TW201734449A - 偵測液體中化合物之方法及設備 - Google Patents

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TW201734449A
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尼可拉斯 勒圖爾納
艾利 卡利法
麥可 苛茲斯基
凱薩琳娜 高梅斯
羅納德 史密斯
莎拉 帕盧斯基維斯
史蒂芬 格雷
泰勒 康弗瑞-馬隆尼
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Abstract

本文描述用於偵測液體中之濫用物質或其他分析物之設備及方法。舉例而言,本文所描述之設備及方法可用於即時偵測分析物,諸如濫用物質。該等方法包含:提供包含能夠接收該液體且允許該液體遷移之層析膜的偵測區域,該層析膜在測試線處包含抗分析物抗體-粒子結合物、分析物-結合蛋白質;至少使該設備之第一位置曝露於該液體;及測定該分析物-結合蛋白質與該液體之間是否發生相互作用以偵測該分析物之存在。該層析膜可在對照線處進一步包含抗物種抗體。揭示特定緩衝液,且此等緩衝液可用於製備該設備以克服與小型化相關的挑戰及與曝露於飲料相關的挑戰。

Description

偵測液體中化合物之方法及設備
本文描述用於偵測液體中之化合物之設備及方法。亦描述適用於設備及方法中之緩衝溶液。舉例而言,本文所描述之設備及方法可用於即時偵測濫用物質。
隨著藥物使用及濫用頻率提高,個人對能夠在即時基礎上偵測不同物質之需求及需要提高。在一些實施例中,可能產生測定藥物是否已在消費者未知之情況下添加至飲料中及分開進行此測定之需要。 舉例而言,在當前文化中,出於娛樂或犯罪目的,各種精神藥物及/或鎮靜性藥物之誤用增多變得更成問題。誤用之尤其麻煩的形式為出於使飲料消費者迷暈或無意識之目的將此等藥物暗中引入一般飲料中。無知覺的個體可能隨後被佔便宜,例如成為搶劫或性侵受害者。藥物促成之性侵變得逐漸常見,尤其在較年輕人群中,以至於大多數大學在適當的位置已有警告及預防方案及策略以阻止藥物促成之性侵。在攝取之前偵測此類藥物之習知設備通常為不夠的,因為其可能使用過於繁瑣,偵測目標物質耗時過長,僅能偵測出有限物質,且對多種其他化合物缺乏選擇性及敏感性。 作為另一實例,在普通群體中診斷自體免疫病症或高度敏感性過敏症之頻率已得到提高。舉例而言,腹腔疾病、花生過敏症、乳糖過敏症或其他不同攝取物質觸發的病狀在普通群體中變得更常見。若具有此等類型病狀之個體攝取特定有害物質,則對於該個體可能產生明顯且嚴重的後果。 鑒於此等趨勢,習知測試方法及裝置通常為過於繁瑣的或評估目標物質之特定液體的耗時過久。在一些實施例中,不存在用於即時偵測某些目標物質或化合物之特定小型化設備。在一些實施例中,飲料組分可能干擾測試方法。
本文所使用之術語「本發明(invention)」、「本發明(the invention)」、「本發明(this invention)」及「本發明(the present invention)」意欲概括地指代本文及以下申請專利範圍之所有標的物。含有此等術語之陳述不限制本文所描述之標的物或不限制以下申請專利範圍之涵義或範疇。此發明內容為本發明之各種態樣之高階綜述且引入一些進一步描述於以下實施方式部分中之概念。此發明內容並不意欲確定所主張之標的物之關鍵或基本特徵,亦不意欲單獨使用以確定所主張之標的物之範疇。應參考整個說明書之適當部分、任何或所有圖式及每一申請專利範圍來理解標的物。 本文揭示用於偵測液體中之目標物質、分析物或藥物之存在的設備及方法。在一些實施例中,設備為用於側流分析之側流裝置,其中待分析液體沿著流體路徑自樣品區域遷移跨過結合物區域,跨過層析膜且進入芯體中。目標物質或分析物(若存在)與抗分析物抗體反應且反應產生目標分析物是否存在於液體中之可見指示。在一些實例中,可代替抗體或除抗體以外使用適體。 作為一個實例,本文所描述之方法及設備可用於即時接觸點偵測藥物,諸如飲料或體液中之約會迷奸藥或其他鎮靜性藥物。在其他實例中,本文所描述之方法及設備可用於即時接觸點偵測食品或營養補充劑中之重金屬;用於偵測化妝品中之污染物;或用於偵測土壤中之污染物或養分。在一些實施例中,本文所描述之方法及設備可用於即時偵測抗分析物抗體存在或可能產生之任何分析物。 因此,本文描述用於安全即時偵測目標物質之可行方法及設備。此類目標物質之實例包括濫用物質內的化合物,諸如藥物、過敏原及生物學及環境毒素。目標物質之非限制性特定實例包括苯并二氮呯;含胺化合物,包括(但不限於)麻醉劑;酒精;及其他濫用藥物,例如俱樂部藥物。當前「俱樂部藥物」包括氯胺酮、4-羥基丁酸(GHB)、麻黃素、甲基安非他明(methamphetamine)、安非他明、氟硝西泮(flunitrazepam)、3,4-亞甲二氧基-甲基安非他明(MDMA,亦稱為搖頭丸(ecstasy)或莫里(molly))、苯并二氮呯(諸如氯硝西泮、四氫大麻酚(THC)及更多)。可偵測損害記憶之藥物或鎮靜性藥物,諸如唑吡坦(zolpidem)、右佐匹克隆(eszopiclone)、雷美替胺(ramelteon)、紮來普隆(zaleplon)、多塞平(doxepine)、三唑侖(triazolam)、替馬西泮(temazepam)及阿普唑侖(alprazolam)。。 此類目標物質之其他實例包括蛋白質、糖、類固醇及其代謝物。目標物質之又其他實例包括毒物、殺蟲劑、毒素、化學戰劑、環境毒物、爆炸物及用於製得其的起始材料。此外,目標物質可包括小分子或小分子之混合物。在一些實施例中,設備可偵測多種分析物。 此外,單分析物或多分析物設備可併入傳訊機制,在一些實施例中,其為指示目標化合物存在或不存在之可見指示、振動或聲音。舉例而言,可見指示可包含著色斑點、圖案或區域之外觀,不存在著色斑點、圖案或區域之外觀;詞之印刷,諸如「安全」、「可以」、「是」或「否」;檢查標記;表情符或符號,諸如「☺」;或螢光。在一些實例中,傳訊機制包含完成線、標識、圖案或符號。 在一些實施例中,本文所描述之設備極小。舉例而言,設備可具有20 mm或小於20 mm,15 mm或小於15 mm,12 mm或10 mm或小於12 mm或10 mm之長度。在一些實施例中,設備包含約10 mm至約150 mm,例如約10 mm至約25 mm,或約10 mm至約20 mm範圍內之長度。在一些實施例中,設備可具有約10 mm或小於10 mm,11 mm或小於11 mm,12 mm或小於12 mm,13 mm或小於13 mm,14 mm或小於14 mm,15 mm或小於15 mm,16 mm或小於16 mm,17 mm或小於17 mm,18 mm或小於18 mm,19 mm或小於19 mm,20 mm或小於20 mm,21 mm或小於21 mm,22 mm或小於22 mm,23 mm或小於23 mm,24 mm或小於24 mm,25 mm或小於25 mm,26 mm或小於26 mm,27 mm或小於27 mm,28 mm或小於28 mm,29 mm或小於29 mm,或30 mm或小於30 mm之長度。在一些實施例中,設備具有大於設備長度之流體路徑長度。 在其他實施例中,設備可具有其他尺寸。然而,本發明克服與側流分析技術之小型化相關的顯著障礙。舉例而言,小型化可導致液體跨過層析膜之流動速率之非所需提高。除小型化提出的挑戰以外,一些目標液體(例如飲料)包括酸性組分、高乙醇濃度、高糖濃度及/或可能干擾準確的測試結果之其他組分。在一些實例中,設備為小型化的以便適宜用於精密用途及/或為穿戴式的。與本發明設備及方法相符之穿戴式設備之特定實施例描述且闡述於Undercover Colors, Inc.申請的標題為「用於偵測液體中之化合物之穿戴式設備(Wearable Apparatus for Detecting a Target Substance in Liquids)」且與本申請案同一天申請之PCT專利申請案中,其以全文引用之方式併入。側流分析之小型化之額外效益包括減少的原料用途,將更多分析封裝至運送容器中之能力,具有在單一設備中多路複用之分析的提高的數目,明顯降低樣品體積,且提供歸因於較短流動距離之快速測試結果。 本文所描述之設備及方法克服與小型化相關的挑戰及與曝露於飲料及其他混合物相關的挑戰。在一些實施例中,設備及方法藉由修飾層析膜及/或修飾液體黏度來調節液體流動速率。在一些實施例中,緩衝溶液可用於製備設備,使殘餘緩衝液組分留在設備上之所需位置處,以使得在使用時復原緩衝液組分且中和測試液體中之酸性組分,減緩測試液體通過裝置之進程,或者促進測試方法。在一些實施例中,緩衝液或緩衝溶液可定製用於處理設備之各種組分,諸如樣品區域、結合物區域及/或層析膜。 在一些實施例中,緩衝溶液可包含至少2厘泊(cP)之黏度。在一些實施例中,緩衝液或緩衝液添加劑提高待分析液體之黏度,藉此調節液體跨過層析膜之流動速率。在一些此類實施例中,當藉由測試液體復原設備上之殘餘緩衝液組分時,復原的緩衝溶液提高測試液體之黏度且減緩液體之流動速率。 在一些實施例中,可在製備試劑或將試劑施加至設備之過程中利用緩衝溶液。在一些實施例中,溶液或殘餘緩衝液組合物可使得測試與可含有分析物之液體相容。在一些實施例中,獨特緩衝液組分可解決、結合或消除不相容的物質,諸如液體中可見之酸(包括α-羥基酸,諸如乳酸、蘋果酸或檸檬酸)。在一些實例中,可將緩衝液添加劑引入至緩衝溶液中之設備之組分或本身。在一些實施例中,緩衝液液體可在施加緩衝溶液之後蒸發。在此情況下,殘餘緩衝液組合物靜置在曝露於緩衝溶液之設備之區域上。 在一些實施例中,樣品墊或區域為曝露於測試液體之設備之組件或部分。在一些實施例中,當液體為酸性飲料時,樣品墊緩衝液可中和測試液體。在一些實施例中,樣品墊緩衝液可包含弱酸之鹽。在一些實施例中,即使在小型化樣品墊之情況下,可濃縮樣品墊緩衝液以提供飲料之足夠中和。 在一個態樣中,本文所描述之偵測液體中之分析物的方法包含以下步驟:提供包含樣品墊、結合物墊及偵測層之設備,其中結合物墊包含至少一種標記物,諸如抗分析物抗體-粒子結合物,且其中偵測層包含分析物-結合蛋白質及能夠接收液體且允許液體遷移之層析膜;至少使樣品墊曝露於液體;及測定分析物-結合蛋白質與液體之間是否存在相互作用以偵測分析物之存在。在一些實施例中,偵測層進一步包含抗物種抗體。在一些實施例中,緩衝液或緩衝溶液可定製用於沈積至樣品墊、結合物墊或偵測層之中或之上。因此,在一些實施例中,樣品墊、結合物墊或偵測層包含殘餘緩衝液組分。舉例而言,緩衝溶液可沈積至偵測層上,且隨後乾燥以形成測試及/或對照線或區域。在一些實施例中,偵測層之層析膜可包含活性碳、矽膠、離子交換樹脂、聚電解質聚合物、水凝膠及/或尺寸排阻層析基質。在一些實施例中,層析膜可包含纖維素、硝化纖維素、玻璃纖維、類似材料或此等材料之組合。出於本申請案之目的,「偵測層」及「偵測區域」可互換使用。 在一些實施例中,標記物包含結合至粒子之抗分析物抗體。在其他實施例中,標記物包含結合至粒子之抗分析物適體。為了易於在本文中進行論述,術語抗分析物抗體-粒子結合物可用於係指抗分析物抗體-粒子結合物及抗分析物適體-粒子結合物中之任一者(或兩者)。粒子可為奈米粒子、微珠粒或其他目測構件。目測構件可為當抗分析物抗體-粒子結合物進行相互作用,諸如與分析物-結合蛋白質或抗物種抗體相互作用時促成可見指示之任何組合物以在測試或對照線處產生顏色。在一些實例中,粒子為著色粒子,其可為金奈米粒子、磁性奈米粒子或染料輸注之聚合物微珠粒。在其他實施例中,粒子可為螢光標記結合物或放射性標記。視情況,粒子包括羧基螢光素、2,7-二氯螢光黃、伊紅B、伊紅Y、紅螢素、螢光素、螢光素胺基酸酯、螢光素異氰酸酯、紅溴汞、玫瑰紅B、孟加拉玫瑰紅(Rose Bengal)、其衍生物及鹽或其組合。術語抗分析物抗體-粒子結合物及標記物在本文中可互換使用。除非另外說明,否則術語涵蓋包括任何適合的粒子,諸如上文所列之彼等者的結合物。在一些實施例中,標記物存在於結合物墊上,其一般安置於樣品墊與層析膜之間。 在一些實施例中,結合物墊可用結合物墊緩衝液預處理。在一些實施例中,結合物墊緩衝液可完全濃縮,因為結合物墊可極小,諸如4 mm×4 mm。在一些實施例中,結合物墊緩衝液可中和可能另外干擾測試結果之液體中可見之化合物。在一些實例中,結合物墊緩衝液可包含有機多元醇及/或胺、聚電解質聚合物、界面活性劑及其組合。此外,在一些實施例中,調配結合物墊緩衝液以與抗分析物抗體-粒子結合物相容,或換言之,結合物墊緩衝液將不使抗分析物抗體-粒子結合物變性。 在一些實施例中,在印刷或者沈積於結合物墊上之前,使抗分析物抗體-粒子結合物溶解於結合物稀釋緩衝液中。舉例而言,結合物稀釋液緩衝劑可包含有機鹽、蛋白質、糖及其組合。 在一些實施例中,沈積於層析膜上之分析物結合蛋白質限定測試線或測試區域,且沈積之抗物種抗體限定對照線或對照區域。測試線及對照線兩者可固定化在層析膜上。如下文進一步解釋,「線」不一定必須為線性的,且可呈各種預定形狀,告知使用者目標物質存在或不存在。在一些實施例中,測試線或線限定圖案,其可包含諸如「是」、「否」、「安全」、「可以」或「☺」之指示。在一些實施例中,若已產生圖案以偵測多種分析物,則僅圖案之一些部分可改變顏色。舉例而言,詞「安全」可呈現為SΛFE,其中字母「A」之顏色在交叉條區域中未出現。在一些實例中,圖案用樣板形成以產生字母、符號或詞。在一些實例中,形成圖案以使得測試結果完成設計、詞、符號或數字。 在一些實例中,液體包含可消耗性液體。舉例而言,可消耗性液體可為啤酒、蘋果汁、能量飲料、調味飲料、水果飲料、白酒或其他酒精類飲料、牛乳或含牛乳飲料、蘇打、運動飲料、蔬菜飲料、水、葡萄酒或其組合。在一些實例中,液體包含非可消耗性液體。舉例而言,非可消耗性液體可為血液、非飲用水、有機溶劑、飲用水、血清、經處理之廢水、未經處理之廢水、尿液、嘔吐物或其組合。液體可包含溶液、懸浮液或乳液。在一些實施例中,液體包含固體粒子或懸浮於其中之冰。在其他實施例中,液體用於在偵測之前自固體材料提取分析物,諸如自非液體食物產品提取過敏原。 在一些實施例中,偵測層安置於惰性基板之表面上。在一些實例中,層析膜可用層析膜緩衝劑預處理,其多種可互換地稱為偵測層緩衝劑或偵測區域緩衝劑。層析膜緩衝劑可包含蛋白質、二元磷酸鈉、聚電解質聚合物、醣或其組合。在一些實例中,層析膜可在7至8範圍內之pH下緩衝。 在另一態樣中,用於偵測液體中之分析物之存在的本文所描述之設備包含偵測層。在一些實施例中,設備包含:能夠接收液體之樣品墊;包含抗分析物抗體-粒子結合物之結合物墊;及包含允許液體遷移之層析膜且在測試位置處包含分析物-結合蛋白質之偵測層。在一些實施例中,層析膜在對照位置處進一步包含抗物種抗體。在一些實施例中,偵測層進一步包含吸收劑及/或經乾燥劑預處理。吸收劑可包括層析紙、矽膠或氧化鋁。在一些實例中,偵測層包含側流分析,其可為多重的,用於測試多種化合物之偵測。 在一些實例中,樣品墊能夠接收液體,且在一些實施例中,液體自樣品墊移動至結合物墊至層析膜。在一些實施例中,液體自層析膜移動至芯體。芯體充當流體儲存器以防止流體停在層析膜上。在一些實施例中,為了使分析小型化,芯體包含摺疊層(例如層在自身向後摺疊)。在一些實施例中,芯體為U形或S形的。在一些情況下,設備中之流體路徑可為通過多個平面及/或沿多個方向,根據設備組件之形狀的曲形。因此,在一些實例中,可在不阻礙設備之偵測能力的情況下縮短設備之總體長度。在一些實施例中,設備具有大於設備長度之流體路徑長度。 在一些實施例中,設備進一步包含層析膜上的覆蓋層。覆蓋層可包含一或多個開口以准許氣體逸出,或覆蓋層可為氣體可滲透的。在一些實施例中,覆蓋層為不透光覆蓋層、著色覆蓋層、透明覆蓋層或半透明覆蓋層。在一些實施例中,覆蓋層限定樣板圖案,其可包含諸如「是」、「否」、「安全」、「可以」或「☺」之指示。樣板圖案可放置在層析膜之第二位置上。此類圖案可有助於使用者容易理解測試結果。 視情況,設備可安置在物件之上、之內或之下。在一些實施例中,物件可為指甲、人工指甲、指甲油層、指甲貼紙、指甲貼花、貼紙、杯子、飲料杯托、飲料攪拌器、牙籤、飲料裝飾物、鉛筆、筆、環、手環、手環小飾品、項鏈、束帶吊墜、杯托、摻和棒或其他適當的物件。在一些實施例中,設備可安置在表面上或指甲上。 在一些實施例中,小型化設備具有高達4 mm之厚度。在一些實施例中,設備長度高達14 mm。在一些實例中,設備寬度高達4 mm。在一些實施例中,小型化設備經配置以偵測各種各樣的啤酒、白葡萄酒、紅葡萄酒、純白酒、混合飲料、鈉、果汁及水中之多種藥物之存在。 在一些實施例中,用於偵測液體中之分析物之存在的設備包含:包含結合物區域之結合物墊,該結合物區域包含至少一種抗分析物抗體-粒子結合物或抗分析物適體-粒子結合物;偵測層,其包含層析膜及至少一種分析物-結合蛋白質;及用於接收液體之樣品區域,其中樣品區域為單獨的樣品墊或為與結合物區域分離之結合物墊之部分。在一些實例中,將樣品墊及結合物墊組合至單一膜中減少設備中之組分的數目且改良可製造性,尤其對於小型化側流分析設備而言。在一些實例中,偵測層、樣品區域或結合物區域中之至少一者包含殘餘緩衝液組合物。在其他實例中,設備包含單一墊,其包含單獨區域,諸如樣品區域、結合物區域、偵測層(或層析膜區域)及芯體區域。在又其他實例中,設備包含單一墊,其包含單獨區域,諸如樣品區域、結合物區域及偵測層(或層析膜區域)。 在一些實施例中,偵測層進一步包含至少一種抗物種抗體。在一些實施例中,層析膜包含纖維素、硝化纖維素、聚酯纖維及/或玻璃纖維中之一或多者。在一些實施例中,設備進一步包含限定圖案之覆蓋層,其中覆蓋層安置於偵測層上方。在一些實施例中,偵測層安置在天然指甲、人工指甲、指甲油層、指甲貼紙、指甲貼花、貼紙、杯子、飲料杯托、飲料攪拌器、牙籤、飲料裝飾物、鉛筆或筆之上或之內或之下。 在一些實施例中,樣品區域包含第一殘餘緩衝液組合物。第一殘餘緩衝液組合物可包含弱酸之鉀鹽及至少一種界面活性劑。在一些實施例中,結合物區域包含第二殘餘緩衝液組合物。第二殘餘緩衝液組合物可包含古德氏緩衝鹽(Good's buffer salt)及蛋白質、寡聚物、聚合物及界面活性劑中之一或多者。在一些實施例中,偵測層包含第三殘餘緩衝液組合物。第三殘餘緩衝液組合物可包含磷酸鹽及醣、蛋白質、寡聚物及聚合物中之一或多者。 在一些實施例中,偵測液體中之分析物之方法包含:提供如本文所描述之設備;使設備的一部分曝露於液體;及觀測可見指示以測定分析物存在或不存在。 在一些實施例中,製得用於偵測液體中之分析物之存在的設備之方法包含:(1)將緩衝溶液施加至以下各者中之至少一者:(a)包含結合物區域之結合物墊,其包含至少一種抗分析物抗體-粒子結合物或抗分析物適體-粒子結合物,(b)偵測層,其包含層析膜及分析物-結合蛋白質,或(c)用於接收液體之樣品區域,其中樣品區域為單獨的樣品墊或為與結合物區域分離的結合物墊之部分;(2)乾燥緩衝溶液;及(3)組裝結合物墊、偵測層、樣品區域及芯體以使得樣品區域與結合物區域之一個部分接觸,結合物區域之另一部分與偵測層之近端接觸,且芯體與偵測層之遠端接觸。 一或多個實施例之細節闡述於以下圖式及實施方式中。其他特徵、目標及優點將自圖式、實施方式及申請專利範圍顯而易見。
相關申請案之交叉參考 本申請案主張2016年1月27日申請之美國臨時申請案第62/287,677號、2016年1月27日申請之美國臨時申請案第62/287,623號、2016年1月27日申請之美國臨時申請案第62/287,643號、2016年5月17日申請之美國臨時申請案第62/337,603號、2016年5月17日申請之美國臨時申請案第62/337,558號及2016年5月17日申請之美國臨時申請案第62/337,608號的優先權,其中之每一者以全文引用之方式併入本文中。 本發明之實施例之標的物描述於本文中以特定滿足法定需求,但本說明書不意欲限制申請專利範圍的範疇。所主張之標的物可體現於其他方法中,可包括不同元素或步驟,及/或可與其他現有或將來技術結合使用。除了當明確描述個別步驟順序或元素配置時以外,本說明書不應解釋為意指各種步驟或元素之中或之間的任何特定順序或配置。給出說明性實例以向讀者介紹本文所論述之一般標的物且並不意欲限制所揭示之概念之範疇。以下部分參考圖式描述各種額外實施例及實例,其中相同數值指示相同元素,且方向描述用於描述說明性實施例,但如說明性實施例不應用於限制本發明。 除非尤其相反陳述,否則以下說明書中所闡述之數值參數為可能視試圖藉由本發明獲得的所需特性而變化之近似值。至少,且不試圖將等效原則之應用限於申請專利範圍之範疇,各數值參數至少應根據所報導之有效數位的數目且藉由應用一般捨入技術來解釋。 儘管闡述本發明之廣泛範疇的數值範圍及參數為近似值,但仍儘可能精確地報導特定實例中所闡述之數值。然而,任何數值均固有地含有由其各別測試量測值中發現之標準差必然引起的某些誤差。此外,本文所揭示之所有範圍涵蓋其中包含之任何及所有子範圍。舉例而言,所陳述範圍「1至10」包括最小值1與最大值10之間(且包括1及10)的任何及所有子範圍;亦即,以最小值1或1以上(例如,1至6.1)開始且以最大值10或10以下(例如,5.5至10)結束之所有子範圍。 本文描述設備及方法及緩衝溶液以用於其中,用於偵測目標物質。在一些實施例中,方法及設備可偵測液體中之目標化合物。在一些實施例中,方法及設備可偵測固體中之目標物質。作為一個實例,本文所描述之方法及設備可用於即時接觸點偵測藥物,諸如飲料或體液中之約會迷奸藥或其他鎮靜性藥物。在其他實例中,本文所描述之方法及設備可用於即時接觸點偵測食品或營養補充劑中之重金屬;化妝品中之污染物;或土壤中之污染物或養分或其他相關分析物。作為另一實例,本文所描述之方法及設備可用於即時偵測某些蛋白質或糖,例如麩質、花生蛋白質或乳糖。在一些實施例中,本文所描述之方法及設備可用於即時偵測其他材料,例如細菌、病原體、真菌、金屬或揮發性有機物及其他目標化合物。在一些實例中,可偵測鎮靜性藥物或約會迷奸藥。 在一些實施例中,可偵測苯并二氮呯藥物。苯并二氮呯或「苯并」為具有含有稠合至二氮呯環之苯環之化學結構的一類藥物,如下式(1)中所示。苯并二氮呯具有鎮靜性特性,且因此被罪犯用於使受害者無能。可偵測之苯并二氮呯包括(但不限於)阿地唑侖(adinazolam)、阿普唑侖(alprazolam)、苯他西泮(bentazepam)、溴他西尼(bretazenil)、溴西泮(bromazepam)、溴替唑侖(brotizolam)、卡姆西泮(camezepam)、氯二氮環氧化物(chlordiazepoxide)、西那西泮(cinazepam)、西諾西泮(cinolazepam)、克洛巴薩姆(clobaxam)、克落那西泮(clonazepam)、克羅西培(chorazepate)、克羅夏西泮(clotiazaepam)、地西泮(diazepam)、氟硝西泮(flunitrazepam)、勞拉西泮(lorazepam)、氯甲西泮(lormetazepam)、美達西泮(medazepam)、咪達唑侖(midazolam)、硝西泮(nitrazepam)、噁西泮(oxaepam)、替馬西泮(temazepam)及西爾那普拉唑侖(thielnalprazolam)。 在一些實施例中,可偵測含胺化合物(例如含胺藥物)。如本文中所提及之「含胺」化合物或藥物包括具有至少一種一級、二級及/或三級胺及/或其鹽之物種。胺式可由NR1 R2 R3 表示,其中R1 、R2 及R3 可相同或彼此不同,且R1 、R2 及R3 可包括(但不限於)氫、經取代或未經取代之直鏈或分支鏈C1 -C6 烷基(例如甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基)、經取代或未經取代之C6 -C10 芳基(例如苯甲基)、經取代或未經取代之直鏈或分支鏈C1 -C6 烷醇(例如甲醇、乙醇、丙醇、丁醇、戊醇、己醇)、經取代或未經取代之C6 -C10 芳基、經取代或未經取代之雜芳基、經取代或未經取代之C4 -C8 環烷基或其組合,其限制條件為R1 、R2 及R3 不能均為氫。如本文所描述之胺鹽可表示為(HNR1 R2 R3 )+ X- ,其中X- 為相對離子且R1 、R2 及R3 如上文針對胺所定義。如本文所描述之含胺化合物不包括氨或化合物或其鹽,諸如脲及其衍生物及鹽,例如硝酸脲。 可偵測之含胺化合物之實例包括例如安非他明、卡西酮、環苯紮平、苯海拉明、苯吡拉明、麻黃素、氯胺酮、麥角酸二乙胺(LSD)、甲基安非他明、3,4-亞甲二氧基苯異丙胺(MDA)、3,4-亞甲二氧基-甲基安非他明(MDMA)、甲卡西酮、四氫唑啉及其鹽及其組合。 在一些實施例中,其他藥物可藉由本文所描述之設備及方法偵測。舉例而言,可偵測出類固醇,諸如雌激素、促孕激素、雄激素;腎上腺皮質類固醇;膽酸;強心糖苷;及糖苷配基,諸如地高辛及地高辛配基;皂素及皂苷元;其衍生物及代謝物。可偵測出巴比妥酸鹽,諸如苯巴比妥。可偵測出安非他明;兒茶酚胺,諸如麻黃素、左旋多巴、腎上腺素、卡西恩(carcene)、派維因(papverin)及其代謝物。可偵測出生物鹼,諸如嗎啡生物鹼。可偵測出嘌呤,諸如茶鹼、咖啡鹼及其代謝物及衍生物。可偵測出大麻衍生物,諸如大麻酚及四氫大麻酚。可偵測出維生素,諸如A、B (諸如B12 )、C、D、E、K、葉酸及硫胺。可偵測損害記憶之藥物或鎮靜性藥物,諸如唑吡坦、右佐匹克隆、雷美替胺、紮來普隆、多塞平、三唑侖、替馬西泮及阿普唑侖。可偵測出抗生素,諸如青黴素、氯黴素、白放線菌素、四環素、土黴素及其代謝物及衍生物。另外,可偵測出抗組織胺、美沙酮及其他藥物。 本文所描述之設備及方法可偵測液體中之目標物質。液體可包含溶液、懸浮液或乳液。在一些實例中,液體具有固體粒子或懸浮於其中之冰。 在一些實施例中,液體包含可消耗性液體。舉例而言,可消耗性液體可包括啤酒、蘋果汁、能量飲料、調味飲料、水果飲料、酒類或其他醇類飲料、牛乳、含牛乳飲料、蘇打、運動飲料、蔬菜飲料、水、葡萄酒及其組合。在一些實施例中,液體具有高濃度之乙醇。在一些實施例中,液體具有高濃度之糖。在一些實施例中,液體為酸性的。 在一些實例中,液體包含非可消耗性液體。舉例而言,非可消耗性液體可包括血液、非飲用水、有機溶劑、飲用水、血清、經處理之廢水、未經處理之廢水、尿液、嘔吐物、汗液、淚液、生殖流體、其他身體分泌物或其組合。 若所需目標物質疑似在非液體,例如固體食品中,則適合的溶劑可用於提取目標物質中之至少一些且溶劑可充當使用本文所描述之設備及方法的測試液體。類似地,可藉由使固體與溶劑接觸以提取任何目標分析物且測試溶劑來測試營養補充劑、化妝品或土壤中重金屬或非所需化學物質之存在。此外,可提取可溶性空氣品質污染物以便測試。在一些實例中,提取採用溶劑或水。 本文所描述之設備及方法可提供可輔助執法或法醫專家之初步法醫分析,例如迅速確認可能已攝取目標化合物的個體之血液、汗液、淚液、尿液、嘔吐物或飲料中之目標分析物之存在或不存在。有利地,本文所描述之設備及方法允許即時測定上文所提及之分析物中之任一者。本文所描述之方法不需要昂貴設備或科學訓練來鑑別分析物存在或不存在。 在一些實施例中,根據本文所描述之實施例之設備為用於側流分析之側流裝置,其中待分析之液體沿著流體路徑自樣品區域遷移跨過結合物區域,且隨後跨過層析膜進入芯體。目標物質或分析物(若存在)與抗分析物抗體反應且反應產生目標分析物是否存在於液體中之可見指示。I. 緩衝溶液 本文所描述之緩衝溶液可施加至如本文所描述之側流設備之部分以增強設備效能。舉例而言,緩衝溶液可使得如本文所描述之測試設備及方法與含有另外將干擾分析之組分之液體相容。緩衝溶液亦可用於減緩跨過膜之液體行進時間以確保任何目標分析物與對應的抗分析物抗體或分析物-結合蛋白質之間足夠的反應時間。 本文所描述之緩衝溶液包括鹽、酸、蛋白質、賦形劑、黏度調節劑及/或界面活性劑。在本申請案中,「緩衝液」、「緩衝溶液」及「緩衝液調配物」可互換使用來描述包含至少一種緩衝化合物及水之溶液。視情況,緩衝溶液可進一步包含緩衝液添加劑。緩衝液添加劑為不一定有助於緩衝溶液之緩衝能力(例如其並不實質上影響緩衝溶液之酸-鹼化學反應)之化合物。在一些實施例中,緩衝化合物可包含緩衝鹽及視情況選用之額外酸或鹼,諸如鹽酸或氫氧化鈉。在一些實施例中,緩衝液添加劑包含屏蔽劑,諸如蛋白質,例如牛血清白蛋白(BSA);黏度調節聚合物,諸如聚(乙烯醇) (PVA)、聚(乙烯基吡咯啶酮) (PVP)、聚(乙二醇) (PEG)或其寡聚物或共聚物;賦形劑或穩定劑,諸如醣(例如葡聚糖、海藻糖、麥芽右旋糖);及界面活性劑,諸如非離子界面活性劑(例如聚山梨醇酯20或80、曲拉通(Triton) X-100、曲拉通X-305或普洛尼克(Pluronic) F-68)。 適用於本文所描述之緩衝溶液中之緩衝鹽包括弱酸及弱鹼。緩衝鹽可為一元、二元、三元或更高元鹼度,視緩衝鹽可接受之質子數目而定。舉例而言,一元緩衝鹽將能夠接受一個質子,而二元緩衝鹽可接受兩個質子。類似地,適用於本文所描述之緩衝溶液中之酸可為單質子、二質子、三質子等,視其可供給之質子數目而定。 傳統的緩衝酸及鹼,諸如硼酸、碳酸及磷酸及其對應的硼酸鹽、碳酸鹽及磷酸鹽可用於本文所描述之緩衝溶液中。另外,亦可使用如Norman Good及同事所描述之古德氏緩衝鹽,及生物化學應用中常用之類似鹽。適用於本文所描述之緩衝溶液中之緩衝鹽之非限制性實例為磷酸單鈉、磷酸二鈉、四硼酸鈉、參(羥基甲基)甲基胺基丙烷磺酸(TAPS)、N-環己基-2-胺基乙烷磺酸(CHES)、N-參(羥基甲基)甲基-4-胺基丁烷磺酸(TABS)、bis-tris甲烷(Bis TRIS)、參(羥基甲基)胺基甲烷(TRIS)、2-[[1,3-二羥基-2-(羥甲基)丙-2-基]胺基]乙磺酸(TES)、2-(N-嗎啉基)乙磺酸(MES)、N-(胺甲醯基甲基)亞胺二乙酸(ADA)、N-(2-乙醯胺基)-2-胺基乙烷磺酸(ACES)、Bis tris丙烷、哌嗪-N,N′-雙(2-乙磺酸) (PIPES)、N-(2-乙醯胺基)-2-胺基乙烷磺酸(ACES)、3-嗎啉基-2-羥基丙磺酸(MOPSO)、乙醇胺氯化物、(3-(N-嗎啉基)丙磺酸) (MOPS)、N,N-雙(2-羥乙基)牛磺酸(BES)、N,N-雙(2-羥乙基)-3-胺基-2-羥基丙磺酸(DIPSO)、4-(N-嗎啉基)丁磺酸(MOBS)、3-[N-參(羥基甲基)甲基胺基]-2-羥基丙磺酸(TAPSO)、乙醯胺基甘胺酸、三乙醇胺(TEA)、哌嗪-N,N′-雙(2-羥基丙磺酸) POPSO、4-(2-羥乙基)哌嗪-1-(2-羥基丙磺酸)水合物(HEPPSO)、3-[4-(2-羥乙基)-1-哌嗪基]丙磺酸(HEPPS)、麥黃酮、參(羥基甲基)胺基甲烷、胺丁三醇(TRIZMA)、甘胺醯胺、甘胺醯基-甘胺酸、N-(2-羥乙基)哌嗪-N′-(4-丁磺酸) (HEPBS)、二羥乙甘胺酸、2-胺基-2-甲基-1-丙醇(AMP)、N-(1,1-二甲基-2-羥乙基)-3-胺基-2-羥基丙磺酸(AMPSO)、N-環己基-2-羥基-3-胺基丙烷磺酸(CAPSO)、N-環己基-3-胺基丙烷磺酸(CAPS)、4-(環己基胺基)-1-丁磺酸(CABS)及(4-(2-羥乙基)-1-哌嗪乙磺酸) (HEPES)。其他潛在適用的緩衝鹽為諸如以下胺基酸之鹽:丙胺酸、精胺酸、天冬醯胺、天冬胺酸、半胱胺酸、麩胺酸、麩醯胺酸、甘胺酸、組胺酸、異白胺酸、白胺酸、賴胺酸、甲硫胺酸、苯丙胺酸、脯胺酸、絲胺酸、蘇胺酸、色胺酸、酪胺酸、纈胺酸。此外,緩衝鹽可包括肉鹼、γ-胺基丁酸、牛磺酸。 以下實例揭示根據一些實施例之緩衝化合物。在一些實例中,緩衝溶液包含TRIS (參(羥基甲基)胺基甲烷)及水。緩衝溶液中之TRIS之濃度可為高達0.3 M,高達0.4 M,高達0.5 M,高達0.60 M,高達0.7 M,高達0.8 M,或高達1.0 M。在一些實施例中,TRIS濃度為約0.5 M。 在一些實施例中,適用於本文所描述之方法及設備中之緩衝溶液包含二元鹽、一元鹽及水。在一些實施例中,二元鹽及一元鹽具有共同陰離子。舉例而言,共同陰離子可為磷酸根陰離子,但可使用任何其他已知的二元陰離子。陽離子可為任何單價或二價陽離子,諸如鉀、鈉或鈣。在一些實例中,緩衝溶液包含磷酸二氫鈉及/或磷酸氫二鈉。 在其他實施例中,適用於本文所描述之方法及設備中之緩衝溶液包含一或多種磷酸鹽、一或多種氯化物鹽或其組合及水。適用的氯化物鹽之實例包括氯化鈉及/或氯化鉀。視情況,一或多種磷酸鹽包括磷酸二鈉及/或磷酸二氫鉀。視情況,用於製備磷酸鹽緩衝溶液之鹽為水合物。水合物可為例如單水合物、二水合物、三水合物、四水合物、五水合物、六水合物或七水合物。在一些實施例中,用於製備磷酸鹽緩衝液之磷酸二鈉可為磷酸二鈉七水合物(Na2 HPO4 ·7H2 O)。磷酸鹽可以高達25 mM,高達25 mM,高達50 mM,高達100 mM,高達約200 mM,約5至約15 mL,約20至約25 mM,約40至約60 mM,或約80至約120 mM之量存在於緩衝液中。 在一些實施例中,適用於本文所描述之方法及設備中之緩衝溶液包含硼酸鹽及水。視情況,硼酸鹽為水合物。如上文所描述,水合物可為例如單水合物、二水合物、三水合物、四水合物、五水合物、六水合物或七水合物。舉例而言,用於製備硼酸鹽緩衝液之硼酸鹽可為四硼酸鹽七水合物(Na2 B4 O7 ·10H2 O)。硼酸鹽可以高達25毫莫耳,高達50 mM,或高達100 mM之量存在於緩衝液中。 在一些實施例中,適用於本文所描述之方法及設備中之緩衝溶液包含一或多種羧酸鹽,諸如丁二酸鹽及檸檬酸鹽及水。在一些實施例中,緩衝溶液包含單價陽離子碳酸鹽,諸如碳酸鉀(K2 CO3 )或二價陽離子碳酸鹽,諸如碳酸鈣(CaCO3 )。舉例而言,碳酸鉀可以高達500 mM,高達750 mM,高達1.0 M,高達1.1 M,高達1.2 M,高達1.3 M,高達1.4 M,或高達1.5 M之量存在於緩衝溶液中。 在一些實施例中,除任何弱酸或鹼緩衝化合物以外,適用於本文所描述之設備及方法中之緩衝溶液包括酸或鹼。此等額外酸及鹼可用於調節緩衝溶液之最終pH。在一些實施例中,鹽酸(HCl)或氫氧化鈉(NaOH)可用作此類額外酸或鹼,但可實際上使用其他酸或鹼。 以下實例揭示根據一些實施例之緩衝液添加劑。在一些實施例中,適用於本文所描述之方法及設備之緩衝溶液可包括一或多種屏蔽劑。在一些實施例中,屏蔽劑為蛋白質。屏蔽劑之非限制性實例包括明膠、酪蛋白及牛血清白蛋白(BSA)。在一些實例中,緩衝溶液可包含按緩衝溶液之重量計小於1%至超過10%之任何量的BSA。在一些實施例中,緩衝溶液包含按緩衝溶液之重量計約0.1 wt%、約0.2 wt%、約0.5 wt%、約1 wt%、約3 wt%、約5 wt%、約8 wt%、約10 wt%、約12 wt%或約15 wt%的BSA。 在一些實施例中,適用於本文所提供之設備及方法中之緩衝溶液可包括至少一種賦形劑(例如一種、兩種、三種、四種或更多種賦形劑)。適用的賦形劑包括(但不限於)醣及胺基酸。適用的醣包括例如單醣及雙醣,諸如(但不限於)蔗糖、甘露糖醇、山梨糖醇、乳糖、右旋糖、果糖、葡萄糖、麥芽糖及其組合。在一些實例中,緩衝液實質上不含除蔗糖外的醣(例如緩衝液實質上不含非蔗糖多元醇)。實質上不含非蔗糖多元醇意謂包括按緩衝液之重量計小於0.1%、小於0.01%、小於0.001%、小於0.0001%或0%之非蔗糖多元醇。 在一些實施例中,適用於本文所提供之設備及方法中之緩衝溶液包含黏度調節劑。適合的黏度調節劑包括(但不限於)醣,諸如蔗糖;及聚合物,諸如聚(乙烯醇) (PVA)、聚(乙烯基吡咯啶酮) (PVP)、聚(乙二醇) (PEG)或其寡聚物或共聚物。可使用任何分子量聚合物或寡聚物,其限制條件為聚合物或寡聚物可溶於緩衝溶液中。在一些實施例中,聚(乙烯吡咯啶酮)-40 (PVP-40)用於提高緩衝溶液之黏度。在一些實施例中,黏度調節劑以按緩衝溶液之總重量計高達0.1 wt%,高達0.2 wt%,高達0.3 wt%,高達0.4 wt%,高達0.5 wt%,高達0.6 wt%,高達0.7 wt%,高達0.8 wt%,高達0.9 wt%,高達1.0 wt%,高達2.0 wt%,高達3.0 wt%,高達4.0 wt%,或高達5.0 wt%存在。 在一些實施例中,適用於本文所提供之設備及方法之緩衝溶液包含至少一種清潔劑或界面活性劑。清潔劑及界面活性劑係指具有親水性部分及疏水性部分兩者之物質。適用的界面活性劑包括離子及非離子界面活性劑。在一些實例中,在緩衝溶液中視情況包括曲拉通X-35、曲拉通X-100及/或普洛尼克F-68作為非離子界面活性劑。一或多種界面活性劑可視情況以按緩衝液之重量計小於1重量%之量存在於緩衝液中。舉例而言,界面活性劑可以高達3重量%,高達2重量%,高達1重量%,高達0.75重量%,高達0.5重量%,高達0.25重量%,高達0.1重量%,或高達0.05重量%(例如0.25重量%或0.5重量%)之量存在於緩衝液中。 在一些實施例中,界面活性劑可為一或多種非離子界面活性劑,諸如脂肪醇、聚乙二醇烷基醚、聚丙二醇烷基醚、葡糖苷烷基醚、聚乙二醇辛基、丙三醇烷基酯、苯基醚(諸如曲拉通X-100)、聚氧化乙烯(20)油基醚(諸如Brig 98)、辛基苯酚乙氧基化物(諸如曲拉通X-305)、聚乙二醇烷基苯基醚、聚乙氧基化動物脂胺、N,N-雙[3-(D-葡萄糖醯胺)丙基]膽醯胺、聚氧化乙烯(20)鯨蠟基醚、二甲基癸基膦氧化物、分支鏈辛基苯氧基聚(乙烯氧基)乙醇、聚氧化乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物、第三辛基苯氧基聚乙氧基乙醇、聚氧乙烯(20)脫水山梨糖醇單油酸酯、烷基多醣苷、聚山梨醇酯(此類及Tween)或泊洛沙姆(諸如Synperonics、Pluronics或Kolliphor)。 在一些實施例中,界面活性劑可為陰離子界面活性劑,諸如2-丙烯醯胺基-2-甲基丙烷磺酸、月桂基硫酸銨、全氟壬酸銨、多庫酯、全氟丁烷磺酸、全氟壬酸、全氟辛烷磺酸、全氟辛酸、烷基硫酸鈉、十二烷基硫酸鈉、十二烷基苯磺酸鈉、月桂酸鈉、月桂醇醚硫酸鈉、月桂醯基肌胺酸鈉、肉豆蔻醇聚醚硫酸鈉、壬醯氧基苯磺酸鈉、鏈烷醇醚硫酸鈉或硬脂酸鈉。 在一些實施例中,界面活性劑可為陽離子界面活性劑,諸如(二十二)三甲銨氯化物、苯紮氯銨、苄索氯銨、溴化十六烷基三甲基銨、鯨蠟基三甲基銨氯化物、二甲基二(十八烷基)銨溴化物、二甲基二(十八烷基)銨氯化物、月桂基甲基葡糖醇聚醚-10羥丙基二甲基銨氯化物、奧替尼啶二氫氯化物、N-油基-1,3-丙二胺、硬酯基二甲基苄基氯化銨或氫氧化四甲銨。 在一些實施例中,界面活性劑可為兩性離子界面活性劑,諸如CHAPS清潔劑、椰油醯胺基丙基甜菜鹼、椰油醯胺丙基磺基甜菜鹼、十二烷基氧化二甲胺及十二烷基咪唑啉。此等界面活性劑實例為非限制性的,因為可使用其他非離子、陰離子、陽離子或兩性離子界面活性劑。 本文所提供之緩衝溶液可用於預處理設備之一或多個特定區域以使設備之一或多個所需位置中之緩衝化合物及緩衝液添加劑沈積。在一些實施例中,將緩衝溶液施加至設備之各別部分作為溶液或懸浮液,隨後移除(例如藉由蒸發)緩衝溶液之液體部分,留下包含一或多種殘餘緩衝化合物之殘餘緩衝液組分及存在於緩衝溶液中之任何殘餘緩衝液添加劑。殘餘緩衝液組分包括在移除液體介質(例如水)之後保留的任何緩衝液組分。隨著測試液體穿過設備,其與沈積的緩衝液組分及任何殘餘緩衝液添加劑接觸,且使其溶解,基本上復原緩衝溶液。術語「復原」並不暗示測試液體中形成的緩衝溶液與用於預處理設備之緩衝溶液具有相同濃度或溶液為相同的。復原緩衝溶液可具有與用於預處理設備之緩衝溶液不同的濃度。 舉例而言,第一緩衝溶液可施加至樣品墊以使所選緩衝化合物及緩衝液添加劑沈積,從而中和或抵消可能干擾測試結果的飲料組分。另一緩衝溶液可施加至層析膜以提高飲料或液體之黏度,例如減緩其遷移跨過層析膜。 本文所描述之緩衝溶液可包含二元鹽及水。在一些實施例中,緩衝溶液包含磷酸二氫鈉及磷酸氫二鈉。在一個特定實例中,緩衝溶液包含每公升5-20公克之量的磷酸二氫鈉及每公升540-80公克之量的磷酸氫二鈉。在一些實施例中,水為分子生物學試劑級水。緩衝溶液藉由將0.7-0.9公升水放置在容器中,添加指定量一元及二元鹽,且隨後添加水直至達到一公升來製備。按需要,使用NaOH或HCl將緩衝溶液之pH調節至所需pH,且使用微米過濾器過濾緩衝溶液。 在一些實施例中,一元鹽可以11.4、11.2、11.0、10.8、10.6、10.4、10.2、10.0、9.8、9.6、9.4或9.2公克×分批體積存在。在一些實施例中,二元鹽可以70、65、60、55、50或45公克×分批體積存在。若使用除磷酸二氫鈉及磷酸氫二鈉外之鹽,則此等量可如熟習此項技術者所理解進行調節。在一些實施例中,緩衝溶液具有7.3、7.4、7.5、7.6、7.7或7.8或此範圍內的任何數目之pH。磷酸二氫鈉/磷酸氫二鈉緩衝溶液適用於將試劑施加至設備。特定言之,在一些實施例中,磷酸二氫鈉/磷酸氫二鈉緩衝溶液可用作溶離緩衝液以使所存儲之抗體脫鹽。 本文所描述之緩衝溶液可包含硼酸鹽、硼酸及水。在一些實施例中,緩衝溶液可包含硼酸鹽、硼酸、BSA、水及視情況選用之氫氧化鈉或鹽酸。在一些實例中,緩衝溶液包含每公升緩衝溶液5-20公克之量的四硼酸鈉十水合物及每公升緩衝溶液0.5-2公克之量的硼酸。在一些實施例中,BSA以每公升緩衝溶液5-20公克之量存在。在一些實施例中,水為分子生物學試劑級水。在一些實施例中,緩衝溶液藉由將乾燥試劑量測至容器中且添加水直至達到最終體積來製備。在一些實施例中,按需要,使用NaOH或HCl將緩衝溶液之pH調節至所需pH。在一些實例中,使用0.2微米過濾器過濾緩衝溶液。 在一些實施例中,四硼酸鈉十水合物可以每公升緩衝溶液16、14、12、11.8、11.6、11.4、11.2、11.0、10、9或8公克或在此範圍內的任何數目存在。在實施例中,硼酸可以每公升緩衝溶液2.0、1.8、1.6、1.4、1.2、1.0、0.8、0.6或0.4公克或在此範圍內的任何數目存在。在一些實例中,BSA可以每公升緩衝溶液12、11、10、9或8公克存在。在一些實施例中,緩衝溶液具有9.5、9.4、9.3、9.2、9.1、9.0、8.9、8.8、8.7、8.6或8.5或在此範圍內之任何數目之pH。此硼酸鹽緩衝溶液適用於將試劑施加至設備。特定言之,在一些實施例中,此硼酸鹽緩衝溶液可用作抗體-粒子結合物之製備過程中的結合阻斷緩衝液。 本文所描述之緩衝溶液可包含硼酸鹽、硼酸及水。在一些實施例中,緩衝溶液可包含硼酸鹽、硼酸、BSA、水及視情況選用之氫氧化鈉或鹽酸。在一些實例中,緩衝溶液包含每公升緩衝溶液5-20公克之量的四硼酸鈉十水合物及每公升緩衝溶液0.5-20公克之量的硼酸。在一些實施例中,BSA以每公升緩衝溶液50-200公克之量添加。在一些實施例中,水為分子生物學試劑級水。在一些實施例中,緩衝溶液藉由將乾燥試劑量測至容器中且添加水直至達到最終體積來製備。在一些實施例中,按需要,使用NaOH或HCl將緩衝溶液之pH調節至所需pH。在一些實例中,使用0.2微米過濾器過濾緩衝溶液。 包含不同濃度BSA之其他硼酸鹽緩衝液亦可為適用的。在其他實施例中,四硼酸鈉十水合物可以每公升緩衝溶液16、14、12、11.8、11.6、11.4、11.2、11.0、10、9或8公克存在。在一些其他實施例中,硼酸可以每公升緩衝溶液2.0、1.8、1.6、1.4、1.2、1.0、0.8、0.6或0.4公克或在此範圍內之任何數目存在。在一些其他實例中,BSA可以每公升緩衝溶液120、110、100、90或80公克存在。在一些其他實施例中,緩衝溶液具有9.5、9.4、9.3、9.2、9.1、9.0、8.9、8.8、8.7、8.6或8.5或在此範圍內之任何數目之pH。此其他硼酸鹽緩衝溶液適用於將試劑施加至設備。特定言之,在一些實施例中,此緩衝溶液可用作將抗體-粒子結合物施加至設備過程中之結合物稀釋緩衝液。 本文所描述之緩衝溶液可包含二元鹽及水。在一些實施例中,適用的緩衝溶液包含磷酸二氫鈉及磷酸氫二鈉;醣、蛋白質及黏度調節劑中之一或多者;蔗糖、BSA及聚(乙烯吡咯啶酮)-40 (PVP-40)中之一或多者;及視情況氫氧化鈉或鹽酸。在一些實例中,緩衝溶液包含每公升緩衝溶液0.1-0.5公克之量的磷酸二氫鈉及每公升緩衝溶液0.5-3公克之量的磷酸氫二鈉。在一些實例中,緩衝溶液進一步包含每公升緩衝溶液0.5-2 g蔗糖、每公升緩衝溶液0.5-2 g BSA及每公升緩衝溶液1-5 g PVP-40。在一些實施例中,水為分子生物學試劑級水。在一些實施例中,藉由添加指定量之一元及二元鹽,添加蔗糖、BSA及PVP-40,且隨後添加水直至達到最終體積來製備緩衝溶液。在一些實施例中,按需要,使用NaOH或HCl將緩衝溶液之pH調節至所需pH。在一些實例中,使用0.2微米過濾器過濾緩衝溶液。 在一些實施例中,一元鹽可以每公升緩衝溶液0.3、0.2或0.1公克存在。在一些實施例中,二元鹽可以每公升緩衝溶液2、1.8、1.6、1.4、1.2、0.8、0.6或0.5公克存在。若使用除磷酸二氫鈉及磷酸氫二鈉外之鹽,則此等量可如熟習此項技術者所理解進行調節。蔗糖可以每公升緩衝溶液2、1或0.5公克存在。BSA可以每公升緩衝溶液2、1或0.5公克存在。PVP-40可以每公升緩衝溶液4、2或1公克存在。在一些實施例中,緩衝溶液具有7.3、7.4、7.5、7.6、7.7或7.8或此範圍內的任何數目之pH。此緩衝溶液適用於減緩液體在設備中流動。特定言之,在一些實施例中,此緩衝溶液可用作設備中之層析膜之預處理緩衝溶液。 本文所描述之緩衝溶液可包含古德氏緩衝鹽及水。在一些實施例中,緩衝溶液包含古德氏緩衝鹽、蛋白質、黏度調節劑、視情況一或多種界面活性劑及視情況一或多種額外酸或鹼。在一些實例中,緩衝溶液包含TRIS。在一些實施例中,緩衝溶液包含TRIS、BSA、PVP-40、視情況曲拉通X-100及普洛尼克F-68中之一或多者、視情況氫氧化鈉或鹽酸。在一些實例中,緩衝溶液包含每公升緩衝溶液50-200公克之量的TRIS。在一些實例中,緩衝溶液進一步包含每公升緩衝溶液20-40 g BSA及每公升緩衝溶液5-20 g PVP-40。在一些實施例中,緩衝溶液進一步包含每公升緩衝溶液1-5 g曲拉通X-100及每公升緩衝溶液2-10 g普洛尼克F-68。在一些實施例中,水為分子生物學試劑級水。在一些實施例中,藉由添加指定量之TRIS,添加BSA及PVP-40、曲拉通X-100及普洛尼克F-68,且隨後添加水直至達到最終體積來製備緩衝溶液。在一些實施例中,按需要,使用NaOH或HCl將緩衝溶液之pH調節至所需pH。在一些實例中,使用0.2微米過濾器過濾緩衝溶液。 在一些實施例中,TRIS可以每公升緩衝溶液約150、140、130、120、115、110、100、90或80公克存在。BSA可以每公升緩衝溶液40、35、32、30、28或25公克存在。PVP-40可以每公升緩衝溶液約20、15、12、10、8或55公克存在。曲拉通X-100可以每公升緩衝溶液約5、4、3、2.8、2.5、2.3或2公克存在。普洛尼克F-68可以每公升緩衝溶液約8、7、6、5.5、5、4.5、4、3.5、3或2公克存在。在一些實施例中,緩衝溶液具有7.6、7.8、8.0、8.2或8.4或此範圍內之任何數目之pH。此緩衝溶液適用於預處理設備之組分。特定言之,在一些實施例中,此緩衝溶液可用作設備中之結合物墊之預處理緩衝溶液。 本文所描述之緩衝溶液可包含羧酸鹽及水。在一些實例中,緩衝溶液包含碳酸鉀。視情況,緩衝溶液可包含一或多種界面活性劑。在一些實施例中,緩衝溶液包含羧酸鹽(諸如碳酸鉀)、水、視情況一或多種界面活性劑及視情況一或多種額外酸或鹼。在一些實施例中,界面活性劑為曲拉通X-305。在一些實例中,緩衝溶液包含每公升緩衝溶液50-200公克之量的碳酸鉀。在一些實例中,緩衝溶液進一步包含每公升緩衝溶液1-10 g曲拉通X-305。在一些實施例中,水為分子生物學試劑級水。在一些實施例中,藉由將指定量之碳酸鉀及曲拉通X-305添加至容器中,且隨後添加水直至達到最終體積來製備緩衝溶液。在一些實施例中,按需要,使用NaOH或HCl將緩衝溶液之pH調節至所需pH。在一些實例中,使用0.2微米過濾器過濾緩衝溶液。 在一些實施例中,碳酸鉀可以每公升緩衝溶液約150、140、138、136、130、120、110、100或80公克存在。曲拉通X-100可以每公升緩衝溶液約5、4、3.8、3.6、3.4、3、2.5或2公克存在。在一些實施例中,緩衝溶液具有7.4、7.2、7.0、6.8或4.4或此範圍內之任何數目之pH。此緩衝溶液適用於預處理設備之組分。特定言之,在一些實施例中,此緩衝溶液可用作設備中之樣品墊之預處理緩衝溶液。II. 偵測目標化合物之方法 本文描述偵測包括濫用物質及/或藥物之目標化合物的方法。 偵測根據本文所描述之實施例之分析物的非限制性方法之實例包括:提供包含以下各者之設備:樣品墊、結合物墊、包含層析膜之偵測層及芯體。設備更詳細地描述於章節III中。本發明之層析膜能夠接收測試液體且亦允許液體在一些實施例中藉由毛細作用遷移通過層析膜。例如藉由與液體直接接觸,使樣品墊曝露於液體,液體自樣品墊遷移至結合物墊(或自樣品區域遷移至結合物區域),且隨後液體前進通過結合物墊(或區域),且隨後通過層析膜。隨著液體前進通過設備,使結合物墊(其中安置抗分析物抗體-粒子結合物)曝露於液體,且抗分析物抗體-粒子結合物變得至少部分地溶解於液體中。 在一些實施例中,可代替抗體或除抗體以外使用適體。為了易於論述,在整個本申請案中使用術語抗體,但在整個說明書中應理解涵蓋抗體及適體兩者。 該方法進一步包括測定抗藥物抗體-粒子結合物與液體之間是否進行相互作用以偵測分析物之存在。判定步驟包含監測測試線(分析物-結合蛋白質所處位置處)以觀測測試線是否產生顏色,且視情況對照線是否產生顏色,如下文所描述。因此,判定步驟包含觀測可見指示以測定分析物之存在或不存在。 若液體含有匹配抗分析物抗體-粒子結合物之抗分析物抗體之分析物,則分析物將結合至結合物之抗分析物抗體部分,且因為結合物之抗分析物部分結合至分析物,抗分析物抗體部分無法不結合至分析物-結合蛋白質,且將無顏色沈積在測試線處。然而,若液體實質上不含匹配抗分析物抗體-粒子結合物之抗分析物抗體的分析物,則抗分析物抗體-粒子結合物將結合至分析物-結合蛋白質且顏色將沈積在測試線處。 視情況,層析膜在對照線處可包含抗物種抗體。不管分析物是否結合至抗分析物抗體-粒子結合物,當抗分析物抗體-粒子結合物藉由液體抽取至對照線時,對照線將產生顏色。 在一些實例中,使用競爭性(間接)免疫分析形式,指示分析物不存在之結果由兩條線(測試及對照線為可見的)組成,而指示分析物存在之結果由一條線(對照線為可見的)組成。在不採用對照線之其他實例中,指示分析物不存在之結果由一條線(測試線為可見的)組成,而指示分析物存在之結果不由線組成。顏色沈積區域不限於線且可包含符號或圖案。片語「測試線、測試位置、測試圖案、測試符號及測試區域」可互換使用。片語「對照線、對照位置、對照圖案、對照符號及對照區域」可互換使用。或者,可使用直接免疫分析形式,其中測試線之可見存在指示存在目標分析物。 在一些實施例中,方法包含觀測關於特定化合物是否存在之可見指示或信號機制。舉例而言,指示可包含出現著色斑點、圖案或區域,未出現任何著色區域;詞之印刷,諸如「安全」、「可以」、「是」或「否」檢查標記;表情符或符號,諸如「☺」;螢光、振動或聲音。在一些實例中,傳訊機制包含完成線、標識、圖案或符號。在一些實施例中,若已產生圖案以偵測多種分析物,則僅圖案之一些部分可改變顏色。舉例而言,詞「安全」可呈現為SΛFE,其中字母「A」之顏色在交叉條區域中未出現。 本文所描述之方法不依賴於抗分析物抗體-粒子結合物之顏色變化之觀測或量測結果以偵測液體中之分析物之存在。本文所描述之方法不依賴於其他技術,諸如電泳。方法依賴於觀測測試及/或對照線、區域或圖案或區域處的顏色沈積(或其缺失)。 以下章節中描述之設備中之任一者可用於本文所描述之方法中。III. 設備 本文所描述之某些實施例提供用於偵測液體中之目標物質、分析物或藥物之存在的設備,其中該設備包含樣品墊、結合物墊及偵測層及在一些情況下芯體。在一些實施例中,偵測層可在接收待測試特定目標物質之液體後偵測特定物質之存在。舉例而言,樣品墊可曝露於相關液體,且隨後可藉由使用者監測設備以測定偵測層與液體之間是否存在特定相互作用以指示目標物質之存在。在一些實施例中,特定物質為苯并二氮呯或含胺化合物。在其他實施例中,特定物質為蛋白質或糖。 在其他實例中,設備包含單一墊,其包含單獨區域,諸如樣品區域、結合物區域、偵測層(或層析膜區域)及芯體區域。在又其他實例中,設備包含單一墊,其包含單獨區域,諸如樣品區域、結合物區域及偵測層(或層析膜區域)。 在一些實施例中,設備可經配置以使回流減至最少、實質上減少或消除。此回流或潛在的組分自設備流動至測試液體可為非所需的,尤其對於可消耗性液體之測試而言。在一些實施例中,潛在回流/逆流可包含來自設備之測試液體及化學物質。為了解決回流之可能性,在一些實施例中,偵測層可進一步在頂層中之樣品孔口或開口處包含未經處理之墊以實質上消除回流。歸因於在將設備引入測試液體中後未經處理的墊之飽和度,未經處理的墊可使返回測試液體之材料之可能性流動減至最少、實質上降低或消除。在引入測試液體中後,飽和未經處理的墊可藉由使樣品墊流動至測試液體之梯度及原動力減至最小而充當回流限制。飽和的未經處理之墊之此限制可幫助確保來自設備之化學添加劑或緩衝液中基本上無一者與測試液體接觸。在一些實例中,可藉由使用未經處理之樣品墊及/或藉由設計設備包覆塑膠殼體中之設備組件(未經處理之墊及/或樣品墊除外)來預防回流。 在一些實施例中,設備為用於側流分析之側流裝置,其中待分析液體沿著流體路徑自樣品區域遷移跨過結合物區域,跨過層析膜且進入芯體中。目標物質或分析物(若存在)與抗分析物抗體反應且反應產生目標分析物是否存在於液體中之可見指示。在一些實例中,可代替抗體或除抗體以外使用適體。側流分析典型地具有沿著設備長度之流體路徑。在本文揭示之一些實例中,流體路徑之長度與設備之長度相同。在其他實例中,流體路徑之長度大於設備之長度,但術語「側流」在整個本說明書中使用,在一些情況下,流體路徑可在x-y平面中或z方向上變化以在具有受限制長度之設備中產生偵測結果。在此類實施例中,流體路徑之長度典型地大於設備之長度。 用於偵測液體中之目標物質之存在的設備包含樣品墊;結合物墊,其包括黏合劑-粒子結合物,諸如抗分析物抗體-粒子結合物;及層析膜,視情況包括分析物-結合蛋白質。在一些實施例中,樣品墊及結合物墊由包含樣品區域及結合物區域之單一材料形成;樣品區域及結合物區域並不重疊。在一些實施例中,抗分析物抗體-粒子結合物可藉由使包含抗分析物抗體-粒子結合物之組合物自結合物稀釋緩衝液沈積在層析膜上而包括於結合物墊中。分析物-結合蛋白質可藉由使包含分析物-結合蛋白質之組合物沈積於線或所需圖案中之層析膜上而包括於測試位置處的層析膜中。視情況,抗物種抗體可藉由使層析膜與包含抗物種抗體之組合物接觸而包括於對照位置處的層析膜中。 芯體充當流體儲存器以保持流體移動通過層析膜。在一些實施例中,為了使分析小型化,芯體由摺疊層(例如層在自身後向後摺疊)構成。在一些實施例中,芯體為U形或S形的。在一些情況下,經由多個平面及/或沿多個方向,根據芯體之形狀,芯體中之流體路徑可為曲形的。隨著流體自層析膜流動至芯體,其繼續沿著芯體內之流體路徑。在一些實例中,通過芯體之流體路徑不與流體通過層析膜之路徑對準,因為芯體可引導流體路徑至層析膜之側面及/或周圍或之下。 在一些實施例中,設備可經配置以在整體水平定向上引導液體流通過偵測層(或層析膜),例如實質上沿著自偵測層之第一末端至偵測層之第二末端的單一水平面。在其他實施例中,偵測層可經配置以在整體垂直定向上引導液體流通過偵測層,例如實質上通過多個水平平面,例如自偵測層底部至偵測層頂部,使得流體路徑之長度大於設備之長度。 在一些實例中,由於流體路徑之長度大於設備之長度,可在不阻礙設備之偵測能力的情況下縮短設備之長度。在一些情況下,流體路徑之長度比設備之長度大5-10%,比設備之長度大10-20%,比設備之長度大20-30%,比設備之長度大30-40%,比設備之長度大50-75%,比設備之長度大75-100%,或比設備之長度大100-200%。 設備可安置在物件之表面上。在一些實例中,該設備可安置在物件上、整合於物件中或併入在物件中。在其他實例中,設備可安置於下方或物件表面下方。適合的物件包括例如天然指甲、人工指甲、指甲油層、指甲貼紙、指甲貼花、杯子、飲料杯托、飲料攪拌器、牙籤、飲料裝飾物(例如傘)、鉛筆、筆、測試條帶、貼紙、貼花、指甲貼花、網狀指甲包層或任何其他適當的表面或結構。在其他實施例中,設備可直接安置在表面上,諸如在手指上。 在一些實施例中,設備包含約0.2微米(µm)至約5公釐(mm)範圍內之厚度。在一些實施例中,設備包含約20 µm至約5 mm範圍內之厚度。在一些實施例中,偵測層可具有約0.6 µm或小於0.6 µm,1 µm或小於1 µm,10 µm或小於10 µm,25 µm或小於25 µm,50 µm或小於50 µm,100 µm或小於100 µm,1 mm或小於1 mm,2 mm或小於2 mm,3 mm或小於3 mm,4 mm或小於4 mm,或5 mm或小於5 mm之厚度。 在一些實施例中,設備包含約0.5 mm至約15 mm範圍內之長度。在一些實施例中,設備包含約1 mm至約10 mm,或約3至約8 mm範圍內之長度。在一些實施例中,偵測層可具有約0.4 mm或小於0.4 mm,0.5或小於0.5,1 mm或小於1 mm,2 mm或小於2 mm,3 mm或小於3 mm,4 mm或小於4 mm,5 mm或小於5 mm,6 mm或小於6 mm,7 mm或小於7 mm,8 mm或小於8 mm,9 mm或小於9 mm,10 mm或小於10 mm,12 mm或小於12 mm,或15 mm或小於15 mm之長度。 在一些實施例中,設備包含約0.5 mm至約5 mm範圍內之寬度。在一些實施例中,設備包含約1 mm至約10 mm,或約3至約8 mm範圍內之寬度。在一些實施例中,偵測層可具有約0.4 mm或小於0.4 mm,0.5或小於0.5,1 mm或小於1 mm,2 mm或小於2 mm,3 mm或小於3 mm,4 mm或小於4 mm,5 mm或小於5 mm,6 mm或小於6 mm,7 mm或小於7 mm,8 mm或小於8 mm,9 mm或小於9 mm,或10 mm或小於10 mm之寬度。 在一些實施例中,設備可經層壓以提供外部環境保護,而藉由在使用期間准許透氣性不損害測試完整性。 現在轉而參看圖,圖1為根據本文所描述之一個實施例之設備100的分解截面圖。設備100包含樣品墊110、結合物墊120、偵測層130及吸收墊或芯體160。樣品墊110靠近結合物墊120之第一部分122以使得在使用時液體自樣品墊110吸收至結合物墊120中。結合物墊之第二部分124靠近層析膜130之近端132處的層析膜130以使得在使用時液體吸收至近端132處的層析膜中且朝向層析膜130之遠端134移動通過層析膜。在近端與末端之間,層析膜包括其中沈積分析物結合蛋白質之至少一個測試線140及其中沈積抗物種抗體之至少一個對照線150。設備亦包含靠近層析膜130之吸收墊或芯體160以使得在使用時液體自層析膜130吸收至芯體中。在一些實施例中,可存在多個測試線以測試多種目標物質。視情況,設備可具有透明覆蓋層170。 圖2為根據本文所描述之一個實施例之設備200的截面圖。設備200包含合併的樣品墊-結合物墊250,其具有並不重疊之樣品區域252及結合物區域254。設備200進一步包含偵測層230及芯體260。樣品結合物墊250之結合物區域254靠近偵測層230之第一部分232以使得在使用時液體吸收至樣品結合物墊250中,遷移至層析膜230之近端232,且朝向層析膜230之遠端234流動。設備亦包含靠近層析膜230之遠端234之吸收墊或芯體260以使得在使用時測試液體自層析膜230吸收至芯體中。視情況,設備可具有透明覆蓋層270。 在一些實施例中,用樣品墊緩衝溶液預處理樣品墊。預處理涉及使樣品墊與樣品墊緩衝溶液接觸,且隨後乾燥樣品墊。經乾燥的樣品墊包含殘餘緩衝液組合物。在使用時,當測試液體接觸殘餘緩衝液組合物時,緩衝液在測試液體中復原。在一些實施例中,樣品墊可用主要由生物相容性材料組成的樣品墊緩衝溶液預處理以使得樣品墊緩衝液成分與飲料之任何潛在相互作用將不會將不適合攝取之材料引入飲料中。在一些實施例中,樣品墊緩衝液幫助中和酸性飲料,且亦可降低其他組分之影響,諸如高糖含量對測試結果之影響。出於本申請案之目的,「樣品墊緩衝溶液」及「樣品區域緩衝溶液」可互換使用。 在一些實施例中,樣品墊緩衝溶液包含碳酸鉀及/或碳酸鈣。在一些實施例中,樣品墊緩衝溶液包含弱酸之鈣鹽。 在一些實施例中,樣品墊緩衝溶液包含碳酸鉀。在一些實施例中,碳酸鉀存在於濃度為200至3000毫莫耳(mM),500至2000 mM,750至1500 mM,0.8至1.2莫耳(M),0.9至1.1 M,或約1 M之樣品墊緩衝溶液中。在一些實施例中,碳酸鉀存在於濃度為至少800 mM、至少900 mM、至少1.0 M、至少1.1 M、至少1.2 M或至少1.3 M之樣品墊緩衝溶液中。視情況,在一些實施例中,樣品墊緩衝溶液可包含氫氧化物、硼酸鹽及/或碳酸氫鹽。 在一些實例中,結合物墊可用包含穩定劑及/或屏蔽劑之結合物墊緩衝溶液預處理。穩定劑之實例包括醣,諸如蔗糖、果糖及海藻糖。屏蔽劑之實例包括明膠、酪蛋白及BSA。 在一些實例中,結合物墊緩衝溶液包含緩衝鹽。參(羥基甲基)胺基甲烷(Tris)被認為是在中和方面尤其有效,且因此緩解酸性飲料對測試結果之負面影響。在一些實施例中,結合物墊緩衝溶液具有7.5至8.5,7.75至8.25,7.9至8.1,或約7.8、約8.0或約8.2之pH。在一些實例中,可不以足夠高以為結合物墊提供所需緩衝能力之濃度製備其他緩衝溶液,諸如硼酸鈉緩衝溶液。歸因於浸漬有結合物墊緩衝溶液(經乾燥)之極有限區域(諸如4×4 mm結合物墊),通常需要高濃度之緩衝溶液,且隨後復原為流動通過結合物墊之樣品液體。在一些實施例中,結合物墊緩衝溶液包含濃度為0.4至0.6莫耳(M),0.423至0.575 M,0.45至0.55 M之Tris。在一些實施例中,結合物墊緩衝溶液包含濃度為約0.4 M、約0.5 M或約0.6 M之Tris。 在一些實施例中,結合物墊緩衝溶液進一步包含蛋白質、聚(乙烯吡咯啶酮)及界面活性劑中之一或多者。界面活性劑之一些非限制性實例為氣霧劑OT、苯紮氯銨、BRIJ35、BRIJ 52、BRIJ98、CHEMAL-LA-9、十六醇聚氧乙烯醚EL、IGEPAL CA210、Merpol A、普洛尼克F68、普洛尼克F127、普洛尼克L64、Silwet L7600、界面活性劑10G、Synperonic F108、2,4,7,9,-四甲基-5-癸炔-4,7-二醇乙氧基化物、Tergitol、Tetronic 90R4、曲拉通X-45、曲拉通X 100、曲拉通X-305、吐溫(Tween) -20、吐溫-60及吐溫-80。在一些實施例中,蛋白質為BSA且聚(乙烯吡咯啶酮)為PVP-40。在一些實施例中,界面活性劑包含曲拉通X-100、曲拉通X-305及/或普洛尼克F68。在一些實例中,可見BRIJ-98減少由飲料引起之背景著色。不意欲受理論束縛,BRIJ-98使得多種紅色葡萄酒組分沈降。在一些實施例中,殘餘緩衝液組合物可實質上減少或實質上移除測試液體之著色組分之外觀。「實質上減少」意謂測試液體之顏色不會干擾測試結果之指示。 在一些實施例中,當藉由測試液體復原時,結合物墊緩衝液組合物與抗分析物抗體-粒子結合物,例如結合物墊緩衝液組合物相容,不使抗分析物抗體-粒子結合物變性。不意欲受理論束縛,此可歸因於結合物墊緩衝液之高pH及諸如飲料之測試液體中之所得酸中和。 結合物不結合至結合物墊;相反,其黏著或固定化,以使得結合物釋放至測試液體中且與測試液體一起流動跨過層析膜。在本發明之一些實施例中,結合物墊及樣品墊由單一片材料,諸如硝化纖維素或玻璃光纖或聚酯纖維之編織網狀物形成。 在一些實施例中,抗分析物抗體-粒子結合物可由可商購單株抗體及金或染料奈米粒子材料製備。在一些實施例中,可商購單株抗體可使用旋轉管柱脫鹽以用抗體脫鹽緩衝液替換抗體存儲緩衝液。在一些實施例中,抗體脫鹽緩衝液包含磷酸鈉緩衝液。磷酸鈉抗體脫鹽緩衝液可具有5 mM、10 mM、25 mM、50 mM、75 mM、100 mM、125 mM或150 mM,或50-150 mM,或75-125 mM,或90-110 mM之濃度。在一些實施例中,抗體脫鹽緩衝液可具有弱鹼性pH,諸如7.2、7.3、7.4、7.5、7.6、7.7、7.8、7.9、8.0、8.1或8.2。當抗體已經脫鹽且溶解於抗體脫鹽緩衝液中時,其可與金或染料奈米粒子材料結合。在一些實施例中,金或染料奈米粒子材料可溶解或懸浮於水中,其中藉由添加HCl或NaOH,將pH調節至弱鹼性,諸如pH 7.05、7.1、7.15、7.2或7.25。 在一些實施例中,在使抗體溶解於抗體脫鹽緩衝液中且使金或染料奈米粒子溶解或懸浮於弱鹼性水中之後,混合兩個組分,且可將結合阻斷緩衝液添加至所得混合物中。在一些實施例中,結合阻斷緩衝液包含四硼酸鈉、硼酸及BSA。在一些實施例中,阻斷緩衝液可具有10 mM、25 mM、50 mM、75 mM或100 mM,或10-110 mM,或25-75 mM,或45-55 mM之四硼酸鈉濃度。在一些實施例中,結合阻斷緩衝液可具有鹼性pH,諸如8.2、8.4、8.6、8.8、9.0、9.2、9.4或9.6。所得抗分析物抗體-粒子結合物可藉由離心分離為丸粒。 在一些實施例中,抗分析物抗體-粒子結合物自可用於復原抗分析物抗體-粒子結合物丸粒之結合物稀釋緩衝液施加至結合物墊。在一些實施例中,在使抗分析物抗體-粒子結合物沈積於結合物墊上之前,使抗分析物抗體-粒子結合物溶解於結合物稀釋緩衝液中。 在一些實施例中,結合物稀釋緩衝液包含弱酸之鹽、蛋白質及視情況賦形劑,諸如醣。在一些實施例中,結合物稀釋緩衝液包含硼酸鹽,諸如四硼酸鈉、硼酸、BSA及視情況蔗糖及/或海藻糖。在一些實例中,結合物稀釋緩衝液包含40-60 mM、45-55 mM或約50 mM硼酸鹽;1-3重量% (wt.%) BSA (例如1 wt.%、2 wt%或3 wt.%);3-7 wt.%海藻糖(例如4 wt.%、5 wt%或6 wt.%);及15-25 wt.%蔗糖(例如18 wt.%、20 wt%或22 wt.%)。在一些實施例中,結合物稀釋緩衝液具有8.5至9.5 (例如8.7、9.0或9.3)之pH。在一些實施例中,滴定結合物稀釋緩衝液之pH。 在一些實例中,結合物稀釋緩衝液包含40-60 mM、45-55 mM或約50 mM硼酸鹽;1-3重量% (wt.%) BSA (例如1 wt.%、2 wt%或3 wt.%);且蔗糖及/或海藻糖在結合物已溶解於結合物稀釋緩衝液中之後添加。在一些實施例中,蔗糖添加量為10%、20%或30%,其中20%例如根據式(結合物稀釋緩衝液中之結合物體積)(20 g蔗糖)/(100 mL)確定。類似地,在一些實施例中,海藻糖添加量為3%、5%或7%,其中5%例如根據式(結合物稀釋緩衝液中之結合物體積)(5 g海藻糖)/(100 mL)確定。 在一些實施例中,本文所描述之緩衝溶液或緩衝液添加劑中之任一者具有至少10 cP之黏度。在其他實施例中,緩衝液或緩衝液添加劑可包含至少0.5 cP、至少1 cP、至少5 cP、至少20 cP、至少30 cP、至少60 cP、至少80 cP、至少100 cP、至少1000 cP、至少20,000 cP或至少50,000 cP之黏度。在其他實施例中,緩衝液或緩衝液添加劑可包含0.5-2 cP之間,2-5 cP之間,5-20 cP之間,20-30 cP之間,30-60 cP之間,1-100 cP之間,2-80 cP之間,5-50 cP之間,10-1000 cP之間,10-20,000 cP之間或10-50,000 cP之間的黏度。在一些實施例中,層析膜可用包含10-20 mM或12-18 mM或約15 mM磷酸鈉;0.5-1.5 wt.%或0.7至1.3 wt.%,或約1 wt.%蔗糖;0.05-0.15 wt.%或0.7至1.2 wt.%或約1 wt.%BSA;及0.1-0.3 wt.%或約0.2 wt.% PVP-40之層析膜緩衝溶液預處理。在一些實施例中,層析膜緩衝液具有7.1至7.5之pH。在一些實施例中,層析膜緩衝液可具有7.1、7.2、7.3、7.4或7.5,或7.1-7.5,或7.2至7.4,或7.25-7.35之pH。 本文所描述之某些實施例之偵測層可為使用者提供關於特定化合物是否存在之可見指示或信號機制。舉例而言,可見指示可包含著色斑點、圖案或區域出現或其缺失;詞之印刷,諸如「安全」、「可以」、「是」或「否」;檢查標記;表情符或符號,諸如「☺」;螢光、振動或聲音。 在一些實施例中,偵測層可藉由電化學偵測為使用者提供指示。在一些實例中,偵測層可提供裝置輔助的定量,例如藉助於智慧型電話應用或其他裝置。在一些實施例中,偵測層可提供液體中之分析物之半定量或定量指示。在一些實例中,存在於液體中之分析物之指示包含線之圖案。舉例而言,在一個實施例中,6條測試線可置放於偵測層上。當使用直接免疫分析形式時,若分析物以一定數量存在,則一條測試線可產生顏色。若分析物以一定更大數量存在,則額外測試線可產生顏色。若分析物以甚至更大量存在,則所有測試線可產生顏色。 或者,當使用間接免疫分析形式時,若分析物以一定數量存在,則一條測試線可產生顏色。若分析物以一定更小數量存在,則額外測試線可產生顏色。若分析物以甚至更小量存在,則所有測試線可產生顏色。在一些實例中,在設備組裝期間,在無前邊緣作用之情況下,測試線在液體流動跨過層析膜之方向上以低至高濃度梯度自緩衝溶液沈積以形成2 mm測試線。「前邊緣作用」係指在測試或對照線處形成顏色梯度,其中最暗區域沿著線之前邊緣且隨著其接近遠端邊緣,線之顏色逐漸變淺。測試/對照線之「前邊緣」為當其流動通過膜時首先接觸流體之線之側面。 在一些實施例中,偵測層包含約50微米至約1000微米範圍內之厚度。在一些實施例中,偵測層包含約200微米至約400微米範圍內之厚度。在一些實施例中,偵測層可具有約100微米或小於100微米,200微米或小於200微米,400微米或小於400微米,600微米或小於600微米,800微米或小於800微米,或1000微米或小於1000微米之厚度。 在一些實施例中,偵測層可經配置以偵測多種目標物質之存在。在一些實施例中,偵測層可物理上分開的以准許在推斷另一分析物偵測之情況下偵測多種分析物。作為另一實例,偵測層可與某些組分多路複用以測試單偵測層上的多種分析物。在一些實施例中,設備可包括彼此相鄰安置之多個離散物理部分以構成單一偵測層。舉例而言,多種基質可與經配置以測試液體中之不同化合物之存在的各基質並排安置。 在一些實施例中,包含偵測層之設備亦可包括至少一個額外層。在一些實施例中,設備可包括頂部層壓層、底部層壓層及可卸除層中之至少一者。在一些實施例中,設備可包括本文所描述之層之任何組合。抗分析物抗體 - 粒子結合物 在一些實施例中,本文所描述之抗分析物抗體-粒子結合物包括抗分析物抗體、著色奈米粒子及視情況一或多種額外組分。 抗體為主要藉由供免疫系統使用以鑑別且結合諸如細菌及病毒之病原體的漿細胞產生的較大Y形蛋白質。適體為結合至特定目標分子之寡核苷酸或肽分子。抗分析物抗體或抗分析物適體為形成以結合諸如藥物分子之特定分析物的抗體或適體。如一般熟習此項技術者所理解,免疫分析技術採用此「鎖及鑰(lock and key)」途徑,使用特定抗體或適體以與目標物質結合。 增強可視性及/或偵測之粒子常常連接至抗分析物抗體以增加抗分析物抗體之可視性及/或偵測。適用的粒子可包含著色化合物或螢光化合物。在一些實施例中,粒子包含螢光素、孟加拉玫瑰紅、其衍生物及鹽或其組合或類似螢光團。在其他實施例中,奈米粒子用作粒子。奈米粒子可為任何著色奈米粒子,諸如金及/或染料輸注之聚合物微珠。 抗分析物抗體藉由連接子接合或結合至粒子。連接子可為與本發明之目標一致的任何連接子。連接子之非限制性實例為(N-(κ-馬來醯亞胺基十一烷醯基氧基)磺基丁二醯亞胺酯) (磺酸基-KMUS)、(琥珀醯亞胺基-4-(N-馬來醯亞胺基甲基)環己烷-1-羧基-(6-醯胺基己酸酯)) (LC-SMCC)、N-(e-馬來醯亞胺基辛醯氧基)-N-羥基琥珀醯亞胺酯(KMU)、琥珀醯亞胺基-4-(對馬來醯亞胺基苯基)丁酸酯(SMBP)、(琥珀醯亞胺基-6-((b-順丁烯二醯亞胺基丙醯胺基)己酸酯) (SMPH)、4-(N-馬來醯亞胺基甲基)環己甲酸N-羥基琥珀醯亞胺酯(SMCC)、4-(N-馬來醯亞胺基甲基)環己烷-1-羧酸3-磺酸基-N-羥基琥珀醯亞胺酯鈉鹽(磺酸基-SMCC)、(N-琥珀醯亞胺基(4-碘乙醯基)胺基苯甲酸酯) (SIAB)、N-(γ-順丁烯二醯亞胺基丁醯氧基)磺基丁二醯亞胺鈉鹽(磺酸基-GMBS)、4-順丁烯二醯亞胺基丁酸N -羥基琥珀醯亞胺酯(GMBS)、(琥珀醯亞胺基3-(溴乙醯胺基)丙酸酯) (SBAP)、N-(2-羧基乙基)順丁烯二醯亞胺(BMPA)、N-α-馬來醯亞胺基乙醯-氧基丁二醯亞胺酯(AMAS)、N-琥珀醯亞胺基3-(硫乙醯基)丙酸酯(SATP)、3-馬來醯亞胺苯甲酸N-羥基琥珀醯亞胺酯(MBS)、(間順丁烯二醯亞胺基苯甲醯基-N-羥基磺基丁二醯亞胺酯) (磺酸基-MBS)、N-ε-順丁烯二醯亞胺基己酸(EMCA)、N-(ε-順丁烯二醯亞胺基己酸)丁二醯亞胺、N-琥珀醯亞胺基6-馬來醯亞胺基己酸酯(EMCS)、琥珀醯亞胺基-(4-乙烯基碸)苯甲酸酯(SVSB)、N-琥珀醯亞胺基3-馬來醯亞胺基丙酸酯(BMPS)或N-乙基-N′-(3-二甲胺基丙基)碳化二亞胺鹽酸鹽(EDC)。在一些實施例中,金奈米粒子用諸如6-巰基己酸、8-巰基辛酸、12-巰基月桂酸或其他巰基羧酸之化合物官能化。諸如EDC之試劑可用於將抗體耦接至此等試劑。聚合物微珠可用類似羧酸或胺官能化。 抗分析物抗體-粒子結合物可以約0.05 wt.%至約10 wt.% (例如約0.5 wt.%至約8 wt.%或約0.8 wt.%至約5 wt.%)之量存在於抗分析物抗體-粒子結合物組合物中。舉例而言,抗分析物抗體-粒子結合物可以約10 wt.%或小於10 wt.%,約9.5 wt.%或小於9.5 wt.%,約9 wt.%或小於9 wt.%,約8.5 wt.%或小於8.5 wt.%,約8 wt.%或小於8 wt.%,約7.5 wt.%或小於7.5 wt.%,約7 wt.%或小於7 wt.%,約6.5 wt.%或小於6.5 wt.%,約6 wt.%或小於6 wt.%,約5.5 wt.%或小於5.5 wt.%,約5 wt.%或小於5 wt.%,約4.5 wt.%或小於4.5 wt.%,約4 wt.%,約3.5 wt.%或小於3.5 wt.%,約3 wt.%或小於3 wt.%,約2.5 wt.%或小於2.5 wt.%,約2 wt.%或小於2 wt.%,約1.5 wt.%或小於1.5 wt.%,約1 wt.%或小於1 wt.%,或約0.5 wt.%或小於0.5 wt.%之量存在於抗分析物抗體-粒子結合物組合物中。在一些實施例中,抗分析物抗體-粒子結合物可以約0.05 wt.%、約0.1 wt.%、約0.15 wt.%、約0.2 wt.%、約0.25 wt.%、約0.3 wt.%、約0.35 wt.%、約0.4 wt.%、約0.45 wt.%、約0.5 wt.%、約0.55 wt.%、約0.6 wt.%、約0.65 wt.%、約0.7 wt.%、約0.75 wt.%、約0.8 wt.%、約0.85 wt.%、約0.9 wt.%、約0.95 wt.%、約1 wt.%、約1.5 wt.%、約2 wt.%、約2.5 wt.%、約3 wt.%、約3.5 wt.%、約4 wt.%、約4.5 wt.%或約5 wt.%之量存在於抗分析物抗體-粒子結合物組合物中。 緩衝劑可存在於結合物稀釋緩衝液中以使得總標記組合物之pH為約5至約9 (例如約6至約8或約6.5至約7.5)。舉例而言,可將緩衝劑添加至組合物中以提供約5、約5.5、約6、約6.5、約7、約7.5或約8之pH。 組合物可進一步包括溶劑載體。適合的溶劑載體包括水(例如去離子水)。視情況,溶劑載體可進一步包括一或多種有機溶劑,諸如醇、二醇及其他液體。分析物 - 結合蛋白質 分析物-結合蛋白質包含待偵測結合或連接至蛋白質之分析物。適合的蛋白質之實例為BSA、CRM197、KLH、甲狀球蛋白、破傷風類毒素、兔血清白蛋白、肌肉球蛋白、結核菌素、聚賴胺酸及/或聚麩胺酸。抗物種抗體 抗物種抗體能夠與抗分析物抗體-粒子結合物結合。因為抗物種抗體將與抗分析物抗體-粒子結合物結合,無論分析物是否存在於液體中,當液體含有抗分析物抗體-粒子結合物時,抗物種抗體沈積所處的位置將產生顏色。層析膜 如上文所描述,偵測層包含層析膜。在一些實施例中,層析膜包含纖維素或纖維素衍生物(包括表面官能化纖維素、玻璃纖維及/或其他材料),可基本上由前述者組成或可由前述者形成。在一些實施例中,層析膜包含多孔層析介質。典型的孔徑可包含約10至14 µm之直徑,但亦可使用其他尺寸孔隙。層析介質可為疏水性或親水性的,且可包含無機粉末,諸如氧化矽、硫酸鎂及氧化鋁;天然聚合材料,尤其纖維素材料及衍生自纖維素之材料,諸如含有纖維之紙,例如濾紙或層析紙;合成或經修飾之天然存在之聚合物,諸如硝化纖維素、乙酸纖維素;聚(氯乙烯)、聚丙烯醯胺、瓊脂糖或聚丙烯酸酯;單獨或與其他材料組合。亦可使用陶瓷。視情況,層析介質可結合至背襯層。 視情況,層析膜可包含一或多種聚合物。視情況,一或多種聚合物包括多醣。適用於層析膜中之適合的多醣包括瓊脂、瓊脂糖、海藻酸鹽、角叉菜膠、纖維素、殼聚糖、葡聚糖、魔芋及其混合物。例示性瓊脂糖聚合物包括例如羧甲基瓊脂糖、二乙胺基乙基瓊脂糖及類似衍生物。視情況,適用於層析膜中之瓊脂糖聚合物可購自Pharmacia Fine Chemicals, Inc. (Piscataway, N.J.)。例示性纖維素聚合物包括例如纖維素酯(例如乙酸纖維素、乙酸丁酸纖維素、乙酸丙酸纖維素)、羧甲基纖維素、二乙胺基乙基(DEAE)纖維素、硝化纖維素、磷酸纖維素、四級銨取代之纖維素及硫氧基乙基纖維素。視情況,適用於基質中之纖維素聚合物可購自Whatman Co. (Whatman Paper Co., Ltd., Maidstone, England)或BioRad Corp. (Richmond, California)。在一些實施例中,層析膜包括玻璃纖維。玻璃及聚酯纖維可獲自GE Healthcare之融合物5 (GE Healthcare, Little Chalfont, UK)。 層析膜可進一步包括吸收劑。舉例而言,吸收劑可包括層析紙、濾紙及典型地用於層析,諸如用於紙層析或薄層層析(TLC)之其他材料。層析紙及濾紙可為定性或定量濾紙,諸如可購自Whatman Co. (Whatman Paper Co., Ltd., Maidstone, England)之層析紙及濾紙。 視情況,吸收劑包含矽膠、氧化鋁、高效能薄層層析(HPTLC)矽膠、聚矽酸、氧化鋁、纖維素、聚醯胺、反相矽膠C2 (二甲基鍵結的)、反相矽膠C2 (乙基鍵結的)、反相矽膠C8 (辛基鍵結的)、反相矽膠C18 (十八烷基鍵結的)、乙醯化纖維素、經胺基修飾之矽膠、經氰基修飾之矽膠、浸漬有烴之矽藻土、陰離子及陽離子陰離子交換樹脂、二乙胺基乙基纖維素及所列出的吸附劑之混合物。吸收劑可固定在惰性表面上。 視情況,層析膜可用乾燥劑預處理以將乾燥劑整合至層析膜中。乾燥劑可為如熟習此項技術者已知的任何乾燥劑,包括(但不限於)分子篩、氧化矽凝膠、黏土、合成聚合物及澱粉。舉例而言,適合的除濕劑包括氧化鋁、鋁礬土、無水硫酸鈣、水吸收黏土、矽膠、沸石及其混合物。 視情況,層析膜可用緩衝劑,諸如上文所描述之緩衝劑預處理。基質可用緩衝劑預處理以使得基質在約3至約8 (例如約4至約6或約4.5至約5.5)範圍內之pH下緩衝。舉例而言,可將緩衝劑添加至組合物中以提供約3、約3.5、約4、約4.5、約5、約5.5、約6、約6.5、約7、約7.5或約8之pH。 層析膜可安置在物件之表面上。在一些實例中,基質可安置於物件內。在其他實例中,層析膜可安置於物件表面下方。適合的物件包括例如指甲、人工指甲、指甲油層、指甲貼紙、指甲貼花、杯子、杯托條、飲料攪拌器、牙籤、飲料裝飾物(例如傘)、鉛筆、筆、測試條帶、貼紙、貼花、指甲貼花、網狀指甲包層或任何其他適當的表面。其他適當的表面包括可能容易且謹慎地與待檢液體接觸之物件,為液體消費者提供提高的個人安全程度。 本文所描述之設備亦可在層析膜上包括覆蓋層。覆蓋層可為不透光覆蓋層、著色覆蓋層、透明覆蓋層或半透明的覆蓋層。視情況,覆蓋層可包括一或多個穿孔。此等穿孔允許在使用設備期間氣態材料之逸出。在覆蓋層為不透光、著色或半透明的實例中,覆蓋層可視情況在覆蓋層上包括一或多個透明窗。覆蓋層可使用熟習此項技術者已知的任何適合的結合材料(包括例如黏著劑)連接至設備。適合的黏著劑包括(但不限於)丙烯酸及甲基丙烯酸酯均聚物或共聚物、基於丁基橡膠之系統、聚矽氧、胺基甲酸酯、乙烯酯及醯胺、烯烴共聚物材料、二-烷基反丁烯二酸酯、天然或合成橡膠及其類似物,包括熱熔黏著劑。 在一些實施例中,包含偵測層之設備亦可包括至少一個額外層。在一些實施例中,設備可包括覆蓋層、支撐層及可卸除層中之至少一者。在一些實施例中,設備可包括本文所描述之層之任何組合。 在一些實施例中,偵測層包含側流分析。在一些實施例中,側流分析可依賴於抗體-分析物相互作用以測定酒精或非酒精飲料中藥物之存在。在一些實施例中,側流分析可包括結合至可攜載通過上面固定有分析物結合蛋白質(測試線)及抗物種抗體(對照線)之層析膜的著色粒子之抗分析物抗體。 在一些實施例中,側流分析可具有延長的存儲壽命。在一些實施例中,包含側流分析之偵測層(及設備)可經層壓以在不損害測試完整性之情況下在使用期間藉由准許透氣性提供保護而不受外部環境影響。 在一些實施例中,第一指示符傳送詞、符號或特徵中之至少一者的一部分之信號,且第二指示符傳送詞、符號或特徵中之至少一者的一部分之信號。在一些實施例中,第一指示符之信號僅向使用者傳送目標物質存在之信號且其中第一指示符及第二指示符兩者之信號均向使用者傳送目標物質不存在之信號。 非限制性實施例包括: 1. 一種用於偵測液體中之分析物之存在的設備,該設備包含能夠接收飲料樣品且分析該飲料中是否存在該分析物之側流分析。 2. 如段落1之實施例,其中該設備包含:樣品區域、結合物區域及偵測區域,其中該樣品區域、結合物區域或偵測區域中之至少一者包含至少一種殘餘緩衝液組合物。 3. 如段落2之實施例,其中該結合物區域包含至少一種抗分析物抗體-粒子結合物或抗分析物適體-粒子結合物;其中該偵測區域包含層析膜及至少一種分析物-結合蛋白質,且其中該樣品區域經配置以用於接收液體。 4. 如段落2或3之實施例,其中該偵測區域進一步包含至少一種抗物種抗體或抗物種適體。 5. 如段落2-4中任一項之實施例,其中該樣品區域、結合物區域及該偵測區域位於單一墊上。 6. 如段落2-4中任一項之實施例,其中該樣品區域、結合物區域及該偵測區域中之至少一者位於獨立的墊上。 7. 如段落3-6中任一項之實施例,其中該層析膜包含纖維素、硝化纖維素、聚酯纖維及/或玻璃纖維中之一或多者。 8. 如段落1-7中任一項之實施例,其進一步包含限定圖案之覆蓋層,其中該覆蓋層安置於該偵測區域上方。 9. 如段落2-8中任一項之實施例,其中該偵測區域安置於天然指甲、人工指甲、指甲油層、指甲貼紙、指甲貼花、貼紙、杯子、飲料杯托、飲料攪拌器、牙籤、飲料裝飾物、鉛筆或筆之上或之內或之下。 10. 如段落2-9中任一項之實施例,其中該殘餘緩衝液組合物包含至少一種界面活性劑。 11. 如段落10之實施例,其中該界面活性劑包含普洛尼克F-68、脂肪醇、聚乙二醇烷基醚、聚丙二醇烷基醚、葡糖苷烷基醚、聚乙二醇辛基、丙三醇烷基酯、苯基醚、聚氧化乙烯(20)油基醚、辛基苯酚乙氧基化物、聚乙二醇烷基苯基醚、聚乙氧基化動物脂胺、N , N - 雙[3-(D-葡萄糖醯胺)丙基]膽醯胺、聚氧化乙烯(20)鯨蠟基醚、二甲基癸基膦氧化物、分支鏈辛基苯氧基聚(乙烯氧基)乙醇、聚氧化乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物、第三辛基苯氧基聚乙氧基乙醇、聚氧乙烯(20)脫水山梨糖醇單油酸酯或其組合。 12. 如段落2-11中任一項之實施例,其中該殘餘緩衝液組合物包含至少一種緩衝鹽。 13. 如段落12之實施例,其中該緩衝鹽包含磷酸單鈉、磷酸二鈉、四硼酸鈉、參(羥基甲基)甲基胺基丙烷磺酸(TAPS)、N-環己基-2-胺基乙烷磺酸(CHES)、N-參(羥基甲基)甲基-4-胺基正丁烷磺酸(TABS)、bis-tris甲烷(Bis TRIS)、參(羥基甲基)胺基甲烷(TRIS)、2-[[1,3-二羥基-2-(羥甲基)丙-2-基]胺基]乙磺酸(TES)、2-(N-嗎啉基)乙磺酸(MES)、N-(胺甲醯基甲基)亞胺二乙酸(ADA)、N-(2-乙醯胺基)-2-胺基乙烷磺酸(ACES)、bis tris丙烷、哌嗪-N,N′-雙(2-乙磺酸) (PIPES)、N-(2-乙醯胺基)-2-胺基乙烷磺酸(ACES)、3-嗎啉基-2-羥基丙磺酸(MOPSO)、乙醇胺氯化物、(3-(N-嗎啉基)丙磺酸) (MOPS)、N,N-雙(2-羥乙基)牛磺酸(BES)、N,N-雙(2-羥乙基)-3-胺基-2-羥基丙磺酸(DIPSO)、4-(N-嗎啉基)丁磺酸(MOBS)、3-[N-參(羥基甲基)甲基胺基]-2-羥基丙磺酸(TAPSO)、乙醯胺基甘胺酸、三乙醇胺(TEA)、哌嗪-N,N′-雙(2-羥基丙磺酸) POPSO、4-(2-羥乙基)哌嗪-1-(2-羥基丙磺酸)水合物(HEPPSO)、3-[4-(2-羥乙基)-1-哌嗪基]丙磺酸(HEPPS)、麥黃酮、參(羥基甲基)胺基甲烷、胺丁三醇(TRIZMA)、甘胺醯胺、甘胺醯基-甘胺酸、N-(2-羥乙基)哌嗪-N′-(4-丁磺酸) (HEPBS)、二羥乙甘胺酸、2-胺基-2-甲基-1-丙醇(AMP)、N-(1,1-二甲基-2-羥乙基)-3-胺基-2-羥基丙磺酸(AMPSO)、N-環己基-2-羥基-3-胺基丙烷磺酸(CAPSO)、N-環己基-3-胺基丙烷磺酸(CAPS)、4-(環己基胺基)-1-丁磺酸(CABS)及(4-(2-羥乙基)-1-哌嗪乙磺酸) (HEPES)、肉鹼、γ-胺基丁酸、牛磺酸或胺基酸丙胺酸、精胺酸、天冬醯胺、天冬胺酸、半胱胺酸、麩胺酸、麩醯胺酸、甘胺酸、組胺酸、異白胺酸、白胺酸、賴胺酸、甲硫胺酸、苯丙胺酸、脯胺酸、絲胺酸、蘇胺酸、色胺酸、酪胺酸或纈胺酸之鹽。 14. 如請求項2-13之段落中任一項之實施例,其中該樣品區域包含殘餘樣品區域緩衝液組合物,且其中該殘餘樣品區域緩衝液組合物包含弱酸之鉀鹽及至少一種界面活性劑。 15. 如段落2-14中任一項之實施例,其中該結合物區域包含殘餘結合物區域緩衝液組合物,且其中該殘餘結合物區域緩衝液組合物包含古德氏緩衝鹽及蛋白質、寡聚物、聚合物及界面活性劑中之一或多者。 16. 如段落2-15中任一項之實施例,其中該偵測區域包含殘餘層析膜緩衝液組合物,且其中該殘餘層析膜緩衝液組合物包含磷酸鹽及醣、蛋白質、寡聚物及聚合物中之一或多者。 17. 如段落2-16中任一項之實施例,其中該側流分析經配置以偵測多種分析物。 18. 如段落2-17中任一項之實施例,其中該殘餘緩衝液組合物可降低測試液體酸度。 19. 如段落2-18中任一項之實施例,其中該殘餘緩衝液組合物可提高測試液體黏度。 20. 如段落2-19中任一項之實施例,其中該殘餘緩衝液組合物可實質上降低或實質上移除測試液體之著色組分之外觀。 21. 一種偵測液體中之分析物之方法,該方法包含:提供如請求項1-20中任一項之設備;使該設備的一部分曝露於該液體;及觀測可見指示以測定該分析物存在或不存在。 22. 如段落21之實施例,其中該液體為飲料。 23. 如段落21之實施例,其中該液體為食品提取物。 24. 如段落21-23中任一項之實施例,其中該液體具有約4.5至約6.8之pH。 25. 一種製得用於偵測液體中之分析物之存在的設備之方法,該方法包含:將緩衝溶液施加至包含以下各者之結合物墊中之至少一者:結合物區域,其包含至少一種抗分析物抗體-粒子結合物或抗分析物適體-粒子結合物;偵測區域,其包含層析膜及分析物-結合蛋白質;或樣品區域,其用於接收液體;使該緩衝溶液乾燥;及組裝該結合物墊、偵測區域、樣品區域及芯體以使得該樣品區域與該結合物區域的一部分接觸,該結合物區域之另一部分與該偵測區域之近端接觸,且該芯體與該偵測區域之遠端接觸。 所附申請專利範圍之設備及方法在範疇中不受於本文所描述之特定設備及方法限制,其預期為申請專利範圍之一些態樣之圖示及在功能上等效之意欲處於申請專利範圍範疇內的任何設備及方法。設備及方法除本文中所展示並描述之彼等外的各種修改意欲屬於附加申請專利範圍之範疇內。舉例而言,與本發明設備及方法相符之設備、系統及方法之額外特定實施例描述且闡述於Undercover Colors, Inc.申請的標題為「用於偵測目標物質之設備、系統及方法(Apparatus, System, and Method for Detecting a Target Substance)」且與本申請案同一天申請之PCT專利申請案中,其以全文引用之方式併入。 此外,雖然具體描述本文中所揭示之僅某些代表性設備材料及方法步驟,但設備材料及方法步驟之其他組合亦意欲屬於附加申請專利範圍之範疇內,即使未具體敍述。因此,步驟、元件、組分或成分之組合可在本文中明確提及,然而,包括步驟、元件、組分及成分之其他組合,儘管未明確陳述。如本文所使用之術語「包含」及其變化形式與術語「包括」及其變化形式同義地使用,且為開放性、非限制性術語。儘管術語「包含」及「包括」本文中已用以描述各種實施例,但術語「主要由……組成」及「由……組成」可替代「包含」及「包括」使用以提供本發明之更特定實施例並予以揭示。實例 實例 1 側流免疫 分析 如下製備本發明之側流免疫分析。苯并測試線溶液使用經pH 7.4磷酸鹽緩衝鹽水(1×)稀釋至2 mg/mL之(苯并二氮呯-BSA,5:1比率)溶液製備。苯并對照線溶液使用經pH 7.4磷酸鹽緩衝鹽水(1×)稀釋至1 mg/mL山羊抗小鼠抗體溶液製備。經稀釋之苯并測試線溶液之測試線自毛細管爬升時間為約120秒持續4 cm之FF120HP (GE Healthcare)硝化纖維素條帶底部開始印刷12 mm。經稀釋之苯并對照線溶液之對照線印刷測試線上1.5 mm。印刷條帶放置於強制空氣烘箱中以在10%濕度及37℃下乾燥60分鐘,且隨後其在20%濕度下存儲於乾燥器中直至使用為止。印刷的FF120HP硝化纖維素條帶用Abcam免疫分析緩衝液(無BSA)處理,且放置於強制空氣烘箱中以在10%濕度及37℃下乾燥60分鐘,且隨後將其在20%濕度下存儲於乾燥器中直至使用為止。 藉由首先使用Zeba旋轉管柱(Thermo Scientific, PN: 89882)使單株小鼠抗苯并二氮呯抗體溶液脫鹽,以用100 mM、pH 7.4磷酸鈉緩衝液替換儲備緩衝液來製備單株小鼠抗苯并二氮呯抗體-金NP結合物。隨後使PBS中之脫鹽的單株小鼠抗苯并二氮呯抗體溶液結合至50 mM硼酸鈉緩衝液中之40 nm膠態金奈米粒子。在結合製程期間,將具有5% BSA之5 mM硼酸鈉添加至結合溶液中。在單株小鼠抗苯并二氮呯抗體與40 nm金NP之結合完成後,濃縮單株小鼠抗苯并二氮呯抗體-金NP結合物且隨後用含有0.5%魚皮明膠及0.1%吐溫80之100 mM硼酸鈉緩衝液稀釋至OD10。 藉由用含有1% BSA、5%蔗糖、2%海藻糖、0.25%吐溫20及0.15 M KCl之50 mM硼酸鈉預處理Ahlstrom 8964玻璃纖維墊條帶,且隨後在10%濕度及37℃下將經預處理之6614條帶放置於強制空氣烘箱中60分鐘,且隨後在20%濕度下存儲於乾燥器中直至使用為止來製備結合物墊。經緩衝稀釋之結合物溶液以8 μL/cm之速率連續印刷跨過8864條帶,且隨後在10%濕度及40℃下將條帶放置於強制空氣烘箱中60分鐘,且隨後在20%濕度下存儲於乾燥器中。 為了製備樣品墊,用1 M K2 CO3 處理CF4條帶(GE Healthcare),且隨後在10%濕度及40℃下將條帶放置於強制空氣烘箱中60分鐘,且隨後在20%濕度下存儲於乾燥器中。藉由將硝化纖維素之印刷條帶施加至黏著劑背襯來組裝主卡板。施加結合物墊以便實現與硝化纖維素底部重疊2 mm。施加樣品墊以便實現與結合物墊底部重疊2 mm。施加Ahlstrom 319芯吸墊以實現與硝化纖維素頂部重疊2 mm。隨後將主卡板切割成4 mm寬條帶。實例 2 製備緩衝溶液 如下製備緩衝溶液:抗體脫鹽緩衝溶液 :藉由按順序組合以下各者來製備100 mM磷酸鈉pH 7.5緩衝液: 分子生物學試劑水(Sigma,PN:W4502),以總批料體積之80%之量添加 磷酸二氫鈉(Sigma,PN:S3139),以10.2 g/L×批料體積(L)之量添加; 磷酸氫二鈉(Sigma,PN:S9763),以58.91 g/L×批料體積(L)之量添加; 分子生物學試劑水(Sigma,PN:W4502),直至達到最終體積 使用NaOH或濃HCl將pH調節至7.5。結合阻斷緩衝溶液 :藉由按順序組合以下各者來製備50 mM硼酸鈉、10% BSA pH 9.0緩衝液: 四硼酸鈉十水合物(Fisher,PN:AC41945-0010):11.4 g/L; 硼酸(Fisher,PN:A74-1):1 g/L 牛血清白蛋白(BSA,Equitech,PN:BAH64):100 g/L; 分子生物學試劑水(Sigma,PN:W4502),直至達到最終體積 使用NaOH或HCl將pH調節至9.0,且隨後使用0.2 µm過濾器(VWR,PN:73520-994)過濾緩衝液。結合物稀釋緩衝溶液 :藉由按順序組合以下各者來製備50 mM硼酸鈉、1% BSA、5%海藻糖及20%蔗糖pH 9.0緩衝液: a. 四硼酸鈉十水合物(Fisher,PN:AC41945-0010):11.4 g/L; b. 硼酸(Fisher,PN:A74-1):1 g/L c. 牛血清白蛋白(BSA,Equitech,PN:BAH64):10 g/L d. 蔗糖(Sigma,PN:84097) e. 海藻糖(Sigma,PN:90210) f. 分子生物學試劑水(Sigma,PN:W4502),直至達到最終體積層析膜緩衝溶液 :藉由按順序每公升緩衝液組合以下各者來製備10 mM磷酸鈉、0.1%蔗糖、0.1% BSA、0.2% PVP-40 pH 7.5緩衝液: 磷酸二氫鈉(Sigma,PN:S3139),0.204 g 磷酸氫二鈉(Sigma,PN:S9763),1.178 g 蔗糖(Sigma,PN:84097) 1.0 g 牛血清白蛋白(BSA,Equitech,PN:BA H64):1.0 g 聚(乙烯吡咯啶酮)-40 (PVP-40,Sigma,PN:PVP-40):2.0 g 分子生物學試劑水(Sigma,PN:W4502),直至達到一公升。 使用NaOH或HCl將pH調節至7.2,且隨後使用0.2 µm過濾器(VWR,PN:73520-994)過濾緩衝液。結合物墊緩衝 溶液 :藉由按順序組合以下各者來預製備0.5 M Tris、3% BSA、1% PVP-40、0.25%曲拉通X-100、0.5%普洛尼克F-68 pH 8.0緩衝液: Tris鹼(Sigma,PN:T1375):114.8 g/L 牛血清白蛋白(BSA,Equitech,PN:BAH64):30 g/L; 聚乙烯吡咯烷酮-40 (PVP-40,Sigma,PN:PVP-40):10 g/L 曲拉通X-100 (Sigma,PN:T8787):2.5 g/L 普洛尼克F-68 (Thermo Fisher,PN:24040032):5 g/L 添加分子生物學試劑水(Sigma,PN:W4502),直至達到最終體積樣品區域緩衝溶液 :藉由按順序組合以下各者來預製備具有0.25%曲拉通X-305之1.0 M碳酸鉀(K2 CO3 )緩衝液(pH 7.0緩衝液): 碳酸鉀(Sigma PN:P1472):138.2 g/L 曲拉通X-305 (Sigma,PN:X305):3.6 g/L 添加分子生物學試劑水(Sigma,PN:W4502),直至達到最終體積實例 3 製備具有合併的樣品結合物墊之側流分析 如下製備本發明之側流免疫分析。苯并測試線溶液使用經pH 7.4磷酸鹽緩衝鹽水(1×)稀釋至4 mg/mL之(苯并二氮呯-BSA,5:1比率)溶液製備。苯并對照線溶液使用經pH 7.4磷酸鹽緩衝鹽水(1×)稀釋至1 mg/mL山羊抗小鼠抗體溶液製備。經稀釋之苯并測試線溶液之測試線自毛細管爬升時間為約85±10秒持續4 cm之8 mm寬CN095 (Sartorius)硝化纖維素條帶底部開始印刷5 mm。經稀釋之苯并對照線溶液之對照線印刷測試線上2 mm。印刷條帶放置於強制空氣烘箱中以在10%濕度及40℃下乾燥30分鐘,且隨後將其在20%濕度下在乾燥器中存儲16小時。用實例2中上文所描述之層析膜緩衝液處理印刷的CN095硝化纖維素條帶(Sartorius),且在10%濕度及40℃下放置於強制空氣烘箱中以乾燥30分鐘,且隨後將其在乾燥器中在20%濕度下存儲16小時。 藉由首先使用Zeba旋轉管柱(Thermo Scientific, PN: 89882)使單株小鼠抗苯并二氮呯抗體溶液脫鹽,以用100 mM、pH 7.4磷酸鈉緩衝液替換儲備緩衝液來製備單株小鼠抗苯并二氮呯抗體-金NP結合物。隨後使PBS中之脫鹽的單株小鼠抗苯并二氮呯抗體溶液結合至40 nm膠態金奈米粒子。在結合製程期間,將結合阻斷緩衝液添加至結合溶液中。在單株小鼠抗苯并二氮呯抗體與40 nm金NP之結合完成後,濃縮單株小鼠抗苯并二氮呯抗體-金NP結合物且隨後用實例2中如上文所描述之結合物稀釋緩衝液稀釋至OD15。 藉由用實例2中上文所描述之結合物墊緩衝液預處理Ahlstrom 6614聚酯纖維墊條帶,且隨後在10%濕度及40℃下將預處理之6614條帶放置於強制空氣烘箱中60分鐘,且隨後在乾燥器中在20%濕度下存儲16小時來製備組合的樣品結合物墊。為了製備組合的樣品結合物墊之樣品區域,僅Ahlstrom 6614聚酯纖維墊之樣品區域用實例2中上文所描述之樣品區域緩衝液處理。經緩衝稀釋之結合物溶液以5 μL/cm之速率連續印刷跨過6614條帶,且隨後在10%濕度及40℃下將條帶放置於強制空氣烘箱中60分鐘,且隨後在20%濕度下在乾燥器中存儲16小時。 藉由將硝化纖維素之印刷條帶施加至黏著劑背襯來組裝主卡板。施加樣品/結合物墊以便實現與硝化纖維素底部重疊2 mm。施加Ahlstrom 319芯吸墊以實現與硝化纖維素頂部重疊2 mm。隨後將主卡板切割成4 mm寬條帶。
100‧‧‧設備
110‧‧‧樣品墊
120‧‧‧結合物墊
122‧‧‧結合物墊之第一部分
124‧‧‧結合物墊之第二部分
130‧‧‧偵測層
132‧‧‧近端
134‧‧‧遠端
140‧‧‧測試線
150‧‧‧對照線
160‧‧‧吸收墊/芯體
170‧‧‧透明覆蓋層
200‧‧‧設備
230‧‧‧偵測層
232‧‧‧偵測層之第一部分/層析膜之近端
234‧‧‧層析膜之遠端
250‧‧‧樣品結合物墊
252‧‧‧樣品區域
254‧‧‧結合物區域
260‧‧‧吸收墊/芯體
270‧‧‧透明覆蓋層
圖1為根據本文所描述之一些實施例之設備的分解截面視圖。 圖2為根據本文所描述之一些實施例之設備的截面視圖。
100‧‧‧設備
110‧‧‧樣品墊
120‧‧‧結合物墊
122‧‧‧結合物墊之第一部分
124‧‧‧結合物墊之第二部分
130‧‧‧偵測層
132‧‧‧近端
134‧‧‧遠端
140‧‧‧測試線
150‧‧‧對照線
160‧‧‧吸收墊/芯體
170‧‧‧透明覆蓋層

Claims (25)

  1. 一種用於偵測液體中之分析物之存在的設備,該設備包含能夠接收飲料樣品且分析該飲料中是否存在該分析物之側流分析。
  2. 如請求項1之設備,其中該設備包含:樣品區域、結合物區域及偵測區域,其中該樣品區域、該結合物區域或該偵測區域中之至少一者包含至少一種殘餘緩衝液組合物。
  3. 如請求項2之設備, 其中該結合物區域包含至少一種抗分析物抗體-粒子結合物或抗分析物適體-粒子結合物; 其中該偵測區域包含層析膜及至少一種分析物-結合蛋白質,且 其中該樣品區域係經配置以用於接收液體。
  4. 如請求項2或3之設備,其中該偵測區域進一步包含至少一種抗物種抗體或抗物種適體。
  5. 如請求項2至4中任一項之設備,其中該樣品區域、該結合物區域及該偵測區域係位於單一墊上。
  6. 如請求項2至4中任一項之設備,其中該樣品區域、該結合物區域及該偵測區域中之至少一者係位於獨立的墊上。
  7. 如請求項3至6中任一項之設備,其中該層析膜包含纖維素、硝化纖維素、聚酯纖維及/或玻璃纖維中之一或多者。
  8. 如請求項1至7中任一項之設備,其進一步包含限定圖案之覆蓋層,其中該覆蓋層係安置於該偵測區域上方。
  9. 如請求項2至8中任一項之設備,其中該偵測區域係安置於天然指甲、人工指甲、指甲油層、指甲貼紙、指甲貼花、貼紙、杯子、飲料杯托、飲料攪拌器、牙籤、飲料裝飾物、鉛筆或筆之上或之內或之下。
  10. 如請求項2至9中任一項之設備,其中該殘餘緩衝液組合物包含至少一種界面活性劑。
  11. 如請求項10之設備,其中該界面活性劑包含普洛尼克(Pluronic) F-68、脂肪醇、聚乙二醇烷基醚、聚丙二醇烷基醚、葡糖苷烷基醚、聚乙二醇辛基、丙三醇烷基酯、苯基醚、聚氧化乙烯(20)油基醚、辛基苯酚乙氧基化物、聚乙二醇烷基苯基醚、聚乙氧基化動物脂胺、N , N -雙[3-(D-葡萄糖醯胺)丙基]膽醯胺、聚氧化乙烯(20)鯨蠟基醚、二甲基癸基膦氧化物、分支鏈辛基苯氧基聚(乙烯氧基)乙醇、聚氧化乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物、第三辛基苯氧基聚乙氧基乙醇、聚氧乙烯(20)脫水山梨糖醇單油酸酯或其組合。
  12. 如請求項2至11中任一項之設備,其中該殘餘緩衝液組合物包含至少一種緩衝鹽。
  13. 如請求項12之設備,其中該緩衝鹽包含磷酸單鈉、磷酸二鈉、四硼酸鈉、參(羥基甲基)甲基胺基丙烷磺酸(TAPS)、N-環己基-2-胺基乙烷磺酸(CHES)、N-參(羥基甲基)甲基-4-胺基丁烷磺酸(TABS)、bis-tris甲烷(Bis TRIS)、參(羥基甲基)胺基甲烷(TRIS)、2-[[1,3-二羥基-2-(羥甲基)丙-2-基]胺基]乙磺酸(TES)、2-(N-嗎啉基)乙磺酸(MES)、N-(胺甲醯基甲基)亞胺二乙酸(ADA)、N-(2-乙醯胺基)-2-胺基乙烷磺酸(ACES)、bis tris丙烷、哌嗪-N,N′-雙(2-乙磺酸) (PIPES)、N-(2-乙醯胺基)-2-胺基乙烷磺酸(ACES)、3-嗎啉基-2-羥基丙磺酸(MOPSO)、乙醇胺氯化物、(3-(N-嗎啉基)丙磺酸) (MOPS)、N,N-雙(2-羥乙基)牛磺酸(BES)、N,N-雙(2-羥乙基)-3-胺基-2-羥基丙磺酸(DIPSO)、4-(N-嗎啉基)丁磺酸(MOBS)、3-[N-參(羥基甲基)甲基胺基]-2-羥基丙磺酸(TAPSO)、乙醯胺基甘胺酸、三乙醇胺(TEA)、哌嗪-N,N′-雙(2-羥基丙磺酸) POPSO、4-(2-羥乙基)哌嗪-1-(2-羥基丙磺酸)水合物(HEPPSO)、3-[4-(2-羥乙基)-1-哌嗪基]丙磺酸(HEPPS)、麥黃酮、參(羥基甲基)胺基甲烷、胺丁三醇(TRIZMA)、甘胺醯胺、甘胺醯基-甘胺酸、N-(2-羥乙基)哌嗪-N′-(4-丁磺酸) (HEPBS)、二羥乙甘胺酸、2-胺基-2-甲基-1-丙醇(AMP)、N-(1,1-二甲基-2-羥乙基)-3-胺基-2-羥基丙磺酸(AMPSO)、N-環己基-2-羥基-3-胺基丙烷磺酸(CAPSO)、N-環己基-3-胺基丙烷磺酸(CAPS)、4-(環己基胺基)-1-丁磺酸(CABS)及(4-(2-羥乙基)-1-哌嗪乙磺酸) (HEPES)、肉鹼、γ-胺基丁酸、牛磺酸或胺基酸丙胺酸、精胺酸、天冬醯胺、天冬胺酸、半胱胺酸、麩胺酸、麩醯胺酸、甘胺酸、組胺酸、異白胺酸、白胺酸、賴胺酸、甲硫胺酸、苯丙胺酸、脯胺酸、絲胺酸、蘇胺酸、色胺酸、酪胺酸或纈胺酸之鹽。
  14. 如請求項2至13中任一項之設備,其中該樣品區域包含殘餘樣品區域緩衝液組合物,且其中該殘餘樣品區域緩衝液組合物包含弱酸之鉀鹽及至少一種界面活性劑。
  15. 如請求項2至14中任一項之設備,其中該結合物區域包含殘餘結合物區域緩衝液組合物,且其中該殘餘結合物區域緩衝液組合物包含古德氏(Good’s)緩衝鹽及蛋白質、寡聚物、聚合物及界面活性劑中之一或多者。
  16. 如請求項2至15中任一項之設備,其中該偵測區域包含殘餘偵測區域緩衝液組合物,且其中該殘餘偵測區域緩衝液組合物包含磷酸鹽及醣、蛋白質、寡聚物及聚合物中之一或多者。
  17. 如請求項1至16中任一項之設備,其中該側流分析係經配置以偵測多種分析物。
  18. 如請求項2至17中任一項之設備,其中該殘餘緩衝液組合物可降低測試液體酸度。
  19. 如請求項2至18中任一項之設備,其中該殘餘緩衝液組合物可提高測試液體黏度。
  20. 如請求項2至19中任一項之設備,其中該殘餘緩衝液組合物可實質上降低或實質上移除測試液體之著色組分之外觀。
  21. 一種偵測液體中之分析物之方法,該方法包含: 提供如請求項1至20中任一項之設備; 使該設備的一部分曝露於該液體;及 觀測可見指示以判定該分析物存在或不存在。
  22. 如請求項21之方法,其中該液體為飲料。
  23. 如請求項21之方法,其中該液體為食品提取物。
  24. 如請求項21至23中任一項之方法,其中該液體具有約4.5至約6.8之pH。
  25. 一種製造用於偵測液體中之分析物之存在之設備的方法,該方法包含: 將緩衝溶液施加至以下各者中之至少一者: 包含結合物區域之結合物墊,該結合物區域包含至少一種抗分析物抗體-粒子結合物或抗分析物適體-粒子結合物; 偵測區域,其包含層析膜及分析物-結合蛋白質;或 用於接收液體之樣品區域; 使該緩衝溶液乾燥;及 組裝該結合物墊、偵測區域、樣品區域及芯體,以使得該樣品區域與該結合物區域的一部分接觸,該結合物區域之另一部分與該偵測區域之近端接觸,且該芯體與該偵測區域之遠端接觸。
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