CN101600691A

CN101600691A - 作为趋化因子受体活性调节剂的哌啶基衍生物

Info

Publication number: CN101600691A
Application number: CNA2007800112946A
Authority: CN
Inventors: 珀西·H·卡特; 卡伦·L·卡瓦拉罗; 约翰·V·邓西亚; 丹尼尔·S·加德纳; 约翰·海因斯; 刘瑞勤; 约瑟夫·B·桑特拉; 达姆帕尔·S·多德
Original assignee: Bristol Myers Squibb Co
Current assignee: Bristol Myers Squibb Co
Priority date: 2006-01-27
Filing date: 2007-01-25
Publication date: 2009-12-09
Also published as: ZA200806875B

Abstract

本申请描述了MIP－1α或CCR－1的取代哌啶基调节剂或其立体异构体或可药用盐。此外，本申请还披露了使用所述调节剂以治疗与预防炎性疾病诸如哮喘与过敏性疾病以及自身免疫性病理诸如风湿性关节炎与移植排斥的方法。

Description

作为趋化因子受体活性调节剂的哌啶基衍生物

技术领域

本发明大体上涉及趋化因子受体活性的调节剂，含有该调节剂的药物组合物，及使用该调节剂作为药物，以治疗与预防炎性疾病、过敏性及自身免疫性疾病，且特别是风湿性关节炎与移植排斥的方法。

背景技术

趋化因子为分子量6-15kDa的趋化性细胞因子，很多种细胞释放趋化因子，以在其它细胞类型中吸引及活化巨噬细胞、T与B淋巴细胞、嗜酸性细胞、嗜碱性细胞及嗜中性细胞(参见：Luster，New Eng.J.Med.1998，338，436-445与Rollins，Blood 1997，90，909-928)。有两种主要趋化因子种类，CXC与CC，依在氨基酸序列中的最初两个半胱氨酸是被单一氨基酸分隔(CXC)还是相邻(CC)而定。CXC趋化因子，诸如白细胞介素-8(IL-8)、嗜中性细胞活化蛋白-2(NAP-2)及黑色素瘤生长刺激活性蛋白(MGSA)，主要是对嗜中性细胞与T淋巴细胞具趋化性，而CC趋化因子，诸如RANTES、MIP-1α、MIP-1β、单核细胞趋化蛋白(MCP-1、MCP-2、MCP-3、MCP-4及MCP-5)及嗜酸性细胞活化趋化因子(eotaxin)(-1与-2)，在其它细胞类型中对巨噬细胞、T淋巴细胞、嗜酸性细胞、树突细胞及嗜碱性细胞具趋化性。也有一些趋化因子(趋淋巴素(lymphotacin)-1、趋淋巴素-2(两者均为C趋化因子)及CXXXC趋化因子(fractalkine)(CX₃C趋化因子))，其并未落在任一种主要趋化因子亚家族中。

所述趋化因子结合至归属于G蛋白质偶联的具有七个跨膜功能域的蛋白质家族的专属性细胞表面受体(参见：Horuk，Trends Pharm.Sci.1994，15，159-165)，其被称为″趋化因子受体″。在结合其相关配体时，趋化因子受体经过所结合的三聚G蛋白质转导胞内信号，在其它响应中导致胞内钙浓度快速增加，细胞形状发生改变，增加细胞粘连分子的表达，引起去颗粒(degranulation)，及促进细胞迁移。有至少十种人类趋化因子受体与CC趋化因子结合或响应于CC趋化因子，其具有下列特征型式(参见Zlotnik and OshieImmunity 2000，12，121)：CCR-1(或″CKR-1″或″CC-CKR-1″)[MIP-1α、MCP-3、MCP-4、RANTES](Ben-Barruch，et al.，Cell 1993，72，415-425与Luster，NewEng.J.Med.1998，338，436-445)；CCR-2A与CCR-2B(或″CKR-2A″/″CKR-2B″或″CC-CKR-2A″/″CC-CKR-2B″)[MCP-1、MCP-2、MCP-3、MCP-4、MCP-5](Charo，et al.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 1994，91，2752-2756与Luster，New Eng.J.Med.1998，338，436-445)；CCR-3(或″CKR-3″或″CC-CKR-3″)[嗜酸性细胞活化趋化因子-1、嗜酸性细胞活化趋化因子-2、RANTES、MCP-3、MCP-4](Combadiere，et al.，J.Biol.Chem.1995，270，16491-16494与Luster，New Eng.J.Med.1998，338，436-445)；CCR-4(或″CKR-4″或″CC-CKR-4″)[TARC、MDC](Power，et al.，J.Biol.Chem.1995，270，19495-19500与Luster，New Eng.J.Med.1998，338，436-445)；CCR-5(或″CKR-5″或″CC-CKR-5″)[MIP-α、RANTES、MIP-1β](Sanson，et al.，Biochemistry 1996，35，3362-3367)；CCR-6(或″CKR-6″或″CC-CKR-6″)[LARC](Baba，et al.，J.Biol.Chem.1997，272，14893-14898)；CCR-7(或″CKR-7″或″CC-CKR-7″)[ELC](Yoshie，et al.，J.Leukoc.Biol.1997，62，634-644)；CCR-8(或″CKR-8″或″CC-CKR-8″)[I-309](Napolitano，et al.，J.Immunol.，1996，157，2759-2763)；CCR-10(或″CKR-10″或″CC-CKR-10″)[MCP-1、MCP-3](Bonini，et al.，DNA and Cell Biol.1997，16，1249-1256)；及CCR-11[MCP-1、MCP-2及MCP-4](Schweickert，et al.，J.Biol.Chem.2000，275，90550)。

除了哺乳动物趋化因子受体以外，已证实哺乳动物巨细胞病毒、疱疹病毒及痘病毒在受感染细胞中表达蛋白质，其具有趋化因子受体的结合性质(参见：Wells and Schwartz，Curr.Opin.Biotech.1997，8，741-748)。人类CC趋化因子，诸如RANTES与MCP-3，可导致钙经由这些病毒编码的受体发生快速移动。就感染而言，可通过破坏正常免疫系统对感染的监督及响应来允许受体表达。此外，就微生物(例如人类免疫缺陷病毒(HIV))感染哺乳动物细胞而言，人类趋化因子受体，诸如CXCR4、CCR2、CCR3、CCR5及CCR8，可充作共受体。

趋化因子及其相关受体是炎性、感染性及免疫调节性病症与疾病的重要介质，这些病症与疾病包括哮喘与过敏性疾病，以及自身免疫性病理，诸如风湿性关节炎与动脉粥样硬化(参见：P.H.Carter，Current Opinion inChemical Bioogy 2002，6，510；Trivedi，et al.，Ann.Reports Med.Chem.2000，35，191；Saunders and Tarby，Drug Disc.Today 1999，4，80；Premack and Schall，Nature Medicine 1996，2，1174)。例如，趋化因子巨噬细胞炎性蛋白-1(MIP-1α)及其受体CC趋化因子受体1(CCR-1)在吸引淋巴细胞至发炎位置及随后活化这些细胞方面发挥重要作用。当趋化因子MIP-1α结合至CCR-1时，其诱导胞内钙浓度快速增加，增加细胞粘连分子的表达，引起细胞去颗粒，及促进淋巴细胞迁移。

此外，已经以实验方式展示了MIP-1α在人类中的趋化性质。人类受试对象，当以皮内方式注射MIP-1α时，出现淋巴细胞向注射位置快速且显著地流入(Brummet，M.E.J.Immun.2000，164，3392-3401)。

已通过用基因修饰小鼠进行实验来展示MIP-1α/CCR-1相互作用的重要性。MIP-1α-/-小鼠具有正常数目的淋巴细胞，但在免疫激发后不能够动员单核细胞至病毒发炎位置(Cook，D.，et al.，Science.1995，269，1583-1585)。最近，已证实MIP-1α-/-小鼠对胶原抗体诱发的关节炎具有抵抗性(Chintalacharuvu，S.R.Immun.Lett.2005，202-204)。类似地，当在体内用MIP-1α进行激发时，CCR-1-/-小鼠不能够动员嗜中性细胞；而且，无CCR-1的小鼠的外周血液嗜中性细胞不会响应于MIP-1α而发生迁移(Gao，B.，et al.，J.Exp.Med.1997，185，1959-1968)，由此证实MIP-1α/CCR-1相互作用的专属性。MIP-1α-/-与CCR-1-/-动物的存活力与一般正常健康情况是值得注意的，即MIP-1α/CCR-1相互作用的瓦解不会诱发生理骤变。总而言之，这些数据所得出的结论是，阻断MIP-1α作用的分子可用于治疗多种炎性与自身免疫性病症。如下文所述，目前已在多种不同动物疾病模型中确认了此项假说。

已知MIP-1α在风湿性关节炎患者的滑液与血液中被提高(Alisa Koch，etal.，J.Clin.Invest.1994，93，921-928)。而且，数项研究已证实对MIP-1α/CCR1相互作用的拮抗在治疗风湿性关节炎中具有潜在的治疗价值(Pease，J.E.&Horuk，R.Expert Opin.Invest.Drugs 2005，14，785-796)。

证实MIP-1α的抗体在小鼠中改善实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)(一种多发性硬化模型)(Karpus，W.J.，et al.，J.Immun.1995，5003-5010)。类似地，可通过将MIP-1α的抗体直接给药患有胶原诱发关节炎的小鼠来控制炎性疾病症状(Lukacs，N.W.，et al.，J.Clin.Invest.1995，95，2868-2876)。

也应注意的是，CCR-1也是趋化因子RANTES、MCP-3、HCC-1、Lkn-1/HCC-2、HCC-4及MPIF-1的受体(Carter，P.H.Curr.Opin Chem.Bio.2002，6，510-525)。由于假设本申请所描述的本发明新颖化合物通过结合至CCR-1受体来拮抗MIP-1α，故这些化合物也可有效地拮抗CCR-1所介导的上述配体的作用。因此，当本申请称″拮抗MIP-1α″时，假定其等价于″拮抗趋化因子对CCR-1的刺激作用″。

例如，已经以实验方式展示了RANTES在人类中的趋化性质。人类受试对象，当以皮内方式注射RANTES时，出现嗜酸性细胞向注射位置流入(Beck，L.A.，et al.，J.Immun.1997，159，2962-2972)。类似地，RANTES的抗体已在大鼠佐剂诱发关节炎(AIA)模型中展示出改善疾病症状的能力(Barnes，D.A.，et al.，J.Clin Invest.1998，101，2910-2919)。在关节发炎的大鼠AIA(Shahrara，S.，et al.，Arthritis & Rheum.2005，52，1907-1919)与小鼠CIA(Plater-Zyberk，C.，et al.，Imm.Lett.1997，57，117-120)疾病模型中，使用RANTES/CCR-1相互作用的肽衍生拮抗剂，此时得到类似的结果。

最近，许多研究小组已描述MIP-1α的小分子拮抗剂的开发(参见：Carson，K.G，et al.，Ann.Reports Med.Chem.2004，39，149-158)。

发明内容

因此，本发明提供MIP-1α或CCR-1受体活性的新颖拮抗剂或部分激动剂/拮抗剂，或其可药用盐或前药。

本发明提供药物组合物，所述药物组合物包含可药用载体，及治疗有效量的至少一种本发明化合物或其可药用盐或前药形式。

本发明提供治疗风湿性关节炎与移植排斥的方法，所述方法包括对需要此种治疗的宿主给药治疗有效量的至少一种本发明化合物或其可药用盐或前药形式。

本发明提供治疗炎性疾病的方法，所述方法包括对需要此种治疗的宿主给药治疗有效量的至少一种本发明化合物或其可药用盐或前药形式。

本发明提供新颖环状衍生物，其用于治疗。

本发明提供新颖环状衍生物在制备用于治疗炎性疾病的药物中的用途。

在下文详细说明中显而易见的本发明的这些和其它特征已通过以下发现来实现：本发明人发现本发明的取代的哌啶基衍生物为MIP-1α与趋化因子活性的有效调节剂。

发明详述

在一个实施方案中，本发明提供新颖式(I)化合物或其立体异构体或前药或可药用盐形式：

其中

虚线表示任选的双键；

T为

R₁为烷基、环烷基、芳基、杂环基或杂芳基，全部所述基团可任选被0-5个R_1a取代；

R_1a在每次出现时独立选自烷基、卤代烷基、芳基、烯基、炔基、环烷基、环烷基烷基-、杂芳基、杂芳基烷基-、杂环基、杂环基烷基-、卤素、-NH₂、-CN、-NO₂、-C(＝O)OH、-C(＝O)O(CR₈R₈)_rR₁₀、-O(CF₂)_rCF₃、-O(CR₈R₈)_rR₁₀、-OH、-SH、-S(CR₈R₈)_rR₁₀、-S(O)₃H、-P(O)₃H₂、-C(＝O)NR₉R₉、-NR₉R₉、-S(O)₂NR₉R₉、-NR₉S(O)₂(CF₂)_rCF₃、-C(＝O)NR₉S(O)₂R₆、-S(O)₂NR₉C(＝O)OR₆、-S(O)₂NR₉C(＝O)NR₉R₉、-C(＝O)NR₉S(O)₂(CF₂)_rCF₃、-C(＝O)(CR₈R₈)_rR₁₀、-NR₉C(＝O)H、-NR₉C(＝O)(CR₈R₈)_rR₁₀、-OC(＝O)(CR₈R₈)_rR₁₀、-C(＝NR₁₄)NR₉R₉、-NHC(＝NR₁₄)NR₁₄R₁₄、-S(＝O)(CR₈R₈)_rR₁₀、-S(O)₂(CR₈R₈)_rR₁₀、-NR₉C(＝O)OR₈、-NR₉S(O)₂R₈、-S(O)₂NR₉C(O)R₆、芳基氧基-或芳基烷基-，其中所述芳基、环烷基、环烷基烷基-、杂芳基、杂芳基烷基-、杂环基、杂环基烷基-、芳基氧基-和芳基烷基-可任选被0-3个R_1b取代；

R_1b在每次出现时独立选自烷基、卤代烷基、芳基、烯基、炔基、环烷基、环烷基烷基-、杂芳基、杂芳基烷基-、杂环基、杂环基烷基-、卤素、-NH₂、-CN、-NO₂、-C(＝O)OH、-C(＝O)O(CR₈R₈)_rR₁₀、-O(CF₂)_rCF₃、-O(CR₈R₈)_rR₁₀、-OH、-SH、-S(CR₈R₈)_rR₁₀、-S(O)₃H、-P(O)₃H₂、-C(＝O)NR₉R₉、-NR₉R₉、-S(O)₂NR₉R₉、-NR₉S(O)₂(CF₂)_rCF₃、-C(＝O)NR₉S(O)₂R₆、-S(O)₂NR₉C(＝O)OR₆、-S(O)₂NR₉C(＝O)NR₉R₉、-C(＝O)NR₉S(O)₂(CF₂)_rCF₃、-C(＝O)(CR₈R₈)_rR₁₀、-NR₉C(＝O)H、-NR₉C(＝O)(CR₈R₈)_rR₁₀、-OC(＝O)(CR₈R₈)_rR₁₀、-C(＝NR₁₄)NR₉R₉、-NHC(＝NR₁₄)NR₁₄R₁₄、-S(＝O)(CR₈R₈)_rR₁₀、-S(O)₂(CR₈R₈)_rR₁₀、-NR₉C(＝O)OR₈、-NR₉S(O)₂R₈、芳基氧基-或芳基烷基-；

R₂为烷基、环烷基、环烷基烷基-或烯基，其中所述烷基可任选被-OH取代；

R₃在每次出现时为烷基；或与同一碳原子相连的任意两个R₃可形成3至6元环；

W为氢、F、-OH、-CN或-NH₂；

R₅为卤素、-CN或-O烷基；或

W与一个R₅及它们各自所连接的碳原子一起形成3至6元含氧环，其中所述环可任选被一个或多个R₅取代；

R₆在每次出现时独立为烷基、环烷基、环烷基烷基-、芳基、芳基烷基-、杂芳基或杂芳基烷基-；

R₈在每次出现时独立为氢或烷基；

R₉在每次出现时独立为氢、烷基、环烷基、芳基、芳基烷基-、杂芳基、杂芳基烷基-、杂环基或杂环基烷基-，其中所述芳基、芳基烷基-、杂芳基、杂芳基烷基-、杂环基或杂环基烷基-可任选被0-5个R_9a取代，且所述杂芳基、杂芳基烷基-、杂环基或杂环基烷基-含有1-4个选自N、O及S的杂原子；

R_9a在每次出现时独立选自烷基、卤代烷基、芳基、烯基、炔基、环烷基、环烷基烷基-、杂芳基、杂芳基烷基-、杂环基、杂环基烷基-、卤素、-NH₂、-CN、-NO₂、-C(＝O)OH、-C(＝O)O(CR₈R₈)_rR₁₄、-O(CF₂)_rCF₃、-O(CR₈R₈)_rR₁₄、-OH、-SH、-S(CR₈R₈)_rR₁₄、-S(O)₃H、-P(O)₃H₂、-C(＝O)NR₁₄R₁₄、-NR₁₄R₁₄、-S(O)₂NR₁₄R₁₄、-NR₁₄S(O)₂(CF₂)_rCF₃、-C(＝O)NR₁₄S(O)₂R₆、-S(O)₂NR₁₄C(＝O)OR₆、-S(O)₂NR₁₄C(＝O)NR₁₄R₁₄、-C(＝O)NR₁₄S(O)₂(CF₂)_rCF₃、-C(＝O)(CR₈R₈)_rR₁₄、-NR₁₄C(＝O)H、-NR₁₄C(＝O)(CR₈R₈)_rR₁₄、-OC(＝O)(CR₈R₈)_rR₁₄、-C(＝NR₁₄)NR₁₄R₁₄、-NHC(＝NR₁₄)NR₁₄R₁₄、-S(＝O)(CR₈R₈)_rR₁₄、-S(O)₂(CR₈R₈)_rR₁₄、-NR₁₄C(＝O)OR₈、-NR₁₄S(O)₂R₈、芳基氧基-或芳基烷基-；

R₁₀在每次出现时独立选自烷基、芳基、芳基烷基-、杂环基或杂环基烷基-，其中所述烷基、芳基、芳基烷基-、杂环基或杂环基烷基-可任选被0-3个R_10a取代，且所述杂环基和杂环基烷基-含有1-4个选自N、O及S的杂原子；

R_10a在每次出现时独立选自烷基、卤代烷基、芳基、烯基、炔基、环烷基、环烷基烷基-、杂芳基、杂芳基烷基-、杂环基、杂环基烷基-、卤素、-NH₂、-CN、-NO₂、-C(＝O)OH、-C(＝O)O(CR₈R₈)_rR₁₄、-O(CF₂)_rCF₃、-O(CR₈R₈)_rR₁₄、-OH、-SH、-S(CR₈R₈)_rR₁₄、-S(O)₃H、-P(O)₃H₂、-C(＝O)NR₁₄R₁₄、-NR₁₄R₁₄、-S(O)₂NR₁₄R₁₄、-NR₁₄S(O)₂(CF₂)_rCF₃、-C(＝O)NR₁₄S(O)₂R₆、-S(O)₂NR₁₄C(＝O)OR₆、-S(O)₂NR₁₄C(＝O)NR₁₄R₁₄、-C(＝O)NR₁₄S(O)₂(CF₂)_rCF₃、-C(＝O)(CR₈R₈)_rR₁₄、-NR₁₄C(＝O)H、-NR₁₄C(＝O)(CR₈R₈)_rR₁₄、-OC(＝O)(CR₈R₈)_rR₁₄、-C(＝NR₁₄)NR₁₄R₁₄、-NHC(＝NR₁₄)NR₁₄R₁₄、-S(＝O)(CR₈R₈)_rR₁₄、-S(O)₂(CR₈R₈)_rR₁₄、-NR₁₄C(＝O)OR₈、-NR₁₄S(O)₂R₈、芳基氧基-或芳基烷基-；

R₁₄在每次出现时独立选自氢、烷基、环烷基或苯基；

m在每次出现时为0-2；

n为1-3；且

r为0-5。

在另一个实施方案中，式(I)化合物为具有式(Ia)的化合物：

在另一个实施方案中，本发明化合物为其中如下的化合物：

T为

W为氢、F、-OH或-NH₂；

R₅为卤素、-CN或-O烷基；

R₈在每次出现时独立为氢或烷基；

R₁₄在每次出现时独立选自氢、烷基、环烷基或苯基；

m在每次出现时为0-2；

n为1-2；且

r为0-4。

在另一个实施方案中，本发明化合物为其中如下的化合物：

T为

R_1b在每次出现时独立选自烷基、卤代烷基、芳基、烯基、炔基、环烷基、环烷基烷基-、杂芳基、杂芳基烷基-、杂环基、杂环基烷基-、卤素、-NH₂、-CN、-NO₂、-C(＝O)OH、-C(＝O)O(CR₈R₈)_rR₁₀、-O(CF₂)_rCF₃、-O(CR₈R₈)_rR₁₀、-OH、-SH、-S(CR₈R₈)_rR₁₀、-S(O)₃H、-P(O)₃H₂、-C(＝O)NR₉R₉、-NR₉R₉、-S(O)₂NR₉R₉、-NR₉S(O)₂(CF₂)_rCF₃、-C(＝O)NR₉S(O)₂R₆、-S(O)₂NR₉C(＝O)OR₆、-S(O)₂NR₉C(＝O)NR₉R₉、-C(＝O)NR₉S(O)₂(CF₂)_rCF₃、-C(＝O)(CR₈R₈)_rR₁₀、-NR₉C(＝O)H、-NR₉C(＝O)(CR₈R₈)_rR₁₀、-OC(＝O)(CR₈R₈)_rR₁₀、-C(＝NR₁₄)NR₉R₉、-NHC(＝NR₁₄)NR₁₄R₁₄、-S(＝O)(CR₈R₈)_rR₁₀、-S(O)₂(CR₈R₈)_rR₁₀、-NR₉C(＝O)OR₈、-NR₉S(O)xR₈、芳基氧基-或芳基烷基-；

R₂为烷基、环烷基或环烷基烷基-，其中所述烷基可任选被-OH取代；

W为氢、F、-OH或-NH₂；

R₅为卤素或-CN；

R₈在每次出现时独立为氢或烷基；

R₁₄在每次出现时独立选自氢、烷基、环烷基或苯基；

m在每次出现时为0-2；

n为1-2；且

r为0-3。

在另一个实施方案中，本发明化合物为其中如下的化合物：

T为

R₂为烷基或环烷基，其中所述烷基可任选被-OH取代；

W为氢、F、-OH或-NH₂；

R₅为卤素；

R₈在每次出现时独立为氢或烷基；

R₁₄在每次出现时独立选自氢、烷基、环烷基或苯基；

m在每次出现时为0-2；

n为1-2；且

r为0-2。

在另一个实施方案中，本发明化合物为其中如下的化合物：

T为

R₂为烷基或环烷基，其中所述烷基可任选被-OH取代；

R₃在每次出现时为烷基；

W为氢、-OH或-NH₂；

R₅为卤素；

R₈在每次出现时独立为氢或烷基；

R₁₄在每次出现时独立选自氢、烷基、环烷基或苯基；

m在每次出现时为0-2；

n为1-2；且

r为0-2。

在另一个实施方案中，本发明化合物为其中如下的化合物：

T为

R₂为烷基或环烷基；

R₃在每次出现时为烷基；

W为氢或-OH；

R₅为卤素；

R₈在每次出现时独立为氢或烷基；

R₁₄在每次出现时独立选自氢、烷基、环烷基或苯基；

m在每次出现时为0-2；

n为1-2；且

r为0-2。

在一个实施方案中，本发明提供新颖式(Ib)化合物或其立体异构体或前药或可药用盐形式：

其中

T为

R₂为烷基、环烷基、环烷基烷基-、芳基烷基-、-CH₂CH₂CH₂NHC(＝NR₁₄)NR₁₄R₁₄、-CH₂CH₂S(CR₈R₈)rR₁₀或-CH₂CH₂CN，其中所述烷基和芳基烷基-可任选被-OH取代；

R₄在每次出现时为F、-OH或烷基；或与同一碳原子相连的任意两个烷基R₄可形成3至6元环，所述3至6元环可任选含有1-4个选自N、O及S的杂原子；

W为氢、F、-OH、-CN或-NH₂；

R₅为卤素、-CN或-O烷基；

R₈在每次出现时独立为氢或烷基；

R₁₄在每次出现时独立选自氢、烷基、环烷基或苯基；

m在每次出现时为0-2；且

r为0-5。

在另一个实施方案中，式(Ib)化合物为具有式(Ib’)的化合物：

其中W为氢或OH，且m为1或2。

在另一个实施方案中，本发明化合物为其中如下的化合物：

T为

R₂为烷基、环烷基、环烷基烷基-、-CH₂CH₂CH₂-NHC(＝NH)NH₂、-CH₂CH₂SCH₃、-CH₂CH₂CN、

其中所述烷基可任选被-OH取代；

R₄在每次出现时为-OH或烷基；或与同一碳原子相连的任意两个烷基R₄可形成3至6元环，所述3至6元环可任选含有1-4个选自N、O及S的杂原子；

R₅为卤素、-CN或-O烷基；

R₈在每次出现时独立为氢或烷基；

R₁₄在每次出现时独立选自氢、烷基、环烷基或苯基；且

r为0-4。

在另一个实施方案中，本发明化合物为其中如下的化合物：

T为

R₂为烷基、环烷基、环烷基烷基-、-CH₂CH₂SCH₃、-CH₂CH₂CN、其中所述烷基可任选被-OH取代；

R₅为卤素或-CN；

R₈在每次出现时独立为氢或烷基；

R₁₄在每次出现时独立选自氢、烷基、环烷基或苯基；且

r为0-3。

在另一个实施方案中，本发明化合物为其中如下的化合物：

T为

R₂为烷基、环烷基、环烷基烷基-、其中所述烷基可任选被-OH取代；

R₄在每次出现时为烷基；或与同一碳原子相连的任意两个烷基R₄可形成3至6元环，所述3至6元环可任选含有1-4个选自N、O及S的杂原子；

R₅为卤素；

R₈在每次出现时独立为氢或烷基；

R₁₄在每次出现时独立选自氢、烷基、环烷基或苯基；且

r为0-2。

在另一个实施方案中，本发明化合物为其中如下的化合物：

T为

R₄在每次出现时为烷基；

R₅为卤素；

R₈在每次出现时独立为氢或烷基；

R₁₄在每次出现时独立选自氢、烷基、环烷基或苯基；且

r为0-2。

在另一个实施方案中，本发明化合物为其中如下的化合物：

T为

R₂为烷基或环烷基；

R₄在每次出现时为烷基；

R₅为卤素；

R₈在每次出现时独立为氢或烷基；

R₁₄在每次出现时独立选自氢、烷基、环烷基或苯基；且

r为0-2。

在另一个实施方案中，本发明化合物为其中如下的化合物：R₂为异丙基、仲丁基或环丙基；R₄为甲基；R₅为Cl、F或Br；且R₁为烷基、环烷基、芳基或杂芳基，全部所述基团可任选被0-5个R_1a取代。

在另一个实施方案中，本发明化合物为其中如下的化合物：

T为

在一个实施方案中，本发明提供新颖式(Ic)化合物或其立体异构体或前药或可药用盐形式：

其中

R₁₅为-NHR₁、杂芳基或芳基，其中所述杂芳基和芳基可任选被0-3个R_1a取代；

R₁为芳基或杂芳基，所述芳基或杂芳基可任选被0-3个R_1a取代，其条件是当R₁为苯基时，R_1a不能为邻位-甲氧基；

W为氢、F、-OH或-NH₂；

R₅为卤素、-CN或-O烷基；

R₈在每次出现时独立为氢或烷基；

R₁₄在每次出现时独立选自氢、烷基、环烷基或苯基；

m在每次出现时为0-2；

n为1-3；且

r为0-5。

在另一个实施方案中，式(Ic)化合物为具有式(Id)的化合物：

在另一个实施方案中，本发明化合物为其中如下的化合物：

R₁为芳基或杂芳基，所述芳基或杂芳基可任选被0-3个R_1a取代；

R₂为烷基或环烷基，其中所述烷基可任选被-OH取代；

W为氢、F或-OH；

R₅为卤素、-CN或-O烷基；

R₈在每次出现时独立为氢或烷基；

R_9a在每次出现时独立选自烷基、卤代烷基、芳基、烯基、炔基、环烷基、环烷基烷基-、杂芳基、杂芳基烷基-、杂环基、杂环基烷基-、卤素、-NH₂、-CN、-NO₂、-C(＝O)OH、-C(＝O)O(CR₈R₈)_rR₁₄、-O(CF₂)_rCF₃、-O(CR₈R₈)_rR₁₄、-OH、-SH、-S(CR₈R₈)_rR₁₄、-S(O)₃H、-P(O)₃H₂、-C(＝O)NR₁₄R₁₄、-NR₁₄R₁₄、-S(O)₂NR₁₄R₁₄、-NR₁₄S(O)₂(CF₂)_rCF₃、-C(＝O)NR₁₄S(O)₂R₆、-S(O)₂NR₁₄C(＝O)OR₆、-S(O)₂NR₁₄C(＝O)NR₁₄R₁₄、-C(＝O)NR₁₄S(O)₂(CF₂)_rCF₃、-C(＝O)(CR₈R₈)_rR₁₄、-NR₁₄C(＝O)H、-NR₁₄C(＝O)(CR₈R₈)rR₁₄、-OC(＝O)(CR₈R₈)_rR₁₄、-C(＝NR₁₄)NR₁₄R₁₄、-NHC(＝NR₁₄)NR₁₄R₁₄、-S(＝O)(CR₈R₈)_rR₁₄、-S(O)₂(CR₈R₈)_rR₁₄、-NR₁₄C(＝O)OR₈、-NR₁₄S(O)₂R₈、芳基氧基-或芳基烷基-；

R_10a在每次出现时独立选自烷基、卤代烷基、芳基、烯基、炔基、环烷基、环烷基烷基-、杂芳基、杂芳基烷基-、杂环基、杂环基烷基-、卤素、-NH₂、-CN、-NO₂、-C(＝O)OH、-C(＝O)O(CR₈R₈)_rR₁₄、-O(CF₂)_rCF₃、-O(CR₈R₈)_rR₁₄、-OH、-SH、-S(CR₈R₈)_rR₁₄、-S(O)₃H、-P(O)₃H₂、-C(＝O)NR₁₄R₁₄、-NR₁₄R₁₄、-S(O)₂NR₁₄R₁₄、-NR₁₄S(O)₂(CF₂)_rCF₃、-C(＝O)NR₁₄S(O)₂R₆、-S(O)₂NR₁₄C(＝O)OR₆、-S(O)₂NR₁₄C(＝O)NR₁₄R₁₄、-C(＝O)NR₁₄S(O)₂(CF₂)_rCF₃、-C(＝O)(CR₈R₈)_rR₁₄、-NR₁₄C(＝O)H、-NR₁₄C(＝O)(CR₈R₈)_rR₁₄、-OC(＝O)(CR₈R₈)_rR₁₄、-C(＝NR14)NR₁₄R₁₄、-NHC(＝NR₁₄)NR₁₄R₁₄、-S(＝O)(CR₈R₈)_rR₁₄、-S(O)₂(CR₈R₈)_rR₁₄、-NR₁₄C(＝O)OR₈、-NR₁₄S(O)₂R₈、芳基氧基-或芳基烷基-；

R₁₄在每次出现时独立选自氢、烷基、环烷基或苯基；

m在每次出现时为0-2；

n为1-2；且

r为0-4。

在另一个实施方案中，本发明化合物为其中如下的化合物：

R₂为烷基或环烷基，其中所述烷基可任选被-OH取代；

R₄在每次出现时为OH或烷基；或与同一碳原子相连的任意两个烷基R₄可形成3至6元环，所述3至6元环可任选含有1-4个选自N、O及S的杂原子；

W为氢或-OH；

R₅为卤素或-CN；

R₈在每次出现时独立为氢或烷基；

R₁₄在每次出现时独立选自氢、烷基、环烷基或苯基；

m在每次出现时为0-2；

n为1-2；且

r为0-3。

在另一个实施方案中，本发明化合物为其中如下的化合物：

R₂为烷基或环烷基，其中所述烷基可任选被-OH取代；

R₄在每次出现时为烷基；或与同一碳原子相连的任意两个R₄可形成3至6元环，所述3至6元环可任选含有1-4个选自N、O及S的杂原子；

W为氢或-OH；

R₅为卤素；

R₈在每次出现时独立为氢或烷基；

R₁₄在每次出现时独立选自氢、烷基、环烷基或苯基；

m在每次出现时为0-2；

n为1-2；且

r为0-2。

在一个实施方案中，本发明化合物为其中如下的化合物：

R₁₅为-NHR₁或杂芳基，其中所述杂芳基可任选被0-3个R_1a取代；

R_1b在每次出现时独立选自烷基、卤代烷基、芳基、烯基、炔基、环烷基、环烷基烷基-、杂芳基、杂芳基烷基-、杂环基、杂环基烷基-、卤素、-NH₂、-CN、-NO₂、-C(＝O)OH、-C(＝O)O(CR₈R₈)_rR₁₀、-O(CF₂)_rCF₃、-O(CR₈R₈)_rR₁₀、-OH、-SH、-S(CR₈R₈)_rR₁₀、-S(O)₃H、-P(O)₃H₂、-C(＝O)NR₉R₉、-NR₉R₉、-S(O)₂NR₉R₉、-NR9S(O)2(CF₂)_rCF₃、-C(＝O)NR₉S(O)₂R₆、-S(O)₂NR₉C(＝O)OR₆、-S(O)₂NR₉C(＝O)NR₉R₉、-C(＝O)NR₉S(O)₂(CF₂)_rCF₃、-C(＝O)(CR₈R₈)_rR₁₀、-NR₉C(＝O)H、-NR₉C(＝O)(CR₈R₈)_rR₁₀、-OC(＝O)(CR₈R₈)_rR₁₀、-C(＝NR₁₄)NR₉R₉、-NHC(＝NR₁₄)NR₁₄R₁₄、-S(＝O)(CR₈R₈)_rR₁₀、-S(O)₂(CR₈R₈)_rR₁₀、-NR₉C(＝O)OR₈、-NR₉S(O)₂R₈、芳基氧基-或芳基烷基-；

R₂为烷基或环烷基，其中所述烷基可任选被-OH取代；

R₄在每次出现时为烷基；

W为氢或-OH；

R₅为卤素；

R₈在每次出现时独立为氢或烷基；

R_10a在每次出现时独立选自烷基、卤代烷基、芳基、烯基、炔基、环烷基、环烷基烷基-、杂芳基、杂芳基烷基-、杂环基、杂环基烷基-、卤素、-NH₂、-CN、-N₂、-C(＝O)OH、-C(＝O)O(CR₈R₈)_rR₁₄、-O(CF₂)_rCF₃、-O(CR₈R₈)_rR₁₄、-OH、-SH、-S(CR₈R₈)_rR₁₄、-S(O)₃H、-P(O)₃H₂、-C(＝O)NR₁₄R₁₄、-NR₁₄R₁₄、-S(O)₂NR₁₄R₁₄、-NR₁₄S(O)₂(CF₂)_rCF₃、-C(＝O)NR₁₄S(O)₂R₆、-S(O)₂NR₁₄C(＝O)OR₆、-S(O)₂NR₁₄C(＝O)NR₁₄R₁₄、-C(＝O)NR₁₄S(O)₂(CF₂)_rCF₃、-C(＝O)(CR₈R₈)_rR₁₄、-NR₁₄C(＝O)H、-NR₁₄C(＝O)(CR₈R₈)_rR₁₄、-OC(＝O)(CR₈R₈)_rR₁₄、-C(＝NR₁₄)NR₁₄R₁₄、-NHC(＝NR₁₄)NR₁₄R₁₄、-S(＝O)(CR₈R₈)_rR₁₄、-S(O)₂(CR₈R₈)_rR₁₄、-NR₁₄C(＝O)OR₈、-NR₁₄S(O)₂R₈、芳基氧基-或芳基烷基-；

R₁₄在每次出现时独立选自氢、烷基、环烷基或苯基；

m在每次出现时为0-2；

n为1-2；且

r为0-2。

在另一个实施方案中，本发明化合物为其中如下的化合物：

R₁₅为-NHR₁；

R_1b在每次出现时独立选自烷基、卤代烷基、芳基、烯基、炔基、环烷基、环烷基烷基-、杂芳基、杂芳基烷基-、杂环基、杂环基烷基-、卤素、-NH₂、-CN、-NO₂、-C(＝O)OH、-C(＝O)O(CR₈R₈)_rR₁₀、-O(CF₂)_rCF₃、-O(CR₈R_8)rR₁₀、-OH、-SH、-S(CR₈R₈)_rR₁₀、-S(O)₃H、-P(O)₃H₂、-C(＝O)NR₉R₉、-NR₉R₉、-S(O)₂NR₉R₉、-NR₉S(O)₂(CF₂)_rCF₃、-C(＝O)NR₉S(O)₂R₆、-S(O)₂NR₉C(＝O)OR₆、-S(O)₂NR₉C(＝O)NR₉R₉、-C(＝O)NR₉S(O)₂(CF₂)_rCF₃、-C(＝O)(CR₈R₈)_rR₁₀、-NR₉C(＝O)H、-NR₉C(＝O)(CR₈R₈)_rR₁₀、-OC(＝O)(CR₈R₈)_rR₁₀、-C(＝NR₁₄)NR₉R₉、-NHC(＝NR₁₄)NR₁₄R₁₄、-S(＝O)(CR₈R₈)_rR₁₀、-S(O)₂(CR₈R₈)_rR₁₀、-NR₉C(＝O)OR₈、-NR₉S(O)₂R₈、芳基氧基-或芳基烷基-；

R₂为烷基或环烷基；

R₄在每次出现时为烷基；

W为氢或-OH；

R₅为卤素；

R₈在每次出现时独立为氢或烷基；

R₉在每次出现时独立为氢、烷基、环烷基、芳基、芳基烷基-、杂芳基、杂芳基烷基-、杂环基或杂环基烷基-其中所述芳基、芳基烷基-、杂芳基、杂芳基烷基-、杂环基或杂环基烷基-可任选被0-5个R_9a取代，且所述杂芳基、杂芳基烷基-、杂环基或杂环基烷基-含有1-4个选自N、O及S的杂原子；

R₁₄在每次出现时独立选自氢、烷基、环烷基或苯基；

m在每次出现时为0-2；

n为1-2；且

r为0-2。

在一个实施方案中，本发明提供新颖式(Ie)化合物或其立体异构体或前药或可药用盐形式：

其中

虚线表示任选的双键；

T为

R₅为卤素、-CN或-O烷基；

R₈在每次出现时独立为氢或烷基；

R₁₄在每次出现时独立选自氢、烷基、环烷基或苯基；

m在每次出现时为0-2；

n为1-3；且

r为0-5。

在一个实施方案中，本发明化合物选自实施例中所列举的化合物。

在一个实施方案中，本发明化合物选自包括：

在另一个实施方案中，本发明涉及药物组合物，所述药物组合物包含可药用载体，及治疗有效量的本发明化合物。

在另一个实施方案中，本发明涉及调节趋化因子或趋化因子受体活性的方法，所述方法包括向需要其的患者给药治疗有效量的本发明化合物。

在另一个实施方案中，本发明涉及调节CCR-1受体活性的方法，所述方法包括向需要其的患者给药治疗有效量的本发明化合物。

在另一个实施方案中，本发明涉及调节CCR-1受体所介导的MIP-1α、MCP-3、MCP-4、RANTES活性，优选为调节MIP-1α活性的方法，所述方法包括向需要其的患者给药治疗有效量的本发明化合物。

在另一个实施方案中，本发明涉及治疗病症的方法，所述方法包括向需要其的患者给药治疗有效量的本发明化合物，其中所述病症选自骨关节炎、动脉瘤、热病、心血管作用、克隆病(Crohn’s disease)、充血性心力衰竭、自身免疫性疾病、HIV感染、HIV相关痴呆、牛皮癣、特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis)、移植物动脉硬化(transplant arteriosclerosis)、物理或化学诱发的脑损伤、炎性肠病、齿槽炎(alveolitis)、结肠炎、系统性红斑狼疮、肾毒血清肾炎(nephrotoxic serum nephritis)、肾小球肾炎、哮喘、多发性硬化、动脉粥样硬化、风湿性关节炎、再狭窄、器官移植、牛皮癣关节炎、多发性骨髓瘤、变态反应例如眼结膜中的皮肤与肥大细胞去颗粒、肝细胞癌、骨质疏松症、肾纤维化及癌症，优选为克隆病、牛皮癣、炎性肠病、系统性红斑狼疮、多发性硬化、风湿性关节炎、多发性骨髓瘤、变态反应例如眼结膜中的皮肤与肥大细胞去颗粒、肝细胞癌、骨质疏松症及肾纤维化。

在另一个实施方案中，本发明涉及治疗炎性疾病的方法，所述方法包括向需要其的患者给药治疗有效量的本发明化合物。

在另一个实施方案中，本发明涉及治疗炎性肠病的方法，所述方法包括向需要其的患者给药治疗有效量的本发明化合物。

在另一个实施方案中，本发明涉及治疗克隆病的方法，所述方法包括向需要其的患者给药治疗有效量的本发明化合物。

在另一个实施方案中，本发明涉及治疗牛皮癣的方法，所述方法包括向需要其的患者给药治疗有效量的本发明化合物。

在另一个实施方案中，本发明涉及治疗系统性红斑狼疮的方法，所述方法包括向需要其的患者给药治疗有效量的本发明化合物。

在另一个实施方案中，本发明涉及治疗多发性硬化的方法，所述方法包括向需要其的患者给药治疗有效量的本发明化合物。

在另一个实施方案中，本发明涉及治疗风湿性关节炎的方法，所述方法包括向需要其的患者给药治疗有效量的本发明化合物。

在另一个实施方案中，本发明涉及治疗牛皮癣关节炎的方法，所述方法包括向需要其的患者给药治疗有效量的本发明化合物。

在另一个实施方案中，本发明涉及治疗多发性骨髓瘤的方法，所述方法包括向需要其的患者给药治疗有效量的本发明化合物。

在另一个实施方案中，本发明涉及治疗变态反应例如眼结膜中的皮肤与肥大细胞去颗粒的方法，所述方法包括向需要其的患者给药治疗有效量的本发明化合物。

在另一个实施方案中，本发明涉及治疗肝细胞癌的方法，所述方法包括向需要其的患者给药治疗有效量的本发明化合物。

在另一个实施方案中，本发明涉及治疗骨质疏松症的方法，所述方法包括向需要其的患者给药治疗有效量的本发明化合物。

在另一个实施方案中，本发明涉及治疗肾纤维化的方法，所述方法包括向需要其的患者给药治疗有效量的本发明化合物。

在另一个实施方案中，本发明涉及治疗炎性疾病例如CCR-1所至少部分介导的炎性疾病的方法，所述方法包括向需要其的患者给药治疗有效量的本发明化合物。

在另一个实施方案中，本发明涉及调节CCR1活性的方法，所述方法包括向需要其的患者给药治疗有效量的本发明化合物。

在另一个实施方案中，本发明涉及本发明化合物在制备用于治疗病症的药物中的用途，所述病症选自骨关节炎、动脉瘤、热病、心血管作用、克隆病、充血性心力衰竭、自身免疫性疾病、HIV感染、HIV相关痴呆、牛皮癣、特发性肺纤维化、移植物动脉硬化、物理或化学诱发的脑损伤、炎性肠病、齿槽炎、结肠炎、系统性红斑狼疮、肾毒血清肾炎、肾小球肾炎、哮喘、多发性硬化、动脉粥样硬化、风湿性关节炎、再狭窄、器官移植、牛皮癣关节炎、多发性骨髓瘤、变态反应例如眼结膜中的皮肤与肥大细胞去颗粒、肝细胞癌、骨质疏松症、肾纤维化及癌症，优选为克隆病、牛皮癣、炎性肠病、系统性红斑狼疮、多发性硬化、风湿性关节炎、多发性骨髓瘤、变态反应例如眼结膜中的皮肤与肥大细胞去颗粒、肝细胞癌、骨质疏松症及肾纤维化。

在另一个实施方案中，本发明涉及本发明化合物，其用于治疗。

在另一个实施方案中，本发明涉及药物组合物，所述药物组合物包含本发明化合物与一种或多种活性成份。

在另一个实施方案中，本发明涉及调节趋化因子或趋化因子受体活性的方法，所述方法包括向需要其的患者给药治疗有效量的药物组合物，所述药物组合物包含本发明化合物与一种或多种活性成份。

在另一个实施方案中，本发明涉及调节CCR-1受体活性的方法，所述方法包括向需要其的患者给药治疗有效量的药物组合物，所述药物组合物包含本发明化合物与一种或多种活性成份。

在另一个实施方案中，本发明涉及调节CCR-1受体所介导的MIP-1α、MCP-3、MCP-4、RANTES活性，优选为调节MIP-1α活性的方法，所述方法包括向需要其的患者给药治疗有效量的药物组合物，所述药物组合物包含本发明化合物与一种或多种活性成份。

在另一个实施方案中，本发明涉及治疗病症的方法，所述方法包括向需要其的患者给药治疗有效量的药物组合物，所述药物组合物包含本发明化合物与一种或多种活性成份，其中所述病症选自骨关节炎、动脉瘤、热病、心血管作用、克隆病、充血性心力衰竭、自身免疫性疾病、HIV感染、HIV相关痴呆、牛皮癣、特发性肺纤维化、移植物动脉硬化、物理或化学诱发的脑损伤、炎性肠病、齿槽炎、结肠炎、系统性红斑狼疮、肾毒血清肾炎、肾小球肾炎、哮喘、多发性硬化、动脉粥样硬化、风湿性关节炎、再狭窄、器官移植、牛皮癣关节炎、多发性骨髓瘤、变态反应例如眼结膜中的皮肤与肥大细胞去颗粒、肝细胞癌、骨质疏松症、肾纤维化及癌症，优选为克隆病、牛皮癣、炎性肠病、系统性红斑狼疮、多发性硬化、风湿性关节炎、多发性骨髓瘤、变态反应例如眼结膜中的皮肤与肥大细胞去颗粒、肝细胞癌、骨质疏松症及肾纤维化。

在另一个实施方案中，本发明涉及治疗炎性疾病优选为CCR-1所至少部分介导的炎性疾病的方法，所述方法包括向需要其的患者给药治疗有效量的药物组合物，所述药物组合物包含本发明化合物与一种或多种活性成份。

在另一个实施方案中，本发明涉及调节CCR-1活性的方法，所述方法包括向需要其的患者给药治疗有效量的药物组合物，所述药物组合物包含本发明化合物与一种或多种活性成份。

在另一个实施方案中，本发明涉及包含本发明化合物与一种或多种活性成份的药物组合物在制备用于治疗病症的药物中的用途，所述病症选自骨关节炎、动脉瘤、热病、心血管作用、克隆病、充血性心力衰竭、自身免疫性疾病、HIV感染、HIV相关痴呆、牛皮癣、特发性肺纤维化、移植物动脉硬化、物理或化学诱发的脑损伤、炎性肠病、齿槽炎、结肠炎、系统性红斑狼疮、肾毒血清肾炎、肾小球肾炎、哮喘、多发性硬化、动脉粥样硬化、风湿性关节炎、再狭窄、器官移植、牛皮癣关节炎、多发性骨髓瘤、变态反应例如眼结膜中的皮肤与肥大细胞去颗粒、肝细胞癌、骨质疏松症、肾纤维化及癌症，优选为克隆病、牛皮癣、炎性肠病、系统性红斑狼疮、多发性硬化、风湿性关节炎、多发性骨髓瘤、变态反应例如眼结膜中的皮肤与肥大细胞去颗粒、肝细胞癌、骨质疏松症及肾纤维化。

在另一个实施方案中，本发明涉及包含本发明化合物与一种或多种活性成份的药物组合物在治疗中的用途。

本发明可在不脱离其构思和基本属性的情况下以其它特定形式来具体化。本发明也涵盖本申请所记载的本发明可选方面的所有组合。应当理解，本发明的任一和所有实施方案均可与任一其它实施方案结合，以描述本发明的额外实施方案。此外，实施方案的任一要素可与任一实施方案的任一和所有其它要素结合，以描述额外的实施方案。

定义

本申请所描述的化合物可具有不对称中心。可将包含不对称取代原子的本发明化合物分离成光学活性形式或外消旋形式。本领域众所周知如何制备光学活性形式，例如通过对外消旋形式进行拆分或从光学活性起始原料合成。本申请所描述的化合物中也可存在烯烃、C＝N双键等的多种几何异构体，且所有这类稳定的异构体都包括在本发明中。本发明化合物的顺式和反式几何异构体得以描述，并且可将其分离成异构体的混合物或分离成分开的异构形式。本发明包括结构的所有手性形式、非对映异构形式、外消旋形式和所有几何异构形式，除非具体指出特定的立体化学或异构形式。

本发明化合物的一种对映异构体与另一种比较，可能显示出优越的活性。因此，本发明包括所有立体化学物质。当需要时，外消旋体质的分离可通过以下方法来实现：使用手性柱进行HPLC，或使用拆分试剂诸如龙脑酰氯进行拆分(Steven D.Young，et al.，Antimicrobial Agents andChemotheraphy，1995，2602-2605)。

本申请所使用的″取代″指在所指定原子或环上的任意一个或多个氢被选自所列出的基团代替，其条件是不得超过所指定原子或环原子的正常化合价，且该取代得到稳定的化合物。当取代基为酮基(即＝O)时，则在该原子上的2个氢被取代。

当任何变量(例如R₄)在一种化合物的任何组成或化学式上出现超过一次时，其在每一次出现时的定义与其在每一次其它次出现时的定义无关。因此，例如若一种基团被显示为被(R₄)_m取代，且m为0-3，则该基团可任选被至多三个R₄基团取代，且R₄在每一次出现时独立选自R₄的定义。而且，取代基及/或变量的组合只有在此种组合得到稳定化合物的情况下才是允许的。

当示出连接取代基的键与连接环中两个原子的键交叉时，则该取代基可与环上任一原子连接。当列出取代基但没有指出该取代基通过哪个原子连接到给定结构式的化合物的其它部分时，则该取代基可通过该取代基中的任一原子来连接。取代基和/或变量的组合只有在此种组合得到稳定化合物的情况下才是允许的。

本申请所使用的″烷基″意在包括支链和直链饱和脂族烃基，其在正链中含有1至20个碳，优选为1至10个碳，更优选为1至8个碳，诸如甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、叔丁基、异丁基、戊基、己基、异己基、庚基、4，4-二甲基戊基、辛基、2，2，4-三甲基-戊基、壬基、癸基、十一烷基、十二烷基、其各种支链异构体等，以及这些基团可任选包含1至4个取代基，诸如卤素，例如F、Br、Cl或I，或CF₃、烷基、烷氧基、芳基、芳基氧基、芳基(芳基)或二芳基、芳基烷基-、芳基烷基氧基、烯基、环烷基、环烷基烷基-、环烷基烷基氧基、氨基、羟基、羟基烷基、酰基、杂芳基、杂芳基氧基、杂芳基烷基-、杂芳基烷氧基、芳基氧基烷基、烷基硫基、芳基烷基硫基、芳基氧基芳基、烷基酰氨基、烷酰基氨基、芳基羰基氨基、硝基、氰基、巯基、卤代烷基、三卤代烷基及/或烷基硫基。

除非另有指出，本申请所使用的″烯基″，单独或作为另一基团的部分，指在正链中具有2至20个碳，优选为2至12个碳，更优选为1至8个碳的直链或支链基团，其在正链中包含一至六个双键，诸如乙烯基、2-丙烯基、3-丁烯基、2-丁烯基、4-戊烯基、3-戊烯基、2-己烯基、3-己烯基、2-庚烯基、3-庚烯基、4-庚烯基、3-辛烯基、3-壬烯基、4-癸烯基、3-十一烯基、4-十二烯基、4，8，12-十四碳三烯基等，且其可任选被1至4个取代基取代，所述取代基为卤素、卤代烷基、烷基、烷氧基、烯基、炔基、芳基、芳基烷基-、环烷基、氨基、羟基、杂芳基、环杂烷基、烷酰基氨基、烷基酰氨基、芳基羰基-氨基、硝基、氰基、巯基、烷基硫基及/或本申请所提出的任何烷基取代基。

除非另有指出，本申请所使用的″炔基″，单独或作为另一基团的部分，指在正链中具有2至20个碳，优选为2至12个碳，更优选为2至8个碳的直链或支链基团，其在正链中包含一个叁键，诸如2-丙炔基、3-丁炔基、2-丁炔基、4-戊炔基、3-戊炔基、2-己炔基、3-己炔基、2-庚炔基、3-庚炔基、4-庚炔基、3-辛炔基、3-壬炔基、4-癸炔基、3-十一碳炔基、4-十二碳炔基等，且其可任选被1至4个取代基取代，所述取代基为卤素、卤代烷基、烷基、烷氧基、烯基、炔基、芳基、芳基烷基-、环烷基、氨基、杂芳基、环杂烷基、羟基、烷酰基氨基、烷基酰氨基、芳基羰基氨基、硝基、氰基、巯基及/或烷基硫基及/或本申请所提出的任何烷基取代基。

除非另有指出，本申请所使用的″环烷基″，单独或作为另一基团的部分，包括饱和或部分不饱和(含有1或2个双键)的环状烃基团，其含有1至3个环，包括单环烷基、二环烷基(或二环烷基)及三环烷基，含有总计3至20个成环碳原子，优选为3至10个成环碳原子，且其可与1或2个就芳基所描述的芳族环稠合，所述环烷基包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、环癸基与环十二烷基、环己烯基、

其中任一基团可任选被1至4个取代基取代，所述取代基诸如卤素、烷基、烷氧基、羟基、芳基、芳基氧基、芳基烷基-、环烷基、烷基酰氨基、烷酰基氨基、氧代、酰基、芳基羰基氨基、氨基、硝基、氰基、巯基及/或烷基硫基及/或关于烷基的任何取代基。

在上文所定义的烷基在两个不同碳原子上具有用于接附其它基团的单键的情况下，其被称为″亚烷基″，且可任选如上文关于″烷基″所定义的那样被取代。

在上文所定义的烯基与上文所定义的炔基分别在两个不同碳原子上具有用于接附的单键的情况下，其分别被称为″亚烯基″与″亚炔基″，且可任选如上文关于″烯基″与″炔基″所定义的那样被取代。

本申请所使用的″卤素″或″卤代″指氟、氯、溴及碘；及″卤代烷基″意在包括支链与直链饱和脂族烃基(例如CF₃)，其具有所指定的碳原子数，被一个或多个卤素取代(例如-C_vF_w，其中v＝1至3，且w＝1至(2v+1))。

除非另有指出，本申请所使用的″芳基″，单独或作为另一基团的部分，指单环芳族基团与二环芳族基团，其在环部分含有6至10个碳(诸如苯基，或萘基，包括1-萘基与2-萘基)中，且可任选包括1至3个与碳环或杂环(诸如芳基、环烷基、杂芳基或环杂烷基环)稠合的其它环，例如

且可任选经过可用的碳原子被1、2或3个取代基取代，所述取代基例如氢、卤素、卤代烷基、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、烯基、三氟甲基、三氟甲氧基、炔基、环烷基-烷基、环杂烷基、环杂烷基烷基、芳基、杂芳基、芳基烷基-、芳基氧基、芳基氧基烷基、芳基烷氧基、芳基硫基、芳基偶氮基、杂芳基烷基-、杂芳基烯基、杂芳基杂芳基、杂芳基氧基、羟基、硝基、氰基、氨基、取代的氨基，其中所述氨基包含1或2个取代基(所述取代基为烷基、芳基，或定义中所提及的任何其它芳基化合物)、巯基、烷基硫基、芳基硫基、杂芳基硫基、芳基硫基烷基、烷氧基芳基硫基、烷基羰基、芳基羰基、烷基-氨基羰基、芳基氨基羰基、烷氧基羰基、氨基羰基、烷基羰基氧基、芳基羰基氧基、烷基羰基氨基、芳基羰基氨基、芳基亚磺酰基、芳基亚磺酰基烷基、芳基磺酰基氨基或芳基磺酰基-氨基羰基及/或本申请所提出的任何烷基取代基。

除非另有指出，本申请所使用的″低级烷氧基″、″烷氧基″、″芳基氧基″或″芳烷氧基″，单独或作为另一基团的部分，包含与氧原子连接的任何上述烷基、芳烷基或芳基。

除非另有指出，本申请所使用的″氨基″，单独或作为另一基团的部分，指可被一个或两个取代基取代的氨基，所述取代基可相同或不同，诸如烷基、芳基、芳基烷基-、杂芳基、杂芳基烷基-、环杂烷基、环杂烷基烷基、环烷基、环烷基烷基-、卤代烷基、羟基烷基、烷氧基烷基或巯基烷基。这些取代基可进一步被羧酸及/或任何R¹基团或上文关于R¹所提出的取代基取代。此外，氨基的取代基可与其所连接的氮原子一起形成1-吡咯烷基、1-哌啶基、1-氮杂

基、4-吗啉基、4-硫吗啉基、1-哌嗪基、4-烷基-1-哌嗪基、4-芳基烷基-1-哌嗪基、4-二芳基烷基-1-哌嗪基、1-吡咯烷基、1-哌啶基或1-氮杂

基，它们任选被烷基、烷氧基、烷基硫基、卤素、三氟甲基或羟基取代。

除非另有指出，本申请所使用的″低级烷基硫基″、″烷基硫基″、″芳基硫基″或″芳烷基硫基″，单独或作为另一基团的部分，包含与硫原子连接的任何上述烷基、芳烷基或芳基。

除非另有指出，本申请所使用的″低级烷基氨基″、″烷基氨基″、″芳基氨基″或″芳基烷基氨基″，单独或作为另一基团的部分，包含与氮原子连接的任何上述烷基、芳基或芳基烷基。

本申请所使用的″杂环基″或″杂环系统″指稳定的5、6或7元单环杂环或二环杂环，或稳定的7、8、9或10元二环杂环，其为饱和、部分不饱和或不饱和(芳族)，且其包含碳原子及1、2、3或4个独立选自N、NH、O及S的杂原子，且包括任何二环基团，其中任何上文所定义的杂环与苯环稠合。氮杂原子与硫杂原子可任选被氧化。杂环可在形成稳定结构的任一杂原子或碳原子处连接到其侧基上。本申请所描述的杂环可在碳或氮原子上被取代，只要所得到的化合物是稳定的。若明确指出，则杂环中的氮可任选是季铵化的。优选的是，当杂环中S和O原子的总数超过1时，这些杂原子不彼此相邻。本申请所使用的″芳族杂环系统″或″杂芳基″指稳定的5-至7-元单环杂环芳族环或二环杂环芳族环或7-至10-元二环杂环芳族环，其包含碳原子及1至4个独立选自N、O及S的杂原子，且在本质上为芳香性。

杂环的实施例包括但不限于1H-吲唑、2-吡咯烷酮基、2H，6H-1，5，2-二噻嗪基、2H-吡咯基、1H-吲哚基、4-哌啶酮基、4aH-咔唑、4H-喹嗪基、6H-1，2，5-噻二嗪基、吖啶基、氮杂环辛四烯基(azocinyl)、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并噻喃基、苯并噻吩基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并三唑基、苯并四唑基、苯并异噁唑基、苯并异噻唑基、苯并咪唑酮基、咔唑基、4aH-咔唑基、β-咔啉基、色满基、色烯基、噌啉基、十氢喹啉基、2H，6H-1，5，2-二噻嗪基、二氢呋喃并[2，3-b]四氢呋喃、呋喃基、呋咱基、咪唑烷基、咪唑啉基、咪唑基、吲唑基、吲哚烯基(indolenyl)、吲哚满基、吲嗪基、吲哚基、异苯并呋喃基、异色满基、异吲唑基、异吲哚满基、异吲哚基、异喹啉基(苯并咪唑基)、异噻唑基、异噁唑基、吗啉基、萘啶基、八氢异喹啉基、噁二唑基、1，2，3-噁二唑基、1，2，4-噁二唑基、1，2，5-噁二唑基、1，3，4-噁二唑基、噁唑烷基、噁唑基、噁唑烷基萘嵌间二氮杂苯基、菲啶基、菲咯啉基、吩吡嗪基、吩嗪基、吩噻嗪基、吩噁噻基、吩噁嗪基、酞嗪基、哌嗪基、哌啶基、蝶啶基、哌啶酮基、4-哌啶酮基、蝶啶基、嘌呤基、吡喃基、吡嗪基、吡唑烷基、吡唑啉基、吡唑基、哒嗪基、吡啶并噁唑、吡啶并咪唑、吡啶并噻唑、吡啶基、吡啶基、嘧啶基、吡咯烷基、吡咯啉基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、4H-喹嗪基、喹喔啉基、奎宁环基、咔啉基、四唑基、四氢呋喃基、四氢异喹啉基、四氢喹啉基、6H-1，2，5-噻二嗪基、1，2，3-噻二唑基、1，2，4-噻二唑基、1，2，5-噻二唑基、1，3，4-噻二唑基、噻蒽基、噻唑基、噻吩基、噻吩并噻唑基、噻吩并噁唑基、噻吩并咪唑基、噻吩基、三嗪基、1，2，3-三唑基、1，2，4-三唑基、1，2，5-三唑基、1，3，4-三唑基、四唑基及呫吨基。在本发明的另一方面，杂环包括但不限于吡啶基、噻吩基、呋喃基、吲唑基、苯并噻唑基、苯并咪唑基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、苯并噁唑基、苯并异噁唑基、喹啉基、异喹啉基、咪唑基、吲哚基、异吲哚基、哌啶基、哌啶酮基、4-哌啶酮基、胡椒基、吡唑基、1，2，4-三唑基、1，2，3-三唑基、四唑基、噻唑基、噁唑基、吡嗪基及嘧啶基。本申请也包括含有例如上述杂环的稠环化合物与螺环化合物。

杂芳基的实施例为1H-吲唑、2H，6H-1，5，2-二噻嗪基、吲哚基、4aH-咔唑、4H-喹嗪基、6H-1，2，5-噻二嗪基、吖啶基、氮杂环辛四烯基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并噻喃基、苯并噻吩基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并三唑基、苯并四唑基、苯并异噁唑基、苯并异噻唑基、苯并咪唑酮基、咔唑基、4aH-咔唑基、β-咔啉基、色满基、色烯基、噌啉基、十氢喹啉基、2H，6H-1，5，2-二噻嗪基、二氢呋喃并[2，3-b]四氢呋喃、呋喃基、呋咱基、咪唑烷基、咪唑啉基、咪唑基、吲唑基、吲哚烯基、吲哚满基、吲嗪基、吲哚基、异苯并呋喃基、异色满基、异吲唑基、异吲哚满基、异吲哚基、异喹啉基(苯并咪唑基)、异噻唑基、异噁唑基、吗啉基、萘啶基、八氢异喹啉基、噁二唑基、1，2，3-噁二唑基、1，2，4-噁二唑基、1，2，5-噁二唑基、1，3，4-噁二唑基、噁唑烷基、噁唑基、噁唑烷基萘嵌间二氮杂苯基、菲啶基、菲咯啉基、吩吡嗪基、吩嗪基、吩噻嗪基、吩噁噻基、吩噁嗪基、酞嗪基、哌嗪基、哌啶基、蝶啶基、哌啶酮基、4-哌啶酮基、蝶啶基、嘌呤基、吡喃基、吡嗪基、吡唑烷基、吡唑啉基、吡唑基、吡唑并三嗪基、哒嗪基、吡啶并噁唑、吡啶并咪唑、吡啶并噻唑、吡啶基、吡啶基、嘧啶基、吡咯烷基、吡咯啉基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、4H-喹嗪基、喹喔啉基、奎宁环基、咔啉基、四氢呋喃基、四氢异喹啉基、四氢喹啉基、6H-1，2，5-噻二嗪基、1，2，3-噻二唑基、1，2，4-噻二唑基、1，2，5-噻二唑基、1，3，4-噻二唑基、噻蒽基、噻唑基、噻吩基、噻吩并噻唑基、噻吩并噁唑基、噻吩并咪唑基、噻吩基、三嗪基、1，2，3-三唑基、1，2，4-三唑基、1，2，5-三唑基、1，3，4-三唑基、四唑基及呫吨基。在本发明的另一方面，杂芳基的实例为吲哚基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并噻喃基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并三唑基、苯并四唑基、苯并异噁唑基、苯并异噻唑基、苯并咪唑酮基、噌啉基、呋喃基、咪唑基、吲唑基、吲哚基、异喹啉基、异噻唑基、异噁唑基、噁唑基、吡嗪基、吡唑基、吡唑并三嗪基、哒嗪基、吡啶基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、噻唑基、噻吩基及四唑基。

本申请所使用的″杂环基烷基″或″杂环基″，单独或作为另一基团的部分，指上文所定义的杂环基，其经过C原子或杂原子连结至烷基链。

本申请所使用的″杂芳基烷基″或″杂芳基烯基″，单独或作为另一基团的部分，指上文所定义的杂芳基，其经过C原子或杂原子连结至上文所定义的烷基链、亚烷基或亚烯基。

本申请所使用的″氰基″，指-CN基团。

本申请所使用的″硝基″，指-NO₂基团。

本申请所使用的″羟基″，指OH基团。

本申请所用的短语“可药用的”是指这样的化合物、材料、组合物和/或剂型，其在合理的医学判断范围内适于与人和动物的组织接触而没有过度的毒性、刺激、变态反应或其它问题或并发症，这与合理的益处/风险比相称。

本申请所用的“可药用盐”是指所公开的化合物的衍生物，其中母体化合物通过制备其酸加成盐或碱加成盐来改性。可药用盐的实例包括但不限于碱性基团如胺的无机或有机酸盐、酸性基团如羧酸的碱金属或有机盐等。可药用盐包括母体化合物的常规无毒盐或季铵盐，其例如从无毒的无机或有机酸来制备。举例来说，这类常规的无毒盐包括源于无机酸的盐，所述无机酸例如为盐酸、氢溴酸、硫酸、氨磺酸、磷酸、硝酸等；及从有机酸制备的盐，所述有机酸例如为乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、扑酸、马来酸、羟基马来酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水杨酸、对氨基苯磺酸、2-乙酰氧基苯甲酸、富马酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙二磺酸、草酸、羟乙磺酸等。

本发明的可药用盐可通过常规的化学方法从包含碱性或酸性基团的母体化合物来合成。通常，这类盐可如此制备，即在水或有机溶剂或二者的混合物中使这些化合物的游离酸或碱形式与化学计量的适宜的碱或酸反应；通常，非水介质是优选的，如乙醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈。适宜盐的列举请参见Remington’s Pharmaceutical Sciences，17th ed.，MackPublishing Company，Easton，PA，1985，p.1418，在此将其所披露的内容引入作为参考。

任何可在体内转化成生物活性剂(即式I、Ia、Ib、Ib’、Ic、Id或Ie化合物)的化合物都是本发明范围和构思内的前药。

本申请所使用的″前药″包括酯类与碳酸酯类，其经由以下方法来制备：采用本领域技术人员已知的操作，使本发明化合物的一个或多个羟基与被烷基、烷氧基或芳基取代的酰化剂反应，以产生乙酸酯、新戊酸酯、甲基碳酸酯、苯甲酸酯等。

各种形式的前药在本领域中是众所周知的，参见：

a)The Practice of Medicinal Chemistry，Camille G.Wermuth，et al.，Ch.31，(Academic Press，1996)；

b)Design of Prodrugs，edited by H.Bundgaard，(Elsevier，1985)；

c)A Textbook of Drug Design and Development，P.Krogsgaard-Larson andH.Bundgaard，eds.Ch.5，pgs 113-191(Harwood Academic Publishers，1991)；及

d)Hydrolysis in Drug and Prodrug Metabolism，Bernard Testa and JoachimM.Mayer，(Wiley-VCH，2003)。

在此将这些文献引入作为参考。

此外，本发明化合物在其制备的后优选经分离与纯化，得到一种组合物，其含有以重量计量等于或大于99％的所述化合物(″基本上单纯″的化合物)，其接着按本申请所描述来使用或配制。本申请也包括本发明这些″基本上单纯″的化合物，其作为本发明的部分。

本申请包括本发明化合物的所有立体异构体，无论是呈混合物形式还是呈单纯或基本上单纯的形式。本发明化合物可在任何碳原子(包括R取代基上的任意一个碳原子)上具有不对称中心，及/或显示出多晶型现象。因此，本发明化合物可以对映异构形式或非对映异构形式或以它们的混合物形式存在。制备方法可利用外消旋体、对映异构体或非对映异构体作为起始原料。当制备非对映异构产物或对映异构产物时，它们可通过常规方法例如色谱或分级结晶来分离。

“稳定的化合物”和“稳定的结构”意指这样的化合物，其足够稳固，经受得住从反应混合物到可用纯度的分离及到有效治疗剂的配制。本发明意在包括稳定的化合物。

″治疗有效量″意在包括本发明化合物单独的量，或本发明化合物组合的量，或本发明化合物与其它活性成份联用的量，所述量可有效抑制MIP-1α或有效治疗或预防炎性病症。

本申请所使用的“治疗”涵盖在哺乳动物特别是人类中对疾病状态进行治疗，并且包括(a)预防该疾病状态在哺乳动物中的发生，特别是当该哺乳动物易患该疾病状态但尚未确诊患有该疾病状态时；(b)抑制该疾病状态，即阻止其发展；和/或(c)缓解该疾病状态，即令该疾病状态消退。

合成

本发明化合物可按有机合成领域技术人员所熟知的多种方法来制备。本发明化合物可利用下述方法连同合成有机化学领域所已知的合成方法或通过本领域技术人员所明了的这些方法的变化形式来合成。优选的方法包括但不限于下面所描述的方法。在此将本申请所引用的所有文献完整引入作为参考。

可使用此章节中所描述的反应与技术来制备本发明的新颖化合物。反应在适于所用试剂与物质的溶剂中进行，且适于所进行的转化。而且，在对下文所述合成方法的说明中，应明了的是，选择所提出的各种反应条件(包括溶剂的选择、反应气氛、反应温度、实验的持续时间及处理操作)，使之就该反应而言为标准的条件，其可容易地被本领域技术人员所明了。有机合成领域技术人员应理解的是，存在于分子各个部分上的官能性应当与所提出的试剂和反应相容。对与反应条件相容的取代基的这些限制可容易地被本领域技术人员所明了，由此必须使用替换的方法。这有时需要作出判断，以改变合成步骤的顺序或选择一种优于另一种方案的特定流程方案，得到期望的本发明化合物。也应明了的是，在本领域中在设计任何合成途径时所要考虑的另一主要问题是合理地选择保护基，以对存在于本发明所述化合物中的反应性官能团进行保护。就本领域技术人员而言，描述多种替换方法的权威报告请参见Greene and Wuts(Protective Groups in OrganicSynthesis，Wiley & Sons，1999)。

本发明的趋化因子受体拮抗剂可从受保护的氨基酸衍生物1.1来制备，其方式是在标准酰胺键形成条件下使受保护的氨基酸衍生物1.1与哌啶1.2偶联，得到1.3，如方案1中所示。氮的脱保护可得到胺1.4，其可进一步与衍生化试剂反应，得到(I和Ia)。此外，使用与制备I类似的顺序，受保护的氨基酸衍生物，诸如1.5，可与取代的哌啶1.6反应，及进一步转化成本发明的Ib与Ib’化合物，。

方案1

或者，本发明化合物可按方案2中所示来合成。使官能化的氨基酸衍生物2.1与哌啶1.2或1.6在标准酰胺键形成条件下偶联，可得到化合物I与Ia(A)或Ib与Ib’(B)。

方案2

羟基哌啶与二氢哌啶(dihydropiperidine)类似物可按照方案3中所概述的方法来制备。官能化的酸2.1可被偶联至羟基哌啶3.1，得到3.2，其本身可用作趋化因子抑制剂。羟基在酸性条件下消除，可得到本发明的二氢哌啶。

方案3

也可使用方案4中所概述的反应来进行树脂所承载的合成。将胺酯偶联至适当官能化的树脂，可得到4.1，其在胺官能化后可形成4.2。标准皂化反应可得到悬挂酸衍生的树脂4.3。与胺1.2或3.1形成酰胺键，可分别得到类似物4.4与4.5。使用酸来与树脂脱离，可从羟基哌啶4.5得到二氢哌啶(Ie)，或从4.4得到哌啶(I和Ia)。

方案4

本发明化合物也可按照方案5中所概述的方法来制备。适当官能化的胺1.4可与异硫氰酸酯反应，接着在碱存在下，用碘甲烷进行烷基化，得到5.1。化合物5.1可进一步与例如肼或羟胺衍生物反应，得到本发明的取代的三唑或噁二唑。

方案5

而且，本发明化合物可以下述方式来制备，使化合物6.1与含有可置换离去基团(诸如溴)的适当酸反应，得到化合物6.2。化合物6.2可与胺在适当溶剂中反应，得到本发明化合物。

方案6

或者，本发明化合物可按方案7a与7b中所示来合成。使本发明化合物的适当官能化类似物在本领域技术人员所已知的多种条件下反应，可得到本发明的其它化合物。理所当然的是，方案7a与7b中所示的实施例只是在有机合成领域技术人员知识范围内可行的多种官能团转化与官能团相互转化的代表。

方案7a

方案7b

本发明的其它化合物可按照方案8中的方法来制备。化合物8.1可与芳基卤化物或杂芳基卤化物反应，得到适当取代的胺。而且，化合物8.1可与酐反应，得到酰胺，或与卤代乙酰卤(诸如氯乙酰氯)反应，接着与亲核剂诸如吡唑反应，得到取代的酰胺。

方案8

本发明的其它化合物也可按照方案9中所概述的方法来制备。氨基酸，诸如D-缬氨酸(9.1)，可与芳基卤化物诸如碘苯反应，得到N-芳基氨基酸9.2。此氨基酸可接着与适当取代的哌啶诸如9.3反应，得到通式(Id)的本发明化合物。

方案9

本发明的其它特征在对示范性实施方案的以下描述中是显而易见的，所述示范性实施方案为了说明本发明而给予，而非意欲对其限制。

实施例

在实施例中使用的缩写定义如下：″1x″为一次，″2x″为两次，″3x″为三次，″Boc″为叔丁氧羰基，″℃″为摄氏度，″Cbz″为苄氧羰基，″DCM″为二氯甲烷，″DMF″为N，N-二甲基甲酰胺，″DIEA″为N，N-二异丙基乙胺，″EDC″为N-(3-二甲氨基丙基)-N-乙基碳二亚胺盐酸盐，″eq″为当量，″g″为克，″HOBt″为1-羟基苯并三唑，″LC″为液相色谱，″mg″为毫克，″mL″为毫升，″μL″为微升，″h″为小时，″M″为摩尔浓度，″MeOH″为甲醇，″min″为分钟，″MS″为质谱，″rt.″为室温，″TFA″为三氟乙酸，″THF″为四氢呋喃，及″v/v″为体积对体积比。″D″、″L″、″R″及″S″为本领域技术人员所熟悉的立体化学命名。使用ChemDraw Ultra，8.0.8版得到化学名称。当此程序未能就所涉及的确切结构给出名称时，使用此程序所利用的相同方法学来确定适当的名称。

中间体

制备A：(R)-2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)丁-1-酮盐酸盐

步骤1：(R)-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-1-氧代丁-2-基氨基甲酸叔丁酯

使N-Boc-D-2-氨基丁酸溶于2毫升氯仿中。添加DIEA(0.65毫升)、HOBt(0.19克)及4-(4-氯苯基)哌啶盐酸盐(0.32克)，并将此溶液在室温搅拌15分钟。在此段时间后，添加EDC(0.26克)，并将所得到的溶液搅拌过夜。在这段期间结束时，将所得到的溶液以氯仿稀释，并以5％v/v HCl/水洗涤。以饱和碳酸氢钠水溶液萃取有机部分。使合并的有机部分以固体硫酸镁干燥，过滤，及通过旋转蒸发浓缩，得到(R)-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-1-氧代丁-2-基氨基甲酸叔丁酯。MS实测值：(M+Na)⁺＝403。

步骤2：(R)-2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)丁-1-酮盐酸盐

将HCl在二噁烷中的4M溶液(8毫升)添加至(R)-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-1-氧代丁-2-基氨基甲酸叔丁酯(0.46克)中，并将所得到的溶液在室温搅拌1.5小时。在此段时间后，通过旋转蒸发除去溶剂，得到油状物。使此油状物在真空中干燥过夜，得到(R)-2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)丁-1-酮盐酸盐。MS实测值：(M+H)⁺＝281。

制备B：2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐

2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐按制备A中所描述的类似方式，唯在步骤1中以N-Boc-DL-缬氨酸代替N-Boc-D-2-氨基丁酸来制备。MS实测值：(M+H)⁺＝295。

制备C：(R)-2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐

(R)-2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐按制备A中所描述的类似方式，唯在步骤1中以N-Boc-D-缬氨酸代替N-Boc-D-2-氨基丁酸来制备。MS实测值：(M+H)⁺＝295。

制备D：(2R，3R)-2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基戊-1-酮盐酸盐

(2R，3R)-2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基戊-1-酮盐酸盐按制备A中所描述的类似方式，唯在步骤1中以N-Boc-D-异亮氨酸代替N-Boc-D-2-氨基丁酸来制备。MS实测值：(M+H)⁺＝309。

制备E：(R)-2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-2-环己基乙酮盐酸盐

(R)-2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-2-环己基乙酮盐酸盐按制备A中所描述的类似方式，唯在步骤1中以N-Boc-D-环己基甘氨酸代替N-Boc-D-2-氨基丁酸来制备。MS实测值：(M+H)⁺＝335。

制备F：2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)戊-1-酮盐酸盐

2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)戊-1-酮盐酸盐按制备A中所描述的类似方式，唯在步骤1中以N-Boc-DL-正缬氨酸代替N-Boc-D-2-氨基丁酸来制备。MS实测值：(M+H)⁺＝295。

制备G：2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-4-甲基戊-1-酮盐酸盐

2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-4-甲基戊-1-酮盐酸盐按制备A中所描述的类似方式，唯在步骤1中以N-Boc-DL-亮氨酸代替N-Boc-D-2-氨基丁酸来制备。MS实测值：(M+H)⁺＝309。

制备H：2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3，3-二甲基丁-1-酮盐酸盐

2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3，3-二甲基丁-1-酮盐酸盐按制备A中所描述的类似方式，唯在步骤1中以N-Boc-DL-α-叔丁基甘氨酸代替N-Boc-D-2-氨基丁酸来制备。MS实测值：(M+H)⁺＝309。

制备I：(2R，3S)-2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基戊-1-酮盐酸盐

(2R，3S)-2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基戊-1-酮盐酸盐按制备A中所描述的类似方式，唯在步骤1中以N-Boc-D-别异亮氨酸代替N-Boc-D-2-氨基丁酸来制备。MS实测值：(M+H)＝309.3。

制备J：(R)-2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-2-环丙基乙酮盐酸盐

(R)-2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-2-环丙基乙酮盐酸盐按制备A中所描述的类似方式，唯在步骤1中以N-Boc-D-环丙基甘氨酸代替N-Boc-D-2-氨基丁酸来制备。MS实测值：(M+H)⁺＝293.2。

制备K：(R)-2-氨基-1-(4-(4-氟苯基)哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐

(R)-2-氨基-1-(4-(4-氟苯基)哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐按制备C中所描述的类似方式，从4-氟苯基哌啶盐酸盐开始来制备。MS实测值：(M+H)⁺＝279.3。

实施例1

(R)-N-(1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-1-氧代丁-2-基)苯甲酰胺

在反应容器中添加DMF(0.6毫升)中的HOBt(8毫克)、苯甲酸(7毫克)及EDC(11毫克)，并将所得到的溶液在室温搅拌15分钟。在此段时间后，添加(R)-2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)丁-1-酮盐酸盐(14毫克)在DIEA(38微升)与DMF(187微升)中的溶液。在添加完成时，使反应混合物在室温振荡过夜。在这段期间结束时，将所得到的溶液以MeOH稀释，并通过制备性LC-MS纯化，得到实施例1。MS实测值：(M+H)⁺＝386。

实施例2至8

如表1中所描述的实施例2至8按关于制备实施例1所描述的类似方式来制备。在实施例2至8的合成中，代替实施例1中所使用的苯甲酸而使用制备所列产物所需要的适当酸。″MS″栏中的数据表示MS实验中观察到的(M+H)+离子的数值。

表1

实施例9

N-(1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-2-苯基乙酰胺

在反应管中添加DMF(0.7毫升)中的HOBt(10毫克)、苯基乙酸(12毫克)及EDC(14毫克)。将所得到的混合物在室温搅拌15分钟，然后添加2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐(20毫克)在DIEA(50微升)与DMF(250微升)中的溶液，并使所得到的混合物在室温振荡过夜。在这段期间结束时，将所得到的溶液以MeOH稀释，并通过制备性LC-MS纯化，得到实施例9。MS实测值：(M+H)⁺＝414。

实施例10至74

如表2中所描述的实施例10至74按关于制备实施例9所描述的类似方式来制备。在实施例10至74的合成中，代替实施例9中所使用的苯基乙酸而使用制备所列产物所需要的适当酸。″MS″栏中的数据表示MS实验中观察到的(M+H)⁺离子的数值。

表2

实施例75

(R)-N-(1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)苯甲酰胺

将(R)-2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐(41毫克)添加至DMF(1毫升)中。将所得到的混合物搅拌，直到均匀为止，然后添加HOBt(19毫克)、DIEA(65微升)、苯甲酸(17毫克)及EDC(26毫克)。将所得到的溶液在室温搅拌过夜。在此段时间后，将溶液以MeOH稀释，并通过制备性LC-MS纯化，得到实施例75。MS实测值：(M+Na)⁺＝421。

实施例76至148

如表3中所描述的实施例76至148按关于制备实施例75所描述的类似方式来制备。在实施例76至148的合成中，代替实施例75中所使用的苯甲酸而使用制备所列产物所需要的适当酸。在实施例139、140、143、144及149中，所述酸通过标准皂化反应(NaOH，THF)从其相应市售的酯来得到。″MS″栏中的数据表示MS实验中观察到的(M+H)⁺离子的数值。

表3

实施例149

(R)-N-(1-(4-(4-溴苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)苯甲酰胺

步骤1：(R)-2-氨基-1-(4-(4-溴苯基)哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐

(R)-2-氨基-1-(4-(4-溴苯基)哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐按制备A中所描述的类似方式，唯在步骤1中以4-溴苯基哌啶代替4-氯苯基哌啶盐酸盐来制备。

步骤2：实施例149

实施例149按关于制备实施例75所描述的类似方式来制备。MS实测值：(M+Na)⁺＝443.2。

实施例150

N-((2R，3R)-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代戊-2-基)苯甲酰胺

在反应管中添加DMF(0.6毫升)中的HOBt(8毫克)、苯甲酸(7毫克)及EDC(11毫克)，然后在室温搅拌15分钟。在此段时间后，添加(2R，3R)-2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基戊-1-酮盐酸盐(16毫克)在DIEA(38微升)与DMF(187微升)中的溶液。在添加完成时，使反应混合物在室温振荡过夜。在这段期间结束时，将所得到的溶液以MeOH稀释，并通过制备性LC-MS纯化，得到实施例150。MS实测值：(M+H)⁺＝414。

实施例151至177

如表4中所描述的实施例151至177按关于制备实施例150所描述的类似方式来制备。在实施例151至177的合成中，代替实施例150中所使用的苯甲酸而使用制备所列产物所需要的适当酸。″MS″栏中的数据表示MS实验中观察到的(M+H)⁺离子的数值。

表4

实施例178

(R)-N-(2-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-1-环己基-2-氧代乙基)苯甲酰胺

在反应管中添加DMF(0.6毫升)中的HOBt(8毫克)、苯甲酸(7毫克)及EDC(11毫克)，然后将其在室温搅拌15分钟。在此段时间后，添加(R)-2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-2-环己基乙酮盐酸盐(16毫克)在DIEA(38微升)与DMF(187微升)中的溶液。在添加完成时，使反应混合物在室温振荡过夜。在这段期间结束时，将所得到的溶液以MeOH稀释，并通过制备性LC-MS纯化，得到实施例178。MS实测值：(M+H)⁺＝440。

实施例179

(R)-N-(2-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-1-环己基-2-氧代乙基)-4-甲基戊酰胺

实施例179按关于制备实施例178所描述的类似方式，以4-甲基戊酸代替苯甲酸来制备。MS实测值：(M+H)⁺＝434。

实施例180

N-(1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-1-氧代戊-2-基)苯甲酰胺

在反应管中添加DMF(0.75毫升)中的HOBt(13毫克)、苯甲酸(9毫克)及EDC(18毫克)，然后在室温搅拌15分钟。将2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)戊-1-酮盐酸盐(20毫克)在DIEA(65微升)与DMF(185微升)中的溶液添加至反应管中，并使所得到的混合物在室温振荡过夜。在此段时间后，将所得到的溶液以MeOH稀释，并通过制备性LC-MS纯化，得到实施例180。MS实测值：(M+H)⁺＝400。

实施例181至186

如表5中所描述的实施例181至186按关于制备实施例180所描述的类似方式来制备。在实施例181至186的合成中，代替实施例180中所使用的苯甲酸而使用制备所列产物所需要的适当酸。″MS″栏中的数据表示MS实验中观察到的(M+H)⁺离子的数值。

表5

实施例187

N-(1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-4-甲基-1-氧代戊-2-基)苯甲酰胺

在反应管中添加DMF(0.75毫升)中的HOBt(13毫克)、苯甲酸(9毫克)及EDC(18毫克)，然后搅拌15分钟。在此段时间后，将2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-4-甲基戊-1-酮盐酸盐(21毫克)在DIEA(65微升)与DMF(185微升)中的溶液添加至反应管中。使反应混合物在室温振荡过夜后，将所得到的溶液以MeOH稀释，并通过制备性LC-MS纯化，得到实施例187。MS实测值：(M+H)⁺＝414。

实施例188至192

如表6中所描述的实施例188至192按关于制备实施例187所描述的类似方式来制备。在实施例188至192的合成中，代替实施例187中所使用的苯甲酸而使用制备所列产物所需要的适当酸。″MS″栏中的数据表示MS实验中观察到的(M+H)⁺离子的数值。

表6

实施例193

实施例193按关于制备实施例187所描述的类似方式来制备。在实施例193的合成中，代替实施例187中所使用的苯甲酸而使用制备产物所需要的适当酸。MS实测值：(M+H)⁺＝428。

实施例194

N-(1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3，3-二甲基-1-氧代丁-2-基)苯甲酰胺

在反应管中添加DMF(0.75毫升)中的HOBt(13毫克)、苯甲酸(9毫克)及EDC(18毫克)，然后搅拌15分钟。在此段时间后，将2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3，3-二甲基丁-1-酮盐酸盐(21毫克)在DIEA(65微升)与DMF(185微升)中的溶液添加至管中，并使反应混合物在室温振荡过夜。在这段期间结束时，将所得到的溶液以MeOH稀释，并通过制备性LC-MS纯化，得到实施例194。MS实测值：(M+H)⁺＝414。

实施例195至199

如表7中所描述的实施例195至199按关于制备实施例194所描述的类似方式来制备。在实施例195至199的合成中，代替实施例194中所使用的苯甲酸而使用制备所列产物所需要的适当酸。″MS″栏中的数据表示MS实验中观察到的(M+H)⁺离子的数值。

表7

实施例200

N-(1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)(苯基)甲磺酰胺

在反应管中添加DCM(0.3毫升)中的苄基磺酰氯(14毫克)、DIEA(50微升)及2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐(20毫克)。使反应混合物在室温振荡过夜。在这段期间结束时，将所得到的溶液以MeOH稀释，并通过制备性LC-MS纯化，得到实施例200。MS实测值：(M+H)⁺＝450。

实施例201

(R)-1-(1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-3-苯基脲

在反应管中添加异氰酸苯酯(12毫克)、(R)-2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐(17毫克)及1，4-二噁烷(0.75毫升)。使反应混合物在室温振荡过夜。在此段时间后，将所得到的溶液以MeOH稀释，并通过制备性LC-MS纯化，得到实施例201。MS实测值：(M+H)⁺＝429。

实施例202至206

如表8中所描述的实施例202至206按关于制备实施例201所描述的类似方式来制备。在实施例202至206的合成中，代替实施例201中所使用的异氰酸酯而使用制备所列产物所需要的适当异氰酸酯。″MS″栏中的数据表示MS实验中观察到的(M+H)⁺离子的数值。

表8

实施例207

实施例207按关于制备实施例201所描述的类似方式来制备。在实施例207的合成中，代替实施例201中所使用的异氰酸酯而使用制备产物所需要的适当异氰酸酯。MS实测值：(M+H)⁺＝380.6。

实施例208

N-(1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)苯甲酰胺

在反应容器中添加DMF(1.5毫升)中的苯甲酰基-DL-缬氨酸(24毫克)、HOBt(16毫克)、DIEA(57微升)、4-(4-氯苯基)哌啶盐酸盐(28毫克)及EDC(23毫克)，然后在室温搅拌16小时。在这段期间结束时，将所得到的溶液以MeOH稀释，并通过制备性LC-MS纯化，得到实施例208。MS实测值：(M+H)⁺＝399。

实施例209

N-(1-(4-(4-氯苯基)-4-羟基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)苯甲酰胺

实施例209按关于制备实施例208所描述的类似方式，唯以4-(4-氯苯基)-4-羟基哌啶代替4-(4-氯苯基)哌啶盐酸盐来制备。MS实测值：(M+H)⁺＝415。

实施例210

N-(1-(4-(4-溴苯基)-4-羟基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)苯甲酰胺

实施例210按关于制备实施例208所描述的类似方式，唯以4-(4-溴苯基)-4-羟基哌啶代替4-(4-氯苯基)哌啶盐酸盐来制备。MS实测值：(M+H)⁺＝460。

实施例211

N-(1-(4-(4-氯苯基)-5，6-二氢吡啶-1(2H)-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)苯甲酰胺

实施例211按关于制备实施例208所描述的类似方式，唯以4-(4-氯苯基)-1，2，3，6-四氢吡啶盐酸盐代替4-(4-氯苯基)哌啶盐酸盐来制备。MS实测值：(M+H)⁺＝398。

实施例212

N-(1-(4-(4-氟苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)苯甲酰胺

实施例212按关于制备实施例208所描述的类似方式，唯以4-(4-氟苯基)哌啶盐酸盐代替4-(4-氯苯基)哌啶盐酸盐来制备，得到标题化合物。MS实测值：(M+H)⁺＝383。

实施例213

1-(4-(4-氯苯基)-4-羟基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸苄酯

实施例213按关于制备实施例208所描述的类似方式，唯以Cbz-DL-缬氨酸与4-(4-氯苯基)-4-羟基哌啶分别代替苯甲酰基-DL-缬氨酸与4-(4-氯苯基)哌啶盐酸盐来制备。MS实测值：(M+H)⁺＝446。

实施例214

(R)-1-(4-(4-氯苯基)-4-羟基哌啶-1-基)-1-氧代丁-2-基氨基甲酸苄酯

实施例214按关于制备实施例208所描述的类似方式，唯以Cbz-D-2-氨基丁酸与4-(4-氯苯基)-4-羟基哌啶分别代替苯甲酰基-DL-缬氨酸与4-(4-氯苯基)哌啶盐酸盐来制备。MS实测值：(M+H)⁺＝431。

实施例215

N-(1-(4-(4-氯苯基)-4-羟基哌啶-1-基)-4-甲基-1-氧代戊-2-基)苯甲酰胺

实施例215按关于制备实施例208所描述的类似方式，唯以苯甲酰基-DL-亮氨酸与4-(4-氯苯基)-4-羟基哌啶分别代替苯甲酰基-DL-缬氨酸与4-(4-氯苯基)哌啶盐酸盐来制备。MS实测值：(M+H)⁺＝430。

实施例216

N-(1-(4-(4-氯苯基)-4-羟基哌啶-1-基)-1-氧代戊-2-基)苯甲酰胺

实施例216按关于制备实施例208所描述的类似方式，唯以苯甲酰基-2-氨基戊酸与4-(4-氯苯基)-4-羟基哌啶分别代替苯甲酰基-DL-缬氨酸与4-(4-氯苯基)哌啶盐酸盐来制备。MS实测值：(M+H)⁺＝415。

实施例217

N-(1-(4-(4-氯苯基)-4-羟基哌啶-1-基)-4-(甲基硫基)-1-氧代丁-2-基)苯甲酰胺

实施例217按关于制备实施例208所描述的类似方式，唯以苯甲酰基-DL-甲硫氨酸与4-(4-氯苯基)-4-羟基哌啶分别代替苯甲酰基-DL-缬氨酸与4-(4-氯苯基)哌啶盐酸盐来制备。MS实测值：(M+H)⁺＝448。

实施例218

1-(4-(4-氯苯基)-4-羟基哌啶-1-基)-1-氧代己-2-基氨基甲酸苄酯

实施例218按关于制备实施例208所描述的类似方式，唯以Cbz-2-氨基己酸与4-(4-氯苯基)-4-羟基哌啶分别代替苯甲酰基-DL-缬氨酸与4-(4-氯苯基)哌啶盐酸盐来制备。MS实测值：(M+H)⁺＝460。

实施例219

(R)-2-(4-(4-氯苯基)-4-羟基哌啶-1-基)-1-环己基-2-氧代乙基氨基甲酸苄酯

实施例219按关于制备实施例208所描述的类似方式，唯以Cbz-D-环己基甘氨酸与4-(4-氯苯基)-4-羟基哌啶分别代替苯甲酰基-DL-缬氨酸与4-(4-氯苯基)哌啶盐酸盐来制备。MS实测值：(M+H)⁺＝486。

实施例220

N-(1-(4-(4-氟苯基)-4-羟基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)苯甲酰胺

实施例220按关于制备实施例208所描述的类似方式，唯以4-(4-氟苯基)-4-羟基哌啶代替4-(4-氯苯基)哌啶盐酸盐来制备，得到标题化合物。MS实测值：(M+H)⁺＝399。

实施例221

3-氯-N-(1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-1-氧代丙-2-基)苯甲酰胺

步骤1：丙氨酸酯衍生的树脂

在250毫升肽容器中添加以4-甲酰基-3-甲氧基苯基连结基进行官能化的聚苯乙烯树脂(1.1毫摩尔/克，4.7克)与DMF(50毫升)。在此混悬液中添加DIEA(4.5毫升)、DL-丙氨酸乙酯盐酸盐(2.0克)、乙酸(4.3毫升)及三乙酰氧基硼氢化钠(2.2克)。在室温振荡16小时后，过滤树脂，并以下述溶剂洗涤：DMF(1×50毫升)；6∶3∶1THF/水/乙酸(2×50毫升)；DMF(2×50毫升)；THF(2×50毫升)；及DCM(2×50毫升)，得到丙氨酸酯衍生的树脂。

步骤2：一组微罐体

将步骤1的丙氨酸酯衍生的树脂装填至Irori微罐体(microkan)(每微罐体20毫克)中。使一组60个微罐体混悬在DMF(200毫升)中，然后添加3-氯苯甲酸(3.95克)、HOBt(3.41克)、DIEA(8.8毫升)及N，N’-二异丙基碳二亚胺(3.95毫升)。使所得到的混合物在室温振荡16小时。在此段时间后，过滤除去溶剂，并将微罐体以DMF(4×200毫升)、THF(4×200毫升)及DCM(4×200毫升)洗涤，得到一组微罐体。

步骤3：2-(3-氯苯甲酰氨基)丙酸树脂

将步骤2的一组180个微罐体添加至THF(150毫升)、40％氢氧化四正丁基铵/水(50毫升)及甲醇(30毫升)的混合物中。将所得到的混合物在40℃振荡40小时，然后使其冷却至室温。一旦达到所要求的温度，立即过滤除去溶剂，并将微罐体以8∶1∶1THF/水/乙酸(2×200毫升)、THF(3×200毫升)及DCM(3×200毫升)洗涤。反应混合物经由以下方法来检查以确定反应是否完成：以40％v/v TFA/DCM对2-(3-氯苯甲酰氨基)丙酸乙酯树脂的小样进行处理。该处理显示反应完成，且已得到所要的产物，即2-(3-氯苯甲酰氨基)丙酸树脂。MS实测值：(M+Na)⁺＝250。

步骤4：含有树脂结合的3-氯-N-(1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-1-氧代丙-2-基)苯甲酰胺的微罐体

使步骤3的一组30个微罐体混悬在DMF(80毫升)中，并以HOBt(0.57克)、DIEA(1.57毫升)、N，N’-二异丙基碳二亚胺(0.66毫升)及4-(4-氯苯基)哌啶盐酸盐(1.39克)进行处理。使所得到的微罐体在室温振荡16小时。在此段时间后，过滤分离微罐体，并以DMF(4×100毫升)、THF(3×100毫升)及DCM(3×100毫升)洗涤，得到含有树脂结合的3-氯-N-(1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-1-氧代丙-2-基)苯甲酰胺的微罐体。

步骤5：实施例221

将含有步骤4中所制备的树脂结合的3-氯-N-(1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-1-氧代丙-2-基)苯甲酰胺的微罐体打开，并使松散的树脂混悬在30％v/vTFA/DCM中。将所得到的混悬液在室温搅拌1小时。在这段期间完成时，过滤除去树脂，并使滤液在真空中浓缩，得到油状物。使油状物溶于甲醇(2毫升)中，并通过制备性LC-MS纯化，得到实施例221。MS实测值：(M+Na)⁺＝427。

实施例222

3-氯-N-(1-(4-(4-氯苯基)-5，6-二氢吡啶-1(2H)-基)-1-氧代丙-2-基)苯甲酰胺

实施例222按关于制备实施例221所描述的类似方式，唯在步骤4中以4-(4-氯苯基)-4-羟基哌啶代替4-(4-氯苯基)哌啶盐酸盐来制备。在步骤5期间经由消除而得到实施例222。MS实测值：(M+H)⁺＝405。

实施例223

4-氯-N-(1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-1-氧代丁-2-基)苯甲酰胺

实施例223按关于制备实施例221所描述的类似方式，唯在步骤1中以2-氨基丁酸甲酯盐酸盐代替DL-丙氨酸乙酯盐酸盐，并在步骤2中以4-氯苯甲酸代替3-氯苯甲酸来制备。MS实测值：(M+H)⁺＝419。

实施例224

4-氯-N-(1-(4-(4-氯苯基)-5，6-二氢吡啶-1(2H)-基)-1-氧代丁-2-基)苯甲酰胺

实施例224按关于制备实施例221所描述的类似方式，唯在步骤1中以2-氨基丁酸甲酯盐酸盐代替DL-丙氨酸乙酯盐酸盐，在步骤2中以4-氯苯甲酸代替3-氯苯甲酸，及在步骤4中以4-(4-氯苯基)-4-羟基哌啶代替4-(4-氯苯基)哌啶盐酸盐来制备。在步骤5期间通过消除而得到实施例224。MS实测值：(M+H)⁺＝417。

实施例225

3-氯-N-(1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-1-氧代丁-2-基)苯甲酰胺

实施例225按关于制备实施例221所描述的类似方式，唯在步骤1中以2-氨基丁酸甲酯盐酸盐代替DL-丙氨酸乙酯盐酸盐来制备。MS实测值：(M+H)⁺＝419。

实施例226

N-(1-(4-(4-氯苯基)-4-羟基哌啶-1-基)-1-氧代丁-2-烯-2-基)苯甲酰胺

在反应容器中添加N-苯甲酰基-L-苏氨酸(56毫克)、HOBt(42毫克)、DIEA(130微升)、4-(4-氯苯基)-4-羟基哌啶(66毫克)、EDC(60毫克)、DMF(1毫升)及1，2-二氯乙烷(1毫升)。将反应混合物在室温搅拌16小时，然后以甲醇(0.5毫升)稀释。在稀释完成时，使反应混合物通过制备性LC-MS纯化，得到实施例226。MS实测值：(M+H)⁺＝399。

实施例227至252

如表9中所描述的实施例227至252按关于制备实施例150所描述的类似方式，以(2R，3S)-2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基戊-1-酮盐酸盐代替(2R)-2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基戊-1-酮盐酸盐来制备。在实施例227至252的合成中，代替实施例150中所使用的苯甲酸而使用制备所列产物所需要的适当酸。

表9

实施例253至271

如表10中所描述的实施例253至271按关于制备实施例75所描述的类似方式，以(R)-2-氨基-1-(4-(4-氟苯基)哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐代替(R)-2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐来制备。在实施例253至271的合成中，代替实施例75中所使用的苯甲酸而使用制备所列产物所需要的适当酸。

表10

实施例272至275

如表11中所描述的实施例272至275按关于制备实施例201所描述的类似方式来制备。在实施例272至275的合成中，代替实施例201中所使用的异氰酸酯而使用制备所列产物所需要的适当氯甲酸酯。″MS″栏中的数据表示MS实验中观察到的(M+H)⁺离子的数值。

表11

实施例276

(R)-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-2-(1-甲基-3-苯基-1H-1，2，4-三唑-5-基氨基)丁-1-酮

步骤1：(R)-N-(1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基硫代氨甲酰基)苯甲酰胺

在(R)-2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐(250毫克，0.75毫摩尔)在DCM(2毫升)中的溶液内添加DIEA(175微升，1毫摩尔)，接着逐滴添加异硫氰酸苯甲酰酯(106微升，0.78毫摩尔)。将反应混合物在室温搅拌2小时，以1N HCl水溶液酸化至pH 3，然后以Et₂O(3×10毫升)萃取。合并萃取液，以饱和NaHCO₃水溶液(1×10毫升)与饱和NaCl水溶液(1×10毫升)相继洗涤，干燥(MgSO₄)，并除去溶剂，得到(R)-N-(1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基硫代氨甲酰基)苯甲酰胺(m/z，458，M+1)，为HPLC纯度大于90％的油状物(300毫克)。

步骤2：(R，Z)-1-苯甲酰基-3-(1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-2-甲基-异硫脲

在(R)-N-(1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基硫代氨甲酰基)苯甲酰胺(300毫克，粗品)在CH₃CN(2毫升)中的溶液内添加K₂CO₃(275毫克，2毫摩尔)，接着添加MeI(75微升，2毫摩尔)。将反应混合物在室温搅拌4小时，以Et₂O(10毫升)稀释，并经过硅藻土填充柱过滤固体。使滤液在真空中浓缩，得到(R，Z)-1-苯甲酰基-3-(1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-2-甲基-异硫脲(300毫克，m/z 473，M+1)，为泡沫状物，将其用于后续步骤中，无需纯化。

步骤3：(R)-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-2-(3-苯基-1H-1，2，4-三唑-5-基氨基)丁-1-酮

使(R，Z)-1-苯甲酰基-3-(1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-2-甲基-异硫脲(47毫克，0.1毫摩尔)溶于THF(0.5毫升)中，并以无水肼(10微升，0.3毫摩尔)处理。将反应混合物在室温搅拌过夜。在此段时间后，在真空中除去THF，并使所得到的残留物溶于甲醇中，然后通过制备性HPLC纯化，得到(R)-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-2-(3-苯基-1H-1，2，4-三唑-5-基氨基)丁-1-酮(20毫克，45％)。MS实测值：438(M+H)。

步骤4：(R)-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-2-(1-甲基-3-苯基-1H-1，2，4-三唑-5-基氨基)丁-1-酮

使(R)-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-2-(3-苯基-1H-1，2，4-三唑-5-基氨基)丁-1-酮(40毫克，0.09毫摩尔)溶于THF(0.5毫升)中，然后以MeNHNH₂(10微升，过量)处理。将反应混合物在室温搅拌过夜。在此段时间后，在真空中除去THF，并使残留物溶于MeOH中，接着通过制备性HPLC纯化，得到(R)-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-2-(1-甲基-3-苯基-1H-1，2，4-三唑-5-基氨基)丁-1-酮(18毫克，47％)，为N₁-CH₃/N₂-CH₃异构体的90/10混合物。MS实测值：452(M+H)。

实施例277

在2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐在乙醇中的溶液内添加TEA(4当量)与4-氯-6-(三氟甲基)喹唑啉(1.1当量，参见WO05/021500)。在添加完成时，将反应混合物在100℃加热30分钟。在此段时间后，使反应混合物浓缩，并在硅胶(25％EtOAc/己烷至50％EtOAc/己烷)上直接纯化，以50％收率得到实施例280。MS实测值：491.4，(M+H)。

实施例278

1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-2-(5-苯基-2H-四唑-2-基)丁-1-酮

步骤1：2-溴-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮

使2-溴-3-甲基丁酸(14)(400毫克，2.2毫摩尔)、4-(4-氯苯基)-哌啶盐酸盐(500毫克，2.2毫摩尔)、HOBt(300毫克，2.2毫摩尔)及EDCI(425毫克，2.2毫摩尔)的混合物混悬在DMF(10毫升)中。添加DIEA(1.4毫升，8毫摩尔)，并将反应混合物搅拌过夜。在此段时间后，将反应混合物以Et₂O(100毫升)稀释，及以H₂O(2×40毫升)；1N HCl水溶液(2×20毫升)；饱和NaHCO₃水溶液(1×20毫升)及饱和NaCl水溶液(1×20毫升)相继洗涤。使Et₂O层干燥(MgSO₄)，并除去溶剂，得到2-溴-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮(600毫克，85％)，为不纯的油状物，使用其而无需纯化。MS实测值：360(M+H)。

步骤2：1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-2-(5-苯基-2H-四唑-2-基)丁-1-酮

将2-溴-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮(40毫克，0.11毫摩尔)、K₂CO₃(50毫克，0.36毫摩尔)及5-苯基-2H-四唑(15毫克，0.1毫摩尔)在CH₃CN(1毫升)中的混合物在微波反应器中在170℃加热30分钟。在此段时间后，使反应混合物经过硅藻土填充柱过滤，以MeOH稀释，并通过制备性HPLC直接纯化，得到1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-2-(5-苯基-2H-四唑-2-基)丁-1-酮(9毫克，21％)，为固体。MS实测值：424(M+H)。

实施例279

1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-2-(5-苯基-1，3，4-噁二唑-2-基氨基)丁-1-酮

步骤1：2-(2-苯甲酰基肼羧酰氨基)-3-甲基丁酸乙酯

在苯甲酰肼(489毫克，5.0毫摩尔)在DCM(10毫升)中的溶液内逐滴添加2-氰氧基-3-甲基丁酸乙酯(0.856克，5.0毫摩尔)在DCM(5毫升)中的溶液。将反应混合物在室温搅拌3小时，并在真空中除去溶剂，得到2-(2-苯甲酰基肼羧酰氨基)-3-甲基丁酸乙酯，通过LCMS判断，纯度大于90％。MS实测值：308(M+H)。

步骤2：3-甲基-2-(5-苯基-1，3，4-噁二唑-2-基氨基)丁酸乙酯

在粗制2-(2-苯甲酰基肼羧酰氨基)-3-甲基丁酸乙酯(约为5毫摩尔)在DCE(10毫升)中的溶液内添加POCl₃(1.5克，10毫摩尔)。在添加完成时，将反应混合物在75-80℃加热过夜。在此段时间后，在真空中除去多余的溶剂与POCl₃。使所得到的残留物溶于EtOAc(75毫升)中，并以饱和NaHCO₃水溶液(2×25毫升)与饱和NaCl水溶液(25毫升)相继洗涤，且以MgSO₄干燥。在真空中除去溶剂，得到3-甲基-2-(5-苯基-1，3，4-噁二唑-2-基氨基)丁酸乙酯，通过LCMS，呈大于90％纯度；m/z(290，M+1)。

步骤3：3-甲基-2-(5-苯基-1，3，4-噁二唑-2-基氨基)丁酸

使粗制3-甲基-2-(5-苯基-1，3，4-噁二唑-2-基氨基)丁酸乙酯(约为5毫摩尔)溶于THF(10毫升)与MeOH(2毫升)的混合物中，然后以1N NaOH水溶液(6毫升)逐滴处理(放热)。将反应混合物搅拌1小时，以H₂O(50毫升)稀释，接着以Et₂O(1×50毫升)萃取。以1N HCl水溶液使水层酸化至pH 3，然后以EtOAc(3×35毫升)萃取。合并EtOAc萃取液，以饱和NaCl水溶液洗涤，干燥(MgSO₄)，并在真空中除去溶剂，以50-75％收率(历经3个步骤)得到3-甲基-2-(5-苯基-1，3，4-噁二唑-2-基氨基)丁酸，通过LCMS判断，纯度＞90％。MS实测值：262(M+H)。

步骤4：1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-2-(5-苯基-1，3，4-噁二唑-2-基氨基)丁-1-酮

将3-甲基-2-(5-苯基-1，3，4-噁二唑-2-基氨基)丁酸(80毫克，0.3毫摩尔)、EDCI(65毫克，0.33毫摩尔)、4-(4-氯苯基)-哌啶盐酸盐(78毫克，0.33毫摩尔)及HOBt(40毫克，0.3毫摩尔)合并，并混悬在DMF(2毫升)中。添加二异丙基乙胺(210微升，1.2毫摩尔)，并将反应混合物在室温搅拌过夜。在此段时间后，将甲醇(2毫升)添加至反应混合物中，并使混合物通过制备性HPLC直接纯化，得到1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-2-(5-苯基-1，3，4-噁二唑-2-基氨基)丁-1-酮(60毫克，30％)。MS实测值：439(M+H)。

实施例280至287

如表12中所描述的实施例280至287按关于制备实施例279所描述的类似方式来制备。典型的收率范围为20-55％。

表12

实施例288

N-(1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-烯-2-基)苯甲酰胺

步骤1：2-苯甲酰氨基-3-甲基丁-2-烯酸

在3-氟-DL-缬氨酸(165毫克，1毫摩尔)在乙酸乙酯(10毫升)中的混悬液内添加NaHCO₃(饱和水溶液，5毫升)，接着添加苯甲酰氯(1毫摩尔)。将溶液搅拌4小时，以1N HCl酸化，然后萃取到乙酸乙酯中。使有机萃取液以MgSO₄干燥，过滤，然后浓缩，得到粗制2-苯甲酰氨基-3-甲基丁-2-烯酸。

步骤2：N-(1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-烯-2-基)苯甲酰胺

按关于制备实施例75所描述的类似方式，使得自步骤1的粗制2-苯甲酰氨基-3-甲基丁-2-烯酸与4-(4-氯苯基)哌啶盐酸盐偶联，得到实施例288即N-(1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-烯-2-基)苯甲酰胺。MS实测值：397(M+H)。

实施例289

(R)-(3-(1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)苯基)甲磺酸钠

步骤1：(R)-3-(氯甲基)-N-(1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)苯甲酰胺

在(R)-2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐(30.5毫克，0.092毫摩尔)在DCM(1毫升)中的冷却至0℃的溶液内添加DIEA(17.4微升，0.1毫摩尔)，接着添加3-氯甲基苯甲酰氯(14.2微升，0.1毫摩尔)。在添加完成时，使反应混合物缓慢温热至室温，将其搅拌过夜。在此段时间后，以二氯甲烷稀释溶液，并通过添加NaHCO₃水溶液使反应淬灭。分离各层，并使有机层以Na₂SO₄干燥，过滤，然后浓缩，得到残留物。使残留物经由SiO₂色谱纯化，得到(R)-3-(氯甲基)-N-(1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)苯甲酰胺，为洁净玻璃状固体(23.7毫克，58％收率)。MS实测值：447.3(M+)，449.3(M+2)。

步骤2：(R)-(3-(1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)苯基)甲磺酸钠

在(R)-3-(氯甲基)-N-(1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)苯甲酰胺(23.7毫克，0.053毫摩尔)中添加Na₂SO₃(34毫克，0.27毫摩尔)、水(0.25毫升)及乙醇(0.25毫升)。将所得到的溶液在100℃加热3小时。在此段时间后，使溶液冷却至室温，然后浓缩成残留物。将残留物在水(1-2毫升)中加载至预先洗涤的C18筒(cartridge)上，然后使柱以水，接着以20％乙腈/水洗脱，得到实施例289即(R)-(3-(1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)苯基)甲磺酸钠(19.2毫克，70％收率)，为白色固体。MS实测值：493.3(M+)，495.3(M+2)。

实施例290

(R)-N-(1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-2-(1H-吡唑-1-基)乙酰胺

步骤1：(R)-2-氯-N-(1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)乙酰胺

在(R)-2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐(340毫克，1.03毫摩尔)在DCM(10毫升)中的冷却至0℃的溶液内添加TEA(144微升，1.03毫摩尔)，接着添加氯乙酰氯(82微升，1.03毫摩尔)。在添加完成时，使反应混合物在0℃保持4小时。在此段时间后，添加氯乙酰氯的额外等分液(60微升)，接着添加额外的TEA(150微升)。将所得到的溶液以二氯甲烷(40毫升)稀释，并通过添加NaHCO₃水溶液(25毫升)使反应淬灭。分离各层。使有机层以Na₂SO₄干燥，过滤，然后浓缩，得到残留物。使残留物经由SiO₂色谱(20％至50％EtOAc/庚烷)纯化，得到(R)-2-氯-N-(1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)乙酰胺，为洁净玻璃状固体(349毫克，92％收率)。MS实测值：371.3(M+)，373.3(M+2)。

步骤2：(R)-N-(1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-2-(1H-吡唑-1-基)乙酰胺

在密封瓶中连续添加(R)-2-氯-N-(1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)乙酰胺(31.4毫克，0.085毫摩尔)、吡唑(11.5毫克，0.17毫摩尔)、K₂CO₃(35.2毫克，0.26毫摩尔)及乙腈(0.4毫升)。然后将反应混合物在75℃加热36小时，冷却至室温，并过滤固体。使滤液浓缩，并通过制备性HPLC纯化，得到实施例290即(R)-N-(1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-2-(1H-吡唑-1-基)乙酰胺(32毫克，94％收率)，为白色固体。MS实测值：403.3(M+H)。

实施例291

实施例291按Sharpless与Demko(J.Org.Chem.2001，66，7945-7950)所描述的类似方式，从实施例122来制备。在5毫升微波反应管中添加实施例122(115毫克，0.27毫摩尔，1.0当量)、溴化锌(92毫克，0.41毫摩尔，1.5当量)、叠氮化钠(53毫克，0.81毫摩尔，3.0当量)、水(2毫升)及异丙醇(1毫升)。将管密封，然后在175℃，经由微波加热5小时。在此段时间后，使反应混合物在二氯甲烷(5毫升)与1N HCl水溶液(5毫升)之间分配，分离各层，并将有机层以1N HCl(2次)、水，接着以盐水洗涤。以二氯甲烷萃取合并的水相。使合并的有机相以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩，得到残留物。使残留物在硅胶上纯化，以5％-10％-15％-20％甲醇/二氯甲烷洗脱，得到实施例291(33毫克)，为无色玻璃状物。MS(APCI)实测值：467.2(M+H)⁺。

实施例292

实施例292按关于制备实施例291所描述的类似方式，从实施例123开始来制备。MS实测值：467.3(M+H)⁺。

实施例293

在20毫升闪烁瓶中添加实施例291(47毫克，0.10毫摩尔，1.0当量)、四氟化硼三甲基氧鎓(trimethyloxonium fluoroborate)(20毫克，0.13毫摩尔，1.3当量)、质子海绵(proton sponge)(60毫克，0.25毫摩尔，2.5当量)、

分子筛(200毫克)及DCM(2毫升)。将瓶充填氩气，并密封。将混合物在室温搅拌过夜。在此段时间后，以乙酸乙酯(50毫升)稀释反应混合物，以水(20毫升)洗涤3次，接着以盐水洗涤3次。使有机相以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩，得到残留物。使残留物在硅胶上纯化，以30％-50％乙酸乙酯/己烷-100％乙酸乙酯洗脱，得到粗产物(38毫克)，为被质子海绵污染的无色玻璃状物。使粗产物通过制备性HPLC纯化，其使用Phenomenex Luna 5μ，C18(2)，250×21.2毫米柱，条件如下：100％水(5分钟)，然后是水中的0％至90％乙腈(0.05％TFA在各溶剂中)，梯度变化历经15分钟。对含有主要峰的洗脱馏分进行冷冻干燥，得到实施例293(11毫克)，为无色粉末。MS(ESI)实测值：481.3(M+H)⁺。

实施例294

在5毫升微波反应管中添加实施例130(298毫克，0.62毫摩尔，1.0当量)、3-氰基苯基硼酸(101毫克，0.69毫摩尔，1.1当量)、2M磷酸钾水溶液(0.93毫升，1.86毫摩尔，3.0当量)及DMF(3毫升)。将所得到的溶液在真空下脱气，然后以氩气回充填。添加四(三苯基膦)钯(0)(50毫克)，并将所得到的混合物按上述再次脱气。将管密封，并将反应混合物经由微波在150℃加热30分钟。在此段时间后，使反应混合物冷却至室温。过滤反应混合物，以除去一些固体，并将滤饼以乙酸乙酯洗涤。在真空中浓缩合并的滤液，得到残留物。使残留物在硅胶上纯化，以25％-50％乙酸乙酯/己烷洗脱，得到实施例294(202毫克)，为无色泡沫状物。MS(ESI)实测值：500.3(M+H)⁺。

实施例295

实施例295按关于制备实施例294所描述的类似方式，使用4-氰基苯基硼酸来制备。MS实测值：500.3(M+H)⁺。

实施例296

实施例296按关于制备实施例294所描述的类似方式，使用2-氰基苯基硼酸来制备。MS实测值：500.3(M+H)⁺。

实施例297

实施例297按关于制备实施例294所描述的类似方式，使用3-氰基苯基硼酸与(R)-2-溴-N-(1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)苯甲酰胺制备。MS实测值：500.4(M+H)⁺。

实施例298

实施例298按关于制备实施例291所描述的类似方式，使用实施例296来制备。MS实测值：543(M+H)。

实施例299

实施例299被分离出来，其为实施例296转化成实施例298的副产物。MS实测值：518(M+H)。

实施例300

实施例300按关于制备实施例291所描述的类似方式，使用实施例295来制备。MS实测值：543.4(M+H)。

实施例301

实施例301按关于制备实施例291所描述的类似方式，使用实施例294来制备。MS实测值：543.5(M+H)。

实施例302

实施例302按关于制备实施例291所描述的类似方式，使用实施例297来制备。MS实测值：543.5(M+H)。

实施例303

步骤1：乙酸(R)-3-((1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨甲酰基)苯酯

按关于制备实施例75所描述的类似方式，使(R)-2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐与3-乙酰氧基苯甲酸偶联，得到乙酸(R)-3-((1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨甲酰基)苯酯(115毫克，50％收率)。MS实测值：457.3(M+)。

步骤2：实施例303

在乙酸(R)-3-((1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨甲酰基)苯酯(115毫克，0.25毫摩尔)在甲醇(2毫升)中的溶液内添加甲醇钠在甲醇中的溶液(0.5M，0.5毫升)。将混合物在室温搅拌一小时。在此段时间后，使混合物浓缩，然后以1N HCl中和至pH＝5。通过过滤来收集所得到的沉淀固体，以水洗涤，然后在真空下干燥，得到实施例303(90毫克，86.7％收率)，为灰白色固体。MS实测值：415.2(M+H)。

实施例304

实施例304按关于制备实施例303所描述的类似方式，使用2-乙酰氧基苯甲酸来制备。MS实测值：415.2(M+H)。

实施例305

(R)-3-氨基-N-(1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)苯甲酰胺的三氟乙酸盐

使实施例128(120毫克，0.27毫摩尔)溶于甲醇(5毫升)与乙酸乙酯(5毫升)的混合物中。添加5％Pd/碳(8毫克)。对反应系统进行脱气然后装填氢气，如此三次，然后将其在氢气气囊中在室温搅拌一小时。过滤混合物，并以乙酸乙酯洗涤。浓缩合并的滤液，并通过制备性HPLC纯化。使含有产物的馏分浓缩，然后冻干，得到实施例305(89毫克，62％)。MS实测值：414.2(M+H)。

实施例306

实施例306按关于制备实施例305所描述的类似方式，使用实施例129来制备。MS实测值：414.2(M+H)。

实施例307

将氰酸钠(2毫克，0.031毫摩尔)添加至实施例305(10毫克，0.024毫摩尔)在乙酸(1毫升)中的溶液内。将混合物在室温搅拌两小时，然后浓缩，得到残留物。使残留物通过制备性HPLC纯化。使含有产物的馏分浓缩，然后冻干，得到实施例307，为黄色固体(10毫克，91.2％收率)。MS实测值：457.3(M+H)。

实施例308

实施例308按关于制备实施例307所描述的类似方式，使用实施例306来制备。MS实测值：457.3(M+H)。

实施例309

在实施例305(15毫克，0.036毫摩尔)在DCM(2毫升)中的溶液内添加异丁酰氯(4.2微升，0.04毫摩尔)与吡啶(4.5微升，004毫摩尔)。将反应混合物在室温搅拌30分钟，然后浓缩，得到残留物。使残留物通过制备性HPLC纯化。使含有产物的馏分浓缩，然后冻干，得到实施例309，为黄色粉末(10毫克，57.4％)。MS实测值：484.3(M+H)。

实施例310

将(R)-2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐(40毫克，0.136毫摩尔，1当量)与邻苯二甲酸酐(20毫克，0.136毫摩尔，1当量)在3毫升氯仿中的溶液在25℃搅拌20小时。在此段时间后，对反应混合物进行浓缩，并通过制备性HPLC纯化，得到实施例310，收率＝55％。MS实测值：443.30(M+H)⁺。

实施例311

实施例311按关于制备实施例310所描述的类似方式来制备。MS实测值：477.3(M+H)⁺。

实施例312

实施例312按关于制备实施例310所描述的类似方式来制备。MS实测值：493.2(M+H)

实施例313

步骤1：2-((叔丁氧羰基)氨基甲基)苯甲酸甲酯

使2-(氨基甲基)苯甲酸甲酯盐酸盐(500毫克，2.48毫摩尔，1当量)在25℃及氮气下溶于10毫升THF中。添加三乙胺(0.35毫升，4.96毫摩尔，2当量)，接着添加BOC酐(BOC anhydride)(541毫克，2.48毫摩尔，1当量)。将反应混合物搅拌20小时。在此段时间后，添加饱和NH₄Cl(10毫升)，并以二氯甲烷萃取产物3次。合并有机萃取液，以硫酸钠干燥，然后浓缩，得到2-((叔丁氧羰基)氨基甲基)苯甲酸甲酯(650毫克)，为淡颜色油状物。

步骤2：2-((叔丁氧羰基)氨基甲基)苯甲酸

使2-((叔丁氧羰基)氨基甲基)苯甲酸甲酯(600毫克，1.99毫摩尔，1当量)在25℃溶于5毫升THF中。添加1N NaOH(5.96毫升，5.96毫摩尔，3当量)，并将反应混合物搅拌20小时。在此段时间后，添加1.0N HCl(5.86毫升)，并以氯仿萃取产物3次。合并有机萃取液，以硫酸钠干燥，然后浓缩，得到2-((叔丁氧羰基)氨基甲基)苯甲酸(560毫克，98％收率)。MS(M+H-BOC)+实测值：152.3。

步骤3：实施例313

实施例313按关于制备实施例75所描述的类似方式来制备。MS实测值：429.3(M-Boc)

实施例314

实施例314按关于制备实施例313所描述的类似方式，使用3-(氨基甲基)苯甲酸甲酯盐酸盐来制备。MS实测值：528.4(M+H)。

实施例315

实施例315按关于制备实施例313步骤1与2所描述的类似方式，使用3-(哌嗪-1-基)苯甲酸来制备。MS实测值：583.5(M+H)。

实施例316

使实施例315利用二氯甲烷中的TFA或二噁烷中的HCl来脱保护，在制备性HPLC后，得到实施例316。MS实测值：483.4(M+H)。

实施例317

实施例317按关于制备实施例316所描述的类似方式，使用2-(哌嗪-1-基)苯甲酸来制备。MS实测值：483.4(M+H)。

实施例318

实施例318按关于制备实施例314步骤1与2所描述的类似方式，使用3-(哌啶-4-基)苯甲酸来制备。MS实测值：582.5(M+H)。

实施例319

使实施例318利用二氯甲烷中的TFA或二噁烷中的HCl来脱保护，在制备性HPLC后，得到实施例319。MS实测值：482.1(M+H)。

实施例320

实施例320按关于制备实施例75所描述的类似方式，使用反式-1，4-环己烷二羧酸单甲酯来制备。MS实测值：463.4(M+H)。

实施例321

实施例321按关于制备实施例290所描述的类似方式，使用3-苯基吡唑来制备。MS实测值：479.4(M+)。

实施例322

实施例322按关于制备实施例290所描述的类似方式，使用4-甲氧基吲哚来制备。MS实测值：482.3(M+)。

实施例323

在(R)-2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐(59毫克，0.195毫摩尔)在THF(2毫升)中的溶液内添加1，3，4-噻二唑-2-基氨基甲酸苯酯(45毫克，0.2毫摩尔)与DIPEA(35微升，0.2毫摩尔)，将混合物在50℃搅拌过夜，然后浓缩，得到残留物。使残留物通过制备性HPLC纯化。使含有产物的馏分浓缩，然后冻干，得到实施例323，为白色粉末(52毫克，55％)。MS实测值：422.3(M+H)。

实施例324

在实施例317(15毫克，0.025毫摩尔)在吡啶(2毫升)中的溶液内添加乙酸酐(7微升，0.075毫摩尔)，并将反应混合物搅拌过夜。在此段时间后，使混合物通过制备性HPLC纯化，并经由对NaOH中和过的产物馏分进行萃取而分离出产物，得到实施例324(17毫克)，为无色膜状物。MS实测值：525.5(M+)。

实施例325

实施例325按关于制备实施例75所描述的类似方式，使用3-苯甲酰基苯甲酸来制备。MS实测值：503.2(M+H)。

实施例326

实施例326经由使实施例325(50毫克，0.1毫摩尔)在甲醇(3毫升)中的溶液与NaBH₄(4毫克，0.1毫摩尔)反应24小时来制备。对水溶液进行处理，接着经由硅胶纯化，得到实施例326(40毫克，80％收率)，为灰白色固体。MS实测值：505.3(M+H)。

实施例327

N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)苯甲酰胺

步骤1：(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐

(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐按制备C中所描述的类似方式，唯使用(S)-4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基哌啶-4-醇(WO 04/043965)代替4(4-氯苯基)哌啶来制备。

步骤2：N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)苯甲酰胺

实施例327按实施例75中所描述的类似方式，从(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐与苯甲酸来制备。

实施例328

实施例328按关于制备实施例75所描述的类似方式，使用(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐与喹啉-5-羧酸来制备。MS实测值：443.3(M+)。

实施例329

实施例329按关于制备实施例328所描述的类似方式，唯使用4-氯苯甲酸代替苯甲酸来制备。MS实测值：477.2(M+)。

实施例330

(R)-N-(1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-2’-硝基联苯-3-羧酰胺

步骤1：(R)-3-(1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)苯基硼酸

(R)-3-(1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)苯基硼酸按实施例75的类似方式，使用3-羧基苯基硼酸来制备。

步骤2：(R)-N-(1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-2’-硝基联苯-3-羧酰胺

将(R)-3-(1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)苯基硼酸(100毫克，2.26毫摩尔)、1-溴-2-硝基苯(46毫克2.26毫摩尔)、Na₂CO₃(72毫克，6.7毫摩尔)及Pd(Ph₃P)₄(13毫克)在甲苯(5毫升)、水(3毫升)及乙醇(3毫升)中的溶液在100℃加热30分钟。在此段时间后，使反应混合物冷却，过滤，然后浓缩。添加水，并将所得到的溶液以乙酸乙酯萃取。使合并的有机萃取液干燥，然后浓缩，得到粗物质。使粗物质经由柱色谱(25％EtOAc/己烷至50％EtOAc/己烷)纯化，得到实施例330，为灰白色玻璃状物。MS实测值：520.2(M+H)。

实施例331

步骤1：

将3-羧基苯基硼酸(100毫克，0.60毫摩尔)、2-溴苯基脲(130毫克，0.60毫摩尔)、四(三苯基膦)钯(0)(35毫克，0.030毫摩尔)、碳酸钠(192毫克，1.81毫摩尔)、甲苯(5毫升)、水(3毫升)及乙醇(3毫升)在25℃及氮气下混合，然后在微波反应器中在100℃加热30分钟。添加水(5毫升)，接着在真空中除去EtOH。将水层以乙醚洗涤(2×)，并以1N HCl调整pH至3。以乙酸乙酯萃取水层(2×)，并使合并的萃取液以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩，得到2’-脲基联苯-3-羧酸(150毫克，0.58毫摩尔，97％收率)，为黄褐色玻璃状物。MS实测值：(M+H)⁺＝257.29

步骤2：实施例331

实施例331按关于制备实施例75所描述的类似方式，使用2’-脲基联苯-3-羧酸来制备。MS实测值：533.4(M+H)。

实施例332

三氟乙酸盐

在实施例142(30毫克，0.05毫摩尔)在丙酮中的溶液内添加KOH(6毫克0.1毫摩尔)与碘甲烷(10微升，0.16毫摩尔)。将所得到的混合物在室温搅拌48小时。在此段时间后，将EtOAc添加至溶液中，并以水及盐水洗涤所得到的混合物。使有机层干燥，然后浓缩成油状物。使油状物通过制备性HPLC纯化，得到实施例332(18毫克)。MS实测值：453.4(M+H)。

实施例333

实施例333按关于制备实施例323所描述的类似方式来制备，唯使用实施例305代替(R)-2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐。MS实测值：541.3(M⁺)。

实施例334

在实施例305(31毫克，0.075毫摩尔)在DCM(1毫升)中的溶液内添加甲磺酰氯(6微升，0.075毫摩尔)与吡啶(8微升，075毫摩尔)。将反应混合物在室温搅拌30分钟，并添加吡啶与甲磺酰氯的额外等分液(各1当量)。将反应混合物搅拌，然后浓缩，得到残留物。使残留物通过制备性HPLC纯化。使含有产物的馏分浓缩，然后冻干，得到实施例334，为白色固体粉末(21毫克)。MS实测值：492.2(M+)。

实施例335至404

如表13中所描述的实施例335至404按关于制备实施例75所描述的类似方式来制备。在实施例344至404的合成中，代替实施例75中所使用的苯甲酸而使用制备所列产物所需要的适当酸。实施例404、398、399、401及403经由标准水解作用而分别从实施例395、396、397、400及402的相应酯来制备。

表13

实施例405至438

如表14中所描述的实施例405至438按关于制备实施例294所描述的类似方式来制备。在实施例405至438的合成中，代替实施例294中所使用的3-氰基苯基硼酸而使用制备所列产物所需要的硼酸。

表14

实施例439

步骤1：4-(3，4-二氯苯基)-4-羟基哌啶-1-羧酸叔丁酯

将n-BuLi(正丁基锂)(2.5M，2毫升，5.21毫摩尔)在-78℃添加至4-溴-1，2-二氯苯(1.07克，4.74毫摩尔)在无水THF(10毫升)中的溶液内。将混合物搅拌20分钟，然后添加4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(0.95克，4.74毫摩尔)在THF(5毫升)中的溶液。将混合物在-78℃再搅拌1小时。在此段时间后，以NH₄C1(15毫升水溶液)使反应淬灭，以乙酸乙酯(50毫升×3)萃取，以Na₂SO₄干燥，然后浓缩，得到残留物。使残留物通过快速色谱纯化，使用己烷中的10-30％乙酸乙酯作为洗脱剂，得到4-(3，4-二氯苯基)-4-羟基哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.6克，90％纯度，88％收率)，为无色油状物。MS实测值：346.3(M⁺)。

步骤2：4-(3，4-二氯苯基)-1，2，3，6-四氢吡啶盐酸盐

将HCl(浓，1.5毫升)缓慢添加至含有4-(3，4-二氯苯基)-4-羟基哌啶-1-羧酸叔丁酯(200毫克，0.58毫摩尔)的烧瓶中。将混合物在室温搅拌30分钟，加热至90℃，保持5小时，然后冷却过夜。通过过滤来收集所得到的沉淀物，得到4-(3，4-二氯苯基)-1，2，3，6-四氢吡啶盐酸盐(107毫克，70％收率)。MS实测值：215.6(M⁺)。

步骤3：4-(3，4-二氯苯基)哌啶盐酸盐

在对系统进行脱气后，在5％Pd/C(5毫摩尔)存在下，将装有氢气的气囊导入到4-(3，4-二氯苯基)-1，2，3，6-四氢吡啶盐酸盐的溶液(107毫克，0.41毫摩尔)中。将反应混合物在室温搅拌2小时，过滤，以MeOH洗涤，然后浓缩，得到4-(3，4-二氯苯基)哌啶盐酸盐(79毫克，72％收率)，为油状物。MS实测值：266.4(M⁺)。

步骤4：实施例439

实施例439按关于制备实施例75所描述的类似方式通过以下方法来制备：使4-(3，4-二氯苯基)哌啶盐酸盐与N-Boc-D-缬氨酸反应，接着除去Boc基团，及与3-羟基苯甲酸偶联。MS实测值：449.2(M⁺)。

实施例440至458

如表15中所描述的实施例440至458按关于制备实施例439所描述的类似方式来制备。在实施例440至458的合成中，代替实施例439中所使用的苯甲酸而使用制备所列产物所需要的适当酸与哌啶。

表15

实施例459至497

如表16中所描述的实施例459至497按关于制备实施例328所描述的类似方式来制备。在实施例459至497的合成中，代替实施例328中所使用的苯甲酸而使用制备所列产物所需要的适当酸与哌啶。实施例463、496及497经由标准水解作用而分别从实施例462、494及495的相应酯来制备。

表16

实施例498

实施例498按关于制备实施例309所描述的类似方式，唯使用异氰酸异丙酯代替异丁酰氯来制备。MS实测值：499.3(M⁺)。

实施例499

实施例499按关于制备实施例309所描述的类似方式，唯使用三氟甲磺酸酐代替异丁酰氯来制备。MS实测值：545.9(M⁺)。

实施例500

实施例500按关于制备实施例1所描述的类似方式通过以下方法来制备：使甲基磺酰胺与实施例394反应。MS实测值：553.9(M⁺)。

实施例501

步骤1：4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基-1，2，3，6-四氢吡啶

(S)-4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基哌啶-4-醇按关于制备实施例439所描述的类似方式在酸性条件下脱水，得到4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基-1，2，3，6-四氢吡啶。

步骤2：实施例501

按关于制备实施例1所描述的类似方式，使4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基-1，2，3，6-四氢吡啶与外消旋的N-苯甲酰基缬氨酸偶联，得到实施例501。MS实测值：426.3(M⁺)。

实施例502

步骤1：(R)-2-(4-氨基苯基)-N-(1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)乙酰胺

按关于制备实施例305所描述的类似方式，在氢气气囊中对实施例382进行还原，得到上述胺。

步骤2：实施例502

将得自步骤1的胺以三氟甲磺酸酐处理，得到实施例502。MS实测值：560.1(M⁺)。

实施例503

步骤1：4-(4-氯苯基)-2-甲基哌啶-1-羧酸叔丁酯

使N-Boc-4-氯苯基哌啶(6.0克，20.3毫摩尔)在乙醚(50毫升)中的溶液冷却至-78℃，并添加TMEDA(6.73毫升，44.6毫摩尔)，接着添加仲丁基锂(17.4毫升，24.3毫摩尔)，同时保持温度低于-60℃。在搅拌5小时后，添加碘甲烷(1当量)，并使反应混合物温热至室温。一旦达到所要求的温度，立即以水(50毫升)使反应淬灭，并分离各层。以乙醚(50毫升)萃取水层，并使合并的有机萃取液以Na₂SO₄干燥，过滤，然后浓缩成油状物。使油状物通过HPLC纯化，得到4-(4-氯苯基)-2-甲基哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.35克，22％收率)，为油状物。MS实测值：310.3(M+H)。

步骤2：4-(4-氯苯基)-2-甲基哌啶盐酸盐

4-(4-氯苯基)-2-甲基哌啶盐酸盐按关于制备实施例439步骤2所描述的类似方式，从4-(4-氯苯基)-2-甲基哌啶-1-羧酸叔丁酯来制备。

步骤3：实施例503

4-(4-氯苯基)-2-甲基哌啶盐酸盐按关于制备C与实施例75中所概述的3-步骤顺序制备所描述的类似方式(使EDC/HOBt与Boc-D-缬氨酸偶联，以二噁烷中的HCl除去Boc，最后使EDC/HOBt与4-氯苯甲酸偶联)而被转化成实施例503。MS实测值：447.2(M⁺)

实施例504

实施例504按关于制备实施例503所描述的类似方式，使用(2R)-2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)-2-甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐，唯在步骤3中使用3-氯-5-(甲氧羰基)苯甲酸代替4-氯苯甲酸来制备。MS实测值：505.1(M+)。

实施例505

实施例505在标准酯水解条件(1N NaOH，甲醇)下从实施例504来制备。MS实测值：491.2(M⁺)。

实施例506

步骤1：(2R)-2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)-4-羟基-2-甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐

(2R)-2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)-4-羟基-2-甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐按关于制备实施例439所描述的类似方式，从2-甲基-4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯来制备。MS实测值：463.2。

步骤2：实施例506

按关于制备实施例75所描述的类似方式，使4-氯苯甲酸偶联至(2R)-2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)-4-羟基-2-甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐。MS实测值：463.2(M+)。

实施例507

在2-(4-氯-5-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基)乙酸(参见US2004/0162282，36.5毫克，0.15毫摩尔)、EDCI(32毫克，0.17毫摩尔)及HOBt(22毫克，0.17毫摩尔)在DMF(0.3毫升)中的搅拌的溶液内添加4-氯苯基哌啶盐酸盐(42毫克，0.18毫摩尔)与DIPEA(66微升)。在添加完成时，将反应混合物搅拌18小时，然后通过HPLC直接纯化，得到实施例507(46.5毫克，74％)，为白色固体。MS实测值：420.1(M+)。

实施例508

实施例508按关于制备实施例328所描述的类似方式，使用(R)-4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基哌啶-4-醇来制备。MS实测值：443.3(M+)。

实施例509

步骤1：1-(3’-羟基联苯-2-基)脲

按关于制备实施例294所描述的类似方式，使3-羟基苯酚与2-溴苯基脲在苏楚基(Suzuki)交叉偶联条件下反应，得到1-(3’-羟基联苯-2-基)脲。

步骤2：实施例509

在(R)-2-氯-N-(1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)乙酰胺(40毫克，0.14毫摩尔)与K₂CO₃(39毫克，0.28毫摩尔)在DMSO(2毫升)中的搅拌的溶液内添加1-(3’-羟基联苯-2-基)脲(32毫克，0.14毫摩尔)。在添加完成时，将反应混合物搅拌18小时。在此段时间后，使反应混合物经由制备性HPLC纯化，得到实施例509(36％收率)。MS实测值：563.2(M+)。

实施例510

1-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-3-甲基脲

在反应管中添加异氰酸甲酯(3微升)、(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐(20毫克)及THF(2毫升)。添加三乙胺(7.4微升)，并使反应混合物在室温振荡过夜。在此段时间后，浓缩所得到的溶液，并通过制备性硅胶色谱(100％EtOAc至20％MeOH/CH₂Cl₂)纯化，得到实施例510。MS实测值：(M+H)⁺＝396.3。

实施例511

1-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-3-环戊基脲

在反应管中添加异氰酸环戊酯(9微升)、(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐(30毫克)及THF(2毫升)。添加三乙胺(11微升)，并使反应混合物在室温振荡过夜。在此段时间后，浓缩所得到的溶液，并通过制备性硅胶色谱(100％EtOAc至20％MeOH/CH₂Cl₂)纯化，得到实施例511。MS实测值：(M+H)⁺＝450.2。

实施例512

(R)-N-(1-(4-(4-氯苯基)-4-羟基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)环戊烷羧酰胺

步骤1：(R)-1-(4-(4-氯苯基)-4-羟基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸叔丁酯

使N-Boc-D-缬氨酸(2.22克，10.2毫摩尔)、EDC(1.96克，10.2毫摩尔)和HOBt(1.38克，10.2毫摩尔)溶于二氯甲烷(40毫升)中。添加DIPEA(4.0毫升，23.3毫摩尔)与4-羟基-(4-氯苯基)哌啶(1.98克，9.34毫摩尔)，并将溶液在室温搅拌2小时。对反应混合物进行浓缩，并使所得到的油状残留物在EtOAc(150毫升)与水(50毫升)之间分配，振荡，然后分离。接着将有机层以NaHCO₃水溶液(50毫升)与盐水洗涤，并使合并的有机馏分以固体硫酸钠干燥。过滤溶液，然后浓缩，得到(R)-1-(4-(4-氯苯基)-4-羟基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸叔丁酯(3.9克)，为白色泡沫状物。MS实测值：(M+)⁺＝411.1。

步骤2：(R)-2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)-4-羟基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐

将HCl在二噁烷中的4M溶液(10毫升)添加至(R)-1-(4-(4-氯苯基)-4-羟基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸叔丁酯(2.0克)中，并将所得到的溶液在室温搅拌1小时。在此段时间后，通过旋转蒸发除去溶剂，得到油状物。使油状物在真空中干燥过夜，得到(R)-2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)-4-羟基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐，为白色泡沫状物。

步骤3：实施例512

在(R)-2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)-4-羟基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐(31.1毫克，0.09毫摩尔)与环戊烷碳酰氯(12微升，0.09毫摩尔)在二氯甲烷(0.5毫升)中的溶液内添加DIPEA(34.3微升，0.2毫摩尔)，并将反应溶液在室温搅拌1小时。除去溶剂，并使残留物在EtOAc(3毫升)与水(1.5毫升)之间分配。分离各层，以硫酸钠干燥，过滤，然后在真空中浓缩。使粗产物经由柱色谱(33％EtOAc/庚烷)纯化，得到实施例512(29.1毫克，80％收率)，为白色固体。MS实测值：407.04(M+)⁺；HPLC保留时间为：3.66分钟。

实施例513

(N-((2R)-1-(4-(4-氯-3-甲氧基苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)环戊烷羧酰胺

步骤1：4-(4-氯-3-甲氧基苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-羧酸叔丁酯

在5-溴-2-氯-苯甲醚(1.613克，7.3毫摩尔)在THF(15毫升)中的-78℃溶液内逐滴添加正丁基锂(4.75毫升，7.6毫摩尔，1.6M)，历经15分钟，并将所得到的溶液在-78℃搅拌1小时。经由导管逐滴添加3，3-二甲基-4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(以国际专利申请WO 04/043965中所描述的方式来制备，754毫克，3.32毫摩尔)在THF(5毫升)中的溶液。将反应混合物在-78℃搅拌2小时，然后使其历经30分钟缓慢温热至室温，然后将混合物在50℃加热30分钟。使反应混合物冷却至室温，通过添加NH₄Cl水溶液使反应淬灭，以水稀释，并萃取到EtOAc中。使合并的有机萃取液以硫酸镁干燥，过滤，然后浓缩。使残留物经由柱色谱(15％至33％至50％EtOAc/庚烷)纯化，得到4-(4-氯-3-甲氧基苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-羧酸叔丁酯(728毫克，60％收率)。

步骤2：4-(4-氯-3-甲氧基苯基)-3，3-二甲基哌啶-4-醇盐酸盐

在4-(4-氯-3-甲氧基苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.36克，2.39毫摩尔)中添加二噁烷(10毫升)中的4N HCl，并搅拌30分钟。在真空中除去溶剂，并使所得到的固体以与甲苯共沸的方式进行干燥，然后在高真空下进一步干燥，得到4-(4-氯-3-甲氧基苯基)-3，3-二甲基哌啶-4-醇盐酸盐，为白色固体。

步骤3：(2R)-1-(4-(4-氯-3-甲氧基苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸叔丁酯

使N-Boc-D-缬氨酸(85毫克，0.39毫摩尔)、EDC(75毫克，0.39毫摩尔)、HOBt(53毫克，0.39毫摩尔)溶于二氯甲烷(2毫升)中。添加4-(4-氯-3-甲氧基苯基)-3，3-二甲基哌啶-4-醇盐酸盐(100毫克，0.33毫摩尔)，接着添加DIPEA(136微升，0.78毫摩尔)，并将此溶液在室温搅拌10分钟。对反应混合物进行浓缩，并使所得到的油状残留物经由柱色谱(10％至50％EtOAc/庚烷)纯化，得到(2R)-1-(4-(4-氯-3-甲氧基苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸叔丁酯(153毫克，99％收率)。MS实测值：(M-Boc)⁺＝396.3。

步骤4：(2R)-2-氨基-1-(4-(4-氯-3-甲氧基苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐

在(2R)-1-(4-(4-氯-3-甲氧基苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸叔丁酯(153毫克，0.33毫摩尔)中添加二噁烷(2毫升)中的4N HCl，并搅拌60分钟。在真空中除去溶剂，并使所得到的固体以与甲苯共沸的方式进行干燥，然后在高真空下进一步干燥，得到(2R)-2-氨基-1-(4-(4-氯-3-甲氧基苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐，为白色固体。

步骤5：实施例513

在(2R)-2-氨基-1-(4-(4-氯-3-甲氧基苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐(20毫克，0.05毫摩尔)与环戊烷碳酰氯(7.4微升，0.06毫摩尔)在二氯甲烷(0.3毫升)中的溶液内添加DIPEA(22微升，0.13毫摩尔)，并将反应溶液在室温搅拌16小时。除去溶剂，并使残留物通过制备性HPLC纯化，得到实施例513(14.5毫克，60％收率)，为白色固体。MS实测值：465.3(M+)⁺；HPLC保留时间为：3.89分钟。

实施例514

N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-5-胍基-1-氧代戊-2-基)环戊烷羧酰胺

步骤1：

在Boc-D-ORN(Cbz)-OH(叔丁氧羰基-D-鸟氨酸(苄氧羰基)-OH)(336毫克，0.92毫摩尔)、EDC(176毫克，0.92毫摩尔)及HOBt(124毫克，0.92毫摩尔)在二氯甲烷(5毫升)中的溶液内添加(S)-4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基哌啶-4-醇(200毫克，0.83毫摩尔)，接着添加DIPEA(0.16毫升，0.92毫摩尔)。将溶液搅拌2小时，然后倒入EtOAc中，并先后以水、NaHCO₃水溶液及盐水洗涤。使有机层以硫酸镁干燥，浓缩，并在高真空下干燥，得到粗制固体，使用其而无需进一步纯化。MS实测值：588.4(M+)⁺。

步骤2：(R)-4-氨基-5-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-5-氧代戊基氨基甲酸苄酯盐酸盐

使上文步骤1的产物在4N HCl的二噁烷(5毫升)溶液中进行脱保护，得到(R)-4-氨基-5-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-5-氧代戊基氨基甲酸苄酯盐酸盐(463毫克，粗产物)。

步骤3：(R)-5-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-4-(环戊烷羧酰氨基)-5-氧代戊基氨基甲酸苄酯

使(R)-4-氨基-5-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-5-氧代戊基氨基甲酸苄酯盐酸盐(50.5毫克，0.096毫摩尔)溶于二氯甲烷(0.5毫升)中，并添加环戊烷碳酰氯(14微升，0.12毫摩尔)，接着添加DIPEA(42微升，0.24毫摩尔)。将溶液搅拌2小时，浓缩，并在EtOAc(2毫升)与NaHCO₃水溶液(0.5毫升)之间分配。分离EtOAc层，以硫酸镁干燥，然后浓缩，得到(R)-5-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-4-(环戊烷羧酰氨基)-5-氧代戊基氨基甲酸苄酯，使用其而无需进一步纯化。

步骤4：N-((R)-5-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-1-氧代戊-2-基)环戊烷羧酰胺2，2，2-三氟乙酸盐

在(R)-5-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-4-(环戊烷羧酰氨基)-5-氧代戊基氨基甲酸苄酯(0.096毫摩尔，得自步骤3)中添加乙酸中的HBr(0.5毫升)，并将所得到的溶液搅拌1小时。添加乙醚(15毫升)，并再继续搅拌一小时。经由吸量管(pipet)除去乙醚，并使胶状固体以乙醚再洗涤一次。使残留物溶于MeOH中，添加固体碳酸钾，然后过滤。使粗制溶液经由制备性HPLC纯化，得到N-((R)-5-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-1-氧代戊-2-基)环戊烷羧酰胺2，2，2-三氟乙酸盐(20.6毫克，38％收率)。MS实测值：450.29(M+)⁺。

步骤5：实施例514

在所得到的N-((R)-5-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-1-氧代戊-2-基)环戊烷羧酰胺2，2，2-三氟乙酸盐(10.6毫克，0.019毫摩尔)与1H-吡唑-1-甲脒盐酸盐(3.03毫克，0.021毫摩尔)在DMF中的混合物内添加DIPEA(13.1微升，0.075毫摩尔)。将反应混合物在室温搅拌3小时。以MeOH稀释粗制反应混合物，并通过制备性HPLC直接纯化，得到实施例514(8.1毫克，60％收率)，为白色固体。MS实测值：492.23(M+)⁺。

实施例515

2-(3-(3-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)苯基)脲基)乙酸

步骤1：3-(3-(2-乙氧基-2-氧代乙基)脲基)苯甲酸

在3-氨基苯甲酸(140毫克，1毫摩尔)在THF(5毫升)中的0℃溶液内添加异氰酸基乙酸乙酯(150微升，1.3毫摩尔)。使反应溶液温热至室温，并搅拌18小时。然后将混合物倒入EtOAc(40毫升)中，并先后以水(15毫升)与盐水(15毫升)洗涤。使有机层以Na₂SO₄干燥，过滤，然后浓缩成油状物，使用其而无需进一步纯化。MS实测值：267.17(M+)⁺。

步骤2：2-(3-(3-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)苯基)脲基)乙酸乙酯

在可再密封瓶中添加(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐(24.1毫克，0.064毫摩尔)、3-(3-(2-乙氧基-2-氧代乙基)脲基)苯甲酸(17.10毫克，0.064毫摩尔)及苯并三唑-1-基氧基三(二甲基氨基)-鏻六氟磷酸盐(BOP)(28.4毫克，0.064毫摩尔)。然后在固体中添加DMF(0.25毫升)，接着添加DIPEA(0.022毫升，0.126毫摩尔)。在搅拌1小时后，将水(1.25毫升)添加至反应混合物中，并将沉淀的固体快速搅拌数小时。通过过滤来收集固体，并以水(2×0.5毫升)洗涤，得到2-(3-(3-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)苯基)脲基)乙酸乙酯(34.8毫克，90％收率)，为白色固体。MS实测值：587.26(M+)⁺。

步骤3：实施例515

在2-(3-(3-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)苯基)脲基)乙酸乙酯(34毫克，0.058毫摩尔)在THF(0.2毫升)与甲醇(0.2毫升)中的溶液内添加NaOH水溶液(1N)(60微升，0.058毫摩尔)。在1小时时的HPLC/LCMS显示起始原料完全消耗，且转化成产物(559.26，M+)。然后以1N HCl(0.06毫升)使反应混合物中和，以水(0.2毫升)稀释，然后浓缩，以除去有机溶剂。使所得到的油状混悬液溶于甲醇中，并通过制备性HPLC直接纯化。使含有产物的馏分浓缩，并使固体在高真空下干燥，得到实施例515(27.7毫克，71％收率)，为白色固体。MS实测值：559.27(M+)⁺。

实施例516

(3-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)苯基)甲磺酸钠

步骤1：3-(氯甲基)-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)苯甲酰胺

在(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐(30.3毫克，0.089毫摩尔)在CH₂Cl₂(0.8毫升)中的冰冷溶液内添加3-(氯甲基)苯甲酰氯(14微升，0.098毫摩尔)，接着添加DIPEA(34.4微升，0.197毫摩尔)。将反应混合物搅拌过夜，然后在EtOAc与稀NaHCO₃水溶液之间分配。将水层以EtOAc进一步萃取，接着以Na₂SO₄干燥。过滤，浓缩，并通过快速色谱纯化(20％EtOAc/庚烷至60％EtOAc/庚烷)，得到3-(氯甲基)-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)苯甲酰胺(33毫克，75％收率)。MS实测值：491.20(M+)⁺。

步骤2：实施例516

在3-(氯甲基)-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)苯甲酰胺(33毫克，0.067毫摩尔)在乙醇(0.25毫升)/水(0.25毫升)中的溶液内添加亚硫酸钠(0.016毫升，0.336毫摩尔)，并将反应容器加热回流过夜。使反应混合物冷却至室温，然后在旋转蒸发器上浓缩。将残留的混悬液加载至1克C18筒(以水预先润湿)上，并先后以水、10％MeCN/水、20％MeCN/水，接着以50％MeCN/水洗脱。使含有产物的馏分合并，浓缩，然后冻干，得到实施例516(27.0毫克，72％收率)，其被分离为白色固体。MS实测值：537.22(M+)⁺。

实施例517

(R)-2-(苯并[d]噁唑-2-基氨基)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮

在(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐(23.7毫克，0.07毫摩尔)在EtOH(300微升)中的溶液内添加2-氯苯并噁唑(8微升，0.070毫摩尔)与TEA(19.50微升，0.140毫摩尔)。将反应溶液在150℃加热45分钟。使反应混合物通过制备性HPLC直接纯化，得到实施例517(21毫克，53％收率)。MS实测值：456.3(M+)⁺。

实施例518

3-乙酰基-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)苯甲酰胺

在3-乙酰基苯甲酸(10.4毫克，0.063毫摩尔)、(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮(21.6毫克，0.058毫摩尔)、EDC(12.14毫克，0.063毫摩尔)及HOBT(9.69毫克，0.063毫摩尔)在DMF(250微升)中的溶液内，在搅拌约20分钟后，添加DIPEA(11.06微升，0.063毫摩尔)。将反应混合物搅拌30分钟，然后添加水(1毫升)。将沉淀的固体搅拌45分钟，过滤，并以水洗涤，得到实施例518(24毫克，86％收率)，为白色固体。HPLC纯度：＞95％，保留时间：3.85分钟；MS实测值：485.19(M+)⁺。

实施例519

N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-3-(1H-吡唑-5-基)苯甲酰胺三氟乙酸盐

步骤1：N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-3-((E)-3-(二甲基氨基)丙烯酰基)苯甲酰胺

在3-乙酰基-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)苯甲酰胺中添加DMF-DMA(N，N-二甲基甲酰胺与N，N-二甲基乙酰胺)(0.3毫升)，并将反应混合物在105℃加热约5小时。在旋转蒸发器上除去残留的DMF-DMA，并使粗产物在高真空下干燥约3小时，得到N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-3-((E)-3-(二甲基氨基)丙烯酰基)苯甲酰胺。

步骤2：实施例519

在N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-3-((E)-3-(二甲基氨基)丙烯酰基)苯甲酰胺(11毫克，0.020毫摩尔)在乙醇(0.3毫升)中的溶液内添加水合肼(20微升，0.411毫摩尔)。将反应混合物搅拌过夜，并使粗制反应混合物经由制备性HPLC直接纯化，得到实施例519(10.0毫克，0.016毫摩尔，79％收率)，为白色固体。HPLC纯度＞99％，保留时间为3.92分钟；MS实测值：509.30(M+)⁺。

实施例520

2-(2-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基)噻唑-4-基)乙酸甲酯

步骤1：1-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)硫脲

在(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐(141.6毫克，0.377毫摩尔)在CHCl₃(2毫升)中的0℃溶液内添加DIPEA(0.066毫升，0.377毫摩尔)，接着逐滴添加异硫氰酸苯甲酰酯(0.051毫升，0.377毫摩尔)。将反应混合物搅拌1小时，然后在旋转蒸发器上浓缩，并添加MeOH(2毫升)。添加5N NaOH(0.080毫升)，并将所得到的混合物搅拌1小时，接着在65℃搅拌1小时。冷却至室温，然后浓缩。添加水(1毫升)，并快速搅拌度过周末。萃取到EtOAc中(3×25毫升)，以Na₂SO₄干燥，过滤，浓缩。经由柱色谱(50％EA/庚烷至75％EA/庚烷)纯化，得到1-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)硫脲(135毫克，90％收率)，为白色固体。HPLC纯度：98.6％，保留时间为3.64分钟；MS实测值：420.24(M+Na)⁺。

步骤2：实施例520

在1-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)硫脲(21.4毫克，0.054毫摩尔)在EtOH(0.3毫升)中的溶液内添加4-氯乙酰乙酸甲酯(7.4微升，0.065毫摩尔)，并将反应混合物在80℃加热过夜。使反应混合物浓缩，并经由柱色谱(33％EA/庚烷至50％EA/庚烷)纯化，得到实施例520(13.7毫克，51.6％收率)，为洁净玻璃状物。HPLC纯度：96.7％，保留时间为3.41分钟；MS实测值：494.25(M+)⁺。

实施例521

N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-3-(氨磺酰基甲基)苯甲酰胺

在(3-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)苯基)甲磺酸钠(19.9毫克，0.036毫摩尔)在CH₂Cl₂(1毫升)中的混悬液内一次性添加五氯化磷(0.012毫升，0.089毫摩尔)。将反应混合物搅拌2小时，然后以水(1毫升)使反应淬灭，并快速搅拌30分钟。分离各层，并将水层以CH₂Cl₂(2×10毫升)萃取。将合并的有机物质以盐水洗涤，以Na₂SO₄干燥，过滤，然后浓缩。添加CH₂Cl₂(0.6毫升)，并使溶液冷却至0℃，此时逐滴添加NH₄OH水溶液(0.5毫升)，并快速搅拌。将混合物快速搅拌，同时逐渐达到室温。将反应混合物以CH₂Cl₂(约15毫升)与水(3毫升)稀释，分离各层，并以CH₂Cl₂(15毫升)进一步萃取水层。使合并的有机层干燥(Na₂SO₄)，过滤，然后浓缩。使粗产物经由柱色谱(50％EA/庚烷至100％EA)纯化，得到实施例521(14.1毫克，74％收率)，使其过夜冻干成白色粉末。HPLC纯度：＞99％，保留时间为3.59分钟；LCMS：536.18(M+)⁺。

实施例522

(R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-2-(4-(羟基甲基)噻唑-2-基氨基)-3-甲基丁-1-酮三氟乙酸盐

步骤1：(R)-2-(4-(氯甲基)噻唑-2-基氨基)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮

在1-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)硫脲(29毫克，0.073毫摩尔)在丙酮(300微升)中的混悬液内添加1，3-二氯丙-2-酮(14毫克，0.105毫摩尔)，并将反应混合物在室温搅拌过夜。除去溶剂，并使残留物经由柱色谱(SiO₂，25％EtOAc/庚烷，接着为50％EtOAc/庚烷，然后是含有0.06％DIPEA的10％EtOAc)纯化。(R)-2-(4-(氯甲基)噻唑-2-基氨基)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮(35毫克，＞95％收率)被分离为洁净玻璃状物。HPLC纯度：＞99％，保留时间为3.87分钟；MS实测值：470.22(M+)⁺。

步骤2：实施例522

将(R)-2-(4-(氯甲基)噻唑-2-基氨基)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮(30毫克，0.064毫摩尔)与亚硫酸钠(40.2毫克，0.319毫摩尔)在EtOH(0.6毫升)/水(0.3毫升)中的溶液在80℃搅拌。将混合物加热2小时，冷却，并经由制备性HPLC直接纯化，得到实施例522(4.8毫克，13.3％收率)。HPLC纯度＞97％，保留时间为3.12分钟；MS实测值：452.31(M+)⁺。

实施例523

(R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-2-(4-(乙氧基甲基)噻唑-2-基氨基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐

从实施例522步骤2分离到另一种产物即实施例523(12.5毫克，33％收率)，纯度为约95％，保留时间为3.55分钟；MS实测值：480.34(M+)⁺。

实施例524

2-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基)噻唑-4-羧酸乙酯

将EtOH(0.6毫升)中的1-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)硫脲(67.5毫克，0.170毫摩尔)与溴丙酮酸乙酯(0.026毫升，0.187毫摩尔)在约65℃加热过夜。以CH₂Cl₂中的2当量TEA使反应混合物中和，浓缩，并经由柱色谱(20％至40％EtOAc/庚烷)纯化，得到实施例524(74.9毫克，89％收率)，为洁净玻璃状物。HPLC纯度：99.5％，保留时间：4.00分钟；LCMS：494.28(M+)⁺。

实施例525

2-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基)噻唑-4-羧酸

在2-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基)噻唑-4-羧酸乙酯(69毫克，0.140毫摩尔)在MeOH(0.28毫升)/THF(0.280毫升)中的溶液内添加1N NaOH(0.140毫升，0.140毫摩尔)，并将反应混合物在室温搅拌。将反应混合物搅拌8小时，然后以1N HCl中和。除去溶剂，并添加水(约1毫升)。将所得到的固体搅拌，联用超声波短暂处理，过滤，且以水洗涤。粗制固体的HPLC纯度为约90％；MS实测值：466.26(M+)⁺。

实施例526

(R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-2-(4-(吗啉-4-羰基)噻唑-2-基氨基)丁-1-酮三氟乙酸盐

在含有2-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基)噻唑-4-羧酸(14.4毫克，0.031毫摩尔)、HOBT(5.68毫克，0.037毫摩尔)及EDC(7.11毫克，0.037毫摩尔)的瓶中添加DMF(0.2毫升)。将反应混合物搅拌约30分钟，接着添加吗啉(8.08微升，0.093毫摩尔)。将反应混合物搅拌过夜，并使产物通过制备性HPLC直接纯化，且冻干成固体。HPLC纯度：97.8％，保留时间为3.70分钟；LCMS：535.31(M+)⁺。

实施例527

(S)-2-氨基-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)丙酰胺2，2，2-三氟乙酸盐

在(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐(30.1毫克，0.080毫摩尔)、(R)-2-(叔丁氧羰基氨基)丙酸(16.69毫克，0.088毫摩尔)、HOBT(13.51毫克，0.088毫摩尔)及EDC(16.91毫克，0.088毫摩尔)在DMF中的溶液内添加DIPEA(0.031毫升，0.176毫摩尔)。将反应混合物搅拌2小时，然后缓慢添加水(1毫升)。将沉淀的固体搅拌2小时，过滤，并在高真空下干燥。使干燥的白色固体溶于CH₂Cl₂(0.25毫升)中，添加TFA(0.1毫升)，并搅拌4小时。经由N₂吹扫以除去溶剂，并使产物通过制备性HPLC纯化，得到实施例527(25.2毫克，0.048毫摩尔，60.0％收率)，为白色固体。HPLC纯度：＞99.5％，保留时间：3.12分钟；LCMS：410.28(M+)。

实施例528

(R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-2-(苯基氨基)丁-1-酮三氟乙酸盐

在(R)-3-甲基-2-(苯基氨基)丁酸(20毫克，0.103毫摩尔)、EDC(21.8毫克，0.114毫摩尔)及HOBT(17.4毫克，0.114毫摩尔)在二氯甲烷(414微升)中的溶液内添加(S)-4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基哌啶-4-醇(24.8毫克，0.103毫摩尔)，然后添加DIPEA(19.89微升，0.114毫摩尔)。将反应混合物搅拌30分钟，除去溶剂，并使残留物通过制备性HPLC直接纯化，得到实施例528(24.8毫克，45％收率)，为白色固体。HPLC纯度：＞98％，保留时间为4.03分钟；MS实测值：415.20(M+)⁺。

实施例529

(R)-2-乙酰氨基-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-2-苯基乙酰胺

步骤1：(R)-2-氨基-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-2-苯基乙酰胺

在(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐(30.0毫克，0.080毫摩尔)、Boc-D-苯基甘氨酸(22.1毫克，O.088毫摩尔)、HOBT(13.5毫克，0.088毫摩尔)及EDC(16.9毫克，O.088毫摩尔)在DMF中的溶液内添加DIPEA(0.031毫升，O.176毫摩尔)。将反应混合物搅拌2小时，然后缓慢添加水(1毫升)。将沉淀的固体搅拌2小时，过滤，并在高真空下干燥。使干燥的白色固体溶于CH₂Cl₂(O.25毫升)中，添加TFA(O.1毫升)，并搅拌4小时。经由N₂吹扫以除去溶剂，并使产物通过制备性HPLC纯化，得到(R)-2-氨基-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-2-苯基乙酰胺三氟乙酸盐(21.7毫克，46％收率)，为白色固体。HPLC纯度：95.2％，保留时间为3.14分钟；MS实测值：410.27(M+)⁺。

步骤2：实施例529

在(R)-2-氨基-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-2-苯基乙酰胺三氟乙酸盐(6.9毫克，0.012毫摩尔)在CH₂Cl₂(O.2毫升)中的溶液内添加Ac₂O(1.3微升，0.014毫摩尔)，接着添加DIPEA(4.1微升，0.024毫摩尔)。对反应混合物进行浓缩，并经由制备性TLC纯化，在干燥后，得到实施例529(4毫克，66.1％收率)。HPLC纯度：＞99％，保留时间为3.67分钟；MS实测值：514.21(M+)⁺。

实施例530

1-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-3-苯基脲

将(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐(25毫克，0.067毫摩尔)在THF(2毫升)与二氯甲烷(2毫升)中在25℃搅拌，然后添加三乙胺(0.019毫升，0.13毫摩尔)，接着添加异氰酸苯酯(0.015毫升，0.13毫摩尔)。将反应混合物搅拌过夜，接着在硅胶上(3∶1至1∶1己烷/EtOAc至100％THF)纯化，得到实施例530(9.0毫克，0.020毫摩尔，29.5％收率)。MS实测值：(M+H)⁺＝458.28。

实施例531

3’-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)联苯-2-羧酸

步骤1：3’-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)联苯-2-羧酸甲酯

将(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮(40毫克，0.107毫摩尔)、2’-(甲氧羰基)联苯-3-羧酸(33毫克，0.128毫摩尔)、HOBT(20毫克，0.128毫摩尔)、EDC(25毫克，0.128毫摩尔)及三乙胺(0.030毫升，0.213毫摩尔)在25℃在二氯甲烷(3毫升)中混合，并搅拌。将反应混合物搅拌20小时，然后以下述方式处理：添加二氯甲烷，并以饱和碳酸氢钠洗涤。使二氯甲烷层以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩，得到白色玻璃状物，使其在硅胶(3∶1至1∶1己烷/EtOAc)上纯化，得到3’-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)联苯-2-羧酸甲酯(40毫克，0.069毫摩尔，65.0％收率)，为白色玻璃状物。MS实测值：(M+H)⁺＝577.31。

步骤2：实施例531

使3’-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)联苯-2-羧酸甲酯(35毫克，0.061毫摩尔)溶于MeOH(3毫升)中，并添加1N NaOH(0.12毫升，0.12毫摩尔)，且在25℃搅拌过夜。在真空中除去MeOH，并将水溶液以乙醚洗涤2次。以1N HCl使碱性水溶液酸化至pH＝3，然后以二氯甲烷萃取2次，得到实施例531(30毫克，0.053毫摩尔，88.0％收率)，为白色玻璃状产物。MS实测值：(M+H)⁺＝563.30。

实施例532

N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-N-甲基环戊烷羧酰胺

步骤1：(R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基(甲基)氨基甲酸叔丁酯

将(S)-4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基哌啶-4-醇(100毫克，0.417毫摩尔)、(R)-2-(叔丁氧羰基(甲基)氨基)-3-甲基丁酸(116毫克，0.501毫摩尔)、HOBT(77毫克，0.501毫摩尔)、EDC(96毫克，0.501毫摩尔)及三乙胺(0.116毫升，0.834毫摩尔)在25℃在二氯甲烷(3毫升)中混合，并搅拌。将反应混合物搅拌20小时，然后以饱和碳酸氢钠洗涤。使二氯甲烷层以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩，得到白色玻璃状物，使其在硅胶(9∶1至3∶1至1∶1己烷/EtOAc)上纯化，得到(R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(190毫克，0.417毫摩尔，100％收率)，为白色玻璃状物。MS实测值：(M+H)⁺＝453.15。

步骤2：(R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁-1-酮

使(R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基(甲基)氨基甲酸叔丁酯(190毫克，0.42毫摩尔)在25℃溶于二噁烷(3毫升)中，并搅拌，接着添加二噁烷中的4N HCl(0.524毫升，2.10毫摩尔)。将反应混合物搅拌20小时，然后浓缩，得到(R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁-1-酮盐酸盐(150毫克，0.39毫摩尔，92％收率)，为白色固体。MS实测值：(M+H)⁺＝353.22。

步骤3：实施例532

将(R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁-1-酮盐酸盐(30毫克，0.077毫摩尔)、环戊烷羧酸(11毫克，0.092毫摩尔)、HOBT(15毫克，0.092毫摩尔)、EDC(18毫克，0.092毫摩尔)及三乙胺(0.021毫升，0.154毫摩尔)在25℃在二氯甲烷(3毫升)中混合，并搅拌。将反应混合物搅拌20小时，然后以饱和碳酸氢钠洗涤。使二氯甲烷层以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩，得到白色玻璃状物，使其在硅胶(3∶1至1∶1己烷/EtOAc)上纯化，得到实施例532(25毫克，0.056毫摩尔，72.3％收率)，为白色玻璃状物。MS实测值：(M+H)⁺＝449.20。

实施例533A与533B

(1R，3S)-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-3-(1-甲基-1H-四唑-5-基)环己烷羧酰胺与(1S，3R)-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-3-(1-甲基-1H-四唑-5-基)环己烷羧酰胺

步骤1：(±)-顺式-3-(甲基氨甲酰基)环己烷羧酸甲酯

将(±)-顺式-3-(甲氧羰基)环己烷羧酸(500毫克，2.69毫摩尔)、甲胺盐酸盐(218毫克，3.22毫摩尔)、HOBT(493毫克，3.22毫摩尔)、EDC(618毫克，3.22毫摩尔)及三乙胺(0.75毫升，5.37毫摩尔)混合，并在25℃在二氯甲烷(10毫升)中搅拌。将反应混合物搅拌过夜，然后以1N HCl、饱和碳酸氢钠及盐水洗涤。使有机层以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩，得到(±)-顺式-3-(甲基氨甲酰基)环己烷羧酸甲酯(460毫克，2.309毫摩尔，86％收率)，为白色玻璃状物。MS实测值：(M+H)⁺＝200.10。

步骤2：(±)-顺式-3-(1-甲基-1H-四唑-5-基)环己烷羧酸甲酯

使(±)-顺式-3-(甲基氨甲酰基)环己烷羧酸甲酯(460毫克，2.309毫摩尔)在25℃及氮气下溶于乙腈(5毫升)中，并搅拌，然后添加叠氮化钠(150毫克，2.309毫摩尔)。冷却至0℃，接着历经2分钟逐滴添加三氟甲磺酸酐(0.390毫升，2.309毫摩尔)。反应混合物为无色溶液。搅拌20小时，然后添加饱和碳酸氢钠，并搅拌15分钟，接着添加少量EtOAc，然后在真空中浓缩乙腈。添加更多EtOAc，并分离各层。将EtOAc层以饱和碳酸氢钠再洗涤一次，然后以盐水洗涤1次。使EtOAc层以硫酸钠干燥，然后浓缩，得到无色油状物。得到产物即(±)-顺式-3-(1-甲基-1H-四唑-5-基)环己烷羧酸甲酯(350毫克，1.561毫摩尔，68％收率)，为无色油状物。MS实测值：(M+H)⁺＝225.00。

步骤3：(±)-顺式-3-(1-甲基-1H-四唑-5-基)环己烷羧酸

使(±)-顺式-3-(1-甲基-1H-四唑-5-基)环己烷羧酸甲酯(350毫克，1.56毫摩尔)在25℃溶于MeOH(3毫升)中，并搅拌，然后添加1.000N NaOH(3.12毫升，3.12毫摩尔)。搅拌3小时，接着通过以下方法来处理：添加少量水，然后在真空中浓缩甲醇。以浓HCl调整pH至3。无固体形成。将酸性水溶液以二氯甲烷萃取3次。合并二氯甲烷萃取液，干燥(硫酸钠)，然后在真空中浓缩，得到产物即(±)-顺式-3-(1-甲基-1H-四唑-5-基)环己烷羧酸(230毫克，1.094毫摩尔，70％收率)，为白色固体。MS实测值：(M+H)⁺＝211.10。

步骤4：(±)-顺式-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-3-(1-甲基-1H-四唑-5-基)环己烷羧酰胺

将(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮(25毫克，0.067毫摩尔)、(±)-顺式-3-(1-甲基-1H-四唑-5-基)环己烷羧酸(17毫克，0.080毫摩尔)、HOBT(12毫克，0.080毫摩尔)、EDC(15毫克，0.080毫摩尔)及三乙胺(0.019毫升，0.133毫摩尔)在25℃在二氯甲烷(3毫升)中混合，并搅拌。将反应混合物搅拌20小时，然后以饱和碳酸氢钠洗涤。使二氯甲烷层以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩，得到白色玻璃状物，使其在硅胶(1∶1己烷/EtOAc至100％EtOAc至4∶1二氯甲烷)上纯化，得到(±)-顺式-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-3-(1-甲基-1H-四唑-5-基)环己烷羧酰胺(35毫克，0.066毫摩尔，99％收率)，为白色玻璃状物。MS实测值：(M+H)⁺＝531.46。

步骤5：实施例533A与533B

将(±)-顺式-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-3-(1-甲基-1H-四唑-5-基)环己烷羧酰胺通过SFC HPLC分离，得到实施例533A(4.0毫克，7.53微摩尔)与实施例533B(4.0毫克，7.53微摩尔)，实施例533A为白色固体产物，MS实测值：(M+H)⁺＝531.43，实施例533B为白色固体产物，MS实测值：(M+H)⁺＝531.43。

实施例534

2-(2-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基)-2-氧代乙氧基)苯甲酸

步骤1：2-氯-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)乙酰胺

将(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐(100毫克，0.266毫摩尔)、三乙胺(0.074毫升，0.533毫摩尔)及二氯甲烷(5毫升)混合，并在25℃搅拌，然后逐滴添加在1毫升二氯甲烷中的2-氯乙酰氯(0.021毫升，0.266毫摩尔)。将反应混合物搅拌1小时，接着在真空中浓缩，得到2-氯-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)乙酰胺(90毫克，0.218毫摩尔，82％收率)，为黄褐色固体。MS实测值：(M+H)⁺＝415.46。使用此产物而无需进一步纯化。

步骤2：2-(2-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基)-2-氧代乙氧基)苯甲酸甲酯

将2-氯-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)乙酰胺(35毫克，0.084毫摩尔)、碳酸钾(35毫克，0.253毫摩尔)、2-羟基苯甲酸甲酯(13毫克，0.084毫摩尔)及DMSO(3毫升)混合，并在25℃搅拌。将反应混合物搅拌20小时，以EtOAc稀释，然后以水洗涤4次。使有机层以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩，得到琥珀色油状物，使其在硅胶(3∶1至1∶1己烷/EtOAc至100％EtOAc)上纯化，得到2-(2-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基)-2-氧代乙氧基)苯甲酸甲酯(18毫克，0.034毫摩尔，40％收率)，为白色玻璃状物。MS实测值：(M+H)⁺＝531.21。

步骤3：实施例534

使2-(2-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基)-2-氧代乙氧基)苯甲酸甲酯(18毫克，0.034毫摩尔)在25℃溶于甲醇(2毫升)中，并搅拌，然后添加1.0N NaOH(0.068毫升，0.068毫摩尔)。将反应混合物搅拌20小时，添加水，接着浓缩，以除去MeOH。以1N HCl使碱性水溶液酸化至pH＝3，然后以二氯甲烷萃取。合并有机层，以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩，得到实施例534(11毫克，0.021毫摩尔，62％收率)，为白色固体。MS实测值：(M+H)⁺＝517.35。

实施例535

(R)-1-(4-氨基-4-氧代丁酰基)-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)哌啶-3-羧酰胺

步骤1：(R)-3-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯

将(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐(100毫克，0.266毫摩尔)、(R)-1-(叔丁氧羰基)哌啶-3-羧酸(73毫克，0.320毫摩尔)、HOBT(49毫克，0.320毫摩尔)、EDC(61毫克，0.320毫摩尔)及三乙胺(0.074毫升，0.533毫摩尔)在25℃在二氯甲烷(3毫升)中混合，并搅拌。将反应混合物搅拌20小时，然后以饱和碳酸氢钠洗涤。使二氯甲烷层以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩，得到白色玻璃状物，使其在硅胶(1∶1己烷/EtOAc至100％EtOAc至4∶1二氯甲烷/MeOH)上纯化，得到(R)-3-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(125毫克，227毫摩尔，85％收率)，为白色固体。MS实测值：(M+H)⁺＝550.52。

步骤2：(R)-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)哌啶-3-羧酰胺盐酸盐

将(R)-3-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(125毫克，0.23毫摩尔)在二噁烷(2毫升)中在25℃及氮气下搅拌，然后添加二噁烷中的4N HCl(0.284毫升，1.14毫摩尔)。将反应混合物搅拌3小时，接着浓缩，得到(R)-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)哌啶-3-羧酰胺盐酸盐(100毫克，0.206毫摩尔，90％收率)，为白色玻璃状物。MS实测值：(M+H)⁺＝450.23。

步骤3：实施例535

将(R)-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)哌啶-3-羧酰胺盐酸盐(30毫克，0.062毫摩尔)、4-氨基-4-氧代丁酸(9毫克，0.074毫摩尔)、HOBT(11毫克，0.074毫摩尔)、EDC(14毫克，0.074毫摩尔)及三乙胺(0.017毫升，0.124毫摩尔)在25℃在二氯甲烷(3毫升)中混合，并搅拌。将反应混合物搅拌20小时，然后以饱和碳酸氢钠洗涤。使二氯甲烷层以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩，得到白色玻璃状物，使其在硅胶(100％EtOAc至4∶1二氯甲烷)上纯化，得到实施例535(24毫克，0.044毫摩尔，70％收率)，为白色玻璃状物。MS实测值：(M+H)⁺＝549.48。

实施例536

1-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-3-((1S，3S)-3-羟基环戊基)脲

步骤1：(R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸苯酯

将(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮(500毫克，1.33毫摩尔)、三乙胺(0.371毫升，2.66毫摩尔)及二氯甲烷(10毫升)在0℃及氮气下混合，然后经由添液漏斗逐滴添加氯甲酸苯酯(phenyl carbonochloridate)的二氯甲烷溶液(209毫克，1.33毫摩尔)。将反应混合物搅拌1小时，以EtOAc稀释，并先后以1N HCl与饱和碳酸氢钠洗涤。使有机层以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩，得到白色玻璃状物，使其在硅胶(3∶1至1∶1己烷/EtOAc)上纯化，得到(R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸苯酯(365毫克，0.795毫摩尔，59％收率)，为白色玻璃状物。MS实测值：(M+H)⁺＝459.32。

步骤2：实施例536

将(R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸苯酯(30毫克，0.065毫摩尔)、(1S，3S)-3-氨基环戊醇(7毫克，0.065毫摩尔)及三乙胺(0.018毫升，0.131毫摩尔)在25℃在乙腈(3毫升)中混合，然后在微波反应器中在150℃加热30分钟。在真空中浓缩溶剂，接着使残留物在硅胶(1∶1己烷/EtOAc至100％EtOAc至1∶1二氯甲烷/MeOH)上纯化，得到实施例536(20毫克，0.043毫摩尔，65％收率)，为白色玻璃状物。MS实测值：(M+H)⁺＝466.37。

实施例537

N1-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-4，4-二甲基戊二酰胺

步骤1：5-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基)-2，2-二甲基-5-氧代戊酸

将(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐(50毫克，0.133毫摩尔)、3，3-二甲基二氢-2H-吡喃-2，6(3H)-二酮(19毫克，0.133毫摩尔)及三乙胺(0.037毫升，0.266毫摩尔)在25℃在二氯甲烷(3毫升)中混合，并搅拌。将反应混合物搅拌20小时，在真空中浓缩，并在硅胶(1∶1己烷/EtOAc至100％EtOAc至4∶1二氯甲烷/MeOH)上纯化，得到5-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基)-2，2-二甲基-5-氧代戊酸(50毫克，0.104毫摩尔，78％收率)，为白色玻璃状物。MS实测值：(M+H)⁺＝481.34。

步骤2：实施例537

将5-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基)-2，2-二甲基-5-氧代戊酸(25毫克，0.052毫摩尔)、氯化铵(14毫克，0.260毫摩尔)、HOBT(10毫克，0.062毫摩尔)、EDC(12毫克，0.062毫摩尔)及三乙胺(7.24微升，0.052毫摩尔)在25℃在乙腈(2毫升)中混合，并搅拌。将反应混合物搅拌20小时，浓缩，然后添加二氯甲烷。将二氯甲烷层以饱和碳酸氢钠洗涤，以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩，得到白色玻璃状物，使其在硅胶(1∶1己烷/EtOAc至100％EtOAc至4∶1二氯甲烷/MeOH)上纯化，得到实施例537(22毫克，0.046毫摩尔，88％收率)，为白色玻璃状物。MS实测值：(M+H)⁺＝480.29。

实施例538

(R)-N3-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)吡咯烷-1，3-二羧酰胺

步骤1：(R)-3-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯

按照实施例535步骤1的操作，使用(R)-1-(叔丁氧羰基)吡咯烷-3-羧酸(0.69克，3.20毫摩尔)，得到(R)-3-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(1.1克，2.05毫摩尔，77％收率)，为白色玻璃状物。MS实测值：(M+H)⁺＝436.43。

步骤2：(R)-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)吡咯烷-3-羧酰胺盐酸盐

按照实施例535步骤2的操作，使用(R)-3-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(1.1克，2.052毫摩尔)，得到(R)-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)吡咯烷-3-羧酰胺盐酸盐(1.0克，2.12毫摩尔，100％收率)，为白色固体。MS实测值：(M+H)⁺＝436.28。

步骤3：实施例538

将(R)-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)吡咯烷-3-羧酰胺盐酸盐(40毫克，0.085毫摩尔)在25℃在乙酸(3毫升)中搅拌，然后添加氰酸钠(6.60毫克，0.102毫摩尔)。在搅拌2小时后，将反应混合物在50℃加热20小时。以1N NaOH调整pH至pH＝7-8，接着将水溶液以EtOAc萃取。合并EtOAc层，以饱和碳酸氢钠洗涤，干燥(硫酸钠)，然后在真空中浓缩，得到黄褐色玻璃状物，使其在硅胶(1∶1己烷/EtOAc至100％EtOAc至4∶1二氯甲烷/MeOH)上纯化，得到实施例538(10毫克，0.021毫摩尔，24％收率)，为白色固体。MS实测值：(M+H)⁺＝479.37。

实施例539

1，4-二乙酰基-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)哌嗪-2-羧酰胺

步骤1：1，4-二乙酰基哌嗪-2-羧酸

将哌嗪-2-羧酸二盐酸盐(200毫克，0.985毫摩尔)、三乙胺(0.137毫升，0.985毫摩尔)及乙酸酐(0.093毫升，0.985毫摩尔)在25℃在二氯甲烷(3毫升)中混合，并搅拌。添加1毫升二噁烷中的4N HCl，然后用二氯甲烷/MeOH在真空中浓缩3次，得到白色固体。MS实测值：(M+H)⁺＝215.24。使用此产物而无需进一步纯化。

步骤2：实施例539

将(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮(30毫克，0.080毫摩尔)、1，4-二乙酰基哌嗪-2-羧酸(21毫克，0.096毫摩尔)、HOBT(15毫克，0.096毫摩尔)、EDC(18毫克，0.096毫摩尔)及三乙胺(0.022毫升，0.160毫摩尔)在25℃在二氯甲烷(3毫升)中混合，并搅拌。将反应混合物搅拌20小时，然后以饱和碳酸氢钠洗涤。使二氯甲烷层以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩，得到白色玻璃状物，使其在硅胶(1∶1己烷/EtOAc至100％EtOAc至4∶1二氯甲烷/MeOH)上纯化，得到实施例539(40毫克，0.075毫摩尔，94％收率)，为白色固体。MS实测值：(M+H)⁺＝535.45。

实施例540

2-(4-乙酰基哌嗪-1-基)-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)乙酰胺

步骤1：4-(2-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基)-2-氧代乙基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯

按照实施例535步骤1的操作，使用2-(4-(叔丁氧羰基)哌嗪-1-基)乙酸(47毫克，0.192毫摩尔)，得到4-(2-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基)-2-氧代乙基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(47毫克，0.083毫摩尔，52％收率)，为白色玻璃状物。MS实测值：(M+H)⁺＝565.38。

步骤2：N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-2-(哌嗪-1-基)乙酰胺盐酸盐

按照实施例535步骤2的操作，使用4-(2-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基)-2-氧代乙基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(70毫克，0.124毫摩尔)，得到N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-2-(哌嗪-1-基)乙酰胺盐酸盐(60毫克，0.120毫摩尔，97％收率)，为白色固体。MS实测值：(M+H)⁺＝465.44。

步骤3：实施例540

将N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-2-(哌嗪-1-基)乙酰胺盐酸盐(30毫克，0.060毫摩尔)、三乙胺(0.042毫升，0.299毫摩尔)及乙酸酐(0.028毫升，0.299毫摩尔)在25℃在二氯甲烷(3毫升)中混合，并搅拌。将反应混合物搅拌3小时，在真空中浓缩，并使残留物在硅胶(1∶1己烷/EtOAc至100％EtOAc至4∶1二氯甲烷/MeOH)上纯化，得到实施例540(21毫克，0.041毫摩尔，69％收率)，为无色油状物。MS实测值：(M+H)⁺＝507.46。

实施例541

N5-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-N1，2，2-三甲基戊二酰胺

将5-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基)-2，2-二甲基-5-氧代戊酸(得自实施例537步骤1)(25毫克，0.052毫摩尔)、甲胺盐酸盐(4毫克，0.062毫摩尔)、HOBT(10毫克，0.062毫摩尔)、EDC(12毫克，0.062毫摩尔)及三乙胺(0.014毫升，0.104毫摩尔)在25℃在二氯甲烷(3毫升)中混合，并搅拌。将反应混合物搅拌20小时，然后以饱和碳酸氢钠洗涤。使二氯甲烷层以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩，得到白色玻璃状物，使其在硅胶(1∶1己烷/EtOAc至100％EtOAc至4∶1二氯甲烷)上纯化，得到实施例541(25毫克，0.051毫摩尔，97％收率)，为白色玻璃状物。MS实测值：(M+H)⁺＝494.47。

实施例542

N5-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-N1，N1，2，2-四甲基戊二酰胺

将5-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基)-2，2-二甲基-5-氧代戊酸(得自实施例537步骤1)(25毫克，0.052毫摩尔)、THF中的2.0M二甲胺(0.031毫升，0.062毫摩尔)、HOBT(10毫克，0.062毫摩尔)、EDC(12毫克，0.062毫摩尔)及三乙胺(0.014毫升，0.104毫摩尔)在25℃在二氯甲烷(3毫升)中混合，并搅拌。将反应混合物搅拌20小时，然后以饱和碳酸氢钠洗涤。使二氯甲烷层以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩，得到白色玻璃状物，使其在硅胶(1∶1己烷/EtOAc至100％EtOAc至4∶1二氯甲烷)上纯化，得到实施例542(10毫克，0.020毫摩尔，38％)，为白色玻璃状物。MS实测值：(M+H)⁺＝508.49。

实施例543

N1-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-N5-甲基戊二酰胺

步骤1：5-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基)-5-氧代戊酸

按照实施例537步骤1的操作，使用二氢-2H-吡喃-2，6(3H)-二酮(18毫克，0.160毫摩尔)。蒸发溶剂，然后使残留物在硅胶(1∶1己烷/EtOAc至100％EtOAc至4∶1二氯甲烷/MeOH)上纯化，得到5-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基)-5-氧代戊酸(56毫克，0.124毫摩尔，77％收率)，为白色玻璃状物。MS实测值：(M+H)⁺＝453.35。

步骤2：实施例543

将5-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基)-5-氧代戊酸(25毫克，0.055毫摩尔)、甲胺盐酸盐(5毫克，0.066毫摩尔)、HOBT(10毫克，0.066毫摩尔)、EDC(13毫克，0.066毫摩尔)及三乙胺(0.015毫升，0.110毫摩尔)在25℃在二氯甲烷(3毫升)中混合，并搅拌。将反应混合物搅拌20小时，然后以饱和碳酸氢钠洗涤。使二氯甲烷层以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩，得到白色玻璃状物，使其在硅胶(1∶1己烷/EtOAc至100％EtOAc至4∶1二氯甲烷)上纯化，得到实施例543(23毫克，0.049毫摩尔，89％收率)，为白色玻璃状物。MS实测值：(M+H)⁺＝466.41。

实施例544

N1-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-N5，N5-二甲基戊二酰胺

将5-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基)-5-氧代戊酸(得自实施例543步骤1)(25毫克，0.055毫摩尔)、THF中的2.0M二甲胺(0.033毫升，0.066毫摩尔)、HOBT(10毫克，0.066毫摩尔)、EDC(13毫克，0.066毫摩尔)及三乙胺(0.015毫升，0.110毫摩尔)在25℃在二氯甲烷(3毫升)中混合，并搅拌。将反应混合物搅拌20小时，然后以饱和碳酸氢钠洗涤。使二氯甲烷层以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩，得到白色玻璃状物，使其在硅胶(1∶1己烷/EtOAc至100％EtOAc至4∶1二氯甲烷)上纯化，得到实施例544(16毫克，0.033毫摩尔，60％收率)，为白色玻璃状物。MS实测值：(M+H)⁺＝480.44。

实施例545

6-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基)-6-氧代己酸

将(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮(50毫克，0.133毫摩尔)、氧杂环戊烷-2，7-二酮(20毫克，0.160毫摩尔)、HOBT(24毫克，0.160毫摩尔)、EDC(31毫克，0.160毫摩尔)及三乙胺(0.037毫升，0.266毫摩尔)在25℃在二氯甲烷(3毫升)中混合，并搅拌。将反应混合物搅拌20小时，然后蒸发溶剂。使所得到的残留物在硅胶(100％EtOAc至4∶1二氯甲烷/MeOH)上纯化，得到实施例545(50毫克，0.107毫摩尔，80％收率)，为白色玻璃状物。MS实测值：(M+H)⁺＝467.38。

实施例546

1-乙酰基-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氮杂环丁烷-3-羧酰胺三氟乙酸盐

步骤1：3-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯

按照实施例535步骤1的操作，使用1-(叔丁氧羰基)氮杂环丁烷-3-羧酸(32毫克，0.160毫摩尔)，得到3-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(50毫克，0.096毫摩尔，71％收率)，为白色玻璃状物。MS实测值：(M+H)⁺＝522.39。

步骤2：N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氮杂环丁烷-3-羧酰胺盐酸盐

按照实施例535步骤2的操作，使用3-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)氮杂环丁烷-1-羧酸叔丁酯(45毫克，0.086毫摩尔)，得到N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氮杂环丁烷-3-羧酰胺盐酸盐(39毫克，0.085毫摩尔，99％收率)，为白色玻璃状物。MS实测值：(M+H)⁺＝422.32。

步骤3：实施例546

按照实施例539步骤1的操作，使用乙酸酐(0.036毫升，0.382毫摩尔)，在通过LCMS HPLC纯化后，得到实施例546(6.0毫克，10.38微摩尔，13％收率)，为白色固体。MS实测值：(M+H)⁺＝464.29。

实施例547

3-(N-乙酰基氨磺酰基)-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)苯甲酰胺

步骤1：N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-3-氨磺酰基苯甲酰胺

将(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮(200毫克，0.533毫摩尔)、3-氨磺酰基苯甲酸(129毫克，0.639毫摩尔)、HOBT(98毫克，0.639毫摩尔)、EDC(123毫克，0.639毫摩尔)及三乙胺(0.149毫升，1.066毫摩尔)在25℃在二氯甲烷(3毫升)中混合，并搅拌。将反应混合物搅拌20小时，然后以饱和碳酸氢钠洗涤。使二氯甲烷层以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩，得到白色玻璃状物，使其在硅胶(1∶1己烷/EtOAc至100％EtOAc)上纯化，得到N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-3-氨磺酰基苯甲酰胺(197毫克，0.377毫摩尔，70％收率)，为白色玻璃状物。MS实测值：(M+H)⁺＝522.32。

步骤2：实施例547

将N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-3-氨磺酰基苯甲酰胺(40毫克，0.077毫摩尔)、乙酸(5.70微升，0.100毫摩尔)、DMAP(12毫克，0.100毫摩尔)、EDC(19毫克，0.100毫摩尔)及三乙胺(0.021毫升，0.153毫摩尔)在二氯甲烷(3毫升)中混合，并搅拌。将反应混合物搅拌20小时，然后以1N HCl(2×)与盐水洗涤。使有机层以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩，并在硅胶(1∶1己烷/EtOAc至100％EtOAc)上纯化，得到实施例547(27毫克，0.048毫摩尔，62％收率)，为白色玻璃状物。MS实测值：(M+H)⁺＝564.36。

实施例548

N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-3-(N-丙酰基氨磺酰基)苯甲酰胺

按照实施例547步骤2的操作，使用丙酸(7.38毫克，0.100毫摩尔)，得到实施例548(25毫克，0.043毫摩尔，56％收率)，为白色玻璃状物。MS实测值：(M+H)⁺＝578.38。

实施例549

3-(N-苯甲酰基氨磺酰基)-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)苯甲酰胺

按照实施例547步骤2的操作，使用苯甲酸(12毫克，0.100毫摩尔)，得到实施例549(35毫克，0.056毫摩尔，73.0％收率)，为白色玻璃状物。MS实测值：(M+H)⁺＝626.40。

实施例550

2-((S)-1-乙酰基吡咯烷-3-基)-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)乙酰胺

步骤1：(S)-3-(2-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基)-2-氧代乙基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯

按照实施例535步骤1的操作，使用(S)-2-(1-(叔丁氧羰基)吡咯烷-3-基)乙酸(37毫克，0.160毫摩尔)，得到(S)-3-(2-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基)-2-氧代乙基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60毫克，0.109毫摩尔，82％收率)，为白色玻璃状物。MS实测值：(M+H)⁺＝550.48。

步骤2：N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-2-((S)-吡咯烷-3-基)乙酰胺盐酸盐

按照实施例535步骤2的操作，使用(S)-3-(2-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基)-2-氧代乙基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(55毫克，0.100毫摩尔)，得到N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-2-((S)-吡咯烷-3-基)乙酰胺盐酸盐(45毫克，0.093毫摩尔，93％收率)，为白色固体。MS实测值：(M+H)⁺＝450.35。

步骤3：实施例550

按照实施例537步骤1的操作，使用乙酸酐(0.039毫升，0.411毫摩尔)，得到实施例550(40毫克，0.081毫摩尔，99％收率)，为白色玻璃状物。MS实测值：(M+H)⁺＝492.39。

实施例551

2-((R)-1-乙酰基吡咯烷-3-基)-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)乙酰胺

步骤1：(R)-3-(2-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基)-2-氧代乙基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯

按照实施例535步骤1的操作，使用(R)-2-(1-(叔丁氧羰基)吡咯烷-3-基)乙酸(37毫克，0.160毫摩尔)，得到(R)-3-(2-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基)-2-氧代乙基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60毫克，0.109毫摩尔，82％收率)，为白色玻璃状物。MS实测值：(M+H)⁺＝550.42。

步骤2：N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-2-((R)-吡咯烷-3-基)乙酰胺盐酸盐

按照实施例535步骤2的操作，使用(R)-3-(2-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基)-2-氧代乙基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(55毫克，0.100毫摩尔)，得到N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-2-((R)-吡咯烷-3-基)乙酰胺盐酸盐(45毫克，0.093毫摩尔，93％收率)，为白色固体。MS实测值：(M+H)⁺＝450.37。

步骤3：实施例551

按照实施例537步骤1的操作，使用乙酸酐(0.039毫升，0.411毫摩尔)，得到实施例551(40毫克，0.081毫摩尔，99％收率)，为白色玻璃状物。MS实测值：(M+H)⁺＝492.39。

实施例552

2-((S)-1-乙酰基吡咯烷-2-基)-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)乙酰胺

步骤1：(S)-2-(2-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基)-2-氧代乙基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯

按照实施例535步骤1的操作，使用(S)-2-(1-(叔丁氧羰基)吡咯烷-2-基)乙酸(37毫克，0.160毫摩尔)，得到(S)-2-(2-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基)-2-氧代乙基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(60毫克，0.109毫摩尔，82％收率)，为白色玻璃状物。MS实测值：(M+H)⁺＝550.42。

步骤2：N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-2-((S)-吡咯烷-2-基)乙酰胺盐酸盐

按照实施例535步骤2的操作，使用(S)-2-(2-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基)-2-氧代乙基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(55毫克，0.100毫摩尔)，得到N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-2-((S)-吡咯烷-2-基)乙酰胺盐酸盐(48毫克，0.099毫摩尔，99％收率)，为白色玻璃状物。MS实测值：(M+H)⁺＝450.39。

步骤3：实施例552

按照实施例537步骤1的操作，使用乙酸酐(0.024毫升，0.257毫摩尔)，得到实施例552(20毫克，0.041毫摩尔，79％收率)，为白色玻璃状物。MS实测值：(M+H)⁺＝492.40。

实施例553

N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-2’-脲基联苯-3-羧酰胺

将(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐(30毫克，0.080毫摩尔)、2’-脲基联苯-3-羧酸(25毫克，0.096毫摩尔)、HOBT(15毫克，0.096毫摩尔)、EDC(18毫克，0.096毫摩尔)及三乙胺(0.022毫升，0.160毫摩尔)在25℃在二氯甲烷(3毫升)中混合，并搅拌。将反应混合物搅拌20小时，然后以饱和碳酸氢钠洗涤。使二氯甲烷层以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩，得到白色玻璃状物，使其在硅胶(1∶1己烷/EtOAc至100％EtOAc至4∶1二氯甲烷/MeOH)上纯化，得到实施例553(40毫克，0.069毫摩尔，87％收率)，为黄褐色固体。MS实测值：(M+H)⁺＝577.39。

实施例554

3-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)-5-(吡啶-2-基)苯甲酸

步骤1：3-溴-5-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)苯甲酸甲酯

将(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐(100毫克，0.266毫摩尔)、3-溴-5-(甲氧羰基)苯甲酸(83毫克，0.320毫摩尔)、HOBT(49毫克，0.320毫摩尔)、EDC(61毫克，0.320毫摩尔)及三乙胺(0.074毫升，0.533毫摩尔)在25℃在二氯甲烷(5毫升)中混合，并搅拌。将反应混合物搅拌20小时，然后以饱和碳酸氢钠洗涤。使二氯甲烷层以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩，得到白色玻璃状物，使其在硅胶(3∶1至1∶1己烷/EtOAc至100％EtOAc)上纯化，得到3-溴-5-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)苯甲酸甲酯(120毫克，0.207毫摩尔，78％收率)，为白色玻璃状物。MS实测值：(M+H)⁺＝579.10/581.13。

步骤2：3-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)-5-(吡啶-2-基)苯甲酸甲酯

使3-溴-5-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)苯甲酸甲酯(40毫克，0.069毫摩尔)在25℃溶于甲苯(3毫升)中，然后添加2-(三丁基锡基)吡啶(76毫克，0.207毫摩尔)。对反应混合物进行脱气，接着置于氮气下。添加四(三苯基膦)钯(0)(4毫克，3.45微摩尔)，并将反应混合物加热回流2小时。使反应混合物在真空中浓缩，得到深色残留物，然后使其溶于MeOH中，过滤，以除去不溶性物质，接着通过LCMS HPLC纯化。使所得到的无色油状物溶于EtOAc中，以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩，得到3-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)-5-(吡啶-2-基)苯甲酸甲酯(30毫克，0.052毫摩尔，75％收率)，为白色玻璃状物。MS实测值：(M+H)⁺＝578.34。

步骤3：实施例554

使3-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)-5-(吡啶-2-基)苯甲酸甲酯(25毫克，0.043毫摩尔)在25℃溶于MeOH(2毫升)中，然后添加1N NaOH(0.086毫升，0.086毫摩尔)，并搅拌。将反应混合物搅拌2小时，以水稀释，然后浓缩，以除去MeOH。以1NHCl使水溶液酸化至pH＝3，并将所得到的固体萃取到二氯甲烷中。合并有机层，干燥(硫酸钠)，然后在真空中浓缩，得到实施例554(12毫克，0.021毫摩尔，49％收率)，为白色固体。MS实测值：(M+H)⁺＝564.33。

实施例555

2-(3-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)脲基)-2-甲基丙酸叔丁酯

步骤1：2-甲基-2-(苯氧羰基氨基)丙酸叔丁酯

将2-氨基-2-甲基丙酸叔丁酯HCl(66毫克，0.337毫摩尔)与三乙胺(0.047毫升，0.337毫摩尔)在25℃在THF(10毫升)中混合并搅拌，然后冷却至0℃，并添加氯甲酸苯酯(53毫克，0.337毫摩尔)的THF溶液。将反应混合物搅拌20小时，以EtOAc稀释，并以1N HCl与盐水洗涤。使有机层干燥(硫酸钠)，然后在真空中浓缩，得到产物即2-甲基-2-(苯氧羰基氨基)丙酸叔丁酯(90毫克，0.322毫摩尔，96％收率)，为白色玻璃状物。MS实测值：(M+H)⁺＝280.30。

步骤2：实施例555

将(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐(40毫克，0.107毫摩尔)、2-甲基-2-(苯氧羰基氨基)丙酸叔丁酯(30毫克，0.107毫摩尔)及三乙胺(0.030毫升，0.213毫摩尔)在25℃在乙腈(3毫升)中混合，然后在微波反应器中在150℃加热60分钟。使反应混合物在真空中浓缩，接着在硅胶(3∶1至1∶1己烷/EtOAc至100％EtOAc)上纯化，得到实施例555(40毫克，0.076毫摩尔，72％收率)，为白色玻璃状物。MS实测值：(M+H)⁺＝524.35。

实施例556

3’-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)联苯-4-羧酸

步骤1：3-溴-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)苯甲酰胺

将(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐(100毫克，0.266毫摩尔)、3-溴苯甲酸(64毫克，0.320毫摩尔)、HOBT(49毫克，0.320毫摩尔)、EDC(61毫克，0.320毫摩尔)及三乙胺(0.074毫升，0.533毫摩尔)在25℃在二氯甲烷(5毫升)中混合，并搅拌。将反应混合物搅拌20小时，然后以饱和碳酸氢钠洗涤。使二氯甲烷层以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩，得到白色玻璃状物，使其在硅胶(3∶1至1∶1己烷/EtOAc至100％EtOAc)上纯化，得到3-溴-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)苯甲酰胺(100毫克，0.192毫摩尔，72％收率)，为白色固体。MS实测值：(M+H)⁺＝521.1/523.1。

步骤2：3’-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)联苯-4-羧酸甲酯

使3-溴-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)苯甲酰胺(50毫克，0.096毫摩尔)、4-(甲氧羰基)苯基硼酸(17毫克，0.096毫摩尔)、1.5M碳酸铯(0.192毫升，0.287毫摩尔)及乙酸钯(II)(1.08毫克，4.79微摩尔)在微波管中在25℃溶于DMF(3毫升)中，然后在60℃加热30分钟。将反应混合物以EtOAc稀释，接着以水洗涤(4×)。使有机层干燥(硫酸钠)，然后在真空中浓缩，得到3’-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)联苯-4-羧酸甲酯(44毫克，0.076毫摩尔，80％收率)，为白色固体。MS实测值：(M+H)⁺＝577.32。

步骤3：实施例556

使3’-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)联苯-4-羧酸甲酯(40毫克，0.069毫摩尔)溶于MeOH(3毫升)中，并在25℃添加1N NaOH(0.14毫升，0.14毫摩尔)，且搅拌度过周末。在真空中除去MeOH，并以1N HCl使水溶液酸化至pH＝3。将所得到的固体以二氯甲烷萃取2次。合并有机层，干燥(硫酸钠)，然后在真空中浓缩，得到产物即实施例556(30毫克，0.053毫摩尔，77％收率)，为白色固体。MS实测值：(M+H)⁺＝563.32。

实施例557

3-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-1-甲基-1-苯基脲

将(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐(25毫克，0.067毫摩尔)与甲基(苯基)氨基甲酰氯(11毫克，0.067毫摩尔)在乙腈(2毫升)中在25℃搅拌，然后在60℃加热20小时。使反应混合物冷却至室温，浓缩，并在硅胶(3∶1己烷/EtOAc至1∶1己烷/EtOAc至100％EtOAc)上纯化，得到实施例557(30毫克，0.064毫摩尔，95％收率)，为白色固体。MS实测值：(M+H)⁺＝472.28。

实施例558

N1-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-N3-(甲基磺酰基)间苯二甲酰胺

步骤1：3-(甲磺酰基氨甲酰基)苯甲酸甲酯

将3-(甲氧羰基)苯甲酸(500毫克，2.78毫摩尔)、甲基磺酰胺(264毫克，2.78毫摩尔)、HATU(1.06克，2.78毫摩尔)及二异丙基乙胺(1.45毫升，8.33毫摩尔)在二氯甲烷(20毫升)中混合，并搅拌。将反应混合物搅拌20小时，添加饱和氯化铵，并以二氯甲烷萃取。合并有机萃取液，以硫酸钠干燥，然后浓缩，得到琥珀色油状物，使其在硅胶(1∶1己烷/乙酸乙酯至100％乙酸乙酯至4∶1二氯甲烷/甲醇)上纯化，得到3-(甲磺酰基氨甲酰基)苯甲酸甲酯(700毫克，2.72毫摩尔，97％收率)。MS实测值：(M+H)⁺＝258.07。

步骤2：3-(甲磺酰基氨甲酰基)苯甲酸

使3-(甲磺酰基氨甲酰基)苯甲酸甲酯(700毫克，2.72毫摩尔)在25℃溶于甲醇中，并搅拌，然后添加1.0N NaOH(5.56毫升，5.56毫摩尔)。将反应混合物搅拌20小时，以水稀释，并在真空中除去甲醇。以乙醚洗涤水溶液(2×)，接着以1N HCl酸化至pH＝3。将所得到的溶液以乙酸乙酯萃取，得到3-(甲磺酰基氨甲酰基)苯甲酸(285毫克，1.12毫摩尔，42％收率)。MS实测值：(M+H)⁺＝244.00。

步骤3：N1-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-N3-(甲基磺酰基)间苯二甲酰胺

将(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐(20毫克，0.053毫摩尔)、3-(甲磺酰基氨甲酰基)苯甲酸(17毫克，0.069毫摩尔)、DMAP(8毫克，0.069毫摩尔)、EDC(13毫克，0.069毫摩尔)及三乙胺(8微升，0.053毫摩尔)在二氯甲烷(3毫升)中混合，并搅拌。将反应混合物搅拌20小时，以二氯甲烷(10毫升)稀释，然后以1N HCl(2×5毫升)洗涤。使有机层以硫酸钠干燥，接着在真空中浓缩，得到固体，使其在硅胶(100％乙酸乙酯至4∶1二氯甲烷/甲醇)上纯化，得到实施例558(15毫克，2.66毫摩尔，50％收率)，为白色固体。MS实测值：(M+H)⁺＝564.26。

实施例559

N-(1-(4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)苯甲酰胺三氟乙酸盐

使1-溴-4-氯苯(17毫克，0.091毫摩尔)与N-(1-(3，3-二甲基-4-氧代哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)苯甲酰胺(0.11毫升，0.18毫摩尔)在25℃及氮气下溶于THF(5毫升)中，然后使反应混合物冷却至-70℃，并搅拌，接着经由添液漏斗逐滴添加己烷中的1.6M正丁基锂。将反应混合物在-70℃搅拌2小时，然后以饱和氯化铵(5毫升)使反应淬灭。将反应混合物以乙酸乙酯萃取3次，并使合并的有机萃取液以硫酸钠干燥，接着在真空中浓缩，得到无色油状物，使其通过LCMS HPLC纯化，得到实施例559(7毫克，1.58毫摩尔，17％收率)。MS实测值：(M+H)⁺＝443.20。

实施例560

乙酸(S)-4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基-1-((R)-3-甲基-2-(3-甲基脲基)丁酰基)哌啶-4-酯三氟乙酸盐

步骤1：1-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-3-甲基脲

将(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐(20毫克，0.053毫摩尔)与三乙胺(7.4微升，0.053毫摩尔)在25℃在THF(2毫升)中混合，并搅拌。添加异氰酸甲酯(6微克，0.11毫摩尔)。1小时后，添加额外的异氰酸甲酯(30微克，0.55毫摩尔)，并将反应混合物在微波反应器中在100℃加热30分钟。使反应混合物冷却，以二氯甲烷稀释，并以水(5毫升)洗涤。使有机层以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩，得到油状物，使其在硅胶(100％乙酸乙酯至4∶1二氯甲烷/甲醇)上纯化，得到1-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-3-甲基脲(18毫克，45毫摩尔，86％收率)，为灰白色固体。MS实测值：(M+H)⁺＝396.19。

步骤2：实施例560

将1-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-3-甲基脲(18毫克，45毫摩尔)与三乙胺(6微升)在25℃在THF(2毫升)中混合，并搅拌，然后添加乙酰氯(3微升，45毫摩尔)。搅拌20小时，接着添加额外的乙酰氯(15微升，225毫摩尔)。继续搅拌6小时，然后过滤反应混合物，以水(3毫升)稀释，并萃取到二氯甲烷中。合并有机萃取液，以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩，得到无色油状物，使其通过HPLC纯化，得到实施例560(3毫克，5.4毫摩尔，12％收率)，为白色固体。MS实测值：(M+H)⁺＝438.37。

实施例561

(R)-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-2-(7-氯喹唑啉-4-基氨基)-3-甲基丁-1-酮

将(R)-2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐(25毫克，0.085毫摩尔)、4，7-二氯喹唑啉(20毫克，0.10毫摩尔)及三乙胺(47微升)在25℃在异丙醇(2毫升)中混合，然后在微波反应器中在100℃加热30分钟。使反应混合物在真空中浓缩，并在硅胶(9∶1至1∶1己烷/乙酸乙酯)上纯化，得到实施例561(31毫克，68毫摩尔，80％收率)，为白色固体。MS实测值：(M+H)⁺＝457.03。

实施例562与563

(R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-2-(2-氯嘧啶-4-基氨基)-3-甲基丁-1-酮与(R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-2-(4-氯嘧啶-2-基氨基)-3-甲基丁-1-酮

在反应容器中添加2，4-二氯嘧啶(21.5毫克，0.144毫摩尔，1当量)、(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮(54.0毫克，0.144毫摩尔，1当量)、三乙胺(0.024毫升，0.144毫摩尔，1当量)及DMF(2毫升)。将反应混合物在室温搅拌过夜。在这段期间结束时，使所得到的溶液蒸发，以MeOH稀释，并通过制备性LC-MS纯化。使所得到的洗脱馏分冻干，得到35.5毫克实施例562与8.4毫克实施例563。实施例562的MS实测值：(M+H)⁺＝451.37。实施例563的MS实测值：(M+H)⁺＝451.27。

实施例564

N-(1-(4-(2，4-二氯苯基)-4-羟基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)苯甲酰胺

在反应容器中添加N-(3-甲基-1-氧代-1-(4-氧代哌啶-1-基)丁-2-基)苯甲酰胺(68.4毫克，0.23毫摩尔，1.0当量)、1-溴-2，4-二氯苯(112.4毫克，0.50毫摩尔，2.2当量)及THF(20毫升)。使搅拌的反应混合物冷却至-78℃。经由注射器向其逐滴添加己烷中的1.6M n-BuLi(0.31毫升，0.50毫摩尔，1.0当量)(注意：放热)。在2小时内，使混合物温热至室温。以水使混合物淬灭。向其添加乙酸乙酯，并分离各层。将有机层先后以1N NaOH(3×)与1N HCl(1×)洗涤。使有机层干燥(MgSO₄)，并在真空中除去溶剂。使残留物溶于MeOH中，并通过制备性LC-MS纯化。蒸发收集的洗脱馏分，并使残留物溶于二氯甲烷中，干燥(MgSO₄)，及在真空中除去溶剂，得到30毫克实施例564，为白色固体。MS实测值：(M+H)⁺＝449.03。

实施例565

(1R，3R)-N-((R)-1-(8-(4-氯苯基)-8-羟基-5-氮杂螺[2.5]辛-5-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-3-羟基环戊烷羧酰胺

步骤1：碘化(2-氯乙基)二甲基锍

将(2-氯乙基)(甲基)硫烷(24.73克，224毫摩尔)与碘甲烷(100毫升，1600毫摩尔)的混合物在室温搅拌两天，在此段时间内，固体沉淀。以300毫升乙醚稀释反应混合物，并将此混悬液搅拌2小时。通过过滤来收集固体，以乙醚洗涤，然后在真空下干燥，得到27.2克深琥珀色粘性固体。将其在100毫升9∶1乙醚/甲醇中搅拌。通过过滤来收集固体，以乙醚洗涤，然后在真空下干燥，得到标题化合物(23.7克，94毫摩尔，42.0％收率)，为淡黄色粉末。将其按原样用于下一步骤中。

步骤2：8-氧代-5-氮杂螺[2.5]辛烷-5-羧酸叔丁酯

将叔丁醇钾(3.26克，27.6毫摩尔)在叔丁醇(40毫升)中的溶液以4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(5克，25.09毫摩尔)处理，导致反应混合物变成鲜明橙色。将混合物搅拌1小时，然后以碘化(2-氯乙基)二甲基锍(5.70克，22.59毫摩尔)进行处理，其以10分钟间隔分三份添加。此添加导致反应混合物的颜色逐渐褪色成淡黄色。将混合物搅拌2小时，接着以叔丁醇(10毫升)稀释，以叔丁醇钾(2.96克，25.09毫摩尔)处理，并在室温搅拌过夜。将反应混合物倒入水(100毫升)中，并以100毫升乙酸乙酯萃取3次。以水及盐水洗涤合并的有机相，以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩。使残留物在5×15厘米硅胶柱上纯化，以乙酸乙酯/己烷(10％-15％-20％-25％EtOAc，每种浓度为1升)洗脱，得到标题化合物(1.15克，5.10毫摩尔，20.34％收率)，为无色油状物。

步骤3：8-(4-氯苯基)-8-羟基-5-氮杂螺[2.5]辛烷-5-羧酸叔丁酯

在火焰干燥的100毫升三颈烧瓶中，使1-溴-4-氯苯(3.51克，18.36毫摩尔)在THF(20毫升)中的溶液冷却至-78℃，并以不使温度超过-60℃的速率逐滴添加己烷中的1.6M BuLi(12.00毫升，19.19毫摩尔)，以进行处理。将混合物在-78℃搅拌1小时，在此段时间内，发现白色沉淀物。混合物通过以下方法来处理：以不使温度超过-60℃的速率逐滴添加8-氧代-5-氮杂螺[2.5]辛烷-5-羧酸叔丁酯(1.88克，8.35毫摩尔)在THF(5毫升)中的溶液。将混合物搅拌3小时，然后使其温热至-20℃，并以饱和氯化铵溶液使反应淬灭。以乙酸乙酯萃取混合物3次，合并的有机相以水洗涤，接着以盐水洗涤，以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩。使残留物在5×15厘米硅胶柱上纯化，以乙酸乙酯/己烷(5％-10％-15％-20％乙酸乙酯)洗脱，得到标题化合物(1.81克，5.36毫摩尔，64.2％收率)，为无色粉末。MS(ESI+)＝264.27，(M-tBuO)⁺，220(M-H₂O-Boc)⁺。

步骤4：8-(4-氯苯基)-5-氮杂螺[2.5]辛-8-醇

将8-(4-氯苯基)-8-羟基-5-氮杂螺[2.5]辛烷-5-羧酸叔丁酯(1.81克，5.36毫摩尔)在二噁烷(2毫升)中的溶液以二噁烷中的4.0M HCl(7毫升，28.0毫摩尔)处理，并将反应混合物在室温搅拌30分钟。使混合物在真空中浓缩，然后用二氯甲烷浓缩2次，以除去残留的HCl。使残留物溶于水中，并以乙醚洗涤2次。将水相以碳酸氢钠处理，直到混合物呈碱性为止，然后以10毫升乙醚洗涤2次。将水相以固体氢氧化钠处理，直到pH＞13为止，并以乙酸乙酯萃取混合物5次。使合并的乙酸乙酯萃取液以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩，得到(±)-8-(4-氯苯基)-5-氮杂螺[2.5]辛-8-醇，为无色粉末(1.1克，87％收率)。MS(ESI+)＝238.1，(M+H)⁺。将异构体经由手性超临界流体色谱进行分离，得到463毫克异构体A与522毫克异构体B。

步骤5：(R)-3-甲基-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)羰基氨基)丁酸

将(R)-2-氨基-3-甲基丁酸(2.01克，17.16毫摩尔)与碳酸(2，5-二氧代吡咯烷-1-基)(2-(三甲基硅基)乙基)酯(4.89克，18.87毫摩尔)在1∶1二噁烷/水(40毫升)中的混合物以三乙胺(3.59毫升，25.7毫摩尔)处理，并将混合物在室温搅拌两天。以饱和硫酸氢钠使混合物酸化，并以乙酸乙酯萃取3次。将合并的有机相以饱和硫酸氢钠、水及盐水洗涤，以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩，得到标题化合物(4.17克，15.96毫摩尔，93％收率)，为琥珀色油状物。

步骤6：(2R)-1-(8-(4-氯苯基)-8-羟基-5-氮杂螺[2.5]辛-5-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸2-(三甲基硅基)乙酯

将8-(4-氯苯基)-5-氮杂螺[2.5]辛-8-醇异构体A(463毫克，1.948毫摩尔)、(R)-3-甲基-2-((2-(三甲基硅基)乙氧基)羰基氨基)丁酸(560毫克，2.142毫摩尔)、EDC(821毫克，4.28毫摩尔)及HOBT(656毫克，4.28毫摩尔)在二氯甲烷(10毫升)中的溶液在室温搅拌30分钟，将混合物以三乙胺(1.086毫升，7.79毫摩尔)处理，并将反应混合物在室温再搅拌30分钟。使反应混合物在真空中浓缩，并使残留物吸收在乙酸乙酯中。将有机相以1N NaOH洗涤3次，以1N HCl洗涤3次，及以盐水洗涤一次，以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩。使残留物在硅胶上纯化，以乙酸乙酯/己烷(25-50％EtOAc)洗脱，得到标题化合物(754毫克，1.567毫摩尔，80％收率)，为无色粘稠油状物。

步骤7：(2R)-2-氨基-1-(8-(4-氯苯基)-8-羟基-5-氮杂螺[2.5]辛-5-基)-3-甲基丁-1-酮

将(2R)-1-(8-(4-氯苯基)-8-羟基-5-氮杂螺[2.5]辛-5-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸2-(三甲基硅基)乙酯(754毫克，1.567毫摩尔)在THF(10毫升)中的溶液以TBAF(1.0M，在THF中)(6.27毫升，6.27毫摩尔)处理，并将混合物在室温搅拌过夜。在真空中浓缩反应混合物，并使残留物在EtOAc与饱和碳酸氢钠之间分配。分离各层，并将有机相以饱和碳酸氢钠洗涤2次，以水洗涤一次，及以盐水洗涤一次。合并的水相以乙酸乙酯萃取一次，并将合并的有机相以水及盐水洗涤，以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩。使残留物吸收在乙腈(100毫升)中，并以20毫升己烷洗涤3次。在真空中浓缩乙腈相，得到标题化合物(420毫克，1.247毫摩尔，80％收率)，为无色玻璃状物。MS(ESI+)＝337.4，(M+H)⁺。

步骤8：实施例565

将(R)-2-氨基-1-(8-(4-氯苯基)-8-羟基-5-氮杂螺[2.5]辛-5-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐(41.7毫克，0.112毫摩尔)、(1R，3R)-3-羟基环戊烷羧酸(16毫克，0.123毫摩尔)、HOBT(37.7毫克，0.246毫摩尔)及三乙胺(78微升，0.559毫摩尔)在二氯甲烷中的混合物以EDC(47.1毫克，0.246毫摩尔)处理，并将反应混合物在室温搅拌过夜。在真空中浓缩混合物，并使残留物吸收在乙酸乙酯中。将有机相以饱和碳酸钠洗涤3次，以1M HCl洗涤3次，及以盐水洗涤一次，以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩。使残留物在12克硅胶柱上经由ISCO纯化，以30毫升/分钟的流速历经35分钟用0-10％MeOH/EtOAc梯度进行洗脱，得到实施例565(33毫克，0.073毫摩尔，65.8％收率)，为无色玻璃状物。MS(ESI+)＝431.13，(M+H-H₂O)⁺。

下表17中的实施例利用实施例565中所描述的操作来制备，在步骤8中以适当的羧酸代替(1R，3R)-3-羟基环戊烷羧酸。

表17

实施例571

3-((2R)-1-(8-(4-氯苯基)-8-羟基-5-氮杂螺[2.5]辛-5-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)苯甲酸

将(2R)-2-氨基-1-(8-(4-氯苯基)-8-羟基-5-氮杂螺[2.5]辛-5-基)-3-甲基丁-1-酮(21毫克，0.062毫摩尔)、3-(甲氧羰基)苯甲酸(12.35毫克，0.069毫摩尔)、HOBT(21.00毫克，0.137毫摩尔)及三乙胺(35微升，0.251毫摩尔)在CH₂Cl₂(2毫升)中的混合物以EDC(26.3毫克，0.137毫摩尔)处理，并将混合物在室温搅拌三天。在真空中浓缩混合物，并使残留物吸收在乙酸乙酯中。将有机相以饱和碳酸钠洗涤3次，以1M HCl洗涤3次，及以饱和氯化钠洗涤一次，以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩。使残留物吸收在THF(1毫升)中，以0.5MLiOH(水溶液)(187微升，0.094毫摩尔)处理，并将混合物在室温搅拌过夜。以1∶1乙腈/水稀释反应混合物，并直接注入制备性HPLC中，以进行纯化，得到实施例571(9.2毫克，0.019毫摩尔，30.4％收率)。

MS(ESI+)＝485.29，(M+H)⁺。

实施例572

(1R，3R)-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-3-羟基环戊烷羧酰胺

步骤1：(R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸叔丁酯

将(S)-4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基哌啶-4-醇(6.3克，26.3毫摩尔)、Boc-D-Val-OH(6.28克，28.9毫摩尔)、EDC(11.08克，57.8毫摩尔)及HOBT(8.85克，57.8毫摩尔)在二氯甲烷(250毫升)中的溶液在室温搅拌30分钟，以三乙胺(14.65毫升，105毫摩尔)处理，并在室温搅拌3小时。将溶液以饱和碳酸钠洗涤3次，以1M HCl洗涤3次，以水洗涤一次，及以盐水洗涤一次，以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩。使残留物在330克硅胶柱上经由ISCO纯化，以100毫升/分钟的流速历经40分钟用0-100％乙酸乙酯/己烷梯度进行洗脱，得到标题化合物(11.0克，25.06毫摩尔，95％收率)，为无色玻璃状物。MS(ESI+)＝439.18，(M+H)⁺。

步骤2：(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐

将(R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸叔丁酯(11克，25.06毫摩尔)在4M HCl二噁烷溶液(100毫升，400毫摩尔)中的溶液在室温搅拌2小时。使混合物在真空中浓缩，用甲醇浓缩3次，然后用二氯甲烷浓缩3次，以除去残留的HCl，得到标题化合物(9.3克，24.78毫摩尔，99％收率)，为无色粉末。MS(ESI+)＝339，(M+H)⁺。

步骤3：实施例572

将(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐(5.77克，15.37毫摩尔)、(1R，3R)-3-羟基环戊烷羧酸(2克，15.37毫摩尔)、HOBT(5.18克，33.8毫摩尔)及三乙胺(10.71毫升，77毫摩尔)在二氯甲烷(100毫升)中的混合物以EDC(6.48克，33.8毫摩尔)处理，并将反应混合物在室温搅拌过夜。在真空中浓缩混合物，并使残留物吸收在乙酸乙酯中。将有机相以饱和碳酸钠洗涤3次，以1M HCl洗涤3次，及以盐水洗涤一次，以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩。使残留物在330克硅胶柱上经由ISCO纯化，以100毫升/分钟的流速历经10分钟用乙酸乙酯洗脱，接着历经35分钟用0-10％甲醇/乙酸乙酯梯度进行洗脱，得到3.2克(1R，3R)-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-3-羟基环戊烷羧酰胺，为无色固体。另一份1.7克含有少量杂质的所要产物也被分离。使此物质接受上述色谱条件，代之以80克硅胶柱及60毫升/分钟的流速，得到为无色固体的额外800毫克(1R，3R)-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-3-羟基环戊烷羧酰胺与700毫克HPLC纯度为88.6％的物质。合并三批物质，并通过手性超临界流体色谱进行纯化，得到实施例572(3.7克，53％收率)。使分析样品以下述方式结晶：在2毫升丙酮中溶解400毫克，添加水，直到溶液变成混浊为止(3毫升)，对混合物进行加热，直到观察到澄清的溶液为止，然后使混合物在室温裸露静置过夜。通过过滤来收集所得到的固体，并在60℃及真空下干燥，得到265毫克结晶粉末。

实施例572A与572B

(1R，3S，4S)-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-3-羟基-4-甲基环戊烷羧酰胺与(1S，3R，4R)-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-3-羟基-4-甲基环戊烷羧酰胺

步骤1：环戊-3-烯羧酸苄酯

在装有回流冷凝管与迪安-斯达克分水器(Dean-Stark trap)的圆底烧瓶中，将环戊-3-烯羧酸(5.2克，46.4毫摩尔)与苄醇(6.03毫升，58.0毫摩尔)在苯(100毫升)中的溶液以硫酸(0.3毫升，5.63毫摩尔)处理，并将混合物加热至回流。历经2.5小时期间，在迪安-斯达克分水器中收集约0.9毫升水。使混合物冷却至室温，并以饱和碳酸钠水溶液(25毫升)处理。分离各层，并将有机相以25毫升饱和碳酸钠洗涤3次，以水洗涤一次，及以盐水洗涤一次，以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩。使残留物在8×10厘米硅胶柱上纯化，以乙酸乙酯/己烷(5％-10％-15％-20％乙酸乙酯)洗脱，得到标题化合物(4.54克，22.45毫摩尔，48.4％收率)，为无色油状物。

步骤2：反式-6-氧杂二环[3.1.0]己烷-3-羧酸苄酯与顺式-6-氧杂二环[3.1.0]己烷-3-羧酸苄酯

标题化合物经由Lizotte，et al.；J.Org.Chem.；1983；48(20)；3594-3597的方法来制备。使环戊-3-烯羧酸苄酯(4.54克，22.45毫摩尔)在二氯甲烷(50毫升)中的溶液冷却至0℃，并历经40分钟逐滴添加m-CPBA(间氯过氧苯甲酸)(7.04克，31.4毫摩尔)在二氯甲烷(50.0毫升)中的溶液，以进行处理。使所得到的混悬液达到至室温，并搅拌过夜。将混合物以20毫升饱和亚硫酸钠处理，并搅拌20分钟。过滤除去固体，以二氯甲烷洗涤，并分离各层滤液。将有机相以饱和亚硫酸钠洗涤，以饱和碳酸氢钠洗涤3次，以水洗涤一次，及以盐水洗涤一次，以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩成3.6克琥珀色油状物。使残留物在5×15厘米硅胶柱上纯化，以乙酸乙酯/己烷(15％EtOAc)洗脱，得到反式-6-氧杂二环[3.1.0]己烷-3-羧酸苄酯(3.4克，64％收率)与顺式-6-氧杂二环[3.1.0]己烷-3-羧酸苄酯(1.2克，24.5％收率)，为无色油状物。

步骤3：(1R，3R，4R)-3-羟基-4-甲基环戊烷羧酸苄酯与(1S，3S，4S)-3-羟基-4-甲基环戊烷羧酸苄酯的外消旋混合物

在已在氩气下火焰干燥的装有磁力搅拌器与两个添液漏斗的50毫升三颈圆底烧瓶中添加氰化亚铜(I)(226毫克，2.52毫摩尔)，并在高真空下抽气过夜，添加THF(5毫升)，且使此混悬液冷却至-78℃。混合物通过以下方法来处理：逐滴添加甲基锂(1.6M，在乙醚中)(3.15毫升，5.04毫摩尔)。在添加完成时，移开冷却浴，并使混悬液缓慢温热，直到观察到均匀溶液为止。使溶液冷却至-78℃，然后缓慢逐滴添加反式-6-氧杂二环[3.1.0]己烷-3-羧酸苄酯(250毫克，1.145毫摩尔)在THF(5毫升)中的溶液，接着一次性添加三氟化硼乙醚合物(0.581毫升，4.58毫摩尔)，以进行处理。将混合物在-78℃搅拌2小时，此时观察到沉淀物，且颜色快速变成鲜明黄色。使反应混合物缓慢达到室温，在此段期间内，颜色开始变成灰色。以饱和NH₄Cl与10％NH₄OH的30毫升9∶1水溶液使反应淬灭，并将混合物搅拌30分钟。过滤所得到的深蓝色混合物，以除去少量沉淀物，并以乙酸乙酯萃取3次。将合并的有机相以水洗涤，接着以盐水洗涤，以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩。使残留物在2×15厘米硅胶柱上纯化，以乙酸乙酯/己烷(25％-50％EtOAc)洗脱，得到(1R，3R，4R)-3-羟基-4-甲基环戊烷羧酸苄酯与(1S，3S，4S)-3-羟基-4-甲基环戊烷羧酸苄酯(225毫克，0.480毫摩尔，84％收率)的外消旋混合物，为无色油状物。

步骤4：(1R，3R，4R)-3-羟基-4-甲基环戊烷羧酸与(1S，3S，4S)-3-羟基-4-甲基环戊烷羧酸的外消旋混合物

将甲醇(10毫升)中的(1R，3R，4R)-3-羟基-4-甲基环戊烷羧酸苄酯与(1S，3S，4S)-3-羟基-4-甲基环戊烷羧酸苄酯的外消旋混合物(217毫克，0.463毫摩尔)与氢氧化钯/碳(65.0毫克，0.463毫摩尔)在真空/氮气下进行脱气，并使混合物在50psi(磅/平方英寸)下氢化过夜。过滤除去催化剂，并以甲醇洗涤。合并滤液，然后在真空中浓缩，得到(1R，3R，4R)-3-羟基-4-甲基环戊烷羧酸与(1S，3S，4S)-3-羟基-4-甲基环戊烷羧酸的外消旋混合物(131毫克，0.454毫摩尔，98％收率)，为无色油状物，其在静置过夜时固化。

步骤5：实施例572A与572B

将(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐(56.0毫克，0.149毫摩尔)、(±)-[(1R，3R，4R)-3-羟基-4-甲基环戊烷羧酸、(1S，3S，4S)-3-羟基-4-甲基环戊烷羧酸(47.3毫克，164毫摩尔)]、HOBT(50.2毫克，0.328毫摩尔)及三乙胺(0.104毫升，0.745毫摩尔)在二氯甲烷(2毫升)中的混合物以EDC(62.9毫克，0.328毫摩尔)处理，并将反应混合物在室温搅拌过夜。在真空中浓缩混合物，并使残留物吸收在酸乙酯中。将有机相以1M NaOH洗涤3次，以1M HCl洗涤3次，及以盐水洗涤一次，以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩。使残留物在2×10厘米硅胶柱上纯化，以50-100％EtOAc/己烷洗脱，接着以5％MeOH/EtOAc洗脱，得到47毫克两种标题化合物的混合物。将两种非对映异构体经由手性超临界流体色谱进行分离，得到20.0毫克实施例572A与15.2毫克实施例572B。对于两种异构体，MS(ESI+)＝465.2，M⁺。

实施例572C与572D

实施例572C与572D利用实施例572A与572B中所描述的操作来制备，在步骤3中以顺式-6-氧杂二环[3.1.0]己烷-3-羧酸苄酯代替反式-6-氧杂二环[3.1.0]己烷-3-羧酸苄酯。对于两种异构体，MS(ESI+)＝465.2，M⁺。

实施例573

N-((R)-1-((4R，5S)-4-(4-氯苯基)-4，5-二羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)环戊烷羧酰胺

步骤1：4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基-1，2，3，6-四氢吡啶

使(R)-4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基哌啶-4-醇和D-(-)-酒石酸(6.2克，15.90毫摩尔)在浓盐酸(150毫升)中的混悬液回流27小时，在此段时间内观察到澄清的溶液。使溶液冷却至0℃，导致白色固体沉淀，并缓慢小心添加固体氢氧化钠，以调整pH至约13。以EtOAc(3×300毫升)萃取水溶液，将合并的有机层以1N NaOH(3×100毫升)，以盐水(100毫升)洗涤一次，以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩，得到标题化合物(3.46克，15.60毫摩尔，98％收率)，为淡黄色油状物。MS(ESI+)＝222/224，(M+H)⁺。

步骤2：4-(4-氯苯基)-5，5-二甲基-5，6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯

将4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基-1，2，3，6-四氢吡啶(3.46克，15.60毫摩尔)在THF(50毫升)中的溶液以一缩二碳酸二叔丁酯(di-tert-butyl dicarbonate)(3.99毫升17.17毫摩尔)处理，导致颜色变成琥珀色，并将混合物在室温搅拌过夜。在真空中浓缩溶液，并使残留物通过洗涤经过硅胶来纯化，以己烷/乙酸乙酯(10％-15％EtOAc)洗脱，得到标题化合物(5.0克，15.54毫摩尔，100％收率)，为无色油状物。MS(ESI+)＝266，(M+H-t-Bu)⁺。

步骤3：(4R，5S)-4-(4-氯苯基)-4，5-二羟基-3，3-二甲基哌啶-1-羧酸叔丁酯

标题化合物经由Sharpless，et al.，J.Org.Chem.57，1992，2768的方法来制备。使AD-MIX-α(2.3克，1.554毫摩尔)与甲磺酰胺(148毫克，1.554毫摩尔)在1∶1叔丁醇/水(16毫升)中的搅拌的混悬液冷却至0℃，然后以4-(4-氯苯基)-5，5-二甲基-5，6-二氢吡啶-1(2H)-羧酸叔丁酯(500毫克，1.554毫摩尔)处理。使混合物达到室温，并搅拌8天。将反应混合物以亚硫酸钠(3克)处理，搅拌30分钟，接着以乙酸乙酯萃取3次。将合并的有机相以1M NaOH洗涤3次，以水洗涤一次，及以盐水洗涤一次，以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩。使残留物在硅胶上纯化，以乙酸乙酯/己烷(10％-20％-50％EtOAc)洗脱，得到标题化合物(196毫克，0.551毫摩尔，35.5％收率)，为无色泡沫状物。MS(ESI+)＝378.26，(M+Na)⁺。

步骤4：(3S，4R)-4-(4-氯苯基)-5，5-二甲基哌啶-3，4-二醇盐酸盐

将(4R，5S)-4-(4-氯苯基)-4，5-二羟基-3，3-二甲基哌啶-1-羧酸叔丁酯(196毫克，0.551毫摩尔)在二噁烷(3毫升)中的溶液以二噁烷中的4N HCl(5毫升，20.00毫摩尔)处理，并将混合物搅拌1小时，此时观察到沉淀物。将混合物以二氯甲烷(5毫升)稀释，以促进搅拌，并将反应混合物再搅拌2小时。使混合物在真空中浓缩，然后用二氯甲烷浓缩3次，以除去残留的HCl与二噁烷。将残留物按原样用于下一步骤中。MS(ESI+)＝256.29，(M+H)⁺。

步骤5：(R)-1-((4R，5S)-4-(4-氯苯基)-4，5-二羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸叔丁酯

将4-(4-氯苯基)-5，5-二甲基哌啶-3，4-二醇盐酸盐(155毫克，0.530毫摩尔)、Boc-D-Val-OH(127毫克，0.584毫摩尔)、HOBT(179毫克，1.167毫摩尔)及三乙胺(0.296毫升，2.122毫摩尔)在二氯甲烷(5毫升)中的混合物以EDC(224毫克，1.167毫摩尔)处理，并将混合物在室温搅拌过夜。在真空中浓缩混合物，并使残留物吸收在乙酸乙酯中。将有机相以1M NaOH洗涤3次，以1M HCl洗涤3次，及以盐水洗涤一次，以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩。使残留物在硅胶上纯化，以乙酸乙酯/二氯甲烷(0％-10％-50％EtOAc)洗脱，得到标题化合物，为无色泡沫状物。455.4(M+H)⁺。

步骤6：(R)-2-氨基-1-((4R，5S)-4-(4-氯苯基)-4，5-二羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐

将(R)-1-((4R，5S)-4-(4-氯苯基)-4，5-二羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸叔丁酯(200毫克，0.440毫摩尔)在二噁烷(3毫升)中的溶液以二噁烷中的4N HCl(3毫升，12.00毫摩尔)处理，并使混合物在室温搅拌6小时。使混合物在真空中浓缩，联用二氯甲烷浓缩3次，以除去残留的二噁烷与HCl。将残留物按原样用于下一步骤中。MS(ESI+)＝355.34，(M+H)⁺。

步骤7：实施例573

将(R)-2-氨基-1-((4R，5S)-4-(4-氯苯基)-4，5-二羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮(22毫克，0.056毫摩尔)、环戊烷羧酸(6.70微升，0.062毫摩尔)、HOBT(18.94毫克，0.124毫摩尔)及TEA(39微升，0.280毫摩尔)在二氯甲烷(2毫升)中的混合物以EDC(23.71毫克，0.124毫摩尔)处理，并将混合物在室温搅拌过夜。以氮气气流吹去溶剂，并使残留物吸收在1∶1乙腈/水中，且经由制备性HPLC纯化，得到实施例573(16.5毫克，0.029毫摩尔，51.9％收率)，为无色粉末。MS(ESI+)＝452.4，(M+H)⁺。

下表18中的实施例利用实施例573中所描述的操作来制备，在步骤3中以AD-Mix-β代替AD-Mix-α，并在步骤7中使用适当的羧酸。

表18

实施例576

3-((R)-1-((4S，5R)-4-(4-氯苯基)-4，5-二羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)苯甲酸

将3-((R)-1-((4S，5R)-4-(4-氯苯基)-4，5-二羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)苯甲酸甲酯(30毫克，0.058毫摩尔)在甲醇(2毫升)中的溶液以1M NaOH(水溶液)(1毫升，1.000毫摩尔)处理，并将混合物搅拌过夜。以1N HCl(1.1毫升)使反应混合物酸化，以1∶1乙腈/水稀释，并直接注入制备性HPLC中，以进行纯化，得到实施例576(17毫克，0.028毫摩尔，47.5％收率)，为无色粉末。MS(ESI+)＝503.3(M+H)⁺。

实施例577

(R)-N-(1-(4-氨基-4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-4-氯苯甲酰胺

步骤1：(R)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-羧酸乙酯

使(R)-4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基哌啶-4-醇(1.96克，8.18毫摩尔)在吡啶(20毫升)中的溶液冷却至0℃，然后逐滴添加氯甲酸乙酯(0.942毫升，9.81毫摩尔)，以进行处理，导致颜色变成橙色。使混合物达到室温，并搅拌过夜。在真空中浓缩反应混合物，并使残留物吸收在乙酸乙酯中，以1M NaOH洗涤3次，以1M HCl洗涤3次，以盐水洗涤一次，以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩，得到标题化合物(2.4克，7.70毫摩尔，94％收率)。将残留物按原样用于下一步骤中。MS(ESI+)＝334，(M+Na)⁺。

步骤2：4-乙酰氨基-4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基哌啶-1-羧酸乙酯

将(R)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-羧酸乙酯(322毫克，1.033毫摩尔)在乙腈(3毫升)中的混悬液以硫酸(0.275毫升，5.16毫摩尔)处理，并将所得到的澄清溶液在室温搅拌过夜。以饱和碳酸钠使反应淬灭，然后以乙酸乙酯萃取3次。将合并的有机相以盐水洗涤，以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩。使残留物在硅胶上纯化，以乙酸乙酯/己烷(10％-25％-100％EtOAc)洗脱，得到标题化合物(245毫克，0.694毫摩尔，67.2％收率)，为无色泡沫状物。

步骤3：4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基哌啶-4-胺

将4-乙酰氨基-4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基哌啶-1-羧酸乙酯(2.04克，5.78毫摩尔)在乙醇(25毫升)中的溶液以5N NaOH(水溶液)(23.13毫升，116毫摩尔)处理，并将混合物加热回流两天。在回流期间，无色皂样固体沉淀。添加水，直到观察到澄清的溶液为止。在减压下除去乙醇，并将含水混合物以乙酸乙酯萃取4次。使合并的有机层以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩，得到标题化合物(1.28克，5.36毫摩尔，93％收率)，为无色粉末。MS(ESI+)＝239，(M+H)⁺。

步骤4：(R)-1-(4-氨基-4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸叔丁酯

将4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基哌啶-4-胺(488毫克，2.044毫摩尔)、Boc-D-Val-OH(444毫克，2.044毫摩尔)、HOBT(626毫克，4.09毫摩尔)及三乙胺(1.140毫升，8.18毫摩尔)在二氯甲烷(5毫升)中的混合物以EDC(784毫克，4.09毫摩尔)处理，并将混合物在室温搅拌过夜。在真空中浓缩混合物，并使残留物吸收在乙酸乙酯中。将有机相以水洗涤3次，以饱和碳酸钠洗涤3次，及以饱和氯化钠洗涤1次，以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩。使残留物在硅胶上纯化，以乙酸乙酯/己烷(25％-50％-100％EtOAc)洗脱，得到标题化合物(845毫克，1.929毫摩尔，94％收率)，为无色玻璃状物。MS(ESI+)＝438.36，M⁺。

步骤5：(R)-2-氨基-1-(4-氨基-4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮二盐酸盐

标题化合物利用实施例571步骤2中所描述的操作，从(R)-1-(4-氨基-4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸叔丁酯来制备。MS(ESI+)＝338.5，(M+H)⁺。

步骤6：实施例577

将(R)-2-氨基-1-(4-氨基-4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮二盐酸盐(330毫克，0.803毫摩尔)、4-氯苯甲酸(126毫克，0.803毫摩尔)、HOBT(246毫克，1.607毫摩尔)及三乙胺(0.672毫升，4.82毫摩尔)在二氯甲烷(3毫升)中的混合物以EDC(308毫克，1.607毫摩尔)处理，并将混合物在室温搅拌过夜。在真空中浓缩混合物，并使残留物吸收在乙酸乙酯中。将有机相以饱和碳酸钠洗涤3次，以1N HCl洗涤3次，及以盐水洗涤一次，以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩。使残留物在硅胶上纯化，以乙酸乙酯/二氯甲烷(10％-25％-50％-100％EtOAc)洗脱，得到实施例577(255毫克，0.535毫摩尔，66.6％收率)，为无色粉末。MS(ESI+)＝476.4，M⁺。将异构体经由手性超临界流体色谱进行分离，得到69毫克异构体A与16毫克异构体B。

下表19中的实施例利用实施例577步骤6中所描述的操作来制备，以适当的羧酸代替4-氯苯甲酸。下列实施例经测试为非对映异构体混合物。

表19

实施例580

(R)-3-(1-(4-氨基-4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)苯甲酸

实施例580利用实施例576中所描述的操作，从(R)-3-(1-(4-氨基-4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)苯甲酸甲酯来制备。MS(ESI+)＝486.3，(M+H)⁺。

实施例581

N-((2R)-1-(4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-3-氨磺酰基苯甲酰胺

步骤1：1-苄基-4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基哌啶-4-醇

将4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基哌啶-4-醇(540毫克，2.252毫摩尔)与苯甲醛(0.274毫升，2.70毫摩尔)在二氯甲烷(15毫升)中的混悬液以三乙酰氧基硼氢化钠(716毫克，3.38毫摩尔)处理，并将混合物在室温搅拌过夜。在真空中浓缩混合物。使残留物吸收在乙酸乙酯中，以1N NaOH洗涤3次，以盐水洗涤一次，以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩，得到标题化合物(696毫克，2.110毫摩尔，94％收率)，为无色油状物。MS(ESI+)＝330.14，(M+H)⁺。

步骤2：二硫代碳酸O-1-苄基-4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基哌啶-4-基酯·S-甲基酯

将1-苄基-4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基哌啶-4-醇(6.9克，20.92毫摩尔)与咪唑(0.214克，3.14毫摩尔)在THF(175毫升)中的溶液以氢化钠(2.510克，62.8毫摩尔)分两份处理。将混合物加热回流过夜。在进行加热后20分钟，观察到剧烈的气体释放，然后使反应混合物达到回流温度。使混合物冷却至室温，并以二硫化碳(23.96毫升，397毫摩尔)处理，导致颜色变成深琥珀色。使反应混合物回到回流温度，保持2小时。使混合物冷却至室温，以碘甲烷(1.570毫升，25.1毫摩尔)处理，并在室温搅拌1.5小时。以盐水使反应淬灭，且以乙酸乙酯萃取混合物3次。将合并的有机相以盐水洗涤，以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩。使残留物在8×10厘米硅胶柱上纯化，以乙酸乙酯/己烷(5％-10％-15％-20％乙酸乙酯)洗脱，得到标题化合物(7.3克，17.38毫摩尔，83％收率)，为琥珀色油状物。MS(ESI+)＝421，(M+H)⁺。

步骤3：1-苄基-4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基哌啶

将二硫代碳酸(O-1-苄基-4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基哌啶-4-基)(S-甲基)酯(7.3克，17.38毫摩尔)、氢化三丁基锡(4.68毫升，17.38毫摩尔)及AIBN(0.856克，5.21毫摩尔)在苯(150毫升)中的溶液以氩气进行脱气，然后回流过夜。使混合物在真空中浓缩。使残留物吸附在少量硅胶上，并在8×15厘米硅胶柱上纯化，以乙酸乙酯/己烷(0％-5％-20％EtOAc)洗脱，在两个洗脱馏分中得到6.2克气味强烈的琥珀色油状物。使油状物吸附在少量硅胶上，并在5×15厘米硅胶柱上纯化，以乙酸乙酯/己烷(0-5％EtOAc)洗脱，得到标题化合物(4.8克，14.38毫摩尔，83％收率)，为无色油状物。

步骤4：4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基哌啶

将1-苄基-4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基哌啶(4.8克，15.29毫摩尔)与氯甲酸1-氯乙酯(1.667毫升，15.45毫摩尔)在二氯乙烷(40毫升)中的溶液在室温搅拌过夜，然后回流3小时。在真空中浓缩溶液。使残留物吸收在甲醇(50毫升)中，使混合物回流过夜。以75毫升1N HCl稀释混合物，并在真空下除去甲醇。将水溶液以乙醚(20毫升)洗涤3次，然后混合物通过以下方法来处理：小心添加饱和碳酸氢钠，以达到pH为8。将水溶液以乙醚(25毫升)洗涤3次，然后混合物通过以下方法来处理：小心添加固体氢氧化钠，以达到pH＞13。以乙酸乙酯(50毫升)萃取水相3次，且使合并的有机相以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩，得到(±)-4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基哌啶(2.44克，10.91毫摩尔，71.3％收率)，为淡黄色油状物，其在静置时固化。MS：(ESI+)＝224.3，(M+H)⁺。将对映异构体经由手性超临界流体色谱进行分离，得到1.09克异构体A与1.05克异构体B。

步骤5：(2R)-1-(4-(4-氯苯基)-3，3-2甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸叔丁酯

将4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基哌啶异构体A(1.1克，4.92毫摩尔)、Boc-D-Val-OH(1.068克，4.92毫摩尔)、HOBT(1.656克，10.82毫摩尔)及三乙胺(3.43毫升，24.58毫摩尔)在二氯甲烷(20毫升)中的混合物以EDC(2.073克，10.82毫摩尔)处理，并将反应混合物在室温搅拌过夜。在真空中浓缩混合物，并使残留物吸收在乙酸乙酯中。将有机相以1M NaOH洗涤3次，以1M HCl洗涤3次，及以盐水洗涤一次，以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩，得到标题化合物(2.25克)。MS(ESI+)＝423.5，(M+H)⁺。

步骤6：(2R)-2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐

标题化合物利用实施例572步骤2中所描述的条件，从(2R)-1-(4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸叔丁酯来制备。MS(ESI+)＝323.39，(M+H)⁺。

步骤7：实施例581

将(2R)-2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐(32毫克，0.089毫摩尔)、3-氨磺酰基苯甲酸(19.71毫克，0.098毫摩尔)、HOBT(30.0毫克，0.196毫摩尔)及三乙胺(62.1微升，0.445毫摩尔)在二氯甲烷中的混合物以EDC(37.6毫克，0.196毫摩尔)处理，并将反应混合物在室温搅拌两天。在真空中浓缩混合物，并使残留物吸收在乙酸乙酯中。将有机相以1M NaOH洗涤3次，以1M HCl洗涤3次，及以盐水洗涤1次，以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩。使残留物经由制备性HPLC纯化，得到实施例581(27毫克，0.053毫摩尔，59.9％收率)，为无色粉末。MS(ESI+)＝506.2，M⁺。

实施例582a

N-((2R)-1-(4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)烟酰胺

将(2R)-2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐(30毫克，0.083毫摩尔)、烟酸(11.31毫克，0.092毫摩尔)、HOBT(28.1毫克，0.184毫摩尔)及三乙胺(58.2微升，0.417毫摩尔)在二氯甲烷中的混合物以EDC(35.2毫克，0.184毫摩尔)处理，并将反应混合物在室温搅拌过夜。在真空中浓缩混合物，并使残留物吸收在乙酸乙酯中。将有机相以水洗涤3次，以1M NaOH洗涤3次，及以盐水洗涤一次，以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩。使残留物经由制备性HPLC纯化。将含有所要产物的洗脱馏分合并，然后冻干，得到无色粉末。NMR显示此物质含有约15％杂质。将此物质在1N NaOH中搅拌，并以乙酸乙酯萃取3次。使合并的有机相以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩。使残留物经由1毫米硅胶预制板纯化，以1∶1EtOAc/己烷洗脱，得到实施例582a(13毫克，0.030毫摩尔，36.4％收率)，为无色膜状物。MS(ESI+)＝428.5，(M+H)⁺。

实施例582b

实施例582a的非对映异构类似物利用实施例581步骤4中制备的4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基哌啶的异构体B来制备。

下表20中的实施例利用实施例581中所描述的操作来制备，在步骤5中以(±)-4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基哌啶代替4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基哌啶异构体A，并在步骤7中使用适当的羧酸。实施例583与584被15％杂质污染，在杂质的结构中，实施例583与584的(±)-4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基哌啶部分被4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基-1，2，3，6-四氢吡啶部分代替，如在实施例586中所显示的那样。

表20

实施例585与586

3-((2R)-1-(4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)苯甲酸甲酯与(R)-3-(1-(4-(4-氯苯基)-5，5-二甲基-5，6-二氢吡啶-1(2H)-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)苯甲酸甲酯

将(2R)-2-氨基-1-(4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐(60毫克，0.167毫摩尔)、3-(甲氧羰基)苯甲酸(33.1毫克，0.184毫摩尔)、HOBT(56.3毫克，0.367毫摩尔)及三乙胺(116微升，0.835毫摩尔)在二氯甲烷中的混合物以EDC(70.4毫克，0.367毫摩尔)处理，并将反应混合物在室温搅拌过夜。在真空中浓缩混合物，并使残留物吸收在乙酸乙酯中。将有机相以饱和碳酸钠洗涤3次，以1M HCl洗涤3次，及以盐水洗涤一次，以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩。使残留物吸收在甲醇中，并经由制备性HPLC纯化，得到两种产物：实施例585(9毫克，0.019毫摩尔，11.1％收率)(MS(ESI+)＝485.4，M⁺)与实施例586(1.7毫克，3.52微摩尔，2.1％收率)(MS＝483.4，M⁺)，为无色粉末。

实施例587

(R)-N-(1-(5-氯-3H-螺[异苯并呋喃-1，4’-哌啶]-1’-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)烟酰胺三氟乙酸盐

步骤1：(2-溴-5-氯苯基)甲醇

使2-溴-5-氯苯甲酸甲酯(4.9克，19.64毫摩尔)在THF(50毫升)中的溶液冷却至0℃，并逐滴添加LAH(氢化锂铝)(1.0M，在THF中)(20.62毫升，20.62毫摩尔)，以进行处理，导致温和的放热及气体释放。使混合物温热至室温，并搅拌3小时。使用Steinhardt操作(参见Fieser & Fieser，Reagents for OrganicSynhesis，584)使反应淬灭。过滤除去所得到的沉淀物，并以乙酸乙酯洗涤。使合并的滤液在真空中浓缩，得到无色油状物，其在静置时固化。使残留物在330克硅胶柱上经由ISCO纯化，历经30分钟以10-100％EtOAc/己烷梯度进行洗脱，得到标题化合物(2.04克，47％收率)，为无色粉末。

步骤2：4-(4-氯-2-(羟基甲基)苯基)-4-羟基哌啶-1-羧酸叔丁酯

使(2-溴-5-氯苯基)甲醇(1.48克，6.68毫摩尔)在无水THF(30毫升)中的溶液冷却至-78℃，并逐滴添加n-BuLi(1.6M，在己烷中)(8.77毫升，14.03毫摩尔)，以进行处理，且将混合物在-78℃搅拌30分钟，在此段期间内观察到浓厚的白色沉淀物。所得到的二价阴离子通过以下方法来处理：逐滴添加4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.465克，7.35毫摩尔)在THF(10毫升)中的溶液，并将混合物在-78℃搅拌1小时，在此段期间内观察到黄色均匀溶液，然后使其温热至室温，并搅拌过夜。以饱和氯化铵使反应淬灭，并将混合物以乙酸乙酯萃取3次。以水及盐水洗涤合并的有机相，接着以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩。将残留物分成两等份，并使每份都在40克硅胶柱上经由ISCO纯化，历经15分钟以10-100％EtOAc/己烷梯度进行洗脱。将得自各操作的含有所要产物的洗脱馏分合并，得到标题化合物(1.4克，4.10毫摩尔，61.3％收率)，为无色泡沫状物。MS(ESI+)＝268，(M+H-tBuOH)⁺。

步骤3：5-氯-3H-螺[异苯并呋喃-1，4’-哌啶]-1’-羧酸叔丁酯

将4-(4-氯-2-(羟基甲基)苯基)-4-羟基哌啶-1-羧酸叔丁酯(1.3克，3.80毫摩尔)与三苯基膦(1.496克，5.70毫摩尔)在THF(20毫升)中的溶液以DEAD(0.903毫升，5.70毫摩尔)处理，并将混合物在室温搅拌过夜。在真空中浓缩混合物，并使残留物在硅胶上纯化，以乙酸乙酯/己烷(5％-25％乙酸乙酯)洗脱，得到标题化合物(1.19克，3.67毫摩尔，97％收率)，为无色油状物。

步骤4：5-氯-3H-螺[异苯并呋喃-1，4’-哌啶]盐酸盐

标题化合物利用实施例571步骤2中所描述的操作，从5-氯-3H-螺[异苯并呋喃-1，4’-哌啶]-1’-羧酸叔丁酯来制备。

步骤5：(R)-1-(5-氯-3H-螺[异苯并呋喃-1，4’-哌啶]-1’-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸叔丁酯

标题化合物利用实施例565步骤6中所描述的操作，从5-氯-3H-螺[异苯并呋喃-1，4’-哌啶]盐酸盐与Boc-D-Val-OH来制备。

步骤6：(R)-2-氨基-1-(5-氯-3H-螺[异苯并呋喃-1，4’-哌啶]-1’-基)-3-甲基丁-1-酮二盐酸盐

标题化合物利用实施例571步骤2中所描述的操作，从(R)-1-(5-氯-3H-螺[异苯并呋喃-1，4’-哌啶]-1’-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸叔丁酯来制备。MS(ESI+)＝323.2，(M+H)⁺。

步骤7：实施例587

将(R)-2-氨基-1-(5-氯-3H-螺[异苯并呋喃-1，4’-哌啶]-1’基)-3-甲基丁-1-酮二盐酸盐(28毫克，0.078毫摩尔)、烟酸(10.55毫克，0.086毫摩尔)、HOBT(26.3毫克，0.171毫摩尔)及三乙胺(54.3微升，0.390毫摩尔)在二氯甲烷中的混合物以EDC(32.9毫克，0.171毫摩尔)处理，并将反应混合物在室温搅拌过夜。在真空中浓缩混合物，并使残留物吸收在乙酸乙酯中。将有机相以水洗涤3次，以1M NaOH洗涤3次，及以盐水洗涤1次，以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩。使残留物经由制备性HPLC纯化，得到实施例587(21毫克，0.039毫摩尔，49.7％收率)，为无色粉末。MS(ESI+)＝428.1，(M+H)⁺。

实施例588

乙酸(1R，3R)-3-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)环戊酯

将(1R，3R)-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-3-羟基环戊烷羧酰胺(20毫克，0.044毫摩尔)在吡啶(0.5毫升)中的溶液以乙酸酐(5.02微升，0.053毫摩尔)处理，并将混合物在室温搅拌过夜。LC/MS分析显示只有50％转化率，因此将混合物以乙酸酐(5.02微升，0.053毫摩尔)处理，并在室温搅拌两天。使反应混合物在真空中浓缩，并使残留物经由制备性HPLC纯化，得到实施例588(11.6毫克，0.024毫摩尔，53.1％收率)，为无色粉末。MS(ESI+)＝493.2，M⁺。

实施例589

3-甲基丁酸(1R，3R)-3-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)环戊酯

将(1R，3R)-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-3-羟基环戊烷羧酰胺(20毫克，0.044毫摩尔)及三乙胺(12微升，0.086毫摩尔)在二氯甲烷(0.5毫升)中的溶液以异戊酰氯(5.41微升，0.044毫摩尔)处理，并将混合物在室温搅拌过夜。LC/MS分析显示只有约50％转化率，因此将混合物以异戊酰氯(5.41微升，0.044毫摩尔)处理，并在室温搅拌四天。使反应混合物在真空中浓缩，并使残留物经由制备性HPLC纯化，得到实施例589(14毫克，0.026毫摩尔，59.0％收率)，为无色粉末。MS(ESI+)＝535.2，M⁺。

实施例590

(R)-N-(1-(4-(4-氟苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)环戊烷羧酰胺

步骤1：4-(4-氟苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-羧酸叔丁酯

使1-溴-4-氟苯(5.32毫升，48.4毫摩尔)在THF(100毫升)中的溶液冷却至-78℃，并通过以下方法来处理：以不使反应混合物的温度超过-60℃的速率逐滴添加己烷中的1.6M BuLi(30.2毫升，48.4毫摩尔)。将混合物在-78℃搅拌30分钟，然后通过以下方法来处理：以不使温度超过-60℃的速率逐滴添加3，3-二甲基-4-氧代哌啶-1-羧酸叔丁酯(5克，22.00毫摩尔)在THF(50毫升)中的溶液。将混合物在-78℃搅拌1.5小时，接着温热至10℃，并以饱和NH₄Cl(50毫升)使反应淬灭。分离各层，且在真空中浓缩有机相。将水溶液以乙酸乙酯(100毫升)萃取，并将有机相与得自原始有机相的残留物合并。将此溶液以水洗涤3次，以盐水洗涤1次，以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩。将残留物以己烷(70毫升)煮解(digest)，并通过过滤来收集所得到的白色粉末，以热己烷洗涤，然后在真空下干燥，得到标题化合物(3.3克，10.20毫摩尔，46.4％收率)。MS(ESI+)＝324.4，(M+H)⁺，250.3，(M-tBuOH)⁺。

步骤2：4-(4-氟苯基)-3，3-二甲基哌啶-4-醇盐酸盐

标题化合物利用实施例571步骤2中所描述的操作，从4-(4-氟苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-羧酸叔丁酯来制备。MS(ESI+)＝224.32，(M+H)⁺。

步骤3：(R)-1-(4-(4-氟苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸叔丁酯

标题化合物利用实施例565步骤6中所描述的操作，从4-(4-氟苯基)-3，3-二甲基哌啶-4-醇盐酸盐与Boc-D-Val-OH来制备。MS(ESI+)＝424.4，(M+H)⁺。

步骤4：(R)-2-氨基-1-(4-(4-氟苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐

标题化合物利用实施例571步骤2中所描述的操作，从(R)-1-(4-(4-氟苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸叔丁酯来制备。MS(ESI+)＝323.4，(M+H)⁺。

步骤5：实施例590

实施例590利用实施例573步骤7中所描述的操作，从(R)-2-氨基-1-(4-(4-氟苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐与环戊烷羧酸来制备。MS(ESI+)＝420.4，M⁺。

实施例591

(R)-N-(1-(4-(4-氟苯基)-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)环戊烷羧酰胺

步骤1：4-(4-氟苯基)-3，3-二甲基-1，2，3，6-四氢吡啶

标题化合物利用实施例573步骤1中所描述的操作，从4-(4-氟苯基)-3，3-二甲基哌啶-4-醇盐酸盐来制备。MS(ESI+)＝206.3，M⁺。

步骤2：4-(4-氟苯基)-3，3-二甲基哌啶

将4-(4-氟苯基)-3，3-二甲基-1，2，3，6-四氢吡啶(450毫克，2.192毫摩尔)、氢氧化钯/碳(308毫克，2.192毫摩尔)及乙酸(1.5毫升，26.2毫摩尔)在甲醇(10毫升)中的混合物在氮气/真空下进行脱气，然后在50psi下氢化两天。过滤除去催化剂，并以甲醇洗涤，且在真空中浓缩滤液，得到标题化合物(442毫克，2.132毫摩尔，97％收率)，为淡黄色油状物。MS(ESI+)＝208.29，(M+H)⁺。

步骤3：(R)-1-(4-(4-氟苯基)-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸叔丁酯

标题化合物利用实施例581步骤5中所描述的操作，从4-(4-氟苯基)-3，3-二甲基哌啶与Boc-D-Val-OH来制备。MS(ESI+)＝351.40，(M-叔丁基)⁺。

步骤4：(R)-2-氨基-1-(4-(4-氟苯基)-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐

标题化合物利用实施例571步骤2中所描述的条件，从(R)-1-(4-(4-氟苯基)-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基甲酸叔丁酯来制备。MS(ESI+)＝307.4，(M+H)⁺。

步骤5：实施例591

标题化合物利用实施例573步骤7中所描述的条件，从(R)-2-氨基-1-(4-(4-氟苯基)-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐与环戊烷羧酸来制备。MS(ESI+)＝404.4，M⁺。

实施例592

3-(2-(苄氧基甲基)-2H-四唑-5-基)-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)苯甲酰胺

步骤1：2-(苄氧基甲基)-2H-四唑

将1H-四唑(2.0克，28.5毫摩尔)与碳酸钾(5.9克，42.7毫摩尔)在DMF(30毫升)中的混悬液以苄基氯甲基醚(5.36克，34.2毫摩尔)处理，并将混合物搅拌4小时。LC/MS分析显示反应并未完成，因此将反应混合物以苄基氯甲基醚(0.5克，3.19毫摩尔)处理，并搅拌过夜。过滤混合物，并使滤液在真空中浓缩。以乙醚(200毫升)稀释残留物，以水(50毫升)洗涤5次，以盐水洗涤一次，以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩。使残留物在6×20毫米硅胶柱上纯化，以20％乙酸乙酯/己烷洗脱，接着以30％乙酸乙酯/己烷洗脱，得到标题化合物(2.39克，44％收率)与1-(苄氧基甲基)-2H-四唑(2.56克，47％收率)。

步骤2：2-(苄氧基甲基)-5-(三丁基锡基)-2H-四唑

在火焰干燥的三颈烧瓶中，使2-(苄氧基甲基)-2H-四唑(2.01克，10.57毫摩尔)与四甲基乙二胺(3.16毫升，21.4毫摩尔)在乙醚(30毫升)中的溶液冷却至-78℃，并通过以下方法来处理：逐滴添加正丁基锂(1.6M，在己烷中，7.3毫升，11.62毫摩尔)，导致溶液的颜色变成深红色。将混合物搅拌10分钟，然后经由导管转移至氯化三丁基锡(2.9毫升，10.57毫摩尔)在乙醚(20毫升)中的已预先冷却至-78℃的溶液内。将反应混合物搅拌45分钟，接着以饱和氯化铵溶液使反应淬灭。使混合物达到室温，并分离各层。将水相以乙酸乙酯萃取3次，并以盐水洗涤合并的有机相，以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩。使残留物在硅胶上纯化，以1％乙酸乙酯/己烷洗脱，然后以5％乙酸乙酯/己烷洗脱，接着以10％乙酸乙酯/己烷洗脱，得到标题化合物(3.0克，60％收率)，为无色油状物。

步骤3：3-(2-(苄氧基甲基)-2H-四唑-5-基)苯甲酸乙酯

将3-溴苯甲酸乙酯(0.47克，2.05毫摩尔)与2-(苄氧基甲基)-5-(三丁基锡基)-2H-四唑在甲苯(20毫升)中的溶液在真空及氩气下进行脱气。在此溶液中添加碘化亚铜(I)(20毫克，0.20毫摩尔)与四(三苯基膦)钯(0)(115毫克，0.10毫摩尔)，并对混合物在真空及氩气下再次脱气。将烧瓶与冷凝器以箔覆盖，以排除光线，并将反应混合物在回流温度加热3小时。在冷却至室温后，过滤混合物，并使滤液在真空中浓缩。使残留物在3.5×12厘米硅胶柱上纯化，以5％乙酸乙酯/己烷洗脱，然后以10％乙酸乙酯/己烷洗脱，接着以15％乙酸乙酯/己烷洗脱，得到标题化合物，为无色油状物，其含有5％三丁基锡杂质。MS(ESI+)＝339.22，(M+H)⁺。将油状物按原样用于下一步骤中。

步骤4：3-(2-(苄氧基甲基)-2H-四唑-5-基)苯甲酸

将3-(2-(苄氧基甲基)-2H-四唑-5-基)苯甲酸乙酯(653毫克，1.93毫摩尔)在THF(10毫升)中的溶液以0.5M氢氧化锂水溶液(5.8毫升，2.9毫摩尔)处理，并将反应混合物搅拌过夜。LC/MS分析显示反应尚未完成，因此将混合物以0.5M氢氧化锂水溶液(1毫升，0.5毫摩尔)处理，并将反应混合物再搅拌6小时。在减压下除去THF，并将水溶液以1N HCl(3.5毫升，3.5毫摩尔)处理。以乙酸乙酯萃取混合物3次，且使合并的有机相以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩，得到标题化合物，为无色粉末，将其按原样用于下一步骤中。

步骤5：实施例592

将(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐(35毫克，0.09毫摩尔)、3-(2-(苄氧基甲基)-2H-四唑-5-基)苯甲酸(29毫克，0.09毫摩尔)、HOBT(25毫克，0.19毫摩尔)及三乙胺(0.052毫升，0.37毫摩尔)在二氯甲烷(2毫升)中的混合物以EDC(36毫克，0.19毫摩尔)处理，并将反应混合物在室温搅拌过夜。将反应混合物直接施加于2×10厘米硅胶柱，并使产物以二氯甲烷洗脱，然后以10％至20％乙酸乙酯/二氯甲烷洗脱，得到实施例592(45毫克，80％收率)，为无色玻璃状物。MS(ESI+)＝631.3，M⁺。

实施例593

N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-3-(2H-四唑-5-基)苯甲酰胺

将3-(2-(苄氧基甲基)-2H-四唑-5-基)-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)苯甲酰胺(34毫克，0.05毫摩尔)在甲醇(1毫升)中的溶液以6M HCl(0.2毫升，1.2毫摩尔)处理，并将混合物加热至50℃，此时起始原料沉淀。以甲醇(3毫升)与6M HCl(0.2毫升，1.2毫摩尔)稀释混合物，并将反应混合物在50℃加热10小时。在真空中浓缩混合物，并使残留物在硅胶上纯化，以25％至50％乙酸乙酯/己烷洗脱，然后以100％乙酸乙酯洗脱，接着以5％至10％至15％甲醇/乙酸乙酯洗脱，得到实施例593(19毫克，75％收率)，为无色玻璃状物。MS(ESI+)＝511.2，M⁺。LC/MS分析显示88％纯度。

实施例594

2-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)苯甲酸

将(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐(32毫克，0.09毫摩尔)与邻苯二甲酸酐(14毫克，0.09毫摩尔)在二氯甲烷(1毫升)中的溶液在室温搅拌过夜。在真空中浓缩混合物，并使残留物经由制备性HPLC纯化，得到实施例594(25毫克，57％收率)，为无色粉末。MS(ESI+)＝487.18，M⁺。

实施例595

N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-3-(羟基甲基)苯甲酰胺

步骤1：3-(羟基甲基)苯甲酸甲酯

使3-(甲氧羰基)苯甲酸(1.05克，5.83毫摩尔)在THF(25毫升)中的溶液冷却至0℃，并通过以下方法来处理：以不使温度超过5℃的速率逐滴添加THF中的2.0M硼烷-二甲硫复合物(14.57毫升，29.1毫摩尔)。将混合物在0℃搅拌15分钟，然后使其温热至室温，并搅拌4小时。使反应混合物冷却至0℃，并以添加小块冰使反应淬灭，导致剧烈的气体释放。当气体释放已停止时，将混合物以盐水稀释，并以乙酸乙酯萃取3次。将合并的有机相以稀的漂白剂(bleach)洗涤3次，以除去残留的二甲硫，以饱和碳酸钠洗涤3次，以除去任何未反应的酸，以水洗涤1次，及以盐水洗涤1次，以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩，得到标题化合物(845毫克，5.09毫摩尔，87％收率)，为无色油状物。

步骤2：3-(羟基甲基)苯甲酸

将3-(羟基甲基)苯甲酸甲酯(845毫克，5.09毫摩尔)在甲醇(15毫升)中的溶液以1M NaOH(水溶液)(15.300毫升，15.30毫摩尔)处理，并将反应混合物在室温搅拌过夜。在减压下除去甲醇，并将残留的水溶液以10毫升乙醚洗涤3次。以浓HCl使水相酸化至pH为1，然后以20毫升乙酸乙酯萃取3次。将合并的有机相以盐水洗涤，以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩，得到标题化合物(680毫克，4.47毫摩尔，88％收率)，为无色粉末。MS(ESI+)＝153.10，(M+H)⁺。

步骤3：实施例595

实施例595利用实施例573步骤7中所描述的操作，从(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐与3-(羟基甲基)苯甲酸来制备。MS(ESI+)＝473.4，(M+H)⁺。

实施例596

乙酸3-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)苄酯

将N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-3-(羟基甲基)苯甲酰胺(37毫克，0.078毫摩尔)在吡啶(0.6毫升)中的溶液以乙酸酐(0.015毫升，0.156毫摩尔)处理，并将混合物在室温搅拌过夜。在真空中浓缩反应混合物，并使残留物经由制备性HPLC纯化，得到实施例596(25毫克，0.049毫摩尔，62.1％收率)，为无色粉末。MS(ESI+)＝515.4，M⁺。

实施例597

2-(3-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)苯基)-2-甲基丙酸

步骤1：2-(3-溴苯基)乙酸甲酯

使2-(3-溴苯基)乙酸(2.64克，12.28毫摩尔)在8∶2苯/甲醇(50毫升)中的溶液冷却至0℃，然后通过以下方法来处理：历时10分钟逐滴添加己烷中的2.0M TMS-重氮甲烷(6.14毫升，12.28毫摩尔)。使混合物达到室温，并搅拌7天。在真空中浓缩混合物，并使残留物在硅胶上纯化，以10％乙酸乙酯/己烷洗脱，得到标题化合物(1.96克，8.56毫摩尔，69.7％收率)，为无色油状物。

步骤2：2-(3-溴苯基)-2-甲基丙酸甲酯

将2-(3-溴苯基)乙酸甲酯(502毫克，2.191毫摩尔)在THF(10毫升)中的溶液冷却至-78℃，并以不使温度超过-60℃的速率逐滴添加甲苯中的0.5M六甲基二硅烷叠氮化钾(potassium hexamethyldisilazide)(4.82毫升，2.411毫摩尔)。将混合物在-78℃搅拌20分钟，温热至-30℃，搅拌20分钟，再冷却至-78℃，并以碘甲烷(0.206毫升，3.29毫摩尔)使反应淬灭。使反应混合物达到室温，并搅拌1小时。使混合物再冷却至-78℃，且第二次重复上述添加操作。使混合物达到室温，并搅拌过夜。以水使反应淬灭，然后以乙酸乙酯萃取3次。将合并的有机相以盐水洗涤，以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩。使残留物在硅胶上纯化，以10％乙酸乙酯/己烷洗脱，得到标题化合物(513毫克，1.995毫摩尔，91％收率)，为无色油状物。

步骤3：3-(1-甲氧基-2-甲基-1-氧代丙-2-基)苯甲酸甲酯

将2-(3-溴苯基)-2-甲基丙酸甲酯(260毫克，1.011毫摩尔)、二(三苯基膦)氯化钯(II)(71.0毫克，0.101毫摩尔)及Hunig碱(0.353毫升，2.022毫摩尔)在甲醇(5毫升)中的混合物在50毫升可密封反应瓶中经由气体分散管(gasdispersion tube)以一氧化碳(28.3毫克，1.011毫摩尔)处理两分钟，将瓶密封，并将混合物在80℃加热过夜。使反应混合物冷却至室温，并过滤除去催化剂，且以甲醇洗涤。在真空中浓缩滤液，并使残留物在2×15厘米硅胶柱上纯化，以乙酸乙酯/己烷(5％-10％-15％-20％乙酸乙酯)洗脱，得到标题化合物(54毫克，0.229毫摩尔，22.60％收率)，为无色油状物。

步骤4：3-(2-羧基丙-2-基)苯甲酸

将3-(1-甲氧基-2-甲基-1-氧代丙-2-基)苯甲酸甲酯(54毫克，0.229毫摩尔)在甲醇(2毫升)中的溶液以1M NaOH(水溶液)(1毫升1.000毫摩尔)处理，并将混合物在室温搅拌过夜。将混合物以1.0N HCl(水溶液)(1.2毫升)处理，并在真空中除去甲醇。使残留的含水混合物冷冻干燥，得到标题化合物与氯化钠的混合物，为无色粉末，将其按原样用于下一步骤中。

步骤5：实施例597

将(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐(78毫克。208毫摩尔)、3-(2-羧基丙-2-基)苯甲酸(47.7毫克，229毫摩尔)、HOBT(70.1毫克，0.458毫摩尔)及三乙胺(0.145毫升，1.040毫摩尔)在二氯甲烷(1毫升)中的混合物以EDC(88毫克，0.458毫摩尔)处理，并将混合物在室温搅拌过夜。在真空中浓缩混合物，并使残留物吸收在乙酸乙酯中。将有机相以水洗涤3次，以1M HCl洗涤3次，及以盐水洗涤一次，以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩。使残留物经由制备性HPLC纯化。合并含有单偶联产物的洗脱馏分，然后冻干，得到无色粉末，其为两种区域异构体(regioisomer)的2∶1混合物。合并含有二偶联产物的洗脱馏分，然后冻干，得到N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-3-(1-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基)-2-甲基-1-氧代丙-2-基)苯甲酰胺(13毫克，0.015毫摩尔，7.35％收率)，为无色粉末。使单偶联产物的2∶1混合物经由1毫米硅胶预制板纯化，以5％MeOH/CH₂Cl₂洗脱3次，得到实施例597(16毫克，0.027毫摩尔，13.09％收率)，为琥珀色固体。MS(ESI+)＝529.5，M⁺。此物质被10％3-(1-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基)-2-甲基-1-氧代丙-2-基)苯甲酸污染。

实施例598

(R)-2-(6-叔丁基嘧啶并[5，4-d]嘧啶-4-基氨基)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮

步骤1：5-溴-2-叔丁基-嘧啶-4-羧酸

将乙醇钠在乙醇中的22％溶液(53毫升，165毫摩尔)逐滴添加至叔丁基脒盐酸盐(20.0克，146毫摩尔)在乙醇(100毫升)中的磁力搅拌的混悬液内。在添加完成时，使黄色混悬液温热至50℃，移开加热套，并以不使温度超过55℃的速率逐滴添加黏溴酸(mucobromic acid)(15.7克，61毫摩尔)在乙醇(50毫升)中的溶液。当此添加完成时，逐滴添加乙醇钠在乙醇中的22％溶液(32毫升，98毫摩尔)，然后使混合物冷却至室温。过滤此混悬液，将固体以乙醇(2×20毫升)洗涤，然后在真空中浓缩合并的滤液。将如此得到的残留物在2N HCl水溶液(30毫升)中搅拌。通过过滤来收集所得到的固体，以冰冷的水(2×20毫升)洗涤，并风干，得到12.1克米黄色粉末，为产物。MS(ESI+)＝259，261，(M+H)⁺。收率＝76％。

步骤2：5-溴-2-叔丁基-嘧啶-4-羧酸甲酯

将三甲硅基重氮甲烷的2.0M己烷溶液(11.8毫升，23.62毫摩尔)逐滴添加至5-溴-2-叔丁基-嘧啶-4-羧酸(6.12克，23.62毫摩尔)在9∶1苯/甲醇(100毫升)中的搅拌的溶液内，并将反应混合物搅拌2天。TLC分析显示反应完成，因此使混合物在真空中浓缩。使残留物溶于乙酸乙酯(100毫升)中，以水(3×20毫升)洗涤，以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩。在硅胶上纯化，以10％乙酸乙酯/己烷洗脱，得到5.2克无色油状物，为产物。MS(ESI+)＝273/275，(M+H)⁺。收率＝81％。

步骤3：5-叔丁氧羰基氨基-2-叔丁基-嘧啶-4-羧酸甲酯

将装有氨基甲酸叔丁酯(140毫克，1.2毫摩尔)、碳酸铯(456毫克，1.4毫摩尔)、4，5-二(二苯基膦基)-9，9-二甲基苍耳烷(18毫克，0.03毫摩尔)及三(二(苯亚甲基)丙酮)二钯(0)(19毫克，0.02毫摩尔)的火焰干燥的反应管在真空下抽真空，然后以氩气回充填。添加二噁烷(2毫升)与5-溴-2-叔丁基-嘧啶-4-羧酸甲酯(273毫克，1.0毫摩尔)，并使混合物在真空下脱气。接着将管以氩气回充填，密封，并在100℃加热2小时。LC/MS分析显示起始溴化物完全消耗。将混合物以二氯甲烷(20毫升)稀释，过滤，以除去固体，然后在真空中浓缩。使残留物在硅胶上纯化，以10％乙酸乙酯/庚烷洗脱，得到152毫克白色固体，为产物。MS(ESI+)＝310，(M+H)⁺。收率＝50％。

步骤4：5-氨基-2-叔丁基-嘧啶-4-羧酸甲酯盐酸盐

使5-叔丁氧羰基氨基-2-叔丁基-嘧啶-4-羧酸甲酯(2.4克，7.75毫摩尔)溶于HCl在二噁烷中的4M溶液(30毫升)内。在搅拌10分钟后，浓厚的白色固体沉淀。将反应混合物搅拌过夜，在此段时间内，混合物变成均匀琥珀色溶液。在真空中浓缩，并使残留物用甲苯(2×50毫升)浓缩，接着用二氯甲烷(3×50毫升)浓缩，以除去过量的HCl。将所得到的1.85克黄色固体用于下一步骤中而无需进一步纯化。MS(ESI+)＝210，(M+H)⁺。

步骤5：6-叔丁基-嘧啶并[5，4-d]嘧啶-4-醇

将5-氨基-2-叔丁基-嘧啶-4-羧酸甲酯盐酸盐(1.1克，4.48毫摩尔)与甲脒乙酸盐(1.86克，17.90毫摩尔)在2-乙氧基乙醇(20毫升)中的混合物加热回流5小时。LC/MS分析显示反应基本上完成，因此使混合物冷却至室温，然后在真空中浓缩。使残留物在硅胶上纯化，以乙酸乙酯洗脱，1％甲醇/乙酸乙酯洗脱，接着以2％甲醇/乙酸乙酯洗脱，得到1.06克米黄色固体，为产物。MS(ESI+)＝205，(M+H)⁺。收率＝94％。

步骤6：2-叔丁基-8-氯-嘧啶并[5，4-d]嘧啶

使6-叔丁基-嘧啶并[5，4-d]嘧啶-4-醇(210毫克，1.03毫摩尔)溶于磷酰氯(10毫升)中，并将混合物加热回流4小时。使溶液在真空中浓缩，然后用二氯甲烷(3×50毫升)浓缩，以除去过量的磷酰氯。将残留物在饱和碳酸氢钠(50毫升)中搅拌10分钟，接着以乙酸乙酯(3×30毫升)萃取。将合并的有机相以水(30毫升)洗涤，接着以盐水(30毫升)洗涤，以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩。使残留物在硅胶上纯化，以50％乙酸乙酯/庚烷洗脱，得到150毫克白色固体，为产物。NMR(500MHz，CDCl₃)δ9.61(s，1H)，9.15(s，1H)，1.52(s，9H)。

步骤7：实施例598

将(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐(17毫克，0.04毫摩尔)、2-叔丁基-8-氯-嘧啶并[5，4-d]嘧啶(10毫克，0.04毫摩尔)及三乙胺(0.016毫升，0.11毫摩尔)在异丙醇(1毫升)中的溶液在室温搅拌过夜。将溶液以1∶1乙腈/水(2毫升)稀释，并使混合物经由制备性HPLC纯化，得到实施例598，为淡黄色粉末。MS(ESI+)＝526.3，M⁺。

实施例599

(R)-2-(8-溴喹唑啉-4-基氨基)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮三氟乙酸盐

步骤1：8-溴喹唑啉-4-醇

将甲脒乙酸盐(836毫克，8.03毫摩尔)与2-氨基-3-溴苯甲酸(578毫克，2.68毫摩尔)在2-乙氧基乙醇(15毫升)中的溶液加热回流18小时。冷却至室温，此时观察到沉淀物。以乙醚(15毫升)稀释，并搅拌20分钟。通过真空过滤来收集固体，以2-乙氧基乙醇(5毫升)洗涤，接着以乙醚洗涤，然后风干，得到标题化合物(445毫克，1.977毫摩尔，73.9％收率)，为黄褐色粉末。MS(ESI+)＝225.1/227.1，(M+H)⁺。

步骤2：8-溴-4-氯喹唑啉

将8-溴喹唑啉-4-醇(410毫克，1.822毫摩尔)在磷酰氯(15.000毫升，161毫摩尔)中的混悬液加热至回流。在回流45分钟后，观察到澄清琥珀色溶液。再回流30分钟，在真空中浓缩，及用二氯甲烷浓缩2次，以除去残留的磷酰氯。使残留物吸收在乙酸乙酯(50毫升)中，小心添加饱和碳酸氢钠，以进行处理，并将此混合物搅拌5分钟，直到气体释放已停止。分离各层，并以乙酸乙酯(20毫升)萃取水相。将合并的有机相以饱和碳酸氢钠、水及饱和氯化钠洗涤，以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩，得到标题化合物(442毫克，1.815毫摩尔，100％收率)，为黄褐色粉末，将其按原样用于下一步骤中。

步骤3：实施例599

将(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐(35毫克，0.093毫摩尔)与N，N-二异丙基乙胺(0.049毫升，0.280毫摩尔)在2-丙醇(1毫升)中的溶液以8-溴-4-氯喹唑啉(24.9毫克，0.103毫摩尔)处理，并将混合物在室温搅拌过夜。以1∶1乙腈/水稀释反应混合物，并直接注入制备性HPLC中，以进行纯化。使含有所要产物的洗脱馏分冻干，得到38毫克无色粉末，其通过NMR/LCMS确定纯度为约80％。使粉末经由HPLC再次进行纯化，得到实施例599(24毫克，0.036毫摩尔，39.0％收率)。MS(ESI+)＝545.13/547.24，M⁺。

实施例600

N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-3-(N，N-二甲基氨磺酰基)苯甲酰胺

步骤1：3-(N，N-二甲基氨磺酰基)苯甲酸

将3-(氯磺酰基)苯甲酸(152毫克，0.689毫摩尔)在二氯甲烷(2毫升)中的溶液以THF中的2.0M二甲胺(1.137毫升2.274毫摩尔)处理，并将混合物在室温搅拌过夜。以1N HCl使反应淬灭，并以EtOAc萃取3次。将合并的有机相以1N HCl洗涤，接着以盐水洗涤，以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩，得到标题化合物(138毫克，0.602毫摩尔，87％收率)。MS(ESI+)＝230.18，(M+H)⁺。

步骤2：实施例600

实施例600利用实施例573步骤7中所描述的操作，从(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐与3-(N，N-二甲基氨磺酰基)苯甲酸来制备。MS(ESI+)＝550.38，M⁺。

实施例601

3-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-1-氧代丙-2-基氨甲酰基)苯甲酸

步骤1：(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)丙-1-酮盐酸盐

将(S)-4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基哌啶-4-醇(107毫克，0.45毫摩尔)、Boc-D-Ala-OH(叔丁氧羰基-D-丙氨酸-OH)(93毫克，0.49毫摩尔)、HOBT(133毫克，0.98毫摩尔)及三乙胺(0.25毫升，1.78毫摩尔)在二氯甲烷(2毫升)中的混合物以EDC(187毫克，0.98毫摩尔)处理，并将反应混合物在室温搅拌过夜。溶剂用氮气气流蒸发，并使残留物吸收在乙酸乙酯中。将有机相以1M NaOH洗涤3次，以1M HCl洗涤3次，及以盐水洗涤一次，以硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩。使残留物溶于二噁烷(2毫升)中，并以二噁烷中的4N HCl(2毫升，8毫摩尔)处理。将混合物搅拌4小时，然后在真空中浓缩。使残留物吸收在二氯甲烷(10毫升)中，然后在真空中浓缩混合物，如次两次，以除去残留的HCl，得到标题化合物。MS(ESI+)＝311.3，(M+H)⁺。

步骤2：3-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-1-氧代丙-2-基氨甲酰基)苯甲酸甲酯

标题化合物利用实施例572步骤5中所描述的条件，从(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)丙-1-酮盐酸盐(47毫克，0.14毫摩尔)与间苯二甲酸单甲酯(27毫克，0.16毫摩尔)来制备。MS(ESI+)＝473.3，M⁺。

步骤3：实施例601

将3-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-1-氧代丙-2-基氨甲酰基)苯甲酸甲酯(33毫克，0.07毫摩尔)在THF(1毫升)中的溶液以0.5M氢氧化锂水溶液处理，并将混合物在室温搅拌过夜。使反应混合物经由制备性HPLC纯化，得到实施例601(24毫克，75％收率)，为无色粉末。MS(ESI+)＝459.3，M⁺。

实施例602

(R)-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-3-氧代环戊烷羧酰胺

实施例602利用实施例572A与572B步骤5中所描述的操作，从以下物质来制备：经由Curry，et al.，J.Med.Chem.1988，31，861的方法所制备的(R)-3-氧代环戊烷羧酸(304毫克，2.37毫摩尔)与(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐(810毫克，2.16毫摩尔)。MS(ESI+)＝449.5，M⁺。

实施例603

(1R)-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-3-羟基-3-甲基环戊烷羧酰胺

步骤1：(1R)-3-羟基-3-甲基环戊烷羧酸

使经由Curry，et al.，J.Med.Chem.1988，31，861.的方法所制备的(R)-3-氧代环戊烷羧酸(215毫克，1.678毫摩尔)在THF(10毫升)中的溶液冷却至-78℃，然后以不使温度超过-60℃的速率逐滴添加乙醚中的1.6M甲基锂(2.927毫升，4.68毫摩尔)，以进行处理。将混合物在-78℃搅拌2小时，接着温热至0℃，并以1N HCl使反应淬灭。分离各层，并将水相以乙酸乙酯萃取3次。使水相在真空中浓缩，然后用异丙醇浓缩3次，以除去全部的水。残留物的NMR显示其为多种物质的复杂混合物。将此物质按原样用于下一步骤中。

步骤2：实施例603

实施例603利用实施例573步骤7中所描述的操作，从(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐与步骤1中制备的含有(1R)-3-羟基-3-甲基环戊烷羧酸的多种物质混合物来制备。MS(ESI+)＝465.5，M⁺。

实施例604

N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-6-(三氟甲基)吡啶并[3，2-d]嘧啶-4-羧酰胺

步骤-1：5-氨基-6-碘-2-(三氟甲基)吡啶

在8克(0.0494摩尔，1当量)5-氨基-2-(三氟甲基)吡啶在160毫升水与160毫升甲醇中的溶液内添加8毫升浓HCl，接着添加8.2克(0.0494摩尔，1当量)碘化钾与5.2克(0.0243摩尔，0.5当量)碘酸钾，并在室温搅拌48小时。以10％NaOH溶液使反应混合物碱化，并以乙酸乙酯萃取。将有机层以盐水洗涤，然后浓缩。使所得到的粗产物通过60-120硅胶纯化，使用石油醚中的10％乙酸乙酯，得到12.5克(87.9％)灰白色固体。结果：¹H NMR(CDCl₃，400MHz)：6.94(1H，d)，7.42(1H，d)，4.0-5.0(2H，bs)。MS 289(M+H)⁺。

步骤-2：5-氨基-6-氰基-2-(三氟甲基)吡啶

使12.5克(0.434摩尔，1当量)5-氨基-6-碘-2-(三氟甲基)吡啶溶于125毫升无水DMF中，并以氮脱气5分钟。添加6.1克(0.519摩尔，1.2当量)氰化锌与5克(0.1当量)Pd(PPh₃)₄，并在100℃加热过夜。以水使反应混合物淬灭，并以乙酸乙酯萃取。将有机层以盐水洗涤，然后浓缩。使所得到的粗产物通过60-120硅胶纯化，使用石油醚中的15％乙酸乙酯，得到7克(86.31％)淡黄色固体。¹H NMR(CDCl₃，400MHz)：4.85(2H，bs)，7.25(1H，d)，7.62(1H，d)。MS188(M+H)⁺。

步骤-3：3-氨基-6-三氟甲基-吡啶-2-羧酰胺

使7克(0.0374摩尔，1当量)5-氨基-6-氰基-2-(三氟甲基)吡啶溶于106毫升90％硫酸中，并在70℃加热3小时。使反应混合物冷却至室温，并以冰水使反应淬灭，且以乙酸乙酯萃取。将有机层以盐水洗涤，然后浓缩。对所得到的固体产物进行洗涤，得到6.8克(89.47％)灰白色固体。¹H NMR(CDCl₃，400MHz)5.5(1H，bs)，7.1(1H，d)，7.53(1H，d)，7.80(1H，bs)。MS 206(M+H)⁺。

步骤-4：6-三氟甲基-3H-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4-酮

将170毫升原甲酸三乙酯中的6.8克(0.0332摩尔，1当量)3-氨基-6-三氟甲基-吡啶-2-羧酰胺在145℃及氮气下加热8小时。在减压下除去过量的原甲酸三乙酯，并将所得到的固体产物以石油醚洗涤，然后在真空下干燥，得到6.8克(95.37％)白色固体。¹H NMR(CDCl₃，400MHz)：8.11(1H，d)，8.35(1H，d)，12.28(1H，bs)。MS 216(M+H)⁺。

步骤-5：4-氯-6-(三氟甲基)吡啶并[3，2-d]嘧啶

标题化合物利用实施例599步骤2中所描述的操作，从三氟甲基-3H-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4-酮来制备。将6-三氟甲基-3H-吡啶并[3，2-d]嘧啶-4-酮(1.0克，4.7毫摩尔)的POCl₃(9.3毫升)混悬液加热回流4小时，在此时间内，琥珀色混悬液变成澄清深蓝色溶液。使反应混合物冷却至室温，并在减压下浓缩。使残留物用二氯甲烷浓缩3次，以除去残留的POCl₃。使残留物在1∶1EtOAc与饱和碳酸氢钠(28毫升)之间分配。将混合物搅拌，直到观察到气体释放停止。使此混悬液经过硅藻土填充柱过滤。分离各层滤液，并将有机相先后以饱和碳酸氢钠与饱和氯化钠洗涤，以硫酸镁干燥，及在减压下浓缩，得到半纯的产物，为紫色固体。未进行进一步纯化。粗产物的纯度大于90％(通过分析性HPLC测定)。MS：ES+234.11(M+H，100％)。

步骤6：实施例604

实施例604利用实施例598步骤7中所描述的操作，从(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐与4-氯-6-(三氟甲基)吡啶并[3，2-d]嘧啶来制备。MS(ESI+)＝536.3，M⁺。

实施例605

3-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基)苯甲酸乙酯

步骤1：(R)-2-(3-(乙氧羰基)苯基氨基)-3-甲基丁酸

将3-碘苯甲酸乙酯(857毫克，3.10毫摩尔)、DMF(5毫升)、碘化亚铜(I)(65毫克，0.34毫摩尔)、N1，N2-二甲基氨基乙烯(62.9毫克，0.714毫摩尔)、D-缬氨酸(400毫克，3.41毫摩尔)及碳酸钾(429毫克，3.10毫摩尔)加入烧瓶中。将烧瓶抽真空，然后以氮气充填，历经数次循环，以除去氧气，接着将反应混合物在氮气下加热至140℃，保持4小时。使反应混合物冷却，蒸发除去DMF，并添加1N HCl。使反应混合物在EtOAc与水之间分配，并将有机层以硫酸钠干燥，过滤，然后浓缩，得到褐色油状物。将其用于下一步骤而无需进一步纯化。

步骤2：实施例605

将(S)-4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基哌啶-4-醇(106毫克，0.44毫摩尔)、(R)-2-(3-(乙氧羰基)苯基氨基)-3-甲基丁酸(167毫克，0.44毫摩尔)、DIPEA(228毫克，1.76毫摩尔)、HOBT(59.5毫克，0.44毫摩尔)、EDC(101毫克，0.53毫摩尔)及DMF(2毫升)在室温搅拌过夜。使反应混合物在EtOAc与水之间分配，使有机物质以硫酸钠干燥，过滤，浓缩，并使残留物通过制备性反相HPLC(MeOH/水/TFA)纯化，得到实施例605，为白色固体(109毫克，50.7％收率)。M+H＝487.19。

实施例606

3-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基)苯甲酸

将3-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基)苯甲酸乙酯(92毫克)、MeOH及1N氢氧化钠在室温搅拌过夜。浓缩反应混合物，并使残留物通过制备性反相HPLC(MeOH/水/TFA)纯化，得到实施例606，为白色固体(83.3毫克，95.7％收率)。

实施例607

(R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-2-(吡啶-3-基氨基)丁-1-酮

步骤1：(R)-3-甲基-2-(吡啶-3-基氨基)丁酸

将3-碘吡啶(525毫克，2.58毫摩尔)、D-缬氨酸(250毫克，2.13毫摩尔)、碘化亚铜(I)(40.6毫克，0.213毫摩尔)、二甲氨基乙醇(400毫克，4.49毫摩尔)、磷酸三钾(1359毫克，6.40毫摩尔)及水(2毫升)在80℃搅拌过夜。将反应混合物以EtOAc洗涤，然后浓缩水部分。将残留物以MeOH配成浆液，然后浓缩MeOH部分。使用制备性反相HPLC(MeOH/水/TFA)来分离产物，联用于下一步骤而无需进一步纯化。

步骤2：实施例607

将(R)-3-甲基-2-(吡啶-3-基氨基)丁酸(162毫克，0.83毫摩尔)、(S)-4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基哌啶-4-醇(200毫克，0.83毫摩尔)、EDC(320毫克，1.67毫摩尔)、HOBT(113毫克，0.83毫摩尔)、DIPEA(431毫克，3.34毫摩尔)及DMF(4毫升)在室温搅拌过夜。实施例607利用制备性反相HPLC被分离为绿色固体(22.5毫克，6.5％收率)。M+H＝416.18。

实施例608

(R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-2-(嘧啶-5-基氨基)丁-1-酮

步骤1：(R)-3-甲基-2-(嘧啶-5-基氨基)丁酸

将5-溴嘧啶(407毫克，2.56毫摩尔)、D-缬氨酸(250毫克，2.13毫摩尔)、碘化亚铜(I)(40.6毫克，0.213毫摩尔)、二甲氨基乙醇(400毫克，4.49毫摩尔)、磷酸三钾(1359毫克，6.40毫摩尔)及水(2毫升)在80℃搅拌数小时。将1N盐酸(3毫升)添加至反应混合物中，接着添加TFA(3毫升)，并将反应混合物以EtOAc萃取。使有机部分以硫酸钠干燥，过滤，浓缩，且产物利用制备性反相HPLC被分离为褐色固体，及用于下一步骤而无需进一步纯化。

实施例608

将(R)-3-甲基-2-(嘧啶-5-基氨基)丁酸(64毫克，0.207毫摩尔)、(S)-4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基哌啶-4-醇(59.4毫克，0.248毫摩尔)、EDC(47.5毫克，0.248毫摩尔)、HOBT(27.9毫克，0.207毫摩尔)、DIPEA(107毫克，0.826毫摩尔)及DMF(2毫升)在室温搅拌过夜。实施例608利用制备性反相HPLC被分离为淡黄褐色固体(6.6毫克，7.7％收率)。M+H＝417.15。

实施例609

5-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)-2-异丙基苯甲酸甲酯

步骤1：3-碘-4-异丙基苯甲酸

将4-异丙基苯甲酸(4.26克，25.9毫摩尔)、硫酸(25毫升)及水(2毫升)加热至95℃，并缓慢分次添加碘(14.42克，56.8毫摩尔)。使反应混合物在此温度保持48小时。使反应混合物冷却，倒入冰中，并以二氯甲烷萃取。使有机萃取液以硫酸钠干燥，过滤，浓缩，然后通过反相HPLC(MeOH/水/TFA)纯化，得到3-碘-4-异丙基苯甲酸(60毫克)。

步骤2：4-异丙基-3-(甲氧羰基)苯甲酸

在帕尔(Parr)反应器中添加3-碘-4-异丙基苯甲酸(60毫克，0.207毫摩尔)、乙酸钯、MeOH(25毫升)、1，3-二(二苯基膦基)丙烷(4.31毫克，0.021毫摩尔)及碳酸钾(57毫克，0.414毫摩尔)，并以80psi一氧化碳气体进行加压。将反应混合物在75℃加热过夜。使反应混合物冷却，浓缩，并在15毫升水/15毫升二氯甲烷之间分配。以1N HCl使水部分酸化，并以二氯甲烷萃取。使有机物质以硫酸钠干燥过滤，然后浓缩，得到带黄色固体(40毫克)。

步骤3：实施例609

将4-异丙基-3-(甲氧羰基)苯甲酸(40毫克，0.180毫摩尔)、HOBT(20毫克，0.15毫摩尔)、EDC(56.3毫克，015毫摩尔)、DIPEA(58.2毫克，0.58毫摩尔)及DMF(2毫升)在室温短暂地搅拌，然后添加(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐。将反应混合物在室温搅拌过夜，接着通过反相HPLC纯化，得到实施例609，为白色固体(47毫克，58％收率)，M+H＝543.31。

实施例610

5-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)-2-异丙基苯甲酸

将5-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)-2-异丙基苯甲酸甲酯(实施例609，45毫克)在MeOH(5毫升)与1N氢氧化钠(5毫升)中在室温搅拌过夜。以1N HCl(10毫升)使反应混合物酸化，并萃取到二氯甲烷中。使有机层以硫酸钠干燥，过滤，浓缩，得到实施例610，为白色固体(39.6毫克)。

实施例611

3-(R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)-5-(三氟甲基)苯甲酸甲酯

步骤1：3，5-二碘次苄基三氟

在亚硝酸异戊酯(365毫克，3.12毫摩尔)在DMF(8毫升)中的搅拌的65℃溶液内添加2，6-二碘-4-(三氟甲基)苯胺(685毫克，1.66毫摩尔)。将反应混合物在室温搅拌过夜，然后倒入1N HCl(10毫升)中，并以二氯甲烷萃取。使有机层以硫酸钠干燥，过滤，浓缩，并使残留物在硅胶(己烷)上纯化，得到粉红色固体。

步骤2：3-(甲氧羰基)-5-(三氟甲基)苯甲酸

在帕尔反应器中添加3，5-二碘次苄基三氟(450毫克，1.13毫摩尔)、1，3-二(二苯基膦基)丙烷(46.6毫克，0.11毫摩尔)、MeOH(30毫升)及碳酸钾(313毫克，2.3毫摩尔)。然后将反应器装填80psi一氧化碳气体，并加热至100℃过夜，且搅拌。使粗制反应混合物经过硅藻土过滤，然后浓缩成紫色固体，使其再溶于二氯甲烷中，并以水洗涤。使水部分酸化，并以二氯甲烷萃取，以硫酸钠干燥，然后浓缩，得到3-(甲氧羰基)-5-(三氟甲基)苯甲酸，为粗制固体，使用其而无需进一步纯化。

步骤3：实施例611

将3-(甲氧羰基)-5-(三氟甲基)苯甲酸(58毫克，0.234毫摩尔)、HOBT(78毫克，0.58毫摩尔)、EDC(74毫克，0.38毫摩尔)、DIPEA(75毫克，0.58毫摩尔)及DMF(1毫升)在室温搅拌30分钟，然后添加(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐。将反应混合物在室温搅拌过夜，且实施例611利用制备性反相HPLC被分离为白色固体(36毫克，11％收率)，M+H＝569.18。

实施例612

3-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)-5-(三氟甲基)苯甲酸

实施例612以与实施例610类似的方式来制备。M+H＝555.2。

实施例613

5-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)-2-甲基苯甲酸甲酯

步骤1：3-(甲氧羰基)-4-甲基苯甲酸

在帕尔反应器中添加3-溴-4-甲基苯甲酸、MeOH(50毫升)、乙酸钯(0.44克，1.95毫摩尔)、二(1，3-二苯基膦基)丙烷及碳酸钾(4.0克，29.3毫摩尔)，以一氧化碳气体加压至80psi。使反应混合物在此温度保持48小时。使反应混合物冷却，以1N HCl酸化，并以二氯甲烷萃取。使有机萃取液以硫酸钠干燥，过滤，浓缩，然后通过反相HPLC纯化，得到标题化合物。

步骤2：实施例613

将4-甲基-3-(甲氧羰基)苯甲酸(32毫克，0.165毫摩尔)、HOBT(22毫克，0.165毫摩尔)、EDC(39毫克，0.25毫摩尔)、DIPEA(50毫克，0.38毫摩尔)及DMF(1毫升)在室温短暂地搅拌，然后添加(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐。将反应混合物在室温搅拌过夜，接着通过反相HPLC纯化，得到实施例613(44.6毫克，68％收率)。M+H＝515.35。

实施例614

5-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)-2-甲基苯甲酸

实施例614以与实施例610类似的方式来制备(28.1毫克，87.5％收率)。M+H＝501.34。

实施例615

3-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)-5-甲基苯甲酸

步骤1：3-(甲氧羰基)-5-甲基苯甲酸

将5-甲基间苯二甲酸(1.21克，6.5毫摩尔)、二氯乙烷(20毫升)、DMF(3滴)及亚硫酰氯(2.42克，20毫摩尔)加热至80℃，保持4小时。将反应混合物浓缩至干，并缓慢添加MeOH的溶液(208毫克，6.5毫摩尔)，且将反应混合物在室温搅拌过夜。添加1N盐酸(10毫升)，并将反应混合物搅拌1小时。以饱和碳酸氢钠(50毫升)调整pH，并以二氯甲烷萃取水溶液，以除去二酯。然后以1N HCl使水部分酸化，并以二氯甲烷/MeOH 95∶5进行萃取。使有机萃取液以硫酸钠干燥，过滤，浓缩，且产物经由制备性反相HPLC分离。

步骤2：3-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)-5-甲基苯甲酸甲酯

将5-甲基-3-(甲氧羰基)苯甲酸(35毫克，0.180毫摩尔)、HOBT(21毫克，0.156毫摩尔)、EDC(48毫克，0.31毫摩尔)、DIPEA(81毫克，0.63毫摩尔)及氯仿(2毫升)在室温短暂地搅拌，然后添加(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐。将反应混合物在室温搅拌过夜，浓缩，并经由反相HPLC纯化，得到3-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)-5-甲基苯甲酸甲酯。

步骤3：实施例615

将3-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)-5-甲基苯甲酸甲酯(21毫克)在THF(0.5毫升)、MeOH(0.5毫升)及1N NaOH(0.5毫升)中搅拌过夜。以1N盐酸使反应混合物酸化，然后在水(10毫升)与二氯甲烷(10毫升)之间分配。分离各层，并使有机层以硫酸钠干燥，过滤，接着浓缩，得到实施例615(18毫克，90％收率)，M+H＝501.29。

实施例616

N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-氟-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)环戊烷羧酰胺

使N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)环戊烷羧酰胺(30毫克，0.069毫摩尔)溶于二氯甲烷(2毫升)中，然后冷却至-78℃，并添加DAST(三氟化二乙氨基硫)(13.3毫克，0.083毫摩尔)。将反应混合物在室温搅拌过夜。HPLC显示存在部分起始原料，并在室温再添加2滴DAST。部分起始原料仍然存在，再添加2滴DAST，接着HPLC显示反应完成。对反应混合物进行浓缩，且实施例616通过制备性反相HPLC被分离为白色固体(15.3毫克，51％收率)，M+H＝437.38。

实施例617

(R)-N-(1-(4-(4-氯苯基)-4-氟哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)环戊烷羧酰胺

使用关于实施例616所概述的方法，使(R)-N-(1-(4-(4-氯苯基)-4-羟基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)环戊烷羧酰胺转化成实施例617。(23.2毫克，42％收率)，M+23＝431.36。

实施例618

2-(2-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基)噻唑-4-基)-N-异丙基乙酰胺

步骤1：2-(2-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基)噻唑-4-基)乙酸

将2-(2-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基)噻唑-4-基)乙酸甲酯(实施例520，356毫克，0.895毫摩尔)在1N氢氧化钠(2毫升)与乙醇(15毫升)中搅拌过夜。以0.1N盐酸使反应混合物中和至pH为7，并以EtOAc∶MeOH 95∶5萃取产物。使有机萃取液以硫酸钠干燥，过滤，然后浓缩，得到标题化合物(180毫克)，使用其而无需进一步纯化。

步骤2：实施例618

将2-(2-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基)噻唑-4-基)乙酸(30毫克，0.062毫摩尔)、DMF(1毫升)、HOBT(8.4毫克，0.06毫摩尔)、EDC(18毫克，0.094毫摩尔)、异丙胺盐酸盐(10毫克，0.125毫摩尔)及DIPEA(32毫克，0.25毫摩尔)在室温搅拌72小时。实施例618通过反相HPLC直接分离(3.4毫克，10.4％收率)，M+H＝521.29。

实施例619

2-(2-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基)噻唑-4-基)-N-环戊基乙酰胺

实施例619按实施例618以类似方式来制备(2.9毫克，8.5％收率)。M+H＝547.34。

实施例620

(R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-2-(4-(2-吗啉代-2-氧代乙基)噻唑-2-基氨基)丁-1-酮

实施例620按实施例618以类似方式来制备(36.3毫克，62％收率)。M+H＝549。

实施例621

(R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-2-(4-甲基噻唑-2-基氨基)丁-1-酮

将1-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)硫脲(50毫克，0.126毫摩尔)、乙醇(5毫升)及1-氯丙-2-酮在80℃加热4小时。使反应混合物冷却，且产物通过反相制备性HPLC分离，得到实施例621，为白色固体(36.5毫克，66.6％收率)，M+H＝436.2。

实施例622

(R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-2-(4-(三氟甲基)噻唑-2-基氨基)丁-1-酮

将1-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)硫脲(55毫克，0.138毫摩尔)、乙醇(6毫升)及3-氯-1，1，1-三氟丙-2-酮(24.3毫克，0.166毫摩尔)在80℃搅拌3天。使反应混合物冷却，且产物通过反相制备性HPLC分离，得到实施例622，为白色固体(14.3毫克，21％收率)，M+H＝490.12。

实施例623

N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-6-异丙氧基烟酰胺

步骤1：6-氯-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)烟酰胺

使(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐(338毫克，0.90毫摩尔)、THF(5毫升)及6-氯烟碱酰氯(132毫克，0.75毫摩尔)冷却至0℃，并逐滴添加DIPEA(233毫克，1.80毫摩尔)。使反应混合物温热至室温，并搅拌过夜。然后除去溶剂，并使残留物在二氯甲烷与饱和碳酸氢钠之间分配。分离各层，并使有机萃取液干燥，过滤，然后浓缩，得到6-氯-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)烟酰胺，为白色固体。

步骤2：实施例623

在微波瓶中添加6-氯-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)烟酰胺(18毫克，0.038毫摩尔)、2-丙醇(1毫升)及刚制备的丙-2-醇钠(0.5毫升，0.083毫摩尔)。将瓶密封，并在150℃加热30分钟。产物经由制备性反相HPLC分离，得到实施例623(13.2毫克，69.9％收率)，为白色固体。M+H＝502.41

实施例624

5-氯-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-6-苯氧基烟酰胺

步骤1：5，6-二氯-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)烟酰胺

将氯化(R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-铵(150毫克，0.40毫摩尔)、THF(10毫升)及5，6-二氯烟碱酰氯(101毫克，0.48毫摩尔)在室温一起搅拌，然后逐滴添加DIPEA(114毫克，0.88毫摩尔)。将反应混合物搅拌过夜，接着除去溶剂，并使残留物在EtOAc与1N氢氧化钠之间分配。使有机萃取液干燥，过滤，然后浓缩，得到5，6-二氯-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)烟酰胺，为白色固体。

步骤2：实施例624

将5，6-二氯-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)烟酰胺(35毫克，0.068毫摩尔)、0.5毫升DMF及苯酚钠(9.51毫克，0.08毫摩尔)在120℃加热1小时。实施例624通过制备性反相HPLC被分离为白色固体(13.7毫克，35.2％收率)，M+H＝570.07。

实施例625

5-氯-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-6-甲氧基烟酰胺

实施例625按实施例624以类似方式来制备(25.6毫克，51.6％收率)。M+H＝508.05。

实施例626

N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-6-(甲基氨基)烟酰胺

在微波瓶中添加6-氯-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)烟酰胺(25毫克，0.05毫摩尔)、乙醇(1毫升)、甲胺盐酸盐(7.06毫克，0.105毫摩尔)及DIPEA(40.5毫克，0.31毫摩尔)。将瓶密封，并在微波反应器中在150℃加热6小时。实施例626通过制备性反相HPLC被分离为白色固体(15.1毫克，61.1％收率)，M+H＝473.33。

实施例627

N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-1-氧代丁-2-基)环戊烷羧酰胺

步骤1：(R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-1-氧代丁-2-基氨基甲酸叔丁酯

将(S)-4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基哌啶-4-醇(100毫克，0.42毫摩尔)、(R)-2-(叔丁氧羰基氨基)丁酸(102毫克，0.50毫摩尔)、HOBT(68毫克，0.5毫摩尔)、EDC(155毫克，1毫摩尔)、DIPEA(129毫克，1毫摩尔)及氯仿(2毫升)在室温搅拌过夜。然后使反应混合物在二氯甲烷与饱和碳酸氢钠溶液之间分配，分离各层，并使有机萃取液以硫酸镁干燥，过滤，然后浓缩，得到产物，将其用于下一步骤而无需进一步纯化。

步骤2：氯化(R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-1-氧代丁-2-铵

将(R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-1-氧代丁-2-基氨基甲酸叔丁酯(200毫克，0.46毫摩尔)与二噁烷中的4N盐酸(8毫升)在室温搅拌2小时。然后使反应混合物浓缩，并在高真空下干燥，得到产物，将其用于下一步骤而无需进一步纯化。

步骤3：实施例627

将氯化(R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-1-氧代丁-2-铵(52.4毫克，0.14毫摩尔)、环戊烷碳酰氯(20毫克，0.17毫摩尔)、THF(5毫升)及DIPEA(135毫克，1.1毫摩尔)在室温搅拌过夜。对反应混合物进行浓缩，且实施例627利用制备性反相HPLC被分离为白色固体(30.75毫克，52.3％收率)，M+H＝421.31。

实施例628

3-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)苯甲酸

步骤1：3-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)苯甲酸甲酯

将氯化(R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-1-氧代丁-2-铵(52.4毫克，0.14毫摩尔)、3-(氯羰基)苯甲酸甲酯(33毫克，0.17毫摩尔)、THF(5毫升)及二异丙基乙胺(135毫克，1.1毫摩尔)在室温搅拌过夜。对反应混合物进行浓缩，而产物利用制备性反相HPLC被分离为白色固体。

步骤2：实施例628

将3-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)苯甲酸甲酯(49毫克，0.10毫摩尔)、MeOH(1毫升)及1N氢氧化钠(0.6毫升)在室温搅拌4小时，然后以1N盐酸(1毫升)酸化。将产物萃取到二氯甲烷中。使有机层以硫酸镁干燥，过滤，然后浓缩，得到实施例628，为白色固体(34.0毫克，72.0％收率)，M+H＝473.27。

实施例629

N1-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)间苯二甲酰胺

将(R)-3-(1-(4-(4-氯苯基)-4-羟基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)苯甲酸(170毫克，0.35毫摩尔)、DMF(5毫升)、HOBT(52毫克，0.38毫摩尔)、EDC(108毫克，0.70毫摩尔)及DIPEA(136毫克，1.0毫摩尔)在室温搅拌。添加氯化铵(8毫克，0.13毫摩尔)，并将反应混合物搅拌过夜。产物经由制备性反相HPLC直接分离，得到实施例629(19.0毫克，73.3％收率)，为白色固体，M+H＝486.25。

实施例630

2-(3-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)苯甲酰氨基)乙酸

步骤1：2-(3-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)苯甲酰氨基)乙酸乙酯

将(R)-3-(1-(4-(4-氯苯基)-4-羟基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)苯甲酸(30.5毫克，0.06毫摩尔)、氯仿(1毫升)、HOBT(9毫克，0.06毫摩尔)、EDC(20毫克，0.13毫摩尔)、氨基乙酸乙酯盐酸盐及DIPEA(32毫克，0.25毫摩尔)在室温搅拌18小时。使产物经由制备性反相HPLC直接纯化。

步骤2：实施例630

将2-(3-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨甲酰基)苯甲酰氨基)乙酸乙酯在THF(0.5毫升)、MeOH(0.50毫升)及0.5毫升1N氢氧化钠中在室温搅拌过夜。以1N盐酸(1毫升)使反应混合物酸化，并将产物萃取到二氯甲烷中。使有机萃取液以硫酸钠干燥，过滤，然后浓缩。使产物经由制备性反相HPLC纯化，得到实施例630(3.4毫克，10.4％收率)，为白色固体。M+H＝544.24。

实施例631

3-乙酰氨基-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)苯甲酰胺

步骤1：N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-3-硝基苯甲酰胺

将3-硝基苯甲酰氯(112毫克，0.67毫摩尔)添加至(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐(250毫克，0.668毫摩尔)与DIPEA(240微升，1.35毫摩尔)在二氯甲烷(2毫升)中的混合物内。将混合物在室温搅拌1小时。以NaHCO₃水溶液使反应淬灭，以二氯甲烷萃取，以Na₂SO₄干燥，过滤，然后浓缩。使残留物通过快速柱纯化，使用己烷中的30％EtOAc作为洗脱剂，得到N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-3-硝基苯甲酰胺(287毫克)，为黄色固体。

步骤2：3-氨基-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)苯甲酰胺

在N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-3-硝基苯甲酰胺(287毫克)在甲醇(10毫升)中的溶液内添加Pd/C(5％，10％毫摩尔)。对混合物进行脱气，并装填氢气，持续3小时。过滤反应混合物，并以甲醇洗涤，接着以EtOAc洗涤。使滤液浓缩，得到3-氨基-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)苯甲酰胺与3-氨基-N-((R)-1-((S)-4-羟基-3，3-二甲基-4-苯基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)苯甲酰胺的混合物(213毫克)。

步骤3：实施例631

在得自步骤2的3-氨基-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)苯甲酰胺(30毫克，0.068毫摩尔)在二氯甲烷(0.5毫升)中的混合物内添加乙酰氯(15微升)与DIPEA(15微升)。将混合物在室温搅拌1小时，然后浓缩。使残留物通过制备性HPLC纯化，得到实施例631(12毫克)，为黄色固体。MS实测值：500.2(M+)。

实施例632

6-乙酰氨基-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)吡啶-2-甲酰胺三氟乙酸盐

步骤1：6-氨基-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)吡啶-2-甲酰胺

在6-氨基吡啶羧酸(33毫克，0.24毫摩尔)在DMF(2毫升)中的混悬液内添加EDC(45.9毫克，0.24毫摩尔)和HOBT(32.3毫克，0.24毫摩尔)。将混合物在室温搅拌0.5小时，然后添加DIPEA(0.083毫升，0.48毫摩尔)与(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐(90毫克，0.239毫摩尔)。将混合物在室温搅拌过夜。以NaHCO₃(水溶液)使反应淬灭，并在室温搅拌1小时，以EtOAc萃取，以盐水洗涤，并以Na₂SO₄干燥。在真空中浓缩后，将残留物与CH₂Cl₂一起研磨，并过滤，得到黄色固体，为6-氨基-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)吡啶-2-甲酰胺(86毫克，0.187毫摩尔，78％收率)。

步骤2：实施例632

在6-氨基-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)吡啶-2-甲酰胺(18毫克，0.039毫摩尔)与DIPEA(7.50微升，0.043毫摩尔)在CH₂Cl₂(1毫升)中的混合物内添加乙酰氯(3.08毫克，0.039毫摩尔)。将混合物在室温搅拌1小时，浓缩，并通过制备性HPLC纯化。使含有产物的馏分浓缩，然后冻干，得到实施例632(11毫克，0.022毫摩尔，56％收率)，为白色三氟乙酸盐。MS实测值：501.2(M+)。

实施例633

4-氯-N-((2R，3S)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代戊-2-基)苯甲酰胺

步骤1：(2R，3S)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代戊-2-基氨基甲酸叔丁酯

使(2R，3S)-2-(叔丁氧羰基氨基)-3-甲基戊酸(197毫克，0.85毫摩尔)、EDC(162毫克，0.85毫摩尔)和HOBT(115毫克，0.85毫摩尔)溶于氯仿(10毫升)中。添加DIPEA(0.15毫升，0.85毫摩尔)与(S)-4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基哌啶-4-醇(200毫克，0.834毫摩尔)。将混合物在室温搅拌2小时，以二氯甲烷稀释，并以NaHCO₃水溶液与盐水洗涤。使有机层以Na₂SO₄干燥，过滤，然后浓缩，得到(2R，3S)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代戊-2-基氨基甲酸叔丁酯(327毫克)，为黄色固体。

步骤2：(2R，3S)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基戊-1-酮三氟乙酸

将TFA(0.5毫升)添加至4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代戊-2-基氨基甲酸酯(327毫克)在二氯甲烷(2毫升)中的溶液内，并将混合物在室温搅拌1小时。浓缩混合物，并使残留物在真空中干燥过夜，得到(2R，3S)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基戊-1-酮三氟乙酸，为淡褐色油状物。

步骤3：实施例633

在(2R，3S)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基戊-1-酮三氟乙酸(35毫克，0.1毫摩尔)在二氯甲烷(0.5毫升)中的溶液内添加DIPEA(44微升，0.25毫摩尔)与4-氯苯甲酰氯(26毫克，0.15毫摩尔)。将混合物在室温搅拌0.5小时，然后浓缩。使残留物通过制备性HPLC纯化，得到实施例633(14毫克，29％收率)。MS实测值：491.2(M+H)。

实施例634

4-氯-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-4-氰基-1-氧代丁-2-基)苯甲酰胺

在(R)-4-氨基-5-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-5-氧代戊酰胺(25毫克，0.068毫摩尔)在二氯甲烷(1毫升)中的溶液内添加DIPEA(30微升，0.17毫摩尔)与4-氯苯甲酰氯(17毫克，0.1毫摩尔)。将混合物在室温搅拌1小时，然后浓缩。使残留物通过制备性HPLC纯化，得到实施例634(15毫克，45％收率)。MS实测值：488.2(M+)。

实施例635

N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-3-(2-(二甲基氨基)乙酰氨基)苯甲酰胺

在2-(二甲基氨基)乙酸(6.2毫克，0.06毫摩尔)在DMF(0.5毫升)中的溶液内添加HOBT(8.1毫克，0.06毫摩尔)和EDC(12毫克，0.06毫摩尔)。将混合物在室温搅拌1小时，然后添加3-氨基-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)苯甲酰胺(25毫克，0.055毫摩尔)。接着将混合物在室温搅拌2小时，并经由制备性HPLC纯化，得到实施例635(16毫克，54％收率)。MS实测值：543.3(M+)。

实施例636A与636B

氨基甲酸(S)-1-((R)-2-(3-氨基苯甲酰氨基)-3-甲基丁酰基)-4-(4-氯苯基)-3，3-二甲基哌啶-4-酯与N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-3-脲基苯甲酰胺

在3-氨基-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)苯甲酰胺(23毫克，0.05毫摩尔)在HOAc(0.5毫升)中的溶液内添加NaOCN(4毫克，6毫摩尔)。将混合物在室温搅拌3小时，然后浓缩。向残留物添加NaHCO₃水溶液，并萃取到EtOAc中。使有机萃取液以Na₂SO₄干燥，过滤，然后浓缩。使残留物经由HPLC纯化，得到实施例636A(6毫克)(MS实测值：501.2(M+H))与实施例636B(4毫克)(MS实测值：500.3(M+))。

实施例637

(R)-N-(1-(4-(4-氯苯基)-4-氰基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)苯甲酰胺

步骤1：(R)-1-(2-氨基-3-甲基丁酰基)-4-(4-氯苯基)哌啶-4-羧酸甲酯三氟乙酸盐

在(R)-2-(叔丁氧羰基氨基)-3-甲基丁酸(279毫克，1.21毫摩尔)在CHCl₃(5毫升)中的溶液内添加EDC(231毫克，1.205毫摩尔)、HOBT(0.219毫升，1.21毫摩尔)及4-(4-氯苯基)哌啶-4-羧酸甲酯(279毫克)。将混合物在室温搅拌过夜。以NaHCO₃水溶液使反应淬灭，并以CH₂Cl₂萃取。将有机萃取液以0.5NHCl和盐水洗涤，以Na₂SO₄干燥，然后浓缩，得到黄色油状物。使此油状物溶于CH₂Cl₂(3毫升)中，并添加TFA(1毫升)。将混合物在室温搅拌3小时，然后浓缩，得到(R)-1-(2-氨基-3-甲基丁酰基)-4-(4-氯苯基)哌啶-4-羧酸甲酯三氟乙酸盐(432毫克，0.960毫摩尔，88％收率)。

步骤2：(R)-1-(2-苯甲酰氨基-3-甲基丁酰基)-4-(4-氯苯基)哌啶-4-羧酸甲酯

在(R)-1-(2-氨基-3-甲基丁酰基)-4-(4-氯苯基)哌啶-4-羧酸甲酯(396毫克，1.123毫摩尔)与苯甲酰氯(0.139毫升，1.2毫摩尔)在CH₂Cl₂(5毫升)中的溶液内添加N-乙基-N-异丙基丙-2-胺(0.401毫升，2.3毫摩尔)。将混合物在室温搅拌1小时。以NaHCO₃(水溶液)使反应淬灭，以二氯甲烷萃取，以Na₂SO₄干燥，然后浓缩。使残留物经由柱色谱(20％EtOAc/庚烷)纯化，得到(R)-1-(2-苯甲酰氨基-3-甲基丁酰基)-4-(4-氯苯基)哌啶-4-羧酸甲酯(467毫克，91％收率)，为黄色固体。

步骤3：

在(R)-1-(2-苯甲酰氨基-3-甲基丁酰基)-4-(4-氯苯基)哌啶-4-羧酸甲酯(467毫克，0.99毫摩尔)在THF(5毫升)中的溶液内添加NaOH水溶液(625毫克，2.5毫摩尔，10％)。将混合物在室温搅拌4小时。以HCl(2N)使反应淬灭至pH＝3，萃取到EtOAc中，然后以Na₂SO₄干燥，得到所要的产物(451毫克，96％收率)，为黄色固体。

步骤4：

在步骤3的产物(20毫克，0.045毫摩尔)在DMF(200微升)中的溶液内添加EDC(7.71毫克，0.050毫摩尔)与HOBT(6.71毫克，0.050毫摩尔)。将反应混合物在室温搅拌0.5小时，并添加NH₄OH水溶液(100微升)。将混合物在室温搅拌0.5小时，以水(2毫升)使反应淬灭，在室温搅拌0.5小时，并过滤，且通过制备性HPLC纯化，得到所要的产物(10毫克，0.023毫摩尔，50.1％收率)。

步骤5：实施例637

在步骤4的产物(30毫克，0.068毫摩尔)与吡啶(11微升，0.136毫摩尔)在THF(4毫升)中的0℃溶液内添加2，2，2-三氟乙酸酐(0.014毫升，0.102毫摩尔)。将混合物在0℃搅拌2小时，然后在室温搅拌2小时。以NaHCO₃使反应淬灭，萃取到EtOAc中。将有机萃取液以盐水洗涤，浓缩，并使残留物通过制备性HPLC纯化，得到实施例637(19毫克，0.045毫摩尔，66.0％收率)。MS实测值：424.3(M+)。

实施例638

N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-2-乙氧基乙酰胺

在乙醇(2毫升)中添加氢化钠(14.4毫克，0.36毫摩尔)。将混合物在室温搅拌15分钟。然后向混合物添加2-氯-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)乙酰胺(30毫克，0.072毫摩尔)，接着在120℃加热30分钟。浓缩反应混合物，并通过制备性HPLC纯化，得到实施例638(18毫克，59％收率)。MS实测值：425.2(M+)

实施例639

N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-2-(1H-吡唑-1-基)乙酰胺

在2-氯-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)乙酰胺(30毫克，0.072毫摩尔)与1H-吡唑(50微升)在乙腈(1毫升)中的溶液内添加K₂CO₃(13.8毫克，0.1毫摩尔)。将反应混合物在120℃加热1小时，过滤，并通过制备性HPLC纯化，得到实施例639(12毫克，38％收率)。MS实测值：447.2(M+)。

实施例640

2-乙酰氨基-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)乙酰胺

在2-乙酰氨基乙酸(7.55毫克，0.064毫摩尔)在DMF(500微升)中的混合物内添加HOBT(8.71毫克，0.064毫摩尔)与EDCI(12.38毫克，0.064毫摩尔)。将混合物在室温搅拌0.5小时，添加(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐(22毫克，0.059毫摩尔)与DIPEA(11.21微升，0.064毫摩尔)，然后在室温搅拌2小时。使反应混合物通过制备性HPLC纯化，得到实施例640(19毫克，0.043毫摩尔，74.0％收率)，为白色固体。MS实测值：438.3(M+)。

实施例641

5-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基)-1H-吡唑-3-羧酸乙酯

步骤1：N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)甲酰胺

在(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐(111毫克，0.296毫摩尔)、2-氯-4，6-二甲氧基-1，3，5-三嗪(57.1毫克，0.325毫摩尔)、甲酸(0.012毫升0.325毫摩尔)及NMM(0.068毫升，0.62毫摩尔)在CH₂Cl₂(10毫升)中的溶液内添加DMAP(3.61毫克，0.03毫摩尔)。将混合物在室温搅拌3小时。过滤反应混合物，并将滤液以Na₂CO₃、0.5N HCl及盐水洗涤。使有机层以Na₂SO₄干燥，然后浓缩，得到N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)甲酰胺(76毫克，0.207毫摩尔，70.0％收率)。

步骤2：(R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-2-异氰基-3-甲基丁-1-酮

在N-((2R)-1-((4S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)甲酰胺(109毫克，0.298毫摩尔)与TEA(0.208毫升，1.490毫摩尔)在CH₂Cl₂(5毫升)中的混合物内在0℃及N₂下添加POCl₃(0.027毫升，0.298毫摩尔)。将混合物在0-5℃搅拌3小时。以NaHCO₃(水溶液)使混合物淬灭，萃取到CH₂Cl₂中，并以Na₂SO₄干燥。在浓缩后，使粗制残留物经由柱色谱(CH₂Cl₂)纯化，得到(2R)-1-((4S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-2-异氰基-3-甲基丁-1-酮(85毫克，0.244毫摩尔，82％收率)，为淡黄色油状物。

步骤3：实施例641

在(2R)-1-((4S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-2-异氰基-3-甲基丁-1-酮(90毫克，0.26毫摩尔)与(Z)-2-(3-溴-1-乙氧基-1-氧代亚丙-2-基)肼羧酸叔丁酯(80毫克，0.26毫摩尔)在CH₂Cl₂(10毫升)中的混合物内添加碳酸钠(137毫克，1.29毫摩尔)。将混合物在室温搅拌18小时。以水使反应淬灭，萃取到CH₂Cl₂中，并使合并的有机萃取液以Na₂SO₄干燥，然后浓缩。使产物溶于CH₂Cl₂(2毫升)中，然后添加TFA(0.5毫升)。将混合物在室温搅拌2小时，浓缩，并经由制备性HPLC纯化，得到实施例641(6毫克，0.013毫摩尔，4.87％收率)，为黄色固体。MS实测值：477.2(M+)。

实施例642

(R)-2-(4-((1H-吡唑-1-基)甲基)噻唑-2-基氨基)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮

在(R)-2-(4-(氯甲基)噻唑-2-基氨基)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮(18毫克，0.04毫摩尔)在乙腈(1毫升)中的溶液内添加1H-吡唑(5.21毫克，0.08毫摩尔)与碳酸钾(10.6毫克，0.08毫摩尔)。将混合物在80℃加热1.5小时，然后冷却。使粗制反应混合物经由制备性HPLC纯化，得到实施例642(9毫克，0.018毫摩尔，46.9％收率)，为黄色固体。MS实测值：502.2(M+)。

实施例643

2-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基)-2-氧代乙磺酸

将2-氯-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)乙酰胺(40毫克，0.096毫摩尔)与亚硫酸钠(60.7毫克，0.482毫摩尔)在EtOH与水中的混合物在120℃加热1小时。过滤混合物，浓缩。经由制备性HPLC纯化，得到实施例643(26毫克，0.056毫摩尔，58.6％收率)。MS实测值：461.2(M+)。

实施例644

在6-氨基-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)吡啶-2-甲酰胺(18毫克，0.039毫摩尔)与DIPEA(10.23微升，0.059毫摩尔)在CH₂Cl₂(1毫升)中的混合物内添加甲磺酸酐(10.25毫克，0.059毫摩尔)。将混合物在室温搅拌3小时。使混合物浓缩，并通过制备性HPLC纯化，得到实施例644(6毫克，0.011毫摩尔，28.5％收率)，为三氟乙酸盐。MS实测值：537.2(M+)。

实施例645

3-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基)-3-氧代丙基氨基甲酸甲酯

在3-氨基-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)丙酰胺(20毫克，0.049毫摩尔)与DIPEA(0.021毫升，0.122毫摩尔)在CH₂Cl₂(1毫升)中的混合物内添加氯甲酸甲酯(6.9毫克，0.073毫摩尔)。将混合物在室温搅拌2小时，浓缩，并使残留物通过制备性HPLC纯化，得到实施例645(15毫克，0.032毫摩尔，65.7％收率)，为白色固体。MS实测值：468.2(M+H)。

实施例646

N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-3-(3-异丙基脲基)丙酰胺

在3-氨基-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)丙酰胺(20毫克，0.049毫摩尔)与DIPEA(0.021毫升，0.122毫摩尔)在CH₂Cl₂(1.5毫升)中的混合物内添加2-异氰酸基丙烷(2.076毫克，0.024毫摩尔)。将混合物在室温搅拌2小时，然后浓缩。使残留物通过制备性HPLC纯化，得到实施例646(21毫克，0.042毫摩尔，87％收率)，为白色固体。MS实测值：495.3(M+)。

实施例647

2-(1H-苯并[d]咪唑-2-基氨基)-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)乙酰胺三氟乙酸盐

在2-氨基-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)乙酰胺三氟乙酸盐(30毫克，0.059毫摩尔)与2-溴-1H-苯并[d]咪唑(11.6毫克，0.07毫摩尔)在MeOH(1毫升)中的混合物内添加DIPEA(0.011毫升，0.07毫摩尔)。将混合物在150℃加热1小时，冷却，然后浓缩。使粗制残留物经由制备性HPLC纯化，得到实施例647(12毫克，0.023毫摩尔，39.8％收率)，为灰白色固体。MS实测值：512.3(M+)。

实施例648

N-(2-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基)-2-氧代乙基)环戊烷羧酰胺

使环戊烷羧酸(7.61毫克，0.067毫摩尔)、HOBT(9.01毫克，0.067毫摩尔)及EDCI(12.80毫克，0.067毫摩尔)溶于DMF(0.3毫升)中。将混合物在室温搅拌0.5小时，然后添加2-氨基-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)乙酰胺三氟乙酸盐(34毫克，0.067毫摩尔)与DIPEA(0.014毫升，0.080毫摩尔)。将混合物搅拌2小时，浓缩，并经由制备性HPLC纯化，得到实施例648(9毫克，0.018毫摩尔，27.4％收率)。MS实测值：492.2(M+)。

实施例649

2-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基)噻唑-5-羧酸

在2-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基)噻唑-5-羧酸甲酯(65毫克，0.135毫摩尔)在THF(1毫升)与MeOH(1毫升)中的溶液内添加氢氧化钠(108毫克，0.271毫摩尔)。将混合物在室温搅拌18小时，然后以1N HCl中和。过滤所得到的固体，并以水洗涤，得到实施例649(60毫克，0.129毫摩尔，95％收率)。MS实测值：466.2(M+)。

实施例650

2-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基)-N-异丙基噻唑-5-羧酰胺

使2-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基氨基)噻唑-5-羧酸(20毫克，0.043毫摩尔)、HOBT(5.80毫克，0.043毫摩尔)及EDCI(10.71毫克，0.056毫摩尔)溶于CH₂Cl₂(0.5毫升)中。将混合物在室温搅拌0.5小时，并添加异丙胺(3.04毫克，0.052毫摩尔)与DIPEA(9.70微升，0.056毫摩尔)。将混合物在室温搅拌1小时，浓缩，并使残留物通过制备性HPLC纯化，得到实施例650(12毫克，0.024毫摩尔，55.1％收率)，为灰白色固体。MS实测值：507.2(M+)。

实施例651

N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)-2-(环戊烷羧酰氨基)噁唑-4-羧酰胺

步骤1：2-氨基噁唑-4-羧酸钠

在2-氨基噁唑-4-羧酸乙酯(1.56克，9.99毫摩尔)在THF(4毫升)与MeOH(4毫升)中的溶液内添加氢氧化钠(8.0克，20毫摩尔，10％)水溶液。将反应混合物在室温搅拌18小时，然后以4N HCl使反应淬灭至pH＝3。浓缩水溶液，得到黄色固体，为混合的酸与盐。将混合物以EtOAc与MeOH洗涤，并收集滤液，然后浓缩，得到2-氨基噁唑-4-羧酸钠，为黄色固体。

步骤2：2-氨基-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)噁唑-4-羧酰胺

使2-氨基噁唑-4-羧酸钠(75毫克，0.500毫摩尔)、HOBT(67.5毫克，0.500毫摩尔)及EDCI(96毫克，0.500毫摩尔)溶于DMF(0.5毫升)中。将混合物在室温搅拌0.5小时，然后添加(R)-2-氨基-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基丁-1-酮盐酸盐(188毫克，0.500毫摩尔)，及再搅拌2小时。以水使反应淬灭，并在室温搅拌2小时。过滤固体，并以水洗涤，得到2-氨基-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)噁唑-4-羧酰胺(169毫克，0.376毫摩尔，75％收率)。

步骤3：实施例651

在2-氨基-N-((R)-1-((S)-4-(4-氯苯基)-4-羟基-3，3-二甲基哌啶-1-基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)噁唑-4-羧酰胺(20毫克，0.045毫摩尔)与DIPEA(7.75微升，0.045毫摩尔)在CH₂Cl₂(1毫升)中的溶液内添加环戊烷碳酰氯(11.8毫克，0.09毫摩尔)。将混合物在室温搅拌1小时，然后浓缩。使残留物通过制备性HPLC纯化，得到实施例651(9毫克，0.017毫摩尔，37.1％收率)。MS实测值：545.2(M+)。

如下表21中所描述的实施例按关于制备上述实施例所描述的类似方式来制备。含有羧酸官能团的实施例按照本领域技术人员所已知的标准碱金属碱操作来制备，得到相应的酯。

表21

应注意的是，以上实施例虽然是本发明的说明例，但并未按顺序排列，且有些实施例编号可能遗漏。

实用性

一般而言，本发明化合物，诸如揭示于上述实施例中的特定化合物，已被证实在浓度等于或有效大于20μM，优选为10μM，更优选为5μM时为趋化因子受体活性的调节剂。由于在这些浓度时显示出活性，所以预期本发明化合物可用于治疗与趋化因子及其相关受体有关的人类疾病。可对功效进行计算，并以抑制常数(Ki值)或IC₅₀值来表示，且指代为利用下述测定系统测量的活性。

对MIP-1α结合至人类THP-1细胞的拮抗作用

(Yoshimura，et al.，J.Immunol.，1990，145，292)

本发明化合物在此处所描述的对MIP-1α结合至人类THP-1细胞的拮抗作用中具有活性。

将微孔滤器板(#MABVN1250)以100微升结合缓冲液(0.5％牛血清白蛋白、20mM HEPES缓冲液及5mM氯化镁，在RPMI 1640培养基中)在室温处理三十分钟。为了测量结合作用，将50微升结合缓冲液(含有或不含有已知浓度的化合物)与50微升I¹²⁵标记的人类MIP-1α(使放射性配体的最终浓度为150pM)及含有5×10⁵个细胞的50微升结合缓冲液合并。用于此结合测定的细胞可包括表达内源性CCR1受体的THP-1细胞系或通过Ficoll-Hypaque梯度离心所分离的人类外周血液单核细胞或人类单核细胞(Weiner，et al.，J.Immunol.Methods，1980，36，89)。将化合物、细胞及放射性配体的混合物在室温培养三十分钟。将板置于真空歧管上，施加真空，及将板以含有0.5MNaCl的结合缓冲液洗涤三次。将塑料边缘从板除去，使板风干，对孔进行穿孔(punch out)，并进行计数。利用在不存在任何竞争性化合物的情况下所得到的总计数及通过添加100nM MIP-1α代替测试化合物所确定的背景结合来计算对结合作用的抑制百分比。

对MIP-1α所诱发的钙流入的拮抗作用

(Sullivan，et al.，Methods Mol.Biol.，114，125-133(1999))

本发明化合物在此处所描述的对MIP-1α所诱发的钙流入测定的拮抗作用中具有活性。

利用荧光Ca²⁺指示剂染料fluo-3来测量钙动员。所使用的细胞可包括表达内源性CCR1受体的细胞系(诸如MonoMac-6细胞与THP-1细胞)或按Weiner，et al.，J.Immunol.Methods，36，89-97(1980)所描述来分离的刚得到的人类单核细胞。使细胞以8×10⁵个细胞/毫升的浓度在含有0.1％牛血清白蛋白、20mM HEPES缓冲液、5mM葡萄糖、1％胎牛血清、4μM fluo-3AM及2.5mM丙磺舒(probenecid)的磷酸盐缓冲盐水中在37℃培养60分钟。在含有0.1％牛血清白蛋白、20mM HEPES、5mM葡萄糖及2.5mM丙磺舒的磷酸盐缓冲盐水中洗涤三次，之后使所述细胞重新悬浮在含有0.5％牛血清白蛋白、20mM HEPES及2.5mM丙磺舒的磷酸盐缓冲盐水中，而最终浓度为2-4×10⁶个细胞/毫升。将细胞置于96孔黑色壁微量板(100微升/孔)中，并使板以200×g离心5分钟。将各种浓度的化合物添加至孔(50微升/孔)中，并在5分钟后，以50微升/孔添加MIP-1α，使其最终浓度为10nM。钙动员在添加配体后立即发生，且使用荧光成像板读取器(利用氩激光器(488纳米))来进行测定。测量与细胞相关的荧光达3分钟(对于前90秒每秒测量1次而对于后90秒每10秒测量1次)。以任意荧光单位给出数据，而将各孔荧光的改变程度确定为最大值与最小值的差别。相对于单独MIP-1α的响应值来计算基于化合物的抑制作用。

对MIP-1α所诱发的THP-1细胞趋化性的拮抗作用

本发明化合物在此处所描述的对MIP-1α所诱发的THP-1细胞趋化性测定的拮抗作用中具有活性。

使BD Falcon HTX Fluoroblok 96-Multiwell Insert System板(8微米，目录编号为351164)在37℃培养箱中温热。在离心后，使THP-1细胞(1.5×10⁷个细胞/板)重新悬浮在1毫升RPMI 1640培养基(不含有酚红)中。将5微升1毫克/毫升钙黄绿素-AM(Molecular Probes目录编号为C-3100)添加至细胞悬浮液中。在温和地混合后，将细胞在37℃培养30分钟。添加14毫升RPMI 1640(含有0.1％BSA)，并使细胞以1300rpm离心5分钟。使沉淀重新悬浮在7.5毫升预热的RPMI 1640(含有0.1％BSA)中。也使人类MIP-1α的20nM溶液在37℃温热。将化合物在RPMI 1640中稀释，以使浓度为最终值的两倍。在含有预热RPMI且含有或不含有测试化合物稀释液的聚丙烯管中使THP-1细胞悬浮液与20nM MIP-1α溶液以1∶1混合。使这些混合物在37℃管温热器中温热。将50微升细胞悬浮液+化合物添加至各插入孔中。将225微升MIP-1α+化合物添加至BD-Falcon Fluoroblok的下方储库中。将Fluoroblok板置于37。℃培养箱中，培养60分钟，并在Cytofluor II荧光多孔板读取器(PerSeptive Biosystems，Inc.)中在激发波长为485纳米而测定波长为530纳米的仪器设定下进行读取。以任意荧光单位给出数据，而将各孔荧光的改变程度确定为最大值与背景值的差别。相对于单独MIP-1α的响应值来计算基于化合物的抑制作用。

哺乳动物趋化因子受体提供了用于干扰或促进哺乳动物(诸如人类)中免疫细胞功能的靶标。抑制或促进趋化因子受体功能的化合物特别可用于调节免疫细胞功能，以达到治疗目的。

因此，本发明涉及可用于预防及/或治疗很多种炎性、感染性及免疫调节性病症与疾病的化合物，所述病症与疾病包括哮喘与过敏性疾病，致病微生物(其通过定义而包括病毒)所引起的感染，以及自身免疫病理诸如风湿性关节炎与动脉粥样硬化。

例如，抑制哺乳动物趋化因子受体(例如人类趋化因子受体)的一种或多种功能的本发明化合物可被给药，以抑制(即减轻或预防)发炎或感染性疾病。因此抑制了一种或多种炎症过程(inflammatory process)，诸如淋巴细胞的迁移、粘附、趋化、胞吐作用(exocytosis)(例如酶、组胺的胞吐作用)或炎症介质的释放。

类似地，促进哺乳动物趋化因子受体(例如人类趋化因子)的一种或多种功能的本发明化合物被给药，以刺激(诱发或增强)免疫或炎症应答，诸如淋巴细胞的迁移、粘附、趋化、胞吐作用(例如酶、组胺的胞吐作用)或炎症介质的释放，导致对炎症过程的有利刺激。例如，可动员嗜酸性细胞以对抗寄生感染。此外，促进哺乳动物趋化因子受体的一种或多种功能的本发明化合物也可用于治疗上述炎性、过敏性及自身免疫性疾病，条件是递送足够的化合物，以通过诱导趋化因子受体的内陷(internalization)而导致受体在细胞上的表达缺失，或以导致细胞迁移方向出现错误的方式递送化合物。

除灵长类动物诸如人类外，多种其它哺乳动物可根据本发明的方法被治疗。例如，哺乳动物(包括但不限于奶牛、绵羊、山羊、马、狗、猫、豚鼠、大鼠或其它牛类、羊类、马类、犬类、猫类、啮齿类或鼠类物种)可被治疗。但是，本发明的方法也可施于其它物种，诸如鸟类物种。在上述方法中治疗的受试对象为期望对趋化因子受体活性进行调节的雄性或雌性哺乳动物。本申请所使用的″调节″意在涵盖拮抗作用、激动作用、部分拮抗作用及/或部分激动作用。

可用趋化因子受体功能抑制剂治疗的人类或其它物种的疾病或症状包括但不限于：炎性或过敏性疾病与症状，包括呼吸系统过敏性疾病，诸如哮喘、过敏性鼻炎、过敏性肺病、过敏性肺炎、嗜酸细胞性蜂窝织炎(eosinophilic cellulitis)(例如Well氏综合征)、嗜酸细胞性肺炎(eosinophilicpneumonia)(例如Loeffler氏综合征、慢性嗜酸细胞性肺炎)、嗜酸细胞性筋膜炎(eosinophilic fasciitis)(例如Shulman氏综合征)、迟发型超敏反应、间质性肺病(interstitial lung disease，ILD)(例如特发性肺纤维化或与以下疾病相关的ILD：风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、强直性脊柱炎、系统性硬化、Sjogren氏综合征、多肌炎或皮肌炎)；全身性过敏反应或过敏性反应、药物变态反应(例如对青霉素、头孢菌素的变态反应)、由于摄入受污染的色氨酸所致的嗜酸性细胞增多(eosinophilia)-肌痛综合征、昆虫螫伤引起的变态反应；自身免疫性疾病，诸如风湿性关节炎、牛皮癣关节炎、多发性硬化、系统性红斑狼疮、重症肌无力、青少年型糖尿病(juvenile onset diabetes)；肾小球肾炎、自身免疫性甲状腺炎、Behcet氏疾病；移植排斥(例如在移植时)，包括同种异体移植物排异或移植物抗宿主病；炎性肠病，诸如克隆病与溃疡性结肠炎；脊椎关节病；硬皮病；牛皮癣(包括T细胞所介导的牛皮癣)与炎性皮肤病诸如皮炎、湿疹、特应性皮炎、过敏性接触性皮炎、荨麻疹；脉管炎(例如坏死性、皮肤性及过敏性脉管炎)；嗜酸细胞性肌炎(eosinophilic myositis)、嗜酸细胞性筋膜炎；伴有淋巴细胞浸润皮肤或器官的癌症。可治疗其中不想要的炎症应答欲被抑制的其它疾病或症状，其包括但不限于再灌注伤害、动脉粥样硬化、某些血液恶性肿瘤、细胞因子诱发的毒性(例如败血性休克、内毒素休克)、多肌炎、皮肌炎。可用趋化因子受体功能抑制剂治疗的人类或其它物种的感染性疾病或症状包括但不限于HIV。

可用趋化因子受体功能促进剂治疗的人类或其它物种的疾病或症状包括但不限于：免疫抑制，诸如在患有免疫缺陷综合征(诸如AIDS或其它病毒感染)的个体中，在接受放射疗法、化学疗法、自身免疫性疾病疗法或药物疗法(例如皮质类固醇疗法)的个体中，上述疗法导致免疫压抑；由于先天性缺乏受体功能或其它原因所致的免疫抑制；及感染性疾病，诸如寄生疾病，包括但不限于蠕虫感染，诸如线虫(蛔虫(round worm))；(鞭虫病、蛲虫病、蛔虫病、钩虫病、类圆线虫病、旋毛虫病、丝虫病)；吸虫(吸虫)(血吸虫病、华支睾吸虫病(clonorchiasis))、绦虫(绦虫)(包虫病、肥胖绦虫病(taeniasissaginata)、囊尾蚴病)；内脏蠕虫、内脏幼虫移行症(例如弓蛔虫属)、嗜酸细胞性胃肠炎(例如异尖属、鼠海豚线虫属)、皮肤幼虫移行症(巴西钩虫、犬钩虫)。因此，本发明化合物可用于预防与治疗很多种炎性、感染性及免疫调节性病症与疾病。

此外，趋化因子受体功能的促进剂可用于治疗上述炎性、过敏性及自身免疫性疾病，条件是递送足够的化合物，以通过诱导趋化因子受体的内陷而导致受体在细胞上的表达缺失，或以导致细胞迁移方向出现错误的方式递送化合物。

在另一方面，本发明可用于评估G蛋白质偶联受体的推断专属性激动剂或拮抗剂。本发明涉及这些化合物在调节趋化因子受体活性的化合物的制备与筛选测定中的用途。而且，本发明化合物可用于建立或确定其它化合物与趋化因子受体的结合位点(例如通过竞争性抑制)，或在测定中作为参考物，以将其已知活性与具有未知活性的化合物进行比较。当开发新的测定或方案时，本发明化合物可用于测试其有效性。具体地，所述化合物可被提供在市售试剂盒中，例如用于涉及上述疾病的医药研究。本发明化合物也可用于评估趋化因子受体的推断专属性调节剂。此外，可利用本发明化合物来检验对不被认为是趋化因子受体的G蛋白质偶联受体的专属性，所述化合物作为不发生结合的化合物的实例，或作为在这些受体上具有活性的化合物的变型，这可有助于定义相互作用的专属性位点。

本发明化合物用于治疗或预防选自以下的病症：风湿性关节炎、骨关节炎、败血性休克、动脉粥样硬化、动脉瘤、热病、心血管作用、血液动力学休克(haemodynamic shock)、脓毒病综合征(sepsis syndrome)、缺血后再灌注伤害、疟疾、克隆病、炎性肠病、分枝杆菌感染、脑膜炎、牛皮癣、充血性心力衰竭、纤维变性疾病、恶病质、移植排斥、自身免疫性疾病、皮肤炎性疾病、多发性硬化、辐射损伤、高氧肺泡损伤(hyperoxic alveolarinjure)、HIV、HIV痴呆、非胰岛素依赖性糖尿病、哮喘、过敏性鼻炎、异位性皮炎(atopic dermatitis)、特发性肺纤维化、大泡性类天疱疮、蠕虫寄生感染、过敏性结肠炎、湿疹、结合膜炎、移植、家族性嗜酸性细胞增多、嗜酸细胞性蜂窝织炎、嗜酸细胞性肺炎、嗜酸细胞性筋膜炎、嗜酸细胞性胃肠炎、药物诱发的嗜酸性细胞增多、胆囊纤维化、丘-施二氏综合征(Churg-Strauss syndrome)、淋巴瘤、霍奇金病(Hodgkin’s disease)、结肠癌、费尔蒂综合征(Felty’s syndrome)、结节病、葡萄膜炎、阿尔茨海默病、肾小球肾炎及系统性红斑狼疮。

在另一方面，本发明化合物用于治疗或预防选自以下的炎性病症：风湿性关节炎、骨关节炎、动脉粥样硬化、动脉瘤、热病、心血管作用、克隆病、炎性肠病、牛皮癣、充血性心力衰竭、多发性硬化、自身免疫性疾病及皮肤炎性疾病。

在另一方面，本发明化合物用于治疗或预防选自以下的炎性病症：风湿性关节炎、骨关节炎、动脉粥样硬化、克隆病、炎性肠病及多发性硬化。

联合疗法以预防与治疗炎性、感染性及免疫调节性病症与疾病，包括哮喘与过敏性疾病，以及自身免疫性病理，诸如风湿性关节炎与动脉粥样硬化，及上文所指出的那些病理，通过本发明化合物与其它已知用于这些用途的化合物的组合来对上述联合疗法进行说明。例如，在炎症的治疗或预防中，本发明化合物可与以下物质联用：消炎剂或止痛剂，诸如阿片制剂激动剂、脂肪氧化酶抑制剂、环氧化酶-2抑制剂、白细胞介素抑制剂(诸如白细胞介素-1抑制剂)、肿瘤坏死因子抑制剂、NMDA拮抗剂、氧化氮的抑制剂或氧化氮合成的抑制剂、非甾体消炎剂、磷酸二酯酶抑制剂或细胞因子抑制性消炎剂，诸如对乙酰氨基酚(acetaminophen)、阿司匹林、可待因、芬太尼(fentaynl)、布洛芬(ibuprofen)、吲哚美辛(indomethacin)、酮咯酸(ketorolac)、吗啡、萘普生(naproxen)、非那西丁(phenacetin)、吡罗昔康(piroxicam)、类固醇止痛剂、舒芬太尼(sufentanyl)、舒林酸(sunlindac)、干扰素α等。类似地，本发明化合物可与以下物质联用：疼痛舒解剂；增效剂，诸如咖啡因、H2-拮抗剂、二甲硅油、氢氧化铝或氢氧化镁；解充血剂，诸如苯肾上腺素、苯丙醇胺、伪麻黄碱、羟甲唑啉(oxymetazoline)、麻黄碱、萘甲唑啉(naphazoline)、丁苄唑啉、丙己君(propylhexedrine)或左旋脱氧麻黄碱；及镇咳药，诸如可待因、二氢可待因酮、卡拉美芬(caramiphen)、喷托维林(carbetapentane)或右美沙芬(dextramethorphan)；利尿剂；及镇静或非镇静抗组胺药。类似地，本发明化合物可联用其它药物，所述其它药物用于治疗/预防/抑制或改善本发明化合物对其有用的疾病或症状。所述其它药物可按其常用途径及用量与本发明化合物同时或先后给药。当本发明化合物与一种或多种其它药物同时使用时，可使用除本发明化合物外还含有所述其它药物的药物组合物。因此，本发明的药物组合物包括以下药物组合物，其除本发明化合物外还含有一种或多种其它活性成份。

可与本发明化合物联用的其它活性成份的实例，无论是分开给药或在同一药物组合物中给药，包括但不限于：(a)整联蛋白拮抗剂，诸如选择蛋白、ICAM与VLA-4；(b)类固醇类，诸如倍氯米松、甲泼尼龙、倍他米松、泼尼松、地塞米松及氢化可的松；(c)免疫抑制剂，诸如环孢菌素、他克莫司(tacrolimus)、雷帕霉素(rapamycin)及其它FK-506型免疫抑制剂；(d)抗组胺药(H1-组胺拮抗剂)，诸如溴非尼拉敏(bromopheniramine)、氯苯那敏(chlorpheniramine)、右氯苯那敏(dexchlorpheniramine)、曲普利啶(triprolidine)、氯马斯汀(clemastine)、苯海拉明(diphenhydramine)、二苯拉林(diphenylpyraline)、曲吡那敏(tripelennamine)、羟嗪(hydroxyzine)、甲地嗪(methdilazine)、异丙嗪(promethazine)、异丁嗪(trimeprazine)、阿扎他定(azatadine)、赛庚啶(cyproheptadine)、安他唑啉、非尼拉敏、美吡拉敏、阿司咪唑(astemizole)、特非那定(terfenadine)、氯雷他定(loratadin)、西替利嗪(cetirizine)、非索非那定(fexofenadine)、脱乙氧羰基氯雷他定等；(e)非类固醇抗哮喘剂，诸如β2-激动剂(特布他林、奥西那林(metaproterenol)、非诺特罗(fenoterol)、新异丙肾上腺素、沙丁胺醇(albuteral)、比托特罗(bitolterol)及吡布特罗(pirbuterol))、茶碱、色甘酸钠、阿托品、异丙托溴铵(ipratropiumbromide)、白三烯拮抗剂(扎鲁司特(zafirlukast)、孟鲁司特(montelukast)、晋仑司特(pranlukast)、伊拉司特(iralukast)、泊比司特(pobilukast)、SKB-102，203)、白三烯生物合成抑制剂(齐留通(zileuton)、BAY-1005)；(f)非甾体消炎剂(NSAID)，诸如丙酸衍生物(阿明洛芬、苯噁洛芬(benxaprofen)、布氯酸、卡洛芬、芬布芬、非诺洛芬(fenoprofen)、氟洛芬(fluprofen)、氟比洛芬、布洛芬(ibuprofen)、吲哚洛芬(indoprofen)、酮洛芬(ketoprofen)、咪洛芬(miroprofen)、萘普生(naproxen)、噁丙嗪(oxaprozin)、吡洛芬、普拉洛芬(pranoprofen)、舒洛芬(suprofen)、噻洛芬酸(tiaprofenic acid)及硫噁洛芬)，乙酸衍生物(吲哚美辛(indomethacin)、阿西美辛(acemetacin)、阿氯芬酸(alclofenac)、环氯茚酸(clidanac)、双氯芬酸(diclofenac)、芬氯酸、芬克洛酸、芬替酸(fentiazac)、呋罗芬酸、异丁芬酸、伊索克酸(isoxepac)、奥昔平酸(oxpinac)、舒林酸(sulindac)、硫平酸、托美丁(tolmetin)、齐多美辛及佐美酸(zomepirac))，灭酸衍生物(氟芬那酸、甲氯芬那酸、甲芬那酸、尼氟酸及托芬那酸)，联苯羧酸衍生物(二氟尼柳与氟苯柳(flufenisal))，昔康类(oxicam)(伊索昔康(isoxicam)、吡罗昔康(piroxicam)、舒多昔康(sudoxicam)及替诺昔康(tenoxicam))，水杨酸酯类(乙酰水杨酸、柳氮磺吡啶(sulfasalazine))，及吡唑酮类(阿扎丙宗、苄哌吡酮、戊烯保泰松、莫非布宗(mofebutazone)、羟基保泰松、保泰松)；(g)环氧化酶-2(COX-2)抑制剂；(h)磷酸二酯酶IV型(PDE-IV)抑制剂；(i)趋化因子受体的其它拮抗剂；(j)胆固醇降低剂，诸如HMG-COA还原酶抑制剂(洛伐他汀、辛伐他汀、普伐他汀、氟伐他汀、阿托伐他汀及其它他汀类)，多价螯合剂(消胆胺及考来替泊)，烟酸，非诺贝酸衍生物(如吉非贝齐、氯贝丁酯、非诺贝特和苯扎贝特)，及普罗布考；(k)抗糖尿病剂，诸如胰岛素、磺脲类、双胍类(二甲双胍)、α-葡萄糖苷酶抑制剂(阿卡波糖(acarbose))及格列酮类(glitazone)(曲格列酮(troglitazone)与吡格列酮(pioglitazone))；(l)干扰素制剂(干扰素α-2a、干扰素-2B、干扰素α-N3、干扰素β-1a、干扰素β-1b、干扰素γ-1b)；(m)抗病毒化合物，诸如依法韦仑(efavirenz)、奈韦拉平(nevirapine)、茚地那韦(indinavir)、更昔洛韦(ganciclovir)、拉米夫定(lamivudine)、泛昔洛韦(famciclovir)及扎西他滨(zalcitabine)；(o)其它化合物，诸如5-氨基水杨酸及其前药，抗代谢物，诸如咪唑硫嘌呤与6-巯基嘌呤，及细胞毒性癌症化学治疗剂。本发明化合物与第二活性成份的重量比可以改变，且有赖于各成份的有效剂量。

通常使用各成份的有效剂量。因此，例如当本发明化合物与NSAID联用时，本发明化合物与NSAID的重量比一般为约1000∶1至约1∶1000，或者为约200∶1至约1∶200。本发明化合物与其它活性成份的组合通常也在上述范围内，但在各种情况下，应使用各活性成份的有效剂量。

本发明化合物以治疗有效量给药哺乳动物。所谓″治疗有效量″指本发明化合物当单独或联用其它治疗剂对哺乳动物给药时有效预防或改善上述疾病状态或所述疾病进展的量。

剂量与制剂

本发明化合物可按口服剂型来给药，如片剂、胶囊剂(每种剂型包括持续释放或定时释放制剂)、丸剂、粉剂、颗粒剂、酏剂、酊剂、混悬剂、糖浆剂及乳剂。它们也可按静脉内(推注或输注)、腹膜内、皮下或肌内形式来给药，所有给药形式均采用药学领域技术人员所众所周知的剂型。它们可以单独给药，但通常与药物载体一起给药，所述药物载体根据选定的给药途径和标准的药学实践来选择。

当然，本发明化合物的给药方案根据已知的因素而变化，如特定药物的药物动力学特性及其给药方式和途径；接受者的物种、年龄、性别、健康、医疗状况及体重；症状的性质和程度；并行治疗的种类；治疗的频率；给药的途径；患者的肾和肝功能；及所期望的效果。医生或兽医可确定预防、逆转或阻止上述病症发展所需要的药物有效量并开具处方。

根据一般指导，当将各活性成分用于所指出的效果时，各活性成分的每日口服剂量的范围为约0.001-1000mg/kg体重，或为约0.01-100mg/kg体重/天，或为约1.0-20mg/kg/天。对于静脉内给药，在恒定速率输注期间，剂量范围为约1至约10mg/kg/分钟。本发明化合物可按单一的日剂量来给药，或将总的日剂量以每日两次、三次或四次的分份剂量来给药。

本发明化合物可通过局部使用适宜的鼻内载体以鼻内形式来给药，或通过经皮途径利用经皮的皮肤贴剂来给药。当以经皮给药系统的形式来给药时，药物给予在整个给药方案中当然是连续的而非间歇的。

化合物通常与适宜的药物稀释剂、赋形剂或载体(本申请统称为药物载体)混合而给药，所述药物载体根据预定的给药形式(即口服片剂、胶囊剂、酏剂、糖浆剂等)来适当地选择并与常规的药学实践相一致。

例如，对于片剂或胶囊剂形式的口服给药，活性药物组分可与口服的无毒的可药用惰性载体组合，所述载体有乳糖、淀粉、蔗糖、葡萄糖、甲基纤维素、硬脂酸镁、磷酸二钙、硫酸钙、甘露醇、山梨糖醇等；对于液体形式的口服给药，口服的药物组分可与任何口服的无毒的可药用惰性载体组合，所述载体有乙醇、甘油、水等。而且，当期望或需要时，还可将适宜的粘合剂、润滑剂、崩解剂及着色剂引入混合物中。适宜的粘合剂包括淀粉、明胶、天然糖如葡萄糖或β-乳糖、玉米增甜剂、天然和合成胶如阿拉伯胶、黄蓍树胶或海藻酸钠、羧甲基纤维素、聚乙二醇、蜡等。这些剂型中所使用的润滑剂包括油酸钠、硬脂酸钠、硬脂酸镁、苯甲酸钠、乙酸钠、氯化钠等。崩解剂包括但不限于淀粉、甲基纤维素、琼脂、膨润土、黄原胶等。

本发明化合物也可按脂质体递送系统的形式来给药，如单层小泡、单层大泡及多层囊泡。脂质体可由各种磷脂如胆固醇、硬脂酰胺或磷酸卵磷酯来形成。

本发明化合物还可与作为靶向药物载体的可溶性聚合物结合。这类聚合物可包括聚乙烯吡咯烷酮、吡喃共聚物、聚羟丙基甲基丙烯酰胺-苯酚、聚羟乙基天冬酰胺苯酚或取代有棕榈酰基的聚氧化乙烯-聚赖氨酸。而且，本发明化合物可与用于实现药物受控释放的生物可降解的聚合物结合，例如聚乳酸、聚乙醇酸、聚乳酸和聚乙醇酸的共聚物、聚ε-己内酯、聚羟基丁酸、聚原酸酯、聚缩醛、聚二氢吡喃、聚氰基丙烯酸酯及水凝胶的交联或两亲性嵌段共聚物。

适于给药的剂型(药物组合物)在每个剂量单位中可包含约1毫克至约1000毫克的活性成分。在这些药物组合物中，活性成分按组合物的总重量计通常以约0.5-95％重量的量存在。

明胶胶囊剂可包含活性成分和粉末载体如乳糖、淀粉、纤维素衍生物、硬脂酸镁、硬脂酸等。可使用类似的稀释剂来制造压制片。片剂和胶囊剂均可制成缓释产品，以在数小时内提供连续释放的药物。压制片可以是糖衣或覆膜的，以掩饰任何不愉快的味道并使片剂与空气隔离；也可以是肠溶衣的，以选择性地在胃肠道中崩解。

口服给药的液体剂型可包含着色剂和调味剂，以提高患者的接受性。

通常，水、适宜的油、盐水、右旋糖(葡萄糖)水溶液及相关糖溶液和二醇如丙二醇或聚乙二醇是注射液的适宜载体。注射给药的溶液可包含活性成分的水溶性盐、适宜的稳定剂及需要时的缓冲物质。抗氧化剂如单独的亚硫酸氢钠、亚硫酸钠或抗坏血酸或其组合均为适宜的稳定剂。也可使用柠檬酸及其盐和EDTA钠盐。另外，注射液可包含防腐剂，如苯扎氯铵、对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯及三氯叔丁醇。

适宜的药物载体参见本领域的标准参考文献即Mack出版公司的Remington’s Pharmaceutical Sciences。

以下举例说明了可用于给药本发明化合物的代表性的药物剂型：

胶囊剂

可通过用100毫克粉末活性成分、150毫克乳糖、50毫克纤维素和6毫克硬脂酸镁填充每个标准的两段式硬明胶胶囊来制备很多种单位胶囊剂。

软明胶胶囊剂

可制备活性成分在可消化油(例如大豆油、棉籽油或橄榄油)中的混合物，然后通过容积泵(positive displacement pump)将其注射到明胶中，以形成含有100毫克活性成分的软明胶胶囊。可对胶囊进行洗涤和干燥。

片剂

片剂可通过常规操作来制备，从而使剂量单位含有100毫克活性成分、0.2毫克胶状二氧化硅、5毫克硬脂酸镁、275毫克微晶纤维素、11毫克淀粉和98.8毫克乳糖。可涂布合适的包衣，以提高适口性或延缓吸收。

注射剂

适于注射给药的肠胃外组合物(parenteral composition)可通过以下方法来制备：在10体积％丙二醇和水中对1.5重量％活性成分进行搅拌。可用氯化钠来使溶液等渗，然后灭菌。

混悬剂

可制备用于口服给药的水性混悬剂，从而使每5mL含有100mg细微分散的活性成分、200mg羧甲基纤维素钠、5mg苯甲酸钠、1.0g山梨醇溶液(U.S.P.)和0.025mL香草醛。

例如，如果本发明化合物与其它活性药物联用，那么每日剂量可以是每千克患者体重约0.1至100毫克本发明化合物与约1至7.5毫克第二活性药物。就片剂剂型而言，本发明化合物通常可按每剂量单位约5至10毫克的量存在，而第二活性药物可按每剂量单位约1至5毫克的量存在。

当两种或多种前述第二治疗剂与本发明化合物联用时，鉴于联用时各治疗剂的累加或协同作用，各组分在典型日剂量和典型剂型中的量一般相对于其单用时的通常剂量可降低。特别当以单个剂量单位提供时，在所组合的活性成分之间潜在地存在化学相互作用。为此，当本发明化合物和第二治疗剂在单个剂量单位中组合时，对它们进行配制，使得尽管活性成分在单个剂量单位中组合，但活性成分之间的物理接触是最小化的(即降低)。例如，一种活性成分可包覆有肠溶衣。通过用肠溶衣包覆活性成分之一，不仅可使所组合的活性成分之间的接触最小化，而且可控制这些组分之一在胃肠道中的释放，使得这些组分之一不在胃中释放而在肠中释放。活性成分之一也可包覆有这样的材料，该材料影响在整个胃肠道中的持续释放并且还可使所组合的活性成分之间的物理接触最小化。此外，缓释组分可额外包覆有肠溶衣，使得该组分的释放仅发生在肠中。另一种方法涉及组合产品的配制，其中一种组分包覆有缓释和/或肠释聚合物，而另一种组分也包覆有聚合物如低粘度的羟丙基甲基纤维素(HPMC)或本领域已知的其它适宜材料，以进一步使各活性组分分开。聚合物包衣形成额外的屏障，以阻隔与其它组分的相互作用。

根据本发明所公开的内容，本领域技术人员容易明了这些及其它减小本发明组合产品各组分之间接触的方法，无论是以单个剂型给药还是以分开的形式但以同样的方式同时给药。

虽然本发明已详细且参照其具体实施方案加以描述，但本领域技术人员可明了的是，可在不偏离其主旨与范围的情况下对其进行各种改变与修饰。

Claims

1.一种式(I)化合物或其立体异构体或前药或可药用盐形式：

其中

虚线表示任选的双键；

T为

R₁为烷基、环烷基、芳基、杂环基或杂芳基，全部所述基团任选被0-5个R_1a取代；

R_1a在每次出现时独立选自烷基、卤代烷基、芳基、烯基、炔基、环烷基、环烷基烷基-、杂芳基、杂芳基烷基-、杂环基、杂环基烷基-、卤素、-NH₂、-CN、-NO₂、-C(＝O)OH、-C(＝O)O(CR₈R₈)_rR₁₀、-O(CF₂)_rCF₃、-O(CR₈R₈)_rR₁₀、-OH、-SH、-S(CR₈R₈)_rR₁₀、-S(O)₃H、-P(O)₃H₂、-C(＝O)NR₉R₉、-NR₉R₉、-S(O)₂NR₉R₉、-NR₉S(O)₂(CF₂)_rCF₃、-C(＝O)NR₉S(O)₂R₆、-S(O)₂NR₉C(＝O)OR₆、-S(O)₂NR₉C(＝O)NR₉R₉、-C(＝O)NR₉S(O)₂(CF₂)_rCF₃、-C(＝O)(CR₈R₈)_rR₁₀、-NR₉C(＝O)H、-NR₉C(＝O)(CR₈R₈)_rR₁₀、-OC(＝O)(CR₈R₈)_rR₁₀、-C(＝NR₁₄)NR₉R₉、-NHC(＝NR₁₄)NR₁₄R₁₄、-S(＝O)(CR₈R₈)_rR₁₀、-S(O)₂(CR₈R₈)_rR₁₀、-NR₉C(＝O)OR₈、-NR₉S(O)₂R₈、-S(O)₂NR₉C(O)R₆、芳基氧基-或芳基烷基-，其中所述芳基、环烷基、环烷基烷基-、杂芳基、杂芳基烷基-、杂环基、杂环基烷基-、芳基氧基-和芳基烷基-任选被0-3个R_1b取代；

R₂为烷基、环烷基、环烷基烷基-或烯基，其中所述烷基任选被-OH取代；

R₃在每次出现时为烷基；或与同一碳原子相连的任意两个R₃任选形成3至6元环；

W为氢、F、-OH、-CN或-NH₂；

R₅为卤素、-CN或-O烷基；或

W与一个R₅及它们各自所连接的碳原子一起形成3至6元含氧环，其中所述环任选被一个或多个R₅取代；

R₈在每次出现时独立为氢或烷基；

R₉在每次出现时独立为氢、烷基、环烷基、芳基、芳基烷基-、杂芳基、杂芳基烷基-、杂环基或杂环基烷基-，其中所述芳基、芳基烷基-、杂芳基、杂芳基烷基-、杂环基或杂环基烷基-任选被0-5个R_9a取代，且所述杂芳基、杂芳基烷基-、杂环基或杂环基烷基-含有1-4个选自N、O及S的杂原子；

R₁₀在每次出现时独立选自烷基、芳基、芳基烷基-、杂环基或杂环基烷基-，其中所述烷基、芳基、芳基烷基-、杂环基或杂环基烷基-任选被0-3个R_10a取代，且所述杂环基和杂环基烷基-含有1-4个选自N、O及S的杂原子；

R₁₄在每次出现时独立选自氢、烷基、环烷基或苯基；

m在每次出现时为0-2；

n为1-3；且

r为0-5。

2.权利要求1的化合物，其中所述化合物为式(Ia)化合物：

3.权利要求2的化合物，其中

T为

W为氢、F、-OH或-NH₂；

R₅为卤素、-CN或-O烷基；

R₈在每次出现时独立为氢或烷基；

R₁₄在每次出现时独立选自氢、烷基、环烷基或苯基；

m在每次出现时为0-2；

n为1-2；且

r为0-4。

4.权利要求2的化合物，其中

T为

R₂为烷基、环烷基或环烷基烷基-，其中所述烷基任选被-OH取代；

W为氢、F、-OH或-NH₂；

R₅为卤素或-CN；

R₈在每次出现时独立为氢或烷基；

R₁₄在每次出现时独立选自氢、烷基、环烷基或苯基；

m在每次出现时为0-2；

n为1-2；且

r为0-3。

5.权利要求2的化合物，其中

T为

R₂为烷基或环烷基，其中所述烷基任选被-OH取代；

W为氢、F、-OH或-NH₂；

R₅为卤素；

R₈在每次出现时独立为氢或烷基；

R₁₄在每次出现时独立选自氢、烷基、环烷基或苯基；

m在每次出现时为0-2；

n为1-2；且

r为0-2。

6.权利要求2的化合物，其中

T为

R₂为烷基或环烷基，其中所述烷基任选被-OH取代；

R₃在每次出现时为烷基；

W为氢、-OH或-NH₂；

R₅为卤素；

R₈在每次出现时独立为氢或烷基；

R₁₄在每次出现时独立选自氢、烷基、环烷基或苯基；

m在每次出现时为0-2；

n为1-2；且

r为0-2。

7.权利要求2的化合物，其中

T为

R₂为烷基或环烷基；

R₃在每次出现时为烷基；

W为氢或-OH；

R₅为卤素；

R₈在每次出现时独立为氢或烷基；

R₁₄在每次出现时独立选自氢、烷基、环烷基或苯基；

m在每次出现时为0-2；

n为1-2；且

r为0-2。

8.一种式(Ib)化合物或其立体异构体或前药或可药用盐形式：

其中

T为

R₂为烷基、环烷基、环烷基烷基-、芳基烷基-、-CH₂CH₂CH₂NHC(＝NR₁₄)NR₁₄R₁₄、-CH₂CH₂S(CR₈R₈)_rR₁₀或-CH₂CH₂CN，其中所述烷基和芳基烷基-任选被-OH取代；

R₄在每次出现时为F、-OH或烷基；或与同一碳原子相连的任意两个烷基R₄任选形成3至6元环，所述3至6元环任选含有1-4个选自N、O及S的杂原子；

W为氢、F、-OH、-CN或-NH₂；

R₅为卤素、-CN或-O烷基；

R₈在每次出现时独立为氢或烷基；

R₁₄在每次出现时独立选自氢、烷基、环烷基或苯基；

m在每次出现时为0-2；且

r为0-5。

9.权利要求8的化合物，其中所述化合物为式(Ib’)化合物：

其中W为氢或OH，且m为1或2。

10.权利要求9的化合物，其中

T为

其中所述烷基任选被-OH取代；

R₄在每次出现时为-OH或烷基；或与同一碳原子相连的任意两个烷基R₄任选形成3至6元环，所述3至6元环任选含有1-4个选自N、O及S的杂原子；

R₅为卤素、-CN或-O烷基；

R₈在每次出现时独立为氢或烷基；

R₁₄在每次出现时独立选自氢、烷基、环烷基或苯基；且

r为0-4。

11.权利要求9的化合物，其中

T为

R₂为烷基、环烷基、环烷基烷基-、-CH₂CH₂SCH₃、-CH₂CH₂CN、

其中所述烷基任选被-OH取代；

R₅为卤素或-CN；

R₈在每次出现时独立为氢或烷基；

R₁₄在每次出现时独立选自氢、烷基、环烷基或苯基；且

r为0-3。

12.权利要求9的化合物，其中

T为

R₂为烷基、环烷基、环烷基烷基-、其中所述烷基任选被-OH取代；

R₄在每次出现时为烷基；或与同一碳原子相连的任意两个烷基R₄任选形成3至6元环，所述3至6元环任选含有1-4个选自N、O及S的杂原子；

R₅为卤素；

R₈在每次出现时独立为氢或烷基；

R₁₄在每次出现时独立选自氢、烷基、环烷基或苯基；且

r为0-2。

13.权利要求9的化合物，其中

T为

R₄在每次出现时为烷基；

R₅为卤素；

R₈在每次出现时独立为氢或烷基；

R₁₄在每次出现时独立选自氢、烷基、环烷基或苯基；且

r为0-2。

14.权利要求9的化合物，其中

T为

R₂为烷基或环烷基；

R₄在每次出现时为烷基；

R₅为卤素；

R₈在每次出现时独立为氢或烷基；

R₁₄在每次出现时独立选自氢、烷基、环烷基或苯基；且

r为0-2。

15.权利要求9的化合物，其中R₂为异丙基、仲丁基或环丙基；R₄为甲基；R₅为C1、F或Br；且R₁为烷基、环烷基、芳基或杂芳基，全部所述基团任选被0-5个R_1a取代。

16.权利要求15的化合物，其中

T为

17.一种式(Ic)化合物或其立体异构体或前药或可药用盐形式：

其中

R₁₅为-NHR₁、杂芳基或芳基，其中所述杂芳基和芳基任选被0-3个R_1a取代；

R₁为芳基或杂芳基，所述芳基或杂芳基任选被0-3个R_1a取代，其条件是当R₁为苯基时，R_1a不能为邻位-甲氧基；

W为氢、F、-OH或-NH₂；

R₅为卤素、-CN或-O烷基；

R₈在每次出现时独立为氢或烷基；

R₁₄在每次出现时独立选自氢、烷基、环烷基或苯基；

m在每次出现时为0-2；

n为1-3；且

r为0-5。

18.权利要求17的化合物，其中所述化合物为式(Id)化合物：

19.权利要求17的化合物，其中

R₁为芳基或杂芳基，所述芳基或杂芳基任选被0-3个R_1a取代；

R₂为烷基或环烷基，其中所述烷基任选被-OH取代；

W为氢、F或-OH；

R₅为卤素、-CN或-O烷基；

R₈在每次出现时独立为氢或烷基；

R₁₄在每次出现时独立选自氢、烷基、环烷基或苯基；

m在每次出现时为0-2；

n为1-2；且

r为0-4。

20.权利要求17的化合物，其中

R₂为烷基或环烷基，其中所述烷基任选被-OH取代；

R₄在每次出现时为OH或烷基；或与同一碳原子相连的任意两个烷基R₄任选形成3至6元环，所述3至6元环任选含有1-4个选自N、O及S的杂原子；

W为氢或-OH；

R₅为卤素或-CN；

R₈在每次出现时独立为氢或烷基；

R₁₄在每次出现时独立选自氢、烷基、环烷基或苯基；

m在每次出现时为0-2；

n为1-2；且

r为0-3。

21.权利要求17的化合物，其中

R₂为烷基或环烷基，其中所述烷基任选被-OH取代；

R₄在每次出现时为烷基；或与同一碳原子相连的任意两个R₄任选形成3至6元环，所述3至6元环任选含有1-4个选自N、O及S的杂原子；

W为氢或-OH；

R₅为卤素；

R₈在每次出现时独立为氢或烷基；

R₁₄在每次出现时独立选自氢、烷基、环烷基或苯基；

m在每次出现时为0-2；

n为1-2；且

r为0-2。

22.权利要求17的化合物，其中

R₁₅为-NHR₁或杂芳基，其中所述杂芳基任选被0-3个R_1a取代；

R₂为烷基或环烷基，其中所述烷基任选被-OH取代；

R₄在每次出现时为烷基；

W为氢或-OH；

R₅为卤素；

R₈在每次出现时独立为氢或烷基；

R_9a在每次出现时独立选自烷基、卤代烷基、芳基、烯基、炔基、环烷基、环烷基烷基-、杂芳基、杂芳基烷基-、杂环基、杂环基烷基-、卤素、-NH₂、-CN、-NO₂、-C(＝O)OH、-C(＝O)O(CR₈R₈)_rR₁₄、-O(CF₂)_rCF₃、-O(CR₈R₈)_rR₁₄、-OH、-SH、-S(CR₈R₈)_rR₁₄、-S(O)₃H、-P(O)₃H₂、-C(＝O)NR₁₄R₁₄、-NR₁₄R₁₄、-S(O)₂NR₁₄R₁₄、-NR₁₄S(O)₂(CF₂)_rCF₃、-C(＝O)NR₁₄S(O)₂R₆、-S(O)₂NR₁₄C(＝O)OR₆、-S(O)₂NR₁₄C(＝O)NR₁₄R₁₄、-C(＝O)NR₁₄S(O)₂(CF₂)_rCF₃、-C(＝O)(CR₈R₈)_rR₁₄、-NR₁₄C(＝O)H、-NR₁₄C(＝O)(CR₈R₈)_rR₁₄、-OC(＝O)(CR₈R₈)_rR₁₄、-C(＝NR₁₄)NR₁₄R₁₄、-NHC(＝NR₁₄)NR₁₄R₁₄、-S(＝O)(CR₈R₈)_rR₁₄、-S(O)₂(CR₈R₈)_rR₁₄、-NR₁₄C(＝O)OR₈、-NR₁₄S(O)₂R₈、芳基氧基-或芳基烷基-

R₁₄在每次出现时独立选自氢、烷基、环烷基或苯基；

m在每次出现时为0-2；

n为1-2；且

r为0-2。

23.权利要求17的化合物，其中

R₁₅为-NHR₁；

R₂为烷基或环烷基；

R₄在每次出现时为烷基；

W为氢或-OH；

R₅为卤素；

R₈在每次出现时独立为氢或烷基；

R₁₄在每次出现时独立选自氢、烷基、环烷基或苯基；

m在每次出现时为0-2；

n为1-2；且

r为0-2。

24.一种式(Ie)化合物或其立体异构体或前药或可药用盐形式：

其中

虚线表示任选的双键；

T为

R₅为卤素、-CN或-O烷基；

R₈在每次出现时独立为氢或烷基；

R₁₄在每次出现时独立选自氢、烷基、环烷基或苯基；

m在每次出现时为0-2；

n为1-3；且

r为0-5。

25.一种化合物，其选自实施例中所列举的化合物。

26.一种药物组合物，所述药物组合物包含可药用载体，及治疗有效量的权利要求1的至少一种化合物。

27.权利要求1的至少一种化合物在制备用于治疗病症的药物中的用途，其中所述病症选自骨关节炎、动脉瘤、热病、心血管作用、克隆病、充血性心力衰竭、自身免疫性疾病、HIV感染、HIV相关痴呆、牛皮癣、特发性肺纤维化、移植物动脉硬化、物理或化学诱发的脑损伤、炎性肠病、齿槽炎、结肠炎、系统性红斑狼疮、肾毒血清肾炎、肾小球肾炎、哮喘、多发性硬化、动脉粥样硬化、风湿性关节炎、再狭窄、器官移植、牛皮癣关节炎、多发性骨髓瘤、变态反应、肝细胞癌、骨质疏松症、肾纤维化及癌症。

28.一种药物组合物，所述药物组合物包含可药用载体，及治疗有效量的权利要求9的至少一种化合物。

29.权利要求9的至少一种化合物在制备用于治疗病症的药物中的用途，其中所述病症选自骨关节炎、动脉瘤、热病、心血管作用、克隆病、充血性心力衰竭、自身免疫性疾病、HIV感染、HIV相关痴呆、牛皮癣、特发性肺纤维化、移植物动脉硬化、物理或化学诱发的脑损伤、炎性肠病、齿槽炎、结肠炎、系统性红斑狼疮、肾毒血清肾炎、肾小球肾炎、哮喘、多发性硬化、动脉粥样硬化、风湿性关节炎、再狭窄、器官移植、牛皮癣关节炎、多发性骨髓瘤、变态反应、肝细胞癌、骨质疏松症、肾纤维化及癌症。

30.一种药物组合物，所述药物组合物包含可药用载体，及治疗有效量的权利要求17的至少一种化合物。

31.权利要求17的至少一种化合物在制备用于治疗病症的药物中的用途，其中所述病症选自骨关节炎、动脉瘤、热病、心血管作用、克隆病、充血性心力衰竭、自身免疫性疾病、HIV感染、HIV相关痴呆、牛皮癣、特发性肺纤维化、移植物动脉硬化、物理或化学诱发的脑损伤、炎性肠病、齿槽炎、结肠炎、系统性红斑狼疮、肾毒血清肾炎、肾小球肾炎、哮喘、多发性硬化、动脉粥样硬化、风湿性关节炎、再狭窄、器官移植、牛皮癣关节炎、多发性骨髓瘤、变态反应、肝细胞癌、骨质疏松症、肾纤维化及癌症。

32.一种药物组合物，所述药物组合物包含可药用载体，及治疗有效量的权利要求24的至少一种化合物。

33.权利要求24的至少一种化合物在制备用于治疗病症的药物中的用途，其中所述病症选自骨关节炎、动脉瘤、热病、心血管作用、克隆病、充血性心力衰竭、自身免疫性疾病、HIV感染、HIV相关痴呆、牛皮癣、特发性肺纤维化、移植物动脉硬化、物理或化学诱发的脑损伤、炎性肠病、齿槽炎、结肠炎、系统性红斑狼疮、肾毒血清肾炎、肾小球肾炎、哮喘、多发性硬化、动脉粥样硬化、风湿性关节炎、再狭窄、器官移植、牛皮癣关节炎、多发性骨髓瘤、变态反应、肝细胞癌、骨质疏松症、肾纤维化及癌症。