JP2017516845A - 血液凝固因子Xa阻害剤としてのヒドラジド化合物 - Google Patents
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Abstract
Description
Xは3−9員炭素環又はそのベンゾ環、4−10員複素環又はそのベンゾ環から選択され、
Y、Zはそれぞれ独立に4−9員飽和複素環から選択され、
R1−3はそれぞれ独立にH、F、Cl、Br、I、CN、OH、SH、NH2、CHO、COOHから選択され、又は任意にR01に置換されるC1−10アルキル基又はヘテロアルキル基、C3−10シクロアルキル基又はヘテロシクロアルキル基、C3−10シクロアルキル基又はヘテロシクロアルキル基に置換されるC1−10アルキル基又はヘテロアルキル基から選択され、
R01はF、Cl、Br、I、CN、CH、OH、SH、NH2、CHO、COOH、R02から選択され、
R02はC1−10アルキル基、C1−10アルキルアミノ基、N,N−ジ(C1−10アルキル)アミノ基、C1−10アルコキシ基、C1−10アルキルアシル基、C1−10アルコキシカルボニル基、C1−10アルキルスルホニル基、C1−10アルキルスルフィニル基、C3−10シクロアルキル基、C3−10シクロアルキルアミノ基、C3−10複素環アルキルアミノ基、C3−10環式アルコキシ基、C3−10シクロアルキルアシル基、C3−10シクロアルコキシカルボニル基、C3−10シクロアルキルスルホニル基、C3−10シクロアルキルスルフィニル基から選択され、
ヘテロ原子又はヘテロ原子団はそれぞれ独立に−C(=O)N(Rd3)−、−N(Rd4)−、−C(=NRd5)−、−S(=0)2N(Rd6)−、−S(=O)N(Rd7)−、−O−、−S−、=O、=S、−C(=O)O−、−C(=O)−、−C(=S)−、−S(=O)−及び/又はーS(=O)2−から選択され、
Rd3−d7はそれぞれ独立にH、R03から選択され、
R03はC1−10アルキル基、C1−10アルキルアシル基、C1−10アルコキシカルボニル基、C1−10アルキルスルホニル基、C1−10アルキルスルフィニル基、C3−10基シクロアルキル基、C3−10環式アルキルアシル基、C3−10シクロアルコキシカルボニル基、C3−10シクロアルキルスルホニル基、C3−10シクロアルキルスルフィニル基から選択され、
R02、R03は任意にR001に置換され、
R001はF、Cl、Br、I、CN、OH、N(CH3)2、NH(CH3)、NH2、CHO、COOH、トリフルオロメチル基、アミノメチル基、ヒドロキシメチル基、メチル基、メトキシ基、ホルミル基、メトキシカルボニル基、メタンスルホニル基、メチルスルフィニル基から選択され、
R01、R001、ヘテロ原子又はヘテロ原子団の数はそれぞれ独立に0、1、2又は3から選択され、
任意に、R1とR2、R2とR3は共に同じ炭素原子又はヘテロ原子に接続されて5−
7員環を形成する。
D11は−C(Rd1)(Rd2)−、−C(=O)N(Rd3)−、−N(Rd4)−、−C(=NRd5)−、−S(=O)2N(Rd6)−、−S(=O)N(Rd7)−、−O−、−S−、−C(=O)O−、−C(=O)−、−C(=S)−、−S(=O)−又は−S(=O)2−から選択され、
Rd1、Rd2はそれぞれ独立にH、F、Cl、Br、I、CN、OH、SH、NH2、CHO、COOHから選択され、又は任意にR01に置換されるC1−10アルキル基又はヘテロアルキル基、C3−10シクロアルキル基又はヘテロシクロアルキル基、C3−10シクロアルキル基又はヘテロシクロアルキル基に置換されるC1−10アルキル基又はヘテロアルキル基から選択される。
本発明の一つの態様において、上記構造ユニット
H、NH2、CHO、COOHから選択され、又は任意にR01に置換されるC1−10アルキル基又はヘテロアルキル基、C3−10シクロアルキル基又はヘテロシクロアルキル基、C3−10シクロアルキル基又はヘテロシクロアルキル基に置換されるC1−10アルキル基又はヘテロアルキル基から選択される。
本発明の一つの態様において、上記構造ユニット
本発明の一つの態様において、上記Yは
D31−32はそれぞれ独立に単結合、−C(Rd1)(Rd2)−、−C(=O)N(Rd3)−、−N(Rd4)−、−C(=NRd5)−、−S(=0)2N(Rd6)−、−S(=O)N(Rd7)−、−O−、−S−、−C(=O)O−、−C(=O)−、−C(=S)−、−S(=O)−又はーS(=O)2−から選択され、且つ両者は同時に単結合でなく、
Rt、Rd1、Rd2はそれぞれ独立にH、F、Cl、Br、I、CN、OH、SH、NH2、CHO、COOHから選択され、任意にR01に置換されるC1−10アルキル基又はヘテロアルキル基、C3−10シクロアルキル基又はヘテロシクロアルキル基、C3−10シクロアルキル基又はヘテロシクロアルキル基に置換されるC1−10アルキル基又はヘテロアルキル基から選択され、
D31−32がC(Rd1)(Rd2)から選択される時、D31とD32は任意に接続されて3−6員環を形成する。
本発明の一つの態様において、上記Zは
D41−45における0−3個はそれぞれ独立に単結合、−C(=O)N(Rd3)−、−N(Rd4)−、−C(=NRd5)−、−S(=0)2N(Rd6)−、−S(=O)N(Rd7)−、−O−、−S−、−C(=O)O−、−C(=O)−、−C(=S)−、−S(=O)−又はーS(=O)2−から選択され、他はC(Rd1)(Rd2)から選択され、
Rt、Rd1、Rd2はそれぞれ独立にH、F、Cl、Br、I、CN、OH、SH、NH2、CHO、COOHから選択され、又は任意にR01に置換されるC1−10アルキル基又はヘテロアルキル基、C3−10シクロアルキル基又はヘテロシクロアルキル基、C3−10シクロアルキル基又はヘテロシクロアルキル基に置換されるC1−10アルキル基又はヘテロアルキル基から選択される。
本発明の一つの態様において、上記化合物又はその薬学に許容される塩は、その構造式が式(II)又は(III)に示すされ、
本発明の一つの態様において、上記化合物又はその薬学に許容される塩は以下から選択される:
1)4−(4−(1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソー3−(トリフルオロメチル)−4,5−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−6(7H)−イル)ピぺリジン−1−イル)モルホリン−3−オン;
2)1−(4−メトキシフェニル)−6−(2’−オキソー[1,1’ −ジピペリジン]−4−イル)−3−(トリフルオロメチル)−5,6−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−7(4H)−オン;
3)1−(4−メトキシフェニル)−6−(1−(2−オキソピロリジン−1−イル)−ピぺリジン−4−イル)−3−(トリフルオロメチル)−5,6−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−7(4H)−オン;
4)1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(2’−オキソー[1,1’− ジピペリジン]−4−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボキサミド;
5)1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(2’−オキソー[1,1’− ジピペリジン]−4−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボニトリル;
6)N’−シアノ−1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(2’−オキソー[1,1’− ジピペリジン]−4−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボキサミジン;
7)1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボキサミド;
8)1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(1−(2−オキソピロリジン−3−イル)ピぺリジン−4−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボキサミド;
9)1−(4−クロロフェニル)−7−オキソ−6−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボキサミド;
10)7−オキソ−6−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−1−(4−(トリフルオロメチル)フェニル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボキサミド;
11)1−(4−(ジフルオロメチル)フェニル)−7−オキソ−6−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾ
ロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボキサミド;
12)1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(3−(2−オキソピロリジン−1−イル)−3−アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン−6−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボキサミド;
13)1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(3−(3−オキソモルホリノ)−3−アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン−6−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボキサミド;
14)1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(2−メトキシフェニル−[1,4’−ジピペリジン]−1’−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボキサミド;
15)1−(4−メトキシフェニル)−N5−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−1H−ピラゾール−3,5−ジカルボキサミド;
16)1−(4−メトキシフェニル)−N5−メチル−N5−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−1H−ピラゾール−3,5−ジカルボキサミド;
17)N5−エチル−1−(4−メトキシフェニル)−N5−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−1H−ピラゾール−3,5−ジカルボキサミド;
18)N5−シクロプロピル−1−(4−メトキシフェニル)−N5−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−1H−ピラゾール−3,5−ジカルボキサミド;
19)1−(4−メトキシフェニル)−N5−(1−(3−オキソモルホリノ)ピロリジン−3−イル)−1H−ピラゾール−3,5−ジカルボキサミド;
20)N5−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−1−(テトラヒドロ−2H−ピラン−4−イル)−1H−ピラゾール−3,5−ジカルボキサミド;
21)1−(1−(メチルスルホニル)ピぺリジン−4−イル)−N5−(1−(オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−1H−ピラゾール−3,5−ジカルボキサミド;22)1−(4−メトキシシクロヘキシル)−N5−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−1H−ピラゾール−3,5−ジカルボキシアミド;
23)4−(4−(1−(4−(ジフルオロメトキシ)フェニル)−7−オキソ−3−(トリフルオロメチル)−4,5−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−6(7H)−イル)ピぺリジン−1−イル)モルホリン−3−オン;
24)4−(4−(1−(6−クロロナフタレン−2−イル)−7−オキソ−3−(トリフルオロメチル)−4,5−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−6(7H)−イル)ピぺリジン−1−イル)モルホリン−3−オン;
25)2−フルオロ−5−(7−オキソ−6−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−3−(トリフルオロメチル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−1−イル)ベンゾニトリル;
26)4−(4−(1−(3−アミノベンゾ[d]イソオキサゾール−5−イル)−7−オキソ−3−(トリフルオロメチル)−4,5−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−6(7H)−イル)ピぺリジン−1−イル)モルホリン−3−オン;
27)3−(7−オキソ−6−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−3−(トリフルオロメチル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−1−イル)ベンゾニトリル;
28)4−(4−(1−(3−フルオロ−4−メトキシフェニル)−7−オキソ−3−(3−(トリフルオロメチル)−4,5−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−6(7H)−イル)ピぺリジン−1−イル)モルホリン−3−オン;
29)4−(4−(1−(3−フルオロナフタレン−2−イル)−7−オキソ−3−(3−(トリフルオロメチル)−4,5−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−6(7H)−イル)ピぺリジン−1−イル)モルホリン−3−オン;
30)2−(ジフルオロメトキシ)−5−(7−オキソ−6−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−3−(トリフルオロメチル)−4,5,6,7−テトラ
ヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−1−イル)ベンゾニトリル;
31)3−(7−オキソ−6−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−3−(トリフルオロメチル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−1−イル)ベンズアミド;
32)2−フルオロ−5−(7−オキソ−6−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−3−(トリフルオロメチル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−1−イル)ベンズアミド;及び
33)2−(ジフルオロメトキシ)−5−(7−オキソ−6−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−3−(トリフルオロメチル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−1−イル)ベンズアミド。
本発明のもう一つの目的は医薬組成物を提供することであって、それは治療上有効な量の式(I)の化合物又はその薬学に許容される塩、水和物又はプロドラッグ及び薬学に許容される担体を含む。
メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、−CH2C(CH3)(CH3)(OH)、シクロプロピル基、シクロブチル基、プロピルメチレン基、、シクロプロピオニル基、ベンジルオキシ基、トリフルオロメチル基、アミノメチル基、ヒドロキシメチル基、メトキシ基、ホルミル基、メトキシカルボニル基、メタンスルホニル基、メチルスルフィニル基、エトキシ基、アセチル基、エチルスルホニル基、カルボエトキシ基、ジメチルアミノ基、ジエチルアミノ基、ジメチルアミノカルボニル基、ジエチルアミノカルボニル基、
N(CH3)2、NH(CH3)、-CH2CF3、-CH2CH2CF3、-CH2CH2F、-CH2CH2S(=O)2CH3、-CH2CH2CN、
ができる。薬学的に許容される酸付加塩の実例は無機酸塩を含み、上記無機酸は、例えば、塩酸、臭化水素酸、硝酸、炭酸、重炭酸、リン酸、リン酸一水素酸、リン酸二水素酸、硫酸、硫酸水素酸、ヨウ化水素酸、亜リン酸等を含む;及び有機酸であって、上記有機酸は、例えば酢酸、プロピオン酸、イソ酪酸、マレイン酸、プロパンジ酸、安息香酸、コハク酸、オクタンジ酸、フマル酸、乳酸、マンデル酸、フタル酸、ベンゼンスルホン酸、p−トルエンスルホン酸、クエン酸、酒石酸和メタンスルホン酸等類似する酸を含む;またアミノ基酸(例えばアルギニン等)の塩、及び例えばグルクロン酸等の有機酸の塩を含む(Berge et al.,"Pharmaceutical Salts",Journal of Pharmaceutical Science 66:1‐19(1977)参照し)。本発明のいくつかの特定の化合物は、アルカリ性及び酸性の官能基を含むため、塩基付加塩又は酸付加塩に変換可能である。
れる。
薬物又は薬理学活性剤について、用語「有効量」又は「治療上有効量」とは、非毒性であって所望の効果を達成するのに薬物又は薬剤の十分な量を指す。本発明の経口剤形につ
いては、組成物における活性物質の「有効量」とは該組成物における他の活性物質と併用する時に所望の効果を達成するのに必要な量を指す。有効量の確認は人によって変わり、受容体の年齢及び一般状態によって決まり、また具体的な活性物質によって決まる。個別のケースでは、適切な有効量は、当分野の技術者が日常的な実験に基づいて確認することができる。
用語「置換された」とは、特定の原子における任意の1つ又は多数の水素原子が置換基に置換されたことを指す。それは重水素及び水素の変体を含み、特定の原子の原子価状態が正常であり、置換された後の化合物が安定であればよい。置換基がケトン基(即ち=O)である時、2つの水素原子が置換されたことを意味する。ケトン置換はアリール基で発生しない。用語「任意に置換された」とは、置換されてもよく、置換されなくてもよいことを意味する。特に明記しない限り、置換基の種類及び数は、化学的に実現可能であれば任意であってよい。
アルキル基及びヘテロアルキル基原子団(通常はアルキリデン基、アルケニル基、ヘテロアルキルデン基、ヘテロアルケニル基、アルキニル基、シクロアルキル基、複素環アルキル基、シクロオレフィン基及びヘテロシクロオレフィン基と呼ばれる基を含む)の置換基は、通常「アルキル置換基」と呼ばれる。それらは下記基における1つ又は多数より選ばれるが、それらに制限されない:R’、‐OR’、=O、=NR’、=N‐OR’、‐NR’R”、‐SR’、ハロゲン、‐SiR’R”R”’、OC(O)R’、‐C(O)R’、‐CO2R’、‐CONR’R”、‐OC(O)NR’R”、‐NR”C(O)R’、NR’C(O)NR”R”’、‐NR”C(O)2R’、‐NR””‐C(NR’R
”R’”)=NR””、NR””C(NR’R”)=NR’”、‐S(O)R’、‐S(O)2R’、‐S(O)2NR’R”、NR”SO2R’、‐CN、-NO2、‐N3、‐CH(Ph)2及びフルオロ(C1‐C4)アルキル基。置換基の数は0〜(2m’+1)であり、そのうちm’はこの種の原子団における炭素原子の合計数である。R'、R”、R”'、R’’’’及びR’’’’’は、それぞれ独立に好ましくは水素、置換され又は置換されないヘテロアルキル基、置換され又は置換されないアリール基(例えば1〜3個ハロゲンに置換されたアリール基)、置換され又は置換されないアルキル基、アルコキシ基、チオアルコキシ基又はアラルキル基より選ばれる。本発明の化合物が1つ以上のR基を含む場合は、例えば、1つの以上のR'、R”、R”’、R’’’’及びR’’’’’基が存在するように、個々のR基は独立に選ばれる。R’及びR”が同じ窒素原子に付着している時、それらは該窒素原子と連結し5‐、6‐又は7‐員環を形成することができる。例えば、‐NR'R”は、1‐ピロリジニル基及び4‐モルホリノ基を含むがそれらに限定されない。上記置換基に関する説明に基づいて、当分野の技術者は、以下を理解できる。すなわち、用語「アルキル基」は、炭素原子が非水素基と結合することによって構成した基、例えば、ハロアルキル基(例えば‐CF3、‐CH2CF3)及びアシル基(例えば‐C(O)CH3、‐C(O)CF3、‐C(O)CH2OCH3等)を含む。
3の整数である。代替例として、アリール基又は複素アリール環の隣接する原子上の2つの置換基は、任意に一般式が-A(CH2)rB‐である置換基によって置換されてよい。ここにおいて、A及びBは、-CRR’‐、‐O‐、‐NR‐、‐S‐、‐S(O)‐、S(O)2‐、‐S(O)2NR’‐又は単結合より独立に選ばれ、rは1〜4の整数である。任意に、これより新しく形成された環における1つの単結合は二重結合に置き換えてよい。代替例として、アリール基又は複素アリール環の隣接する原子上の2つの置換基は、任意に一般式が-A(CH2)rB‐である置換基によって置換されてよい。ここにおいて、s及びdは、それぞれ独立に、0〜3の整数より選ばれ、Xは-O‐、‐NR’、‐S‐、‐S(O)‐、‐S(O)2‐又は-S(O)2NR’‐である。置換基R、R’、R”及びR”’は、それぞれ独立に好ましく、水素及び置換され又は置換されない(C1‐C6)アルキル基より選ばれる。
素原子、塩素原子、臭素原子又はヨウ素原子を表す。さらに、用語「ハロアルキル基」は、モノハロアルキル基及びポリハロアルキル基を含む。例えば、用語「ハロ(C1-C4)アルキル基」は、トリフルオロメチル基、2、2、2-トリフルオロエチル基、4-クロロブチル基、及び3-ブロモプロピル基等を含むが、これらに限定されない。
特に明記しない限り、用語「複素」とは、ヘテロ原子又はヘテロ原子団(即ちヘテロ原子が含まれる原子団)を表し、炭素(C)及び水素(H)以外の原子、及びそれらのヘテロ原子が含まれる原子団を含み、例えば酸素(O)、窒素(N)、硫黄(S)、ケイ素(Si)、ゲルマニウム(Ge)、アルミニウム(Al)、ボロン(B)、-O-、-S-、=O、=S、-C(=O)O-、-C(=O)-、-C(=S)-、-S(=O)、-S(=O)2-、及び任意に置換された-C(=O)N(H)-、-N(H)-、-C(=NH)-、-S(=O)2N(H)-又は-S(=O)N(H)-等を含む。
、6、7員単環又は二環、又は7、8、9又は10員二環複素環基の芳香環を意味し、それは炭素原子と1、2、3又は4個のN、O及びSより独立に選ばれるシクロヘテロ原子とを含む。窒素原子は、置換され又は置換されなくてよい(即ちN又はNR、そのうち、RはH又は本明細書で定義された他の置換基である)。窒素及び硫黄ヘテロ原子は、任意に酸化されてよい(即ちNO及びS(O)p)。注意すべきは、芳香族複素環上のS及びO原子の合計が1を超えない。架橋環も複素環の定義に含まれる。1つ又は多数の原子(即ち、C、O、N又はS)が2つの隣接しない炭素原子又は窒素原子を接続する時に架橋環を形成する。好ましい架橋環は、1つの炭素原子、2つの炭素原子、1つの窒素原子、2つの窒素原子及び1つの炭素‐窒素基を含むが、それらに制限されない。注意すべきは、1つの架橋は常に単環を三環に変換する。架橋環において、環上の置換基は、架橋に発生することもできる。
基、1,2,5-チアジアゾール基、1,3,4-チアジアゾール基、チアントレニル基、チアゾリル基、イソチアゾリルチエニル基、チエニル基、チエノオキサゾリル基、チエノチアゾリル基、チエノイミダゾリル基、トリアジニル基、1,2,3-トリアゾリル基、1,2,4-トリアゾリル基、1,2,5-トリアゾリル基、1,3,4-トリアゾリル基及びキサンテニル基を含むが、これらに限定されない。また、縮合環及びスピロ環化合物も含まれる。
基を含むが、これらに限定されない。前記芳香炭化水素基は、6-12員の芳香炭化水素基、例えば、フェニル基、ナフタレン基等を含むが、これらに限定されない。いくつかの実施例において、用語「アルキル基」は、直鎖状又は分枝鎖状の原子団又はそれらの組み合せを表し、完全飽和、一価又は多価不飽和であってよく、また二価及び多価原子団を含んでよい。飽和炭化水素原子団の実例は、メチル基、エチル基、n−プロピル基、イソプロピル基、n−ブチル基、tert−ブチル基、イソブチル基、sec−ブチル基、シクロヘキシル基、シクロヘキシルメチル基、シクロプロピルメチル基、及びn−ペンチル基、n−ヘキシル基、n−ヘプチル基、n−オクチル基等の原子団の同族体又は異性体を含むが、これらに限定されない。不飽和アルキル基は、1つの又は多数の二重結合又は三重結合を有し、その実例は、ビニル基、2-アリル基、ブテニル基、クロチル基、2-イソペンテニル基、2-(ブタジエニル)基、2、4-ペンタジエニル基、3-(1、4-ペンタジエニル)基、エチニル基、1-及び3-プロピニル基、3-ブチニル基、及び高級同族体及び異性体を含むが、これらに限定されない。
あってよく、それらは縮合又は共有結合している。用語「ヘテロアリール基」は、1−4個ヘテロ原子を含むアリール基(又は環)を表す。1つの典型的な実例において、ヘテロ原子はB、N、O及びSより選ばれ、窒素及び硫黄原子は任意に酸化され、窒素原子は任意に第四級アンモニウム化される。ヘテロアリール基は、ヘテロ原子を通して分子の他の部分に接続されてよい。アリール基又はヘテロアリール基の非限定的な実例は、フェニル基、1-ナフチル基、2-ナフチル基、4-ビフェニリル基、1-ピロリル基、2-ピロリル基、3-ピロリル基、3-ピラゾリル基、2-イミダゾリル基、4-イミダゾリル基、ピラジン基、2-オキサゾリル基、4-オキサゾリル基、2-フェニル-4-オキサゾリル基、5-オキサゾリル基、3-イソオキサゾリル基、4-イソオキサゾリル基、5-イソオキサゾリル基、2-チアゾリル基、4-チアゾリル基、5-チアゾリル基、2-フラニル基、3-フラニル基、2-チエニル基、3-チエニル基、2-ピリジル基、3-ピリジル基、4-ピリジル基、2-ピリミジニル基、4-ピリミジニル基、5-ベンゾチアゾリル基、プリニル基、2-ベンゾイミダゾリル基、5-インドリル基、1-イソキノリン基、5-イソキノリン基、2-キノキサリニル基、5-キノキサリニル基、3-キノリン基及び6-キノリン基を含む。上記任意のアリール基及びヘテロアリールシクロ基の置換基は、以下に示す許容可能な置換基より選ばれる。
の技術者の既知方法と同等の方法が含まれる。好ましい実施方法は、本発明の実施例を含むが、それらに限定されない。
Shimadzu SIL−20A自動サンプラ及び日本島津DAD:SPD−M20Aセンサが備えられている島津LC20ABシステムによって高速液体クロマトグラフィーを行い、Xtimate C18(規格が2.1*300である3・mフィラ)クロマトカラムを用いる。0−60AB_6分である方法は下記のように行われた:線形勾配を応用し、100%のA(Aは0.0675%のTFAの水溶液である)で溶出を開始し、且つ60%のB(Bは0.0625%のTFAのMeCN溶液である)で溶出を終了する。プロセス全体は4.2分であり、その後60%のBで1分間溶出する。クロマトカラムを更に0.8分間平衡させて100:0に達せ、総運行時間は6分である。10−80AB_6分である方法は下記のように行われた:線形勾配を応用し、90%のA(Aは0.0675%のTFAの水溶液である)で溶出を開始し、且つ80%のB(Bは0.0625%のTFAのアセトニトリル溶液である)で溶出を終了する。プロセス全体は4.2分間であり、その後80%のBで1分間溶出する。クロマトカラムを更に0.8分間平衡させて90:10に達せ、総運行時間は6分間である。クロマトカラムの温度は50℃で、流速は0.8mL/minである。ダイオードアレイセンサの走査波長は200−400nmである。
C)を行い、普通は紫外線ランプで照射して斑点を検出し、いくつかの状況にも他の方法で斑点を検出する。それらの状況において、ヨウ素(10gのシリカゲルに1gのヨウ素を加え且つ徹底に混合して得る)、バニリン(1gほどのバニリンを100mLの10%のH2SO4に溶解させて得る)、ニンヒドリン(Aldrichで購入される)又は特殊な顕色剤((NH4)6Mo7O24・4H2O、5gの(NH4)2Ce(IV)(NO3)6、450mLのH2O及び50mLの濃H2SO4を徹底に混合して得る)を用いて薄層板を展開し、化合物を検査する。Still,W.C.;Kahn,M.;and Mitra,M.Journal of Organic Chemistry,1978,43,2923−2925.に開示される技術に類似した方法を用いて、Silicycleの40−63μm(230−400メッシュ)のシリカゲルにフラッシュカラムクロマトグラフィーを行う。フラッシュカラムクロマトグラフィー又は薄層クロマトグラフィーに常用される溶媒は塩化メチレン/メタノール、酢酸エチル/メタノール及びヘキサン/酢酸エチルの混合物である。
はエタノール−二酸化炭素で化合物を溶出し、中のエタノール又はメチルアルコールに0.05%のNH3・H2O、0.05%のDEA又は0.1%のMEAが含まれ、総運行時間は20−30分間である。
H)−イル)ピぺリジン−1−イル)モルホリン−3−オン
ステップB:(Z)−2,2,2−トリフルオロ−N’−(4−メトキシフェニル)ブロモアセトヒドラジド(3.3g、11.1mmol)のトルエン溶液(35mL)に3−モルホリノー5,6−ジヒドロプテリジン−2(1H)−オン(2.43g、13.3mmol)とTEA(2.25g、22.2mmol)を加え、混合物を加熱して16時間還流させる。反応混合物を水(80mL)に入れ、EA(80mL*2)で抽出し、塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過して濃縮する。粗残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(PEからPE:PA=5:1−1:1まで)によって純化し、1−(4−メトキシフェニル)−7α−モルホリノ−3−(トリフルオロメチル)−3α,4,5,6−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−7(7αH)−オン(1.38g、30%)を得、黄色固体である。LCMS(ESI)M/Z:421.1(M+23)。
ステップC:1−(4−メトキシフェニル)−7α−モルホリノ−3−(トリフルオロメチル)−3α,4,5,6−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−7(7αH)−オン(1.38g、3.46mmol)のDCM(15mL)溶液にTFA(1.5mL)を加える。混合物を25℃で2時間撹拌した後水(50mL)に入れ、DCM(50mL*2)で抽出する。合併された有機相を塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮し、1−(4−メトキシフェニル)−3−(トリフルオロメチル)−5,6−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−7(4H)−オン(1.08g、粗生成物)を得、黄色固体である。LCMS(ESI)M/Z:312.2(M+1)。
ステップD:1−(4−メトキシフェニル)−3−(トリフルオロメチル)−5,6−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−7(4H)−オン(1.08g、3.47mmol)、4−ブロモピリジン塩酸塩(1.01g、5.2mmol)、Pd2(dba)3(318g、8.67mmol)、Xantphos(200mg、0.347mmol)及び炭酸セシウム(2.83g、8.67mmol)をトルエン(15mL)に加える。混合物を80℃まで加熱し、16時間を持続する。混合物を室温まで冷却し、濾過する。濾液を濃縮し、粗残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(PE:EA=10:1−1:1)によって純化し、1−(4−メトキシフェニル)−6−(ピリジン−4−イル)−3−(トリフルオロメチル)−5,6−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−7(4H)−オン(800mg、59%)を得、黄色固体である。LCMS(ESI)M/Z:389.1(M+1)。
ステップE:1−(4−メトキシフェニル)−6−(ピリジン−4−イル)−3−(トリフルオロメチル)−5,6−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−7(4H)−オン(800mg、2.06mmol)と二酸化白金(50mg)をAcOH(10mL)溶液に加え、50psi圧力のH2で、25℃で16時間撹拌する。混合物を濾過し、且つ濾液を濃縮し、1−(4−メトキシフェニル)−6−(ピリジン−4−イル)−3−(トリフルオロメチル)−5,6−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−7(4H)−オン(900mg、粗産物)を得、黄色油状物であり、直接次のステ
ップに用いる。LCMS(ESI)M/Z:395.2(M+1)。
ステップF:0℃で1−(4−メトキシフェニル)−6−(ピリジン−4−イル)−3−(トリフルオロメチル)−5,6−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−7(4H)−オン(900mgの粗生成物、2.06mmol)のAcOH(8mL)溶液に亜硝酸ナトリウム(711mg、10.3mmol、4mLの水)溶液を加える。混合物を25℃まで加熱して16時間撹拌する。混合物を水(30mL)に入れ、DCM(30mL*2)で抽出する。合併された有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮し、1−(4−メトキシフェニル)−6−(1−ニトロソピリジン−4−イル)−3−(トリフルオロメチル)−5,6−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−7(4H)−オン(900mg、粗産物)を得、黄色固体である。LCMS(ESI)M/Z:424.2(M+1)。
ステップG:1−(4−メトキシフェニル)−6−(1−ニトロソピリジン−4−イル)−3−(トリフルオロメチル)−5,6−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−7(4H)−オン(900mg粗生成物、2.06mmol)のAcOH(10mL)溶液に亜鉛末(670mg、10.3mmol)を加える。混合物を25℃で3時間撹拌した後濾過し、濾液を濃縮し、少量のAcOHを凍結乾燥して除去する。粗残留物6−(1−アミノピリジン−4−イル)−1−(4−メトキシフェニル)−3−(トリフルオロメチル)−5,6−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−7(4H)−オン(900mg粗生成物、2.06mmol)を直接次のステップに用いる。LCMS(ESI)M/Z:410.2(M+1)。
ステップH:2−(2−クロロエチル)酢酸(342mg、2.47mmol)のDMF(10mL)溶液にHATU(939mg、2.47mmol)、DIEA(532mg、4.12mmol)及び6−(1−アミノピリジン−4−イル)−1−(4−メトキシフェニル)−3−(トリフルオロメチル)−5,6−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジンー7(4H)−オン(900mg粗生成物、2.06mmol)を加える。混合物を25℃で16時間撹拌する。混合物を水(80mL)に入れ、EA(60mL*2)で抽出する。合併された有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮する。粗残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(PE:EA=1:1からEAまで)によって純化し、2−(2−クロロエチル)−N−(4−(1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−3−(トリフルオロメチル)−4,5−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−6(7H)−イル)ピぺリジン−1−イル)アセトアミド(900mg、82%)を得、黄色固体である。LCMS(ESI)M/Z:530.2(M+1)。
ステップI:0℃で、2−(2−クロロエチル)−N−(4−(1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−3−(トリフルオロメチル)−4,5−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジンー6(7H)−イル)ピぺリジン−1−イル)アセトアミド(900mg、1.7mmol)のDMF(10mL)溶液にNaH(74.8mg、1.87mmol)を加える。混合物を25℃で2時間撹拌した後水(80mL)に入れ、EA(80mL)で抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮する。粗残留物を調製型HPLC(蟻酸)で純化し、4−(4−(1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−3−(トリフルオロメチル)−4,5−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジンー6(7H)−イル)ピぺリジン−1−イル)モルホリン−3−オン(303mg、36%)を得、白色固体である。1HNMR(400MHz、DMSO−d6)δ7.45(m、2H)、7.02(m、2H)、4.24(m、1H)、3.97(s、2H)、3.82−3.78(m、5H)、3.60(t、J=6.4Hz、2H)、3.42−3.39(m、4H)、3.02−2.99(m、2H)、2.90−2.88(m、2H)、1.82−1.77(m、2H)、1.59−1.56(m、2H).LCMS(ESI)m/z:494.2(M+1)。
−4−イル)−3−(トリフルオロメチル)−5,6−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−7(4H)−オン
ステップB:0℃で、5−ブロモ−N−(4−(1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−3−(トリフルオロメチル)−4,5−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジンー6(7H)−イル)ピぺリジン−1−イル)ペンタンアミド(180mg、0.315mmol)のDMF(3mL)溶液にNaH(14mg、0.346mmol)を加える。混合物を25℃で3時間撹拌した後水(30mL)に入れ、EtOAc(30mL*2)で抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して濃縮する。粗残留物を調製型HPLC(蟻酸)によって純化し、1−(4−メトキシフェニル)−6−(2’−オキソ−[1,1’−ジピペリジン]−4−イル)−3−(トリフルオロメチル)−5,6−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−7(4H)−オン(32mg、20%)を得、白色固体である。1HNMR(400MHz、DMSO−d6)δ7.46−7.44(m、2H)、7.03−7.01(m、2H)、4.23−4.21(m、1H)、3.82(s、3H)、3.61−3.57(m、4H)、3.31−3.29(m、2H)、2.88−2.67(m、4H)、2.32−2.16(m、2H)、1.74−1.71(m、4H)、1.59−1.56(m、4H)。LCMS(ESI)m/z:492.2(M+1)。
ステップB:0℃で、4−クロロ−N−(4−(1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−3−(トリフルオロメチル)−4,5−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−6(7H)−イル)ピぺリジン−1−イル)ブチルアミド(180mg、0.351mmol)のDMF(3mL)溶液にNaH(15.4mg、0.385mmol)を加える。混合物を25℃で16時間撹拌した後水(30mL)に入れ、EA(30mL*2)で抽出し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥して濃縮する。粗残留物を調製型HPLC(蟻酸)によって純化し、1−(4−メトキシフェニル)−6−(1−(2−オキソピロリジノ−1−イル)−ピぺリジン−4−イル)−3−(トリフルオロメチル)−5,6−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−7(4H)−オン(39mg、23%)を得、白色固体である。1HNMR(400MHz、DMSO−d6)δ7.46−7.43(m、2H)、7.03−7.00(m、2H)、4.27−4.21(m、1H)、3.81(s、3H)、3.59(t、J=6.8Hz、2H)、3.36(t、J=6.8Hz、2H)、3.05−3.03(m、2H)、2.90−2.86(m、4H)、2.15−2.11(m、2H)、1.88−1.84(m、4H)、1.58−1.54(m、2H)。LCMS(ESI)m/z:478.2(M+1)。
ステップB:3,3−ジクロロピぺリジン−2−オン(31g、粗生成物)をモルフォリノ(300mL)に溶解した後、混合物を130℃まで加熱して一晩置く。溶媒を濃縮して除去した後、ジクロロメタンで洗浄する。固体を濾過し、有機相を濃縮してから、粗生成物をクロマトカラムによって純化し、3−モルホリノ−5,6−ジヒドロピリジン−2
(1H)−オン(23g)を得る。1HNMR(CDCl3、400MHz)δ=6.58−6.50(m、1H)、5.55(t、J=4.8Hz、1H)、3.85−3.79(m、4H)、3.32(td、J=6.8、3.2Hz、2H)、2.87(t、J=4.8Hz、4H)、2.35(td、J=6.8、4.8Hz、2H)。
ステップC:0℃で、(Z)−エチル−2−クロロ‐2−(2−(4−メトキシフェニル)ヒドラゾノ)蟻酸エチル(32g、0.126mol)のEtOAc(300mL)溶液に3−モルホリノ−5,6−ジヒドロピリジニルー2(1H)−オン(23g、0.126mol、EAに溶解する)及びトリエチルアミン(31g、0.315mol)を加える。反応混合物を室温まで加熱した後30分撹拌し、その後加熱して還流させて一晩置く。室温まで冷却した後、反応液を濾過し、固体を収集し、且つ水と酢酸エチルで洗浄し、次に真空で乾燥し、1−(4−メトキシフェニル)−7a−モルホリノ−7−オキソ−3a,4,5,6,7,7a−ヘキサヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(40g、粗生成物)を得る。LCMS(ESI)m/z:403(M+1)。
ステップD:0℃で、1−(4−メトキシフェニル)−7a−モルホリノ−7−オキソ−3a,4,5,6,7,7a−ヘキサヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(40g、粗生成物)のジクロロメタン(400mL)溶液に2,2,2−トリフルオロ酢酸(30mL)を徐々に加え、その後反応物を25℃で5時間撹拌する。混合物を飽和のNaHCO3水溶液と塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して濃縮し、1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチルを得、黄色固体である(20g、50%)。1HNMR(CDCl3、400MHz)δ7.50(d、J=9.2Hz、1H)、6.95(d、J=8.8Hz、1H)、5.69(brs、1H)、4.45(q、J=7.2Hz、2H)、3.85(s、3H)、3.66−3.61(m、2H)、3.20(t、J=6.8、2H)、1.43(t、J=6.8、3H)。
ステップE:1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(3.00g、9.52mmol)、4−ブロモピリジン塩酸塩(3.71mg、19.0mmol)、Pd2(dba)3(872mg、0.952mmol)、Xantphos(1.10g、1.90mmol)及び炭酸セシウム(15.5g、14.6mmol)をトルエン(150mL)溶液に12時間加熱して還流させる。室温まで冷却した後、混合物を濾過する。濾過ケーキをEA(50mL*3)で洗浄する。合併された有機相を濃縮して粗産物を得、それをシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって純化し(PE:EA=5:1〜PE:EA=1:4)、1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(ピリジニル−4−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(3.30mg、88.5%)を得、黄色固体である。LCMS(ESI)m/z:393.4(M+1)。
ステップF:PtO2(500mg)を1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(ピリジニル−4−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(3.30g、8.42mmol)のAcOH(150mL)溶液に加える。混合物を50psiのH2の圧力に室温で12時間撹拌する。混合物を濾過して濃縮し、1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(ピリジニル−4−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(4.60g、粗生成物)を得、黄色油状物である。LCMS(ESI)m/z:399.4(M+1)。
ステップG:亜硝酸ナトリウム(3.47g、50.3mmol)を10mLの水に溶解し、0℃で該水溶液を1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(ピリジニル−4−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボン酸メチル(4.00g、10.1mmol)のAcOH(80mL)溶液に加える。反応混合物を室温で3時間撹拌し、水(200mL)で希釈し、且つDCM(4
0mL*3)で抽出する。合併された有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥して濾過する。濾液を濃縮し、1−(4−メトキシフェニル)−6−1−ニトロソピペリジン−4−イル)−7−オキソ−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(4.50g、粗生成物)を得、白色固体である。LCMS(ESI)m/z:428.4(M+1)。
ステップH:亜鉛末(6.54g、0.100mmol)を1−(4−メトキシフェニル)−6−1−ニトロソピペリジン−4−イル)−7−オキソ−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(4.29g、10.0mmol)のAcOH(150mL)溶液に加える。反応混合物を室温で5時間撹拌する。混合物を濾過した後濾液を濃縮し、6−(1−アミノピぺリジン−4−イル)−1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(4.00g、粗生成物)を得、黄色固体である。LCMS(ESI)m/z:414.4(M+1)。
ステップI:6−(1−アミノピぺリジン−4−イル)−1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(2.00g、0.484mmol)、5−ブロモバレリルクロリド(1.16g、5.81mmol)及びDIPEA(2.5mL、14.5mmol)例えばDCM(20mL)に加え、混合物を室温で12時間撹拌する。混合物を水(40mL)に加えてDCM(20mL*3)で抽出する。合併された有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥して濾過する。濾液を濃縮した後6−(1−(5−ブロモバレルアミド)ピぺリジン−4−イル)−1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(3.00g、粗生成物)を得、黄色固体である。LCMS(ESI)m/z:576.2[M+1]。
ステップJ:氷浴で冷却する場合、NaH(138mg、3.44mmol)を徐々に6−(1−(5−ブロモバレルアミド)ピぺリジン−4−イル)−1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(1.80g、3.13mmol)のTHF(50mL)溶液に加える。反応混合物を室温で12時間撹拌した後、真空で溶媒を除去する。残留物を水(100mL)に加え、且つDCM(40mL*4)で抽出する。合併された有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥して濾過する。濾液を濃縮し、粗産物を得、シリカゲルカラムクロマトグラフィーによって純化し(DCM:エタノール=100:1〜10:1)、1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(2’−オキソ−[1,1’−ジピペリジン]−4−イル)−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(1.00g、64%)を得、黄色固体である。LCMS(ESI)m/z:496.2[M+1]。
ステップK:1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(2’−オキソ−[1,1’−ジピペリジン]−4−イル)−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(500mg、1.01mmol)をアンモニアガスがあるエチレングリコール(20mL)に加える。混合物をタンクに80℃で3時間撹拌する。冷却した後、水(100mL)を混合物に加えて濾過する。固体を水(5mL*3)で洗浄して乾燥し、1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(2’−オキソ−[1,1’−ジピペリジン]−4−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボキサミド(370mg、79%)を得、黄色固体である。1HNMR(DMSO−d6、400MHz)δ7.66(s、1H)、7.46(d、J=8.8Hz、2H)、7.39(s、1H)、7.01(d、J=9.2Hz、2H)、4.26−4.20(m、1H)、3.82(s、3H)、3.55−3.52(m、3H)、3.31−3.30(m、3H)、3.00−2.92(m、4H)、2.20−2.17(m、2H)、1.75−1.72(m、2H)、1.60−1.56(m、4H)。LCMS(ESI)m/z:467.2[M+1]。
ピペリジン]−4−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボニトリル
ステップB:0℃で、NaH(100mg、4.16mmol)を6−(1−(2−(ク
ロロメトキシ)アセトアミド)ピぺリジン−4−イル)−1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(0.70g、1.31mmol)のTHF(20mL)溶液に加える。反応混合物を室温で12時間撹拌し、溶媒を濃縮して除去する。残留物を水(100mL)で希釈し、DCM(40mL*4)で抽出する。合併された有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥して濾過する。濾液を濃縮し、粗産物を得、それをシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって純化し(DCM:エタノール=100:1〜50:1)、1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(4.00g、粗生成物)を得、黄色固体である。LCMS(ESI)m/z:498(M+1)。
ステップC:1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(500mg、1.01mmol)をアンモニアガスがあるエチレングリコール(20mL)に加える。混合物をタンクに80℃で3時間撹拌する。冷却した後、水(100mL)を混合物に加え、且つ濾過する。残留物を水(5mL*3)で洗浄して乾燥し、1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボキサミド(370mg、79%)を得、黄色固体である。1HNMR(DMSO−d6、400MHz)δ7.71(s、1H)、7.46(d、J=8.8Hz、2H)、7.39(s、1H)、7.01(d、J=9.2Hz、2H)、4.26−4.20(m、1H)、3.82(s、3H)、3.55−3.52(m、3H)、3.31−3.30(m、3H)、3.00−2.92(m、4H)、1.85−1.79(m、2H)、1.58(d、J=10.4Hz、2H)。
濃縮する。粗残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(EtOAc=1:1〜1:3PE)によって純化し、3−ヨードピロリジノ−2−オン(1.60g、16%)を得、浅黄色固体である。
ステップB:室温で、1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(ピリジニル−4−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボン酸メチル(598mg、1.5mmol)のDMF(5mL)溶液にNEt3(304mg、3.0mmol)を加え、次に3−ヨードピロリジノ−2−オン(317mg、1.5mmol)を加える。混合物を室温で16時間撹拌する。反応混合物を濃縮し、粗生成物を得、シリカゲルカラムクロマトグラフィーによって純化し(DCM:エタノール=50:1〜20:1)、1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(1−(2−オキソピロリジン−3−イル)ピぺリジン−4−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(680mg、94%)を得、浅黄色固体である。LCMS(ESI)m/z:479(M+1)。
ステップC:タンクに1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(1−(2−オキソピロリジン−3−イル)ピぺリジン−4−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(674mg、1.4mmol)及びアンモニアガスがあるエチレングリコール(10mL)溶液を加え、混合物を120℃で16時間を撹拌する。混合物を室温まで冷却し、水(50mL)で希釈する。混合液をEtOAc(50mL*3)で抽出する。合併された有機相を乾燥して濃縮する。粗残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって純化し(PE:酢酸エチル=1:3〜1:1)、1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(1−(2−オキソピロリジン−3−イル)ピぺリジン−4−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボキサミド(400mg、44%)を得、灰白色固体である。タイトルの化合物はキラル化合物であり、異性体は調製型SFCと調製型HPLCによって更なる純化され、それぞれ18.5mgと23.6mgである二つの留分を得る。留分1:1HNMR(400MHz、DMSO−d6)δ8.50(brs、2H)、7.54(d、J=8.0Hz、2H)、7.34(d、J=8.0Hz、2H)、7.28(d、J=8.0Hz、2H)、7.01(d、J=8.0Hz、2H)、4.06(t、J=6.0Hz、2H)、3.81(s、3H)、3.62−3.59(m、2H)、3.23(t、J=6.0Hz、2H)、2.42−2.38(m、2H)、1.88−1.84(m、4H)。LCMS(ESI)m/z:484.2(M+1)。留分2:1HNMR(400MHz、DMSO−d6)δ8.50(brs、2H)、7.54(d、J=8.0Hz、2H)、7.34(d、J=8.0Hz、2H)、7.28(d、J=8.0Hz、2H)、7.01(d、J=8.0Hz、2H)、4.06(t、J=6.0Hz、2H)、3.81(s、3H)、3.62−3.59(m、2H)、3.23(t、J=6.0Hz、2H)、2.42−2.38(m、2H)、1.88−1.84(m、4H)。MS(ESI)m/z:484.2(M+1)。
ノ)酢酸メチルを置換する。タイトルの化合物は白色固体である。1HNMR(400MHz、DMSO−d6)δ7.74−7.72(m、3H)、7.52−7.50(m、2H)、7.46(s、1H)、4.27(t、J=12.0Hz、1H)、3.98(s、2H)、3.82−3.80(m、2H)、3.57(t、J=6.4Hz、2H)、3.43−3.40(m、4H)、3.01−2.98(m、4H)、1.82−1.77(m、2H)、1.59(d、J=12.0Hz、2H)。
mL)溶液を5分以内に反応液に加え、その後0℃で10分撹拌し続ける。反応混合物に過量の飽和亜硫酸ナトリウム水溶液を加え、0℃で0.5時間撹拌する。反応混合物をDCM(200mL*2)で抽出する。合併された有機相を乾燥して濾過し、25℃で濃縮し、ブロモ(ニトロ)メタン(28.00g、粗生成物)を得、黄色油状物であり、直接次のステップに用いる。
ステップB:1−ベンジル−1H−ピロリル−2,5−ジオン(15.08g、81mmol)のCH3CN(810mL)溶液にブロモ(ニトロ)メタン(11.33g、81mmol)を加え、次にK2CO3(11.19g、81mmol)を加える。混合物を25℃で4時間撹拌してから、いくつかの回数に分けて各4時間にブロモ(ニトロメチル)メタン(1.13g、8mmol)*5回を加え、反応の温度を25℃に制御する。完成した後、25℃で4時間撹拌する。混合物を真空で濃縮して粗生成物を得る。粗産物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって純化し(EA:PE=1:10〜1:5)、3−ベンジル−6−ニトロ−3−アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン−2,4−ジオン(8.00g、粗生成物)を得、黄色固体であり、直接次のステップに用いる。LCMS(ESI)m/z:247(M+1)。
ステップC:−20℃で、3−ベンジル−6−ニトロ−3−アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン−2,4−ジオン(8.12g、33mmol)のTHF(100mL)溶液に水素化ホウ素ナトリウム(3.74g、99mmol)を加えた後、−20℃で0.5時間撹拌する。次に−20℃で徐々に三弗化硼素エーテラート(14.05g、99mmol)溶液を加え、0.5時間に完成した後、−20℃で1時間撹拌し続ける。混合物を25℃まで加熱して16時間撹拌する。反応混合物に徐々にMeOH(25mL)を加え、その後25℃で0.5時間撹拌する。混合物を減圧して濃縮し、粗生成物を得る。粗生成物を水(50mL)に加え、且つEA(50mL*3)で抽出する。合併された有機相を乾燥して濾過し、濃縮して粗生成物を得る。粗生成物をMeOH(80mL)に加え、80℃で2時間撹拌した後濃縮する。粗残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって純化し(EA:PE=1:50〜1:30)、3−ベンジル−6−ニトロ−3−アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン(4.70g、65%)を得、無色油状物である。LCMS(ESI)m/z:219(M+1)。
ステップD:25℃で、3−ベンジル−6−ニトロ−3−アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン(4.80g、22mmol)のイソプロピルアルコール溶液(220mL)に2Mの塩酸水溶液(110mL、220mmol)を加え、次に25℃で亜鉛末(28.78g、440mmol)を加える。混合物を25℃で2時間撹拌した後、炭酸水素ナトリウム(18.48g、220mmol)を反応混合物に加え、且つ25℃で0.5時間撹拌し続ける。混合物を珪藻土に濾過し、濾液をDCM(200mL*3)で抽出する。合併された有機相を乾燥して濾過し、且つ濃縮する。粗残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって純化し(DCM:エタノール=30:1〜10:1)、3−ベンジル−3−アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン−6−アミン(3.25g、78%)を得、黄色固体である。LCMS(ESI)m/z:189(M+1)。
ステップE:0℃で、3−ベンジル−3−アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン−6−アミン(3.20g、17mmol)のTHF(150mL)溶液にNEt3(3.78g、37mmol)を加え、次に5−ブロモバレリルクロリド(4.07g、20mmol)が溶解されたTHF(20mL)溶液を加え、その後0℃で2時間撹拌する。混合物を飽和のNaHCO3水溶液(150mL)に入れ、EtOAc(150mL*3)で抽出する。合併された有機相を乾燥し、濾過して濃縮する。得る粗産物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって純化し(DCM:エタノール=50:1〜30:1)、中間体粗生成物を得る。粗生成物をTHF(130mL)溶液に溶解し、0℃でいくつかの回数に分けてカリウムtert−ブトキシド(1.90g、17mmol)を加え、その後0℃で2時間撹拌し続ける。混合物を飽和のNH4Cl溶液(100mL)に入れ、EtOAc(100mL*3)で抽出する。合併された有機相を乾燥し、濾過して濃縮する。粗残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって純化し(DCM:エタノール=5
0:1〜30:1)、1−(3−ベンジル−3−アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン−6−イル)ピぺリジン−2−オン(2.80g、79%)を得、白色固体である。LCMS(ESI)m/z:271(M+1)。
ステップF:25℃で、1−(3−ベンジル−3−アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン−6−イル)ピぺリジン−2−オン(2.03g、7.5mmol)のCHCl3(24mL)溶液に五塩化リン(6.25g、30.0mmol)を加える。混合物を85℃まで加熱して16時間撹拌する。反応液を0℃まで冷却した後、混合物を氷水(25mL)に入れてCHCl3(25mL*2)で抽出する。合併された有機相を乾燥し、濾過して濃縮する。1−(3−ベンジル−3−アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン−6−イル)−3,3−ジクロロピぺリジン−2−オン(2.60g、粗生成物)を得、暗褐色固体である。該粗生成物を直接次のステップに用いる。LCMS(ESI)m/z:339(M+1)。
ステップG:1−(3−ベンジル−3−アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン−6−イル)−3,3−ジクロロピぺリジン−2−オン(2.54g、7.5mmol)をモルフォリノ(35mL)に溶解し、130℃で加熱して16時間撹拌する。混合物を濃縮し、得る粗生成物を水(20mL)に溶解し、且つEtOAc(20mL*3)で抽出する。合併された有機相を乾燥し、濾過して濃縮する。粗残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって純化し(DCM:エタノール=40:1)、1−(3−ベンジル−3−アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン−6−イル)−3−モルホリノ−5,6−ジヒドロピリジン−2(1H)−オン(1.70g、粗産物)を得、褐色油状物である。LCMS(ESI)m/z:271(M+1)。
ステップH:4−メトキシアニリン(19.71g、160mmol)のEtOH(40mL)溶液にHCl溶液(40mL、12M)を加え、次に−5℃で徐々に60mLの亜硝酸ナトリウム(12.14g、176mmol)水溶液を加え、20分を掛かる。反応物を0℃で1時間撹拌した後、順序によって2−クロロ‐3−オキソ酪酸エチル(26.34g、160mmol)、EtOH/H2O(400mL、9:1)及び酢酸ナトリウム(20.99256mmol)を加えた後、0℃で0.5時間撹拌し、次に25℃まで加熱して2時間撹拌する。濾過して固体を収集し、H2O(50mL*3)で洗浄し、乾燥して、(Z)−エチル−2−クロロ‐2−(2−(4−(メトキシフェニル)ヒドラゾノ)酢酸メチル(15g、36%)を得、緑黄色固体である。1HNMR(400MHz、CDCl3)δ8.29(brs、1H)、7.17(d、J=8.8Hz、2H)、6.89(d、J=8.8Hz、2H)、4.38(q、J=6.4Hz、2H)、3.80(s、3H)、1.40(t、J=6.4Hz、3H)。
ステップI:1−(3−ベンジル−3−アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン−6−イル)−3−モルホリノ−5,6−ジヒドロピリジン−2(1H)−オンと(Z)−エチル−2−クロロ‐2−(2−(4−メトキシフェニル)ヒドラゾノ)酢酸メチルをEtOAc(40mL)に溶解し、混合物にNEt3(1.26g、12.5mmol)に加えた後85℃まで加熱して16時間撹拌する。混合物を25℃まで冷却し、水(30mL)に入れ、EtOAc(30mL*3)で抽出する。合併された有機相を飽和NaHCO3溶液で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮して、中間体(3.00g、生成物)を得、黄色固体である。MS(ESI)M/Z:574(M+1)。該中間体をDCM(25mL)溶液に溶解し、TFA(2.5mL)に加え、且つ25℃で16時間撹拌する。NaHCO3(10g、0.12mmol)を25℃で反応混合物に加え、且つ25℃で1時間撹拌する。混合物を濾過して濃縮する。粗残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって純化し(DCM:エタノール=50:1〜20:1)、6−(3−ベンジル−3−アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン−6−イル)−1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(800mg、粗産物)を得、褐色油状物であり、それを直接次のステップに用いる。LCMS(ESI)m/z:487(M+1)。
ステップJ:6−(3−ベンジル−3−アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン−6−イル
)−1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(779mg、1.6mmol)と10%のPd/C(500mg)のMeOH(20mL)溶液を50psiのH2圧力において、25℃で16時間撹拌する。混合物を濾過し、濾液を濃縮し、6−(3−アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン−6−イル)−1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(700mg、粗産物)を得、黄色固体であり、それを直接次のステップに用いる。LCMS(ESI)m/z:397(M+1)。
ステップK:0℃で、6−(3−アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン−6−イル)−1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(674mg、1.7mmol)のAcOH(10mL)溶液に2mLの亜硝酸ナトリウム(704mg、10.2mmol)水溶液を加えた後、0℃で1時間撹拌する。混合物を水(30mL)に入れてEtOAc(30mL*2)で抽出する。合併された有機相を飽和NaHCO3溶液で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥し、濾過して濃縮する。得る中間体(520mg、71%)を得、黄色固体である:粗残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって純化する(PE=1:2〜1:1、EA)。LCMS(ESI)m/z:426(M+1)。
ステップL:中間体(510mg、1.2mmol)にMeOH(20mL)溶液に塩化アンモニウム(386mg、7.2mmol)を加え、次に0℃でいくつかの回数に分けて亜鉛末(471mg、7.2mmol)を加え、且つ0℃で1時間撹拌する。混合物を濾過し、濾液を濃縮する。粗残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって純化し(DCM:エタノール=30:1〜10:1)、6−(3−アミノ−3−アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン−6−イル)−1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(370mg、74%)を得、白色固体である。LCMS(ESI)m/z:412(M+1)。
ステップM:0℃で、6−(3−アミノ−3−アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン−6−イル)−1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(206mg、0.5mmol)のDCM(5mL)溶液にNEt3(111mg、1.1mmol)を加え、次に5−ブロモバレリルクロリド(120mg、0.6mmol)のDCM(1mL)溶液を加える。混合物を0℃で1時間撹拌した後飽和NaHCO3溶液(10mL)に入れ、DCM(10mL*2)で抽出する。合併された有機相を乾燥し、濾過して濃縮する。粗残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって純化し(DCM:EA=1:1〜1:3)、中間体(235mg、81%)を得、白色固体である。LCMS(ESI)m/z:574(M+1)。
ステップN:0℃で、中間体(230mg、0.4mmol)のDMF溶液(5ml)にNaH(21mg、0.5mmol)を加えた後、0℃で2時間撹拌する。混合物を飽和NH4Cl水溶液(20mL)に入れ、EtOAc(20mL*2)で抽出する。合併された有機相を乾燥し、濾過して濃縮する。粗残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって純化し(DCM:EA=1:1〜1:2)、1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(3−(2−オキソモルホリノ−1−イル)−3−アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン−6−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(110mg、55%)を得、白色固体である。LCMS(ESI)m/z:494(M+1)。
ステップO:タンクに1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(3−(2−オキソモルホリノ−1−イル)−3−アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン−6−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(109mg、0.2mmol)をアンモニアガスがあるエチレングリコール溶液(6mL)に入れ、混合物を80℃で16時間撹拌する。室温まで冷却した後、混合物をH2
O(30mL)に入れ、EA(25mL*3)で抽出する。合併された有機相を乾燥し、濾過して濃縮する。粗残留物を調製型HPLC(HCOOH)によって純化し、タイトルの化合物(45mg、44%)を得、白色固体である。1HNMR(400MHz、DMSO−d6)δ7.65(brs、1H)、7.45(d、J=8.8Hz、2H)、7.38(brs、1H)、7.01(d、J=8.8Hz、2H)、3.82(s、3H)、3.61−3.53(m、4H)、3.28−3.26(m、2H)、3.03−2.98(m、4H)、2.74−2.72(m、1H)、2.19−2.16(m、2H)、1.74−1.68(m、4H)、1.60−1.57(m、2H)。LCMS(ESI)m/z:465(M+1)。
ステップB:6−(3−(2−(2−クロロエチル)アセトアミド)−3−アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン−6−イル)−1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(80mg、0.15mmol)をDMF(5mL)溶液に溶解し、0℃で溶液にNaH(6mg、0.15mmol)を加え、その後0℃で2時間撹拌し続ける。混合物を飽和NH4Cl溶液(20mL)に注ぎ、EtOAc(20mL*2)で抽出する。合併された有機相を乾燥し、濾過して濃縮する。得る粗生成物1−(4−メトキシフェニル)−7
−オキソ−6−(3−(3−オキソモルホリノ)−3−アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン−6−イル)−1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチルは黄色油状物であり、直接次のステップに用いる。LCMS(ESI)m/z:496(M+1)。
ステップC:タンクに、1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(3−(3−オキソモルホリノ3−アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン−6−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(15mg、0.03mmol)をアンモニアガスがあるエチレングリコール溶液(5mL)に加え、混合物を80℃で16時間撹拌する。混合物をH2O(30mL)に注ぎ、EA(230ml*3)で抽出する。合併された有機相を乾燥し、濾過して濃縮する。粗残留物を調製型HPLC(HCOOH)によって純化し、1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(3−(3−オキソモルホリノ)3−アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン−6−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボキサミド(6mg、42%)を得、白色固体である。1HNMR(400MHz、DMSO−d6)δ7.65(brs、1H)、7.45(d、J=8.8Hz、2H)、7.38(brs、1H)、7.01(d、J=8.8Hz、2H)、3.97(s、2H)、3.82(s、3H)、3.81−3.78(m、2H)、3.61−3.57(m、2H)、3.55−3.52(m、2H)、3.36−3.32(m、2H)、3.11−3.08(m、2H)、3.01−2.97(m、2H)、2.76−2.74(m、1H)、1.79−1.76(m、2H)。LCMS(ESI)m/z:465(M+1)。
ステップB:6−アミノ−1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボン酸メチル(3.3g、0.01mol)のDMF(35mL)に2,2−ジ(2−ブロモエチル)−1,3−ジオキソラン(2.86g、0.01mol)及びK2CO3(1.38g、0.01mol)を加える。混合物を100℃まで加熱して16時間持続する。18℃まで冷却した後、混合物を水(100mL)に注ぎ、EtOAc(100mL*2)で抽出する。有機層を塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して濃縮する。粗残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって純化し(PE:EA=1:1)、1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(1,4−ジオキサン−8−アザスピロ[4,5]デカン−8−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン
−3−カルボン酸メチル(0.9g、20%)を得、白色固体である。
ステップC:1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(1,4−ジオキサン−8−アザスピロ[4,5]デカン−8−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボン酸メチル(700mg、1.54mmol)をアセトン(10mL)と水(1mL)との混合溶液に加え、その後TsOH・H2O(132mg、0.77mmol)を加える。混合物を50℃まで加熱して20時間撹拌する。反応液を冷却した後飽和NaHCO3溶液に注ぎ、EtOAc(30mL*2)で抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して濃縮する。粗残留物を薄層クロマトグラフィー(PE:EA=1:2)によって純化し、1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(4−オキソピぺリジン−1−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボン酸メチル(250mg、39%)を得、白色固体である。
ステップD:1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(4−オキソピぺリジン−1−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボン酸メチル(350mg、0.849mmol)のエタノール(6mL)溶液に酢酸アンモニウム(77mg、1.27mmol)及びNaBH3CN(107mg、1.69mmol)を加える。混合物を20℃で15時間撹拌する。混合物を水(50mL)に入れ、DCM(50mL)で抽出して分液し、水層を収集してから、冷凍乾燥により溶媒を除去し、6−(4−アミノピペリジン−1−イル)−1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボン酸メチル(300mg、粗生成物)を得、白色固体である。LCMS(ESI)m/z:414(M+1)。
ステップE:6−(4−アミノピペリジン−1−イル)−1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボン酸メチル(300mg、0.726mmol、粗生成物)をDMF(5mL)に溶解し、溶液にDIPEA(112mg、0.871mmol)及び5−ブロモバレリルクロリド(158mg、0.799mmol)を加える。混合物を20℃で16時間撹拌する。混合物をNH4Cl水溶液に注ぎ、EtOAc(300mL*2)で抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して濃縮する。粗残留物をTLC(EA)で純化し、6−(4−(5−ブロモバレルアミド)ピぺリジン−1−イル)−1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボン酸メチル(200mg、48%)を得、黄色固体である。LCMS(ESI)m/z:576(M+1)、578(M+3)。
ステップF:0℃で、6−(4−(5−ブロモバレルアミド)ピぺリジン−1−イル)−1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボン酸メチル(200mg、0.347mmol)のDMF(3mL)溶液にNaH(14mg、0.347mmol)を加え、次に反応物を20℃で16時間撹拌する。混合物をNH4Cl水溶液(30mL)に注ぎ、EA(30mL*2)で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥し、且つ粗残留物を濃縮して抽出した後、TLCで純化し(EA:エタノール=30:1)、1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(2−オキソ−[1,4’−ビピペリジン]−1’−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボン酸メチル(120mg、69%)を得、白色固体である。LCMS(ESI)m/z:596(M+1)。
ステップG:タンクに、1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(2−オキソ−[1,4’−ビピペリジン]−1’−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボン酸メチル(150mg、0.303mmol)をアンモニアガスがあるエチレングリコール溶液(8mL)に加える。混合物を80℃まで加熱して16時間持続する。混合物を水(30mL)に入れ、DCM(30mL*2)で抽出し、塩水で有機相を洗浄する。有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥して濃縮
する。粗残留物を調製型HPLC(塩酸)によって純化し、1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(2−オキソ−[1,4’−ビピペリジン]−1’−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボキサミド(10mg、7%)を得、白色固体である。1HNMR(400MHz、DMSO−d6)δ7.67(brs、1H)、7.46(dd、J=6.8Hz、2.0Hz、2H)、7.40(brs、1H)、7.31(dd、J=6.8Hz、2.0Hz、2H)、4.25(s、1H)、3.83(s、3H)、3.76−3.72(m、2H)、3.70−3.65(m、2H)、3.16−3.13(m、2H)、3.09−2.98(m、4H)、2.22(t、J=6.0Hz、2H)、1.67−1.63(m、6H)、1.50−1.47(m、2H)。LCMS(ESI)m/z:567(M+1)。
ステップB:0℃で、4−(3−(メトキシカルボニル)−1−(4−メトキシフェニル)−1H−ピラゾール−5−ホルミルアミノ)ピぺリジン−1−カルボン酸tert-ブチル(1g、2.18mmol)のDMF(10mL)溶液にNaH(0.131g、3.27mmol)を加えた後、アリルホスゲン(0.524g、4.36mmol)を加える。混合物を20℃で16時間撹拌する。混合物を水(50mL)に入れ、EtOAc(50mL*2)で抽出し、塩水で洗浄して濃縮する。粗残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(EA=8:1〜3:1PE)によって純化し、4−(N−((アリルオキシ)カルボニル)−3−(メトキシカルボニル)−1−(4−メトキシフェニル)−1H−
ピラゾール−5−ホルミルアミノ)ピぺリジン−1−カルボン酸tert−ブチル(700mg、59%)を得、無色液体である。LCMS(ESI)m/z:543(M+1)。
ステップC:4MのHCl/酢酸エチル(15mL)溶液に4−(N−((アリルオキシ)カルボニル)−3−(メトキシカルボニル)−1−(4−メトキシフェニル)−1H−ピラゾール−5−ホルミルアミノ)ピぺリジン−1−カルボン酸tert−ブチル(770mg、1.42mmol)を加える。反応液を25℃で3時間撹拌する。混合物を濃縮し、メチル5−(((アリルオキシ)カルボニル)(ペリジン−4−イル)アミノカルボニル)−1−(4−メトキシフェニル)−1H−ピラゾール−3−カルボン酸エチル(600mg、95%)を得、白色固体である。
ステップD:0℃で、5−(((アリルオキシ)カルボニル)(ピペリジン−4−イル)アミノカルボニル)−1−(4−メトキシフェニル)−1H−ピラゾール−3−カルボン酸エチル(100mg、0.226mmol)のAcOH(4mL)溶液に2mLの亜硝酸ナトリウム(78mg、1.13mmol)水溶液を加える。混合物を25℃で3時間撹拌した後水(10mL)に注ぎ、EA(20mL*2)で抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して濃縮する。メチル5−(((アリルオキシ)カルボニル)(1−ニトロソピペリジン−4−イル)アミノカルボニル)−1−(4−メトキシフェニル)−1H−ピラゾール−3−カルボン酸エチル(90mg、粗産物)を得、黄色固体である。LCMS(ESI)m/z:472(M+1)。
ステップE:メチル5−(((アリルオキシ)カルボニル)(1−ニトロソピペリジン−4−イル)アミノカルボニル)−1−(4−メトキシフェニル)−1H−ピラゾール−3−カルボン酸エチル(450mg、0.849mmol)のAcOH(6mL)溶液に亜鉛末(276mg、4.24mmol)を加える。混合物を25℃で3時間撹拌した後水(20mL)に注ぎ、EtOAc(30mL*2)で抽出し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥して濃縮する。少量のAcOHを冷凍乾燥によって除去し、メチル5−(((アリルオキシ)カルボニル)(1−アミノピペリジン−4−イル)アミノカルボニル)−1−(4−メトキシフェニル)−1H−ピラゾール−3−カルボン酸エチル(400mg、91%)を得、白色固体である。LCMS(ESI)m/z:458(M+1)。
ステップF:2−(2−クロロエトキシ)酢酸(181mg、1.31mmol)のDCM(5mL)溶液にHATU(399mg、1.05mmol)及びDIEA(225mg、1.75mmol)を加える。混合物を30分撹拌した後メチル5−(((アリルオキシ)カルボニル)(1−アミノピペリジン−4−イル)アミノカルボニル)−1−(4−メトキシフェニル)−1H−ピラゾール−3−カルボン酸エチル(400mg、0.875mmol)を加える。反応混合物を25℃で16時間撹拌する。混合物を水(20mL)に注ぎ、DCM(30mL*2)で抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して濃縮する。粗残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって純化し(PE:EA=5:1〜1:1)、メチル5−(((アリルオキシ)カルボニル)(1−(2−(2−クロロエトキシ)アセトアミド)ピぺリジン−4−イル)アミノカルボニル)−1−(4−メトキシフェニル)−1H−ピラゾール−3−カルボン酸エチル(400mg、79%)を得、黄色固体である。LCMS(ESI)m/z:578(M+1)。
ステップG:0℃で、メチル5−(((アリルオキシ)カルボニル)(1−(2−(2−クロロエトキシ)アセトアミド)ピぺリジン−4−イル)アミノカルボニル)−1−(4−メトキシフェニル)−1H−ピラゾール−3−カルボン酸エチル(350mg、0.606mmol)のDMF(5mL)溶液にNaH(29mg、0.727mmol)を加える。混合物を25℃で1時間撹拌した後水(20mL)に注ぎ、DCM(30mL*2)で抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して濃縮し、メチル5−(((アリルオキシ)カルボニル)(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)アミノカルボニル)−1−(4−メトキシフェニル)−1H−ピラゾール−3−カルボン酸エチル(300mg、91%)を得、白色固体である。LCMS(ESI)m/z:542(M+1)。
ステップH:メチル5−(((アリルオキシ)カルボニル)(1−(3−オキソモルホリ
ノ)ピぺリジン−4−イル)アミノカルボニル)−1−(4−メトキシフェニル))−1H−ピラゾール−3−カルボン酸エチル(360mg、0.664mmol)のDCM(4mL)溶液にテトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(76mg、0.066mmol)とモルフォリノ(200μL)を加える。混合物を25℃で16時間撹拌した後水(20mL)に注ぎ、DCM(30mL*2)で抽出する。合併された有機相を無水Na2SO4で乾燥して濃縮する。粗残留物をTLC(EA)で純化し、メチル1−(4−メトキシフェニル)−5−((1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)アミノホルミル)−1H−ピラゾール−3−カルボン酸エチル(200mg、65%)を得、白色固体である。LCMS(ESI)m/z:458(M+1)。
ステップI:タンクに、アンモニアガスがあるエチレングリコール溶液(5mL)にメチル1−(4−メトキシフェニル)−5−((1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)アミノホルミル)−1H−ピラゾール−3−カルボン酸エチル(200mg、0.452mmol)を加え、混合物を80℃で16時間撹拌する。混合物を水(50mL)に入れ、DCM(50mL*3)で抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して濃縮する。粗残留物を調製型HPLC(HCOOH)によって純化し、1−(4−メトキシフェニル)−N5−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−1H−ピラゾール−3,5−ジカルボキサミド(42mg、21%)を得、白色固体である。1HNMR(400MHz、DMSO−d6)δ8.56(d、J=8.0Hz、1H)、7.72(s、1H)、7.39−7.35(m、3H)、7.20(s、1H)、7.02(dd、J=7.2、2.0Hz、2H)、3.96(s、2H)、3.81−3.78(m、5H)、3.59−3.56(m、1H)、3.41−3.34(m、4H)、2.98−2.96(m、2H)、1.78−1.75(m、2H)、1.57−1.52(m、2H)。
ステップB:エチル1−(4−メトキシフェニル)−5−(エチル(1−(3−オキソモ
ルホリノ)ピぺリジン−4−イル)アミノホルミル)−1H−ピラゾール−3−カルボン酸エチル(100mg、0.212mmol)をアンモニアガスがあるエチレングリコール(5mL)溶液に加える。混合物を100mLの高圧釜に注ぎ、80℃で15時間撹拌する。反応が完成した後、水(10mL)を加え、EtOAc(20mL*3)で抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して濃縮する。粗残留物を調製型HPLC(HCOOH)によって純化し、タイトル化合物を得、白色固体である。1HNMR(400MHz、DMSO−d6)δ7.44(d、J=5.2Hz、2H)、7.28(br.s.、1H)、7.06(d、J=5.2Hz、2H)、6.90(s、1H)、3.95(s、2H)、3.83(s3H)、3.80(t、J=4.8Hz、3H)、3.39(t、J=4.8Hz、3H)、2.96(brs、4H)、2.74(s、3H)、1.76(qd、J=12.4、4.0Hz、2H)、1.18−1.64(m、2H)。LCMS(ESI)m/z:457.2(M+1)。
ステップB:N5−シクロプロピル−1−(4−メトキシフェニル)−N5−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−1H−ピラゾール−3,5−ジカルボキサミドは実施例15に用いる調製方法に基づいて、ステップA〜Iの順番で調製される。ステップAにシクロプロピルアミンでアミノ基を置換する。粗産物を調製型HPLC(HCOOH)によって純化し、タイトルの化合物(34mg、35%)を得、白色固体である。1HNMR(400MHz、DMSO−d6)δ7.68−7.73(m、1H)、7.36−7.43(m、3H)、7.04−7.10(m、2H)、6.98−7.01(m、1H)、3.97(s、2H)、3.80(s、6H)、3.37−3.50(m、4H)、2.91−3.04(m、2H)、2.05−2.15(m、1H)、1.84−1.99(m、2H)、1.54−1.68(m、2H)、0.38−0.63(m、4H)。
ステップB:tert−ブチル−4−((メタンスルホニル)メトキシ)ピペリジノ−1−カルボン酸tert−ブチル(130g、0.466mol)のDMF(1L)溶液に、フタルイミドカリウム(92.3g、0.699mol)を加える。混合物を80℃で16時間撹拌する。混合物を水に注ぎ、白色固体を析出して濾過する。得る白色固体をDCMに溶解し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過する。濾液を濃縮し、必要な産物(55g、36%)を得、白色固体である。
ステップC:0℃で、tert−ブチル−4−(1,3−ジオキソイソインドリン−2−イル)ピペリジノ−1−蟻酸tert−ブチル(55g、0.167mol)のDCM(500mL)溶液に、TFA(100mL)を加える。該混合物を0℃で2時間撹拌した後、減圧して溶媒を除去し、粗産物を得、直接それを次のステップに用いる。
ステップD:0℃で、2−(ピペリジノ−4−イル)イソインドリン−1,3−クルジオ
ン(30g、0.13mol)のAcOH(350mL)溶液に亜硝酸ナトリウム(18g、0.26mol)の水溶液(150mL)を加えた後混合物を30℃で3時間撹拌してから、混合物を水(500mL)に注ぎ、白色固体を析出し、濾過する。白色固体をDCMに溶解し、飽和NaHCO3溶液(300mL*4)で洗浄し、有機相を無水Na2SO4で乾燥し、濾過する。濾液を濃縮し、必要な産物(248g、73.4%)を得、白色固体である。
ステップE:0℃で、2−(1−ニトロソピペリジン−4−イル)イソインドリン−1,3−クルジオン(6.5g、0.025mol)のDCM(75mL)とMeOH(250mL)の混合溶液に亜鉛末(6.5g、0.1mol)と塩化アンモニウム(5.4g、0.1mol)を加え、該混合物を0℃で30分撹拌した後、15℃で1時間撹拌する。混合物を濾過し、濾液をDCM(300mL*6)で抽出し、合併された有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥して濾過する。粗残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(DCM:エタノール=20:1)によって純化し、2−(1−アミノピペリジン−4−イル)イソインドリン‐1,3−クルジオンを得、黄色固体である。
ステップF:2−(2−クロロエトキシ)酢酸(6.2g、0.0449mmol)、HATU(18.6g、0.049mmol)及びDIEA(6.8g、0.049mmol)をDMF(150mL)に加える。混合物を30℃で20分撹拌し、次に2−(1−アミノピペリジン−4−イル)イソインドリン−1,3−クルジオン(10.0g、0.0408mmol)を加える。混合物を30℃で16時間撹拌する。反応が完成した後、混合物を水(200mL)に入れ、白色固体を析出し、濾過する。固体をDCM(300mL)に溶解し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して濾過する。濾液を濃縮し、2−(2−クロロエトキシ)−N−(4−(1,3−−インドリン−2−イル)ピぺリジン−1−イル)アセトアミド(12.5g、83.9%)を得、白色固体である。
ステップG:0℃で、2−(2−クロロエトキシ)−N−(4−(ジオキソイソインドリン−2−イル)−ピぺリジン−1−イル)アセトアミド(12.5g、0.038mol)のDMF(300mL)溶液に水素化ナトリウム(1.5g、0.042mol)を加え、1時間を持続して完成する。混合物を0℃で30分撹拌する。反応が完成した後、混合物を水(300mL)に注ぐ。白色固体を析出してから、濾過する。白色固体をDCM(300mL)に溶解し、水で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥し、濾過する。濾液を濃縮して産物(9.0g、79.6%)を得、白色固体である。
ステップH:2−(1−(3−オキソピロリジン)ピぺリジン−4−イル)イソインドリン−1,3−クルジオン(9.0g、0.027mol)のMeOH(300mL)溶液にメチルアミン(10.6mL、0.136mol)を加える。混合物を70℃で3時間撹拌し、反応が完成した後、減圧して溶媒を除去し、粗産物を得る。シリカゲルカラムクロマトグラフィーによって純化し、産物(2.0g、37%)を得、白色固体である。
ステップI:ジヒドロ−2H−ピラニル−4(3H)−オン(5g、0.05mmol)のMeOH(60mL)溶液にtert−ブチルヒドラジン蟻酸tert−ブチル(7.92g、0.06mol)、酢酸(500μL)、及びNaBH3CN(6.3g、0.1mol)を加える。混合物を25℃で16時間撹拌した後、濃縮する。残留物をDCM(100mL)に溶解し、水(80mL)で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して濃縮する。粗残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(PE:PA=5:1〜1:1)によって純化し、tert−ブチル2−(テトラヒドロ−2H−ピラニル−4−イル)カルバジン酸tert−ブチル(10g、92%)を得、白色固体である。
ステップJ:tert−ブチル2−(テトラヒドロ−2H−ピラニル−4−イル)カルバジン酸tert−ブチル(11g、0.05mol)のDCM(100mL)溶液にトリフルオロ酢酸(10mL)を加える。混合物を25℃で16時間撹拌した後、濃縮し、粗生成物(テトラヒドロ−2H−ピラニル−4−イル)ヒドラジントリフルオロ酢酸塩(6g、粗生成物)を得、それを直接次のステップに用いる。
ステップK:(テトラヒドロ−2H−ピラニル−4−イル)ヒドラジントリフルオロ酢酸塩(6g、粗生成物)のMeOH(80mL)溶液にメチル3−(フラニル−2−イル)
−3−オキソプロピオン酸エチル(10g、51.7mmol)及びTsOH・H2O(9.8g、51.7mmol)を加える。混合物を60℃で16時間撹拌する。混合物を水(100mL)に入れ、EtOAc(100mL*2)で抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して濃縮する。粗産物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(PE:EA=10:1〜1:1)によって純化し、メチル−5−(フラニル−2−イル)−1−(テトラヒドロ−2H−ピラニル−4−イル)−1H−ピラゾール−3−カルボン酸エチル(3.7g、26%)を得、黄色固体である。LCMS(ESI)m/z:277(M+1)。
ステップL:メチル−5−(フラニル−2−イル)−1−(テトラヒドロ−2H−ピラニル−4−イル)−1H−ピラゾール−3−カルボン酸エチル(1g、3.62mmol)のMeCN(12mL)とH2O(6mL)の混合溶液にリン酸二水素ナトリウム(2.17g、18.1mmol)とNaClO2(3.27g、36.2mmol)を加える。混合物を25℃で16時間撹拌した後混合物を飽和の亜硫酸水素ナトリウムの水溶液(50mL)に注ぎ、EtOAc(50mL*2)で抽出し、塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して濃縮し、3−(メトキシカルボニル)−1−(テトラヒドロ−2H−ピラニル−4−イル)−1H−ピラゾール−5−カルボン酸(500mg、粗生成物)を得、黄色固体である。
ステップM:3−(メトキシカルボニル)−1−(テトラヒドロ−2H−ピラニル−4−イル)−1H−ピラゾール−5−カルボン酸(150mg、0.59mmol)のDMF(4mL)溶液にHATU(269mg、0.707mmol)、DIEA(152mg、1.18mmol)と4−(4−アミノピペリジン−1−イル)モルフォリノ−3−オン(117mg、0.59mmol)を加える。混合物を25℃で16時間撹拌した後水(30mL)に注ぎ、EtOAc(40mL*2)で抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して濃縮する。粗産物をTLC(EA)で純化し、メチル5−((1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)アミノカルボニル−1−(テトラヒドロ−2H−ピラニル−4−イル)−1H−ピラゾール−3−蟻酸エチル(170mg、粗産物)を得、黄色油状物である。LCMS(ESI)m/z:436(M+1)。
ステップN:タンクに、アンモニアガスがあるエチレングリコール(10mL)溶液にメチル5−((1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)アミノカルボニル−1−(テトラヒドロ−2H−ピラニル−4−イル)−1H−ピラゾール−3−蟻酸エチル(170mg、粗生成物)を加え、混合物を80℃で8時間撹拌する。冷却した後混合物を水(30mL)に注ぎ、DCM(30mL*2)で抽出する。有機相を無水Na2SO4で乾燥して濃縮する。粗残留物を調製型HPLCによって純化し、N5−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−(テトラヒドロ−2H−ピラニル−4−イル)−1H−ピラゾール−3,5−ジカルボキサミド(9.1mg、5%)を得、白色固体である。1HNMR(400MHz、DMSO−d6)δ8.48−8.43(m、2H)、7.53(s、1H)、7.31(m、1H)、7.24(m、1H)、5.35−5.29(m、1H)、3.97−3.94(m、4H)、3.80−3.79(m、2H)、3.55−3.53(m、1H)、3.45−3.41(m、6H)、3.01−3.98(m、2H)、2.12−2.07(m、2H)、1.87−1.80(m、4H)、1.61−1.60(m、2H)。
)、3.43−3.37(m、4H)、3.26(s、3H)、3.18(m、1H)、3.00(m、2H)、2.13−2.10(m、2H)、1.95−1.80(m、6H)、1.62−1.57(m、2H)、1.26−1.23(m、2H)。
ステップB:0℃で、6−(1−ベンジルピペリジン−4−イル)−3−(トリフルオロメチル)−5,6−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−7(4H)−オン(3.5g、9.25mmol)のDCM(50mL)にEt3N(5.5mL、37mmol)及び(2−(クロロメトキシ)エチル)トリメチルシラン(3.1g、18.5mmol)を加え、混合物を50mmolで16時間撹拌する。水を加えた後、混合物をDCM(100mL*L)で抽出する。合併された有機層を塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して濃縮する。粗残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(PE:PA=3:1)によって純化し、6−(1−ベンジルピペリジン−4−イル)−3−(トリフルオロメチル)−1−((2−(トリメチルシリル)エトキシ)メチル)−5,6−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−7(4H)−オン(2.0g、40%)を得、黄色油状物である。
ステップC:6−(1−ベンジピペリジン−4−イル)−3−(トリフルオロメチル)−1−((2−(トリメチルシリル)エトキシ)メチル)−5,6−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−7(4H)−オン(4.0g、7.86mmol)及びPd/C(0.8g、10%)のエタノール(50mL)溶液を50psiの水素の圧力に60℃で16時間撹拌する。混合物を濾過し、次に濾液を濃縮し、6−(ピペリジン−4−イル)−3−(トリフルオロメチル)−1−((2−(トリメチルシリル)エトキシ)メチル)−5,6−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−7(4H)−オン(3.0g、90%)を得、更なる純化なしで直接次のステップに用いる。
ステップD:15〜20℃で、6−(ピペリジン−4−イル)−3−(トリフルオロメチル)−1−((2−(トリメチルシリル)エトキシ)メチル)−5,6−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−7(4H)−オン(3.0g、90%)(3.0g、7.2mmol)の酢酸(30mL)溶液に亜硝酸ナトリウム(2.5g、35.8mmol)の水(5mL)溶液を加える。混合物を15℃で0.5時間撹拌した後、40℃で2時間を撹拌する。混合物を酢酸エチル(60mL*L)で抽出し、合併された有機層を塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮し、且つシリカゲルカラムクロマトグラフィー(PE:PA=5:1〜2:1)によって純化し、6−(1−ニトロソピリジン−4−イル)−3−(トリフルオロメチル)−1−((2−(トリメチルシリル)エトキシ)メチル)−5,6−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−7(4H)−オン(3.0g、94%)を得、黄色固体である。
ステップE:0℃で、6−(1−ニトロソピリジン−4−イル)−3−(トリフルオロメチル)−1−((2−(トリメチルシリル)エトキシ)メチル)−5,6−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−7(4H)−オン(2.5g、5.6mmol)及び塩化アンモニウム(1.5g、27.9mmol)のMeOH(40mL)溶液に亜鉛末(1.8g、27.9mmol)を加える。混合物を10mmolで2時間撹拌した後濾過し、濾液を濃縮し、6−(1−アミノピリジン−4−イル)−3−(トリフルオロメチル)−1−((2−(トリメチルシリル)エトキシ)メチル)−5,6−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−7(4H)−オン(2.4g、100%)を得、粗産物であり、更なる純化なしで直接次のステップに用いる。
ステップF:12℃で、2−2(クロロエチル)酢酸(0.93g、6.7mmol)、
HATU(2.6g、6.7mmol)及びDIPEA(2.6mL)をDMF(30mL)溶液に加え、それから6−(1−アミノピリジン−4−イル)−3−(トリフルオロメチル)−1−((2−(トリメチルシリル)エトキシ)メチル)−5,6−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−7(4H)−オン(2.4g、5.6mmol)が溶解されたDMF(10mL)溶液を加える。混合物を12℃で16時間撹拌する。溶液に水を加えた後、混合物をEtOAc(100mL*L)で抽出する。合併された有機層を炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮してシリカゲルカラムクロマトグラフィー(PE:PA=1:1〜0:1)によって純化し、2−2(クロロエチル)−N−(4−(7−オキソ−3−(トリフルオロメチル1)−1−((2−(トリメチルシリル)エトキシ)メチル)−4,5−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−6(7H)−イル)ピぺリジン−1−イル)アセトアミド(2.8g、92%)を得、油状物である。
ステップG:2−2(クロロエチル)−N−(4−(7−オキソ−3−(トリフルオロメチル1)−1−((2−(トリメチルシリル)エトキシ)メチル)−4,5−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−6(7H)−イル)ピぺリジン−1−イル)アセトアミド(2.8g、5.1mmol)をDMF(30mL)溶液に溶解し、0℃で溶液にNaH(305mg、7.6mmol)を加える。その後混合物を10℃で1時間撹拌する。混合物を飽和NH4Cl溶液に加え、EtOAc(200mL*L)で抽出する。合併された有機層を塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮し、4−(4−(7−オキソ−3−(トリフルオロメチル1)−1−((2−(トリメチルシリル)エトキシ)メチル)−4,5−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−6(7H)−イル)ピぺリジン−1−イル)モルホリン−3−オン(2.2g、84%)を得、白色固体である。
ステップH:0℃で、4−(4−(7−オキソ−3−(トリフルオロメチル1)−1−((2−(トリメチルシリル)エトキシ)メチル)−4,5−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−6(7H)−イル)ピぺリジン−1−イル)モルホリン−3−オン(2.3g、4.4mmol)をDCM(30mL)と2,2,2−トリフルオロ酢酸(8mL)の混合溶液に加える。該混合物を0℃で16時間撹拌する。混合物を濃縮して、シリカゲルカラムクロマトグラフィー(PE:酢酸エチル=1:1〜0:1)によって純化し、4−(4−(1−(ヒドロキシメチル)−7−オキソ−3−(トリフルオロメチル)−4,5−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−6(7H)−イル)ピぺリジン−1−イル)モルホリン−3−オン(1.6g、93%)を得、粘着性の固体である。
ステップI:4−(4−(1−(ヒドロキシメチル)−7−オキソ−3−(トリフルオロメチル)−4,5−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−6(7H)−イル)ピぺリジン−1−イル)モルホリン−3−オン(1.5g、3.6mmol)及びアンモニア水(2.0mL)をMeOH(20mL)に加え、混合物を2℃で20分撹拌する。混合物を濃縮し、4−(4−(7−オキソ−3−(トリフルオロメチル)−4,5−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−6(7H)−イル)ピぺリジン−1−イル)モルホリン−3−オン(1.2g、82%)を得、白色固体である。
ステップJ:2℃で、4−(4−(7−オキソ−3−(トリフルオロメチル)−4,5−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−6(7H)−イル)ピぺリジン−1−イル)モルホリン−3−オン(60mg、0.2mmol)、(4−(ジフルオロメトキシ)フェニル)ホウ酸(60mg、0.4mmol)、4A分子篩(1g)及びトリエチルアミン(0.5mL)をジクロロメタン(2.0mL)に加え、次に窒素の保護において酢酸銅(28mg、0.2mmol)を加える。O2の雰囲気で、混合物を2℃で12時間撹拌する。反応混合物を濾過し、濾液を濃縮して調製型HPLC(HCOOH)によって純化し、4−(4−(1−(4−(ジフルオロメトキシ)フェニル)−7−オキソ−3−(トリフルオロメチル)−4,5−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−6(7H)−イル)ピぺリジン−1−イル)モルホリン−3−オン(30mg、3
7%)を得、白色固体である。1HNMR(DMSO−d6.400MHz)δ7.64(dd、J1=8.0Hz、J2=3.2Hz、2H)、7.30(dd、J1=8.0Hz、J2=3.2Hz、2H)、7.36(t、J=74.0Hz、1H)、4.25−4.22(m、1H)、3.98(s、2H)、3.82−3.79(m、2H)、3.64−3.61(m、2H)、3.43−3.40(m、4H)、3.00−3.05(m、2H)、2.91−2.86(m、2H)、1.83−1.79(m、2H)、1.61−1.58(m、2H)。
、2H)、3.82−3.80(m、2H)、3.66−3.62(m、2H)、3.43−3.40(m、4H)、3.08−3.05(m、2H)、2.98−2.90(m、2H)、1.83−1.80(m、2H)、1.62−1.59(m、2H)。
0(m、2H)、1.84−1.81(m、2H)、1.60−1.58(m、2H)。
4に用いる調製方法のステップJに基づいて調製され、そのうち(3−フルオロ−4−(メトキシフェニル)ホウ酸で(4−(ジフルオロメトキシ)フェニル)ホウ酸を置換する。1HNMR(DMSO−d6.400MHz)δ7.55(d、J=11.6Hz、1H)、7.38−7.36(m、1H)、7.27(t、J=8.8Hz、1H)、4.26−4.23(m、1H)、3.98(s、2H)、3.92(s、3H)、3.81−3.80(m、2H)、3.61−3.60(m、2H)、3.43−3.40(m、4H)、3.03−3.01(m、2H)、2.91−2.90(m、2H)、1.84−1.79(m、2H)、1.61−1.58(m、2H)。
間撹拌する。混合物は飽和の次亜硫酸ナトリウム(5mL)水溶液で洗浄し、EtOAc(10mL*L)で抽出し、濃縮する。粗残留物を調製型HPLC(HCOOH)で純化し、3−(7−オキソ−6−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−3−(トリフルオロメチル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−1−イル)ベンズアミド(10.2mg、10%の収率)を得、白色固体である。1HNMR(DMSO−d6.400MHz)δ8.12(s、1H)、8.04−7.99(m、2H)、7.72(d、J=2.8Hz、1H)、7.21(d、J=4.0Hz、1H)、7.61−7.56(m、2H)、4.28−4.25(m、1H)、3.98(s、2H)、3.81−3.79(m、2H)、3.65−3.62(m、2H)、3.43−3.40(m、4H)、3.00−2.98(m、4H)、1.83−1.78(m、2H)、1.61−1.59(m、2H)。
(実験例1)体外評価
IC50値を測定することにより、受験化合物がヒト又はネズミのXa因子又は他の酵素、例えば、トロンビン又はトリプシンに対する抑制能力を評価し、IC50値は抑制常数Kiと関連する。呈色測定に純化された酵素を用いる。FlexStation III(アメリカ分子デバイス会社)を用いて、37℃で時間プロセスの線形部分(普通は基質を加えた2〜10分後)が405nmにおける吸光度の変化を測定することにより、発色基質が加水分解する初期速度を測定する。加水分解する相対速度(抑制されない対照組と比べ)が受験化合物の濃度に対する対数曲線を作成した後、線形回帰を通して計算し、基質が加水分解する速度を50%に低下させる阻害剤の濃度を測定する。Cheng−Prusoff equation:Ki=IC50/(1+[S]/Km)に基づいて酵素の抑制常数(Ki)を計算し、ここにおいて[S]は基質の濃度であり、Kmは二重逆数プロット方法で確定するミカエリス・メンテン常数である。GraphPadPrismソフトウェアによって受験化合物のIC50値を得る。「形線量効果(可変勾配)」を用いて曲線を整合する。
Tris−HCl緩衝液(50mM、pH8.3、150mMのNaCl)を用いてヒト又はネズミの凝固因子Xaの活性に対する抑制作用を測定する。50μLのヒト凝固因子Xa(Enzyme Research Laboratories, Inc;最終濃度は8.36nM)、又は50μLのネズミ凝固因子Xa(Enzyme Research Laboratories, Inc;最終濃度は57.5nM)の緩衝液を、Greiner 384マイクロタイタープレートに適合の孔に滴下する方法により、IC50を測定する。2μL2%(V/V)DMSOを含む測定用緩衝液(抑制されない対照組)又は各種の濃度の受験化合物を2%(V/V)DMSOを含む測定用緩衝液に希釈し、且つ48μLの基質S−2222(Chromogenix;化学式:Bz−IIe−Glu(γ−OR)−Gly−Arg−pNA・HClR=H(50%)で、R=CH
3(50%)である)測定用緩衝液を添加し、最終濃度は0.172mMである。該実験には受験化合物と酵素を事前に10分培養してから、基質S−2222を加えて100μLの最終体積を得ることで実験を開始する。
Ki<10μMの受験化合物は陽性であると考えられ、本発明はKi<1μMの化合物が好ましく、更にKi<0.1μMの化合物が好ましく、更にKi<0.01μMの化合物が好ましく、もっと一歩進んでKi<0.001μMの化合物が好ましい。上記実験方法によって、本発明のいくつかの化合物がKi<0.1μMということが測定されたため、本発明の化合物は効果的なXa因子阻害剤とすることができる。
緩衝液(10mMのHEPES緩衝液、pH7.4、2mMのCaCl2)を用いてヒトトロンビンの活性に対する抑制作用を測定する。Greiner 384マイクロタイタープレートに適合の孔を選べてIC50を測定する。50μLのヒトトロンビン(Sigma会社;T8885)を含む緩衝液、最終濃度が0.05NIH単位/mLであり、2μL2%(V/V)DMSOを含む測定用緩衝液(抑制されない対照組)、又は各種の濃度の受験化合物を2%(V/V)DMSOを含む測定用緩衝液に希釈する;48μLの基質S−2238(Chromogenix;化学式:H−D−Phe−Arg−pNA・2HCl)を含む緩衝液を加え、最終濃度は30μMである。該実験には受験化合物と酵素を事前に10分培養してから、基質を加えて100μLの最終体積を得ることで実験を開始する。
緩衝液(50mMのTris、pH8.2、20mMのCaCl2)を用いてヒトトリプシンの活性に対する抑制作用を測定する。Greiner 384マイクロタイタープレートに適合の孔を選べてIC50を測定する。50μLのヒトトリプシン(Sigma会社;T6424)を含む緩衝液、最終濃度が0.39BAEE単位/mLであり、2μL2%(V/V)DMSOを含む測定用緩衝液(抑制されない対照組)、又は各種の濃度の受験化合物を2%(V/V)DMSOを含む測定用緩衝液に希釈する;基質S−2222(Chromogenix)を含む緩衝液は、最終濃度が30μMである。該実験には受験化合物と酵素を事前に10分培養してから、48μLの基質を加えて、100μLの最終体積を得ることで実験を開始する。
トロンビンの生成によって受験化合物がプロトロンビン酵素の活性に対する抑制作用を測定する。簡単に言えば、10mMのHEPES緩衝液及びpHが7.4で、2mMのCaCl2に12.5μLのヒト凝固因子Xaを培養し、最終濃度は0.5nmであり、且つ37℃で12.5μLのヒト血小板(1*107mL−1)を10分加える。25μLのプロトロンビンを加えて反応を始め、最終濃度は0.5μMである。2μL2%(V/V)DMSOを含む測定用緩衝液(抑制されない対照組)、又は各種の濃度の受験化合物を2%(V/V)DMSOを含む測定用緩衝液に希釈する。20分後、最終濃度が50μMになるまで、48μLの基質S−2238(Chromogenix)を加えることでトロンビンの活性を測定する。
2.上記の酵素活性実験を通す化合物を活性の大きさ範囲に基づいて、A〜Dという四つの区間に分け、そのうちA≦10nm;10nm<B≦50nm;1000nm>C≧50nm;D≧1000nm;N/Aは該データがテストされないことを表す。
本発明の一つの態様において、上記化合物又はその薬学に許容される塩は以下から選択される:
1)4−(4−(1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソー3−(トリフルオロメチル)−4,5−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−6(7H)−イル)ピぺリジン−1−イル)モルホリン−3−オン;
2)1−(4−メトキシフェニル)−6−(2’−オキソー[1,1’ −ジピペリジン]−4−イル)−3−(トリフルオロメチル)−5,6−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−7(4H)−オン;
3)1−(4−メトキシフェニル)−6−(1−(2−オキソピロリジン−1−イル)−ピぺリジン−4−イル)−3−(トリフルオロメチル)−5,6−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−7(4H)−オン;
4)1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(2’−オキソー[1,1’− ジピペリジン]−4−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボキサミド;
5)1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(2’−オキソー[1,1’− ジピペリジン]−4−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボニトリル;
6)N’−シアノ−1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(2’−オキソー[1,1’− ジピペリジン]−4−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボキサミジン;
7)1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボキサミド;
8)1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(1−(2−オキソピロリジン−3−イル)ピぺリジン−4−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボキサミド;
9)1−(4−クロロフェニル)−7−オキソ−6−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボキサミド;
10)7−オキソ−6−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−1−(4−(トリフルオロメチル)フェニル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボキサミド;
11)1−(4−(ジフルオロメチル)フェニル)−7−オキソ−6−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボキサミド;
12)1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(3−(2−オキソピロリジン−1−イル)−3−アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン−6−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボキサミド;
13)1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(3−(3−オキソモルホリノ)−3−アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン−6−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボキサミド;
14)1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(2−オキソ−[1,4’−ジピペリジン]−1’−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボキサミド;
15)1−(4−メトキシフェニル)−N5−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−1H−ピラゾール−3,5−ジカルボキサミド;
16)1−(4−メトキシフェニル)−N5−メチル−N5−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−1H−ピラゾール−3,5−ジカルボキサミド;
17)N5−エチル−1−(4−メトキシフェニル)−N5−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−1H−ピラゾール−3,5−ジカルボキサミド;
18)N5−シクロプロピル−1−(4−メトキシフェニル)−N5−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−1H−ピラゾール−3,5−ジカルボキサミド;
19)1−(4−メトキシフェニル)−N5−(1−(3−オキソモルホリノ)ピロリジン−3−イル)−1H−ピラゾール−3,5−ジカルボキサミド;
20)N5−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−1−(テトラヒドロ−2H−ピラン−4−イル)−1H−ピラゾール−3,5−ジカルボキサミド;
21)1−(1−(メチルスルホニル)ピぺリジン−4−イル)−N5−(1−(オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−1H−ピラゾール−3,5−ジカルボキサミド;
22)1−(4−メトキシシクロヘキシル)−N5−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−1H−ピラゾール−3,5−ジカルボキシアミド;
23)4−(4−(1−(4−(ジフルオロメトキシ)フェニル)−7−オキソ−3−(トリフルオロメチル)−4,5−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−6(7H)−イル)ピぺリジン−1−イル)モルホリン−3−オン;
24)4−(4−(1−(6−クロロナフタレン−2−イル)−7−オキソ−3−(トリフルオロメチル)−4,5−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−6(7H)−イル)ピぺリジン−1−イル)モルホリン−3−オン;
25)2−フルオロ−5−(7−オキソ−6−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−3−(トリフルオロメチル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−1−イル)ベンゾニトリル;
26)4−(4−(1−(3−アミノベンゾ[d]イソオキサゾール−5−イル)−7−オキソ−3−(トリフルオロメチル)−4,5−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−6(7H)−イル)ピぺリジン−1−イル)モルホリン−3−オン;
27)3−(7−オキソ−6−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−3−(トリフルオロメチル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−1−イル)ベンゾニトリル;
28)4−(4−(1−(3−フルオロ−4−メトキシフェニル)−7−オキソ−3−(トリフルオロメチル)−4,5−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−6(7H)−イル)ピぺリジン−1−イル)モルホリン−3−オン;
29)4−(4−(1−(3−フルオロナフタレン−2−イル)−7−オキソ−3−(トリフルオロメチル)−4,5−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−6(7H)−イル)ピぺリジン−1−イル)モルホリン−3−オン;
30)2−(ジフルオロメトキシ)−5−(7−オキソ−6−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−3−(トリフルオロメチル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−1−イル)ベンゾニトリル;
31)3−(7−オキソ−6−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−3−(トリフルオロメチル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−1−イル)ベンズアミド;
32)2−フルオロ−5−(7−オキソ−6−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−3−(トリフルオロメチル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−1−イル)ベンズアミド;及び
33)2−(ジフルオロメトキシ)−5−(7−オキソ−6−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−3−(トリフルオロメチル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−1−イル)ベンズアミド。
Shimadzu SIL−20A自動サンプラ及び日本島津DAD:SPD−M20Aセンサが備えられている島津LC20ABシステムによって高速液体クロマトグラフィーを行い、Xtimate C18(規格が2.1*300である3μmフィラ)クロマトカラムを用いる。0−60AB_6分である方法は下記のように行われた:線形勾配を応用し、100%のA(Aは0.0675%のTFAの水溶液である)で溶出を開始し、且つ60%のB(Bは0.0625%のTFAのMeCN溶液である)で溶出を終了する。プロセス全体は4.2分であり、その後60%のBで1分間溶出する。クロマトカラムを更に0.8分間平衡させて100:0に達せ、総運行時間は6分である。10−80AB_6分である方法は下記のように行われた:線形勾配を応用し、90%のA(Aは0.0675%のTFAの水溶液である)で溶出を開始し、且つ80%のB(Bは0.0625%のTFAのアセトニトリル溶液である)で溶出を終了する。プロセス全体は4.2分間であり、その後80%のBで1分間溶出する。クロマトカラムを更に0.8分間平衡させて90:10に達せ、総運行時間は6分間である。クロマトカラムの温度は50℃で、流速は0.8mL/minである。ダイオードアレイセンサの走査波長は200−400nmである。
はエタノール−二酸化炭素で化合物を溶出し、中のエタノール又はメチルアルコールに0.05%のNH3・H2O、0.05%のDEA又は0.1%のMEAが含まれ、総運行時間は20−30分間である。
ステップB:(Z)−2,2,2−トリフルオロ−N’−(4−メトキシフェニル)ブロモアセトヒドラジド(3.3g、11.1mmol)のトルエン溶液(35mL)に3−モルホリノー5,6−ジヒドロピリジン−2(1H)−オン(2.43g、13.3mmol)とTEA(2.25g、22.2mmol)を加え、混合物を加熱して16時間還流させる。反応混合物を水(80mL)に入れ、EA(80mL*2)で抽出し、塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過して濃縮する。粗残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(PEからPE:PA=5:1−1:1まで)によって純化し、1−(4−メトキシフェニル)−7α−モルホリノ−3−(トリフルオロメチル)−3α,4,5,6−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−7(7αH)−オン(1.38g、30%)を得、黄色固体である。LCMS(ESI)M/Z:421.1(M+23)。
ステップC:1−(4−メトキシフェニル)−7α−モルホリノ−3−(トリフルオロメチル)−3α,4,5,6−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−7(7αH)−オン(1.38g、3.46mmol)のDCM(15mL)溶液にTFA(1.5mL)を加える。混合物を25℃で2時間撹拌した後水(50mL)に入れ、DCM(50mL*2)で抽出する。合併された有機相を塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮し、1−(4−メトキシフェニル)−3−(トリフルオロメチル)−5,6−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−7(4H)−オン(1.08g、粗生成物)を得、黄色固体である。LCMS(ESI)M/Z:312.2(M+1)。
ステップD:1−(4−メトキシフェニル)−3−(トリフルオロメチル)−5,6−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−7(4H)−オン(1.08g、3.47mmol)、4−ブロモピリジン塩酸塩(1.01g、5.2mmol)、Pd2(dba)3(318g、8.67mmol)、Xantphos(200mg、0.347mmol)及び炭酸セシウム(2.83g、8.67mmol)をトルエン(15mL)に加える。混合物を80℃まで加熱し、16時間を持続する。混合物を室温まで冷却し、濾過する。濾液を濃縮し、粗残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(PE:EA=10:1−1:1)によって純化し、1−(4−メトキシフェニル)−6−(ピリジン−4−イル)−3−(トリフルオロメチル)−5,6−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−7(4H)−オン(800mg、59%)を得、黄色固体である。LCMS(ESI)M/Z:389.1(M+1)。
ステップE:1−(4−メトキシフェニル)−6−(ピリジン−4−イル)−3−(トリフルオロメチル)−5,6−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−7(4H)−オン(800mg、2.06mmol)と二酸化白金(50mg)をAcOH(10mL)溶液に加え、50psi圧力のH2で、25℃で16時間撹拌する。混合物を濾過し、且つ濾液を濃縮し、1−(4−メトキシフェニル)−6−(ピリジン−4−イル)−3−(トリフルオロメチル)−5,6−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−7(4H)−オン(900mg、粗産物)を得、黄色油状物であり、直接次のステ
ップに用いる。LCMS(ESI)M/Z:395.2(M+1)。
ステップF:0℃で1−(4−メトキシフェニル)−6−(ピリジン−4−イル)−3−(トリフルオロメチル)−5,6−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−7(4H)−オン(900mgの粗生成物、2.06mmol)のAcOH(8mL)溶液に亜硝酸ナトリウム(711mg、10.3mmol、4mLの水)溶液を加える。混合物を25℃まで加熱して16時間撹拌する。混合物を水(30mL)に入れ、DCM(30mL*2)で抽出する。合併された有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮し、1−(4−メトキシフェニル)−6−(1−ニトロソピリジン−4−イル)−3−(トリフルオロメチル)−5,6−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−7(4H)−オン(900mg、粗産物)を得、黄色固体である。LCMS(ESI)M/Z:424.2(M+1)。
ステップG:1−(4−メトキシフェニル)−6−(1−ニトロソピリジン−4−イル)−3−(トリフルオロメチル)−5,6−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−7(4H)−オン(900mg粗生成物、2.06mmol)のAcOH(10mL)溶液に亜鉛末(670mg、10.3mmol)を加える。混合物を25℃で3時間撹拌した後濾過し、濾液を濃縮し、少量のAcOHを凍結乾燥して除去する。粗残留物6−(1−アミノピリジン−4−イル)−1−(4−メトキシフェニル)−3−(トリフルオロメチル)−5,6−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−7(4H)−オン(900mg粗生成物、2.06mmol)を直接次のステップに用いる。LCMS(ESI)M/Z:410.2(M+1)。
ステップH:2−(2−クロロエチル)酢酸(342mg、2.47mmol)のDMF(10mL)溶液にHATU(939mg、2.47mmol)、DIEA(532mg、4.12mmol)及び6−(1−アミノピリジン−4−イル)−1−(4−メトキシフェニル)−3−(トリフルオロメチル)−5,6−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジンー7(4H)−オン(900mg粗生成物、2.06mmol)を加える。混合物を25℃で16時間撹拌する。混合物を水(80mL)に入れ、EA(60mL*2)で抽出する。合併された有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮する。粗残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(PE:EA=1:1からEAまで)によって純化し、2−(2−クロロエチル)−N−(4−(1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−3−(トリフルオロメチル)−4,5−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−6(7H)−イル)ピぺリジン−1−イル)アセトアミド(900mg、82%)を得、黄色固体である。LCMS(ESI)M/Z:530.2(M+1)。
ステップI:0℃で、2−(2−クロロエチル)−N−(4−(1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−3−(トリフルオロメチル)−4,5−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジンー6(7H)−イル)ピぺリジン−1−イル)アセトアミド(900mg、1.7mmol)のDMF(10mL)溶液にNaH(74.8mg、1.87mmol)を加える。混合物を25℃で2時間撹拌した後水(80mL)に入れ、EA(80mL)で抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮する。粗残留物を調製型HPLC(蟻酸)で純化し、4−(4−(1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−3−(トリフルオロメチル)−4,5−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジンー6(7H)−イル)ピぺリジン−1−イル)モルホリン−3−オン(303mg、36%)を得、白色固体である。1HNMR(400MHz、DMSO−d6)δ7.45(m 、2H)、7.02(m、2H)、4.24(m、1H)、3.97(s、2H)、3.82−3.78(m、5H)、3.60(t、J=6.4Hz、2H)、3.42−3.39(m、4H)、3.02−2.99(m、2H)、2.90−2.88(m、2H)、1.82−1.77(m、2H)、1.59−1.56(m、2H).LCMS(ESI)m/z:494.2(M+1)。
ステップB:3,3−ジクロロピぺリジン−2−オン(31g、粗生成物)をモルフォリノ(300mL)に溶解した後、混合物を130℃まで加熱して一晩置く。溶媒を濃縮して除去した後、ジクロロメタンで洗浄する。固体を濾過し、有機相を濃縮してから、粗生成物をクロマトカラムによって純化し、3−モルホリノ−5,6−ジヒドロピリジニル−2(1H)−オン(23g)を得る。1HNMR(CDCl3、400MHz)δ=6.58−6.50(m、1H)、5.55(t、J=4.8Hz、1H)、3.85−3.79(m、4H)、3.32(td、J=6.8、3.2Hz、2H)、2.87(t、J=4.8Hz、4H)、2.35(td、J=6.8、4.8Hz、2H)。
ステップC:0℃で、2−クロロ‐2−(2−(4−メトキシフェニル)ヒドラゾノ)蟻酸(Z)−エチル(32g、0.126mol)のEtOAc(300mL)溶液に3−モルホリノ−5,6−ジヒドロピリジン−2(1H)−オン(23g、0.126mol、EAに溶解する)及びトリエチルアミン(31g、0.315mol)を加える。反応混合物を室温まで加熱した後30分撹拌し、その後加熱して還流させて一晩置く。室温まで冷却した後、反応液を濾過し、固体を収集し、且つ水と酢酸エチルで洗浄し、次に真空で乾燥し、1−(4−メトキシフェニル)−7a−モルホリノ−7−オキソ−3a,4,5,6,7,7a−ヘキサヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(40g、粗生成物)を得る。LCMS(ESI)m/z:403(M+1)。
ステップD:0℃で、1−(4−メトキシフェニル)−7a−モルホリノ−7−オキソ−3a,4,5,6,7,7a−ヘキサヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(40g、粗生成物)のジクロロメタン(400mL)溶液に2,2,2−トリフルオロ酢酸(30mL)を徐々に加え、その後反応物を25℃で5時間撹拌する。混合物を飽和のNaHCO3水溶液と塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して濃縮し、1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチルを得、黄色固体である(20g、50%)。1HNMR(CDCl3、400MHz)δ7.50(d、J=9.2Hz、1H)、6.95(d、J=8.8Hz、1H)、5.69(brs、1H)、4.45(q、J=7.2Hz、2H)、3.85(s、3H)、3.66−3.61(m、2H)、3.20(t、J=6.8、2H)、1.43(t、J=6.8、3H)。
ステップE:1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(3.00g、9.52mmol)、4−ブロモピリジン塩酸塩(3.71mg、19.0mmol)、Pd2(dba)3(872mg、0.952mmol)、Xantphos(1.10g、1.90mmol)及び炭酸セシウム(15.5g、14.6mmol)をトルエン(150mL)溶液に12時間加熱して還流させる。室温まで冷却した後、混合物を濾過する。濾過ケーキをEA(50mL*3)で洗浄する。合併された有機相を濃縮して粗産物を得、それをシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって純化し(PE:EA=5:1〜PE:EA=1:4)、1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(ピリジニル−4−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(3.30mg、88.5%)を得、黄色固体である。LCMS(ESI)m/z:393.4(M+1)。
ステップF:PtO2(500mg)を1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(ピリジニル−4−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(3.30g、8.42mmol)のAcOH(150mL)溶液に加える。混合物を50psiのH2の圧力に室温で12時間撹拌する。混合物を濾過して濃縮し、1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(ピリジニル−4−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(4.60g、粗生成物)を得、黄色油状物である。LCMS(ESI)m/z:399.4(M+1)。
ステップG:亜硝酸ナトリウム(3.47g、50.3mmol)を10mLの水に溶解し、0℃で該水溶液を1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(ピリジニル−4−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボン酸メチル(4.00g、10.1mmol)のAcOH(80mL)溶液に加える。反応混合物を室温で3時間撹拌し、水(200mL)で希釈し、且つDCM(40mL*3)で抽出する。合併された有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥して濾過する。濾液を濃縮し、1−(4−メトキシフェニル)−6−1−ニトロソピペリジン−4−イル)−7−オキソ−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(4.50g、粗生成物)を得、白色固体である。LCMS(ESI)m/z:428.4(M+1)。
ステップH:亜鉛末(6.54g、0.100mmol)を1−(4−メトキシフェニル)−6−1−ニトロソピペリジン−4−イル)−7−オキソ−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(4.29g、10.0mmol)のAcOH(150mL)溶液に加える。反応混合物を室温で5時間撹拌する。混合物を濾過した後濾液を濃縮し、6−(1−アミノピぺリジン−4−イル)−1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(4.00g、粗生成物)を得、黄色固体である。LCMS(ESI)m/z:414.4(M+1)。
ステップI:6−(1−アミノピぺリジン−4−イル)−1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(2.00g、0.484mmol)、5−ブロモバレリルクロリド(1.16g、5.81mmol)及びDIPEA(2.5mL、14.5mmol)例えばDCM(20mL)に加え、混合物を室温で12時間撹拌する。混合物を水(40mL)に加えてDCM(20mL*3)で抽出する。合併された有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥して濾過する。濾液を濃縮した後6−(1−(5−ブロモバレルアミド)ピぺリジン−4−イル)−1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(3.00g、粗生成物)を得、黄色固体である。LCMS(ESI)m/z:576.2[M+1]。
ステップJ:氷浴で冷却する場合、NaH(138mg、3.44mmol)を徐々に6−(1−(5−ブロモバレルアミド)ピぺリジン−4−イル)−1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(1.80g、3.13mmol)のTHF(50mL)溶液に加える。反応混合物を室温で12時間撹拌した後、真空で溶媒を除去する。残留物を水(100mL)に加え、且つDCM(40mL*4)で抽出する。合併された有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥して濾過する。濾液を濃縮し、粗産物を得、シリカゲルカラムクロマトグラフィーによって純化し(DCM:エタノール=100:1〜10:1)、1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(2’−オキソ−[1,1’−ジピペリジン]−4−イル)−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(1.00g、64%)を得、黄色固体である。LCMS(ESI)m/z:496.2[M+1]。
ステップK:1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(2’−オキソ−[1,1’−ジピペリジン]−4−イル)−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(500mg、1.01mmol)をアンモニアガスがあるエチレングリコール(20mL)に加える。混合物をタンクに80℃で3時間撹拌する。冷却した後、水(100mL)を混合物に加えて濾過する。固体を水(5mL*3)で洗浄して乾燥し、1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(2’−オキソ−[1,1’−ジピペリジン]−4−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボキサミド(370mg、79%)を得、黄色固体である。1HNMR(DMSO−d6、400MHz)δ7.66(s、1H)、7.46(d、J=8.8Hz、2H)、7.39(s、1H)、7.01(d、J=9.2Hz、2H)、4.26−4.20(m、1H)、3.82(s、3H)、3.55−3.52(m、3H)、3.31−3.30(m、3H)、3.00−2.92(m、4H)、2.20−2.17(m、2H)、1.75−1.72(m、2H)、1.60−1.56(m、4H)。LCMS(ESI)m/z:467.2[M+1]。
ステップB:0℃で、NaH(100mg、4.16mmol)を6−(1−(2−(クロロメトキシ)アセトアミド)ピぺリジン−4−イル)−1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(0.70g、1.31mmol)のTHF(20mL)溶液に加える。反応混合物を室温で12時間撹拌し、溶媒を濃縮して除去する。残留物を水(100mL)で希釈し、DCM(40mL*4)で抽出する。合併された有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥して濾過する。濾液を濃縮し、粗産物を得、それをシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって純化し(DCM:エタノール=100:1〜50:1)、1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(4.00g、粗生成物)を得、黄色固体である。LCMS(ESI)m/z:498(M+1)。
ステップC:1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(500mg、1.01mmol)をアンモニアガスがあるエチレングリコール(20mL)に加える。混合物をタンクに80℃で3時間撹拌する。冷却した後、水(100mL)を混合物に加え、且つ濾過する。残留物を水(5mL*3)で洗浄して乾燥し、1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボキサミド(370mg、79%)を得、黄色固体である。1HNMR(DMSO−d6、400MHz)δ7.71(s、1H)、7.46(d、J=8.8Hz、2H)、7.39(s、1H)、7.01(d、J=9.2Hz、2H)、4.26−4.20(m、1H)、3.82(s、3H)、3.55−3.52(m、3H)、3.31−3.30(m、3H)、3.00−2.92(m、4H)、1.85−1.79(m、2H)、1.58(d、J=10.4Hz、2H)。
ステップB:室温で、1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(ピリジニル−4−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボン酸メチル(598mg、1.5mmol)のDMF(5mL)溶液にNEt3(304mg、3.0mmol)を加え、次に3−ヨードピロリジノ−2−オン(317mg、1.5mmol)を加える。混合物を室温で16時間撹拌する。反応混合物を濃縮し、粗生成物を得、シリカゲルカラムクロマトグラフィーによって純化し(DCM:エタノール=50:1〜20:1)、1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(1−(2−オキソピロリジン−3−イル)ピぺリジン−4−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(680mg、94%)を得、浅黄色固体である。LCMS(ESI)m/z:479(M+1)。
ステップC:タンクに1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(1−(2−オキソピロリジン−3−イル)ピぺリジン−4−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(674mg、1.4mmol)及びアンモニアガスがあるエチレングリコール(10mL)溶液を加え、混合物を120℃で16時間を撹拌する。混合物を室温まで冷却し、水(50mL)で希釈する。混合液をEtOAc(50mL*3)で抽出する。合併された有機相を乾燥して濃縮する。粗残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって純化し(PE:酢酸エチル=1:3〜1:1)、1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(1−(2−オキソピロリジン−3−イル)ピぺリジン−4−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボキサミド(400mg、44%)を得、灰白色固体である。タイトルの化合物はキラル化合物であり、異性体は調製型SFCと調製型HPLCによって更なる純化され、それぞれ18.5mgと23.6mgである二つの留分を得る。留分1:1HNMR(400MHz、DMSO−d6)δ8.50(brs、2H)、7.54(d、J=8.0Hz、2H)、7.34(d、J=8.0Hz、2H)、7.28(d、J=8.0Hz、2H)、7.01(d、J=8.0Hz、2H)、4.06(t、J=6.0Hz、2H)、3.81(s、3H)、3.62−3.59(m、2H)、3.23(t、J=6.0Hz、2H)、2.42−2.38(m、2H)、1.88−1.84(m、4H)。LCMS(ESI)m/z:484.2(M+1)。留分2:1HNMR(400MHz、DMSO−d6)δ8.50(brs、2H)、7.54(d、J=8.0Hz、2H)、7.34(d、J=8.0Hz、2H)、7.28(d、J=8.0Hz、2H)、7.01(d、J=8.0Hz、2H)、4.06(t、J=6.0Hz、2H)、3.81(s、3H)、3.62−3.59(m、2H)、3.23(t、J=6.0Hz、2H)、2.42−2.38(m、2H)、1.88−1.84(m、4H)。MS(ESI)m/z:484.2(M+1)。
ステップB:1−ベンジル−1H−ピロリル−2,5−ジオン(15.08g、81mmol)のCH3CN(810mL)溶液にブロモ(ニトロ)メタン(11.33g、81mmol)を加え、次にK2CO3(11.19g、81mmol)を加える。混合物を25℃で4時間撹拌してから、いくつかの回数に分けて各4時間にブロモ(ニトロメチル)メタン(1.13g、8mmol)*5回を加え、反応の温度を25℃に制御する。完成した後、25℃で4時間撹拌する。混合物を真空で濃縮して粗生成物を得る。粗産物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって純化し(EA:PE=1:10〜1:5)、3−ベンジル−6−ニトロ−3−アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン−2,4−ジオン(8.00g、粗生成物)を得、黄色固体であり、直接次のステップに用いる。LCMS(ESI)m/z:247(M+1)。
ステップC:−20℃で、3−ベンジル−6−ニトロ−3−アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン−2,4−ジオン(8.12g、33mmol)のTHF(100mL)溶液に水素化ホウ素ナトリウム(3.74g、99mmol)を加えた後、−20℃で0.5時間撹拌する。次に−20℃で徐々に三弗化硼素エーテラート(14.05g、99mmol)溶液を加え、0.5時間に完成した後、−20℃で1時間撹拌し続ける。混合物を25℃まで加熱して16時間撹拌する。反応混合物に徐々にMeOH(25mL)を加え、その後25℃で0.5時間撹拌する。混合物を減圧して濃縮し、粗生成物を得る。粗生成物を水(50mL)に加え、且つEA(50mL*3)で抽出する。合併された有機相を乾燥して濾過し、濃縮して粗生成物を得る。粗生成物をMeOH(80mL)に加え、80℃で2時間撹拌した後濃縮する。粗残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって純化し(EA:PE=1:50〜1:30)、3−ベンジル−6−ニトロ−3−アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン(4.70g、65%)を得、無色油状物である。LCMS(ESI)m/z:219(M+1)。
ステップD:25℃で、3−ベンジル−6−ニトロ−3−アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン(4.80g、22mmol)のイソプロピルアルコール溶液(220mL)に2Mの塩酸水溶液(110mL、220mmol)を加え、次に25℃で亜鉛末(28.78g、440mmol)を加える。混合物を25℃で2時間撹拌した後、炭酸水素ナトリウム(18.48g、220mmol)を反応混合物に加え、且つ25℃で0.5時間撹拌し続ける。混合物を珪藻土に濾過し、濾液をDCM(200mL*3)で抽出する。合併された有機相を乾燥して濾過し、且つ濃縮する。粗残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって純化し(DCM:エタノール=30:1〜10:1)、3−ベンジル−3−アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン−6−アミン(3.25g、78%)を得、黄色固体である。LCMS(ESI)m/z:189(M+1)。
ステップE:0℃で、3−ベンジル−3−アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン−6−アミン(3.20g、17mmol)のTHF(150mL)溶液にNEt3(3.78g、37mmol)を加え、次に5−ブロモバレリルクロリド(4.07g、20mmol)が溶解されたTHF(20mL)溶液を加え、その後0℃で2時間撹拌する。混合物を飽和のNaHCO3水溶液(150mL)に入れ、EtOAc(150mL*3)で抽出する。合併された有機相を乾燥し、濾過して濃縮する。得る粗産物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって純化し(DCM:エタノール=50:1〜30:1)、中間体粗生成物を得る。粗生成物をTHF(130mL)溶液に溶解し、0℃でいくつかの回数に分けてカリウムtert−ブトキシド(1.90g、17mmol)を加え、その後0℃で2時間撹拌し続ける。混合物を飽和のNH4Cl溶液(100mL)に入れ、EtOAc(100mL*3)で抽出する。合併された有機相を乾燥し、濾過して濃縮する。粗残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって純化し(DCM:エタノール=50:1〜30:1)、1−(3−ベンジル−3−アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン−6−イル)ピぺリジン−2−オン(2.80g、79%)を得、白色固体である。LCMS(ESI)m/z:271(M+1)。
ステップF:25℃で、1−(3−ベンジル−3−アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン−6−イル)ピぺリジン−2−オン(2.03g、7.5mmol)のCHCl3(24mL)溶液に五塩化リン(6.25g、30.0mmol)を加える。混合物を85℃まで加熱して16時間撹拌する。反応液を0℃まで冷却した後、混合物を氷水(25mL)に入れてCHCl3(25mL*2)で抽出する。合併された有機相を乾燥し、濾過して濃縮する。1−(3−ベンジル−3−アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン−6−イル)−3,3−ジクロロピぺリジン−2−オン(2.60g、粗生成物)を得、暗褐色固体である。該粗生成物を直接次のステップに用いる。LCMS(ESI)m/z:339(M+1)。
ステップG:1−(3−ベンジル−3−アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン−6−イル)−3,3−ジクロロピぺリジン−2−オン(2.54g、7.5mmol)をモルフォリノ(35mL)に溶解し、130℃で加熱して16時間撹拌する。混合物を濃縮し、得る粗生成物を水(20mL)に溶解し、且つEtOAc(20mL*3)で抽出する。合併された有機相を乾燥し、濾過して濃縮する。粗残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって純化し(DCM:エタノール=40:1)、1−(3−ベンジル−3−アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン−6−イル)−3−モルホリノ−5,6−ジヒドロピリジン−2(1H)−オン(1.70g、粗産物)を得、褐色油状物である。LCMS(ESI)m/z:271(M+1)。
ステップH:4−メトキシアニリン(19.71g、160mmol)のEtOH(40mL)溶液にHCl溶液(40mL、12M)を加え、次に−5℃で徐々に60mLの亜硝酸ナトリウム(12.14g、176mmol)水溶液を加え、20分を掛かる。反応物を0℃で1時間撹拌した後、順序によって2−クロロ‐3−オキソ酪酸エチル(26.34g、160mmol)、EtOH/H2O(400mL、9:1)及び酢酸ナトリウム(20.99256mmol)を加えた後、0℃で0.5時間撹拌し、次に25℃まで加熱して2時間撹拌する。濾過して固体を収集し、H2O(50mL*3)で洗浄し、乾燥して、(Z)−エチル−2−クロロ‐2−(2−(4−(メトキシフェニル)ヒドラゾノ)酢酸メチル(15g、36%)を得、緑黄色固体である。1HNMR(400MHz、CDCl3)δ8.29(brs、1H)、7.17(d、J=8.8Hz、2H)、6.89(d、J=8.8Hz、2H)、4.38(q、J=6.4Hz、2H)、3.80(s、3H)、1.40(t、J=6.4Hz、3H)。
ステップI:1−(3−ベンジル−3−アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン−6−イル)−3−モルホリノ−5,6−ジヒドロピリジン−2(1H)−オン(1.77g、5mmol)と2−クロロ‐2−(2−(4−メトキシフェニル)ヒドラゾノ)酢酸(Z)−エチル(1.93g、17.5mmol)をEtOAc(40mL)に溶解し、混合物にNEt3(1.26g、12.5mmol)に加えた後85℃まで加熱して16時間撹拌する。混合物を25℃まで冷却し、水(30mL)に入れ、EtOAc(30mL*3)で抽出する。合併された有機相を飽和NaHCO3溶液で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥し、濾過し、濃縮して、中間体(3.00g、生成物)を得、黄色固体である。MS(ESI)M/Z:574(M+1)。該中間体をDCM(25mL)溶液に溶解し、TFA(2.5mL)に加え、且つ25℃で16時間撹拌する。NaHCO3(10g、0.12mmol)を25℃で反応混合物に加え、且つ25℃で1時間撹拌する。混合物を濾過して濃縮する。粗残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって純化し(DCM:エタノール=50:1〜20:1)、6−(3−ベンジル−3−アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン−6−イル)−1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(800mg、粗産物)を得、褐色油状物であり、それを直接次のステップに用いる。LCMS(ESI)m/z:487(M+1)。
ステップJ:6−(3−ベンジル−3−アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン−6−イル)−1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(779mg、1.6mmol)と10%のPd/C(500mg)のMeOH(20mL)溶液を50psiのH2圧力において、25℃で16時間撹拌する。混合物を濾過し、濾液を濃縮し、6−(3−アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン−6−イル)−1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(700mg、粗産物)を得、黄色固体であり、それを直接次のステップに用いる。LCMS(ESI)m/z:397(M+1)。
ステップK:0℃で、6−(3−アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン−6−イル)−1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(674mg、1.7mmol)のAcOH(10mL)溶液に2mLの亜硝酸ナトリウム(704mg、10.2mmol)水溶液を加えた後、0℃で1時間撹拌する。混合物を水(30mL)に入れてEtOAc(30mL*2)で抽出する。合併された有機相を飽和NaHCO3溶液で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥し、濾過して濃縮する。得る中間体(520mg、71%)を得、黄色固体である:粗残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって純化する(EA:PE=1:2〜1:1)。LCMS(ESI)m/z:426(M+1)。
ステップL:中間体(510mg、1.2mmol)にMeOH(20mL)溶液に塩化アンモニウム(386mg、7.2mmol)を加え、次に0℃でいくつかの回数に分けて亜鉛末(471mg、7.2mmol)を加え、且つ0℃で1時間撹拌する。混合物を濾過し、濾液を濃縮する。粗残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって純化し(DCM:エタノール=30:1〜10:1)、6−(3−アミノ−3−アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン−6−イル)−1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(370mg、74%)を得、白色固体である。LCMS(ESI)m/z:412(M+1)。
ステップM:0℃で、6−(3−アミノ−3−アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン−6−イル)−1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(206mg、0.5mmol)のDCM(5mL)溶液にNEt3(111mg、1.1mmol)を加え、次に5−ブロモバレリルクロリド(120mg、0.6mmol)のDCM(1mL)溶液を加える。混合物を0℃で1時間撹拌した後飽和NaHCO3溶液(10mL)に入れ、DCM(10mL*2)で抽出する。合併された有機相を乾燥し、濾過して濃縮する。粗残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって純化し(DCM:EA=1:1〜1:3)、中間体(235mg、81%)を得、白色固体である。LCMS(ESI)m/z:574(M+1)。
ステップN:0℃で、中間体(230mg、0.4mmol)のDMF溶液(5ml)にNaH(21mg、0.5mmol)を加えた後、0℃で2時間撹拌する。混合物を飽和NH4Cl水溶液(20mL)に入れ、EtOAc(20mL*2)で抽出する。合併された有機相を乾燥し、濾過して濃縮する。粗残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって純化し(DCM:EA=1:1〜1:2)、1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(3−(2−オキソモルホリノ−1−イル)−3−アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン−6−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(110mg、55%)を得、白色固体である。LCMS(ESI)m/z:494(M+1)。
ステップO:タンクに1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(3−(2−オキソモルホリノ−1−イル)−3−アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン−6−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−蟻酸エチル(109mg、0.2mmol)をアンモニアガスがあるエチレングリコール溶液(6mL)に入れ、混合物を80℃で16時間撹拌する。室温まで冷却した後、混合物をH2O(30mL)に入れ、EA(25mL*3)で抽出する。合併された有機相を乾燥し、濾過して濃縮する。粗残留物を調製型HPLC(HCOOH)によって純化し、タイトルの化合物(45mg、44%)を得、白色固体である。1HNMR(400MHz、DMSO−d6)δ7.65(brs、1H)、7.45(d、J=8.8Hz、2H)、7.38(brs、1H)、7.01(d、J=8.8Hz、2H)、3.82(s、3H)、3.61−3.53(m、4H)、3.28−3.26(m、2H)、3.03−2.98(m、4H)、2.74−2.72(m、1H)、2.19−2.16(m、2H)、1.74−1.68(m、4H)、1.60−1.57(m、2H)。LCMS(ESI)m/z:465(M+1)。
ステップB:6−アミノ−1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボン酸エチル(3.3g、0.01mol)のDMF(35mL)に2,2−ジ(2−ブロモエチル)−1,3−ジオキソラン(2.86g、0.01mol)及びK2CO3(1.38g、0.01mol)を加える。混合物を100℃まで加熱して16時間持続する。18℃まで冷却した後、混合物を水(100mL)に注ぎ、EtOAc(100mL*2)で抽出する。有機層を塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して濃縮する。粗残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって純化し(PE:EA=1:1)、1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(1,4−ジオキサン−8−アザスピロ[4,5]デカン−8−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボン酸エチル(0.9g、20%)を得、白色固体である。
ステップC:1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(1,4−ジオキサン−8−アザスピロ[4,5]デカン−8−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボン酸エチル(700mg、1.54mmol)をアセトン(10mL)と水(1mL)との混合溶液に加え、その後TsOH・H2O(132mg、0.77mmol)を加える。混合物を50℃まで加熱して20時間撹拌する。反応液を冷却した後飽和NaHCO3溶液に注ぎ、EtOAc(30mL*2)で抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して濃縮する。粗残留物を薄層クロマトグラフィー(PE:EA=1:2)によって純化し、1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(4−オキソピぺリジン−1−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボン酸エチル(250mg、39%)を得、白色固体である。
ステップD:1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(4−オキソピぺリジン−1−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボン酸エチル(350mg、0.849mmol)のエタノール(6mL)溶液に酢酸アンモニウム(77mg、1.27mmol)及びNaBH3CN(107mg、1.69mmol)を加える。混合物を20℃で15時間撹拌する。混合物を水(50mL)に入れ、DCM(50mL)で抽出して分液し、水層を収集してから、冷凍乾燥により溶媒を除去し、6−(4−アミノピペリジン−1−イル)−1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボン酸エチル(300mg、粗生成物)を得、白色固体である。LCMS(ESI)m/z:414(M+1)。
ステップE:6−(4−アミノピペリジン−1−イル)−1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボン酸エチル(300mg、0.726mmol、粗生成物)をDMF(5mL)に溶解し、溶液にDIPEA(112mg、0.871mmol)及び5−ブロモバレリルクロリド(158mg、0.799mmol)を加える。混合物を20℃で16時間撹拌する。混合物をNH4Cl水溶液に注ぎ、EtOAc(300mL*2)で抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して濃縮する。粗残留物をTLC(EA)で純化し、6−(4−(5−ブロモバレルアミド)ピぺリジン−1−イル)−1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボン酸エチル(200mg、48%)を得、黄色固体である。LCMS(ESI)m/z:576(M+1)、578(M+3)。
ステップF:0℃で、6−(4−(5−ブロモバレルアミド)ピぺリジン−1−イル)−1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボン酸エチル(200mg、0.347mmol)のDMF(3mL)溶液にNaH(14mg、0.347mmol)を加え、次に反応物を20℃で16時間撹拌する。混合物をNH4Cl水溶液(30mL)に注ぎ、EA(30mL*2)で抽出し、無水Na2SO4で乾燥し、且つ粗残留物を濃縮して抽出した後、TLCで純化し(EA:エタノール=30:1)、1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(2−オキソ−[1,4’−ビピペリジン]−1’−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボン酸エチル(120mg、69%)を得、白色固体である。LCMS(ESI)m/z:596(M+1)。
ステップG:タンクに、1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(2−オキソ−[1,4’−ビピペリジン]−1’−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボン酸エチル(150mg、0.303mmol)をアンモニアガスがあるエチレングリコール溶液(8mL)に加える。混合物を80℃まで加熱して16時間持続する。混合物を水(30mL)に入れ、DCM(30mL*2)で抽出し、塩水で有機相を洗浄する。有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥して濃縮する。粗残留物を調製型HPLC(塩酸)によって純化し、1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(2−オキソ−[1,4’−ビピペリジン]−1’−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボキサミド(10mg、7%)を得、白色固体である。1HNMR(400MHz、DMSO−d6)δ7.67(brs、1H)、7.46(dd、J=6.8Hz、2.0Hz、2H)、7.40(brs、1H)、7.31(dd、J=6.8Hz、2.0Hz、2H)、4.25(s、1H)、3.83(s、3H)、3.76−3.72(m、2H)、3.70−3.65(m、2H)、3.16−3.13(m、2H)、3.09−2.98(m、4H)、2.22(t、J=6.0Hz、2H)、1.67−1.63(m、6H)、1.50−1.47(m、2H)。LCMS(ESI)m/z:567(M+1)。
ステップB:0℃で、4−(3−(メトキシカルボニル)−1−(4−メトキシフェニル)−1H−ピラゾール−5−ホルミルアミノ)ピぺリジン−1−カルボン酸tert-ブチル(1g、2.18mmol)のDMF(10mL)溶液にNaH(0.131g、3.27mmol)を加えた後、アリルホスゲン(0.524g、4.36mmol)を加える。混合物を20℃で16時間撹拌する。混合物を水(50mL)に入れ、EtOAc(50mL*2)で抽出し、塩水で洗浄して濃縮する。粗残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(EA=8:1〜3:1PE)によって純化し、4−(N−((アリルオキシ)カルボニル)−3−(メトキシカルボニル)−1−(4−メトキシフェニル)−1H−ピラゾール−5−ホルミルアミノ)ピぺリジン−1−カルボン酸tert−ブチル(700mg、59%)を得、無色液体である。LCMS(ESI)m/z:543(M+1)。
ステップC:4MのHCl/酢酸エチル(15mL)溶液に4−(N−((アリルオキシ)カルボニル)−3−(メトキシカルボニル)−1−(4−メトキシフェニル)−1H−ピラゾール−5−ホルミルアミノ)ピぺリジン−1−カルボン酸tert−ブチル(770mg、1.42mmol)を加える。反応液を25℃で3時間撹拌する。混合物を濃縮し、5−(((アリルオキシ)カルボニル)(ペリジン−4−イル)アミノカルボニル)−1−(4−メトキシフェニル)−1H−ピラゾール−3−カルボン酸メチル(600mg、95%)を得、白色固体である。
ステップD:0℃で、5−(((アリルオキシ)カルボニル)(ピペリジン−4−イル)アミノカルボニル)−1−(4−メトキシフェニル)−1H−ピラゾール−3−カルボン酸メチル(100mg、0.226mmol)のAcOH(4mL)溶液に2mLの亜硝酸ナトリウム(78mg、1.13mmol)水溶液を加える。混合物を25℃で3時間撹拌した後水(10mL)に注ぎ、EA(20mL*2)で抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して濃縮する。5−(((アリルオキシ)カルボニル)(1−ニトロソピペリジン−4−イル)アミノカルボニル)−1−(4−メトキシフェニル)−1H−ピラゾール−3−カルボン酸メチル(90mg、粗産物)を得、黄色固体である。LCMS(ESI)m/z:472(M+1)。
ステップE:5−(((アリルオキシ)カルボニル)(1−ニトロソピペリジン−4−イル)アミノカルボニル)−1−(4−メトキシフェニル)−1H−ピラゾール−3−カルボン酸メチル(450mg、0.849mmol)のAcOH(6mL)溶液に亜鉛末(276mg、4.24mmol)を加える。混合物を25℃で3時間撹拌した後水(20mL)に注ぎ、EtOAc(30mL*2)で抽出し、有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥して濃縮する。少量のAcOHを冷凍乾燥によって除去し、5−(((アリルオキシ)カルボニル)(1−アミノピペリジン−4−イル)アミノカルボニル)−1−(4−メトキシフェニル)−1H−ピラゾール−3−カルボン酸メチル(400mg、91%)を得、白色固体である。LCMS(ESI)m/z:458(M+1)。
ステップF:2−(2−クロロエトキシ)酢酸(181mg、1.31mmol)のDCM(5mL)溶液にHATU(399mg、1.05mmol)及びDIEA(225mg、1.75mmol)を加える。混合物を30分撹拌した後5−(((アリルオキシ)カルボニル)(1−アミノピペリジン−4−イル)アミノカルボニル)−1−(4−メトキシフェニル)−1H−ピラゾール−3−カルボン酸メチル(400mg、0.875mmol)を加える。反応混合物を25℃で16時間撹拌する。混合物を水(20mL)に注ぎ、DCM(30mL*2)で抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して濃縮する。粗残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーによって純化し(PE:EA=5:1〜1:1)、5−(((アリルオキシ)カルボニル)(1−(2−(2−クロロエトキシ)アセトアミド)ピぺリジン−4−イル)アミノカルボニル)−1−(4−メトキシフェニル)−1H−ピラゾール−3−カルボン酸メチル(400mg、79%)を得、黄色固体である。LCMS(ESI)m/z:578(M+1)。
ステップG:0℃で、5−(((アリルオキシ)カルボニル)(1−(2−(2−クロロエトキシ)アセトアミド)ピぺリジン−4−イル)アミノカルボニル)−1−(4−メトキシフェニル)−1H−ピラゾール−3−カルボン酸メチル(350mg、0.606mmol)のDMF(5mL)溶液にNaH(29mg、0.727mmol)を加える。混合物を25℃で1時間撹拌した後水(20mL)に注ぎ、DCM(30mL*2)で抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して濃縮し、5−(((アリルオキシ)カルボニル)(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)アミノカルボニル)−1−(4−メトキシフェニル)−1H−ピラゾール−3−カルボン酸メチル(300mg、91%)を得、白色固体である。LCMS(ESI)m/z:542(M+1)。
ステップH:5−(((アリルオキシ)カルボニル)(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)アミノカルボニル)−1−(4−メトキシフェニル))−1H−ピラゾール−3−カルボン酸メチル(360mg、0.664mmol)のDCM(4mL)溶液にテトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(76mg、0.066mmol)とモルフォリノ(200μL)を加える。混合物を25℃で16時間撹拌した後水(20mL)に注ぎ、DCM(30mL*2)で抽出する。合併された有機相を無水Na2SO4で乾燥して濃縮する。粗残留物をTLC(EA)で純化し、1−(4−メトキシフェニル)−5−((1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)アミノホルミル)−1H−ピラゾール−3−カルボン酸メチル(200mg、65%)を得、白色固体である。LCMS(ESI)m/z:458(M+1)。
ステップI:タンクに、アンモニアガスがあるエチレングリコール溶液(5mL)に1−(4−メトキシフェニル)−5−((1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)アミノホルミル)−1H−ピラゾール−3−カルボン酸メチル(200mg、0.452mmol)を加え、混合物を80℃で16時間撹拌する。混合物を水(50mL)に入れ、DCM(50mL*3)で抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して濃縮する。粗残留物を調製型HPLC(HCOOH)によって純化し、1−(4−メトキシフェニル)−N5−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−1H−ピラゾール−3,5−ジカルボキサミド(42mg、21%)を得、白色固体である。1HNMR(400MHz、DMSO−d6)δ8.56(d、J=8.0Hz、1H)、7.72(s、1H)、7.39−7.35(m、3H)、7.20(s、1H)、7.02(dd、J=7.2、2.0Hz、2H)、3.96(s、2H)、3.81−3.78(m、5H)、3.59−3.56(m、1H)、3.41−3.34(m、4H)、2.98−2.96(m、2H)、1.78−1.75(m、2H)、1.57−1.52(m、2H)。
ステップB:tert−ブチル−4−((メタンスルホニル)メトキシ)ピペリジノ−1−カルボン酸tert−ブチル(130g、0.466mol)のDMF(1L)溶液に、フタルイミドカリウム(92.3g、0.699mol)を加える。混合物を80℃で16時間撹拌する。混合物を水に注ぎ、白色固体を析出して濾過する。得る白色固体をDCMに溶解し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過する。濾液を濃縮し、必要な産物(55g、36%)を得、白色固体である。
ステップC:0℃で、tert−ブチル−4−(1,3−ジオキソイソインドリン−2−イル)ピペリジノ−1−蟻酸tert−ブチル(55g、0.167mol)のDCM(500mL)溶液に、TFA(100mL)を加える。該混合物を0℃で2時間撹拌した後、減圧して溶媒を除去し、粗産物を得、直接それを次のステップに用いる。
ステップD:0℃で、2−(ピペリジノ−4−イル)イソインドリン−1,3−クルジオン(30g、0.13mol)のAcOH(350mL)溶液に亜硝酸ナトリウム(18g、0.26mol)の水溶液(150mL)を加えた後混合物を30℃で3時間撹拌してから、混合物を水(500mL)に注ぎ、白色固体を析出し、濾過する。白色固体をDCMに溶解し、飽和NaHCO3溶液(300mL*4)で洗浄し、有機相を無水Na2SO4で乾燥し、濾過する。濾液を濃縮し、必要な産物(24.8g、73.4%)を得、白色固体である。
ステップE:0℃で、2−(1−ニトロソピペリジン−4−イル)イソインドリン−1,3−クルジオン(6.5g、0.025mol)のDCM(75mL)とMeOH(250mL)の混合溶液に亜鉛末(6.5g、0.1mol)と塩化アンモニウム(5.4g、0.1mol)を加え、該混合物を0℃で30分撹拌した後、15℃で1時間撹拌する。混合物を濾過し、濾液をDCM(300mL*6)で抽出し、合併された有機相を無水硫酸ナトリウムで乾燥して濾過する。粗残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(DCM:エタノール=20:1)によって純化し、2−(1−アミノピペリジン−4−イル)イソインドリン‐1,3−クルジオンを得、黄色固体である。
ステップF:2−(2−クロロエトキシ)酢酸(6.2g、0.0449mmol)、HATU(18.6g、0.049mmol)及びDIEA(6.8g、0.049mmol)をDMF(150mL)に加える。混合物を30℃で20分撹拌し、次に2−(1−アミノピペリジン−4−イル)イソインドリン−1,3−クルジオン(10.0g、0.0408mmol)を加える。混合物を30℃で16時間撹拌する。反応が完成した後、混合物を水(200mL)に入れ、白色固体を析出し、濾過する。固体をDCM(300mL)に溶解し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して濾過する。濾液を濃縮し、2−(2−クロロエトキシ)−N−(4−(1,3−−インドリン−2−イル)ピぺリジン−1−イル)アセトアミド(12.5g、83.9%)を得、白色固体である。
ステップG:0℃で、2−(2−クロロエトキシ)−N−(4−(ジオキソイソインドリン−2−イル)−ピぺリジン−1−イル)アセトアミド(12.5g、0.038mol)のDMF(300mL)溶液に水素化ナトリウム(1.5g、0.042mol)を加え、1時間を持続して完成する。混合物を0℃で30分撹拌する。反応が完成した後、混合物を水(300mL)に注ぐ。白色固体を析出してから、濾過する。白色固体をDCM(300mL)に溶解し、水で洗浄し、無水Na2SO4で乾燥し、濾過する。濾液を濃縮して産物(9.0g、79.6%)を得、白色固体である。
ステップH:2−(1−(3−オキソピロリジン)ピぺリジン−4−イル)イソインドリン−1,3−クルジオン(9.0g、0.027mol)のMeOH(300mL)溶液にメチルアミン(10.6mL、0.136mol)を加える。混合物を70℃で3時間撹拌し、反応が完成した後、減圧して溶媒を除去し、粗産物を得る。シリカゲルカラムクロマトグラフィーによって純化し、産物(2.0g、37%)を得、白色固体である。
ステップI:ジヒドロ−2H−ピラニル−4(3H)−オン(5g、0.05mmol)のMeOH(60mL)溶液にヒドラジン蟻酸tert−ブチル(7.92g、0.06mol)、酢酸(500μL)、及びNaBH3CN(6.3g、0.1mol)を加える。混合物を25℃で16時間撹拌した後、濃縮する。残留物をDCM(100mL)に溶解し、水(80mL)で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して濃縮する。粗残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(PE:PA=5:1〜1:1)によって純化し、2−(テトラヒドロ−2H−ピラニル−4−イル)カルバジン酸tert−ブチル(10g、92%)を得、白色固体である。
ステップJ:2−(テトラヒドロ−2H−ピラニル−4−イル)カルバジン酸tert−ブチル(11g、0.05mol)のDCM(100mL)溶液にトリフルオロ酢酸(10mL)を加える。混合物を25℃で16時間撹拌した後、濃縮し、粗生成物(テトラヒドロ−2H−ピラニル−4−イル)ヒドラジントリフルオロ酢酸塩(6g、粗生成物)を得、それを直接次のステップに用いる。
ステップK:(テトラヒドロ−2H−ピラニル−4−イル)ヒドラジントリフルオロ酢酸塩(6g、粗生成物)のMeOH(80mL)溶液に3−(フラニル−2−イル)−3−オキソプロピオン酸メチル(10g、51.7mmol)及びTsOH・H2O(9.8g、51.7mmol)を加える。混合物を60℃で16時間撹拌する。混合物を水(100mL)に入れ、EtOAc(100mL*2)で抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して濃縮する。粗産物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(PE:EA=10:1〜1:1)によって純化し、5−(フラニル−2−イル)−1−(テトラヒドロ−2H−ピラニル−4−イル)−1H−ピラゾール−3−カルボン酸メチル(3.7g、26%)を得、黄色固体である。LCMS(ESI)m/z:277(M+1)。
ステップL:5−(フラニル−2−イル)−1−(テトラヒドロ−2H−ピラニル−4−イル)−1H−ピラゾール−3−カルボン酸メチル(1g、3.62mmol)のMeCN(12mL)とH2O(6mL)の混合溶液にリン酸二水素ナトリウム(2.17g、18.1mmol)とNaClO2(3.27g、36.2mmol)を加える。混合物を25℃で16時間撹拌した後混合物を飽和の亜硫酸水素ナトリウムの水溶液(50mL)に注ぎ、EtOAc(50mL*2)で抽出し、塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して濃縮し、3−(メトキシカルボニル)−1−(テトラヒドロ−2H−ピラニル−4−イル)−1H−ピラゾール−5−カルボン酸(500mg、粗生成物)を得、黄色固体である。
ステップM:3−(メトキシカルボニル)−1−(テトラヒドロ−2H−ピラニル−4−イル)−1H−ピラゾール−5−カルボン酸(150mg、0.59mmol)のDMF(4mL)溶液にHATU(269mg、0.707mmol)、DIEA(152mg、1.18mmol)と4−(4−アミノピペリジン−1−イル)モルフォリノ−3−オン(117mg、0.59mmol)を加える。混合物を25℃で16時間撹拌した後水(30mL)に注ぎ、EtOAc(40mL*2)で抽出し、無水硫酸ナトリウムで乾燥して濃縮する。粗産物をTLC(EA)で純化し、5−((1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)アミノカルボニル−1−(テトラヒドロ−2H−ピラニル−4−イル)−1H−ピラゾール−3−蟻酸メチル(170mg、粗産物)を得、黄色油状物である。LCMS(ESI)m/z:436(M+1)。
ステップN:タンクに、アンモニアガスがあるエチレングリコール(10mL)溶液に5−((1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)アミノカルボニル−1−(テトラヒドロ−2H−ピラニル−4−イル)−1H−ピラゾール−3−蟻酸メチル(170mg、粗生成物)を加え、混合物を80℃で8時間撹拌する。冷却した後混合物を水(30mL)に注ぎ、DCM(30mL*2)で抽出する。有機相を無水Na2SO4で乾燥して濃縮する。粗残留物を調製型HPLCによって純化し、N5−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−(テトラヒドロ−2H−ピラニル−4−イル)−1H−ピラゾール−3,5−ジカルボキサミド(9.1mg、5%)を得、白色固体である。1HNMR(400MHz、DMSO−d6)δ8.48−8.43(m、2H)、7.53(s、1H)、7.31(m、1H)、7.24(m、1H)、5.35−5.29(m、1H)、3.97−3.94(m、4H)、3.80−3.79(m、2H)、3.55−3.53(m、1H)、3.45−3.41(m、6H)、3.01−3.98(m、2H)、2.12−2.07(m、2H)、1.87−1.80(m、4H)、1.61−1.60(m、2H)。
Tris−HCl緩衝液(50mM、pH8.3、150mMのNaCl)を用いてヒト又はネズミの凝固因子Xaの活性に対する抑制作用を測定する。50μLのヒト凝固因子Xa(Enzyme Research Laboratories, Inc;最終濃度は8.36nM)、又は50μLのネズミ凝固因子Xa(Enzyme Research Laboratories, Inc;最終濃度は57.5nM)の緩衝液を、Greiner 384マイクロタイタープレートに適合の孔に滴下する方法により、IC50を測定する。2%(V/V)DMSOを含む測定用緩衝液2μL(抑制されない対照組)又は各種の濃度の受験化合物を2%(V/V)DMSOを含む測定用緩衝液2μLに希釈し、且つ48μLの基質S−2222(Chromogenix;化学式:Bz−IIe−Glu(γ−OR)−Gly−Arg−pNA・HClR=H(50%)で、R=CH3(50%)である)測定用緩衝液を添加し、最終濃度は0.172mMである。該実験には受験化合物と酵素を事前に10分培養してから、基質S−2222を加えて100μLの最終体積を得ることで実験を開始する。
Ki<10μMの受験化合物は陽性であると考えられ、本発明はKi<1μMの化合物が好ましく、更にKi<0.1μMの化合物が好ましく、更にKi<0.01μMの化合物が好ましく、もっと一歩進んでKi<0.001μMの化合物が好ましい。上記実験方法によって、本発明のいくつかの化合物がKi<0.1μMということが測定されたため、本発明の化合物は効果的なXa因子阻害剤とすることができる。
緩衝液(10mMのHEPES緩衝液、pH7.4、2mMのCaCl2)を用いてヒトトロンビンの活性に対する抑制作用を測定する。Greiner 384マイクロタイタープレートに適合の孔を選べてIC50を測定する。ヒトトロンビン(Sigma会社;T8885)を含む緩衝液50μL、最終濃度が0.05NIH単位/mLであり、2%(V/V)DMSOを含む測定用緩衝液2μL(抑制されない対照組)、又は各種の濃度の受験化合物を2%(V/V)DMSOを含む測定用緩衝液2μLに希釈する;基質S−2238(Chromogenix;化学式:H−D−Phe−Arg−pNA・2HCl)を含む緩衝液48μLを加え、最終濃度は30μMである。該実験には受験化合物と酵素を事前に10分培養してから、基質を加えて100μLの最終体積を得ることで実験を開始する。
緩衝液(50mMのTris、pH8.2、20mMのCaCl2)を用いてヒトトリプシンの活性に対する抑制作用を測定する。Greiner 384マイクロタイタープレートに適合の孔を選べてIC50を測定する。ヒトトリプシン(Sigma会社;T6424)を含む緩衝液50μL、最終濃度が0.39BAEE単位/mLであり、2%(V/V)DMSOを含む測定用緩衝液2μL(抑制されない対照組)、又は各種の濃度の受験化合物を2%(V/V)DMSOを含む測定用緩衝液2μLに希釈する;基質S−2222(Chromogenix)を含む緩衝液は、最終濃度が30μMである。該実験には受験化合物と酵素を事前に10分培養してから、48μLの基質を加えて、100μLの最終体積を得ることで実験を開始する。
トロンビンの生成によって受験化合物がプロトロンビン酵素の活性に対する抑制作用を測定する。簡単に言えば、10mMのHEPES緩衝液及びpHが7.4で、2mMのCaCl2に12.5μLのヒト凝固因子Xaを培養し、最終濃度は0.5nmであり、且つ37℃で12.5μLのヒト血小板(1*107mL−1)を10分加える。25μLのプロトロンビンを加えて反応を始め、最終濃度は0.5μMである。2%(V/V)DMSOを含む測定用緩衝液2μL(抑制されない対照組)、又は各種の濃度の受験化合物を2%(V/V)DMSOを含む測定用緩衝液2μLに希釈する。20分後、最終濃度が50μMになるまで、48μLの基質S−2238(Chromogenix)を加えることでトロンビンの活性を測定する。
Claims (14)
- 式(I)に示される化合物又はその薬学的に許容される塩であって、
そのうち、
Xは3−9員炭素環又はそのベンゾ環、4−10員複素環又はそのベンゾ環から選択され、
Y、Zはそれぞれ独立に4−9員飽和複素環から選択され、
R1−3はそれぞれ独立にH、F、Cl、Br、I、CN、OH、SH、NH2、CHO、COOHから選択され、又は任意にR01に置換されるC1−10アルキル基又はヘテロアルキル基、C3−10シクロアルキル基又はヘテロシクロアルキル基、C3−10シクロアルキル基又はヘテロシクロアルキル基に置換されるC1−10アルキル基又はヘテロアルキル基から選択され、
R01はF、Cl、Br、I、CN、CH、OH、SH、NH2、CHO、COOH、R02から選択され、
R02はC1−10アルキル基、C1−10アルキルアミノ基、N,N−ジ(C1−10アルキル)アミノ基、C1−10アルコキシ基、C1−10アルキルアシル基、C1−10アルコキシカルボニル基、C1−10アルキルスルホニル基、C1−10アルキルスルフィニル基、C3−10シクロアルキル基、C3−10シクロアルキルアミノ基、C3−10複素環アルキルアミノ基、C3−10シクロアルコキシ基、C3−10シクロアルキルアシル基、C3−10シクロアルコキシカルボニル基、C3−10シクロアルキルスルホニル基、C3−10シクロアルキルスルフィニル基から選択され、
ヘテロ原子又はヘテロ原子団はそれぞれ独立に−C(=O)N(Rd3)−、−N(Rd4)−、−C(=NRd5)−、−S(=0)2N(Rd6)−、−S(=O)N(Rd7)−、−O−、−S−、=O、=S、−C(=O)O−、−C(=O)−、−C(=S)−、−S(=O)−及び/又はーS(=O)2−から選択され、
Rd3−d7はそれぞれ独立にH、R03から選択され、
R03はC1−10アルキル基、C1−10アルキルアシル基、C1−10アルコキシカルボニル基、C1−10アルキルスルホニル基、C1−10アルキルスルフィニル基、C3−10シクロアルキル基、C3−10環式アルキルアシル基、C3−10シクロアルコキシカルボニル基、C3−10環式アルキルスルホニル基、C3−10シクロアルキルスルフィニルから選択され、
R02、R03は任意に選択されてR001に置換され、
R001はF、Cl、Br、I、CN、OH、N(CH3)2、NH(CH3)、NH2、CHO、COOH、トリフルオロメチル基、アミノメチル基、ヒドロキシメチル基、メチル基、メトキシ基、ホルミル基、メトキシカルボニル基、メタンスルホニル基、メチルスルフィニル基から選択され、
R01、R001、ヘテロ原子又はヘテロ原子団の数はそれぞれ独立に0、1、2又は3から選択される;
任意に、R1とR2、R2とR3は共に同じ炭素原子又はヘテロ原子に接続されて5−
7員環を形成することを特徴とする式(I)に示される化合物又はその薬学的に許容される塩。 - Xは
から選択され、そのうちR11−16はそれぞれ独立にH、F、Cl、Br、I、CN、OH、SH、NH2、CHO、COOHから選択され、又は任意にR01に置換されるC1−10アルキル基又はヘテロアルキル基、C3−10シクロアルキル基又はヘテロシクロアルキル基、C3−10シクロアルキル基又はヘテロシクロアルキル基に置換されるC1−10アルキル基又はヘテロアルキル基から選択され、
D11は−C(Rd1)(Rd2)−、−C(=O)N(Rd3)−、−N(Rd4)−、−C(=NRd5)−、−S(=O)2N(Rd6)−、−S(=O)N(Rd7)−、−O−、−S−、−C(=O)O−、−C(=O)−、−C(=S)−、−S(=O)−又は−S(=O)2−から選択され、
Rd1、Rd2はそれぞれ独立にH、F、Cl、Br、I、CN、OH、SH、NH2、CHO、COOHから選択され、又は任意にR01に置換されるC1−10アルキル基又はヘテロアルキル基、C3−10シクロアルキル基又はヘテロシクロアルキル基、C3−10シクロアルキル基又はヘテロシクロアルキル基に置換されるC1−10アルキル基又はヘテロアルキル基から選択され、
他の変数は権利請求項1に定義されることを特徴とする請求項1に記載の上記化合物又はその薬学的に許容される塩。 - Yは
から選択され、そのうち、T31−32はそれぞれ独立にN又はC(Rt)から選択され、
D31−32はそれぞれ独立に単結合、−C(Rd1)(Rd2)−、−C(=O)N(Rd3)−、−N(Rd4)−、−C(=NRd5)−、−S(=0)2N(Rd6)−、−S(=O)N(Rd7)−、−O−、−S−、−C(=O)O−、−C(=O)−、−C(=S)−、−S(=O)−又はーS(=O)2−から選択され、且つ両者は同時に単結合でなく、
Rt、Rd1、Rd2はそれぞれ独立にH、F、Cl、Br、I、CN、OH、SH、NH2、CHO、COOHから選択され、任意にR01に置換されるC1−10アルキル基又はヘテロアルキル基、C3−10シクロアルキル基又はヘテロシクロアルキル基、C3−10シクロアルキル基又はヘテロシクロアルキル基に置換されるC1−10アルキル基又はヘテロアルキル基から選択され、
D31−32がC(Rd1)(Rd2)から選択される時、D31とD32は任意に接続されて3−6員環を形成し、
他の変数は請求項1に定義されることを特徴とする請求項1に記載の上記化合物又はその薬学的に許容される塩。 - Zは
から選択され、そのうち、T41はN又はC(Rt)から選択され、
D41−45における0−3個はそれぞれ独立に単結合、−C(=O)N(Rd3)−、−N(Rd4)−、−C(=NRd5)−、−S(=0)2N(Rd6)−、−S(=O)N(Rd7)−、−O−、−S−、−C(=O)O−、−C(=O)−、−C(=S)−、−S(=O)−又はーS(=O)2−から選択される;他はC(Rd1)(Rd2)から選択され、
Rt、Rd1、Rd2はそれぞれ独立にH、F、Cl、Br、I、CN、OH、SH、
NH2、CHO、COOHから選択され、又は任意にR01に置換されるC1−10アルキル基又はヘテロアルキル基、C3−10シクロアルキル基又はヘテロシクロアルキル基、C3−10シクロアルキル基又はヘテロシクロアルキル基に置換されるC1−10アルキル基又はヘテロアルキル基から選択され、
他の変数は権利請求項1に定義されることを特徴とする請求項1に記載の上記化合物又はその薬学的に許容される塩。 - 1)4−(4−(1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−3−(トリフルオロメチル)−4,5−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−6(7H)−イル
)ピぺリジン−1−イル)モルホリン−3−オン;
2)1−(4−メトキシフェニル)−6−(2’−オキソ−[1,1’ −ジピペリジン]−4−イル)−3−(トリフルオロメチル)−5,6−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−7(4H)−オン;
3)1−(4−メトキシフェニル)−6−(1−(2−オキソピロリジン−1−イル)−ピぺリジン−4−イル)−3−(トリフルオロメチル)−5,6−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−7(4H)−オン;
4)1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(2’−オキソー[1,1’− ジピペリジン]−4−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボキサミド;
5)1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(2’−オキソー[1,1’− ジピペリジン]−4−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボニトリル;
6)N’−シアノ−1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(2’−オキソー[1,1’− ジピペリジン]−4−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボキサミジン;
7)1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボキサミド;
8)1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(1−(2−オキソピロリジン−3−イル)ピぺリジン−4−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボキサミド;
9)1−(4−クロロフェニル)−7−オキソ−6−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボキサミド;
10)7−オキソ−6−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−1−(4−(トリフルオロメチル)フェニル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボキサミド;
11)1−(4−(ジフルオロメチル)フェニル)−7−オキソ−6−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボキサミド;
12)1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(3−(2−オキソピロリジン−1−イル)−3−アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン−6−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボキサミド;
13)1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(3−(3−オキソモルホリノ)−3−アザビシクロ[3.1.0]ヘキサン−6−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボキサミド;
14)1−(4−メトキシフェニル)−7−オキソ−6−(2−メトキシフェニル−[1,4’−ジピペリジン]−1’−イル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−3−カルボキサミド;
15)1−(4−メトキシフェニル)−N5−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−1H−ピラゾール−3,5−ジカルボキサミド;
16)1−(4−メトキシフェニル)−N5−メチル−N5−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−1H−ピラゾール−3,5−ジカルボキサミド;
17)N5−エチル−1−(4−メトキシフェニル)−N5−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−1H−ピラゾール−3,5−ジカルボキサミド;
18)N5−シクロプロピル−1−(4−メトキシフェニル−N5−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−1H−ピラゾール−3,5−ジカルボキサミド;19)1−(4−メトキシフェニル)−N5−(1−(3−オキソモルホリノ)ピロリジン−3−イル)−1H−ピラゾール−3,5−ジカルボキサミド;
20)N5−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−1−(テトラヒドロ−2H−ピラン−4−イル)−1H−ピラゾール−3,5−ジカルボキサミド;
21)1−(1−(メチルスルホニル)ピぺリジン−4−イル)−N5−(1−(オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−1H−ピラゾール−3,5−ジカルボキサミド;22)1−(4−メトキシシクロヘキシル)−N5−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−1H−ピラゾール−3,5−ジカルボキサミド;
23)4−(4−(1−(4−(ジフルオロメトキシ)フェニル)−7−オキソ−3−(トリフルオロメチル)−4,5−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−6(7H)−イル)ピぺリジン−1−イル)モルホリン−3−オン;
24)4−(4−(1−(6−クロロナフタレン−2−イル)−7−オキソ−3−(トリフルオロメチル)−4,5−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−6(7H)−イル)ピぺリジン−1−イル)モルホリン−3−オン;
25)2−フルオロ−5−(7−オキソ−6−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−3−(トリフロロメチル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−1−イル)ベンゾニトリル;
26)4−(4−(1−(3−アミノベンズ[d]イソオキサゾール−5−イル)−7−オキソ−3−(トリフルオロメチル)−4,5−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−6(7H)−イル)ピぺリジン−1−イル)モルホリン−3−オン;
27)3−(7−オキソ−6−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−3−(トリフルオロメチル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−1−イル)ベンゾニトリル;
28)4−(4−(1−(3−フルオロ−4−メトキシフェニル)−7−オキソ−3−(3−(トリフルオロメチル)−4,5−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−6(7H)−イル)ピぺリジン−1−イル)モルホリン−3−オン;
29)4−(4−(1−(3−フルオロナフタレン−2−イル)−7−オキソ−3−(3−(トリフルオロメチル)−4,5−ジヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−6(7H)−イル)ピぺリジン−1−イル)モルホリン−3−ケトン;
30)2−(ジフルオロメトキシ)−5−(7−オキソ−6−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−3−(トリフルオロメチル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−1−イル)ベンゾニトリル;
31)3−(7−オキソ−6−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−3−(トリフルオロメチル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−1−イル)ベンズアミド;
32)2−フルオロ−5−(7−オキソ−6−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−3−(トリフルオロメチル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−1−イル)ベンズアミド;及び
33)2−(ジフルオロメトキシ)−5−(7−オキソ−6−(1−(3−オキソモルホリノ)ピぺリジン−4−イル)−3−(トリフルオロメチル)−4,5,6,7−テトラヒドロ−1H−ピラゾロ[3,4−c]ピリジン−1−イル)ベンズアミドから選択されることを特徴とする請求項12に記載の上記化合物又はその薬学に許容される塩。
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