TW201109029A - Vaccine therapy for choroidal neovascularization - Google Patents

Description

201109029 preventing diseases caused by neovascularization in human choroid (neovascular maculopathy).

The present invention provides pharmaceutical compositions and vaccines for treating and/or preventing diseases caused by neovascularization in human choroid (neovascular maculopathy), comprising at least one type each of a peptide comprising an amino acid sequence derived from a VEGFR-1 protein and having an activity of inducing cytotoxic T cells, and a peptide comprising an amino acid sequence derived from a VEGFR-2 protein and having an activity 〇f inducing cytotoxic T cells. 四、 指定代表圖： (一） 本案指定代表圖為：第（1)圖。 (二） 本代表圖之元件符號簡單說明：無。 五、 本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學式. 無。 六、 發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於用於在脈絡膜（choroid)中由血管新生 (neovascularization)所引起的疾病（血管新生龙 上汽斑病變 2 201109029 (neovascular macul〇pathy))的治療或避免。本發明也關 於用於抑制在人類脈絡膜中之血管新生的藥學組合物或疫 苗0 【先前技術】 由脈絡膜血官新生（ch〇r〇id ne〇vasculai_izatic)n， CNV)所引起之滲出型老年黃班病變為在已開發國家中重度 視覺損傷（severe visual impairment)的主要原因之一。 迄今之證據指出血管内皮生長因子（vascular endothelial growth fact〇r，VEGF)在脈絡膜血管新生中 才刀冷重要角色例如，已報導脈絡膜血管新生被抑制VEGF 之產生的化合物或抑制VEGF之訊號傳遞途徑的化合物所 抑制。此外，也已報導相較於包括光力學治療 (photodynamic therapy)的一般治療方法，抗vegf抗體顯 示較高之治療功效。因此於近年來，抗VEGF試劑已成為對 脈絡膜血管新生之藥物治療的一主要選擇。 VEGF (receptor 訊號傳遞藉由兩種類型之受體酪胺酸激酶 tyrosine kinases)，即 VEGF 受體 i(vegf reCePt〇r L VEGFR—1)與 VEGF 受體 2(VEGF recept〇r 2, VEGFR-2)。兩種受體被表現於人類脈絡膜新生血管膜盥實 驗室小鼠脈絡膜新生血管膜上。$而，順旧訊號傳遞 途徑於脈絡膜血管新生中的角色仍為有爭議的。例如，一 研究報導，ϋ由抗體的口服、基因剔除或31腸之VEGH 訊號傳遞的抑制，抑制了脈絡膜血管新生。另一研究報導， 201109029 於眼睛中藉由VEGF或胎盤生長因子i(piacental gr_Qwth factor 1，PIGF1) ’ 其為 VEGFR-2 的配體之 vEGFR — i 的活 化’導_致經由以SPARC活化VEGFR-2的脈絡膜企管新生的 活化。另一方面’對於VEGFR-2而言，一般接受VEGFR-2 訊號傳遞的活化促進脈絡膜新生血管生長。因此，以 VEGFR-2為標的之抗血管生成方法，例如抗vegfR-2試劑 或VEGFR-2抗體之系統（systemic)或局部投予，與siRNA 之玻璃體（intravitreal)投予為被預期抑制VEGFR_2訊號 傳遞與脈絡膜新生血管生長。 然而，隨著目前可得之抗VEGF試劑的問題為它們需在 4至6週間隔被重複注射。此外，具有嚴重併發症，例如 眼内炎（endophthalmitis)與視網膜剝離（retinal detachment)的高風險。因此，需要建立取代目前使用之抗 VEFG試劑的新穎治療方法。 使用一來自人類VEGF受體2之胜肽的疫苗已知為誘導 於腫瘤組織中具有強有力的抗VEGFR_2表現之内皮細胞的 細胞毒性的細胞毒殺性τ淋巴球（專利文獻丨）。使用一來 自人類VEGF受體1之胜肽的疫苗也已知為誘導具有強有力 的抗VEGFR 2表現之内皮的細胞毒性的細胞毒殺性了淋^ =(專利文獻2)。此外，使用來自聊受體2的胜狀的疫 苗已被轉認為於小鼠中具有脈絡膜血管新生抑制功效（專 利文獻3)。然而，如同在其他組織中，在脈絡膜中血管新 生之機制中有許多不清楚的點，且於人類脈絡膜中之有 抑制脈絡膜血管新生的疫苗的存在為未知。 4 201109029 【先前技術文獻】 [專利文獻（Patent Document)] [專利文獻 1] WO 2004/024766 [專利文獻 2] W0 2006/093030 [專利文獻 3] W0 2008/099908 【發明内容】 [本發明所要解決的問題] 有鑑於上述情形達成本發明。一由本發明 標 導 法 、^ T元成之目 為提供用於治療及/或避免由人類脈絡膜中放 g新生所 致之疾病（血管新生黃斑病變）的新穎之筚 求干成劑逊 [解決問題的手段] 本發明投予包含一 VEGFR-1衍生胜肽之藥學組合物 疫苗至血管新生黃斑病變病患，且因此發顯此可有效抑/ 人類脈絡膜血管新生兒沒有導致示意安全議題的問題，Ρ : 因此完成本發明。 更特別地本發明乂供用於治療及/或避免於人類脈絡 膜中由血新生所引起的疾病（血管新生黃斑病變）之藥學 組合物，其包括，至少一包含來自_ vegf受體工蛋白質的 胺基酸序列與具有一誘導細胞毒殺性τ細胞之能力之胜 肽及/或一編碼出其的多核苷酸為活性成分。 本發月也k供用於治療及/或避免於人類脈絡膜中由 管新生所引起的疾病（血管新生黃斑病變）之疫苗，其包 201109029 括’至少一包含來自一 VEGF受體1蛋白質的一胺基酸序列 與具有一誘導細胞毒殺性τ細胞之能力之胜肽及/或一編 碼出其的多核苷酸為活性成分。 本發明也提供用於抑制於人類脈絡膜中血管新生之藥 學組合物’其包括，至少一包含來自一 VEGF受體1蛋白質 的一胺基酸序列與具有一誘導細胞毒殺性T細胞之能力之 胜肽及/或一編碼出其的多核苷酸為活性成分。 此外’本發明也提供用於抑制於人類脈絡膜中血管新 生之疫苗’其包括’至少一包含來自一 VEGF受體1蛋白質 的一胺基酸序列與具有一誘導細胞毒殺性T細胞之能力之 胜肽及/或一編碼出其的多核苷酸為活性成分。 本發明提供用於治療及/或避免於人類脈絡膜中由血 管新生所引起的疾病之方法，其包括投予一個體至少一包 含來自一 VEGF受體1蛋白質的一胺基酸序列與具有一誘導 細胞毒殺性T細胞之能力之胜肽及/或一編碼出其的多核 苷酸的步驟d 本發明也提供用於抑制於人類脈絡膜中血管新生之方 法’其包括投予一個體至少一包含來自一 VEGF受體1蛋白 質的一胺基酸序列與具有一誘導細胞毒殺性T細胞之能力 之胜狀及/或一編碼出其的多核苷酸的步驟。 本發明更提供用一包含來自一 VEGF受體1蛋白質的一 胺基酸序列與具有一誘導細胞毒殺性T細胞之能力之胜肽 及/或一編碼出其的多核苷酸於製造用於治療及/或避免於 人類脈絡膜中由血管新生所引起的疾病之藥學組合物的用 201109029 途。 此外，本發明提供用一包含來自一 VEGF受體1蛋白質 的一胺基酸序列與具有一誘導細胞毒殺性了細胞之能力之 胜肽及/或一編碼出其的多核苷酸於製造用於治療及/或避 免於人類脈絡膜中由血管新生所引起的疾病之疫苗的用 途。 本發明也提供用一包含來自一VEGF受體1蛋白質的一 胺基酸序列與具有一誘導細胞毒殺性Τ細胞之能力之胜肽 及/或一編碼出其的多核苷酸於製造用於抑制於人類脈絡 膜中血管新生之藥學組合物的用途。 此外，本發明也提供用一包含來自一 Vegf受體1蛋白 質的一胺基酸序列與具有一誘導細胞毒殺性τ細胞之能力 之胜肽及/或一編碼出其的多核苷酸於製造用於抑制於人 類脈絡膜中血管新生之疫苗的用途。 本發明更提供一包含來自一 VEGF受體1蛋白質的—胺 基酸序列與具有一誘導細胞毒殺性τ細胞之能力之用於治 療及/或避免於人類脈絡膜中由血管新生所引起的疾病令 的用途。 或者，本發明更提供製造用於治療或避免於人類脈絡 膜中由血管新生所引起的疾病之藥學組合物的方法或製 程，其中該方法包括將一藥學上或生理上可接受之载體與 包含來自一 VEGF受體1蛋白質的一胺基酸序列與具有一誘 導細胞毒殺性T細胞之能力之胜肽及/或一編碼出其的多 核苷酸的活性成分一起配製的步驟。 201109029 在另一實施例中’本發明也提供製造用於治療或避免 於人類脈絡膜中由血管新生所引起的疾病之藥學組合物的 方法或製程，其中該方法包括將一活性成分與一藥學上或 生理上可接受之載體混合之步驟’其中該活性成分為包含 來自一 VEGF受體1蛋白質的一胺基酸序列與具有一誘導細 胞毒殺性T細胞之能力之胜肽及/或一編碼出其的多核苷 酸。 或者，在一貫細•例中，在本發明中，VegfR-Ι衍生胜 肽可被與一 VEGFR-2衍生胜肽結合投予以治療或抑制人類 脈絡膜血管新生。因此，本發明提供用於治療及/或避免於 人類脈絡膜中由血管新生所引起的疾病（血管新生黃斑病 變）之藥學組合物，包括至少一類型之各個擇自由下列所組 成之群組的胜肽為活性成分： U)包含來自一 VEGFR-1蛋白質的一胺基酸序列與具 有一誘導細胞毒殺性T細胞之能力之胜肽及/或一編碼出 其的多核苷酸，以及 (b)包含來自一 VEGFR-2蛋白質的一胺基酸序列與具 有一誘導細胞毒殺性T細胞之能力之胜肽及/或一編碼出 其的多核苷酸。 本發明也提供用於治療及/或避免於人類脈絡膜中由 血管新生所引起的疾病之疫苗，包括至少一類型之各個擇 自由下列所組成之群組的胜肽為活性成分： (a)包含來自一 VEGFR-1蛋白質的一胺基酸序列與具 有一誘導細胞毒殺性T細胞之能力之胜肽及/或一編碼出 201109029 其的多核苷酸以及 (b)包含來自一 VEGFR-2蛋白質的一胺基酸序列與具 有一誘導細胞毒殺性T細胞之能力之胜肽及/或一編碼出 其的多核苷酸。 本發明也提供用於抑制於人類脈絡膜中血管新生之藥 學組合物，包括至少一類型之各個擇自由下列所組成之群 組的胜肽為活性成分： (a) 包含來自一 VEGFR-1蛋白質的一胺基酸序列與具 有一誘導細胞毒殺性T細胞之能力之胜肽及/或一編碼出 其的多核苷酸以及 (b) 包含來自一VEGFR-2蛋白質的一胺基酸序列與具 有一誘導細胞毒殺性T細胞之能力之胜肽及/或一編碼出 其的多核苷酸。 此外’本發明也提供用於抑制於人類脈絡膜中血管新 生之疫苗’包括至少一類型之各個擇自由下列所組成之群 組的胜肽為活性成分： (a) 包含來自一 VEGFR-1蛋白質的一胺基酸序列與具 有一誘導細胞毒殺性T細胞之能力之胜肽及/或一編碼出 其的多核苷酸以及 (b) 包含來自一 VEGFR-2蛋白質的一胺基酸序列與具 有一誘導細胞毒殺性T細胞之能力之胜肽及/或一編碼出 其的多核苷酸。 本發明提供用於治療及/或避免於人類脈絡膜中由血 官新生所引起的疾病之方法，包括投予一個體至少一類型 201109029 之各個擇自由下列所組成之群組的胜肽的步驟： (a) 包含來自一 VEGFR-1蛋白質的一胺基酸序列與具 有一誘導細胞毒殺性T細胞之能力之胜肽及/或一編碼出 其的多核苷酸以及 (b) 包含來自一 VEGFR-2蛋白質的一胺基酸序列與具 有一誘導細胞毒殺性T細胞之能力之胜肽及/或一編碼出 其的多核苷酸。 本發明也提供用於抑制於人類脈絡膜中血管新生之方 法，包括投予一個體至少一類型之各個擇自由下列所組成 之群組的胜肽的步驟： (a) 包含來自一 VEGFR-1蛋白質的一胺基酸序列與具 有一誘導細胞毒殺性T細胞之能力之胜肽及/或一編碼出 其的多核苷酸以及 (b) 包含來自一 VEGFR-2蛋白質的一胺基酸序列與具 有—誘導細胞毒殺性T細胞之能力之胜肽及/或一編碼出 其的多核皆酸。 之群組的胜肽於製造 由血管新生所引起的 用 疾 有 其 本發明更提供擇自由下列所組成 於治療及/或避免於人類脈絡膜中 病之藥學組合物的用途： (a)包含來自一 VEGFR-1蛋白暂从 贫曰質的一胺基酸序列與具 —誘導細胞毒殺性T細胞之能六a f i Λ κ lb力之胜肽及/或一編碼出 的多核苷酸以及 有一 (b)包含來自一 誘導細胞毒殺性 VEGFR 2蛋白質的一胺基酸序列與具 T細胞之能力之胜肽及/或一編碼出 10 201109029 其的多核苷酸。 i此外，本發明提供擇自由下列所組成之群組的胜肽於 製造用於治療及/或避免於人類脈絡膜中由血管新生所引 起的疾病之疫苗的用途·· (a) 包含來自-聊η蛋白質的—胺基酸序列與具 有—誘導細胞毒殺性Τ細胞之能力之胜肽及/或一編碼出 其的多核苷酸以及 (b) 包含來自 _ VEGFR-9 K2蛋白質的一胺基酸序列與具 一誘導細胞毒殺性rp “ Α ^ τ、、.田胞之ab力之胜肽及/或一編碼出 具的多核苷酸。 本發明也提供擇自由下列所組成之群組的胜肽於製造 於抑制於人類脈絡膜中血管新生之藥學組合物的用途： (a) 包含來自一 VEGFR-1 右 、 K1蛋白質的一胺基酸序列與具 誘導細胞毒殺性T 6m & 复& '，，田胞之能力之胜肽及/或一編碼出 ，、的多核苷酸以及 (b) 包含來自一 vegfR-o π 有—蛋白質的一胺基酸序列與具 ~~誘導細胞毒殺性Τ細胎々At丄 复认 > 之此力之胜狀及/或一編碼出 丹的多核苷酸。 此外，本發明也提佴 於制、Λ 、禪自由F列所組成之群組的胜肽 、裊w用於抑制於人類脈 、絡膜中血管新生之疫苗的用途： Ca)包含來自一 VEgfi? ί 有—球1蛋白質的一胺基酸序列與具 誘導細胞毒殺性T %胎+ 复认々 胞之能力之胜肽及/或一編碼出 再的多核苷酸以及 (b)包含來自一 R 2蛋白質的一胺基酸序列與具 11 201109029 有一誘導細胞毒殺性τ細胞之能力之胜肽及/或一編碼出 其的多核苷酸。 此外’本發明提供擇自由下列所組成之群組的胜肽於 用於治療及/或避免於人類脈絡膜中由血管新生所引起的 疾病的用途： (a) 包含來自一 VEGFR-1蛋白質的一胺基酸序列與具 有一誘導細胞毒殺性T細胞之能力之胜肽及/或一編碼出 其的多核苷酸以及 (b) 包含來自一 VEGFR-2蛋白質的一胺基酸序列與具 有一誘導細胞毒殺性T細胞之能力之胜肽及/或一編碼出 其的多核苷酸。 此外’本發明提供擇自由下列所組成之群組的胜肽於 用於抑制於人類脈絡膜中由血管新生所引起的疾病的用 途： (a) 包含來自一 VEGFR-1蛋白質的一胺基酸序列與具 有一誘導細胞毒殺性T細胞之能力之胜肽及/或一編碼出 其的多核苷酸以及 (b) 包含來自一 VEGFR-2蛋白質的一胺基酸序列與具 有一誘導細胞毒殺性T細胞之能力之胜肽及/或一編碼出 其的多核苷酸。 或者，本發明更提供製造用於治療或避免於人類脈絡 暝中由血管新生所引起的疾病之藥學組合物的方法或製 心，其中該方法或製程包括將一藥學上或生理上可接受之 栽體與一活性成分一起配製的步驟，活性成分係擇自： 12 201109029 (a)包含來自一 VEGFR-1蛋白質的一胺基酸序列與具 有一誘導細胞毒殺性T細胞之能力之胜肽及/或一編碼出 其的多核苷酸以及 (b)包含來自一 VEGFR-2蛋白質的一胺基酸序列與具 有一誘導細胞毒殺性T細胞之能力之胜肽及/或一編碼出 其的多核普酸，為活性成分。 或者’本發明更提供製造用於治療或避免於人類脈絡 膜中由血管新生所引起的疾病之疫苗的方法或製程，其中 該方法或製程包括將一藥學上或生理上可接受之載體與一 活性成分一起配製的步驟，活性成分係擇自： 包含來自一 VEGFR-i蛋白質的一胺基酸序列與具 有誘導細胞毒殺性τ細胞之能力之胜肽及/或一編碼出 其的多核苷酸以及 (b)包3來自一VEGFR-2蛋白質的一胺基酸序列與具 有一誘導細胞毒㈣T細胞之能力之胜肽及/或-編碼出 其的多核苷酸，為活性成分。 在另貝％例中，本發明也提供製造用於治療或避免 ;人類脈絡膜中由血督新生所引起的疾病之藥學組合物的 方法或製程，纟中該方法或製程包括將一活性成分與-藥 學上或生理上可接受之載體混合的步驟，纟中該活性成分 係擇自： (a)包含來自_ vegfr-i 有一誘導細胞毒殺性T細胞 其的多核苷酸以及 蛋白質的一胺基酸序列與具 之能力之胜肽友/或一編碼出 13 201109029 (b)包含來自一 VEGFR-2蛋白質的一胺基酸序列與具 有一誘導細胞毋殺性T細胞之能力之胜肽及/或一編碼出 其的多核苷酸。 在另一實施例中，本發明也提供製造用於治療或避免 於人類脈絡膜中由血管新生所引起的疾病之疫苗的方法或 製程，其中該方法或製程包括將一活性成分與一藥學上或 生理上可接受之載體混合的步驟，其中該活性成分係擇自： (a) 包含來自一 VEGFR-1蛋白質的一胺基酸序列與具 有一誘導細胞毒殺性T細胞之能力之胜肽及/或一編碼出 其的多核苷酸以及 (b) 包含來自一 VEGFR-2蛋白質的一胺基酸序列與具 有一誘導細胞毒殺性T細胞之能力之胜肽及/或一編碼出 其的多核苦酸。 更特別地，本發明提供下列[丨]至[3 〇 ]; [1 ] 一種用於治療及/或避免於人類脈絡膜中由血管 新生所引起的疾病（血管新生黃斑病變）之藥學組合物，包 括，（a)包含來自一 vEGF受體i蛋白質的一胺基酸序列與 具有一誘導細胞毒殺性τ細胞之能力之胜肽的至少一類型 的胜肽或一編碼出其的多核苷酸為活性成分。 [2 ] [1 ]之藥學組合物，其中（a)之前述胜肽包括下列 (〇與（i i)之胜肽： (I) 至少一胜肽，其包括任一擇自由序列辨識號：1至 4所組成之群組的胺基酸序列； (II) 至少一胜肽，其包括在任一擇自由序列辨識號：1 14 201109029 至4所組成之群組的胺基酸序列中具有一或多個胺基酸取 代、刪除、加入及/或插入的胺基酸序列。 [3] [2]之藥學組合物’其中（π)之前述胜肽為下列 (1)與（6 )之胜肽的任何一個·· (1) 一胜肽’於其中來自序列辨識號：1至3之胺基酸 序列之任一個的N端的第二個胺基酸為白胺酸或甲硫丁胺 酸； (2) —胜肽，於其中序列辨識號：1至3之胺基酸序列 之任一個的C端胺基酸為纈胺酸或白胺酸； (3) —胜肽’於其中來自序列辨識號：1至3之胺基酸 序列之任一個的N端的第二個胺基酸為白胺酸或甲硫丁胺 酸’且序列辨識號：1至3之胺基酸序列之任一個的C端 胺基酸為纈胺酸或白胺酸； (4) 一胜肽’於其中來自序列辨識號：4之胺基酸序列 的N端的第二個胺基酸為苯丙胺酸、酪胺酸、曱硫丁胺酸 或色胺酸； (5) —胜肽，於其中序列辨識號：4之胺基酸序列的C 端胺基酸為笨丙胺酸、白胺酸、異白胺酸、色胺酸或曱硫 丁胺酸；以及 (6) —胜肽’於其中來自序列辨識號：4之胺基酸序列 的N端的第二個胺基酸為笨丙胺酸、酪胺酸、曱硫丁胺酸 或色胺酸，且序列辨識號：4之胺基酸序列的C端胺基酸 為苯丙胺酸、白胺酸、異白胺酸、色胺酸或曱硫丁胺酸。 [4 ] [ 1 ]至[3 ]之任一項之藥學組合物，其中該組合物 15 201109029 更包括，（b)包含來自一 VEGF受體2蛋白質的一胺基酸序 列與具有一誘導細胞毒殺性T細胞之能力之胜肽的至少一 類型的胜肽。 [5] [4]之藥學組合物，其中（b)之前述胜肽包括下列 (i)與（ii)之胜肽： (i) 至少一胜狀’其包括任一擇自由序列辨識號.5至 17所組成之群組的胺基酸序列；以及 (ii) 至少一胜肽，其包括在任一擇自由序列辨識號：5 至17所組成之群組的胺基酸序列中具有一或多個胺基酸 取代、刪除、加入及/或插入的胺基酸序列。 [6] [5]之藥學組合物，其中（ii)之前述胜肽為下列 (1)與（6)之胜肽的任何一個： (1) 一胜肽，於其中來自序列辨識號：11至17之胺基 酸序列之任一個的N端的第二個胺基酸為白胺酸或曱硫丁 胺酸； (2) —胜肽，於其中序列辨識號：11至17之胺基酸序 列之任一個的C端胺基酸為纈胺酸或白胺酸； (3) —胜肽，於其中來自序列辨識號：η至17之胺基 酸序列之任一個的Ν端的第二個胺基酸為白胺酸或甲硫丁 胺酸’且序列辨識號：1丨至17之胺基酸序列之任一個的c 端胺基酸為纈胺酸或白胺酸； (4) 一胜肽’於其中來自序列辨識號：5至10之胺基 酸序列之任一個的Ν端的第二個胺基酸為笨丙胺酸、酪胺 酸、甲硫丁胺酸或色胺酸； 16 201109029 * (5) 一胜肽，於其中序列辨識號：5至1 〇之胺基酸序 列之任一個的C端胺基酸為苯丙胺酸、白胺酸 '異白胺酸、 色胺酸或曱硫丁胺酸；以及 (6) —胜肽，於其中來自序列辨識號：5至1〇之胺基 馱序列之任一個的]^端的第二個胺基酸為苯丙胺酸、酪胺 醆、甲硫丁胺酸或色胺酸，且序列辨識號：5至1〇之胺基 馱序列之任一個的c端胺基酸為苯丙胺酸、白胺酸、異白 胺酸、色胺酸或甲硫丁胺酸。 (7) [丨]至[6]之任一項之藥學組合物，其中該於脈絡 膜中由血官新生所引起的疾病（血管新生黃斑病變）係擇自 滲出型老年黃班病變、近視黃斑病變、血管樣紋、中心性 滲出性脈絡膜視網膜病變、各種視網膜色素上皮病變、脈 絡膜萎縮、脈絡膜缺失症與脈絡膜骨瘤。 [8 ] [ 1 ]至[7 ]之任一項之藥學組合物，其被投予一人 類白血球組織抗原為人類白血球組織抗原_A〇2或人類白血 球組織抗原-A 2 4的個體。 [9 ] 一種用於治療及/或避免於人類脈絡膜中由血管 新生所引起的疾病（血管新生黃斑病變）之疫苗，包括，（a) 包含來自一 VEGF受體1蛋白質的一胺基酸序列與具有一誘 導細胞毒殺性T細胞之能力之胜肽的至少一類型的胜肽或 —編碼出其的多核苷酸為活性成分。 [10] [9]之疫苗’其中（a)之前述胜肽包括下列（i) 與（i i)之胜肽： (i)至少一胜肽，其包括任一擇自由序列辨識號·· 1至 17 201109029 4所組成之群組的胺基酸序列；以及 (ii)至少一胜肽’其包括在任一擇自由序列辨識號：1 至4所組成之群組的胺基酸序列中具有一或多個胺基酸取 代、刪除、加入及/或插入的胺基酸序列。 [11] [10]之疫苗，其中（ii)之前述胜肽為下列（1) 與（6 )之胜肽的任何一個： (1) 一胜肽，於其中來自序列辨識號：1至3之胺基酸 序列之任一個的N端的第二個胺基酸為白胺酸或甲硫丁胺 酸； (2) —胜肽，於其中序列辨識號：1至3之胺基酸序列 之任一個的C端胺基酸為纈胺酸或白胺酸； (3) —胜肽，於其中來自序列辨識號：1至3之胺基酸 序列之任一個的N端的第二個胺基酸為白胺酸或甲硫丁胺 酸’且序列辨識號：1至3之胺基酸序列之任一個的C端 胺基醆為纈胺酸或白胺酸； (4) 一胜肽，於其中來自序列辨識號：4之胺基酸序列 的1^端的第二個胺基酸為苯丙胺酸、酪胺酸、曱硫丁胺酸 或色胺酸；

(5) —胜肽’於其中序列辨識號：4之胺基酸序列的C 端胺基酸為笨丙胺酸 '白胺酸、異白胺酸、色胺酸或甲硫 丁胺酸；以及 (6) —胜肽’於其中來自序列辨識號：4之胺基酸序列 的N端的第二個胺基酸為笨丙胺酸、酪胺酸、甲硫丁胺酸 或色胺’且序列辨識號：4之胺基酸序列的c端胺基酸 18 201109029 為苯丙胺酸、白胺酸、異白胺酸、色胺酸或曱硫丁胺酸。 [12] [9]至[11]之任一項之疫苗，其中該組合物更包 括，（b)包含來自一 VEGF受體2蛋白質的一胺基酸序列與 具有一誘導細胞毒殺性T細胞之能力之胜肽的至少一類型 的胜肽。 [13] [12]之疫苗’其中（b)之前述胜肽包括下列（i) 與（i i)之胜肽： (I) 至少一胜肽，其包括序列辨識號：5至17之任一 個的胺基酸序列；以及 (II) 至少一胜肽，其包括在任一擇自由序列辨識號：5 至17所組成之群組的胺基酸序列中具有一或多個胺基酸 取代、刪除、加入及/或插入的胺基酸序列。 [14] [13]之疫苗，其中（U)之前述胜肽為下列（1) 與（6)之胜肽的任何一個： (1) 一胜肽，於其中來自序列辨識號：丨丨至17之胺基 酸序列之任一個的N端的第二個胺基酸為白胺酸或甲硫丁 胺酸； 一胜肽，於其中序列辨識號：11至17之胺基酸月 列之任一個的C端胺基酸為纈胺酸或白胺酸； ^ (3) 一胜肽，於其中來自序列辨識號：11至17之胺遵 =序列之任-個的Ν端的第二個胺基酸為白胺酸或甲硫 胺酸，且序列诚^甜、％ 識5虎.11至17之胺基酸序列之任-個的（ 為胺基酸為纈胺酸或白胺酸； (胜肽，於其中來自序列辨識號：5至1〇之胺基 19 201109029 酸序列之任一個的N端的第二個胺基酸為笨丙胺酸、酪胺 酸、甲硫丁胺酸或色胺酸； (5) —胜肽，於其中序列辨識號：5至1〇之胺基酸序 列之任一個的C端胺基酸為笨丙胺酸、白胺酸、異白胺酸、 色胺酸或甲硫丁胺酸；以及 (6) —胜肽’於其中來自序列辨識號：5至之胺基 酸序列之任一個的N端的第二個胺基酸為苯丙胺酸、酪胺 酸、曱硫丁胺酸或色胺酸，且序列辨識號：5至1〇之胺基 酸序列之任一個的C端胺基酸為苯丙胺酸、白胺酸、異白 胺酸、色胺酸或甲硫丁胺酸。 [15] [9]至[14]之任一項之疫苗，其中該於脈絡膜中 由血管新生所引起的疾病（血管新生黃斑病變）係擇自滲出 型老年㈢班病變、近視黃斑病變、血管樣紋、中心性滲出 性脈絡膜視網膜病變、各種視網膜色素上皮病變、脈絡膜 萎縮、脈絡膜缺失症與脈絡膜骨瘤。 [16] [ 9 ]至[15 ]之任一項之疫苗，其被投予一人類白 血球組織抗原為人類白血球組織抗原_A〇2或人類白血球組 織抗廣-A 2 4的個體。 [17] —種用於抑制在人類脈絡膜中之血管新生的藥 學組合物，包括’包含來自一 VEGF受體1蛋白質的— 胺基知序列與具有一誘導細胞毒殺性T細胞之能力之胜肽 的至少一類型的胜肽或一編碼出其的多核苷酸為活性成 分。 [18] [17]之藥學組合物，其中（a)之前述胜肽包括下 20 201109029 列（i)與（i i)之胜肽： (i) 至少一胜肽，其包括任一擇自由序列辨識號：1至 4所組成之群組的胺基酸序列；以及 (ii) 至少一胜肽，其包括在任一擇自由序列辨識號：1 至4所組成之群組的胺基酸序列中具有一或多個胺基酸取 代、刪除、加入及/或插入的胺基酸序列。 [19] [ 18 ]之藥學組合物，其中（i i)之前述胜肽為下 列（1)與（6)之胜肽的任何一個： (1) 一胜肽，於其中來自序列辨識號：1至3之胺基酸 序列之任一個的N端的第二個胺基酸為白胺酸或曱硫丁胺 酸； (2) —胜肽，於其中序列辨識號：1至3之胺基酸序列 之任一個的C端胺基酸為纈胺酸或白胺酸： (3) —胜肽，於其中來自序列辨識號：1至3之胺基酸 序列之任一個的N端的第二個胺基酸為白胺酸或曱硫丁胺 酸’且序列辨識號：1至3之胺基酸序列之任一個的c端 胺基酸為纈胺酸或白胺酸； (4) —胜肽’於其中來自序列辨識號：4之胺基酸序列 的Njw的第二個胺基酸為苯丙胺酸、酪胺酸、曱硫丁胺酸 或色胺酸； (5) —胜肽，於其中序列辨識號：4之胺基酸序列的c 端胺基酸為笨丙胺酸、白胺酸、異白胺酸、色胺酸或甲硫 丁胺酸；以及 (6) —胜肽，於其中來自序列辨識號：4之胺基酸序列 21 201109029 的N端的第二個胺基酸為苯丙胺酸、酷胺酸、甲硫丁胺酸 或色胺酸，且序列辨識號：4之胺基酸序列的C端胺基酸 為苯丙胺酸、白胺酸、異白胺酸、色胺酸或甲硫丁胺酸。 [20] [17]至[19]之任一項之藥學組合物，其中該組 合物更包括，（b)包含來自一 VEGF受體2蛋白質的一胺基 酸序列與具有一誘導細胞毒殺性T細胞之能力之胜肽的至 少一類型的胜肽。 [21] [20]之藥學組合物，其中（b)之前述胜肽包括下 列（i )與（i i)之胜肽： (i) 至少一胜肽’其包括序列辨識號：5至17之任一 個的胺基酸序列；以及 (ii) 至少一胜肽，其包括在任一擇自由序列辨識號：5 至1 7所組成之群組的胺基酸序列中具有一或多個胺基酸 取代、刪除、加入及/或插入的胺基酸序列。 [22] [21]之藥學組合物，其中（i〇之前述胜肽為下 列（1)與（6)之胜肽的任何一個： (1) 一胜肽’於其中來自序列辨識號：11至17之胺基 酸序列之任一個的N端的第二個胺基酸為白胺酸或曱硫丁 胺酸； (,2)—胜肽，於其中序列辨識號：u至17之胺基酸序 列之任一個的C端胺基酸為纈胺酸或白胺酸； (3)—胜肽，於其中來自序列辨識號：u至17之胺基 酸序列之任一個的N端的第二個胺基酸為白胺酸或甲硫丁 胺酸’且序列辨識號：11至1 7之胺基酸序列之任一個的c 22 201109029 端胺基酸為纈胺酸或白胺酸； (4) 一胜肽，於其中來自序列辨識號：5至1〇之胺基 酸序列之任一個的1^端的第二個胺基酸為笨丙胺酸、酪胺 酸、甲硫丁胺酸或色胺酸； :5至丨〇之胺基酸序 、白胺酸、異白胺酸、 (5) —胜肽，於其中序列辨識號 列之任一個的C端胺基酸為苯丙胺酸 色胺酸或甲硫丁胺酸；以及 (6) —胜肽，於其中來自序列辨識號：5至之胺基 酸序列之任一個的N端的第二個胺基酸為笨丙胺酸、酪胺 酸、甲硫丁胺酸或色胺酸，且序列辨識號：5至丨〇之胺基 酸序列之任一個的C端胺基酸為苯丙胺酸、白胺酸、異白 胺酸、色胺酸或甲硫丁胺酸。 [23] [ 15 ]至[1 9 ]之任一項之藥學組合物，其被投予 一人類白血球組織抗原為人類白血球组織抗原_ A 〇 2或人類 白血球組織抗原- A24的個體。 [24 ] 一種用於抑制在人類脈絡膜中之血管新生的疫 苗，包括，（a)包含來自一VEGF受體1蛋白質的一胺基酸 序列與具有一誘導細胞毒殺性T細胞之能力之胜肽的至少 一類型的胜肽或一編碼出其的多核苷酸為活性成分。 [25] [24]之疫苗，其中（a)之前述胜肽包括下列（i) 與（i i)之胜肽： (i) 至少一胜肽，其包括任一擇自由序列辨識號： 4所組成之群組的胺基酸序列；以及 (ii) 至少一胜肽，其包括在任一擇自由序列辨識號：i 23 201109029 至4所組成之群組的胺基酸序列中具有一或多個胺基酸取 代、刪除、加入及/或插入的胺基酸序列。 [26] [25]之疫苗，其中（i i)之前述胜肽為下列（1) 與（6)之胜肽的任何一個： (1) 一胜肽，於其中來自序列辨識號：1至3之胺基酸 序列之任一個的N端的第二個胺基酸為白胺酸或曱硫丁胺 酸； (2) —胜肽，於其中序列辨識號：1至3之胺基酸序列 之任一個的C端胺基酸為纈胺酸或白胺酸； (3) —胜肽，於其中來自序列辨識號：1至3之胺基酸 序列之任一個的N端的第二個胺基酸為白胺酸或曱硫丁胺 酸，且序列辨識號：1至3之胺基酸序列之任一個的C端 胺基酸為纈胺酸或白胺酸； (4) 一胜肽’於其中來自序列辨識號：4之胺基酸序列 的N端的第二個胺基酸為苯丙胺酸、酪胺酸、甲硫丁胺酸 或色胺酸； (5) —胜肽’於其中序列辨識號：4之胺基酸序列的C 端胺基酸為苯丙胺酸、白胺酸、異白胺酸、色胺酸或甲硫 丁胺酸；以及 (6) —胜肽’於其中來自序列辨識號：4之胺基酸序列 的N端的第二個胺基酸為苯丙胺酸、酪胺酸、甲硫丁胺酸 或色胺酸’且序列辨識號：4之胺基酸序列的C端胺基酸 為苯丙胺酸、白胺酸、異白胺酸、色胺酸或甲硫丁胺酸。 [27] [24]至[26]之任一項之疫苗，其中該組合物更 24 201109029 包括，（b)包含來自一 VEGF受體2蛋白質的一胺基酸序列 與具有一誘導細胞毒殺性T細胞之能力之胜肽的至少一類 型的胜肽。 [28] [27]之疫苗，其中（b)之前述胜肽包括下列（i) 與（ii)之胜肽： (i) 至少一胜肽，其包括序列辨識號：5至17之任一 個的胺基酸序列；以及 (ii) 至少一胜肽，其包括在任一擇自由序列辨識號：5 至17所組成之群組的胺基酸序列中具有一或多個胺基酸 取代、刪除、加入及/或插入的胺基酸序列。 [29] [28]之疫苗，其中（ii)之前述胜肽為下列（1) 與（6)之胜狀的任何—個： (1) 一胜肽，於其中來自序列辨識號：11至17之胺基 酸序列之任一個的N端的第二個胺基酸為白胺酸或曱硫丁 胺酸； (2) —胜肽，於其中序列辨識號：u至I?之胺基酸序 列之任一個的C端胺基酸為纈胺酸或白胺酸； (3) —胜肽，於其中來自序列辨識號：^至I?之胺基 西文序列之任一個的n端的第二個胺基酸為白胺酸或甲硫丁 胺酸’且序列辨識號：11至17之胺基酸序列之任一個的c 端胺基酸為綠胺酸或白胺酸； (4) 一胜肽，於其中來自序列辨識號：5至1〇之胺基 酸序列之任一個的N端的第二個胺基酸為苯丙胺酸、酪胺 酸、曱硫丁胺酸或色胺酸； 25 201109029 (5) —胜肽，於其中序列辨識號：5至1〇之胺基酸序 列之任一個的C端胺基酸為苯丙胺酸、白胺酸、異白胺酸、 色胺酸或甲硫丁胺酸；以及 (6) —胜肽，於其中來自序列辨識號：5至丨〇之胺基 酸序列之任一個的N端的第二個胺基酸為苯丙胺酸、酪胺 酸' 甲硫丁胺酸或色胺酸，且序列辨識號；5至1〇之胺基 酸序列之任一個的C端胺基酸為苯丙胺酸、白胺酸、異白 胺酸、色胺酸或甲硫丁胺酸。 [30] [24]至[29]之任一項之疫苗，其被投予一人類 白血球組織抗原為人類白血球組織抗原_A〇2或人類白血球 組織抗原-A24的個體。 [本發明之效果] 本發明可提供有效用以治療與避免於人類脈絡膜中由 血管新生所引起的疾病（血管新生黃斑病變）的藥學組合物 與疫苗。此外，本發明可提供有效用以抑制於人類脈絡膜 中血管新生的藥學組合物與疫苗。 【實施方式】 定義 於此使用之單字“一”與“該”意指“至少―”除非 以別的方式明確指出。 於此可替換使用之用語“多胜肽”、“胜狀，，與‘‘蛋 白質意指胺基酸殘基之一聚合物。此用語適用於胺基酸 聚合物，於其中一或多個胺基酸殘基為經修飾之殘基^非 26 201109029 自然發生之殘基’例如對應自然發生胺基酸之人工化學模 仿物’與自然發生胺基酸聚合物。 於此使用之用語“胺基酸”意指自然發生與合成之胺 基酸’及胺基酸類似物與胺基酸模仿物，其與自然發生之 胺基酸起相似作用。胺基酸可為L-胺基酸或D-胺基酸。自 然發生胺基酸為基因密碼所編碼的那些與於細胞中在轉譯 後被修飾的那些（例如經脯胺酸（hydroxyprol ine) ' 7* -叛 基谷胺酸（gamma-carboxyglutamate)與 0-填絲胺酸 (O-phosphoserine))。措辭“胺基酸類似物”意指具有與 自然發生胺基酸相同之基礎化學結構（一 α碳鍵結至一 氫、一羧基、一胺基與一 R基）的化合物，但具有一經修飾 之R基或經修飾之骨架（例如，同絲胺酸（homoser i ne)、降 亮胺酸（norleucine)、曱硫胺酸（methionine)、亞颯 (sulfoxide) 甲基硫教確（methionine methyl sulfonium))。措辭“胺基酸模仿物”意指化學化合物其與 一般胺基酸具有不同結構，但有相似的功能。 可错由由 IUPAC-IUB Biochemical Nomenclature

Comm ission所建議之其一般所知的三字母符號或一字母符 號來指出於此處之胺基酸。 於此可替換使用用語“基因，，、“多核苷酸”、“核 苷酸”與“核酸”，且除非以別的特別方式指出，其一般 接受的單一字母編碼來指出。 此處使用之用語“組合物”意指包括一產物，其包括 於特定量中特定成分，與任何產物其直接或間接來自於特 27 201109029 定量之特定成分的組合。此用語與藥學 包括-產物，丨包括一活性成分 關，意指 及任何產物其直接或間接來自任兩個或 “， 複合或聚集，或來自_哎多個& 71 紐合、 或夕個成分之解雜， =分之反應或相互作用的其他形式。因此 = :中’措辭“藥學組合物”包括藉由遇合本發明化：：内 樂學上或生理上可接受之載體所製成的任何組合物：與 處所使用之措辭“藥學上可接受之載體 此 受之載體，，音於藥踩+ 次生理上可接 載體意_上或生理上可接受之材料、 物質或載劑’包括，但不限於一液體或固體填充料、稀釋 劑、賦形劑、溶劑或套膜材料，其與自一器官或身體之一 部分攜帶或運輸活性成分至另―器官或身體之 關。 相 除非以別的方式定義，於此可替換使用i以別的方式 特別才曰出用語“細胞毒殺性τ淋巴球，，、“細胞毒殺性了 田胞與CTL”以意指τ淋巴球之次族群，且除非以別的 方弋私出，意指Τ淋巴球之次群組（sub-group)可辨認非自 身細聦（例如’被病毒感染之細胞），且誘導這些細胞死亡。 除非特別定義，用語“ HLA-A24”意指包含次型，例如 HLA-A* 2402 之 HLA-A24。 除非特別定義，用語“ HLA-A02”如此處所使用，代表 性意指次型，例如HLA-A* 0201。 除非特別定義，於此使用之用語“套組”被使用於關 於试劑與其他材料之組合。並無打算使用語“套組”限制 28 201109029 於試劑及/或材料之特定組合。 本發明之方法與組合物之範圍提供用途於人類脈絡膜 (choroid)中由血管新生（ne〇vascularizati〇n)所引起的 疾病（血管新生黃斑病變（neovascular macul〇pathy))之 治療之内容中，一治療被視為“有效”，若其導致臨 床優點，例如在個體中於色素上皮（pigment epithel ium) 之脫離（detachment)中的減少、色素上皮之脫離的改善、 減少之戌漏（1 eakage)或扭曲（d i stort i on)的改善。有效性 被確認於相關之治療於人類脈絡膜中由血管新生所引起的 疾病（血管新生黃斑病變）的任何已知方法中。 除非特別定義，於此使用屬與本發明之所有技術或科 學用語為與熟悉此技藝人士所通常瞭解之意義相同。 本發明關於用以治療及/或避免於人類脈絡膜中由血 官新生所引起的疾病（血管新生黃斑病變）的藥學組合物與 用以抑制於人類脈絡膜中血管新生的藥學組合物，其包 括，包含來自一 VEGFR-1蛋白質的一胺基酸序列與具有一 誘導細胞毒殺性τ細胞之能力之胜肽（於此之後指VEGFR l 胜肽）（於此之後，組合物可一起意指為“本發明之藥學組 合物）及/或編碼出其之多核苷酸。此外，本發明關於用 以治療及/或避免於人類脈絡膜中由血管新生所引起的疾 病（血管新生黃斑病變）的疫苗與用以抑制於人類脈絡膜中 血管新生的疫苗’其包括VEGFR-1(於此之後，疫苗可—起 意才曰為本發明之疫苗”）及/或編碼出其之多核普酸。以 上組合物或疫苗可包括任何其他物質，例如免疫刺激物 29 201109029 (immune stimulator)。較佳為，可包括包含來自其他蛋白 質之胺基酸序列且具有一誘導細胞毒殺性T細胞之能力之 胜肽。更佳為，一包含來自一 VEGFR-2蛋白質的一胺基酸 序列與具有一誘導細胞毒殺性T細胞之能力之胜肽（於此 之後意指為VEGFR-2胜肽）。本發明根據本發明發明人發現 包括VEGFR-1胜肽之藥學組合物或疫苗對於在脈絡膜中抑 制血管新生為有效的。 VEGFR-1 胜狀 錯由自於已知VEGFR-1蛋白質之胺基酸序列中的任何 位置合成胜肽可獲得被包含於本發明之藥學組合物與疫苗 中的VEGFR-1胜肽（於此之後，“VEgfR-1胜肽”可意指 “本發明胜肽”）。本發明可包含VEGFR-2胜肽，且也可藉 由自於已知VEGFR-2之胺基酸序列中的任何位置合成胜肽 來獲得。人類VEGFR-1與人類VEGFR-2為已知，且熟悉此 技藝人士。可自蛋白質序列資料庫輕易獲得它們，且期於 網際網路上為可得。人類VEGFR-1蛋白質之胺基酸序列的 一例子為序列辨識號：19之胺基酸序列（由GenBank

Accession No. NM_0020 1 9之核苷酸序列所編碼之胺基酸 序列）。人類VEGFR-2蛋白質之胺基酸序列的一例子為序列 辨識號· 21之胺基酸序列（由GenBank Accession No. ΝΜ_002253之核苷酸序列所編碼之胺基酸序列）。 根據一般於胜肽化學中使用的方法，可執行胜肽合 成。一般胜肽合成方法敘述於文件中，例如“胜肽合成 (Peptide Synthesis)* Interscience, New York, 1966 ； 30 201109029 蛋白質（The Proteins) , Vol. 2, Academic Press, New

York, 1 976; “胜肽合成（peptide Synthesis)”，Maruzen

Co. , 1 975, 胜肽合成之基礎與實驗（Fundamentals and

Experiments of Peptide Synthesis)** , Maruzen Co., 1985，藥學的發展之續集（The sequel of Development of Pharmaceuticals) (Zoku Iyakuhin no Kaihatsu)" , Vol. 14 Peptide synthesis，Hirokawa， 1991 ;與於公開中國 際公開號W099/67288。於其中編碼出本發明之胜肽的j)ΝΑ 已被插入的一載體被引入一宿主細胞以產生轉形細胞。藉 由收集於這些轉形細胞中所產生的胜肽可獲得本發明之胜 肽。本發明之胜肽最初也可被產生為一融合蛋白，藉由使 用一適合的蛋白酶可使其分裂以獲得胜肽。 在一製備一融合蛋白的方法中，編碼出本發明之胜肽 可與編碼出其他胜肽的多核苷酸於讀框内（丨n f ram)連 接，且可被插入於一表現以表現於一宿主中。對熟悉此技 藝人士而§為已知的技術可被使用於此目的。對於與本發 明胜肽融合之胜肽而言，可使用已知胜肽，例如FLAG卯， τ· P. et al.， BioTechnology (1988) 6， 1204-1210)、 由6個組胺酸（His)殘基所組成之6x、1〇χ His、流感血凝 素蛋白（influenza hemagglutinin，HA)、人類 c-myc 片 段、VSV-GP 片段、P18HIV 片段、T7__tag、HSV_tag、、 SV40T 抗原片段、lck tag、a -微管素（tubulin)片段、B_tag 與蛋白質C片段。其也可能連接本發明胜肽至縠胱甘肽轉 化酶（glutathione-S-transferase’ GST)、流感血凝素蛋 31 201109029 白免疫球蛋白保守區（hmunogiobu^n regions)石半乳糖苷酶（点-galactosidase)、麥芽糖結 合蛋白（malt〇se-binding pr〇tein，MBp)，或此類以產生 融合蛋白。藉由以適合之蛋白酶以處理以此方式產生之融 合蛋白可獲得本發明之胜肽，且之後收集感興趣之胜肽。 藉由熟悉此技藝人士已知的方法可收集胜肽，例如親合層 析（affinity chromatography)。 藉由使用對HLA抗原之結合親和力為一指示物 (indicator) ’作為本發明胜肽之胺基酸序列，例如，任何 序列可被擇自VEGFR-1蛋白質之完整胺基酸序列或 VEGFR-2蛋白質之完整胺基酸序列。藉由分離具有HLA抗 原於細胞表面之細胞，例如樹突細胞，並使用一般執行方 法來測量胜肽對細胞之結合，可測量對HLA抗原的親和 力。或者’可計算結合親和力藉由現今於網路 可得之軟體程式，例如於parker K. c. , j. Immun〇l.丨52, 1 994中所敘述的那些。當應用至日本人時，例如a_24型、 A-02型或此類，其被認為通常表現於曰本人族群中，為較 佳被使用為一 HLA抗原以獲得有效結果。HLA抗原，例如 A-02與A24型各包括次型例如A_〇2〇2或a-2402。具有對 HLA-A* 0201高親和力之VEGFR-1胜肽的例子包括包含序列 辨識號：1至3之胺基酸序列的胜肽，且具有對HLA_A* 2402 咼親和力之VEGFR-1胜肽的例子包括包含序列辨識號：4 之胺基酸序列的胜肽（W02006/093030)。具有對HLA-A* 0201高親和力之VEGFR-2胜肽的例子包括包含序列辨識 32 201109029 號：11至17之胺基酸序列的胜肽，且具有對jjla-A*2402 高親和力之VEGFR-2胜肽的例子包括包含序列辨識號：5 至10之胺基酸序列的胜肽（W02004/093030)。在臨床試驗 中 藉由預先調查HLA 原的類型，可適合地選擇由需要 治療之病患所攜帶之具有對HLA抗原高結合親和力之胜 肽。 對HLA抗原具有尚結合親和力之胜肽為高度可能有效 作為具有誘導細胞毒殺性T細胞之活性的胜肽。儘管如 此’其需要被檢驗是否使用高結合親和力為指標來選擇之 候選胜肽實際具有誘導細胞毒殺性τ細胞之活性。可確認 細胞毒殺性T細胞誘導活性，藉由以候選胜肽刺激包括人 類MHC抗原之抗原呈現細胞（例如β_淋巴球 '巨噬細胞與 樹突細胞）’較佳為來自人類周邊血液單核細胞之樹突細 胞；將細胞與CD8 +細胞混合；之後測量抗目標細胞之細胞 毒殺活性。如此反應系統’可使用已被產生來表現人類hla 之基因轉殖動物（例如，於Hum. Immunol. 2000 Aug; 61(8):764-79 Related Articles, Books, Linkout Induction of CTL response by a minimal epitope vaccine in HLA A*0201/DR1 transgenic mice: dependence on HLA class II restricted T(H) response., Ben Mohamed L., KrishnanR., Longmate J. , Auge C. , Low L. , Primus J., D l amond D J ·中描述的那些）。可從自目標細胞釋放出的放 射活性計算細胞毒殺活性，而目標細胞被例如以51(：r或此 類放射標示。或者’藉由在攜帶胜肽之抗原呈現細胞存在 33 201109029 下測量由細胞毒殺性τ細胞產生並釋放的j Γ八~ 7，且使用 抗JFM-r料抗體來使於培養基上之抑制區可見來檢驗 活性 本發明胜肽之長度不被特別限制’只要它們具有細胞 毒殺性T細胞活性，但較佳為50個胺基酸或較少更佳為 30個胺基酸較少，且甚至為15個胺基酸或較少。例如， 當in vivo被呈現於抗原呈現細胞時，各種蛋白質被降解 為9-員胜肽（九胜肽），且之後被呈現。因此，本發明胜肽 合意地為9-員（九胜肽）或10 -員（十胜肽）。較佳之 胜肽包括包含序列辨識號·· 1至4之胺基酸序列的胜肽 (W02006/093030)。較佳之VEGFR-2胜肽包括包含序列辨識 號：5至17之胺基酸序列的胜肽（w〇2 0 04/024766)。 此外，一、二或數個胺基酸可被取代、刪除、加入及/ 或插入至自然發生之VEGFR-1或VEGFR-2之部分胜肽的胺 基酸序列。此處’ “數個”指五個或更少，且較佳為三個 或更少。當修飾胺基酸殘基時’其希望以於其中胺基酸側 鏈之特性被維持之胺基酸來取代。胺基酸側鏈之特性的例 子為：疏水胺基酸（A，I，L，M，F，P，W，Y與v)、親水 胺基酸（R，D，N, C, E，Q, G，H，K，S與T);與具有脂 肪族支鏈的胺基酸（G，A，V，L，I與P);含羥基支鏈的胺 基酸（S，T與Y);含硫原子支鏈的胺基酸（C與M);含叛酸 與基支鍵的胺基酸（D, N，E與Q);含驗支鍵的胺基酸（r K與H);以及含芳香族支鏈的胺基酸（H, F，Y與將所 有胺基酸以一字母標號顯示於括號中）。於這些族群之各個 34 201109029 中的胺基酸取代稱為保守取代。包含經修飾之胺基酸序列 的胜肽’其中一、二或多個胺基酸殘基已被取代、刪除、 加入及/或插入）至一特定胺基酸序列，已知為維持其原始 胜肽的生物活性（Mark，D. F. eta/.，Proc. Natl. Acad. Sci. USA ( 1984) 81, 5662-6; Zoller, M. J. and Smith, M., Nucleic Acids Res. (1982) 10, 6487-500； Wang, A. et a1.， Science (1984) 224: 1431-3; Dalbadie-

McFarland, G. etal., Proc. Natl. Acad. Sci. USA ( 1 982) 79: 6409-1 3)。此類經修飾之VEGFR-1胜肽的較佳例子包 括包含於序列辨識號1至4之任一個的胺基酸序列中具有 一或多個胺基酸取代、刪除、加入及/或插入的一胺基酸序 列。經修飾之VEGFR-2胜肽的較佳例子包括包含於序列辨 識號5至1 7之任一個的胺基酸序列中具有一或多個胺基酸 取代、刪除、加入及/或插入的一胺基酸序列。此外，由於 藉由與HLA抗原結合而顯示之胜肽之序列的規則為已知（】.

Immunol., 152:3913， 1994; Immunogenetics, 41:178 1995; J. Immunol.，1 55:4307，1 994)，所以可選擇具有 此類序列的胜肽，或可將根據此規則之修飾執行於如上述 所獲得之胜肽。例如，具有高HLA-24結合親和力的那些， 已知為胜肽，於其中自胜肽N端之第二個胺基酸為笨丙胺 酸、酪胺酸、曱硫丁胺酸或色胺酸且c端胺基酸為笨丙胺 酸、白胺酸、異白胺酸、色胺酸或甲硫丁胺酸。因此，對 於要被包含於投予至攜帶HLA-24型HLA抗原之個體的藥學 組合物或疫苗的胜肽而言，可選擇於其中自N端之第二個 35 201109029 胺基酸為笨丙胺酸、酪胺酸、甲硫丁胺酸或色胺酸及/或c 端胺基酸為笨丙胺酸、白胺酸、異白胺酸、色胺酸或甲硫 丁胺酸的胜狀。或者，所獲得之胜肽的自N端的第二個胺 基酸可被修飾為笨丙胺酸、酪胺酸、甲硫丁胺酸或色胺酸， 或C端胺基酸可被修飾為苯丙胺酸、白胺酸、異白胺酸、 色胺酸或甲硫丁胺酸。此類VEGFR-1胜肽的較佳例子包括 於其中在序列辨識號：4之胺基酸序列中，自N端之第二 個胺基酸被修飾為苯丙胺酸、酪胺酸、曱硫丁胺酸或色胺 酸及/或C端胺基酸被修飾為苯丙胺酸、白胺酸、異白胺 酸、色胺酸或甲硫丁胺酸的胜肽。 此外，此類VEGFR-2胜肽的較佳例子包括於其中在序 列辨識號· 5至1G之任—個的胺基酸序列中，自N端之第 二個胺基酸被修飾為笨丙胺酸、酪胺酸、甲硫丁胺酸或色 胺酸及/或C端胺基酸被修飾為苯丙胺酸、白胺酸、異白胺 酸、色胺酸或甲硫丁胺酴砧& ‘ 一 人τ瓜j妝a夂的胜肽。而，具有高HLA_〇2結合 親和力的那些為已知為於直中自 甲目Μ知之第二個胺基酸為白

胺酸或甲硫丁胺酸，盥Γ她眩I /、L螭胺基酸為纈胺酸或白胺酸的胜 狀。因此，作為對於要被包含於浐

文饥匕3於4又予至攜帶HLA-02型HLA 抗原之個體的藥學組合物或疫苗的胜肽’可選擇於其中自

Nk之第一個胺基酸為白胺酸u 肷硫丁胺酸及/或C端胺基

:為賴胺酸或白胺酸的胜肽。或者，自所獲得之胜肽的N =的第二個胺基酸可被修飾為白胺酸或甲硫丁胺酸，且c 端胺基酸可被修飾為纈胺酸啖白 妝蚁及白胺酸。此類VEGFR-2胜肽 的較佳例子包括於其中在序列辨 斤u辨識唬.1至3之任一個的 36 201109029 胺基酸序列中，自N端之第二個胺基酸被修飾為白胺酸或 甲硫丁胺酸及/或C端胺基酸被修飾為纈胺酸或白胺酸的 胜肽。對於HLA-02型之經修飾之VEGFR_2胜肽的一例子為 包括序列辨識號·· 11至1 7之胺基酸序列的胜肽。 可如上述獲得本發明之胜肽，但當一胜肽序列與具有 不同功能之内生或外生蛋白質之胺基酸序列的部分相同 時，其會導致副作用，例如自體免疫疾病或抗特定物質之 過敏症狀。因此，較佳為使用可得資料庫以執行同源搜尋， 並檢驗是否所獲得之胜肽的序列與其他蛋白質之胺基酸序 列相配。若胜肽序列與其他蛋白質之胺基酸序列相配，較 佳應避免選擇那個胜肽序列。若同源搜尋顯示無相異於一 或二個胺基酸的胜肽存在，則用以增加對HLA抗原結合親 和力及/或細胞毒殺性T細胞誘導活性的上述胺基酸修飾 不會導致這修問題。 多核苷酸 本發明也提供一多核苷酸，其編碼出任何本發明上述 之胜肽。這些包括來自自然發生之VEGFR-1基因（GenBank

Accession No. NM_00201 9(例如，序列辨識號：18))或 VEGFR-2 基因（GenBank Accession No. NM_002253(例如， 序列辨識號：20))的核苷酸序列與具有其之保守修飾之核 皆酸序列的那些。此處措辭“保守修飾之核苷酸序列”指 序列其編碼出相同或實質上相同之胺基酸序列。由於基因 密碼的退化’—大份之功能相同之核酸編碼出任何已知蛋 白質°例如，密碼GCA、GCC、GCG與0〇1皆編碼出胺基酸 37 201109029 丙胺酸。因此，於藉由一密碼具體指定丙胺酸之每個位置， 可改k也、喝成為任何上述不會改變編碼出之胜肽的對應密 此核酸變化為“沈默變化（silent variation)，，，其 為保寸修飾變化的一種。此處編碼出一胜肽之每個核酸序 列也描述核酸之每種可能的沈默變化。熟悉此技藝人士明 白於核&中各密碼（除了 AUG，其原本為甲硫胺酸之唯一 密碼與TGG其原本為色胺酸之唯一密碼）可被修飾以產生 力Bb相同分子。因此編碼出一胜肽之核酸的各沈默變化 係為於各所揭露之序列中被暗示性描述。 本發明之多核苷酸可由DNA、RNA或其衍生物所組成。 如本技術領域所熟知，DNA分子由鹼基所組成，例如自然 發生之驗基A、T、C與G，而T於RNA中為U所取代。熟 悉此技藝人士可瞭解非自然發生鹼基也被包含於本發明 中。 本發月之夕核苷酸可編碼出本發明之多個胜肽，具有 或’、有"於中間之胺基酸序列。例如介於中間之胺基酸 序列可提供多核苷酸或經轉譯之胜肽一裂解位（例如酵素 辨認序列）。更進—步而言，多核普酸可包括任何額外之序 列至編碼出本發Β月胜肽之編碼序列。例如多核苦酸可為 -重組多核苦酸’丨包括胜肽表現所需之調控序列，或可 為一具有標誌基因與此類之表現載體（質體）。一般而古， 可製備此重組多核苷酸’藉由經由使用—般重組技術：例 如聚合酶與内切酶之多核苷酸操作。 可使用重組與化學合成技術兩者以產生本發明之多核 38 201109029 苷酸。例如，藉由插進入一適合之載體可產生一多核苷酸，

當轉染進入一勝任細胞時’其可被表現。或者，使用pCR 技術或表現於適合的宿主可將一多核苷酸放大（參見，例如

Sambrook et al., Molecular Cloning: A Laboratory

Manual, Cold Spring Harbor Laboratory, New York, 1989)。或者，使用固態技術如於Beaucage si & Iyer Rp，

Tetrahedron 1992, 48: 2223-311； Matthes et al., EMBO J 1984’ 3: 801-5中所敘述，可合成多核苷酸。 匕s VEGFR 1胜肽及/或編碼出其之多核苷酸的藥學組合 物或疫苗 友本發明提供用於治療及/或避免於人類脈絡膜中由血 管新生所引起的疾病之藥學組合物，纟包括，至少一 R 1胜肽及/或一編碼出其的多核苷酸為活性成分。 於本發明中之治療指由在具有實際發展之症狀的病患 中減少於脈絡膜中由 在本發日Μ，減^^新生所引起的疾病的症狀特徵。 減低，即使程度為非〜別被限制’且只要症狀可被 的意義中。在本發明Γ微’其也被包含於本發明之治療 血管新生所5丨叙沾、避免意指先前抑制於脈絡膜中由 進展之抑制程戶不疾：的症狀特徵的進展。在本發明中， 制，即使程度“二:Γ:方式㈣，只要進展可被抑 意義中。於脈絡膜中其也被包含於本發明之避免的 減低的視力。藉 血官新生所引起的疾病的症狀包括 評估。此外，可d驗可確定是否此症狀已被減低的 J ^ 症狀之進展被抑制經由使用螢光 39 201109029 眼底攝影（fluorescein fundus photography)或光學同調 喊層掃描術（optical coherence tomography)的檢驗來評 估脈絡膜血管的活性（ch〇roida 1 neovesse 1 )。 此外，本發明提供用於治療及/或避免於人類脈絡膜中 由血管新生所引起的疾病之疫苗，其包括，至少一 VEGFR-1 胜肽及/或一編碼出其的多核苷酸為活性成分。在本發明 中’ 一疫苗意指一組合物其當被投予一生物時，可於生物 中7/7 H F0誘導免疫反應。於本發明中，/万h川誘導之 免疫反應意指，特別是以表現VEGFR]之細胞為標的之細 胞毒殺性T細胞的誘導。由於與於脈絡膜中之血管新生血 ‘相關之内皮細胞表現V E G G R -1於細胞表面，所以它們可 成為藉由此役苗之投予所誘導之細胞毒殺性T細胞的標 的。那就是，本發明之疫苗的投予導致本發明胜肽被以高 社度呈現於抗原呈現細胞之HLA抗原上，此誘導與形成於 被呈現之胜肽與HLA抗原間之複合物專一反應的細胞毒殺 性T細胞，且攻擊於脈絡膜中之血管上皮細胞之能力增 加。或者，藉由自病患萃取樹突細胞並以本發明胜肽刺激 它們而獲得具有本發明胜肽於其細胞表面上之抗原呈現細 胞。經由投予將細胞返回至病患而引起於病患中之細胞毒 殺性T細胞的誘導，且可增加攻擊於脈絡膜中之血管上皮 細胞的能力。 本發明藥學組合物與疫苗為有效對抗於脈絡膜中由血 管新生所引起的疾病。本發明之藥學組合物與疫苗的目標 疾病並無限制，尸、Μ們為脈絡膜血管新生所導致的疾 40 201109029 病。較佳為疾病包括血管新生黃斑病變，其與疾病，例如 滲出型老年黃班病變（exudative age-related macular degeneration)、近視黃斑病變（myopic macular degeneration)、血管樣紋（angioid streaks) ' 中心性滲 出性脈絡膜視網膜病變（central exudative chorioretinopathy)、各種視網膜色素上皮病變（vari〇us retinal pigment epitheliopathies)、脈絡膜萎縮 (choroidal atrophy)、脈絡膜缺失症（choroideremia)與 脈絡膜骨瘤（choroidal osteoma)相關。特別較佳實施例為 渗出型老年黃班病變。本發明之藥學組合物或疫苗選擇性 地攻擊血管内皮細胞，且因此具有低風險之為於一般治療 方法中之問題的迅速視力減低與治療後嚴重併發症 (severe complications post-treatment)之發展。因此，

心 也可應用至具有相對良好之視力的早期病患。由於 在具有相對良好視力之早期病例中視網膜損傷為低的，所 以對於後階段病例之治療後視力 post-treatment)被預期為比一般 預後（vi sual prognosis

丨期為比一般治療更適合。此外，本發 卜不對一般治療方法反 -此類病例。 的至少一 一類型及/或— 現於脈絡膜中之血管新生被V £ g F R -1 因此本發明提供用於抑制於脈絡膜中 合物，其包括，VEGFR-1胜肽之各個 編碼出其的多核苷酸。 。此外，包含 41 201109029 VEGFR-1胜肽及/或一編碼出其的多核苷酸的藥學組合物可 被使用為疫苗。因此，本發明也提供用於抑制於脈絡膜中 的血官新生的疫苗，其包括至少一 胜肽及/或一編 碼出其的多核苷酸。抑制之程度不被特別限制，且只要可 抑制血管新生，即使程度為輕微，其也包含於抑制的意義 中。 本發明葉學組合物或疫苗不被特別限制，只要它們含 有至少一 VEGFR-1胜肽及/或一編碼出其的多核皆酸，且例 如，它們可包括多重類型之VEGFRq脞肽及/或任何其他物 質，例如免疫刺激物，較佳為可包括包含來自其他蛋白質 之胺基酸序列與具有誘導細胞毒殺性τ細胞之活性的胜 肽。更佳為一胜肽包含來自VEGFR_2蛋白質之胺基酸序列 與具有誘導細胞毒殺性T細胞之活性（於此之後， “職-2胜狀當適當時，本發明藥學組合物與;;為 除了胜肽外可包含載體、賦形劑與—般適合用於藥學之此 類。例如，它們可被非σ服使用於以水或其他藥學載體液 體製備之無菌溶液或懸浮液的注射形式中。它們可被配製 藉由將它們適當地與藥學上可接受之載體或媒劑（vehide) 結合’更特別是滅菌水或生理食鹽溶液、植物油、乳化劑、 懸浮，劑（suspending agent) '界面活性劑、穩定劑 (Stabilizer)、香料⑴avoring agent)、賦形劑、媒劑、 防腐劑（preservative)、結合試劑與此類，且將它們由以 一般接受之藥學實施所要求的一單位劑量形式混合。於這 量被包括以達成於 些配方（f ormu 1 at i on)中之活性成分的 42 201109029 特定限制中之適合劑量。 當本發明為一疫苗時，其可包括一佐劑以便有效建立 細胞性免疫（cellular immunity)，且它們也可包括其他對 於血管新生黃斑病變之活性成分與此類。它們也可被製成 微粒配方（articulate formulati〇n)。對於佐劑而言，敘 述於文件（Johnson AG.， Clln. Mi_biQl. Rev.， 7·277-289’ 1 994)中的那些或此類為可得的。其他配方可 為微脂體配製（i ipQS_ preparat 1Gn)、藉由與微米粒徑 之小珠結合來產生的粒狀配製或液體結合⑴pid b〇und) 配製。 包含於本發明藥學組合物與疫苗中之vEGFR_i胜肽的 量不被特別限制，只要其為一藥學上有效的量。例如，各 胜肽的有效量可為—⑽至胸心較佳為^叫至 lOOOmg ’且更佳為〇 lmg至1〇mg。此外若藥學組合物與 疫苗包含VEGFR-2胜肽，觸卜]胜肽對謂r —2胜狀的 結合比不被特別限制，只要兩者胜肽之藥學上有效量被包 含。VEGFR-1 胜月太粗 vI?prd 〇 肌興、、Ό。之VEGFR-2胜肽的量可為相同， 或者任 **結合胜肽的暑可"士 〇 〇 , 服旳重了大於另一胜肽。然而VEGFR_2被 表現於4乎所有血官内皮細胞的表面上自僅被 表現於血管内皮細胞之特定部分的表面上；因&，結合之 VEGFR_2胜肽的量可大於VEGFR-1胜肽的量。 在本發明另一實施例中，本發明之胜肽也可以藥學上 可接受之鹽類的形式被投予。此鹽類的較佳實施例包括具 有驗金屬之鹽類、具有金屬之鹽類、具有有機驗之鹽類、 43 201109029 具有有機酸之鹽類與具有無機酸之鹽類。 本發明也包括VEGHM胜肽及/或編碼出其之多核普 酸於製造用於治療及/或避免於人類脈絡膜中由血管新生 所引起的疾病的藥學組合物或疫苗中的用途。此外本發 明包括VEGFH胜肽及/或編碼出其之多核#酸於製造用 於抑制於人類脈絡膜中血管新生的藥學組合物或疫苗中的 用途 本發明包括要被投予至一個體以治療及/或避免於人 類脈絡膜中由血管新生所引起的疾病的Vegfr_1胜肽及/ 或編碼出其之多核苷酸。此外，本發明包括要被與 胜肽及/或編碼出其之多核苷酸一起投予至—個體以治療 及/或避免於人類脈絡膜中由血管新生所引起的疾病°的 VEGFR-2胜肽及/或編碼出其之多核苷酸。再者本發明包 括包括要被與VEGFR-丨胜肽及/或編碼出其之多核苷酸一 起杈予至一個體以抑制於人類脈絡膜中血管新生的 VEGFR-2胜肽及/或編碼出其之多核苷酸。又，本發明包括 包括要被與VEGFR-2胜肽及/或編碼出其之多核苷酸一起 杈予至一個體以抑制於人類脈絡膜中血管新生的 胜肽及/或編碼出其之多核苷酸。 治療或避免血管新生黃耗變的套纟且與抑制於脈絡膜中灰 管新生的套組 本發明提供用以治療與避免於人類脈絡膜中由血管新 生所引起的疾病的套組，其包括至少一 VEGFR_1胜肽及/ 或一編碼出其之多核苷酸。此外，本發明也提供用以抑制 44 201109029 於人類脈絡膜中& # & & + s新生的套組，其包括至少一 vegfr-i 胜肽及/或一編碼出其之多核苷酸。 要被包含於本發明套組之VEGFR-1胜肽可為個別單獨 存在4匕們可藉由適當地與藥學上可接受之 Μ或更特別是減菌水或生理食鹽溶液、植物油、乳化劑、 懸浮劑、卩面活性劑、穩定劑、香料、賦形劑、媒劑、防 腐劑、結合試劑與此類結合而以配方或疫苗之形式存在。 當它們被製成疫苗時，彳包括佐劑以便有效建立細胞性免 疫且也可包括其他對於血管新生黃斑病變之活性成分與 此類較佳為可包括VEGFR_2胜肽。它們也可被製成微粒 配方（artiCuiate f〇rmu】ati〇n)。對於佐劑而言，敘述於 文件（Johnson AG.，Clin. Microbiol. Rev.，7:277-289 1 994)中的那些或此類為可得的。其他配方可為微脂體配 製、藉由與微米粒徑之小珠結合來產生的粒狀配製或液體 結合配製。 本發明之套組可更包括藥學上可接受之載體或媒劑， 例如上述的那些’以便製備藥物者可做出適合之調整。 治療或避免血管新生黃斑病變的方法與抑制於脈絡臈中血 管新生的方法 本發明更提供用於治療及/或避免於人類脈絡膜中由 血言新生所引起的疾病之方法，其包括投予一個體至少一 VEGFR-1胜肽及/或一編碼出其的多核苷酸的步驟。此外， 本發明提供用於抑制於人類脈絡膜中血管新生之方法，其 其包括投予一個體至少一 VEGFR-1胜肽及/或一編碼出其 45 201109029 的多核芽酸的步驟β R 1胜肽可被非口服投予至個體於以水或其他藥 學載體液體製備之I益—、六+ μ ^ 。 …、菌，谷液或懸洋液的注射形式中。它們 α，、·方之形式投予至個體藉由將它們適當地與藥學上 可接受之載體或媒劑（vehlcle)結合，更特別是滅菌水或生 理食鹽溶液、植物油、乳化劑、懸浮劑（suspending agent)、界面活性劑、穩定劑（stabiiizer)、香料 (flavoring agent)、賦形劑、媒劑、防腐劑 (preservative)、結合試劑與此類，且將它們由以一般接 觉之藥學實施所要求的一單位劑量形式混合。當投予 VEGFR-1胜肽為疫苗時，它們可與佐劑一起被投予以便有 效建立細胞性免疫，且可與對於血管新生黃斑病變之其他 活性成分與此類一起被投予。對於佐劑而言，敘述於文件 (Johnson AG. , Clin. Microbiol. Rev., 7:277-289, 1994) 中的那些或此類為可得的。 根據需要本發明胜肽投予之病患（個體）的症狀，熟悉 此技藝人士可適合地計畫投予VEGFR-1胜肽之投藥方法、 劑量與期間。VEGFR-1胜肽可被投予至個體為本發明藥學 組合物或疫苗，或它們可被投予至個體為個別含有各個胜 肽之藥學組合物或疫苗。可以系統投藥或局部投藥投予 VEGFR-1胜肽。系統投藥的例子包括口服投藥、皮膚内 (intradermal)投藥、皮下（subcutaneous)投藥與靜脈内 (intravenous)注射。局部投藥的例子包括脈絡膜之附近區 域的投藥。 46 201109029 例如 0. OOlmg 至 lOOOmg , 佳為0. lmg至1 〇mg，但不 於幾天或幾個月投予疫苗 VEGFR-1胜肽的劑量，可為， 車乂佳為O.OOljug至lOOOujg，且更 限於其。此外，沒有限制，較佳 一次，且更佳為一週一次。 【實施例】 以下將隨著對實施例的參考具體描述本發明，但其不 被建構為對其之限制。 [實施例1 ] [個體] HLA-A0201 -病例 1 一具有老年性黃斑部退化症（age-related maculai· degeneratl0n)之67歲老年男性病患，其已經由光動力療 法與癌思停（AVastin)投予來治療，被選擇為一個體。其為 無法由一般治療方法來減輕的病例。HLA_A位置（i〇cus)的 檢驗確認此個體攜帶HLA-A* 020 1。 HLA-A0201 -病例 3 一具有老年性黃斑部退化症之76歲老年男性病患其 已經由於德濃氏囊（Tenon，s capsule)下之類固醇（安西諾 隆（triamcinolone))的注射 '光動力療法與癌思停投予來 治療，被選擇為一個體。其為無法由一般治療方法來減輕 的病例。HLA-A位置的檢驗確認此個體攜帶HLA_A* 〇2〇1。 HLA-A2402-病例 1 一具有老年性黃斑部退化症之67歲老年男性病患被 選擇為一個體。其為無法由一般治療方法來減輕的病例。 47 201109029 HLA-A位置的檢驗確認此個體攜帶HLA-A* 2402。 [胜肽] 優良製造實行（Good Manufacturing Practice, GMP) 等級之 HLA-A*2402 限制 VEGFR1 胜肽（VEGFR1-A24-1084; SYGVLLWEI ;序列辨識號：4)、HLA-A*2402 限制 VEGFR2 胜 肽（VEGFR2-A24-169; RFVPDGNRI;序列辨識號：8)、 HLA-A*020 1 限制 VEGFR1 胜肽（VEGFR1-A2-770; TLFWLLLTL; 序列辨識號：2)與 HLA-A*0201 限制 VEGFR2胜肽 (VEGFR2-A2-773; VIAMFFWLL;序列辨識號：12) ' HLA-A*2402-限制 HIV-Env 蛋白質-衍生胜肽（HIV-A24; RYLRDQQLL;序列辨識號：22 與 HLA-A*0201-限制 HIV-Env 蛋白質-衍生胜肽（HIV-A2; SLYNTYATL;序列辨識號：23) 為由美國胜肽公司（American Peptide Company Inc.)(Sunnyvale，CA)所合成並分析品質。 [投藥方法] GMP等級合成胜肽、VEGFR-1胜肽（TLFWLLLTL;序列辨 識號：2)與VEGFR-2胜肽（VIAMFFWLL;序列辨識號：12)為 獲自東京大學醫學院人類基因體中心（Human Genome Center, Institute of Medical Sciences, the University of Tokyo)。將一毫克之各VEGFR-1胜肽與VEGFR-2胜肽與 lmL 之非完全佛朗氏佐劑（Freund’s adjuvant) (M0NTANIDE*ISA51VG，SEPPIC，France)混合，且將它們皮 下投予至病患之腋下。執行投藥一週一次。 [PBMCs]藉由 Ficoll-Plaque(Pharmacia)溶液自病患 48 201109029 (HLA-A*2402或HLA-A*0201 +)分離周邊血液單核細胞 (Peripheral blood mononuclear cell, PBMC) ° [IFN-r ELISPOT 分析] 在治療之前與在每個治療過程結束時收集周邊血液單 核細胞並將其立即冷凍。為了免疫監測，將所有來自各病 患之經冷凍的周邊血液單核細胞同時解凍並以1 〇 # g/m 1 之同源胜肽（cognate peptide)與20 IU/mL之細胞白介素 -2( inter leukine-2) (Chiron, Emeryville，CA)刺激，在 37°C具有5% C02環境下2週。在經由Dynal CD4 +分離套 組（Dynal CD4 positive isolation kit) (Invitrogen， Carlsbad，CA)之 CD4 +細胞的消耗（depletion)後，為了干 擾素-7 (interferon-gamma, IF N - 7')酵素連結免疫墨點 (enzyme-linked immunospot, ELISPOT)分析，提供細胞。 根據製造商之程序（BD Biosciences, San Jose, CA)執行 IFN- r ELISPOT 分析。簡單而言，將 HLA-A*2402- + B-淋巴 母細胞（lymphoblast) TISI 細胞（IHWG Cell and Gene Bank, Seattle，WA)或 HLA-A*02(H_ + B-淋巴母細胞 T2 細胞（ATCC， Tokyo，Japan)以20 // g/ml之同源胜肽或HIV-Env胜肽隔 夜培養。在清洗掉未結合至於細胞上之HLA的剩餘胜肽 後’將個別之胜肽脈衝（pept ide-pu 1 sed)細胞（2x 1 04細胞/ 孔）用來刺激經製備之CD4-細胞（lxl 04細胞/孔）於96-孔盤 (Millipore，Bedford，ΜΑ)上於 37°C 具有 5% C〇2 之環境隔 夜。將盤於 ImmunoSpot S4 Analyzer 與 ImmunoSpot image analyzer software version 5.0 (Cellular Technology 49 201109029

Ltd.，Cleveland，OH)進行掃瞄與分析。藉由從當以同源 胜肽刺激之墨點數目扣除當以HI V-Env胜肽刺激之墨點數 目來計算同源胜肽專一墨點的數目。所有EL I SPOT分析被 執行三重複（tr i p 1 i cate we 11)。當偵測到過量之墨點時， 其無法計算準確墨點計數，由於成串且那些孔洞被定義為 飽和。 [流式細胞分析（Flow cytometric analysis)] 為了偵測胜肽專一 T細胞受體，將製備來用以EL I SPOT 分析之5x10s之CD4-細胞以藻紅蛋白（phycoerythrin, PE)-結合 HLA-A*2402/VEGFR1 dextramer 或 HLA-A*020 1 / VEGFR1 dextramer (DAKO Japan, Tokyo，Japan)、異硫氰 酸酯營光素（fluoroscein isothiocyanate，FITC) -結合抗 -人類 CD8 mAb (RPA-T8，BD Biosciences，San Jose, CA) 與異藻藍素（allophycocyanina，APC)-結合抗-人類CD3 mAb (UCHT1，BD Biosciences，San Jose, CA)染色，之後 使用 FACSCanto II (BD Biosciences，San Jose, CA)來 分析。將 HLA-A*2402/HIV-Env dextramer 或 HLA-A*0201/ HIV-Env dextramer (DAKO Japan, Tokyo, Japan)使用為 負控制組。根據以 7-ADD (Sigma-Aldrich Japan, Tokyo, Japan)之染色將死亡細胞排除於分析外。 [結果] HLA-A0201-病例 1 使用光學同調斷層掃描術、螢光眼底造影 (fluorescein fundus imaging)與眼底攝影（fundus 50 201109029

Photography)來分析老年性黃斑部退化症的進展。在開始 投予VEGFR-i胜肽與VEGFR_2胜肽前，於光學同調斷 瞄之斷層掃瞄影像中觀察到大量色素 上皮（pigment epithelium)的分離（第1A圖）。也於眼底攝影中清楚觀察 到色素上皮的分離（第1B圖）。此外，於螢光眼底攝影中觀 察到大量洩漏（1 eakage)(第1D圖）。 在開始投予VEGFR-1胜肽與VEGFR_2胜肽5個月後， 於光學同調斷層掃瞄之斷層掃瞄影像中觀察到於色素上皮 之分離中的顯著減少（第1D圖）。也以眼底攝影觀察到色素 ,皮之分離的改善(第1E圖）。此外’於螢光眼底攝影中確 < 了減少的洩漏（第丨F圖）。其報導主體症狀，例如扭曲被 大幅地改善。右眼之視力被輕微改善（Rv = (〇 9) = (1.2))。這些結果確認胜肽與VE(Jfr_2胜肽的投 予對老年性黃斑部退化症產生改善效果。沒有出現引起安 全性議題聯想的問題。 HLA-A0201 -病例 3 開始投予VEGFR-1胜肽與VEGFR_2胜肽前，於光學同 調斷層掃0¾之斷層掃猫影像中觀察到由於來自新生血管之 洩漏的視網膜破裂與於視網膜中的水腫（6“邮）（第Μ 圖）。在開始投予VEGFR—丨胜肽與VEGFR_2胜肽丨個月後， 與開始投藥前相較，清楚發現視網膜的水腫被減輕（第2B 圖）此外’觀察到明顯纖維化（f ibrosed)與低活動度 (hyp〇active)之新生血管膜（第2β圖）。此外其報導主體症 狀，例如扭曲被顯著地改善。同樣地這些結果確認 51 201109029 胜肽與VEGFR-2胜肽的投予對於此病例中老年性黃斑部退 化症的症狀產生改善功效。沒有出現引起安全性議題聯想 的問題。 HLA-A2402-病例 1 在開始投予VEGFR-1胜肽與VEGFR-2胜肽前，於眼底 攝影中觀察到清楚之視網膜下出血（subretinal hemorrhages)(第3圖，上方左邊圖板）。在開始投藥3個 月後’與開始投藥前相較，視網膜下出血被明顯減輕（第3 圖’上方中間與右邊圖板）。此外，黃斑區（macular regi〇n) 之分析（anatomy)沒有影響（第3圖，下方圖板）且視力被改 善。 監測分析 IFN- 7 EL I SPOT分析及/或流式細胞分析被執行為經治療 之病患的監測 52 201109029 ,表1、,監測分柄之總結

劑量 病例 治療療程 CTL反應 Multimer analysis R1 R2 CMV CD8+ Rldextramer+ /CD3+ CD4' (°/〇) lmg HLA-A0201 •'病例1 治療前 (pre-treatment) +++ — +++ NT 1次療程後 (post-lcourse) +++ — +++ NT 2次療程後 (post-2course) +++ - +++ NT 3次療程後 (post-3course) +++ - +++ NT 4次療程後 (post-4course) +++ - +++ NT HLA-A0201 -病例3 治療前t + + +++ 0.01 1次療程後 +++ - +++ 0. 05 2次療程後 NT NT NT NT 3次療程後 +++ - +++ 0.69 4次療程後 +++ 一 +++ 0. 04 5次療程後 (post-5course) +++ - +++ 0.11 HLA-A2402 -病例1 治療前t - - +++ NT 1次療程後 - 一 + NT 2次療程後 +++ — - NT 3次療程後 ++ + ++ NT 4次療程後 + — - NT 5次療程後 +++ ++ +++ NT 6次療程後 (post-6course) ++ — - NT NT :未測試 HLA-A020卜病例1 在IFN-r ELISP0T分析中，與以HIV-Env胜肽-脈衝 T2細胞刺激相較’當以VEGFR卜A2-770胜肽-脈衝T2細胞 刺激時，觀察到顯著較高數目的墨點，特別是在治療療程 53 201109029 後（表1與第4圖）。在另—方面，藉由以VEGFR2_A2_773 胜肽的刺激沒有觀察到專—之IFN_r產生（表】與第5 圖），儘管VEGFR1-A2-770胜肽與VEGFR2_A2_773胜肽兩者 的投予於病患中顯示明顯的功效。因此，其指出 VEGFR1-A2-770胜肽單獨作用以改善此病例。 HLA-A0201-病例 3 在IFN-r ELISP0T分析中，與以HIV_Env胜肽_脈衝 T2細胞刺激相較，當以VEGFR1-A2-770胜肽-脈衝T2細胞 刺激時’觀察到顯著較高數目的墨點（表1與第6圖）。一 貫地’藉由流式細胞分析來偵測HLA-A*020 1 / VEGFIM-A2-770 dextramer+ CD8+ 細胞的顯著群組 (significant population)(第 6 圖下方圖板）。在另一方 面，藉由以VEGFR2-A2-773胜肽之刺激沒有觀察到專一之 IFN-r產生（表1與第7圖），儘管VEGFm-A2-770胜肽與 VEGFR2-A2-773胜肽兩者的投予於病患中顯示明顯的功 效。因此，其指出VEGFR1-A2-770胜肽單獨作用以改善此 病例。 HLA-A2402-病例 1 在IFN-r ELISP0T分析中，與以HIV-Εην胜肽-脈衝 T2細胞刺激相較，當以VEGFR1-A24-1084胜肽-脈衝T2細 胞刺激時，觀察到顯著較高數目的墨點，特別是在治療療 程後（表1與第8圖）。在另一方面，藉由以VEGFR2-A24-169 胜肽刺激沒有觀察到專一之IFN-r產生（表1與第9圖）， 儘管VEGFR1-A 24-1084胜肽與VEGFR2-A24-169胜肽兩者的 54 201109029 投予於病患中顯示明顯的功效。因此，其指出 VEGFRH24-1084胜肽單獨作用以改善此病例。… 在治療後於視力中的改變 伴隨著顯著的差異 治療群組之視力被改盖 (p = 0· 015)(第 10 圖）。 產業利用性 本發明提供用於治療及/赤雄Λ # 縻及/或避免於人類脈絡膜中由血 管新生所引起的疾病（血營新头至 s祈生κ斑病變）之藥學組合物及 /或疫苗。-般而言，已執行雷射治療、光動力治療手術 治療(寧以1〜讣卿)、藥物治療與此類為對於血管新 生黃斑病變的治療方法。鈇而，Φ私、A由a …、而，雷射治療會減低中心視力

(central vision)。且右名且古自丄L ，、有在具有良好視力之病例中光動力 治療後，快速視力減低的例子。I手術治療中具有與外 科侵入（册glCal lnvasion)相關之術後併發症 (po — tive c⑽plicati〇n)的風險。在藥物治療中， ”有由於眼内庄射之嚴重併發症之風險例如眼内炎與視 網膜分離。那就是，-般治療具有由於治療相關不利作用 與併發症之視力減低的高風險。因此，治療具有相對良好 視力之早期病例為困難的。由^在經投藥之病例中安全性 問題並無發生’可預期本發明之藥學組合物及/或疫苗對於 血管新生黃斑病變提供低風險與高度安全之治療試劑與治 療方法。此外’由於它們已顯示在不對一般治療方法有反 應之病例的方面為有效的，因此可預期它們會在對於一般 55 201109029 治療方法已經無效之病例方面提供治療試劑與治療方法。 【圖式簡單說明】 第1圖顯示—被給予VEGFR-卜衍生胜肽與vegfr_2_ 何生胜肽之老年性黃斑部退化症病患HLA-A02(U-病例！的 症狀減輕。（A)顯示在開始投藥前的斷層掃瞄影像，顯 不在開始投藥前的眼底攝影（〇cuiar p 〇graph)，（c)顯示在開始投藥前的螢光眼底攝影 (fluorescein fundus photography)，（D)顯示在開始投藥 後5個月的斷層掃瞄影像，⑻顯示在開始投藥後5個月的 眼底攝影’⑴顯示在開始投藥後5個月的螢光眼底攝影。 (A) 與⑻之箭號指出色素上皮的線且⑻與⑻之箭號指出 色素上皮的分離。 第2圖顯示藉由於其被給予冗“卜卜衍生胜肽與 VEGFR 2-何生胜肽之老年性黃斑部退化症病患卜 病例3之單一病例執行光學同調斷層掃描所獲得之視網 膜斷層掃8¾影像。（A)顯示在開始投藥前的斷層掃猫影像與 (B) 顯示在開始投藥後i個月的斷層㈣影像。箭號指出水 腫，且虛線箭號指出明顯纖維化（f ibr〇sed)與低活動度 (hypo,active)之新生血管膜。 第3圖顯示被給予VEGFR_卜衍生胜肽與vegfr_2_衍生 胜肽之老年性黃斑部退化症病患HLA_A24〇2_病例（的症狀 減幸坐與視力復原。上方照片顯示眼底攝影與下方照片顯示 在開始治療後視網膜斷層掃瞄影像視網膜下出血消失（箭 56 201109029 號指出）與視力改善（括號内的值）。此外，黃斑之分析 (anatomy of macu 1 ar)也仍是相同。 第4圖顯示HLA-A020卜病例1之VEGFR1胜肽-專一反 應。治療前（a)，1次療程後（b)，2次療程後（c)，3次療 程後（d)與4次療程後（e)之PBMC被測試。在各圖中，顯示 於其中以VEGFiU-A2-770胜肽（上才左邊靨族）或HIV-Env 胜肽（J：才右邊厨莜）刺激PBMC之ELISP0T盤的照片。R/S; 反應者（responder)/刺激者（stimulator)比。墨點計數（7" 才左i#羼族）與VEGFR1胜肽-專一墨點（Τ'才古邊鏍灰）的 數目被指出於圖中。使用單方（unpaired) Student’ s t-test執行統計分析（星號標誌；Ρ<0· 05)。圓形標誌指出 墨點計數為飽和的。 第5圖顯示HLA-A020 1 -病例1之VEGFR2胜肽-專一反 應。治療前（a)，1次療程後（b)，2次療程後（c)，3次療 程後（d)與4次療程後（e)之PBMC被測試。在各圖中，顯示 於其中以VEGFR2-A2-773胜肽（上才彳邊鏢莜）或HIV_Env 胜肽（J：才右邊羼莜）刺激PBMC之ELISP0T盤的照片。R/s; 反應者（responder)/刺激者（stimulator)比。墨點計數（万 才左叇鏍族）與VEGFR2胜肽-專一墨點（歹才古邊鏍族）的 數目被指出於圖中。 第6圖顯示HLA-A020卜病例3之VEGFR1胜肽-專一反 應。1次療程後（a)，3次療程後（b)，4次療程後（€)與5 次療程後（d)之PBMC的反應被顯示為代表之結果。在各圖 中，顯示於其中以VEGFR卜A2 —770胜肽（上才2邊屬莜）或 57 201109029

HIV-Env胜肽（上才右邊鏍族）刺激PBMC之ELISP0T盤的照 片。R/S;反應者（responder)/刺激者（stimulator)比。墨 點計數（户总左邊羼族）與VEGFR1胜肽-專一墨點（尹激右 邊圖板）的數目被指出於圖中。使用單方Student’ s t-test執行統計分析（星號標誌；p〈〇. 〇5)。藉由 HLA-A*0201/VEGFR1 dextramer 來偵測 VEGFR1 胜肽-專一 T 細胞受體（7*才羼莜）。 第7圖顯示HLA-A0201-病例3之VEGFR2胜肽-專一反 應。治療前（a) ’ 1次療程後（b)，3次療程後（c)，4次療 程後（d)與5次療程後（e)之PBMC被測試。在各圖中，抗 VEGFR2-A2-773胜肽-脈衝TISI或HIV-Env胜肽-脈衝 TISI(左邊羼族）與VEGFR2胜肽-專一墨點（右邊磨莜）的數 目被指出於圖中。 第8圖顯示HLA-A2402-病例1之VEGFR1胜肽-專一反 應。2次療程後（a)與6次療程後（b)之PBMC的反應被顯示 為代表之結果。在各圖中，顯示於其中以VEGFR1-A24-1 084 胜狀（4遠鐵族）或HIV-Env胜肽（右邊羼族）刺激PBMC之 ELISP0T盤的照片。r/s;反應者（resp〇nder)/刺激者 (stimulator)比。VEGFR1胜肽-專一墨點的數目被指出於 圖中。使用單方Student，s t-test執行統計分析（星號標 諸；P<0. 05) ^圓形標誌指出墨點計數為飽和的。 第9圖顯示HLA-A2402-病例1之VEGFR2胜肽-專一反 應° 2次療程後（8)與6次療程後（1))之pBMC的反應被顯示 為代表之結果。在各圖中，顯示於其中以VEGFR2-A24-169 58 201109029 胜肽（左邊屬族）或HIV-Env胜肽（右i#鐵族）刺激PBMC之 ELI SPOT盤的照片。r/s;反應者（responder) /刺激者 (stimulator)比。VEGFR2胜肽-專一墨點的數目被指出於 圖中。 第1〇圖顯示在治療後於個體之視力中的改變。治療群 組之視力相較於非治疼 廢之鮮組有顯著的差異（p值=〇. 〇15)。 【主要元件符號說明】 59 201109029 序列表

〈110>腫瘤療法·科學股份有限公司 〈120>脈絡膜新生血管之疫苗療法 <130> 0NC-A0911-TW <150〉 JP2009-140363 〈151> 2009-06-11 <160〉 23 <170> Patent In version 3.4 <210> 1 <211> 9 <212〉 PRT 〈213>人工 <220〉 <223〉合成之抗原決定位胜肽 <400> 1

Val Leu Leu Trp Glu lie Phe Ser Leu <210> 2 <211〉 9 <212〉 PRT <213〉人工 <220> <223〉合成之抗原決定位胜肽 <400> 2

Thr Leu Phe Trp Leu Leu Leu Thr Leu 1 5 10PRT人 <210〉 <211> <212> 〈213〉 <220> 201109029 <223〉合成之抗原決定位胜肽 <400〉 3

Asn Leu Thr Ala Thr Leu lie Val Asn Val 1 5 10 <210〉 4 <211〉 9 <212〉 PRT <213〉人工 〈220〉 <223〉合成之抗原決定位胜肽 <400〉 4

Ser Tyr Gly Val Leu Leu Trp Glu lie 1 5 〈210〉 5 <211> 9 〈212〉 PRT <213〉 人工 <220〉 <223〉 合成之抗原決定位胜肽 〈400〉 5

Val Tyr Ser Ser Glu Glu Ala Glu Leu 〈210〉 6 <211> 9 〈212〉 PRT 〈213〉人工 〈220〉 <223〉合成之抗原決定位胜肽 <400> 6

Gly Tyr Arg lie Tyr Asp Val Val Leu 1 5 <210> 7 <211〉 9 2 201109029 <212> PRT K <213〉人工 <220> 〈223>合成之抗原決定位胜肽 <400> 7

Ser Tyr Met lie Ser Tyr Ala Gly Met 1 5 <210〉 8 <211> 9 <212〉 PRT 〈213〉人工 <220〉 <223〉合成之抗原決定位胜肽 <400> 8

Arg Phe Val Pro Asp Gly Asn Arg Ile 1 5 〈210〉 9 <211> 9 <212〉 PRT 〈213〉人工 〈220〉 <223〉合成之抗原決定位胜肽 <400> 9

Lys Trp Glu Phe Pro Arg Asp Arg Leu 1 5 <210〉 10 <211〉 9 <212〉 PRT <213〉人工 <220〉 〈223>合成之抗原決定位胜肽 <400> 10

Asp Phe Leu Thr Leu Glu His Leu lie 201109029 <210〉 11 <211〉 9 <212〉 PRT <213> 人工 <220〉 <223〉 合成之抗原決定位胜肽 <400〉 11

Ala Met Phe Phe Trp Leu Leu Leu Val 1 5 <210〉 12 <211〉 9 〈212〉 PRT 〈213〉人工 <220〉 〈223>合成之抗原決定位胜肽 <400〉 12

Val Ile Ala Met Phe Phe Trp Leu Leu <210〉 13 〈211〉 9 <212〉 PRT <213〉人工 <220〉 <223〉合成之抗原決定位胜肽 <400〉 13

Ala Val Ile Ala Met Phe Phe Trp Leu 1 5 <210> 14 <211> 9 <212〉 PRT <213〉人工 〈220〉 〈223>合成之抗原決定位胜肽 4 201109029 <400〉 14

Lys Leu lleGlu MeGlyVal Gin Thr 1 5 〈210〉 15 <211> 9 〈212〉 PRT 〈213>人工 <220〉 〈223>合成之抗原決定位胜肽 <400〉 15

Tyr Met Ile Ser Tyr Ala Gly Met Val 1 5 <210〉 16 〈211〉 10 〈212〉 PRT 〈213〉 人工 <220〉 <223> 合成之抗原決定位胜肽 〈400〉 16 lie Gin Ser Asp Val Trp Ser Phe Gly Val 15 10 〈210〉 17 <211> 9 <212> PRT 〈213>人工 <220〉 <223〉合成之抗原決定位胜肽 <400> 17

Val Leu Ala Met Phe Phe Trp Leu Leu 1 <210> 18 <211〉 7123 <212> DNA <213> 人類 201109029 <400> 18 atcgaggtcc gcgggaggct cggagcgcgc caggcggaca ctcctctcgg ctcctccccg 60 gcagcggcgg cggctcggag cgggctccgg ggctcgggtg cagcggccag cgggcgcctg 120 gcggcgagga ttacccgggg aagtggttgt ctcctggctg gagccgcgag acgggcgctc 180 agggcgcggg gccggcggcg gcgaacgaga ggacggactc tggcggccgg gtcgttggcc 240 gcggggagcg cgggcaccgg gcgagcaggc cgcgtcgcgc tcaccatggt cagctactgg 300 gacaccgggg tcctgctgtg cgcgctgctc agctgtctgc ttctcacagg atctagttca 360 ggttcaaaat taaaagatcc tgaactgagt ttaaaaggca cccagcacat catgcaagca 420 ggccagacac tgcatctcca atgcaggggg gaagcagccc ataaatggtc tttgcctgaa 480 atggtgagta aggaaagcga aaggctgagc ataactaaat ctgcctgtgg aagaaatggc 540 aaacaattct gcagtacttt aaccttgaac acagctcaag caaaccacac tggcttctac 600 agctgcaaat atctagctgt acctacttca aagaagaagg aaacagaatc tgcaatctat 660 atatttatta gtgatacagg tagacctttc gtagagatgt acagtgaaat ccccgaaatt 720 atacacatga ctgaaggaag ggagctcgtc attccctgcc gggttacgtc acctaacatc 780 actgttactt taaaaaagtt tccacttgac actttgatcc ctgatggaaa acgcataatc 840 tgggacagta gaaagggctt catcatatca aatgcaacgt acaaagaaat agggcttctg 900 acctgtgaag caacagtcaa tgggcatttg tataagacaa actatctcac acatcgacaa 960 accaatacaa tcatagatgt ccaaataagc acaccacgcc cagtcaaatt acttagaggc 1020 catactcttg tcctcaattg tactgctacc actcccttga acacgagagt tcaaatgacc 1080 tggagttacc ctgatgaaaa aaataagaga gcttccgtaa ggcgacgaat tgaccaaagc 1140 aattcccatg ccaacatatt ctacagtgtt cttactattg acaaaatgca gaacaaagac 1200 aaaggacttt atacttgtcg tgtaaggagt ggaccatcat tcaaatctgt taacacctca 1260 gtgcatatat atgataaagc attcatcact gtgaaacatc gaaaacagca ggtgcttgaa 1320 accgtagctg gcaagcggtc ttaccggctc tctatgaaag tgaaggcatt tccctcgccg 1380 gaagttgtat ggttaaaaga tgggttacct gcgactgaga aatctgctcg ctatttgact 1440 cgtggctact cgttaattat caaggacgta actgaagagg atgcagggaa ttatacaatc 1500 6 201109029 ttgctgagca taaaacagtc aaatgtgttt aaaaacctca ctgccactct aattgtcaat gtgaaacccc agatttacga aaaggccgtg tcatcgtttc cagacccggc tctctaccca ctgggcagca gacaaatcct gacttgtacc gcatatggta tccctcaacc tacaatcaag tggttctggc acccctgtaa ccataatcat tccgaagcaa ggtgtgactt ttgttccaat aatgaagagt cctttatcct ggatgctgac agcaacatgg gaaacagaat tgagagcatc actcagcgca tggcaataat agaaggaaag aataagatgg ctagcacctt ggttgtggct gactctagaa tttctggaat ctacatttgc atagcttcca ataaagttgg gactgtggga agaaacataa gcttttatat cacagatgtg ccaaatgggt ttcatgttaa cttggaaaaa atgccgacgg aaggagagga cctgaaactg tcttgcacag ttaacaagtt cttatacaga gacgttactt ggattttact gcggacagtt aataacagaa caatgcacta cagtattagc aagcaaaaaa tggccatcac taaggagcac tccatcactc ttaatcttac catcatgaat gtttccctgc aagattcagg cacctatgcc tgcagagcca ggaatgtata cacaggggaa gaaatcctcc agaagaaaga aattacaatc agagatcagg aagcaccata cctcctgcga aacctcagtg atcacacagt ggccatcagc agttccacca ctttagactg tcatgctaat ggtgtccccg agcctcagat cacttggttt aaaaacaacc acaaaataca acaagagcct ggaattattt taggaccagg aagcagcacg ctgtttattg aaagagtcac agaagaggat gaaggtgtct atcactgcaa agccaccaac cagaagggct ctgtggaaag ttcagcatac ctcactgttc aaggaacctc ggacaagtct aatctggagc tgatcactct aacatgcacc tgtgtggctg cgactctctt ctggctccta ttaaccctct ttatccgaaa aatgaaaagg tcttcttctg aaataaagac tgactaccta tcaattataa tggacccaga tgaagttcct ttggatgagc agtgtgagcg gctcccttat gatgccagca agtgggagtt tgcccgggag agacttaaac tgggcaaatc acttggaaga ggggcttttg gaaaagtggt tcaagcatca gcatttggca ttaagaaatc acctacgtgc cggactgtgg ctgtgaaaat gctgaaagag ggggccacgg ccagcgagta caaagctctg atgactgagc taaaaatctt gacccacatt ggccaccatc tgaacgtggt taacctgctg ggagcctgca ccaagcaagg agggcctctg atggtgattg ttgaatactg caaatatgga aatctctcca actacctcaa gagcaaacgt 1560 1620 1680 1740 1800 1860 1920 1980 2040 2100 2160 2220 2280 2340 2400 2460 2520 2580 2640 2700 2760 2820 2880 2940 3000 3060 201109029 gacttatttt gagccaggcc tttgcgagct tctgacggtt gtggccagag agaaacattc gatatttata atggctcctg ggagtattgc gatgagga.ct actcctgaaa agatttgcag ggtaaagact actcctgcct ggaagctctg aaaacctttg agcagcactc aaggcctcgc gatgtcagca aggttcacct gactacaact atttctagaa atatataagt atagtgcttt gtgaagaaca ccaatgactt ttctcaacaa tggaacaagg ccggctttca tctacaagga gcatggagtt ttttatctga agaaccccga aatctatctt tgtgggaaat tttgcagtcg tctatcagat aacttgtgga acatcccaat tctctgagga atgatgtcag aagaactttt tgttggcctc tcaagattga ggcccagttt acgaccacgc cggtggtcct gcacatgtgt ttacaccttt tttttttttg ctactgctaa ccctgctcca ggatgcagca caagaaacca ggaagataaa gcccatcact cctgtcttcc gaacaacgtg ttatgtgaga tgacaaaatc cttctcctta cctgagggaa catgctggac aaaactaggt caatgccata cttcttcaag atacgtaaat accgaatgcc tcccatgctg cttgagagta ctgccattcc tgagctggaa gtactccacc atttataccc atctttccat actaacaaga atcctcatgt acccccgcca ctacacatgg agactagata agtctgagtg atggaagatc agaaagtgca gtgaagattt aaaggagata tacagcacca ggtgggtctc ggcatgagga tgctggcaca gatttgcttc ctgacaggaa gaaagtattt gctttcaagt acctccatgt aagcgcttca accagtaaaa agctgtgggc aggaaaatcg ccacccatct ccaggaaact gggagccagc atgtaactcc tactcagtgt cctcagggca agcctaagaa gcgtcaccag atgttgagga tgatttctta ttcatcggga gtgattttgg ctcgacttcc agagcgacgt catacccagg tgagagctcc gagacccaaa aagcaaatgt atagtgggtt cagctccgaa tcatgagcct ttgatgacta cctggactga gtaaggagtc acgtcagcga cgtgctgctc agagtttgac agcttttgcc tgctttttgt agatagagaa tagagaaatc cgcaggacca agaaaaaatg cagcgaaagc agaggaggat cagttttcaa cctggcagcg ccttgcccgg tctgaaatgg gtggtcttac agtacaaatg tgagtactct agaaaggcca acaacaggat tacatactca gtttaattca ggaaagaatc ccagggcgac cagcaaaccc ggggctgtct aggcaagcgc cccgccccca acgaagcctt agtattatgc gattttttta atagtgacaa cttcctaaac gtttgattga 3120 3180 3240 3300 3360 3420 3480 3540 3600 3660 3720 3780 3840 3900 3960 4020 4080 4140 4200 4260 4320 4380 4440 4500 4560 4620 8 201109029 ggagctgcac tgatcaccca atgcatcacg taccccactg ggccagccct gcagcccaaa acccagggca acaagcccgt tagccccagg gatcactggc tggcctgagc aacatctcgg gagtcctcta gcaggcctaa gacatgtgag gaggaaaagg aaaaaaagca aaaagcaagg gagaaaagag aaaccgggag aaggcatgag aaagaatttg agacgcacca tgtgggcacg gagggggacg gggctcagca atgccatttc agtggcttcc cagctctgac ccttctacat ttgagggccc agccaggagc agatggacag cgatgagggg acattttctg gattctggga ggcaagaaaa ggacaaatat cttttttgga actaaagcaa attttagaac tttacctatg gaagtggttc tatgtccatt ctcattcgtg gcatgttttg atttgtagca ctgagggtgg cactcaactc tgagcccata cttttggctc ctctagtaag atgcactgaa aacttagcca gagttaggtt gtctccaggc catgatggcc ttacactgaa aatgtcacat tctattttgg gtattaatat atagtccaga cacttaactc aatttcttgg tattattctg ttttgcacag ttagttgtga aagaaagctg agaagaatga aaatgcagtc ctgaggagag gagttttctc catatcaaaa cgagggctga tggaggaaaa aggtcaataa ggtcaaggga aaaccccgtc tctataccaa ccaaaccaat tcaccaacac agttgggacc caaaacacag gaagtcagtc acgtttcctt ttcatttaat ggggattcca ctatctcaca ctaatctgaa aggatgtgga agagcattag ctggcgcata ttaagcactt taagctcctt gagtaaaaag gtggtatgta atttatgcaa ggtatttctc cagttgggac tcaggatatt agttaatgag ccatcactag aagaaaagcc cattttcaac tgctttgaaa cttgcctggg gtctgagcat gatgggaata gggagacagg gtaggaaagg gcgcctactc ttcagggtct aaagatcaag tgggccttgg atcgctaagc tggctctgtt tgatgctatt tatgcaagtt agggtctatg tatttatgat gtctgcacct tctgcagcca gtcagaagct ggagaggcaa cagtggattg ctgcttcttg gggagaagag tatgcttcct tttatccatg taatttaact gtagaacctg agctctaagt aaccgaagaa tgtatgcctc tgttcttatg tgccacatcc ttgtttaaag gctctctgta tgaagagatg ggaccgtcat cagcacattc cctagtgagc ctactggctc ctggcagcgg cttttgtgga agactcacta gccagaagag aggagtggga cagtcctctc caccaagatc taaatccaaa caaaagcagg ctagagccag aagagaggac aaatctttgt tcttcctctt 4680 4740 4800 4860 4920 4980 5040 5100 5160 5220 5280 5340 5400 5460 5520 5580 5640 5700 5760 5820 5880 5940 6000 6060 6120 6180 201109029 ctttacatac gcaaaccacc tgtgacagct ggcaatttta taaatcaggt aactggaagg 6240 aggttaaaca cagaaaaaag aagacctcag tcaattctct actttttttt ttttttccaa 6300 atcagataat agcccagcaa atagtgataa caaataaaac cttagctatt catgtcttga 6360 tttcaataat taattcttaa tcattaagag accataataa atactccttt tcaagagaaa 6420 agcaaaacea ttagaattgt tactcagctc cttcaaactc aggtttgtag catacatgag 6480 tccatccatc agtcaaagaa tggttccatc tggagtctta atgtagaaag aaaaatggag 6540 acttgtaata atgagctagt tacaaagtgc ttgttcatta aaatagcact gaaaattgaa 6600 acatgaatta actgataata ttccaatcat ttgccattta tgacaaaaat ggttggcact 6660 aacaaagaac gagcacttcc tttcagagtt tctgagataa tgtacgtgga acagtctggg 6720 tggaatgggg ctgaaaccat gtgcaagtct gtgtcttgtc agtccaagaa gtgacaccga 6780 gatgttaatt ttagggaccc gtgccttgtt tcctagccca caagaatgca aacatcaaac 6840 agatactcgc tagcctcatt taaattgatt aaaggaggag tgcatctttg gccgacagtg 6900 gtgtaactgt atgtgtgtgt gtgtgtgtgt gtgtgtgtgt gtgtgtgggt gtatgtgtgt 6960 tttgtgcata actatttaag gaaactggaa ttttaaagtt acttttatac aaaccaagaa 7020 tatatgctac agatataaga cagacatggt ttggtcctat atttctagtc atgatgaatg 7080 tattttgtat accatcttca tataataaac ttccaaaaac aca 7123 8 頁 3 T 0 9 3 R 9 1, t— p // .J— <210> <211> <212> 〈213〉 <400〉

Met Val Ser Tyr Trp Asp Thr Gly Val Leu Leu Cys Ala Leu Leu Ser 15 10 15

Cys Leu Leu Leu Thr Gly Ser Ser Ser Gly Ser Lys Leu Lys Asp Pro 20 25 30

Glu Leu Ser Leu Lys Gly Thr Gin His lie Met Gin Ala Gly Gin Thr 35 40 45 10 201109029

Leu His Leu Gin Cys Arg Gly Glu Ala Ala His Lys Trp Ser Leu Pro 50 55 60

Glu Met Val Ser Lys Glu Ser Glu Arg Leu Ser lie Thr Lys Ser Ala 65 70 75 80

Cys Gly Arg Asn Gly Lys Gin Phe Cys Ser Thr Leu Thr Leu Asn Thr 85 90 95

Ala Gin Ala Asn His Thr Gly Phe Tyr Ser Cys Lys Tyr Leu Ala Val 100 105 110

Pro Thr Ser Lys Lys Lys Glu Thr Glu Ser Ala lie Tyr lie Phe lie 115 120 125

Ser Asp Thr Gly Arg Pro Phe Val Glu Met Tyr Ser Glu Me Pro Glu 130 135 140

Me lie His Met Thr Glu Gly Arg Glu Leu Val lie Pro Cys Arg Val 145 150 155 160

Thr Ser Pro Asn lie Thr Val Thr Leu Lys Lys Phe Pro Leu Asp Thr 165 170 175

Leu lie Pro Asp Gly Lys Arg lie lie Trp Asp Ser Arg Lys Gly Phe 180 185 190 lie lie Ser Asn Ala Thr Tyr Lys Glu lie Gly Leu Leu Thr Cys Glu 195 200 205

Ala Thr Val Asn Gly His Leu Tyr Lys Thr Asn Tyr Leu Thr His Arg 210 215 220

Gin Thr Asn Thr lie Me Asp Val Gin lie Ser Thr Pro Arg Pro Val 225 230 235 240

Lys Leu Leu Arg Gly His Thr Leu Val Leu Asn Cys Thr Ala Thr Thr 245 250 255 11 201109029

Pro Leu Asn Thr Arg Val Gin Met Thr Trp Ser Tyr Pro Asp Glu Lys 260 265 270

Asn Lys Arg Ala Ser Val Arg Arg Arg lie Asp Gin Ser Asn Ser His 275 280 285

Ala Asn lie Phe Tyr Ser Val Leu Thr lie Asp Lys Met Gin Asn Lys 290 295 300

Asp Lys Gly Leu Tyr Thr Cys Arg Val Arg Ser Gly Pro Ser Phe Lys 305 310 315 320

Ser Val Asn Thr Ser Val His lie Tyr Asp Lys Ala Phe lie Thr Val 325 330 335

Lys His Arg Lys Gin Gin Val Leu Glu Thr Val Ala Gly Lys Arg Ser 340 345 350

Tyr Arg Leu Ser Met Lys Val Lys Ala Phe Pro Ser Pro Glu Val Val 355 360 365

Trp Leu Lys Asp Gly Leu Pro Ala Thr Glu Lys Ser Ala Arg Tyr Leu 370 375 380

Thr Arg Gly Tyr Ser Leu lie Me Lys Asp Val Thr Glu Glu Asp Ala 385 390 395 400

Gly Asn Tyr Thr lie Leu Leu Ser Me Lys Gin Ser Asn Val Phe Lys 405 410 415

Asn Leu Thr Ala Thr Leu lie Val Asn Val Lys Pro Gin lie Tyr Glu 420 425 430

Lys Ala Val Ser Ser Phe Pro Asp Pro Ala Leu Tyr Pro Leu Gly Ser 435 440 445

Arg Gin lie Leu Thr Cys Thr Ala Tyr Gly lie Pro Gin Pro Thr lie 450 455 460 12 201109029

Lys Trp Phe Trp His Pro Cys Asn His Asn His Ser Glu Ala Arg Cys 465 470 475 480

Asp Phe Cys Ser Asn Asn Glu Glu Ser Phe lie Leu Asp Ala Asp Ser 485 490 495

Asn Met Gly Asn Arg lie Glu Ser lie Thr Gin Arg Met Ala lie lie 500 505 510

Glu Gly Lys Asn Lys Met Ala Ser Thr Leu Val Val Ala Asp Ser Arg 515 520 525 lie Ser Gly lie Tyr lie Cys lie Ala Ser Asn Lys Val Gly Thr Val 530 535 540

Gly Arg Asn Me Ser Phe Tyr lie Thr Asp Val Pro Asn Gly Phe His 545 550 555 560

Val Asn Leu Glu Lys Met Pro Thr Glu Gly Glu Asp Leu Lys Leu Ser 565 570 575

Cys Thr Val Asn Lys Phe Leu Tyr Arg Asp Val Thr Trp lie Leu Leu 580 585 590

Arg Thr Val Asn Asn Arg Thr Met His Tyr Ser Me Ser Lys Gin Lys 595 600 605

Met Ala lie Thr Lys Glu His Ser lie Thr Leu Asn Leu Thr lie Met 610 615 620

Asn Val Ser Leu Gin Asp Ser Gly Thr Tyr Ala Cys Arg Ala Arg Asn 625 630 635 640

Val Tyr Thr Gly Glu Glu lie Leu Gin Lys Lys Glu lie Thr lie Arg 645 650 655

Asp Gin Glu Ala Pro Tyr Leu Leu Arg Asn Leu Ser Asp His Thr Val 660 665 670 s 13

I 201109029

Ala lie Ser Ser Ser Thr Thr Leu Asp Cys His Ala Asn Gly Val Pro 675 680 685

Glu Pro Gin lie Thr Trp Phe Lys Asn Asn His Lys lie Gin Gin Glu 690 695 700

Pro Gly lie lie Leu Gly Pro Gly Ser Ser Thr Leu Phe lie Glu Arg 705 710 715 720

Val Thr Glu Glu Asp Glu Gly Val Tyr His Cys Lys Ala Thr Asn Gin 725 730 735

Lys Gly Ser Val Glu Ser Ser Ala Tyr Leu Thr Val Gin Gly Thr Ser 740 745 750

Asp Lys Ser Asn Leu Glu Leu lie Thr Leu Thr Cys Thr Cys Val Ala 755 760 765

Ala Thr Leu Phe Trp Leu Leu Leu Thr Leu Phe lie Arg Lys Met Lys 770 775 780

Arg Ser Ser Ser Glu lie Lys Thr Asp Tyr Leu Ser lie lie Met Asp 785 790 795 800

Pro Asp Glu Val Pro Leu Asp Glu Gin Cys Glu Arg Leu Pro Tyr Asp 805 810 815

Ala Ser Lys Trp Glu Phe Ala Arg Glu Arg Leu Lys Leu Gly Lys Ser 820 825 830

Leu Gly Arg Gly Ala Phe Gly Lys Val Val Gin Ala Ser Ala Phe Gly 835 840 845 lie Lys Lys Ser Pro Thr Cys Arg Thr Val Ala Val Lys Met Leu Lys 850 855 860

Glu Gly Ala Thr Ala Ser Glu Tyr Lys Ala Leu Met Thr Glu Leu Lys 865 870 875 880 14 201109029 lie Leu Thr His lie Gly His His Leu Asn Val Val Asn Leu Leu Gly 885 890 895

Ala Cys Thr Lys Gin Gly Gly Pro Leu Met Val lie Val Glu Tyr Cys 900 905 910

Lys Tyr Gly Asn Leu Ser Asn Tyr Leu Lys Ser Lys Arg Asp Leu Phe 915 920 925

Phe Leu Asn Lys Asp Ala Ala Leu His Met Glu Pro Lys Lys Glu Lys 930 935 940

Met Glu Pro Gly Leu Glu Gin Gly Lys Lys Pro Arg Leu Asp Ser Val 945 950 955 960

Thr Ser Ser Glu Ser Phe Ala Ser Ser Gly Phe Gin Glu Asp Lys Ser 965 970 975

Leu Ser Asp Val Glu Glu Glu Glu Asp Ser Asp Gly Phe Tyr Lys Glu 980 985 990

Pro lie Thr Met Glu Asp Leu lie Ser Tyr Ser Phe Gin Val Ala Arg 995 1000 1005

Gly Met Glu Phe Leu Ser Ser Arg Lys Cys lie His Arg Asp Leu 1010 1015 1020

Ala Ala Arg Asn lie Leu Leu Ser Glu Asn Asn Val Val Lys lie 1025 1030 1035

Cys Asp Phe Gly Leu Ala Arg Asp lie Tyr Lys Asn Pro Asp Tyr 1040 1045 1050

Val Arg Lys Gly Asp Thr Arg Leu Pro Leu Lys Trp Met Ala Pro 1055 1060 1065

Glu Ser lie Phe Asp Lys lie Tyr Ser Thr Lys Ser Asp Val Trp 1070 1075 1080 15 201109029

Ser Tyr Gly Val Leu Leu Trp Glu lie Phe Ser Leu Gly Gly Ser 1085 1090 1095

Pro Tyr Pro Gly Val Gin Met Asp Glu Asp Phe Cys Ser Arg Leu 1100 1105 1110

Arg Glu Gly Met Arg Met Arg Ala Pro Glu Tyr Ser Thr Pro Glu 1115 1120 1125 lie Tyr Gin lie Met Leu Asp Cys Trp His Arg Asp Pro Lys Glu 1130 1135 1140

Arg Pro Arg Phe Ala Glu Leu Val Glu Lys Leu Gly Asp Leu Leu 1145 1150 1155

Gin Ala Asn Val Gin Gin Asp Gly Lys Asp Tyr lie Pro lie Asn 1160 1165 1170

Ala lie Leu Thr Gly Asn Ser Gly Phe Thr Tyr Ser Thr Pro Ala 1175 1180 1185

Phe Ser Glu Asp Phe Phe Lys Glu Ser lie Ser Ala Pro Lys Phe 1190 1195 1200

Asn Ser Gly Ser Ser Asp Asp Val Arg Tyr Val Asn Ala Phe Lys 1205 1210 1215

Phe Met Ser Leu Glu Arg lie Lys Thr Phe Glu Glu Leu Leu Pro 1220 1225 1230

Asn Ala Thr Ser Met Phe Asp Asp Tyr Gin Gly Asp Ser Ser Thr 1235 1240 1245

Leu Leu Ala Ser Pro Met Leu Lys Arg Phe Thr Trp Thr Asp Ser 1250 1255 1260

Lys Pro Lys Ala Ser Leu Lys I le Asp Leu Arg Val Thr Ser Lys 1265 1270 1275 16 201109029

Ser Asp VaI 1285

Ser Lys Glu Ser Gly Leu 1280

Ser Arg Pro Ser Phe Cys 1290

Val Ser Glu 1300

His Ser Ser Cys Gly His 1295

Gly Lys Arg Arg Phe Thr 1305

Glu Arg Lys 1315

Tyr Asp His Ala Glu Leu 1310 lie Ala Cys Cys Ser Pro 1320

Pro Pro Asp Tyr Asn Ser Val Val Leu Tyr Ser Thr Pro Pro lie 1325 1330 1335 <210> 20 <211〉 6055 <212〉 DNA <213〉人類 <400〉 20 actgagtccc gggaccccgg gagagcggtc aatgtgtggt cgctgcgttt cctctgcctg cgccgggcat cacttgcgcg ccgcagaaag tccgtctggc agcctggata tcctctccta ccggcacccg cagacgcccc tgcagccgcg gtcggcgccc gggctcccta gccctgtgcg ctcaactgtc ctgcgctgcg gggtgccgcg agttccacct ccgcgcctcc ttctctagac aggcgctggg agaaagaacc ggctcccgag ttctgggcat ttcgcccggc tcgaggtgca ggatgcagag caaggtgctg ctggccgtcg ccctgtggct ctgcgtggag acccgggccg cctctgtggg tttgcctagt gtttctcttg atctgcccag gctcagcata caaaaagaca tacttacaat taaggctaat acaactcttc aaattacttg caggggacag agggacttgg actggctttg gcccaataat cagagtggca gtgagcaaag ggtggaggtg actgagtgca gcgatggcct cttctgtaag acactcacaa ttccaaaagt gatcggaaat gacactggag cctacaagtg cttctaccgg gaaactgact tggcctcggt catttatgtc tatgttcaag attacagatc tccatttatt gcttctgtta gtgaccaaca tggagtcgtg tacattactg agaacaaaaa caaaactgtg gtgattccat gtctcgggtc catttcaaat ctcaacgtgt cactttgtgc aagataccca gaaaagagat ttgttcctga tggtaacaga atttcctggg acagcaagaa gggctttact attcccagct acatgatcag ctatgctggc atggtcttct 60 120 180 240 300 360 420 480 540 600 660 720 780 840 17 900 960 201109029 gtgaagcaaa aattaatgat gaaagttacc agtctattat gtacatagtt gtcgttgtag ggtataggat ttatgatgtg gttctgagtc cgtctcatgg aattgaacta tctgttggag aaaagcttgt cttaaattgt acagcaagaa ctgaactaaa tgtggggatt gacttcaact gggaatacoc ttcttcgaag catcagcata agaaacttgt aaaccgagac ctaaaaaccc agtctgggag tgagatgaag aaatttttga gcaccttaac tatagatggt gtaacccgga gtgaccaagg attgtacacc tgtgcagcat ccagtgggct gatgaccaag aagaacagca catttgtcag ggtccatgaa aaaccttttg ttgcttttgg aagtggcatg gaatctctgg tggaagccac ggtgggggag cgtgtcagaa tccctgcgaa gtaccttggt tacccacccc cagaaataaa atggtataaa aatggaatac cccttgagtc caatcacaca attaaagcgg ggcatgtact gacgattatg gaagtgagtg aaagagacac aggaaattac actgtcatcc ttaccaatcc catttcaaag gagaagcaga gccatgtggt ctctctggtt gtgtatgtcc caccccagat tggtgagaaa tctctaatct ctcctgtgga ttcctaccag tacggcacca ctcaaacgct gacatgtacg gtctatgcca ttcctccccc gcatcacatc cactggtatt ggcagttgga ggaagagtgc gccaacgagc ccagccaagc tgtctcagtg acaaacccat acccttgtga agaatggaga agtgtggagg acttccaggg aggaaataaa attgaagtta ataaaaatca atttgctcta attgaaggaa aaaacaaaac tgtaagtacc cttgttatcc aagcggcaaa tgtgtcagct ttgtacaaat gtgaagcggt caacaaagtc gggagaggag agagggtgat ctccttccac gtgaccaggg gtcctgaaat tactttgcaa cctgacatgc agcccactga gcaggagagc gtgtctttgt ggtgcactgc agacagatct acgtttgaga acctcacatg gtacaagctt ggcccacagc ctctgccaat ccatgtggga gagttgccca cacctgtttg caagaacttg gatactcttt ggaaattgaa tgccaccatg ttctctaata gcacaaatga cattttgatc atggagctta agaatgcatc cttgcaggac caaggagact atgtctgcct tgctcaagac aggaagacca agaaaagaca ttgcgtggtc aggcagctca cagtcctaga gcgtgtggca cccacgatca caggaaacct ggagaatcag acgacaagta ttggggaaag catcgaagtc tcatgcacgg catctgggaa tccccctcca cagatcatgt ggtttaaaga taatgagacc cttgtagaag actcaggcat tgtattgaag gatgggaacc 1020 1080 1140 1200 1260 1320 1380 1440 1500 1560 1620 1680 1740 1800 1860 1920 1980 2040 2100 2160 2220 2280 2340 2400 2460 18 201109029 ggaacctcac tatccgcaga gtgaggaagg aggacgaagg cctctacacc tgccaggcat gcagtgttct tggctgtgca aaagtggagg catttttcat aatagaaggt gcccaggaaa agacgaactt ggaaatcatt attctagtag gcacggcggt gattgccatg ttcttctggc tacttcttgt catcatccta cggaccgtta agcgggccaa tggaggggaa ctgaagacag gctacttgtc catcgtcatg gatccagatg aactcccatt ggatgaacat tgtgaacgac tgccttatga tgccagcaaa tgggaattcc ccagagaccg gctgaagcta ggtaagcctc ttggccgtgg tgcctttggc caagtgattg aagcagatgc ctttggaatt gacaagacag caacttgcag gacagtagca gtcaaaatgt tgaaagaagg agcaacacac agtgagcatc gagctctcat gtctgaactc aagatcctca ttcatattgg tcaccatctc aatgtggtca accttctagg tgcctgtacc aagccaggag ggccactcat ggtgattgtg gaattctgca aatttggaaa cctgtccact tacctgagga gcaagagaaa tgaatttgtc ccctacaaga ccaaaggggc acgattccgt caagggaaag actacgttgg agcaatccct gtggatctga aacggcgctt ggacagcatc accagtagcc agagctcagc cagctctgga tttgtggagg agaagtccct cagtgatgta gaagaagagg aagctcctga agatctgtat aaggacttcc tgaccttgga gcatctcatc tgttacagct tccaagtggc taagggcatg gagttcttgg catcgcgaaa gtgtatccac agggacctgg cggcacgaaa tatcctctta tcggagaaga acgtggttaa aatctgtgac tttggcttgg cccgggatat ttataaagat ccagattatg tcagaaaagg agatgctcgc ctccctttga aatggatggc cccagaaaca atttttgaca gagtgtacac aatccagagt gacgtctggt cttttggtgt tttgctgtgg gaaatatttt ccttaggtgc ttctccatat cctggggtaa agattgatga agaattttgt aggcgattga aagaaggaac tagaatgagg gcccctgatt atactacacc agaaatgtac cagaccatgc tggactgctg gcacggggag cccagtcaga gacccacgtt ttcagagttg gtggaacatt tgggaaatct cttgcaagct aatgctcagc aggatggcaa agactacatt gttcttccga tatcagagac tttgagcatg gaagaggatt ctggactctc tctgcctacc tcacctgttt cctgtatgga ggaggaggaa gtatgtgacc ccaaattcca ttatgacaac acagcaggaa tcagtcagta tctgcagaac agtaagcgaa agagccggcc tgtgagtgta aaaacatttg 2520 2580 2640 2700 2760 2820 2880 2940 3000 3060 3120 3180 3240 3300 3360 3420 3480 3540 3600 3660 3720 3780 3840 3900 3960 4020 19 201109029 aagatatccc gttagaagaa ccagaagtaa aagtaatccc agatgacaac cagacggaca gtggtatggt tcttgcctca gaagagctga aaactttgga agacagaacc aaattatctc catcttttgg tggaatggtg cccagcaaaa gcagggagtc tgtggcatct gaaggctcaa accagacaag cggctaccag tccggatatc actccgatga cacagacacc accgtgtact ccagtgagga agcagaactt ttaaagctga tagagattgg agtgcaaacc ggtagcacag cccagattct ccagcctgac tcggggacca cactgagctc tcctcctgtt taaaaggaag catccacacc cccaactcct ggacatcaca tgagaggtgc tgctcagatt ttcaagtgtt gttctttcca ccagcaggaa gtagccgcat ttgattttca tttcgacaac agaaaaagga cctcggactg cagggagcca gtcttctagg catatcctgg aagaggcttg tgacccaaga atgtgtctgt gtcttctccc agtgttgacc tgatcctctt tttcattcat ttaaaaagca tttatcatgc cccctgctgc gggtctcacc atgggtttag aacaaagacg ttcaagaaat ggccccatcc tcaaagaagt agcagtacct ggggagctga cacttctgta aaactagaag ataaaccagg caatgtaagt gttcgaggtg ttgaagatgg gaaggatttg cagggctgag tctatccaag aggctttgtt taggacgtgg gtcccaagcc aagccttaag tgtggaattc ggattgatag aaaggaagac taacgttacc ttgctttgga gagtactgga gcctgcaaat gcattgtgtt tgctctggtg gaggtgggca tggggtctgt tctgaaatgt aaagggttca gacggggttt ctggttttag aaggttgcgt gttcttcgag ttgggctaaa gtagagttcg ttgtgctgtt tctgactcct aatgagagtt ccttccagac cgttacgtgt ctcctggcca agccccagga aggaaatgat gcagctctgg ctccttgtct cccaggctga tcctttattc agaataccac aaagaaagga cattcagctc aaggctccct gccgtgttga agagttctga ctgcacaaac cagcttctgg tttcttctgg aatgaatacc ctcatatctg tcctgatgtg atatgtctga gactgaatgc gggaggttca atgtgaagct gtgtgtggtg tcaaagtttc aggaaggatt ttaccctttt gttcttcccc ctgtccccaa cccactctca ccccgcaacc catcagtatt ttagttattt ggcctctact ccagtaaacc tgattgggtt tgttcactct ctgaatgatt attagccaga cttcaaaatt attttatagc ccaaattata acatctattg tattatttag acttttaaca tatagagcta tttctactga tttttgccct tgttctgtcc 4080 4140 4200 4260 4320 4380 4440 4500 4560 4620 4680 4740 4800 4860 4920 4980 5040 5100 5160 5220 5280 5340 5400 5460 5520 5580 20 201109029 5640 5700 5760 5820 5880 5940 6000 6055 tttttttcaa aaaagaaaat gtgttttttg tttggtacca tagtgtgaaa tgctgggaac aatgactata agacatgcta tggcacatat atttatagtc tgtttatgta gaaacaaatg taatatatta aagccttata tataatgaac tttgtactat. tcacattttg tatcagtatt atgtagcata acaaaggtca taatgctttc agcaattgat gtcattttat taaagaacat tgaaaaactt gaaggaatcc ctttgcaagg ttgcattact gtacccatca tttctaaaat ggaagagggg gtggctgggc acagtggccg acacctaaaa acccagcact ttggggggcc aaggtgggag gatcgcttga gcccaggagt tcaagaccag tctggccaac atggtcagat tccatctcaa agaaaaaagg taaaaataaa ataaaatgga gaagaaggaa tcaga <210> 21 <211> 1356 <212〉 PRT <213〉人類 <400> 21

Met Gin Ser Lys Val Leu Leu Ala Val Ala Leu Trp Leu Cys Val Glu 15 10 15

Thr Arg Ala Ala Ser Val Gly Leu Pro Ser Val Ser Leu Asp Leu Pro 20 25 30

Arg Leu Ser Ile Gin Lys Asp lie Leu Thr Ile Lys Ala Asn Thr Thr 35 40 45

Leu Gin lie Thr Cys Arg Gly Gin Arg Asp Leu Asp Trp Leu Trp Pro 50 55 60

Asn Asn Gin Ser Gly Ser Glu Gin Arg Val Glu Val Thr Glu Cys Ser 65 70 75 80

Asp Gly Leu Phe Cys Lys Thr Leu Thr lie Pro Lys Val lie Gly Asn 85 90 95

Asp Thr Gly Ala Tyr Lys Cys Phe Tyr Arg Glu Thr Asp Leu Ala Ser 100 105 110 21 201109029

Val lie Tyr Val Tyr Val Gin Asp Tyr Arg Ser Pro Phe lie Ala Ser 115 120 125

Val Ser Asp Gin His Gly Val Val Tyr lie Thr Glu Asn Lys Asn Lys 130 135 140

Thr Val Val Me Pro Cys Leu Gly Ser lie Ser Asn Leu Asn Val Ser 145 150 155 160

Leu Cys Ala Arg Tyr Pro Glu Lys Arg Phe Val Pro Asp Gly Asn Arg 165 170 175 lie Ser Trp Asp Ser Lys Lys Gly Phe Thr lie Pro Ser Tyr Met lie 180 185 190

Ser Tyr Ala Gly Met Val Phe Cys Glu Ala Lys lie Asn Asp Glu Ser 195 200 205

Tyr Gin ,Ser Ile Met Tyr Ile Val Val Val Val Gly Tyr Arg Ile Tyr 210 215 220

Asp Val Val Leu Ser Pro Ser His Gly lie Glu Leu Ser Val Gly Glu 225 230 235 240

Lys Leu Val Leu Asn Cys Thr Ala Arg Thr Glu Leu Asn Val Gly Me 245 250 255

Asp Phe Asn Trp Glu Tyr Pro Ser Ser Lys His Gin His Lys Lys Leu 260 265 270

Val Asn Arg Asp Leu Lys Thr Gin Ser Gly Ser Glu Met Lys Lys Phe 275 280 285

Leu Ser Thr Leu Thr lie Asp Gly Val Thr Arg Ser Asp Gin Gly Leu 290 295 300

Tyr Thr Cys Ala Ala Ser Ser Gly Leu Met Thr Lys Lys Asn Ser Thr 305 310 315 320 22 201109029

Phe Val Arg Val His Glu Lys Pro Phe Val Ala Phe Gly Ser Gly Met 325 330 335

Glu Ser Leu Val Glu Ala Thr Val Gly Glu Arg Val Arg lie Pro Ala 340 345 350

Lys Tyr Leu Gly Tyr Pro Pro Pro Glu Me Lys Trp Tyr Lys Asn Gly 355 360 365 lie Pro Leu Glu Ser Asn His Thr lie Lys Ala Gly His Val Leu Thr 370 375 380 lie Met Glu Val Ser Glu Arg Asp Thr Gly Asn Tyr Thr Val lie Leu 385 390 395 400

Thr Asn Pro lie Ser Lys Glu Lys Gin Ser His Val Val Ser Leu Val 405 410 415

Val Tyr Val Pro Pro Gin lie Gly Glu Lys Ser Leu lie Ser Pro Val 420 425 430

Asp Ser Tyr Gin Tyr Gly Thr Thr Gin Thr Leu Thr Cys Thr Val Tyr 435 440 445

Ala lie Pro Pro Pro His His Me His Trp Tyr Trp Gin Leu Glu Glu 450 455 460

Glu Cys Ala Asn Glu Pro Ser Gin Ala Val Ser Val Thr Asn Pro Tyr 465 470 475 480

Pro Cys Glu Glu Trp Arg Ser Val Glu Asp Phe Gin Gly Gly Asn Lys 485 490 495 lie Glu Val Asn Lys Asn Gin Phe Ala Leu lie Glu Gly Lys Asn Lys 500 505 510

Thr Val Ser Thr Leu Val lie Gin Ala Ala Asn Val Ser Ala Leu Tyr 515 520 525 23 201109029

Lys Cys 6lu Ala Val Asn Lys Val Gly Arg Gly Glu Arg Val lie Ser 530 535 540

Phe His Val Thr Arg Gly pro Glu Ile Thr Leu Gin Pro Asp Met Gin 545 550 555 560

Pro Thr Glu Gin Glu Ser Val Ser Leu Trp Cys Thr Ala Asp Arg Ser 565 570 575

Thr Phe Glu Asn Leu Thr Trp Tyr Lys Leu Gly Pro Gin Pro Leu Pro 580 585 590 lie His Val Gly Glu Leu Pro Thr Pro Val Cys Lys Asn Leu Asp Thr 595 600 605

Leu Trp Lys Leu Asn Ala Thr Met Phe Ser Asn Ser Thr Asn Asp lie 610 615 620

Leu lie Met Glu Leu Lys Asn Ala Ser Leu Gin Asp Girt Gly Asp Tyr 625 630 635 640

Val Cys Leu Ala Gin Asp Arg Lys Thr Lys Lys Arg His Cys Val Val 645 650 655

Arg Gin Leu Thr Val Leu Glu Arg Val Ala Pro Thr lie Thr Gly Asn 660 665 670

Leu Glu Asn Gin Thr Thr Ser lie Gly Glu Ser lie Glu Val Ser Cys 675 680 685

Thr Ala Ser Gly Asn Pro Pro Pro Gin lie Met Trp Phe Lys Asp Asn 690 695 700

Glu Thr Leu Val Glu Asp Ser Gly lie Val Leu Lys Asp Gly Asn Arg 705 710 715 720

Asn Leu Thr lie Arg Arg Val Arg Lys Glu Asp Glu Gly Leu Tyr Thr 725 730 735 24 201109029

Cys Gin Ala Cys Ser Val Leu Gly Cys Ala Lys Val Glu Ala Phe Phe 740 745 750 lie lie Glu Gly Ala Gin Glu Lys Thr Asn Leu Glu lie lie lie Leu 755 760 765

Val Gly Thr Ala Val lie Ala Met Phe Phe Trp Leu Leu Leu Val Me 770 775 780

Me Leu Arg Thr Val Lys Arg Ala Asn Gly Gly Glu Leu Lys Thr Gly 785 790 795 800

Tyr Leu Ser Ile Val Met Asp Pro Asp Glu Leu Pro Leu Asp Glu His 805 810 815

Cys Glu Arg Leu Pro Tyr Asp Ala Ser Lys Trp Glu Phe Pro Arg Asp 820 825 830

Arg Leu Lys Leu Gly Lys Pro Leu Gly Arg Gly Ala Phe Gly Gin Val 835 840 845 lie Glu Ala Asp Ala Phe Gly lie Asp Lys Thr Ala Thr Cys Arg Thr 850 855 860

Val Ala Val Lys Met Leu Lys Glu Gly Ala Thr His Ser Glu His Arg 865 870 875 880

Ala Leu Met Ser Glu Leu Lys lie Leu lie His Me Gly His His Leu 885 890 895

Asn Val Val Asn Leu Leu Gly Ala Cys Thr Lys Pro Gly Gly Pro Leu 900 905 910

Met Val Me Val Glu Phe Cys Lys Phe Gly Asn Leu Ser Thr Tyr Leu 915 920 925

Arg Ser Lys Arg Asn Glu Phe Val Pro Tyr Lys Thr Lys Gly Ala Arg 930 935 940 25 201109029

Phe Arg Gin Gly Lys Asp Tyr Val Gly Ala lie Pro Val Asp Leu Lys 945 950 955 960

Arg Arg Leu Asp Ser lie Thr Ser Ser Gin Ser Ser Ala Ser Ser Gly 965 970 975

Phe Val Glu Glu Lys Ser Leu Ser Asp Val Glu 6lu Glu Glu Ala Pro 980 985 990

Glu Asp Leu Tyr Lys Asp Phe Leu Thr Leu Glu His Leu lie Cys Tyr 995 1000 1005

Ser Phe Gin Val Ala Lys Gly Met Glu Phe Leu Ala Ser Arg Lys 1010 1015 1020

Cys lie His Arg Asp Leu Ala Ala Arg Asn Me Leu Leu Ser Glu 1025 1030 1035

Lys Asn Val Val Lys lie Cys Asp Phe Gly Leu Ala Arg Asp lie 1040 1045 1050

Tyr Lys Asp Pro Asp Tyr Val Arg Lys Gly Asp Ala Arg Leu Pro 1055 1060 1065

Leu Lys Trp Met Ala Pro Glu Thr lie Phe Asp Arg Val Tyr Thr 1070 1075 1080 lie Gin Ser Asp Val Trp Ser Phe Gly Val Leu Leu Trp Glu lie 1085 1090 1095

Phe Ser Leu Gly Ala Ser Pro Tyr Pro Gly Val Lys Ile Asp Glu 1100 1105 1110

Glu Phe Cys Arg Arg Leu Lys Glu Gly Thr Arg Met Arg Ala Pro 1115 1120 1125

Asp Tyr Thr Thr Pro Glu Met Tyr Gin Thr Met Leu Asp Cys Trp 1130 1135 1140 26 201109029

His Gly Glu Pro Ser Gin Arg Pro Thr Phe Ser Glu Leu Val Glu 1145 1150 1155

His Leu Gly Asn Leu Leu Gin Ala Asn Ala Gin Gin Asp Gly Lys 1160 1165 1170

Asp Tyr lie Val Leu Pro lie Ser Glu Thr Leu Ser Met Glu Glu 1175 1180 1185

Asp Ser Gly Leu Ser Leu Pro Thr Ser Pro Val Ser Cys Met Glu 1190 1195 1200

Glu Glu Glu Val Cys Asp Pro Lys Phe His Tyr Asp Asn Thr Ala 1205 1210 1215

Gly lie Ser Gin Tyr Leu Gin Asn Ser Lys Arg Lys Ser Arg Pro 1220 1225 1230

Val Ser Val Lys Thr Phe Glu Asp Ile Pro Leu Glu Glu Pro Glu 1235 1240 1245

Val Lys Val lie Pro Asp Asp Asn Gin Thr Asp Ser Gly Met Val 1250 1255 1260

Leu Ala Ser Glu Glu Leu Lys Thr Leu Glu Asp Arg Thr Lys Leu 1265 1270 1275

Ser Pro Ser Phe Gly Gly Met Val Pro Ser Lys Ser Arg Glu Ser 1280 1285 1290

Val Ala Ser Glu Gly Ser Asn Gin Thr Ser Gly Tyr Gin Ser Gly 1295 1300 1305

Tyr His Ser Asp Asp Thr Asp Thr Thr Val Tyr Ser Ser Glu Glu 1310 1315 1320

Ala Glu Leu Leu Lys Leu 11e Glu Ile Gly VaI Gin Thr Gly Ser 1325 1330 1335 27 201109029

Thr Ala Gin lie Leu Gin Pro Asp Ser Gly Thr Thr Leu Ser Ser 1340 1345 1350

Pro Pro Val 1355 〈210〉 22 <211〉 9 <212〉 PRT <213〉人工 〈220〉 <223〉HIV-Env蛋白質衍生合成胜肽 <400> 22

Arg Tyr Leu Arg Asp Gin Gin Leu Leu 1 5 〈210〉 23 <211> 9 〈212〉 PRT 〈213〉人工 〈220〉 〈223〉HIV-Env蛋白質衍生合成胜肽 <400> 23

Ser Leu Tyr Asn Thr Tyr Ala Thr Leu 28

Claims (1)

1. 201109029 七、申請專利範圍： 1. 一種用於治療及/或避免於人類脈絡膜中由血管新 生所引起的疾病（血管新生黃斑病變）之藥學組合物，包 括，（a)包含來自一 VEGF受體1蛋白質的一胺基酸序列與 具有一誘導細胞毒殺性T細胞之能力之胜肽的至少一類型 的胜肽或一編碼出其的多核苷酸為活性成分。 2·如申請專利範圍第1項所述之藥學組合物，其中 之前述胜肽包括下列（i)與（ii)之胜肽： (i)至少一胜肽’其包括任一擇自由序列辨識號：1至 4所組成之群組的胺基酸序列； (11)至少一胜肽’其包括在任一擇自由序列辨識號：1 至4所組成之群組的胺基酸序列中具有一或多個胺基酸取 代、刪除、加入及/或插入的胺基酸序列。 3.如申請專利範圍第2項所述之藥學組合物，其中（η) 之刖述胜肽為下列（1)與（6)之胜肽的任何一個： (1) 一胜肽，於其中來自序列辨識號：1至3之胺基酸 序列之任一個的N端的第二個胺基酸為白胺酸或甲硫丁胺 酸； (2) —胜肽，於其中序列辨識號：i至3之胺基酸序列 之任一個的C端胺基酸為纈胺酸或白胺酸； (3) —胜肽，於其中來自序列辨識號：1至3之胺基酸 序列之任一個的N端的第二個胺基酸為白胺酸或曱硫丁胺 酸’且序列辨識號：1至3之胺基酸序列之任一個的c端 胺基酸為纈胺酸或白胺酸； 1 201109029 (4) 一胜肽’於其中來自序列辨識號：4之胺基酸序列 的N端的第二個胺基酸為笨丙胺酸、酪胺酸、曱硫丁胺酸 或色胺酸； (5) —胜肽’於其中序列辨識號：4之胺基酸序列的c 端胺基酸為笨丙胺酸、白胺酸、異白胺酸、色胺酸或曱硫 丁胺酸；以及 (6) —胜肽’於其中來自序列辨識號：4之胺基酸序列 的N端的第二個胺基酸為苯丙胺酸、酪胺酸、曱硫丁胺酸 或色胺酸’且序列辨識號：4之胺基酸序列的c端胺基酸 為苯丙胺酸、白胺酸、異白胺酸、色胺酸或曱硫丁胺酸。 4. 如申請專利範圍第1至3項之任一項所述之藥學組 合物’其中該組合物更包括，（b)包含來自一 VEGF受體2 蛋白質的一胺基酸序列與具有一誘導細胞毒殺性T細胞之 能力之胜肽的至少一類型的胜肽。 5. 如申請專利範圍第4項所述之藥學組合物，其中（b) 之前述胜肽包括下列（i)與（i i)之胜肽： (i) 至少一胜肽，其包括任一擇自由序列辨識號：5至 17所組成之群組的胺基酸序列；以及 (ii) 至少一胜肽，其包括在任一擇自由序列辨識號：5 至17所組成之群組的胺基酸序列中具有一或多個胺基酸 取代、删除、加入及/或插入的胺基酸序列。 6. 如申請專利範圍第5項所述之藥學組合物，其中（i i) 之前述胜肽為下列（1)與（6)之胜肽的任何一個： (1) 一胜肽，於其中來自序列辨識號：11至17之胺基 2 201109029 酸序列之任一個的1^端的第二個胺基酸為白胺酸或甲硫丁 胺酸； (2) —胜狀，於其中序列辨識號：11至17之胺基酸序 J之任個的c端胺基酸為綠胺酸或白胺酸； (3) 一胜狀’於其中來自序列辨識號：11至17之胺基 序歹丨之任個的N端的第二個胺基酸為白胺酸或甲硫丁 胺酸且序列辨識號：丨丨至丨7之胺基酸序列之任一個的C 端胺基酸為纈胺酸或白胺酸； (4) 一胜肽，於其中來自序列辨識號：5至1〇之胺基 -文序列之任一個的N端的第二個胺基酸為笨丙胺酸、酪胺 酸、甲硫丁胺酸或色胺酸； (5) —胜肽，於其中序列辨識號：5至1〇之胺基酸序 列之任一個的C端胺基酸為苯丙胺酸、白胺酸、異白胺酸、 色胺酸或甲硫丁胺酸；以及 (6) 一胜狀’於其中來自序列辨識號：5至10之胺基 酸序列之任一個的N端的第二個胺基酸為苯丙胺酸、酪胺 酸、甲硫丁胺酸或色胺酸，且序列辨識號：5至1〇之胺基 酸序列之任一個的C端胺基酸為苯丙胺酸、白胺酸、異白 胺酸、色胺酸或甲硫丁胺酸。 7.如申請專利範圍第1至6項之任一項所述之藥學組 合物，其中該於脈絡膜中由血管新生所引起的疾病（血管新 生黃斑病變）係擇自滲出型老年黃班病變 '近視黃斑病變、 血官樣紋、中心性滲出性脈絡膜視網膜病變、各種視網膜 色素上皮病變、脈絡膜萎縮、脈絡膜缺失症與脈絡膜骨瘤。 201109029 8·如申請專利範圍第1至7項之任一項所述之藥學組 合物’其被投予一人類白血球組織抗原為人類白血球組織 抗原-Α02或人類白血球組織抗原_Α24的個體。 9. 一種用於治療及/或避免於人類脈絡膜中由血管新 生所引起的疾病（血管新生黃斑病變）之疫苗，包括，（a) 包含來自一 VEGF受體1蛋白質的一胺基酸序列與具有一誘 導細胞毒殺性T細胞之能力之胜肽的至少一類型的胜肽或 一編碼出其的多核苷酸為活性成分。 10. 如申請專利範圍第9項所述之疫苗，其中之前 述胜肽包括下列（i)與（ii)之胜肽： (i) 至少一胜肽，其包括任一擇自由序列辨識號：1至 4所組成之群組的胺基酸序列；以及 (ii) 至少一胜肽，其包括在任一擇自由序列辨識號：1 至4所組成之群組的胺基酸序列中具有一或多個胺基酸取 代 '刪除、加入及/或插入的胺基酸序列。 11. 如申請專利範圍第1 〇項所述之疫苗，其中（丨丨）之 刖述胜肽為下列（1)與（6 )之胜肽的任何一個： (1) 一胜肽’於其中來自序列辨識號：1至3之胺基酸 序列之任一個的N端的第二個胺基酸為白胺酸或甲硫丁胺 酸； (2) —胜肽，於其中序列辨識號：1至3之胺基酸序列 之任一個的C端胺基酸為纈胺酸或白胺酸； (3) —胜肽，於其中來自序列辨識號：丨至3之胺基酸 序列之任一個的N端的第二個胺基酸為白胺酸或曱硫丁胺 4 201109029 酉欠，且序列辨識號：1至3之胺基酸序列之任一個的C端 胺基酸為纈胺酸或白胺酸； (4) 一胜狀’於其中來自序列辨識號·· 4之胺基酸序列 的N端的第二個胺基酸為苯丙胺酸、酪胺酸、曱硫丁胺酸 或色胺酸； (5) —胜肽，於其中序列辨識號：4之胺基酸序列的c 端胺基酸為苯丙胺酸、白胺酸、異白胺酸、色胺酸或曱硫 丁胺酸；以及 (6) —胜肽’於其中來自序列辨識號：4之胺基酸序列 的N端的第二個胺基酸為苯丙胺酸、酪胺酸、甲硫丁胺酸 或色胺酸’且序列辨識號：4之胺基酸序列的c端胺基酸 為苯丙胺酸、白胺酸、異白胺酸、色胺酸或甲硫丁胺酸。 12. 如申請專利範圍第9至11項之任一項所述之疫 苗’其中該組合物更包括，（b)包含來自一 VEGF受體2蛋 白質的一胺基酸序列與具有一誘導細胞毒殺性T細胞之能 力之胜肽的至少一類型的胜肽。 13. 如申請專利範圍第12項所述之疫苗，其中（b)之前 述胜肽包括下列（i)與（ii)之胜肽： (i)至少一胜肽，其包括序列辨識號：5至17之任一 個的胺基酸序列；以及 (i i)至少一胜肽，其包括在任一擇自由序列辨識號：5 至17所組成之群組的胺基酸序列中具有一或多個胺基酸 取代、刪除、加入及/或插入的胺基酸序列。 14. 如申請專利範圍第13項所述之疫苗，其中（ii)之 5 201109029 前述胜肽為下列（1)與（6)之胜肽的任何一個： (1) 一胜肽，於其中來自序列辨識號：11至17之胺基 酸序列之任一個的N端的第二個胺基酸為白胺酸或甲硫丁 胺酸； (2) —胜肽，於其中序列辨識號：11至17之胺基酸序 列之任一個的C端胺基酸為纈胺酸或白胺酸； (3) —胜肽，於其中來自序列辨識號：π至I?之胺基 酸序列之任一個的N端的第二個胺基酸為白胺酸或曱硫丁 胺酸，且序列辨識號：11至1 7之胺基酸序列之任一個的c 端胺基酸為纈胺酸或白胺酸； (4) 一胜肽’於其中來自序列辨識號：5至1〇之胺基 酸序列之任一個的N端的第二個胺基酸為笨丙胺酸、酪胺 酸、甲硫丁胺酸或色胺酸； (5) —胜肽’於其中序列辨識號：5至10之胺基酸序 列之任一個的C端胺基酸為苯丙胺酸、白胺酸、異白胺酸、 色胺酸或曱硫丁胺酸；以及 (6) —胜肽，於其中來自序列辨識號：5至之胺基 酸序列之任一個的N端的第二個胺基酸為苯丙胺酸、酪胺 酸、甲硫丁胺酸或色胺酸，且序列辨識號：5至丨〇之胺基 酸序列之任一個的C端胺基酸為苯丙胺酸、白胺酸、異白 胺酸、色胺酸或甲硫丁胺酸。 15.如申請專利範圍第9至14項之任一項所述之疫 田其中該於脈絡膜中由血管新生所引起的疾病（血管新生 κ斑病變）係擇自滲出型老年黃班病變、近視黃斑病變、血 6 201109029 狀、 ▲‘陡’參出性脈絡膜視網膜病變、各種視網膜色 :變脈絡膜萎縮、脈絡膜缺失症與脈絡膜骨瘤。 —16.如申請專利範圍第9至15項之任一項所述之疫 八被杈予人類白血球組織抗原為人類白血球組織抗 原A 0 2或人類白血球組織抗原_ a 2 4的個體。 1 7’種用於抑制在人類脈絡膜中之血管新生的藥學 組合物’包括’（a)包含來自一 VEGF受體1蛋白質的一胺 基酸序列與具有—誘導細胞毒殺性T細胞之能力之胜肽的 至夕类員型的胜肽或—編碼出其的多#玄苷酸為活性成分。 18·如申請專利範圍第17項所述之藥學組合物，其中 (a)之前述胜肽包括下列（1)與（11)之胜肽： (1)至夕肽’其包括任一擇自由序列辨識號"至 4所組成之群組的胺基酸序列；以及 (11)至乂胜肽，其包括在任一擇自由序列辨識號：1 至4所組成之群㈣胺基酸序财具有_或多㈣基酸取 代、刪除、加入及/或插入的胺基酸序列。 19.如申請專利範圍第18項所述之藥學組合物，其中 (ii)之前述胜肽為下列（1)與（6)之胜肽的任何一個： (1)-胜肽’於其中來自序列辨識號：i至3之胺基酸 序列之任-個白"端的第二個胺基酸為白胺酸或甲硫丁胺 酸； (2) -胜肽’於其中序列辨識號：】至3之胺基酸序列 之任一個的C端胺基酸為纈胺酸或白胺酸； (3) -胜肽’於其中來自序列辨識號：i至3之胺基酸 201109029 序列之任一個的N端的第二個胺基酸為白胺酸或甲硫丁胺 酸，且序列辨識號：丨至3之胺基酸序列之任一個的C端 胺基酸為纈胺酸或白胺酸； (4) 一胜肽，於其中來自序列辨識號：4之胺基酸序列 的的第二個胺基酸為苯丙胺酸、胳胺酸、甲硫丁胺酸 或色胺酸； (5) —胜肽，於其中序列辨識號：4之胺基酸序列的c %胺基酸為苯丙胺酸、白胺酸、異白胺酸、色胺酸或甲硫 丁胺酸；以及 (6) —胜肽’於其中來自序列辨識號：4之胺基酸序列 的N端的第二個胺基酸為苯丙胺酸、酷胺酸、甲硫丁胺酸 或色胺酸’且序列辨識號：4之胺基酸序列的C端胺基酸 為苯丙胺酸、白胺酸、異白胺酸、色胺酸或曱硫丁胺酸。 20.如申請專利範圍第17至19項之任一項所述之藥學 組合物’其中該組合物更包括，（b)包含來自一 VEGF受體 2蛋白質的一胺基酸序列與具有一誘導細胞毒殺性τ細胞 之能力之胜肽的至少一類型的胜肽。 21 ·如申請專利範圍第20項所述之藥學組合物，其中 (b)之前述胜肽包括下列（i)與（ii)之胜肽： (i)至少一胜肽，其包括序列辨識號：5至17之任一 個的胺基酸序列；以及 (i i)至少一胜肽，其包括在任一擇自由序列辨識號：5 至17所組成之群組的胺基酸序列中具有一或多個胺基酸 取代、刪除、加入及/或插入的胺基酸序列。 8 201109029 22.如申請專利範圍第21項所述之藥學組合物，其中 (i i)之前述胜肽為下列（1)與（6 )之胜肽的任何一個： (1) 一胜肽，於其中來自序列辨識號：11至17之胺基 酸序列之任一個的N端的第二個胺基酸為白胺酸或曱硫丁 胺酸； (2) —胜肽，於其中序列辨識號：11至I?之胺基酸序 列之任一個的C端胺基酸為纈胺酸或白胺酸； (3) —胜肽，於其中來自序列辨識號：丨丨至I?之胺基 酸序列之任一個的N端的第二個胺基酸為白胺酸或甲硫丁 胺酸’且序列辨識號：Π至1 7之胺基酸序列之任一個的c 端胺基酸為綠胺酸或白胺酸； (4) 一胜肽’於其中來自序列辨識號：5至1 〇之胺基 酸序列之任一個的N端的第二個胺基酸為苯丙胺酸、酪胺 酸、甲硫丁胺酸或色胺酸； (5) —胜肽，於其中序列辨識號：5至Μ之胺基酸序 列之任一個的C端胺基酸為笨丙胺酸、白胺酸、異白胺酸、 色胺酸或甲硫丁胺酸；以及 (6)—胜肽，於其中來自序列辨識號：5至1〇之胺基 酸序列之任-個的N端的第二個胺基酸為苯丙胺酸、酷胺 酸、甲硫丁胺酸或色胺酸’且序列辨識號：5至1〇之胺基 酸序列之任-個的C端胺基酸為苯丙胺酸、自胺酸、異白 胺酸、色胺酸或曱硫丁胺酸。 23.如申睛專利範圍第155 + h 乐至19項之任—項所述之藥學 組合物，其被投予一人類白血 I且織抗原為人類白血球組 201109029 織抗原-A02或人類白血球組織抗原_A24的個體。 24. —種用於抑制在人類脈絡膜中之血管新生的疫 苗’包括’（a)包含來自一 VEGF受體1蛋白質的一胺基酸 序列與具有一誘導細胞毒殺性T細胞之能力之胜肽的至少 一類型的胜肽或一編碼出其的多核苦酸為活性成分。 25. 如申請專利範圍第24項所述之疫苗，其中（a)之前 述胜肽包括下列（i)與（ii)之胜肽： (i )至少一胜肽’其包括任一擇自由序列辨識號：1至 4所組成之群組的胺基酸序列；以及 (ii)至少一胜肽’其包括在任一擇自由序列辨識號：1 至4所組成之群組的胺基酸序列中具有一或多個胺基酸取 代、刪除、加入及/或插入的胺基酸序列。 26. 申請專利範圍第25項所述之疫苗，其中（π)之前 述胜狀為下列（1)與（6)之胜肽的任何一個： (1) 一胜肽’於其中來自序列辨識號：1至3之胺基酸 序列之任一個的N端的第二個胺基酸為白胺酸或曱硫丁胺 酸； (2) —胜肽’於其中序列辨識號：1至3之胺基酸序列 之任一個的C端胺基酸為纈胺酸或白胺酸； (3) —胜肽，於其中來自序列辨識號：1至3之胺基酸 序列之任一個的N端的第二個胺基酸為白胺酸或甲硫丁胺 酸，且序列辨識號：丨至3之胺基酸序列之任一個的C端 胺基酸為纈胺酸或白胺酸； (4) 一胜肽，於其中來自序列辨識號：4之胺基酸序列 10 201109029 的N端的第二個胺基酸主# 吞酸為本丙胺酸、酪胺酸、曱硫丁胺酸 或色胺酸； (5) 胜肽’於其中序列辨識號：4之胺基酸序列的c 端胺基酸為笨丙胺酸、缺 妝夂白胺酸、異白胺酸、色胺酸或甲硫 丁胺酸；以及 (6) 胜肽，於其中來自序列辨識號：4之胺基酸序列 的的第—個胺基酸為苯丙胺酸、酪胺酸、曱硫丁胺酸 或色胺馱，且序列辨識號：4之胺基酸序列的C端胺基酸 為笨丙胺酸、白胺酸、異白胺酸、色胺酸或曱硫丁胺酸。 27.如申請專利範圍第24至26項之任一項所述之疫 苗，其中該組合物更包括，（b)包含來自一 VEGF受體2蛋 白質的一胺基酸序列與具有一誘導細胞毒殺性T細胞之能 力之胜肽的至少一類型的胜肽。 28·如申請專利範圍第27項所述之疫苗，其中（b)之前 述胜肽包括下列（i)與（ii)之胜肽： (I) 至少一胜肽，其包括序列辨識號：5至17之任一 個的胺基酸序列；以及 (II) 至少一胜肽’其包括在任一擇自由序列辨識號：5 至17所組成之群組的胺基酸序列中具有一或多個胺基酸 取代、刪除、加入及/或插入的胺基酸序列。 29.如申請專利範圍第28項所述之疫苗，其中（ii)之 前述胜肽為下列（1)與（6)之胜肽的任何一個： (1) 一胜肽’於其中來自序列辨識號：11至17之胺基 酸序列之任一個的N端的第二個胺基酸為白胺酸或甲硫丁 11 201109029 胺酸； (2) —胜肽’於其中序列辨識號：u至I?之胺基酸序 列之任一個的C端胺基酸為纈胺酸或白胺酸； (3) —胜肽’於其中來自序列辨識號：丨丨至I?之胺基 k序列之任一個的N端的第二個胺基酸為白胺酸或甲硫丁 胺酸，且序列辨識號：1丨至17之胺基酸序列之任一個的c 端胺基酸為網胺酸或白胺酸； (4) 一胜肽’於其中來自序列辨識號：5至1〇之胺基 酸序列之任一個的N端的第二個胺基酸為苯丙胺酸 '酪胺 酸、曱硫丁胺酸或色胺酸； (5) —胜肽，於其中序列辨識號：5至丨〇之胺基酸序 列之任一個的C端胺基酸為苯丙胺酸、白胺酸異白胺酸、 色胺酸或曱硫丁胺酸；以及 (6) —胜肽，於其中來自序列辨識號：5至1〇之胺基 酉欠序列之任一個的N端的第二個胺基酸為笨丙胺酸、赂胺 k、曱硫丁胺酸或色胺酸，且序列辨識號：5至1〇之胺基 酸序列之任一個的C端胺基酸為苯丙胺酸、白胺酸、異白 胺酸、色胺酸或曱硫丁胺酸。 30.如申請專利範圍第24至29項之任一項所述之疫 田’其被投予一人類白血球組織抗原為人類白血球組織抗 原-A02或人類白血球組織抗原_A24的個體。 12