TW201544504A - 作為凝血因子Ｘa抑制劑的醯肼類化合物 - Google Patents

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Abstract

本發明提供一種作為凝血因子Xa抑制劑的醯肼類化合物，具有如下化學式(I)所示之結構。該化合物或其鹽類可以作為治療和預防血栓異常疾病的抗凝劑，本發明通過提供凝血因子Xa的強力抑制劑以滿足針對凝血Xa的選擇性和強力抑制劑的現實需求。 □

Description

作為凝血因子Xa抑制劑的醯肼類化合物
本發明是有關於一種新的醯肼類化合物之製備方法、藥物組合物及其作為抗凝血劑之應用。
心血管疾病是開發國家人口致病和致死的主要原因，其中大多數的心血管事件主要歸因於血栓形成。華法林是第一個批准上市的口服抗凝藥物，其應用受困於緩慢的維生素K依賴型拮抗作用、藥物與藥物之間的相互作用以及藥物與食物之間的相互作用，這導致了進行連續監測以獲得準確劑量的必要性。而其他的抗凝劑比如肝素、磺達肝素等只適合於腸胃外服藥，無法適用其他方式。基於現有抗凝劑的上述缺陷，因此推動了新的抗凝血藥物的進一步研究。
在血液凝血連鎖反應(blood coagulation cascade)中，凝血因子Xa在可以被內部路徑(觸點激活)和外部路徑(組織因子)所激活的共同的交界處保持平衡，因此是一種獨特的絲氨酸蛋白酶。與連鎖反應中凝血酶所發揮的多種作用相比，凝血因子Xa只將凝血酶原轉化為凝血酶，但不影響現有的迴圈凝血酶水準。在臨床前動物模型中，相對於凝血酶抑制劑，凝血因子Xa抑制劑降低了出血風險並提高了安全性/有效性。因此，在過去的十年中，在發現和開發選擇性和 口服活性的小分子凝血因子Xa抑制劑作為治療靜脈或動脈血栓栓塞的抗凝血劑方面已經取得了巨大的進步，例如，預防術後深靜脈血栓形成(DVT)和肺栓塞(PE)，預防在心房顫動時的中風，治療急性冠狀動脈綜合症(ACS)，尤其是如下方程式(B-I)所示的利伐沙班(US2003/153610)和方程式(B-Ⅱ)所示的阿呱沙班(WO2003/049681)，分別於2011年和2013年經美國食品藥物管理局FDA批准上市。
目前，為了預防經歷了擇期全髖關節置換手術或全膝關節置換手術的患者的靜脈血栓栓塞(VTE)，利伐沙班的標準劑量是10毫克，每天一次。然而，利伐沙班用量的提高同時伴隨著較高的出血作用，重大或致命性出血的風險也不容小覷，尤其是在病人長期服藥的情況下。此外，利伐沙班的水溶性差，因而難以開發靜脈注射製劑。與利伐沙班不同，阿呱沙班的標準劑量為5毫克，一天兩次。阿呱沙班在體內能被迅速吸收，能在給藥後約1-3小時達到血中最高藥物濃度(Cmax)。達到初始的Cmax後，阿呱沙班的血漿濃度會快 速下降，然後經歷一個平緩的終端階段，半衰期為8-15小時，因此阿呱沙班是每天給藥兩次。阿呱沙班經過多個代謝途徑後(包括腎和腸道代謝)，被氧化成幾種代謝物排出體外。使用阿呱沙班治療的患者與代謝酵素CYP3A4的強效抑制劑聯合治療是存在高風險的。因此更提高了需要更廣泛地利用Xa因子抑制劑之必要性。
從臨床的觀點來看，開發對凝血因子Xa具有高特異性和強效抑制作用並且具有較高水溶性，使其做為口服藥更有效，或更適合以靜脈注射之方式給藥、具有更多的治療方式之選擇和較少的出血傾向的藥物成為本發明之主要課題。
本發明提供一種作為凝血因子Xa抑制劑的醯肼類化合物，具有如下化學式(I)所示之結構。其中，X選自3-9元碳環或其苯並環、4-10元雜環或其苯並環，Y、Z皆選自4-9元飽和雜環任一者；其中，R1、R2、R3皆選自H、F、Cl、Br、I、CN、OH、SH、NH2、CHO、COOH中之任一者，或選自被R01取代的C1-10烷基或雜烷基、C3-10環烴基或雜環烴基、被C3-10環烴基或雜環烴基取代的C1-10烷基或雜烷基中之任一者，其中所述R01選自F、Cl、Br、I、CN、OH、SH、NH2、CHO、COOH、R02中之任一者，其中所述R02選自C1-10烷基、C1-10烷胺基、N,N-二(C1-10烷基)胺基、C1-10烷氧基、C1-10烷醯基、C1-10烷氧羰基、C1-10烷基磺醯基、C1-10烷基亞磺醯基、C3-10環烷基、C3-10環烷胺基、C3-10雜環烷胺基、C3-10環烷氧基、C3-10環烷基醯基、C3-10環烷氧羰基、C3-10環烷基磺醯基、C3-10環烷基亞磺醯基中之任一者；其中，所述4-10元雜環、所述4-9元飽和雜環、所述C1-10雜烷基、所述C3-10雜環烴基、所述 C1-10雜烷基與所述C3-10雜環烷胺基皆各別包含至少一雜原子或至少一雜原子團，其中所述雜原子或雜原子團選自-C(=O)N(Rd3)-、-N(Rd4)-、-C(=NRd5)-、-S(=O)2N(Rd6)-、-S(=O)N(Rd7)-、-O-、-S-、=O、=S、-C(=O)O-、-C(=O)-、-C(=S)-、-S(=O)-和-S(=O)2-中之任一者，其中所述Rd3、Rd4、Rd5、Rd6、Rd7選自H、R03任一者，其中所述R03選自C1-10烷基、C1-10烷基醯基、C1-10烷氧羰基、C1-10烷基磺醯基、C1-10烷基亞磺醯基、C3-10環烷基、C3-10環烷基醯基、C3-10環烷氧羰基、C3-10環烷基磺醯基、C3-10環烷基亞磺醯基中之任一者；其中，當所述R02、R03任一者被R001取代時，該R001選自F、Cl、Br、I、CN、OH、N(CH3)2、NH(CH3)、NH2、CHO、COOH、三氟甲基、氨甲基、羥甲基、甲基、甲氧基、甲醯基、甲氧羰基、甲磺醯基、甲基亞磺醯基中之任一者；其中該化合物包含所述R01、所述R001、與所述雜原子或雜原子團的數量分別介於0-3之間；以及，其中所述R1與所述R2、所述R2與所述R3之任一組分別共同連接到同一個碳原子或雜原子上形成一個5-7元環。
本發明同時提供上述化合物的製備路徑如下圖所示。
依據上述本發明提供之化合物或其鹽類，其對凝血因子Xa具有高特異性和強效抑制作用並且具有較高水溶性，可以做為更有效之口服藥，或更適合以靜脈注射之方式給藥、具有更多的治療方式之選擇和較少的出血傾向的藥物。因此，本發明通過提供凝血因子Xa的強力抑制劑以滿足針對凝血Xa的選擇性和強力抑制劑的現實需求。
本發明目的在提供一種新的醯肼類化合物之製備方法、藥物組合物及其作為對凝血因子Xa之抗凝血劑之應用，以達到高特異性和強效抑制作用，同時因其具有較高水溶性，因此可解決習知技術使用之利伐沙班與阿呱沙班的副作用與用藥方式之限制。為讓本發明之上述和其他目的、特徵和優點能更明顯易懂，下文以實施例配合圖式做詳細說明。
為清楚說明本發明，首先對下文中使用之符號與名稱進行定義，如下說明。
C1-10選自C1、C2、C3、C4、C5、C6、C7、C8、C9和C10；C3-10選自C3、C4、C5、C6、C7、C8、C9和C10。
C1-10烷基或雜烷基、C3-10環基或雜環烴基、被C3-10環烴基或雜環烴基取代的C1-10烷基或雜烷基包括但不限於：C1-10烷基、C1-10烷胺基、N,N-二(C1-10烷基)胺基、C1-10烷氧基、C1-10烷醯基、C1-10烷氧羰基、C1-10烷基磺醯基、C1-10烷基亞磺醯基、C3-10環烷基、C3-10環烷胺基、C3-10雜環烷胺基、C3-10環烷氧基、C3-10環烷基醯基、C3-10環烷基氧羰基、C3-10環烷基磺醯基、C3-10環烷基亞磺醯基；甲基、乙基、正丙基、異丙基、-CH2C(CH3)(CH3)(OH)、環丙基、環丁基、丙基亞甲基、環丙醯基、苄氧基、三氟甲基、氨甲基、羥甲基、甲氧基、甲醯基、甲氧羰基、甲磺醯基、甲基亞磺醯基、乙氧基、乙醯基、乙磺醯基、乙氧羰基、二甲基胺基、二乙基胺基、二甲基胺基羰基、二乙基胺基羰基；N(CH3)2,NH(CH3),-CH2CF3,-CH2CH2CF3,-CH2CH2F,-CH2CH2S(=O)2CH3,-CH2CH2CN,,,, ,,,-CH2CH(OH)(CH3)2,-CH2CH(F)(CH3)2,-CH2CH2F,-CH2CF3,-CH2CH2CF3,-CH2CH2NH2,-CH2CH2OH,-CH2CH2OCH3,-CH2CH2CH2OCH3,-CH2CH2N(CH3)2, -S(=O)2CH3,-CH2CH2S(=O)2CH3,,, ,；和苯基、噻唑基、聯苯基、萘基、環戊基、呋喃基、3-吡咯啉基、吡咯烷基、1,3-氧五環基、吡唑基、2-吡唑啉基、吡唑烷基、咪唑基、惡唑基、噻唑基、1,2,3-唑基、1,2,3-三唑基、1,2,4-三唑基、1,3,4-噻二唑基、4H-吡喃基、吡啶基、呱啶基、1,4-二氧六環基、嗎啉基、噠嗪基、嘧啶基、吡嗪基、呱嗪基、1,3,5-三噻烷基、1,3,5- 三嗪基、苯並呋喃基、苯並噻吩基、吲哚基、苯並咪唑基、苯並噻唑基、嘌呤基、喹啉基、異喹啉基、噌啉基或喹喔啉基；
本說明書中所採用的術語“藥學上可接受的”，是針對那些化合物、材料、組合物和/或劑型而言，它們在可靠的醫學判斷的範圍之內，適用於與人類和動物的組織接觸使用，而沒有過多的毒性、刺激性、過敏性反應或其它問題或併發症，與合理的利益/風險比相稱。
術語“藥學上可接受的鹽”是指本發明化合物的鹽， 由本發明發現的具有特定取代基的化合物與相對無毒的酸或鹼製備。當本發明的化合物中含有相對酸性的官能基時，可以通過在純的溶液或合適的惰性溶劑中用足夠量的鹼與這類化合物的中性形式接觸，獲得鹼加成鹽。藥學上可接受的鹼加成鹽可以包括胺鹽或金屬鹽類，如鈉、鉀、鈣、銨、有機氨或鎂鹽等鹽類。當本發明的化合物中含有相對鹼性的官能基時，可以通過在純的溶液或合適的惰性溶劑中用足夠量的酸與這類化合物的中性形式接觸，獲得酸加成鹽。藥學上可接受的酸加成鹽的實例包括無機酸鹽以及有機酸。該無機酸包括例如鹽酸、氫溴酸、硝酸、碳酸，碳酸氫根，磷酸、磷酸一氫根、磷酸二氫根、硫酸、硫酸氫根、氫碘酸、亞磷酸等。而有機酸鹽所含之有機酸可以包括如乙酸、丙酸、異丁酸、馬來酸、丙二酸、苯甲酸、琥珀酸、辛二酸、反丁烯二酸、乳酸、扁桃酸、鄰苯二甲酸、苯磺酸、對甲苯磺酸、檸檬酸、酒石酸和甲磺酸等，以及胺基酸(如精氨酸等)的鹽，以及如葡糖醛酸等有機酸的鹽(參見Berge et al.,"Pharmaceutical Salts",Journal of Pharmaceutical Science 66：1-19(1977))。本發明的某些特定的化合物含有鹼性和酸性的官能基，從而可以被轉換成任一鹼或酸加成鹽。
本發明較佳實施例中，以常規方式使鹽與鹼或酸接觸，再分離母體化合物，由此再生成化合物的中性形式。化合物的母體形式與其各種鹽的形式的不同之處在於某些物理性質，例如在極性溶劑中的溶解度不同。
本文所用的“藥學上可接受的鹽”屬於本發明化合物的衍生物，其中，通過與酸成鹽或與鹼成鹽的方式修飾上述母體化合物。藥學上可接受的鹽的實例包括但不限於：含鹼基(如胺)的無機酸或有機酸鹽、酸根(如羧酸)的鹼金屬或有機鹽等等。藥學 上可接受的鹽包括常規的無毒性的鹽或母體化合物的季銨鹽，例如無毒的無機酸或有機酸所形成的鹽。常規的無毒性的鹽包括但不限於那些衍生自無機酸和有機酸的鹽，所述的無機酸或有機酸選自2-乙醯氧基苯甲酸、2-羥基乙磺酸、乙酸、抗壞血酸、苯磺酸、苯甲酸、碳酸氫根、碳酸、檸檬酸、依地酸、乙烷二磺酸、乙烷磺酸、富馬酸、葡庚糖、葡糖酸、谷氨酸、乙醇酸、氫溴酸、鹽酸、氫碘酸鹽、羥基、羥萘、羥乙磺酸、乳酸、乳糖、十二烷基磺酸、馬來酸、蘋果酸、扁桃酸、甲烷磺酸、硝酸、草酸、雙羥萘酸、泛酸、苯乙酸、磷酸、多聚半乳糖醛、丙酸、水楊酸、硬脂酸、亞乙酸、琥珀酸、胺基磺酸、對胺基苯磺酸、硫酸、單寧、酒石酸和對甲苯磺酸。
本發明的藥學上可接受的鹽可由含有酸根或鹼基的母體化合物通過常規化學方法合成。一般情況下，這樣的鹽的製備方法是：在水或有機溶劑或兩者的混合物中，經由該化合物游離酸或鹼的形式，與適當化學計量的鹼或酸反應來製備。一般而言，醚、乙酸乙酯、乙醇、異丙醇或乙腈等非水介質為較佳的選擇。
除了鹽的形式，本發明所提供的化合物還存在前體藥物的形式(prodrug，後面簡稱前藥或前藥形式)。本文所描述的化合物的前藥容易在生理條件下發生化學變化從而轉化成本發明的化合物。此外，前體藥物可以在體內環境中通過化學或生化方法被轉換到本發明的化合物。
本發明的某些化合物可以以非溶劑化形式或者溶劑化形式存在，包括水合物形式。一般而言，溶劑化形式與非溶劑化的形式相當，都包含在本發明的範圍之內。本發明的某些化合物可以以多晶或無定形形式存在。
本發明的某些化合物可以具有不對稱碳原子(光學中心)或雙鍵。外消旋體、非對映異構體、幾何異構體和單一鏡像異構體都包括在本發明的範圍之內。本文中消旋體、ambiscalemic and scalemic或者對映體純的化合物的圖示法來自Maehr,J.Chem.Ed.1985,62：114-120。1985年，62：114-120。除非另有說明，用楔形鍵和虛線鍵表示一個立體中心的絕對構型。當本文所述化合物含有烯屬雙鍵或其它幾何不對稱中心，除非另有規定，它們包括E、Z幾何異構體。同樣地，所有的互變異構形式均包括在本發明的範圍之內。
本發明的化合物可以存在特定的幾何或立體異構體形式。本發明提供的這類化合物，包括順式和反式異構體、(-)-和(+)-對對映體、(R)-和(S)-對映體、非對映異構體、(D)-異構體、(L)-異構體，及其外消旋混合物和其他混合物，例如對映異構體或非對映體富集的混合物，所有這些混合物都屬於本發明的範圍之內。烷基等取代基中可存在另外的不對稱碳原子。所有這些異構體以及它們的混合物，均包括在本發明的範圍之內。
可以通過的對掌性(chrial)合成或對掌性試劑或者其他常規技術製備光學活性的(R)-和(S)-異構體以及D和L異構體。可以理解本發明某化合物的一種對映體，可以通過不對稱合成或者具有對掌性助劑的衍生作用來製備，其中將所得非對映體混合物分離，並且輔助基團裂開以提供純的所需對映異構體。或者，當分子中含有鹼性官能基(如胺基)或酸性官能基(如羧基)時，與適當的光學活性的酸或鹼形成非對映異構體的鹽，然後通過本領域所公知的分步結晶法(反覆進行熔融和部分結晶的方法)或色譜法(chromatography，又稱層析)進行非對映異構體拆分，然後回收得到純的對映體。此外，對映異構體和非對映異構體的分離 通常是通過使用色譜法完成的，所述色譜法採用對掌性固定相，並選擇性地與化學衍生法相結合(例如由胺生成胺基甲酸鹽)。
本發明的化合物可以在一個或多個構成該化合物的原子上包含非天然比例的原子同位素。例如，可用放射性同位素標記化合物，比如氚(3H)，碘-125(125I)或C-14(14C)。本發明的化合物的所有同位素組成的變換，無論放射性與否，都包括在本發明的範圍之內。
術語“藥學上可接受的載體”是指能夠遞送本發明有效劑量活性物質、不干擾活性物質的生物活性並且對宿主或者患者無毒副作用的任何製劑或載體介質，代表性的載體包括水、油、蔬菜和礦物質、膏基、洗劑基質、軟膏基質等。這些基質包括懸浮劑、增黏劑、透皮促進劑等。它們的製劑為化妝品領域或局部藥物領域的技術人員所熟知。關於載體的其他資訊，可以參考Remington：The Science and Practice of Pharmacy,21st Ed.,Lippincott,Williams & Wilkins(2005)，該文獻的內容通過引用的方式併入本文。
術語“賦形劑”通常是指配製有效的藥物組合物所需要載體、稀釋劑和/或介質。
針對藥物或藥理學活性劑而言，術語“有效劑量”或“治療有效劑量”是指無毒的但能達到預期效果的藥物或藥劑的足夠用量。對於本發明中的口服劑型，組合物中一種活性物質的“有效劑量”是指與該組合物中另一種活性物質聯用時，為了達到預期效果所需要的用量。有效劑量因人而異，取決於受體的年齡和一般情況，也取決於具體的活性物質，個案中合適的有效量可以由本領域技術人員根據常規試驗確定。
術語“活性成分”、“治療劑”，“活性物質”或“活性劑” 是指一種化學實體，它可以有效地治療目標紊亂、疾病或病症。
術語“被取代的”是指特定原子上的任意一個或多個氫原子被取代基取代，包括重氫(原子量為3)和氫的變體，只要特定原子的價數是正常的並且取代後的化合物是穩定的。當取代基為酮基(即=O)時，意味著兩個氫原子被取代。酮取代不會發生在芳香基上。術語“任選被取代的”是指可以被取代，也可以不被取代，除非另有規定，取代基的種類和數目在化學上可以實現的基礎上可以是任意或不限定的。
當任何變數(例如化學表示方式中的R)在化合物的組成或結構中出現一次以上時，其在每一種情況下的定義都是獨立的。因此，例如，如果一個基團被0-2個R所取代，則所述基團可以至多被兩個R所取代，並且每種情況下的R都有獨立的選項。此外，取代基和/或其變體的組合只有在這樣的組合會產生穩定的化合物的情況下才是被允許的。
當其中一個變數選自單鍵時，表示其連接的兩個基團直接相連，比如A-L-Z中L代表單鍵時表示該結構實際上是A-Z。
當一個取代基的鍵可以交叉連接到一個環上的兩個原子時，這種取代基可以與這個環上的任意原子相鍵合。當所列舉的取代基中沒有指明其通過哪一個原子連接到化學結構通式中包括但未具體提及的化合物時，這種取代基可以通過其任何原子相鍵合。取代基和/或其變體的組合只有在這樣的組合會產生穩定 的化合物的情況下才是被允許的。例如，結構單元或 表示其可在環己基或者環己二烯上的任意一個位置發生取代。
烷基和雜烷基原子團(包括通常被稱為亞烷基、鏈 烯基、亞雜烷基、雜烯基、炔基、環烷基、雜環烷基、環烯基和雜環烯基的那些基團)的取代基一般被稱為“烷基取代基”，它們可以選自但不限於下列基團中的一個或多個：-R’、-OR’、=O、=NR’、=N-OR’、-NR’R”、-SR’、鹵素、-SiR’R”R”’、OC(O)R’、-C(O)R’、-CO2R’、-CONR’R”、-OC(O)NR’R”、-NR”C(O)R’、NR’C(O)NR”R”’、-NR”C(O)2R’、-NR””’-C(NR’R”R’”)=NR””、NR””C(NR’R”)=NR’”、-S(O)R’、-S(O)2R’、-S(O)2NR’R”、NR”SO2R’、-CN、-NO2、-N3、-CH(Ph)2和氟代(C1-C4)烷基，取代基的數目為0~(2m’+1)，其中m’是這類原子團中碳原子的總數。R’、R”、R”’、R''''和R'''''為各自獨立原子團，如氫、被取代或未被取代的雜烷基、被取代或未被取代的芳基(例如被1~3個鹵素取代芳基)、被取代或未被取代的烷基、烷氧基、硫代烷氧基基團或芳烷基。值得注意的是，當本發明的化合物包括一個以上的R基團時，每個R基團皆可以相同或是不相同，如同當存在一個以上的R’、R”、R”’、R''''和R'''''基團。當R'和R”附著於同一個氮原子時，它們可與該氮原子結合形成5-，6-或7-元環。例如，-NR'R”意在包括但不僅限於1-吡咯烷基和4-嗎啉基。根據上述關於取代基的討論中，本領域技術人員可以理解，術語“烷基”意在包括碳原子鍵合於非氫基團所構成的基團，如鹵代烷基(例如-CF3、-CH2CF3)和醯基(例如-C(O)CH3、-C(O)CF3、-C(O)CH2OCH3等)。
與烷基原子團所述取代基相似，芳基和雜芳基取代基一般統稱為“芳基取代基”，選自例如-R’、-OR’、-NR’R”、-SR’、-鹵素，-SiR’R”R”’、OC(O)R’、-C(O)R’、-CO2R’、-CONR’R”、-OC(O)NR’R”、-NR”C(O)R’、NR’C(O)NR”R”’、-NR”C(O)2R’、-NR””’-C(NR’R”R’”)=NR””、NR””C(NR’R”)=NR’”、-S(O)R’、-S(O)2R’、-S(O)2NR’R”、NR”SO2R’、-CN、-NO2、-N3、-CH(Ph)2、 氟(C1-C4)烷氧基和氟(C1-C4)烷基等，取代基的數量介於0與芳香環上開放化合價的總數之間；其中R’、R”、R”’、R””和R””’彼此獨立存在，且較佳選自氫、被取代或未被取代的烷基、被取代或未被取代的雜烷基、被取代或未被取代的芳基和被取代或未被取代的雜芳基。當本發明的化合物包括一個以上的R基團時，如同當存在一個以上R’、R”、R”’、R””和R””’基團。
芳基或雜芳基環的相鄰原子上的兩個取代基可以任選地被通式為-T-C(O)-(CRR’)q-U-的取代基所取代，其中T和U獨立地選自-NR-、-O-、CRR'-或單鍵，q是0到3的整數。作為替代選擇，芳基或雜芳基環的相鄰原子上的兩個取代基可以任選地被通式為-A(CH2)r B-的取代基所取代，其中A和B獨立的選自-CRR’-、-O-、-NR-、-S-、-S(O)-、S(O)2-、-S(O)2NR’-或單鍵，r是1~4的整數。任選地，由此形成的新環上的一個單鍵可以替換為雙鍵。作為替代選擇，芳基或雜芳基環的相鄰原子上的兩個取代基可以任選地被通式為-A(CH2)r B-的取代基所取代，其中s和d分別獨立的選自0~3的整數，X是-O-、-NR’、-S-、-S(O)-、-S(O)2-或-S(O)2NR’-。取代基R、R’、R”和R”’分別獨立地優選自氫和被取代或未被取代的(C1-C6)烷基。
除非另有規定，術語“鹵代素”或“鹵素”本身或作為另一取代基的一部分表示包含氟、氯、溴和/或碘原子。此外，術語“鹵代烷基”包括單鹵代烷基和多鹵代烷基。例如，術語“鹵代(C1-C4)烷基”包括但不僅限於三氟甲基、2，2，2-三氟乙基、4-氯丁基和3-溴丙基等等。
鹵代烷基的實例包括但不僅限於：三氟甲基、三氯甲基、五氟乙基，和五氯乙基。“烷氧基”代表通過氧原子做為鍵結(或稱氧橋)連接的具有特定數目碳原子的上述烷基。C1-6烷氧基 包括C1、C2、C3、C4、C5和C6的烷氧基。烷氧基的例子包括但不限於：甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、仲丁氧基、三級丁氧基、正戊氧基和S-戊氧基。“環烷基”包括飽和環基，如環丙基、環丁基或環戊基。3-7環烷基包括C3、C4、C5、C6和C7環烷基。“鏈烯基”包括直鏈或支鏈構型的烴鏈，其中該鏈上任何的穩定位點上存在一個或多個碳-碳雙鍵，例如乙烯基和丙烯基。
術語“鹵”或“鹵素”是指氟、氯、溴和/或碘。
除非另有規定，術語“雜”表示雜原子或雜原子團(即含有雜原子的原子團)，包括碳(C)和氫(H)以外的原子以及含有這些雜原子的原子團，例如包括氧(O)、氮(N)、硫(S)、矽(Si)、鍺(Ge)、鋁(Al)、硼(B)、-O-、-S-、=O、=S、-C(=O)O-、-C(=O)-、-C(=S)-、-S(=O)、-S(=O)2-，以及任選被被取代的-C(=O)N(H)-、-N(H)-、-C(=NH)-、-S(=O)2N(H)-或-S(=O)N(H)-。
除非另有規定，“環”表示被取代或未被取代的環烷基、雜環烷基、環烯基、雜環烯基、環炔基、雜環炔基、芳基或雜芳基。所謂的環包括單環、聯環、螺環、並環或橋環。環上原子的數目在文中被定義為環的元數，例如，“5~7元環”是指環繞排列5~7個原子，再舉例來說，3-9元碳環即含碳原子數介於3-9之間的碳環。除非另有規定，該環任選地包含1~3個雜原子。因此，“5~7元環”包括例如苯基吡啶和呱啶基；另一方面，術語“5~7元雜環烷基環”包括吡啶基和呱啶基，但不包括苯基。術語“環”還包括含有至少一個環的環系，其中的每一個“環”均獨立地符合上述定義。
除非另有規定，術語“雜環”或“雜環基”意指穩定的含雜原子或雜原子團的單環、雙環或三環，它們可以是飽和的、部 分不飽和的或不飽和的(芳族的)，它們包含碳原子和1、2、3或4個獨立地選自N、O和S的環雜原子，其中上述任意雜環可以稠合到一個苯環上形成雙環。氮和硫雜原子單一或全部可以選擇性地被氧化(即NO和S(O)p)。氮原子可以是被取代的或未取代的(即N或NR，其中R是H或本文已經定義過的其他取代基)。該雜環可以附著到任何雜原子或碳原子的側基上從而形成穩定的結構。如果產生的化合物是穩定的，本文所述的雜環可以發生碳位或氮位上的取代。雜環中的氮原子任選地被季銨化。一個較佳選擇是，當雜環中S及O原子的總數超過1時，這些雜原子彼此不相鄰。另一個較佳選擇是，雜環中S及O原子的總數不超過1。如本文所用，術語“芳族雜環基團”或“雜芳基”意指穩定的5、6、7元單環或雙環或7、8、9或10元雙環雜環基的芳香環，它包含碳原子和1、2、3或4個獨立地選自N、O和S的環雜原子。氮原子可以是被取代的或未取代的(即N或NR，其中R是H或本文已經定義過的其他取代基)。氮和硫雜原子單一或全部可以選擇性地被氧化(即NO和S(O)p)。值得注意的是，芳香雜環上S和O原子的總數不超過1。橋環也包含在雜環的定義中。當一個或多個原子(即C、O、N或S)連接兩個不相鄰的碳原子或氮原子時形成橋環。橋環包括但不限於：一個碳原子、兩個碳原子、一個氮原子、兩個氮原子和一個碳-氮基。值得注意的是，一個橋總是將單環轉換成三環。橋環中，環上的取代基也可以出現在橋上。
雜環化合物的實例包括但不限於：吖啶基、吖辛因基、苯並咪唑基、苯並呋喃基、苯並巰基呋喃基、苯並巰基苯基、苯並惡唑基、苯並惡唑啉基、苯並噻唑基、苯並三唑基、苯並四唑基、苯並異惡唑基、苯並異噻唑基、苯並咪唑啉基、哢唑基、4aH-哢唑基、哢啉基、苯並二氫吡喃基、色烯、噌啉基十氫喹啉 基、2H,6H-1,5,2-二噻嗪基、二氫呋喃並[2,3-b]四氫呋喃基、呋喃基、呋咱基、咪唑烷基、咪唑啉基、咪唑基、1H-吲唑基、吲哚烯基、二氫吲哚基、中氮茚基、吲哚基、3H-吲哚基、isatino基、異苯並呋喃基、異吲哚基、異二氫吲哚基、異喹啉基、異噻唑基、異惡唑基、亞甲二氧基苯基、嗎啉基、萘啶基，八氫異喹啉基、惡二唑基、1,2,3-惡二唑基、1,2,4-惡二唑基、1,2,5-惡二唑基、1,3,4-惡二唑基、惡唑烷基、惡唑基、羥吲哚基、嘧啶基、菲啶基、菲咯啉基、吩嗪、吩噻嗪、苯並黃嘌呤基、酚惡嗪基、酞嗪基、呱嗪基、呱啶基、呱啶酮基、4-呱啶酮基、胡椒基、蝶啶基、嘌呤基、吡喃基、吡嗪基、吡唑烷基、吡唑啉基、吡唑基、噠嗪基、吡啶並惡唑、吡啶並咪唑、吡啶並噻唑、吡啶基、吡咯烷基、吡咯啉基、2H-吡咯基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、4H-喹嗪基、喹喔啉基、奎寧環基、四氫呋喃基、四氫異喹啉基、四氫喹啉基、四唑基，6H-1,2,5-噻二嗪基、1,2,3-噻二唑基、1,2,4-噻二唑基、1,2,5-噻二唑基、1,3,4-噻二唑基、噻蒽基、噻唑基、異噻唑基噻吩基、噻吩基、噻吩並惡唑基、噻吩並噻唑基、噻吩並咪唑基、三嗪基、1,2,3-三唑基、1,2,4-三唑基、1,2,5-三唑基、1,3,4-三唑基和呫噸基。還包括稠環(Fused rings)和螺環化合物。
除非另有規定，術語“烴基”或者其下位概念(如烷基、烯基、炔基、苯基等)，本身或者作為另一取代基的一部分時，代表直鏈的、支鏈的或環狀的烴原子團或其組合，可以是完全飽和的、單元或多元不飽和的，可以是單取代、二取代或多取代的，可以包括二價或多價原子團，具有指定數量的碳原子(如C1-C10表示1至10個碳)。“烴基”包括但不限於脂肪烴基和芳香烴基，所述脂肪烴基包括鏈狀和環狀，具體包括但不限於烷基、烯基、炔基，所述芳香烴基包括但不限於6-12元的芳香烴基，例如苯、 萘等。在一些實施例中，術語“烷基”表示直鏈的或支鏈的原子團或它們的組合，可以是完全飽和的、單元或多元不飽和的，可以包括二價和多價原子團。飽和烴原子團的實例包括但不限於甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、三級丁基、異丁基、仲丁基、異丁基、環己基、(環己基)甲基、環丙基甲基，以及正戊基、正己基、正庚基、正辛基等原子團的同系物或異構體。不飽和烷基具有一個或多個雙鍵或三鍵，其實例包括但不限於乙烯基、2-丙烯基、丁烯基、巴豆基、2-異戊烯基、2-(丁二烯基)、2，4-戊二烯基、3-(1，4-戊二烯基)、乙炔基、1-和3-丙炔基，3-丁炔基，以及更高級的同系物和異構體。
除非另有規定，術語“雜烴基”(如雜烷基、雜烯基、雜炔基、雜芳基等皆為其下位概念)，本身或者與另一化合物(如上述說明之術語)結合時，表示穩定的直鏈的、支鏈的或環狀的烴原子團或其組合，其具有一定數目的碳原子和至少一個雜原子組成。在一些實施例中，術語“雜烷基”本身或者與另一術語聯合表示穩定的直鏈的、支鏈的烴原子團或其組合物，有一定數目的碳原子和至少一個雜原子組成。在一個實施例中，雜原子選自B、O、N和S，其中氮和硫原子單一或全部可以選擇性地被氧化，氮雜原子可以選擇性地被季銨化。雜原子B、O、N和S可以位於雜烴基的任何內部位置(包括該烴基附著於分子其餘部分的位置)。實例包括但不限於-CH2-CH2-O-CH3、-CH2-CH2-NH-CH3、-CH2-CH2-N(CH3)-CH3、-CH2-S-CH2-CH3、-CH2-CH2、-S(O)-CH3、-CH2-CH2-S(O)2-CH3、-CH=CH-O-CH3、-CH2-CH=N-OCH3和-CH=CH-N(CH3)-CH3。至多兩個雜原子可以是連續的，例如-CH2-NH-OCH3。
術語“烷氧基”、“烷胺基”和“烷硫基”(或硫代烷氧基) 屬於慣用表達，是指分別通過一個氧原子、胺基或硫原子連接到分子的其餘部分的那些烷基基團。
除非另有規定，術語“環烴基”、“雜環烴基”或者其下位概念(比如芳基、雜芳基、環烷基、雜環烷基、環烯基、雜環烯基、環炔基、雜環炔基等)，其本身或與其他術語聯合，分別表示環化的“烴基”、“雜烴基”。此外，就雜烴基或雜環烴基(比如雜烷基、雜環烷基)而言，雜原子可以佔據該雜環附著於分子其餘部分的位置。環烷基的實例包括但不限於環戊基、環己基、1-環己烯基、3-環己烯基、環庚基等。雜環基的非限制性實例包括1-(1,2,5,6-四氫吡啶基)、1-呱啶基、2-呱啶基，3-呱啶基、4-嗎啉基、3-嗎啉基、四氫呋喃-2-基、四氫呋喃吲哚-3-基、四氫噻吩-2-基、四氫噻吩-3-基，1-呱嗪基和2-呱嗪基。
除非另有規定，術語“芳基”表示多不飽和的芳族烴取代基，可以是單取代、二取代或多取代的，它可以是單環或多環(優選1至3個環)，它們稠合在一起或共價連接。術語“雜芳基”是指含有一至四個雜原子的芳基(或環)。在一個示範性實例中，雜原子選自B、N、O和S，其中氮和硫原子單一或全部可以選擇性地被氧化，氮原子單一或全部可以選擇性地被季銨化。雜芳基可通過雜原子連接到分子的其餘部分。芳基或雜芳基的非限制性實施例包括苯基、1-萘基、2-萘基、4-聯苯基、1-吡咯基、2-吡咯基、3-吡咯基、3-吡唑基、2-咪唑基、4-咪唑基、吡嗪基、2-惡唑基、4-惡唑基、2-苯基-4-惡唑基、5-惡唑基、3-異惡唑基、4-異惡唑基、5-異惡唑基、2-噻唑基、4-噻唑基、5-噻唑基、2-呋喃基、3-呋喃基、2-噻吩基、3-噻吩基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2-嘧啶基、4-嘧啶基、5-苯並噻唑基、嘌呤基、2-苯並咪唑基、5-吲哚基、1-異喹啉基、5-異喹啉基、2-喹喔啉基、5-喹喔 啉基、3-喹啉基和6-喹啉基。上述任意一個芳基和雜芳基環系的取代基選自下文所述的可接受的取代基。
為簡便起見，芳基在與其他術語聯合使用時(例如芳氧基、芳硫基、芳烷基)，包括如上定義的芳基和雜芳基環。因此，術語“芳烷基”包括芳基附著於烷基的那些原子團(例如苄基、苯乙基、吡啶基甲基等)，舉例來說，其可包括其中的碳原子(如亞甲基)已經被例如氧原子代替的那些烷基，例如苯氧基甲基、2-吡啶氧甲基3-(1-萘氧基)丙基等。
術語“離去基團”是指可以被另一種官能基或原子通過取代反應(例如親和取代反應)所取代的官能基或原子。代表性的離去基團例如三氟甲磺酸酯；氯、溴、碘；磺酸酯基，如甲磺酸酯、甲苯磺酸酯、對溴苯磺酸酯、對甲苯磺酸酯等；醯氧基，如乙醯氧基、三氟乙醯氧基等。
術語“保護基”包括但不限於“胺基保護基”、“羥基保護基”或“巰基保護基”。術語“胺基保護基”是指適合用於阻止胺基氮位上副反應的保護基團。代表性的胺基保護基包括但不限於：甲醯基；醯基，例如鏈烷醯基(如乙醯基、三氯乙醯基或三氟乙醯基)；烷氧基羰基，如三級丁氧基羰基(Boc)；芳基甲氧羰基，如苄氧羰基(Cbz)和9-芴甲氧羰基(Fmoc)；芳基甲基，如苄基(Bn)、三苯甲基(Tr)、1,1-二-(4'-甲氧基苯基)甲基；甲矽烷基，如三甲基甲矽烷基(TMS)和三級丁基二甲基甲矽烷基(TBS)等等。術語“羥基保護基”是指適合用於阻止羥基副反應的保護基。代表性羥基保護基包括但不限於：烷基，如甲基、乙基和三級丁基；醯基，例如鏈烷醯基(如乙醯基)；芳基甲基，如苄基(Bn)，對甲氧基苄基(PMB)、9-芴基甲基(Fm)和二苯基甲基(二苯甲基，DPM)；甲矽烷基，如三甲基甲矽烷基(TMS)和三級丁基二甲基 甲矽烷基(TBS)等等。
本發明的化合物可以通過本領域技術人員所熟知的多種合成方法來製備，包括下面列舉的具體實施方式、其與其他化學合成方法的結合所形成的實施方式以及本領域技術上人員所熟知的等同替換方式，較佳的實施方式包括但不限於本發明的實施例。
本發明所使用的所有溶劑皆為市面上可以找到之市售化合物，無需進一步純化即可使用。反應一般是在惰性氮氣下、無水溶劑中進行的。質子核磁共振資料記錄在Bruker Avance III 400(400MHz)分光儀上，化學位移以四甲基矽烷低場處的(ppm)表示方法。質譜是在安捷倫1200系列加6110(&1956A)上測定。LC/MS或Shimadzu MS包含一個DAD：SPD-M20A(LC)和Shimadzu Micromass 2020檢測器。質譜儀配備有一個正或負模式下操作的電噴霧離子源(ESI)。
本發明採用下述縮略詞：aq代表水；HATU代表O-7-氮雜苯並三唑-1-基)-N，N，N'，N'-四甲基脲六氟磷酸鹽；EDC代表N-(3-二甲基胺基丙基)-N'-乙基碳二亞胺鹽酸鹽；m-CPBA代表3-氯過氧苯甲酸；eq代表當量、等量；CDI代表羰基二咪唑；DCM代表二氯甲烷；PE代表石油醚；DIAD代表偶氮二羧酸二異丙酯；DMF代表N，N-二甲基甲醯胺；DMSO代表二甲亞碸；EtOAc代表乙酸乙酯；EtOH代表乙醇；MeOH代表甲醇；CBz代表苄氧羰基，是一種胺保護基團；BOC代表三級丁基羰基是一種胺保護基團；HOAc代表乙酸；NaCNBH3代表氰基硼氫化鈉；r.t.代表室溫；O/N代表過夜；THF代表四氫呋喃；Boc2O代表二-三級丁基二碳酸酯；TFA代表三氟乙酸；DIPEA代表二異丙基乙基胺；SOCl2代表氯化亞碸；CS2代表二硫化碳；TsOH代表對甲苯磺酸；NFSI代 表N-氟-N-(苯磺醯基)苯磺醯胺；NCS代表1-氯吡咯烷-2,5-二酮；n-Bu4NF代表氟化四丁基銨；iPrOH代表2-丙醇；mp代表熔點。
化合物經手工或者ChemDraw®軟體命名，市售化合物採用供應商目錄名稱。
用配有Shimadzu SIL-20A自動進樣器和日本島津DAD：SPD-M20A探測器的島津LC20AB系統進行高效液相色譜分析，採用Xtimate C18(3m填料，規格為2.1 x 300mm)色譜柱。0-60AB_6分鐘的方法：應用線性梯度，以100%A(A為0.0675% TFA的水溶液)開始洗脫，並以60% B(B為0.0625% TFA的MeCN溶液)結束洗脫，整個過程為4.2分鐘，然後以60% B洗脫1分鐘。將色譜柱再平衡0.8分鐘達到100：0，總執行時間為6分鐘。10-80AB_6分鐘的方法：應用線性梯度，以90%A(A為0.0675%TFA的水溶液)開始洗脫，並以80%B(B為0.0625%TFA的乙腈溶液)結束洗脫，整個過程為4.2分鐘，然後以80% B洗脫1分鐘。將色譜柱再平衡0.8分鐘達到90：10，總執行時間為6分鐘。柱溫為50℃，流速為0.8mL/min。二極體陣列檢測器掃描波長為200-400nm。
在Sanpont-group的矽膠GF254上進行薄層色譜分析(TLC)，常用紫外光燈照射檢出斑點，在某些情況下也採用其他方法檢視斑點，在這些情況下，用碘(10g矽膠中加入約1g碘並徹底混合而成)、香草醛(溶解大約1g香草醛於100mL 10% H2SO4中制得)、茚三酮(從Aldrich購得)或特殊顯色劑(徹底混合(NH4)6Mo7O24˙4H2O、5g(NH4)2Ce(IV)(NO3)6、450mL H2O和50mL濃H2SO4而制得)展開薄層板，檢視化合物。採用Still,W.C.；Kahn,M.；and Mitra,M.Journal of Organic Chemistry,1978,43,2923-2925.中所公開技術的類似方法，在Silicycle的40-63μm (230-400目)矽膠上進行快速柱色譜。快速柱色譜或薄層色譜的常用溶劑是二氯甲烷/甲醇、乙酸乙酯/甲醇和己烷/乙酸乙酯的混合物。
在Gilson-281 Prep LC 322系統上採用吉爾森UV/VIS-156探測器進行製備色譜分析，所採用的色譜柱是Agella Venusil ASB Prep C18,5m、150 x 21.2mm；Phenomenex Gemini C18、5□m、150 x 30mm；Boston Symmetrix C18,5m、150 x 30mm；或者Phenomenex Synergi C18、4m、150 x 30mm。在流速約為25mL/min時，用低梯度的乙腈/水洗脫化合物，其中水中含有0.05% HCl、0.25% HCOOH或0.5% NH3˙H2O，總執行時間為8-15分鐘。
用帶有Agilent1260自動進樣器和Agilent DAD：1260檢測器的Agilent 1260 Infinity SFC系統進行SFC分析。色譜柱採用Chiralcel OD-H 250 x 4.6mm I.D.,5um或者Chiralpak AS-H 250 x 4.6mm I.D.,5m或者Chiralpak AD-H 250 x 4.6mm I.D.,5m。OD-H_5_40_2.35ML的色譜條件：Chiralcel OD-H色譜柱(規格為250 x 4.6mm I.D.,□5m填料)，流動相為40%乙醇(0.05%DEA)-CO2；流速為2.35mL/min；檢測波長為220nm。AS-H_3_40_2.35ML色譜條件：Chiralpak AS-H色譜柱(規格為250 x 4.6mm I.D.,5m填料)；流動相為40%甲醇(0.05% DEA)-CO2；流速為2.35mL/min，檢測波長為220nm。OD-H_3_40_2.35M色譜條件：Chiralcel OD-H色譜柱(規格為250 x 4.6mm I.D，5m填料)，流動相為40%甲醇(0.05% DEA)-CO2，流速為2.35mL/min，檢測波長為220nm。AD-H_2_50_2.35ML色譜條件：Chiralpak AD-H色譜柱(規格為250 x 4.6mm I.D，5mm填料)，流動相為50%甲醇(0.1% MEA)-CO2，流速為2.35mL/min，檢測波長為220nm。
在使用Gilson UV檢測器的Waters Thar 80 Pre-SFC系統上進行製備型SFC分析，所採用的色譜柱為Chiralcel OD-H(規格為250 x 4.6mm I.D，5m填料)或者Chiralpak AD-H(規格為250 x 4.6mm I.D，5m填料)。在流速約為40-80mL/min時，用低梯度的乙醇-二氧化碳或者甲醇-二氧化碳洗脫化合物，其中甲醇或乙醇含有0.05% NH3˙H2O、0.05% DEA或者0.1% MEA，總執行時間為20-30分鐘。
本發明部分化合物的製備方法如下說明。
本發明的化合物可以通過本領域技術人員所熟知的多種合成方法來製備，包括下面列舉的具體實施方式、其與其他化學合成方法的結合所形成的實施方式以及本領域技術上人員所熟知的等同替換方式，較佳的實施方式包括但不限於本發明的實施例。
本發明具體實施方式的化學反應是在合適的溶劑中完成的，所述的溶劑須適合於本發明的化學變化及其所需的試劑和物料。為了獲得本發明的化合物，有時需要本領域技術人員在已有實施方式的基礎上對合成步驟或者反應流程進行修改或選擇。
本領域任何合成實驗規劃中的一個重要考量因素是為反應性官能基(如本發明中的胺基)選擇合適的保護基。對於經過訓練的從業者來說，Greene and Wuts的(Protective Groups In Organic Synthesis,Wiley and Sons,1991)是這方面的權威。本發明引用的所有參考文獻整體上併入本發明。
本發明中化學式(IV)所示之化合物可以通過如下所示之反應流程1以及本領域技術人員所熟知的標準方法所製備。以戊內醯胺(1-1)為例，在有機溶劑(比如CHCl3)存在的情況 下用五氯化磷氯代，所得羰基鄰位被二氯代的內醯胺經嗎啉取代並消除，得到中間產物即被一個嗎啉取代的二氫呱啶酮，其與芳香基鹵代乙醯肼進行(3+2)成環反應並在酸性條件下消除一分子嗎啉形成吡唑並吡啶環系，然後在鈀催化下經Bulkwald反應引入吡啶基團。吡啶基團在二氧化箔催化下氫化還原為呱啶基團，呱啶基團上的胺基被氧化引入亞硝基，經鋅粉還原後得到肼基化合物，肼基官能團經與鹵代烷基羧酸的醯胺縮合反應、NaH處理成六元內醯胺環，最後通過氨氣的胺酯交換反應形成甲醯胺官能團(1-6)，即本發明的凝血因子Xa抑制劑。
反應流程1
具體而言，本發明所提供的化學式(IV)之化合物可以通過反應流程1以及本領域技術人員所熟知的標準方法所製備。從市售戊內醯胺(1-1)衍生物開始，也可以從其他具有不同官能基修飾的近似衍生物開始。舉例來說，戊內醯胺的胺基被烷基化的中間體，化合物(1-3)環上的R可以為甲醯胺、羧酸乙酯、甲腈基、三氟甲基等，X、Y、Z選自各種芳香或飽和的碳環或雜環。所有這些變化、替換將在後面以具體實施方式予以詳述。本領域技術人員應該知道，為了製備本發明化合物，反應流程1中的反應步驟的順序可以是不同的，這也屬於本發明的範圍。
本說明書提供的化學式(I)所示的一系列新的醯肼化合物，對凝血因子Xa來說是具有選擇性的強效抑制劑，因此可用作抗凝血劑使用。與習知技術相比，本發明化合物具有較佳的水溶性、增強的療效以及更低的出血傾向。因此，化學式(I)的化合物可以成為血栓栓塞性疾病的治療或預防藥物。
接著，本發明的具體實施方式將以詳細說明不同實施例的方式呈現。下面通過實施例對本發明進行詳細描述，但並非用以限制本發明。
依據本發明實施例1提供之化學式與其反應流程如下所示。
4-(4-(1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-3-(三氟甲基)-4,5-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-6(7H)-基)呱啶-1-基)嗎啡啉-3-酮
步驟A：將(4-甲氧基苯基)肼鹽酸鹽(4.83克，27.7毫莫耳)溶解在乙醇(50毫升)中，加入1-乙氧基-2,2,2-三氟乙醇(4.8克，33.3毫莫耳)，然後將該混合物回流16小時。將反應物濃縮，然後將殘餘物溶解在DMF(50mL)中，並冷卻至0℃。NBS(6.1克，27.7毫莫耳)緩慢加入到該溶液中。將反應混合物升溫至25℃並攪拌16小時。反應混合物用水淬滅(quenching)，用乙酸乙酯萃取(extraction)。將合併的有機相用鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。將粗殘餘物通過矽膠色譜法(PE到PE：EA=20：1)純化，得到(Z)-2,2,2-三氟-N'-(4-甲氧基苯基)溴代乙醯肼(3.3克，39%)，為黃色油狀物。LCMS (ESI)m/z：296.0(M+23)。
步驟B：在(Z)-2,2,2-三氟-N'-(4-甲氧基苯基)溴代乙醯肼(3.3克，11.1毫莫耳)的甲苯溶液(35毫升)中加入3-嗎啉代-5,6-二氫呱啶-2(1H)-酮(2.43克，13.3毫莫耳)和TEA(2.25克，22.2毫莫耳)，將混合物加熱至回流16小時。反應混合物倒入水(80毫升)中，用EA(80毫升×2)萃取，鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。將粗殘餘物通過矽膠色譜純化(PE到PE：EA=5：1至1：1)，得到1-(4-甲氧基苯基)-7α-嗎啉代-3-(三氟甲基)-3α,4,5,6-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-7(7αH)-酮(1.38克，30%)，為黃色固體。LCMS(ESI)M/Z：421.1(M+23)。
步驟C：在1-(4-甲氧基苯基)-7α-嗎啉代-3-(三氟甲基)-3α,4,5,6-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-7(7αH)-酮(1.38克，3.46毫莫耳)的DCM(15mL)溶液中加入TFA(1.5mL)。混合物在25℃下攪拌2小時後倒入水(50mL)中，用DCM(50毫升×2)萃取。合併的有機相用鹽水洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，濃縮，得到1-(4-甲氧基苯基)-3-(三氟甲基基)-5,6-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-7(4H)-酮(1.08克，粗品)，為黃色固體。LCMS(ESI)M/Z：312.2(M+1)。
步驟D：將1-(4-甲氧基苯基)-3-(三氟甲基基)-5,6-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-7(4H)-酮(1.08克，3.47毫莫耳)，4-溴吡啶鹽酸鹽(1.01克，5.2毫莫耳)，Pd2(dba)3(318毫克，8.67毫莫耳)，Xantphos(200毫克，0.347毫莫耳)和碳酸銫(2.83克，8.67毫莫耳)加入甲苯(15mL)中。混合物加熱至80℃，持續16小時。混合物冷卻至室溫後過濾。將濾液濃縮，粗品殘餘物通過矽膠色譜法(PE：EA=10：1至1：1)純化，得到1-(4-甲氧基苯基)-6-(吡啶-4-基)-3-(三氟甲基)-5,6-二氫-1H- 吡唑並[3,4-c]吡啶-7(4H)-酮(800毫克，59%)，為黃色固體。LCMS(ESI)M/Z：389.1(M+1)。
步驟E：將1-(4-甲氧基苯基)-6-(吡啶-4-基)-3-(三氟甲基)-5,6-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-7(4H)-酮(80(0毫克，2.06毫莫耳)和二氧化鉑(50毫克)加入AcOH(10mL)溶液中，50psi壓力的H2下，25℃攪拌16小時。將混合物過濾，並將濾液濃縮，得到1-(4-甲氧基苯基)-6-(呱啶-4-基)-3-(三氟甲基)-5,6-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-7(4H)-酮(900毫克，粗產物)，為黃色油狀物，直接用於下一步驟。LCMS(ESI)M/Z：395.2(M+1)。
步驟F：在0℃下於1-(4-甲氧基苯基)-6-(呱啶-4-基)-3-(三氟甲基)-5,6-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-7(4H)-酮(900毫克粗品，2.06mmol)的AcOH(8mL)溶液中加入亞硝酸鈉(711毫克，10.3毫莫耳，4毫升水)溶液。將混合物升溫至25℃下並攪拌16小時。將混合物倒入水(30mL)中，用DCM(30毫升×2)萃取。合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，濃縮，得1-(4-甲氧基苯基)-6-(1-亞硝基呱啶-4-基)-3-(三氟甲基)-5,6-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-7(4H)-酮(900毫克，粗產物)，為黃色固體。LCMS(ESI)M/Z：424.2(M+1)。
步驟G：在1-(4-甲氧基苯基)-6-(1-亞硝基呱啶-4-基)-3-(三氟甲基)-5,6-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-7(4H)-酮(900毫克粗，2.06毫莫耳)的AcOH(10毫升)溶液中加入鋅粉(670毫克，10.3毫莫耳)。混合物在25℃下攪拌3小時後過濾，將濾液濃縮，少量的AcOH凍幹除去。粗殘餘物6-(1-胺基呱啶-4-基)-1-(4-甲氧基苯基)-3-(三氟甲基)-5,6-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-7(4H)-酮(900毫克粗品，2.06毫莫耳)直接用於下一步驟。LCMS(ESI) M/Z：410.2(M+1)。
步驟H：在2-(2-氯乙氧基)乙酸(342毫克2.47毫莫耳)的DMF(10mL)溶液中加入HATU(939毫克，2.47毫莫耳)，DIEA(532毫克，4.12毫莫耳)和6-(1-胺基呱啶-4-基)-1-(4-甲氧基苯基)-3-(三氟甲基)-5,6-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-7(4H)-酮(900毫克粗品，2.06毫莫耳)。混合物在25℃下攪拌16小時。將混合物倒入水(80毫升)中，用EA(60毫升×2)萃取。合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，濃縮。粗殘餘物通過矽膠色譜純化(PE：EA=1：1至EA)，得到2-(2-氯乙氧基)-N-(4-(1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-3-(三氟甲基)-4,5-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-6(7H)-基)呱啶-1-基)乙醯胺(900毫克，82%)，為黃色固體。LCMS(ESI)M/Z：530.2(M+1)。
步驟I：在0℃下，於2-(2-氯乙氧基)-N-(4-(1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-3-(三氟甲基)-4,5-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-6(7H)-基)呱啶-1-基)乙醯胺(900毫克，1.7毫莫耳)的DMF(10mL)溶液中加入NaH(74.8毫克，1.87毫莫耳)。混合物在25℃下攪拌2小時後倒入水(80mL)中，用EA(80毫升)萃取，無水硫酸鈉乾燥，濃縮。粗殘餘物通過製備型HPLC(甲酸)純化，得到4-(4-(1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-3-(三氟甲基)-4,5-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-6(7H)-基)呱啶-1-基)嗎啡啉-3-酮(303毫克，36%)，為白色固體。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 7.45(m,2H),7.02(m,2H),4.24(m,1H),3.97(s,2H),3.82-3.78(m,5H),3.60(t,J=6.4Hz,2H),3.42-3.39(m,4H),3.02-2.99(m,2H),2.90-2.88(m,2H),1.82-1.77(m,2H),1.59-1.56(m,2H).LCMS(ESI)m/z：494.2(M+1)。
依據本發明實施例2提供之化學式與其反應流程如 下所示。
1-(4-甲氧基苯基)-6-(2'-氧代-[1,1'-二呱啶基]-4-基)-3-(三氟甲基)-5,6-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-7(4H)-酮
步驟A：將6-(1-胺基呱啶-4-基)-1-(4-甲氧基苯基)-3-(三氟甲基)-5,6-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-7(4H)-酮(500毫克，1.22毫莫耳)溶解在DMF(8毫升)中，溶液中加入DIEA(315毫克，2.44毫莫耳)和5-溴戊醯氯(267毫克，1.34毫莫耳)。混合物在25℃攪拌3小時後倒入水(30毫升)中，用EA(30毫升×2)萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮。粗殘餘物用薄層色譜法純化(EA)得到5-溴-N-(4-(1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-3-(三氟甲基)-4,5-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-6(7H)-基)呱啶-1-基)戊醯胺(180毫克，25%)，為黃色固體。LCMS(ESI)m/z：528.2(M+1),530.2(M+3)。
步驟B：在0℃下，於5-溴-N-(4-(1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-3-(三氟甲基)-4,5-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-6(7H)-基)呱啶-1-基)戊醯胺(180毫克，0.315毫莫耳)的DMF(3mL)溶液中加入NaH(14毫克，0.346毫莫耳)。混合物在25℃下攪拌3小時後倒入水(30mL)中，用EtOAc(30毫升×2)萃取，無水硫酸鈉乾燥並濃縮。粗殘餘物通過製備級HPLC純化(甲酸)，得到1-(4-甲氧基苯基)-6-(2'-氧代-[1,1'-二呱啶基]-4-基)-3-(三氟甲基)-5,6-. 二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-7(4H)-酮(32毫克，20%)，為白色固體。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 7.46-7.44(m,2H),7.03-7.01(m,2H),4.23-4.21(m,1H),3.82(s,3H),3.61-3.57(m,4H),3.31-3.29(m,2H),2.88-2.67(m,4H),2.32-2.16(m,2H),1.74-1.71(m,4H),1.59-1.56(m,4H).LCMS(ESI)m/z：492.2(M+1)。
依據本發明實施例3提供之化學式與其反應流程如下所示。
1-(4-甲氧基苯基)-6-(1-(2-氧代吡咯烷-1-基)-呱啶基-4-基)-3-(三氟甲基)-5,6-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-7(4H)-酮
步驟A：在6-(1-胺基呱啶-4-基)-1-(4-甲氧基苯基)-3-(三氟甲基)-5,6-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-7(4H)-酮(250毫克，0.611毫莫耳)的DCM(8mL)溶液中加入Et3N(62毫克，0.611毫莫耳)和4-氯丁醯氯(86毫克，0.611毫莫耳)。將混合物在25℃下攪拌16小時，所得混合物倒入水(30mL)中，用DCM(30毫升×2)萃取，無水硫酸鈉乾燥並濃縮.粗產物用TLC(EA)純化，得到4-氯-N-(4-(1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-3-(三氟甲基)-4,5-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-6(7H)-基)呱啶-1-基)丁醯胺(100毫克，32%)，為黃色固體。LCMS(ESI)m/z：514.2(M+1),516.2(M+3)。
步驟B：在0℃下，於4-氯-N-(4-(1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-3-(三氟甲基)-4,5-二氫-1H-吡唑並[3,4-c] 吡啶-6(7H)-基)呱啶-1-基)丁醯胺(180毫克，0.351毫莫耳)的DMF(3mL)溶液中加入NaH(15.4毫克，0.385毫莫耳)。混合物在25℃下攪拌16小時後倒入水(30mL)中，用EA(30毫升×2)萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥，並濃縮。粗殘餘物通過製備級HPLC純化(甲酸)，得到1-(4-甲氧基苯基)-6-(1-(2-氧代吡咯烷-1-基)-呱啶基-4-基)-3-(三氟甲基)-5,6-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-7(4H)-酮(39毫克，23%)，為白色固體。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 7.46-7.43(m,2H),7.03-7.00(m,2H),4.27-4.21(m,1H),3.81(s,3H),3.59(t,J=6.8Hz,2H),3.36(t,J=6.8Hz,2H),3.05-3.03(m,2H),2.90-2.86(m,4H),2.15-2.11(m,2H),1.88-1.84(m,4H),1.58-1.54(m,2H).LCMS(ESI)m/z：478.2(M+1)。
依據本發明實施例4提供之化學式與其反應流程如下所示。
1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-6-(2'-氧代-[1,1'-二呱啶基]-4-基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲醯胺
反應流程：
步驟A：向呱啶-2-酮(30.0克，0.3莫耳)的氯仿(1升)溶液中加入五氯化磷(246.0克，1.2莫耳)，將混合物回流5小時。冷卻至室溫後，將混合物緩慢倒入冰水中，用二氯甲烷萃取兩次。合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，濃縮，得到3,3-二氯呱啶-2-酮(31克，粗品)，其直接用於下一步驟。
步驟B：將3,3-二氯呱啶-2-酮(31克，粗品)溶於嗎啉(300毫升)後，混合物加熱至130℃過夜。溶劑濃縮除去，然後用二氯甲烷洗滌。固體過濾掉，將有機層濃縮，並且將粗品通過色譜柱純化，得到3-嗎啉代-5,6-二氫吡啶-2(1H)-酮(23克)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ=6.58-6.50(m,1H),5.55(t,J=4.8Hz,1H),3.85-3.79(m,4H),3.32(td,J=6.8,3.2Hz,2H),2.87(t,J=4.8Hz,4H),2.35(td,J=6.8,4.8Hz,2H)。
步驟C：在0℃下，向(Z)-乙基-2-氯-2-(2-(4-甲氧基苯基)亞肼基)甲酸乙酯(32克，0.126莫耳)的EtOAc (300毫升)溶液中加入3-嗎啉代-5,6-二氫吡啶2(1H)-酮(23克，0.126莫耳，溶解於EA)和三乙胺(31克，0.315莫耳)。將反應混合物升至室溫後攪拌30分鐘，之後加熱至回流過夜。冷卻至室溫後，將反應液過濾，收集固體，並用水和乙酸乙酯洗滌，然後在真空中乾燥，得到1-(4-甲氧基苯基)-7a-嗎啉代-7-氧代-3a,4,5,6,7,7a-六氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲酸乙酯(40克，粗品)。LCMS(ESI)m/z：403(M+1)。
步驟D：在0℃下，於1-(4-甲氧基苯基)-7a-嗎啉代-7-氧代-3a,4,5,6,7,7a-六氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲酸乙酯(40克，粗品)的二氯甲烷(400毫升)溶液中緩慢地加入2,2,2-三氟乙酸(30mL)，然後將反應物在25℃下攪拌5小時。混合物用飽和的NaHCO3水溶液和鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥並濃縮，得到1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3，4-c]吡啶-3-甲酸乙酯，為黃色固體(20克，50%)。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ 7.50(d,J=9.2Hz,1H),6.95(d,J=8.8Hz,1H),5.69(brs,1H),4.45(q,J=7.2Hz,2H),3.85(s,3H),3.66-3.61(m,2H),3.20(t,J=6.8,2H),1.43(t,J=6.8,3H)。
步驟E：將1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲酸乙酯(3.00克，9.52毫莫耳)，4-溴吡啶鹽酸鹽(3.71毫克，19.0毫莫耳)，Pd2(dba)3(872毫克，0.952毫莫耳)，Xantphos(1.10克，1.90毫莫耳)和碳酸銫(15.5克，14.6毫莫耳)在甲苯(150mL)溶液中一起加熱回流12小時。冷卻至室溫後，將混合物過濾。將濾渣用EA(50毫升×3)洗滌。合併的有機相濃縮，得到粗產物，其通過矽膠色譜純化(PE：EA=5：1至PE：EA=1：4)，得到1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-6-(吡啶基-4-基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲酸 乙酯(3.30毫克，88.5%)，為黃色固體。LCMS(ESI)m/z：393.4(M+1)。
步驟F：將PtO 2(500毫克)加入1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-6-(吡啶基-4-基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲酸乙酯(3.30克，8.42毫莫耳)的AcOH(150mL)溶液中。將混合物在50psi H 2壓力下室溫攪拌12小時。混合物過濾並濃縮，得到1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-6-(呱啶基-4-基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲酸乙酯(4.60克，粗品)，為黃色油狀物。LCMS(ESI)m/z：399.4(M+1)。
步驟G：將亞硝酸鈉(3.47克，50.3毫莫耳)溶在10mL水中，在0℃下將該水溶液加入到1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-6-(呱啶基-4-基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-羧酸甲酯(4.00克，10.1毫莫耳)的AcOH(80mL)溶液中。反應混合物在室溫下攪拌3小時，用水(200毫升)稀釋，並用DCM(40毫升×3)萃取。將合併的有機層用無水硫酸鈉乾燥並過濾。將濾液濃縮，得到1-(4-甲氧基苯基)-6-1-亞硝基呱啶基-4-基)-7-氧代-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲酸乙酯(4.50克，粗品)，為白色固體。LCMS(ESI)m/z：428.4(M+1)。
步驟H：鋅粉(6.54克，0.100毫莫耳)緩慢加入到1-(4-甲氧基苯基)-6-1-亞硝基呱啶基-4-基)-7-氧代-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲酸乙酯(4.29克，10.0毫莫耳)的AcOH(150mL)溶液中。將反應混合物在室溫下攪拌5小時。混合物過濾後濾液濃縮，得到6-(1-胺基呱啶-4-基)-1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲酸乙酯(4.00克，粗品)，為黃色固體。LCMS(ESI)m/z：414.4(M+1)。
步驟I：將6-(1-胺基呱啶-4-基)-1-(4-甲氧基苯基)-7- 氧代-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲酸乙酯(2.00克，0.484毫莫耳)，5-溴代戊醯氯(1.16克，5.81毫莫耳)和DIPEA(2.5毫升，14.5毫莫耳)假如DCM(20mL)中，混合物在室溫下攪拌12小時。將混合物加入水(40mL)中並用DCM(20毫升×3)萃取。將合併的有機層經無水硫酸鈉乾燥並過濾。濾液濃縮後得到6-(1-(5-溴代戊醯胺)呱啶-4-基)-1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲酸乙酯(3.00克，粗品)，為黃色固體。LCMS(ESI)m/z：576.2[M+1]。
步驟J：在冰浴冷卻下，將NaH(138毫克，3.44毫莫耳)緩慢加入到6-(1-(5-溴代戊醯胺)呱啶-4-基)-1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲酸乙酯(1.80克，3.13毫莫耳)的THF(50mL)溶液中。反應混合物在室溫下攪拌12小時，然後在真空下除去溶劑。殘餘物加入水(100毫升)中，並用DCM(40毫升×4)萃取。將合併的有機層經無水硫酸鈉乾燥並過濾。將濾液濃縮，得到粗產物，通過矽膠色譜純化(DCM：甲醇=100：1至10：1)，得到1-(4-甲氧基苯基)-7-氧-6-(2'-氧-[1,1'-二呱啶基]-4-基)-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲酸乙酯(1.00克，64%)，為黃色固體。LCMS(ESI)m/z：496.2[M+1]。
步驟K：將1-(4-甲氧基苯基)-7-氧-6-(2'-氧-[1,1'-二呱啶基]-4-基)-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲酸乙酯(500毫克，1.01毫莫耳)加入通有氨氣的乙二醇(20mL)中。混合物在悶罐中於80℃攪拌3小時。冷卻後，加入水(100毫升)到混合物中，並過濾。將固體用水(5毫升×3)洗滌並乾燥，得到1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-6-(2'-氧代-[1,1'-二呱啶基]-4-基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲醯胺(370毫克，79%)，為黃色固體。1HNMR(DMSO-d 6,400MHz)δ 7.66(s,1H),7.46(d,J=8.8Hz, 2H),7.39(s,1H),7.01(d,J=9.2Hz,2H),4.26-4.20(m,1H),3.82(s,3H),3.55-3.52(m,3H),3.31-3.30(m,3H),3.00-2.92(m,4H),2.20-2.17(m,2H),1.75-1.72(m,2H),1.60-1.56(m,4H).LCMS(ESI)m/z：467.2[M+1].
依據本發明實施例5提供之化學式與其反應流程如下所示。
1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-6-(2'-氧代-[1,1'-二呱啶基]-4-基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-腈
步驟A：在冰浴冷卻下，TFAA(406毫克，1.93毫莫耳)逐滴加入到1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-6-(2'-氧代-[1,1'-二呱啶基]-4-基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲醯胺(300毫克，0.644毫莫耳)和Et3N(0.36毫升，2.58毫莫耳)的DCM(20mL)溶液中。反應混合物在30℃下攪拌2小時。混合物用飽和NaHCO3水溶液調節pH值至9，，再用DCM(20毫升×2)萃取。將合併的有機層經無水硫酸鈉乾燥並過濾。將濾液濃縮，得到1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-6-(2'-氧代-[1,1'-二呱啶基]-4-基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-腈(288毫克，99%)，為白色固體。1HNMR(DMSO-d 6,400MHz)δ 7.49-7.46(m,2H),7.05-7.02(m,2H),4.26-4.16(m,1H),3.83(s,3H),3.60(t,J=6.8Hz,2H),3.33-3.30(m,4H),2.95-2.89(m,4H),2.19(t,J=6.4Hz,2H),1.83-1.69(m,4H),1.61-1.53(m,4H).LCMS(ESI)m/z：449.2[M+1]。
依據本發明實施例6提供之化學式與其反應流程如下所示。
N '-氰基-1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-6-(2'-氧代-[1,1'-二呱啶基]-4-基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲脒
步驟A：向1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-6-(2'-氧代-[1,1'-二呱啶基]-4-基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-腈(288毫克，0.642毫莫耳)的MeOH(20毫升)溶液中加入甲醇鈉(69毫克，1.28毫莫耳)。將反應混合物在室溫下攪拌3小時後，氰胺(270毫克，6.42毫莫耳)加入到混合物中，混合物在室溫下繼續攪拌12小時。將混合物濃縮，得到粗產物，其通過製備型HPLC純化(甲酸)，得到N'-氰基-1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-6-(2'-氧代-[1,1'-二呱啶基]-4-基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲脒(120毫克，38%)，為白色固體。1HNMR(DMSO-d 6,400MHz)δ 8.90(brs,1H),8.66(brs,1H),7.52-7.49(m,2H),7.04-7.01(m,2H),4.26-4.20(m,1H),3.83(s,3H),3.54(t,J=6.8Hz,3H),3.33-3.30(m,3H),3.00-2.92(m,4H),2.19(t,J=6.8Hz,2H),1.81-1.69(m,4H),1.62-1.53(m,4H),LCMS(ESI)m/z：491.2[M+1]。
依據本發明實施例7提供之化學式與其反應流程如下所示。
1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-6-(1-(3-氧代嗎啉代)呱啶-4-基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲醯胺
步驟A：將6-(1-胺基呱啶-4-基)-1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲酸乙酯(1.00克，2.42毫莫耳)，2-(2-氯代乙氧基)乙酸(0.40克，2.91毫莫耳)加入DCM(20mL)中，溶液中加入DIPEA(1.2毫升，7.2毫莫耳)和HATU(0.95克，2.5毫莫耳)。混合物在室溫下攪拌12小時。將混合物加入水(40mL)中，並用DCM(20毫升×3)萃取。將合併的有機層經無水硫酸鈉乾燥並過濾。將濾液濃縮，得到6-(1-(2-(氯代甲氧基)乙醯胺)呱啶-4-基)-1-(4-甲氧基苯基)-氧代-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲酸乙酯(1.00克，粗品)，為黃色固體。LCMS(ESI)m/z：534(M+1)。
步驟B：在0℃下，NaH(100毫克，4.16毫莫耳)緩慢加入到6-(1-(2-(氯代甲氧基)乙醯胺)呱啶-4-基)-1-(4-甲氧基苯基)-氧代-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲酸乙酯(0.70克，1.31毫莫耳)的THF(20mL)溶液中。將反應混合物在室溫下攪拌12小時，濃縮除去溶劑。將殘餘物用水(100毫升)稀釋，並用DCM(40毫升×4)萃取。將合併的有機層，用無水硫酸鈉乾燥並過濾。將濾液濃縮，得到粗產物，其通過矽膠色譜純化(DCM：甲醇=100：1~50：1)，得到1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-6-(1-(3-氧代嗎啉代)呱啶-4-基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲酸乙酯(4.00克，粗品)，為黃色固體。LCMS(ESI)m/z：498(M+1)。
步驟C：將1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-6-(1-(3-氧代嗎啉代)呱啶-4-基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲酸乙 酯(500毫克，1.01毫莫耳)加入通有氨氣的乙二醇(20mL)中。混合物於悶罐中在80℃下攪拌3小時。冷卻後，加入水(100毫升)加入到混合物中，並過濾。將殘餘物用水(5毫升×3)洗滌並乾燥，得到1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-6-(1-(3-氧代嗎啉代)呱啶-4-基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲醯胺(370毫克，79%)，為黃色固體。1HNMR(DMSO-d 6,400MHz)δ 7.71(s,1H),7.46(d,J=8.8Hz,2H),7.39(s,1H),7.01(d,J=9.2Hz,2H),4.26-4.20(m,1H),3.82(s,3H),3.55-3.52(m,3H),3.31-3.30(m,3H),3.00-2.92(m,4H),1.85-1.79(m,2H),1.58(d,J=10.4Hz,2H)。
依據本發明實施例8提供之化學式與其反應流程如下所示。
1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-6-(1-(2-氧代吡咯烷-3-基)呱啶-4-基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲醯胺
步驟A：在-15℃下，向吡咯烷-2-酮(4.32克，48毫莫耳)的DCM(120mL)溶液中加入NEt3(24.29克，240毫莫耳)，隨後加入TMSCl(15.64克，144毫莫耳)。混合物在-15℃下攪拌0.5小時後，加入溶有I2(24.36克，96毫莫耳)的DCM(180毫升)溶液。混合物升溫至0℃，並在0℃下攪拌2小時。將所得混合物用飽和亞硫酸鈉溶液(600毫升×3)洗滌。有機相用無水硫酸 鈉乾燥，過濾並濃縮。粗的殘餘物通過矽膠層析法(EtOAc=1：1至1：3 PE)進行純化，得到3-碘吡咯烷-2-酮(1.60克，16%)，為淺黃色固體。
步驟B：在室溫下，向1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-6-(呱啶基-4-基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-羧酸甲酯(598毫克，1.5毫莫耳)的DMF(5mL)溶液中加入NEt3(304毫克，3.0毫莫耳)，接著加入3-碘吡咯烷-2-酮(317毫克，1.5毫莫耳)。混合物在室溫下攪拌16小時。將反應混合物濃縮，得到粗品，通過矽膠色譜純化(DCM：甲醇=50：1至20：1)，得到1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-6-(1-(2-氧代吡咯烷-3-基)呱啶-4-基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲酸乙酯(680毫克，94%)，為淺黃色固體。LCMS(ESI)m/z：479(M+1)。
步驟C：悶罐中加入1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-6-(1-(2-氧代吡咯烷-3-基)呱啶-4-基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲酸乙酯(674毫克，1.4毫莫耳)和通有氨氣的乙二醇(10mL)溶液，混合物在120℃下攪拌16小時。將混合物冷卻至室溫，並用水(50mL)稀釋。混合液用EtOAc(50毫升×3)萃取。將合併的有機層乾燥及濃縮。粗殘餘物通過矽膠色譜純化(PE：乙酸乙酯=1：3至1：1)，得到1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-6-(1-(2-氧代吡咯烷-3-基)呱啶-4-基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲醯胺(400毫克，44%)，為灰白色固體。標題化合物為手性化合物，異構體通過製備級SFC和製備HPLC進一步純化，得到兩個分餾，一個得到18.5毫克，另一個得到23.6毫克。分餾1：1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 8.50(brs,2 H),7.54(d,J=8.0Hz,2 H),7.34(d,J=8.0Hz,2 H),7.28(d,J=8.0Hz,2 H),7.01(d,J=8.0Hz,2 H),4.06(t,J=6.0Hz,2H),3.81(s,3 H),3.62-3.59 (m,2 H),3.23(t,J=6.0Hz,2 H),2.42-2.38(m,2 H),1.88-1.84(m,4 H).LCMS(ESI)m/z：484.2(M+1).分餾2：1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 8.50(br s,2 H),7.54(d,J=8.0Hz,2 H),7.34(d,J=8.0Hz,2 H),7.28(d,J=8.0Hz,2 H),7.01(d,J=8.0Hz,2 H),4.06(t,J=6.0Hz,2H),3.81(s,3 H),3.62-3.59(m,2 H),3.23(t,J=6.0Hz,2 H),2.42-2.38(m,2 H),1.88-1.84(m,4 H).MS(ESI)m/z：484.2(M+1)。
依據本發明實施例9提供之化學式與其反應流程如下所示。
1-(4-氯代苯基)-7-氧代-6-(1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲醯胺
步驟A：1-(4-氯代苯基)-7-氧代-6-(1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲醯胺根據用於實施例4的製備方法製備，從步驟A~K序列。其中在步驟B中用(Z)-乙基-2-氯-2-(2-(4-氯苯基)亞肼基)乙酸三級丁酯替代(Z)-2-氯-2-(2-(4-甲氧基苯基)亞肼基)乙酸甲酯。標題化合物為白色固體。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 7.73(brs,1 H),7.62(d,J=8.8Hz,2 H),7.56(d,J=8.8Hz,2 H),7.45(brs,1 H),4.29-4.25(m,1 H),3.97(s,2 H),3.81-3.78(m,2 H),3.56-3.53(m,2 H),3.42-3.37(m,4 H),3.02-2.98(m,4 H),1.84-1.76(m,2 H),1.60-1.56(m,2 H).LCMS(ESI)m/z：473(M+1)。
依據本發明實施例10提供之化學式與其反應流程 如下所示。
7-氧代-6-(1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲醯胺
步驟A：7-氧代-6-(1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲醯胺根據用於實施例4的製備方法製備，從步驟A~K序列。其中在步驟B中用(Z)-乙基-2-氯-2-(2-(4-(三氟甲氧基)苯基)亞肼基)乙酸甲酯替代(Z)-乙基2-氯-2-(2-(4-甲氧基苯基)亞肼基)乙酸甲酯。標題化合物為白色固體。1HNMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 7.74-7.72(m,3H),7.52-7.50(m,2H),7.46(s,1H),4.27(t,J=12.0Hz,1H),3.98(s,2H),3.82-3.80(m,2H),3.57(t,J=6.4Hz,2H),3.43-3.40(m,4H),3.01-2.98(m,4H),1.82-1.77(m,2H),1.59(d,J=12.0Hz,2H)。
依據本發明實施例11提供之化學式與其反應流程如下所示。
1-(4-(二氟甲基)苯基)-7-氧代-6-(1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲醯胺
步驟A：1-(4-(二氟甲基)苯基)-7-氧代-6-(1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲醯胺根據用於實施例4的製備方法製備，從步驟A~K序列。其中在步驟B中用(Z)-乙基-2-氯-2-(2-(4-(二氟甲氧基)苯基)亞肼基)乙酸三級丁酯替代(Z)-乙基-2-氯-2-(2-(4-甲氧基苯基)亞肼基)乙酸甲酯。標題化合物為白色固體。1HNMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 7.71(s,1H),7.65(d,J=8.8Hz,2H),7.44(s,1H),7.34(t,J=74Hz,1H),7.29(d,J=8.8Hz,2H),4.27-4.22(m,1H),3.98(s,2H),3.77-3.75(m,2H),3.60-3.55(m,2H),3.50-3.40(m,4H),3.02-2.95(m,4H),1.82-1.75(m,2H),1.60-1.55(m,2H)。
依據本發明實施例12提供之化學式與其反應流程如下所示。
1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-6-(3-(2-氧代呱啶-1-基)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲醯胺
反應流程：
步驟A：在0℃下，向NaOH(12.00克，300毫莫耳)水溶液(300毫升)中逐滴加入硝基甲烷(18.30克，300毫莫耳)，加完後在0℃下繼續攪拌0.5小時。隨後溶有液溴(47.94克，300毫莫耳)的水(100毫升)溶液在5分鐘內加入反應液中，加完後繼續在0℃下攪拌10分鐘。反應混合物中加入過量的飽和亞硫酸鈉水溶液，在0℃下攪拌0.5小時。將反應混合物用DCM(200毫升×2)萃取。將合併的有機層乾燥，過濾，在25℃下濃縮，，得到溴(硝基)甲烷(28.00克，粗品)，為黃色油狀物，直接用於下一步驟。
步驟B：向1-苄基-1H-吡咯-2,5-二酮(15.08克， 81毫莫耳)的CH3CN(810毫升)溶液中加入溴(硝基)甲烷(11.33克，81毫莫耳)，接著加入K2CO3(11.19克，81毫莫耳)。混合物在25℃下攪拌4小時，然後分批次每4小時加入溴(硝基甲基)甲烷(1.13克，8毫莫耳)×5次，反應溫度控制在25℃。加完後繼續在25℃下攪拌4小時。將混合物真空濃縮，得到粗品。粗產物通過矽膠柱色譜純化(EA：PE=1：10至1：5)，得到3-苄基-6-硝基-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2,4-二酮(8.00克，粗品)，為黃色固體，直接用於下一步驟。LCMS(ESI)m/z：247(M+1)。
步驟C：在-20℃下，向3-苄基-6-硝基-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2,4-二酮(8.12克，33毫莫耳)的THF(100mL)溶液中加入硼氫化鈉(3.74克，99毫莫耳)，加完後在-20℃下攪拌0.5小時。接著在-20℃下緩慢加入三氟化硼乙醚(14.05克，99毫莫耳)溶液，0.5小時加完，加完後在-20℃下繼續攪拌1小時。混合物升至25℃下並攪拌16小時。向反應混合物中緩慢加入MeOH(25mL)，加完後在25℃下攪拌0.5小時。將混合物在減壓濃縮，得到粗品。將粗品加入水(50mL)中，並用EA(50毫升×3)萃取。將合併的有機層乾燥，過濾，濃縮，得到粗品。將粗品加入MeOH(80mL)中，並在80℃下攪拌2小時後濃縮。粗殘餘物通過矽膠柱色譜純化(EA：PE=1：50至1：30)，得到3-苄基-6-硝基-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷(4.70克，65%)，為無色油狀物。LCMS(ESI)m/z：219(M+1)。
步驟D：在25℃下，於3-苄基-6-硝基-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷(4.80克，22毫莫耳)的異丙醇溶液(220毫升)溶液中加入2M的鹽酸水溶液(110毫升，220毫莫耳)，隨後在25℃下加入鋅粉(28.78克，440毫莫耳)。混合物並在25℃下攪拌2小時後，碳酸氫鈉(18.48克，220毫莫耳)加入到反應混合物中， 並在25℃下繼續攪拌0.5小時。將混合物在矽藻土上過濾，濾液用DCM(200毫升×3)萃取。將合併的有機層乾燥，過濾，並濃縮。將粗殘餘物通過矽膠柱色譜純化(DCM：甲醇=30：1~10：1)，得到3-苄基-3-氮雜雙環[3.1.0]己-6-胺(3.25克，78%)，為黃色固體。LCMS(ESI)m/z：189(M+1)。
步驟E：在0℃下，於3-苄基-3-氮雜雙環[3.1.0]己-6-胺(3.20克，17毫莫耳)的THF(150mL)溶液中加入NEt3(3.78克，37毫莫耳)，接著加入溶有5-溴代戊醯氯(4.07克，20毫莫耳)的THF(20mL)溶液，加完後在0℃下攪拌2小時。將混合物倒入飽和的NaHCO3水溶液(150mL)中，用EtOAc(150毫升×3)萃取。將合併的有機層乾燥，過濾，濃縮。得到的粗產物通過矽膠柱色譜純化(DCM：甲醇=50：1~30：1)，得到中間體粗品。粗品溶解在THF(130毫升)溶液中，在0℃分批加入三級丁醇鉀(1.90克，17毫莫耳)，加完後在0℃下繼續攪拌2小時。混合物倒入飽和NH4Cl溶液(100mL)中，用EtOAc(100毫升×3)萃取。將合併的有機層乾燥，過濾，並濃縮。粗殘餘物通過矽膠柱色譜純化(DCM：甲醇=50：1~30：1)，得到1-(3-苄基-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)呱啶-2-酮(2.80克，79%)，為白色固體。LCMS(ESI)m/z：271(M+1)。
步驟F：在25℃下，向溶有1-(3-苄基-3-氮雜雙環[3.1.0]己-6-基)呱啶-2-酮(2.03克，7.5毫莫耳)的CHCl3(24毫升)溶液加入五氯化磷(6.25克，30.0毫莫耳)。混合物升溫至85℃下攪拌16小時。反應液冷卻至0℃後，將混合物倒入冰水(25mL)中並用CHCl3(25毫升×2)萃取。將合併的有機層乾燥，過濾，並濃縮，得到1-(3-苄基-3-氮雜雙環[3.1.0]己-6-基)-3,3-二氯呱啶-2-酮(2.60克，粗品)，為暗棕色固體。該 粗品直接用於下一步驟。LCMS(ESI)m/z：339(M+1)。
步驟G：1-(3-苄基-3-氮雜雙環[3.1.0]己-6-基)-3,3-二氯呱啶-2-酮(2.54克，7.5毫莫耳)溶在嗎啉(35毫升)中，在130℃下加熱攪拌16小時。將混合物濃縮，得到的粗品溶于水(20mL)中，並用EtOAc(20毫升×3)萃取。將合併的有機層乾燥，過濾，並濃縮。粗殘餘物通過矽膠柱色譜法純化(DCM：甲醇=40：1)，得到1-(3-苄基-3-氮雜雙環[3.1.0]己-6-基)-3-嗎啉代-5,6-二氫吡啶-2(1H)-酮(1.70克，粗產物)，為棕色油狀物。LCMS(ESI)m/z：271(M+1)。
步驟H：向4-甲氧基苯胺(19.71克，160毫莫耳)的EtOH(40mL)中的溶液中加入HCl溶液(40毫升，12M)，隨後在-5℃下緩慢加入60mL亞硝酸鈉(12.14克，176毫莫耳)水溶液，歷時20分鐘.反應物在0℃下攪拌1小時，然後按順序加入2-氯-3-氧代丁酸乙酯(26.34克，160毫莫耳)，EtOH/H2O(400毫升，9：1)和醋酸鈉(20.99256毫莫耳)，加完後在0℃下攪拌0.5小時，然後升溫至25℃攪拌2小時。過濾收集固體，用H2O(50毫升×3)洗滌，乾燥，得到(Z)-乙基-2-氯-2-(2-(4-甲氧基苯基)亞肼基)乙酸甲酯(15克，36%)，為黃綠色固體。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ 8.29(br s,1 H),7.17(d,J=8.8Hz,2 H),6.89(d,J=8.8Hz,2 H),4.38(q,J=6.4Hz,2 H),3.80(s,3 H),1.40(t,J=6.4Hz,3 H)。
步驟I：1-(3-苄基-3-氮雜雙環[3.1.0]己-6-基)-3-嗎啉代-5,6-二氫吡啶-2(1H)-酮和(Z)-乙基-2-氯-2-(2-(4-甲氧基苯基)亞肼基)乙酸甲酯溶在EtOAc(40mL)中，向混合中加入NEt3(1.26克，12.5毫莫耳)後升溫至85℃下攪拌16小時。將混合物冷卻至25℃，倒入水(30mL)中， 用EtOAc(30毫升×3)萃取。將合併的有機層用飽和NaHCO3溶液洗滌，用無水Na2SO4乾燥，過濾，濃縮，得到中間體(3.00克，粗品)，為黃色固體。MS(ESI)M/Z：574(M+1)。該中間體溶在DCM(25mL)溶液中，加入TFA(2.5mL)中，並在25℃下攪拌16小時。NaHCO3(10克，0.12莫耳)在25℃下加入到反應混合物中，並在25℃下攪拌1小時。將混合物過濾並濃縮。粗殘餘物通過矽膠柱色譜法純化(DCM：甲醇=50：1~20：1)，得到6-(3-苄基-3-氮雜雙環[3.1.0]己-6-基)-1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲酸乙酯(800毫克，粗產物)，為棕色油狀物，其直接用於下一步驟。LCMS(ESI)m/z：487(M+1)。
步驟J：6-(3-苄基-3-氮雜雙環[3.1.0]己-6-基)-1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲酸乙酯(779毫克，1.6毫莫耳)和10%的Pd/C(500毫克)的MeOH(20ml)溶液在50psi的H2壓力下，在25℃下攪拌16小時。將混合物過濾，濾液濃縮，得到6-(3-氮雜雙環[3.1.0]己-6-基)-1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲酸乙酯(700毫克，粗產物)，為黃色固體，將其直接用於下一步驟。LCMS(ESI)m/z：397(M+1)。
步驟K：在0℃下，於6-(3-氮雜雙環[3.1.0]己-6-基)-1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲酸乙酯(674毫克，1.7毫莫耳)的AcOH(10mL)溶液中加入2mL亞硝酸鈉(704毫克，10.2毫莫耳)水溶液，加完後在0℃下攪拌1小時。將混合物倒入水(30mL)中並用EtOAc(30毫升×2)萃取。將合併的有機層用飽和NaHCO3溶液洗滌，用無水Na2SO4乾燥，過濾，濃縮。得到中間體(520毫克，71%)， 為黃色固體：將粗殘留物通過矽膠柱層析(PE=1：2至1：1，EA)純化。LCMS(ESI)m/z：426(M+1)。
步驟L：於中間體(510毫克，1.2毫莫耳)在MeOH(20毫升)的溶液中加入氯化銨(386毫克，7.2毫莫耳)，隨後在0℃下分批加入鋅粉(471毫克，7.2毫莫耳)，並在0℃下攪拌1小時。將混合物過濾，濾液濃縮。粗殘餘物通過矽膠柱色譜純化(DCM：甲醇=30：1~10：1)，得到6-(3-胺基-3-氮雜雙環[3.1.0]己-6-基)-1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲酸乙酯(370毫克，74%)，為白色固體。LCMS(ESI)m/z：412(M+1)。
步驟M：在0℃下，於6-(3-胺基-3-氮雜雙環[3.1.0]己-6-基)-1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲酸乙酯(206毫克，0.5毫莫耳)的DCM(5mL)溶液中加入NEt3(111毫克，1.1毫莫耳)，接著加入5-溴代戊醯氯(120毫克0.6毫莫耳)的DCM(1毫升)溶液.混合物在0℃攪拌1小時後倒入飽和NaHCO3溶液(10mL)中，用DCM(10毫升×2)萃取。將合併的有機層乾燥，過濾，濃縮。將粗殘餘物通過矽膠柱色譜(DCM：EA=1：1至1：3)純化，得到中間體(235毫克，81%)，為白色固體。LCMS(ESI)m/z：574(M+1)。
步驟N：在0℃下，於中間體(230毫克，0.4毫莫耳)的DMF溶液(5mL)中加入NaH(21毫克，0.5毫莫耳)，隨後在0℃下攪拌2小時。混合物倒入飽和NH4Cl水溶液(20mL)中，用EtOAc(20毫升×2)萃取。將合併的有機層乾燥，過濾，濃縮。粗殘餘物通過矽膠柱色譜純化(DCM：EA=1：1至1：2)，得到1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-6-(3-(2-氧代呱啶-1-基)-3-氮雜雙環[3.1.0]己-6-基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲酸乙酯(110毫克，55 %)，為白色固體。LCMS(ESI)m/z：494(M+1)。
步驟O：悶罐中將1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-6-(3-(2-氧代呱啶-1-基)-3-氮雜雙環[3.1.0]己-6-基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲酸乙酯(109毫克，0.2毫莫耳)加入通有氨氣的乙二醇溶液(6mL)中，混合物在80℃下攪拌16小時。冷卻至室溫後，將混合物倒入H2O(30mL)中，用EA(25毫升×3)萃取。將合併的有機層乾燥，過濾，並濃縮。將粗殘餘物通過製備型HPLC(HCOOH)純化，得到標題產物(45mg，44%)，為白色固體。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 7.65(br s,1 H),7.45(d,J=8.8Hz,2 H),7.38(br s,1 H),7.01(d,J=8.8Hz,2 H),3.82(s,3 H),3.61-3.53(m,4 H),3.28-3.26(m,2 H),3.03-2.98(m,4 H),2.74-2.72(m,1 H),2.19-2.16(m,2 H),1.74-1.68(m,4 H),1.60-1.57(m,2 H). LCMS(ESI)m/z：465(M+1)。
依據本發明實施例13提供之化學式與其反應流程如下所示。
1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-6-(3-(3-氧代嗎啉)-3-氮雜雙環[3.1.0]己-6-基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲醯胺
步驟A：將2-(2-氯乙氧基)乙酸(46毫克，0.33毫莫耳)的DCM(0.5毫升)溶液，HATU(125毫克，0.33毫莫耳)，加入DCM(2.0mL)中，隨後加入DIPEA(76毫克0.60毫莫耳)，混合物在25℃攪拌0.5小時。然後將溶有6-(3-胺基-3-氮雜雙環 [3.1.0]己-6-基)-1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲酸乙酯(123毫克，0.30毫莫耳)的DCM(0.5毫升)溶液在25℃下加入到反應混合物中，並在25℃下攪拌16小時。將混合物倒入飽和NaHCO3溶液(10mL)中，用DCM(10毫升×2)萃取。將合併的有機層乾燥，過濾，濃縮。將粗殘餘物通過矽膠柱色譜純化(DCM：EA=1：1至0：1)，得到6-(3-(2-(2-氯代乙氧基)乙醯胺)-3-氮雜雙環[3.1.0]己-6-基)-1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲酸乙酯(80毫克，50%)，為黃色油狀物。LCMS(ESI)m/z：532(M+1)。
步驟B：將6-(3-(2-(2-氯代乙氧基)乙醯胺)-3-氮雜雙環[3.1.0]己-6-基)-1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲酸乙酯(80毫克，0.15毫莫耳)溶在DMF(5mL)溶液中，在0℃向溶液中加入NaH(6毫克，0.15毫莫耳)，加完後在0℃下繼續攪拌2小時。混合物倒入飽和NH4Cl溶液(20mL)中，用EtOAc(20毫升×2)萃取。將合併的有機層乾燥，過濾並濃縮，得到粗品1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-6-(3-(3-氧代嗎啉)-3-氮雜雙環[3.1.0]己-6-基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲酸乙酯為黃色油狀物，其直接用於下一步驟。LCMS(ESI)m/z：496(M+1)。
步驟C：在悶罐中，將1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-6-(3-(3-氧代嗎啉)-3-氮雜雙環[3.1.0]己-6-基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲酸乙酯(15毫克，0.03毫莫耳)加入通有氨氣的乙二醇溶液(5mL)中，混合物在80℃下攪拌16小時。將混合物倒入H2O(30mL)中，用EA(230毫升×3)萃取。將合併的有機層乾燥，過濾，並濃縮。將粗殘餘物通過製備型HPLC純化(HCOOH)，得到1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-6-(3-(3-氧代嗎啉)-3- 氮雜雙環[3.1.0]己-6-基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲醯胺(6毫克，42%)，為白色固體。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 7.65(br s,1 H),7.45(d,J=8.8Hz,2 H),7.38(br s,1 H),7.01(d,J=8.8Hz,2 H),3.97(s,2 H),3.82(s,3 H),3.81-3.78(m,2 H),3.61-3.57(m,2 H),3.55-3.52(m,2 H),3.36-3.32(m,2 H),3.11-3.08(m,2 H),3.01-2.97(m,2 H),2.76-2.74(m,1 H),1.79-1.76(m,2 H). LCMS(ESI)m/z：465(M+1)。
依據本發明實施例14提供之化學式與其反應流程如下所示。
1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-6-(2-甲氧基苯基-[1,4'-二呱啶]-1'-基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲醯胺
反應流程：
步驟A：在-10℃下，將LiHMDS(17.4毫升，17.4毫莫耳)緩慢加入到乙基1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-羧酸乙酯(5.00克，15.8毫莫耳)的DMF(50mL)溶液中後，將混合物攪拌10分鐘，在0℃下將P，P-二苯基次膦醯胺(4.4克，19.1毫莫耳)的DMF(20mL)溶液中逐滴加入其中.混合物隨後在18℃下攪拌16小時。將混合物倒入水(150毫升)中，用EA(150毫升×3)萃取。合併的有機相用無水Na2SO4乾燥，濃縮。粗殘餘物用二氧化矽凝膠色譜法純化(PE：EA=4：1至1：2)純化，得到6-胺基-1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-羧酸甲酯(3.3克，63%)，為白色固體。1HNMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 7.45(dd,J=6.8,2.0Hz,2H),7.01(dd,J=6.8,2.0Hz,2H),5.04(brs,2H),4.31(q,J=7.2Hz,2H),3.82(s,3H),3.75(t,J=7.2Hz,2H),3.09(t,J=7.2Hz,2H),1.31(t,J=7.2Hz,3H)。
步驟B：6-胺基-1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代 -4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-羧酸甲酯(3.3克，0.01莫耳)的DMF(35mL)溶液中加入2,2-雙(2-溴乙基)-1,3-二氧戊環(2.86克，0.01莫耳)和K2CO3(1.38，0.01莫耳)。將混合物加熱至100℃持續16小時。冷卻至18℃後，將混合物傾入水(100mL)中，用EtOAc(100毫升×2)萃取.有機相用鹽水洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，濃縮。粗殘餘物用二氧化矽凝膠色譜法純化(PE：EA=1：1)純化，得到1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-6-(1,4-二氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-羧酸甲酯(0.9克，20%)，為白色固體。
步驟C：1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-6-(1,4-二氧雜-8-氮雜螺[4.5]癸烷-8-基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-羧酸甲酯(700毫克，1.54毫莫耳)加入丙酮(10mL)和水(1mL)的混合溶液中，隨後加入加入TsOH‧H2O(132毫克，0.77毫莫耳)。將混合物加熱至50℃攪拌20小時。反應液冷卻後傾入飽和NaHCO3溶液，用EtOAc(30毫升×2)萃取，無水硫酸鈉乾燥，濃縮。將粗殘餘物用薄層色譜法(PE：EA=1：2)純化，得到1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-6-(4-氧代呱啶-1-基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-羧酸甲酯(250毫克，39%)，為白色固體。
步驟D：1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-6-(4-氧代呱啶-1-基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-羧酸甲酯(350毫克，0.849毫莫耳)的甲醇(6毫升)溶液中加入乙酸銨(77毫克，1.27毫莫耳)和NaBH3CN(107毫克，1.69毫莫耳)。將混合物在20℃下攪拌15小時。混合物倒入水(50毫升)中，用DCM(50mL)萃取分液，收集水層，然後通過冷凍乾燥除去溶劑，得到6-(4-胺基呱啶-1-基)-1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-4,5,6,7- 四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-羧酸甲酯(300毫克，粗品)，為白色固體。LCMS(ESI)m/z：414(M+1)。
步驟E：6-(4-胺基呱啶-1-基)-1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-羧酸甲酯(300毫克，0.726毫莫耳，粗品)溶在DMF(5mL)中，溶液中加入DIPEA(112毫克，0.871毫莫耳)和5-溴代戊醯氯(158毫克，0.799毫莫耳)。將混合物在20℃下攪拌16小時。將混合物傾入NH4Cl水溶液，用EtOAc(300毫升×2)萃取，無水硫酸鈉乾燥，濃縮。將粗制殘餘物經TLC(EA)純化，得到6-(4-(5-溴代戊醯胺)呱啶-1-基)-1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-羧酸甲酯(200毫克，48%)，為黃色固體。LCMS(ESI)m/z：576(M+1),578(M+3)。
步驟F：在0℃下，向6-(4-(5-溴代戊醯胺)呱啶-1-基)-1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-羧酸甲酯(200毫克，0.347毫莫耳)的DMF(3mL)溶液中加入NaH(14毫克，0.347毫莫耳)，然後將反應物在20℃下攪拌16小時.將混合物傾入NH4Cl水溶液(30mL)中，用EA(30毫升×2)洗滌，用無水Na2SO4乾燥，並濃縮萃取粗品殘留物通過TLC純化(EA：甲醇=30：1)，得到1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-6-(2-氧代-[1,4'-聯呱啶]-1'-基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-羧酸甲酯(120毫克，69%)，為白色固體。LCMS(ESI)m/z：596(M+1)。
步驟G：在悶罐中，1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-6-(2-氧代-[1,4'-聯呱啶]-1'-基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-羧酸甲酯(150毫克，0.303毫莫耳)加入通有氨氣的乙二醇(8mL)溶液中。混合物加熱至80℃持續16小時。將混合物倒入水(30mL) 中，用DCM(30毫升×2)萃取，用鹽水洗滌有機相.有機相用無水硫酸鈉乾燥，濃縮。粗殘餘物通過製備型HPLC(鹽酸)純化，得到1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-6-(2-氧代-[1,4'-聯呱啶]-1'-基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲醯胺(10毫克，7%)，為白色固體。1HNMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 7.67(brs,1H),7.46(dd,J=6.8Hz,2.0Hz,2H),7.40(brs,1H),7.31(dd,J=6.8Hz,2.0Hz,2H),4.25(s,1H),3.83(s,3H),3.76-3.72(m,2H),3.70-3.65(m,2H),3.16-3.13(m,2H),3.09-2.89(m,4H),2.22(t,J=6.0Hz,2H),1.67-1.63(m,6H),1.50-1.47(m,2H). LCMS(ESI)m/z：567(M+1)。
依據本發明實施例15提供之化學式與其反應流程如下所示。
1-(4-甲氧基苯基)-N 5 -(1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)-1H-吡唑-3,5-二甲醯胺
反應流程：
步驟A：3-(甲氧基羰基)-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-羧酸(1克，3.62毫莫耳)的DMF(10mL)溶液中加入HATU(1.65克，4.34毫莫耳)，DIEA(0.93克，7.24毫莫耳)和三級丁基4-胺基呱啶-1-羧酸三級丁酯(0.87克，4.34毫莫耳)。將混合物在20℃攪拌16小時後倒入水(60mL)中，用EtOAc(60毫升×2)萃取，合併的有機相用無水無水硫酸鈉乾燥，並濃縮。將粗殘餘物用矽膠色譜法(PE：EA=3：1至1：2)純化，得到4-(3-(甲氧基羰基)-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-甲醯胺基)呱啶-1-羧酸三級丁酯(1.1克，68%)，為白色固體。
步驟B：在0℃下，於4-(3-(甲氧基羰基)-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-甲醯胺基)呱啶-1-羧酸三級丁 酯(1克，2.18毫莫耳)的DMF(10mL)中溶液中加入NaH(0.131克，3.27毫莫耳)，隨後加入烯丙基碳醯氯(0.524克，4.36毫莫耳)。將混合物在20℃下攪拌16小時。將混合物倒入水(50mL)中，用EtOAc(50毫升×2)萃取，用鹽水洗滌，並濃縮。粗殘留物用矽膠色譜法(EA=8：1至3：1 PE)純化，得到4-(N-((烯丙氧基)羰基)-3-(甲氧羰基)-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-甲醯胺基)呱啶-1-羧酸三級丁酯(700毫克，59%)，為無色液體。LCMS(ESI)m/z：543(M+1)。
步驟C：在4M的HCl/乙酸乙酯(15ml)溶液中加入4-(N-((烯丙氧基)羰基)-3-(甲氧羰基)-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-5-甲醯胺基)呱啶-1-羧酸三級丁酯(770毫克，1.42毫莫耳)。反應液在25℃下攪拌3小時。將混合物濃縮，得到甲基5-(((烯丙氧基)羰基)(呱啶-4-基)胺基甲醯基)-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(600毫克，95%)，為白色固體。
步驟D：0℃下在5-(((烯丙氧基)羰基)(呱啶-4-基)胺基甲醯基)-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(100毫克，0.226毫莫耳)的AcOH(4mL)溶液中加入2mL亞硝酸鈉(78毫克，1.13毫莫耳)水溶液.將混合物在25℃下攪拌3小時後倒入水(10毫升)中，用EA(20毫升×2)萃取，用無水硫酸鈉乾燥，濃縮，得到甲基5-(((烯丙氧基)羰基)(1-亞硝基呱啶-4-基)胺基甲醯)-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(90毫克，粗產物)，為黃色固體。LCMS(ESI)m/z：472(M+1)。
步驟E：在甲基5-(((烯丙氧基)羰基)(1-亞硝基呱啶-4-基)胺基甲醯)-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(450毫克，0.849毫莫耳)的AcOH(6mL)溶液中加入鋅粉(276毫克，4.24毫莫耳)。將混合物在25℃下攪拌3小時後倒入水(20mL) 中，用EtOAc(30毫升×2)萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥，濃縮。少量的AcOH通過冷凍乾燥除去，得到甲基5-(((烯丙氧基)羰基)(1-胺基呱啶-4-基)胺基甲醯)-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(400毫克，91%)，為黃色固體。LCMS(ESI)m/z：458(M+1)。
步驟F：在2-(2-氯乙氧基)乙酸(181毫克，1.31毫莫耳)的DCM(5mL)溶液中加入HATU(399毫克，1.05毫莫耳)和DIEA(225毫克，1.75毫莫耳)。將混合物攪拌30分鐘後加入甲基5-(((烯丙氧基)羰基)(1-胺基呱啶-4-基)胺基甲醯)-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(400毫克，0.875毫莫耳)。反應混合物在25℃下攪拌16小時。將混合物倒入水(20mL)中，用DCM(30毫升×2)萃取，用無水硫酸鈉乾燥，濃縮。粗殘餘物用矽膠色譜法純化(PE：EA=5：1至1：1)純化，得到甲基5-(((烯丙氧基)羰基)(1-(2-(2-氯代乙氧基)乙醯胺)呱啶-4-基)胺基甲醯)-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(400毫克，79%)，為黃色固體。LCMS(ESI)m/z：578(M+1)。
步驟G：0℃下在甲基5-(((烯丙氧基)羰基)(1-(2-(2-氯代乙氧基)乙醯胺)呱啶-4-基)胺基甲醯)-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(350毫克，0.606毫莫耳)的DMF(5mL)溶液中加入NaH(29毫克，0.727毫莫耳)。混合物在25℃下攪拌1小時後倒入水(20mL)中，用DCM(30毫升×2)萃取，用無水硫酸鈉乾燥，並濃縮，得到甲基5-(((烯丙氧基)羰基)(1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)胺基甲醯)-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(300毫克，91%)，為白色固體。LCMS(ESI)m/z：542(M+1)。
步驟H：甲基5-(((烯丙氧基)羰基)(1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)胺基甲醯)-1-(4-甲氧基苯基)-1H-吡唑-3-羧酸乙酯 (360毫克，0.664毫莫耳)的DCM(4mL)溶液中加入四(三苯基膦)鈀(76毫克，0.066毫莫耳)和嗎啉(200微升)。將混合物在25℃下攪拌16小時後倒入水(20mL)中，用DCM(30毫升×2)萃取。合併的有機相用無水Na2SO4乾燥，濃縮。粗制殘餘物經TLC(EA)純化，得到甲基1-(4-甲氧基苯基)-5-((1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)胺基甲醯基)-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(200毫克，65%)，為白色固體。LCMS(ESI)m/z：458(M+1)。
步驟I：悶罐中，通有氨氣的乙二醇溶液(5mL)中加入甲基1-(4-甲氧基苯基)-5-((1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)胺基甲醯基)-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(200毫克，0.452毫莫耳)，將混合物在80℃下攪拌16小時。將混合物倒入水(50mL)中，用DCM(50毫升×3)萃取，用無水硫酸鈉乾燥，濃縮。粗殘餘物通過製備型HPLC(HCOOH)純化，得到1-(4-甲氧基苯基)-N 5-(1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)-1H-吡唑-3,5-二甲醯胺(42毫克，21%)，為白色固體。1HNMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 8.56(d,J=8.0Hz,1H),7.72(s,1H),7.39-7.35(m,3H),7.20(s,1H),7.02(dd,J=7.2,2.0Hz,2H),3.96(s,2H),3.81-3.78(m,5H),3.59-3.56(m,1H),3.41-3.34(m,4H),2.98-2.96(m,2H),1.78-1.75(m,2H),1.57-1.52(m,2H)。
依據本發明實施例16提供之化學式與其反應流程如下所示。
1-(4-甲氧基苯基)-N 5 -甲基-N 5 -(1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)-1H-吡唑-3,5-二甲醯胺
步驟A：1-(4-甲氧基苯基)-5-((1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)胺基甲醯基)-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(100毫克，0.219毫莫耳)溶在DMF(2mL)中。，然後在0℃下分批加入鈉氫(13毫克，0.329毫莫耳)和碘甲烷(62毫克，0.438毫莫耳).加完後將混合物在0℃下攪拌2小時。反應完成後，倒入水(10毫升)中，並用DCM(15毫升×3)萃取，將合併的有機相用無水Na2SO4乾燥，過濾，濃縮得到粗產物，將其直接用於在下一個步驟。LCMS(ESI)m/z：472.1(M+1)。
步驟B：甲基1-(4-甲氧基苯基)-5-(甲基(1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)胺基甲醯基)-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(100毫克，0.212毫莫耳)加入通有氨氣的乙二醇(5毫升)溶液中。將混合物倒入100mlL高壓釜中，在80℃下攪拌15小時。反應完成後，加入水(10毫升)，用EtOAc(20毫升×3)萃取，用無水硫酸鈉乾燥，濃縮。粗殘餘物用製備型HPLC(HCOOH)純化，得到標題化合物，為白色固體。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 7.44(d,J=5.2Hz,2 H),7.28(br.s.,1 H),7.06(d,J=5.2Hz 2 H),6.90(s,1 H),3.95(s,2 H),3.83(s,3 H),3.80(t,J=4.8Hz,2 H),3.39(t,J=4.8Hz,3 H),2.96(brs,4 H),2.74(s,3 H),1.76(qd,J=12.4,4.0Hz,2 H),1.18-1.64(m,2 H). LCMS(ESI)m/z：457.2(M+1)。
依據本發明實施例17提供之化學式與其反應流程如下所示。
N 5 -乙基-1-(4-甲氧基苯基)-N 5 -(1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)-1H-吡唑-3,5-二甲醯胺
步驟A：N 5-乙基-1-(4-甲氧基苯基)-N 5-(1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)-1H-吡唑-3,5-二甲醯胺按照用於實施例16的製備方法製備，自A~K的步驟序列，在步驟A中溴乙烷代替碘甲烷. 1HNMR(400MHz,DMSO-d 6)δ 1.03(t,J=6.4Hz,3 H),1.35(s,2 H),1.80(s,2 H),2.53(d,J=1.6Hz,2 H),2.94(brs,2 H),3.38(t,J=5.2Hz,3 H),3.79(t,J=5.2Hz,2 H),3.83(s,3 H),3.97(brs,2 H),6.90(s,1 H),7.03-7.11(m,2 H),7.14-7.39(m,2 H),7.41-7.51(m,2 H). LCMS(ESI)m/z：471.2(M+1)。
依據本發明實施例18提供之化學式與其反應流程如下所示。
N 5 -環丙基-1-(4-甲氧基苯基)-N 5 -(1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)-1H-吡唑-3,5-二甲醯胺
步驟A：三級丁基4-氧代呱啶-1-甲酸三級丁酯(8克，40.2毫莫耳)，環丙胺(2.52克，44.2毫莫耳)和AcOH(2.41克， 40.2毫莫耳)加入MeOH(15mL)中，在30℃下攪拌5小時。在0℃，下，向溶液中分批加入NaBH3CN(3.53克，56.2毫莫耳)，加完後將反應在30℃下攪拌16小時。將混合物濃縮，粗品用矽膠色譜法純化(PE：EA=3：1至1：1)，得到三級丁基4-(環丙基胺基)呱啶-1-羧酸乙酯(5克，52%)，為無色油狀物。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ 3.90-4.16(m,2H),2.66-2.89(m,3H),2.13(s,1H),1.82-1.97(m,2H),1.45(s,10H),1.15-1.33(m,2H),0.42-0.49(m,2H),0.30-0.36(m,2H)。
步驟B：N 5-環丙基-1-(4-甲氧基苯基)-N 5-(1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)-1H-吡唑-3,5-二甲醯胺按照用於實施例15的製備方法製備，自步驟A~I序列，在步驟A中環丙胺替代胺基.將粗產物通過製備型HPLC(HCOOH)純化，得到標題化合物(34mg，35%)，為白色固體。1HNMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 7.68-7.73(m,1H),7.36-7.43(m,3H),7.04-7.10(m,2H),6.98-7.01(m,1H),3.97(s,2H),3.80(s,6H),3.37-3.50(m,4H),2.91-3.04(m,2H),2.05-2.15(m,1H),1.84-1.99(m,2H),1.54-1.68(m,2H),0.38-0.63(m,4H)。
依據本發明實施例19供之化學式與其反應流程如下所示。
1-(4-甲氧基苯基)-N 5 -(1-(3-氧代嗎啉)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑-3,5-二甲醯胺
步驟A：1-(4-甲氧基苯基)-N5-(1-(3-氧代嗎啉)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑-3,5-二甲醯胺按照用於實施例15的製備方法製備，從步驟A~I序列.其中，在步驟A中三級丁基4-胺基呱啶-1-羧酸替代三級丁基-3-胺基吡咯烷-1-羧酸三級丁酯.粗產物通過製備型HPLC(HCOOH)純化，得到標題化合物(11.5毫克，17%)為灰白色固體。1HNMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 8.89(d,J=7.2Hz,1H),8.44(s,1H),7.70(s,1H),7.37(d,J=8.4Hz,3H),7.24(s,1H),7.02(d,J=8.8Hz,2H),4.30(t,J=6.0Hz,1H),4.03(s,2H),3.84(d,J=5.2Hz,1H),3.82(s,3H),3.46-3.45(m,3H),3.27-3.25(m,1H),3.21-3.17(m,1H),3.07-3.05(m,1H),2.08-2.01(m,1H),1.80-1.75(m,1H)。
依據本發明實施例20供之化學式與其反應流程如下所示。
N 5 -(1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)-1-(四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-3,5-二甲醯胺
反應流程：
步驟A：在0℃下，在三級丁基4-羥基呱啶-1-甲酸三級丁酯(100克，0.5莫耳)的DCM(1L)溶液中加入三乙胺(101克，1.0莫耳).將混合物在0℃攪拌10分鐘，然後在0℃逐滴加入甲磺醯氯(62.7克，0.55莫耳)。加完後混合物在室溫下攪拌15小時，，將混合物依次用飽和NaHCO3溶液(200毫升×2)和水(200毫升×3)洗滌。有機相用無水硫酸鈉乾燥，並過濾。將濾液濃縮，得到三級丁基4-((甲基磺醯基)氧基)呱啶-1-羧酸三級丁酯(130克，92.2%)，為白色固體。
步驟B：在三級丁基4-((甲基磺醯基)氧基)呱啶-1-羧酸三級丁酯(130克，0.466莫耳)的DMF(1L)溶液中，加入鄰苯二甲醯亞胺鉀鹽(92.3克，0.699莫耳)。將混合物在80℃下攪拌16小時。將混合物傾入水中，白色固體析出並過濾。將所 得白色固體溶於DCM中，用無水硫酸鈉乾燥，過濾。將濾液濃縮，得到所需產物(55克，36%)，為白色固體。
步驟C：在0℃下，在三級丁基4-(1,3-二氧代異吲哚啉-2-基)呱啶-1-甲酸三級丁酯(55克，0.167莫耳)的DCM(500毫升)溶液中，加入TFA(100mL)。該混合物在0℃下攪拌2小時後減壓除去溶劑，得到粗產物，將其直接用於下一步驟。
步驟D：0℃下在2-(呱啶-4-基)異吲哚啉-1,3-二酮(30克，0.13莫耳)的AcOH(350毫升)溶液中加入亞硝酸鈉(18克，0.26莫耳)的水溶液(150毫升)加完後將混合物在30℃下攪拌3小時後，將混合物倒入水(500毫升)中，白色固體析出來，並過濾。將白色固體溶於DCM中，用飽和NaHCO3溶液(300毫升×4)洗滌，有機相用無水Na2SO4乾燥，過濾。將濾液濃縮，得到所需產物(248克，73.4%)，為白色固體。
步驟E：在0℃下，向2-(1-亞硝基呱啶-4-基)異吲哚啉-1,3-二酮(6.5克，0.025莫耳)的DCM(75毫升)和MeOH(250毫升)混合溶液中加入鋅粉(6.5克，0.1莫耳)和氯化銨(5.4克，0.1莫耳)該混合物在0℃下攪拌30分鐘，然後在15℃下攪拌1小時.混合物過濾，濾液用DCM(300毫升×6)萃取，合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾。將粗殘餘物通過矽膠色譜純化(DCM：甲醇=20：1)，得到2-(1-胺基呱啶-4-基)異吲哚啉-1,3-二酮，為黃色固體。
步驟F：將2-(2-氯乙氧基)乙酸(6.2克，0.0449莫耳)，HATU(18.6克，0.049莫耳)和DIEA(6.8克，0.049莫耳)加入DMF(150ml)中。將混合物在30℃下攪拌20分鐘，然後加入2-(1-胺基呱啶-4-基)異吲哚啉-1,3-二酮(10.0克，0.0408莫耳)。將混合物在30℃下攪拌16小時。反應完成後，將 混合物倒入水(200毫升)中，白色固體析出來，過濾。將固體溶解於DCM(300ml)中，用無水硫酸鈉乾燥，過濾。將濾液濃縮，得到2-(2-氯乙氧基)-N-(4-(1,3--多林-2-基)呱啶-1-基)乙醯胺(12.5克，83.9%)，為白色固體。
步驟G：0℃下在2-(2-氯乙氧基)-N-(4-(二氧代異吲哚啉-2-基)-呱啶-1-基)乙醯胺(12.5克，0.038莫耳)的DMF(300mL)溶液中加入鈉氫(1.5克，0.042莫耳)，持續1小時加完.混合物在0℃下攪拌30分鐘。反應完成後，將混合物倒入水(300毫升)中。白色固體析出來，過濾。將白色固體溶解於DCM(300毫升)中，用水洗滌，無水Na2SO4乾燥，過濾。將濾液濃縮，得到產物(9.0克，79.6%)，為白色固體。
步驟H：向2-(1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)異吲哚啉-1,3-二酮(9.0克，0.027莫耳)的MeOH(300毫升)溶液中加入甲胺(10.6毫升，0.136莫耳)。混合物於70℃攪拌3小時，反應完成後，減壓除去溶劑，得到粗產物。通過矽膠色譜法純化，得到產物(2.0g，37%)，為白色固體。
步驟I：向二氫-2H-吡喃-4(3H)-酮(5克，0.05莫耳)的MeOH(60mL)溶液中加入三級丁基肼甲酸三級丁酯(7.92mmol克，0.06莫耳)，乙酸(500微升)，和NaBH3CN(6.3克，0.1莫耳)。將混合物在25℃下攪拌16小時，然後濃縮。將殘餘物溶解在DCM(100mL)中，用水(80mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，濃縮。將粗殘留物用矽膠色譜法純化(PE：EA=5：1-1：1)純化，得到三級丁基2-(四氫-2H-吡喃-4-基)肼甲酸三級丁酯(10克，92%)，為白色固體。
步驟J：在三級丁基2-(四氫-2H-吡喃-4-基)肼甲酸三級丁酯(11克，0.05莫耳)的DCM(100毫升)溶液中加入 三氟乙酸(10mL)。將混合物在25℃下攪拌16小時，然後濃縮，粗品(四氫-2H-吡喃-4-基)肼三氟乙酸鹽(6克，粗品)，其直接用於下一步驟。
步驟K：在(四氫-2H-吡喃-4-基)肼三氟乙酸鹽(6克，粗品)的MeOH(80毫升)溶液中加入甲基3-(呋喃-2-基)-3-氧代丙酸乙酯(10克，51.7毫莫耳)和TsOH‧H2O(9.8克，51.7毫莫耳)。將混合物在60℃攪拌16小時。將混合物倒入水(100mL)中，用EtOAc(100毫升×2)萃取，無水硫酸鈉乾燥，濃縮。將粗產物通過矽膠色譜法純化(PE：EA=10：1至1：1)純化得到甲基5-(呋喃-2-基)-1-(四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(3.7克，26%)，為黃色固體。LCMS(ESI)m/z：277(M+1)。
步驟L：在甲基5-(呋喃-2-基)-1-(四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-3-羧酸乙酯(1克，3.62毫莫耳)的MeCN(12mL)和H2O(6毫升)混合溶液中加入磷酸二氫鈉(2.17克，18.1毫莫耳)和NaClO2(3.27克，36.2毫莫耳)。將混合物在25℃下攪拌16小時後將混合物傾入飽和的亞硫酸氫鈉水溶液(50mL)中，用EtOAc(50毫升×2)萃取，用鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，得到3-(甲氧基羰基)-1-(四氫-2H-吡喃唑-4-基)-1H-吡唑-5-羧酸(500毫克，粗品)，為黃色固體。
步驟M：在3-(甲氧基羰基)-1-(四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-5-羧酸(150毫克，0.59毫莫耳)的DMF(4mL)溶液中加入HATU(269毫克，0.707毫莫耳)，DIEA(152毫克，1.18毫莫耳)和4-(4-胺基呱啶-1-基)嗎啉-3-酮(117毫克，0.59毫莫耳)。將混合物在25℃下攪拌16小時後倒入水(30mL)中，用EtOAc(40毫升×2)萃取，用無水硫酸鈉乾燥， 濃縮。將粗產物用TLC(EA)純化，得到甲基5-((1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)胺基甲醯)-1-(四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-3-甲酸乙酯(170毫克，粗產物)，為黃色油狀物。LCMS(ESI)m/z：436(M+1)。
步驟N：悶罐中在通有氨氣的乙二醇(10毫升)溶液中加入甲基5-((1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)胺基甲醯)-1-(四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-3-甲酸乙酯(170毫克，粗品)，將混合物在80℃下攪拌8小時。冷卻後將混合物倒入水(30mL)中，用DCM(30毫升×2)萃取.有機相用無水Na2SO4乾燥，並濃縮。將粗殘餘物通過製備型HPLC純化，得到N 5-(1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)-1-(四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-3,5-二甲醯胺(9.1毫克，5%)，為白色固體。1HNMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 8.48-8.43(m,2H),7.53(s,1H),7.31(s,1H),7.24(m,1H),5.35-5.29(m,1H),3.97-3.94(m,4H),3.80-3.79(m,2H),3.55-3.53(m,1H),3.45-3.41(m,6H),3.01-3.98(m,2H),2.12-2.07(m,2H),1.87-1.80(m,4H),1.61-1.60(m,2H)。
依據本發明實施例21提供之化學式與其反應流程如下所示。
1-(1-(甲磺醯基)呱啶-4-基)-N 5 -(1-(氧代嗎啉)呱啶-4-基)-1H-吡唑-3,5-二甲醯胺
步驟A：1-(1-(甲磺醯基)呱啶-4-基)-N 5-(1-(氧代嗎啉) 呱啶-4-基)-1H-吡唑-3,5-二甲醯胺按照用於實施例20的製備中的程式，按順序的步驟I~N，在步驟I中苄基-4-氧代呱啶-1-羧酸三級丁酯替代二氫-2H-吡喃-4(3H)-酮.將粗產物通過製備型HPLC(HCOOH)純化製備，得到標題化合物(15mg，17%)，為白色固體。1HNMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 8.44(d,J=7.6Hz,1H),7.56(s,1H),7.31(s,1H),7.25(s,1H),5.27-5.22(m,1H),3.97(s,2H),3.81-3.79(m,2H),3.69-3.66(m,3H),3.41(t,J=5.2Hz,3H),3.02-2.99(m,2H),2.92-2.90(m,6H),2.12-2.09(m,4H),2.04-1.82(m,2H),1.80-1.61(m,2H)。
依據本發明實施例22提供之化學式與其反應流程如下所示。
1-(4-甲氧基環己基)-N 5 -(1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)-1H-吡唑-3,5-二甲醯胺
步驟A：1-(4-甲氧基環己基)-N 5-(1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)-1H-吡唑-3,5-二甲醯胺按照用於實施例20的製備方法製備，自步驟A-I序列，在步驟A中用4-甲氧基環己酮代替二氫-2H-吡喃-4(3H)-酮．1HNMR(400MHz,DMSO-d 6 )δ 8.41(d,J=7.6Hz,1H),7.46(brs,1H),7.30(brs,1H),7.22(s,1H),5.08(m,1H),3.98(s,2H),3.71(m,2H),3.69(m,1H),3.43-3.37(m,4H),3.26(s,3H),3.18(m,1H),3.00(m,2H),2.13-2.10(m,2H),1.95-1.80(m,6H),1.62-1.57(m,2H),1.26-1.23(m,2H)。
依據本發明實施例23提供之化學式與其反應流程如下所示。
4-(4-(1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-氧代-3-(三氟甲基)-4,5-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-6(7H)-基)呱啶-1-基)嗎啉-3-酮
步驟A：0℃下在6-(1-苄基呱啶-4-基)-1-(4-甲氧基苯 基)-3-(三氟甲基)-5,6-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-7(4H)-酮(7.5克，15.5毫莫耳)的CH3CN(250毫升)溶液中逐滴加入CAN(60克，0.11莫耳)的水溶液(150毫升)。將混合物在2℃下攪拌16小時。混合物濃縮，並加入水，該混合物通過飽和NaHCO3溶液調節到pH=9，然後過濾。將濾液分離，將有機層濃縮，用矽膠柱色譜(DCM：甲醇=200：1~20：1)，得到6-(1-苄基呱啶-4-基)-3-(三氟甲基)-5,6-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-7(4H)-酮(13.5克，60%)，為油狀物。
步驟B：在0℃下，向6-(1-苄基呱啶-4-基)-3-(三氟甲基)-5,6-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-7(4H)-酮(3.5克，9.25毫莫耳)的DCM(50毫升)中加入Et3N(5.5毫升，37毫莫耳)和(2-(氯甲氧基)乙基)三甲基矽烷(3.1克，18.5毫莫耳)，將混合物於50爾下攪拌16小時。加入水後，將混合物用DCM(100毫升×升)萃取。合併的有機層用鹽水洗滌，用無水硫酸鈉乾燥並濃縮。粗殘餘物通過矽膠柱色譜法(PE：EA=3：1)純化，得到6-(1-苄基呱啶-4-基)-3-(三氟甲基)-1-((2-(三甲矽基)乙氧基)甲基)-5,6-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-7(4H)-酮(2.0克，40%)，為黃色油狀物。
步驟C：將6-(1-苄基呱啶-4-基)-3-(三氟甲基)-1-((2-(三甲矽基)乙氧基)甲基)-5,6-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-7(4H)-酮(4.0克，7.86毫莫耳)和Pd/C(0.8克，10%)的甲醇(50mL)溶液在50psi的氫氣壓力下於60℃攪拌16小時。將混合物過濾，然後將濾液濃縮，得到6-(呱啶-4-基)-3-(三氟甲基)-1-((2-(三甲矽基)乙氧基)甲基)-5,6-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-7(4H)-酮(3.0克，90%)，不經過進一步純化直接用於下一步驟。
步驟D：在15~20℃下，將6-(呱啶-4-基)-3-(三氟甲基)-1-((2-(三甲矽基)乙氧基)甲基)-5,6-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-7(4H)-酮(3.0克，90%)(3.0克，7.2毫莫耳)的乙酸(30mL)溶液中加入亞硝酸鈉(2.5克，35.8毫莫耳)的水(5mL)溶液。將混合物在15℃下攪拌0.5小時，然後在40℃攪拌2小時。將混合物用乙酸乙酯(60毫升×升)萃取，將合併的有機層用鹽水洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，濃縮，並通過矽膠柱色譜法(PE：EA=5：1至2：1)純化，得到6-(1-亞硝基呱啶-4-基)-3-(三氟甲基)-1-((2-(三甲矽基)乙氧基)甲基)-5,6-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-7(4H)-酮(3.0克，94%)，為黃色固體。
步驟E：在0℃下，將溶有6-(1-亞硝基呱啶-4-基)-3-(三氟甲基)-1-((2-(三甲矽基)乙氧基)甲基)-5,6-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-7(4H)-酮(2.5克，5.6毫莫耳)和氯化銨(1.5克，27.9毫莫耳)的MeOH(40毫升)溶液中加入鋅粉(1.8克，27.9毫莫耳)。將混合物在10爾下攪拌2小時後過濾，將濾液濃縮，得到6-(1-胺基呱啶-4-基)-3-(三氟甲基)-1-((2-(三甲矽基)乙氧基)甲基)-5,6-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-7(4H)-酮(2.4克，100%)，為粗產物，其不經進一步純化直接用於下一步驟。
步驟F：在12℃下，將2-(2-氯乙氧基)乙酸(0.93克，6.7毫莫耳)，HATU(2.6克，6.7毫莫耳)和DIPEA(2.6毫升)加入DMF(30mL)溶液中，然後加入溶有6-(1-胺基呱啶-4-基)-3-(三氟甲基)-1-((2-(三甲矽基)乙氧基)甲基)-5,6-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-7(4H)-酮(2.4克，5.6毫莫耳)的DMF(10mL)溶液。將混合物在12℃下攪拌16小時。溶液中加入水後，混合物用EtOAc(100毫升×升)萃取。將合併的有機層用碳酸氫鈉水溶液洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，濃縮，並通過矽膠柱色譜純化(PE： EA=1：1至0：1)，得到2-(2-氯乙氧基)-N-(4-(7-氧代-3-(三氟甲基l)-1-((2-(三甲矽基)乙氧基)甲基)-4,5-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-6(7H)-基)呱啶-1-基l)乙醯胺(2.8克，92%)，為油狀物。
步驟G：將2-(2-氯乙氧基)-N-(4-(7-氧代-3-(三氟甲基l)-1-((2-(三甲矽基)乙氧基)甲基)-4,5-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-6(7H)-基)呱啶-1-基)乙醯胺(2.8克，5.1毫莫耳)溶在DMF(30mL)溶液中，在0℃向溶液中加入NaH(305毫克，7.6毫莫耳)。加完後將混合物在10℃下攪拌1小時。混合物加入飽和NH4Cl溶液中，並用EtOAc(200毫升×升)萃取。合併的有機層用鹽水洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，濃縮，得到4-(4-(7-氧代-3-(三氟甲基l)-1-((2-(三甲矽基)乙氧基)甲基)-4,5-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-6(7H)-基)呱啶-1-基)嗎啉-3-酮(2.2克，84%)，為白色固體。
步驟H：在0℃下，將4-(4-(7-氧代-3-(三氟甲基)-1-((2-(三甲矽基)乙氧基)甲基)-4,5-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-6(7H)-基)呱啶-1-基)嗎啉-3-酮(2.3克，4.4毫莫耳)加入DCM(30mL)和2,2,2-三氟乙酸(8mL)的混合溶液中。該混合物在0℃下攪拌16小時。將混合物濃縮，並用矽膠柱層析(PE：乙酸乙酯=1：1至0：1)，得到4-(4-(1-(羥基甲基)-7-氧代-3-(三氟甲基)-4,5-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-6(7H)-基)呱啶-1-基)嗎啉-3-酮(1.6克，93%)，為粘稠固體。
步驟I：將4-(4-(1-(羥基甲基)-7-氧代-3-(三氟甲基)-4,5-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-6(7H)-基)呱啶-1-基)嗎啉-3-酮(1.5克，3.6毫莫耳)和氨水(2.0毫升)加入MeOH(20毫升)中，混合物在2℃下攪拌20分鐘。將混合物濃縮，得到4-(4-(7-氧代-3-(三氟甲基)-4,5-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-6(7H)-基)呱啶-1-基)嗎啉-3-酮(1.2克，82%)，為白色固體。
步驟J：在2℃下，將4-(4-(7-氧代-3-(三氟甲基)-4,5-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-6(7H)-基)呱啶-1-基)嗎啉-3-酮(60毫克，0.2毫莫耳)，(4-(二氟甲氧基)苯基)硼酸(60毫克，0.4毫莫耳)，4Å分子篩(1克)和三乙胺(0.5mL)加入二氯甲烷(2.0毫升)中，隨後在氮氣保護下加入醋酸銅(28毫克，0.2毫莫耳)。O2氛圍下，將混合物在2℃下攪拌12小時。將反應混合物過濾，將濾液濃縮並通過製備型HPLC(HCOOH)純化，得到4-(4-(1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-氧代-3-(三氟甲基)-4,5-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-6(7H)-基)呱啶-1-基)嗎啉-3-酮(30毫克，37%)，為白色固體。1H NMR(DMSO-d 6 ,400MHz)δ 7.64(dd,J 1 =8.0Hz,J 2 =3.2Hz,2H),7.30(dd,J 1 =8.0Hz,J 2 =3.2Hz,2H),7.36(t,J=74.0Hz,1H),4.25-4.22(m,1H),3.98(s,2H),3.82-3.79(m,2H),3.64-3.61(m,2H),3.43-3.40(m,4H),3.00-3.05(m,2H),2.91-2.86(m,2H),1.83-1.79(m,2H),1.61-1.58(m,2H)。
依據本發明實施例24提供之化學式與其反應流程如下所示。
4-(4-(1-(6-氯代萘-2-基)-7-氧代-3-(三氟甲基)-4,5-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-6(7H)-基)呱啶-1-基)嗎啉-3-酮
步驟A：4-(4-(1-(6-氯代萘-2-基)-7-氧代-3-(三氟甲基)-4,5-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-6(7H)-基)呱啶-1-基)嗎啉-3-酮按照用於實施例24的製備方法步驟J製備，其中(6-氯萘-2-基) 硼酸替代(4-(二氟甲氧基)苯基)硼酸。將粗產物通過製備型HPLC(FA)進行純化，得到標題化合物，為白色固體。1HNMR(DMSO-d 6,400MHz)δ 8.22-8.19(m,2H),8.11(d,J=8.8Hz,1H),8.03(d,J=8.8Hz,1H),7.76(d,J=8.8Hz,1H),7.63(d,J=8.8Hz,1H),4.26-4.23(m,1H),3.97(s,2H),3.81-3.78(m,2H),3.66-3.62(m,2H),3.43-3.40(m,4H),3.08-3.05(m,2H),2.98-2.90(m,2H),1.83-1.79(m,2H),1.62-1.58(m,2H)。
依據本發明實施例25提供之化學式與其反應流程如下所示。
2-氟-5-(7-氧代-6-(1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)-3-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-1-基)苯甲腈
步驟A：2-氟-5-(7-氧代-6-(1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)-3-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-1-基)苯甲腈按照用於實施例24的製備方法步驟J製備，其中(3-氰基-4-氟苯基)硼酸替代(4-(二氟甲氧基)苯基)硼酸。1H NMR(DMSO-d 6 ,400MHz)δ 8.32(dd,J 1 =6.4Hz,J 2 =2.4Hz,1H),8.05(dd,J 1 =7.2Hz,J 2 =4.4Hz,1H),7.71(d,J=8.8Hz,1H),4.26-4.23(m,1H),3.98(s,2H),3.82-3.80(m,2H),3.66-3.62(m,2H),3.43-3.40(m,4H),3.08-3.05(m,2H),2.98-2.90(m,2H),1.83-1.80(m,2H),1.62-1.59(m,2H)。
依據本發明實施例26提供之化學式與其反應流程 如下所示。
4-(4-(1-(3-胺基苯並[d]異惡唑-5-基)-7-氧代-3-(三氟甲基)-4,5-二 氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-6(7H)-基)呱啶-1-基)嗎啉-3-酮
步驟A：4-(4-(1-(3-胺基苯並[d]異惡唑-5-基)-7-氧代-3-(三氟甲基)-4,5-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-6(7H)-基)呱啶-1-基)嗎啉-3-酮按照用於實施例24的製備方法步驟J製備，其中(3-胺基苯並[d]異惡唑-5-基)硼酸替代(4-(二氟甲氧基)苯基)硼酸。1H NMR(DMSO-d 6 ,400MHz)δ 8.05(d,J=2.0Hz,1H),7.71(d,J=9.2Hz,1H),7.56(d,J=8.8Hz,1H),6.59(s,2H),4.25-4.23(m,1H),3.98(s,2H),3.82-3.80(m,2H),3.66-3.62(m,2H),3.43-3.40(m,4H),3.08-3.05(m,2H),2.98-2.90(m,2H),1.84-1.81(m,2H),1.60-1.58(m,2H)。
依據本發明實施例27提供之化學式與其反應流程如下所示。
3-(7-氧代-6-(1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)-3-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-1-基)苯甲腈
步驟A：3-(7-氧代-6-(1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)-3-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-1-基)苯甲腈 按照用於實施例24的製備方法步驟J製備，其中(3-氰基苯基)硼酸替代(4-(二氟甲氧基)苯基)硼酸。1H NMR(DMSO-d 6 ,400MHz)δ 8.19(s,1H),8.00-7.95(m,2H),7.75-7.72(m,1H),4.25-4.23(m,1H),3.98(s,2H),3.82-3.80(m,2H),3.66-3.62(m,2H),3.43-3.40(m,4H),3.08-3.05(m,2H),2.98-2.90(m,2H),1.84-1.81(m,2H),1.60-1.58(m,2H)。
依據本發明實施例28提供之化學式與其反應流程如下所示。
4-(4-(1-(3-氟-4-甲氧基苯基)-7-氧代-3-(3-(三氟甲基)-4,5-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-6(7H)-基)呱啶-1-基)嗎啉-3-酮
步驟A：4-(4-(1-(3-氟-4-甲氧基苯基)-7-氧代-3-(3-(三氟甲基)-4,5-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-6(7H)-基)呱啶-1-基)嗎啉-3-酮按照用於實施例24的製備方法步驟J製備，其中(3-氟-4-甲氧基苯基)硼酸替代(4-(二氟甲氧基)苯基)硼酸。1H NMR(DMSO-d 6 ,400MHz)δ 7.55(d,J=11.6Hz,1H),7.38-7.36(m,1H),7.27(t,J=8.8Hz,1H),4.26-4.23(m,1H),3.98(s,2H),3.92(s,3H),3.81-3.80(m,2H),3.61-3.60(m,2H),3.43-3.40(m,4H),3.03-3.01(m,2H),2.91-2.90(m,2H),1.84-1.79(m,2H),1.61-1.58(m,2H)。
依據本發明實施例29提供之化學式與其反應流程如下所示。
4-(4-(1-(3-氟代萘-2-基)-7-氧代-3-(3-(三氟甲基)-4,5-二氫-1H-吡 唑並[3,4-c]吡啶-6(7H)-基)呱啶-1-基)嗎啉-3-酮
步驟A：4-(4-(1-(3-氟代萘-2-基)-7-氧代-3-(3-(三氟甲基)-4,5-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-6(7H)-基)呱啶-1-基)嗎啉-3-酮按照用於實施例24的製備方法步驟J製備，其中(3-氟萘-2-基)硼酸替代(4-(二氟甲氧基)苯基)硼酸。1H NMR(DMSO-d 6 ,400MHz)δ 8.29(d,J=7.6Hz,1H),8.09-7.02(m,3H),7.78(d,J=7.6Hz,1H),7.62(d,J=8.0Hz,1H),4.25-4.20(m,1H),3.96(s,2H),3.80-3.79(m,2H),3.66-3.62(m,2H),3.43-3.40(m,4H),3.00-2.98(m,4H),1.84-1.78(m,2H),1.58-1.56(m,2H)。
依據本發明實施例30提供之化學式與其反應流程如下所示。
2-(二氟甲氧基)-5-(7-氧代-6-(1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)-3-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-1-基)苯甲腈
步驟A：2-(二氟甲氧基)-5-(7-氧代-6-(1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)-3-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-1-基)苯甲腈按照用於實施例24的製備方法步驟J製備，其中(3-氰基-4- (二氟甲氧基)苯基)硼酸替代(4-(二氟甲氧基)苯基)硼酸。1H NMR(DMSO-d 6 ,400MHz)δ 8.31(d,J=2.8Hz,1H),8.04(dd,J 1 =9.2Hz,J 2 =2.8Hz,1H),7.62(d,J=9.2Hz,1H),7.56(t,J=72.0Hz,1H),4.28-4.20(m,1H),3.98(s,2H),3.81-3.79(m,2H),3.65-3.62(m,2H),3.43-3.40(m,4H),3.00-2.98(m,4H),1.83-1.78(m,2H),1.62-1.59(m,2H)。
依據本發明實施例31提供之化學式與其反應流程如下所示。
3-(7-氧代-6-(1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)-3-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-1-基)苯甲醯胺
步驟A：將3-(7-氧代-6-(1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)-3-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-1-基)苯甲腈(100毫克，0.205毫莫耳)和K2CO3(57毫克，0.41毫莫耳)溶解於DMSO(2mL)中，然後H2O2(21毫克，0.615毫莫耳)加入到混合物中，將所得混合物在20℃下攪拌3小時。混合物用飽和硫代硫酸鈉(5mL)水溶液洗滌，用EtOAc(10毫升×升)萃取，並濃縮。將粗殘餘物通過製備型HPLC純化(HCOOH)，得到3-(7-氧代-6-(1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)-3-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-1-基)苯甲醯胺(10.2毫克，10%產率)，為白色固體。1HNMR(DMSO-d 6 ,400MHz)δ 8.12(s,1H),8.04-7.99(m,2H),7.72(d,J=2.8Hz,1H),7.21(d,J=4.0Hz,1H),7.61-7.56(m,2H),4.28-4.25(m,1H),3.98(s,2H),3.81-3.79(m,2H), 3.65-3.62(m,2H),3.43-3.40(m,4H),3.00-2.98(m,4H),1.83-1.78(m,2H),1.61-1.59(m,2H)。
依據本發明實施例32提供之化學式與其反應流程如下所示。
2-氟-5-(7-氧代-6-(1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)-3-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-1-基)苯甲醯胺
步驟A：2-氟-5-(7-氧代-6-(1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)-3-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-1-基)苯甲醯胺按照用於實施例31的製備所述的方法，步驟A製備. 1HNMR(DMSO-d 6 ,400MHz)δ 7.90(s,1H),7.85-7.82(m,2H),7.79-7.85(m,1H),7.45(t,J=8.8Hz,1H),4.28-4.25(m,1H),3.98(s,2H),3.81-3.79(m,2H),3.65-3.62(m,2H),3.43-3.40(m,4H),3.00-2.98(m,4H),1.83-1.78(m,2H),1.61-1.53(m,2H)。
依據本發明實施例33提供之化學式與其反應流程如下所示。
2-(二氟甲氧基)-5-(7-氧代-6-(1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)-3-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-1-基)苯甲醯胺
步驟A：2-(二氟甲氧基)-5-(7-氧代-6-(1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)-3-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-1-基)苯甲醯胺按照用於實施例31的製備所述的方法，步驟A製備1HNMR(DMSO-d 6 ,400MHz)δ 7.83(s,1H),7.76-7.70(m,3H),7.35(d,J=8.8Hz,1H),7.27(t,J=72Hz,1H),4.28-4.25(m,1H),3.98(s,2H),3.81-3.79(m,2H),3.65-3.62(m,2H),3.43-3.40(m,4H),3.00-2.98(m,4H),1.83-1.78(m,2H),1.61-1.55(m,2H)。
本發明提供之化合物，可通過測定IC50值來評價受試化合物對人或大鼠的Xa因子或其他酶如凝血酶或胰蛋白酶的抑制能力，其中IC50值與抑制常數Ki相關聯。在顯色測定中使用純化的酶。使用FlexStation III(美國分子儀器公司)測定37℃下時間進程中線性部分(通常是加入底物2~10分鐘後)在405nm處的吸光度的變化來測量發色底物水解的初始速度。通過繪製水解的相對速度(與未受抑制的對照組相比)對受試化合物濃度的對數曲線後，通過線性回歸計算，測定導致底物水解的速率降低50%的抑制劑的濃度。根據Cheng-Prusoff equation：Ki=IC50/(1+[S]/Km)計算酶抑制常數(Ki)，其中[S]為底物濃度，Km為通過雙倒數作圖法確定的米-曼二氏常數。通過GraphPad Prism軟體得到受試化合物的IC50值。使用"形劑量效應(可變斜率)"擬合曲線。以下對於不同試驗做簡單說明，同時提供本案之不同實施例的測試結果，如下表1所示。
人/大鼠凝血因數Xa試驗，係採用Tris-HCl緩衝液(50mM,pH 8.3,150mM NaCl)測定人或大鼠的凝血因數Xa活性抑制作用。通過將50μL人凝血因數Xa(Enzyme Research Laboratories,Inc；終濃度為8.36nM)或50μL大鼠凝血因數Xa(Enzyme Research Laboratories,Inc；終濃度為57.5nM)的緩衝液滴加到Greiner 384微量滴定板的合適孔中的方法測定IC50。含2μL 2%(V/V)DMSO的測定緩衝液(未受抑制的對照組)或各種濃度的待測化合物稀釋在含有2%(V/V)DMSO的測定緩衝液中，並添加48μL襯底S-2222(Chromogenix；化學式：Bz-IIe-Glu(γ-OR)-Gly-Arg-pNA‧HCl R=H(50%)，其中R=CH3(50%))的測定緩衝液，終濃度為0.172mM。該試驗中將受試化合物與酶預培養10分鐘，然後加入底物S-2222得到100μL終體積以開始試驗。
Ki<10μM的受試化合物被認為是積極的，本發明優選Ki<1μM的化合物，更優選Ki<0.1μM的化合物，更優選Ki<0.01μM的化合物，進一步優選Ki<0.001μM的化合物。經上述試驗方法測定，本發明的一些化合物Ki<0.1μM，因此本發明的化合物可作為有效的Xa因數抑制劑。
而人凝血酶試驗則是採用緩衝液(10mM的HEPES緩衝液，pH 7.4,2mM CaCl2)測定人凝血酶活性抑制作用。選擇Greiner 384微量滴定板中合適的孔測定IC50，含有50μL人凝血酶(Sigma公司；T8885)的緩衝液，終濃度為0.05NIH單位/mL，含2μL2%(V/V)DMSO的測定緩衝液(未受抑制的對照組)或各種濃度的待測化合物稀釋在含有2%(V/V)DMSO的測定緩衝液中；加入含有48μL底物S-2238(Chromogenix；化學式：H-D-Phe-Pip-Arg-pNA‧2HCl)的緩衝液，終濃度為30μM。該試驗中將受試化合物與酶預培養10分鐘，然後加入底物得到100μL 終體積以開始試驗。
人胰蛋白酶試驗是採用緩衝液(50mM Tris,pH 8.2,and 20mM CaCl2)測定人胰蛋白酶活性抑制作用。選擇Greiner 384微量滴定板中合適的孔測定IC50，含有50μL人胰蛋白酶(Sigma公司；T6424)的緩衝液，終濃度為0.39BAEE單位/mL，含2μL 2%(V/V)DMSO的測定緩衝液(未受抑制的對照組)或各種濃度的待測化合物稀釋在含有2%(V/V)DMSO的測定緩衝液中；含有底物S-2222(Chromogenix)的緩衝液，終濃度為30μM。該試驗中將受試化合物與酶預培養10分鐘，然後加入底物48μL，得到終體積100μL以開始試驗。
凝血酶原試驗是通過凝血酶的生成測量受試化合物對凝血酶原酶的活性。簡單地說，在10mM HEPES緩衝液和pH 7.4,2mM CaCl2中溫育12.5μL人因數Xa，終濃度為0.5nM，並在37℃加入12.5μL人血小板(1×107mL-1)10分鐘。加入25μL凝血酶原以開始反應，終濃度為0.5μM，含2μL 2%(V/V)DMSO的測定緩衝液(未受抑制的對照組)或各種濃度的待測化合物稀釋在含有2%(V/V)DMSO的測定緩衝液中。20分鐘後，加入48μL底物S-2238(Chromogenix)至終濃度為50μM以測定凝血酶活性。
由上表1可得知，與已知抗凝劑阿派沙班相比，本發明化合物通過其特定的抗凝血因子Xa活性表現出很強的抗凝血活性。
雖然本發明已以實施例揭露如上，然其並非用以限定本發明。任何該領域中具有通常知識者，在不脫離本發明之精神和範圍內，當可作些許之更動與潤飾。因此本發明之保護範圍當視後附之申請專利範圍所界定者為準。

Claims (14)

  1. 一種作為凝血因子Xa抑制劑的醯肼類化合物，其包含：一如下化學式(I)所示之化合物或其醫藥上可接受之鹽， 其中，X選自3-9元碳環或其苯並環、4-10元雜環或其苯並環，Y、Z分別獨立地選自4-9元飽和雜環任一者；其中，R1、R2、R3分別獨立地選自H、F、Cl、Br、I、CN、OH、SH、NH2、CHO、COOH中之任一者，或選自被R01取代的C1-10烷基或雜烷基、C3-10環烴基或雜環烴基、被C3-10環烴基或雜環烴基取代的C1-10烷基或雜烷基中之任一者，其中所述R01選自F、Cl、Br、I、CN、OH、SH、NH2、CHO、COOH、R02中之任一者，其中所述R02選自C1-10烷基、C1-10烷胺基、N,N-二(C1-10烷基)胺基、C1-10烷氧基、C1-10烷醯基、C1-10烷氧羰基、C1-10烷基磺醯基、C1-10烷基亞磺醯基、C3-10環烷基、C3-10環烷胺基、C3-10雜環烷胺基、C3-10環烷氧基、C3-10環烷基醯基、C3-10環烷氧羰基、C3-10環烷基磺醯基、C3-10環烷基亞磺醯基中之任一者；其中，所述4-10元雜環、所述4-9元飽和雜環、所述C1-10雜烷基、所述C3-10雜環烴基、所述C1-10雜烷基與所述C3-10雜環烷胺基皆各別包含至少一雜原子或至少一雜原子 團，其中所述雜原子或雜原子團分別獨立地選自-C(=O)N(Rd3)-、-N(Rd4)-、-C(=NRd5)-、-S(=O)2N(Rd6)-、-S(=O)N(Rd7)-、-O-、-S-、=O、=S、-C(=O)O-、-C(=O)-、-C(=S)-、-S(=O)-和-S(=O)2-中之任一者，其中所述Rd3、Rd4、Rd5、Rd6、Rd7分別獨立地選自H、R03任一者，其中所述R03選自C1-10烷基、C1-10烷基醯基、C1-10烷氧羰基、C1-10烷基磺醯基、C1-10烷基亞磺醯基、C3-10環烷基、C3-10環烷基醯基、C3-10環烷氧羰基、C3-10環烷基磺醯基、C3-10環烷基亞磺醯基中之任一者；其中，當所述R02、R03視選擇性地被R001取代時，所述R001選自F、Cl、Br、I、CN、OH、N(CH3)2、NH(CH3)、NH2、CHO、COOH、三氟甲基、氨甲基、羥甲基、甲基、甲氧基、甲醯基、甲氧羰基、甲磺醯基、甲基亞磺醯基中之任一者；其中該化合物包含所述R01、所述R001、與所述雜原子或雜原子團的數量分別介於0-3之間；以及，其中視選擇性地所述R1與所述R2、所述R2與所述R3之任一組共同連接到同一個碳原子或雜原子上形成一個5-7元環。
  2. 如申請專利範圍第1項所述之作為凝血因子Xa抑制劑的醯肼類化合物，其中所述X選自之任一者，其中R11、R12、R13、R14、R15與R16選自H、F、Cl、Br、I、CN、OH、SH、NH2、CHO、COOH，或選自視選擇性被所述 R01取代的C1-10烷基或雜烷基、C3-10環烴基或雜環烴基、被C3-10環烴基或雜環烴基取代的C1-10烷基或雜烷基；其中D11選自-C(Rd1)(Rd2)-、-C(=O)N(Rd3)-、-N(Rd4)-、-C(=NRd5)-、-S(=O)2N(Rd6)-、-S(=O)N(Rd7)-、-O-、-S-、-C(=O)O-、-C(=O)-、-C(=S)-、-S(=O)-以及-S(=O)2-中之任一者；以及其中Rd1、Rd2分別獨立地選自H、F、Cl、Br、I、CN、OH、SH、NH2、CHO、COOH任一者，或選自視選擇性被R01取代的C1-10烷基或雜烷基、C3-10環烴基或雜環烴基、被C3-10環烴基或雜環烴基取代的C1-10烷基或雜烷基中之任一者。
  3. 如申請專利範圍第2項所述之作為凝血因子Xa抑制劑的醯肼類化合物，其中所述X選自 之任一者，其中R101、R102、R103、R104、R105、R106、R107分別獨立地選自CH3O-、F、Cl、CN、NH2、CF3O-、CHF2O-、-C(=O)NH2、CH3S(=O)2-中之任一者。
  4. 如申請專利範圍第3項所述之作為凝血因子Xa抑制劑的醯肼類 化合物，其中所述X選自 之任一者。
  5. 如申請專利範圍第1項所述之作為凝血因子Xa抑制劑的醯肼類化合物，其中所述結構單元選自以及中之任一者，其中R21、R22、R23分別獨立地選自H、F、Cl、Br、I、CN、OH、SH、NH2、CHO、COOH，或選自視選擇性被R01取代的C1-10烷基或雜烷基、C3-10環烴基或雜環烴基、被C3-10環烴基或雜環烴基取代的C1-10烷基或雜烷基。
  6. 如申請專利範圍第5項所述之作為凝血因子Xa抑制劑的醯肼類化合物，其中所述R21、R22、R23分別獨立地選自H、CN、CF3、CH3、CH3CH2、環丙基、-C(=O)NH2、中之任一者。
  7. 如申請專利範圍第6項所述之作為凝血因子Xa抑制劑的醯肼類化合物，其中所述結構單元選自 中之任一者。
  8. 如申請專利範圍第1項所述之作為凝血因子Xa抑制劑的醯肼類化合物，其中所述Y之結構為，其中T31、T32分別獨立地選自N與C(Rt)中任一者，D31、D32分別獨立地選自單鍵、-C(Rd1)(Rd2)-、-C(=O)N(Rd3)-、-N(Rd4)-、-C(=NRd5)-、-S(=O)2N(Rd6)-、-S(=O)N(Rd7)-、-O-、-S-、-C(=O)O-、-C(=O)-、-C(=S)-、-S(=O)-與-S(=O)2-中之任一者，且兩者不同時為單鍵，其中Rt、Rd1、Rd2分別獨立地選自H、F、Cl、Br、I、CN、OH、SH、NH2、CHO、COOH中之任一者，或選自視選擇性被R01取代的C1-10烷基或雜烷基、C3-10環烴基或雜環烴基、被C3-10環烴基或雜環烴基取代的C1-10烷基或雜烷基中之任一者，並且當所述D31與所述D32為C(Rd1)(Rd2)時，所述D31與所述D32相互連接形成一個3-6元環。
  9. 如申請專利範圍第8項所述之作為凝血因子Xa抑制劑的醯肼類化合物，其中所述Y選自中之任一者。
  10. 如申請專利範圍第1項所述之作為凝血因子Xa抑制劑的醯肼類化合物，其中所述Z之為，其中T41選自N和C(Rt)中之任一者，D41、D42、D43、D44、D45中之任0-3者分別獨立地選自單鍵、-C(=O)N(Rd3)-、-N(Rd4)-、-C(=NRd5)-、-S(=O)2N(Rd6)-、-S(=O)N(Rd7)-、-O-、-S-、-C(=O)O-、-C(=O)-、-C(=S)-、-S(=O)-或-S(=O)2-中之任一者，並且其餘選自C(Rd1)(Rd2)，其中Rt、所述Rd1、所述Rd2分別獨立地選自H、F、Cl、Br、I、CN、OH、SH、NH2、CHO、COOH中之任一者，或選自視選擇性被R01取代的C1-10烷基或雜烷基、C3-10環烴基或雜環烴基、被C3-10環烴基或雜環烴基取代的C1-10烷基或雜烷基中之任一者。
  11. 如申請專利範圍第10項所述之作為凝血因子Xa抑制劑的醯肼類化合物，其中所述Z選自中之任一者。
  12. 如申請專利範圍第1項所述之作為凝血因子Xa抑制劑的醯肼類化合物，其中所述化合物或醫藥上可接受之鹽具有如下化學式 (I)與(II)任一者之結構 其中，Y1、Y2分別獨立地代表含N的4-9元飽和雜環，Z1代表含醯胺鍵的4-9元飽和雜環，Z2代表4-9元飽和雜環。
  13. 如申請專利範圍第12項所述之作為凝血因子Xa抑制劑的醯肼類化合物，其中該化合物選自：4-(4-(1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-3-(三氟甲基)-4,5-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-6(7H)-基)呱啶-1-基)嗎啡啉-3-酮、1-(4-甲氧基苯基)-6-(2'-氧代-[1,1'-二呱啶基]-4-基)-3-(三氟甲基)-5,6-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-7(4H)-酮、1-(4-甲氧基苯基)-6-(1-(2-氧代吡咯烷-1-基)-呱啶基-4-基)-3-(三氟甲基)-5,6-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-7(4H)-酮、1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-6-(2'-氧代-[1,1'-二呱啶基]-4-基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲醯胺、1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-6-(2'-氧代-[1,1'-二呱啶基]-4-基)-4,5,6,7- 四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-腈、N'-氰基-1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-6-(2'-氧代-[1,1'-二呱啶基]-4-基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲脒、1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-6-(1-(3-氧代嗎啉代)呱啶-4-基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲醯胺、1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-6-(1-(2-氧代吡咯烷-3-基)呱啶-4-基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲醯胺、1-(4-氯代苯基)-7-氧代-6-(1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲醯胺、7-氧代-6-(1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)-1-(4-(三氟甲基)苯基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲醯胺、1-(4-(二氟甲基)苯基)-7-氧代-6-(1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲醯胺、1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-6-(3-(2-氧代呱啶-1-基)-3-氮雜雙環[3.1.0]己烷-6-基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲醯胺、1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-6-(3-(3-氧代嗎啉)-3-氮雜雙環[3.1.0]己-6-基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲醯胺、1-(4-甲氧基苯基)-7-氧代-6-(2-甲氧基苯基-[1,4'-二呱啶]-1'-基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-3-甲醯胺、1-(4-甲氧基苯基)-N5-(1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)-1H-吡唑-3,5-二甲醯胺、1-(4-甲氧基苯基)-N5-甲基-N5-(1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)-1H-吡 唑-3,5-二甲醯胺、N5-乙基-1-(4-甲氧基苯基)-N5-(1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)-1H-吡唑-3,5-二甲醯胺、N5-環丙基-1-(4-甲氧基苯基)-N5-(1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)-1H-吡唑-3,5-二甲醯胺、1-(4-甲氧基苯基)-N5-(1-(3-氧代嗎啉)吡咯烷-3-基)-1H-吡唑-3,5-二甲醯胺、N5-(1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)-1-(四氫-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-3,5-二甲醯胺、1-(1-(甲磺醯基)呱啶-4-基)-N5-(1-(氧代嗎啉)呱啶-4-基)-1H-吡唑-3,5-二甲醯胺、1-(4-甲氧基環己基)-N5-(1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)-1H-吡唑-3,5-二甲醯胺、4-(4-(1-(4-(二氟甲氧基)苯基)-7-氧代-3-(三氟甲基)-4,5-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-6(7H)-基)呱啶-1-基)嗎啉-3-酮、4-(4-(1-(6-氯代萘-2-基)-7-氧代-3-(三氟甲基)-4,5-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-6(7H)-基)呱啶-1-基)嗎啉-3-酮、2-氟-5-(7-氧代-6-(1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)-3-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-1-基)苯甲腈、4-(4-(1-(3-胺基苯並[d]異惡唑-5-基)-7-氧代-3-(三氟甲基)-4,5-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-6(7H)-基)呱啶-1-基)嗎啉-3-酮、3-(7-氧代-6-(1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)-3-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氫 -1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-1-基)苯甲腈、4-(4-(1-(3-氟-4-甲氧基苯基)-7-氧代-3-(3-(三氟甲基)-4,5-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-6(7H)-基)呱啶-1-基)嗎啉-3-酮、4-(4-(1-(3-氟代萘-2-基)-7-氧代-3-(3-(三氟甲基)-4,5-二氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-6(7H)-基)呱啶-1-基)嗎啉-3-酮、2-(二氟甲氧基)-5-(7-氧代-6-(1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)-3-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-1-基)苯甲腈、3-(7-氧代-6-(1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)-3-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-1-基)苯甲醯胺、2-氟-5-(7-氧代-6-(1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)-3-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-1-基)苯甲醯胺、和2-(二氟甲氧基)-5-(7-氧代-6-(1-(3-氧代嗎啉)呱啶-4-基)-3-(三氟甲基)-4,5,6,7-四氫-1H-吡唑並[3,4-c]吡啶-1-基)苯甲醯胺中之任一者。
  14. 如申請專利範圍第1項所述之作為凝血因子Xa抑制劑的醯肼類化合物，其該化合物或其鹽類之製程造方法如下所示：
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Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111148743B (zh) 2017-10-06 2023-12-15 福马治疗有限公司 抑制泛素特异性肽酶30
CA3110113A1 (en) 2018-10-05 2020-04-09 Forma Therapeutics, Inc. Fused pyrrolines which act as ubiquitin-specific protease 30 (usp30) inhibitors

Family Cites Families (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6020357A (en) 1996-12-23 2000-02-01 Dupont Pharmaceuticals Company Nitrogen containing heteroaromatics as factor Xa inhibitors
US6271237B1 (en) * 1997-12-22 2001-08-07 Dupont Pharmaceuticals Company Nitrogen containing heteromatics with ortho-substituted P1s as factor Xa inhabitors
DK1140941T3 (da) 1998-12-23 2005-02-14 Bristol Myers Squibb Pharma Co Nitrogenholdige heterobicykliske forbindelser som faktor Xa-inhibitorer
US6858616B2 (en) 1998-12-23 2005-02-22 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Nitrogen containing heterobicycles as factor Xa inhibitors
DE19962924A1 (de) 1999-12-24 2001-07-05 Bayer Ag Substituierte Oxazolidinone und ihre Verwendung
TWI331526B (en) 2001-09-21 2010-10-11 Bristol Myers Squibb Pharma Co Lactam-containing compounds and derivatives thereof as factor xa inhibitors
CA2726702A1 (en) 2001-09-21 2003-04-03 Bristol-Myers Squibb Company Lactam-containing compounds and derivatives thereof as factor xa inhibitors
EP1314733A1 (en) 2001-11-22 2003-05-28 Aventis Pharma Deutschland GmbH Indole-2-carboxamides as factor Xa inhibitors
TW200302225A (en) * 2001-12-04 2003-08-01 Bristol Myers Squibb Co Substituted amino methyl factor Xa inhibitors
TW200738672A (en) 2001-12-10 2007-10-16 Bristol Myers Squibb Co Intermediated for the preparation of 4,5-dihydro-pyrazolo [3,4-c] pyrid-2-ones
US7135469B2 (en) 2003-03-18 2006-11-14 Bristol Myers Squibb, Co. Linear chain substituted monocyclic and bicyclic derivatives as factor Xa inhibitors
US7381732B2 (en) 2004-10-26 2008-06-03 Bristol-Myers Squibb Company Pyrazolobenzamides and derivatives as factor Xa inhibitors
CN103242310A (zh) * 2012-02-10 2013-08-14 苏州迈泰生物技术有限公司 吡唑并吡啶酮类化合物及其在制备抗凝血药物中的用途
US9365556B2 (en) 2012-03-16 2016-06-14 Axikin Pharmaceuticals, Inc. 3,5-diaminopyrazole kinase inhibitors

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