TW201430344A - 粗糙肌膚的評估方法 - Google Patents

Abstract

本發明的課題係提供使用不會給使用者造成負擔、又可簡便且確實地評估是否為粗糙肌膚的生物化學指標的新型評估方法。藉由膠帶剝離法等非侵襲式地採集皮膚角質層，藉由測定其中所含有的半乳糖凝集素-7的表現量來評估粗糙肌膚的程度。

Description

粗糙肌膚的評估方法

本發明涉及粗糙肌膚的評估方法。

人體的皮膚經常與外界接觸，會受到各種各樣的刺激。其代表性刺激為紫外線。即使也有紫外線不使肌膚在外觀上有較大變化的情況，但也會誘發皮膚細胞的DNA裂解、膠原蛋白的變性等而成為皮膚老化的原因。紫外線經常不斷地給肌膚施加壓力。且對於女性來說，洗臉、化妝等日常的行為也會給皮膚施加刺激，此種皮膚的外部刺激蓄積時，會形成被認為是肌膚粗糙的狀態。肌膚粗糙雖指一時的症狀，但該症狀持續的狀態即稱為“粗糙肌膚”。

“粗糙肌膚”是指乾燥、乾巴巴的皮膚症狀持續的狀態的總稱，其最顯著的臨床表現為鱗屑。此種粗糙肌膚狀態和皮膚的屏障功能之間存在密切的關係，已知粗糙肌膚狀態越嚴重，作為屏障功能的客觀指標的經皮水分蒸散量(以下稱為TEWL)越高，作為由物理/化學的主要因素而產生的肌膚粗糙狀態的指標，測定TEWL(非專利文獻1：日皮會誌、第92卷、第1001頁-1003頁、1982年)。

該粗糙肌膚被認為是如前所述的紫外線、化學物質、其他各 種各樣的刺激影響皮膚內部環境，從而產生表皮的屏障功能受到抑制的結果。此種狀況呈現在皮膚上時，會產生如下變化，皮膚內部影響細胞增殖/分化的前列腺素、細胞介素(cytokine)的濃度上升(非專利文獻2：J.Invest.Dermatol、Vol.81、519-523、1983)、核酸(DNA)合成機能的亢進(非專利文獻3：Journal of Clinical Investigation、Vol.87、1668-1673、1991)，與屏障功能有密切關係的TEWL上升(非專利文獻4：J.Lipid.Res.、Vol.26、418-427、1985、Vol.30、323-333、1989)等。但是，有關這些現象的關聯性的報告很少，其詳細機制也不明了。因此，粗糙肌膚的指標至今為止還依賴於本人的申報、肉眼直觀的判斷，還不存在明確的指標。

此外還存在潛在的粗糙肌膚狀態的人，但難於檢測此種表面未顯現的潛在的粗糙肌膚。該潛在的粗糙肌膚狀態的膚質之一也可稱為是所謂的敏感肌膚。

調配在化妝品及醫藥部外品(quasi drug)等的皮膚外用劑中的有效成分的有用性評估按照藉由體外(in vitro)試驗的1次篩選、藉由使用動物的試驗的2次篩選、使用人體的使用試驗的順序進行。但是，在如粗糙肌膚那樣機制複雜且無法特定其主要原因的情況下，實施著眼於參與各機制的步驟的生物體外試驗非常困難，最終的評估只能是在將粗糙肌膚的程度作為指標的人體上進行試驗，此時的指標無論如何也不過是以感官評估和肉眼、顯微觀察(顯微鏡觀察)等非定量的方法為主流。

近年來，為解決上述課題提出了一些方案。專利文獻1(日本特開平11-76168號公報)中提出了使皮膚與二苯基苦味基肼游離基(DPPH)的醇溶液接觸，測量著色的程度的方法。專利 文獻2(國際公開第2006/098523號)中公開了以皮膚角質層的鱗狀細胞癌相關抗原為指標的方法。此外，專利文獻3(國際公開第98/40045號)中公開了以真皮膠原纖維束的有序度的變化量為指標的方法。進而還在專利文獻4(日本特開2010-71917號公報)中提出了用水從皮膚中萃取吡咯啶酮羧酸，用其萃取量來評估的方法。

本發明發現了以往完全未注意到的半乳糖凝集素-7(galectin-7)的新功能，並且是首次利用該功能的提案。半乳糖凝集素是指識別結合半乳糖(β-半乳糖苷結構)或交聯糖鏈之間的蛋白質的總稱。闡明了其參與發生、分化、形態形成、腫瘤轉移、細胞凋亡(細胞死亡)等生命現象。現在，已知作為哺乳類的半乳糖凝集素有半乳糖凝集素-1至-15的15種。為人體的情況下，不存在相當於-5，-6，-14，-15的半乳糖凝集素，目前有10種，今後有進一步增加的可能性。半乳糖凝集素從其形態上大致分為3個亞型(subgroup)。第1亞型具有1個與糖鏈結合的部分(糖鏈結合結構域2：糖識別結構域(carbohydrate recognition domain,CRD)的雛型(proto-type)，第2亞型是在1個糖鏈結合結構域具有不與糖鏈結合而與其他結構域鏈結的結構的嵌合型(chimera-type)，第3亞型為由2個糖鏈結合結構域形成的銜接型(tandem-repeat-type)。雛型(proto-type)和嵌合型(chimera-type)只具有1個糖鏈結合結構域，但藉由2個分子結合(形成二聚體)，而實質上與銜接型(tandem-repeat-type)相同為與2個糖鏈結合。

從哺乳動物複層上皮中檢測出半乳糖凝集素-7，在角質形成細胞(keratinocyte)中從基底層到角質層均檢測出半乳糖凝集素-7。複層上皮分佈於表皮、食道上皮、鱗狀上皮化的氣管 上皮、外宮頸上皮、下咽部至喉頭上皮、肛門上皮等。由於角質形成細胞中的半乳糖凝集素-7的表現不受Ca²⁺濃度的影響，因而可知其也不受角質化程度的控制(非專利文獻5：Differetiation、1998、63、159-168)。另一方面，未確認出在成纖維細胞中的表現。此外，還可知半乳糖凝集素-7藉由視網酸(retinoic acid)微弱減少(非專利文獻6：Developmental Biology 168、259-271(1995))。

有報告指出半乳糖凝集素-7被p53(癌抑制基因)誘導，被指定為PIG1(P53-誘導基因1(P53-induced gene1))，參與細胞凋亡。引起半乳糖凝集素-7的表現被強化的胱天蛋白酶-3(caspase-3)的活化和多聚(ADP-核糖)聚合酶的裂解(非專利文獻7：J Biol Chem.2002 Feb 1；277(5)：3487-97.Epub 2001 Nov 8.)。已知用UVB照射角質形成細胞時，半乳糖凝集素-7的表現劇增，經過JNK-BaX途徑，而引起角質形成細胞的細胞凋亡(非專利文獻8：Proc Natl Acad Sci U S A.1999 Sep 28；96(20)：11329-34)。

此外，在專利文獻5(日本特開2006-182744號公報)中，公開了半乳糖凝集素-7表現促進物質的篩選方法及藉由塗抹調配半乳糖凝集素-7成分的組合物的保濕作用和皮膚症狀改善作用。而且，在專利文獻6(日本特開平9-216833號公報)中公開了含有1種或2種以上半乳糖凝集素的外用劑具有預防、改善皮膚的皺紋、彈性降低等老化症狀及創傷治癒效果。

[先前技術文獻] [專利文獻]

[專利文獻1]日本特開平11-76168號公報

[專利文獻2]國際公開第2006/098523號公報

[專利文獻3]國際公開第98/40045號公報

[專利文獻4]日本特開2010-71917號公報

[專利文獻5]日本特開2006-182744號公報

[專利文獻6]日本特開平9-216833號公報

[非專利文獻]

[非專利文獻1]日皮會誌、第92卷、第1001頁-1003頁、1982年

[非專利文獻2]J.Invest.Dermatol、Vol.81、519-523、1983

[非專利文獻3]Journal of Clinical Investigation、Vol.87、1668-1673、1991

[非專利文獻4]J. Lipid. Res.、Vol.26、418-427、1985、Vol.30、323-333、1989

[非專利文獻5]Differetiation、1998、63、159-168

[非專利文獻6]Developmental Biology 168、259-271(1995)

[非專利文獻7]J Biol Chem. 2002 Feb 1;277(5):3487-97. Epub 2001 Nov 8.

[非專利文獻8]Proc Natl Acad Sci U S A. 1999 Sep 28;96(20):11329-34

如上所述，期待有評估粗糙肌膚程度的客觀評估方法。本發明為非外科式地摘取皮膚，不給皮膚施加刺激的方法，本發明的課題係提供使用可簡便且確實地評估是否為粗糙肌膚的 生物化學指標的新型評估方法。

本發明如下構成。

(1)一種粗糙肌膚的程度的評估方法，其係測定皮膚角質層的半乳糖凝集素-7的表現量。

(2)一種粗糙肌膚的程度的評估方法，其係將皮膚角質層的半乳糖凝集素-7的表現量與預先或同時測定的正常部位的皮膚的半乳糖凝集素-7的表現量進行對比。

(3)一種敏感肌膚的評估方法，其係將皮膚角質層的半乳糖凝集素-7的表現量與預先或同時測定的正常部位的皮膚的半乳糖凝集素-7的表現量進行對比。

(4)如(1)或(2)所述的評估方法，其具備：採集皮膚角質層的採集步驟、測定前述採集步驟中所採集的角質層細胞中的半乳糖凝集素-7的表現量的測定步驟、將前述測定步驟中所測定的半乳糖凝集素-7的表現量與健康正常肌膚的皮膚角質層中的半乳糖凝集素-7的表現量進行比較的比較步驟。

(5)如(4)所述的評估方法，其中，採集皮膚的角質層的步驟藉由膠帶剝離法進行。

根據本發明的評估方法，可藉由測定角質層中的半乳糖凝集素-7的表現量來評估粗糙肌膚的程度。此外，以該半乳糖凝集素-7表現量為指標，可簡便地檢測出潛在的粗糙肌膚。進而，因本發明的評估方法用膠帶剝離法等簡便的操作方法採集評估試樣，所以，受試者的負擔少，任何人均可簡單地進行評估。且因其為生物化學的試驗方法，無論誰測定均可得到相同的結果，所以，不需進行如以往那樣藉由與專家面談的方式的諮詢。

此外，還可藉由本發明的方法客觀評估化妝品等的效果。

第1圖為測定人體各部位的半乳糖凝集素-7的表現量的圖。

第2圖為測定藉由SDS製作的強制粗糙肌膚模型的半乳糖凝集素-7的表現量的圖。

第3圖為測定藉由丙酮製作的強制粗糙肌膚模型的半乳糖凝集素-7的表現量的圖。

第4圖為健康正常肌膚的608名的半乳糖凝集素-7表現量和表現頻率的圖表。

第5圖為確認半乳糖凝集素-7和TEWL的相關性的圖。

第6圖為表示保濕性高的乳霜連用14天前後的半乳糖凝集素-7的表現量的變化圖。

第7圖為表示保濕性高的乳霜連用14天前後的TEWL值、角質層水分量值的變化圖。

以下，詳細說明本發明。

本發明的評估方法的特徵係以皮膚角質層中的半乳糖凝集素-7的存在量為指標。

本發明中的粗糙肌膚是指在乾燥、乾巴巴的狀態下持續出現鱗屑的症狀的膚質。此外，敏感肌膚是指雖無明顯的皮膚病變，但易引起不利、有害的反應的肌膚，稱為是潛在的粗糙肌膚的膚質。且對外界刺激的抵抗力比健康正常肌膚低，也可以說是容易產生皮膚問題的肌膚。另一方面，健康正常肌膚是指不表現如上 所述的粗糙肌膚、敏感肌膚的性質的健康且正常的肌膚。已知敏感肌膚中TEWL增高，高頻傳導率(角質層水分量)有降低等的趨勢。且被稱為敏感肌膚的膚質有時會引起皮膚炎、肌膚粗糙。

角質層為皮膚最外層的組織，具有保護皮膚不受來自體外的異物侵害、刺激的作用。

本發明中的評估對象部位只要是可得到角質層的部位，也可包含任何部位，但作為主要的部位，可列舉面部、頸部、上臂部。根據以往的方法，可得到來自上述部位的皮膚的角質層。但是，如前所述，因外科式摘取皮膚等方法會給使用者造成負擔，所以，優選膠帶剝離、刮擦等可簡便得到角質層的方法。

如此準備的各試樣中的半乳糖凝集素-7的表現量可用以往已知的方法測定。例如，可使用基於針對半乳糖凝集素-7的抗體的反應的酶免疫測定法、放射免疫測定法、西方墨點法等方法。此種測定方法已有市售，作為代表性的半乳糖凝集素-7的酶免疫檢驗試劑盒，可例示Abcam公司製的Galectin 7 Human ELISA Kit、R&D systems公司製的ELISA Kit。

從各試樣中，將半乳糖凝集素-7經由其自身已知的生物化學的方法、如凍融法、超聲波破碎法、勻漿法等來製備可溶性組分。且萃取後迅速測定。

因粗糙肌膚與健康正常肌膚相比角質層中的半乳糖凝集素-7的表現量顯著高，所以，以角質層中的半乳糖凝集素-7的表現量的多少為指標，可簡便地評估壓力的蓄積度或肌膚是否是粗糙肌膚。本發明中使用的角質層可用以下簡單的方法採集，即如膠帶剝離法的僅將角質層的表層部分用角質膠帶採集。且本 發明不需給皮膚以紫外線、化學物質等的刺激即可測定半乳糖凝集素-7的表現量。因此，不會給使用者造成負擔即可評估使用者的肌膚是否為粗糙肌膚。特別是可簡便地選擇更適合使用者的肌膚的化妝品、化學煥膚劑，由此可避免皮膚炎症等肌膚問題、副作用，並進一步發揮化妝品的護膚效果。

本發明的評估方法由採集角質層的採集步驟、測定前述採集步驟中所採集的角質層中的半乳糖凝集素-7的表現量的測定步驟、將前述測定步驟中所測定的半乳糖凝集素-7的表現量與健康正常肌膚的角質層中的半乳糖凝集素-7的表現量進行比較的比較步驟構成。以下就該評估方法進行說明。

首先，將如上所述測定的半乳糖凝集素-7的表現量與受試者自身的健康正常肌膚的角質層中的半乳糖凝集素-7的表現量進行比較。此外，測定受試者的某一評估對象部位的角質層中的半乳糖凝集素-7的表現量，將所測定的半乳糖凝集素-7的表現量與具有健康正常肌膚的人的同一評估對象部位的角質層中的半乳糖凝集素-7的表現量進行比較。具有健康正常肌膚的人的角質層的半乳糖凝集素-7的表現量可藉由使用多個具有健康正常肌膚的人的資料的平均值，進行更加客觀的評估。更加具體地說，可由隨機萃取的受試者的半乳糖凝集素-7的表現量分佈設定健康正常肌膚的分佈。

如此比較的結果，在所測定的半乳糖凝集素-7的表現量顯著大於健康正常肌膚的半乳糖凝集素-7的表現量的情況下，評估為壓力的蓄積大，即使未呈現出粗糙肌膚，也可判斷為作為敏感肌膚的可能性大。該健康正常肌膚的試樣可從測定半乳 糖凝集素-7的人的皮膚上採集，也可從與測定半乳糖凝集素-7的人不同的人的皮膚上採集。

此外，受試者的某一評估對象部位的角質層中的半乳糖凝集素-7的表現量顯著大於具有健康正常肌膚的人的同一評估對象部位的角質層中的半乳糖凝集素-7的表現量的情況下，也評估為壓力的蓄積大。而且，即使表面上為未呈現出粗糙肌膚的情況，在該數值顯著高的情況下也評估為具有敏感肌膚。

即評估為壓力蓄積高的情況下，可根據所測定的半乳糖凝集素-7的表現量的程度評估壓力蓄積的程度。所測定的半乳糖凝集素-7的表現量與健康正常肌膚的半乳糖凝集素-7的表現量相比顯著多的情況下，該肌膚評估為強烈顯示粗糙肌膚的性質。且與健康正常肌膚相比，對外界刺激的抵抗力顯著低，判斷為極容易產生皮膚問題的可能性大。此外，所測定的半乳糖凝集素-7的表現量與健康正常肌膚的半乳糖凝集素-7的表現量相比僅少量增加的情況下，其肌膚比健康正常肌膚更具有壓力的蓄積，對外界刺激的抵抗力低，雖產生皮膚問題的可能性低，但可評估為具有是輕度敏感肌膚的可能性。

以下就具體的實施例進行說明，但本發明不限於以下的實施例。

[實施例] 1.人體各部位的半乳糖凝集素-7表現量的測定 <受試者>

從35名健康正常肌膚的男性女性(包括以往有異位性皮膚炎(AD)的人)的臉頰、前臂內側部、臀部採集樣品。

<角質層樣品萃取方法、蛋白定量>

在受試者的臉頰、臂、臀部黏貼角質層測試片(ASAHIBIOMED公司)，採集角質層。從角質層測試片上用玻璃珠法(在容器內放入分析物、直徑約2mm的玻璃珠和萃取液進行振蕩萃取的方法)使用500μl T-PER萃取緩衝液(組織蛋白萃取試劑(Tissue Protein Extraction Reagent)賽默飛世爾科技有限公司(Thermo Scientific)製(product# 78510))進行角質層蛋白質的萃取。各樣品的蛋白質的量用Pierce BCA protein Assay Kit(Thermo Scientific #23225)測定。測定時，在10μl前述角質層蛋白質萃取液中加入200μl Pierce BCA protein Assay Kit的反應試劑液，在60℃下孵育30分鐘後，測定562nm處的吸光度。同時用BSA繪出校正曲線，由吸光度的值算出蛋白質的量。

<角質層中的半乳糖凝集素-7的測定>

同樣，將從膠帶上萃取的角質層蛋白質萃取液使用R&D systems公司製的ELISA試劑盒(galectin-7：DY1339E)測定半乳糖凝集素-7的表現量。首先，在costar公司製的96孔酶標板(#3590)中，將成為1次抗體的固相化抗體使用試劑盒指定的濃度在20℃下過夜使之固相化。其次，用1%BSA、37℃下1小時封閉酶標板，用0.01% Tween-PBS將酶標板洗滌後，各使用100μl成為校正曲線的標準樣品及樣品，在25℃下孵育2小時。用0.01% Tween-PBS將酶標板洗滌後，將2次抗體使用試劑盒指定濃度在25℃下孵育2小時。進而用0.01% Tween-PBS將酶標板洗滌後，將Streptavidin-HRP使用試劑盒指定濃度，在25℃下孵育30分鐘。最後，用0.01% Tween-PBS將酶標板洗滌後，將顯色底物TMB溶 液(Promega,G7431)按100μl/孔加入，在試劑盒指定時間後，加入100μl終止溶液(0.5M硫酸)，測定450nm處的吸光度以算出表現量。

<結果>

測定結果如第1圖所示。

如第1圖可表明，可確認出日常暴露在外界刺激下的臉頰與所謂的粗糙肌膚通常不出現的臂、臀部(屁股)相比，半乳糖凝集素-7的表現量顯著高。由該試驗結果表明，作為粗糙肌膚、敏感肌膚的指標，半乳糖凝集素-7非常有用。

2.人工粗糙肌膚模型中的半乳糖凝集素-7表現量的變化 <藉由SDS的粗糙肌膚模型製作> <受試者>

將14名健康正常肌膚的女性作為受試者實施了試驗。

在左前臂內側部用2push表面活性劑(十二烷基硫酸鈉，以下為SDS)10%溶液，來回摩擦100次。用熱水(35℃、1L)沖洗，洗去表面活性劑。且作為對照，對右前臂內側部也用熱水(35℃、1L)沖洗。在1天4次，每次操作在隔開1小時以上的狀態下重復該操作。持續進行2天此過程，人工製作粗糙肌膚模型。

<角質採集>

在深度方向上各採集4片不進行SDS洗滌、進行SDS洗滌的各個部分的角質層。採集角質層的日期為在洗滌前和洗滌後第4、8、12天進行採集。

<角質層樣品萃取方法、蛋白定量、半乳糖凝集素-7的測定>

與上述1.的方法同樣進行測定。

<結果>

受試者的單獨測定結果如第2圖所示。可確認出粗糙肌膚製作處理後第8至12天半乳糖凝集素-7的測定結果顯著上升。

<藉由丙酮的粗糙肌膚模型製作> <受試者>

將3名健康正常肌膚的女性作為受試者實施試驗。

將上下開口的玻璃製漏斗(直徑3cm)用橡皮筋固定，將2ml丙酮(WAKO特級)/二乙醚(WAKO特級)等量混合液用移液管(pipetman)注入漏斗內，在振蕩器上放置兩臂處理20分鐘。

而後，將漏斗內的丙酮/二乙醚混合液用滴管除去後，注入自來水，在振蕩器上放置兩臂處理(脫脂處理)5分鐘。第二天，在同一部分進行同樣的操作以再次進行脫脂處理，製作乾燥皮膚。且將僅用自來水處理的部位作為對照。

<角質採集>

在深度方向上分別採集4片丙酮無處理、丙酮處理部位的角質層。採集的日期為丙酮處理前一天、丙酮處理後第1、5、8、12、16、20天採集。

<角質層樣品萃取方法、蛋白定量、半乳糖凝集素-7的測定>

與上述1.的試驗方法同樣進行操作。

<結果>

受試者的單獨測定結果如第3圖所示。可確認出粗糙肌膚製作處理後第8至12天半乳糖凝集素-7的測定結果顯著上升。

從以上的粗糙肌膚模型製作試驗的結果可確認出，隨著粗糙 肌膚的產生，半乳糖凝集素-7上升。

3.健康正常肌膚的半乳糖凝集素-7的測定 <受試者>

採集608名健康正常肌膚的男性女性(包括以往有異位性皮膚炎的人)的臉頰樣品，確認半乳糖凝集素-7的分佈。此外，對於其中35名受試者，測定作為以往的粗糙肌膚的評估指標的TEWL，確認與半乳糖凝集素-7的測定結果有無相關性。

<角質層樣品萃取方法、蛋白定量>

與上述1.同樣，在受試者的臉頰上黏貼角質層測試片(ASAHIBIOMED公司製)，採集角質層。

<角質層中的半乳糖凝集素-7的測定>

與上述1.同樣，將從膠帶上萃取的角質層蛋白質萃取液使用R&D systems公司製的ELISA試劑盒(galectin-7：DY1339E，)測定半乳糖凝集素-7的表現量。

<TEWL值>

TEWL使用keystone公司製的Delfin，將2次分別測定的平均值用於分析。

<結果>

608名的半乳糖凝集素-7測定結果如表1及第4圖所示。

根據第4圖，表明健康正常肌膚的臉頰皮膚的半乳糖凝集素-7有80%在435pg/μg以內。且從受試者的聽取調查中， 可確認出以往有異位性皮膚炎的人、具有自我感覺易有肌膚粗糙等的人大部分顯示出500pg/μg以上的半乳糖凝集素-7。因此，例如可將半乳糖凝集素-7的測定值500pg/μg作為粗糙肌膚的指標。

此外，與TEWL相關性如第5圖所示。

可確認出半乳糖凝集素-7與TEWL存在一定的相關性。

由以上試驗結果判斷，半乳糖凝集素-7的測定作為粗糙肌膚的指標很有用，而且可檢測出用TEWL無法檢測出的潛在的粗糙肌膚。

4.伴隨粗糙肌膚改善的半乳糖凝集素-7的變動 <試驗內容>

因半乳糖凝集素-7的表現量高的人具有為粗糙肌膚的趨勢，所以，藉由給半乳糖凝集素-7的表現量高的人塗布保濕性強的乳霜(芳珂公司製FDR乳霜)，確認出粗糙肌膚得到改善，半乳糖凝集素-7降低，同時確認了半乳糖凝集素-7作為粗糙肌膚指標的有用性。

<受試者>

將半乳糖凝集素-7的表現量高的(平均約1400pg/μg蛋白質)10名作為受試者。

<乳霜的連續使用>

使受試者在14天內，在早晚各塗布1次日常使用的保濕化妝品的基礎上再塗布保濕性強的乳霜(芳珂公司製FDR乳霜)。

<角質層樣品萃取方法、蛋白定量>

與上述1.同樣，使用角質層測試片(ASAHIBIOMED公司製)，採集保濕性強的乳霜連續使用前後的臉頰的角質層。與上述1.同 樣，測定角質層的蛋白質的量。

<角質層中的半乳糖凝集素-7的測定>

與上述1.同樣，將從膠帶上萃取的角質層蛋白質萃取液使用R&D systems公司製的ELISA試劑盒(galectin-7：DY1339E)，測定半乳糖凝集素-7的表現量。

<TEWL值>

TEWL使用keystone公司製的Delfin，在保濕性強的乳霜連續使用前後各測定2次洗臉、乾燥後的臉頰，將平均值用於分析。

<角質層水分量值>

角質層水分量使用I.B.S公司製的Skicon-200EX，在保濕性強的乳霜連續使用前後各測定5次洗臉、乾燥後的臉頰，將平均值用於分析。

<結果>

保濕性強的乳霜連續使用前後的半乳糖凝集素-7的表現量如第6圖所示，TEWL值、角質層水分量值如第7圖所示。

藉由連續使用14天保濕性強的乳霜，半乳糖凝集素-7的表現量顯著降低。另一方面，角質層水分量顯著上升，表明粗糙肌膚得到了改善。TEWL值有一些降低，顯示了粗糙肌膚改善的趨勢。

由以上可知，半乳糖凝集素-7的表現量作為粗糙肌膚的指標而有效。

Claims (5)

1. 一種粗糙肌膚的程度的評估方法，其係測定皮膚角質層的半乳糖凝集素-7的表現量。
2. 一種粗糙肌膚的程度的評估方法，其係將皮膚角質層的半乳糖凝集素-7的表現量與預先或同時測定的正常部位的皮膚的半乳糖凝集素-7的表現量進行對比。
3. 一種敏感肌膚的評估方法，其係將皮膚角質層的半乳糖凝集素-7的表現量與預先或同時測定的正常部位的皮膚的半乳糖凝集素-7的表現量進行對比。
4. 如申請專利範圍第1項或第2項所述的評估方法，其具備：採集皮膚角質層的採集步驟、測定前述採集步驟中所採集的角質層細胞中的半乳糖凝集素-7的表現量的測定步驟、將前述測定步驟中所測定的半乳糖凝集素-7的表現量與健康正常肌膚的皮膚角質層中的半乳糖凝集素-7的表現量進行比較的比較步驟。
5. 如申請專利範圍第4項所述的評估方法，其中，採集皮膚的角質層的步驟藉由膠帶剝離法進行。