TW200845989A - Medicament for the treatment of endometriosis - Google Patents

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200845989 九、發明說明： 【發明所属之技術領域】 本發明關於一種用於治療子宮内膜異位的藥物。 【先前技術j 5 子宮内膜異位係一種良性的慢性婦科疾病。其可定義

為子宮内膜組織（包含腺體内皮及基質兩者)存在於子宮腔 外。其係一種良性的婦科疾病，但在少部分的女性病患可 發展成侵襲性疾病。子宮内膜異位係與各種痛苦的廢狀有 關，包括經痛、性交疼痛、骨盆腔疼痛及生育力降低。 10 已知㈣新生懷已存在的血管之外形成新血管的過 程)可能對子宮内膜異位的發展很重要，以及血管通透因子 /血管内皮細胞生長因子(VP/VEGF)在血管生成（在生理及 =理性^新生兩者)扮演_定的角色。已用移植於免疫受 η °、裸乳之人類子呂内膜組織的研究評估用於治療子宮内 位抗血官生成療法之可能功效。子宮内膜外植體移植 4三週投予四種不同抗血管生成劑^叩以< 2004)。四種 ^制y王部皆可降低已存在之外植體的大小並使新血管停 :成*是，已知的抗灰管生成劑具有高度毒性 以在診療場㈣以類。 難 巴胺類致效劑之 、口此在本發明之前未期望發現包括有 組成物可用於治療子宮内膜異位。 啊内容 預本=明因此提供多巴胺類致效劑用於製造治療及/或 、防子呂内膜異位藥物之用途。本發明亦提供多巴胺類致 5 200845989 " 5 效劑用於治療及/或預防子宮内膜異位之用途。本文中的用 語“子宮内膜異位之治療”包括減少（或移除)存在於子宮腔 之外的子宮内膜組織量（例如，減少或移除子宮内膜異位症 病灶)及/或治療以減少及/或改善一或多個與子宮内膜異位 有關之癥狀(例如治療以改善及/或減少經痛之癥狀；治療以 改善及/或減少性交疼痛廏狀，及/或治療以改善及/或減少 骨盆腔疼痛）之治療。用語“子宮内膜異位”之治療包括減少 子宮腔外的子宮内膜組織病症量及/或減少病症大小（例如 減少子宮内膜異位症病灶量及/或大小)之治療。用語“子宮 10 内膜異位之治療”包括減少子宮内膜腺體量。用語“子宮内 膜異位之治療”包括造成一或多個下列結果之治療：明顯降 低活動性子宮内膜異位症病灶百分比；使子宮内膜異位症 病灶中表現萎縮性或退化性組織之特徵的細胞及組織明顯 消失；及明顯降低子宮内膜異位症病灶中之新血管量之治 15 療。用語“子宮内膜異位之治療”包括減少一或多個卵巢、 直腸子宮凹陷區、子宮薦韌帶、子宮後表面、子宮廣韌帶、 其餘的骨盆腹膜、腸道、尿道（包括例如膀胱及/或輸尿管） 的子宮内膜異位症病灶量及/或大小之治療。 用語“子宮内膜異位”包括，舉例而言，腹膜型子宮内 20 膜異位、卵巢型子宮内膜異位及深層子宮内膜異位。本文 中用語“多巴胺類致效劑”表示一種作用如多巴胺類的化合 物，舉例而言，與多巴胺類受器交互作用（例如特別是結合) 以模仿多巴胺類作用之藥物。其不包括之化合物係僅僅只 是“多巴胺類物質”，亦即，僅僅只是透過不同作用機制增 6 200845989 加多巴胺量的化合物。 用語多巴胺類致效劑不包括揭示於US 6359130之橋接 的知並吼略 u卡嗤(bridged indenopyrrolocarbazoles) 〇 先前曾發現多巴胺類致效劑可用於治療或預防卵巢度 5刺激徵候群（〇HSS)(WO 2006117608)。這種病狀是微血管 、 之血管通透性明顯增加。經發現多巴胺類致效可回復這種 作用。但是，其中並未揭示子宮内膜異位的病況及可能可用 於治療子宮内膜異位之抗血管生成療法的效用。 ® 本發明所用之用語多巴胺類致效劑包括（但不限於）金 10 剛胺（amantadine)、溴隱亭（bromocryptine)、卡麥角林 (cabergoline)、喹高萊(quinagolide)、麥角乙脲(lisuride)、培 南利特（pergolide)、羅匹尼羅（ropinirole)及普拉克索 (pramipexole)。一種用於本發明之較佳多巴胺類致效劑係卡 麥角林。一種用於本發明之較佳多巴胺類致效劑係喹高 15萊。根據本發明亦可使用“部分多巴胺類致效劑，，（例如特麥 角脲<terguride>)。但是，以使用多巴胺類致效劑為較佳。 以僅使用多巴胺類致效劑為較佳。 可以介於每天25微克及80 mg/天之劑量投予多巴胺類 • 致效劑（例如口服投予一人類病患）。以介於每天50微克及5 20 mg/天為較佳，以介於每天300微克及1 mg/天為更佳；該範 圍中之適合劑ϊ視所用之多巴胺類致效劑而定，例如熟習 此技藝者已知道的多巴胺類致效劑。 在一較佳具體實施例，多巴胺類致效劑係卡麥角林。 以卡麥角林之投予劑量（例如口服投予一人類病患）細 7 200845989 ' 介於0.01及12.5 mg/週為較佳，以介於〇·ι及10 mg/週為較 佳，以介於0.5mg及5 mg/週為為較佳，以劑量介於3.5 mg/ 週及4 mg/週為更佳。可能投予之多巴胺類致效劑，舉例而 言，係每天單一劑量（舉例而言，介於〇.1 mg/天及5mg/天， • 5 從〇.2mg/天至1 mg/天，舉例而言，〇.5mg/天）；或每曰劑量 * 可分成兩個或更多的次劑量，在不同時間服用一段長達24 小時的期間。可以上述劑量作為每日劑量投予多巴胺類致 效劑（卡麥角林)或以相等劑量投予，例如每週投予、一週 • 兩次或每兩天一次。在一種藥方中，多巴胺類致效劑(舉例 10而言，卡麥角林)投予之總劑量係介於3.5及12.5 mg/週（例 如 4mg/週、7mg/週、l〇mg/週）。 在另一具體實施例，多巴胺類致效劑係喹高萊。以喹 高萊投予劑量（例如口服投予一人類病患）係介於25及1〇〇〇 微克/天為較佳，以介於25及500微克/天為較佳，以介於25 15及300微克/天為更佳。舉例而言，可以一單一每日劑量投 予多巴胺類致效劑；或每曰劑量可能分成二或更多之次劑 量，於不同時間服用一段長達24小時之期間。可以上述劑 量作為每曰劑量投予多巴胺類致效劑（喹高萊），或以相等劑 里才又予’例如每週投予、一週兩次或每兩天一次。 20 在另一具體實施例，多巴胺類致效劑係溴隱亭。以溴 隱手之投予劑量（例# 口服投予一人類病患）係介於1〇至8〇 微克7天為較佳，以為較佳10至40 mg/天。 在一具體實施例，多巴胺類致效劑係用來作為治療子 宮内膜異位的唯一藥物治療。換言之，多巴胺類致效劑可 8 200845989 . 在無其他藥物或手術治療時使用[舉例而言，未用炔睾醇 <danazol>] 〇 在另一具體實施例，投予一多巴胺類致效劑可能併有 其他樂物或手術治療子宮内膜異位[舉例而言，NSAIDs及/ 5或^r爾蒙治療（炔睾醇〈danazol〉、〇Cs、醋酸甲經孕酮 * <medr〇xyprogesterone acetate>、其他孕激素、GnRH 致效 劑及拮抗劑、芳香環轉化酶抑制劑)]。在另一具體實施例， 手術治療或藥物治療可能在多巴胺類致效劑治療前後或同 _ 時使用。 10 【實施方式】 以下藉由實施例更詳細地討論這些具體實施例。 同時也發現投予多巴胺類致效劑給一需要的病患可提 供實質臨床利益，例如，舉例而言：明顯降低活動性子宮 内膜異位症病灶百分比；明顯使子宮内膜異位症病灶中表 15現萎縮性或退化性組織特徵之細胞及組織消失·，及明顯降 低子S内膜異位症病灶之新血管量。 ® 以多巴胺類致效劑為主的藥物亦具有高劑量耐受性、 安全性及記錄完善之臨床使用記錄的好處。再者，已發現 _ 可投予多巴胺類致效劑(舉例而言，卡麥角林)一段長期的時 2〇間（例如1至3週<例如1至21天，舉例而言1至14天>、白 、自1天 至3個月、1天至6個月、1天至12個月或i天至2年或更長) 並獲得有利的治療效果且副作用風險低。可連續投予例如 每曰或每週劑量，或可能有一或多個中斷，舉例而今，一 個數(例如1至3)週或一個數(例如丨至”月的中斷。可長期投 9 200845989 予多巴胺類致效劑直到疼痛（或其他癥狀)結束。 可將多巴胺類致效劑（舉例而言，卡麥角林、喹高菜) 投予一懷孕個體。治療或預防子宮内膜異位可能與一子宮 内膜腺體量降低有關。 5 在本發明一實施例，血管内皮細胞生長因子(VEGF)可 能係以多巴胺類致效劑為目標，作為影響子宮内膜異位發 展中的一個因子。異構體VEGF121及VEGF165表現出主要涉 及血管新生的過程（Watkins. R.H·，et al.，Am. J. Physiol. 1999, vol· 276, ρρ· 858-67)。已發現VEGF有兩種特異的内皮 10 細胞膜受器：VEGF 受器(VEgfr-1 ; Fit-i)及VEGFR-2 (Flk_l/KDR)。VEGFR-2表現出主要涉及調整血管新生及血 管生成。 因此VEGFR-2 (KDR)可作為多巴胺類致效劑的目標， 而成為影響子宮内膜異位發展的因子。N〇tch_4可作為多巴 15胺類致效劑的目標，而成為影響子宮内膜異位發展的因 子VEGF、VEGFR-2及Notch-4可作為彡巴胺類致效劑的 目標’而成為影響子宮⑽異位發展的因子。其他多巴胺 類致效劑作用機制係落在本發明之範圍内。 以一藥學上可接受之製劑投予。

匕各夕巴胺類致效劑作為活動性劑之藥學製劑已為本 多巴胺類致效劑係以 20 ，卡麥角林可得自註冊商 技藝所熟知且可購得。舉例而言 10 200845989 標為Cabaser及Sogilen/Dostinex者。根據本發明可將可購得 之多巴胺類致效劑製劑使用於子宮内膜異位。 選擇之投予模式視要治療之病況的急性及嚴重程度及 獲得之劑量而定。任何產生所欲療效而無不可接受的副作 5用之投予模式皆與實施本發明有關。這類投予模式可包括 ' 口服、直腸、局部、穿皮、舌下、肌肉内、腸位外、靜脈 内、腔内、陰道及用於手術之黏著基質。各種用於本發明 之调配組成物之方法描述於Handbook of Pharmaceutical Excipients，Third Edition, American Pharmaceutical 10 Association，US A 及 Pharmaceutical Press UK (2000)，and

Pharmaceutics - The Science of Dosage Form Design, Churchill Livingston (1988) ° 在一較佳具體實施例中係口服投予。適合口服投予之 組成物包括膠囊、扁囊劑、錠劑、糖漿、酏劑或口含鍵。 15 本發明另一態樣提供一種治療或預防子宮内膜異位之 方法，其包含將一多巴胺類致效劑投予一有需要之病患的 •步驟。 — 以投予多巴胺類致效劑之藥學製劑形式其包括一或多 - 個多巴胺類致效劑作為活性成份為較佳。 20 多巴胺類致效劑可能投予劑量（例如口服投予一人類 病患）介於25微克/天及80 mg/天，以介於50微克/天及5 mg/ 天為較佳，以介於300微克/天及1 mg/天為更佳；範圍内之 適合劑量視要用之多巴胺類致效劑而定，此為熟悉此項技 藝者可以明瞭的。 11 200845989 在一較佳具體實施例，多巴胺類致效劑係卡麥角林。 以卡麥角林投予劑量（例如口服投予一人類病患）介於 〇·〇1及12·5 mg/週為較佳，以介於〇丨及1〇 mg/週為較佳，以 介於0.5mg及5 mg/週為更佳，以劑量介於3 5 mg/週及4 mg/ 5週為更佳。可以下列方式投予多巴胺類致效劑，舉例而言， 每天一次劑量(舉例而言，介於0.1 mg/天及5mg/天，自〇.2 mg/天至1 mg/天，舉例而言〇 5ing/天）；或每曰劑量可分成 二或更多次劑量，於不同時間服用一段長達24小時之時 間。可以下列方式投予多巴胺類致效劑(卡麥角林每日投 10 予上述劑量，或相等劑量，例如每週投予、一週兩次或兩 天一次。在一藥方中，多巴胺類致效劑(舉例而言，卡麥角 林)投予總劑量介於3.5及12.5 mg/週（例如4 mg/週，7mg/ 週，10mg/週）。 在另一具體實施例，多巴胺類致效劑係喹高萊。以喹 15高萊投予劑量（例如口服投予一人類病患）介於25及1 〇〇〇微 克/天為較佳，以介於25及500微克/天為較佳，以介於25及 3〇〇微克/天為更佳。可以下列方式投予多巴胺類致效劑： 舉例而言，每曰單一劑量；或將每曰劑量分成二或多個次 劑量’於不同時間服用一段長達24。可以下列方式投予多 20巴胺類致效劑（喹高萊）：每曰投予上述劑量，或相等劑量， 例如母週投予、一週兩次或兩天一次。 在另一具體實施例，多巴胺類致效劑係溴隱亭。 以溴隱亭係投予劑量（例如口服投予一人類病患）介於 10至80 mg/天為較佳，以1〇至40 mg/天為較佳。 12 200845989 投予多巴胺類致效劑可併用其他藥物或手術治療子宮 内膜異位[舉例而言，NSAIDs及/或荷爾蒙治療（块睾醇 <da_卜〇Cs '醋酸甲鮮鲷、其他孕激素、如紐致效 劑及拮抗劑、芳香環轉化酶抑制劑)〗。為 』牡力一具體實施例， 5手術治療或藥物治療可能在多巴胺類致效劑治療前後或同 時使用。 本案申請者已發現可投予多巴胺類致效劑(舉例而 言，卡麥角林)一段長期的時間(例如例如m天， 舉例而言1至14天〉、自i天至3個月、】天至6個月、】天至^ 1〇個月或i天至2年或更長)並獲得有利的治療效果且副作用 風險低。可連續投予例如每日或每週劑量，或可处有一或 多個中斷，舉例而言，-個數(例如週或 至3)月的中斷。可長期投予多巴胺類致效劑直到疼痛（或其 他癥狀)結束。 15 病患可能懷孕。 子宮内膜異位之治療或預防可能與降低子宮内膜腺體 量有關。 ' 以下將引述實施例與附於本說明書之圖示說明本發 明，其中·· 20 第1圖顯示以下討論之控制組及用低劑量(〇 〇5 mg/kg/ 天)及高劑量((U mg/kg/天)卡麥角林之治療組動物研究後 的活動性病灶百分^第la關示三__/基質比[低及 高卡麥諸(“〇32’，)劑量她皆比重至組具有較多之基質及 較少之腺體（*ρ<0·05)] ; 土、 13 200845989 第2圖顯示控制組及低與高劑量組之血管(mm3); 第3圖顯示控制組及低與高劑量組動物之“成熟，，及“新 形成”的血管百分比； 第4圖顯示控制組及低與高劑量組之增殖指數； 5 第5圖顯不控制組及低與高劑量組之VEGF、VEGFR_2 (KDR)、Notch_4、Ang 1及 Wnt-1 的相對表現； 第6a圖顯不多巴胺類受器2 (Dp-r2)及VEGF在三組(控 制組、低及咼劑量組)動物子宮内膜植入物中的存在情形;及 第6b圖顯示子宮内膜異位病灶(左邊長條）及子宮内膜 10 (右邊長條）中VEGF、VEGFR_2 (KDR)及D2R的相對表現。 實施例1 藉由將人類子宮内膜片段插入裸鼠而研發一個實驗性 動物子宮内膜異位模式。將母鼠（Hsd: Athimic Nude⑽， Harlan Iberica S· L，Barcelona，西班牙）分別在無塵操作台 15放入高溫滅菌後的籠子及鋪上墊料。動物房維持在26 °C並 保持光照12-小時黑暗12小時的循環，並隨意餵食高溫滅菌 後的實驗室嚙齒類chow(—種嚙齒類飼料)及酸化水。所有 處理過程都在無塵操作台進行。用無菌器具將ketamine<氯 胺酮>/ medetomidine〈美托咪啶> (75 pg/g ketamine<氯胺酮 20 > 及 1 Pg/g medetomidinec 美托咪啶 >)(Ket〇lar⑧，

Parke-Davis，Espana ; Domtor®，Pfizer，西班牙）混合物，注 入腹腔以麻醉小白鼠，然後進行侵入性處理及在侵入性處 理後將 atipamezole〈阿替美唑 >(Antisedan®，smithKline

Beecham，西班牙）lpg/g注入腹腔中以使其自麻醉回復。 14 200845989 5週齡時，將含有18 mg之17p-雌二醇（Inn〇vative Research of America，Sarasota，FL)之無菌的⑼‘緩釋型膠 囊放在每隻動物的頸部皮下。根據製造商資訊，當印巢週 期時，膠囊以150-250 pmol/公升之血清濃度連續釋放荷爾 5 蒙’其係在小白鼠生理量的範圍内。此一安定的生理量之 動情素促使移植的人類子宮内膜生長及避免小白鼠間因卵 巢週期階段不同而有差異。 插入動情素片四天後，在下腹部腹腔中線形成一個入 口以插入來自扣贈者印菜的新鮮人類子宮内膜。用膠 10 (Vetabond®，3M動物保健用品，USA)將這些片段黏於腹 腔。這套方法可以模仿發生於子宮内膜異位之婦女經血逆 流的病理狀態。 植入三週後，將該等動物分成三組。第一控組是控制 組；第二組是低劑量組，口服0·05 mg/kg/天之卡麥角林來 15治療；及高劑量組，口服劑量〇·1 mg/kg/天之卡麥角林來治 療。治療兩週後，將動物犧牲及取樣子宮内膜異位症病灶 並如下所述般分析。 結果顯示於第1、la及2至6b圖。 藉由螢光分析多巴胺類致效劑抗血管生成作用，用於 20 雷射抑描共辆焦颁微鏡照出存在於内皮細胞及血管平滑肌 細胞(結合型單株Ig G2 a -SMA-FITC de Sigma，St Louis， USA)之Von Wiliebrand 因子之抗體(vwf單株ig G1，DAKO Corp·，Denmark)。不具新形成作用之血管係因平滑肌層而 成為圓形，該平滑肌層賦予該等金管成熟度。用vWF，找 15 200845989 ， 出内皮細胞，而用a -SMA正染色找出成熟血管。因此， vWF+ /a-SMA-血管被認為是新的或未成熟的，但vWF+ / aSMA+血管細被分類為老的或成熟的血管。 進行型態學研究以測量植入物區域及細胞密度。用 ‘ 5 Ki麵67 (單株Ig G1 DAKO Corp·，Denmark)抗體進行免疫化 - 學檢查以評估植入物之增生活性。用光學顯微鏡(OM)、透 射電子顯微鏡(TEM)及組織化學染色偵測組織病理學及次 細胞超結構改變。進行光學顯微鏡(0M)、透射電子顯微鏡 # (TEM)及形態學檢測以確認子宮内膜腺體及基質的存在及 10 研究次細胞超結構改變、植入物區域及細胞濃度。 用TaqMan Real-time PCR及2_ΛΔα方法分析三個促進血 管新生不同標記物(VEGF、VEGFR-2、Notch-4)之基因表現 輪廓；血管生成素(企管生成素)-1 (Ang-Ι): —種抗血管新 生標記物，其促使既有之血管擴大及對抗血管滲漏；及 15 Wnt_l。用 TaqMan Real- time PCR及2 AACt方法（第 6a、6b 圖）證實在實驗性植入物”人類腹腔子宮内膜異位症病灶及 ⑩ 子宮内膜中VEGF及多巴胺類第2型受器（Dp-r2)之表現。相 - 似地，用該方法證實人類腹膜型子宮内膜異位症病灶，及 - 子宮内膜之VEGFR_2表現（第6b圖）。 20 用 GraphPad Instat V3.0 (GmphPad Software，san

Diego，CA，USA)進行統計分析。設計研究以偵測治療組 與控制組間受分析之標記物的不同。除非有特別的說明， 類別數據以數字及百分比表示，及數值型數據則以平均數 值土平均值之標準誤(SEM)表示。顯著性限定為户<〇 〇5。用 16 200845989 單因子、<_分析進行統計分析。 毒性 / 又有任何一隻投予卡麥角林後的小白鼠在研究中死亡。 卡麥角林並未改變小白鼠的整體健康，因為不同處理 ’ 5 自鼠缝沒有晴μ(絲未顯雜本文中）。 結果 第1圖顯不經過上述討論之動物研究後的控制組與治 療組之活動性病灶百分比，該治療組係經低劑量（〇 〇5 ⑩ mg/kg/天）及高劑量（〇·1 mg/kg/天）卡麥角林的治療。用低 10 (58·6±9·7%)及咼（60.4±8·4%)劑量治療的動物之活動性病灶 相較於控制組(89·6±5·7%)為顯著降低(ρ=〇 〇169)。當與控制 組比較時，經卡麥角林(低及高劑量兩組)治療後的動物活動 性病灶明顯較少。換言之，以卡麥角林進行治療可減少此 模式之子宮内膜異位症病灶的數量。〇Μ及ΤΕΜ研究顯示控 15制組的子宮内膜異位症病灶存在有高度的細胞基質及完全 ^ 再組織及結構之組織面，可能就如在典型人類子宮内膜異 位病灶中所見。但是，在治療組的病灶（高及低劑量卡麥角 林）觀察到鬆散的基質，具有鬆散的細胞性及組織；這是 _ 萎縮性或退化性組織的特徵。圍繞腺體區域的人類子宮内 20 膜基質很容易與肌肉結合鼠組織區別。 這些組織學結果經型態學的分析確認（第1&圖）。雖然細 胞濃度在組間沒有統計上的差異，但組間的腺體/基質比具 有顯著差異(Ρ二0.0093)，如第la圖中所見；低及高卡麥角林 劑量兩組相較於控制組具有較多的基質及較少的腺體 17 200845989 (*p<0.05)。這表& 小卞麥角林治療可能與降低或減少子宮内 膜腺體量有關。 弟2圖顯示控岳丨 “ 一，，—徑制組、低及高劑量組之血管（mm3)分化介 \成'及新形d管。控制組具有較大比例的新 形成血官（明顯的成管新生指標），但低及高劑量組具有明顯 較大比例之成熟血总 、g ’表不明顯減少了血管新生。這也經 過組織學的證實（红 、 # 、V〜果未顯不於本文）。這些結果顯示，在此

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模式t卡麥角林明顯降低新血管形成(血管新生）。 第3圖顯不控制組及低及高劑量組之血管百分比。控制 組之總血管具有將近74%的新形成血管，顯示明顯血管新 生另$面，低及高劑量組之總血管具有將近85至89% 之成热血官’顯示血f新生不鶴。彡些結絲示，在此 模式中，卡麥角林明顯減少新金管的行程(血管新生）。 第4圖顯不增生研究的結果。用Ki-67抗體（亦即，用抗 15 Ki-67之抗體分析細胞增生的程度)進行免疫細胞化學研究 以此技藝中所知的方法評估植入物增生活性。用影像計數 軟體計算Ki-67陽性細胞，並藉此計算各組之增殖指數。觀 察到以卡麥角林(低及高劑量組兩者）治療之動物組的病灶 中之增生相較於控制組為顯著(P<〇〇〇1)降低。 20 病灶中血管生成的情況一開始以免疫螢光抗體及雷射 掃描共輛焦顯微鏡(Leica Confocal Software)分析，以找出 新的(vWF+/ a SMA -)及舊血管(VWF+/ a SMA +)。 可用抗Von Willebrand因子(vWF)(存在於内皮細胞及 血管平滑肌細胞<“4]\4八>中)之免疫螢光抗體測試抗血管 18 200845989 生成作用Cb2。平滑肌肉層附予非新生成之血管成熟度而呈 圓形。用vWF確認内皮細胞，而用qi-SMA正染色證實成熟 血管。因此，vWF+ /aSMA-血管被認為是新的或未成熟 的’而vWF+/aSMA+血管被分類為舊的或成熟血管。 5 植入物呈現出較高程度的細胞基質及在控制組子宮内 膜異位病灶中所常見的完整再組織及結構的組織學面貌， 而在低及高劑量組之小白鼠中的植入物顯示鬆散的基質且 具有鬆散的細胞性及組織，其係萎縮性/退化性組織之特 徵。形態學檢測顯示組間之細胞濃度及腺體區域之基質/腺 10 體比沒有不同。 用TaqMan Real-time PCR及2-AACt方法分析促進血管新 生之二個不同標記物(VEGF，VEGFR-2，Notch-4)的基因表 現輪廓血管生成素(血管生成素)4 (Ang_〗）：一種抗血管新 生標記物，其促使既有之血管擴大及對抗血管滲漏。用管 15家基因18S rRNA使目標基因Ct值標準化。相較於控制組 ct值(較正值）來表現各組Ct值，以藉由2·^^方法計算相對 表現。 用得自惡性肉瘤180腫瘤細胞（S-180)及人類臍靜脈内 皮細胞(HUVEC)之cDNA分別作為VEGF及VEGFR-2基因表 20現之正、負控制組。用脾作為Ang-Ι之正控制組及Wnt-Ι， 及用肺作為]Siotch_4之正控制組。 表1顯示在低及高劑量卡麥角林(“cb2”)治療之植入物 的促血管生成標記物(VEGF、VEGFR-2及Notch-4)之基因表 現輪廓，相較於控制組，是向下調節的。Ang_l&Wnt-l被 19 200845989 認為是抗血管生成標記物；用低及高Cb2劑量處理之小白鼠 植入物中其等表現輪廓，相較於控制組，係向上調節的， 顯示卡麥角林治療係與血管新生抑制有關。該表之相對表 現數據係圖示於第5圖。 表1 :血管生成基因表現輪廓 血管新生 標記物 基因 控制組 载劑 低劑量 (0.05mg/kg/天) 高劑量 (O.Olmg/kg/天) ρ值 ~----^ 表現 + VEGF HUVEC 1·2±0.3 0.5±0.2 0·4±0·1 <0.05 Cb2治療組： 复Ea節 + VEGF-2 (KDR) HUVEC 1·0±0·1 0·4±0·1 0·3±0·1 <0.05 纪®節 + Notch-4 肺 1.010.1 0·5±0.1 0.4±0.1 <0.05 应工a節 - Ang-1 脾 1·1±0.2 3_2±0·6 3·7±0·6 <0.05 Cb2治療組: 向上調f - Wnt-1 脾 1.0+0.1 3.410.2 3.3±0.6 =0.07 Cb2治療組： 向上調節 數據以平均值±sd表示 檢查人類子宮内膜組織及存在於接受手術（腹腔鏡）之 女性的子宮内膜異位症植入物之多巴胺類第2型受器。用 TaqMan Real-time PCR及2_ΔΛα方法確定存在於人類子宮内 10 膜組織之多巴胺類受器2 (“Dp-r2”，“D2R”)及VEGF，不僅 植入物（第6a圖）中的，也包括以腹腔鏡取自1〇位婦女之腹膜 型子宮内膜異位症病灶（第6b圖，其亦包括VEGFR-2之數 據）。Dp_r2之正及負控制組分別是HUVEC及S-180 cDNA細 胞。用小白鼠控制組的Ct值作為校正值，及用人類腹腔病灶 15之HUVECCt值作為校正值，以計算相對表現by2-^ct方法。 第6a圖顯示三組動物子宮内膜植入物中之veGF及 Dp-r2的存在。表現當動物以增加劑量之卡麥角林治療時， Dp-r2有增加之趨勢。當以增加劑量之卡麥角林治療動物 20 200845989 時，有降低VEGF表現之趨勢。 第6b圖顯示（左邊長條)不同類型子宮内膜異位症病灶 之VEGF、VEGFR-2 (KDR)及D2R (“Dp-r2”)相對表現；以 紅、白及黑表示。VEGF、VEGFR-2及Dp-r2表現因病灶類 、 5 型不同而有明顯的差異。 • 第6b圖亦顯示（右邊長條)VEGF、VEGFR-2 (KDR)及 D2R (“Dp-r2”)在子宮内膜之相對表現。患有子宮内膜異位 個體之VEGF及VEGFR-2在子宮内膜之相對表現比沒有子 ® 宮内膜異位個體高；Dp-r2在患有子宮内膜異位個體子宮内 10 膜之相對表現沒有子宮内膜異位個體低。 這些結果顯示於表以下2。

基因 子宮内膜 子宮内膜異位症病灶 無子宮 内膜異 位症 中度 嚴重 Ρ值 紅 白 黑 P值 VEGF 1.0±0.1 2.2±0.7 2·1±0.4 NS 17.8±5.8 10.1±4.8 11.1±3.9 NS KDR 1.0±0.1 2.1±0·6 1·9±0.3 NS 47.4±15.0 26.9±12.2 23.6±7.2 NS D2R 1.0±0.1 0·3±0·1 0.2±0·1 =0.07 0.2±0.1 〇.3±0.2 0.6±0.3 NS 結果顯示以〇·〇5及〇·ΐ mg/kg/天之劑量投予多巴胺類致 效劑卡麥角林，可以： (a) 明顯降低活動子宮内膜異位症病灶量； (b) 使子宮内膜異位症植入物中萎縮性或退化性組織中 表現出特徵之細胞及組織消失； (c) 明顯降低子宮内膜異位植入物新血管量； (d) 明顯降低血管新生及細胞增生之標記物表現；及 0)增加組織退化作用及減少子宮内膜異位症植入物。 21 200845989 人類及嚙齒類之VEGF系統具有高同質性，該VEGF系 統提供一個指標即顯示於上述嚙齒類模式之活性可應用於 人類模式。結果顯示投予多巴胺類致效劑對於子宮内膜異 位具有明顯作用，可能與作用於血管新生有關。結果可能 5 係與存在於正位性及異位性子宮内膜組織之多巴胺類受器 有關。 實施例2 一種口服錠劑配方係〇.5mg之卡麥角林（可購得 Dostinex®，Pfizer，西班牙）。 1〇 其他實施例 實施例A : —病患罹患慢性骨盆腔疼痛，經以腹腔鏡檢 查診斷為子宮内膜異位第ΙΠ型。於相同之腹腔鏡檢查，該 病患接受手術切除可發現的病灶及開始投予卡麥角林。 實施例B:病患先前被診斷為子宮内膜異位，表現出骨盆 15腔疼痛及痛經之癥狀。開始投予卡麥角林而未進行手術。 實施例C:該病患經診斷為子宮内膜異位，一開始受到 GnRH致效劑（或炔睾醇cdanazoi〉或芳香環轉化酶抑制劑) 的治療及投予卡麥角林（並持續使用GnRH致效劑）歷時一 段時間。再經過3或6個月的治療，病患再開始使用卡麥角 2〇 林歷時一段時間。 【圖式簡單說明】 第1圖顯示以下討論之控制組及用低劑量（0.05 mg/kg/ 天）及高劑量(0·1 mg/kg/天）卡麥角林之治療組動物研究後 的活動性病灶百分比；第la圖顯示三組的腺體/基質比[低及 22 200845989 高卡麥角林(“Cb2”)劑量兩組皆比重至組具有較多之基質及 較少之腺體(*p<0.05)]; 第2圖顯示控制組及低與高劑量組之血管(mm3); 第3圖顯示控制組及低與高劑量組動物之“成熟，，及“新 5 形成”的血管百分比； 第4圖顯示控制組及低與高劑量組之增殖指數； 第5圖顯示控制組及低與高劑量組之VEGF、VEGFR-2 (KDR)、Notcli-4、Ang 1 及Wnt-Ι的相對表現； 第6a圖顯示多巴胺類受器2 (Dp-r2)及VEGF在三組(控 10 制組、低及高劑量組)動物子宮内膜植入物中的存在情形；及 第6b圖顯示子宮内膜異位病灶(左邊長條）及子宮内膜 (右邊長條）中VEGF、VEGFR-2 (KDR)及D2R的相對表現。 【主要元件符號說明】 (無） 23

Claims (1)

1. 200845989 十、申請專利範圍： L —種多巴胺類致效劑(agonist)之用途，其係將多巴胺類 致效劑用於製造用於治療或預防子宮内膜異位之藥物。 2·如申請專利範圍第1項之用途，其中該多巴胺類致效劑 係金剛胺(amantadine)、漠隱亭(bromocryptine)、卡麥角 林（cabergoline)、喧高萊（quinagolide)、麥角乙脲 (lisuride)、培高利特（perg〇lide)、羅匹尼羅（ropinirole) 及普拉克索(pramipexole)中之一。 3.如申請專利範圍第1或2項之用途，其中該多巴胺類致效 劑係卡麥角林且以介於〇.〇1及12.5mg/週之劑量投予。 4·如申請專利範圍第1至3項中任一項之用途，其中該多巴 胺類致效劑係喹高萊且以介於25及1000微克/天之劑量 投予。 5. 如申請專利範圍第1至4項中任一項之用途，其中該多巴 胺類致效劑係溴隱亭且以介於10及80mg/天之劑量投予。 6. 如申請專利範圍第1至5項中任一項之用途，其中該多巴 胺類致效劑之投予歷時一段介於1天及2年的時間。 7·如申请專利範圍第1至6項中任一項之用途，其中該多巴 胺類致效劑係與其他用於子宮内膜異位之手術或藥物 治療一起投予。 8.如申請專利範圍第1至7項中任一項之用途，其中該多巴胺 類致效劑係用於治療或預防懷孕個體的子宮内膜異位。 9·如申請專利範圍第1至8項中任一項之用途，其中係以血 管内皮細胞生長因子（vascular end〇thelial growth 24 200845989 factor ; VEGF)為目標。 10.如申請專利範圍第1至9項中任一項之用途，其中係以 VEGFR-2為目標。 11·如申請專利範圍第1至1〇項中任一項之用途，其中係以 Notch-4為目標。 12·如申請專利範圍第1至U項中任一項之用途，其中該子 宮内膜異位治療或預防係與降低子宮内膜腺體量有關。 13·如申請專利範圍第1至12項中任一項之用途，其中該子 呂内膜異位治療或預防係與減少（或移除)存在於子宮腔 外之子宮内膜組織量有關；及/或治療以減少及/或改善 一或多個與子宮内膜異位有關之癥狀。 14·如申請專利範圍第1至13項中任一項之用途，其中該投 藥方式是口服呈膠囊、扁囊劑、錠劑、糖漿、酏劑或口 含錠形式之組成物。 15·種用於治療或預防子宮内膜異位的藥學組成物，其包 含一個多巴胺類致效劑。 16·如申請專利範圍第15項之藥學組成物，其中該多巴胺類 致欢劑係金剛胺、溴隱亭、卡麥角林、喹高萊、麥角乙 脲、培高利特、羅匹尼羅及普拉克索中之一。 7·如申凊專利範圍第15或16項之藥學組成物，其中該多巴 〕、、致放W丨係卡麥角林且以介於⑽1及週之劑 量投予。 申明專利範圍弟15至I?項中任一項之藥學組成物，其 中忒夕巴胺類致效劑係喹高萊且以介於25及1〇〇〇微克/ 25 200845989 天之劑量投予。 19. 如申請專利範圍第15至18項中任一項之藥學組成物，其 中該多巴胺類致效劑係溴隱亭且以介於10及8 0 m g /天之 劑量投予。 20. 如申請專利範圍第15至19項中任一項之藥學組成物，其 中該多巴胺類致效劑之投予歷時一段介於1天及2年的 時間。 21·如申請專利範圍第15至20項中任一項之藥學組成物，其 中該多巴胺類致效劑係與其他用於子宮内膜異位之手 術或藥物治療一起投予。 22. 如申請專利範圍第15至21項中任一項之藥學組成物，其 中該多巴胺類致效劑係用於治療或預防懷孕個體的子 宮内膜異位。 23. 如申請專利範圍第15至22項中任一項之藥學組成物，其 中係以血管内皮細胞生長因子(VEGF)為目標。 24. 如申請專利範圍第15至23項中任一項之藥學組成物，其 中係以VEGFR-2為目標。 25. 如申請專利範圍第15至24項中任一項之藥學組成物，其 中係以Notch-4為目標。 26. 如申請專利範圍第15至25項中任一項之藥學組成物，其 中該子宮内膜異位治療或預防係與降低子宮内膜腺體 量有關。 27. 如申請專利範圍第15至26項中任一項之藥學組成物，其 中該子宮内膜異位治療或預防係與減少（或移除)存在於 26 200845989 子宮腔外之子宮内膜組織量有關；及/或治療以減少及/ 或改善一或多個與子宮内膜異位有關之薇狀。 28.如申請專利範圍第15至27項中任一項之藥學組成物，其 中該投藥方式是口服呈膠囊、扁囊劑、錠劑、糖漿、酏 劑或口含錠形式之組成物。

   27 200845989 七、指定代表圖： (一） 本案指定代表圖為：第（1 )圖。 (二) 本代表圖之元件符號簡單說明： (無) 八、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學式：

   200845989

   發明專利說明書

   (本說明書格式、順序及粗體字’請勿任意更動’※記號部分請勿填寫） ※申請案號·· I ※申請日期： ％IPC分類： 一、發明名稱：（中文/英文) 用於治療子宮内膜異位之藥物 MEDICAMENT FOR THE TREATMENT OF ENDOMETRIOSIS 二、 申請人：（共1人）

   姓名或名稱：（中文/英文） 菲瑞茵國際中心股份有限公司/ FERRING INTERNATIONAL CENTER S.A. 代表人：（中文/英文） 艾斯果維克泰迪/ ERCEGOVIC，TEDDY 住居所或營業所地址:（中文/英文） 瑞士聖-普瑞克斯•維可格納薩茲路50號 Chemin de la Vergognausaz 50, 1162 Saint-Prex, Switzerland 國籍：（中文/英文） 瑞士 / SWITZERLAND

   三、 發明人：（#人） 姓名··（中文/英文） 1·培利瑟-馬汀茲安東尼歐/ PELLICER-MARTINEZ，ANTONIO 2·席蒙-維里斯卡洛斯/ SIMON-VALLES，CARLOS 3.諾維拉-馬士翠艾杜菱 / NOVELLA-MAESTRE，EDURNE 國籍：（中文/英文） 1·-3.西班牙 / SPAIN