TW201206435A - Piperidinyl compound as a modulator of chemokine receptor activity - Google Patents

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201206435 六、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明基本上係關於一種作為趨化因子受體活性調節劑 之六氫。比°定基化合物，含有該化合物之醫藥組合物，及將 該化合物用作治療及預防炎症疾病、過敏性及自身免疫疾 病，及特定言之，類風濕性關節炎及移植排斥之藥劑之方 法。 本申請案主張2010年6月16曰申請之美國臨時申請案 61/3 55,225號之權利，該案係以引用全文之方式併入本 文。 【先前技術】 趨化因子係具有分子量6至15 kDa且由多種細胞釋放以 吸引及活化（特定言之細胞類型）單核細胞、巨噬細胞、T 及B淋巴細胞、嗜酸性粒細胞、嗜驗性粒細胞及嗜中性白 血球之趨化細胞因子。基於胺基酸序列中之頭兩個半胱胺 酸係由單胺基酸分開（CXC)或鄰接（CC)，主要存在兩類趨 化因子，CXC及CC。CXC趨化因子（如介白素-8(IL-8)、嗜 中性白血球活化蛋白-2(NAP-2)及黑色素瘤生長刺激活性 蛋白（MGSA))主要趨化嗜中性白血球及T淋巴細胞，而CC 趨化因子（如RANTES、MIP-lct、MIP-Ιβ、單核細胞趨化 蛋白（MCP-1、MCP-2、MCP-3、MCP-4 及 MCP-5)及嗜酸性 粒細胞趨化因子（-1及-2)趨化（特定言之細胞類型）巨噬細 胞、Τ淋巴細胞、嗜酸性粒細胞、樹突細胞及嗜鹼性粒細 胞0 156717.doc 201206435 趨化因子結合至屬於G-蛋白偶合之七跨膜區蛋白家族之 特定細胞表面受體，該受體稱為「趨化因子受體」。當結 合其等同源配位體時，趨化因子受體使細胞内信號轉導通 過相關三聚G蛋白，導致（特定言之反應）細胞内鈣濃度迅 速增加，細胞形狀改變，細胞黏附分子表達增強’去顆粒 化及促進細胞遷移。存在至少種結合或應答cc趨化因 子之人類趨化因子受體，其等具有以下特徵模式：CCR-1 (或「CKR-1」或「CC-.CKR-1」）[MIP-la、MCP-3、MCP-4、 RANTES]、CCR-2A及 CCR-2B(或「CKR-2A」/「CKR-2B」 或「CC-CKR-2A」/「CC-CKR-2B」）[MCP-1、MCP-2、 MCP-3、MCP-4、MCP-5] ; CCR-3(或「CKR-3」或 「CC-CKR-3」）[嗜酸性粒細胞趨化因子-1、嗜酸性粒細胞 趨化因子-2、RANTES、MCP-3、MCP-4] ; CCR-4(或 「CKR-4」或「CC-CKR-4」）[TARC、MDC] ; CCR-5(或 「CKR-5」或「CC-CKR-5」）[ΜΙΡ-1α、RANTES、ΜΠΜβ]; CCR_6(或「CKR-6」或「CC-CKR-6」）[LARC] ; CCR-7(或 「CKR-7」或「CC-CKR-7」）[ELC] ; CCR-8(或「CKR-8」 或「CC-CKR-8」）[I-309] ; CCR-10(或「CKR-10」或 「CC-CKR-10」）[MCP-1、MCP-3]及 CCR-11[MCP-1、 MCP-2及 MCP-4]。 除哺乳動物趨化因子受體外，已發現在受感染細胞中， 哺乳動物巨細胞病毒、皰疹病毒及痘病毒表達具有趨化因 子受體結合性質之蛋白。人類CC趨化因子（如RANTES及 MCP-3)可藉由此等病毒編碼之受體而導致鈣迅速移動。受 156717.doc 201206435 體表達可因正常免疫系統監督之破壞及感染應答而感染。 此外，人類趨化因子受體（如CXCR4、CCR2、CCR3、 CCR5及CCR8)可用作微生物（例如，人類免疫缺陷病毒 (HIV))感染哺乳動物細胞之輔助受體。 趨化因子及其他同源受體涉及炎症、感染症及免疫調節 病症及疾病，包括哮喘及過敏性疾病，及自體免疫病理， 如類風濕性關節炎及關節硬化之重要介導劑（回顧：Carter， P.H., Current Opinion in Chemical Biology 2002, 6, 510 ； Trivedi 等，Ann. Reports Med. Chem. 2000，35，191 ; Saunders 等，Drug Disc. Today 1999，4，80 ; Premack等， Nature Medicine 1996, 2，1174)。例如，趨化因子巨嗟細胞 炎症蛋白- l(MIP-la)及其受體CC趨化因子受體l(CCR-l)用 於吸引白血球至炎症位點及隨後活化此等細胞。當趨化因 子ΜΙΡ-1α結合至CCR-1時，其誘導細胞内鈣濃度迅速增 加，細胞粘附分子表達增強，細胞去顆粒化及促進白血球 遷移。 此外，ΜΙΡ-1 α於人類中之趨化性質已經實驗證實。當皮 内注射ΜΙΡ-1α時，人類受體之白血球快速及大量流向注射 點（Brummet，M.E.，J. Immun. 2000，164, 3392-3401)。 已知MIP-lot於患類風濕性關節炎之病患之滑液及血液中 增加。此外，數個研究已證明在治療類風濕性關節炎時 MIP-la/CCRl相互作用之拮抗作用之潛在治療價值。 亦應注意CCR-1亦係趨化因子RANTES、MCP-3、HCC-1、 Lkn-l/HCC-2、HCC-4 及 MPIF-1 之受體（Carter，Ρ·Η·, Curr. 156717.doc s 201206435

Opin Chem. Bio. 2002, 6, 510-525)。由於假定文中所述之 如式（I)之新穎化合物藉由結合至CCR-1受體拮抗ΜΙΡ-1α， 故此化合物亦係由CCR-1介導之上述配位體之作用之有效 拮抗劑。因此，當文中提及「ΜΙΡ_1α之拮抗作用」時，假 定此等效於「CCR-1之趨化因子刺激之拮抗作用」。 最近，許多研究小組已描述ΜΙΡ-Ια之小分子拮抗劑之發 展（回顧.Carson, K.G.等，Ann. Reports Med. Chem. 2004 39, 149-158)。 【發明内容】 因此’本發明提供一種作或CCR-1受體活性之 拮抗劑或部份激動劑/拮抗劑之六氫吡啶基化合物，或其 等醫藥可接受鹽。 本發明提供包含醫藥可接受載劑及治療有效量之本發明 化合物或其等醫藥可接受鹽形式之醫藥組合物。 本發明提供一種治療類風濕性關節炎及移植排斥之方 法其包含對需此治療之主體投與治療有效量之本發明化 合物或其等醫藥可接受鹽形式。 本發明提供一種治療炎症性疾病之方法，其包含對需此 治療之主體投與治療有效量之本發明化合物或其等醫藥可 接受鹽形式。 本發明提供一種用於治療之化合物。 本發明提供一種以化合物於製造用於治療炎症性疾病之 藥劑上之用途。 【實施方式】 156717.doc 201206435 於一實施例中’本發明提供一種如下式（i)之化合物

或其等立體異構體或醫藥可接受鹽。 本發明提供一種較CCR-1活性之已知抑制劑（例如，美國 專利7,601，844中所述並指定申請人之化合物）具有出人意 料的優勢之化合物。更佳地，該化合物展現優異藥物動力 學概況及令其成為臨床發展之引人注目之候選物之其他性 質。因此，僅此等出人意料之性質及/或組合令如式⑴之 化合物適宜用作藥劑。 於另一實施例中，本發明係關於一種醫藥組合物，其包 含醫藥可接受載劑及治療有效量之如式⑴之化合物。 於另一實施例中，本發明係關於一種調節趨化因子或趨 化因子受體活性之方法，其包含對有需求之病患投與治療 有效量之如式（I)之化合物。 於另一實施例中，本發明係關於一種調節CCR-1受體活 性之方法包含對有需求之病患投與治療有效量之如式 ⑴之化合物。 於另一實施例中，本發明係關於一種由CCRd受體介導 之 MIP-Ια、MCP_3、MCp_4、RANTES 活性較佳調節 ΜΠΜα活性之調節方法，其包含對有需求之病患投與治療 156717.doc 201206435 有效量之如式（i)之化合物。 於另一實施例中，本發明係關於一種治療病症之方法， 其包含對有需求之病患投與治療有效量之如式⑴之化合 物’其中該病症係選自骨關節炎、動脈瘤、發熱、心血管 作用、克隆氏病（Crohn’s disease)、充金性心臟衰竭、自體 免疫疾病、HIV-感染、HIV-相關癡呆症、牛皮癖、特發性 肺纖維化、移植動脈硬化、物理或化學誘導之腦創傷、神 經痛、發炎性腸病、肺泡炎、潰瘍性結腸炎、全身性紅斑 狼瘡、腎毒企清腎炎 '腎小球腎炎、哮喘、多發性硬化、 關節硬化、類風濕性關節炎、再狹窄症、器官移植、牛皮 癬關節炎、多發性骨髓瘤、過敏症（如皮膚及眼結膜中之 肥大細胞去顆粒）、肝細胞癌、結腸直腸癌、骨質疏鬆 症、腎纖維化及其他癌症。較佳地，本發明係關於一種治 療克隆氏病、牛皮癬、發炎性腸病、全身性紅斑狼瘡、多 發性硬化、類風濕性關節炎、多發性骨髓瘤、過敏症（如 皮膚及眼結膜中之肥大細胞去顆粒）、肝細胞癌、骨質疏 鬆症或腎纖維化之方法。 於另一實施例中，本發明係關於一種治療炎症性疾病之 方法，其包含對有需求之病患投與治療有效量之如式⑴之 化合物。 於另一實施例中，本發明係關於一種治療炎症性疾病， 例如，至少由CCR-1部份介導之炎症性疾病之方法，其包 含對有需求之病患投與治療有效量之如式⑴之化合物。 於另一實施例中，本發明係關於一種調節CCR1活性之 156717.doc -9- 201206435 方法，其包含對有需求之病患投與治療有效量之如式⑴之 化合物。 於另一實施例中，本發明係關於一種以如式⑴之化合物 於製備用於治療録之_上之料，該病症係選自骨關 節炎、動脈瘤、發熱、心血管作用、克隆氏病、充血性心 臟衰竭、自體免疫疾病、HIV-感染、HIV-相關癡呆症、牛 皮癖、特發性肺纖維化、移植動脈硬化、物理或化學誘導 之腦創傷、神經痛、發炎性腸病、肺泡炎、潰瘍性結腸 炎、全身性紅斑狼瘡、腎毒血清腎炎、腎小球腎炎、哮 喘、多發性硬化、關節硬化、類風濕性關節炎、再狹窄 症、器官移植、牛皮癬關節炎、多發性骨髓瘤、過敏症 (如皮膚及眼結膜中之肥大細胞去顆粒）、肝細胞癌、結腸 直腸癌、骨質疏鬆症、腎纖維化及其他癌症。較佳地，本 發明係關於-種以如式⑴之化合物於製備用於治療克隆氏 病牛皮癬、發炎性腸病、全身性紅斑狼瘡、多發性硬 化、類風濕性關節炎、多發性骨髓瘤、過敏症（如皮膚及 眼結膜中之肥大細胞去顆粒）、肝細胞癌、骨質疏鬆症或 腎纖維化之藥劑上之用途。 於另一實施例中，本發明係關於—種用於治療之如式⑴ 之化合物。 於另一貫施例中，本發明係關於—種醫藥組合物，其包 含如式（I)之化合物及一或多種活性成份。 於另一實施例中，本發明係關於—種調節趨化因子或趨 化因子受體活性之方法’其包含對有需求之病患投與治療

156717.doc 1Λ -10 - S 201206435 有效量之包含如式（i)之化合物及一或多種活性成份之醫藥 組合物。 於另一實施例中，本發明係關於一種調節CCRq受體活 性之方法，其包含對有需求之病患投與治療有效量之包含 如式⑴之化合物及一或多種活性成份之醫藥組合物。 於又一實施例中，本發明係關於一種由CCR4受體介導 之 MIP-Ια、MCP-3、MCP-4 或 RANTES 活性，較佳 Μιρ_1α 活性之調節方法，其包含對有需求之病患投與治療有效量 之包含如式⑴之化合物及一或多種活性成份之醫藥組合 物。 於另一實施例中，本發明係關於一種治療病症之方法， 其包含對有需求之病患投與治療有效量之包含如式⑴之化 合物及一或多種活性成份之醫藥組合物，其中該病症係選 自骨關節炎、動脈瘤、發熱、心血管作用、克隆氏病、充 血性心臟衰竭、自體免疫疾病、HIV-感染、HIV-相關癡呆 症、牛皮癬、特發性肺纖維化、移植動脈硬化、物理或化 學誘導之腦創傷、神經痛、發炎性腸病、肺泡炎、潰瘍性 結腸炎、全身性紅斑狼瘡、腎毒血清腎炎、腎小球腎炎、 哮喘、多發性硬化、關節硬化、類風濕性關節炎、再狹窄 症、器官移植、牛皮癬關節炎、多發性骨髓瘤、過敏症 (如皮膚及眼結膜中之肥大細胞去顆粒）、肝細胞癌、結腸 直腸癌、骨質疏鬆症、腎纖維化及其他癌症，較佳地，克 隆氏病、牛皮癖、發炎性腸病、全身性紅斑狼瘡、多發性 硬化、類風濕性關節炎、多發性骨髓瘤、過敏症（如皮膚 156717.doc 201206435 及眼結膜中之肥大細胞去顆粒）、肝細胞癌、骨質疏鬆症 及腎纖維化。 於又另一實施例中，本發明係關於一種治療炎症性疾 病’較佳至少部份由CCR-1介導之炎症性疾病之方法，其 包含對有需求之病患投與治療有效量之包含如式⑴之化合 物及一或多種活性成份之醫藥組合物。 於另一實施例中’本發明係關於一種調節CCRJ活性之 方法，其包含對有需求之病患投與治療有效量之包含如式 (I)之化合物及一或多種活性成份之醫藥組合物。 於另一實施例中，本發明係關於一種以包含如式⑴之化 合物及一或多種活性成份之醫藥組合物於製備用於治療病 症之藥劑上之用途，該病症係選自骨關節炎、動脈瘤、發 熱、心血管作用、克隆氏病、充血性心臟衰竭、自體免疫 疾病、HIV-感染、HIV-相關癡呆症、牛皮癬、特發性肺纖 維化、移植動脈硬化、物理或化學誘導之腦創傷、神經 痛、發炎性腸病、肺泡炎、潰瘍性結腸炎、全身性紅斑狼 瘡、腎毒血清腎炎、腎小球腎炎、哮喘、多發性硬化、關 節硬化、類風濕性關節炎、再狹窄症、器官移植、牛皮癖 關知炎夕發性骨艟瘤、過敏症（如皮膚及眼結膜中之肥 大細胞去顆粒）、肝細胞癌、結腸直腸癌、骨質疏鬆症、 腎纖維化及其他癌症’較佳地，{隆氏病、牛皮癖、發炎 I·生腸病、全身性紅斑狼瘡、多發性硬化、類風濕性關節 炎多發性骨髓瘤、過敏症（如皮膚及眼結膜中之肥大細 胞去顆粒）、肝細胞癌、骨質疏鬆症及腎纖維化。 156717.doc

S • 12 · 201206435 於又-實施例中，本發明係關於—種以包含如式⑴之化 合物及一或多種活性成份之醫藥組合物於治療上之用途。 本發明可在不脫離其精神或必要屬十生下以其他特定形式 實施。本發明亦涵蓋文中所述之本發明之各態樣之所有： 合。應理解本發明之任何及所有實施例可與任何其他實施 例組合以描述本發明之額外實施例。此外，一實施例之任 何元素可與實施财任—者之任何及所有其他元素組合: 描述額外實施例。 文中所述之化合物可具有不對稱中心。含有不對稱取代 原子之本發明化合物可以光學活性或消旋形式分離。於本 技藝中已熟知如何製備光學活性形式，如藉由解析消旋形 式或藉由自光學活性起始材料之合成。於本文所描述之化 合物中亦可存㈣烴、C=N雙鍵及類似者之許多幾何異構 體，且所有此等穩定異構體涵蓋於本發明中。描述本發明 ，合物之順式及反式幾何異構體幻系以異構體混合物或以 草離的異構形式分離。除非明確指出具體立體化學結構或 異構形式’否則意指結構之所有掌性、非對映異構、消旋 形式及所有幾何異構形式。 ，式1化合物之一冑映異構體可展現優&其他之極佳活 性。因此，所有立體化學結構視為本發明之一部分。需要 時’消旋物質之分離可藉由利用掌性柱之肌以藉由利 用解析劑之解析如熟習本項技術者已知般進行。 短語「醫藥可接受」於本文中係指在合理範圍的醫療判 1567l7.doc •13· 201206435 斷下，適於與人類及動物組織接觸而無過量毒性、刺激、 過敏性反應、或其他問題或併發症，相當於合理效益/風 險比之彼等化合物、物質、組合物及/或劑型。 如本文所使用，「醫藥可接受鹽」係指所揭示化合物之 衍生物，其中原化合物係藉由製得其酸或鹼鹽而加以改 質。醫藥可接文鹽之實例包括，但非限於，驗性殘基（如 胺）之無機或有機酸鹽；酸性殘基（如叛酸）之驗式或有機 鹽，及類似者。醫藥可接受鹽包括自（例如）無毒性無機或 有機酸形成之原化合物之習知無毒性鹽或季銨鹽。例如， 此等習知無毒性鹽包括自諸如氫氣酸·、氫溴酸、硫酸、胺 磺酸、磷酸、硝酸等之無機酸衍生之彼等物；及由諸如乙 酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、蘋果酸、酒 石酸、棒檬酸、抗壞血酸、雙經蔡酸、馬來酸、經基馬來 酸、苯乙酸、榖胺酸、苯曱酸、水揚酸、磺胺酸、2_乙醯 氧基苯曱酸、富馬酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙烷二磺酸、 草酸、羥乙續酸等之有機酸製備之鹽。 本發明之醫藥可接受鹽可由含有驗性或酸性部分之原化 合物藉由習知化學方法合成。一般而言，此等鹽可藉由使 此等化合物之游離酸或鹼形式與含化學計量之量之適宜鹼 或酸之水或有機溶劑’或兩者之混合物反應製備；一般而 言’以非水性介質如醚、乙酸乙酯、乙醇、異丙醇或乙腈 為較佳。適宜鹽之列表參見Remingtonis Pharmaceutical

Sciences，17 版，Mack Publishing Company，Easton，PA， 1985，第1418頁，該案之揭示内容係以引用之方式併入本

I56717.doc . I4. S 201206435 文 此外，如式（i)之化合物於製備之後，較佳進行單離及純 化以獲得包含量（重量比）等於或大於99%之式I化合物（「實 質上純」化合物I)之組合物，隨後如本文所描述般使用或 調配 分0 此 貫質上純」式I化合物亦視為本發明之 部 涵蓋呈混合物或純或實質上純形式之本發明化合物之所 有對映異構體。本發明之化合物可於包含R取代基中任一 者之任-碳原子上具有非對稱中心及/或展現多形性。因 此，如式I之化合物可以對映異構或非對映異構形式或其 等混合物之形式存在。製備方法可將消旋體、對映異構體 或非對映異構體用作起始物質。當製備非對映異構或對映 異構產物時等可藉由習知方法(例如，層析或分步結 晶）分離β 「穩定化合物」及「穩定結構」意指穩固性足自反應混 物單離至有用純度並調成有效治療劑之化合物。本發 明意欲獲得穩定化合物。 「治療有效量」意欲包含僅本發明化合物之量或所主張 ，合物之組合之量或本發明化合物與有效抑制或有 效’U療或預防炎症性病症之其他活性成份之組合之量。 如本文所使用，「治療」涵蓋治療哺乳動物，尤其人類 二；病Λ i包括·（a)預防哺乳動物發生疾病病況，特 s此甫乳動物趨於罹患疾病病況但仍未診斷出已 罹患；（b)抑制疾病病況，gp B ^ 扣巳 即，阻止其發展；及/或（c)緩解 156717.doc • 15 - 201206435 疾病病況’即’使疾病病況回退。 合成 如以下實例、反應方案及其論述，以及可由熟習此項技 術者利用之相關文獻製程所示般製備如式I之化合物。用 於此等反應之示例性試劑及製程描述於下文中。 步驟1 : 3 -曱基-4-氧基六氫η比咬-1-繞酸第三丁基酯

於真空及II氣下，使於乙醇（100 mL)中之1-节基-3-甲基 六氫。比。定-4-酮（11.4 g，56.1 mmol)、Boc-酐（14.32 mL， 61.7 mmol)及 10°/。碳載鈀（0.597 g，5.61 mmol)之混合物除 氣漏，隨後於50 psi下，室溫氫化4小時。過濾移除觸媒， 以甲醇沖洗’及真空濃縮組合之濾液與沖洗液。經330 g 矽膠柱純化殘餘物，以1 〇〇 mL/min進行乙酸乙酯/己烷梯 度洗脫而得到呈油形式之3-曱基-4-氧基六氫吡啶-1-羧酸 第三丁基S旨（11.66 g，54.7 mmol，97%得率），其靜止時凝 固。1H NMR (CDC13，400 ΜΗζ) δ 4.15 (m，2H)，3.22 (m， 1H), 2.79 (br m9 1H), 2.52-2.38 (m, 3H), 1.46 (s, 9H), 1.01 (d，J=6.8 Hz, 3H); m/z=158.2 (M-tBu)+。 步驟2 : 4-(4-氣苯基）-3-甲基-5,6-二氫吡啶-1(2H)_羧酸 第三丁基酯

156717.doc -16 - S 201206435 使含 1-溴-4-氣苯（21.87 g，114 mmol)之無水 THF (2 5 0 mL)溶液冷卻至_78。(：及經正丁基鋰（43·5 mL，109 mmol， 1.6 Μ己烷溶液）逐滴處理。於_78〇c下將該混合物攪拌45分 鐘’期間觀察到沈澱物，隨後該漿液經含3-甲基-4-氧基六 氳°比咬-1-緩酸第三丁基醋（11.6 g，54.4 mmol)之無水 THF(50 mL)溶液逐滴處理。於-78^下將反應攪拌2小時， 隨後緩慢升溫至-20°C及經飽和氯化銨淬滅。分層，及真 空濃縮有機相。經乙酸乙酯（300 mL)萃取水相一次，及將 有機相與來自原有機相之殘餘物合併。藉由水清洗混合物 3次及藉由鹽水清洗一次，然後經硫酸鈉乾燥並真空濃 縮。於沸騰己烷（200 mL)中消化殘餘物1小時，及隨後將 混合物冷卻至室溫。過濾收集固體，經少量熱己烷沖洗， 及真空乾燥以獲得呈粉末形式之4-(4-氯苯基）-4-羥基-3-甲 基六氫吡啶-1-羧酸第三丁基酯（13.96 g，42.8 mmol，79% 得率）。m/z=252.2(M-tBuO)+。 於250 mL圓底燒瓶中’以濃HC1(25 mL，300 mmol)處理 4-(4-氯苯基）-4-羥基-3-甲基六氫吡啶-i_羧酸第三丁基酉旨 (4.3 g，13.2 mmol)。室溫下授拌該混合物直至劇烈冒泡停 止及觀察到多相自由攪拌混合物。回流下將混合物加熱i 9 小時’期間觀察到澄清溶液。 真空濃反應混合物，及自曱苯濃縮殘餘物兩次以移除 殘餘HCh將殘餘物懸浮於Thf(50 mL)中，及添加B〇e_酐 (3.00 mL，12.9 mmol)，接著添加三乙胺（5.52 mL，4〇 mmol)。室溫下將反應攪拌2小時。隨後真空濃縮混合物， 1567I7.doc -17- 201206435 及將殘餘物溶於乙酸乙酯（150 mL)中。以！ N HC1(3 乂）清 洗多相混合物，以水清洗一次及以鹽水清洗一次，隨後經 硫酸鈉乾燥及真空濃縮以獲得呈油形式之4_(4_氣苯基）_3_ 曱基-5,6-二氫吡啶-1(2H)-羧酸第三丁基酯（4.3 g)。lH NMR (400 MHz, MeOD4) δ 7.34 (m, 2Η), 7.14 (d, J=8.3 Hz, 2H), 3.87 (br s, 2H), 3.58 (br s, 2H), 2.33 (m, 2H), (1.58 (s, 3H), 1.48 (s, 9H); m/z (ESI+)=252.1 (M - tert-Bu)+。 步驟3 : (3S，4S)-4-(4-氣苯基）-3,4·二羥基·3·甲基六氫吡 啶-1-羧酸第三丁基酯

將含4-(4-氯苯基）-3 -甲基-5,6-二氫°比。定_ι(2Η)-羧酸第三 丁基酯（2.2 g，7.15 mmol)之5 0%第三丁醇/水（5〇 mL)溶液 冷卻至5°C，及經曱烷磺醯胺（0.680 g，7.15 mmol)及 AD-Mixa(ll g ’ 7.15 mmol)處理。於5°C下將所得之懸浮液 攪拌4小時，隨後缓慢升溫至室溫及攪拌3天。隨後使該混 合物冷卻至5°C及經亞硫酸鈉固體處理，及將該混合物搜 拌1小時’期間觀察到澄清溶液。該混合物經乙酸乙g旨（3 X)萃取’隨後經水清洗合併之有機相兩次，及經鹽水清洗 一次，經硫酸鈉乾燥，及真空濃縮。藉由MPLC，於120 g 石夕膠柱上純化殘餘物，以85 mL/min經25%，接著30°/。，接 著35%乙酸乙酯/己烷洗脫以獲得呈油形式之（3s，4S)_4_(4_ 156717.doc •18· 201206435 氯笨基）-3,4-二羥基-3-甲基六氫吡啶_丨_羧酸第三丁基酯 (2.1 g，5.53 mmol，77%得率）。iH NMR (4〇〇 mHz，

MeOD4) δ 7.53 (d, J=8.8 Hz, 2H), 7.30 (d, J=8.8 Hz, 2H), 4.05 (br d，1H)，3.73 (m，1H)，3.26 (m，2H)，2.48 (ddd， J=12.7, 4.8 Hz, 1H)，1.65 (d，J=14.1 Hz，1H)，1.47 (s，9H)， 0.92 (s, 3H); m/z (ESI+)=342.1 (M+H)+, 286.1(M - tert-Bu)+ 〇 步驟4:(35,48)-4-(4-氯苯基）-3_曱基六氫〇比咬_3,4_二醇 鹽酸鹽

室溫下，將含（3S,4S)-4-(4-氯笨基）-3,4-二羥基-3-曱基六 氫吡啶-1-羧酸第三丁基酯（2.08 g，6.08 mmol)之4 M HC1 之二氧雜環己烷（30·4 mL，122 mmol)溶液攪拌45分鐘。真 空濃縮該混合物，隨後自二氣甲烷（3 X)濃縮以移除殘餘 HC1，以獲得呈粉末形式之（3S，4S)-4-(4-氣苯基）-3-曱基六 氫吡啶-3,4-二醇鹽酸鹽（1.7 g，6.11 mmol，100%得率）。 !H NMR (400 MHz, MeOD4) δ 7.55 (d, J=8.8 Hz, 2H), 7.36 (d, J=8.8 Hz, 2H),.3.42 (m, 1H), 3.29 (m, 1H), 3.05 (d, J=13.2 Hz, 1H), 2.71 (ddd, J=13.2 , 4.8 Hz, 1H), 1.97 (dt, J=14.5, 3.1 Hz, 1H), 1.08 (s, 3H); m/z (ES+)=242.1 (M+H)+。 步驟 5 : (R)-l-((3S，4S)-4-(4-氣苯基）-3,4-二羥基-3-甲基 156717.doc -19- 201206435 六氫吡啶-1-基）-3-曱基-1-氧基丁-2-基胺基曱酸第三丁基酯

室溫下，將 DIPEA(132 mL，753 mmol)% 加至（3S，4S)-4-(4-氣苯基）-3-曱基六氫吡啶-3,4-二醇（91 g，376 mmol)、 Boc-D-顯胺酸（83.1 g，382 mmol)、HOBt(69.2 g，452 mmol)、EDC(87 g，452 mmol)之 CH2C12(800 mL)及 DMF(80 mL)之混合物中。室溫下將該混合物攪拌過夜。 濃縮反應產物及將殘餘物分配於EtOAc與水之間。以1 N HC1、飽和NaHC03水溶液、及鹽水清洗EtOAc層以獲得粗 產物（180 g，〜80%純度），該產物可直接用於下一步轉 化。 步驟6 : (3S,4S)-4-(4-氯苯基）-3-甲基-1-D-纈胺醯基-3,4-六氫吡啶二醇

於 60°C 下，將含（R)-l-((3S,4S)-4-(4-氯苯基）-3,4-二羥 基-3 -曱基六氮°比咬-1-基）-3 -曱基-1-氧基丁-2 -基胺基甲酸 第三 丁基酯（0.150 kg，0.34 mol)及 HC1(408 mL，1.02 mol，2.5 Μ)之EtOH(18 mL)溶液攪拌2小時。隨後移除溶 (劑以獲得油狀物，添加EiOAc(l L)、水（1 L)及TEA(2 mol)。 室溫下，將二層式溶液攪拌2小時及產物以固體形式沈澱 156717.doc -20-

S 201206435 70 g ’ 98〇/〇純度）。另自MeOH之再結晶使純度增至99.8% » 自母液另回收11 g以提供呈固體形式之（3S，4S)-4-(4-氯苯 基）-3 -甲基-1-D-顯胺醯基-3,4-六氫〇比咬二醇（81 g，70%得 率）。4 NMR (400 MHz, MeOD4，旋轉異構）δ 7.54 (n， 2H), 7.31 (m, 2H), 4.53 (m, 0.5H), 4.27 (dd, J=12.4, 1.2 Hz, 〇.5H), 3.93 (br d, 0.5H), 3.70 (t, J=5.2 Hz, 1H), 3.69 (m, 1.5H), 3.14 (m, 1H), 2.49 (ddd, J=13.9, 4.8 Hz, 1H), 1.96-1.71 (m, 2H), 1.07-0.89 (m, 9H); m/z=341.12 (M+H)+。 步驟7 : (R)-3,3-二氟環戊烷羧酸苄基酯

將（R)-3-氧基環戊烧叛酸节基醋（62.8 g，288 mmol)溶於 二氣乙烷（220 mL)中並藉由冰浴冷卻至i〇°c »將三氟化（二 乙胺基）硫（86 mL，647 mmol)添加至該混合物中及添加期 間維持反應溫度低於室溫。升溫至室溫之後，於40°C下將 溶液加熱12小時及隨後室溫下攪拌12小時以獲得黑色溶 液。藉由乾冰/MeOH冷卻所得之溶液及藉由MeOH(30 mL) 淬滅。隨後將該混合物傾入經乾冰/MeOH冷卻之4 L燒杯 中及緩慢添加NaHC03+Na2C03水溶液以調節至pH 5-7。以 DCM萃取產物及濃縮有機層以獲得液體（>80 g)。藉由柱層 析EtOAc/己烷（0-10%梯度，15分鐘）純化粗產物以提供呈 液體形式之44 g (R)-3,3-二氟環戊烷羧酸苄基酯^ 1H NMR 156717.doc 21 201206435 (CDC13, 400 MHz) δ 7.23 (m, 5H), 3.05 (m, 1H), 2.34-2.45 (m，2H)，2.01-2.16 (m，4H). m/z=263.2 (M+Na)+。 步驟8 : (R)-3,3_二氟環戊烷羧酸

室溫下’將（R)-3,3-二氟環戊烷羧酸节基醋（13 g，54.1 mmol)在攪拌下溶於MeOH(200 mL)中，隨後添加0.5 Μ LiOH(216 mL ’ 108 mmol)。攪拌2小時之後，將水添加至 反應混合物及濃縮以移除揮發性溶劑。以Et2〇(2x)沖洗水 層’隨後利用1 N HC1酸化至pH 3 »以二氣曱烷（2x)萃取水 層及合併有機層，乾燥（NaaSO4)及濃縮以獲得呈油形式之 (R)-3,3-二氣1 環戊烧缓酸（6.58 g，43.8 mmol，81%得率）。 *H NMR (MeOD3, 400 MHz) δ 3.03 (m, 1Η), 2.33 (m, 2H), 1.95-2.20 (m, 4H); m/z=149.2 (M-H) o 步驟 9 : (R)-N-((R)-l-((3S，4S)-4-(4-氯苯基）-3,4-二羥基 _ 3-曱基六氫《比啶-1-基）-3-曱基-1-氧基丁-2-基）-3,3-二氣環 戊烷甲醯胺

將 HOBT(12.50 g，82 mmol)、EDC(15.65 g，82 mmol) 及休尼格（Hunig's)驗（23.76 mL，136 mmol)添加至（R)-2-胺 基-l-((3S，4S)-4-(4-氣苯基）-3,4-二羥基-3-曱基六氫吡啶 156717.doc -22- 201206435 基）-3-甲基丁-1-酮（22.49 经，66.〇111111〇1)、（1^)-3,3-二1環 戊烧叛酸（10.21 g，68.0 mmol)之 CH2Cl2(300 mL)及 DMF(75 mL)之混合物中。室溫下將反應攪拌2〇小時，隨 後濃縮以移除CHAl2。添加乙酸乙酯及有機層經1 N HC1 清洗兩次，經飽和碳酸鈉清洗兩次及經水清洗三次。有機 層經硫酸鈉乾燥及濃縮以獲得玻璃固體，自CH3CN結晶獲 得（R)-N-((R)-l-((3S，4S)_4-(4-氣苯基）-3,4-二羥基-3-甲基 六氫。比啶-1-基）-3-曱基-1-氧基丁_2_基）_3,3_二氟環戊烷甲 酿胺（31.03 g ’ 65.6 mmol，99%得率）。 H NMR (500 MHz，DMSO-d6，旋轉異構）§ 8.11 (m 1H)， 7.55 (m, 2H), 7.34 (app t, 2H), 5.29 (d, J=6.9 Hz, 1H), 4.76 (m, 0.5H), 4.68-4.58 (m, 1.5H), 4.43 (br m, 0.5H), 4.09 (br d, 0.5H), 3.97 (br d5 0.5H), 3.50 (m, 1H), 3.35 (m5 3H), 3.00 (m, 2H), 2.31 (m, 〇.5H), 2.32-1.94 (m, 6.5H), 1.77 (m, 1H), 1.65 (m, 1H)S ().92-0.83 (m, 6H), 0.74 (m, 3H); m/z=473.2 (M+H) 〇 用途 般而。如式（1)之化合物顯示為一種趨化因子受體活 性之調節劑。因展現作為趨化因子受體活性調節劑之活 性，如式⑴之化合物預期可用於治療與趨化因子及其等同 源受體相關之人類疾病。 以下係對比化合物1盥TTC Λ /、US 2007/0208056Α1(對應 wo 2007/092681)中之化合物之验姑^ 口扨之4樂及生理化學特性之試驗及 156717.doc -23· 201206435 資料》 將本發明之化合物（化合物1)與已證實為CCR-1活性之有 效抑制劑且具特別優勢之其他化合物對比。例如，較其他 化合物之出人意料之優點係顯示於下表1及2中。 人類CCR1 THP-1結合試驗 針對放射性配位體競爭研究，於40 pL試驗緩衝液（無酚 紅的 RPMI 1640，50 mM HEPES，5 mM MgCl2，1 mM CaCl2，0.1% BSA)中使最終濃度為ΙχΙΟ5 THP-1單核白血 病細胞與 100 pg LS WGA PS 珠粒（Amersham，Cat.# : RPNQ 0260)組合。將THP-1細胞/珠粒混合物添加至含有3 倍連續稀釋之測試化合物之384孔試驗板（PerkinElmer， Cat·# : 6007899)之各孔中，使最終濃度介於8 μΜ至0.14 ηΜ之間。將最終濃度〇·1 ηΜ之[125I]-MIP-la(PerkinElmer， Cat.#NEX298)之20 μί試驗緩衝液添加至反應中。將過量 之未標記ΜΙΡ-Ια添加至一些孔中以確定非特異結合。室溫 下將密封試驗板培養12小時，隨後進行LEADseekerTM* 析。 將於一濃度範圍内之測試化合物之競爭資料繪製為不存 在測試化合物時特異性結合之放射性配位體之抑制百分比 (總信號之百分比）。校正非特異結合之後，確定IC5〇值。 將IC5〇值定義為使[125I]-MIP-l(x特異結合減少50%所需之測 試化合物濃度且利用四參數邏輯曲線方程式計算以配合標 準化資料。藉由將IC5〇值代入Cheng-Prusoff等式確定Ki 值，其中Ki=IC50/(l +配位體濃度/Kd)。[125Ι]-ΜΙΡ-1α 於 THP-1 156717.doc -24·

S 201206435 細胞中之Kd係0· 1 nM。重複進行各實驗。 hERG膜片鉗試驗 全細胞膜片钳用於直接測量穩定表現經選殖之hERG_ 離子通道α次單元之HEK-293細胞中之hERG尾電流。藉由 測量峰尾電流之抑制性計算化合物之效用。利用pH 74之 水性緩衝液於室溫下進行實驗。試驗緩衝液中不含蛋白 質。所提出之測試濃度係標稱游離藥物濃度。所出示之數 據為在固定濃度下之抑制百分比。 鈉及L-型鈣離子通道試驗 以全細胞膜片鉗用於直接測量表現人類心臟納通道， SCN5A之HEK-293細胞中之内向鈉電流。於藥物存在下到 達穩態作用之後，藉由在丨Hz及4 Hz之頻率下之刺激來評 估速率相關性。利用pH 7.4之水性緩衝液於室溫下進行實 驗:緩衝液中不含蛋白冑’且所提出之藥物濃度係標稱游 離藥物濃度》所評估之測試物至高為1〇 μΜ(不含蛋白質之 緩衝液）。藉由在i Ηζ及4 Ηζ頻率之刺激下評估抑制作用之 速率相關性。所出示之數據為在固定濃度下之抑制百分 比。 除與L㈣離子通道相互作用之電位外，全細胞膜片麵 亦可用於直接測量穩定表現經選殖之人類心臟L_sCa («1C)及其β次單元之騰_293細胞中之内向飼電流。藉由 測量峰電流之抑制性’計算化合物之效用。利用pH 乂之 水性緩衝液於室溫下進行實驗。緩衝液中不含蛋白質，且 所提出之藥物濃度係標稱游離藥物濃度。所出示之數據為 156717.doc -25· 201206435 在固定濃度下之抑制百分比。 麻醉兔之心電圖 於麻醉兔中進行測試化合物之劑量-反應研究，以評估 細胞離子通道試驗中所建立之心臟電生理曲線。 對、星異丙驗-芬太尼（pr〇p〇f〇1_fentanyl)胸外麻醉之雄性 兔進行實驗。研究期㈤分別使用p〇NeMah系統及Ργ_電 生理記錄系統連續監控並記錄體表心電圖（ecg)及心臟内 希氏束電圖。研究當曰，在PEG400:乙醇^M1:1:1)之媒劑 中製備具有30 藥濃度之測試化合物。於5分鐘内 藉由輸注泵，以3、1〇及30 mg/kg2遞增劑量經靜脈内供 給測試化合物（n=3)或媒劑（n=3)。投藥間隔為1〇分鐘分 為5分鐘之測試藥劑輸注及5分鐘之休息時期。於基線（藥 物輸注前）時及於每次輸注結束時立即採血樣。針對％ mg/kg劑量，於輸注結束後第1〇、2〇及3〇分鐘時另採血 樣。 自採血樣時之1分鐘ECG記錄期間取pr間隔、QRS持續 時間及QT間隔平均值。利用Fridericia(QTcf)及Van der Water(QTcv)方程式針對心跳速率作用校正qT間隔。藉由 自希氏束電圖之人工測量評估ΑΗ及HV間隔，其等分別表 示A-V結傳導及希氏_浦金埃s(His_Purkinje)傳導。數據係 以PR、QRS、AH及HV間隔之投藥前基線之百分比變化（平 均值士SEM)及QTc間隔之藥物輸注前基線之變化△(平均值 士SEM)表示。基於此模型之經驗，將&丨〇%之pR、qRS及 AH間隔變化及20%之HV間隔變化及>10 mSiQTc^B]隔變化 •26- I56717.doc

S 201206435 視為顯著。 如下表1所示，活體内數據表明化合物I之優異安全性。 特定言之，化合物I展現較其他化合物更低之活體内CCR1 Ki，亦具有30 mg/kg兔子之無觀測到效應之濃度（NOEL)。 雖然實例491之化合物具有類似NOEL，然而其相對化合物 I具有更高絕對QT延長及更低循環藥物游離部分。 表1 :活體外及活體内心血管安全性 試驗 化合物I EX# 491* EX# 572* CCR1 Ki (nM) 1.6 2.1 1.5 hERG通道， 抑制％ 22% @ 30 μΜ 27% @ 30 μΜ 32% @ 30 μΜ Na通道，抑制％ 21%@ ΙΟμΜ 13% @ ΙΟμΜ 25% @ ΙΟμΜ Ca通道，抑制％ 29% @ 30 μΜ 22% @ 10μΜ 19%@30μΜ 蛋白結合 68% 95% 84% 人類 (兔 54%) (兔 94%) (兔 87°/。） 兔活體内EP效應 QTcf，A 無效應 +17 ms +22 ms QT效應 劑量 無效應高達 30 mg/kg 96/52 μΜ 30 mg/kg 10 mg/kg Cmax:總藥物/游離 藥物 138.5/5.5 μΜ 48.6/6.3 μΜ NOEL劑量， Cmax:總藥/自由藥物 30 mg/kg 96/52 μΜ 10 mg/kg 77/3.1 μΜ 未識別 <10 mg/kg <48.6/6.3 μΜ (*)-如下所示之US2007/0208056之實例：

156717.doc -27- 201206435

PXR轉活化試驗 所用細胞培養基係DMEM。自GIBCO/Invitrogen (Carlsbad，CA)購置脂質轉染胺2000、PBS、熱滅活胎牛血 清（FBS)、胰蛋白酶-EDTA(0.25%)、及青黴素-鏈黴素。自 Hyclone(Logan，UT)購置經炭/葡聚糖處理之胎牛血清 (FBS)。自 ATCC(Manassas，VA)獲得 HepG2 細胞。Bristol-Myers Squibb產 生人類 PXR-pcDNA3 及含有 CYP3A4 啟動 子、CYP3A-Luc之螢光素酶受體。自 Perkin Elmer(Boston， 1^八）購置白色組織培養（丁(：）-表面3 84-孔板。自？1*〇111683 (Madison，WI)購置榮光素酶基質（Steady-Glo)。自 Sigma (St. Louis, MO)購置對照化合物利福平（rifampicin)、米非 司酮（mifepristone)及績 η比酮（suljfinpyrazone)。 於T175燒瓶中利用含有10% FBS之DMEM進行HejDG2細 胞培養。轉染混合物含有1 pg/mL PXR-pcDNA3質粒 DNA、20 gg/ml Cyp3A-Luc 質粒 DNA、90 pL/mL脂質轉染 胺2〇00及無血清培養基。室溫培養20分鐘後，將轉染混合 物（1 ml/燒瓶）施用於新鮮培養基（20 mL/燒瓶）中之細胞， 及燒瓶於37°C (5% C02)下培養過夜。 藉由PBS清洗各燒瓶中之細胞及添加2 mL胰蛋白酶-EDTA(0.25%)並於37°C，5% C02下培養5分鐘。隨後用力 輕敲該等燒瓶以破壞細胞聚結物。添加8 mL含有5%經炭/

156717.doc -28 - S 201206435 葡聚糖處理之FBS之DMEM後’將整個混合物轉移至錐形 管。隨後於1000 rpm下將細胞離心5分鐘》將細胞小球再 懸浮於冷凍培養基（含有20%血清及1〇% DMSO之DMEM)中 至〜7X 106細胞/mL之最終計數。將細胞懸浮液分裝至15-mL聚丙烯管中’每管5 mL。藉由置於_80。(：之泡沫聚苯乙 稀-絕緣容器中過夜將細胞緩慢地冷床。24小時後將小瓶 轉移至超冷（-140°C)冷凍器以長期保存。 於溫水浴中將凍存細胞小瓶快速解凍5分鐘。收集細胞 及於50-mL錐形瓶中稀釋至50 mL »於1500 rpm下將經解凍 之細胞離心5分鐘以收集細胞及丟棄上清液《隨後將細胞 再懸浮於新鮮培養基11(含有5%經炭/葡聚糖處理之FBS、 1 °/〇青黴素/鏈黴素、100 μΜ非必需胺基酸、1 mM丙酮酸鈉 及2 mM L-榖胺醯胺之DMEM)中，利用Guava細胞計數器 計數，及於相同培養基中稀釋至1.6x1 〇5細胞/ml。 將50微升細胞混合物添加至含有溶於1 〇〇% DMSO中之 0.25 μί測試化合物之白色組織培養處理之384-孔板之攔1 至23中之孔。將50微升培養基II添加至攔24中之孔。將板 於37°C(5% C02)下培養24小時，隨後將5 pL阿爾瑪藍試劑 (Alamar Blue reagent)(Trek Diagnostics，Cat# 00-100)加 入各孔中。然後將盤於37°C、5% C02下再培養2小時及隨 後於室溫下培養1小時。於Ex525/Em598下讀取螢光值。測 量螢光值後，將25 μΕ螢光素酶基質（Steady-Glo， Promega)加入各孔中。於室溫下將此等板培養15分鐘，然 後於PheraStar(BMG Labkch)板讀取器上讀取發光值。 156717.doc -29- 201206435 各板中包含利福平（10 μΜ)(熟知PXR激動劑）作為内標及 陽性對照。隨後將數據表示為對照百分比（％ CTRL)，其中 對照信號係來自10 μΜ利福平之信號及空白信號係DMSO 媒劑之信號。 % CTRL=((化合物信號-空白信號）/(對照信號-空白信 號）)*100 以1 0個濃度（2.5 nM至50 μΜ，1:3連續稀釋）測試化合 物。試驗結果表示為ECm，即觀察到50%最大反應時之化 合物濃度，及表示為YMAXOBS，即針對彼化合物所觀察 到之最大反應（最高CTRL百分比）。EC 5Q定義為對應自利用 四參數邏輯回歸模型所確定之擬合20點曲線獲得之最大反 應之一半之濃度。此外’化合物亦可表示為EC2〇或EC60。 HepG2細胞毒性試驗之數據分析 以10個濃度（2.5 nM至50 μΜ，1:3連續稀釋）測試化合 物。試驗結果表示為1〇5〇 ’其定義為對應自利用四參數邏 輯回歸模型所確定之擬合20點曲線獲得之50%抑制之濃 度。 活鱧外代謝試驗 试驗條件A : 獲得3.5 mM原液之100% DMSO之測試化合物。稀釋化 合物以形成含有1.4% DMSO之50 μΜ乙腈（ACN)溶液，隨 後將此用作與微粒體一起培養之丨00χ原液。於代謝穩定 性-人類、大鼠及小鼠試驗組中對三物種中每一者單獨地 重複性測試各化合物或於代謝穩定性_狗或代謝穩定性_猴

156717.doc 3〇 S 201206435 組中對各物種如此般。於三個步驟中組合化合物、 NADPH及肝微粒體溶液以用於培養： 於37°C下預熱152 p.L肝微粒體懸浮液，於100 mM NaPi 中具1.1 mg/mL之蛋白濃度，PH 7.4，6.6 mM MgCl2緩衝 液0 1)將 1.7 μί 50 μΜ 化合物（98.6% ACN，1.4% DMSO)加入 同一管中及於37°C下預培養5分鐘。 2)藉由添加17 pL，pH 7.4之經預熱之10 mM NADPH於100 mMNaPi中之溶液使反應開始。 3)充分混合反應組分，及立即將75 pL轉移至150 μί淬滅/ 終止溶液（零-時間點，Τ〇)中。於37°C下將反應培養10分 鐘及隨後將另75 μι等分液轉移至150 μί淬滅溶液中。 將含有100 μΜ DMN(注射品質對照之UV標準品）之乙腈 用作淬滅溶液以終止代謝反應。 4)於 Allegra Χ-12 離心機、SX4750 滾筒（Beckman Coulter

Inc.，Fullerton, CA)中以 1500 rpm(〜50〇xg)將經淬滅之混 合物離心15分鐘以造粒變性微粒體。隨後將含有原化合 物及其代謝產物之混合物之9〇 體積之上清液提取物 轉移至一單獨96-孔板進行υν-LC/MS-MS分析以確定混 合物中所殘留的原化合物之百分比。

........ 代謝穩定性試驗-反龐組分 反應組分 丨 1 ."一 代謝穩定性試驗中之最終濃度 化合物(基質）… —~ 0.5 μΜ

100 mM 0.014% 156717.doc • 31 · 201206435 代謝穩定性試驗-反應組分 乙腈 0.986% 微粒體(人類，大鼠，小鼠)(BD/Gentest) 1 mg/mL蛋白 NADPH 1.0 mM MgCl2 6.66 mM 37°C培養時間 0分鐘及10分鐘 淬滅/終止溶液(ACN+100 μΜ DMN) 150μί 反應樣品 75 pL 變性微粒體之沈澱 15分鐘 上清液之UV-LC/MS分析 0.17 μΜ 試驗條件B : 獲得20 mM DMSO溶液之測試化合物。稀釋化合物以形 成含有1.5% DMSO之300 μΜ乙腈（ACN)溶液，隨後將此用 作與微粒體一起培養之100X原液《於代謝穩定性-人類、 大鼠及小鼠試驗組中對三物種中每一者單獨地重複性測試 各化合物或於代謝穩定性-狗或代謝穩定性-猴組中對各物 種如此般》於三個步驟中組合化合物、NADPH及肝微粒 體溶液以用於培養： 1. 於37°C下預熱450 μΐ^肝微粒體懸浮液，於100 mM NaPi 中具有1 mg/mL之蛋白濃度，pH 7.4，6.6 mM MgCl2緩衝 液。 2. 將 5 μί 3 00 μΜ化合物（98.5% CAN，1.5% DMSO)加入同 一管中。 ' 3. 藉由添加50#1^，卩117.4之經預熱之5 1111^\八0?11於100 mM NaPi中之溶液使反應開始。 充分混合反應組分及立即將150 pL轉移至淬滅/終止溶 156717.doc -32· 201206435 液作為零-分鐘時間點。於37°C下將反應培養10分鐘及隨 後自培養轉移另150 pL。將所轉移之等分液與含有100 μΜ DMN作為偵測之UV標準品之300 μι ACN組合》 反應組分 W 一-—— 於代謝穩定性試驗中之最终濃度 化合物(基質） 3 μΜ NaPi緩衝液，ρΗ 7·4 100 mM DMS0 0.015% ACN 0.985% 微粒體(人類、大鼠、小鼠)(BD/Gentest) 1 mg/ml蛋白 NADPH 0.5 mM MgCl2 6.66 mM 37°C培養時間 0分鐘及10分鐘 淬滅/終止溶液(ACN+100 μΜ DMN) 300 μι 反應樣品 150 μί 變性微粒體之沈澱 15分鐘 上清液之UV-LC/MS分析. 1.0 μΜ 於 Allegra Χ-12離心機，SX4750滾筒（Beckman Coulter Inc.，Fullerton，CA)中以 1500 rpm(〜500 X g)將經淬滅之混 合物離心15分鐘以造粒變性微粒體》隨後將含有原化合物 與其代謝產物之混合物之110 μΐ體積之上清液提取物轉移 至一單獨96-孔板用於UV-LC/MS-MS分析以確定混合物中 所殘留之原化合物之百分比。 如下表2所示’化合物I亦可藉由2關鍵參數（PXR轉活化 及人類肝微粒體穩定性）進行明確地區別。 PXR轉活化預測潛在的藥物-藥物相互作用。若化合物 活化此受體，則其他藥物可較正常情況更快地代謝，導致 藥物濃度降低及效力下降。此明顯地為待發展之化合物中 156717.doc -33· 201206435 所不適宜之特性。 活體外篩選說明化合物I較除一者外之所羅列之所有化 合物並非此受體之有效活化劑。 最後，於人類肝微粒體穩定性試驗中測試該等化合物， 該試驗係化合物之活體内清除率之良好預測者。就發展之 目的而言，不進一步考究小於70%之化合物。 因此，PXR轉活化之低風險及人類肝微粒體代謝試驗中 所殘留的1 〇〇%化合物之組合說明化合物I具有較其他已知 及結構類似CCR-1拮抗劑之優異藥理學特性。 表2 : PXR/Cyp 3A4誘導能力及代謝穩定性-活體外： 實例 CCR1 Kj (nM) PXR EC5〇 (μΜ) 人類肝微粒體代謝之殘留％ (試驗條件） 化合物I 1.6 >50 96% (B) #1356 3.7 1.83 100% (A)/100% (B) #1083 2.6 1.9 (EC2〇) 13% (A) #460 0.7 0.53 47% (A)/16% (B) #466 2.6 1.12 (EC6〇) 67% (A)/ 33% (B) #850 0.5 10.2 (EC6〇) 99% (A) #897 2.1 >50 (EC6〇) 59% (A) (*)-以下所示來自US 2007/0208056之實例：

156717.doc •34- 201206435 實例466 A DH ΟγΧλΛ 0 實例850 C,x^ DH ΟγΧλ人 0 實例897 )Η 0 實例1083 ·_ >Η 0 1 大鼠之單劑量藥物動力學 經口或IV輸/主對雄性Sprague-Dawley大鼠投與化合物 (N=3個動物）溶液。針對所有研究於投與後之多個時間點 (例如，0.17(或經 口 之0.25)、〇 5、〇 75、】、2、4、68 及24小時）處自頸靜脈收集連續血液樣品。藉由lc_ms/ms 分析血漿樣品。 如上所述般進行額外研究以評估結晶藥物於水性介質中 之懸浮液。 狗之單劑量藥物動力學 經口或iv輸注對雄性beagle狗投與化合物（N=3個動物）溶 液。針對所有研究於投與後之多個時間點(例如， 經口之〇·25)'0.5、⑽、1、^、6、⑽小時）處收集 I56717.doc -35· 201206435 連續血液樣品。藉由LC-MS/MS分析血漿樣品。 如下表3所示，活體内藥物動力學特性證明化合物I於兩 不同物種中之優勢。特定言之，溶液或水性結晶懸浮液於 大鼠中展現較表中其他化合物更高之曝露程度。此特性之 優勢係固體劑型調配物於臨床中所預期之優異性能。 此外，於狗中，化合物1顯示關於活體内清除率（CL)之 優異特性。較對比化合物，展現8至13倍之降低。懸浮液 調配物之優異性能及降低之清除率之組合明確地區別化合 物1。 表3 :化合物1之藥物動力學特性 化合物I EX#491* EX# 572* EX#460 EX#463 物種 大鼠 大鼠 大鼠 大鼠 大鼠 當以溶液方式投 與時大鼠之經口 生物利用率 43% 23% 37% 8% 9% 當以結晶懸浮液 之方式投與時之 相對生物利用率 84% 0% >90% 未測試 未測試 CL (mL/min/kg) 26 67 29 10 75 物種 狗 狗 狗 當以溶液方式投 與時狗之經口生 物利用率 82 100 72 未測試 未測試 CL (mL/min/kg) 0.6 7.9 4.9 (*)-如下顯示來自US 2007/0208056之實例：

156717.doc •36- S 201206435

哺乳動物趨化因子受體提供干擾或促進哺乳動物（如人 類）之免疫細胞功能之標靶。抑制或促進趨化因子受體功 能之化合物特別用於調節免疫細胞功能以爲治療目的。 因此，本發明係關於—種如式（I)之化合物，據信其可用 於預防及/或治療各種炎症、感染、及免疫調節病症及疾 病，包括哮喘及過敏性疾病，病原微生物（其於定義上包 括病毒）感染’及諸如類風濕性關節炎及關節硬化之自體 免疫病理。 例如，可投與抑制哺乳動物趨化因子受體（例如，人類 趨化因子受锻、_ ·+、0 一或夕個功能之本發明化合物以抑制 广緩解或預防)炎症或感染性疾病 症過程受•制，諸 ^種欠 白血球遷移、黏著、趨化性、胞外 156717.doc -37· 201206435 分泌（例如，酶、組胺）或炎症介導劑釋放。 類似地’投與促進哺乳動物趨化因子受體（例如，人類 趨化因子）之一或多個功能之本發明化合物以刺激（誘發.或 增強）免疫或炎症反應，如白血球遷移、點著、趨化性、 月匕外刀泌（例如’酶、組胺）或炎症介導劑釋放，有利刺激 了炎症過程。例如’可補充嗜酸性粒細胞以攻擊寄生蟲感 染。此外，若期望投與充足化合物以藉由誘發趨化因子受 體内部化來導致細胞上之受體表現損失或以誤導細胞遷移 之方式投與化合物，則亦期望促進哺乳動物趨化因子受體 之-或多個功能之本發明化合物可用於治療上述炎症、過 敏性及自體免疫疾病。 除諸如人類之靈長類動物外，亦可根據本發明之方法产 療各種其他哺乳動物。例如，可治療包括但非限於，牛、口 羊、山羊、馬、狗、貓、豚鼠、大鼠或其他牛類、羊類、 馬類、犬類、猶類、齧齒動物或鼠科動物之哺乳動物'然 而、,’本發明方法亦可實施於其他物種，諸如禽類。於以上 法中所療之個體係需調節趨化因+受體活性之雄性或 雌性哺乳動物。如本文所❹之「調節」意欲涵蓋枯抗、 催動、部份拮抗及/或部份催動作用。 可藉由趨化因子受體功能抑制劑治療之人類或其他物種 之疾病或病況包括’但非限於··炎症性或過敏性疾病及病 、匕括呼政系統過敏性疾病，如哮喘、過敏性鼻炎、過 敏性肺部疾病、過敏性肺炎、嗜酸性蜂寫性組織炎（例 如’韋氏（Weli，s)症候群）、嗜酸性肺炎（例如，呂氏 I567l7.doc

S •38· 201206435 (Loeffler’s)症候群 '慢性嗜酸性肺炎）、嗜酸性筋膜炎（例 如’舒-曼（Shulman's)症候群）、遲發型過敏、間質性肺 病（ILD)(例如，特發性肺纖維化、或與類風濕性關節炎相 關之ILD、全身性紅斑狼瘡、僵直性脊椎炎、全身性硬 化、修格蘭氏（Sjogren，s)症候群、多發性肌炎或皮肌炎）； 王身過敏或過敏反應、藥物過敏（例如，對青黴素、頭孢 菌素類）、因攝取污染色胺酸而引起的嗜酸性粒細胞增多· 肌痛症候冑、昆蟲叮咬過i ;自體免疫疾，病，如類風濕性 關節k牛皮癬性關節炎、多發性硬化、全身性紅斑狼 瘡、重症肌無力症、幼年發病型糖尿病；腎小球腎炎、自 體免疫性甲狀腺炎、貝切特氏病（Behcet's disease);移植 排斥（例如，移植期間）’包括同種異體移植排斥或移植物 抗佰主病，發乂性腸病，如克隆氏病（Cr〇hn，s disease)及潰 瘍性結腸炎；脊椎關節炎；硬皮病；牛皮癖（包括τ_細胞介 導之牛皮癬）及炎症性皮心，如皮膚炎、濕療、特應性 皮膚炎、過敏性接觸皮膚炎、蓴麻疹；血管炎（例如，壞 死性表皮及過敏性血管炎）；嗜酸性肌炎、嗜酸性筋膜 炎’伴隨皮膚或n官之自血mm症。可治療其中非 所需炎症反應待抑制之其他疾病或病況，包括，但非限 於，再灌注損傷硬化、特定惡性血液病、細胞激素 誘發之中毒（例如，敗血性休克、内毒素性休克）、多發性 肌炎、皮肌f可藉由趨化因子受體功能抑制n療之人 類或其他物種之感染性疾病或病況包括]旦非限於， HIV。 156717.doc •39· 201206435 可藉由趨化因子受體功能促進劑治療之人類或其他物種 之疾病或病況包括’但非限於：免疫抑制，如罹患諸如 aids或其他病毒感染之免疫缺陷症候群之個體、接受放 射療法、化療、用於自體免疫疾病之療法或藥物療法（例 如’皮質類固醇療法）而導致免疫抑制之個體中之免疫抑 制；因受體功能之先天性缺陷或其他起因而導致的免疫抑 制；及感染性疾病，如寄生性疾病，包括，但非限於蠕蟲 感染，諸如線蟲（蛔蟲）；（鞭蟲病、蟯蟲病、蛔蟲病、鈎蟲 病、類圓線蟲病、旋毛蟲病、絲蟲病）；吸蟲（血吸蟲病、 華支睪吸蟲病）、縧蟲（包蟲病、牛帶縧蟲病、囊蟲病广内 臟蟲、内臟幼蟲偏頭痛（例如，弓首蛔蟲）、嗜酸性胃腸炎 (例如，Anisaki sp.、Phocanema sp )、表皮幼蟲偏頭痛（巴 西鉤蟲、犬鉤蟲）。因此，本發明之化合物可用於預防及 治療多種炎症性、感染性及免疫調節性病症及疾病。 此外，若期望投與充足化合物以藉由誘發趨化因子受體 内部化來導致細胞上之受體表現損失或以誤導細胞遷移之 方式投與化合物’則亦期望趨化因子受體功能促進劑可用 於治療上述炎症、過敏性及自體免疫疾病。 於另-態樣中，本發明可用於評估G蛋白偶合受體之推 疋特異性激動劑或拮抗劑。本發㈣毅如式⑴之化合物 於調節趨化因子受體活性之化合物之製備及篩選試驗：行 之用途。此外，本發明之化合物可用於（例如）藉由競爭性 抑制建立料定其他化合物與趨化因子受體之結合位點或 用作將其已知活性與具有未知活性之化合物對比之試驗之 156717.doc 201206435 參照。當發展新試驗或方案時，本發明之化合物可用於測 試其等有效性。特定言之，可將此化合物提供於（例如）用 於涉及上述疾病之醫藥研究中之市售套組中。本發明之化 合物亦可用於評估趨化因子受體之推定特異性調節劑。此 外，本發明化合物可用於檢測未被視為趨化因子受體之〇 蛋白偶合受體之特異性，其係藉由用作不結合於此等受體 上之化合物實例或用作對此等受體具活性之化合物之結構 變體而有助於確定相互作用之特異性位點。 如式⑴之化合物係用於治療或預防選自以下之病症：類 風濕性關郎炎、骨關節炎、敗血性休克、關節硬化、動脈 瘤、發熱、心血管作用、血液動力性休克、敗血病症候 群、缺血後再灌注損傷、遽疾、克隆氏病、發炎性腸病、 分枝菌感染、腦膜炎、牛皮癬、充也性心臟衰竭、纖維變 性疾病、惡病質 '移植排斥、自體免疫疾病、皮膚炎症性 疾病、多發性硬化、輕射損傷、氧過多性肺泡損傷、 贈、HIV癡呆症、非胰島素依賴性糖尿病 '哮喘、過敏 性鼻炎、特應性皮膚炎、特發性肺纖維化、大跑性類天跑 瘡、蠕蟲寄生性感染' 過敏性結腸炎、濕疹、結膜炎、移 植、家族性嗜酸性粒細胞增多、嗜酸性蜂寫性組織炎、嗜 酸性肺炎、嗜酸性筋膜炎、嗜酸性胃腸炎、藥物誘導之嗜 酸性粒細胞增多、囊性纖維化、徹奇·斯全司症候群、淋 =·、霍奇金病(H〇dgkin’s disease)、結腸癌、費爾蒂 e ys)症候群、結節病、葡萄膜炎、阿茲海默氏病、腎 小球腎炎及全身性紅斑狼瘡。 J56717.doc •41 · 201206435 於另&、樣中’如式⑴之化合物係用於治療或預防選自 以下之炎症病症：類風濕性關節炎、骨關節炎、關節硬 化、動脈瘤、發熱、心血管作用、克隆氏病、發炎性腸 病、牛皮癖、充血性心臟妄办七 性贓农蝎、多發性硬化、自體免疫疾 病、皮膚炎症性疾病。 於另·邊樣中’該化合物係用於治療或預防選自以下之 炎症病症：類風濕性關節炎、骨關節炎、『節硬化、克隆 氏病、發炎性腸病及多發性硬化。 預防及化療炎症、感染性及免疫調節病症及疾病，包括 哮喘及過敏性疾病，及自體免疫病理，諸如類風濕性關節 炎及關節硬化’及上述彼等病理之組合療法闡述為本發明 化合物與用於此等用途之其他已知化合物之組合。例如， 於治療或預防炎症中，本發明化合物可與諸如鴉片激動 劑、脂肪加氧酶抑制劑、環加氧酶_2抑制劑、介白素抑制 劑（如介白素-1抑制劑）、腫瘤壞死因子抑制劑、NMda拮 抗劑、一氧化氮抑制劑或一氧化氮合成抑制劑、非類固醇 抗炎症藥劑、磷酸二酯酶抑制劑、或細胞激素抑制抗炎症 藥劑之抗炎劑或止痛劑組合使用，例如，與諸如乙酿胺 盼、阿斯匹靈、可待因（codeine)、芬太尼（fentanyi)、布洛 芬（ibuprofen)、吲哚美辛（indomethacin)、克多炎 (ketorolac)、嗎啡（morphine)、萘普生（naproxen)、非那西 丁（phenacetin)、吡羅昔康（pir0Xicam)、類固醇止痛劑、舒, 芬太尼（sufentanyl)、蘚林酸（sunlindac)、α干擾素及類似 者之化合物組合使用《同樣地，本發明化合物可與止痛 1567I7.doc -42 · 201206435 藥；諸如咖啡因、H2•拮抗齊卜二甲基聚石夕氧燒 (―)、氫氧化铭或氫氧化鎂之增強劑；諸如苯福 林（Phenyiephrine)、苯丙醇胺、偽麻黃鹼、羥甲唑啉 (〇xymetaz〇nne)、腎上腺素、萘甲㈣（卿haz〇Hne)、赛 洛唾琳㈣娜tazoline)、環己丙曱胺（_咖讀_或 勒沃德西（levodesoxy)-麻黃鹼之減充血劑；及諸如可待 因、二氫可待因酮(hydroc〇d〇ne) '咳美芬—a—)、 咳必清（carbetapentane)或右美沙芬（dextrameth〇rphan)之止 咳劑；利尿劑；及止痛或非止痛抗組胺組合使用。同樣， 如式（I)之化合物可與用於治療/預防/抑制或改善本發明化 合物所適用之錢或錢之其㈣物組合使^此等其他 藥物可藉由其常用之路徑及常用量與本發明化合物同時或 依序投與。當如式⑴之化合物與一或多種其他藥物同時使 用時，可使用含有此等其他藥物及如式（I)之化合物之醫藥 組合物。因此，本發明之醫藥組合物包括.彼等除了如式⑴ 之化合物外亦含有一或多種其他活性成份之醫藥組合物。 可與本發明化合物組合，分開投與或包含於同一醫藥組 合物中之其他活性成份之實例包括，但非限於：（a)整合素 拮抗劑，諸如用於選擇素、ICAM&VLA_4之彼等物；（b) >員固醇，諸如倍乳米松（beci〇methas〇ne)、甲潑尼龍 (methylprednisolone)、倍他米松（betamethas〇ne)、強的松 (prednisone)、地塞米松（dexamethas〇ne)及氫化可體松 (hydrocortisone) ; (c)免疫抑制劑，諸如環孢菌素、他克莫 司（taCr〇limus)、雷帕黴素（rapamycin)及其他FK_5〇6型免疫 156717.doc • 43· 201206435 抑制劑；（d)抗組胺藥（HI-組胺拮抗劑），諸如溴苯那敏 (bromopheniramine)、氣苯那敏（chlorpheniramine)、右氯 苯那敏（dexchlorpheniramipe)、曲普立定（triprolidine)、氯 馬斯 ί丁（clemastine)、苯海拉明（diphenhydramine)、雙苯拉 林（diphenylpyraline)、去敏靈（tripelennamine)、經嗪 (hydroxyzine)、甲吡吩嗪（methdilazine)、異丙嗪 (promethazine)、异 丁嗪（trimeprazine)、阿扎他定 (azatadine)、赛庚咬（cyproheptadine)、安他唾淋 (antazoline)、苯拉敏（pheniramine)、〇比拉明（pyrilamine)、 阿司咪唑（astemizole)、特非那丁（terfenadine)、氯雷他定 (loratadine)、西替利嗪（cetirizine)、非索那定 (fexofenadine)、 脫羧乙 氧基氣 雷他定 (descarboethoxyloratadine)、及類似者；（e)非類固醇抗哮 喘藥’諸如b2-激動劑（特布他林（terbutaline)、間經異丙腎 上腺素（metaproterenol)、非諾特羅（fenoter〇i)、異他林 (isoetharine) ' 阿布特羅（aibuteral)、比托特羅（bitolterol) 及吡布特羅（pirbuterol))、茶鹼（theophylline)、色甘酸鈉、 阿托品（atropine)、異丙托溴銨（ipratropiurn bromide)、白 三烯（leukotriene)拮抗劑（紮魯司特（zafirlukast)、孟魯司特 (montelukast)、普崙司特（pranlukast)、伊拉司特 (iralukast)、泊比司特（pobilukast)、SKB-102、203)、白三 烯生物合成抑制劑（齊留通（zileuton)、BAY-1005) ; (f)非類 固醇抗炎症藥劑（NSAID) ’諸如丙酸衍生物（阿明洛芬 (alminorpofen)、苯噁洛芬（benxaprofen)、布氣酸（buci〇xic • 44 - 156717.doc

S 201206435 acid)、卡洛芬（carprofen)、芬布芬（fenbufen)、非諾洛芬 (fenoprofen)、氟洛芬（fluprofen)、氟比洛芬 (flurbiprofen)、布洛芬（ibuprofen)、叫丨 〇朵洛芬 (indoprofen)、酮基布洛芬（ketoprofen)、σ米洛芬 (miroprofen)、萘普生、奥沙普嗪（oxaprozin)、吡洛芬 (pirprofen)、普拉洛芬（pranoprofen)、舒洛芬（suprofen)、 噻洛芬酸（tiaprofenic acid)及硫噁洛芬（tioxaprofen))、乙酸 衍生物（吲哚美辛（indomethacin)、阿西美辛（acemetacin)、 阿氯芬酸（alclofenac)、環氯茚酸（clidanac)、雙氯芬酸 (diclofenac)、芬氣酸（fenclofenac)、芬克洛酸（fenci〇zic acid) ' 芬替酸（fentiazac)、吱羅芬酸（furofenac)、異丁芬 酸（ibufenac)、伊索克酸（isoxepac)、奥平酸（oxpinac)、舒 林酸（sulindac)、硫平酸（tiopinac)、托美汀（tolmetin)、齊 多美辛（zidometacin)及佐美酸（zomepirac))、芬那酸 (fenamic acid)衍生物（氟芬那酸（flufenamic acid)、曱氣芬 那酸（meclofenamic acid)、曱滅酸（mefenamic acid)、氟尼 酸（niflumic acid)及托芬那酸（tolfenamic acid))、聯苯緩酸 衍生物（雙氟尼酸（diflunisal)及氟苯柳（flufenisal))、昔康類 (oxicams)(伊索昔康（isoxicam)、°比羅昔康（piroxicam)、舒 多昔康（sudoxicam)及替链昔康（tenoxicam))、水揚酸類（乙 醯水楊酸、柳氮項胺D比咬（sulfasalazine))及°比。坐琳酮類 (pyrazolones)(阿扎丙宗（apazone)、 苯紮旅嚇酮 (bezpiperylon)、非普拉宗（feprazone)、莫非布.宗 (mofebutazone)、羥基保泰松（oxyphenbutazone)、保泰松 156717.doc -45- 201206435

(phenylbutazone)) ; (g)環加氧酶 _2(C〇X-2)抑制劑；（h)IV 型磷酸二酯酶（PDE-IV)抑制劑；⑴其他趨化因子受體拮抗 劑；（j)膽固醇降低劑，諸如HMG-COA還原酶抑制劑（洛伐 他>丁（lovastatin)、辛伐他彡丁（simvastatin)及普伐他汀 (pravastatin)、氟伐他彡丁（fluvastatin)、阿伐他 >、丁 (atorvastatin)及其他他汀類（statins))、螯合劑（考來烯胺 (cholestyramine)及考來替泊（c〇lestip〇l))、菸鹼酸、非諾貝 酸（fenofibric acid)衍生物（吉非貝齊（gemfibrozil)、考非貝 特（clofibrat)、非諾貝特（fenofibrate)及苯扎貝特 (benzafibrate))及普羅布考（pr〇bucol); (k)抗糖尿病藥劑， 如胰島素、磺醯脲類、雙胍類（二曱雙胍）、a-葡萄糖苷酶 抑制劑（黯祿）及格列酮類（glitazones)(曲格列酮 (troglitazone)及吡格列酮（pioglitazone)) ; (1)干擾素製劑 (干擾素a-2a、干擾素-2B、干擾素α-Ν3、干擾素β-la、干 擾素β-lb、干擾素γ-lb) ; (m)抗病毒化合物，諸如依法韋 侖（efavirenz)、奈韋拉平（nevirapine)、因地那韋 (indinavir)、更昔洛韋（ganciclovir)、拉米夫定 (lamivudine)、泛昔洛韋（famciclovir)及紮西他賓 (zalcitabine) ; (η)其他化合物，諸如5-胺基水楊酸及其前 藥、抗代謝物，諸如硫17坐嗓吟（azathioprine)及6-疏基嘌呤 (mercaptopurine)、及細胞毒素癌化療劑。如式（I)之化合物 對第二活性成份之重量比可不同且係視各成份之有效劑量 而定。 一般而言，使用有效劑量之各成份。因此，例如，當如 -46- 1567l7.doc

S 201206435 式⑴之化合物與NSAID組合時，本發明化合物對NSAIDi 重量比一般係介於約1000:1至約1:1000，或約2〇〇:1至約 1:200之範圍内。如式⑴之化合物與其他活性成份之組合 一般亦係於上述範圍内，但於各情況中，應使用有效劑量 之各活性成份。 將該化合物以治療有效量投與至哺乳動物。「治療有效 買」意指當單獨或與額外治療劑組合投與至哺乳動物時可 有效預防或改善血栓性栓塞疾病病況或疾病進程之式“匕 合物之量。 劑型及調配物 本發明化合物可以諸如錠劑、膠囊（各包含持續釋放或 延時釋放調配物）、丸劑、粉末、顆粒、驰劑、西丁劑、懸 浮液、糖漿及乳液之經口劑型投與。其亦可經靜脈内(團 注或輸注）、經腹膜内、經皮下或經肌肉内形式投與，所 有使用之劑㈣為熟習醫藥技藝者已知。可單獨投與，.但 -般係與根據所選擇之投藥路徑及標準醫藥執行而選擇之 醫藥載劑一起投與。 理所當然地，本發明化合物之投藥方案係'取決於已知因 素，諸如特定藥劑之藥效特性及其投與模式及路徑；受試 者之物種、年齡、性別、健康情況、醫學條件及體重·症 狀屬性及程度；同步治療之類型；治療頻率；投與路徑、 病患肝腎功能、及所需效果。醫師或獸醫可確定及規定用 於預防對抗或阻止栓塞性血栓疾病之進程所需之藥物 有效量。 156717.doc •47· 201206435 依據基本原則’當用於指示效果時，各有效成份之日口 服劑量可介於約0.001至1000 mg/kg體重，或約〇〇1至1〇〇 mg/kg體重/日’或’介於約lo至2〇 mg/kg/日之範圍内。 就經靜脈内而言，劑量於恒定速率輸注期間係介於約i至 約10 mg/kg/分鐘之範圍内。本發明之化合物可以單次曰劑 量方式投與’或可將總曰劑量以每日2、3或4次分開投 與。 本發明之化合物可以經鼻形式經由局部使用適宜經鼻媒 劑，或經由經皮路徑，使用經皮皮膚貼片投與。當以經皮 遞送系.統投與時，理所當然地，劑型投與在整個投藥方案 期間係連續而非間斷的。 該化合物一般係以與針對所期投與形式（即，口服錠 劑、膠囊、驰劑、糖毁等）並符合習知醫藥執行所適宜選 :之適宜醫藥稀釋劑、賦形劑或載劑(於本文中統稱爲醫 藥載劑）之混合物的形式投與。 例如，就以鍵劑或膠囊形式經口投與而言，活性藥物組 分可與口服、無毒性、醫藥可接受惰性载劑（如，乳糖、 澱粉、嚴糖、葡萄糖、甲基纖維素、硬脂酸鎂、磷酸二 鈣、硫_、甘露醇、山梨醇)組合；就以液體形式經口 投與而言’口服藥物組分可與任何口月民、無毒性、醫藥可 接受惰性載劑（如乙醇、甘油、水等）組合。此外，當需要 或必需時，亦可將適宜黏合劑、潤滑劑、崩解劑及:色劑 併入混合物中。適宜黏合劑包括殿粉、明膠、諸如葡萄糖 或β·乳糠之天然糖類、玉㈣味劑、諸如阿拉伯勝、黃箸 156717.doc

S •48- 201206435 膠或海藻酸納之天然及合成樹膠、叛甲基纖維素、聚乙二 醇、蠟等。用於此等劑型中之潤滑劑包括油酸鈉、硬脂酸 納、硬脂酸鎂、笨曱酸鈉、6 g复鈉、氣化納等。崩解劑包 括’但非p艮於’ ί殿粉、甲基纖維素、5复脂、膨潤土、黃原 膠等。 本發明之化合物亦可以脂質體遞送系統（如小單層脂質 體、大單層脂質體及多層脂質體）之形式投與。脂質體可 由多種磷脂，諸如膽固醇、硬脂胺或磷酯醯膽鹼形成。 本發明之化合物亦可與作爲可定靶藥物載劑之可溶性聚 α物偶a。此等聚合物可包括聚乙烯吡咯啶酮、哌喃共聚 物聚L丙基甲基丙烯醯胺-苯酚、聚羥乙基天冬醯胺苯 酚或經棕櫚醯殘基取代之聚環氧乙烷_聚離胺酸。此外， 本發明之化合物亦可偶合至一 P用於控制釋放藥物之生物 可降解聚合物，例如，聚乳酸、$乙_、聚乳酸與聚乙 醇^之共聚物、聚ε_己内酉旨、聚經基丁酸、聚原酸酯、聚 縮醛聚一氫哌喃、聚氰基丙烯酸酯、及水凝膠之交聯或 兩性嵌段共聚物。 適且杈與之劑型（醫藥組合物）可含有約1毫克至約100毫 克活性成份/劑量單位。於此等醫藥組合物中，活性成份 一般係以基於組合物總重量之約〇 · 5至9 5重量％之量存在。 明膠膠囊可含有活性成份及粉末狀載劑，諸如乳糖、殿 粉、纖維素衍生4勿、硬脂酸_ '硬脂酸等。類似稀釋劑可 用於製造1_劑。可將錠劑及膠囊製成緩釋產品以於數 小時内提供藥劑之連續釋放。壓縮鍵劑可經糖塗覆或膜塗 I56717.doc -49- 201206435 覆以遮蔽任何不宜味道及保護旋劑而與環境隔離，或經腸 溶塗覆以於腸胃道内選擇性崩解。 用於經口投與之液體劑型可含有著色劑及調味劑以增加 病患接受度。 一般而言’非經腸溶液之適宜載劑係水、適宜油、鹽 水、水性右旋糖（葡萄糖）、及相關糖溶液及諸如丙二醇或 聚乙一醇之一醇。非經腸投與之溶液可含有活性成份之水 溶性鹽、適宜穩定劑及若需要，緩衝物質。適宜穩定劑係 呈單獨或組合形式之抗氧化劑，如亞硫酸氫鈉、亞硫酸納 或抗壞血酸。亦使用檸檬酸及其鹽及EDTA鈉。此外，非 經腸溶液可含有防腐劑，如氯化苄二曱烴敍、對經基苯甲 酸曱酯或丙酯、及氯丁醇。 適宜醫藥載劑係描述於Remington's Pharmaceutical Sciences，Mack Publishing Company中，此領域之一標準 參考文獻。 用於投與本發明化合物之典型有用醫藥劑型係描述如 下： 膠囊 大量單位膠囊可藉由各以100毫克粉末狀活性成份、15〇 毫克乳糖、50毫克纖維素及6毫克硬脂酸鎂填充標準二片 式硬明膠膠囊製備。 軟明膠膠囊 可製備活性成份於諸如大豆油、棉籽油或撖欖油之可消 化油中之混合物並藉由一正排量泵注入明膠中以形成含有 156717.doc 201206435 100毫克活性成份之軟明膠膠囊。應清洗及乾燥該等膠 囊。 鍵劑 鍵劑可藉由習知製程製備以使劑量單位含i 〇〇毫克活性 成伤、0.2毫克膠體二氧化矽、5毫克硬脂酸鎂、275毫克 微晶纖維素、Η毫克澱粉及98.8毫克乳糖。可施用適宜塗 層以增加可口性或延遲吸收。 可注射溶液 適於注射投與之非經腸組合物可藉由將1 5重量％活性成 份在10體積％丙二醇及水中攪拌製備。該溶液應藉由氣化 鈉製成寻渗及進行滅菌。 懸浮液 水性懸浮液可製成經口投與形式以使各5 mL含有1〇〇 mg 微細活性成份、2〇〇 mg羧曱基纖維素鈉、5 mg苯甲酸鈉' g山梨醇溶液、U.S.P·、及0.025 !^香草醛。 當本發明之化合物與其他抗凝血劑組合時，例如，曰劑 里可為約0.1至100毫克之式〗化合物及約1至7 5毫克第二抗 凝血劑/千克病患體重。就錠劑劑型而言，本發明化合物 一般存在量可為約5至10毫克/劑量單位，及第二抗凝血劑 存在量可為約1至5毫克/劑量單位。 备式I化合物與以上第二治療劑中之兩或更多者一起投 與時，考慮到以組合方式投與時之治療劑之疊加或協同作 用，故於常見日劑量及常見劑型中之各組分之量可較單獨 投與時之一般藥劑劑量降低。特定言之，當以單劑量單位 156717.doc 201206435 形式提供時’組合之活性成份間可能存在化學相互作用。 爲此§將如式I之化合物與第二治療劑組合於單劑量單 位中時，其等可經調配以使儘管將活性成份組合於單劑量 單位中’但使活性成份間之物理接觸最小化（即，減少）。 例如’-活性成份可經腸溶塗覆。藉由腸溶塗覆活性成份 中之-者’不僅可使組合之活性成份間之接觸最小化，亦 可控制此等組分中之—者於腸胃道中之釋放，以使此等組 分中之該者不在胃中而在腸中釋放。活性成份中之一者亦 可塗覆有-種材料’該材料導致在整個腸胃道中之持續釋 放及亦用於使組合之活性成份間之物理接觸最小化。此 外’持續釋放組分可額外地經腸溶塗覆錢此組分之釋放 僅發生於腸中。m將涉及組合產物之調配，於該產 物中組分塗覆有持續及/或腸溶釋放聚合物及另一組 刀亦^覆有諸如低黏度羥丙基甲基纖維素（HPMC)之聚合 物或本技藝中已知之其他適宜材料，以進_步分離活性組 为。聚合物塗層係用於形成額外障壁以防止與其他組分之 相互作用。 ,本發明組合產物之組分不管以單劑型方式投與或以分離 形式但藉由相同方式同時投與，其間之接觸最小化之此等 及其他方式係為熟習此項技術者了解。 雖然本發明已詳細描述並參照具體實施例，然而熟習此 項技術者將了解可在不脫離本發明精神及範圍下進行多種 變化及修改。 156717.doc

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Claims (1)

1. 201206435 七、申請專利範圍： 1.種如式⑴之化合物：

   或其立體異構體或醫藥可接受鹽形式。 2· 樂組合物’其包含—種醫藥可接受載劑及治療有 效量之如請求項1之化合物。 3·種以如請求項1之化合物於製造用於調節趨化因子或 趨化因子受體活性之藥劑上之用途。 4. 如清求項3之用途，其中該趨化因子或趨化因子受體活 性係CCR-1或CCR-1受體活性。 5. —種以如請求項i之化合物於製造用於治療選自由以下 組成之群之病症之藥劑上之用途：骨關節炎、動脈瘤、 發熱、心血管作用、克隆氏病（Crohn's disease)、充血性 心臟衰竭、自體免疫疾病、mv_感染、扪^相關癡呆 症、牛皮癬、特發性肺纖維化、移植動脈硬化、物理或 化學誘導之腦創傷、神經痛、發炎性腸病、肺泡炎、潰 瘍性結腸炎、全身性紅斑狼瘡、腎毒血清腎炎、腎小球 腎炎、哮喘、多發性硬化、關節硬化、類風濕性關節 炎、再狹窄症、器官移植、多發性骨髓瘤、結腸直腸 癌、肝細胞癌及其他癌症。 6. —種以如請求項丨之化合物於製造用於治療炎症性疾病 156717.doc 201206435 之藥劑上之用途。 7. 一種製備用於治療以下各項之藥劑之方法：骨關節炎、 動脈瘤、發熱、心血管作用、克隆氏病（Cr〇hn,s disease)、充血性心臟衰竭、自體免疫疾病、mv_感染、 HIV-相關癡呆症、牛皮癖、特發性肺纖維化、移植動脈 硬化、物理或化學誘導之腦創傷、神經痛、發炎性腸 病、肺泡炎、潰瘍性結腸炎、全身性紅斑狼瘡、腎毒血 清腎炎、腎小球腎炎、哮喘、多發性硬化、關節硬化、 類風濕性關節炎，其包含調配如請求項丨之化合物。 8. —種以如請求項丨之化合物於製造用於治療需要治療之 病患之藥劑上之用途。 9. 一種以如請求項2之組合物於製造用於調節趨化因子或 趨化因子受體活性之藥劑上之用途。 10. 種以如％求項2之組合物於製造用於調節CCR_丨受體活 性之藥劑上之用途。 11. 種以如凊求項2之組合物於製造用於治療選自由以下 各項組成之群之病症之藥劑上之用途：骨關節炎、動脈 瘤、發熱、心血管作用、克隆氏病（Crohn's disease)、充 血眭〜臟衰蝎、自體免疫疾病、HIV-感$、HIV-相關癡 呆症、牛皮癬、特發性肺纖維化、移植動脈硬化、物理 或化學誘導之脫备丨μ ,, 腦創傷、神經痛、發炎性腸病、肺泡炎、 潰癌性結腸炎、人& , β ^ ^ 全身性紅斑狼瘡' 腎毒血清腎炎、腎小 球腎炎、哮tr山 夕 而、夕發性硬化、關節硬化、類風濕性關節 炎·、抒初L窄、广 乍從、器官移植、多發性骨髓瘤、結腸直腸 156717.doc 201206435 12. 癌、肝細胞癌及其他癌症β 一種以如請求項2之組合物 之藥劑上之用途。 於製造用於治療炎症性疾 病 13. 14. -種製備用於治療以下各項之藥劑之方法：骨關節炎、 動脈瘤、發熱、心血管作用、克隆氏病(Cr〇hn，s 如叫、充血性心臟衰竭、自體免疫疾病、鮮-感染、 相關癡呆症、牛皮癖、特發性肺纖維化、移植動脈 硬化、物理或化學誘導之腦創傷、神經痛、發炎性腸 病、肺泡炎、潰瘍性結腸炎、全身性紅斑狼瘡、腎毒血 清腎炎、腎小球腎炎、哮喘、多發性硬化、關節硬化、 類風濕性關節炎，其包括將如請求項2之組合物調配成 適用之醫藥劑型。 一種以如請求項2之組合物於製造用於治療需要治療之 病患之藥劑上之用途。 156717.doc 201206435 四、指定代表圖： (一) 本案指定代表圖為：（無） (二) 本代表圖之元件符號簡單說明： 五、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學式：

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