^0130^ A6 B6 五、發明説明（1> 本發明係關於擬普徽素（pseudo-primycin皙譯)及邦酸加成鹽。 (請先間讀竹面之注龙事項再填柘本頁j 普黴素爲巨分子杭生索（Nature，1ZS 1105/1954 )，顯示抗 菌活性·巨爲市軎Ebrimycine凝膠的活性成份。帛現優興的 抗菌活性，而尙未展現對它的抗藥性。基於此等有益性能， 目前正受廣用，惟僅配製成醇系凝膠* R用於表面治療。 其他製藥配方的開發極爲有限•因爲普黴素是不溶性， 僅稍溶於水和各種不同的有機溶劑。 本發明之目的•在於提供一製法•以改進普黴素之溶 解性及利用。 茲意外發現.普黴素以各種不同鹼性物，親核物、和 /或金屬化合物處理時•可轉化成新型式（新化合物）· 可充分溶於水和/或有機溶劑，且具有礙與的凝膠化性能。 所發也的反應是C 35 — C 內酯化轉移作丨丨]，即通常具有 c 35的鍇徽素環，轉變成C 37環。此反應所得呰黴素即稱 爲擬普黴素。 擬普黴素與出發的普黴素類似•也是錯合物*即亦含 有不同成份，可利用分離皆黴素所用方法分離（兄匈5Γ利 堪利196,425號）。 另外，擬普黴素成份亦可由呰黴素個別單離.的成份內 _化轉移作用製成。迄今已知的所有普黴素成份亦有勸-似 反應。 根據本發明人等經驗，擬普黴素及其成份顯示抗菌活 性，並可用於製造含有較高劑最活性成份之製藥組成物。 由於其新結溝，迄今尙未Μ現其阻力。 依照上述，本發明係關於式I之擬挎黴素錯合物，和 本紙張尺度適用中因园家棵孕（CNS>T4規恪(210x297公徒） 3 ,0130'ί Α6 Β6 五、發明説明（ /成K.成份及敁酸加成鹽，以及Jt製汰· ίΗ Λ；丨小 0 hOH oh oh oh t nh2 h 1 CKjCK^ K1代表丁毡、己拔成戊丛， U 2代表氫、羥基或〇 -阿掂， X 代玫無機酸離子，以硫酸m離子爲彳丨:：、成奵機酸離子， W乙酸根離子爲ί丨丨· 依照本籴製法： (a)偽製造式[之擬.代磁索錯h物，式丨丨之酋微▲-錯 ί ί 物： 〇 1?1 Λ OH%” 〇OTt?mLi^〆•〇sr\c丫〜^个个人丨1 2 Λ Μ ^H3CH3 OH OH OH OH 」 ch3 H.
OH OH OHOH (請先Μ讀卄面之注意事項冉填宵本頁) ··:裝· .打：： 經消郎屮夾桴"而：：：：：工消^合作杜印贤 i U:中’ K 1，R 2和X同上），與帶诳何鹼性物成無祗侦 Π物反應，以進ίτ Cas — C w内酷化轉侈作川 (b) Μ製造擬酋徽尜鉛片物之成份，川Λ丨丨所π拎緻^ 錯妗物的成份進行内趾i化轉移作丨|j ;成 ⑹爲製造擬呰黴尜錯台物之成份，將Λ丨所不擬普線 灰錯π物，利川Μ析法分離。 在水發明製法I|i，任何酋礅粜鹽均可丨丨I做⑴發物料， 惟敉仕化片物足山酵製炚的酋敞素硫酸撾，成山硫酸鹽 製扮之乙酸蝴。諳黴粜乙酸_，以及硫酸蝴以外的K.他 徽索鹽的製逝’收於細牙利唞利I 9 6，8 2 2號。
AU •緣· 本紙张尺度適用中國a家榇準(CNS)*M規格(210x297公釐）-4 _ 1,01307 1,01307 Μ;Ι1郎屮丸標"局=::工消"合作作,:|,製 Λ6 _ B6_ 五、發明說明< 3 ) 內配化轉移怍用迠小衡反丨％ ,—般"Γ彳U.化成物的1 : 1 混台物，可使用有银侦成無诳侦化fi物之物料ilMT ° 有m荷的物料主要撝分解成離子.的鹽奶，埝备機陰 離子，例如_化物，w φ _•鹽、乙_豳、酚_偽作，成羧 酸1崩，以乙酸_、φ酸鹽、氣乙酸鹽、丨·二酸_、苯丨丨丨酸 關爲彳丨丨，成爲無埤陰離ϊ·，例如碳酸搠，碳阶鉍丨蝴，硫畋 搠？硫化物*磷·峰搠，磷酸二鉍鹽，姻酸I别，I!;i.硝峻鹽， m化物，Μ化物，犋化物，μ化物〇丨陨離f "丨爲鹼金版， 以納、鉀爲化，成dll丨：金磁，例如鎂，成過鈹金㈣，以織 爲佧， ，此外，下列物科亦用做冇屯抑物枓··平跋_，以四 Γ拢溴化銨爲佳，成銳換物，以離子交換樹脂α侦，例如 Amberlite IRA 401 〇 內酩化轉移作rti小所Hi無也仰化片物，"ι·選卩丨泣尬氣 化物和鉍氧化物，Μ·好足鉍Μ·化_、鉍鉍化鋇、和化 鉍，以及冇機鹼，敁好坫二乙胺、η乙胺、：笨胺，還冇含 Η成含鉍的離製化π物，般好迠吡啶、吟'•林、d/ii〇漆、咪哗 、二噁烷 內&i化轉移作出垲作水溶性和/成彳丨機溶劑媒资内進 行。右機溶劑Hf用質子性溶劑，例如Cl 一 C«脂族_ » Μ 好娃Φ _、乙_、ιΕ 丁 _，鹵化拽，般好垲κ仿，成非钭子 性溶劑，例如醚、成右·機鹼，例如二乙胺、丨|丨〖:丨|定、乙膪、 1 二ψ槔ιΡ ®έ胺。較彳1::化π物偽（.'1〜（〕4脂族_，削獨成μ 水溶性M fi液。 本紙張尺度適用中國S家榇準(CNS)T4規格(210X297公-5 - 請先Μ請背面之注意事項再瑱艿本頁) • : *装* A6 B6 (〇13〇'> 五、發明說明（4). 反應可在室媼C 20 — 22 進行，俋亦可提路溫度， {請先閱讀背面之注意本項再填寫本页) 例如在囘流餾度，可以達成更高的反應速率· 依照本法較佳具體例，出鉍的酱黴素鹽可視需耍轉化 成乙酸蚴*再依上述內酗化轉移作用，製成擬普撇素乙酸 鹽，未反應的普饊素乙酸豳，可用甲酸酯等適當有機物 料處埋，而目擬普黴索乙酸鹽分離，將沉臉的普徽素乙酸 铖爐掉，自濾液單離擬酋铖素，虽乙酸鹽型，或覷需耍加 相對應之酸後，呈Jt他鹽型，例如硫酸镧。嗯離Μ好用乙 醚和/或水或乙腈缒行，然後將所得生成物過應和乾燥β 在本發明製法铋項(b)中，分離的昔黴索錯片物個別成 份用於內酯化轉移作用*則可得擬呰徽索之相封鮑议份。 反應是依上述鉍項（a)進ff。 依照本發明製法之鉍項(0，缺項（a)所得擬普藏素錯台 物可利用層析分離·，而得擬酋徽素成份。分離可利用皆柱 或鴻赌層析法進行，ΙΠ於.擬酋黴莱溶解度較皆碰素爲徒， 一般利用簡單管柱層析法卽可容易進行秘析分離。 依照本發明，管柱®析分離最好以裝於管柱內，懸浮 ! 於所用洗提液的矽凝腿ί例如 Kieselgel 60 )迆行，欲 分之普徽索鹽•亦以所用洗；捉液內之溶液型施加於管柱 。撝展開所用洗提液可爲水和各極不丨肖丨有機溶劑的混台物 •茲發現洗;提液內有機酸的存在，可改進分離的效率•有 機溶劑最好是用醇類，例如甲醇、乙_、丁醇，成鹵化溶 1 劑，例如氯仿、二氯甲烷等，jiu有機觖敁好足用乙酸•較 佧溶劑系統造鉍仿：甲幀：.乙酸：水=·· 9 : 6 : :i : 4混台物的 本纸張尺度遑用中國國家標準(CNS)Ή規格(210X297公釐）-6 - A6 B6 五，、發明説明（5) I 較低相，經1 %容量甲醇安定化。 在展開之際，收集含同丨樣物料f以薄層敁析法TI c證 明_)的部丨分’蒸發後得四楠成份。TLC試驗般好使用丨i 樣品，在矽凝隊上，最好是在Kieselgel 60 F254 (Merck) m HPTLC HP-KF (Whatmann) 板上進行。洗提液爲氣仿：中 _ :甲酸：水：甲醛：正丁醇的160 :53 :6 :9 :3混台液， 展開時使用含1 %磷§Π酸之乙_或氯甲苯胺。 擬普徽索錯台物利用腐析分離時，可得|纟徽素成份相 類似的成 ，卽 Αι 1 A2 * A3 « B 1 • B 2 · Ba » C 1 » C2 . C 式I 的j 凝普 徽素錯弁物成份如下 *遍冇 κ·酸加成鹽 擬普隞尜 Αι * Jt 中 ，R1 爲丁甚* R2 為0 —阿糖》 ffuXfe丨上 擬普黴索 A* » ft 中 ，R1 鉍戊基， Ra 爲〇—H糖， 而XN上 擬諳黴素 A3 * It 中 ，R1 爲己基》 R2 爲0 —阿糖》 而X同上 擬普徽素 Bi ，Jt 中 • R1 爲丁基， Ra 爲 Ιϊ\ » j Ϊ0 X 同上； 擬普黴岽 Ba » K- 中】 .Rx 爲丨戈基， R2 爲1¾ * 而X 同h ; 擬普徽茉 Bs ，其 中， 1 爲己基， R2 爲鼠1 而X 同1:; 擬普徽素 C* * it 中丨 .Rl 爲丁鉴* Ra •而 X Μ上 擬普徽素 Ca ，其 中1 Rl 爲戊基， Ra ，而 X冏上 擬酋黴素 C3 ，其 中丨 ，R| 爲己甚， R2 爲邦莊 *而 丨X 1词上 擬酋 徽莱成 ί分的K f 値特性如 下： » 1 A> R f == 0.30 IU Rf = 0 . 55 Cl Rf = 0.36 A* Rf = 0.3 2 Ba Rf= 0- 57 C2 R f = 0.38 A3 Rf 0.34 B 3 Rf = 〇 · 59 C3 Kf = 0.40 本發明_普徽素錯fi物或it成份之溶解酞，遠較⑴發 本巧Λ尺度適用中aa家準(CNS)甲4規格(210x297公釐）-7- (請先閱讀背面之注意事項再填奪本頁) .裝· .打· _線· ,0130" A6 B6 五、發明説明（6 ) 諸徽素錯铃物和/或U:成份爲彳丨丨。例如，矜饊莱乙酸鹽赏 隙上不溶於水、乙_、M i _，iiu擬普徽尜乙_豳的溶解麼 托水中爲5 g/l〇m丨，在乙醇屮偽5 g/l〇ml，在1丨）_中爲 10 g/ 10m丨，意即溶解度火有改池· 擬普黴莱個別成⑸溶解，IT的改進，則上述擬酋黴索錯 台物情况相同，卽例如擬普徽素Α»乙酸鹽之溶解度，在 水和乙_中爲5 g/l〇m丨•甲龄中爲10 g/l〇mU因|)七，擬 普黴素錯铃物和/或it成份適於製造含較高劑紐活他成份 的製樂配方》 擬諳徽·素及it成份的迤一少鼬仪他能足傑I丨丨的蜮收j化 他能：在水性媒質內，51刻以溶解度極限開始肜成凝_ , 如在有機溶劑媒質內，經靜置數小時後，即形戍安定性凝 滕。 製造凝_、軟梅等莱些製嘁配方時，該項凝膠化能力 可以有益利用。 擬普黴索和/或ft成份之鹽，可視需耍轉化成游離化 p物，和/或轉變成jt他_ * 與原有酋徽尜鉛fj·物和/成lt成份相似的造，擬涔徽 桊錯台物和/或试成份亦顯示抗菌性，尤奸是對抗革削氏 隖性菌，但較高劑量時，亦可有效對抗革丨职氏陰件菌· 以下表中縮寫代號如下： ' 試驗菌株 1. 枯草桿菌 2. 劳孢桿菌 本紙译尺度適用中®國家標準(CNS)f4規格(210x297公數> -8 - .................................·( .............Γ»...............................打·…’r.(...................線 {請先聞請卄面之注意事項再填鸾本页) A6 B6 五、發明説明（7 ) 3. 地衣芽孢桿睹 4. 金黃色葡萄球菌 5. 表皮葡萄球菌 6. 微球阐洙 7. 脲芽孢八#球菌 試驗化π物 Ϊ 擬普徽索乙酸鹽 II 擬普微尜A:乙酸豳 III 擬普徽# A3乙酸鹽 IV 擬普黴素β*乙酸鹽 V 擬普徽尜以乙酸鹽 VI 擬普微索c ^乙酸鹽 mi 擬普黴索錯台物及典成份對多項抗樂性人體病原阐株之 活性譜 .-MU 塱 Ml _Μ ϋ ^ί_ ί/Ηβ/ωΐ_) I. II. III. IV. V. VI. 1. 2.5-5 5-10 2.5 2.5 2.5 2.5 2. 2.5-5 5-10 2.5 2.5 2.5 2.5 3'. 2.5-5 5-10 3.5 2.5 2.5 2.5 4. 2.5-5 5-1〇 5 5 5 2.5 5. 2.5-5 5-10 5 5 5 2.5 6. 0.75 2.5 2.5 2.5 1 1-2. 7. 0.5 1 0.5 2.5 0.75 0.5 本紙Λ尺度適用中國國家標準（CNS)T4規格（210x297公釐）-9 - {請先閱請竹面之注意事項再填寫本页) •裝· •打：：為 Α6 _________ Β6 五、發明說明（8 > 本發明擬普徽莱銷π物及U:成份對公鼠和母鼠進行試 驗，所得結果列於表2 · 袠2 ———— 擬酋黴素錯台物及M:成份之帮性 誠驗化台物 —--------- . 〜 LD β。値 (mg/kg) _靜脈注射 .. 门 m 公鼠 毋鼠 I 17.66 18.78 1724 1583 Π 13.30 14.75 937 806 本發明茲以如下 W施例詳細.擊證 實施例1 ,· ·———.......—_ — 取60.0克f 53 . 23毫吳耳）普徽尜硫酸鹽和a 5克 (2 6 .9 4毫吳耳）含8個結晶水的氫氧化鋇，懸浮於8 〇〇 I議汁甲_和200毫汁水之混台液內，經2 .5小時黃沸後， 加20奄升乙酸，繼_灰沸30分鐘。然後，趁熱濾掉硫酸鋇 ’將媳液蒸發，油性殘楂溶入伽奄升甲醇内，溶液在室溫 撺拌下於約20分鐘內滴加2〇〇错升甲酸乙他•然後，濾 :掉米反應的普徽素乙酸鹽，滤液在眞空内蒸發，固體殘渣 W 100逯升二乙_碳製，經過滤，丨了[j白色固體粉术在70 C眞 空內乾燥β生成物爲26 . 0克擬拎饊索乙酸鹽，產率4 3 · 3 ! % ’融點1 〇 6 c *跑光率十3 5 C紅〇 . 2 %甲酵溶液內）*· ； 埤施例2 I 収60.0克f 52 · 77逯英咩）锊徽素碲酸豳》懸浮於《00 奄計甲醇內，加溶入2()〇毫升水中之2 .丨4苋（ 53.5银轉敁）氣氣 本紙张尺度適用中國國家橾準(CNS)甲4規格(210X297公ft) - 10 - {請先《讀背*之注惫事項再琪寫本頁) .装_ .ir. •線.
^0i30'V A6 B6 五、發明説明（9 ) 化納•懸泮液枉捎拌下遴沸2·5小時·再於熱反敝财台物加 20毫升乙酸，繼_攪桦3〇分鐘，在眞空內蒸發•殘谨溶人 伽逯升甲_內，揹拌中在約20分鐘內加20 0喵升中酸乙酗。 滤除朱反應普撇素乙酸鹽，濾液枉眞空內蒸發，殘籀以“0 遨汁二乙_和9奄升水的混台液碾製’所得瞇浮液經過感， 所得物科在70 *€眞空內乾燥•生成物爲25克ί 4 1 .6 % )擬 酋黴莱乙酸鹽，_點1〇6 *C · w m m 3 収60.0克（53 .23逛英耳）酋黴梁硫酸鹽，懸浮於含 9克ί 27.35奄吳tf.)鉍氧化納的200疮汁水內，加800 错幵甲_，攪拌中索沸2 · 5小時•然後，溶液加？〇鐽升乙酸， 又遺沸30分鐘，反應Μ片物在眞空內蒸發，殘渣溶入伽窀 升甲醇內，濾掉米溶化物f硫酸納），於攪拃中約20分鐘 滴加200毫f卜甲酸乙蛸於溶液，濾除沉澱的米反應普秘(素 乙酸!ii ·濾液在捎枠中滴加3 3.5奄升2 N鹽酸，滤掉所得 擬μ徽采硫酸，並在眞空內乾操。汾24 .5屯C 4 0 .8 % ) 擬酋1數素硫酸鹽，呈白粉狀，融點1 27 ·€，旋光率十26.5 ° f在〇 . 2 % φ醇溶液內）· W施例4 取30.0兑f 26.38错吳坏）普黴尜乙酸鹽，縣游於9〇〇 ，退升屮_ :水的2 : 1 混合液內》加10克乾Amberlite I IRA - 4〇1 ί Ο Η型）離子交換樹脂，混合物在60 c攪枠4 f ' 小時。然後濾掉樹脂，鴻液加10错升乙酸和100銮汁丁酿, ! 溶液在眞空内蒸發。殘渣溶人50垡升丨I !醇內，並打約15分 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210x297公釐）-11 - (請先閑讀背面之注意事項再填寫本页) •沃· 經濟部中央櫺準局員工消費合作社印製 ^,0130^ A6 B6 五、發明説明（10 ) 鐘敝烈攪拌下，於室溫溶液滴加伽逯升甲酸乙鴻掉沉 撇的未反_普黴素乙酸鹽，触液在政空內蒸發，衊渣以二 乙醚破製〇將懸液過濾，固體物在70 ‘C眞空内乾燥•生成 物爲14 .〇克Γ 46 .6 % )擬普徽素乙酸_，融點106 TC。 貫施例5 山〇 .幻克f l:i .48错吳丨丨：）金闷納和50窀升丨Π蝻，在 無水反應條ί牛下製成的1丨丨_化納溶液，加]5 ·0屯Γ 13 .19 逯吳耳）捋徽索。酸铖，所得懸浮液激烈Μ拌1小時，然 ； 後加丨〇遥升乙酸，反脑Μ η物托眞空内蒸發ι殘池在猫和 | 加熱下溶入250奄升甲_內，溶液在茧溫1〇分鐘內滴加5〇 銮升Φ醇乙酯。滅掉米反應的普鉍索硫酸鹽，龅液在眞空 内蒸發，殘渣以1 12毫升二乙鉍和2 · 2毫升水之混台液礙 製，將懸浮液過濾，固艘物在70 X：眞空內乾燥。生成物_ 7.0克（46.fi % )擬呰龈采乙酸鹽，融點1〇6 t。 HU— 經濟部中央梂準局員工消費合作社印製 ί請先聞讀背面之注意事項具瑱寫本1Γ) 収15 ·0克ί 13 · 19，毫莫耳）矜徽尜乙酸鹽，魅浮於5〇 遥升甲_內，加1 ·56 .屯f 1 3.48窀萸丨〖.）酚撾，懸浮液在 60 C隞烈攪拌】小丨丨ΐ ·於所汾溶液加丨〇奄計乙酸，溶劑在 觖蝤下蒸餾·殘渣枉溫和加熱下溶入25 ()升甲_，溶液 在搅拌下約20分鐘内，滴加50锴升印酸乙酚·濾掉米反應 涔徽素乙酸鹽，濾液在好空內蒸發，殘渣以丨i 2窀升二乙 ||和2 · 2毫升水的混台液碾製•然後將所拟懸浮液過减· '固體物在70 t眞空內乾燥。生成物是：7.0免〆46 .6 % )擬 1 普微素乙酸鹽，融點1 〇 6 t：。 年紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210x297公釐）-12 _ ^0130? A6 B6 五、發明説明（11) W施例7 収6 .0克（5.27皂吳耳）酋饊素乙酸鹽，谜浮於4〇〇 毫升TE 丁醇內，加（)·4 9免ί 6 .0窀萸耳）乙酸鈉•反應混 付物在揹拌中键沸1小時，然後龆除溶劑，殘渣溶人1〇逛 升甲_內》所得溶液朴:室溫搅拌φ約20分鍮內淌加？0堪升 Ψ酸乙酯，然後龅掉米反胞矜徽素乙酸鹽，脑液迕減跶下 旄鉍，鉍渣以30毫升乙膀碳製，所得懸泮液經過碰。丨尚體 物在70 X：眞空內乾燥。生成物撝2.8克（46 .6 % )擬酋黴 采乙酸鹽，融點]〇 6 1C。 w m m b 經濟部中央標半局員工消费合作社印製 (請先聞讀背面之注意事項再填寫本頁) 和 .漆. 収6 ·0克ί 5 .27逛英耳）普徽籴乙酸鹽，魅浮於40tt 银升|E 丁 _內’加6.0错莫4 _溶於甲醇之無機試劑，例 如氯化納、硫酸納、亞硫酸鈉、碳酸黾納、磷酸餓i in )、 硝酸鉀、亞娲酸鈉、演化鉀、氟化鉀、鉍化鈇、似化納、 磷酸二納、亞硫酸鈸ί 1丨）等》反應浞台物在拟拌中輿 沸1小時，加5奄升乙酸，然後，溶劑在眞空内餾除β殘 極固體物在加熱下溶入10奄升甲齡內，樾除小溶物，_液 在室溫攪拌中約20分鐘內淌加20璀汁φ酸乙酯，龅除米反 普徽索乙酸，濾液在砹空內蒸發，殘渣以二乙醚碳製。 所得懸浮液經過丨慮，固體物枉70 ‘C眞空內乾燥。生成物爲 2.8苋ί 46 .6 % )擬普饊紫乙酸镏，融點i ()6 t：。 WJfe JJ 9_ 収6.0克（5·27毫莫M:)普傲累乙酸鹽，懸浮於400 逯升Ε 丁 _內，加1 0觅（3 · 1燊吳耳）四丁甚溴化銨， 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格(210x297公釐)-13 - ^0130^ ^0130^ 經irt郎屮处標屮局Μ工消合作托印" A6 _ B6_ 五、發明説明（12 ) 黄沸2小時，然後加5 .〇 ,龜升乙酸，溶，削任好空內餾除β 固體殘稽£ 30奄升氣仿碳製，所得懸浮液經過濾，固體物 在加熱下溶入10奄升φ醇內，然後，溶液托室猫禮拌中約 20分鐘內加20奄升甲峻乙酯。濾除米反應铸徽索乙酸鹽、 滤液在興空內蒸發，殘摘i W二乙醚碾製。所得懸浮液經過 滅*茌70 Ό眞空内乾燥。生成物爲2 · 8免c 4fi . 6 % )擬普 威莱乙酜鹽，融點1 〇 6 X：。 賞施例10 収6.0克「5 .π奄吳耳）普黴案乙酸鹽，秘浮於36〇 窀汁正丁醇和60窀汁二乙胺的Μ片液内，迕擅拌下奚沸4.5 小時。然後，反應敁妗物迕眞空内濃縮全·半，加5墙升乙 酸，溶劑茌眞空內餾除。殘渣溶入10毫升屮_內，所得溶 液在室溫攪拌中約20分鐘内滴加20逯升Φ酸乙蝙《»煺除米 反Μ普饊素乙酸鹽，餘(液經蒸發，殘渣以二乙醜碳製，得 懸浮液過濾，固齬物在70 t：眞空內乾燥。生成杉」撝2.8克 ί 46.6 % )擬普黴素乙酸鹽，融點1 〇 61C。 W施例11 収6».0克ί 62.77蟮吳斗）ilf激索乙_搠，在4〇〇逯 升妣陡內黄洲i 3.5小胳，然後，所辩溶液办奴空内旄發。 殘渣利用2 X 50毫升乙醇洗;濯將乙_餾除，然後將殘楂溶入B0毫升 乙醇內，所得溶液在室涠攪拌中約20分鐘內滴加200毫升甲酸乙醇· 滤除未反應普徽素乙酸轍，滤液茌眞空內蒸發，殘渣以二 1 乙贈礙製，所得懸浮液經過滤，固f肖物在70 X；眞空內乾燥。 i 生成物撝25克（4 1% )擬捋徽素乙酸豳，融點1 〇6 t：。 本纸張尺度適用中BB家樣爭(CNS)>P4規格(210X297公#)-14 - (請先聞讀背面之注意事項再填寫本莨) _装· .打_ •線. -01307 A6 __B6_ 五、發明說明（13 ) 霄施例12 {請先閲續背面之注意事項再填寫本页) 収1 ·〇克r 〇 ·89奄吳耳）轉徽索a *硫_盥（依照匈 牙利専利I9fi，425號製成），和含8個結品水的0.1·!觅 ί Ο ·45毫莫耳）氫氧化鋇，懸浮於13 5错升甲醇和3.5 奄升水之混台液內•反應混台物在攪桦下黄沸2 .5小時， 加〇·4奄幵乙酸後，繼_欖掸3〇分鋪β然後，鴻除反應中 生成的硫酸鋇，濾液蒸發，只有殘渣溶人i .6毫升φ _內， 所得溶液在室温搅拌中約2〇分鋪內淌加3 · 4奄f卜屮酸乙酿· 濾除米反應普&索乙酸酏，液在眞空内蒸發，所掛懸浮 液經過_，白色固腌物在70 C (¾空内乾垛。生成物爲0 ·43 ώ ( 43 % )擬諸徽索Α ι乙酸y，融點1 〇 8 *C · W Μ 13 利月j管柱層析法分離擬-普徽索的成份 1:廢析分_ 欲分離之榇品：溶於30 .链升忧捉液之6.8克擬普黴 素乙酸_ (依照貨施例1 , 2，4—丨1之任一所製成）。 管柱：Φ 3 .松分，提90公分，充接！矽凝怊（Merck 製 Kieselgel 60 ，粒徑 0.063-0.100 公厘），懸 浮於洗提液内。 洗提液：氣仿：甲_ :乙醇：水=9 : 6 : 3 : 4混台液 之較低相，以1 %容甲醇安定化。 | 流 : 1·75舉升/混合液
I ' 收集部丨分的容hi : 10 ‘場升 lit部份之活性成份含U利用TLC弒驗。 本紙$尺度適用中國國家秣準(CNS)T4規格(2丨0X297公釐）_ 15 _ oi游 2. TLC試驗 使用 10 ml 樣品》在 Kieeelgel 60 F25<| (Merck) 上進 行試驗。 使用氯仿：甲醇：甲酸：水：甲醛：正丁醇=13〇 :53 : 6 : 9 : 3 : 3之混合液爲洗提液·利用含1 %磷 钼酸的乙醇或氯苯甲胺進行展開。 將層析上相同部份合併•以10毫升甲醇稀釋•在眞 空內蒸發。固體殘渣以二乙醚碾製·經渦撾•固體白色 粉體在70 1C眞空內乾燥。 即得如下成份 « 1 成份 擬普黴素 At乙酸鹽 U lf6〇 產率 (i) 23.5 融點 (°C) 108 +38.¾ 擬普黴素 -A*乙酸酯 0r2 2.9 109 + 48.0 擬普徽素 A3乙酸鹽 〇,3〇 k.h 110 +52.1 擬普徽素 β»乙酸鹽 〇,45 6·6 103 +5〇·〇 擬普黴素 …乙酸酯 〇,〇5 0,7 103 47·2 擬普撇素 Β3乙酸鹽 0,10 ΙΛ 103 + 45.0 擬酋徽素 Cl乙酸鹽 〇,98 ih.h 104 +42·2 擬呰徽素 C2乙酸酯 0.01 O.U 105 + ν··7 擬普黴素 0.02 0.28 105 +46· 5 C3乙酸酯 *旋光率是在0，2 %甲醇溶液內測定。 甲 4 ( 210 X 297 公廑） —16