TW201722459A - 凍乾的重組vwf調配物 - Google Patents
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Abstract
本發明提供凍乾的重組馮威里氏因子(recombinant von-Willebrand Factor;rVWF)之長期穩定醫藥調配物以及製造及投予該等調配物之方法。
Description
一般而言,本發明係關於凍乾的重組VWF調配物及製造包含重組VWF之凍乾組成物的方法。
馮威里氏因子(Von Willebrand factor,VWF)為在血漿中以大小介於約500至20,000kD範圍內之一系列多聚體形式進行循環的糖蛋白。VWF之多聚體形式由藉由二硫鍵連接在一起之250kD多肽子單元構成。VWF介導血小板與受損血管壁之內皮下組織的初期黏著。僅較大多聚體展現止血活性。假定內皮細胞分泌VWF之較大多聚形式,且具有低分子量之彼等VWF形式(低分子量VWF)由蛋白質水解分裂產生。具有較大分子質量的多聚體儲存在內皮細胞之魏貝爾-帕拉德體(Weibel-Pallade body)中,且在受刺激之後即釋放。
VWF係由內皮細胞及巨核細胞合成,呈基本上由重複結構域組成之前原VWF(prepro-VWF)形式。在信號肽分裂之後,原VWF即在其C末端區域藉由二硫鍵進行二聚。該等二聚體充當多聚作用之原體,多聚作用受自由末端之間的二硫鍵支配。組合成多聚體之後,蛋白質水解移除肽原序列(Leyte等人,Biochem.J.274(1991),257-261)。
預計可得自VWF之選殖cDNA的主要轉譯產物為2813個殘基的前驅
體多肽(前原VWF)。前原VWF由22個胺基酸信號肽及741個胺基酸肽原組成,而成熟VWF包含2050個胺基酸(Ruggeri Z.A.,及Ware,J.,FASEB J.,308-316(1993))。
VWF缺陷導致馮威里氏病(VWD),該疾病特性在於在某種程度上已經斷定之出血性表型。3型VWD為最嚴重之形式,其中VWF完全失去,而1型VWD與VWF之定量損失有關且其表型可能極其輕微。2型VWD與VWF之定性缺陷有關,且可能與3型VWD同樣嚴重。2型VWD具有許多亞型,其中有些與高分子量多聚體之損失或減少有關。2a型馮威里氏症候群(VWS-2A)之特性在於中間及大型多聚體二者之損失。VWS-2B之特性在於分子量最高之多聚體的損失。與VWF相關之其他疾病及病症在此項技術中眾所周知。
美國專利第6,531,577號、第7,166,709號及歐洲專利申請案第04380188.5號描述血漿來源之VWF調配物。然而,血漿來源之VWF除了具有數量及純度問題之外,亦存在血液攜帶病原體(例如病毒及變異型克亞二氏病(Creutzfeldt-Jakob disease;vCJD))之風險。此外,已知VWF在應力條件下會形成聚集體。
因而,此項技術中需要開發一種包含重組VWF之穩定醫藥調配物。
本發明提供適用於凍乾重組VWF以產生高度穩定之醫藥組成物的調配物。該穩定醫藥組成物適用作治療劑用於治療罹患可受益於投予重組VWF之病症或病狀的個人。
在一個具體實例中,提供重組馮威里氏因子(rVWF)之穩定凍乾醫藥
調配物,其包含:(a)rVWF;(b)一或多種緩衝劑;(c)一或多種胺基酸;(d)一或多種穩定劑;及(e)一或多種界面活性劑;該rVWF包含選自由下列組成之群的多肽:a)在SEQ ID NO:3中所列出之胺基酸序列;b)a)之生物學活性類似物、片段或變異體;c)由在SEQ ID NO:1中所列出之多核苷酸編碼的多肽;d)c)之生物學活性類似物、片段或變異體;及e)由在中度嚴格雜交條件下與在SEQ ID NO:1中所列出之多核苷酸雜交之多核苷酸編碼的多肽;該緩衝液包含在約0.1mM至約500mM範圍內的pH緩衝劑,且該pH值在約2.0至約12.0範圍內;該胺基酸之濃度為約1至約500mM;該穩定劑之濃度為約0.1至約1000mM;且該界面活性劑之濃度為約0.01g/L至約0.5g/L。
在另一具體實例中,rVWF包含在SEQ ID NO:3中所列出之胺基酸序列。在另一具體實例中,緩衝劑係選自由檸檬酸鹽、甘胺酸、組胺酸、HEPES、Tris及此等緩衝劑之組合組成之群。在又一具體實例中,緩衝劑為檸檬酸鹽。在許多具體實例中,pH值在約6.0至約8.0、約6.5至約7.5範圍內或為約7.3。在另一具體實例中,pH值為約7.3。
在另一具體實例中,上述胺基酸係選自由甘胺酸、組胺酸、脯胺酸、絲胺酸、丙胺酸及精胺酸組成之群。在另一具體實例中,胺基酸之濃度在約0.5mM至約300mM範圍內。在另一具體實例中,胺基酸為約15mM濃度之甘胺酸。
在本發明之一個具體實例中,rVWF包含在SEQ ID NO:3中所列出之胺基酸序列;其中緩衝劑為檸檬酸鹽,且pH值為約7.3;且其中胺基酸為約15mM濃度之甘胺酸。
在本發明之另一具體實例中,上述一或多種穩定劑係選自由甘露醇、乳糖、山梨醇、木糖醇、蔗糖、海藻糖、甘露糖、麥芽糖、乳糖、葡萄糖、棉子糖、纖維二糖、龍膽二糖、異麥芽糖、阿拉伯糖(arabinose)、葡糖胺、果糖及此等穩定劑之組合組成之群。在一個具體實例中,穩定劑為約10g/L濃度之海藻糖及約20g/L濃度之甘露醇。
在本發明之又一具體實例中,上述界面活性劑係選自由毛地黃皂苷、Triton X-100、Triton X-114、TWEEN-20、TWEEN-80及此等界面活性劑之組合組成之群。在另一具體實例中,界面活性劑為約0.01g/L之TWEEN-80。
在本發明之另一具體實例中,rVWF包含在SEQ ID NO:3中所列出之胺基酸序列;其中緩衝劑為約15mM濃度、約pH 7.3之檸檬酸鹽;其中胺基酸為約15mM濃度之甘胺酸;其中穩定劑為約10g/L濃度之海藻糖及約20g/L濃度之甘露醇;且其中界面活性劑為約0.1g/L之TWEEN-80。
圖1展示用於評估穩定性之批次(在5℃±3℃儲存)的合併VWF:RCo活性之ANCOVA分析。
圖2展示在5℃±3℃儲存之rVWF FDP中殘餘水分增加。
圖3展示在40℃±2℃儲存之rVWF FDP中殘餘水分增加。
除非另外定義,否則本文中所使用之所有技術及科學術語均與一般熟習本發明所屬技術領域者通常所理解之含義相同。以下參考文獻向熟習此項技術者提供用於本發明之許多術語的一般定義:Singleton,等人,
DICTIONARY OF MICROBIOLOGY AND MOLECULAR BIOLOGY(第2版,1994);THE CAMBRIDGE DICTIONARY OF SCIENCE AND TECHNOLOGY(Walker編,1988);THE GLOSSARY OF GENETICS,第5版,R.Rieger,等人(編),Springer Verlag(1991);及Hale及Marham,THE HARPER COLLINS DICTIONARY OF BIOLOGY(1991)。
本文中所引用之各公開案、專利申請案、專利及其他參考文獻係以不與本發明不一致之程度以全文引用之方式併入本文中。
在此應注意,除非本內容中另外明確規定,否則如本說明書及隨附申請專利範圍中所使用之單數形式「一」及「該」包括複數個指代物。
如本文中所使用,除非另外規定,否則以下術語具有歸屬於其之含義:術語「包含」對於肽化合物意謂化合物可能在指定序列之胺基及羧基末端中之一或二者處包括其他胺基酸。固然,此等其他胺基酸不應顯著干擾該化合物之活性。對於本發明之組成物,術語「包含」意謂組成物可能包括其他組份。此等其他組份不應顯著干擾該組成物之活性。
術語「藥理活性」意謂如此描述之物質經測定具有可影響醫學參數(例如(但不限於)血壓、血球計數、膽固醇含量)或疾病病況(例如(但不限於)癌症、自體免疫性病症)的活性。
如本文中所使用,術語「表現」意謂允許或導致基因或DNA序列中之資訊顯現,例如藉由活化涉及相應基因或DNA序列之轉錄及轉譯的細胞功能而產生蛋白質。DNA序列在細胞中表現或由細胞表現,以便形成諸如蛋白質之「表現產物」。表現產物自身(例如所得蛋白質)亦可說成是「經表現」。表現產物可特性化為細胞內、細胞外或分泌產物。術語「細胞內」意
謂在細胞內部。術語「細胞外」意謂在細胞外部,諸如跨膜蛋白。若物質在很大程度上出現在細胞外部、自細胞上某處或在細胞內部,則其係由細胞「分泌」。
如本文中所使用,「多肽」係指由胺基酸殘基、結構變異體、相關天然存在之結構變異體及其非天然存在之合成類似物經由肽鍵連接所構成的聚合物。合成多肽係藉由例如使用自動化多肽合成器製備。術語「蛋白質」通常係指大多肽。術語「肽」通常係指短多肽。
如本文中所使用,多肽之「片段」意欲指小於全長多肽或蛋白質表現產物的任何多肽或蛋白質部分。
如本文中所使用,「類似物」係指在結構上實質上類似且具有相同生物活性,但可能對整個分子或其片段具有不同程度之活性的任何兩種或兩種以上多肽。類似物因一或多個突變(涉及一或多種胺基酸對於其他胺基酸之取代、缺失、插入及/或添加)而在其胺基酸序列組成方面不同。根據被置換之胺基酸與用於進行置換之胺基酸的物理化學或功能相關性,取代可為保守性或非保守性。
如本文中所使用,「變異體」係指經修飾以包含通常並非分子之一部分的其他化學部分的多肽、蛋白質或其類似物。該等部分可調節分子之溶解度、吸收、生物半衰期,等等。或者,該等部分可降低分子毒性,並消除或削弱該分子之任何不想要的副作用,等等。能夠介導該等作用之部分揭示於Remington's Pharmaceutical Sciences(1980)中。將該等部分偶合至分子的程序在此項技術中眾所周知。例如(但不限於),在一個態樣中,變異體為具有可賦予蛋白質更長活體內半衰期之化學修飾的凝血因子。在多個態樣
中,多肽係藉由糖基化、聚乙二醇化及/或唾液酸化(polysialylation)來修飾。
前原VWF之多核苷酸及胺基酸序列分別在SEQ ID NO:1及SEQ ID NO:2中列出,且分別可以基因庫(GenBank)登記號NM_000552及NP_000543獲得。對應成熟VWF蛋白質之胺基酸序列在SEQ ID NO:3中列出(對應於全長前原VWF胺基酸序列之胺基酸764-2813)。
適用rVWF之一種形式至少具有在活體內穩定(例如結合)至少一種VIII因子(FVIII)分子且視情況具有藥理學上可接受之糖基化模式的性質。其特定實例包括無A2結構域因而可抗蛋白質水解之VWF(Lankhof等人,Thromb.Haemost.77:1008-1013,1997);及自Val 449至Asn 730之VWF片段,包括糖蛋白1b結合域以及膠原蛋白及肝素之結合位點(Pietu等人,Biochem.Biophys.Res.Commun.164:1339-1347,1989)。在一個態樣中,測定VWF穩定至少一種FVIII分子之能力係在缺乏VWF之哺乳動物中根據此項技術現狀中已知的方法進行。
本發明之rVWF係藉由此項技術中已知之任何方法產生。一個特定實例揭示於在1986年10月23日公開之WO86/06096及1990年7月23日申請之美國專利申請案第07/559,509號中,該等文獻之關於產生重組VWF的方法係以引用之方式併入本文中。因而,在此項技術中已知進行下列之方法:(i)藉由基因工程(例如經由RNA逆轉錄及/或DNA擴增)產生重組DNA;(ii)藉由轉染(例如經由電穿孔或微量注射)向原核或真核細胞中引入重組DNA;(iii)培養轉型細胞,例如以連續或間歇方式;(iv)表現VWF,例如組成性表現或在誘導之後表現;及(v)分離VWF,例如自培養基或藉
由收集轉型細胞,以便(vi)獲得純化rVWF,例如經由陰離子交換層析或親和層析。在一個態樣中,重組VWF係在轉型宿主細胞中使用此項技術眾所周知的重組DNA技術製造。例如,可使用適合限制酶自DNA切除編碼多肽之序列。或者,在另一態樣中,DNA分子係使用化學合成技術(諸如胺基磷酸酯法)合成。又,在另一態樣中,使用此等技術之組合。
本發明亦提供在適當宿主中編碼本發明多肽之載體。該載體包含編碼多肽之多核苷酸,其可操作地與適當表現控制序列連接。在多核苷酸插入載體中之前或之後實現此可操作連接的方法眾所周知。表現控制序列包括啟動子、活化子、強化子、操縱子、核糖體結合位點、起始信號、中止信號、加帽信號(cap signal)、聚腺苷酸化信號,及涉及轉錄或轉譯控制的其他信號。所得載體(其中具有多核苷酸)係用於使適當宿主轉型。此轉型可使用此項技術眾所周知的方法進行。
許多可利用且眾所周知的宿主細胞中任一者均可用於實施本發明。特定宿主之選擇取決於此項技術中已公認的許多因素,包括例如與所選表現載體的相容性、DNA分子所編碼之肽的毒性、轉型率、肽之易回收性、表現特性、生物安全性及成本。在理解並非所有宿主細胞對於表現特定DNA序列均具有相等效果的情況下,必須尋得此等因子之平衡。在此等一般準則內,適用微生物宿主細胞包括(但不限於)細菌、酵母及其他真菌、昆蟲、植物、培養中之哺乳動物(包括人類)細胞,或此項技術中已知之其他宿主。
轉型宿主細胞在習知醱酵條件下培養以便表現所要化合物。該等醱酵條件在此項技術中眾所周知。最終,藉由此項技術中眾所周知的方法自培
養基或宿主細胞自身純化多肽。
視用於表現本發明化合物之宿主細胞而定,糖(寡醣)基視情況與蛋白質中已知的待糖基化位點連接。一般而言,O連接之寡醣與絲胺酸(Ser)或蘇胺酸(Thr)殘基連接,而當天冬醯胺酸(Asn)殘基為序列Asn-X-Ser/Thr(其中X可為除脯胺酸以外的任何胺基酸)之一部分時,N連接之寡醣與天冬醯胺酸(Asn)殘基連接。X較佳為19個天然存在之胺基酸(不計脯胺酸)之一。N連接寡醣及O連接寡醣之結構以及在各類型中發現之糖殘基均不同。通常在N連接寡醣及O連接寡醣上發現之一種糖為N-乙醯基神經胺酸(稱為唾液酸)。唾液酸通常為N連接寡醣及O連接寡醣之末端殘基,且在一個態樣中,由於其負電荷而賦予糖基化化合物酸性。該(等)位點可併入本發明化合物之連接子中,且較佳在重組產生多肽化合物期間藉由細胞進行糖基化(例如,在哺乳動物細胞中,諸如CHO、BHK、COS)。在其他態樣中,該等位點係藉由此項技術中已知的合成或半合成程序而糖基化。
或者,藉由合成方法使用例如固相合成技術製造化合物。適合之技術在此項技術中眾所周知,及包括下列文獻中所描述之彼等:Merrifield(1973),Chem.Polypeptides,第335-61頁(Katsoyannis及Panayotis編);Merrifield(1963),J.Am.Chem.Soc.85:2149;Davis等人(1985),Biochem.Intl.10:394-414;Stewart及Young(1969),Solid Phase Peptide Synthesis;美國專利第3,941,763號;Finn等人(1976),The Proteins(第3版)2:105-253;及Erickson等人(1976),The Proteins(第3版)2:257-527。固相合成為製造個別肽的較佳技術,此係由於其為製造小肽的最成本有效之方法。
製備多肽片段、變異體或類似物之方法在此項技術中眾所周知。
多肽片段係使用(但不限於)酶分裂(例如胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶)以及使用重組法製備,以產生具有特定胺基酸序列之多肽片段。可產生包含具有特定活性之蛋白質區域(諸如多聚域)或此項技術中已知之任何其他可識別之VWF域的多肽片段。
製造多肽類似物之方法亦為眾所周知。多肽之胺基酸序列類似物可為取代、插入、添加或缺失類似物。缺失類似物(包括多肽片段)缺乏天然蛋白質之一或多個殘基,該等殘基對於功能或免疫原活性並非必需的。插入類似物包括在多肽中之非末端點添加例如胺基酸。此類似物可包括例如(但不限於)插入免疫活性抗原決定基或僅插入單個殘基。添加類似物(包括多肽片段)包括在蛋白質之一或兩個末端添加一或多個胺基酸,且包括例如融合蛋白質。亦涵蓋上述類似物之組合。
取代類似物通常在蛋白質內之一或多個位點用一種野生型胺基酸交換另一種,且可經設計以便在未完全損失其他功能或性質的情況下調節多肽之一或多種性質。在一個態樣中,取代為保守性取代。「保守性胺基酸取代」為以具有側鏈或類似化學特性的胺基酸取代胺基酸。用於進行保守性取代之類似胺基酸包括具有下列側鏈之胺基酸:酸性側鏈(麩胺酸、天門冬胺酸);鹼性側鏈(精胺酸、離胺酸、組胺酸);極性醯胺側鏈(麩醯胺酸、天冬醯胺酸);疏水性脂族側鏈(白胺酸、異白胺酸、纈胺酸、丙胺酸、甘胺酸);芳族側鏈(苯丙胺酸、色胺酸、酪胺酸);小側鏈(甘胺酸、丙胺酸、絲胺酸、蘇胺酸、甲硫胺酸);或脂族羥基側鏈(絲胺酸、蘇胺酸)。
在一個態樣中,類似物實質上與重組VWF同源,或實質上與重組VWF相同,該等類似物係來源於重組VWF。類似物包括保留野生型多肽之至少某些生物活性(例如凝血活性)的類似物。
所涵蓋之多肽變異體包括(但不限於)藉由諸如下列技術進行化學修飾的多肽:泛素化;糖基化,包括多唾液酸化(polysialation);與治療劑或診斷劑結合;標記;共價聚合物連接,諸如聚乙二醇化(以聚乙二醇衍生);引入不可水解之鍵;及藉由化學合成胺基酸(諸如鳥胺酸,其通常並不存在於人類蛋白質中)進行插入或取代。變異體保留未經修飾之本發明分子的相同或基本上相同之結合性質。該化學修飾可包括藥劑直接或間接(例如經由連接子)與VWF多肽連接。在間接連接情況下,涵蓋連接子可水解或不可水解。
在一個態樣中,製備聚乙二醇化多肽類似物將包含以下步驟:(a)在結合構築體多肽與一或多個PEG基團連接的條件下,使多肽與聚乙二醇(諸如PEG之反應性酯或醛衍生物)反應;及(b)獲得反應產物。一般而言,醯化反應之最優反應條件係根據已知參數及所要結果確定。例如,PEG:蛋白質之比愈大,聚-聚乙二醇化產物(poly-pegylated product)之百分比愈大。在一些具體實例中,結合構築體在N末端具有單一PEG部分。聚乙二醇(PEG)可與凝血因子連接以例如獲得更長活體內半衰期。PEG基團可能具有任何適宜分子量,且為直鏈或分支鏈。PEG之平均分子量介於約2千道爾頓(kiloDalton,「kD」)至約100kDa、約5kDa至約50kDa,或約5kDa至約10kDa範圍內。在某些態樣中,PEG基團係藉由PEG部分上之天然或工程反應性基團(例如醛基、胺基、硫醇基,或酯基)與凝血因子上之反
應性基團(例如醛基、胺基,或酯基)的醯化或還原性烷基化反應,或藉由此項技術中已知之任何其他技術而與凝血因子連接。
製備聚唾液酸化多肽之方法描述於美國專利公開案20060160948,Fernandes et Gregoriadis;Biochim.Biophys.Acta 1341:26-34,1997,及Saenko等人,Haemophilia 12:42-51,2006中。簡言之,在室溫下於暗處攪拌含0.1M NaIO4之多聚乙醯神經氨糖酸(CA)溶液以氧化CA。活化之CA溶液在暗處相對於例如0.05M磷酸鈉緩衝液(pH 7.2)進行透析,且此溶液添加至rVWF溶液中並在室溫下於暗處在溫和搖動下培育18小時。視情況藉由例如超濾/滲濾自rVWF-唾液酸結合物分離自由試劑。rVWF與唾液酸之結合物係使用戊二醛作為交聯試劑而獲得(Migneault等人,Biotechniques 37:790-796,2004)。
在另一態樣中,進一步涵蓋本發明多肽為與第二藥劑(其為多肽)形成之融合蛋白質。在一個具體實例中,第二藥劑(其為多肽)為(但不限於)酶、生長因子、抗體、細胞激素、超化因子、細胞表面受體、細胞表面受體之細胞外域、細胞黏著分子,或上述蛋白質之片段或活性域。在相關具體實例中,第二藥劑為凝血因子,諸如因子VIII、因子VII、因子IX。所涵蓋之融合蛋白質係藉由此項技術中眾所周知的化學或重組技術製造。
在另一態樣中,亦涵蓋前原VWF及原VWF多肽在本發明調配物中將提供治療效益。例如,美國專利第7,005,502號描述一種醫藥製劑,其包含大量的可在試管內誘導凝血酶產生之原VWF。除天然存在之成熟VWF的重組生物學活性片段、變異體,或其他類似物之外,本發明亦涵蓋在本文所述之調配物中使用前原VWF(在SEQ ID NO:2中列出)或原VWF多肽
(SEQ ID NO:2之胺基酸殘基23至764)的重組生物學活性片段、變異體,或類似物。
編碼片段、變異體及類似物之多核苷酸可由熟習編碼與天然存在之分子具備相同或相似之生物活性的天然存在分子之生物學活性片段、變異體或類似物的工作者容易地產生。在多個態樣中,此等多核苷酸係使用PCR技術、DNA編碼分子之消化/接合及類似技術來製備。因而,熟習此項技術者將能夠使用此項技術中已知之任何方法(包括(但不限於)位點特異性突變誘發)在DNA股中產生單鹼基變化,以產生經改變之密碼子及錯義突變。如本文中所使用,片語「中度嚴格雜交條件」意謂例如在42℃下於50%甲醯胺中雜交,及在60℃下於0.1×SSC、0.1% SDS中洗滌。熟習此項技術者應理解,可根據待雜交序列之長度及GC核苷酸鹼基含量而改變此等條件。此項技術中之標準公式適用於確定準確雜交條件。參看Sambrook等人,9.47-9.51,Molecular Cloning,Cold Spring Harbor Laboratory Press,Cold Spring Harbor,New York(1989)。
在一個態樣中,包含本發明VWF多肽之調配物在投藥之前經凍乾。凍乾係使用此項技術中常見之技術進行,且應針對所開發之組成物進行優化[Tang等人,Pharm Res.21:191-200,(2004)及Chang等人,Pharm Res.13:243-9(1996)]。
在一個態樣中,凍乾週期由三個步驟構成:凍結、初步乾躁及二次乾燥[A.P.Mackenzie,Phil Trans R Soc London,Ser B,Biol 278:167(1977)]。在凍結步驟中,冷卻溶液以引發結冰。此外,此步驟誘發膨脹劑結晶。冰在初步
乾燥階段中昇華,此係藉由降低腔室壓力至低於冰之蒸氣壓、使用真空及引入熱以促進昇華來進行。最終,在二次乾燥階段,在低腔室壓力及高存放溫度(shelf temperature)下除去附著水或結合水。該處理產生稱為凍乾塊之物質。此後,該凍乾塊可用無菌水或適合稀釋劑復原供注射。
凍乾週期不僅決定賦形劑之最終物理狀態,而且亦影響其他參數,諸如復原時間、外觀、穩定性及最終含水量。呈凍結狀態之組成物結構經受在特定溫度下發生之若干轉移(例如玻璃轉移、濕化及結晶),且該結構可用於理解及優化凍乾處理。玻璃轉移溫度(Tg及/或Tg')可提供關於溶質之物理狀態的資訊,且可藉由差示掃描量熱術(DSC)測定。當設計凍乾週期時,Tg及Tg'為必須考慮的重要參數。例如,Tg'對於初步乾燥至關重要。此外,在乾燥狀態下,玻璃轉移溫度提供關於最終產物之儲存溫度的資訊。
賦形劑為賦予或增強藥品(例如蛋白質)之穩定性及遞送的添加劑。不管包含其之原因如何,賦形劑為調配物之必需組份,且因此必需安全且為患者良好耐受。對於蛋白質藥物,賦形劑之選擇尤其重要,此係由於其可影響藥物之效力及免疫原性。因此,需要開發具有適當選擇之賦形劑且提供適合穩定性、安全性及市場性的蛋白質調配物。
在一個態樣中,凍乾調配物至少包含一或多種緩衝液、膨脹劑,及穩定劑。在此態樣中,在聚集成為凍乾步驟期間或復原期間之問題的情況下,評估且選擇界面活性劑之效用。包括適當緩衝劑以在凍乾期間維持調配物在pH值穩定區內。涵蓋用於液體及凍乾蛋白質調配物之賦形劑組份的比較提供於表A中。
在開發蛋白質調配物時,主要挑戰為針對製造、運輸及儲存之應力而穩定產物。調配物賦形劑之作用為提供針對此等應力之穩定作用。亦採用賦形劑來降低高濃度蛋白質調配物之黏度,以使其能夠遞送並增加患者便利性。一般而言,賦形劑可根據其針對各種化學及物理性應力而穩定蛋白質的機制進行分類。一些賦形劑係用於減輕特定應力之效應或用於調節特定蛋白質之特定感受性。其他賦形劑對蛋白質之物理及共價穩定性具有更一般之作用。本文所述之賦形劑係藉由其化學類型或其在調配物中之功能作用而組織。當論述各賦形劑類型時,提供穩定模式之簡要描述。
根據本文所提供之教示及導則,熟習此項技術者應瞭解在任何特定調配物中可包括多少量或範圍之賦形劑來獲得本發明之生物醫藥調配物,該賦形劑之量或範圍有助於該生物醫藥(例如蛋白質)穩定性之保持。例如,
包括在本發明生物醫藥調配物中之鹽的量及類型係根據最終溶液之所要滲透壓(亦即,等滲透壓、低滲透壓或高滲透壓)以及待要包括在該調配物中之其他組份的量及滲透壓進行選擇。
舉例而言,包括約5%山梨醇可達成等滲透壓,而需要約9%蔗糖賦形劑才能達成等滲透壓。可包括在本發明生物醫藥調配物內的一或多種賦形劑濃度之量或範圍的選擇已參考鹽、多元醇及糖而例示於上文。然而,熟習此項技術者應瞭解,本文所描述及參考特定賦形劑進一步例示之考慮因素同樣可用於賦形劑之所有類型及組合,例如包括鹽、胺基酸、其他張力劑、界面活性劑、穩定劑、膨脹劑、低溫保護劑、凍乾保護劑、抗氧化劑、金屬離子、螯合劑及/或防腐劑。
此外,若以莫耳濃度報導特定賦形劑,則熟習此項技術者應認可亦涵蓋溶液之當量百分率(%)w/v(例如,(溶液樣本中物質之公克數/溶液之毫升數)×100%)。
固然,一般熟習此項技術者應認可,本文所述之賦形劑濃度在特定調配物內具有互依性。舉例而言,若例如蛋白質濃度較高,或若例如穩定劑濃度較高,則可降低膨脹劑之濃度。此外,一般熟習此項技術者應認可,為了維持不含膨脹劑之特定調配物的等滲透壓性,因此要調節穩定劑之濃度(亦即,使用「張力調節(tonicifying)」量之穩定劑)。常用賦形劑在此項技術中眾所周知,且可在Powell等人,Compendium of Excipients fir Parenteral Formulations(1998),PDA J.Pharm.Sci.Technology,52:238-311中找到。
通常在較窄pH值範圍內觀察到藥理學活性蛋白質調配物之穩定性最大。此最優穩定性之pH值範圍需要在預調配研究早期確定。若干方法適用於此意圖,諸如加速穩定性研究及量熱篩檢研究(Remmele R.L.Jr.,等人,Biochemistry,38(16):5241-7(1999))。調配物一旦最終製成,即必須製造蛋白質且維持整個存放期。因此,在調配物中幾乎總是採用緩衝劑來控制pH值。
緩衝物質之緩衝能力在pH值等於pKa時最大,且隨pH值自此值增加或降低而降低。在其pKa之1個pH單位內,存在90%緩衝能力。緩衝能力亦隨緩衝液濃度增加而按比例增加。
當選擇緩衝液時,需要考慮若干因素。首先,需要根據緩衝液之pKa及所要調配物pH值來確定緩衝液種類及其濃度。保證緩衝液與蛋白質及其他調配物賦形劑相容,且不催化任何降解反應同樣重要。要考慮之第三重要態樣為投藥之後緩衝液可能誘發之刺痛感及刺激感。例如,已知檸檬酸鹽在注射之後會導致刺痛(Laursen T,等人,Basic Clin Pharmacol Toxicol.,98(2):218-21(2006))。對於經由皮下(SC)或肌肉內(IM)途徑投予之藥物,其中與藉由靜脈內(IV)途徑投藥(調配物在投藥之後快速稀釋至血液中)時相比,藥物溶液保持在注射位點之時段相對更長,刺痛及刺激之可能性更大。對於藉由直接IV輸注投藥之調配物,需要監控緩衝液(及任何其他調配物組份)之總量。不得不尤其留心以磷酸鉀緩衝液形式投予之鉀離子,其可能在患者中誘發心血管效應(Hollander-Rodriguez JC,等人,Am.Fam.Physician.,73(2):283-90(2006))。
用於凍乾調配物之緩衝液需要額外考慮。一些緩衝液(如磷酸鈉)在凍結期間可能自蛋白質無定形相結晶析出,從而導致pH改變。其他常見緩
衝液(諸如乙酸酯及咪唑)在凍乾處理期間可能會昇華或蒸發,從而在凍乾期間或復原之後改變調配物之pH值。
組成物中所存在之緩衝系統應加以選擇使得生理學上相容且可維持醫藥調配物之所要pH值。在一個具體實例中,溶液之pH值介於pH 2.0與pH 12.0之間。例如,溶液之pH值可能為2.0、2.3、2.5、2.7、3.0、3.3、3.5、3.7、4.0、4.3、4.5、4.7、5.0、5.3、5.5、5.7、6.0、6.3、6.5、6.7、7.0、7.3、7.5、7.7、8.0、8.3、8.5、8.7、9.0、9.3、9.5、9.7、10.0、10.3、10.5、10.7、11.0、11.3、11.5、11.7,或12.0。
pH緩衝化合物可以適合維持調配物之pH值處於預定水準的任何量存在。在一個具體實例中,pH緩衝液濃度介於0.1mM與500mM(1M)之間。例如,涵蓋pH緩衝劑為至少0.1、0.5、0.7、0.8、0.9、1.0、1.2、1.5、1.7、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、25、30、40、50、60、70、80、90、100、200,或500mM。
如本文中所陳述,用於緩衝調配物之例示性pH緩衝劑包括(但不限於)有機酸、甘胺酸、組胺酸、麩胺酸、丁二酸鹽、磷酸鹽、乙酸鹽、檸檬酸鹽、Tris、HEPES,及胺基酸或胺基酸混合物,包括(但不限於)天門冬胺酸、組胺酸及甘胺酸。在本發明之一個具體實例中,緩衝劑為檸檬酸鹽。
在本發明醫藥調配物之一個態樣中,添加穩定劑(或穩定劑之組合)以防止或減少儲存導致之聚集及化學降解。復原後之混濁或不透明溶液表明蛋白質已沈澱或至少已聚集。術語「穩定劑」意謂在水溶液狀態下能夠防止聚集或物理降解(包括化學降解,例如自溶作用、脫醯胺作用、氧化
作用,等等)的賦形劑。所涵蓋之穩定劑包括(但不限於)蔗糖、海藻糖、甘露糖、麥芽糖、乳糖、葡萄糖、棉子糖、纖維二糖、龍膽二糖、異麥芽糖、阿拉伯糖、葡糖胺、果糖、甘露醇、山梨醇、甘胺酸、鹽酸精胺酸、多羥基化合物(包括多醣,諸如聚葡萄糖、澱粉、羥乙基澱粉、環糊精、N-甲基吡咯啶酮(pyrollidene)、纖維素及玻尿酸)、氯化鈉[Carpenter等人,Develop.Biol.Standard 74:225,(1991)]。在本發明調配物中,穩定劑係以約0.1、0.5、0.7、0.8、0.9、1.0、1.2、1.5、1.7、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、30、40、50、60、70、80、90、100、200、500、700、900,或1000mM之濃度併入。在本發明之一個具體實例中,甘露醇及海藻糖用作穩定劑。
必要時調配物亦包括適量膨脹劑及滲透壓調節劑。膨脹劑包括例如(但不限於)甘露醇、甘胺酸、蔗糖、諸如聚葡萄糖、聚乙烯吡咯啶酮之聚合物、羧甲基纖維素、乳糖、山梨醇、海藻糖,或木糖醇。在一個具體實例中,膨脹劑為甘露醇。膨脹劑係以約0.1、0.5、0.7、0.8、0.9、1.0、1.2、1.5、1.7、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、30、40、50、60、70、80、90、100、200、500、700、900,或1000mM之濃度併入。
蛋白質具有與表面相互作用的較高傾向,從而使其對於空氣-液體、小瓶-液體,及液體-液體(矽油)界面處之吸附及變性較為敏感。已觀察到此降解途徑視蛋白質濃度而可逆,且導致形成可溶性及不可溶性蛋白質聚集體,或因表面吸附而損失溶液中之蛋白質。除容器表面吸附之外,表面導
致之降解作用因物理攪動而加劇,這會在產品運輸及處理期間經歷。
界面活性劑通常用於蛋白質調配物中以防止表面導致之降解作用。界面活性劑為能夠在與蛋白質競爭界面位置時勝出的兩性分子。界面活性劑分子之疏水性部分佔據界面位置(例如空氣/液體),同時該分子之親水性部分仍定向主體溶劑。在充分濃度(通常約為清潔劑之臨界微胞濃度)下,界面活性劑分子之表層用於防止蛋白質分子吸附在界面處。從而將表面導致之降解作用減至最低。本文中所涵蓋之界面活性劑包括(但不限於)聚乙氧基化去水山梨醇之脂肪酸酯,亦即,聚山梨醇酯20及聚山梨醇酯80。二者之不同僅在於賦予分子疏水性特性之脂肪鏈長度分別為C-12及C-18。因此,與聚山梨醇酯-20相比,聚山梨醇酯-80更具表面活性,且具有更低臨界微胞濃度。
清潔劑亦可影響蛋白質之熱力學構形穩定性。再次說明,指定清潔賦形劑之作用應具蛋白質特異性。例如,聚山梨醇酯已顯示可降低一些蛋白質之穩定性並增加其他蛋白質之穩定性。清潔劑使蛋白質不穩定可以清潔劑分子之疏水性尾部(其可參加與部分或完全未摺疊蛋白質狀態的特異性結合)的觀點進行解釋。此等類型之相互作用可導致構形平衡變為更膨脹之蛋白質狀態(亦即,增加互補蛋白質分子之疏水性部分暴露至結合聚山梨醇酯)。或者,若蛋白質天然狀態展現一些疏水表面,則與天然狀態結合之清潔劑可穩定該構形。
聚山梨醇酯之另一態樣在於其固有地對氧化降解敏感。其(作為原料)往往含有足量過氧化物從而導致蛋白質殘基側鏈(尤其甲硫胺酸)氧化。由添加穩定劑所產生的氧化破壞之可能性著重表明,應在調配物中使用最
低有效濃度的賦形劑。對於界面活性劑,針對指定蛋白質的有效濃度將視穩定機制而定。
在凍結及乾燥期間,亦添加適量界面活性劑以防止與表面相關之聚集現象[Chang,B,J.Pharm.Sci.85:1325,(1996)]。因而,例示性界面活性劑包括(但不限於)陰離子、陽離子、非離子、兩性離子,及兩性界面活性劑,包括來源於天然存在之胺基酸的界面活性劑。陰離子界面活性劑包括(但不限於)月桂基硫酸鈉、二辛基磺基丁二酸鈉及二辛基磺酸鈉、鵝去氧膽酸、N-月桂醯基肌胺酸鈉鹽、十二烷基硫酸鋰、1-辛烷磺酸鈉鹽、水合膽酸鈉、去氧膽酸鈉,及甘胺去氧膽酸鈉鹽。陽離子界面活性劑包括(但不限於)苯甲烷氯化銨或苯乙烷氯化銨、單水合十六烷基氯化吡啶鎓,及十六烷基三甲基溴化銨。兩性離子界面活性劑包括(但不限於)CHAPS、CHAPSO、SB3-10,及SB3-12。非離子界面活性劑包括(但不限於)毛地黃皂苷、Triton X-100、Triton X-114、TWEEN-20,及TWEEN-80。界面活性劑亦包括(但不限於)聚桂醇(lauromacrogol)400;硬脂酸聚乙二醇酯40;聚氧化乙烯氫化蓖麻油10、40、50及60;單硬脂酸甘油酯;聚山梨酸酯40、60、65及80;大豆卵磷脂及其他磷脂,諸如二油基磷脂醯膽鹼(DOPC)、二肉豆蔻醯基磷脂醯甘油(DMPG)、二肉豆蔻醯基磷脂醯膽鹼(DMPC)及二油基磷脂醯甘油(DOPG);蔗糖脂肪酸酯;甲基纖維素;及羧甲基纖維素。因此,進一步提供以個別形式或不同比率之混合物形式包含此等界面活性劑之組成物。在本發明之一個具體實例中,界面活性劑為TWEEN-80。在本發明調配物中,界面活性劑係以約0.01g/L至約0.5g/L之濃度併入。在所提供之調配物中,界面活性劑濃度為0.005、0.01、0.02、0.03、0.05、
0.06、0.07、0.08、0.09、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9或1.0g/L。
通常添加鹽以增加調配物之離子濃度,此舉對於蛋白質溶解度、物理穩定性及等滲透壓性可能較為重要。鹽可以各種方式影響蛋白質之物理穩定性。離子可藉由與蛋白質表面上之帶電殘基結合來穩定蛋白質之天然狀態。或者,鹽可藉由沿蛋白質骨架與肽基(-CONH-)結合來穩定變性狀態。鹽亦可藉由屏蔽蛋白質分子內殘基之間的靜電相互排斥作用來穩定蛋白質天然構形。蛋白質調配物中之鹽亦可屏蔽蛋白質分子之間的靜電相互吸引作用,該相互作用會導致蛋白質聚集且不溶解。在所提供之調配物中,鹽濃度介於0.1、1、10、20、30、40、50、80、100、120、150、200、300,與500mM之間。
胺基酸在蛋白質調配物中已尋得多種用途,如緩衝液、膨脹劑、穩定劑及抗氧化劑。因而,在一個態樣中,分別採用組胺酸及麩胺酸來緩衝pH值範圍為5.5-6.5及4.0-5.5的蛋白質調配物。組胺酸之咪唑基之pKa=6.0,且麩胺酸側鏈之羧基之pKa為4.3,此使得此等胺基酸適用於在其各別pH值範圍內進行緩衝。在該等情況下,麩胺酸尤其適用。組胺酸在市售蛋白質調配物中較為常見,且此胺基酸可替代檸檬酸,眾所周知,檸檬酸為注射後導致刺痛的緩衝液。有趣的是,亦已報導當以高濃度液體及凍乾形式使用時,組胺酸對聚集具有穩定效應(Chen B,等人,Pharm Res.,20(12):1952-60(2003))。其他人亦觀察到組胺酸可降低高蛋白質濃度調配物之黏度。然而,
在同一研究中,在於不鏽鋼容器中進行抗體凍融研究期間,作者在含組胺酸調配物中觀察到聚集及變色增加。關於組胺酸之另一注意事項為其在金屬離子存在下會光氧化(Tomita M,等人,Biochemistry,8(12):5149-60(1969))。甲硫胺酸在調配物中用作抗氧化劑看似有前景的;已觀察到其對許多氧化應力有效(Lam XM,等人,J Pharm Set,86(11):1250-5(1997))。
在許多態樣中,提供包括一個或多種胺基酸之調配物,甘胺酸、脯胺酸、絲胺酸、精胺酸及丙胺酸已顯示可藉由優先排除機制穩定蛋白質。甘胺酸亦為凍乾調配物中之常用膨脹劑。已證明精胺酸為抑制聚集之有效藥劑,且其已用於液體及凍乾調配物中。
在所提供之調配物中,胺基酸濃度介於0.1、1、10、20、30、40、50、80、100、120、150、200、300,與500mM之間。在本發明之一個具體實例中,胺基酸為甘胺酸。
蛋白質殘基氧化由許多不同的原因引起。除了添加特定抗氧化劑以外,預防蛋白質氧化破壞包括在整個製造處理及產物儲存期間小心控制許多因素,諸如大氣氧、溫度、光曝露,及化學污染。因此,本發明涵蓋使用醫藥抗氧化劑,包括(但不限於)還原劑、氧/自由基捕捉劑,或螯合劑。在一個態樣中,蛋白質治療調配物中之抗氧化劑可溶於水,且在整個產品存放期仍具活性。還原劑及氧/自由基捕捉劑藉由除去溶液中之活性氧物質而起作用。螯合劑(諸如EDTA)藉由結合可促進自由基形成之痕量金屬污染物而有效。例如,在酸性纖維母細胞生長因子之液體調配物中利用EDTA抑制半胱胺酸殘基之金屬離子催化氧化。
除各種賦形劑預防蛋白質氧化之效果以外,亦關心抗氧化劑自身導致蛋白質之其他共價或物理變化的可能性。例如,還原劑會導致分子內二硫鍵分裂,該分裂又會導致二硫化物改組。在過渡金屬離子存在下,抗壞血酸及EDTA已顯示可在許多蛋白質及肽中促進甲硫胺酸氧化(Akers MJ,及Defelippis MR.Peptides and Proteins as Parenteral Solutions.Pharmaceutical Formulation Development of Peptides and Proteins.Sven Frokjaer,Lars Hovgaard編.Pharmaceutical Science.Taylor及Francis,UK(1999));Fransson J.R.,J.Pharm.Sci.86(9):4046-1050(1997);Yin J,等人,Pharm Res.,21(12):2377-83(2004))。已報導硫代硫酸鈉可降低rhuMab HER2中光及溫度誘導之甲硫胺酸氧化的程度;然而,此研究中亦報導硫代硫酸鹽-蛋白質加合物之形成(Lam XM,Yang JY,等人,J Pharm Sci.86(11):1250-5(1997))。選擇適當抗氧化劑係根據蛋白質之特定應力及敏感度進行。在某些態樣中,所涵蓋之抗氧化劑包括(但不限於)還原劑及氧/自由基捕捉劑、EDTA,及硫代硫酸鈉。
一般而言,在蛋白質調配物中不需要過渡金屬離子,此係由於其可催化蛋白質中之物理及化學降解反應。然而,當特定金屬離子為蛋白質輔因子時,其可包括在調配物中;且若其形成配位錯合物,則可包括在蛋白質之懸浮液調配物中(例如胰島素之鋅懸浮液)。最近,已建議使用鎂離子(10-120mM)抑制天門冬胺酸異構化形成異天門冬胺酸(WO 2004039337)。
金屬離子賦予蛋白質穩定性或增加蛋白質活性的兩個實例為人類脫氧核糖核酸酶(rhDNase,Pulmozyme®)及因子VIII。在rhDNase情況下,Ca+2離子(至多100mM)藉由特定結合位點增加酶之穩定性(Chen B,等人,J Pharm Sci.,88(4):477-82(1999))。實際上,用EGTA自溶液移除鈣離子會導致脫醯胺作用及聚集增加。然而,經觀察此作用僅與Ca+2離子相關;經觀察,其他二價陽離子Mg+2、Mn+2及Zn+2使rhDNase不穩定。在因子VIII中觀察到類似效應。Ca+2及Sr+2離子穩定蛋白質;而其他如Mg+2、Mn+2及Zn+2、Cu+2及Fe+2使酶不穩定(Fatouros,A.,等人,Int.J.Pharm.,155,121-131(1997))。在關於因子VIII之獨立研究中,在Al+3離子存在下觀察到聚集率顯著增加(Derrick TS,等人,J.Pharm.Sci.,93(10):2549-57(2004))。作者指出,其他賦形劑(如緩衝鹽)通常經Al+3離子污染,且說明需要在調配產物中使用具適當品質之賦形劑。
當開發多次用量非經腸調配物(其涉及自同一容器取出一次以上)時,必需防腐劑。其主要功能為在整個存放期內或使用藥品時,抑制微生物生長且確保產品無菌。常用防腐劑包括(但不限於)苯甲醇、苯酚及間甲酚。雖然防腐劑具有較長使用歷史,但開發包括防腐劑之蛋白質調配物仍具挑戰性。防腐劑幾乎一向具有使蛋白質不穩定之效應(聚集),且此已變成限制其在多劑量蛋白質調配物中使用的主要因素(Roy S,等人,J Pharm Sci.,94(2):382-96(2005))。
迄今為止,大部分蛋白質藥物已經調配僅供單次使用。然而,當多劑量調配物有可能存在時,其賦予患者便利之優勢將增加,且增加市場性。一個良好實例為人類生長激素(hGH),所開發之防腐調配物已將更便利、可多次使用之注射筆形式商業化。在市場上現可獲得至少4種含有hGH防腐調配物之該等筆器件。Norditropin®(液體,Novo Nordisk)、Nutropin AQ®
(液體,Genentech)& Genotropin(凍乾雙腔藥筒,Pharmacia & Upjohn)含有苯酚,而Somatrope®(Eli Lilly)係以間甲酚調配。
在防腐劑型之調配物開發期間需要考慮若干態樣。在藥品中,有效防腐劑濃度必須經優化。此需要在具有賦予抗微生物效果而不損害蛋白質穩定性之濃度範圍的劑型中測試指定防腐劑。例如,在開發介白素-1受體(I型)之液體調配物時,藉由使用差示掃描量熱術(DSC)成功篩檢出三種防腐劑。根據防腐劑在通常用於市售產品中之濃度下對穩定性之影響將其按順序分級(Remmele RL Jr.,等人,Pharm Res.,15(2):200-8(1998))。
與凍乾調配物相比,開發含防腐劑之液體調配物更具挑戰性。凍乾產品可在無防腐劑的情況下凍乾,且在使用時用含防腐劑之稀釋劑復原。此顯著縮短防腐劑與蛋白質接觸之時間,從而將相關穩定性風險最小化。對於液體調配物,不得不在整個產品存放期內維持防腐效果及穩定性(約18-24個月)。一個重要注意點為,在含活性藥物及所有賦形劑組份之最終調配物中必須顯示防腐效果。
一些防腐劑可引起注射位點反應,此為選擇防腐劑時需要考慮的另一因素。在聚焦於評估Norditropin中之防腐劑及緩衝液的臨床試驗中,與含間甲酚之調配物相比,在含苯酚及苯甲醇之調配物中觀察到疼痛感降低(Kappelgaard A.M.,Horm Res.62 Suppl 3:98-103(2004))。有趣的是,在常用防腐劑中,苯甲醇具備麻醉性(Minogue SC,及Sun DA.,Anesth Analg.,100(3):683-6(2005))。在多個態樣中,防腐劑之使用提供比任何副作用均重要的效益。
本發明進一步涵蓋製備醫藥調配物之方法。
本發明方法進一步包含一個或多個以下步驟:在凍乾之前向該混合物中添加如本文所描述之穩定劑;在凍乾之前向該混合物中添加至少一種選自膨脹劑、等滲透壓調節劑及界面活性劑之藥劑,各藥劑均如本文所描述。
凍乾物質之標準復原實務為回添一定體積的注射用純水或無菌水(WFI)(通常等於在凍乾期間移除之體積),雖然抗細菌劑之稀釋溶液有時用於產生供非經腸投藥之醫藥[Chen,Drug Development and Industrial Pharmacy,18:1311-1354(1992)]。因此,提供製備復原rVWF組成物之方法,該方法包含向本發明之凍乾rVWF組成物中添加稀釋劑的步驟。
凍乾物質可復原成水溶液。各種水性載劑,例如注射用無菌水、用於多劑量使用的具有防腐劑之水,或具有適量界面活性劑之水(例如,含有活性化合物與適用於製造水性懸浮液之賦形劑之混合物的水性懸浮液)。在許多態樣中,該等賦形劑為懸浮劑,例如(但不限於)羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、海藻酸鈉、聚乙烯吡咯啶酮、黃蓍膠(gum tragacanth)及阿拉伯膠(gum acacia);分散劑或潤濕劑為天然存在之磷脂(例如(但不限於)卵磷脂),或環氧烷與脂肪酸之縮合產物(例如(但不限於)聚氧化乙烯硬脂酸酯),或環氧乙烷與長鏈脂族醇(例如(但不限於)十七伸乙基氧基十六醇)之縮合產物,或環氧乙烷與衍生自脂肪酸及己糖醇之偏酯的縮合產物(諸如聚氧化乙烯山梨醇單油酸酯),或環氧乙烷與衍生自脂肪酸及己糖醇酐之偏酯的縮合產物(例如(但不限於)聚乙烯脫水山梨醇單油酸酯)。在多個態樣中,水性懸浮液亦含有一或多種防腐劑,例如(但不限於)對羥基苯甲酸乙酯或對羥基苯甲酸正丙酯。
在一個態樣中,為了向人類或試驗動物投予組成物,組成物包含一或多種醫藥學上可接受之載劑。片語「醫藥學上」或「藥理學上」可接受係指當使用此項技術中眾所周知的途徑投藥(如下文所描述)時,分子整體及組成物穩定、可抑制蛋白質降解(諸如聚集及分裂產物),且此外不產生過敏或其他有害反應。「醫藥學上可接受之載劑」包括任何及所有臨床上適用之溶劑、分散介質、包衣劑、抗細菌劑及抗真菌劑、等滲透壓及吸收延遲劑及類似物,包括上文所揭示之藥劑。
醫藥調配物係經口、局部、經皮、非經腸、藉由吸入噴霧、經陰道、經直腸或藉由顱內注射而投予。如本文中所使用之術語非經腸包括皮下注射、靜脈內注射、肌肉內注射、腦池內注射或輸注技術。亦涵蓋在特定部位藉由靜脈內、皮內、肌肉內、乳房內、腹膜內、鞘內、眼球後、肺內注射及/或外科植入進行投藥。一般而言,組成物基本上不含熱原以及可能對接受者有害的其他雜質。
組成物之單次或多次投藥係根據治療醫師所選擇之劑量濃度及模式來進行。出於預防或治療疾病之目的,適當劑量取決於待治療之疾病類型,如上文所定義;疾病之嚴重程度及進程;是出於預防還是出於治療目的投予藥物;先前療法;患者之臨床病史及對藥物之反應;及主治醫師之判斷。
作為附加態樣,本發明包括包含一或多種凍乾組成物之套組,該等組成物係以有助於其投予個體使用的方式包裝。在一個具體實例中,該套組包括本文所描述之醫藥調配物(例如包含治療蛋白質或肽的組成物),該調
配物包裝在諸如密封瓶或密封器皿之容器中,描述化合物或組成物在實施該方法中之用途的標籤係黏貼至容器或包括在該包裝中。在一個具體實例中,醫藥調配物係包裝在容器中,以致容器中之頂部空間量(例如,液體調配物與容器頂部之間的空氣量)極小。頂部空間量較佳可忽略(亦即,幾乎為零)。在一個具體實例中,套組含有具有治療蛋白質或肽組成物的第一容器及具有該組成物之生理學上可接受之復原溶液的第二容器。在一個態樣中,醫藥調配物係包裝在單位劑型中。套組可進一步包括適用於根據特定投藥途徑投予醫藥調配物的器件。套組較佳含有描述醫藥調配物之用途的標籤。
涉及治療本文所描述之病狀之方法的用藥方案將由主治醫師考慮可改變藥物作用的各種因素來確定,該等因素例如患者年齡、病狀、體重、性別及飲食、任何感染之嚴重程度、投藥時間及其他臨床因素。舉例而言,本發明之重組VWF的典型劑量為約50U/kg,等於500μg/kg。
在一個態樣中,本發明調配物係藉由初始快速推注接著連續輸注來進行投藥,以維持藥品之治療循環濃度。作為另一實例施,本發明化合物係以一次劑量形式投藥。一般熟習此項技術者將容易地優化有效劑量及投藥方案,如根據良好醫學實務及個別患者之臨床病狀所確定。用藥頻率取決於藥劑之藥物動力學參數及投藥途徑。最優醫藥調配物係由熟習此項技術者視投藥途徑及所要劑量來確定。例如參看Remington's Pharmaceutical Sciences,第18版(1990,Mack Publishing公司,Easton,PA 18042)第1435-1712頁,該文獻之揭示內容以引用的方式併入本文中。該等調配物影響所投予
之藥劑的物理狀態、穩定性、活體內釋放速率,及活體內清除速率。視投藥途徑不同,適合劑量係根據體重、身體表面積或器官大小來計算。可藉由使用用於測定血液濃度劑量之既定檢定連同適當劑量反應資料來確定適當劑量。最終用藥方案係由主治醫師考慮可改變藥物作用的各種因素來確定,該等因素例如藥物之比活性、損傷之嚴重程度及患者之反應性、患者年齡、病狀、體重、性別及飲食、任何感染之嚴重程度、投藥時間及其他臨床因素。隨著研究進行,將出現關於各種疾病及病狀之適當劑量濃度及治療持續時間的其他資訊。
以下實施例不意欲具有限制意義,而是僅例示本發明之特定具體實例。
為了測定rVWF在各種調配物中之沈澱量,在各種條件下測試rVWF在紊亂搖動之後的聚集程度。
如下表1中所示,在20mM檸檬酸鹽緩衝液(pH 7.3)中評定各種rVWF調配物。設計搖動實驗以模擬機械應力條件。1-2ml各調配物用實驗室搖動器以1200rpm搖動10分鐘。
可見VWF聚集物之評定係根據以下所示之方案進行。在大部分情況下,「可見聚集物」為大小介於約100nm至1-2cm範圍內的凝膠纖維。
搖動實驗之結果示於下表2中。
總之,上述搖動實驗表明,含有Tween-80及甘露醇之調配物提供最佳結果(亦即,聚集量最小)。
設計凍融實驗以評定由重複凍結及解凍所導致之應力的影響。除了用於搖動實驗之上述調配物(表1)以外,亦評定以下調配物(表3及表4):
所有調配物均在冰箱中於-20℃下凍結約1小時,且接著在室溫下解凍。結果示於下表5中。
如上所示,海藻糖提供最佳結果(亦即,聚集量最小)。
設計凍乾實驗以評定各種調配物形成凍乾塊的能力,該凍乾塊在10分鐘內溶解且獲得澄清溶液。亦進行加速穩定性研究以證明生物活性無顯著損失。
下表6中所示之調配物係用氮氣凍乾器TS20002根據製造商說明書凍乾。凍乾總時間約為72小時。以下調配物亦各含有20g/L甘露醇及0.1g/LTween-80。
凍乾實驗之結果示於下表7中。
如上所示,檸檬酸鹽或HEPES緩衝液與胺基酸組合獲得澄清溶液。
為了評定經復原之凍乾rVWF的穩定性,進行VWF:Ag及VWF:RCo測試。VWF:Ag對應可在VWF特異性ELISA中使用多株抗VWF抗體偵測到的VWF量;而VWF:RCo對應在瑞斯特黴素(ristocetin)存在下導致穩定之血小板凝集的VWF量。樣本在40℃下儲存。假定阿瑞尼氏方程式(Arrhenius equation)適用,則在40℃下一個月之穩定性約與在4℃下一年之穩定性相等。穩定性實驗之結果示於下表8及表9中。
ELISA之標準偏差在10%-20%範圍內。上述結果表明,所有測試調配物在40℃下經8週均具有良好穩定性。
若在調配物中使用不同的胺基酸(例如15mM或20mM之甘胺酸、離胺酸或組胺酸),且若改變檸檬酸鹽緩衝液(例如,15、20或25mM),則又進行穩定性實驗。如上所述,使用VWF:RCo活性檢定監控rVWF之穩定性。即使在13個月之後,對於在40℃下儲存之rVWF穩定性樣本亦未觀察到VWF:RCo活性值顯著差異。量測值之顯著性用t-檢驗進行檢驗。檢定之中間精密度係藉由計算變異數係數來確定。在所有系列穩定性資料中,CV均小於20%,且滿足CV<20%之驗證標準。基於以上所述,可得出以下結論:rVWF在所測試之所有檸檬酸鹽緩衝系統中均穩定,而與緩衝液莫耳濃度及所添加之胺基酸無關。即使當在40℃下儲存至少13個月時,rVWF仍穩定。
使用VWF:RCo活性檢定進行之效力測定在CV值小於20%的情況下顯示良好中間精密度。
因而,鑒於本文中呈現之資料,建議包括15mM檸檬酸鹽(二水合檸檬酸三鈉)、15mM甘胺酸、10g/L海藻糖、20g/L甘露醇、0.1g/L Tween-80(pH 7.3)的rVWF調配物。
進行研究以評估在推薦儲存條件及高儲存條件下儲存之rVWF最終藥品(FDP)的穩定性。來自高儲存條件之資料保證溫度偏差將不會影響rVWF FDP之品質,且將在不存在即時、真實條件穩定性資料時用於外推該物質之可接受有效條件。
當前規格為3.0%殘餘水分(如使用卡爾.費歇爾法(Karl Fischer Method)所測定)。批次rVWFF#4FC、rVWFF#5FC、rVWFF#6FC及rVWFF#7FC分別釋放1.2%、1.3%、1.2%及1.5%之水分含量。基於過去對具有類似小瓶及塞子構造之其他產品的經驗,預計在建議存放期(亦即,在5℃±3℃之預定儲存溫度下24個月)末期,釋放約1.3%殘餘水分的任何rVWF批次均將符合3.0%之規格界限。
使用已製成之4個rVWF FDP批次,在所推薦之儲存條件(亦即5℃±3℃)及高溫(亦即40℃±2℃)下進行長期穩定性研究。此等研究已提供充分資料,以便比較個別臨床批次之穩定性特性。
在表10中可獲得穩定性方案,包括穩定性指示檢定及穩定性接受標準
之描述,表10亦含有與穩定性研究中所評估之rVWF FDP批次相關的資訊。
總體穩定性(24個月)之匯總及論述
所呈現之rVWF FDP穩定性資料包含下列:1. 批次rVWF#1FC在5℃±3℃(完成測試)下之24個月長期研究資料及在30℃±2℃(完成測試)下之6個月中間資料;2. 批次rVWF#2FC在5℃±3℃(完成測試)下之6個月資料;3. 批次rVWF#3FC在2-8℃(完成測試)下之24個月長期研究資料,在30℃±2℃下之6個月資料,及在40℃±2℃(完成測試)下之3個月資料;4. 批次rVWFF#4FC在5℃±3℃下之24個月穩定性資料及在40℃±2℃下之9個月資料;5. 批次rVWFF#5FC在5℃±3℃下之24個月穩定性資料及在40℃±2℃下之9個月資料;
6. 批次rVWFF#6FC在5℃±3℃下之12個月穩定性資料及在40℃±2℃下之9個月資料;及7. 批次rVWFF#7FC在5℃±3℃下之12個月穩定性資料及在40℃±2℃下之9個月資料。
在批次rVWFF#4FC、rVWFF#5FC、rVWFF#6FC及rVWFF#7FC之殘餘水分中所觀察到之變化仍遠低於接受標準3%,且不影響功能活性(VWF:RCo)。對於適用於非臨床研究及臨床研究中的所製造批次,定性分析技術(亦即外觀、SDS-PAGE分析,等等)之穩定性結果中不存在可觀察到的變化。類似地,對於總蛋白質分析、VWF:Ag分析或在儲存期間所觀察之VWF多聚體數目,不存在穩定性降低之趨勢。
批次rVWF#1FC、rVWF#2FC及rVWF#3FC所呈現之VWF:RCo活性與VWF:Ag活性之比及VWF:RCo資料二者的變化可能為測試方法變化之結果,實際上,個別VWF:RCo穩定性測試結果由一個穩定性樣本之單次測定資料及/或來自不符合歐洲藥典(non-Ph.Eur.-conforming)法之檢定方法的資料組成。在將檢定方法變成符合歐洲藥典之檢定之後,使用原檢定方法及新檢定方法測試非臨床批次之所有測試時間點。
大規模製造出之rVWF FDP展現與實驗規模下製造出之rVWF FDP批次相似的穩定性特性。此等rVWF FDP批次在5℃±3℃下儲存高達24個月仍維持VWF:RCo活性。當前,甚至在30℃±2℃下儲存6個月或在40℃±2℃下儲存9個月之後,大規模批次樣本中VWF多聚體類型在穩定性方面亦無變化。表11展示在40℃±2℃於應力條件下儲存之批次rVWF#4FC、rVWF#5FC、rVWF#6FC及rVWF#7FC之VWF:RCo、VWF:Ag、VWF多聚體類型的結果。
該等結果表明,在高溫儲存條件下穩定性為9個月可外推成在環境溫度下或甚至在冷藏條件下存放期為3年以上。
協方差分析(ANCOVA分析)顯示,回歸線之斜率差(批次rVWFF#4FC、rVWFF#5FC、rVWFF#6FC及rVWFF#7FC,在5℃±3℃儲存)不顯著(p=0.906),從而可按照ICH Q1A(R2)中所描述合併VWF:RCo活性資料。個別批次之趨勢線的高度差亦不顯著。如圖1所示,對所合併之最壞狀況斜率(worse case slope)進行外推,顯示信賴區間完全處於最少24個月之接受標準內。平均曲線之下信賴區間在51個月時降低至80%初始活性(在歐洲藥典中,對於人類馮威里氏因子,80%亦為估計效力與所陳述效力之間的最大差異)。所合併之最壞狀況斜率顯示,VWF:RCo每月降低0.0344 U。此比較顯示,rVWF FDP之穩定性特性,特別是VWF:RCo活性不會由於產生方法之變化而改變。上述外推支持當在推薦儲存溫度下儲存時,rVWF FDP之臨時存放期可擴充至24個月。
水分自塞子向凍乾製品轉移取決於塞子材料,且受塞子在滅菌後的殘餘水分、儲存樣本時的濕度及塞子固有水分轉移速率影響。如圖2中所示,在5℃±3℃儲存之批次rVWFF#4FC、rVWFF#5FC、rVWFF#6FC及rVWFF#7FC的殘餘水分類似(斜率比較之差異不顯著,p=0.734)。在高溫條件40℃±2℃下儲存之批次亦顯示,經9個月之殘餘水分增加類似(圖3)。在此,ANCOVA分析顯示,回歸線斜率之差異類似(p=0.546)。圖3顯示最壞狀況合併斜率外推至多達24個月。
當在5℃±3℃下儲存時,此等資料足以支持使用批次rVWFF#6FC及rVWFF#7FC持續所描述之24個月有效期。
rVWF FDP之推薦儲存條件為5℃±3℃。因此,當在所推薦儲存條件下儲存時,建議rVWF FDP之臨時存放期為24個月。rVWF FDP批次之存放期有可能根據其他資料進一步延長以獲得更長儲存期。
<110> 史耐克等人
<120> 凍乾的重組VWF調配物
<130> TW103141771
<150> US-61/107,273
<151> 2008-10-21
<160> 3
<170> PatentIn 3.5版
<210> 1
<211> 8833
<212> DNA
<213> 智慧人
<400> 1
<210> 2
<211> 2783
<212> PRT
<213> 智慧人
<400> 2
<210> 3
<211> 2050
<212> PRT
<213> 智慧人
<400> 3
Claims (17)
- 一種重組馮威里氏因子(recombinant von Willebrand Factor;rVWF)之穩定凍乾醫藥調配物,其包含:(a)rVWF;(b)一或多種緩衝劑;(c)一或多種胺基酸;(d)一或多種穩定劑;及(e)一或多種界面活性劑;其中該調配物係藉由將包含以下者之溶液凍乾來製備:(a)該rVWF包含選自由以下者所組成之群組的多肽:(1)在SEQ ID NO:3中所列出之胺基酸序列;(2)(1)之類似物、片段或變異體,其能夠在瑞斯特黴素(ristocetin)的存在下使經穩定化之血小板凝集,或能夠結合至因子VIII;(3)由在SEQ ID NO:1中所列出之多核苷酸編碼的多肽;(4)(3)之類似物、片段或變異體,其能夠在瑞斯特黴素的存在下使經穩定化之血小板凝集,或能夠結合至因子VIII;(5)由在中度嚴格雜交條件下與SEQ ID NO:1中所列出之多核苷酸雜交的多核苷酸編碼的多肽,其中該多肽能夠在瑞斯特黴素的存在下使經穩定化之血小板凝集,或能夠結合至因子VIII;(b)該緩衝液包含在約0.1mM至約500mM的範圍內的pH緩衝劑,且其pH在約2.0至約12.0的範圍內;其中該緩衝劑為檸檬酸鹽;(c)該胺基酸之濃度為約1mM至約500mM;其中該胺基酸為甘胺酸;(d)該穩定劑之濃度為約0.1mM至約1000mM;其中該一或多種穩定劑為甘露醇及海藻糖;及(e)該界面活性劑之濃度為約0.01g/L至約0.5g/L;其中該界面活性劑是TWEEN-80。
- 根據請求項1的調配物,其中該rVWF包含在SEQ ID NO:3中所列出之胺基酸序列。
- 根據請求項1的調配物,其中該溶液之pH是在約6.0至約8.0的範 圍內,或約6.5至約7.5的範圍內。
- 根據請求項1的調配物,其中該緩衝劑是檸檬酸鹽且該pH為約7.3。
- 根據請求項1的調配物,其中該胺基酸在溶液中的濃度在約0.5mM至約300mM的範圍內。
- 根據請求項5的調配物,其中該胺基酸是在溶液中濃度為約15mM的甘胺酸。
- 根據請求項1的調配物,其中該rVWF包含在SEQ ID NO:3中所列出之胺基酸序列;其中該溶液之緩衝劑為檸檬酸鹽且該pH為約7.3;且其中該胺基酸是在溶液中濃度為約15mM的甘胺酸。
- 根據請求項1的調配物,其中該穩定劑是在溶液中濃度為約10g/L的海藻糖及在溶液中濃度為約20g/L的甘露醇。
- 根據請求項1的調配物,其中該界面活性劑是在溶液中約0.01g/L的TWEEN-80。
- 根據請求項1的調配物,其中該rVWF包含在SEQ ID NO:3中所列出之胺基酸序列;其中該溶液之緩衝劑是在溶液中濃度為約15mM、pH約7.3的檸檬酸鹽;其中該胺基酸是在溶液中濃度為約15mM的甘胺酸;其中該穩定劑是在溶液中濃度為約10g/L的海藻糖及在溶液中濃度為約20g/L的甘露醇;且其中該界面活性劑是在溶液中約0.1g/L的TWEEN-80。
- 一種重組馮威里氏因子(rVWF)之穩定凍乾醫藥調配物,其包含:(a)rVWF;(b)一或多種緩衝劑;(c)一或多種胺基酸;(d)一或多種穩定劑;及(e)一或多種界面活性劑;其中該調配物係藉由將包含以下者之溶液凍乾來製備:(a)該rVWF包含選自由以下者所組成之群組的多肽:(1)在SEQ ID NO:3中所列出之胺基酸序列;(2)(1)之類似物、片段或變異體,其能夠在瑞斯特黴素的存在下使經穩 定化之血小板凝集,或能夠結合至因子VIII;(3)由在SEQ ID NO:1中所列出之多核苷酸編碼的多肽;(4)(3)之類似物、片段或變異體,其能夠在瑞斯特黴素的存在下使經穩定化之血小板凝集,或能夠結合至因子VIII;(5)由在中度嚴格雜交條件下與SEQ ID NO:1中所列出之多核苷酸雜交的多核苷酸編碼的多肽,其中該多肽能夠在瑞斯特黴素的存在下使經穩定化之血小板凝集,或能夠結合至因子VIII;(b)該緩衝液包含在約0.1mM至約500mM的範圍內的pH緩衝劑,且其pH在約6.5至約7.5的範圍內;其中該緩衝劑為檸檬酸鹽;(c)該胺基酸之濃度為約1mM至約500mM;其中該胺基酸為甘胺酸;(d)該穩定劑之濃度為約0.1mM至約1000mM;其中該一或多種穩定劑為甘露醇及海藻糖;及(e)該界面活性劑之濃度為約0.01g/L至約0.5g/L;其中該界面活性劑是TWEEN-80。
- 一種重組馮威里氏因子(rVWF)之穩定凍乾醫藥調配物,其包含:(a)rVWF;(b)一或多種緩衝劑;(c)一或多種胺基酸;(d)一或多種穩定劑;及(e)一或多種界面活性劑;其中該調配物係藉由將包含以下者之溶液凍乾來製備:(a)該rVWF包含選自由以下者所組成之群組的多肽:(1)在SEQ ID NO:3中所列出之胺基酸序列;(2)(1)之類似物,其能夠在瑞斯特黴素的存在下使經穩定化之血小板凝集,或能夠結合至因子VIII;(3)由在SEQ ID NO:1中所列出之多核苷酸編碼的多肽;(4)(3)之類似物,其能夠在瑞斯特黴素的存在下使經穩定化之血小板凝集,或能夠結合至因子VIII; (5)由在中度嚴格雜交條件下與SEQ ID NO:1中所列出之多核苷酸雜交的多核苷酸編碼的多肽,其中該多肽能夠在瑞斯特黴素的存在下使經穩定化之血小板凝集,或能夠結合至因子VIII;(b)該緩衝液包含在約0.1mM至約500mM的範圍內的pH緩衝劑,且其pH在約6.5至約7.5的範圍內;其中該緩衝劑為檸檬酸鹽;(c)該胺基酸之濃度為約1mM至約500mM;其中該胺基酸為甘胺酸;(d)該穩定劑之濃度為約0.1mM至約1000mM;其中該一或多種穩定劑為甘露醇及海藻糖;及(e)該界面活性劑之濃度為約0.01g/L至約0.5g/L;其中該界面活性劑是TWEEN-80。
- 一種重組馮威里氏因子(rVWF)之穩定凍乾醫藥調配物,其包含:(a)rVWF;(b)一或多種緩衝劑;(c)一或多種胺基酸;(d)一或多種穩定劑;及(e)一或多種界面活性劑;其中該調配物係藉由將包含以下者之溶液凍乾來製備:(a)該rVWF包含選自由以下者所組成之群組的多肽:(1)在SEQ ID NO:3中所列出之胺基酸序列;(2)(1)之類似物,其能夠在瑞斯特黴素的存在下使經穩定化之血小板凝集,或能夠結合至因子VIII;(3)由在SEQ ID NO:1中所列出之多核苷酸編碼的多肽;(4)(3)之類似物,其能夠在瑞斯特黴素的存在下使經穩定化之血小板凝集,或能夠結合至因子VIII;(5)由在中度嚴格雜交條件下與SEQ ID NO:1中所列出之多核苷酸雜交的多核苷酸編碼的多肽,其中該多肽能夠在瑞斯特黴素的存在下使經穩定化之血小板凝集,或能夠結合至因子VIII;(b)該溶液的緩衝劑是濃度為15mM的檸檬酸鹽,且pH為約7.3; (c)該胺基酸是在溶液中濃度為約15mM的甘胺酸;(d)該穩定劑是在溶液中濃度為約10g/L的海藻糖及在溶液中濃度為約20g/L的甘露醇;及(e)該界面活性劑是在溶液中約0.1g/L的TWEEN-80。
- 一種重組馮威里氏因子(rVWF)之穩定凍乾醫藥調配物,其包含:(a)rVWF;(b)一或多種緩衝劑;(c)一或多種胺基酸;(d)一或多種穩定劑;及(e)一或多種界面活性劑;其中該調配物係藉由將包含以下者之溶液凍乾來製備:(a)該rVWF包含選自由以下者所組成之群組的多肽:(1)在SEQ ID NO:3中所列出之胺基酸序列;(2)(1)之類似物,其能夠結合至因子VIII;(3)由在SEQ ID NO:1中所列出之多核苷酸編碼的多肽;(4)(3)之類似物,其能夠結合至因子VIII;(5)由在中度嚴格雜交條件下與SEQ ID NO:1中所列出之多核苷酸雜交的多核苷酸編碼的多肽,其中該多肽能夠結合至因子VIII;(b)該溶液的緩衝劑是濃度為15mM的檸檬酸鹽,且pH為約7.3;(c)該胺基酸是在溶液中濃度為約15mM的甘胺酸;(d)該穩定劑是在溶液中濃度為約10g/L的海藻糖及在溶液中濃度為約20g/L的甘露醇;及(e)該界面活性劑是在溶液中約0.1g/L的TWEEN-80。
- 一種重組馮威里氏因子(rVWF)之穩定凍乾醫藥調配物,其由以下者組成:(a)rVWF;(b)一或多種緩衝劑;(c)一或多種胺基酸;(d)一或多種穩定劑;及(e)一或多種界面活性劑;其中該調配物係藉由將溶液凍乾來製備;其中該rVWF包含在SEQ ID NO:3中所列出之胺基酸序列;其中該緩 衝劑是pH約7.3、在溶液中濃度為約15mM的檸檬酸鹽;其中該胺基酸是在溶液中濃度為約15mM的甘胺酸;其中該穩定劑是在溶液中濃度為約10g/L的海藻糖及在溶液中濃度為約20g/L的甘露醇;且其中該界面活性劑是在溶液中約0.1g/L的TWEEN-80。
- 一種重組馮威里氏因子(rVWF)之穩定凍乾醫藥調配物,其由以下者組成:(a)rVWF;(b)一或多種緩衝劑;(c)一或多種胺基酸;(d)一或多種穩定劑;及(e)一或多種界面活性劑;其中該調配物係藉由將溶液凍乾來製備;其中該rVWF包含在SEQ ID NO:3中所列出之胺基酸序列;其中該緩衝劑是pH約7.3、在溶液中濃度為約15mM的檸檬酸鹽;其中該胺基酸是在溶液中濃度為約15mM的甘胺酸;其中該穩定劑是在溶液中濃度為約10g/L的海藻糖及在溶液中濃度為約20g/L的甘露醇;且其中該界面活性劑是在溶液中約0.1g/L的TWEEN-80,其係用於靜脈內投予。
- 一種重組馮威里氏因子(rVWF)之穩定凍乾醫藥調配物,其包含:(a)rVWF;(b)一或多種緩衝劑;(c)一或多種胺基酸;(d)一或多種穩定劑;及(e)一或多種界面活性劑;其中該調配物係藉由將溶液凍乾來製備;其中該rVWF包含在SEQ ID NO:3中所列出之胺基酸序列;其中該緩衝劑是pH約7.3、在溶液中濃度為約15mM的檸檬酸鹽;其中該胺基酸是在溶液中濃度為約15mM的甘胺酸;其中該穩定劑是在溶液中濃度為約10g/L的海藻糖及在溶液中濃度為約20g/L的甘露醇;且其中該界面活性劑是在溶液中約0.1g/L的TWEEN-80,其係用於靜脈內投予。
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KR101969515B1 (ko) * | 2011-06-10 | 2019-04-16 | 박스알타 인코퍼레이티드 | 재조합 vwf의 투여에 의한 응고 질환의 치료 |
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WO2014141149A1 (en) * | 2013-03-15 | 2014-09-18 | Glaxosmithkline Intellectual Property (No.2) Limited | Formulations with reduced viscosity |
NL1040254C2 (en) * | 2013-05-17 | 2014-11-24 | Ablynx Nv | Stable formulations of immunoglobulin single variable domains and uses thereof. |
EP3158055B1 (en) | 2014-06-13 | 2019-09-11 | CSL Limited | Improved production of recombinant von willebrand factor in a bioreactor |
CA2977519A1 (en) * | 2015-02-27 | 2016-09-01 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Nebulized cav-1 polypeptide therapeutics and uses thereof |
BE1023343B1 (nl) * | 2015-05-20 | 2017-02-09 | Mycartis Nv | Opslagbuffer |
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CA3069256A1 (en) * | 2017-07-07 | 2019-01-10 | Baxalta Incorporated | Treatment of patients with severe von willebrand disease undergoing elective surgery by administration of recombinant vwf |
EP3672644A1 (en) | 2017-08-23 | 2020-07-01 | CSL Behring GmbH | Method for virus filtration of von willebrand factor |
JP2021519280A (ja) | 2018-03-21 | 2021-08-10 | バクスアルタ インコーポレイテッド | クロマトグラフィー法によるvwfとvwfプロペプチドの分離 |
US11905336B2 (en) | 2018-09-10 | 2024-02-20 | Lung Therapeutics, Inc. | Modified peptide fragments of CAV-1 protein and the use thereof in the treatment of fibrosis |
CN113645993A (zh) | 2019-02-01 | 2021-11-12 | 武田药品工业株式会社 | 使用重组VWF(rVWF)进行预防性治疗的方法 |
JP2022547556A (ja) | 2019-09-11 | 2022-11-14 | 武田薬品工業株式会社 | フォン・ヴィレブランド因子と補体c1qの複合体に関連する治療法 |
TW202134266A (zh) | 2020-02-04 | 2021-09-16 | 日商武田藥品工業股份有限公司 | 藉由投予重組vwf治療患有嚴重馮威里氏病之患者之經血過多 |
CN111789867B (zh) * | 2020-08-27 | 2022-01-11 | 中国人民解放军军事科学院军事医学研究院 | 一种适用于提高血浆干粉功能的适配液 |
JP7371208B2 (ja) | 2022-01-19 | 2023-10-30 | Kmバイオロジクス株式会社 | von Willebrand因子含有製剤 |
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Family Cites Families (63)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3941763A (en) * | 1975-03-28 | 1976-03-02 | American Home Products Corporation | PGlu-D-Met-Trp-Ser-Tyr-D-Ala-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2 and intermediates |
US8597910B1 (en) | 1985-04-11 | 2013-12-03 | Children's Medical Center Corporation | DNA encoding Von Willebrand Factor (VWF) and methods and cells for producing VFW, and VFW produced by the DNA, methods and cells |
AU591671B2 (en) | 1985-04-11 | 1989-12-14 | Children's Medical Center Corporation | Von willebrand factor |
US5900476A (en) * | 1986-05-30 | 1999-05-04 | The Scripps Research Institute | Therapeutic domains of van Willebrand factor |
US5201033A (en) | 1990-01-17 | 1993-04-06 | International Business Machines Corporation | Method for controlling cursor movements on certain computer workstations |
US5847086A (en) | 1991-06-20 | 1998-12-08 | Centeon L.L.C. | Therapeutic fragments of von Willebrand factor |
CA2110585C (en) * | 1991-06-20 | 2004-10-12 | David L. Farb | Therapeutic fragments of von willebrand factor |
US5670132A (en) * | 1994-09-20 | 1997-09-23 | Immunomedics, Inc. | Modified radioantibody fragments for reduced renal uptake |
DE4435392B4 (de) * | 1994-10-04 | 2008-02-07 | Immuno Ag | Verfahren zur Trennung von vWF in hochmolekularen vWF und niedermolekularen vWF |
DE4435485C1 (de) | 1994-10-04 | 1996-03-21 | Immuno Ag | Verfahren zur Gewinnung von hochreinem von Willebrand-Faktor |
US20010046487A1 (en) | 1994-12-30 | 2001-11-29 | Roser Bruce J. | Methods for loading platelets, stabilizing platelets for dry storage and compositions obtained thereby |
US7244824B2 (en) * | 1995-01-19 | 2007-07-17 | Quadrant Drug Delivery Limited | Dried blood factor composition comprising trehalose |
US7253262B2 (en) * | 1995-01-19 | 2007-08-07 | Quandrant Drug Delivery Limited | Dried blood factor composition comprising trehalose |
GB9501040D0 (en) * | 1995-01-19 | 1995-03-08 | Quadrant Holdings Cambridge | Dried composition |
CN1151842C (zh) | 1995-07-27 | 2004-06-02 | 基因技术股份有限公司 | 稳定等渗的冻干蛋白制剂 |
US6267958B1 (en) * | 1995-07-27 | 2001-07-31 | Genentech, Inc. | Protein formulation |
US6005077A (en) * | 1995-11-10 | 1999-12-21 | Immuno Aktiengesellschaft | Use of von willebrand factor and pharmaceutical formulation |
US5925738A (en) * | 1995-12-01 | 1999-07-20 | The American National Red Cross | Methods of production and use of liquid formulations of plasma proteins |
AT403764B (de) * | 1996-03-15 | 1998-05-25 | Immuno Ag | Stabiler faktor viii/vwf-komplex |
AU3671197A (en) * | 1996-07-19 | 1998-02-10 | Regents Of The University Of Michigan, The | Dna encoding canine von willebrand factor and methods of use |
SE9604296D0 (sv) | 1996-11-22 | 1996-11-22 | Astra Ab | New pharmaceutical formulation of polypeptides |
US20020019036A1 (en) | 1996-12-13 | 2002-02-14 | Hans-Peter Schwarz | Von willebrand factor derivatives and methods of isolating proteins that bind to von willebrand factor |
AT405740B (de) * | 1996-12-13 | 1999-11-25 | Immuno Ag | Von willebrand-faktor-derivat sowie ein verfahren zur isolierung von proteinen |
AT406373B (de) | 1997-02-27 | 2000-04-25 | Immuno Ag | Verfahren zur reinigung von faktor viii/vwf-komplex mittels kationenaustauscherchromatographie |
AT405403B (de) * | 1997-02-27 | 1999-08-25 | Immuno Ag | Reinigung von von willebrand-faktor durch kationenaustauscherchromatographie |
AT405485B (de) * | 1997-05-28 | 1999-08-25 | Immuno Ag | Eine das vwf-propeptid enthaltende pharmazeutische präparation |
US6005007A (en) * | 1997-07-18 | 1999-12-21 | Farmer; Luc J. | Retinoids, methods for their production and use |
US6310183B1 (en) * | 1997-09-10 | 2001-10-30 | Novo Nordisk A/S | Coagulation factor VIIa composition |
US6531577B1 (en) | 1997-12-15 | 2003-03-11 | Hemasure Denmark A/S | von Willebrand factor (vWF)-containing preparation, process for preparing vWF-containing preparations, and use of such preparations |
EP1148063A1 (de) * | 2000-04-18 | 2001-10-24 | Octapharma AG | Haemostatisch aktives vWF enthaltendes Präparat und Verfahren zu seiner Herstellung |
EP1336410A4 (en) * | 2000-08-04 | 2005-10-12 | Chugai Pharmaceutical Co Ltd | PROTEIN INJECTION PREPARATIONS |
JP5485489B2 (ja) | 2000-08-11 | 2014-05-07 | 中外製薬株式会社 | 抗体含有安定化製剤 |
DE10043124A1 (de) * | 2000-08-31 | 2002-03-14 | Max Delbrueck Centrum | Verfahren zur Diagnostik von neuronalen Erkrankungen sowie zur Behandlung der defizienten primären Hämostase |
DE60141908D1 (de) | 2000-10-02 | 2010-06-02 | Novo Nordisk Healthcare Ag | Glykoformen von faktor vii |
ES2332402T5 (es) * | 2000-10-12 | 2018-05-14 | Genentech, Inc. | Formulaciones de proteína concentradas de viscosidad reducida |
KR101186140B1 (ko) | 2002-06-21 | 2012-09-27 | 노보 노르디스크 헬스 케어 악티엔게젤샤프트 | 페길화된 인자 vii 글리코형태 |
AU2003291689A1 (en) | 2002-10-31 | 2004-05-25 | Protein Design Labs, Inc. | Stable liquid pharmaceutical formulation of antibodies that are prone to isomerization |
ES2229931B1 (es) | 2003-10-03 | 2006-01-16 | Grifols, S.A. | Composicion liquida bilogicamente estable de fviii, de fvw o del complejo fviii/fvw humanos. |
FR2861395B1 (fr) * | 2003-10-23 | 2006-02-17 | Lab Francais Du Fractionnement | Facteur viii viralement securise a faible teneur en multimeres superieurs |
EP2311437A1 (en) * | 2003-12-19 | 2011-04-20 | Novo Nordisk Health Care AG | Stabilised compositions of factor VII polypeptides |
US20060008415A1 (en) * | 2004-06-25 | 2006-01-12 | Protein Design Labs, Inc. | Stable liquid and lyophilized formulation of proteins |
FR2874216B1 (fr) | 2004-08-16 | 2006-11-03 | Lab Francais Du Fractionnement | Procede de preparation d'un concentre de facteur von willebrand (fvw) par voie chromatographique et concentre de fvw susceptible d'etre ainsi obtenu |
DE102004044421B4 (de) * | 2004-09-14 | 2010-06-24 | Biotest Ag | Verfahren zur Trennung eines von Willebrand Faktors mit einer spezifischen VWF-Aktivität von wenigstens 50 E/mg VWF-Antigen von einem von Willebrand Faktor mit niedriger Aktivität und Verwendung von Hydroxylapatit dafür |
PT1835938E (pt) * | 2004-12-27 | 2013-11-06 | Baxter Int | Conjugados de polímero-factor de von willebrand |
EP1707634A1 (en) * | 2005-03-29 | 2006-10-04 | Octapharma AG | Method for isolation of recombinantly produced proteins |
GB0509443D0 (en) * | 2005-05-09 | 2005-06-15 | Prometic Biosciences Ltd | Affinity adsorbents for factor VIII and von willebrand's factor |
EP2264161A1 (en) * | 2005-07-02 | 2010-12-22 | Arecor Limited | Stable aqueous systems comprising proteins |
WO2007014073A2 (en) * | 2005-07-22 | 2007-02-01 | Amgen Inc. | Concentrated protein lyophilates, methods, and uses |
EP1986612B1 (en) * | 2006-02-07 | 2012-09-12 | Shire Human Genetic Therapies, Inc. | Stabilized composition of glucocerebrosidase |
GB0700523D0 (en) * | 2007-01-11 | 2007-02-21 | Insense Ltd | The Stabilisation Of Proteins |
US7559509B1 (en) | 2007-02-12 | 2009-07-14 | Thomas C. Taylor | Large cryogenic tank logistics for in-space vehicles |
US20100137211A1 (en) * | 2007-04-11 | 2010-06-03 | Monahan Paul E | Methods and compositions for intra-articular coagulation proteins |
RU2469739C2 (ru) * | 2007-04-26 | 2012-12-20 | БАЙЕР ХЕЛСКЕА ЛЛСи | Стабилизация жидких растворов рекомбинантного белка для хранения в замороженном состоянии |
ES2392569T3 (es) * | 2007-06-13 | 2012-12-11 | Csl Behring Gmbh | Uso de preparaciones FVIII estabilizadas VWF para administración extravascular en la terapia y el tratamiento profiláctico de trastornos de hemorragias |
FR2920429B1 (fr) * | 2007-08-30 | 2012-10-05 | Lfb Biotechnologies | Procede de purification du facteur viii et du facteur von willebrand |
CA2710762A1 (en) * | 2007-12-28 | 2009-07-09 | Baxter International Inc. | Recombinant vwf formulations |
ES2298096B1 (es) | 2008-01-08 | 2009-01-01 | Grifols, S.A. | Procedimiento para la obtencion de un concentrado de factor von willebrand o del complejo de factor viii/factor von willebrand y utilizacionde los mismos. |
DE102008032361A1 (de) * | 2008-07-10 | 2010-01-21 | Csl Behring Gmbh | Der Einsatz von Faktor VIII und vWF bzw. vWF-enthaltenden Konzentraten zur Therapie der durch Thrombocyten-Inhibitoren induzierte Koagulopathie |
CN102281865B (zh) * | 2008-10-15 | 2017-04-05 | 精达制药公司 | 高浓缩药物颗粒、制剂、混悬剂及其应用 |
DK2349314T3 (da) * | 2008-10-21 | 2013-05-27 | Baxter Int | Lyofiliserede præparater af rekombinant VWF |
CA2740793A1 (en) * | 2008-11-03 | 2010-06-03 | Haiyan Jiang | Method for the treatment of hemophilia |
WO2010089379A1 (en) * | 2009-02-05 | 2010-08-12 | Pierre Philippart | Method and means for producing tissues and tissues obtained |
US9315560B2 (en) * | 2009-08-20 | 2016-04-19 | Baxalta Incorporated | Purification of VWF for increased removal of non-lipid enveloped viruses |
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