TW201023858A - Synergistic combinations of a macrocyclic inhibitor of HCV and a nucleoside - Google Patents

Description

201023858 六、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明關於HCV之巨環NS3/4A蛋白酶抑制劑與HCV NS5B聚合酶抑制性核苷的協乘性組合物。 【先前技術】 C型肝炎病毒（HCV)為黃病毒科肝炎 病毒屬的病毒成員’其乃是全世界慢性肝病的主要病因。 雖然診斷學和血液篩檢的發展已顯著地降低了新感染的比 率，但HCV因其慢性的性質及其長期損害肝臟的潛力，仍❿ 然是一種全球性的健康負擔。HCV有六種主要的基因型（1_6) 以及許多亞型（以字母表示）。基因型ib主要在歐洲，而基 因型la則在北美居多。基因型在臨床上的重要性在於，研 判對於療法的可能反應以及這些療法所需持續的時程。 HCV主要藉由血液接觸來傳播。經過早期的急性感染 之後，大多數受到感染的個體會發展成慢性肝炎，因為Hcv 偏好於肝細胞中複製但不直接造成細胞病變。有相當數目 的受感染者會於數十年間發展成纖維化、硬化和肝細胞❹ 癌，且慢性HCV感染疋肝臟移植的主要原因。上述原因以 及所涉及的患者數量已使得H C V成為許多醫藥研究的焦 點。 HCV基因體的複製作用係被數種酵素所調控當中涉 有HCV NS3/4A絲胺酸蛋白酶以及其辅助因子NS4A。在此 —過程中的另一種必要酵素為NS5B聚合酶qNS3/4A絲胺酸 蛋白酶和NS5B聚合酶此二者被認為是Hcv複製所必須且 201023858 這些酵素的抑制劑被認為是治療HCV的候選藥物。 ❹ ❹ 目前的標準照護係由每週給予聚乙二醇化干擾素_α (IFN α)與母日給予一次利巴韋林的組合療法所 f成，其可治癒〜80%遭受基因型2或3所感染的病人，但僅 旎夠治癒40至50%的基因型1病人。除了對於基因型丨病人的 低成功率以外，此一療法亦伴隨著某種範圍的副作用，包 括類感+ 冒症狀、貧血及抑鬱。因此，需要一種更為安全且 有效的藥物，特別是，其能夠克服現今HCV療法的諸多缺 點’例如副作用、有限的有效性、耐受性不佳、產生抗藥 性以及不遵從治療指示。 HCV聚合酶的高錯誤比率以及高病毒轉換率

導致HCV 基因體在各個病人體内產生異質性族群，且依這些變显株 的發生頻率和適應性而定，在病毒的消滅上造成高度障 礙。因此，未來的療法看來將會包括數種抗病毒藥物的組 合物’並於需要_人跡咏利巴韋林，叫進抗病毒效 應並提高發生抗藥性的門m改善病毒持續性反應 (SVR)的比率。 已有許多藥劑被敘述為可抑制Hcv鹏/4八絲胺酸蛋 白酶。WO 〇5/〇73195揭露具有—個經取代之中心脯胺酸部 分的直鏈和巨環型NS3絲胺酸蛋白酶抑制冑，而㈣ 05/073216所減者具有—個巾心環縣部分。在這些化八 物當中，巨環型射物因其效力和有趣的藥物動力學曲ς 而受人注目。WO蕭船傷揭露—系列的巨環型聰絲 胺酸蛋白酶抑制劑。其巾’特別重要者為化合物 201023858 (1尺，4尺，68，15艮1711)-順式-沁[17-[2-(4-異丙基噻唑-2-基)、7、 甲氧基-8-曱基喹啉-4-基氧基]-13-曱基-2，14-二侧氣基 -3，1；3-二氮雜三環[13·3·〇.〇4,6]十八_7·烯斗羰基](環丙基)嘴 醯胺，其亦可稱為（1尺，411，63,72，1511，1711)-沁[17-[2-(4-異内 基噻唑-2-基）-7-曱氧基-8-曱基喹啉-4-基氧基]-13-甲基 -2,14-二側氧基-3，13-二氮三環[13.3.0.04,6]十八-7-烯-4、幾 基](環丙基)磺醯胺，亦即具有後述化學結構的式I化合物。 此一化合物展現出顯著的抗HCV活性、受人注目的藥物動 力學曲線以及良好的耐受力。此一化合物可藉由w〇◎ 2007/014926實例5中所述合成流程來製備。 RNA-依賴性RNA聚合酶NS5B係為RNA基因體的複製 作用所必須。這個酵素的核苷和非核苷抑制劑已屬習知。 例如，WO 2008/043704述及數種核苷抑制劑，其中一者為 4-胺基-1-(211，38,48,51^)-5-疊氮基-4-經基_5-經甲基_3_甲基 四氫呋喃-2-基)-1Η-嘧啶-2-酮，亦即具有後述化學結構的式 II化合物。此一化合物可藉由WO 2008/043704實例1中所述 合成流程來製備。 ❹ 【發明内容】 本發明關於一種協乘性組合物，其包含具有下式〗的化 合物： 201023858

⑴

(II)， 或其藥學上可接受之鹽。

經發現’此二種活性組份會協乘地 有㈣料卩= 式1或式11化合物可呈藥學上可接受之鹽類形式或呈游 離^式（亦即非鹽類形式）而供運用。鹽_式可藉^ -酸或鹼來處理游離形式而製得。重要者為藥學上 之酸和驗加成鹽’此表示其包含有々和式d化合物所能= 成鹽形式。式制工 化合物的藥學上可接受性酸加成鹽可轉由以適當的酸來# 理游離形式而便職祕。舉例w，適#的酸包含益ς 7 201023858 酸，例如氫齒酸，諸如氫溴酸或特別是氫氯酸；或是硫酸、 硝酸、磷酸或類似酸類；抑或是有機酸，例如乙酸、丙酸、 羥基乙酸、乳酸、丙酮酸、草酸、丙二酸、號珀酸、順丁 烯二酸、反丁烯二酸、蘋果酸（亦即羥基丁二酸）、酒石酸、 曱磺酸、乙磺酸、苯磺酸、對曱苯磺酸、環己基胺基磺酸 (cyclamic acid )、柳酸、對胺基柳酸、亞甲基雙羥萘酸 (pamoic acid)以及類似的酸類。式丨化合物亦可藉由運用 適當的有機或無機驗進行處理而被轉化成為藥學上可接受 之金屬或胺加成鹽類形式。舉例而言，適當的驗鹽形式包® 含錢鹽；驗金族和驗土族金屬鹽，例如链、納或奸鹽；或 是鎂或辦鹽；具有有機驗的鹽類，例如节星（benZathine)、 iV-甲基-D-還原葡糖胺、哈胺（hydrabamine)鹽，以及與精 胺酸、離胺酸等胺基酸所形成之鹽。加成鹽類形式此用語 亦意欲涵蓋式I和式II化合物以及彼等之鹽所能夠形成的任 何溶劑合物。舉例而言’這些溶劑合物為水合物、諸如乙 醇合物之醇合物等。重要者為式II化合物的游離形式（亦即 非鹽類形式）’或是式I化合物在藥學上可接受的鹽類形式。β 活性組份I與II在本發明組合物中之EC5()比例可以有所 變化。在一具體例中，該比例係位於10:1至1:10之間，或是 5:1至1:5之間，或是3:1至1:3之間，或是2:1至1:2之間的範圍 内。在一特定具體例中’該比例為約1:1 ^本案說明書中所 使用之「EC%比例」此用語係指式I化合物之ec50濃度相對 於式II化合物之EC%數值的比例，該ec5G數值得自於HCV複 製子測驗（HCV replicon test)。特別是，HCV複製子測驗 201023858 即為後文所述的測試方法。在此測驗中，以HCV基因型lb 為準，式I化合物的EC%數值為8 nM，而式II化合物的EC50 數值為5 μΜ。

基於上述EC%數值，有效血漿位準可藉由將£(：別數值 乘以一個表示血漿蛋白結合度的因數以及一個代表安全 際的因數來麟。絲安全雜_數可被衫於約1〇。 ^白結合度可藉由測量與諸如人血清白蛋白、脂蛋白 '酶 有=二人白等▲液蛋白相結合的量來進行判斷。 位料稱為絲雜㈣，代表需要料劑量來 =有效眺病毒滩，脚，有效降低病毒 ^負載的有效降低係指其數量降 、= 病毒的可檢測下限 ==從 = 身體其餘部二:: 中以產生血液中濃度觀^^㈣被均勻地分佈於其 活性物質的動物模的谷積。VD可在被給予預定量 ^化合物在本發 基礎上於約以克至約25 °物中1可在每日給藥的 毫克之間，或是於約1(’於約5亳克至約1000 毫克至約250¾:克之n f'約5GG毫克之間’或是於約25 變化。弋1彳卜人& B，或是於約25毫克至約200毫克之間 3、二:=每毫曰克，^^ 5毫克、150毫克、2〇〇毫克以及侧毫克。 201023858 式π化合物的含量在每日給藥的基礎上可於約25〇毫克至約 20,000毫克之間，或是於約5〇〇毫克至約16,〇〇〇毫克之間， 或是於約1000毫克至約12,000毫克之間，或是於約3000毫克 至約12,000毫克之間，或是於約3000毫克至約6000毫克之間 變化。式II化合物的每日用量之範例為3〇〇〇毫克、4500毫 克、6000毫克、12,〇〇〇毫克。此處以及後續章節中所述及的 所有用量均是參照游離形式（亦即非鹽類形式）。上述數值 代表游離形式等效量，亦即，如同游離形式將被投藥時的 用量。若欲投予鹽，則用量需代入鹽和游離形式間之分子 量比例函數進行計算。 式I化合物和式π化合物的範例組合物以每日毫克用量 /每日毫克用量來表示包括諸如25/3000 ; 25/6000 ; 25/12000 ； 50/3000 ； 50/6000 ； 50/12000 ； 100/3000 ； 100/6000 ； 100Λ2000 ; 200/3000 ; 200/6000 ; 200/12000。 上述每日劑量係針對約70公斤的平均體重來計算，在 運用於幼童時或是供具有實質差異體重的病人使用時，應 該另行計算。 劑量可呈在一曰内以適當間隔給予的一、二、三、四 或更多個次劑量。所使用的劑量較佳為對應於式I化合物 或式II化合物的前述每日用量，或是彼等之次劑量，例如彼 等的1/2、1/3或1/4。一個劑型可以含有呈相等於前述章節 中所述範圍或數量之含量的化合物I或化合物II或此二者， 例如，一劑型可呈個別調配物或組合調配物的形式而含有 25毫克、50毫克、100毫克、200毫克的化合物I，或是250 201023858 Ο 毫克、500毫克、1000亳克、1500毫克、2000毫吉 II。在一具體例中，式I化合物每日投藥一次(q.d):特二^ 每曰一劑，且式II化合物每日投藥一或二次(qd嘎bid)， 特別是每曰一或二劑。在式I或式Π化合物均為每曰投藥一 次的情形下，其可藉由投予兩個分離劑量來達成，一者具 有化合物ί，另一者具有化合物II，抑或是藉由投予一含有 化合物I和化合物π此二者的組合劑量來達成。在式I化人物 每日投藥一次，而式11化合物每日投藥二次的情形下，其可 藉由投予三個分離劑量來達成，一者具有化合物J，二者具 有化合物II’抑或是藉由投予一含有化合物I和化合 者的組合劑量，並於有需要時投予另一個具有化合物π的劑 量來達成。 本發明的組合物可每日投藥一次、二次、三次、四次 或於有需要時投藥多次。在一具體例中，該組合物每曰投 藥一次。在另一具體例中，該組合物每日投藥二次，或是 每曰三次。劑量的給予可透過數個分離的劑型來進行，亦 即僅含有化合物I或僅有化合物Π的劑型；或是透過含有活 性組份I和II此二者的組合劑型來進行。再者，如前所述， 可以應用一種利用一組合劑型以及一、二或更多個含有化 合物1或較佳為含有化合物II之劑型的混合物。可供投藥的 劑型敘述於下文，較佳者為口服劑型，尤以錠劑或膠囊 佳。 、、活性組份可分別地被配製成藥學組成物，或是被配製 成為組合型藥學組成物。後者係提供一種藥學組成物，其 201023858 包含一治療有效量之式i化合物或其藥學上可接受之鹽，以 及式II化合物或其藥學上可接受之鹽，這些化合物係述明於 本案說明書中’以及-藥學上可接受之載劑。就此，一治 療有效量是;i可在受到感染之個體中或是在有感染風險之 個體中以預防方式來對抗HCV感染或是用以安定或降低 HCV感*染的用量。治療有效量可特別對應於前述用量以供 每日投藥，或是彼等之次劑量以便利每日多次投藥。 在另一態樣中，本發明關於一種用以製備本案說明書 中所述藥學組成物的方法，其包含令—藥學上可接受之^❹ 劑與一治療有效量之式I化合物或其藥學上可接受之鹽以 及一治療有效量之式II化合物或其藥學上可接受之鹽^密 地相混合。 ' 本案S兒明書所提供的組合物亦可被配製成組合製劑， 以供同時、分別或順序應用MHCV的治療。在此例中，式工 化合物被配製於一含有其他藥學上可接受性賦形劑的藥學 組成物中，且式Π化合物被另外地配製於一含有其他藥學上 :接受性賦形劑的藥學組成物中。便利地，這^種個別的❹ 藥學組成物可為一套組之部件，以供同時、分別或順序應 用。 本發明之組合物的個別成份可同時地投藥或是在治療 期間的不同時間分別地投藥，抑或是呈分離或單一的組合 物形式共同投藥。 因此，式I或II化合物可個別地或組合地被配製成多種 適合於投藥目的之藥學組成物。在此，一治療有效量之特 201023858 f匕口物或上述兩種化合物與-藥學上可接受之載劑相組 合，該載劑可依投藥所偏好之製劑形式而呈多樣形式。藥 學組成物可被製成供口服、非經口（包括經皮下、肌肉和 靜脈）、經直腸、透皮、經頰或經鼻投藥的藥物。適用的口 服投藥組成物包括粉末、顆粒、凝聚體、錠劑、壓縮或覆 膜丸劑、糖衣錠、隨身包、硬式或明膠勝囊、糖聚以及懸 浮液。適㈣雜Π投藥組祕包括水性或非水性溶液或 Ο 乳劑，而就直腸投藥而言，適用的投藥組成物包括具有親 水性或疏水性載體的栓劑。就局部投藥而言，可運用適合 的透皮傳輸系統’而經鼻傳輸則可運用適合的氣霧劑傳輸 系統。 舉例而言，在製備口服投藥用組成物時，可運用任何 常用的藥用媒質，例如在懸浮液、糖漿、酏劑、乳劑和溶 液等口服液體組成物的例子中可運用水、二醇、油液、醇 等；或是在固體組成物的例子中可運用澱粉、糖、高嶺土、 ❿ 潤滑劑、黏著劑、崩散劑等固體載劑。就非經口組成物而 5，載劑通常包含有至少呈絕大部分的無菌水，縱使可加 入助洛劑、乳化劑或其他辅劑等其他組份。可製成注射用 溶液’其中載劑包含生理食鹽水溶液、葡萄糖溶液或是此 二者的混合物。亦可製成注射用懸浮液，在此情形下，可 運用適當的液體載劑、懸浮劑等。本案亦包括供用於在即 將使用之前被轉變成為液體形式製劑的固體形式製劑，例 如復水型粉末。在適合經皮投藥的組成物中，載劑係任擇 地包含一皮膚穿透增進劑及/或溼潤劑，且任擇地與少許比 13 201023858 例的適當皮膚相容性添加劑相組合。式i或π化合物或是彼 等之組合物亦可經口吸入或吹入而進行投藥’其係藉由適 於此種投藥類型的調配物來進行，例如溶液、懸浮液或乾 粉。呈氣霧劑或噴霧劑形式來投藥的適當藥學組成物為諸 如式I或II化合物或是此二者配於乙醇或水等藥學上可接受 性液體載劑或彼等之混合物内所構成的懸浮液。若有需 要’調配物亦可另含有其他的藥用輔劑，例如界面活性劑、 乳化劑和安定劑以及推進劑。此一製劑通常含有呈一為約 0.1至50重量％且特別是約0 3至3重量％之濃度的活性化合❹ 物。 藥學組成物可含有式I或式II或此二者的活性組份，這 些活性組份係呈約0.1%至約50%，或約1%至約30%，或約 30/〇至約20% ’或約5%至約20%之濃度，所有的百分比率均 以重量計。在含有式][和式Η化合物此二者的組成物中，式I 化合物係呈約0.1%至約50%，或約1%至約3〇% ’或約3%至 約20%，或約5%至約20%之濃度；且式II化合物係呈約3% 至約50%，或約5%至約50%，或約1〇%至約50%，或約10%❹ 至約50%，或約10%至約30%之濃度。 藥學組成物可便利地呈單位劑型之形式，以方便投藥 並使劑量均一。實例包括錠劑（包括刻痕或覆膜錠劑）、膠 囊、丸劑、栓劑、粉末袋包、薄片、注射用溶液或懸浮液 等’以及彼等之分離複型。重要者為口服投藥用固體劑型， 例如錠劑或膠囊。 呈單位劑型的固體劑型可被包裝成任何習用包裝體， 201023858 以泡囊式包裝體為佳，特別是供錠劑或膠囊使用者。當式^ 和式II化合物被分別配製時，它們可包農於個別的泡囊片 内，但一個泡囊片也可以同樣地包含有化合物1和化合物^ 的單位劑型，例如，一列包裝有化合物！的單元，而另—列 包裝有化合物Η。其他的可能性亦屬可行，例如’為了供化 合物II的bid.投藥’ 一列錠劑具有化合物丨和卩此二者的組合 劑型，而一列具有式II化合物。病人可隨後於早晨服用組合 劑量，並於夜間服用式II化合物劑量。 本發明的組合物可供用以治療HCV感染以及HCV所 伴隨的疾病。HCV所伴隨的疾病包括進展性肝纖維化、發 炎及壞死，導致硬化、末期肝病及HCC (肝細胞癌）。 式I或式II化合物對抗HCV的活體外抗病毒活性可在 一個細胞型HCV複製子系統中進行測驗，該系統係以 Lohmann ei 〇/. (1999) 285:110-113為基礎，再藉由

Krieger ei a/. (2001) «/⑽《α/ o/F/ro/ogy 75: 4614-4624 (該文 献被併入於本說明書以作為參考）所述内容加以改良，其 在實例一節中被提列為範例。此一模型雖然不是HCV的一 個完整感染模型，但被廣泛接受為目前最有用且最具效率 的自發性HCVRNA複製模型。對抗HCV的活體外抗病毒活 性亦可藉由酵素測驗來進行測試。 如本案說明書所述’式1化合物與式Η化合物的組合物 可供用以治療受到HCV感染的溫血動物’特別是人類’並 供用以預防HCV感染。 因此，本發明另關於一種用以治療一受到HCV感染或 15 201023858 有HCV感染風險之溫血動物的方法，該溫血動物特別是人 類，該方法包含給予一抗-HCV有效量之本案說明書所述式 I化合物與式II化合物的組合物。本發明亦提供一種用以在 一動物體内治療HCV相關病況或預防HCV相關病況的方 法，其包含給予一抗·病毒有效量之本案說明書所述式I化合 物與式II化合物的組合物。 本發明的組合物可供用作為藥物。本發明亦關於本案 說明書所述組合物的用途，其係供製造一用於治療或預防 HCV感染或HCV相關病況的藥物。 ® 在另一態樣中，本發明關於一種產品，其含有式I化合 物和式II化合物，且任擇地含有另一抗-HCV化合物，而成 為一組合型製劑，以供同時、分別或順序應用於HCV感染 的治療。 本發明的組合物可轉而與另一或更多種抗_HCV化合 物相組合。重要者為IFN-ct (經聚乙二醇化或未經聚乙二醇 化）及/或利巴韋林(ribavirin)。 可與本發明組合物共同給藥的其他藥劑可呈分離調配❹ 物之形式進行給藥，或是可與式I或式II活性组份中之一或 一*者共同配製。 本發明的組合物’包括含有其他抗-Hcv藥劑者在内， 亦可與一對於藥物代謝及/或改善生物可利用性之藥物動力 f具有正向效應的細相組合，例如，利㈣ 或其藥學上可接受之鹽。利托那弗可呈分離調配物之形式 以供使用’或是可與本發明組合物令之―或多種活性电份 201023858 共同配製。式i化舍物或式11化合物相對於利托那弗的重量/ 重量比可位於約10:1至約1:10，或是位於約6:1至約1:6，或 是位於約ι:ι至約，或疋位於約ι:ι至約6:1，或是位於約 1:1至約4:1，或是位於約1:1至約3:1 ’或是位於約1:1至約2:1 的範圍内。

在本發明的男一態樣中，其係提供式⑴化合物與式11 化合物之酯蜇前藥的組合物°這些酯型前藥包含wo 2008/043704中戶斤述式II化合物’特別是可由下式Ha來表示 的4’和5’羥基酯： 或其藥學上可接受之鹽’其中R1為氫，且R2為CM8烷基 -CO-;或是R2為氫’且烷基-CO-;或是R>R2此 二者均為Cus烧基-CO-;其中各個(^_18燒基係個別地為一 具有1至18個碳原子之未經分支或經分支餘和烴基；以及其 中各個Cm烷基係特別為C〗_6烷基’更特別為c34烷基。這 些西曰型前藥的實例為具有式Ila之化合物，其中r1為氫，且 R為異1丙基2 ;或是其中R2為氫，且Ri為異丙基_c〇_ ;或是 二中R和R均為異丙基_c〇_。異丙基_c〇_此用語係指異丁 ，的一種酯，其亦可指異丁醯基。式IIa前藥在藥學上可接 文之鹽係如前文針對式Π化合物之鹽所敘述者。 在此態樣中，式(II)化合物在前述組合物、調配物、用 17 201023858 途或方法中係被一等效量之酯型前藥所置換。 本案說明書中所使用之「約」字具有其習用意義。在 特疋具體例中’當與-數值有關時，其可被解釋為意指該 數值±10/。，或±5°/°，或±2%，或±1%，或±〇 5%，或±〇jo/。。 在其他的具體例中，精準數值係藉由省略「約」字來彰示。 【實施方式】 實例： 下列實例係用以例示本發明，而非限制本發明。 實例1 :式I和式II化合物的活性 ❿ 複製子分析 式I化合物係在一細胞分析中針RNA複製作用 的抑制活性進行檢測。該分析顯示，式〗化合物展現出對抗 細胞培養物中之功能性HCV複製子的活性。該細胞分析係 以Lohmann w α/. (1999) *SW⑼ce vol. 285 pp. 110-113 中所敘 述並依據Krieger β α/· (2001) /⑽如/ 〇/ K/w/叹y 75: 4614-4624加以改良的雙順反子表現構築體（|^(；丨血〇11匕 expression construct)為基礎，採取多標的篩選策略進行。❹ 基本上，該方法如下： 該分析係以經安定轉染之細胞株Huh-7 luc/neo(以下稱 為Huh-Luc)為基礎。此細胞株擁有一個編碼有雙順反子表 現構築體的RNA，該構築體包含HCV lb型的野生型 NS3-NS5B區域，這些蛋白係由一源自於腦脊髓炎病毒 (EMCV)的核糖體内部進入位址(IRES)開始轉譯而得，位於 這些區域前方者為報導部分（FfL-螢光素酶）以及篩選標 201023858 έ己部分（neoR’新黴素ί粦酸移轉酶）。該構築體以源自於hcv lb型的5’和3’NTRs (非轉譯區）為邊界。在G418(ne〇R)的 存在下繼續培養複製子細胞係仰賴於HCVRNA的複製。經 文定轉染之複製子細胞會表現出HCVRNA，而編碼有螢光 素酶的HCVRNA會自發性地複製並達到高位準，這些複製 子細胞供用以篩選抗病毒化合物。 在以各種濃度加入的測試和對照化合物的存在下，將 ❹ 複製子細胞展佈於數個具有384個井的培養皿内。經培育三 曰以後，藉由分析螢光素酶的活性來測量HCV的複製（利 用標準螢光素酶分析受質和試劑’以及一具Perkin Eimer ViewLuxTM ultraHTS微姐成像儀）。在沒有任何抑制劑存在 之下，位於對照培養物内的複製子細胞具有高度的螢光素 酶表現。化合物的抑制活性係在Huh-Luc細胞上監測，以獲 致各個測試化合物的劑量相依性曲線。隨後計算出]5〇：5〇數 值’該數值代表將所測得的螢光素酶活性位準，或更特定 ❹ 地說係將遺傳聯鎖之HCV複製子RNA的複製能力，降低 50%所需要的化合物用量。 實例2:測定式I和式π化合物相組合時之效應 協乘作用的存在與否係利用羅威氏（L〇ewe )模型來測 定。羅威氏加成性模型（Loewe S，Muischnek H. Effect of combinations: mathematical basis of problem. Arch. Exp.

Pathol. Pharmakol. 1926; 114: 313-326)經常被稱為「劑量

加成作用」’其係基植於下列觀念：交互作用為零係發生在 劑量A所產生的反應加上劑量3所產生的反應等於劑量A+B 19 201023858 所產生的反應時。對於單一藥物而言，此永遠成立，因而 單一藥物不會自我交互作用。展現出劑量加成作用的不同 藥物僅僅表現出相互稀釋’且它們的預期效應係依據下列 等式而為其劑量與相對效力之總和：

Da/DA + Db/DB = 1 其中DA和DB是藥物A和B在單獨給藥時產生特定位準之反 應的劑量，而Da和Db是這些藥物在組合給藥時產生相同位 準之反應的劑量。羅威氏加成性的偏差值通常是利用組合 指數來定量： ®

Cl = Da/DA + Db/DB

CalcuSyn軟體（Biosoft，Ferguson，]V[〇·)係用於針對羅威氏 加成性模型來分析HCV複製子抑制數據。ci數值<0.9、 0.9-1.1及>1.1係分別表示協乘作用、加成作用及拮抗作用。 計异出達到50%、75%或90°/。抑制時之有效劑量的組合 指數(CI)數值。針對式丨化合物與式^的組合物進行兩個獨立 的測驗。一者利用五個測試jBL來進行，而另一者則利用四 個測試皿。計算出中位數EDso、]51)75和ED90的數值（CI數❹ ED50 ____ED75 ED90 CI 0.82 0.79 0.71 SD 0.15 0.13 0.19 CI=組合指數 SD=標準偏差 值）以及標準偏差（SD數值），這些數值列於下表》這些數 值顯示出一協|關後。 20 201023858 實例3 :從前藥釋出母本化合物 位於式Ila範圍内的某些前藥需要於活體内（諸如在腸 壁或肝臟中）轉形成為游離核苷，再經過胞内麟酸化而形 成活性物種。這些前藥因而無法在諸如實例1所使用之複製 子系統等細胞系統中接受直接協乘性測試。但是，可以在 投予式Ila前藥以後，測量式II母本化合物在適當的動物物 種體内釋出，進而推斷共同給予前藥與式1蛋白酶抑制劑將 〇 會於活體内展現出協乘性。大鼠被認定是用以評估核芽類 似體之藥物動力參數的有用模型。 將式Ila化合物中R1和R2為異丁醯基者（化合物3&)咬 是R1為異丁醯基且R2為Η者（化合物3b)於28% (經丙基_β_ 環糊精載體）内配製成具有6.7 mM之濃度。藉由管飼法（3 毫升/公斤）’將20 μηιοί/公斤的單一劑量經口投予斷食μ小 時的二組雄性Sprague Dawley大鼠。在第 15、30、60、120、 240、360和480分鐘的時間點採取血液樣品。藉由ms/ms將 ❹ 血清内的4’-疊氮基-2’-去氧-2’-曱基阿拉伯糖胞苷予以定量 如下：利用150 μΐ含内標準殺鼠靈（internal standard warfarin)的冰乙腈來沈澱〇 μ1血漿。在37〇〇 rpm下將樣品 予以離心20分鐘。首先以1〇〇 μ1水來稀釋1〇〇 μ1之上澄液， 再以75 μΐ水來稀釋75 μ1之稀釋樣品。管柱：Synergy POLAR-RPTM ’ 4 μπι ’ 5.0*4.6mm。泳動相：配於 1〇 m]y[乙 酸銨内之乙腈梯度。 在此分析中，化合物3a造成了 4.56 μΜ的母本Cmax以及 15.3 μΜ.Ιι的AUCO-t’而化合物3b則造成4 65 _上的母本 21 201023858

Cmax以及12.7 μΜ.Ιι的AUCO-t。假設標準大鼠的體重為約 250克，則在經口投予式Ila前藥以後，母本物種的血漿濃度 圖顯示出遠超過該母本在複製子系統中的IC50，因而確認 將前藥施加於活體内時，將享有母本核苷所展現的協乘性 質。 【圖式簡單說明】 無 【主要元件符號說明】 ^ ❿

22

Claims (1)

1. 201023858 七、申請專利範圍·· 1. 一種協乘性組合物，其包含具有下式I的化合物：

   κι c

   或其藥學上可接受之鹽， 以及具有下式II的化合物：

   (II)，

   或其藥學上可接受之鹽；或是其酯型前藥，該前藥可 由下式Ila來表示：

   (Ila)， 其中R1為氫，且^為^以烷基-CO-;或是R2為氫，且 R1為(^_18烷基-CO-;或是R1和R2此二者均為(^_18烷基 -CO-;或是其藥學上可接受之鹽。 23 201023858 2. 如申請專利範圍第1項之組合物，其中該式I化合物與 該式II化合物相組合。 3. 如申請專利範圍第1項之組合物，其中該式I化合物與 該式Ila化合物相組合。 4. 如申請專利範圍第3項之組合物，其中R1和R2此二者均 為異丙基-CO-。 5. 如申請專利範圍第1至4項之組合物，其中該化合物I與 II之間的EC50比例係位在3:1至1:3之間的範圍内。 6. 如申請專利範圍第1至4項之組合物，其中該化合物I與 II之間的EC5〇比例為約1:1。 7. 如申請專利範圍第1至4項之組合物，其含有約25毫克 至約200毫克之式I化合物的游離形式等效體，以及約 3000毫克至約12,000毫克之式II化合物的游離形式等 效體。 8. 如申請專利範圍第1至7項中任一項之組合物，其係與 另一種選自於利巴韋林(ribavirin)和干擾素的藥劑相組 合。 9. 一種藥學組成物，其包含如申請專利範圍第1至7項中 任一項之協乘性組合物，以及一在藥學上可接受之載 劑。 10. —種產品，其包含如申請專利範圍第1項中所界定之具 有式I的化合物和具有式II或式Ila的化合物，以作為一 供同時、分別或連續用於HCV治療的組合製劑。 11. 一種如申請專利範圍第1至8項中任一項之組合物的用 24 201023858 途，其係供用以預防和治療HCV的感染或HCV感染所 伴隨的疾病。

   ◎ 25 201023858 四、指定代表圖： (一) 本案指定代表圖為：第（無）圖。 (二) 本代表圖之元件符號簡單說明： 無 五、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學式：