TW201817416A - 用於治療膀胱癌之配方 - Google Patents

Abstract

係揭示一種用於製造與使用化療用前體脂質體與脂質體配方之組成物與方法。該化療用前體脂質體與脂質體配方，以及包括此配方之藥物與藥劑形式，可與膀胱癌和尿道上皮癌的治療處方一同使用。因此，本發明之配方、藥物與藥劑形式，適用於經由膀胱內投藥治療膀胱癌，以及治療尿道上皮癌。本發明配方包括(a)紫杉烷(如紫杉醇、多西紫杉醇(docetaxel))或順鉑、(b)第一磷脂質，即1,2-二肉豆蔻醯基-sn-甘油基-3-磷酸膽鹼 (DMPC)，以及(c)第二磷脂質，即二肉豆蔻醯基磷脂醯基甘油鈉(DMPG)。該前體脂質體配方會在與水性載劑接觸時形成脂質體。

Description

用於治療膀胱癌之配方

此申請案主張提申日期皆為2016年1月7日之美國專利申請案號62/275,941與62/275,936，以及提申日期2016年11月11日之62/421,137，之優先權。

本發明係相關於一種治療藥物之前體脂質體與脂質體配方，以及其用於治療膀胱癌之用途。

用於治療膀胱癌之化療試劑投藥通常涉及膀胱內投藥，係使用導尿管將試劑直接投至膀胱。然而，這種化療投藥的治療方法對於使用化療試劑如紫杉醇(Taxol^® )治療膀胱癌而言，卻出現障礙 (Hadaschiket al., "Paclitaxel and cisplatin as intravesical agents against non-muscle-invasive bladder cancer"BJUI . 101:1347-1355 (2008); Mugabeet al. “Paclitaxel incorporated in hydrophobically derivatized hyperbranched polyglycerols for intravesical bladder cancer therapy"BJUI . 103:978-986 (2008))。更特別的是，舉例而言，紫杉醇在膀胱內的pH值環境下會沉澱出，其中該pH值的範圍可為從4.5至8，因而喪失生物可利用性。而紫杉醇可溶於二甲基亞碸 (DMSO)中，但維持用於膀胱癌治療之有效劑量溶液所需之DMSO，卻是醫藥上無法接受的。因此，需要調配一種穩定之化療試劑配方，其可於膀胱內投藥，而不會於膀胱內沉澱。此種需求可藉由此述組成物和方法滿足，將治療劑量的化療試劑調配為可自由流動的前體脂質體粉末分散物，其可於廣範圍的pH值下分散於水性介質中，而不會導致藥物沉澱。

本發明相關於一種製造與使用化療用前體脂質體與脂質體配方之組成物與方法。在各觀點中，本發明組成物為前體脂質體粉末分散物，其包括(a)紫杉烷或順鉑(為化療試劑)、(b)1,2-二肉豆蔻醯基-sn-甘油基-3-磷酸膽鹼 (DMPC)，以及(c)二肉豆蔻醯基磷脂醯基甘油鈉(DMPG)。其重量比例為1 : (1.3-4.5) : (0.4-2.5)。

在本發明之某些觀點中，在前體脂質體粉末分散物中之化療試劑為紫杉烷。用於製造本發明配方之紫杉烷範例包括但不限於，紫杉醇、多西紫杉醇(docetaxel)、卡伐他賽(cabazitaxel)、替西他賽(tesetaxel)、DJ-927、TPI 287、拉羅他賽(larotaxel)、奧塔他賽(ortataxel)、DHA-紫杉醇，或其組合。例如，該紫杉烷可為(a)多西紫杉醇(docetaxel)，且a : b : c之比例為1 : (1.3- 2.0) : (0.4-2.0)。

在其他觀點中，該化療試劑為順鉑。本發明之前體脂質體分散物除了(a)順鉑、(b) DMPC與(c) DMPG之外，亦可包括(d)膽固醇，並具有重量比a : b : c : d為1 : (2.5-4.5) : (1.0-2.5) : (0.5-1)。

在本發明之各種觀點中，該前體脂質體粉末分散物可包括(a)紫杉醇、(b)DMPC，與(c)DMPG，重量比為a : b : c 為1 : (1.3-3.8) : (0.4-1.5)。除了(a)紫杉烷或順鉑、(b)DMPC與 (c)DMPG之外，本發明配方可包括(d)膽固醇，並具有重量比a : b : c : d 為1 : (1.3-3.8) : (0.4-1.5) : (0.5-1)。

在某些觀點中，本發明相關於一種醫藥組成物，其包括本發明任一前體脂質體粉末分散物，以及至少一醫藥上可接受之賦形劑。在其他觀點中，本發明相關於一種藥劑形式，其包括該醫藥組成物之任一者。

在其他觀點中，本發明相關於一種備紫杉烷或順鉑之脂質體配方之方法。該脂質體配方可藉由將本發明任一前體脂質體粉末分散物於水性載劑中進行水合作用。本發明配方亦可藉由將第一脂質與第二脂質分散於水性載劑中，藉由攪拌、混合及/或均質化，以形成一分散物；加入紫杉烷或順鉑至該第一脂質與第二脂質之分散物中；均質化該第一脂質、第二脂質與紫杉烷或順鉑之分散物 ，以獲得摻入紫杉烷或順鉑之脂質體；均質化該脂質體，以於分散物中獲得奈米化之脂質體顆粒；以及加入低溫/凍乾保護劑(cryo/lyoporotectant)。在本發明之某些觀點中，該分散物可經冷凍乾燥，以形成前體脂質體粉末分散物。在其他觀點中，該均質化步驟可於於高壓及/或高於脂質之Tc/Tg溫度下進行。

在本發明之某些觀點中，係相關於一種醫藥組成物，其包括本發明之任一脂質體配方。

本發明亦相關於一種治療病患膀胱癌之方法，藉由將本發明醫藥組成物投藥至該病患。在某些觀點中，該醫藥組成物係以膀胱內傳送方式投藥，以及其中該癌症為非肌肉浸潤性膀胱癌。在本發明之某些觀點中，該紫杉烷或順鉑於膀胱中在從4.5至8的任一pH值下維持可溶性。

本發明更相關於一種治療尿道上皮癌病患之方法 ，藉由投以病患本發明之醫藥組成物。在某些觀點中，為了治療上尿道上皮癌 ，該醫藥組成物可投藥至輸尿管和/或腎盂。

本發明相關於一種製造與使用化療用前體脂質體與脂質體配方之組成物與方法。本發明之配方，以及包含此配方之藥物與藥劑形式，可與膀胱癌之治療處方一同使用。本發明之配方、藥物與藥劑形式適用於將化療試劑投藥至膀胱以及輸尿管和腎盂。本發明之配方、藥物與藥劑形式可預防該調配之化療試劑於尿液環境沉澱出，該pH值為典型膀胱內環境，範圍為從4.5至8。

本發明組成物與方法可治療各種膀胱癌，包括非肌肉浸潤性膀胱癌(NMIBC)。本發明之前體脂質體與脂質體配方可用於治療尿道上皮癌，亦稱之為移行細胞癌。尿道上皮癌為最常見之膀胱癌，占所有膀胱癌90%之比例。在大約75%的病例中，這些癌症通常是淺表的，在這些病例中它們未進入膀胱壁的較深層。本發明配方亦用於治療其他種類之膀胱癌，如鱗狀細胞癌或腺癌。

大部分淺層腫瘤(即侷限於膀胱黏膜和固有層的腫瘤)係由泌尿科醫師以膀胱鏡手術的方式，以及在選擇的案例中以膀胱內藥物療法，來治療。雖然這些淺層膀胱癌經常復發，且可能是多灶性的，但治療後的生存率一般都很好。然而，在癌症已穿透膀胱肌肉壁的情況下(即癌症已進展到侵入膀胱壁更深層，以及可能附近的器官，例如子宮、陰道或前列腺之肌肉侵入性膀胱癌)，預後通常較差。約50%的肌肉侵襲性膀胱癌患者會發展為轉移性疾病。 因此，明確需要膀胱癌之有效療法。前體脂 質體與脂質體配方

本發明治療膀胱癌之方法涉及投予脂質體懸浮物，其包括水難溶性藥物摻入之脂質體。該脂質體可為奈米化脂質體。該脂質體加入化療試劑，或化療試劑組合物 。該脂質體可藉由將本發明前體脂質體粉末分散物進行水合而製備。該前體脂質體粉末分散物為乾燥粉末，其可以已知方法形成，例如，藉由延流膜法，如下列範例1至4，以及美國專利號9,445,995與6,759,058所述，其在此併入本案以作為參考資料。該脂質體配方可藉由將前體脂質體粉末分散物分散於水性載劑中而製備。

該脂質體配方亦可以無有機溶劑法製備，如下範例6所述。一般而言，第一脂質與第二脂質可分散於水性載劑中，藉由攪拌、混合及/或均質化，以形成分散物。之後可加入紫杉烷或順鉑至該第一脂質與第二脂質分散物中，且該第一脂質與第二脂質，以及紫杉烷或順鉑之分散物可均質化，以得摻有紫杉烷或順鉑之脂質體。該脂質體可均質化，以於分散物中獲得奈米化之脂質體顆。可加入低溫/凍乾保護劑至分散物中。若希望，該分散物可經冷凍乾燥，以得紫杉烷或順鉑之前體脂質體粉末分散物 。更常見地，此方法可用於形成水難溶性藥物(如紫杉烷或順鉑)與任一脂質或磷脂質之配方。可用於製備本發明配方之方法中的適當磷脂質範例包括二硬脂基磷脂醯基膽鹼(DSPC)、二棕櫚醯磷脂醯基膽鹼(DPPC)、1,2-二肉荳蔻基甘油基-3-磷酸膽鹼(DMPC)、卵磷脂醯基膽鹼(egg- PC)、大豆磷脂醯基膽鹼(大豆-PC)、二肉豆蔻基磷脂醯基甘油基鈉(DMPG)、1,2-二肉荳蔻基-磷脂酸(DMPA)、二棕櫚醯磷脂醯基甘油基(DPPG)、磷酸二棕櫚醯酯(DPP)、1,2-二硬脂醯-sn-甘油基-3-磷酸外消旋甘油(DSPG)、1,2-二硬脂醯-sn-甘油基-3-磷脂酸(DSGPA) 、磷脂醯基絲胺酸(PS)和鞘磷脂(SM)，或任何上述磷脂的組合。

本發明之前體脂質體粉末分散物與脂質體包括磷脂質成分，其包括第一磷脂質，即1,2-二肉豆蔻醯基-sn-甘油基-3-磷酸膽鹼 (DMPC)，以及第二磷脂質，即二肉豆蔻基磷脂醯基甘油鈉(DMPG)。

本發明之前體脂質體粉末分散物含有至少(a)化療試劑、(b) 第一磷脂質，即DMPC，以及(c)第二磷脂質，即DMPG，其中一者分散於另一者中，以及其在接觸水性溶液時會形成脂質體。例如，前體脂質體粉末分散物可含有(a)、(b)與(c)，其重量/重量比(a) : (b) : (c) 範圍為(1.0) : (1.3-4.5) : (0.4-2.5)。除了成分(a)-(c)之外，該前體脂質體粉末分散物亦可含有(d)膽固醇。因此，前體脂質體配方可含有(a)、(b)、(c)、(d) ，其重量/重量比(a) : (b) : (c) : (d)範圍為(1.0) : (1.0-4.5) : (0.1-2.5) : (0.1-2.0)。

當磷脂質如DMPC與DMPG置於水性環境中，其親水基頭部會排成直線構形，而其疏水性尾部則會實質上互相平行排列。之後第二行直線分子會以尾部對尾部方式與第一行對齊，由於尾部會傾向於排斥水性環境 。為了最大程度地避免與水性環境，即在雙層的邊緣處接觸，同時使表面積與體積比最小化，因而達到最小能量結構，此兩行磷脂，或稱之為磷脂雙層或薄片， 會匯集成脂質體。如此一來，脂質體(或磷脂質球)會將一些水性介質和任何可能溶解或懸浮在其中的物質捕捉在球體核心中。 此包括本發明前體脂質體粉末分散物的各種成分，例如化療試劑。

根據本發明的方法，在投予化療試劑或試劑群，一般係經由膀胱內輸送到膀胱中之前，係將含有化療試劑的前體脂肪體粉末分散物於水中或另一醫藥上可接受的水性載劑(例如，生理食鹽水)中進行水合，而形成脂質體，並將化療試劑包封在脂質體內。除了水與水性載劑之外，所得脂質體懸浮物可含有凍乾/低溫保護劑(lyo/cryoprotectant)，如甘露醇，蔗糖或海藻糖。一般而言，脂質體配方之凍乾/低溫保護劑成分與藥物成分之 w/w比例 (凍乾/低溫保護劑：藥物約(0.5 : 1.0)至(5.5 : 1.0)。例如，可用於本發明方法之脂質體懸浮物可藉由將前體脂質體粉末分散物 ，其含有(a)化療試劑、(b) DMPC與(c)DMPG，以及(e) 凍乾/低溫保護劑 (1.0) : (1.0-4.5) : (0.1-2.5) : (0.5-5.5)，混合而製備。

本發明之前體脂質體與脂質體配方可採用任何技術上已知可治療膀胱癌之各種化療試劑。本發明包括但不限於，紫杉烷包括紫杉醇、多西紫杉醇(docetaxel)、DJ-927、TPI 287、拉羅他賽(larotaxel)、奧塔他賽(ortataxel)、DHA-紫杉醇、卡伐他賽(cabazitaxel)與替西他賽(tesetaxel)、順鉑，或其混合物，以及與另一化療試劑之組合物。

例如，本發明之前體脂質體粉末分散物，其含有紫杉烷衍生藥物 (”前體脂質體膀胱內紫杉烷(PLIT) 配方”)，可含有(a)紫杉烷、(b)第一磷脂質，即DMPC，與(c)第二磷脂質，即DMPG。前體脂質體粉末分散物可包含(a)、(b)與(c)，其重量/重量比(a) : (b) : (c)選自(1.0) : (1.0-3.8) : (0.2-1.5)；或其中之任一比例。例如，本發明之前體脂質體分散物，其紫杉醇 : DMPC : DMPG之重量/重量比(a) : (b) : (c)可為(1.0) : (3.15) : (1.00)；或(1.0) : (3.20) : (1.05)；或(1.0) : (3.25) : (1.10)；或(1.0) : (1.43) : (0.567)，或其中之任一比例。本發明之前體脂質體粉末分散物可實質上由(a)紫杉烷、(b)DMPC與(c) DMPG，以上述任一重量/重量比例組成，或其由這些成分以這些比例之任一者組成。

除了紫杉烷、DMPC與DMPG之外，此述之前體脂質體粉末分散物亦可包含(d)膽固醇。因此，本發明之前體脂質體粉末分散物含有(a) : (b) : (c) : (d)，其重量比/重量比選自於(1.0) : (1.0-3.8) : (0.4-1.5) : (0.5-1)；或其中之任一比例。例如，本發明之前體脂質體粉末分散物可包括(a)紫杉醇，即該第一磷脂質、(b)DMPC，即該第二磷脂質、(c)DMPG與 (d)膽固醇，其中 (a) : (b) : (c) : (d)之重量/重量比為(1.0) : (3.40) : (1.25) : (0.70)；或(1.0) : (3.45) : (1.30) : (0.75)；或(1.0) : (3.50) : (1.35) : (0.80)；或其中之任一比例。本發明之前體脂質體粉末分散物可實質上含有(a)紫杉烷、(b)DMPC、(c)DMPG與(d) 膽固醇，以上述任一比例之重量/重量比，或其由這些成分以任一比例組成。

此外，舉例而言，本發明前體脂質體與脂質體配方含有順-二胺二氯鉑 (II)，一般稱之為順鉑，作為化療試劑。本發明含有順鉑之前體脂質體粉末分散物 (”前體脂質體膀胱內順鉑(PLIC)配方”)，可含有(a)順鉑、(b)第一磷脂質，即DMPC，與(c)第二磷脂質，即DMPG。順鉑之前體脂質體粉末分散物可含有(a)、(b)與(c)，其(a) : (b) : (c)重量/重量比選自於(1.0) : (2.5-4.5) : (1-2.5)；或其中之任一比例。例如， (a) : (b) : (c)之重量/重量比為(1.0) : (2.7) : (1.2)；或(1.0) : (2.75) : (1.21)；或(1.0) : (2.76) : (1.22)；或(1.0) : (2.77) : (1.2)；或(1.0) : (2.78) : (1.22)；或其中之任一比例。在前體脂質體粉末分散物中，其中(a)為順鉑，其(a) : (b) : (c)之重量/重量比可為 (1.0) : (2.7) : (1.2)；或(1.0) : (2.75) : (1.21) ；或(1.0) : (2.76) : (1.22) ；或(1.0) : (2.77) : (1.2) ；或(1.0) : (2.78) : (1.22)；或其中任一比例。本發明之前體脂質體粉末分散物可實質上由(a)順鉑、(b)DMPC與(c)DMPG，以任一上述重量/重量比組成，或其可由這些成分以這些比例之任一者組成。

在本發明之前體脂質體粉末分散物中，(a) : (b) : (c) 之重量/重量比可為(1.0) : (4.1) : (2.1)；或(1.0) : (4.15) : (2.25) ；或(1.0) : (4.16) : (2.26) ；或(1.0) : (4.17) : (2.27) ；或其中之任一比例。在前體脂質體分散物中，其中(a)為順鉑，即該第一磷脂質、(b)為DMPC，即該第二磷脂質、(c)為DMPG， (a) : (b) : (c)之重量/重量比可為(1.0) : (4.1) : (2.1) ；或(1.0) : (4.15) : (2.25) ；或(1.0) : (4.16) : (2.26) ；或(1.0) : (4.17) : (2.27) ；或其中之任一比例。本發明之前體脂質體粉末分散物實質上由(a)順鉑、(b)DMPC，與(c)DMPG，以任一上述重量/重量比組成，或其可由這些成分以這些比例之任一者組成。

除了(a)順鉑、(b)DMPC，與(c)DMPG之外，順鉑之前體脂質體粉末分散物可含有(d)膽固醇。此順鉑配方可含有(a) : (b) : (c) : (d)，其重量/重量比選自於 (1.0) : (2.5-4.5) : (1.0-2.5) : (0.5-1) ；或其中之任一比例。(a) : (b) : (c) : (d)之重量/重量比可為如(1.0) : (2.7) : (1.2) : (0.6)；或(1.0) : (2.75) : (1.21) : (0.65)；或(1.0) : (2.76) : (1.22) : (0.7) ；或(1.0) : (2.77) : (1.2) : (0.75)；或(1.0) : (2.78) : (1.22) : (0.8)；或(1.0) : (2.78) : (1.22) : (0.9)；或其中之任一比例。

本發明之前體脂質體粉末分散物與脂質體配方可使用於醫藥配方或藥劑形式中， 其投至需要化療試劑(如紫杉醇、多西紫杉醇(docetaxel)、順鉑等)之個體中。本發明之醫藥配方或藥劑形式可投藥治療膀胱癌。更特別的是，在治療應用中，醫藥配方或藥劑形式係投至已患有膀胱癌之個體中，其量足以消除所有症狀，或至少部分減輕膀胱癌症狀之一。此種有效之化療試劑劑量形式取決於膀胱癌之階段、嚴重度與過程、先前治療、個體之健康狀況、重量、對於藥物之反應，及/或主治醫師之判斷。

如下範例1-4所述，為了製備化療試劑之前體脂質體粉末分散物，該化療試劑(如紫杉醇)可與脂質溶於乙醇中，並可使用旋轉快速蒸發儀延流成薄膜。該乾燥薄膜可使用正常生理食鹽水或水或任一其他醫藥上可接受之水性載劑進行水合。此提供一脂質體分散物。該脂質體分散物之後可使用 Emulsiflex™-C5 (Avestin, Canada)或類似之高壓均質機或技術上適當之儀器，其可達到希望之粒徑，擠出。在本發明之脂質體中，該顆粒可為奈米化。本發明脂質體一般具有粒徑至多700 nm、至多500 nm、至多250 nm、至多200 nm，或至多100 nm。

在本發明之脂質體分散物中，可外部加入適當之賦形劑，並進行冷凍乾燥，以得前體脂質體粉末分散物，意即，賦形劑係由“外部”加入。例如，本發明之前體脂質體粉末分散物，可與至少一醫藥上可接受之賦形劑混合。示範性醫藥上可接受之賦形劑包括，但不限於：(a)低溫保護劑、填充劑或增量劑，例如甘露糖醇、澱粉、乳糖(例如乳糖單水合物)、蔗糖、葡萄糖、海藻糖和矽酸；(b)黏合劑，例如纖維素衍生物，包括羥丙基甲基纖維素，其商品名為Benecel™、羥基丙基纖維素，其商品名為Klucel™(Ashland Inc-Covington，KY)、澱粉、海藻糖、明膠、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯膠，(c)吸收促進劑，例如四級銨化合物。膀胱內傳送

本發明之配方與藥劑形式可用於傳送治療劑量之化療試劑(如紫杉烷如紫杉醇、多西紫杉醇(docetaxel)，及/或順鉑) 膀胱內投藥至膀胱。膀胱內療法涉及經由插入導尿管，將治療試劑直接灌至膀胱中。在膀胱內灌注之標準流程中，無菌導管可以用直線形或者是粗(雄性)導管進行。膀胱完全清空。導管尖端注射器可以含有藥劑之針尖轉接器插入，以防止在插入期間溢出或飛濺。或者，連接到藥物小瓶的引發管可插入導管中，且化學試劑藉由每次重力流或溫和注射灌入。評估患者的疼痛狀況。注射器或藥物小瓶可使用完整管道移除。 導管被擠壓關閉，且導管或插管導管如指示移除，使用無菌紗布幫助吸收任何液滴。如果患者在保留溶液時有困難，可使用Foley導管，並可在灌注後將導管塞插入導管的末端，以使化學試劑在膀胱中保留一段特定的時間，通常為一至兩小時。根據患者的行動能力，導管可以在所需停留時間結束時移除，或者病人可連接排尿袋以排出化學試劑。 一旦導管被移除並適當地丟棄，檢查會陰部區域是否發生洩漏，且患者重新評估疼痛狀況。指示患者嘗試保留治療1至2小時。根據經驗，患者被指示躺下，從左側到右側，每隔15分鐘重新調整姿勢，之後自導管上移開氣泡，並確保藥物與膀胱的所有區域接觸。

膀胱內藥物傳送裝置與將這些裝置置入膀胱內之方法之範例描述如下，美國專利申請公開案：U.S. 20150165178；U.S. 2012/0203203；U.S. 2012/0089122；U.S. 2012/0089121；U.S. 2011/0218488；U.S. 2011/0202036；U.S. 2011/0152839；U.S. 2011/0060309；U.S. 2010/0331770；U.S. 2010/0330149；U.S. 2010/0003297；U.S. 2009/0149833；以及U.S. 2007/0202151，在此併入本案以作為參考資料。

除了膀胱內傳送，本發明之配方與藥劑形式可使用適當之導管裝置與技術上已知之流程，投藥至輸尿管及/或腎盂中。此化療試劑之投藥可用於治療如上尿道上皮癌。

當本發明配方與藥劑形式自藥物傳送裝置傳送出時，該配方與藥物形式可以各種形式置於裝置內，其取決於特定機制，其中該裝置釋放該前體脂質體粉末分散物、脂質體配方、醫藥配方，以及藥劑形式，至膀胱中的尿液及/或腎系統的其他部分。藥劑形式可為固體、半固體或其他非液體形式(如粉末或壓縮粉末)，其較佳可幫助化療試劑之穩定儲存，在裝置使用前，且較佳可允許以較小體積儲存化療試劑，與液體溶液或懸浮液形式之試劑相較。

當使用本發明配方時，化療試劑可在膀胱內傳送之後，於人類尿液中維持可溶，於典型尿液pH值4.5-8下。此外，本發明配方可允許化療試劑附著於膀胱壁上，且化療試劑可維持於排泄尿液中多達3天。腸胃外投藥

本發明之前體脂質體粉末分散物、脂質體配方、醫藥配方與藥劑形式可用於製備為組成物形式，用於腸胃外傳送治療劑量之紫杉烷(如紫杉醇或多西紫杉醇(docetaxel))或順鉑至病患中。腸胃外投藥包括靜脈內、動脈內、肌內、腦室內或皮下投藥路徑。

可注射組成物可以一般形式製備，不論是液體溶液或懸浮液形式、適於在注射前溶解或懸浮於液體中的固體形式，或乳劑形式。 注射劑、溶液與乳劑亦可含有一或多種賦形劑。適當的賦形劑為如水、生理食鹽水、葡萄糖、甘油或乙醇。 此外，如果希望，待投藥的醫藥組成物亦可含有少量的無毒輔助物質，例如潤濕劑或乳化劑、pH緩衝劑、穩定劑、溶解度增強劑，以及其它此類試劑，例如，乙酸鈉、山梨糖醇單月桂酸酯、三乙醇胺油酸酯，以及環糊精。

技術上已知之適當醫藥賦形劑可與本發明前體脂質體粉末分散物組合，以產生一醫藥配方或藥劑形式。組合治療

本發明之前體脂質體粉末分散物、脂質體配方、醫藥配方與藥劑形式可與其他醫療試劑組合，其可降低與化療相關的不良反應嚴重性與或消除其副作用，包括噁心、嘔吐、食慾不振、腹瀉、味覺喪失、可能發生的脫髮、手腳麻木/刺痛/寒冷/變藍色、 手臂或腿部的疼痛/發紅/腫脹、失去反射、失去平衡、行走困難、肌肉抽筋/痙攣/虛弱、頸或背部疼痛、口腔或舌頭瘡、關節疼痛、腿或腳腫脹、心理/情緒變化 、頭痛、心跳加快/不規則、血尿、咖啡渣狀嘔吐物、黑便或血便、排尿疼痛或排尿困難、下背部或側部疼痛，或視力變化(例如視力模糊、看錯顏色)。

在某些案例中，較佳投以本發明之前體脂質體粉末分散物、脂質體配方、醫藥配方與藥劑形式，以及另一治療試劑。例如，紫杉醇前體脂質體粉末分散物可使用於醫藥配方或藥劑形式中，其作為包括吉西他濱(gemcitabine)組合療法之一部分投藥，用於治療膀胱癌。本發明之順鉑前體脂質體粉末分散物可使用於醫藥配方或藥劑形式中，作為包括5-氟尿嘧啶(5-FU)組合療法之一部分投藥，用於治療膀胱癌。紫杉醇前體脂質體粉末分散物亦可用於醫藥配方或藥劑形式中，其作為包括前體脂質體順鉑配方之組合療法之一部分投藥。

當使用組合療法時，其他試劑未必一定要於同一醫藥組成物中投藥，且由於不同物理與化學特性，可以不同路徑投藥。例如，初始投藥可依據已建立之流程進行，之後，依據觀察到的作用，投藥之劑量、模式與投藥時間可進一步修飾。

多重治療試劑可同時投藥 (如同時、實質上同時，或於同一治療流程中)或依序投藥，依據癌症之階段與種類、病患狀況，以及實際選擇所使用之化合物而定。在治療流程中，每一治療試劑投藥順序之決定，以及投藥重複次數，可基於待治療疾病與個體症狀之評估而定。

此組合物之各化療試劑係依序或同時投藥，於單獨或組合醫藥配方中。例如，各醫療試劑可於組合醫藥配方中同時投藥。已知醫療試劑之適當劑量將由此技術領域者所知曉 。

本發明之組合物可方便地以醫藥組成物與醫藥上可接受稀釋劑或載體組合形式使用。 範例

下列範例1-4係分別描述前體脂質體膀胱內紫杉醇(PLIP)配方PLIP-003、PLIP-006、PLIP-021與PLIP-023之製備。前述PLIP配方之製備分別描述於表1-4，就每一配方而言，係於500 mL圓底瓶中，將所有藥物與脂質成分一同溶解於10 mL乙醇中，並置於50°C水浴中而進行。薄膜由脂質成分與乙醇混合物，使用旋轉快速蒸發器(Buchi)減壓乾燥而延流成型。薄膜於室溫下完全乾燥整夜，於減壓下(150~200 mbar)。薄膜使用20 mL生理食鹽水，藉由將燒瓶置於50°C水浴中進行水合反應。燒瓶使用Buchi旋轉快速蒸發器旋轉，形成脂質體分散物。分散物之後於室溫下均質化，在高壓下，使用Nano DeBee®高壓均質機進行，產生單層脂質體，尺寸範圍為100-200 nm粒徑。所製備的分散物之後使用EmusiFlex®-C5均質機擠出。擠出係使用聚碳酸酯薄膜進行，其孔徑可將尺寸1 µm降至0.2 µm。在最終擠出物中，分別加入如表1至4所述含量之甘露糖醇，且混合物經冷凍乾燥，得前體脂質體粉末分散物。

範例1 . PLIP-003 表1

範例2 .PLIP-006 表2

範例3 .PLIP-021 表3

範例4 .PLIP-023 表4

範例5 . PLIP-003 、PLIP-006 、PLIP-021 與PLIP-023 藥效之體外分析 。使用磺醯羅丹明B (sulforhodamine B)(SRB)試驗-基礎法，來決定紫杉醇配方PLIP-003、PLIP-006、PLIP-021與PLIP-023對抗人類膀胱上皮癌細胞株T24 (ATCC® HTB-4™)、5637 (ATCC® HTB-9™)與HT-1376 (ATCC® CRL-1472™)之抑制濃度(IC)₅₀ 。用於此試驗中，該紫杉醇配方分散於正常生理食鹽水中至濃度為 2-5 mg/mL紫杉醇。該分散配方形成澄清溶液。純的、未經調配的紫杉醇溶液([6 mg/100 µL]之DMSO溶液)係使用作為對照組配方。

細胞種於96-孔盤中，密度為5x10³ 細胞/孔，並於37°C， 5% CO₂ 下培養24小時。該經分散之紫杉醇配方與純藥物對照組係加至接種細胞培養物之培養液中。以該配方處理72小時後，將培養液吸出。經處理之細胞係藉由溫和加入100 μl之10%三氯醋酸(TCA)至每一孔中進行固定，且培養盤於4 °C靜置至少1小時。靜置後，培養盤以自來水清洗五次，但並未將水直接流入孔中，該盤於室溫下進行空氣乾燥，並加入50 μl之0.4% w/v SRB (於1%醋酸中)至每一孔中。該盤於室溫之SRB溶液中靜置20至30分鐘。之後，該盤以1%醋酸清洗五次，並於室溫下進行空氣乾燥。經蛋白質結合之SRB係以加入100 µl之10 mM Tris鹼溶液至每一格，並靜置5至10分鐘，使Tris溶液可溶解SRB而偵測。該盤使用微盤讀取儀，於吸收波長565 nm偵測。表5報導PLIP-003、PLIP-006、PLIP-021、PLIP-023與未調配紫杉醇之IC50。 表5

範例6 .另一製備奈米化水難溶性藥物摻入之脂質體小泡之方法 ，係進行如下： 1. 脂質成分DMPC與DMPG係經稱重，並轉移至水性介質中； 2. 水性介質維持於較脂質成分之Tc/Tg高之溫度下； 3. 該脂質進行水合反應，不論是使脂質混合物靜置、攪拌、混合及/或均質化 ； 4. 該水難溶性藥物(經修飾之紫杉烷如紫杉醇，或含鉑藥物如順鉑)係加至該脂質分散物中，藥物與脂質之混合物持續攪拌； 5. 為了獲得脂質體，含脂質+藥物之分散物於高壓與高於脂質Tc/Tg之溫度下進行均質化。持續均質化至藥物摻入脂質體中。藥物摻入係由顯微鏡觀察脂質體，無任何藥物結晶存在而確認 ； 6. 一旦藥物摻入，後續均質化於稍高於、等於或稍低於脂質Tc/Tg之溫度下進行，以獲得奈米化藥物摻入之脂質體小泡；以及 7. 加入適當之低溫/凍乾保護劑至該脂質體小泡中，之後進行冷凍乾燥，以獲得載入藥物的前體脂質體。

上述另一製備奈米化藥物摻入之脂質體小泡的方法之優點，包括不需使用有機或苛性溶劑如乙醇、氯仿及/或醚。 此外，該方法涉及較少單元操作及/或該過程涉及較少數量的儀器。此外，該方法需要明顯更少的時間獲得藥物摻入的脂質體小泡，與實施例1-4中描述的延流膜法(兩小時製備時間，與兩天相比)相較。此為簡單、快速和經濟的製程。

範例7 .PLIP-001 。另一製備奈米化水難溶性藥物摻入之脂質體小泡的方法，如範例6所述，係用於製備紫杉醇配方PLIP-001，其包括於表6所述之成分中。PLIP成分之含量可依PTX含量比例調整，以重量/重量比為基礎。 表6. PLIP-001

範例8 .於原位小鼠模型中進行PLIP-001 對人類膀胱癌之藥效評估。 紫杉醇(PTX)對於轉移性膀胱癌具高度活性；因此，PTX為預防NMIBC復發與進展之輔助性膀胱內療法候選者。PTX為親脂性。現有配方(如紫杉醇/亞伯杉^® (abraxane^® ))不溶於膀胱內之酸性水性環境中。若經適當調配， PTX之親脂性可產生穿透尿道上皮和傳送至黏膜下層的藥效。下列研究顯示PLIP-001-調配之PTX可成功傳送至膀胱，於體外及體內皆證實PLIP-001之概念。

利用原位小鼠模型評估紫杉醇的前體脂質體配方。膀胱癌細胞株KU7/GFP殖株6係用於這些研究中。 KU7/GFP殖株6經綠色螢光蛋白穩定轉染，這些細胞株係用於所有體內研究。KU7/GFP殖株6係描述於Watanabe et al。細胞係於經修飾最低必需培養液中，補充有10% FCS，並培養於37^o C，5% CO₂ 下。KU7/GFP細胞產生之腫瘤係於體外產生。將腫瘤植入雌性小鼠的膀胱中。植入KU7/GFP腫瘤後7天，將小鼠分為以下四個實驗治療組，其中小鼠接受：10 mg 紫杉醇/kg體重(10 mg/kg)，投藥名稱為PLIP-001 (第1組)；15 mg/kg，投藥名稱為PLIP-001 (第2組)；15 mg/kg，投予亞伯杉^® (abraxane^® )，一種紫杉醇之白蛋白結合形式奈米顆粒，由Celgene Corporation製造(第3組)；或生理食鹽水(第4組)。前述配方與生理食鹽水係於腫瘤植入後第0、7與14天投藥。

表7、8與9分別顯示在治療第0、7與14天，第1至4組每一組動物的體重和平均體重值。圖2顯示在治療第0、7與14天的動物體重圖。 表7. 腫瘤移植後，以PLIP-001治療第0天的體重。 表8. 腫瘤移植後，以PLIP-001治療第7天的體重。 表9. 腫瘤移植後，以PLIP-001治療第14天的體重(圖3)。

在第1至4組中治療小鼠治療第14天測量的的膀胱重量(B-W)，報導於表10中。表6報導各組的膀胱重量比較之統計分析，且治療組之膀胱尺寸報導於表11中。 表10. 膀胱重量 表11. 統計分析 表12. 膀胱尺寸 (在表中，*表示膀胱外腫瘤存在，其可能由於當小鼠接種癌細胞時，膀胱穿孔而發生。當腫瘤位於膀胱外部時，預估化療藥物的膀胱內投藥不會對腫瘤產生影響)。

範例9 . 藉由測量腫瘤面積評估紫杉醇前體脂質體配方之藥效。 KU-7-GFP人類膀胱癌原位MetaMouse^® 模式：表現GFP之人類膀胱癌細胞株KU-7係得自AntiCancer Inc.細胞株庫。動物使用 KU-7-GFP膀胱癌細胞，藉由膀胱內灌注植入。動物以氯胺酮、醋丙嗪和賽拉嗪混合物麻醉。手術區域使用碘和酒精消毒。在下腹部腹部切口適當暴露膀胱後，膀胱以24-G血管導管進行插管，用膀胱內皮針刺傷排出並受傷。將KU-7-GFP (100 μl 2 x10⁶ )細胞滴注入膀胱中，並放置囊串以封閉尿道，以使細胞保持1小時。然後將膀胱送回到腹腔。以單層6-0手術縫合術將腹壁的切口封閉。手術全程動物皆維持於異氟醚麻醉下。上述操作的所有程序皆於7倍放大顯微鏡(Olympus)下進行。在HEPA過濾下，將動物維持在屏障設施中。

在腫瘤細胞植入後第7天，將50隻動物隨機分成5組(每一治療組包含n=10隻小鼠)。所有組別的小鼠在同一天開始治療，此視為研究第0天。表13和14顯示研究設計。使用24G/3/4” IV導管將新鮮重製之配方(50 µL)注入膀胱內，並使用囊串扣住尿道。 將製劑維持於膀胱中1小時。 1小時後，將囊串切開，使膀胱自然排空。在第0、7、14和第21天遵循相同的程序。

結果：經前體脂質體紫杉醇(PLIP)配方處理的動物，與生理食鹽水組相較，顯示出膀胱腫瘤面積降低。 純藥物治療組損失6隻動物，由於藥物在溶解狀態(於DMSO中)的過度暴露所致，此會導致全身毒性。圖8顯示平均血漿位準，其顯示該藥物在PLIP組中最低限度地暴露於全身循環中，而溶解於DMSO中的純藥物則導致紫杉醇顯著的血漿位準，此在治療膀胱癌中是不樂見的。以較低劑量為基礎，係研究較高劑量，並與市售產品亞伯杉^® (abraxane^® )進行比較。 10 mg/kg之PLIP配方表現出與15 mg/kg亞伯杉有類似的效果。 增加PLIP配方劑量顯示出腫瘤面積有某些程度的降低(圖5、6和7)。 表13. 研究設計1 表14. 研究試驗2 表15. 研究設計1中，經4週治療後之最終腫瘤面積 表16. 研究設計1中，經4週治療後之最終組織學腫瘤面積 (在表中，*代表膀胱外腫瘤)。 表17. 研究設計2中，經2週治療後之最終腫瘤面積，以螢光法測量

範例 10 . 係於研究設計2之小鼠中評估轉移狀況：第1組 (10 mg/kg PLIP-001)、第2組(15 mg/kg PLIP-001)，第3組(15 mg/kg 亞伯杉(abraxane))。表18、19與20顯示下列器官轉移的發生率：肝、腸系膜、隔膜與腎。 表18. 第1組之轉移情況 表19. 第2組之轉移情況 表20. 第3組之轉移情況 表21. 原位裸小鼠模式之膀胱內治療反應摘錄 (EV = 膀胱外延伸，即腫瘤出現於膀胱外)

範例11 . 紫杉醇(PTX)對於轉移性膀胱癌具高度活性，因此，PTX為預防NMIBC復發與進展之輔助性膀胱內療法候選者。PTX為親脂性。現有配方 (如紫杉醇/亞伯杉^® (abraxane^® ))不溶於膀胱內之酸性水性環境中。若經適當調配， PTX之親脂性可產生穿透尿道上皮和傳送至黏膜下層的藥效。下列研究顯示PTX可成功傳送(使用脂質體)至膀胱，於體外及體內皆證實PLIP之概念。

體外人類膀胱癌細胞株(T24, KU7)係用於評估IC50值。體內研究係於經KU7-GFP細胞株植入之裸鼠中進行。 在接種 KU7膀胱腫瘤之後，進行每週膀胱內灌注(x3) (3組： PLIP；PTX/DMSO或PTX/Nab；或生理食鹽水)，並測量腫瘤生長。藥物動力學研究係於大鼠物種中進行。亦進行符合GLP之大鼠物種的急性擴張毒理學/毒物動力學研究。進行比較用(PLIP vs. 亞伯杉(abraxane))豬膀胱體外模式與PTX組織濃度研究 。

試驗編號1結果： T24人類膀胱癌中，PLIP之IC50＜0.01，對比於PTX配方之亞伯杉(abraxane)＞0.5 µg/mL。 PLIP明顯有效降低腫瘤尺寸，並增進完全反應，與生理食鹽水組相較(圖7/表22)。PLIP顯示可大幅降低 PTX之全身性暴露並降低不朽性，與PTX/DMSO相較。體外單離豬膀胱模式中，PLIP(對比於亞伯杉(abraxane))可允許紫杉醇自膀胱內脂肪，良好轉移至膀胱尿道上皮和下尿道上皮層，而不會有全身性暴露與毒性相關問題。請見圖9。 表22 (* 在此表中代表統計學顯著性差異p˂0.05，與生理食鹽水對照組相較 )

這些數據說明PLIP在體外條件之人類尿液中相當穩定；且在體外與體內皆對於所測試之人類膀胱腫瘤細胞株具高度活性；並且相較於亞伯杉(abraxane)，傳送相對高濃度之PTX至尿道上皮組織，伴隨著可忽略的PTX全身性(systemic)位準。

範例12 .使用豬膀胱之黏附/ 融合/ 轉移離體研究 。 實驗：從屠宰場獲得新鮮的豬膀胱(n=3)(雄性)，並且排出任何剩餘的尿液。以冷Kerb緩衝液洗滌切下的膀胱。切下的膀胱經洗滌並儲存於冷Tyrode緩衝液中直到實驗開始。以5mL Tyrode緩衝液(37℃)通過尿道沖洗膀胱。冷凍乾燥之PLIP與亞伯杉(abraxane)配方(6 mg)，以5 mL之Tyrode緩衝液(37°C)重新調配。將該配方(5 mL)經由尿道加至膀胱中。加入後立即取出0.5 mL之投藥配方，設為時間點0(T0)之樣本。膀胱之後置於150 mL之Tyrode緩衝液(37°C)中，並置於水浴搖晃儀中2小時。2小時後，將膀胱內容物清空，並收集樣本用於分析。膀胱以5 mL之Tyrode 緩衝液 (37°C)潤洗，並收集樣本用於分析(此步驟進行二次)。將膀胱切開，並切出一小部分(1-2克重)。其中一片組織用於冷凍切片機切片。冷凍切片於-15°C進行， 將10x50µm切片收集於Eppendorf管中用於萃取。切割切片直至到達肌肉層(該處難以切割)。切片或整片之萃取係使用甲醇進行，並使用HPLC法分析，用於配方之試驗中。結果顯示PLIP可穿透尿道上皮層，並傳送藥物，優於亞伯杉(abraxane)(圖9)。然而，並未在大於2,500 µm之尿道上皮層觀察到藥物位準。適當的層厚度為2,500 µm。此為一個重要的發明貢獻，由於PLIP配方可將紫杉醇輸送到膀胱非肌肉層的解剖極限，而預防腫瘤生長，同時並未顯示出任何藥物全身性暴露。

範例13 . 雌性Sprague-Dawley 大鼠的 藥物動力學研究。 在雌性Sprague Dawley大鼠的膀胱中進行單次膀胱內投藥後，進行PLIP對亞伯杉(Abraxane)的血漿PK曲線和膀胱濃度的評估。投予PLIP和亞伯松(abraxane)一次，持續2小時的膀胱內灌注，隨後進行投藥後24小時觀察期(表23)。 表23. 在雌SD大鼠中之膀胱內PK研究設計 * 目標劑量係以平均體重約0.300 kg/大鼠為基礎。

動物於異氟烷麻醉下投藥，使用尿道膀胱內導管將PLIP或亞伯松(abraxane)緩慢推注到膀胱中，然後進行2小時膀胱滯留期。該2小時暴露期間係以技術可行性為基礎，並以大鼠尿量為基礎計算最大劑量。在投藥/滯留期結束時，經由腹壁輕輕觸壓膀胱，而使藥劑配方從膀胱中排出。在本研究中，評估包括死亡率檢查和臨床觀察。用於PK分析的血漿樣品係於第1天，在以下目標時間點收集：投藥前與灌注開始後第1、2、3、4、6和24小時。在24小時結束時，收集膀胱並快速冷凍以分析紫杉醇濃度。

對死亡率或臨床觀察的結果並無與LIP相關的影響。PLIP之單一膀胱內灌注，滯留期為2小時，濃度為3 mg/mL (1.5 mg/animal)，結果為在所有處理的動物中，紫杉醇血漿位準無法定量( [LLOQ] 量化低限=1 ng/mL) 。類似的結果可在相同劑量(1.5 mg /動物)的亞伯杉(abraxane)比較組中得到，除了在啟動灌注後2.17小時、濃度為1.04 ng / mL，以及灌注開始後3小時、濃度為1.76ng / mL的兩隻動物之外。這些發現支持了在以最大可行劑量，經膀胱內途徑投藥至大鼠時，PLIP並非全身性生物利用。

由灌注開始後6和24小時膀胱組織分析的結果顯示，在投予PLIP或亞培杉(abraxane)之後，紫杉醇被吸收至膀胱中；然而，在第6小時，每一治療組的結果是有差異的。6小時後膀胱中的紫杉醇濃度範圍約300 ng/g，於4隻經PLIP-處理動物中的1隻，以及於4隻經亞伯杉(abraxane)^® -處理的動物中的3隻是如此。在PLIP組中，在所有動物中，於6小時有1隻動物具有最低的膀胱紫杉醇濃度(約40 ng/g)，而該組有2隻動物具約 1800-1900 ng/g 範圍。在經亞伯杉^® (abraxane^® )-處理組中，其中1隻動物具膀胱濃度約8500 ng/g，而其餘3隻動物皆位於 300 ng/g 範圍內。在6小時內數據變化的原因是未知的，但可能與膀胱經機械按摩以幫助排除灌注液後，殘留在膀胱中的劑量配方有關。在灌注開始24小時後，膀胱紫杉醇濃度實質上低於6小時時的濃度，此如預期是由於尿流幫助移除膀胱內表面殘留的藥劑配方，以及紫杉醇的潛在代謝作用或進一步分布所致。 表24.體內膀胱尿液之紫杉醇藥物濃度

範例14 . 前體脂 質體膀胱內順鉑(PLIC) 配方PLIC‑002 之製備。 PLIC‑002係藉由將18.4 mg順鉑溶於15 mL水中而製備。順鉑水溶液於室溫下與3 ml含有表25所列脂質成分之乙醇溶液合併。製備之分散物使用EmusiFlex^® -C5均質機擠出。擠出係使用聚碳酸酯薄膜進行，其孔徑可將尺寸由1 µm降至0.2 µm。在最終擠出物中，100 mg甘露糖醇係與該擠出物混合，該混合物經冷凍乾燥，得前體脂質體。 表25. PLIC-002

範例15 . PLIC-009 之製備 。 PLCP-009之製備係藉由將9.8 mg順鉑溶解於11 mL生理食鹽水中進行。順鉑水溶液於室溫下與4 ml含有表26所列脂質成分之乙醇溶液合併。製備之分散物使用EmusiFlex™-C5均質機擠出。擠出係使用聚碳酸酯薄膜進行，其孔徑可將尺寸由1 µm降至0.2 µm。在最終擠出物中，26 mg甘露糖醇係與該擠出物混合，該混合物經冷凍乾燥，得前體脂質體。 表26. PLIC-009

範例16 . 順鉑(CPN) 前體脂 質體配方藥效之體外分析 。採用磺醯羅丹明B(SRB)測定法測定順鉑配方PLIC-002和PLIC-009，對於人膀胱癌上皮細胞株T24(ATCC® HTB-4™)、5637(ATCC® HTB-9™)和HT-1376(ATCC® CRL-1472™)之抑制濃度IC50。用於試驗中，該順鉑配方分散於正常生理食鹽水中至濃度 2 mg/mL順鉑。重新分散之配方形成澄清溶液。純順鉑1 mg/mL之正常生理食鹽水溶液(未調配)係使用作為對照組。未使用高濃度之純順鉑，由於順鉑無法於高於1 mg/mL正常生理食鹽水中形成澄清溶液。

細胞種於96-孔盤中，密度為5x10³ 細胞/孔，並於37°C、5% CO₂ 下培養24小時。 2 mg/mL順鉑配方與1 mg/mL純藥物對照組係加至接種細胞培養物之培養液中，劑量為100 μL。經配方處理72小時後，培養液吸出。經處理之細胞係藉由溫和加入100 μl 之10%三氯醋酸(TCA)至每一孔中進行固定，且培養盤於4 °C靜置至少1小時。靜置後，培養盤以自來水清洗五次，但並未將水直接流入孔中，該盤於室溫下進行空氣乾燥，並加入50 μl之0.4% w/v SRB (於1%醋酸中)至每一孔中。該盤於室溫之SRB溶液中靜置20至30分鐘。之後，該盤以1%醋酸清洗五次，並於室溫下進行空氣乾燥。經蛋白質結合之SRB係以加入100 µl之10mM Tris鹼溶液至每一格，並靜置5至10分鐘使Tris溶液可溶解SRB而偵測。該盤使用微盤讀取儀，於吸收波長565 nm偵測。表27報導 PLIC-002、PLIC-009與純藥物溶液之IC50值。 表27

範例17. 多西紫杉 醇(docetaxel) 配方 (DTL-102716) 藥效之體外分析 表28

範例6中描述的方法係用於製備多西紫杉醇(docetaxel)配方。配方之平均粒徑(Zave)為380 nm。體外磺醯羅丹明B(SRB)試驗-基礎法係用於測定多西紫杉醇(docetaxel)配方對於KU-7細胞株之抑制濃度IC50，如以上對於紫杉醇所述者。多西紫杉醇(docetaxel)配方之IC50為0.0005 ng/mL。

圖1顯示使用範例6製備脂質體之方法製備的紫杉醇-摻入脂質體在光學顯微鏡下的顯微照片(長條代表100 µm)。

圖2顯示以10 mg/kg 前體脂質體膀胱內紫杉醇配方(PLIP-001，於圖2稱之為TSD-001)、15 mg/kg PLIP-001、15 mg/kg 亞伯杉(abraxane)，或生理食鹽水治療第0、7與14天之動物體重圖，如範例8所討論。

圖3顯示投以10 mg/kg PLIP-001 (PLIP-001，於圖3中稱之為TSD-001)、15 mg/kg PLIP-001、15 mg/kg 亞伯杉(abraxane)，或生理食鹽水後第14天之動物平均體重。

圖4 顯示投以10 mg/kg PLIP-001 (PLIP-001，於圖4中稱之為TSD-001)、15 mg/kg PLIP-001、15 mg/kg 亞伯杉(abraxane)，或生理食鹽水後第14天之動物平均膀胱重量。

圖5顯示投以10 mg/kg PLIP-001 (PLIP-001，於圖5中稱之為TSD-001)、15 mg/kg PLIP-001、15 mg/kg 亞伯杉(abraxane)，或生理食鹽水後第14天之平均腫瘤面積。

圖6顯示投以10 mg/kg PLIP-001、15 mg/kg PLIP-001、15 mg/kg 亞伯杉(abraxane)，或生理食鹽水後第14天之平均腫瘤面積，使用組織學方法測量。

圖7顯示在該等動物被投予0.5 mg/kg PLIP-001 (PLIP-001，於圖7中稱之為TSD-001)、2.5 mg/kg PLIP-001、5 mg/kg PLIP-001、 5 mg/kg紫杉醇 (溶於DMSO之純紫杉醇)，或生理食鹽水21天後，在第21天的平均腫瘤面積。

圖8顯示膀胱內投以0.5 mg/kg PLIP-001、2.5 mg/kg PLIP-001、5 mg/kg PLIP-001，與未調配之紫杉醇後，在第21天的血漿紫杉醇位準。

圖9顯示PLIP-001與亞伯杉(abraxane)投藥至單離雄豬膀胱中後(離體)，冷凍切片組織中的紫杉醇濃度。

Claims (15)

1. 一種前體脂質體粉末分散物，其包含 (a)一紫杉烷或順鉑， (b)1,2-二肉豆蔻醯基-sn-甘油基-3-磷酸膽鹼(DMPC)，以及 (c)二肉豆蔻醯基磷脂醯基甘油鈉(DMPG)； 其中a : b : c之重量比為1 : (1.3-4.5) : (0.4-2.5)。
2. 如請求項1之前體脂質體粉末分散物，其中(a)為一紫杉烷，其選自於由紫杉醇、多西紫杉醇(docetaxel)、卡伐他賽(cabazitaxel)、替西他賽(tesetaxel)、DJ-927、TPI 287、拉羅他賽(larotaxel)、奧塔他賽(ortataxel)、DHA-紫杉醇及其混合物所組成之群組。
3. 如請求項1之前體脂質體粉末分散物，其中(a)為多西紫杉醇(docetaxel)，且a : b : c之重量比為1 : (1.3-2.0) : (0.4-2.0)。
4. 如請求項1之前體脂質體粉末分散物，其中(a)為順鉑與，且該分散物額外地包含(d)膽固醇，以及 a : b : c : d之重量比為1 : (2.5-4.5) : (1.0-2.5) : (0.5-1)。
5. 一種前體脂質體粉末分散物，其包含 (a)紫杉醇， (b)1,2-二肉豆蔻醯基-sn-甘油基-3-磷酸膽鹼 (DMPC)，以及 (c)二肉豆蔻醯基磷脂醯基甘油鈉(DMPG)， 其中a : b : c之重量比為1 : (1.3-3.8) : (0.4-1.5)。
6. 如請求項1或5之前體脂質體粉末分散物，其額外地包含(d)膽固醇，其中 a : b : c : d之重量比為1 : (1.3-3.8) : (0.4-1.5) : (0.5-1)。
7. 一種醫藥組成物，其包含如請求項1至6中任一項之前體脂質體粉末分散物 ，以及至少一醫藥上可接受之賦形劑。
8. 一種製備一紫杉烷或順鉑之脂質體配方之方法，其包含將如請求項1至6中任一項之前體脂質體粉末分散物，於一水性載劑中進行水合反應。
9. 一種製備一紫杉烷或順鉑配方之方法，其包含下列步驟： (i)將一第一脂質與一第二脂質分散於一水性載劑中，藉由攪拌、混合及/或均質化，以形成一分散物； (ii)加入一紫杉烷或順鉑至該第一脂質與第二脂質之分散物中； (iii)均質化該第一脂質、第二脂質與紫杉烷或順鉑之分散物，以獲得摻入紫杉烷或順鉑之脂質體； (iv)均質化該脂質體，以於分散物中獲得奈米化之脂質體顆粒；以及 (v)加入一低溫/凍乾保護劑(cryo/lyoporotectant)。
10. 如請求項9之方法，其中該方法亦包含步驟(vi)冷凍乾燥該分散物，以形成前體脂質體粉末分散物。
11. 如請求項9之方法，其中步驟(iii)係於高壓及/或高於脂質之Tc/Tg溫度下進行。
12. 一種醫藥組成物，其包含以如請求項8或9之方法所製備之一脂質體配方，以及至少一醫藥上可接受之賦形劑。
13. 一種治療在一病患中的一膀胱癌之方法，其包含將如請求項12之醫藥組成物投藥至該病患的步驟，其中該醫藥組成物係以膀胱內傳送的方式投藥，且其中該癌症為一非肌肉浸潤性膀胱癌。
14. 如請求項13之方法，其中該紫杉烷或順鉑於膀胱中在從4.5至8的任一pH值下維持可溶性。
15. 一種治療在一病患中的一上尿道上皮癌之方法，其包括將如請求項12之醫藥組成物投藥至該病患的步驟，其中該醫藥組成物係投藥至輸尿管及/或腎盂中。