TW201628613A - 含有多酚之機能性口服組成物 - Google Patents

Abstract

本發明提供可日常簡便、安全且便宜地攝取之晝行性哺乳動物用之機能性口服組成物以及其用法。本發明之機能性口服組成物之特徵係以劃分或分割為每1日投予量之狀態包裝，且於晝行性哺乳動物1個體之每1日投予量中總量含有0.3mg~5g之多酚，較好含有可可多酚(cacao polyphenol)。

Description

含有多酚之機能性口服組成物

本發明系有關以多酚作為有效成分之機能性口服組成物以及於用以於被檢驗者體內有效展現該組成物之作用的用法及用量。更詳言之，本發明系有關具有控制能量代謝之作用(能量代謝抑制作用)之口服組成物，以及針對該口服組成物用以於被檢驗者體內有效展現其能量代謝抑制作用之用法及用量(例如一次投予量、投予量、投予頻度、投予時間、投予期間、治療期間等)。

本發明中成為對象之機能性口服組成物包含具有使能量代謝活化之作用之口服組成物(能量代謝之活化劑)、具有抑制內臟脂肪累積之作用之口服組成物(內臟脂肪之累積抑制劑)、用以預防或改善肥胖之口服組成物(抗肥胖劑)以及具有預防或改善生活習慣病之作用之口服組成物(生活習慣病之預防或改善劑)。上述生活習慣病包含肥胖、代謝徵候群、高脂血症、高血糖、高血壓及發炎等之身體狀態。因此，本發明中成為對象之生活習慣病之預防或改善劑包含用於抑制或預防發展成上述身體狀態或重症化所用之口服組成物。且本發明中成為對象之機能性 口服組成物，作為上述之其他樣態，包含具有維持體內能量或體內脂肪之作用之口服組成物(體內能量或體內脂肪維持劑)。

在日本，肥胖或代謝徵候群等之生活習慣病之比例有增加的傾向。因此，日本厚生勞動省公布了日本人之飲食攝取標準等而提高國人之意識的同時，亦指示了對於企業講述對於員工之健康檢查之義務化、營養指導及運動指導等之對策之方針。於此20年間，實際情況係日本國民之能量攝取之平均值雖減少，但生活習慣病之比例減少之傾向並未明確顯現。另一方面，即便於全世界，肥胖比例亦有增加傾向，尤其於美國、中國及印度等，數千萬人以上被認為肥胖。作為肥胖對策，雖推薦能量攝取之限制及運動等，但與日本同樣，實際情況是肥胖比例減少之傾向並未明確顯現。又，所謂肥胖係白色脂肪組織過度增加、累積之狀態，因為肥胖，已知會提高例如耐糖能障礙、脂質異常症、高血壓、高尿酸血症、冠狀動脈疾病、腦梗塞、脂肪肝、月經異常、妊娠併發症、睡眠時無呼吸徵候群、肥胖低換氣徵候群、腰痛症、變形性關節炎、肥胖相關腎臟病、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、大腸癌、乳癌及膽道癌等之各種疾病之發生率。

作為肥胖之預防或改善方法而被推薦之能量攝取限制及運動必須忍耐食慾，改變以飲食生活為始之生 活環境，而自慵懶開始或難以持續，無法期待效果。又，藉由藥劑之攝取或投予，由於副作用之可能性高或花費高額費用，而難以開始或持續，無法期待效果。因此，作為用以預防或改善肥胖或代謝徵候群等之生活習慣病之簡便、安全且便宜之手段，則期望提高身體能量代謝並抑制內臟脂肪累積之方法能以取代該等方法。

多酚係可安全且便宜地攝取之可食性材料，自過去以來，著眼於其生理活性作用之研究成果已有大量報導。尤其，巧克力等中所含之源自可可脂多酚有各種生理活性作用，其高的利用價值備受矚目。例如源自可可之多酚中，已報導原矢車菊素(procyanidin)有抑制血糖上升效果(專利文獻1)，且報導黃烷醇(flavanol)有控制血糖及改善血管擴張之作用(專利文獻2)。且，可可種子之殼的水萃取物有細胞活化作用、紫外線障礙緩和作用、退黑激素產生抑制作用(專利文獻3)。再者，源自可可之處理物有糖尿病併發症之預防作用(專利文獻4)。此外，多酚亦被期待有心血管疾病或糖尿定等之預防、治療及改善以及美膚等效果。

[先前技術文獻]

[專利文獻]

[專利文獻1]日本特開平09-291039號公報

[專利文獻2]日本特表2009-538342號公報

[專利文獻3]日本特開平03-181496號公報

[專利文獻4]日本特開2002-128685號公報

本發明之課題在於提供安全且便宜且可簡單地攝取之機能性口服組成物、以及用以有效地展現及享受該口服組成物之作用的用法及用量。

更詳細而言，本發明之課題在於提供具有控制能量代謝之作用(能量代謝抑制作用)之口服組成物(例如能量代謝之活化劑及能量代謝之活性維持劑)。且本發明之課題在於提供針對該口服組成物用以於活體內有效地展現其能量代謝抑制作用之安全、便宜及簡便用法及用量。

身體之能量代謝活化若高，則可抑制內臟脂肪之累積，而可有效地預防或改善肥胖或代謝徵候群等之生活習慣病。因此，本發明之課題在於提供內臟脂肪之累積抑制劑及生活習慣病之預防或改善劑作為安全且便宜而可簡便地攝取之機能性口服組成物。再者，本發明之課題在於提供用以在被試驗者體內有效地展現及享受該等口服組成物之作用的用法及用量。

又，以特定用法及用量攝取多酚，可控制身體之能量代謝，藉此抑制內臟脂肪之累積，以及抑制朝肥胖或代謝徵候群等之生活習慣病之轉化或重症化等之實際驗證之研究成果並未有報導。

本發明人等為解決上述課題而重複積極研究，結果發現針對夜行性哺乳動物於白天投予或攝取多酚且針對晝行性哺乳動物於夜間投予或攝取多酚之簡便方法，可活化身體之能量代謝，依據該多酚之用法，確認針對成為對象之哺乳動物可抑制內臟脂肪之累積、預防或消除肥胖、進而可預防或改善生活習慣病。且，本發明人等藉由一連串研究，確認與上述相反，針對夜行性哺乳動物於夜間投予或攝取多酚且針對晝行性哺乳動物於白天投予或攝取多酚，亦無法使身體能量代謝活化，而仍維持體內能量及體內脂肪。由此，確認上述多酚之能量代謝活化作用係藉由針對晝行性哺乳動物於夜間投予(攝取)多酚而選擇性獲得之特有效果，因而完成本發明。

亦即本發明包含如下實施形態。

又，以下，本說明書中所謂「投予」之用語包含成為對象之哺乳動物(被試驗者)本身自發進行之行為之「攝取」或「服用」之意思。且所謂「投予量」之用語包含「攝取量」或「服用量」之意思，且所謂「投予期間」之用語亦包含「攝取期間」或「服用期間」之意思。

(I)機能性口服組成物

(I-1)一種晝行性哺乳動物用之機能性口服組成物，其含有多酚作為有效成分。

(I-2)如(I-1)之機能性口服組成物，其中多酚至少含 有可可多酚。

(I-3)如(I-1)或(I-2)之機能性口服組成物，其中每1日投予量換算為多酚總量為0.3mg~5g。

(I-4)如(I-1)至(I-3)中任一項之機能性口服組成物，其係每日連續投予者。

(I-5)如(I-1)至(I-4)中任一項之機能性口服組成物，其投予期間至少為3日。

(I-6)如(I-1)至(I-5)中任一項之機能性口服組成物，其係以劃分或分割為每1日投予量之狀態包裝，且於晝行性哺乳動物1個體之每1日投予量中總量含有0.3mg~5g之多酚。

(I-7)如(I-6)之機能性口服組成物，其中將晝行性哺乳動物1個體之至少3日之投予量之機能性口服組成物收容於一個容器或包裝物中，或將至少3日投予量設為一組。

(I-8)如(I-1)至(I-7)中任一項之機能性口服組成物，其係身體之能量代謝控制劑。

(I-9)如(I-1)至(I-8)中任一項之機能性口服組成物，其係夜間投予者。

(I-10)如(I-9)之機能性口服組成物，其中上述夜間係自日落至日出之時間帶中自日落至就寢前之時間帶。

(I-11)如(I-9)之機能性口服組成物，其中上述夜間係自日落至日出之時間帶中自晚餐後至就寢前之時間帶。

(I-12)如(I-9)至(I-11)中任一項之機能性口服組成 物，其係能量代謝之活化劑。

(I-13)如(I-9)至(I-12)中任一項之機能性口服組成物，其係內臟脂肪之累積抑制劑、抗肥胖劑、或生活習慣病之預防或改善劑。

(I-14)如(I-1)至(I-8)中任一項之機能性口服組成物，其係於白天投予者。

(I-15)如(I-14)之機能性口服組成物，其中上述白天係自日出至日落之時間帶中自日出後起8小時之間。

(I-16)如(I-14)之機能性口服組成物，其中上述白天係自日出後起8小時中自早餐後起7小時之間。

(I-17)如(I-14)至(I-16)中任一項之機能性口服組成物，其係體內能量或體脂肪維持劑。

(II)機能性口服組成物之用法

(II-1)一種用法，其係如(I-1)至(I-8)中任一項之機能性口服組成物之用以使晝行性哺乳動物之能量代謝活化之用法，其特徵為於夜間對晝行性哺乳動物投予該機能性口服組成物。

(II-2)如(II-1)之用法，其中上述夜間係自日落至日出之時間帶中自日落至就寢前之時間帶。

(II-3)如(II-1)之用法，其中上述夜間係自日落至日出之時間帶中自晚餐後至就寢前之時間帶。

(II-4)如(II-1)~(II-3)中任一項之用法，其中對晝行性哺乳動物1個體投予如(I-1)至(I-8)中任一項之機能性口服 組成物之每1日投予量，換算為多酚總量為0.3mg~5g。

(II-5)如(II-1)~(II-4)中任一項之用法，其中對晝行性哺乳動物每日連續投予如(I-1)至(I-8)中任一項之機能性口服組成物。

(II-6)如(II-1)~(II-5)中任一項之用法，其中如(I-1)至(I-8)中任一項之機能性口服組成物之投予期間至少為3天。

(II-7)一種維持晝行性哺乳動物之體內能量或體脂肪之用法，其特徵係於白天對晝行性哺乳動物投予如(I-1)至(I-8)中任一項之機能性口服組成物。

(II-8)如(II-7)之用法，其中上述白天係自日出至日落之時間帶中自日出起8小時之間。

(II-9)如(II-7)之用法，其中上述白天係自日出起8小時之時間帶中之自早餐後起7小時之間。

(II-10)如(II-7)~(II-9)中任一項之用法，其中對晝行性哺乳動物1個體投予如(I-1)至(I-8)中任一項之機能性口服組成物之每1日投予量，換算為多酚總量為0.3mg~5g。

(II-11)如(II-7)~(II-10)中任一項之用法，其中對晝行性哺乳動物每日連續投予如(I-1)至(I-8)中任一項之機能性口服組成物。

(II-12)如(II-7)~(II-11)中任一項之用法，其中如(I-1)至(I-8)中任一項之機能性口服組成物之投予期間至少為3天。

(III)晝行性哺乳動物之能量代謝控制方法

(III-1)一種使晝行性哺乳動物之能量代謝活化之方法，其具有於夜間對晝行性哺乳動物投予如(I-1)至(I-8)中任一項之機能性口服組成物之步驟。

(III-2)如(III-1)之方法，其中上述夜間係自日落至日出之時間帶中自日落至就寢前之時間帶。

(III-3)如(III-1)之方法，其中上述夜間係自日落至日出之時間帶中自晚餐後至就寢前之時間帶。

(III-4)如(III-1)~(III-3)中任一項之方法，其中對晝行性哺乳動物1個體投予如(I-1)至(I-8)中任一項之機能性口服組成物之每1日投予量，換算為多酚總量為0.3mg~5g。

(III-5)如(III-1)~(III-4)中任一項之方法，其中對晝行性哺乳動物每日連續投予如(I-1)至(I-8)中任一項之機能性口服組成物。

(III-6)如(III-1)~(III-5)中任一項之方法，其中如(I-1)至(I-8)中任一項之機能性口服組成物之投予期間至少為3天。

(III-7)一種維持晝行性哺乳動物之體內能量或體脂肪之方法，其特徵係於白天對晝行性哺乳動物投予如(I-1)至(I-8)中任一項之機能性口服組成物。

(III-8)如(III-7)之方法，其中上述白天係自日出至日落之時間帶中自日出起8小時之間。

(III-9)如(III-7)之用法，其中上述白天係自日出起8小時之時間帶中之自早餐後起7小時之間。

(III-10)如(III-7)~(III-9)中任一項之方法，其中對晝行性哺乳動物1個體投予如(I-1)至(I-8)中任一項之機能性口服組成物之每1日投予量，換算為多酚總量為0.3mg~5g。

(III-11)如(III-7)~(III-10)中任一項之方法，其中對晝行性哺乳動物每日連續投予如(I-1)至(I-8)中任一項之機能性口服組成物。

(III-12)如(III-7)~(III-11)中任一項之方法，其中如(I-1)至(I-8)中任一項之機能性口服組成物之投予期間至少為3天。

(IV)機能性口服組成物之用途

(IV-1)一種如(I-1)至(I-7)中任一項之機能性口服組成物之用途，其係用以製造晝行性哺乳動物用之能量代謝控制劑。

(IV-2)如(IV-1)之用途，其係於夜間對晝行性哺乳動物投予上述機能性口服組成物者。

(IV-3)如(IV-2)之用途，其中上述夜間係自日落至日出之時間帶中自日落至就寢前之時間帶。

(IV-4)如(IV-2)之用途，其中上述夜間係自日落至日出之時間帶中自晚餐後至就寢前之時間帶。

(IV-5)如(IV-1)~(IV-4)中任一項之用途，其中上述能 量代謝控制劑係能量代謝之活化劑。

(IV-6)如(IV-5)之用途，其中上述能量代謝之活化劑係內臟脂肪之累積抑制劑、抗肥胖劑、或生活習慣病之預防或改善劑。

(IV-7)如(IV-1)之用途，其中上述機能性口服組成物係於白天對晝行性哺乳動物投予者。

(IV-8)如(IV-7)之用途，其中上述白天係自日出至日落之時間帶中自日出起8小時之間。

(IV-9)如(IV-1)、(IV-7)或(IV-8)中任一項之用途，其中上述能量代謝控制劑係體內能量或體內脂肪維持劑。

(V)用於控制能量代謝所使用之機能性口服組成物

(V-1)如(I-1)至(I-7)中任一項之機能性口服組成物，其係用於控制晝行性哺乳動物之能量代謝所使用者。

(V-2)如(V-1)之機能性口服組成物，其中上述機能性口服組成物係於夜間對晝行性哺乳動物投予者。

(V-3)如(V-2)之機能性口服組成物，其中上述夜間係自日落至日出之時間帶中自日落至就寢前之時間帶。

(V-4)如(V-2)之機能性口服組成物，其中上述夜間係自日落至日出之時間帶中自晚餐後至就寢前之時間帶。

(V-5)如(V-1)至(V-4)中任一項之機能性口服組成物，其係用以對晝行性哺乳動物之能量代謝正向控制而活化所使用者。

(V-6)如(V-1)至(V-5)中任一項之機能性口服組成 物，其係用以針對晝行性哺乳動物抑制內臟脂肪之累積、預防或改善肥胖、或預防或改善生活習慣病所使用者。

(V-7)如(V-1)之機能性口服組成物，其中上述機能性口服組成物係於白天對晝行性哺乳動物投予者。

(V-8)如(V-7)之機能性口服組成物，其中上述白天係自日出起至8小時之前之時間帶。

(V-9)如(V-1)、(V-7)或(V-8)中任一項之機能性口服組成物，其係用以維持晝行性哺乳動物之體內能量或體內脂肪所使用者。

本發明之機能性口服組成物藉由於夜間對晝行性哺乳動物投予，而以使該晝行性哺乳動物之身體能量代謝活化之方式發揮作用。亦即，該用法中，本發明之機能性口服組成物可有效發揮作為對於晝行性哺乳動物之能量代謝活化劑之機能。該能量代謝活化劑係於夜間對晝行性哺乳動物投予之方法所用，藉此可抑制該哺乳動物中之內臟脂肪之累積、有效預防或改善肥胖及/或代謝徵候群等之生活習慣病。若換言之，本發明之機能性口服組成物(能量代謝活化劑)藉由於夜間對晝行性哺乳動物投予，而可有效發揮作為內臟脂肪之累積抑制劑、抗肥胖劑、生活習慣病之預防或改善劑之機能。尤其，本發明之機能性口服組成物(能量代謝活化劑)不會誘發過度變瘦，可於日常中持續且簡便地、便宜且安全地攝取，故不管何世代，均 可廣泛使用。

本發明之機能性口服組成物藉由於白天對晝行性哺乳動物投予，而可以維持該晝行性哺乳動物之體內能量及/或體脂肪之方式發揮作用。亦即，該用法中，本發明之機能性口服組成物可有效發揮作為對於晝行性哺乳動物之體內能量或體脂肪維持劑(以下亦簡稱為「體內能量維持劑」)之機能。該體內能量維持劑對於晝行性哺乳動物尤其是虛弱(瘦)、食慾不振、營養不良、高齡者、能量代謝亢進性疾病等之各種疾病患者，可適用於體內能量及/或體脂肪之保持。

本發明係針對本發明之機能性口服組成物提供用以發揮上述各種作用功能之方式(用法、用量)。可發揮如此各種作用機能之本發明之機能性口服組成物，可以美容、健康之維持或增進為目的，而作為醫藥品、準醫藥、化妝品或飲食品(保健機能食品「特定保健用食品、顯示機能性食品、營養機能食品」、營養輔助食品、健康輔助食品、營養調整食品、健康食品、補充品、醫藥用飲食品)加以利用。

圖1係顯示對小鼠餵予通常食物(C)或高脂肪食物(H)，並持續1週於早上(9點)(圖1(A))或傍晚(17點)(圖1(B))投予可可萃取物時之血漿GLP-1濃度之圖。圖中之 圖例中，「0」及「10」意指可可萃取物(CLPr)之投予量(0mg/kg體重、10mg/kg體重)。

圖2係顯示對小鼠餵予通常食物(C)或高脂肪食物(H)，並持續1週於早上(9點)(圖2(A))或傍晚(17點)(圖2(B))投予可可萃取物時之血漿脂連蛋白(adiponectin)濃度之圖。圖中之圖例中，「0」、「1」及「10」意指可可萃取物(CLPr)之投予量(0mg/kg體重、1mg/kg體重、10mg/kg體重)(以下圖3~11亦同)。

圖3係顯示對小鼠餵予通常食物(C)或高脂肪食物(H)，並持續1週於早上(9點)(圖3(A))或傍晚(17點)(圖3(B))投予可可萃取物時之比目魚肌(soleus muscle)之磷酸化AMPK/總AMPK(相對於對照組[C-0]之相對比)之圖。

圖4係對小鼠餵予通常食物(C)或高脂肪食物(H)，並持續1週於早上(9點)(圖4(A))或傍晚(17點)(圖4(B))投予可可萃取物時之腓腸肌之PPAR-α基因表現量以相對於對照組[C-0]之相對比表示之圖。

圖5係對小鼠餵予通常食物(C)或高脂肪食物(H)，並持續1週於早上(9點)(圖5(A))或傍晚(17點)(圖5(B))投予可可萃取物時之腓腸肌之PGC-1α基因表現量以相對於對照組[C-0]之相對比表示之圖。

圖6係對小鼠餵予通常食物(C)或高脂肪食物(H)，並持續1週於早上(9點)(圖6(A))或傍晚(17點)(圖6(B))投予可可萃取物時之腓腸肌之Clock基因表現量以相對於對照組[C-0]之相對比表示之圖。

圖7係對小鼠餵予通常食物(C)或高脂肪食物(H)，並持續1週於早上(9點)(圖7(A))或傍晚(17點)(圖7(B))投予可可萃取物時之腓腸肌之Bmal1基因相對表現量以相對於對照組[C-0]之相對比表示之圖。

圖8係對小鼠餵予通常食物(C)或高脂肪食物(H)，並持續1週於早上(9點)(圖8(A))或傍晚(17點)(圖8(B))投予可可萃取物時之腓腸肌之Period1(Per1)基因表現量以相對於對照組[C-0]之相對比表示之圖。

圖9係對小鼠餵予通常食物(C)或高脂肪食物(H)，並持續1週於早上(9點)(圖9(A))或傍晚(17點)(圖9(B))投予可可萃取物時之腓腸肌之Period2(Per2)基因表現量以相對於對照組[C-0]之相對比表示之圖。

圖10係對小鼠餵予通常食物(C)或高脂肪食物(H)，並持續1週於早上(9點)(圖10(A))或傍晚(17點)(圖10(B))投予可可萃取物時之腓腸肌之隱花色素(Cryptochromel)1(Cry1)基因表現量以相對於對照組[C-0]之相對比表示之圖。

圖11係對小鼠餵予通常食物(C)或高脂肪食物(H)，並持續1週於早上(9點)(圖11(A))或傍晚(17點)(圖11(B))投予可可萃取物時之腓腸肌之隱花色素(Cryptochromel)2(Cry2)基因表現量以相對於對照組[C-0]之相對比表示之圖。

圖12係對小鼠以1天4次(ZT3(11：00)、ZT9(17：00)、ZT15(23：00)、ZT21(5：00))投予可可萃取物 (CLPr)，於其180分鐘後測定Per1基因、Per2基因、Per3基因、Bmal1基因、Dbp基因及PPAR-α基因之表現量之結果與替代可可萃取物而投予蒸餾水時之結果一起顯示之圖。任一圖中，均將對每小鼠個體於全測定時間之各基因表現量予以平均之值作為1時之相對比表示。

圖13係對小鼠以1天4次(ZT3(11：00)、ZT9(17：00)、ZT15(23：00)、ZT21(5：00))投予可可萃取物(CLPr)，於其180分鐘後測定Cry1基因、Cry2基因、Clock基因、Rev-erba基因及PGC1-α基因(Pgc1-α)之表現量之結果與替代可可萃取物而投予蒸餾水時之結果一起顯示之圖。任一圖中，均將對每小鼠個體於全測定時間之各基因表現量予以平均之值作為1時之相對比表示。

(I)機能性口服組成物

本發明之機能性口服組成物係對於哺乳動物口服投予之可食性組成物，其特徵係含有多酚作為有效成分。

本發明之哺乳動物可舉例為人類、黑猩猩、猴及兔子等之晝行性哺乳動物；豚鼠、小鼠、大鼠、狗及貓等之夜行性哺乳動物。本發明中成為對象之哺乳動物較好為晝行性哺乳動物，更好為人類。

(A)有效成分(多酚)及其調製方法

多酚係同一分子內具有複數個酚性羥基之化合物，其大多為源自植物之成分。本發明中成為對象之多酚只要為可食性即可，可為單體或亦可為該等之聚合物。且可此用由1種多酚所成者，亦可為2種以上之多酚之混合物。

作為多酚具體可例示為原矢車菊素、表兒茶素、表沒食子兒茶素(epigallocatechin)、表兒茶素沒食子酸酯、表沒食子兒茶素沒食子酸酯、茶黃素(theaflavin)、茶玉紅精(thearubigin)、兒茶素、木質素、單寧、花青素、白藜蘆醇(resveratrol)、蘆丁(rutin)、異黃烷、綠原酸(chlorogenic acid)、紅花素(carthamin)、橙皮(hesperidin)、木酚素(lignan)、香豆素、薑黃素(curcumin)、鞣花酸(ellagic acid)、大豆黃酮(daidzein)、高金雀花鹼(genistein)、大豆異黃酮(genistin)、葛根素(puerarin)、楊梅黃酮(myricetin)、漆樹黃酮(fisetin)、山柰酚(kaempferol)、高良薑黃素(galangin)、及槲皮素(quercetin)等。

本發明中，作為多酚較好為源自可可豆之多酚，更好為源自可可塊之多酚(以下將該等稱為「可可多酚」)。可可多酚中至少包含下列：包含兒茶素及表兒茶素之兒茶素類之類黃酮(flavonoid)；原矢車菊素B2及原矢車菊素B5等之二聚體型之原矢車菊素、原矢車菊素C1等之三聚體型之原矢車菊素、以及兒茶精(cinnamtannin)A2等之四聚體型之原矢車菊素等之花青素原(proanthocyanidin)(例如參考福場等人著之「巧克力．可 可之科學與機能」，IK Corporation出版，2004年11月發行)。可可多酚中所含之花青素原係以表兒茶素作為基本骨架進行4→8鍵結等之多聚物，與自其他植物萃取之花青素原相較，其構造較單純。因此有製造步驟安定且易於管理之優點。

可可多酚中所含之兒茶素、表兒茶素、原矢車菊素B2、原矢車菊素B5、原矢車菊素C1及兒茶精A2之比例，將該等總量設為100重量%時，可例示為兒茶素與表兒茶素合計：45~65重量%，原矢車菊素B2：15~25重量%，原矢車菊素B5：2~8重量%，原矢車菊素C1：10~20重量%，兒茶精A2：5~10重量%。且可可塊中所含之總多酚100重量%中所佔之該等6種多酚雖未限制，但可例示為8~50重量%，較好為10~40重量%。

又，可可多酚係如後述表2所例示為單體與聚合物(至少包含2聚物~7聚物之聚合物)之混合物。可可多酚中所含之單體~7聚物之比例雖未限制，但將單體~7聚物之總量設為100重量%時，可例示為單體：35~50重量%，2聚物：15~25重量%，3聚物：10~20重量%，4聚物：5~15重量%，5聚物：1~10重量%，6聚物：0.5~5重量，7聚物：0.1~3重量%之比例。再者，可例示為腸可吸收之單體~3聚物：60~95重量%，腸無法吸收之4聚物~7聚物：5重量%~33重量%之比例。然而，並未特別限制於該等比例。

可可多酚之調製方法並未特別限制，但可藉 由將可可豆(以下亦稱為「可可」)作為原料使用水或有機溶劑等之萃取溶劑萃取而調製取得。

更具體而言，可可多酚係將使可可豆之胚乳進行發酵、乾燥、焙煎及磨碎而調製之可可塊作為原料，藉由後述之萃取溶劑萃取而調製。又，由於可可塊中含有約50重量%之可可油脂分(可可奶油)，故在以萃取溶劑萃取之前，期望藉由壓榨法或使用己烷等之非極性有機溶劑預先進行脫脂處理，可預先防止於萃取處理時自可可塊萃取出多餘脂質。

可可多酚之萃取中所使用之萃取溶劑，只要為用以自植物萃取多酚之一般使用之萃取溶劑，則未特別限制。較好舉例為極性溶劑。作為極性溶劑，可例示為例如水；甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇、丁醇等之碳數1~5之低級醇；1,3-丁二醇、丙三醇、聚乙二醇等之多元醇；丙酮；乙醚；乙酸乙酯；乙酸甲酯等。該等萃取溶劑可單獨使用1種，亦可組合2種以上使用。作為該萃取溶劑，舉例為較好為水、碳數1~5之低級醇及碳數1~5之低級醇與水之混合液；更好為基於食品衛生之觀點，較好為水、乙醇、及乙醇與水之混合液；最好為乙醇與水之混合液。

作為萃取方法可採用通常所用之植物萃取物之萃取方法，更具體舉例為浸漬法(靜置或振盪浸漬)；攪拌方法；或濾浸法(percolation)等。

可可多酚之萃取條件並未特別限定，可採用冷溫、室溫及加溫條件之任一溫度條件。作為一例，為水 時，較好在40~100℃，更好在50~90℃加溫。且，使用乙醇水溶液作為溶劑時，較好在0~80℃，更好在40~70℃加溫。

可可多酚之調製中，其萃取過程所得之粗萃取物中，除了多酚以外，亦包含胺基酸、可可鹼(theobromine)、及蛋白質成分等之成分。該等多酚以外之成分之去除，為了取得更高純度之可可多酚時，可採用將上述粗萃取物與以氫離子取代處理之陽離子交換樹脂(例如Diaion(註冊商標)HP-2MG管柱[三菱化學(股)製]等)接觸，接著以不含離子性物質之溶劑(例如水或乙醇等低級醇)溶出處理之方法。藉由將如此所得之溶出區分進行濃縮或乾燥可調製取得富含以花青素原為首之多酚之純度高的可可多酚(可可萃取物)。又，根據需要，亦可重複該等方法。

順帶一提，雖未特別限制，但為了使可可多酚安定化，於上述調製步驟中，亦可使用包含鞣花酸或安石榴甙(punicalagin)之至少一者之安定化劑。該等安定化劑可應用於例如自可可豆調製可可之粗萃取物之步驟，較好加熱步驟。作為加熱步驟，可例示例如在37℃以上加熱之步驟，較好在120℃以上加熱之步驟。又，可可多酚之調製步驟中，於調製物(液狀物)之pH為4以上之狀態，見到表兒茶素類之表異構化或花青素原類之含量降低等之不期望現象。因此，上述安定化劑為了抑制或改善該現象，可較好地應用於使含多酚之組成物處於pH2~8，較 好pH4~7.5，更好pH5.5~6.5之狀態時。此情況下，該等安定化劑相對於多酚100重量份，鞣花酸可以1.5重量份以上、或安石榴甙為5重量分以上之比例使用。

(B)其他成分及機能性口服組成物之形態

本發明之機能性口服組成物可作為醫藥品組成物(口服用醫藥品)、化妝品組成物(包含口腔用化妝品)或飲食品組成物(例如包含保健機能食品「特定保健用食品、顯示機能性食品、營養機能食品」、營養輔助食品、健康輔助食品、營養調整食品、健康食品、補充品、醫藥用飲食品等)調製或提供。較好為口服醫藥品組成物及飲食品組成物，更好為飲食品組成物。

該等機能性口服組成物有可能為將含有前述多酚較好可可多酚之可可萃取物作為原料，基於本技藝之技術常識，進行固液分離、乾燥(凍結乾燥、噴霧乾燥)、混合、混練、造粒及加工成形(打錠)等之各種操作之一或組合複數種而調製之加工物。再者，根據所期望之形態或劑型，可依據規定調配擔體或添加劑等。作為添加劑，可例示賦形劑、結合劑、崩壞劑、滑澤劑、矯臭劑、矯味劑、甜味劑、溶解輔助劑、懸浮劑、乳化劑、安定化劑(安定劑)、增黏劑、膠凝劑、酸味料、保存料、抗氧化劑、pH調整劑、基劑、著香劑及著色劑等。該等各添加劑之具體成分並未特別限制，可同樣使用本技藝者通常使用者。

作為本發明之機能性口服組成物之形態或劑型，可舉例為哺乳動物可經口攝取或投予之形態或劑型。例如，作為口服醫藥品或飲食品之形態或劑型，可例示錠劑、丸劑、顆粒劑、散劑(粉末製劑)、膠囊劑、咀嚼錠劑、片劑、液劑(糖漿劑)、果凍劑、乾糖漿劑、及膏狀製劑等之製劑形態。該製劑形態中，較好為錠劑、咀嚼錠劑、果凍劑或膏狀製劑。基於保存觀點，更好為錠劑、咀嚼錠劑。

本發明之機能性口服組成物亦可調製為一般之飲食品形態。作為該飲食品之形態，例示有速食麵、蒸煮食品、罐裝、微波食品、速食湯．味噌湯類、冷凍乾燥食品等之速食食品；清涼飲料、果汁飲料、蔬菜飲料、豆乳飲料、咖啡飲料、可可飲料、茶飲料、粉末飲料、濃縮飲料、酒精飲料等之飲料；麵包、義大利麵、麵、混合蛋糕、麵包粉等之小麥粉製品；飴、焦糖、口香糖、巧克力、小甜餅乾、餅乾、蛋糕、派、休閒食品、蘇打餅、日式點心、甜點點心等點心類；調味醬、番茄醬加工調味料、風味調味料、料理混醬、佐料類、調味品類、沾醬類、咖哩．燉菜之湯底等之調味料；加工油脂、奶油、人造奶油、美乃滋等之油脂類；乳飲料、發酵乳(優格等)、乳酸菌飲料、天然乳酪、精製乳酪類、冰淇淋類、奶油霜類等之乳製品；農產罐頭；果醬．柑橘果醬類、巧克力奶油等之烤麵包醬；穀類等之農產加工品；冷凍食品等。較好為巧克力、巧克力蛋糕(黑森林蛋糕(Gâteau au chocolat))、巧克力點心、巧克力奶油(烤麵包醬)、可可飲料、巧克力飲料等。

本發明之機能性口服組成物不管其形態或劑型類別，哺乳動物1個體(1人)之1日投予量中之多酚較好為可可多酚係總量含有0.3mg~5g者。1日投予量可在該範圍內適當設定，可舉例為例如0.6mg~4g、1mg~3g、3mg~2g、6mg~1g之範圍。且作為其他樣態，亦可舉例為1g~5g、2g~5g、3g~5g、4g~5g之範圍。基於風味或安全性之觀點，對人類投予之1日投予量較好為0.6mg~1.8g。

本發明之機能性口服組成物，為了簡便且有效地發揮其作用效果而由哺乳動物享受，較好為具備可對哺乳動物每日連續投予1日必要量之多酚之簡便且便利之形態。作為此形態雖未限制，但可舉例為於一個容器或包裝工具(以下總稱為「容器包裝工具」)中，以將機能性口服組成物劃分或分割成1日投予量之狀態予以收容之樣態。具體而言，將機能性口服組成物以每1日之投予量以有切痕之狀態(例如易於分割)、經切割狀態、經成型之狀態或個別包裝(或填充於容器)之狀態，將1日~數日分之用量分收納或填充於1個容器包裝工具之樣態。此處所謂「經成型之狀態」雖未限制，但包含如錠劑等之製劑形態。且所謂「個別包裝(或填充於容器)之狀態」雖未限制，但包含例如將1日投予量分之顆粒或粉末狀物分裝於膠囊基材或包裝工具中之狀態，以及將1日投予量分之液狀物填充於容器或包裝工具之狀態。且作為其他樣態雖未 限制，但可以將每1日之投予量個別包裝(或容器填充)之機能性口服組成物以2日~數十日分(或2~數日分)組合之樣態，將該等組合而成之製品或套組製品被交易。

本發明之機能性口服組成物，為了有效發揮其作用，較好至少3日持續(連續)投予。較好為5日以上，更好為1週以上，又更好為10日以上，特佳為20日以上，又特佳為30日以上。因此，上述本發明之機能性口服組成物亦可於1個容器包裝工具中收容1日~3日分、5日分、1週分、10日分、20日分或30日分之用量分，但可有將該等日數分組合而成者(套組)之樣態。

(C)機能性口服組成物之用途以及用法及用量

本發明之機能性口服組成物藉由於夜間對晝行性哺乳動物連續投予，而發揮使該晝行性哺乳動物之身體能量代謝活化之作用效果。結果，可亢進晝行性哺乳動物之身體能量代謝，抑制內臟脂肪或皮下脂肪之累積，預防或消除肥胖。且，可預防或改善成為肥胖尤其是內臟脂肪累積之原因之生活習慣病。另一方面，本發明之機能性口服組成物即使於白天對晝行性哺乳動物投予，並不會使能量代謝活化(亢進)，反而以維持體內能量及體脂肪之方式作用。因此，為了對晝行性哺乳動物保持體內能量及體脂肪，本發明之機能性口服組成物較好於白天投予(服用)。

此意指本發明之機能性口服組成物基於其作用效果，可說是「身體能量代謝控制劑」，可以專為控制 晝行性哺乳動物之身體能量代謝之目的而使用。

該身體能量代謝控制劑，基於上述，根據其使用方式，可分類為(1)身體之能量代謝活化劑，及(2)體內能量或體脂肪維持劑之兩類。以下針對該等加以說明。

(1)身體能量代謝活化劑

本發明之能量代謝活化劑具有下述特徵。

(a)含有多酚較好為可可多酚作為有效成分。

(b)對於晝行性哺乳動物於夜間投予。

(c)每1日之投予量換算為多酚總量為0.3mg~5g。

(d)持續3日以上每日連續投予。

上述(b)之所謂「夜間」意指晝行性哺乳動物之活動較少之時間帶，通常為日落至日出之時間帶。較好為日落至就寢之時間帶，更好為晚餐後至就寢之時間帶。又所謂「晚餐後」意指自晚餐結束時點以後之時間帶，可為晚餐剛結束後，亦可為晚餐結束後經過1小時以後。雖亦隨季節而異，但若舉一例，則作為自日落至日出之時間帶可舉例為「午後6點(18點)~隔天早上6點(6點)」之時間帶，作為自日落至就寢之時間帶可舉例為「午後7點(19點)~隔天早上1點(1點)」之時間帶，作為自晚餐後至就寢之時間帶可舉例為「午後7點(19點)~隔天早上0點(0點)」之時間帶，但不特別限制。

關於本發明之能量代謝活化劑，為了確實獲得其效果，有必要遵守(b)~(d)之用法及用量。為了確實且 簡便地實行並遵守此用法及用量，較好使本發明之能量代謝活化劑具備與本發明之機能性口服組成物有關之上述(B)中說明之形態。具體而言可為以劃分或分割為每1日之投予量之狀態予以包裝，且將至少3日分之能量代謝活化劑收容於1個容器包裝工具中，或成為組合而成之物(套組)之樣態。與其相關之上述(B)之記載可於此處加以援用。

本發明之能量代謝活化劑之1日投予量係如(B)中記載般之換算成多酚總量為0.3mg~5g，於該範圍內可根據年齡、性別及投予之哺乳動物之身體狀態等而適當設定。例如可自0.6mg~4g、1mg~3g、3mg~2g、及6mg~1g等之範圍，或自1g~5g、2g~5g、3g~5g、4g~5g之範圍適當設定。基於風味或安全性之觀點，對人類投予之1日投予量較好為0.6mg~1.8g之範圍。又，本發明之能量代謝活化劑只要於1日內投予上述特定量即可，其投予次數並未特別限制。上述投予量可投予1次，且亦可分成2~數次投予。

且，本發明之能量代謝活化劑為了提高晝行性哺乳動物之身體能量代謝且有效地持續維持高的能量代謝，較好至少持續3日持續進行上述投予量之夜間投予。更好持續5日以上，又更好持續1週(7日)以上，最好為10日以上、20日以上、及30日以上。藉由如此，可抑制因高能量(高卡路里)、高糖質及/或高脂肪之餐飲、及/或運動不足等引起之過度內臟脂肪累積，且可有效地預防或 改善朝肥胖及代謝徵候群等之生活習慣病之轉化或重症化。

本發明中，所謂能量代謝包括糖代謝及脂質代謝等。因此，本發明之「能量代謝活化劑」亦作為「糖代謝及/或脂質代謝之提高劑」發揮作用，而可期待作為對於伴隨糖代謝及脂質代謝之至少一者降低或以其為原因之身體狀態或疾病、或對於藉由提高糖代謝及脂質代謝之至少一者而可期待預防或改善之身體狀態或疾病之預防或改善劑之效果。作為上述身體狀態或疾病可例示為例如耐糖能障礙、脂質異常症、高血壓、高尿酸血症、冠狀動脈疾病、腦梗塞、脂肪肝、月經異常、妊娠併發症、睡眠時無呼吸徵候群、肥胖低換氣徵候群、腰痛症、變形性關節炎、肥胖相關腎臟病、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、大腸癌、乳癌及膽道癌等。又，本發明之「能量代謝之活化劑」不僅可使用作為內臟脂肪過量之肥胖症者，亦可作為內臟脂肪並未過量之健康者(非肥胖者)等之吃了高糖質及/或高脂肪餐飲時提高該健康者之糖代謝及/或脂質代謝之組成物而使用。

本發明之能量代謝活化劑於體內之作用機制雖尚不清楚，但認為係因使AMPK活化，而誘導出PGC-1α，而可促進或抑制各種時鐘基因(clock gene)之表現，促進GLP-1分泌者。本文中以本發明之能量代謝活化劑促進表現之時鐘基因為Clock基因、Per2基因或Cry2基因之至少一者。但該作用機制畢竟只是假設，本發明並非限 定於該作用機制。

AMPK(AMP-Activated protein kinase，AMP-活化蛋白質激酶)係於肝臟、肌肉、脂肪組織等之末梢神經組織或視丘下部中，監視細胞之能量狀態，並根據其狀態而調整糖及脂質代謝等之酵素。AMPK若被活化則藉由亢進能量產生路徑(糖輸送、脂肪氧化)，阻斷能量消耗路徑(蛋白質合成)，而使細胞內ATP恢復。作為利用AMPK活化之作用，已知有例如肝臟中之糖新生之抑制、肌肉內之糖攝取．脂肪酸之氧化或分解之促進等。

PGC-1α(Peroxisome proliferative activated receptor，γ-coactivator 1α，過氧化體增生活化受體，γ-共活化因子1α)為核內受體共活化因子，係統括能量代謝與時鐘基因之共活化因子。作為PGC-1α之作用，已知除了例如粒線體之形成促進、脂肪之分解促進、活性酵素之抑制以外，亦有肌肉之增強等。

時鐘基因為控制生理時鐘之基因群，具體而言，可例示Clock基因、Bmal(Brain and Mastlent-Like protein)基因、Period(以下有時簡稱為「Per」)、隱花色素(Cryptochrome)(以下有時簡稱為「Cry」)基因、白蛋白部位D-結合蛋白質(albumin site D-binding protein)(以下有時簡稱為「Dbp」)基因、E4BP4基因、Npass2基因等。又，Per基因有Period1基因(Per1基因)、Period2基因(Per2基因)及Period3基因(Per3基因)之3種。於哺乳動物(例如人類、貓、狗、豚鼠)中，編碼以作為時鐘基因之 Clock基因、Bmal1基因、Per基因(Per1、Per2、Per3)及Cry基因之4個作為核之蛋白質之基因與各種時鐘基因之轉錄之促進或抑制有關連。

促進體內時鐘之刻度之因子的基因群包含例如Clock基因及Bmal1基因。另一方面，抑制體內時鐘之刻度之因子的基因群包含例如Per基因、Cry基因及Chromo基因。

又，生理時鐘之控制中樞雖存在於視丘下部之視交叉上核，但控制生理時鐘之機構亦存在於肝臟或肌肉等之大部分末梢組織，於中樞及末梢亦以同樣系統發揮機能。該等時鐘基因於人類係控制呼吸、血壓、體溫、賀爾蒙分泌、睡眠及睡醒等之生理學及行為學之現象。Bmal1基因則與脂肪酸及膽固醇之合成促進及分解抑制有關。且，Per1基因、Per2基因、Per3基因除了作為時鐘基因發揮作用以外，亦與壓力反應或肥胖有關。

PPAR-α係肝臟、網膜、消化器官黏膜、肌肉之褐色脂肪組織、心臟及腎臟中強力表現之受體蛋白質，藉由游離脂肪酸等之生理配位而活化，與膽固醇及三酸甘油酯之合成降低等有關。作為PPAR-α之具體作用，已知有脂肪酸之β氧化及ω氧化之促進、脂肪酸輸送活性及醯基CoA合成酵素活性之增加、脫輔基蛋白質(apoprotein)A1之合成促進、血清HDL膽固醇之增加及LPL合成之亢進、脫輔基蛋白質C-3合成之抑制、醯基CoA羧基酵素．脂肪酸合成酵素之活性降低、發炎之抑制等。

本發明之能量代謝活化劑與前述之「機能性口服組成物」同樣，可使用作為口服投予之醫藥品、準醫藥、化妝品或飲食品(保健機能食品「特定保健用食品、顯示機能性食品、營養機能食品」、營養輔助食品、健康輔助食品、營養調整食品、健康食品、補充品、醫藥用飲食品)。

該等各種製品中，較好根據各國制度以各製品之容許方法及範圍內於市場上流通(包含販售)由需要者可辨識之方式，顯示本發明之能量代謝活化劑之有效成分(機能性成分)；有效成分之用途、效能、機能及調配量；投予方法(投予時間、投予次數、投予量)等。

此處所謂「顯示」只要為需要者可辨識之方法即可，在該限度內包含所有手段。且，無關於顯示之目的或意圖，亦包含可想起或類推有效成分(機能性成分)之用途、效能或機能等之手段。且顯示之對象物(媒體)可例示製品之容器、製品之包材、製品之說明書、製品之廣告、製品之交易書類、製品之網頁(網際網路等)、製品之目錄、製品之手冊及製品之POP等，該顯示之場所可例示製品本身、銷售製品之店內．店外、介紹製品之展示會．說明會等。

本發明中所謂「顯示」較好為由各國之行政或制度等所認可之說明或表現，例如於日本則為由消費者廳或特定保健用食品制度所認可之說明或表現。具體而言，由健康增進法所規定之特定保健用食品之顯示(尤其 保健用途之顯示)、附帶條件之特定保健用食品之顯示、對身體構造或機能帶來影響之主旨顯示、減低疾病危險性之主旨顯示等。

例如，本發明之能量代謝活化劑之有效成分(機能性成分)；有效成分之用途、效能、機能及含量；投予方法(投予時間、投予次數、投予量等)之代表例若總結則如下述。

有效成分(機能性成分)；多酚

有效成分之用途．機能：能量代謝之活化效果、內臟脂肪之累積抑制效果、抗肥胖效果、或生活習慣病之預防．改善效果

有效成分之調配量：1日投予量中多酚以總量計含有0.3mg~5g

投予方法(投予時間、投予次數、投予量等)：將1日投予量換算為多酚總量為0.3mg~5g於夜間(日落後至就寢前)以1次或分為複數次口服攝取。持續3日以上連續攝取。

(2)體內能量或體內脂肪維持劑

本發明之體內能量或體內脂肪維持劑(以下總稱為「體內能量維持劑」)具有下述特徵。

(a)含有多酚較好為可可多酚作為有效成分。

(b’)對於晝行性哺乳動物於白天投予。

(c)每1日之投予量換算為多酚總量為0.3mg~5g。

(d)持續3日以上每日連續投予。

上述(b’)之所謂「白天」意指晝行性哺乳動物之活動時間帶，通常為日出後起8小時之時間帶。較好為日出至日落之時間帶中自早餐後起7小時之時間帶。但若舉一例，則作為自日出起8小時之時間帶可舉例為「早上6點至下午2點」之時間帶，但不特別限制。

本發明之體內能量維持劑，為了確實獲得其效果，有必要遵守上述(b’)~(d)之用法及用量。為了確實且簡便地實行及遵守其用法及用量，本發明之體內能量維持劑較好具備關於本發明之機能性口服組成物之上述(B)所說明之形態。具體而言可為以劃分或分割為每1日之投予量之狀態予以包裝，且將至少3日分之體內能量維持劑收容於1個容器包裝工具中，或成為組合而成之物(套組)之樣態。與此相關之上述(B)之記載可於此處加以援用。

本發明之體內能量維持劑之1日投予量係如(B)中記載般之換算成多酚總量為0.3mg~5g，於該範圍內可根據年齡、性別及投予之哺乳動物之身體狀態等而適當設定。例如可自0.6mg~4g、1mg~3g、3mg~2g、及6mg~1g等之範圍，或自1g~5g、2g~5g、3g~5g、4g~5g之範圍適當設定。基於風味或安全性之觀點，對人類投予之1日投予量較好為0.6mg~1.8g之範圍。又，本發明之體內能量維持劑只要於1日內投予上述特定量即可，其投予次數並未特別限制。上述投予量可投予1次，且亦可分成2~數次投予。

且，為了藉由本發明之體內能量維持劑持續維持體內之能量及/或體內脂肪，較好至少連續3日於白天持續投予該維持劑之上述投予量。更好持續5日以上，又更好持續1週(7日)以上，最好為10日以上、20日以上、及30日以上。藉由如此，即使不強制變更高能量(高卡路里)、高糖質及/或高脂肪之餐飲，亦可防止體內能量之顯著消耗或體內脂肪之減少。

本發明之體內能量維持劑與前述之「機能性口服組成物」同樣，可使用作為口服投予之醫藥品、準醫藥、化妝品或飲食品(保健機能食品「特定保健用食品、顯示機能性食品、營養機能食品」、營養輔助食品、健康輔助食品、營養調整食品、健康食品、補充品、醫藥用飲食品)。

本發明之體內能量維持劑能積極地攝取能量而可較好地對人類使用。作為該對象者，可例示虛弱(瘦)者、食慾不振者、康復(慢性阻塞性肺疾病(COPD)、肝衰竭、風濕性關節炎、慢性心臟衰竭、慢性腎衰竭、下肢截肢、大腿骨頸部骨折、糖尿病、腦中風、癌(惡液質)、廢用徵候群、帕金森氏症、誤嚥性肺炎、有褥瘡之高齡者)中之高齡者、能量代謝亢進之疾病(例如甲狀腺異常)之患者等。本發明之體內能量維持劑可作為具有錠劑(片錠)、咀嚼劑、顆粒劑或安瓿劑等製劑形態之醫藥品、準醫藥或飲食品(補充品等)對該對象者投予以外，亦可作為流動食品(口服營養劑、營養飲品、經腸營養劑)、看護食品、吞 嚥困難者用食品、巧克力等點心類、巧克力飲料或可可飲料等之飲食品(保健機能食品、營養輔助食品、健康輔助食品、醫藥用飲食品等)使用。

該體內能量維持劑關於顯示亦如前述所述。

例如，本發明之體內能量維持劑之有效成分(機能性成分)；有效成分之用途、效能、機能及含量；投予方法(投予時間、投予次數、投予量等)之代表例若總結則如下述。

有效成分(機能性成分)；多酚

有效成分之用途．機能：體內能量之維持、體內脂肪之維持

有效成分之調配量：1日投予量中多酚以總量計含有0.3mg~5g

投予方法(投予時間、投予次數、投予量等)：將1日投予量換算為多酚總量為0.3mg~5g於白天(日出後起8小時)以1次或分為複數次口服攝取。持續3日以上連續攝取。

(II)晝行性哺乳動物之能量代謝控制方法

本發明係關於控制以人類為代表之晝行性哺乳動物之能量代謝之方法。

該方法可藉由對晝行性哺乳動物投予(服用)前述之本發明之機能性口服組成物而實施。

(a)能量代謝之活化方法

作為正向控制晝行性哺乳動物之能量代謝並活化之方法，可舉例對於成為對象之晝行性哺乳動物於夜間投予包含特定量多酚之本發明之機能性口服組成物之方法。此處所謂「夜間」通常為日落至日出之時間帶，但較好為日落至就寢之時間帶，更好為日落後之晚餐後至就寢之時間帶。又作為對晝行性哺乳動物1個體之機能性口服組成物之每1日之投予量舉例為換算成多酚總量為0.3mg~5g。於該範圍內可根據年齡、性別及投予之哺乳動物之身體狀態等而適當設定。例如可自0.6mg~4g、1mg~3g、3mg~2g、及6mg~1g等之範圍，或自1g~5g、2g~5g、3g~5g、4g~5g之範圍適當設定。基於風味或安全性之觀點，對人類投予之1日投予量較好為0.6mg~1.8g之範圍。又，本發明之機能性口服組成物只要於1日內對晝行性哺乳動物投予上述特定量即可，其投予次數並未特別限制。例如，上述投予量可投予1次，且亦可分成2~數次投予。

且，為了使晝行性哺乳動物之能量代謝活化且有效地持續維持高的能量代謝，較好至少連續3日持續進行本發明之機能性口服組成物之上述投予量之夜間投予。更好持續5日以上，又更好持續1週(7日)以上，最好為持續10日以上、20日以上、及30日以上。

藉由如此，可抑制因高能量(高卡路里)、高糖質及/或高脂肪之餐飲、及/或運動不足等引起之過度內臟脂肪累積，且可有效地預防或改善朝肥胖及代謝徵候群等 之生活習慣病之轉化或重症化。

依據本發明之方法，由於可提高糖代謝及/或脂質代謝，故可作為對於伴隨糖代謝及脂質代謝之至少一者降低或以其為原因之身體狀態或疾病、或對於藉由提高糖代謝及脂質代謝之至少一者而可期待預防或改善之身體狀態或疾病之預防或改善劑之方法而使用。作為上述身體狀態或疾病可例示為例如耐糖能障礙、脂質異常症、高血壓、高尿酸血症、冠狀動脈疾病、腦梗塞、脂肪肝、月經異常、妊娠併發症、睡眠時無呼吸徵候群、肥胖低換氣徵候群、腰痛症、變形性關節炎、肥胖相關腎臟病、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、大腸癌、乳癌及膽道癌等。又，本發明之方法不僅可使用作為內臟脂肪過量之肥胖症者，亦可作為內臟脂肪並未過量之健康者(非肥胖者)等之吃了高糖質及/或高脂肪餐飲時提高該健康者之糖代謝及/或脂質代謝、預防肥胖而使用。

(b)體內能量或體內脂肪之維持方法

為了對成為對象之晝行性哺乳動物維持其體內能量及/或體內脂肪，可舉例於白天投予包含特定量多酚之本發明之機能性口服組成物之方法。此處所謂「白天」通常為自日出起8小時之時間帶，較好為日出後之早餐後起8小時之時間帶。又作為對晝行性哺乳動物1個體之機能性口服組成物之每1日之投予量舉例為換算成多酚總量為0.3mg~5g。於該範圍內可根據年齡、性別及投予之哺乳動 物之身體狀態等而適當設定。例如可自0.6mg~4g、1mg~3g、3mg~2g、及6mg~1g等之範圍，或自1g~5g、2g~5g、3g~5g、4g~5g之範圍適當設定。基於風味或安全性之觀點，對人類投予之1日投予量較好為0.6mg~1.8g之範圍。又，本發明之機能性口服組成物只要於1日內對晝行性哺乳動物投予上述特定量即可，其投予次數並未特別限制。例如，上述投予量可投予1次，且亦可分成2~數次投予。

且，為了維持晝行性哺乳動物之體內能量及/或體內脂肪，較好至少連續3日連續進行本發明之機能性口服組成物之上述投予量之白天投予。更好連續5日以上，又更好連續1週(7日)以上，最好為10日以上、20日以上、及30日以上。藉由如此，即使不積極攝取高能量(高卡路里)、高糖質及/或高脂肪之餐飲，亦可防止體內能量之顯著消耗或體內脂肪之減少。

依據本發明，由於可維持體內能量及/或體內脂肪，故可較好地積極攝取能量而適用於人類。作為該對象者則如前述。可例示虛弱(瘦)者、食慾不振者、康復之患者等。

[實施例]

以下，基於製造例及實施例更詳細說明本發明。但本發明不限定於該等實施例者，在不脫離本發明之技術思想之範圍內，可進行各種變更。

[製造例1]

<可可萃取物之調製>

可可萃取物係以自可可豆1.9kg調製之可可塊1.0kg作為原料。於可可塊1.0kg中添加正己烷5L，於室溫條件於30分鐘內攪拌予以脫脂，獲得脫脂可可塊875g。於如此所得之脫脂可可塊875g中添加含水丙酮(丙酮含量70體積%)6L進行萃取，其次使用蒸發器於減壓下蒸發去除丙酮。所得水性區分以9倍體積之正丁醇萃取，所得正丁醇相予以濃縮，並提供於Diaion(註冊商標)HP-2MG管柱(15cm×10cm I.D.)(三菱化學股份有限公司製)並吸附。隨後，於該管柱中供給含0.1%(v/v)之三氟乙酸之含水乙醇(乙醇含量15%(v/v))，溶出可可鹼(theobromine)，接著供給含水甲醇(甲醇含量80%(v/v))。如此所得之含水甲醇溶出區分進行濃縮乾燥，獲得富含花青素原(proanthocyanidin-rich)之區分的可可萃取物17g。該可可萃取物作為以下之「可可液花青素原(cacao liquor proanthocyanidin)」簡稱為「CLPr」。該所得之可可萃取物17g之總多酚含量以普魯士藍法(Price,L.M.,et al.,Rapid visual estimation and spectrophotometric determination of tannin content of sorghum grain.J.Agric.Food Chem.,1977,25,1268-1273)，以表兒茶素作為標準品而測定後，為628.1mg/g(表兒茶素相當量)。

又，亦可使用乙醇代替上述使用之丙酮或甲 醇。

該可可萃取物中所含之總多酚每1g之各多酚含量(mg)示於表1。又，該多酚含量係依據Natsume等人之論文(Natsume,M.etal.,Analysis of Polyphenols in Cacao Liquor,Cocoa,and Chocolate by Normal-Phase and Reversed-Phase HPLC,Bioscience Biotechnology and Biochemistry 2000,64,2581-2587)之記載予以測定。

且該可可萃取物中所含之總多酚每1g所含之單體及多聚物(二聚物~7聚物)之量(mg)示於表2。又，該多酚之分子量係依據Kelm等人之論文(Kelm,M.A.et al.,High-performance liquid chromatography separation and purification of cacao(Theobroma cacao L.)procyanidins according to degree of polymerization using a diol stationary phase.J Agric Food Chem 2006,54,1571-1576)之記載加以測定。

[實施例1]

<多酚攝取時間對血漿GLP-1濃度之影響驗證>

使用小鼠調查多酚攝取時間(早上、傍晚)對血漿GLP-1濃度之影響。又，小鼠為夜行性哺乳動物，與以人類為代表之晝行性哺乳動物之生理時鐘(內因性節律)相差12小時而相反。

(1)被試驗小鼠

取得C57BL/6小鼠(雄性5週齡，日本SLC公司)後，經過1週(馴化期間)後，將40隻分成下述8群(各群5隻)，以室溫25±2℃、照明時間/天為8點~20點之條件下飼養(亮暗週期：亮期8：00~20：00，暗期20：00~8：00)。又，如上述由於小鼠為夜行性哺乳動物，故於上述亮暗週期中，亮期相當於睡眠/絕食時間帶，暗期相當於活動/攝取時間帶。

下述中，符號「A」及「B」分別意指可可萃 取物早上投予及傍晚投予。又，符號「C」及「H」分別意指普通食物飼料及高脂肪食物飼料。

No.1(A/C-0)：未投予可可萃取物(0mg/kg體重)(對照)

No.2(A/C-10)：可可萃取物早上投予(10mg/kg體重)

No.3(A/H-0)：未投予可可萃取物(0mg/kg體重)(對照)

No.4(A/H-10)：可可萃取物早上投予(10mg/kg體重)

No.5(B/C-0)：未投予可可萃取物(0mg/kg體重)(對照)

No.6(B/C-10)：可可萃取物傍晚投予(10mg/kg體重)

No.7(B/H-0)：未投予可可萃取物(0mg/kg體重)(對照)

No.8(B/H-10)：可可萃取物傍晚投予(10mg/kg體重)

具體而言，首先如上述將40隻小鼠分成可可萃取物早上投予群(A：No.1~4)及可可萃取物傍晚投予群(B：No.5~8)之2群，該等群分別進一步分為普通食物飼料群(C)與高脂肪食物飼料群(H)。且，各群(早上投予/普通食物飼料群[A/C]、早上投予/高脂肪食物飼料群[A/H]、傍晚投予/普通食物飼料群[B/C]、傍晚投予/高脂肪食物飼料群[B/H])均相對於可可萃取物投予群設有可可萃取物非投予群(對照)。

(2)試驗方法

將上述製造例1調製之可可萃取物(以下亦稱為「CLPr」)以蒸餾水稀釋為10倍，將其對於上述No.2、No.4、No.6及No.8之小鼠以CLPr量為10mg/kg體重(多酚之總量6mg/kg)之方式口服投予。對該等小鼠之對照群(No.1、No.3、No.5及No.7)以10mg/kg體重之比例投予蒸餾水代替CLPr。且對1~4群之小鼠於早上(9點)，對No.5~8之小鼠於傍晚(17點)分別以1次/日之比例投予CLPr或蒸餾水。

上述實驗中，No.1~2及No.5~6係自由攝取普通食物(D12450B(脂質能量比10%)、Research Diet公司)，對No.3~4及No.7~8自由攝取高脂肪食物(D12492(脂質能量比60%)，Research Diet公司)。

於CLPr口服投予開始起第7天(第7天口服投予1小時後)，將各群小鼠以戊巴比妥鈉(Nembutal)麻醉下藉由心臟採血而屠殺。自各群小鼠採取之血液進行離心分離(9,700g，10分鐘，4℃)，獲得血漿。使用如此調製之血漿，使用Reavis(R)GLP-1(Active)(Shibayagi公司)之測定套組測定各群小鼠之血漿GLP-1濃度。又，GLP-1係類升糖素胜肽，促進參與血糖代謝之胰島素分泌。因此，血漿中之GLP-1濃度增加意指隨著胰島素分泌而亢進糖代謝。

(3)試驗結果

早上投予群(A)之小鼠血漿GLP-1濃度示於圖1(A)， 傍晚投予群(B)之小鼠血漿GLP-1濃度示於圖1(B)。如圖1(A)所示，早上投予群中，與普通食物飼料群(C)及高脂肪食物飼料群(H)之類別並無關係，與CLPr非投予群比較，CLPr投予群之血漿GLP-1濃度均顯示有意義之高值。另一方面，傍晚投予群中，普通食物飼料群(C)及高脂肪食物飼料群(H)任一群，於CLPr非投予群與CLPr投予群之血漿GLP-1濃度均無有意義差。由該結果可知，藉由於早上對小鼠攝取或投予CLPr，可促進GLP-1分泌，亢進糖代謝(能量代謝)。若將該結果應用於生理時鐘與小鼠相反之晝行性哺乳動物(包含人類)，則於晝行性哺乳動物時，藉由於傍晚以後攝取或投予可可萃取物(多酚)，認為可促進GLP-1分泌，亢進糖代謝(能量代謝)。

[實施例2]

使用小鼠，調查多酚攝取時間(早上、傍晚)對於血漿脂連蛋白濃度、磷酸化AMPK/總AMPK、各臟器中脂肪組織量及時鐘基因之表現量帶來之影響。作為多酚與實施例1同樣使用製造例1調製之可可萃取物(CLPr)。

(1)被試驗小鼠

取得C57BL/6小鼠(雄性5週齡，日本SLC公司)後，經過1週(馴化期間)後，將60隻分成12群(各群5隻)，分類為如下。

No.1(A/C-0)：未投予CLPr(0mg/kg體重)(對照)

No.2(A/C-1)：CLPr早上投予(1mg/kg體重)

No.3(A/C-10)：CLPr早上投予(10mg/kg體重)

No.4(A/H-0)：未投予CLPr(0mg/kg體重)(對照)

No.5(A/H-1)：CLPr早上投予(1mg/kg體重)

No.6(A/H-10)：CLPr早上投予(10mg/kg體重)

No.7(B/C-0)：未投予CLPr(0mg/kg體重)(對照)

No.8(B/C-1)：CLPr傍晚投予(1mg/kg體重)

No.9(B/H-10)：CLPr傍晚投予(10mg/kg體重)

No.10(B/H-0)：未投予CLPr(0mg/kg體重)(對照)

No.11(B/H-1)：CLPr傍晚投予(1mg/kg體重)

No.12(B/H-10)：CLPr傍晚投予(10mg/kg體重)

具體而言，首先如上述將60隻小鼠分成早上投予群(A：No.1~6)及傍晚投予群(B：No.7~12)之2群，該等群分別進一步分為普通食物飼料群(C)與高脂肪食物飼料群(H)之2群。且，將分類為該等4群之各群(早上投予/普通食物飼料群[A/C]、早上投予/高脂肪食物飼料群[A/H]、傍晚投予/普通食物飼料群[B/C]、傍晚投予/高脂肪食物飼料群[B/H])進一步分類為2群CLPr投予群(1mg/kg投予群、10mg/kg投予群)與1群非投予CLPr群(對照)。

(2)試驗方法

將上述製造例1調製之可可萃取物(CLPr)以蒸餾水稀釋為10倍，將其對於上述No.2、No.5、No.8及No.11之 小鼠以CLPr量為1mg/kg體重(多酚之總量0.6mg/kg)之方式，或對於上述No.3、No.6、No.9及No.12之小鼠以CLPr量為10mg/kg體重(多酚之總量6mg/kg體重)之方式分別口服投予。對該等小鼠之對照群(No.1、No.4、No.7及No.10)以10mg/kg體重之比例投予蒸餾水代替CLPr。且對No.1~6之小鼠於早上(9點)，對No.7~12之小鼠於傍晚(17點)分別以1次/日之比例投予CLPr或蒸餾水。

上述實驗中，No.1~3及No.7~9係自由攝取普通食物(D12450B)，對No.4~6及No.10~12自由攝取高脂肪食物(D12492)。

於CLPr口服投予開始起第7天(第7天口服投予1小時後)，將各群小鼠以戊巴比妥鈉(Nembutal)麻醉下藉由心臟採血而屠殺。自各群小鼠採取之血液進行離心分離(9,700g，10分鐘，4℃)，獲得血漿。

使用如此調製之血漿，使用Reavis脂連蛋白(Shibayagi公司)之測定套組測定各群小鼠之血漿脂連蛋白濃度。且磷酸化AMPK/總AMPK以西方墨點法測定。又，脂連蛋白係脂肪細胞特異分泌之蛋白質，血漿中之脂連蛋白濃度增加意指提高胰島素感受性亦即活化糖代謝。且磷酸化AMPK/總AMPK之增加表示AMPK活化且進行磷酸化。

又，針對各群小鼠，於測定體重後，摘出白色脂肪細胞(內臟脂肪[副睪脂肪組織、腸間膜脂肪、腎周圍脂肪]、皮下脂肪)、褐色脂肪細胞及肌肉(腓腸肌、比目 魚肌)，於各群間比較該等重量(g/100g體重)。又，統計處理係使用Tukey-Kramer多重比較試驗，p<0.05判定為具有有意義差。

[測定結果]

(1)血漿中脂連帶白濃度

早上投予群(A)及傍晚投予群(B)之血漿脂連帶白濃度分別示於圖2(A)及(B)。如圖2(A)所示，於早上(9點)之CLPr投予中，普通食物飼料群(C)中見到血漿脂連蛋白濃度與CLPr投予量相關性地提高之傾向。且高脂肪食物飼料群(H)亦見到血漿脂連蛋白濃度因CLPr投予而提高之傾向。又，CLPr非投予群中，見到高脂肪食物飼料群(H-0)之血漿脂連蛋白濃度為比普通食物飼料群(C-0)更低值之傾向，但於CLPr投予群，高脂肪食物飼料群(H-1、H-10)與普通食物飼料群(C-1、C-10)之血漿脂連蛋白濃度為同程度(亦即意指藉由對高脂肪食物飼料群投予CLPr而提高血漿脂連蛋白濃度)。另一方面，如圖2(B)所示，於傍晚(17點)投予CLPr時，所有群中血漿脂連蛋白濃度為同程度，未見到因CLPr投予所致之影響。

由該結果可明瞭藉由早上對小鼠攝取或投予CLPr，可提高血漿脂連蛋白濃度，亦即促進脂連蛋白之分泌。

(2)磷酸化AMPK/總AMPK

針對早上投予群(A)及傍晚投予群(B)之各者，將磷酸化AMPK除以總AMPK之比率(磷酸化AMPK/總AMPK)分別示於圖3(A)及(B)。圖3(A)及(B)均顯示將CLPr非投予之普通食物飼料群(C-0)作為1(對照)，評價各群之磷酸化AMPK/總AMPK之結果。如圖3(A)所示，藉由於早上(9點)之CLPr投予，於普通食物飼料群及高脂肪食物飼料群之兩群均見到磷酸化AMPK/總AMPK與CLPr投予量相關地提高之傾向。另一方面，藉由於傍晚(17點)之CLPr投予，高脂肪食物飼料群中未見到磷酸化AMPK/總AMPK與CLPr投予量相關地提高之傾向。

(3)脂肪細胞之重量

早上投予群(A)及夜間投予群(B)之小鼠體重(g)及每100g體重之脂肪細胞重量(g/100g體重)分別示於表3及表4。又，表3及表4中，所謂「白色脂肪細胞(g/100g體重)」意指副睪脂肪、腸管膜脂肪及腎周圍脂肪(以上為內臟脂肪)，以及皮下脂肪之每100g體重之總量(g)。各表中之各值所記載之符號，意指附加不同符號之群間具有有意義差。

早上投予群(A)及傍晚投予群(B)之任一群之小鼠，於高脂肪食物飼料群(H)之內臟脂肪之白色脂肪細胞(副睪脂肪、腸管膜脂肪及腎周圍脂肪)之重量均為比普通食物飼料群(C)為更高值。

早上投予群(A)中，高脂肪食物飼料之CLPr高投予群(CLPr：10mg/kg體重)與同樣飼料群之CLPr非投予群(CLPr：0mg/kg體重)比較，見到白色脂肪細胞重量變低之傾向。又，該CLPr高投予群之白色脂肪細胞之重量與普通食物飼料群大致為相同程度。且，早上投予群 中，高脂肪食物飼料之CLPr低投予群(CLPr：1mg/kg體重)與同樣飼料群之CLPr非投予群(CLPr：0mg/kg體重)比較，見到腸管膜脂肪之重量變低之傾向(參考表3)。

另一方面，傍晚投予群(B)中，高脂肪食物飼料之CLPr高投予群(CLPr：10mg/kg體重)之白色脂肪細胞重量與同樣飼料群之CLPr非投予群(CLPr：0mg/kg體重)為同程度，且見到比普通食物飼料之CLPr高投予群更為提高之傾向(表4)。

由該結果可知藉由早上對小鼠攝取或投予CLPr，即使攝取高脂肪食物，亦可有效地抑制內臟脂肪之累積。且，藉由早上對小鼠攝取或投予CLPr，即使攝取普通食物，亦未見到皮下脂肪或內臟脂肪量之過度降低傾向(表3)。由此可知於早上攝取或投予CLPr對於身體為安全的。

(4)RNA萃取及基因表現之測定

由於實施例1中見到因CLPr之投予時間對於促進參與糖代謝之胰島素分泌之CLP-1分泌有差異，故確認CLPr之投予對於時鐘基因(Clock、Baml1、Per1、Per2、Per3、Cry1、Cry2)、PGC-1α基因及PPAR-α基因表現之影響。

[方法]

將自小鼠採取之腓腹肌25mg秤量於微管中，添加 500μL之TRIzol試劑，以多轉子均質機粉碎組織。於其中添加氯仿100μL，以渦流混合機充分混合，於室溫(25℃±5℃)靜置10分鐘。隨後，進行離心分離(12,000g，15分鐘，4℃)，獲得上澄液。將該上澄液回收至新的微管中，添加2-丙醇300μl，倒置混合，於室溫靜置10分鐘。隨後，進行離心分離(12,000g，10分鐘，4℃)，使RNA區分沉澱，將沉澱之RNA區分以乙醇洗淨後，以濃縮離心機離心乾燥。接著以去離子蒸餾水(deionized-distilled water)30μL，再次溶解離心乾燥之總RNA，進行DNase(DNasel重組無RNase)處理。於該DNase處理之RNA 5μL中，使用逆轉錄酵素之ReverTra Ace(註冊商標)qPCR RT Kit(TOYOBO)合成cDNA。合成之cDNA使用SYBR Green premix Taq，以即時PCR(TaKaRa PCR Thermal Cycler Dice，TAKARA BIO公司)進行測定。又，內部標準係使用GAPDH。普通食物飼料(C)之CLPr非投予群之各基因(PGC-1α基因及PPAR-α基因、Clock基因、Bmal1基因、Per1基因、Per2基因、Cry1基因、Cry2基因)之表現量作為1(對照)，相對地評價各群(普通食物飼料(C)之CLPr投予群、高脂肪食物飼料(H)之CLPr非投予群及CLPr投予群)之各基因表現量。又，統計處理中，使用Tukey-Kramer多重比較試驗，p<0.05判定為具有有意義差。

[結果]

早上投予群及傍晚投予群之PPAR-α基因之相對表現量分別示於圖4(A)及(B)。早上投予時，普通食物飼料群(C)及高脂肪食物飼料群(H)之兩群中，均見到PPAR-α基因之相對表現量因CLPr投予而提高之傾向(圖4(A))。相對於此，傍晚投予時，高脂肪食物飼料群(H)中，未見到PPAR-α基因之相對表現量與CLPr投予量相關地提高之傾向(圖4(B))。

早上投予群及傍晚投予群之PGC-1α基因之相對表現量分別示於圖5(A)及(B)。早上投予時，高脂肪食物飼料群(H)中，見到PGC-1α基因之相對表現量與CLPr投予量相關地提高之傾向(圖5(A))。相對於此，傍晚投予時，未見到PGC-1α基因之相對表現量與CLPr投予量相關地提高之傾向(圖5(B))。

早上投予群及傍晚投予群之Clock基因之相對表現量分別示於圖6(A)及(B)。早上投予時，高脂肪食物飼料群(H)中，見到Clock基因之相對表現量與CLPr投予量相關地有意義提高之傾向(圖6(A))。相對於此，傍晚投予時，未見到Clock基因之相對表現量與CLPr投予量相關地提高之傾向(圖6(B))。

早上投予群及傍晚投予群之Bmal1基因之相對表現量分別示於圖7(A)及(B)。早上投予時，高脂肪食物飼料群(H)中，見到Bmal1基因之相對表現量與CLPr投予量相關地提高之傾向(圖7(A))。相對於此，傍晚投予時，Bmal1基因之相對表現量雖隨著CLPr之投予而增 加，但未見到與投予量相關地提高之傾向(圖7(B))。

早上投予群及傍晚投予群之Per1基因之相對表現量分別示於圖8(A)及(B)。早上投予時，各群間未見到有意義差(圖8(A))。相對於此，傍晚投予時，於普通食物飼料群(C)中，見到Per1基因之相對表現量與CLPr投予量相關地提高之傾向(圖8(B))。然而，高脂肪食物飼料群(H)中，未見到Per1基因之相對表現量與CLPr投予量相關地提高之傾向(圖8(B))。

早上投予群及傍晚投予群之Per2基因之相對表現量分別示於圖9(A)及(B)。早上投予時，於高脂肪食物飼料群中，見到Per2基因之相對表現量與CLPr投予量相關地提高之傾向(圖9(A))。另一方面，傍晚投予時，未見到Per2基因之相對表現量與CLPr投予量相關地提高之傾向(圖9(B))。

早上投予群及傍晚投予群之Cry1基因之相對表現量分別示於圖10(A)及(B)。早上投予及傍晚投予均未見到Cry1基因之相對表現量與CLPr投予量相關地提高之傾向。

早上投予群及傍晚投予群之Cry2基因之相對表現量分別示於圖11(A)及(B)。早上投予時，於高脂肪食物飼料群(H)中，見到Cry2基因之相對表現量與CLPr投予量相關地提高之傾向(圖11(A))。另一方面，傍晚投予時，未見到Cry2基因之相對表現量與CLPr投予量相關地提高之傾向(圖11(B))。

由該等結果可知，藉由於早上對小鼠攝取或投予可可萃取物(多酚)，與傍晚攝取或投予可可萃取物(多酚)之情況相比，糖攝取增加，亦即教示糖代謝受到亢進。再者，藉由於早上對小鼠攝取或投予可可萃取物(多酚)，即使攝取高脂肪食物等，亦不會使過量(異常)體脂肪降低，確認可於短時間內有效地抑制多餘之內臟脂肪之累積。亦即，確認藉由於早上對小鼠攝取或投予可可萃取物(多酚)，可亢進脂質代謝。至於該等作用機制，可認為藉由AMPK被磷酸化而活化，誘導出PCG-1α基因，並促進時間基因中之尤其Clock基因、Per2基因及Cry2基因之表現，而提高能量代謝，抑制內臟脂肪累積，而可預防或改善肥胖或代謝徵候群等之生活習慣病。

該等結果若應用於生物時鐘與小鼠相反之晝行性哺乳動物(包含人類)，則認為於晝行性哺乳動物時，藉由於夜間攝取或投予可可萃取物(多酚)而產生上述現象，並亢進糖代謝及脂肪代謝(能量代謝)，抑制內臟脂肪之累積，可預防或改善肥胖或代謝徵候群等之生活習慣病。

[實施例3]

<多酚之投予時間與各種基因表現量之關係>

使用小鼠，評價多酚投予時間與時鐘基因及能量代謝關聯基因之表現量之關係。作為時鐘基因，使用肝臟之時鐘基因的Period基因(Per1基因、Per2基因、Per3基 因)、Bmal1基因、Dbp基因(D-結合蛋白質基因)、隱花色素基因(Cry1基因、Cry2基因)及Clock基因。且，作為能量代謝關聯基因，使用PPAR-α基因(Ppar-α)、Rev-erba基因、PGC1-α基因(Pgc1-α)。且最為多酚係使用製造例1調製之可可萃取物(CLPs)。

[方法]

將C57BL/6小鼠(雄性7週齡，日本SLC公司)依據所測定之基因(Per1、Per2、Per3、Bmal1、Dbp、Cry1、Cry2、Clock、Ppar-arufwa、Rev-erba及Pgc1-α基因)數分成11群，各群進一步分成CLPr投予群與CLPr非投予群(對照)(各群n=5)。又，CLPr投予群中作為每1次投予之CLPr量係投予150mg/kg體重(多酚總量計為90mg)。該等各群之小鼠在25±2℃、照明時間/天為8點~20點之條件下飼養(亮暗週期：亮期8：00~20：00，暗期20：00~8：00)。

該亮暗週期中，以1天4次(以zeitgeber時間計，ZT3(11：00)、ZT9(17：00)、ZT15(23：00)、ZT21(5：00))，以胃餵食管對CLPr投予群以上述量強制經口投予CLPr，對CLPr非投予群投予蒸餾水(6.7mL/kg體重)。且，自該等各投予後180分鐘後(ZT6(14：00)、ZT12(20：00)、ZT18(2：00)、ZT24(=ZT0)(8：00))，屠殺各群之小鼠，採取肝臟、脂肪組織及肌肉，依據規定方法，藉由RT-PCR測定各組織中表現之時鐘基因及能量帶列關 聯基因之mRNA表現量。

[結果]

CLPr之投予時間與Per1、Per2、Per3、Bmal1、Dbp及Ppar-α基因之表現量之關係示於圖12。且CLPr之投予時間與Cry1、Cry2、Clock、Rev-erba及Pgc1-α基因之表現量之關係示於圖13。又，該等各圖係對每各個體求得所有測定時間之基因表現量之平均值，將其分別設為1時之相對比作為各基因表現量之增減量而顯示。

如圖12及13所示，對於夜行性哺乳動物的小鼠於亮期ZT3投予CLPr時，肝臟中，Per1、Per2、Per3、Dbp及Pparα基因之表現量有意義增加(各圖中以*表示)，且Cry2及Pgc1-α基因之表現量顯示增加傾向。另一方面Bmal1基因之表現量有意義地減少，Cry1基因之表現量顯示減少傾向。然而，亮期ZT3以外之時間帶，即使投予CLPr，該等基因之表現量並無太大變化。

由此判知可可萃取物(多酚)因其投予時點(時間帶)而對時鐘基因及能量代謝關聯因子之表現量帶來之影響不同。且由此教示與糖代謝或脂質代謝(能量代謝)相關之基因表現亦隨可可萃取物(多酚)之投予時點(投予之時間帶)而變化。具體而言，對小鼠於亮期投予CLPr，而可在投予後短時間內使肝臟之時鐘基因Per1、Per2、Per3、Dbp及Pparα基因之表現增加(攝取第3小時為高峰)，藉由於該時間帶(亮期)攝取可可萃取物(多酚)，而使糖代謝 或脂質代謝關聯之基因表現產生變化，教示不易引起內臟脂肪累積之抑制等。且於其以外之時間帶(暗期)攝取可可萃取物(多酚)時，時鐘基因、糖代謝及脂質代謝相關之基因表現並無特別影響，教示可維持體內能量及體脂肪。

又，由於小鼠為夜行性哺乳動物，故認為將該結果應用於晝行性哺乳動物(包含人類)時，晝行性哺乳動物時，藉由於暗期(日落~日出)攝取或投予可可萃取物(多酚)而可抑制內臟脂肪累積，相反地於亮期(日出~8小時左右)攝取或投予可可萃取物(多酚)而可維持體內能量或體脂肪。

[實施例4]

<本發明之組成物之製造>

以數種類製造包含以乙醇萃取之可可多酚萃取物、可可塊、全脂奶粉、可可奶油、砂糖、蛋白脂組成物(混合物)。以普魯士藍法，將表兒茶素作為標準品測定該等組成物之總多酚含量後，多酚含量(總量)為0.4mg重量%~107mg重量%。將其由專門官能試驗員10名攝取後，均評價為風味與食感良好。

[產業上之可利用性]

本發明之機能性口服組成物，藉由將其對於晝行性哺乳動物於夜間(自日落至日出)進行攝取或投予，而以提高身體之能量代謝，抑制內臟脂肪累積之方式發揮 作用，而可有效地預防或改善肥胖或代謝徵候群等之生活習慣病。且本發明之機能性口服組成物，藉由將其對於晝行性哺乳動物於白天(自日出起8小時左右)進行攝取或投予，而可維持體內之能量或體內脂肪，可有效地抑制身體能量之消耗。本發明之機能性口服組成物可利用作為新穎之醫藥品組成物或飲食品組成物。

Claims (14)

1. 一種晝行性哺乳動物用之機能性口服組成物，其含有多酚作為有效成分，且係對於晝行性哺乳動物於夜間投予者。
2. 如請求項1之機能性口服組成物，其中多酚至少含有可可多酚。
3. 如請求項1或2之機能性口服組成物，其中以劃分或分割為每1日投予量之狀態包裝，且於晝行性哺乳動物1個體之每1日投予量中總量含有0.3mg~5g之多酚。
4. 如請求項1至3中任一項之機能性口服組成物，其係每日連續投予者。
5. 如請求項1至4中任一項之機能性口服組成物，其投予期間至少為3日。
6. 如請求項1至5中任一項之機能性口服組成物，其係身體之能量代謝控制劑。
7. 如請求項1至6中任一項之機能性口服組成物，其係能量代謝之活化劑。
8. 如請求項1至7中任一項之機能性口服組成物，其係內臟脂肪之累積抑制劑、抗肥胖劑、或生活習慣病之預防或改善劑。
9. 一種如請求項1至8中任一項之機能性口服組成物之用法，其係用以使晝行性哺乳動物之能量代謝活化之用法，其特徵為對晝行性哺乳動物於夜間投予該機能性口服組成物。
10. 如請求項9之用法，其中對晝行性哺乳動物1個體投予如請求項1至8中任一項之機能性口服組成物之每1日投予量，換算為多酚總量為0.3mg~5g。
11. 如請求項9或10之用法，其中對晝行性哺乳動物每日連續投予如請求項1至8中任一項之機能性口服組成物。
12. 如請求項9至11中任一項之用法，其中投予如請求項1至8中任一項之機能性口服組成物之投予期間至少為3天。
13. 一種使晝行性哺乳動物之能量代謝活化之方法，其具有於夜間對晝行性哺乳動物投予如請求項1至8中任一項之機能性口服組成物之步驟。
14. 一種如請求項1至8中任一項之機能性口服組成物之用途，其係用以製造晝行性哺乳動物用之能量代謝控制劑。