TW201439320A - 紅血球保存方法 - Google Patents

Abstract

本發明係關於保存紅血球之方法，其包含以下步驟：獲得紅血球濃縮物；使該紅血球濃縮物接受氣體系統處理，該氣體系統包括65體積%至100體積%之氙氣及視情況包括0體積%至35體積%之一或多種壓載氣體；及，將已接受該氣體系統處理之該紅血球濃縮物維持在高於該紅血球濃縮物之凝固點且最高溫度約30℃之溫度下。

Description

紅血球保存方法

本發明主張於2012年11月30日申請之美國臨時專利申請案第61/731,944號之優先權，該案係以引用方式併入本文中。

本發明係關於血液保存方法，具體而言係關於供體血液(即，壓積紅血球(紅血球濃縮物))之保存。

廣泛使用之紅血球保存方法涉及自供體獲得呈壓積紅血球(紅血球濃縮物)形式且白血球含量有所降低之紅血球(例如，使用血球分離方法，或藉由自所供給全血分離)，以及後續的將所獲得紅血球濃縮物在1℃至6℃範圍內之溫度下於塑膠袋中儲存42天之時段。例如，此方法目前係藉助使用由Haemonetics公司(Baintree,MA,USA)及Terumo BCT公司(Lakewood,CO,USA)生產之血球分離裝置及由聚氯乙烯與塑化劑鄰苯二甲酸雙(2-乙基己基)酯(DEHP，CAS編號117-81-7)製造之血液組份用袋總成(亦與血球分離裝置一起供應)來實施。僅約20%之RBC係使用此方法來收集，大部分RBC係自所供給全血分離而來。對於血小板則係相反的。

自供體將輸注用紅血球(RBC)收集至CPD或CP2D抗凝血保存溶液中。藉由離心方法分離RBC，並添加供長期儲存之溶液(例如，AS-3)。藉由過濾去除白血球，且在輸注前將RBC/AS-3在1-6℃下於DEHP塑膠化PVC袋中儲存至多42天。眾所周知，DEHP塑化劑對RBC具有重要的保護效應，從而可在整個儲存過程中降低溶血之量。期望將此 儲存溶血及其他儲存損害降至最低，從而向輸注受體提供最大治療益處，以及將與RBC輸注相關之潛在不利後遺症降至最低。DEHP塑化劑(用於製造該等袋)在RBC之儲存過程中部分地溶解於紅血球濃縮物中，藉此自袋材料擴散且對紅血球發揮額外保存作用。已顯示(Dumont Larry J.等人，Exploratory in vitro study of red blood cell storage containers formulated with an alternative plasticizer. Transfusion,2012年7月52(7)：1439-1445)，DEHP塑化劑之存在降低儲存紅血球濃縮物期間溶解之紅血球的數量。

紅血球濃縮物中之DEHP塑化劑分解成有毒組份，該等有毒組份中之一者即係鄰苯二甲酸單乙基己基酯(MEHP)。因此，將紅血球保存於由含有DEHP塑化劑之材料製造之袋中之缺點在於，患者在輸注紅血球濃縮物單元後具有中毒之危險。在多次輸注之情形下可極顯著增加所指示負面結果。鑒於此情形，較佳地將紅血球濃縮物儲存於由不含DEHP塑化劑之材料製得之袋中。由於在某些高風險患者群體中具有理論上不利的效應，故期望找到DEHP之替代作為RBC儲存袋之組份。然而，在此情形下，保存效應(因DEHP塑化劑之存在產生)丟失，且因此，在儲存期間溶解之紅血球之數量增加。

闡述於2010年1月14日公開之US 2010/0009334中之血小板保存方法已為人所知。此方法涉及自獲自個體之血液獲得血小板濃縮物，將血小板血漿保存在含有65%至100%氙之氣體介質中及3.5atm至5atm之壓力下，隨後將血小板濃縮物冷卻至大約1℃至6℃範圍內之溫度，並在上文所指示溫度及氣體介質壓力之條件下儲存。藉由血球分離獲得血小板。此方法使得血小板之儲存時段延長。

然而，如實際經驗顯示，此方法於保存其他血球(例如，紅血球)之應用之特徵為具有眾多缺點。首先，此方法氾濫使用氣體混合物，該氣體混合物除氙以外包括氧或大氣。然而，氧在紅血球儲存期間之 存在刺激紅血球溶解(溶血)。紅血球在儲存期間之溶血導致最終產物之品質不那麼令人滿意，即，紅血球濃縮物中完整細胞之數量較低，此在輸注至患者後損害該紅血球濃縮物之效率。甚至更重要的是因所輸注RBC中之溶血較高而造成不利輸注效應。在美國，若超過1%之紅血球濃縮物發生溶血，則認為紅血球濃縮物於血液輸注而言係不可接受的。在其他國家，對於血液輸注可接受之紅血球濃縮物而言，溶血之量必須低至紅血球濃縮物之0.8%。

鑒於目前的技術狀態，業內需要研發保存紅血球濃縮物之方法，該方法確保該紅血球濃縮物儲存不少於42天之時段且不會顯著降低紅血球品質且使得能夠使用未使用DEHP塑化劑製造之塑膠袋。

本發明係關於保存紅血球濃縮物之改良方法，該方法確保該紅血球濃縮物儲存不少於42天之時段且不會顯著降低紅血球品質且使得能夠使用未使用DEHP塑化劑製造之塑膠袋。

本發明係關於血液保存醫藥，且具體而言係關於壓積紅血球(紅血球濃縮物)之保存。在本發明之一個非限制性實施例中，提供將紅血球濃縮物(提前自全血獲得且置於袋中)維持於不包括氧氣之氣體系統中之紅血球保存方法。在此實施例之一個非限制性態樣中，氣體系統包括天然存在於地球大氣中海平面處之氙含量。在此實施例之另一非限制性態樣中，氣體系統包括大於約10體積%之氙含量。在此實施例之再一非限制性態樣中，氣體系統包括大於約50體積%之氙含量。在此實施例之又一非限制性態樣中，氣體系統包括約65%至約100體積%之氙含量。氙(Xe)係惰性(noble、inert)元素氣體，其係海平面處空氣中比例極小(小於1/1,000%)之常見組份。其在正常生物條件下不具反應性或為「惰性」。氙係可易於擴散之氣體，其既不能為身體所用亦不能由身體產生。氙可視情況與含量為0體積%至35體積%之一或 多種壓載氣體(例如，氮、惰性氣體、二氧化碳)組合。氙氣或氙氣與壓載氣體之混合物所包括之氧量通常小於5體積%，通常小於2體積%，更通常小於1體積%，再更通常小於0.5體積%，又更通常小於0.1體積%，且又更通常為約0體積%。氣體系統中之氙量可為65體積%至100體積%之任一量(例如，65%、65.1%、65.2%...99.8%、99.9%、100%)且可包括該等值內之任一範圍。同樣，當一或多種壓載氣體包括在氣體系統中時，氣體系統中壓載氣體之量可為0體積%至35體積%之任一量(例如，0%、0.1%、0.2%...34.8%、34.9%、35%)且可包括該等值內之任一範圍。壓載氣體在使用時通常為氮及/或氬；然而，可將其他惰性氣體應用至紅血球濃縮物。將氣體系統引入容器中之紅血球濃縮物中以使紅血球濃縮物部分地或完全地經氣體系統飽和。通常，紅血球濃縮物經氣體系統至少約75%飽和，通常經氣體系統至少約80%飽和，更通常經氣體系統至少約85%飽和，再更通常經氣體系統至少約90%飽和，又更通常經氣體系統至少約95%飽和，且又更通常經氣體系統至少約98%飽和。在一個非限制性佈置中，容器之至少一部分可讓氣體混合物通透從而使得氣體混合物可經由擴散穿過容器引入容器中及/或自其去除；然而，此並非係必需的。在一個非限制性組態中，容器係呈可或可不包括DEHP塑化劑之由聚氯乙烯製得之袋形式。容器之大小具有非限制性。一個非限制性大小係可含有至少200ml紅血球濃縮物之容器。在另一非限制性組態中，容器位於配備有可讓氣體混合物通透之蓋子之氣密性密封器皿中。器皿可或可不透過氣體混合物。在容器位於氣密性密封室中時，容器中之紅血球濃縮物可視情況在氣體混合物存在下且在高於1atm之壓力下且不另外泵送氣體混合物之情形下保存。氣密性密封室中之紅血球濃縮物之可選冷卻可自氣密性密封室中之氣體混合物壓力穩定之時刻開始，且該穩定係因紅血球濃縮物經氣體混合物飽和而達成。

在本發明之一個非限制性態樣中，當將氣體系統引入紅血球濃縮物中時，氣體系統之壓力通常不超過約4atm。通常，氣體系統之壓力為至少約1atm。出於本發明之目的，大氣壓力為1atm(760托)。通常，氣體系統之壓力小於約10atm。在本發明之一個非限制性實施例中，氣體系統在引入紅血球濃縮物中時之壓力為約1atm至4atm(例如，1atm、1.1atm、1.2atm....3.8atm、3.9atm、4atm)且可包括該等數值內之任一範圍。在本發明之一個非限制性態樣中，氣體系統在引入紅血球濃縮物中時之壓力大於大氣壓力(例如，1atm)。

在本發明之另一及/或替代非限制性態樣中，當紅血球濃縮物在高於紅血球濃縮物之凝固點至最高約30℃之溫度(例如，0.01℃、0.02℃....29.98℃、29.99℃、30℃)之溫度下時，可將氣體系統引入紅血球濃縮物中。在將氣體系統引入紅血球濃縮物中時，容器中紅血球濃縮物之溫度可維持在恆定溫度下或有所變化(例如，降低、提高，等)。在一個非限制性實施例中，當紅血球濃縮物在最高約25℃之溫度之溫度下時，將氣體系統引入紅血球濃縮物中。在另一非限制性實施例中，當紅血球濃縮物在最高約23℃之溫度之溫度下時，將氣體系統引入紅血球濃縮物中。在另一非限制性實施例中，當紅血球濃縮物在為約6℃至23℃之溫度下時，將氣體系統引入紅血球濃縮物中。

在本發明之再一及/或替代非限制性態樣中，通常在自人類或其他類型之哺乳動物抽出血液後約98小時(例如，0.01小時、0.02小時....97.98小時、97.99小時、98小時)內將氣體系統引入紅血球濃縮物中。在一個非限制性實施例中，在自人類或其他類型之哺乳動物抽出血液後約72小時內將氣體系統引入紅血球濃縮物中。在另一非限制性實施例中，在自人類或其他類型之哺乳動物抽出血液後約48小時內將氣體系統引入紅血球濃縮物中。在另一非限制性實施例中，在自人類或其 他類型之哺乳動物抽出血液後約24小時內將氣體系統引入紅血球濃縮物中。

在本發明之又一非限制性態樣中，在氣體系統(即，氙、氙加壓載氣體)引入紅血球濃縮物中之前將氧自包括紅血球濃縮物之容器去除或吹掃；然而，此並非係必需的。通常，將紅血球濃縮物於真空環境(例如，0atm、0.01atm、0.02atm...0.97atm、0.98atm、0.99atm)中暴露足夠時間段(例如，0.1秒、0.2秒、0.3秒...599.8秒、599.9秒、600秒)以自包括紅血球濃縮物之容器去除至少約75%之氧，通常自包括紅血球濃縮物之容器去除至少約80%之氧，更通常自包括紅血球濃縮物之容器去除至少約85%之氧，再更通常自包括紅血球濃縮物之容器去除至少約90%之氧，且又更通常自包括紅血球濃縮物之容器去除至少約95%之氧。因此，75%至100%中任一量(例如，75%、75.1%、75.2%....99.8%、99.9%、100%)之氧皆可在氣體系統引入紅血球濃縮物中之前自包括紅血球濃縮物之容器去除。紅血球濃縮物所接受真空之真空度及時間段沒有限制性。自包括紅血球濃縮物之容器去除或吹掃氧之方法亦使得去除溶解於紅血球濃縮物中之氧。

在本發明之又一及/或替代非限制性態樣中，在將氣體系統引入紅血球濃縮物中後，將紅血球濃縮物維持在高於紅血球濃縮物之凝固點之冷藏溫度(即，小於環境溫度)下。通常，冷藏溫度不超過約25℃，通常不超過約20℃，更通常不超過約15℃，再更通常不超過約10℃，且又更通常不超過約6℃。在一個非限制性實施例中，可將紅血球濃縮物在該冷藏溫度下維持至少約42天，且使得紅血球濃縮物之溶血不超過約1%，通常使得紅血球濃縮物之溶血不超過約0.8%，通常使得紅血球濃縮物之溶血不超過約0.7%，且更通常使得紅血球濃縮物之溶血不超過約0.6%。

在本發明之另一及/或替代非限制性態樣中，可在冷藏紅血球濃 縮物之前視情況將氣體系統引入紅血球濃縮物中一次以上。當在冷藏紅血球濃縮物之前將氣體系統引入紅血球濃縮物中一次以上時，用氣體系統對紅血球濃縮物加壓，然後吹掃氣體系統，且然後再用氣體系統加壓。加壓及吹掃步驟之數量具有非限制性。通常，對紅血球濃縮物加壓、吹掃且然後再加壓不超過5次，且通常不超過4次，更通常不超過3次，且又更通常不超過2次。自紅血球濃縮物吹掃氣體系統可在真空下實施；然而，此並非係必需的。在將氣體系統首次引入紅血球濃縮物中之前，用氣體系統對紅血球濃縮物加壓，然後吹掃氣體系統，且然後用氣體系統再加壓，以在初始吹掃紅血球濃縮物之空氣後進一步去除留於紅血球濃縮物中之任何氧。自紅血球吹掃氣體系統可在與自紅血球濃縮物去除氧類似之參數下進行；然而，此並非係必需的。可視情況攪動或換言之振搖紅血球濃縮物以促進氧自紅血球濃縮物之去除。

在本發明之再一及/或替代非限制性態樣中，紅血球濃縮物在經氣體系統加壓之後且在冷藏紅血球濃縮物之前及/或期間可視情況進行攪動或換言之振搖，以促進氣體系統與紅血球濃縮物之混合。攪動之時間可為約0.002小時至24小時(例如，0.0021小時、0.0022小時...23.99小時、24小時)。在一個非限制性實施例中，攪動之時間不超過約10小時，通常不超過約5小時，且更通常不超過約3.5小時。

在本發明之又一及/或替代非限制性態樣中，在將紅血球濃縮物冷藏一段時間之後，且在對紅血球濃縮物之氣體系統減壓之前或之後，可視情況攪動紅血球濃縮物。在一個非限制性實施例中，在對紅血球濃縮物之氣體系統減壓之前攪動紅血球濃縮物。攪動之時間可為約0.002小時至10小時(例如，0.0021小時、0.0022小時...9.99小時、9小時)。在一個非限制性實施例中，攪動之時間不超過約2小時，通常不超過約1小時，更通常不超過約0.5小時，且再更通常不超過約0.2小 時。

在本發明之又一及/或替代非限制性態樣中，在已對紅血球濃縮物之氣體系統減壓且視情況攪動之後，視情況使紅血球濃縮物自冷藏溫度升溫至環境溫度(例如，25℃-27℃)。在一個非限制性實施例中，使紅血球濃縮物升溫之時間段可為約0.002小時至10小時(例如，0.0021小時、0.0022小時...9.99小時、9小時)。如應瞭解，可使用更長之升溫時間。

在本發明之另一及/或替代非限制性態樣中，在已對紅血球濃縮物之氣體系統減壓且視情況攪動之後，在約72小時內、通常在約36小時內、更通常在約24小時內且再更通常在約12小時內在血液輸注中使用紅血球濃縮物。

在本發明之再一非限制性態樣中，用於紅血球濃縮物之容器不包括DEHP塑化劑。本發明之方法能夠將紅血球濃縮物保存至少約42天，且不包括DEHP塑化劑之容器中之紅血球濃縮物之溶血不超過約1%。該方法較先前保存方法有顯著進步，該等先前保存方法需要DEHP塑化劑之保存效應來使紅血球濃縮物獲得42天之保存時間。本發明之方法克服了保存紅血球濃縮物之技術中之此前者限制。

本發明之一個非限制性目標係提供保存紅血球濃縮物之方法。

本發明之另一及/或替代非限制性目標係提供保存紅血球濃縮物而不使用包括DEHP塑化劑之所製造容器之方法。

本發明之再一及/或替代非限制性目標係提供藉由使用包括氙氣之氣體系統保存紅血球濃縮物之方法。

本發明之又一及/或替代非限制性目標係提供藉由使用包括氙氣之氣體系統保存紅血球濃縮物之方法，且紅血球濃縮物之氧已部分地或完全地吹掃。

本發明之又一及/或替代非限制性目標係提供保存紅血球濃縮物 之方法，該方法確保該紅血球濃縮物儲存不少於42天之時段且不會顯著降低紅血球品質且使得能夠使用未使用DEHP塑化劑製造之塑膠袋。

本發明之另一及/或替代非限制性目標係提供保存紅血球濃縮物之方法，該方法降低紅血球濃縮物之溶血。

本發明之再一及/或替代非限制性目標係提供保存紅血球濃縮物之方法，該方法提高紅血球濃縮物之該三磷酸腺苷(ATP)含量。

本發明之又一及/或替代非限制性目標係提供紅血球容器系統，其用於保存紅血球之設計包括具有紅血球濃縮物之容器，且容器中之紅血球濃縮物係處於低於環境溫度之溫度下，且紅血球濃縮物至少部分地經包括氙氣之氣體系統飽和。

如附圖中所說明，根據本發明較佳實施例之以下詳細說明，將明瞭本發明之該等及其他目標、特徵及優點。

圖1係說明一袋紅血球濃縮物在暴露及未暴露於本發明之氣體系統時在42天後之溶血度之圖形；且圖2係說明一袋紅血球濃縮物在暴露及未暴露於本發明之氣體系統時在42天後之ATP含量之圖形。

現在參考附圖，其中所顯示內容僅係出於說明本發明之實施例之目的而非出於限制本發明之目的，本發明係關於保存紅血球濃縮物之改良方法。保存紅血球濃縮物之改良方法可利用或借助於未使用DEHP塑化劑製造之容器來達成。該方法包括使用氣體系統，該氣體系統係在儲存紅血球濃縮物期間引入紅血球濃縮物中。本發明亦係關於紅血球容器系統，其經設計以保存紅血球，其包含包括紅血球濃縮物之容器，且紅血球濃縮物至少部分地經氣體系統飽和，且氣體系統 所包括氙氣之濃度大於天然存在於大氣中之氙氣之濃度。

本發明之若干非限制性方法係如下來闡述：

方法A

1.在容器中獲得紅血球濃縮物；2.使容器中之紅血球濃縮物接受包括氙氣之氣體系統處理，該氙氣之濃度大於天然存在於大氣中之氙氣之濃度；及3.將已接受氣體系統處理之紅血球濃縮物維持在高於紅血球濃縮物之凝固點至最高約30℃之溫度之溫度下。

應瞭解，RBC可在RBC插入容器中期間及/或之後暴露於氙氣。

方法B

1.在容器中獲得紅血球濃縮物；2.使容器中之紅血球濃縮物接受氣體系統處理，該氣體系統包括濃度為65體積%至100體積%之氙氣且視情況包括0體積%至35體積%之一或多種壓載氣體；及3.將已接受氣體系統處理之紅血球濃縮物維持在高於紅血球濃縮物之凝固點至最高約30℃之溫度之溫度下。

方法C

1.在容器中獲得紅血球濃縮物；2.自包括紅血球濃縮物之容器中之紅血球濃縮物去除70-100%之氧；3.在氧去除步驟後使容器中之紅血球濃縮物接受包括氙氣之氣體系統處理，該氙氣之濃度大於天然存在於大氣中之氙氣之濃度；及4.將已接受氣體系統處理之紅血球濃縮物維持在高於紅血球濃縮物之凝固點至最高約30℃之溫度之溫度下。

方法D

1.在容器中獲得紅血球濃縮物； 2.自包括紅血球濃縮物之容器中之紅血球濃縮物去除70-100%之氧；3.使容器中之紅血球濃縮物接受氣體系統處理，該氣體系統包括濃度為65體積%至100體積%之氙氣且視情況包括0體積%至35體積%之一或多種壓載氣體；及4.將已接受氣體系統處理之紅血球濃縮物維持在高於紅血球濃縮物之凝固點至最高約30℃之溫度之溫度下。

在方法A至D中，氣體系統在引入容器中之紅血球濃縮物中時之壓力通常小於6atm，通常為1-4atm，更通常為1-3atm，且再更通常為1-2atm。在方法A至D中，在將氣體系統引入紅血球濃縮物中時，容器中之紅血球濃縮物之溫度通常不大於約25℃，且通常不大於約23℃。在方法A至D中，在將氣體系統引入容器中之紅血球濃縮物中時，容器中之紅血球濃縮物之溫度可維持在恆定溫度下或有所變化(例如，降低等)。在方法A至D中，可在將氣體系統引入容器中之紅血球濃縮物中之前、期間及/或之後視情況攪動或振搖包括紅血球濃縮物之容器。在方法A至D中，可在將氣體系統引入容器中之紅血球濃縮物中後將包括紅血球濃縮物之容器冷卻至不超過約6℃且大於紅血球濃縮物之凝固點之溫度。在方法A至D中，容器可視情況不含DEHP塑化劑。

本發明之更特定非限制性方法係如下：

方法E

1.在容器中獲得紅血球濃縮物；2.在真空環境中自容器中之紅血球濃縮物去除70-100%之氧；3.使容器中之紅血球濃縮物在氧去除步驟後在不超過約23℃之溫度下且在大於1atm且最大約4atm之壓力下接受氣體系統處理，該氣體系統包括65體積%至100體積%之氙及視情況0體積%至35體積% 之一或多種壓載氣體；及4.將已接受氣體系統處理之紅血球濃縮物維持在高於紅血球濃縮物之凝固點且最高約6℃之溫度下。

方法F

1.在容器中獲得紅血球濃縮物；2.在真空環境中自容器中之紅血球濃縮物去除70-100%之氧；3.使容器中之紅血球濃縮物在氧去除步驟後在約18℃至23℃之溫度下且在約1.01-2atm之壓力下接受氣體系統處理，該氣體系統包括65體積%至100體積%之氙及視情況0體積%至35體積%之一或多種壓載氣體；4.將容器中之紅血球濃縮物冷卻至高於紅血球濃縮物之凝固點且最高約6℃之溫度，及5.將已接受氣體系統處理之紅血球濃縮物在高於紅血球濃縮物之凝固點至最高約6℃之溫度之溫度下維持長達42天。

方法G

1.在容器中獲得紅血球濃縮物，其中該容器不含DEHP塑化劑；2.在真空環境中自容器中之紅血球濃縮物去除70-100%之氧；3.使容器中之紅血球濃縮物在氧去除步驟後在約18℃至23℃之溫度下且在約1.01-2atm之壓力下接受氣體系統處理，該氣體系統包括65體積%至100體積%之氙及視情況0體積%至35體積%之一或多種壓載氣體；4.在將氣體系統引入容器中之紅血球濃縮物中之前、期間及/或之後攪動或振搖容器中之紅血球濃縮物；5.將容器中之紅血球濃縮物冷卻至高於紅血球濃縮物之凝固點且最高約6℃之溫度，及6.將已接受氣體系統處理之紅血球濃縮物在高於紅血球濃縮物 之凝固點至最高約6℃之溫度之溫度下維持長達42天。

在方法E-G中，氣體系統在引入容器中之紅血球濃縮物中時之壓力通常小於6atm，通常為1-4atm，更通常為1-3atm，且再更通常為1-2atm。在方法E-G中，在將氣體系統引入紅血球濃縮物中時，容器中之紅血球濃縮物之溫度通常不大於約25℃，且通常不大於約23℃。在方法E-G中，在將氣體系統引入容器中之紅血球濃縮物中時，容器中之紅血球濃縮物之溫度可維持在恆定溫度下或有所變化(例如，降低等)。在方法E-G中，可在將氣體系統引入容器中之紅血球濃縮物中之前、期間及/或之後視情況攪動或振搖包括紅血球濃縮物之容器。在方法E-G中，可在將氣體系統引入容器中之紅血球濃縮物中後將包括紅血球濃縮物之容器冷卻至不超過約6℃且大於紅血球濃縮物之凝固點之溫度。在方法E-G中，容器可視情況不含DEHP塑化劑。

儘管不受限於本發明方法之任一理論，但相信，當紅血球濃縮物在一定壓力(例如，2atm)下保存在上文所指示組成之氣體混合物中時，氣體可擴散至紅血球濃縮物(包括紅血球本身)中。紅血球濃縮物在上文所指示壓力之條件下經氙飽和確保後續的該紅血球濃縮物在高於凝固點且最高約6℃之溫度下之儲存以及紅血球之活力及功能之保存。氙對紅血球之保存作用確保紅血球濃縮物儲存長達42天之時段，從而允許放棄使用借助於DEHP塑化劑製造之塑膠袋之想法。

另外，與已知方法相反，所提出方法消除氧自周圍環境穿過袋材料至紅血球濃縮物中之擴散，從而降低紅血球之溶血。

可視情況使用冷卻室來冷卻紅血球濃縮物及後續的儲存經冷卻紅血球濃縮物。

當實施所提出方法時，可將紅血球濃縮物置於可讓氣體混合物通透之容器中，且在放置具有紅血球濃縮物之容器之氣密性密封室中將紅血球濃縮物保存於氣體混合物中。具體而言，在將氣體混合物進 給至氣密性密封室(具有紅血球濃縮物之容器置於其中)中之前，將室抽真空以便自其去除氧。

可視情況使用配備有可讓氣體混合物通透之蓋子之氣密性密封器皿或由可讓氣體混合物通透之材料製得之袋(例如由聚氯乙烯製造而不含DEHP且通常用於儲存血液組份之袋)作為紅血球濃縮物之容器。

藉由紅血球濃縮物經氙飽和之期望水準(如上文所指示)確定紅血球濃縮物在壓力(例如，1.01-4atm)下於氣體混合物中保存之時間段。例如，當使用由可讓氣體混合物通透之材料製得之袋時，向其中放置至少200ml紅血球濃縮物，然後使接受高於1atm之壓力，此時間將為至少約1分鐘，通常小於約30小時，更通常至少約15分鐘，更通常至少約30分鐘，再更通常至少約1小時，且又更通常至少約3小時。

在一般情形下，可基於氣密性密封室(不另外泵送氣體混合物)中之氣體混合物壓力降低之停止(此指示紅血球濃縮物經氣體混合物組份飽和之停止)來確定紅血球濃縮物在壓力(例如，1.01atm、1.5atm、2atm等)下於氣體混合物中保存之持續時間。可視情況自氣密性密封室中之氣體混合物壓力穩定之時刻開始冷卻紅血球濃縮物。

在即將使用儲存後之紅血球濃縮物之前，可視情況將紅血球濃縮物在不超過大氣壓力(1大氣壓)之壓力及18℃至28℃(例如，升溫至環境溫度等)之溫度下保存至少足以將紅血球濃縮物自然加熱至上文所指示溫度之時段；然而，此並非係必需的。具體而言，可自冷卻室取出氣密性密封室，開封氣密性密封，且然後抽出具有紅血球濃縮物之袋，並在室溫及大氣壓力下保存足以將紅血球濃縮物自然加熱至室溫且足以使氣體系統在紅血球濃縮物於環境中升溫至環境溫度時自紅血球濃縮物逸出之時間段。為縮短氣體混合物組份在儲存時段後自容器中之紅血球濃縮物釋放或逃逸之時間段，可視情況攪動或振搖包括 紅血球濃縮物之容器及/或將其置於壓力或真空有所降低(如與大氣壓力相比)之條件下。

本發明實際上可出於保存紅血球(呈紅血球濃縮物形式)之目的借助於意欲用於儲存血液產品且由可透過氙氣之材料製得之習用袋(且該袋不含有DEHP塑化劑)來使用。可在本發明中使用能夠將氣體系統供應至可接受至多2-4atm之氣體系統壓力之氣密性密封室中之標準設備。亦可在本發明中使用儲存經保存血液產品之標準冷藏設備(習用冰箱)。

已根據實驗證實本發明之實際實施方案及獲得上文所指示結果(在長達42天之時段期間保存200ml紅血球濃縮物同時保持低水準之紅血球溶血方面)之可能性。

現在參考圖1-2，說明兩種不同紅血球濃縮物之測試結果。藉由編號2032識別第一紅血球濃縮物且藉由編號2086識別第二紅血球濃縮物。將每一試樣分至四個不同的容器中。用於每一試樣之容器中之兩者包括DEHP塑化劑且用於每一試樣之容器中之兩者不包括DEHP塑化劑。另外，對於每一試樣，容器中之兩者包括氙氣佔99.9體積%之氣體系統。該等圖形指示哪個容器包括或不含氙氣及/或DEHP塑化劑。容器之測試方案係如下：對於不含Xe氣之容器：

a.將非Xe單元於旋轉器上平坦放置3.5小時。

b.將非Xe單元與Xe單元同時置於血庫冰箱中。

對於包括Xe氣之容器：

a.將Xe單元平坦放置於預測試之氣密室中。

b.用真空將室排空以自Xe單元去除氧。

c.用4atm下之Xe氣對室加壓。

d.排放室之Xe氣。

e.用4atm下之Xe氣對室加壓。

f 排放室之Xe氣。

g.用4atm下之Xe氣對室加壓。

h.排放室之Xe氣。

i.用4atm下之Xe氣對室加壓。

j.將經加壓Xe單元於攪動器上放置3.5h。

k.將經加壓Xe單元與非Xe單元同時置於血庫冰箱中。

在Xe單元及非Xe單元在血庫冰箱中時，在42天的時段內定期檢查Xe單元以確保Xe單元中之壓力超過1atm。42天後，自血庫冰箱去除所有單元。在自血庫冰箱去除單元後，對該等單元實施以下程序：

1.立即將經壓Xe單元及非Xe單元於血小板往復水平攪動器上放置10分鐘。

2.藉由打開容器上之閥對所有單元減壓。

3.將所有單元置於台頂部上並保持3小時。

4.在保持3小時時段後，測試試樣之溶血%及ATP含量。

如圖1中說明，經氙氣處理之紅血球濃縮物試樣之溶血%小於未經氙氣處理之試樣之溶血%。在兩種試樣中，經氙氣處理之紅血球濃縮物試樣之溶血%顯著低於未經處理試樣之溶血%。對於包括DEHP塑化劑之容器，溶血量亦有所降低。另外，與包括DEHP塑化劑之容器且沒有氙氣之情形相比，藉由使用氙氣且不含DEHP塑化劑可降低溶血量。DEHP塑化劑添加至包括氙氣之容器中可進一步降低溶血。

現在參考圖2，兩種試樣指示，紅血球濃縮物在經氙氣處理時的ATP含量較高。

因此可以看出，在自前述說明明了之彼等目標中，尤其可有效實現上述目標，且由於可在所述構造中作出某些改變而不違背本發明之精神及範圍，故含於上文闡述中且顯示於附圖中之所有內容皆意欲 應理解為具有說明性而非具有限制意義。已參考較佳及替代實施例闡述了本發明。熟習此項技術者在閱讀並瞭解本文提供之本發明之詳細闡述後將明瞭修改及變更。本發明意欲包括所有該等修改及變更，只要其在本發明之範圍內即可。亦應瞭解，以下申請專利範圍意欲涵蓋本文中所闡述之本發明之所有一般及特定特徵，且對本發明之範圍之所有陳述(在語言上)皆可認為在此兩者之間。已參考較佳實施例闡述了本發明。較佳實施例以及本發明之其他實施例之該等及其他修改將自本文之揭示內容顯而易見，因此上述闡述性內容應理解為僅說明本發明而非限制本發明。意欲包括所有該等修改及變更，只要其在隨附申請專利範圍之範圍內即可。

Claims (24)

1. 一種保存紅血球之方法，其包含以下步驟：a.在容器中獲得紅血球濃縮物；b.使該紅血球濃縮物接受包括氙氣之氣體系統處理，該氙氣之濃度大於天然存在於大氣中之氙氣濃度；及c.將已接受該氣體系統處理之該紅血球濃縮物維持在高於該紅血球濃縮物之凝固點且最高溫度約30℃之溫度下。
2. 如請求項1所定義之方法，其中該氣體系統包括65體積%至100體積%之氙氣及0體積%至35體積%之至少一種壓載氣體。
3. 如請求項1所定義之方法，其中該氣體系統包括小於5體積%之氧。
4. 如請求項1所定義之方法，其進一步包括在向該紅血球濃縮物中添加該氣體系統之前先自該紅血球濃縮物去除70%至100%之氧之步驟。
5. 如請求項4所定義之方法，其中該去除氧之步驟係在真空環境中進行。
6. 如請求項1所定義之方法，其中該氣體系統係依約1atm至10atm之壓力添加至該紅血球濃縮物中。
7. 如請求項6所定義之方法，其中該氣體系統係依高於1atm之壓力添加至該紅血球濃縮物中。
8. 如請求項1所定義之方法，其中該容器不含DEHP塑化劑。
9. 如請求項1所定義之方法，其進一步包括以下步驟：a)在將該氣體系統添加至該紅血球濃縮物中之前，b)在該將該氣體系統添加至該紅血球濃縮物中之期間，c)在該將該氣體系統添加至該紅血球濃縮物中之後，及其組合，攪動該容器中之該紅血球濃 縮物。
10. 如請求項1所定義之方法，其中該氣體系統在引入該紅血球濃縮物中時之壓力為1atm至4atm、1atm至3atm或1atm至2atm。
11. 如請求項1所定義之方法，其中在將該氣體系統引入該紅血球濃縮物中時，該紅血球濃縮物之溫度高於該紅血球濃縮物之該凝固點且不高於約23℃。
12. 如請求項11所定義之方法，其中在將該氣體系統引入該紅血球濃縮物中時，該紅血球濃縮物之該溫度係維持在恆定溫度下或具有可變溫度。
13. 如請求項1所定義之方法，其進一步包括在添加該氣體系統之後，冷卻該紅血球濃縮物至高於該紅血球濃縮物之該凝固點且不高於約6℃之溫度之步驟。
14. 如請求項13所定義之方法，其中在添加該氣體系統之後冷卻該紅血球濃縮物之該步驟係在冷卻室中進行，該冷卻室之設計在於將該經冷卻紅血球濃縮物儲存長達42天。
15. 如請求項2所定義之方法，其中該壓載氣體係氮氣、氬氣或其混合物。
16. 如請求項1所定義之方法，其中該容器之至少一部分可讓該氣體混合物通透且該氣體混合物係經由擴散穿過該容器而引入該容器中及自該容器中排出。
17. 如請求項16所定義之方法，其中該容器係位於配備有可讓該氣體混合物通透之蓋子之氣密性密封器皿中，該器皿不可讓該氣體混合物通透。
18. 如請求項1所定義之方法，其中當該容器位於該氣密性密封室中時，該容器中之該紅血球濃縮物係保存在該氣體混合物中及高於1atm之壓力下且不另外泵送該氣體混合物之情形下，且紅血 球濃縮物之冷卻係自該氣密性密封室中之氣體混合物壓力穩定之時刻開始，且該穩定係因紅血球濃縮物經該氣體混合物飽和所達成。
19. 如請求項1所定義之方法，其中袋子係由聚氯乙烯製得，其不含DEHP塑化劑。
20. 一種設計用於保存紅血球之紅血球容器系統，其包含包括紅血球濃縮物之容器，該容器中之該紅血球濃縮物處於低於環境溫度之溫度下，該紅血球濃縮物至少部分地經氣體系統飽和，該氣體系統所包括氙氣，其濃度大於天然存在於大氣中之氙氣濃度。
21. 如請求項20所定義之紅血球容器系統，其中包括該紅血球濃縮物之該容器包括小於5體積%之氧。
22. 如請求項20所定義之紅血球容器系統，其中該容器不含DEHP塑化劑。
23. 如請求項20所定義之紅血球容器系統，其中該容器係撓性塑膠容器。
24. 如請求項20所定義之紅血球容器系統，其中該容器係處於大於1大氣壓之壓力下。