酸鹽、琥珀酸鹽或其等混合物的緩衝液可能難以實現以上範圍內的pH。在再包含酸或鹼(譬如氫氧化鈉)作為pH控制劑的情況下，抗體的穩定性可能劣化。

滲透壓

在本發明的具體例中，穩定的液體調配物的滲透壓可為200至400 mmol/kg、250至350 mmol/kg、或270至330 mmol/kg，舉例來說，200、201、202、203、204、205、206、207、208、209、210、211、212、213、214、215、216、217、218、219、220、221、222、223、224、225、226、227、228、229、230、231、232、233、234、235、236、237、238、239、240、241、242、243、244、245、246、247、248、249、250、251、252、253、254、255、256、257、258、259、260、261、262、263、264、265、266、267、268、269、270、271、272、273、274、275、276、277、278、279、280、281、282、283、284、285、286、287、288、289、290、291、292、293、294、295、296、297、298、299、300、301、302、303、304、305、306、307、308、309、310、311、312、313、314、315、316、317、318、319、320、321、322、323、324、325、326、327、328、329、330、331、332、333、334、335、336、337、338、339、340、341、342、343、344、345、346、347、348、349、350、351、352、353、354、355、356、357、358、359、360、361、362、363、364、365、366、367、368、369、370、371、372、373、374、375、376、377、378、379、380、381、382、383、384、385、386、387、388、389、390、391、392、393、394、395、396、397、398、399或400 mmol/kg。當滲透壓落於以上範圍內時，皮下投藥後可能發生的疼痛可最小化。在本發明的具體例中，滲透壓可使用醋酸鹽緩衝液與甘胺酸來調整。明確地說，當包含預定份量的醋酸鹽緩衝液與甘胺酸時，即使不使用額外的滲透壓控制劑，亦可顯現以上範圍內的滲透壓。在再包含NaCl作為額外的滲透壓控制劑的情況下，可能發生沉澱，所得調配物可能具有明膠形狀及差劣的穩定性。

黏性

在本發明的具體例中，在製備方法後立刻於室溫(25°C±3°C)測得或在儲存於5°C±3°C或40°C±2°C的6週後測得的穩定的液體調配物的黏性可為0.5至5.0 cp，舉例來說，0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2.0、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3.0、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、4.0、4.1、4.2、4.3、4.4、4.5、4.6、4.7、4.8、4.9或5.0 cp。鑑於以上黏性範圍，皮下投藥後可能發生的疼痛可最小化，該調配物可容易地被製備並可展現極佳的穩定性。當將所得調配物施加至預填注射筒或自動注射器時，可產生極佳的柱塞鬆脫力或動態滑動力。

在本發明的具體例中，術語「穩定」液體調配物可指滿足下列標準之至少一者的液體調配物。

外觀分析

-液體調配物，在5°C±3°C的溫度儲存6週後觀察，其清晰度被認為是澄清的。

-液體調配物，在5°C±3°C的溫度儲存6週後觀察，其清晰度被認為是澄清的。

-液體調配物，在40°C±2°C的溫度儲存6週後觀察，其清晰度被認為是澄清的。

-液體調配物，在40°C±2°C的溫度與75±5%的相對濕度儲存6週後觀察，其清晰度被認為是澄清的。

濁度

-液體調配物，在5°C±3°C的溫度儲存6週後，使用分光光度計在350 nm測得其吸光度為0至0.0900。

-液體調配物，在5°C±3°C的溫度儲存6週後，使用分光光度計在350 nm測得其吸光度為0至0.0900。

-液體調配物，在40°C±2°C的溫度儲存6週後，使用分光光度計在350 nm測得其吸光度為0至0.1300。

-液體調配物，在40°C±2°C的溫度與75±5%的相對濕度儲存6週後，使用分光光度計在350 nm測得其吸光度為0至0.1300。

-液體調配物，在45°C±2°C的溫度儲存3週後，使用分光光度計在350 nm測量其吸光度為0至0.0900。

高分子量組分( 其滯留時間位於主峰( 完整IgG) 之前的峰)

-液體調配物，在5°C±3°C的溫度儲存6週後，經由粒徑篩析高效液相層析(SE-HPLC)測得其高分子量組分含量為0至0.3%。

-液體調配物，在5°C±3°C的溫度儲存6週後，經由SE-HPLC測得其高分子量組分含量為0至0.3%。

-液體調配物，在40°C±2°C的溫度儲存6週後，經由SE-HPLC測得其高分子量組分含量為0至0.9%。

-液體調配物，在40°C±2°C的溫度與75±5%的相對濕度儲存6週後，經由SE-HPLC測得其高分子量組分含量為0至0.9%。

-液體調配物，在45°C±2°C的溫度儲存3週後，經由SE-HPLC測得其高分子量組分含量為0至1.4%。

主要組分含量( 主峰)

-液體調配物，在5°C±3°C的溫度儲存6週後，經由SE-HPLC測得其主要組分含量為99.7%至100%。

-液體調配物，在5°C±3°C的溫度儲存6週後，經由SE-HPLC測得其主要組分含量為99.7%至100%。

-液體調配物，在40°C±2°C的溫度儲存6週後，經由SE-HPLC測得其主要組分含量為95.0%至100%。

-液體調配物，在40°C±2°C的溫度與75±5%的相對濕度儲存6週後，經由SE-HPLC測得其主要組分含量為95.0%至100%。

低分子量組分( 其滯留時間位於主峰( 完整IgG) 之後的峰)

-液體調配物，在5°C±3°C的溫度儲存6週後，經由SE-HPLC測得其低分子量組分含量為0.0%。

-液體調配物，在5°C±3°C的溫度儲存6週後，經由SE-HPLC測得其低分子量組分含量為0.0%。

-液體調配物，在40°C±2°C的溫度儲存6週後，經由SE-HPLC測得其低分子量組分含量為0至4.0%。

-液體調配物，在40°C±2°C的溫度與75±5%的相對濕度儲存6週後，經由SE-HPLC測得其低分子量組分含量為0至4.0%。

完整免疫球蛋白G 含量

-液體調配物，在5°C±3°C的溫度儲存6週後，經由非還原性毛細管電泳-十二烷基硫酸鈉(NR CE-SDS)測得其完整免疫球蛋白G含量(完整IgG%)為98.0%至100%。

-液體調配物，在5°C±3°C的溫度儲存6週後，經由NR CE-SDS測得其完整免疫球蛋白G含量(完整IgG%)為98.0%至100%。

-液體調配物，在40°C±2°C的溫度儲存6週後，經由NR CE-SDS測得其完整免疫球蛋白G含量(完整IgG%)為93.1%至100%。

-液體調配物，在40°C±2°C的溫度與75±5%的相對濕度儲存6週後，經由NR CE-SDS測得其完整免疫球蛋白G含量(完整IgG%)為93.1%至100%。

亞可視顆粒的數目

–液體調配物，在40°C±2°C的溫度儲存6週後，經由微流量成像(MFI)測得其亞可視顆粒(1.00 mm £，＜ 100.00 mm)的數目為0至10,000。

-液體調配物，在40°C±2°C的溫度與75±5%的相對濕度儲存6週後，經由MFI測得其亞可視顆粒(1.00 mm £，＜ 100.00 mm)的數目為0至10,000。

-液體調配物，在45°C±2°C的溫度儲存3週後，經由MFI測得其亞可視顆粒(1.00 mm £，＜ 100.00 mm)的數目為0至5,000。

[ 製備穩定的液體調配物的方法]

根據本發明的穩定的液體調配物可使用任何已知的方法製備，其製備並不限於特定方法。舉例來說，本發明的液體調配物可藉由添加醋酸鹽緩衝液調整包含甘胺酸與表面活性劑的溶液的pH，隨後將抗體加入所得混合溶液來製備。

在本發明的具體例中，在製備液體調配物時，可進行或不進行凍乾方法。

當不進行凍乾方法時，舉例來說，本發明的液體調配物係製備並可在諸如無菌處理或類似處理之加工後立刻置於容器中。

當進行凍乾方法時，舉例來說，本發明的液體調配物可被製備並凍乾，或者本發明的液體調配物可被製備、凍乾並儲存，接著補充或置換經由凍乾及/或儲存被去除或改質的任何組分，藉此獲得本發明的液體調配物。再者，再者，只有除了在本發明的液體調配物中可經由凍乾及/或儲存而被去除或改質的組分以外的組分可被凍乾、或被凍乾並儲存，然後可對其添加該除外的組分，藉此獲得本發明的液體調配物。

[ 使用穩定的液體調配物的方法]

根據本發明的穩定的液體調配物可用於治療相應抗體所靶向的疾病，舉例來說，TNF-α活性對其有害的疾病。TNF-α活性對其有害的疾病的例子可包含，但不限於，敗血症、自體免疫疾病、傳染病、移植、惡性癌症、肺部病症、腸部病症、心臟病症等等。

在本發明的具體例中，TNF-α活性對其有害的疾病可選自類風濕性關節炎、關節黏連性脊椎炎、潰瘍性結腸炎、成人克隆氏症(Crohn's disease)、小兒克隆氏症、牛皮癬和牛皮癬性關節炎。

本發明的穩定液體調配物可使用一次或數次，或用於皮下自身投藥。

包含該抗體的液體調配物的組分濃度係如上所述，該液體調配物的總體積可落於0.2至10.0 mL的範圍內，舉例來說，0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0、1.1、1.2、1.3、1.4、1.5、1.6、1.7、1.8、1.9、2.0、2.1、2.2、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3.0、3.1、3.2、3.3、3.4、3.5、3.6、3.7、3.8、3.9、4.0、4.1、4.2、4.3、4.4、4.5、4.6、4.7、4.8、4.9、5.0、5.1、5.2、5.3、5.4、5.5、5.6、5.7、5.8、5.9、6.0、6.1、6.2、6.3、6.4、6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7.0、7.1、7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、7.9、8.0、8.1、8.2、8.3、8.4、8.5、8.6、8.7、8.8、8.9、9.0、9.1、9.2、9.3、9.4、9.5、9.6、9.7、9.8、9.9或10.0 mL。

本發明的液體調配物的投藥份量和時機可取決於疾病的類型、疾病的嚴重程度與進展、患者的健康和治療方案、以及治療醫師的判斷，而不限於特定值。舉例來說，可以抗體的質量為基準，投予0.1至10 mg/kg的份量的包含該液體調配物的單一產品或數個產品(譬如在患者具有50 kg體重的情況下為5至500 mg抗體)，然後可每週、隔週、每3週、每月、每2個月、或每3個月進行相同或不同份量的投藥。再者，液體調配物的投藥份量和時機可參照包含該抗體的批准藥劑，舉例來說，Humira標示來決定。

[ 治療方法與穩定化方法]

本發明提出一種治療相應抗體所靶向之疾病(舉例來說，TNF-α的活性對其有害的疾病)的方法，該方法包含向患有相應抗體所靶向之疾病，舉例來說，TNF-α的活性對其有害的疾病的患者投予穩定的液體調配物，該穩定的液體調配物包含(A)一抗體或其抗原結合部分、(B)一醋酸鹽緩衝液、(C)甘胺酸及(D)一表面活性劑，而不包含糖、糖醇和金屬鹽中之至少一者。

此外，本發明提出一種穩定在一液體調配物中之一抗體的方法，該方法包含製備一穩定的液體調配物，其包含(A)一抗體或其抗原結合部分、(B)一醋酸鹽緩衝液、(C)甘胺酸及(D)一表面活性劑，而不包含糖、糖醇和金屬鹽中之至少一者。

在治療方法或穩定化方法的具體例中，(A)該抗體可包含一單株抗體。

在治療方法或穩定化方法的具體例中，(A)該抗體可包含一完全人類抗體。

在治療方法或穩定化方法的具體例中，(A)該抗體可包含一結合至TNF-α的抗體。

在治療方法或穩定化方法的具體例中，(A)該抗體可包含下列中之至少一者：英利昔單抗、阿達木單抗、賽妥珠單抗及戈利木單抗。

在治療方法或穩定化方法的具體例中，(A)該抗體可包含一輕鏈可變區，其包含：一含有SEQ ID NO:1胺基酸序列的CDR1區域、一含有SEQ ID NO:2胺基酸序列的CDR2區域及一含有SEQ ID NO:3胺基酸序列的CDR3區域；以及一重鏈可變區，其包含：一含有SEQ ID NO:4胺基酸序列的CDR1區域、一含有SEQ ID NO:5胺基酸序列的CDR2區域及一含有SEQ ID NO:6胺基酸序列的CDR3區域。

在治療方法或穩定化方法的具體例中，(A)該抗體可包含：一含有SEQ ID NO:7胺基酸序列的輕鏈可變區，以及一含有SEQ ID NO:8胺基酸序列的重鏈可變區。

在治療方法或穩定化方法的具體例中，(A)該抗體可包含：一含有SEQ ID NO:9胺基酸序列的輕鏈，以及一含有SEQ ID NO:10胺基酸序列的重鏈。

在治療方法或穩定化方法的具體例中，(A)該抗體可具有50至150 mg/mL的濃度。

在治療方法或穩定化方法的具體例中，(B)該醋酸鹽緩衝液可包含醋酸鹽。

在治療方法或穩定化方法的具體例中，醋酸鹽的份量可為1至30 mM。

在治療方法或穩定化方法的具體例中，該穩定的液體調配物可不包含下列中之至少一者：組胺酸、檸檬酸鹽、磷酸鹽、馬來酸鹽、酒石酸鹽及琥珀酸鹽。

在治療方法或穩定化方法的具體例中，(C)甘胺酸可具有100至300 mM的濃度。

在治療方法或穩定化方法的具體例中，該穩定的液體調配物可不包含下列中之至少一者：丙胺酸、精胺酸、天門冬醯胺、天門冬胺酸、半胱胺酸、麩胺酸、麩醯胺酸、組胺酸、異亮胺酸、亮胺酸、離胺酸、甲硫胺酸、苯丙胺酸、脯胺酸、絲胺酸、蘇胺酸、色胺酸、酪胺酸及纈胺酸。

在治療方法或穩定化方法的具體例中，(D)該表面活性劑可包含聚山梨酯、泊洛沙姆或其等的混合物。

在治療方法或穩定化方法的具體例中，(D)該表面活性劑可包含下列中之至少一者：聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯40、聚山梨醇酯60及聚山梨醇酯80。

在治療方法或穩定化方法的具體例中，(D)該表面活性劑可包含聚山梨醇酯80。

在治療方法或穩定化方法的具體例中，(D)該表面活性劑可具有0.01至1% (w/v)的濃度。

在治療方法或穩定化方法的具體例中，該穩定的液體調配物可具有介於4.5至5.5的範圍內的pH。

在治療方法或穩定化方法的具體例中，該穩定的液體調配物可具有介於200至400 mmol/kg的範圍內的滲透壓。

在治療方法或穩定化方法的具體例中，該穩定的液體調配物可不包含防腐劑、螯合劑或其等的混合物。

在治療方法或穩定化方法的具體例中，該穩定的液體調配物可另包含水性載體、抗氧化劑、或其等之兩或多者的混合物。

在治療方法或穩定化方法的具體例中，該穩定的液體調配物可具有介於0.5至5.0 cp的範圍內的黏性。

在治療方法或穩定化方法的具體例中，該穩定的液體調配物可用於皮下投藥。

[ 產品]

本發明提出一種產品，其包含該穩定的液體調配物和容納處於閉合狀態的穩定藥學調配物的容器。

穩定的液體調配物係如上所述。

在本發明的具體例中，該容器可由玻璃、聚合物(塑料)、金屬、或類似物形成，但不限於該等。在本發明的具體例中，該容器為瓶子、小瓶、注射筒，舉例來說，可預填或預填的注射筒、或管子，但不限於該等。在本發明的具體例中，該容器可為由玻璃或聚合物製成的小瓶，或由玻璃或聚合物製成的預填注射筒。在本發明的具體例中，提供一填有該穩定的液體調配物的預填注射筒。

在本發明的具體例中，該預填注射筒的內表面可塗覆有矽油。在此情況下，可能會出現極佳的柱塞鬆脫力或動態滑動力。在本發明的具體例中，該預填注射筒的內表面可不塗覆矽油。在此情況下，該調配物的穩定性可為極佳的。該容器可為單次藥量或多次藥量容器。

在本發明的具體例中，該產品可為自動注射器，該自動注射器內可包含填有該穩定的液體調配物的預填注射筒。該自動注射器可包含，舉例來說，容納預填注射筒的圓柱形外殼和藉由向該預填注射筒的塞子施加壓力而開始投藥的致動器(譬如彈簧)，並可由玻璃、聚合物(塑料)、或金屬構成。作為自動注射器，可使用已知產品的任何一者，或者可客製化包含該預填注射筒的產品。

在本發明的具體例中，該產品可再包含使用該穩定的液體調配物的方法與儲存該穩定的液體調配物的方法的任一者或兩者的說明書。在本發明的具體例中，使用方法包含治療相應抗體所靶向的疾病，舉例來說，TNF-a的活性對其有害的疾病，並可包含投藥途徑、藥量及時機。

在本發明的具體例中，該產品可包含從商業目的和用戶的角度看來必要的其他工具，舉例來說，針、注射器、以及類似物。

經由下列實施例將更好地理解本發明，該等僅僅是為了例示而提出的，但不應被解讀為限制本發明的範疇。

實施例

關於實施例1與2和比較實施例1至5與7至12所使用的抗體，使用的是由Celltrion公司製作的阿達木單抗，關於比較實施例6所使用的抗體，使用的是由AbbVie公司製作的阿達木單抗(HumiraÒ)。

為了測量實施例的液體調配物的物理和化學穩定性，使用下列方法。

-外觀分析

觀察調配物的澄清度。

-濁度

吸光度係於350 nm使用UV-Vis分光光度計測量。

-主要組分含量

主要組分含量(主峰；%)係使用粒徑篩析高效液相層析(SE-HPLC)測量。

-高分子量組分含量

高分子量組分含量(峰前；%)係使用SE-HPLC測量。

-低分子量組分含量

低分子量組分含量(峰後；%)係使用SE-HPLC測量。

-完整免疫球蛋白G含量(完整IgG%)

完整免疫球蛋白G含量(%)係使用非還原性毛細管電泳-十二烷基硫酸鈉(NR CE-SDS)測量。

-亞可視顆粒的數目

亞可視顆粒(1.00 mm ≤，＜ 100.00 mm)的數目係使用微流量成像(MFI)測量。

-滲透壓

滲透壓(mmol/kg)係使用滲透壓計(VAPRO 5520)測量。

-黏性

500 mL注射筒的黏性係於25°C±0.1°C，使用配有流量槽(B05感測器類型，50 mm槽深)的微毛細管流變計(視剪切率：103 ~ 105 s-1)測得。

實施例1 與2 和比較實施例1 至12

在實施例1與2和比較實施例1至12的液體調配物中，製備各個緩衝液以適應相應的pH，添加胺基酸或金屬鹽或糖或糖醇，再添加抗體，並另外添加表面活性劑，於是產生下表1列示的樣本。個別組分的特定份量顯示於下表1。總體積為3 mL。 [表1]

實施例1與2和比較實施例1至7的液體調配物係儲存在5±3°C的溫度、40±2°C的溫度及75±5%的相對濕度達6週。

再者，實施例1與比較實施例8至12的液體調配物係儲存在45±2°C的溫度達3週。

外觀分析 [表2]

參照表2，從製備的時間點來看，相較於比較實施例1至5，實施例1與2的液體調配物展現相對澄清，並未觀察到在個別儲存條件下隨著時間推移的外觀變化。

濁度 [表3]

參照表3，實施例1與2─包含醋酸鹽緩衝液與甘胺酸─在濁度是最優異的，即使在40°C、6週後，實施例1與2的吸光度相較於比較實施例1至6仍是低的。 [表4]

參照表4，實施例1─包含10 mM醋酸鹽緩衝液與250 mM甘胺酸─在濁度是最優異的，尤其，即使在45°C、3週後，實施例1的吸光度為0.1800或更少，於是，相較於比較實施例8至12仍是低的。

高分子量組分含量 [表5]

參照表5，實施例1的高分子量組分含量在所有條件中皆是最低的。尤其，在40°C、6週後，實施例1的高分子量組分含量係少於1.0%。 [表6]

參照表6，在45°C、3週後，實施例1的高分子量組分含量係少於1.5%。

主要組分含量 [表7]

參照表7，在40°C、6週後，實施例1的單體含量為95.0%或更多，其係高於比較實施例1至6。 [表8]

參照表8，在45°C、3週後，實施例1的單體含量為95.0%或更多，其係高於比較實施例11與12。

低分子量組分含量 [表9]

參照表9，在40°C、6週後，實施例1的低分子量組分含量係少於4%，其係低於比較實施例1至6。

完整免疫球蛋白G 含量( 完整IgG%) [表10]

參照表10，在40°C、6週後，實施例1的完整IgG%為93.10%或更多，其係高於比較實施例1至6。

亞可視顆粒(1.00 mm £ ，＜ 100.00 mm) 的數目 [表11]

參照表11，在實施例1或2中，其中使用250或280 mM甘胺酸，在40°C、6週後，亞可視顆粒的數目為10,000或更少。然而，在Humira調配物形式的比較實施例6中，在40°C、6週後，亞可視顆粒的數目為50,000或更多。再者，在使用310 mM甘胺酸的比較實施例7中，在40°C、6週後，亞可視顆粒的數目為35,000或更多。 [表12]

參照表12，在使用250 mM甘胺酸的實施例1中，在45°C、3週後，亞可視顆粒的數目為5000或更少。然而，在比較實施例8與12中，在45°C、3週後，亞可視顆粒的數目為4,000,000或更多。

滲透壓 [表13]

參照表13，比較實施例10的滲透壓係少於200 mmol/kg，其係低於實施例1與比較實施例8、9、11與12。

黏性 [表14]

參照表14，在45°C、3週後，測得實施例1的黏性係少於3.0。

<110> 南韓商賽特瑞恩股份有限公司<120> 穩定的液體調配物<130> CPD2017003KR<160> 10<170> KoPatentIn 3.0<210> 1<211> 11<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 抗體<400> 1Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Tyr Leu Ala 1 5 10 <210> 2<211> 7<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 抗體<400> 2Ala Ala Ser Thr Leu Gln Ser 1 5 <210> 3<211> 9<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 抗體<400> 3Gln Arg Tyr Asn Arg Ala Pro Tyr Thr 1 5 <210> 4<211> 5<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 抗體<400> 4Asp Tyr Ala Met His 1 5<210> 5<211> 17<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 抗體<400> 5Ala Ile Thr Trp Asn Ser Gly His Ile Asp Tyr Ala Asp Ser Val Glu 1 5 10 15 Gly <210> 6<211> 12<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 抗體<400> 6Val Ser Tyr Leu Ser Thr Ala Ser Ser Leu Asp Tyr 1 5 10 <210> 7<211> 107<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 抗體<400> 7Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15 Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gln Gly Ile Arg Asn Tyr 20 25 30 Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45 Tyr Ala Ala Ser Thr Leu Gln Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60 Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gln Pro 65 70 75 80 Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Arg Tyr Asn Arg Ala Pro Tyr 85 90 95 Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 8<211> 120<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 抗體<400> 8Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly Arg Ser 1 5 10 15 Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asp Asp Tyr Ala 20 25 30 Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val Ser 35 40 45 Ala Ile Thr Trp Asn Ser Gly His Ile Asp Tyr Ala Asp Ser Val Glu 50 55 60 Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu 65 70 75 80 Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala 85 90 95 Lys Val Ser Tyr Leu Ser Thr Ala Ser Ser Leu Asp Tyr Trp Gly Gln 100 105 110 Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120<210> 9<211> 236<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 抗體<400> 9Met Asp Phe Gln Val Gln Ile Ile Ser Phe Leu Leu Ile Ser Ala Ser 1 5 10 15 Val Ile Met Ser Arg Gly Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser 20 25 30 Leu Ser Ala Ser Val Gly Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser 35 40 45 Gln Gly Ile Arg Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys 50 55 60 Ala Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Thr Leu Gln Ser Gly Val 65 70 75 80 Pro Ser Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr 85 90 95 Ile Ser Ser Leu Gln Pro Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Arg 100 105 110 Tyr Asn Arg Ala Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Val Glu Ile 115 120 125 Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp 130 135 140 Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn145 150 155 160 Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu 165 170 175 Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp 180 185 190 Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr 195 200 205 Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser 210 215 220 Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys225 230 235 <210> 10<211> 470<212> PRT<213> 人工序列<220><223> 抗體<400> 10Met Gly Trp Ser Leu Ile Leu Leu Phe Leu Val Ala Val Ala Thr Arg 1 5 10 15 Val Leu Ser Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln 20 25 30 Pro Gly Arg Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe 35 40 45 Asp Asp Tyr Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu 50 55 60 Glu Trp Val Ser Ala Ile Thr Trp Asn Ser Gly His Ile Asp Tyr Ala 65 70 75 80 Asp Ser Val Glu Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn 85 90 95 Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val 100 105 110 Tyr Tyr Cys Ala Lys Val Ser Tyr Leu Ser Thr Ala Ser Ser Leu Asp 115 120 125 Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys 130 135 140 Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly145 150 155 160 Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro 165 170 175 Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr 180 185 190 Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val 195 200 205 Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn 210 215 220 Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro225 230 235 240 Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu 245 250 255 Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp 260 265 270 Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp 275 280 285 Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly 290 295 300 Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn305 310 315 320 Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp 325 330 335 Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro 340 345 350 Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu 355 360 365 Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn 370 375 380 Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile385 390 395 400 Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr 405 410 415 Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys 420 425 430 Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys 435 440 445 Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu 450 455 460 Ser Leu Ser Pro Gly Lys465 470

Claims (27)

1. 一種穩定的液體調配物，其包含： (A)一抗體或其抗原結合部分； (B)一醋酸鹽緩衝液； (C)甘胺酸；以及 (D)一表面活性劑， 其中該穩定的液體調配物不包含糖、糖醇和金屬鹽中之至少一者。
2. 如請求項1之穩定的液體調配物，其中(A)該抗體包含一單株抗體。
3. 如請求項1之穩定的液體調配物，其中(A)該抗體包含一完全人類抗體。
4. 如請求項1之穩定的液體調配物，其中(A)該抗體包含一結合至TNF-α的抗體。
5. 如請求項1之穩定的液體調配物，其中(A)該抗體包含下列中之至少一者：英利昔單抗(infliximab)、阿達木單抗(adalimumab)、賽妥珠單抗(certolizumab pegol)以及戈利木單抗(golimumab)。
6. 如請求項1之穩定的液體調配物，其中(A)該抗體包含： 一輕鏈可變區，其包含：一含有SEQ ID NO:1胺基酸序列的CDR1區域、一含有SEQ ID NO:2胺基酸序列的CDR2區域及一含有SEQ ID NO:3胺基酸序列的CDR3區域；以及 一重鏈可變區，其包含：一含有SEQ ID NO:4胺基酸序列的CDR1區域、一含有SEQ ID NO:5胺基酸序列的CDR2區域及一含有SEQ ID NO:6胺基酸序列的CDR3區域。
7. 如請求項1之穩定的液體調配物，其中(A)該抗體包含一含有SEQ ID NO:7胺基酸序列的輕鏈可變區和一含有SEQ ID NO:8胺基酸序列的重鏈可變區。
8. 如請求項1之穩定的液體調配物，其中(A)該抗體包含一含有SEQ ID NO:9胺基酸序列的輕鏈和一含有SEQ ID NO:10胺基酸序列的重鏈。
9. 如請求項1之穩定的液體調配物，其中(A)該抗體具有50至150 mg/mL的濃度。
10. 如請求項1之穩定的液體調配物，其中(B)該醋酸鹽緩衝液包含醋酸鹽。
11. 如請求項1之穩定的液體調配物，其中該醋酸鹽的份量為1至30 mM。
12. 如請求項1之穩定的液體調配物，其中該穩定的液體調配物不包含下列中之至少一者：組胺酸、檸檬酸鹽、磷酸鹽、馬來酸鹽、酒石酸鹽及琥珀酸鹽。
13. 如請求項1之穩定的液體調配物，其中(C)該甘胺酸具有100至300 mM的濃度。
14. 如請求項1之穩定的液體調配物，其中該穩定的液體調配物不包含下列中之至少一者：丙胺酸、精胺酸、天門冬醯胺、天門冬胺酸、半胱胺酸、麩胺酸、麩醯胺酸、組胺酸、異亮胺酸、亮胺酸、離胺酸、甲硫胺酸、苯丙胺酸、脯胺酸、絲胺酸、蘇胺酸、色胺酸、酪胺酸及纈胺酸。
15. 如請求項1之穩定的液體調配物，其中(D)該表面活性劑包含聚山梨酯、泊洛沙姆或其等的混合物。
16. 如請求項1之穩定的液體調配物，其中(D)該表面活性劑包含下列中之至少一者：聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯40、聚山梨醇酯60及聚山梨醇酯80。
17. 如請求項1之穩定的液體調配物，其中(D)該表面活性劑包含聚山梨醇酯80。
18. 如請求項1之穩定的液體調配物，其中(D)該表面活性劑具有0.01至1% (w/v)的濃度。
19. 如請求項1之穩定的液體調配物，其具有介於4.5至5.5的範圍內的pH。
20. 如請求項1之穩定的液體調配物，其具有介於200至400 mmol/kg的範圍內的滲透壓。
21. 如請求項1之穩定的液體調配物，其中該穩定的液體調配物不包含防腐劑、螯合劑或其等的混合物。
22. 一種穩定的液體調配物，其包含： (A) 50至150 mg/mL的一抗體或其抗原結合部分； (B)一醋酸鹽緩衝液，其包含1至30 mM的醋酸鹽； (C) 100至300 mM的甘胺酸；以及 (D) 0.01至1% (w/v)的一表面活性劑， 其中該穩定的液體調配物不包含糖、糖醇和金屬鹽中之至少一者。
23. 一種穩定的液體調配物，其包含： (A) 50至150 mg/mL的一抗體或其抗原結合部分，其包含一輕鏈可變區及一重鏈可變區；該輕鏈可變區包含：一含有SEQ ID NO:1胺基酸序列的CDR1區域、一含有SEQ ID NO:2胺基酸序列的CDR2區域及一含有SEQ ID NO:3胺基酸序列的CDR3區域；該重鏈可變區包含：一含有SEQ ID NO:4胺基酸序列的CDR1區域、一含有SEQ ID NO:5胺基酸序列的CDR2區域及一含有SEQ ID NO:6胺基酸序列的CDR3區域； (B)一醋酸鹽緩衝液，其包含1至30 mM的醋酸鹽； (C) 100至300 mM的甘胺酸；以及 (D) 0.01至1% (w/v)的一表面活性劑， 其中該穩定的液體調配物不包含糖、糖醇和金屬鹽中之至少一者。
24. 一種穩定的液體調配物，其包含： (A) 100 mg/mL的一抗體或其抗原結合部分，其包含一輕鏈可變區及一重鏈可變區；該輕鏈可變區包含：一含有SEQ ID NO:1胺基酸序列的CDR1區域、一含有SEQ ID NO:2胺基酸序列的CDR2區域及一含有SEQ ID NO:3胺基酸序列的CDR3區域；該重鏈可變區包含：一含有SEQ ID NO:4胺基酸序列的CDR1區域、一含有SEQ ID NO:5胺基酸序列的CDR2區域及一含有SEQ ID NO:6胺基酸序列的CDR3區域； (B)一醋酸鹽緩衝液，其包含10 mM醋酸鹽； (C) 250 mM甘胺酸；以及 (D) 0.1% (w/v)的一表面活性劑， 其中該穩定的液體調配物不包含糖、糖醇和金屬鹽中之至少一者。
25. 如請求項1至24中任一項之穩定的液體調配物，其係用於皮下投藥。
26. 一種預填注射筒(pre-filled syringe)，其填有如請求項1至24中任一項之穩定的液體調配物。
27. 一種自動注射器(auto-injector)，其中包含如請求項26之預填注射筒。