TW201043609A - Application of Acacia extracts and their phytocompounds on the inhibition of xanthine oxidase - Google Patents

Description

201043609 六、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 可用於抑制黃嘌呤氧化 本發明係有關於一種 酶之組合物，其包括有 效量來自相思樹屬之樹木抽出物。 【先前技術】 〇 食物攝取或人链内㈣吟通過新陳代謝轉化為次黃^ 咖__㈣料(x喊ne),从黃討氧化酶伽咖 oxidase ’ XO)的催化作用下生成尿酸。尿酸就是嗓吟在人體内分解代謝 的最終產物。如體_t減戦f， 而使尿酸鹽(Urate crystds)在關節腔内沉積形成結晶，造成關節舰和 變形，而造成痛風。國内目前三十歲以上的男性人口中痛風的盛行率竟 n達百分之3.3 ’而最谷易發生痛風的年齡層已經下降到三十幾歲。這 〇 纟讀著經濟的高度絲’國民肋物性蛋白、高熱量食物的攝取量逐 年增加，使得肥胖的人口越來越多、越來越年輕化，迫使尿酸過高的人 口急遽上升。 高尿酸引起之痛風，具有以下症狀，例如，肌肉痙攣、局部腫脹、 發炎、關節疼痛、肌肉疲倦、壓力感及心肌梗塞。目前已有許多商業化 藥物可用於治療痛風，例如，本補麻龍(Benzbromarone，（URINORM))、 丙績舒(Probenecid)、別°票呤醇(Allopurinol)、布可隆(Bucolome)、辛可 芬(Cinchophan)以及秋水仙素(Colchicine)，其中係以別嘌呤醇為臨床上 3 201043609 經常使用之藥物。些藥物發揮功能之方式鱗制尿酸之形成、將多餘 尿酸從體内移除、作用於腎臟以幫助身體減少尿酸、抑制將黃嗓岭轉化 為尿酸之黃嗓吟氧倾之活性以及加速尿酸從體内分泌出去。然而，這 些尿酸促排_同時具有-賴侧，例如，料起尿路結石、胃腸障 礙、兴疫、腎貞擔、職以及貧血。因此，雖然已有許多躲絲痛風 之藥劑，但仍有需要找峰低尿酸含量之新賦飲食添加物，藉此治療 痛風並調節痛風相關症狀。 而汽％吟氧化酶在體内’除了將黃嗓吟代謝為尿酸外，在黃嗓吟與 κ嘌呤氧化酶的反應巾，會產生超氧自由基㈣和過氧化邮2〇2)。其 生化反應過程如下所示：

XO

Hypoxanthine . 〇〇 {次黃嘌呤} .J + HzO 冰）

Xanthine 債嘌呤} (黃嘌呤氧化酶} -~~► Xanthine + 202· + 2H+ (黃嘌呤）（超氧自由基}丨氫離子} Χ0 + 202_ + 2H+ (超氧自由基| ί氫離子} t黃嘿化酶y -—► Uric acid + 202- + 2H+ (尿酸）（超氧自由基）{氫離子}

Xanthine + 〇2 頃嘌呤） {氧) h2o <水） XO 《黃嘌呤氧化勒

Uric acid (尿制

h2o2 (過氧化氫J 自由基因其本質上之不穩定性’若在人體内極易和細胞及組織產生化 子反應’這個化學反應統稱為氧化(Qxidati⑽)，會使細胞失去正常功能， 如氧化發生在細賴上的脂質，會使細賴通雜改變，養分及代謝物質 4 201043609 法進出細胞内造成細胞壞死，而_膜被破壞的速度大於細胞再生的速 度’組織的功能就會受到明顯影響；若攻擊蛋白質，會使蛋白質失去正常 生理功能而㈣賴，如發生在皮下之_蛋自(⑽則會令 皮膚失去彈性及保濕功能而產生老化現象(Agi♦另外，自由基也會破 壞DNA ’造成DNA股的切斷或鹼基的改變，一旦DNA遭到切斷，人體 在修補的過射，可能會因絲法正常修復而產生紐。自由基攻擊驗基 後會衍生-賴產品，這些品往往會使遺傳發生錯誤而有致癌的可 能。人體若長期受到上述-連㈣傷害，各種慢性病、老化、癌症將可能 陸續應運而生。 相思樹屬(灰ada)為豆科中的一屬，為常見的樹木，主 要分布於低海拔山地與丘陵地。目前，有關相思樹的主要功用，除了可 供作為傳統薪炭材之外，亦可作為部分結構用材。此外，相思樹為具植 物相勉作用之樹種之一，其部份葉子抽出物之化合物，經海蝦致死試驗 已證實具有生物活性；亦有一些研究發現相思樹屬之抽出物中，具有黃 酮類物質，見 Lai Yeap Foo, Phytochemistry, Vol. 26, No. 3, ρρ·813-817 (1987) > Elfranco Malan, Phytochemistiy, Vol. 33, No. 3, pp. 733-734 (1993) > Wu et al., Journal of Agricultural and Food Chemistiy, Vol. 56, No. 5, pp. 1567-1573 (2008) » Lee et al., Journal of Natural Products, Vol. 63, No. 5, pp. 710-712 (2000)» Tung et al., Food Chemistry, Vol. 115, No. 3, pp. 1019-1024 (2009) » Wu et al., Journal of Agricultural and Food Chemistry, Vol. 56, No. 2, pp. 328-332 (2008) > Lee et al., Bot. stud, Vol. 47, pp. 37-43 5 201043609 (2006)及 Wu et al” Journal of Agricultural and Food Chemistry, Vol. 53, No. 2, pp. 5917-5921 (2005)。然而，對於相思樹樹皮、心材甚至是葉子 中所潛藏具抑制黃嗓呤氧化酶魏之化合物，截至目前為止並無人發 現。 【發明内容】 本發明係一種用於抑制黃嘌呤氧化酶活性之組合物，其包括有效量 來自相思樹抽出物及醫藥上可接受之載體。此組合物可用於降低個體 中之尿酸及降低自由基的產生。此組合物係由相思樹屬之樹木以有機 溶劑如乙醇或水等萃取其中之有效成分。 本發明之相思樹之抽出物係由相思樹之心材、樹皮、枝條、花及葉 子中萃取，其中抑制黃嘌呤氧化酶活性作用較佳者係由心材萃取，次佳 為由樹皮中萃取。 本發明之有機溶劑(如乙醇等)萃取相思樹抽出物，續以乙酸乙酯、 正丁醇及水進行液相-液相分配，分為乙酸乙酯可溶部、正丁醇可溶部 及水可溶部。其中對於抑制黃嘌呤氧化酶作用較佳之乙酸乙酯可溶部， 可分離出八種主成分，分別為：3,7,8,3，，4,_五羥基黃酮 (3,7,8,3,4-Pentahydroxyflavone (麥拉諾千廷，Melanoxetin))、7,8,3，,4，_ 四羥基黃酮（7,8,3’，4’-Tetrahydroxyflavon)、3,4,2，，3，，4，-五羥基順式查耳酮 (3,4,2,,3,,4,-Pentahydroxy irara-chalcone » Okanin)) > 7,8,3^4^,¾ 羥基-3-甲氧基黃酮(7,8,3VT-Tetrahydroxy-3_methoxyflavone (傳希廷， 6 201043609

Transilitin)) 、 3,7,8,3’-四羥基-4，-甲氧基黃酮 (3’7,8,3f-Tetrahydroxy-4r-methoxyflavone)、7,8,3’_ 三經基-3,4’-二甲氧基黃 酮（7,8,3’-Trihydroxy-3,4’-dimethoxyflavone)、7,3’，4’-三經基黃酮 (7’3’，4’-Trihydroxyflavone)、7,3’，4’-三羥基-3-曱氧基黃酮 (7,3W-Trihydroxy-3-methoxyflavone)。而抑制黃嘌呤氧化酶活性作用較 佳者係麥拉諾千廷(Melanoxetin)及歐卡寧(Okanin)，最佳者係歐卡寧 (Okanin) ’且其中麥拉諾千廷(Melanoxetin)及歐卡寧(Okanin)對於抑制黃 〇 嘌呤氧化酶的能力為現今常用治療痛風之別嘌呤醇(Allopurinol)的17及 63倍，極具潛力取代有副作用的別嘌呤醇。 本發明之相思樹屬之樹木係包含但不限於下列樹種：拉特氏相思樹 adracea)、微白相思樹α/况也）、無脈相思樹幻 aneura) '阿拉伯相思樹（也沉如ara况ca)、直幹相思樹（灰ac/a awricM/z/omb)、灰葉相思樹（Jcada知⑹印⑽为、貝利氏相思樹(Jcacb bai㈣ana)、銀荆相思樹（Acacia bealbat)、雙生脈相思樹（如沉如 binervia) ' {Acacia brachybotrya) ' >-]' -¾ M {Acacia 、白諾相思樹（Jeac/a 知woeawa)、藤相思樹（/4cac/flcaes^)、藤 葉相思樹、心葉相思樹、兒茶 相思樹 、加芬相思樹（^cac/acavemVz)、小合歡 cw2a>2«i〇、臺灣相思樹（也沉以co«/w似）、牛角相思樹 comigera)、刀狀相思樹(也沉/α 、銀葉相思樹 CM/iri/brwis)、澳洲相思樹（乂⑶^如、巨相思樹 7 201043609 c_yc/o/?的、澳洲白粉相思樹（Jcack 、美麗相思樹(dazcw ifecora)、下延相思樹（Jcacw i/ecM/rms)、長莢相思樹（y4cizc/flf e/owgata)、鎌莢相思樹(Jcflcw 为/eaia)、消息花相思樹 /izmaszVma)、流蘇相思樹、吉臘夫氏相思樹 gz'ra加e)、猫爪相思樹(Jc<3c& gregK)、摩洛哥相思樹(Acacia • gwwwz)fera)、絨毛相思樹(JcaciVz /w?/iwm‘c〇、平展葉相思樹（Jcac幻 、非洲相思樹（Jcac/α /zom‘<ia〇、何威特相思樹（灰aczb 〇 /w?wz'ii/〇、交枝相思樹(ylcacia 、柏葉相思樹（灰ac/aywm>en>2<3)、 卡路相思樹A^rrao)、凱特威氏相思樹（dcaab 、村 阿相思樹〇4cac&fo?iz)、大葉栲皮相思樹油·<?Μ/βη·ί)、皮屑相思 樹⑷⑽·α /epmsa)、白勃相思樹(如士 /ewcop/z/oea)、長葉相思樹 (de<3cz‘a 、大葉相思樹（dc<2c?z'a 、黑荆相思樹(Jcizck weamszY)、綠栲皮相思樹（v4c<3da we/iWi»qy/o«)、具蜜相思樹（Acacia me//汾ra)、藤相思樹（Jcack mem·////)、柔毛相思樹(灰沉& zwo//z·孤>wa)、 Ο 黑木相思樹(/4cacz‘a «igrescms)、膠相思樹（/4cacz_a m7ortca)、圓錐花序相 思樹 pamVw/ato)、刺相思樹（/4cac^a /?ara<i〇jraf)、垂枝相思樹 (dcaciapem/w/a)、加力酸藤相思樹（JcaczVa /?e««ato)、羽脈相思樹 户ew«>2emX)、珍珠相思樹（々ac/a 、極弯相思樹（ylcaczV? prav&iima)、凸起相思樹（Jcac/a /wOmiwem)、粉莖相思樹(y4c<3〇'iz /?m>2〇ii7)、毛相思樹（Acacia /?t/Z>esrms)、密花相思樹(Acacia 、樹膠狀相思樹（也ada r油>?ocfes)、臺灣樹(灰richii)、 剛硬相思樹rigew)、變紅相思樹（Αυκ*/<3 ΓΜό/ί/ύ!)、柳相思樹 201043609 (yicizc/dt «sa/ic/wa)、塞内加爾相思樹、塞伊耳相甲、樹 〇4cada此刊/)、藤相思樹伽⑽㈣、顯著相思樹（也沉如 speciaMis)、螺果相思樹(灰⑽·α啊>〇⑵φβ)、香甜相思樹（乂⑽^ swizveo/ms)、頂生相思樹（jCi7Ck temz_„a/〇、被覆相思樹（士议^ veiito)、勝利相思樹相思樹Wctonbe)、屋得相思樹⑷ ' WOOi^) ’其中較佳之相思樹種係為綠栲皮相思樹（Jmck me/awcay/cw)、黑木相思樹(jcac& 、臺灣相思樹（灰沉幻 〇 <%»«yksa)，最佳係臺灣相思樹力⑸2)。 本發明之相思樹抽出物可作為藥物、保健食品或痛風患者無法多量 食用之食品(如豆腐等），以用於治療體内黃嘌吟氧化酶作用產生之尿酸 引起的痛風或改善與高量尿酸相關之症狀，其係選自肌肉痙攣、局部腫 脹、發炎、關節疼痛、肌肉疲倦、壓力感或心肌梗塞。 另外，以前已有發表過相思樹抽出物有抑制自由基及抗氧化之功 〇 能 ，見 Chang et al” Journal of Agricultural and Food Chemistry, Vol. 49, pp. 3420-3424 (2001)及 Wu et al.，Journal of Agricultural and Food

Chemistry, Vol.53, pp. 5917-5921 (2005) »Wu et al., Journal of Agricultural and Food Chemistry, Vol. 56, No. 5, pp. 1567-1573 (2008) » Lee et al., Bot. Stud., Vol. 47, pp. 37-43 (2006) 5 Tung et al., Food Chemistry, Vol. 115, No. 3, pp. 1019-1024 (2009) > Wu et al., Journal of Agricultural and Food Chemistry, Vol. 56, No. 2, pp. 328-332 (2008) » Tung et al., Bioresource Technology, Vol. 100, No. 1，pp. 509-514 (2009)及 Tung et al.，Bioresource 9 201043609

Techn〇k)gy，侃98，Ng.5，pp.⑽-丨叫厕），,然而，尚未有研究證實 相思樹抽出物可抑制因黃嗓吟氧化酶作用於生物體内所產生之自由 基。本發明之相思樹抽出物柯作為藥物、保健食品或化妝品等用以抑 制因黃嗓吟氧化酶作用時於個體内產生之自由基，其係可改善因體内自 由基引起之相_病，如：丨.破壞細賴，使細胞無法魏養分造成 皮膚炎*皰胃春癌、黑斑、老人斑及傷口不易療合^攻擊朦 原、蛋白、彈力蛋白所造成之皮膚老化、敵紋及無光澤;3.破壞免疫系 Ο 統&成之免疫力降低、谷錢冒、呼吸道傷害、紅斑性狼瘡及乾癣；4. 促使過氧傾f形成，胁顿脈_化4脈硬化，高血壓、心臟血 管疾病’腦出血及巾風；5.促使师沉積在各料或其它結締組織造 成之肝炎、脂肪肝、肝硬化、騰臟炎、胃炎、便秘、腎臟炎、急性腎衰 竭。糖尿病、眼睛充血、視網膜病變、白内 症及記憶力減退；6.破壞跳儀，造峨體改變、細胞= 成之腫瘤及癌症。 〇 本發明之組合物可進—步包括寡胜肽、_絲酸、崎Camitine) 及醫藥上或生理上可接受之_讎成醫敝合物。較佳之醫藥上可 接受之賦形劑包括但不限於糊精、乳糖、殿粉、滑石、硬脂酸、酒石 酸、酒精、甘油、蔬菜油及壤。 如將本發明作為藥物’則本發明之組合物可藉由習知方法以適當的 醫樂上可接受之賦型劑製備於適當的醫藥劑型，例如，鍵劑、粉末、顆 粒、膠囊、賴賴浮液(其於不_給藥途徑）。本發明之組合物 201043609 可經由任何形式之途徑給藥，例如，口服或非經腸道之途徑，以降低個 體中之尿酸，例如，哺乳動物，較佳為人類。具體而言，本發明之組人 物可用於控制罹患痛風之個體中之尿酸含量，並改善與高量尿酸或自由 基引起之相關症狀，例如，肌肉痙攣、局部腫脹、發炎、關節疼痛、肌 肉疲倦、壓力感及心肌梗塞。 如將作為飲食添加物，本發明之組合物可藉由習知方法而賦形於用 於口服關之適當舰巾，例如，㈣、粉末、雛、膠囊、液體及懸 浮液，或製作成例如散劑、丹劑、條劑、線劑、熏劑或片劑等的外用劑 型。口服劑型可進-步作成健康食品，而外關型可應用在例如面膜、 化妝水、晶露、乳液或彩妝中。 許多已知用於冶療痛風之尿酸促排藥劑是商業上可獲得的，例如， 本補麻龍、丙續舒、別嗓+醇、布可隆、辛可芬以及秋水仙素。本發明 之組合物可與-❹種之料絲㈣_結合使肖，_於降低尿 酸。當進行此等結合使料’本發明之組合物與該一或多種尿酸促排藥 劑可依序綱時給藥或細。例如，本發明之組合物可於單—劑型中進 步括或多種尿酸促排藥劑。或者，本發明之組合物與該一或多種 尿酸促排藥舰賦形為分職綱，而同賴依序給誠施用於個體 中。 本發明中之醫藥上可接受之載體，可適用於口服、舌下、直腸、鼻 腔、陰道、腹腔、癌内、關節内、眼球内、眼球表面、表皮、經皮，及 201043609 其他可能之投予方式如注射或貼片等。劑型可以是單位劑型，可以傳統 製劑技術製備，這些技術包括將有效成分與醫藥載體或輔型劑結合。 【實施方式】 本發明將因參考以下實例而臻於清楚明確。以下所說明之實例僅作 為說明之用並非作為本發明之限制。 〇 實施例1臺灣相思樹各部位乙酵抽出物之黃嘌呤氧化酶抑制活 性 不同部位之相思樹以乙醇冷浸萃取3次，每次浸泡7天，萃取液以 Whatman# 1濾紙抽氣過濾以去除雜質，並將過濾所得萃取液以減壓濃 縮機(Rotatory vacuum evap〇rat〇r)濃縮’隨後移入冷凍乾燥機予以凍乾 後進行黃嘌呤氧化酶抑制活性試驗。試驗之進行是以黃嘌呤(Xanthine) 0 與黃嘌呤氧化酶〇xidase)反應生成尿酸，在紫外光295 ^有 特定吸收。因此’將2吣不同濃度之試驗樣品、798 nL焦磷酸鈉緩衝 液(pH 7.5)與〇.1 u黃嘌呤氧化酶，於37〇c均句混合5分鐘後，再加 入200 μί 〇·6 mM黃嘌呤，均勻振盪後，以紫外光/可見光分光光譜儀 測量295 nm吸收值之經時變化，並計算其反應速率以及抽出物之黃嘌 呤氧化酶抑制率(％)。 黃嘌呤氧化酶抑制率（％) = (1一 -?驗組反應速率χχ1〇〇 對照組反應速率 ’ 12 201043609 圖1為臺灣相思樹各部位乙醇抽出物之黃嘌呤氧化酶抑制能力之 結果，由此可見乙醇抽出物之抑制率隨濃度的增加而增大。比較各部 位之抑制率，以心材抽出物之效果最佳，其半數有效濃度(£(：5())為ιΐ 7 pg/mL，其次為樹皮抽出物。 實施例2臺灣相思樹心材乙酵抽出物及各可溶部之黃嘌呤氧化酶 抑制活性 〇 臺灣相思樹心材之乙醇抽出物續以不同極性之溶劑，包括以乙酸乙 S旨、正丁SI及水等，餅細_油分，將相鱗吨乙醇抽出物初 步分為乙酸乙i旨可溶部、正丁醇可鱗及水可溶部3個可溶部，進行 步驟如實施例1所述之黃嘌呤氧化酶抑制活性試驗。 此進-步評估心材抽出物中各可溶部之黃辦氧化酶抑制活性，結 果如圖2所示，以乙酸乙醋之效果最佳，其半數有效濃度购0)為78 D μ§/就，而f學上錢之已知黃—氧化卿娜施細㈣ 半數有效濃度(EC5〇)則為1.2 pg/mL。 實施例3㈣相思樹心材乙雜丨物之次分料對黃料氧化酵 抑制活性 更進步利用官柱層析與高效能液相層析，以咖8谬體管柱層析 對具抑制黃噪呤氧化酶之可溶部_乙酸乙醋可溶部％克進行初步分 離並將冲提所得之抽出物分為腿（沖提液為哪至職之甲醇/水 (Me〇mi2〇)) , EA2-EA3 (30% ψ ^/^(Μ&0ΗΜ20)) . EA4 (30%^ 40 13 201043609 % 甲醇/水(Me0H/H20))、EA5 (40% 至 50% 甲醇/水(MeOH/H2〇))、EA6 (50 至 60% 曱醇冰(MeOH/H2〇))、EA7 (60% 曱醇/水(MeOH/H2〇))、EA8 (70% 至 80% 甲醇 / 水(MeOH/H2〇))、EA9(80% 至 100% 甲醇 / 水 (MeOH/HzO))及EA10 (100%四氫呋喃(挪》等1〇個次分離部。其沖 提溶液及收率如表1所示，其中以EA5至EA8對黃嘌呤氧化酶抑制 活性較佳，當濃度為5 pg/mL，其抑制率約為74 8%至8〇 5%，而別嘌 呤醇(Allopurinol)之抑制率為78%。 〇 表1、臺灣相思樹心材乙酸乙酯可溶部中各次分離部之沖提溶劑、 收率及黃嘌呤氧化抑制活性(使用濃度為5 pg/mL)。 次分離部 移動相· 重量（克） 抑制率（¾) EA1 10%-20% 13.9 35.^ EA2 30% 3.1 39.4d EA3 30% 1.7 · 49.4。 BA4 30%-40% 2.4 64.1b EA5 40%-50% 6a 78.7a EA6 50%-60% 3.3 77.8a EA7 60% u 80.5a EA8 70%-80% 0.9 74.88 EA9 80%-100% 0-5 37.9d EA10 THF 6.4 39.3d 總重（克） 39.4 gj收率（1) 93.9% 為甲醇/水之比率（v/v)-別嘌呤醇之抑制率為：78*2%.

實施例4臺灣相思樹心材乙酵抽出物之主成分對黃嗓吟氧化酶抑 14 201043609 制活性 進一步將臺灣相思樹心材EA5至EA8次分離部分離純化所得之八 種主成分，其化學式如圖3所示。此八種主成分如下：13,7,8,3,，4，_五經 基黃酮（3,7,8,3，，4，-Pentahydroxyflavone (麥拉諾千廷，Mdan〇xetin))、2 7,8,3’，4’-四羥基黃酮（7,8,3’，4f-Tetrahydroxyflavon)、3. 7,8,3，，4，-四經基-3- 曱氧基黃酮（7,8,3W-Tetrahydroxy-3-methoxyflav〇ne (傳希廷， 加ra_chalcone (歐卡寧，Okanin))、5. 3,7,8,3’-四羥基_4，_甲氧基黃酮 (3’7’8’3^611油>^(^丫-4'-11^1;11€«>^&¥〇1^)、6.7,8,3’-三經基_3,4’-二曱氧基 黃酮（7,8,3’-Trihydroxy-3,4’-dimethoxyflavone)、7. 7,3’,4，-三經基黃酮 (7,3’，4’-Trihydroxyflavone)、8. 7,3’，4’-三羥基 _3_ 甲氧基黃酮 (7’3VT-Trihydroxy-3-methoxyflavone)，將此八種成分進行黃嘌呤氧化酶 抑制試驗’其試驗結果如圖4所示，結果顯示Melan〇xetin及〇kanin之 黃嘌呤氧化酶抑制能力，其半數有效濃度(ECy分別為〇274及〇〇74 μΜ ’甚較目前之別嗓吟醇(M〇purinol)為佳（的❶為4784 _)，即 Melanoxetin及Okanin之黃嘌呤氧化酶抑制能力為別嘌呤醇(M〇purin〇1) 的17及63倍，因此，Melanoxetin及Okanin極具潛力取代有副作用之 別嘌吟醇。 實施例5雙倒數作圖(Lineweaver-Burkplot)測定抑制型態 200 mM 焦磷酸鈉/氣化鈉(s— pyrophosphate/HCl, pH 7.5)的緩 15 201043609 沖液中含〇·1單位的黃嗓吟氧化酶TO &與2此的待測化合物麥拉諾 千廷(Melanoxetin)、7,8,3义四羥基黃酮（783,，4,_Tetrahydr()xyfl_n) 或歐卡寧(Okanin)溶於二甲基亞砜(DMS〇)，混合於96微孔盤中37七作 用五分鐘’分別加入濃度為〇.3、〇·4或〇·6 之溶於二次水中之美質 使反應開始。反應物於室溫下，每隔一分鐘以酵素免疫微盤分析儀 (ELISA reader)偵測295 nm吸光值，測八分鐘。以Excd軟體分析所有 酵素實驗結果。 圖5之雙倒數作圖顯示出麥拉諾千廷及7,8，y，4,_四經 基黃酮⑽^’撕咖加邮瞻^對於黃嗓吟氧化酶的抑制模式為競 爭型，與別嘌呤醇(Allopurinol)的型態一樣，而歐卡寧(〇kanin)在黃嗓呤 為基質時，顯示出為非競爭型之抑制作用。 實施例6水萃取臺灣相思樹心材部位及分析其成分 取1 g相思樹心材之乾燥粉末分別加入50mL水中，以沸水煮2小 時得到熱水抽出物，以Whatman #1濾紙抽氣過據，然後去除雜質。將 所得之熱水㈣物H賴濃賴陶_ v_m evapQ_)濃縮乾 燥進-步將臺灣相思樹心材熱水抽出物分離純化分析其主成分。 由圖6可見，以水萃取之抽出物與有機溶劑萃取抽出物之成分相同， 具有可抑婦—氧化酶抑卿狀化合物如3,7,8,3,，4,_五經基黃嗣 。’7’8’3’’4’屮__〇_狀〇此（麥拉諾千廷，繼如_邮、7,8,3,4,四 _<基3甲氧基黃酮(7’83,4,_丁扯却咖〇?^_3_111地〇?^狀〇此（傳希廷 201043609

Tr—litin))、3,4,2’，3，，4,_五羥基順式查耳酮(吻 的m-ChalC0ne(歐卡寧’ 〇kanin))等，故可知臺灣相思樹無論是以有機萃 取或水萃取，其成分皆有可抑制黃嗓岭氧化酶之功效。 【圖式簡單說明】 ' 圖1、臺灣相思樹各部位乙醇抽出物之黃嘌呤氧化酶抑制活性 圖2、臺灣相思射材乙雜出概各可溶狀黃嗓呤氧化酶抑制活性 Ο 圖3、臺灣相思樹心材乙醇抽出物次分離部純化所得之主成分 圖4、臺灣相思樹心材乙醇袖出物之主成分對黃嗓呤氧化酶抑制活性 圖5、麥拉諾千廷（Melanoxetin)、7,8,3^四羥基黃酮 (7,8,3 ’，4’-Tetrahydroxyflavon)及歐卡寧(〇kanin)對黃嘌呤氧化酶抑制之 酵素動力雙倒數圖形。 圖6、臺灣相思樹心材熱水抽出物之指紋圖譜 【主要元件符號說明】 17

Claims (1)

1. 201043609 七、申請專利範圍： 1. 一種抑制黃封氧化酶之活性之組合物，其包括有效量之相思樹屬 樹木抽出物及醫藥上可接受之載體。 2. 如中請專利範圍第i項之組合物，其中相思樹屬樹木為臺灣相思樹 {Acacia confusa) ° —3.如中請專利範圍第1項之組合物，其中抽出物可降低個體中之尿酸濃度。 4. 如申請專利範圍第3項之組合物，其中抽出物可作為藥物以用於治療痛 〇 風或改善與高量尿酸相關之症狀，其係選自肌肉痙攀、局部腰服、發炎、 關節疼痛、肌肉疲倦、壓力感及心肌梗塞。 5. 如申請專利範圍第i項之組合物，其_物可抑細切呤氧化酶作 用於生物體内而產生之自由基。 6·如申請專利細第丨項之組合物，其中抽出物是以有機溶劑萃取。 7. 如申請專利範圍第6項之組合物，其中有機溶劑為乙醇。 8. 如申請專概圍第！項之組合物，其幅出物是以水萃取。 0 9.如巾請專利範_ 1項之組合物，財糾物係由相思樹屬樹木之心 材、樹皮、枝條、花或葉子中萃取。 Μ·萃如取申請專利範圍第1項之組合物，其中抽出物係由相思樹屬樹木之心材 化如甲相專利範圍第7項之組合物，其中有機溶劑萃取相思樹抽出物可續 以乙酸乙酉旨、正丁醇及水進行液相_液相分配，分為乙酸乙酿可溶部、 正丁醇可溶部及水可溶部。 。 12·如申請專利範圍第U項之組合物，其中乙酸乙醋可溶部之黃嗓吟氧化 201043609 酶抑制活性之主成分為 3,7,8,3^-五經基黃_ (3,7,8,3’，4’-?61^11)\11*〇乂>^^¥〇116(麥拉諾千廷，]\461&11€^1;丨11))、7,8,3，，4，_四 羥基黃酮（7,8,3W-Tetrahydroxyflavon)、3,4,27,4'-五羥基順式查耳_ (3,4,2 ',3 f,4-Pentahydroxy trans-chaXcom (歐卡寧，Okanin))、7,8,3，，4。四 羥基_3-甲氧基黃酮(7,8,3^4匕丁6加11}^1>(^-3-11^11(^£^〇1^(傳希廷， Transilitin)) 、 3,7,8,3-四羥基-4’-甲氧基黃職 (3,7,8,3r-Tetrahydroxy-4f-methoxyflavone)、7,8,3’-三經基-3, 4’_二甲氧基黃 Ο

   酮（7,8,3，-Trihydroxy-3,4，-dimethoxyflavone)、 7,3，，4，-三羥基黃明 (7,3’，4'-Trihydroxyflavone) 、7,3’，4’-三羥基·3·甲氧基黃明 (7,3 ’，4 ’-Trihydroxy-3 -methoxyflavone) 〇 13.如申請專利範圍第12項之組合物’其中乙酸乙酯可溶部之黃嗓呤氧化 酶抑制活性之主成分為3,7,8,3，,4，-五羥基黃_ (3,7,8,3f，4f-Pentahydroxyflavone (麥拉諾千廷，Melanoxetin))及 3,4,2，，3，，4，~ 五羥基順式查耳酮（3,4,2f，3f，4f-Pentahydroxy irww-chalcone (歐卡寧， Okanin))。 13. 如申請專利範圍第1項之組合物，其係可作為食品添加物。 14. 如申請專利範圍第13項之組合物，其中食品係豆腐。