TW200824696A

TW200824696A - Combinations and methods of using an immunomodulatory oligodeoxynucleotide

Info

Publication number: TW200824696A
Application number: TW095144982A
Authority: TW
Inventors: Jarl Ulf Birger Jungnelius; David Robert John Readett; Louis Jean Denis
Original assignee: Pfizer
Priority date: 2005-11-11
Filing date: 2006-12-04
Publication date: 2008-06-16
Also published as: AU2006315632A1; BRPI0618473A2; IL190983A0; RU2008118144A; CA2628659A1; WO2007059041A2; KR20080075107A; WO2007059041A3; EP1963502A4; EP1963502A2; JP2009515896A; US20090082295A1

Description

200824696 (1) 九、發明說明【發明所屬之技術領域】本發明關於治療哺乳動物（尤其是人類）之異常細胞生長（諸如癌症）的組合物及方法。尤其是，本發明提供利用免疫調節性寡去氧核苷酸治療癌症之組合療法及治療方案。

【先前技術】治療癌症之傳統方法係以治療法瞄準腫瘤本身。癌症療法之替代方法爲瞄準免疫系統（”免疫療法”）而非腫瘤本身及/或加上瞄準腫瘤本身。免疫療法之潛在效益爲增強患者本身對腫瘤之免疫反應，但將治療對正常細胞之有害效果降至最低，以提供改良之效果。細菌DNA具有免疫刺激效果，以活化B細胞及天然殺手細胞（Tokunaga，T·，et al·，1988. Jpn. J. Cancer Res. 7 9:682-686; Tokunaga，T.5 et al” 1 984，JNC1 72:955-962; Messina，J.P.， et al” 1991， J. Immunol. 147:1859-1764; and reviewed in Krieg，1 998，In: Applied Oligonucleotide Technology， C.A. Stein and A. M. Krieg，（Eds.), John Wiley and Sons，Inc·，New York，NY，pp. 431-448) 〇細菌DNA之免疫刺激效果爲特定鹼基（CpG再現單位（ motifs))中存有未甲基化之CpG二核苷酸所造成的結果，此未甲基化之情況在細菌DNA中常見，但脊椎動物之 DNA則爲甲基化者且比例低（Krieg et al，1 995 Nature (2) 200824696 374:546-549; Krieg，1 99 9 Biochim. Biophys. Acta 9332 1:

l-io)。細菌DNA之免疫刺激效果可藉含有這些CpG再現單位之合成的寡去氧核苷酸（ODN )來模擬（下文中 "CpG ODN"與”免疫調節性 ODNs"可交換使用）。這類 CpG ODN對人類及老鼠白血球具有高度刺激效果，其誘導B細胞之增生、細胞活素及免疫球蛋白之分泌、天然殺手細胞（NK)之細胞溶解活性、IFN-γ分泌及活化樹突狀細胞（DCs )和其他抗原呈現細胞，以表現輔刺激性分子並分泌細胞活素，尤其是似Thl細胞活素，其對促進似 Thl T細胞反應之發展至爲重要。天然磷酸二酯骨架CpG ODN之免疫刺激效果爲高度CpG特異性，若CpG再現單位被甲基化、被改成GPC或被排除或被改造，則該效果將顯着降低（Krieg et al5 1995 Nature 374:546-549;

Hartmann et al，1999 Proc. Natl. Acad. Sci USA 95:9305-10 )。過去認爲免疫刺激效果需要該具有嘌呤-嘌呤-CpG-嘧啶-嘧啶序列之 CpG再現單位（Krieg et al，1 995 Nature 374:54 6- 549; Pisetsky， 1 9 9 6 J. Immunol. 1 56:42 1 -423; Hacker et al.，1998 EDMBO J. 1 7:623 0-6240; Lipford et al，1998 Trends in Microbiol. 6:496-500)。然而，現已清楚老鼠淋巴球不具此序列之磷酸二酯CpG再現單位的反應相當良好（Yi et al.，1 998 J· Immunol. 160:5898-5906 )，且人類B細胞及樹突狀細胞亦是如此（Hartmann et al， 1999 Proc. Natl. Acad. Sci USA 96:9305-10; Liang，1996 (3) 200824696 J. Clin. Invest. 9 8:1 1 1 9-1 1 29 ) o 一種類別之CpG ODN對活化B細胞很有效，但在誘導IFN- r及NK細胞活化方面之效力相當薄弱；此類別已被定名爲B類。B類CpG寡核苷酸通常非常穩定且在某些較佳鹼基中並包括未甲基化之CpG二核苷酸。見，如：美國專利第 6,194,388; 6,207,646; 6,214,80 6; 6,218,317; 6,239，1 16 ;及 6,339,068 號。

雖然個別使用CpG ODN來誘導抗腫瘤反應對治療癌症很有希望，但仍需要硏發新穎之療法，以這類免疫治療方法來治療腫瘤（尤其是實體腫瘤）。全世界每年診斷出之肺癌病例超過1 20萬件。其死亡率非常高且這些疾病每年造成1 1 0萬位患者死亡。在美國，肺癌爲男性及女性之癌症死亡率的首要原因。估計20 0 5 年將診斷出超過1 72,570個新肺癌病例且超過1 63,000位患者將死於肺癌，將近爲所有與癌症相關之死亡病例的 3 0% 〇約80%之肺癌在組織學上被定義爲非小細胞肺癌’其餘之2 0 %爲小細胞肺癌。大部分具有非小細胞肺癌（ NSCLC )之患者呈現出爲無可用之有效療法的無法手術之局部末期（第ΠΙ B階段）或轉移（第IV階段）疾病。對這些患者而言，在個別硏究之蒼萃分析中’以鉑爲基礎之化療法與單獨使用最佳之支持照護相較下，其顯示出可適度增加中位存活率。因此，根據其中相較於單獨使用鉬類化合物或其他非鉑類之單一治療劑而顯示出具改良之存活力 (4) 200824696 的試驗，許多以鉛類化合物爲基礎之雙重（即，合倂使用二種化療劑）組合方案已成爲照護之臨床及管理標準。全世界中常用之醫囑雙重化療方案係包含順鉑或卡鉑與太平洋紫杉醇（paclitaxel )、多烯紫杉醇（do cit axel )、吉西他汀（gemcitabine)或長春瑞賓（vinorelbine)之組合。治療方法存在著地理上的偏好模式；太平洋紫杉醇加卡鉛

爲美國最常用之醫囑方案，而吉西他汀或長春瑞賓與順鉑或卡鉛之組合爲歐洲最常用者。數種大型之隨機化第3階段試驗係比較以不同之鉑類化合物爲基礎的方案，但無一方案在反應速率、無惡化存活期或總存活期上顯示出明確之優越性。這些試驗中，不同治療臂之中位存活率爲7.4 至9 ·9個月。不同之雙重組合療法的毒性變化形廓有些差異，但無一單獨方案之毒性被認爲較其他方案明顯爲低。因此，所有以鉑類化合物爲基礎之雙重組合方案可被視爲末期NSCLC之第1線治療的適當標準照護且方案之選擇主要係根據個別醫師及患者之偏好。許多隨機化臨床試驗係硏究將第三種細胞毒性劑加入這些標準之以鉑類化合物爲基礎的組合中。雖然某些三重 (即，合倂使同三種化療劑）組合已可改良客觀反應速率，但無一可改良總存活期。最新之指標劑（諸如上皮細胞生長因子受體（EGFR )酪胺酸激酶抑制劑吉菲特尼（ gefitinib ) ( Gefitinib®)及埃洛特尼（erlotinib)(

Tarceva®)和瞄準血管內皮細胞生長因子（VEGF)之單株抗體貝伐單抗（bevacizumab ) ( Avastin® )已在 NSCLC -8 - (5) 200824696

患者中測試。吉菲特尼及埃洛特尼二者在難治之NSCLC 中顯示出具臨床活性，但將其加入標準之第一線以鉑類化合物爲基礎之化療中時，無一可改良臨床結果。一種硏究在第一線太平洋紫杉醇加卡鉑之化療中加入貝伐單抗的隨機化第3階段試驗已在最近完成。由於在先前之第2階段試驗中觀察到與貝伐單抗相關的肺部出血，因此，具鱗狀細胞組織、中樞神經腫瘤、肉眼可見之咳血的患者或接受可邁丁（ Coumadin )、阿斯匹靈或抗血小板療法之患者被排除在此第3階段試驗之外。從該試驗取得之最近中期結果報告太平洋紫杉醇/卡鉑加貝伐單抗之治療臂可使中位數總存活率改良23% ( 12.5個月對10.2個月-ρ = 0·007 )。注意，不管對反應速率及無惡化存活期之治療效果，該探索性亞組分析並未證明對女性患者之存活效益。不管該資格限制，與只包含太平洋紫杉醇/卡鉑之治療臂中僅有 0.7%患者出現CTC 3/4/5級出血相較下，在太平洋紫杉醇/ 卡鉑加貝伐單抗之治療臂中有4.5 %患者出現CTC 3/4/5級出血（包括5位與咳血有關之死亡病例）。這些數據如何影響貝伐單抗在第一線NSCLC中之使用仍有待測定。吾人對用於新近診斷出末期NSCLC之患者的新穎治療選擇仍有明確需求。最近的數據顯示出以疫苗爲基礎之免疫療法可能用於末期NSCLC之臨床治療中。其他免疫治療法仍爲有吸引力之選擇，因其可能對末期NSCLC提供安全且有效之治療形式。再者，對治療NSCLC仍未滿足的醫療需求可用來說明其他類型之癌症（包括，但不限 (6) 200824696 於：SCLC、乳癌、黑色瘤、皮膚T-細胞淋巴瘤及其他型式之非何杰金氏淋巴瘤）。因此，無疑的，目前亦需要可用來治療不同癌症之患者的新穎治療選擇。【發明內容】〔發明簡述〕

硏發新穎之治療方案（尤其是那些可增加或促成患者免疫系統之抗腫瘤活性，並可減低現有之化療劑的細胞毒性副作用者）是有必要的。本發明係提供這類方案。因此，本發明提供治療或預防需要此類治療之患者的癌症之方法，其中該方法包含（a)治療方案，其包含同時、半-同時、分別或依序給予患者治療上有效量之CpG ODN與治療上有效量之選自下列之化療劑·· 5- ( 5-氟-2-合氧基-1，2-二氫亞吲哚-(3Z)-基甲基）-2,4-二甲基-1H-吡咯-3-羧酸（2-二乙胺基乙基）-醯胺、表阿黴素（ epirubicin )、多柔比星（doxorubicin )、太平洋紫杉醇 (paclitaxel )、多;(¾ 紫杉醇（docetaxel )、吉西他汀（ gemcitabine )、長春瑞賓（vinorelbine) ' 伊立替康（ irinotecan)、培米催塞（pemetrexed)、絲裂黴素（ mitomycin )、長春新鹼（vincristine )、卡倍他濱（ capecitabine)、環磷醯胺（cyclophosphamide)、甲胺喋玲（methotrexate )、亞葉酸錦（leuco vorin )、曲妥珠單抗（trastuzumab )、拉倍特尼（lapatinib )、長春花驗（ vinblastine )、長春地辛（vindesine )、順鉑（cisplatin -10- (7) 200824696

)、卡鉛（carboplatin)、奧沙利鉑（oxaliplatin)、吉菲特尼（g e f i t i n i b )、埃洛特尼（e r 1 〇 t i n i b ) 、T L K - 2 8 6、西妥昔單抗（cetuximab )、貝伐單抗（bevacizumab )、依托伯苷（etoposide)、平陽黴素（bleomycin) 、5-FU

、馬法蘭（melphalan) 、ZD 6 474、ZD 2171、UFT、SI、伊弗法_胺（i f 〇 s f a m i d e )、噻替_ ( t ii i o t e p a )、替莫哩胺（temozolomide)、塔拉伯泰（talabostat)、干擾素、塔莫西芬（tamoxifen)、拉洛西芬（raloxifene)、伊西美坦（exemestane)、阿那曲唑（anastrozole)、諾雷德 (zoladex )、來曲哗（letrozole)、美可治（megace)、艾布雷森（abr axane )、雙膦酸鹽（bi spho sphonat e )、替莫哩胺（temozolomide)、法安明（fragmin)、法斯洛德 (faslodex )、伊立替康（irinotecan)、奧沙利鉑（ oxaliplatin ) 、DTIC、干擾素、介白素、索拉非尼（ s o r a f e n i b ) 、IL - 2 及其組合；及，選擇性地，（b )給予患者包含CpG ODN之維持劑量的維持方案。較佳地，本發明之方法提供治療上有效量之CpG ODN (包含約〇 . 0 1至5.0毫克/公斤之治療劑量，宜爲約0.0 1 至2.5毫克/公斤，更宜爲約0·05至1.0毫克/公斤，最宜爲約〇·2毫克/公斤）。本發明提供治療或預防之方法’其中該治療劑量係（ a )在給予化療劑之前投藥，（b )在給予化療劑之後投藥，（c )在給予化療劑前約1週至3週給予患者，（d)在 -11 - (8) 200824696 給予化療劑前約1週給予患者，（e)在給予化療劑後約1 週至3週給予患者，（f)在給予化療劑後約1週給予患者，及/或（g)其中該方法進一步包含治療方案，此治療方案包含選自下列之療法：外科手術、放射療法或其組合本發明亦考慮給予約0.01至5.0毫克/公斤（宜爲約 0·01至2·5毫克/公斤，更宜爲約〇.〇5至1.0毫克/公斤，

最宜爲約〇·2毫.克/公斤）之CpG ODN的維持劑量。本發明亦提供治療或預防需要治療非小細胞肺癌（ NSCLC)之患者的非小細胞肺癌（NSCLC )之方法，其中該方法包含（a )治療方案，其包含同時、半-同時、分別或依序給予患者治療上有效量之CpG ODN與治療上有效量之選自下列之化療劑：5-'( 5-氟-2-合氧基-1，2-二氫亞吲哚-(3Z)-基甲基）-2,4-二甲基-1H-吡略-3-羧酸（2-二乙胺基乙基）-醯胺、太平洋紫杉醇、多烯紫杉醇、吉西他汀、長春瑞賓、伊立替康、培米催塞、絲裂黴素素、長舂新驗、長春花驗、長春地辛、順鉑、卡鉛、奧沙利鈾、吉菲特尼、埃洛特尼、TLK-286、西妥昔單抗、貝伐單抗、依托伯苷、平陽黴素、5-FU、馬法蘭、ZD 6474、ZD 2171 、UFT、S 1、伊弗法醯胺、噻替哌、替莫唑胺、塔拉伯泰、千擾素及其組合；及，選擇性地，（b )給予患者包含 CpG ODN之維持劑量的維持方案。於一較佳體系中，本發明提供治療如上述之NSCLC 的方法，其包含同時、半-同時、分別或依序給予患者治 -12- (9) 200824696

療上有效量之CpG ODN與治療上有效量之（a)選自下列之第一化療劑：5 - ( 5 -氟-2 ·合氧基-1，2 -二氫亞吲哚-(3 Z

)胃基甲基）-2,4-二甲基-1H-吡咯-3-羧酸（2-二乙胺基乙基）-醯胺、太平洋紫杉醇、多烯紫杉醇、吉西他汀、長春瑞賓、伊立替康、培米催塞、絲裂黴素、長春新鹼、長春花鹼、長春地辛、順鉬、卡鉑、奧沙利鉑、吉菲特尼、埃洛特尼、TLK-286、西妥昔單抗、貝伐單抗、依托伯苷、平陽黴素、5-FU、馬法蘭、ZD 6474、ZD 2171、UFT、 S 1、伊弗法醯胺、噻替哌、替莫唑胺、塔拉伯泰、干擾素 •，及（b )選自下列之第二化療劑：5- ( 5-氟-2-合氧基-1，2-二氫亞吲哚-(32)-基甲基）-2,4-二甲基-111-吡咯-3-羧酸（2-二乙胺基乙基）-醯胺、太平洋紫杉醇、多烯紫杉醇、吉西他汀、長春瑞賓、伊立替康、培米催塞、絲裂黴素、長舂新鹼、長春花鹼、長春地辛、順鉑、卡鈾、奧沙利鉛、吉菲特尼、埃洛特尼、TLK-2 86、西妥昔單抗、貝伐單抗、依托伯苷、平陽黴素、5-FU、馬法蘭、ZD 6474 、ZD 2171、UFT、S1、伊弗法醯胺' 噻替哌、替莫唑胺、塔拉伯泰、干擾素；其中該第一及第二化療劑二者相異 ;及選擇性地，（c )給予患者維持方案，其包含CpG ODN之維持劑量；唯其若該第一化療劑係選自順鈾或卡鉑，則該第二化療劑不爲太平洋紫杉醇或多烯紫杉醇。於一較佳體系中，該 CpG ODN係選自下列：PF 351267 6、1018 ISS、Genazense 及 IMOxine® ° 於本發明之一種較佳體系中，本發明方法考慮投服選 -13- (10) 200824696 自下列之化療劑：5- ( 5-氟-2-合氧基-1，2-二氫亞吲哚-( 3Z)-基甲基）-2,4-二甲基-1H-吡咯-3-羧酸（2-二乙胺基乙基）-醯胺、培米催塞、吉西他汀、貝伐單抗、卡鉑、埃洛特尼及其組合，且該治療方案進一步包含投服順銷。

還有，本發明提供一種治療或預防NSCLC之方法，其中該治療上有效量之CpG ODN爲約0.01至5.0毫克/公斤（宜爲約0.01至2.5毫克/公斤，更宜爲約0.05至1.0 毫克/公斤，最宜爲約〇·2毫克./公斤）之治療劑量。再者，本發明考慮一種治療或預防NSCLC之方法，其中該治療劑量係（a )在給予化療劑之前投藥，（b )在給予化療劑之後投藥，（c )在給予化療劑前約1週至3 週給予患者，（d )在給予化療劑前約1週給予患者，（e )在給予化療劑後約1週至3週給予患者，（f)在給予化療劑後約1週給予患者，及/或（g )其中該方法進一步包含治療方案，此治療方案包含選自下列之療法：外科手術、放射療法或其組合。本發明亦考慮投服約0.01至5·0毫克/公斤（宜爲約 0.01至2.5毫克/公斤，更宜爲約〇·〇5至i.o毫克/公斤，最宜爲約0.2毫克/公斤）之CpG ODN的維持劑量。本發明亦提供治療或預防需要治療乳癌之患者的乳癌之方法，其中該方法包含（a)治療方案，其包含同時、半-同時、分別或依序給予患者治療上有效量之CpG ODN 與治療上有效量之選自下列之化療劑：5 _( 5 _氟-2 -合氧基-1，2 -二氫亞吲哚-(3Z)-基甲基）_2,4_二甲基-1H -吡 -14- (11) 200824696

咯-3-羧酸（2-二乙胺基乙基）-醯胺、表阿黴素、多柔比星、太平洋紫杉醇、多烯紫杉醇、卡倍他濱、長春新鹼、吉西他汀、5-Fu、環磷醯胺、甲胺喋呤、亞葉酸鈣、曲妥珠單抗、貝伐單抗、拉倍特尼、埃洛特尼、吉菲特尼、培米催塞、塔莫西芬、拉洛西芬、伊西美坦、阿那曲唑、諾雷德、來曲唑、美可治、艾布雷森、雙膦酸鹽、替莫唑胺、法安明、法斯洛德、伊立替康、順鉑、卡銷、奧沙利鉑及其組合；及，選擇性地，（b )給予患者包含CpG ODN 之維持劑量的維持方案。於一較佳體系中，該CpG ODN 係選自下列·· PF 35 1 2676、1018 ISS、Genazense 及 IMOxine®，且，較隹地，該 CpG ODN 爲 PF 3 512676。再者，本發明提供治療或預防乳癌之方法，其中該治療上有效量之CpG ODN爲約0.01至5 ·〇毫克/公斤（宜爲約0.01至2.5毫克/公斤，更宜爲約〇_〇5至1〇毫克/公斤，最宜爲約0.2毫克/公斤）之治療劑量。還有，本發明考慮治療或預防乳癌之方法，其中該治療劑量係（a )在給予化療劑之前投藥，（b )在給予化療劑之後投藥，（c )在給予化療劑前約1週至3週給予患者，（d )在給予化療劑前約1週給予患者，（e )在給予化療劑後約1週至3週給予患者’（f)在給予化療劑後約1週給予患者，及/或（g )其中該方法進一步包含治療方案，此治療方案包含選自下列之療法：外科手術、放射療法或其組合。本發明亦考慮投服約〇 · 〇 1至5.0毫克/公斤（宜爲約 -15- (12) 200824696 0·01至2·5毫克/公斤，更宜爲約0.05至1.0毫克/公斤，最宜爲約0.2毫克/公斤）之CpG ODN的維持劑量。

本發明進一步提供治療或預防需要治療黑色瘤之患者的黑色瘤之方法，其中該方法包含（a)治療方案，其包含同時、半-同時、分別或依序給予患者治療上有效量之 CpG ODN與治療上有效量之選自下列之化療劑：DTIC、長春花鹼、長春新鹼、長春地辛、替莫唑胺、干擾素、介白素及其組合；及，選擇性地，（b )給予患者包含CpG ODN之維持劑量的維持方案。於一較佳體系中，該CpG ODN 係選自下歹ij ·· PF 3512676、1018 ISS、Genazense 及 IMOxine®，且，較佳地，該 CpG Ο DN 爲 P F 3 5 1 2 6 7 6。再者，本發明提供治療黑色瘤之方法，其中該治療上有效量之CpG ODN爲約0.01至5.0毫克/公斤（宜爲約〇.〇1至2.5毫克/公斤，更宜爲約0.05至1.0毫克/公斤且最宜爲約0.2毫克/公斤）之治療劑量。還有，本發明考慮治療黑色瘤之方法，其中該治療劑量係（a )在給予化療劑之前投藥，（b )在給予化療劑之後投藥，（c )在給予化療劑前約1週至3週給予患者， (d )在給予化療劑前約1週給予患者，（e )在給予化療劑後約1週至3週給予患者，（f)在給予化療劑後約1 週給予患者，及/或（g )其中該方法進一步包含治療方案，此治療方案包含選自下列之療法：外科手術、放射療法或其組合。本發明亦考慮投服約〇·〇1至5.0毫克/公斤（宜爲約 -16- (13) 200824696 0.01至2.5毫克/公斤，更宜爲約0.05至1.0毫克/公斤且最宜爲約0.2毫克/公斤）之CpG ODN的維持劑量。

本發明進一步提供治療或預防需要治療腎細胞癌之患者的腎細胞癌之方法，其中該方法包含（a)治療方案，其包含同時、半-同時、分別或依序給予患者治療上有效量之CpG ODN與治療上有效量之選自下列之化療劑：5-(5-氟-2-合氧基-1，2-二氫亞吲哚- (3Z)-基甲基）-2,4-二甲基-1H-吡咯-3-羧酸（2-二乙胺基乙基）-醯胺、索拉非尼、IL-2、伊美特尼（imatinib )、貝伐單抗、吉西他汀、順鈾、卡鉑、太平洋紫杉醇、多烯紫杉醇及其組合；及，選擇性地，（b )給予患者包含CpG ODN之維持劑量的維持方案。於一較佳體系中，該CpG ODN係選自下列： PF 3 5 1 2676、10 18 ISS、Genazense 及 IMOxine®，且，較佳地，該 CpG ODN 爲 PF 3 5 1 2676 ° 再者，本發明提供治療或預防RCC之方法，其中該治療上有效量之CpG ODN爲約〇.〇1至5.0毫克/公斤（宜爲約0.01至2.5毫克/公斤，更宜爲約0.05至1.0毫克/公斤且最宜爲約〇 . 2毫克/公斤）之治療劑量。還有，本發明考慮治療或預防RCC之方法，其中該治療劑量係（a )在給予化療劑之前投藥，（b )在給予化療劑之後投藥，（c )在給予化療劑前約1週至3週給予患者，（d )在給予化療劑前約1週給予患者，（e )在給予化療劑後約1週至3週給予患者，（f)在給予化療劑後約1週給予患者，及/或（g )其中該方法進一步包含治 -17- (14) 200824696 療方案，此治療方案包含選自下列之療法··外科手術、放射療法或其組合。本發明亦考慮投服約0.01至5.0毫克/公斤（宜爲約〇.〇1至2.5毫克/公斤，更宜爲約0·05至1，〇毫克/公斤，最宜爲約0.2毫克/公斤）之CpG ODN的維持劑量。這些及其他本發明之較佳體系詳細描述於此文中。

本發明之各項限制可包含本發明之多種不同較佳體系。因此，預期涉及任一要素或要素之組合的本發明各項限制可包含在本發明之各觀點中。本發明並不限於下列說明中所提出或圖形中所解說之構成細節及組成安排之應用。本發明可有其他較佳體系且可以多種不同之方式執行或進行。此處所使用之措詞及專門用語係用於說明而不應被視爲限制。此處，n 包括（i n c 1 u d i n g ) ”、"包含（c 〇 m p r i s i n g )”或”具有（having) π、n含有（containing) n、’’涉及（ involving ) n及其變化體係包含該列於其後之項目和其同等物以及其他項目。〔發明詳述〕 I. 定義除非此文中另外定義，否則所使用之與本發明相關的科學及技術名詞應具有本技藝之一般技術人士所習知之意義。再者，除非另有需要，單數名詞應包括複數且複數名詞應包括單數。通常，與此文中所描述之細胞及組織培養 -18- (15) 200824696 、分子生物學、免疫學、微生物學、遺傳學及蛋白質和核酸化學以及雜合作用之技術相關的學術用語爲本技藝所熟知且常用者。除非另外指出，本發明之方法和技術通常係根據本技藝所熟知之方法進行且描述於本專利說明書中所列舉及討論之多種不同之一般及較特殊的參考資料中。這類參考資料包括，例如：Sambrook and Russell，Molecular

Cloning， A Laboratory Approach， Cold Spring Harbor Press， Cold Spring Harbor，NY (2001 )，Ausubel et al·， Current Protocols in Molecular Biology, John Wiley & Sons， NY (2 0 02)及 Harlow and Lane Antibodies: A

Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press， Cold Spring Harbor，NY (1 990)中，其倂爲此文之參考資料。酶性反應及純化技術係根據製造者說明書進行，如同本技藝中常完成或此文中所描述者。與此文中所描述之分析化學、合成有機化學及醫用和製藥化學之實驗室程序及技術相關的學術用語爲本技藝所熟知且常用者。在化學合成、化學分析、製藥、配製及遞送和治療患者時係使用標準技術來進行。此文所使用之下列各學術用語具有此章節中與其相關之意義。此處所使用之冠詞’’一 π係指一或超過一個（即，至少一個）該冠詞之文法受詞。例如，"一種要素”意指一種要素或超過一種要素。 ”藥學組成物”係指一或多種此文所描述之化合物或其 -19- (16) 200824696 生理學上/藥學上可接受之鹽、溶劑化物、水合物或前藥與其他成分（諸如生理學上/藥學上可接受之載體及賦形劑）的混合物。藥學組成物之目的係協助將化合物投給有機體。此文所使用之π生理學上/藥學上可接受之載體"係指不會明顯干擾有機體且不會終止該投服之化合物之生物活性及性質的載體或稀釋劑。

”藥學上可接受之賦形劑”係指加入藥學組成物中，以進一步協助投服化合物之惰性物質。賦形劑之非限定實例包括碳酸鈣、磷酸鈣、多種不同之糖類及澱粉、纖維素衍生物、明膠、蔬菜油及聚乙二醇之類型。此文所使用之’’藥學上可接受之鹽’’ 一詞係指那些保有該母化合物之生物有效性及性質之鹽類。這類鹽包括酸加成鹽，其可藉由將母化合物之游離鹼與無機酸（諸如氫氯酸、氫溴酸、硝酸、磷酸、硫酸及過氯酸等）或有機酸（諸如醋酸、草酸、（D )或（L )蘋果酸、順-丁烯二酸、甲磺酸、乙磺酸、對-甲苯磺酸、柳酸、酒石酸、檸檬酸、琥珀酸或丙二酸等）反應來取得。此文所使用之"有效量”或π治療上有效量’’一詞係指當將其給予哺乳動物（宜爲人類）時能促成可偵測到之治療反應（此係與無該化合物存在時所偵測到之反應相比較）的量。治療反應（諸如，但不限於：增加總存活率、抑制及/或減少腫瘤生長（包括腫瘤大小停滯）、腫瘤大小、轉移等）可輕易地藉由多種本技藝所認可之方法（包括， -20- (17) 200824696 如：此文中所揭示之這類方法）來評估。本技藝之技術熟習人士了解CpG ODN (本發明所投服之化合物或組成物）之有效量將有所不同且可輕易地根據多種因素（諸如接受治療之疾病或病況、疾病之期別、接受治療之哺乳動物的年齡、健康及生理狀況、疾病之嚴重性、投服之特定的CpG ODN化合物，等）來決定。 π治療上有效量”或”有效量”係描述將一或多種惡性疾

病之症狀減至可偵測到之某種程度時所需之作用劑的量，減少之症狀係包括，但不限於：（1 )減少癌細胞之數目 ;(2 )減小腫瘤大小；（3 )抑制（即，減緩至某種程度，宜爲停止）癌細胞浸潤入周圍器官；（4 )抑制（即，減緩至某種程度，宜爲停止）腫瘤轉移；（5 )抑制腫瘤生長至某種程度；（6 )緩和或減少一或多種與疾病相關之症狀至某種程度；（7 )減輕或減少與服用抗癌劑相關之副作用；及/或（8 )增加患者之總存活率（此增加係指相對於在接受標準照護之具指定腫瘤類型或惡性疾病之患者中所觀察到者）。 ”維持有效量”係描述將在治療方案期間所取得之治療效益以可偵測到之方式維持時所需之作用劑的量治療效益包括，但不限於：（1 )抑制癌細胞數目增加；（2 )抑制腫瘤大小增加；（3 ) 抑制癌細胞浸潤入周圍器官；（ 4 )抑制腫瘤轉移；（5 )緩和或減少一或多種與疾病相關之症狀至某種程度；（6 )抑制一或多種與該疾 '病相關之症狀再發或開始。 -21 - (18) 200824696 組合此文中所提供之教示，經由在不同活性化合物中選擇及評估各因子（諸如效力、相關生物可利用性、患者體重、不良副作用之嚴重性及較佳之投服模式）可規劃出不會引起實質毒性而可全然有效地治療特定個體之有效的預防性或治療性治療方案或維持期。用於任何特定應用之治療或維持有效量可根據，諸如：接受治療之疾病或病況、疾病或病況之嚴重性及個體之健康和大小之類的因子而

有不同。本技藝之一般技術人士可根據經驗，而不需過度實驗來決定免疫刺激性ODN (如：CpG ODN、1018 ISS 或IMOxine® )、化療劑及/或其他治療劑之治療上有效量此處所使用之”治療"係指減少患者所感受之疾病症狀 (即，腫瘤生長及/或轉移、或其他由免疫細胞之數目及/ 或活性所促成之作用，等）的頻率。此一詞包括投服CpG ODN、本發明之化合物或作用劑以預防或延遲疾病之症狀開始、倂發症或生化指標（如：攝護腺癌中之PS A水準提高）、緩和症狀或阻止或抑制疾病、病況或失調進一步發展。治療可爲預防性（如：預防或延遲疾病開始、預防其臨床症狀或不明顯之臨床症狀表現）或治療性地遏制或緩和疾病表現後之症狀。此處所使用之"預防”係指抑制患者所感受之疾病症狀開始或發展（即，腫瘤生長及/或轉移、或其他由免疫細胞之數目及/或活性所促成之作用等）。此一詞包括投服

CpG ODN、本發明之化合物或作用劑以抑制或延遲疾病之 -22- (19) 200824696 症狀開始、倂發症或生化指標（如：攝護腺癌中之PSA水準提高）。

單獨之免疫刺激性ODN及/或化療劑或二者一起之治療上有效量或維持有效量可先從動物模型測定。治療或維持之有效劑量亦可從人類之特殊免疫刺激性ODN及/或化療劑的數據或其他已知顯示出類似之藥學活性的化合物之數據測得。經由腸胃道外途徑投藥時可能需要較高之劑量。施用之劑量可根據投服之化合物的相關生物可利用性及效力來調節。根據上述方法及其他本技藝所熟知之方法來調節劑量以取得最大效力爲本技藝所熟知且在本技藝之一般技術人士之能力範圍內。此處所使用之”用法說明材料π —詞包括用於溝通套組中本發明化合物、組合物及/或組成物於影響、減緩或治療此文中所列舉之不同疾病或失調上之用途的刊物、記錄、圖表或任何其他表達媒體。選擇性地，或替代地，該用法說明材料可描述一或多種緩和細胞、組織或哺乳動物（包括此文中他處所揭示者）中之疾病或失調的方法。套組之用法說明材料可，例如：附加於含有CpG ODN、本發明化合物及/或組成物之容器上或與含有該化合物及/或組成物之容器一起運送。或者，該用法說明材料可與容器分開運送，但該接受者係將用法說明材料與化合物協同使用。本發明之CpG ODN及/或化療劑可在醫療分配器中供應。醫療分配器爲一種包裝，其界定數個醫療貯存隔室， -23- (20) 200824696 各隔室係用於儲存藥品之個別單位。治療之整個醫療系列係儲存在數個醫療貯存隔室中。界定數個醫療貯存隔室之包裝可爲任何型式之可拋式製藥包裝或將藥品保持在個別隔室中的卡片容器。例如：該包裝爲從卡片容器構成之泡形罩，其可從堅硬之紙類材料、泡形罩薄片及支撐薄片製成。這類卡片容器爲本技藝之一般技術人士所熟知。

例如：醫療分配器可貯存治療之整個醫療系列。分裝器可包含日期指示，以指示服用個別單位之藥品的日子。這些可沿著醫療包裝之第一側標示。亦可標示劑量指示，例如：沿著與該醫療包裝之第一側垂直之醫療包裝第二側標示，以藉此指示服用個別單位之藥品的時間。該單位劑量可包含在爲泡形罩包裝之分配器中。除非另外指出，”患者"或π個體’’等詞可交換使用且係指哺乳動物（諸如：人類患者和非人類之靈長類，以及動 φ 物個體，諸如兔子、大鼠及小鼠及其他動物）。較佳地，該患者係指人類。 ’’組合療法Μ包含投服免疫刺激性ODN (如：CpG ODN ，PF 3 5 1 2676、1018 ISS、IMOxine®及化療劑）來作爲特殊治療方案（其選擇性地包含維持期）之一部分，以自這些治療劑之共同作用提供有利之效果。該組合療法之有利效果包括，但不限於：來自治療劑組合之藥物動力學或藥效的共同作用。組合投服這些治療劑通常係在限定之時期內進行（根據所選擇之組合通常爲數分鐘、數小時、數 -24- (21) 200824696 天或數週）。”組合療法”通常不欲包含因偶然或任意投服二或多種爲分別之單一治療方案的一部分的治療劑而造成的本發明組合物。

”組合療法"包含以依序方式投服這些治療劑（亦即，其中各治療劑係在不同時間給藥）以及以大體上同時之方式給予這些治療劑或至少二種該治療劑。大體上同時給藥可經由，如：給予個體具有固定比例之各治療劑的單一膠囊或數個各治療劑之單一膠囊來完成。依序或大體上同時給予各治療劑可藉由任何適當之途徑生效，這些途徑包括 ’但不限於：口服途徑、靜脈內途徑、肌肉內途徑、皮下途徑及透過黏膜組織直接吸收。治療劑可經由相同或不同途徑投服。例如··組合療法之第一種治療劑（如·· CpG ◦ DN )可經由皮下注射投服，第二種治療劑（如：化療劑 )可經由靜脈內途徑投服。再者，所選擇之組合的第一種治療劑可經由靜脈內注射投服而該組合之其他治療劑可經口投藥。或者，例如：可將二種治療劑均經口投服或將二種治療劑經由靜脈內或皮下注射投服。除非另外具體指出，本專利說明書中”依序”一詞係指以規律之順序或次序爲特徵，例如：若劑量方案包括投服 CpG ODN及化療劑，則順序劑量方案可包含在化療劑之前、同時、大體上同時或之後投服CpG ODN，但二種作用劑係以規律之順序或次序投藥。除非另外具體指出，” 分別” 一詞係指將一個與另一個分開。除非另外具體指出，M同時”一詞係指在相同時間發生或完成，即，本發明之 -25- (22) 200824696 化合物係在相同時間投藥。”大體上同時”一詞係指該化合物彼此係在數分鐘內投藥（即，彼此係在1 0分鐘內投藥 )且欲包含聯合投服及連續投服，若爲連續投服，則其時間上僅分隔很短的時期（如：醫師分別給予二種化合物所費之時間）。此文所使用之同時投服及大體上同時投服可交換使用。依序投服係指暫時分別投服ODN及化療劑。

π組合療法π亦可包含投服如上述之治療劑與其他生物活性成分（諸如，但不限於：第二種且不同之抗惡性腫瘤劑、樹突狀細胞疫苗或其他腫瘤疫苗）及非藥物療法（諸如，但不限於：外科手術或放射治療或此二者）。其中該組合療法還包含放射治療時，該放射治療可在任何合適之時間進行，只要可自治療劑及放射治療之組合的共同作用中取得益處。例如，在適當之案例中，當將放射治療從治療劑之給藥中暫時移除時（也許數日或數過）仍可取得有益之效果。此文所使用之”輔助療法”係指在初次治療後給予之治療，包括，但不限於：放射療法、化療、荷爾蒙療法，等。輔助療法之目標係增加患者緩解或治癒之機會，以增加患者之總存活效益並協助降低復發之風險。因此，若將 CpG ODN以輔助型式投服是可理解的，其將在初步治療後給予患者，例如：給予患者放射治療及/或化療方案後再給予CpG ODN之療程。就此而言，根據輔助療法之目的，CpG ODN之劑量可考慮爲治療性劑量或維持劑量。” 非輔助療法”一詞係指在初步治療之前所給予的治療，包 -26- (23) 200824696 括，但不限於放射治療、化療，等。在非輔助療法之設定中，該CpG ODN之劑量爲治療性劑量。 ’’第一線治療”係指病況或疾病所指定使用之第一種類型的療法，或治療特殊類型之癌症的第一種選擇療法。因此，”第二線治療π —詞當然係指當第一線治療不成功時所指定之治療’而"第三線治療"係指當最初之’治療及接下去之治療均不成功時所規定使用之治療方案。

”轉移”或”轉移之癌症”係指癌症從身體之一部分散佈至另一部分。已散佈之由細胞形成之腫瘤稱爲”轉移之腫瘤”或”轉移”。轉移之腫瘤含有類似於原始（原發）腫瘤中所含有者之細胞。 ’’緩解’’係指癌症之徵兆及症狀減少或消失。在部分緩解中，癌症之一些，但非全部徵兆及症狀無法偵測到。在完全緩解中，癌症之全部徵兆及症狀均消失，但癌症細胞可能保留在體內。 ”總存活期”係指已存活一段界定時間之患者的百分比。此一詞通常記錄爲從診斷或治療開始的時間，且其係與 ’存活率”同義。 I.治療方法本發明考慮治療不同腫瘤類型之方法。於一較佳體系中，本發明特別關於治療肺癌、乳癌、黑色瘤、皮膚Τ-細胞淋巴瘤及非何杰金氏瘤之方法。下列爲經診斷出具有其中一種這類癌症之患者目前所有之治療選擇的簡單摘要。 -27- (24) 200824696 (a )肺癌如上述，本技藝之一般技術人士了解肺癌可分成二種主要類型，非-小細胞肺癌（NSCLC )及小細胞肺癌（ SCLC )。各類型之肺癌係以不同方式生長及散佈並可以不同方式治療。NSCLC有3種亞型：鱗狀細胞癌、腺癌（包括支氣管肺泡癌）及大細胞未分化癌。然而，NSCLC之

亞型不會影響治療之選擇。SCLC通常可替換稱爲燕麥細 / 胞癌、小細胞未分化癌及分化不良之神經內分泌癌。 NSCLC通常係藉由組合一或多種化療劑來治療且化療劑通常係週期循環投藥，各治療期之後有一恢復期。化療週期通常持續約21-28天，且初次治療通常涉及4-6個週期。恢復期通常係根據週期中所指定之療法類型及患者病況改變。最常用於NSCLC之第一線化療的藥物組合爲順鉛或卡鉑加上下列作用劑之一：太平洋紫杉醇、多烯紫杉醇、吉西他汀、長春瑞賓、伊立替康、依托伯苷或長春花鹼。用於NSCLC之第二線治療的化療法或標靶治療包括單獨使用多烯紫杉醇或吉菲特尼。最常用於SCLC之初次化療的藥物組合爲順鉑與依托伯苷或卡鉑與依托伯苷（用於限定期別），以及順鉑與依托伯苷、卡鉑與依托伯苷或順鉛與伊立替康（用於延展期別）。若SCLC再發，則使用之化療藥物包括：（〇若在2至3個月內發生再發則使用伊弗法醯胺、太平洋紫杉醇、多烯紫杉醇或吉西他汀；（b )若在2至3個月至6 -28- (25) 200824696 個月內發生再發則使用托波替康（topotecan )、伊立替康、環磷醯胺/多柔比星/長春新鹼、吉西他汀、太平洋紫杉醇、多烯紫杉醇、口服依托伯苷、甲胺喋呤或長舂瑞賓； ((〇 6個月後發生再發則可重複使用原始之化療法。 (b )乳癌

最常用於治療乳癌之組合爲：（a )環磷醯胺（ Cytoxan )、甲胺喋玲（A m e thopterin，Mexate，Folex)及氟尿嘧 D定（Fluorouracil，5-FU，Adrucil) ; (b)環磷醯胺、多柔比星（Adriamycin )及氟尿嘧啶；（c )多柔比星（Adriamycin )及環鱗醯胺；（d )多柔比星（ Adriamycin )及環磷醯胺與太平洋紫杉醇；（e)多柔比星（Adriamycin )，再使用 CMF ; ( f)環磷醯胺、表阿黴素及氟尿嘧啶。其他用於治療乳癌婦女之化療藥物包括多烯紫杉醇、長春瑞賓、吉西他汀、卡倍他濱及曲妥珠單抗。另外，數種阻斷動情激素之作用或降低動情激素水準之方法可用來治療乳癌。動情激素主要係由女性卵巢製造直到停經，然後再由脂肪組織製造，動情激素促進約2/3 之乳癌（那些含有動情激素或黃體脂酮受體者）生長，因此，其爲治療乳癌之關鍵標靶。最常用之抗動情激素藥物爲塔莫西芬。其係以藥九形式每日服用。若該癌症含有動情激素或黃體脂酮受體，手術後服用塔莫西芬（通常爲5年）可降低癌症再發的機會 -29- (26) 200824696 。塔莫西芬亦可用來治療轉移之乳癌。其亦可用來預防高危險群婦女發展出乳癌。拉洛西芬（Evista )、托利米芬 (toremifene) (Fareston)或弗維斯川（fulvestrant)( Faslodex)亦可考慮甩來治療乳癌。

再者，芳香酶抑制劑使停經婦女停止製造動情激素且其已被核准用於治療乳癌。這些藥物有來曲唑（Femara) 、阿那曲嗤（Arimidex )及伊西美坦（Aromasin )。其係藉由阻斷停經婦女體內負責製造少量動情激素之酶來作用 (c )黑色瘤常用來治療黑色瘤之化療藥物包括：（a )單獨使用達卡巴肼（Dacarbazine)(亦稱爲DTIC)或與其他化療藥物，諸如卡沐汀（earmustine )(亦稱爲BCNU)及順鉑一起使用。此三種化療藥物與塔莫西芬（最常用於治療乳癌之荷爾蒙療法藥物）之組合稱爲"Dartmouth方案”； (b )順鉑、長春花鹼及DTIC爲另一用於治療黑色瘤之化療組合；（c)替莫唑胺（Temodar)爲類似於DTIC作用之藥物，但其可以藥九之形式服用。免疫療法可增強及促進患者之免疫系統’以更有效地辨識並破壞癌細胞。用於治療罹患末期黑色瘤之患者的免疫療法有數種。細胞活素爲以一般方式活化免疫系統之蛋白質。二種細胞活素，干擾素-ex及介白素，可協助增強罹患黑色瘤之患者的免疫力。此二種藥物均可協助約1 0% -30- (27) 200824696 至20%之患者縮小轉移（第瓜及ιν期）之黑色瘤。具較深之黑色瘤的患者通常具有從原始黑色瘤脫離出並移至身體其他部分之癌細胞。干擾素爲身體對感染反應所產生之免疫物質。干擾素-a2b可作爲輔助（加入）治療以預防脫離組織之細胞生長。 (d)非-何杰金氏淋巴瘤

皮膚T-細胞非何杰金氏淋巴瘤爲一種非何杰金氏淋巴瘤（NHL )(—種淋巴系統之癌症）之類型。CTCL爲約佔所有NHL病例之5%的罕見病況。其爲一種τ-淋巴球之癌症且最常出現在年齢介於40至60之間的人們。不似其他型式之非何杰金氏淋巴瘤，CTCL主要影響皮膚。其係由皮膚中一種類型之T-細胞不受控制生長所造成且其成因未知。CTCL中最常見之類型爲真樣淋巴瘤（mycoses fungoides )或 Sezary 症候群。Sezary 症候群爲一種 CTCL 之特殊類型，其中大面積之皮膚或淋巴腺受到影響且亦可在血中找到T-淋巴球。真樣淋巴瘤爲其他血液未受影響之 CTCL類型的通用名稱° CTCL可以多種方式（單獨或組合療法）治療。大部分之治療方法可用於疾病之任何期別。治療方法之選擇通常係根據皮膚受影響之程度而定。若大面積之皮膚受到影響則適合 PUVA治療方法。若涉及採用補骨脂素（ psoralens )(其使皮膚對紫外線之有利作用敏感）’ 一旦藥物有時間收集在患者之皮膚中，患者即進入含有紫外線 -31 - (28) 200824696 之封閉的空調室內。此治療可一週進行數次。

若淋巴瘤仍爲早期，通常係以皮膚乳膏（諸如類固醇 )與滋潤油膏治療，並以非經常性之PUVA療程來控制淋巴瘤。若僅有一或二小區之皮膚受影響則可使用用於治療早期疾病之放射療法。若需要時，可在有斑塊及腫瘤之皮膚區域施予放射治療。在受影響之區域可施予二或三個低劑量之放射治療之劑量。若淋巴瘤散佈得更廣但未深入皮膚表層下時，可使用放射治療來治療整個皮膚表面。此稱爲全身皮膚電子束治療。化療法可以油膏型式直接敷在全身皮膚表面，或者，若病況惡化，則靜脈內化療法亦爲一種治療選擇。干擾素亦可經由皮下途徑給藥。非何杰金氏淋巴瘤通常係以用於低度惡性淋巴瘤之瘤可寧（chlorambucil)或氟達拉濱（fludarabine) 治療，以及用於高度惡性淋巴瘤之單獨的環磷醯胺、多柔比星、長春新驗及潑尼松龍（p r e d n i s ο 1 ◦ n e )組合物或加上利多西單抗（rituximab )來治療。 Π.免疫刺激性ODNs 免疫刺激性ODNs或CpG ODNs含有被發現可引出免疫反應之特殊序列。這些特殊序列稱爲”免疫刺激性再現單位”而含有免疫刺激性再現單位之寡核苷酸稱爲”免疫刺激性寡核苷酸分子’’及，與其相等之”免疫刺激性寡核苷酸 "。免疫刺激性寡核苷酸包括至少一免疫刺激性再現單位 -32- (29) 200824696 且，較佳地，該再現單位爲內再現單位。”內免疫刺激性再現單位”一詞係指在寡核苷酸序列（其在5’及3’二端均較再現單位序列至少多一個核苷酸）內之再現單位序列的位置。

CpG寡核苷酸包括至少一未甲基化之CpG二核苷酸。含有至少一未甲基化之CpG二核苷酸的寡核苷酸爲一種含有胞嘧啶-鳥嘌呤二核苷酸序列（即，’’CpG DNA"或含有藉由磷酸鍵連接V鳥嘌呤之5’胞嘧啶的DNA)且活化免疫系統之寡核苷酸分子。整個CpG寡核苷酸可爲未甲基化或可部分未甲基化，但至少5’CG3’之C必須爲未甲基化。 CpG寡核苷酸之B類別係由至少下式代表： 5,XiX2CGX3X43, 其中Xi、X2、X3及X4爲核苷酸。X2可爲腺苷酸、鳥嘌呤或胸腺嘧啶。

CpG寡核苷酸之B類別包括由至少下式代表之寡核苷酸： 5,NiXiX2CGX3X4N23, 其中Xi、X2、X3及X4爲核苷酸，N爲任何核苷酸且化及N2爲各由0-25個N所組成之寡核苷酸序列。X!X2 可爲選自下列之二核苷酸：GpT、GpG、GpA、ApA、ApT 、ApG、CpT、CpA、CpG、TpA、TpT 及 TpG ;且 X3X4 可爲選自下列之二核苷酸：TpT、ApT、TpG、ApG、CpG、 TpC、ApC、CpC、TpA、ApA jCpA〇

CpG寡核苷酸之B類別係揭示於PCT已發表之專利 -33- (30) 200824696 申請案 PCT/US95/0 1 570 和 PCT/US97/1 979 1，及分別於 20 01年2月27日和2001年5月29日核准之USP 6，1 94,3 8 8 B1 及 USP 6,23 9，116 B1 中。

免疫刺激性寡核苷酸分子可具有同質骨架（如：全然之磷酸二酯或全然之硫代磷酸酯）或嵌合骨架。在本發明之目的中，嵌合骨架係指部分安定之骨架，其中至少一核苷酸間鍵（internucleotide linkage)爲磷酸二酯或似磷酸二酯且其中至少另一核苷酸間鍵爲安定之核苷酸間鍵，其中該至少一磷酸二酯或似磷酸二酯鍵及該至少一安定之鍵並不相同。由於硼烷基膦酸酯鍵被認爲較磷酸二酯鍵相對穩定，在骨架之嵌合性質方面，硼烷基膦酸酯鍵可據此被歸類爲似磷酸二酯鍵者或爲安定者。例如，於一較佳體系中，根據本發明之嵌合骨架可包括至少一磷酸二酯（磷酸二酯或似磷酸二酯）鍵及至少一硼烷基膦酸酯（安定）鍵。於另一較佳體系中，根據本發明之嵌合骨架可包括硼烷基膦酸酯鍵（磷酸二酯或似磷酸二酯）及硫代磷酸酯（安定）鍵。"穩定之核苷酸間鍵”應指與磷酸二酯核苷酸間鍵相較下，對活體內降解（如：經由外-或內-核酸酶）較具抗性之核苷酸間鍵。較佳之穩定的核苷酸間鍵包括，但不限於：硫代磷酸酯、二硫代磷酸酯、甲基膦酸酯及甲基硫代磷酸酯。其他穩定之核苷酸間鍵包括’但不限於：肽、烷基、脫磷酸型鍵及其他如上述者。經過修改之骨架（諸如硫代磷酸酯）可利用自動技術，使用磷酸醯胺酯或膦酸酯化學物質來合成。芳基及 -34- (31) 200824696 烷基膦酸酯可依，如：美國專利第4,469,863號中之描述製備；而如美國專利第5,023,243號及歐洲專利第〇92,574 號中所描述之烷基磷酸三酯（其中該帶電荷之氧部分係經烷基化）可藉由自動化固相合成法，利用市售之試劑製備。用於修改其他DNA骨架及取代的方法已有記錄（

Uhlmann E et al. (1 9 9 0) Chem Rev 90:544; Good child J (1990) Bioconjugate Chem 1:165)。用於製備嵌合性寡核

苷酸之方法亦爲已知方法。例如：授讓予Uhlmann等人之專利中已描述這類技術。混合骨架之經過修改的ODN可利用市售之DNA合成儀及標準之亞磷胺化學合成。（F. E. Eckstein,

Oligonucleotides and Analogues — A Practical Approach IRL Press，Oxford，UK，1991，and M. D. Matteucci and M. H. Caruthers，Tetrahedron Lett. 21，7 1 9 (1 9 8 0) ) 〇偶合後，手[J 用 Beaucage 試齊！1 ( R. P. Iyer, W. Egan，J. B. Regan and S. L. Beaucage, J. Am. Chem. S o c. 112，1 2 5 3 (1 990)) (0.075M，在乙腈中）或苯基乙醯基二硫化物（PADS ) ，藉由硫化反應引入PS鍵，再以醋酸酐、在四氫呋喃中之2,6-二甲基吡啶（1 : 1 : 8 ;體積：體積：體積）及N-甲基咪唑（1 6%，在四氫呋喃中）封端。此封端步驟係在硫化反應後進行，以將在應坐落著硫代磷酸酯鍵之位置處所形成之不欲有的磷酸二酯（P〇 )鍵減至最少。在引入磷酸二酯鍵之情況中（如：在CpG二核苷酸處），中間磷_ ΠΙ係以碘（在水/吡啶中）溶液處理來氧化。將ODN從固 -35- (32) 200824696 相支撐裂解，最後再以濃氨水處理（在50°C，15小時）去保護後，將其藉由 HPLC，在Gen-Pak Fax管柱（ Millipore-Waters)上’利用NaCl梯度（如：緩衝液A: 在乙腈/水（=1: 4 /體積··體積）中之l〇mM Na2P〇4，pH 6·8 ;緩衝液B :在乙腈/水=1 : 4/體積：體積中之lOmM NaH2P04，1·5Μ NaCl;在 30 分鐘內從 5 至 60% B，速度爲1毫升/分鐘）或藉由毛細管凝膠電泳法進行分析。

ODN可藉由HPLC或在Source高效能管柱（Amersham Pharmacia )上藉由FPLC純化。將HPLC同質餾分合倂並經由C18管柱或藉由超濾作用脫鹽。藉由MALDI-TOF質譜儀分析ODN以確認計算出之質量。本發明之寡核苷酸亦可包括其他修改。這些.包括非離子性DNA類似物，諸如：烷基-及芳基磷酸酯（其中該帶電荷之膦酸酯氧係被烷基-或芳基團所取代）、磷酸二酯及烷基磷酸三酯，其中該帶電荷之氧部分係經烷基化。在一端或二端含有二醇（諸如四乙二醇或六乙二醇）之寡核苷酸亦顯示出大體上對核酸酶降解具抗性。於某些較佳體系中，該寡核苷酸可爲軟性或半-軟性寡核苷酸。軟性寡核苷酸爲具部分安定之骨架的免疫刺激性寡核苷酸，其中磷酸二酯或似磷酸二酯核苷酸間鍵僅出現在至少一內嘧啶-嘌呤二核苷酸（YZ )內且直接與其鄰接。較佳地，YZ爲YG，一種嘧啶-鳥嘌呤核苷（YG)二核苷酸。該至少一內YZ二核苷酸本身具有磷酸二酯或似磷酸二酯之核苷酸間鍵。直接與該至少一內YZ二核苷酸 -36- (33) 200824696 鄰接之磷酸二酯或似磷酸二酯核苷酸間鍵可在該至少一內 YZ二核苷酸之5’端、3’端或5'及31二端。尤其是，磷酸二酯或似磷酸二酯核苷酸間鍵涉及”內二核苷酸"。內二核苷酸通常意指任何一對藉由核苷酸間鍵連接之相鄰核苷酸，其中該對核苷酸中無一核苷酸爲終端核苷酸，即：在該對核苷酸中無一核苷酸爲界定該寡核苷酸之5’或3’端的核苷酸。因此，爲η個核苷酸長之線性

寡核苷酸共具η-1個二核苷酸且僅有η-3個內二核苷酸。在內二核苷酸中之各核苷酸間鍵爲內核苷酸間鍵。因此’ 爲η個核苷酸長之線性寡核苷酸共具η-1個核苷酸間鍵且僅有η-3個內核苷酸間鍵。因此，經策略性放置之磷酸二酯或似磷酸二酯核苷酸間鍵係指置於寡核苷酸序列中任何一對核苷酸之間的磷酸二酯或似磷酸二酯核苷酸間鍵。於某些較佳體系中，磷酸二酯或似磷酸二酯核苷酸間鍵並非置於最接近5’或3’端之核苷酸對之間。較佳地，直接與該至少一內 ΥΖ二核苷酸鄰接之磷酸二酯或似磷酸二酯核苷酸間鍵本身爲內核苷酸間鍵。因此，對序列Νι ΥΖ Ν2 (其中Νι及Ν2爲彼此各自獨立之任何單一核苷酸）而言，該ΥΖ二核苷酸具有磷酸二酯或似磷酸二酯核苷酸間鍵，且（a )當川爲內核苷酸時，Ν ]及γ 係藉由磷酸二酯或似磷酸二酯核苷酸間鍵連接，（b ) 當 N2爲內核苷酸時，Z及N2係藉由磷酸二酯或似磷酸二酯核苷酸間鍵連接，或（c)當Ni爲內核苷酸時，Νι及γ 係藉由磷酸二酯或似磷酸二醋核苷酸間鍵連接且當N2爲 -37 - (34) 200824696 內核苷酸時，Z及N2係藉由磷酸二酯或似磷酸二酯核苷酸間鍵連接。咸信，與完全穩定之寡核苷酸相較下，根據本發明之軟性寡核苷酸對核酸酶裂解相當敏感。不欲受限於特殊理論或機制，咸信：本發明之軟性寡核苷酸對裂解敏感而產生與全長軟性寡核苷酸相較下具減低或無免疫刺激性活性之片段。咸信：倂入至少一對核酸酶敏感之核苷酸間鍵（

尤其是接近寡核苷酸之中間）可提供一 ”關閉開關” ’此關閉開關改變寡核苷酸之藥物動力學，以減少寡核苷酸之最大免疫刺激性活性的持續期。此在需要避免與慢性局部發炎或免疫刺激相關之傷害的組織及臨床應用（如：腎臟）中特別重要。半-軟性寡核苷酸爲一種具部分安定之骨架的免疫刺激性寡核苷酸，其中磷酸二酯或似磷酸二酯核苷酸間鍵僅出現在至少一內嘧啶-嘌呤二核苷酸（YZ )內。與對應之全然安定的免疫刺激性寡核苷酸相較下，半-軟性寡核苷酸通常擁有增加之免疫刺激性效力。由於半-軟性寡核苷酸具較強效力，在某些情況中，半-軟性寡核苷酸所使用之有效濃度較低且具有較習知之全然安定的免疫刺激性寡核苷酸低之有效劑量，以取得所需之生物效果。咸信：半-軟性寡核苷酸之前述性質通常隨著涉及內 YZ二核苷酸之磷酸二酯或似磷酸二酯核苷酸間鍵的劑量增加而增加。因此，據信，例如：通常，在指定之具四個內YZ二核苷酸的寡核苷酸序列方面，具有四個內磷酸二 -38- (35) 200824696

酯或似磷酸二酯YZ核苷酸間鍵之寡核苷酸較具有三個內磷酸二酯或似磷酸二酯ΥΖ核苷酸間鍵之寡核苷酸更具免疫刺激性，該具有三個內磷酸二酯或似磷酸二酯γ Ζ核苷酸間鍵之寡核苷酸又較具有二個內磷酸二酯或似磷酸二酯 ΥΖ核苷酸間鍵之寡核苷酸更具免疫刺激性，而該具有二個內磷酸二酯或似磷酸二酯ΥΖ核苷酸間鍵之寡核苷酸則較該具有一個內磷酸二酯或似磷酸二酯γΖ核苷酸間鍵之寡核苷酸更具免疫刺激性。重要的是，即使僅包含一個內磷酸二酯或似磷酸二酯ΥΖ核苷酸間鍵之寡核苷酸亦較無內磷酸二酯或似磷酸二酯γ ζ核苷酸間鍵有利。除了磷酸二酯或似磷酸二酯核苷酸間鍵之數目外，沿著寡核苷酸長邊之位置亦可影響效力。除了在較佳之內部位置處的磷酸二酯或似磷酸二酯核苷酸間鍵外，軟性及半-軟性寡核苷酸通常還包括對降解具抗性的5’及3’二端。這類對降解具抗性的終端可涉及任何可產生較未修改之終端對核酸外切酶分解具增加之抗性的適當修改。例如：該Υ及3 ’二端可藉由包含至少一個在骨架之磷酸酯修改而穩定化。於一較佳體系中，該在各端之至少一個骨架之磷酸酯修改係獨立地爲硫代磷酸酯、二硫代磷酸酯、磷酸甲酯或硫代磷酸甲酯核苷酸間鍵。於另一較佳體系中，該具降解抗性之終端包含一或多個在3 ·端藉由肽或醯胺鍵連接之核苷酸單位。磷酸二酯核苷酸間鍵爲天然寡核苷酸所特有之鍵的類型。該磷酸二酯核苷酸間鍵包括側面連接二個橋連氧原子 -39- (36) 200824696 且與另二個氧原子（一帶電，另一不帶電）鍵結的磷原子。當減少組織寡核苷酸之半生期變得很重要時，磷酸二酯核苷酸間鍵爲特佳者。似磷酸二酯核苷酸間鍵爲含磷之橋連基團，其與磷酸二酯爲化學上相似及/或非立體異構型上相似。與磷酸二酯之類似性的測量包括對核酸酶分解的感受性及活化

RNase Η之能力。因此，例如：在磷酸二酯方面（但硫代磷酸酯則不），寡核苷酸對核酸酶分解具敏感性，但磷酸二酯及硫代碟酸酯寡核苷酸二者均可活化RNAse Η。於一較佳體系中，該似磷酸二酯核苷酸間鍵爲硼烷基磷酸酯（或等同於硼烷基膦酸酯）鍵。美國專利第5,177,198號；美國專利第5,859,231號；美國專利第6,160,109號；美國專利第 6,207,8 1 9 號；Sergueev，等人，（1 998 ) J Am Chem Soc 1 20 : 94 1 7-27。於另一較佳體系中，該似磷酸二酯核苷酸間鍵爲非立體異構純型之Rp硫代磷酸酯。咸信，該非立體異構純型之Rp硫代磷酸酯對核酸酶分解較敏感且在活化RNAse Η上較混合的或非立體異構純型之 Sp硫代磷酸酯爲佳。CpG寡核苷酸之立體異構物爲已出版之 PCT 申請案 PCT/US 9 9/17 100 (W0 00/06588)之主題。需注意，本發明之目的中，”似磷酸二酯核苷酸間鍵”一詞具體排除二硫代磷酸酯及甲基膦酸酯核苷酸間鍵。如上述，本發明之軟性及半-軟性寡核苷酸可在C和 G之間具有似磷酸二酯鍵。似磷酸二酯鍵之一種實例爲Rp 構型之硫代磷酸酯鍵。根據測量活性之時間點，寡核苷酸 -40 - (37) 200824696

P-對掌性對CpG寡核苷酸之免疫活性可具有明顯之相反作用。在早先之40分鐘時間點時，硫代磷酸酯CpG寡核苷酸之Rp，但非Sp立體異構物可誘導老鼠脾臟細胞中之 JNK磷酸化。相反地，當在較晚之44小時的時間點分析時，該Sp，但非Rp立體異構物具有刺激脾臟紐胞增殖之活性。此Rp與Sp立體異構物之動力學及生物活性中的差異並非來自細胞吸收中的任何差異，而較可能是來自該P -對掌性的二種相反的生物角色。首先，與Sp相較下，Rp 立體異構物在早先之時間點所具有之增強的刺激免疫細胞的活性表示Rp可更有效地與CpG受體，TLR9，交互作用，或可誘導下游之傳訊通路。另一方面，與Sp相較下， Rp PS-寡核苷酸較快速降解而使傳訊之時期縮短許多，如此，當在較晚之時間點測試時，該Sp PS-寡核苷酸顯示出較具生物活性。

CpG二核苷酸本身之P-對掌性可達到很強之作用。與立體-任意CpG寡核苷酸相較下，其中該單一 CpG二核苷酸以Rp型連結之同質物的活性稍佳，而含有Sp鍵之同質物幾乎不具誘導脾臟細胞增殖之活性。因此，寡核苷酸之骨架組成物可爲異質性，以藉此含有任何連接在一起之聚合物單位的可能組合。 ”寡核苷酸”一詞亦包含具有取代或修改之寡核苷酸，諸如在糖類中者。例如：其包括具有骨架糖類之寡核苷酸 ’這些骨架糖類在2»位置處共價連接除了羥基外，在5’位置處共價連接除了磷酸基或羥基外之低分子量有機基團。 -41 - (38) 200824696 因此，經過修改之寡核苷酸可包含一 2'-Ο-烷基化核糖基。另外，經過修改之寡核苷酸可包含糖類，諸如阿拉伯糖或21-氟基阿拉伯糖來取代核糖。與天然RNA及DNA相較下，本發明之免疫刺激性寡核苷酸可包含多種不同之涉及磷酸二酯核苷酸間橋連或β-D-核糖單位之化學修改及取代。化學修改之實例爲本技藝之技術熟習人士所已知且描述於，如：Uhlmann E et al.

(1 9 9 0) Chem Rev 90:543; M Protocols for Oligonucleotides and Analogs” Synthesis 及 Properties & Synthesis and

Analytical Techniques，S. Agrawal，Ed，Humana Proess，

Toto wa5 USA 1 993; Crooke ST et al. (1 996) Annu Rev

Pharmacol Toxicol 36:107-129; and Hunziker J et al. (1 995) Mod Synth Methods 7:3 3 1-4 17 中。根據本發明之寡核苷酸可具有一或多種修改，與由天然DNA或RNA所組成之具相同序列的寡核苷酸相較下，其中各修改係位於特定之磷酸二酯核苷酸間橋及/或特殊々-D-核糖單位處。例如：本發明係關於可能包含一或多種修改的寡核苷酸且其中各修改係獨立地選自下列：（a )藉由經過修改之核苷酸間橋取代位於核苷酸之3’及/或5’端處的磷酸二酯核苷酸間橋；（b )藉由脫磷酸橋取代位於核苷酸之3 ’ 及/或5 1端處的磷酸二酯橋；（c )藉由另一單位取代來自糖磷酸酯骨架之糖磷酸酯單位；及（d )藉由經過修改之糖單位取代Θ -D-核糖單位。寡核苷酸之化學修改的更多詳細實例如下： -42- (39) (39)200824696 位於核音酸之3’及/或5,端處的磷酸二酯核苷酸間橋可被經過修改之核苷酸間橋取代，其中該經過修改之核苷酸間橋係，如，選自下列：硫代磷酸酯、二硫代磷酸酯、 NRiR2-磷酸醯胺酯、硼烷基磷酸酯、α-羥苄基膦酸酯、磷酸酯_ ( Κ21) -〇-烷基酯、磷酸酯( c6-Ci2)芳基_ ( Ci-Cn ) -0-院基]酯、（Ci-q )烷基膦酸酯及/或（（：6-(：12 )芳基膦酸酯橋、（CVC^2 ) -α_羥甲基-芳基（如：揭示於 WO 95/0 1363 中者），其中（C：6-C12)芳基、（C6-C20 )芳基及（C6-cM)芳基係隨意地被鹵素、烷基、烷氧基、硝基、氰基所取代且其中R1及R2係彼此獨立地爲氫、 (C”C18 )-烷基、（C6-C2())-芳基、（c6-C14 )—芳基-( c 1 - C 8 ) - ί兀基，宜爲氣、（Ci_Ci8)-院基，以（C1-C4) -烷基及/或甲氧基乙基較佳，或者R1及R2與攜帶彼之氮原子一起形成5至6員之雜環，其可另外含有選自〇、S及 N之其他雜原子。藉由脫磷酸橋（其描述於，如：Uhlmann E及Peyman A in f, Methods in Molecular BiologyM, Vol?. 20, n Protocols for Oligonucleotides and Analogs"， S. Agrawal， Ed·， Humana Press，Totowa 1 9 9 3, Chapter 16，pp. 355ff 中）取代位於核苷酸之3’及/或5’端之磷酸二酯橋，其中脫磷酸橋係，如，選自下列：甲縮醛' 3’-硫代甲縮醛、甲基羥基胺、肟、伸甲基二甲基-肼撐、二伸甲楓及/或甲矽烷基團來自糖磷酸酯骨架（即，糖磷酸酯骨架係由糖磷酸酯 -43- (40) 200824696 單位所組成）之糖磷酸酯單位（即，/3 -D-核糖單位與磷酸二酯核苷酸間橋一起形成糖磷酸酯單位）可被其他單位所取代，其中該其他單位係，如：適合建立n嗎福啉基-衍生物”寡聚物者（如描述於 Stirchak EP et al. ( 1 989)

Oligonucleotides Res 17:612 9-41 中者），即，被嗎福啉基-衍生物單位所取代；或適合建立聚醯胺寡核苷酸者（ "PNA’·；如描述於 Nielsen PE et al. (1 994) Bi〇conjUg Chem 5:3-7中者），即，被PNA骨架單位所取代（如：被2 -胺乙基甘油所取代）。沒-D-核糖單位或/3 -D-2’-去氧核糖單位可被經過修改之糖單位所取代，其中該經過修改之糖單位係，如，選自下列：/3 核糖、a-D-21-去氧核糖、L-2’-去氧核糖、2·-F-2’-去氧核糖、2’-F-阿拉伯糖、烷基_核糖 (較佳地，2’-0- ( Ci-Cs )烷基-核糖爲2’-0-甲基核糖）、2:0- ( C2-C6 )烯基-核糖、2，-[0- ( )烷基-〇-( )烷基]-核糖、2f-NH2- 2*-去氣核糖、/3 -D·木-呋喃糖、a-阿拉伯呋喃糖、2，4-二去氧基-/3 -D-赤-六-吡喃糖及碳環形（如·· in Froehler J(1 992) Am Chem Soc 1 14:8320 中所描述者）及/或開鏈糖類似物（如：Vandendriessche et al· (1993) Tetrahedron 49: 7223 中所描述者）及 / 或二環糖類似物（如：Tarkov M et al. (1 993) Helv Chim Acta 76:48 1中所描述者）〇於某些較佳體系中，該糖爲-0-甲基核糖，尤其是藉由磷酸二酯或似磷酸二酯核苷酸間鍵連接之一或二個核 -44 - (41) 200824696 苷酸。

此處所描述之特定序列係由一組經過修改之鹼基定義。例如：字母Y係指含有胞嘧啶或經過修改之胞喷啶的核苷酸。此處所使用之經過修改之胞嘧啶爲天然或非天然之胞嘧啶的嘧啶鹼基類似物（其可取代此鹼基而不會減弱寡核苷酸之免疫刺激活性）。經過修改之胞嘧啶包括，但不限於：5-經取代之胞嘧啶（如：5_甲基-胞嘧啶.、5-氟-胞嘧啶、5-氯-胞嘧啶、5-溴-胞嘧啶、5_碘-胞嘧啶、羥基_ 胞嘧啶、5-羥甲基-胞嘧啶、5-二氟甲基-胞嘧啶及未經取代或經取代之5-炔基-胞嘧啶）、6-經取代之胞嘧啶、N4-經取代之胞赠D疋（如：N 4 -乙基-胞喷D定）、5 -氮雜-胞嚼B定、2 -锍基-胞嚼D定、異胞喷B定、假-異胞嘧B定、具縮合之環系的胞嘧啶類似物（如：N，N’-伸丙基胞嘧啶或啡咢井）及尿嘧啶和其衍生物（如：5 -氟-尿嘧啶、5 -溴-尿嘧啶、 5-溴乙烯基-尿嘧啶、4-硫基-尿嘧啶、5-羥基-尿嘧啶、5-丙炔基-尿嘧啶）。一些較佳之胞嘧啶包括·· 5 -甲基-胞嘧啶、5 -氟-胞嘧啶、5 -羥基-胞嘧啶、5 -羥甲基-胞嘧啶及 N4-乙基-胞嘧啶。於本發明之另一較佳體系中，該胞嘧啶鹼基係被通用鹼基（如：3-硝基吡咯、P-鹼基）、芳環系統（如：氟苯或二氟苯）或氫原子（d間隔基）所取代。字母Z係指鳥嗓哈或經過修改之鳥嘿B令鹼基。此處所使用之經過修改之鳥嘌呤爲天然或非天然之鳥嘌呤的嘌呤鹼基類似物（其可取代此鹼基而不會減弱寡核苷酸之免疫刺激活性）。經過修改之鳥嘌呤包括，但不限於：7-去氮 -45- (42) 200824696 雜鳥嘌呤、7-去氮雜-7-經取代之鳥嘌呤（諸如7-去氮雜_ 7 - ( C 2 - C 6 )炔基鳥嘌呤）、7 -去氮雜-8 -經取代之鳥嘌呤、次黃嘌呤、N2-經取代之鳥嘌呤（如：N2_甲基_鳥嘌呤 )、5-胺基-3-甲基- 3H，6H -嚷哩並[4,5-d]嚼陡_2,7-二酮、 2,6-二胺基嘌呤、2-胺基嘌呤、嘌呤、吲哚、腺嘌呤、經取代之腺嘌呤（如·· N6-甲基-腺嘌呤、8-合氧基—腺嘌呤）

、8-經取代之鳥嘌呤（如：8_羥基鳥嘌呤及8-溴鳥嘌呤）及6 -硫代鳥嘌呤。於本發明之另一較佳體系中，該鳥嘌呤鹼基係被通用鹼基（如：4 -甲基-吲哚、5 -硝基-u引哚及K-鹼基）、芳環系統（如：苯並咪唑或二氯苯並咪唑、1 -甲基-1H-[1，2,4]三唑-3-羧酸醯胺）或氫原子（d間隔基）所取代。寡核苷酸可能具有一或多個易接近之5,端。創造具有二個這類V端之經過修改的寡核苷酸是可能的。此可，如 ’透過3’-3’鍵連接二個寡核苷酸來產生具有一或二個易接 ^ 近之5’端的寡核苷酸來達成。該3’-3’鍵可爲磷酸二酯、硫代辦酸酯或任何其他經過修改之核苷酸間橋。用於取得這類鍵之方法爲本技藝所知。例如：這類鍵描述於S eliger， Η.; et al.， Oligonucleotide analogs with terminal 3' - 3f -and S'-S'-internucleotidic linkages as antisense inhibitors of viral gene expression, Nucleotides & Nucleotides (1991)， 10(1-3)，469-77 及 Jiang， et al·，Pseudo-cyclic oligonucleotides: in vitro and in vivo properties，

Bio organic & Medicinal Chemistry (1999)， 7(12)，2727- -46- (43) 200824696 2735 中。另外，其中該介於V 3’-端之核苷酸間的鍵不是磷酸二酯、硫代磷酸酯或其他經過修改之橋的連接之寡核苷酸可利用額外之間隔基（諸如三-或四-乙二醇磷酸酯部分 )來製備（Durand，M. et al，Triple-helix formation by and oligonucleotide containing one (dA) 12 and two (dT) 12 sequences bridged by two hexaethy lene glycol chains 5

Biochemistry (1992)，3 1 (3 8), 91 97-204，US Patent No. 565873 8，及 U S P at ent N o . 5 6 6 8 2 6 5 )。或者，該非核苷酸連接子可利用標準亞磷胺化學，自乙二醇、丙二醇衍生或自脫鹼基去氧核糖（d間隔基）單位衍生（Fontanel，

Marie Laurence et al., Sterical recognition by T4 polynucleotide kinase of non-nucleosidic moieties 5f-attached to oligonucleotides; Oligonucleotides Research (1 994)，22(11)，2022-7 )。該非核苷酸連接子可被倂入一或多次，或彼此合倂以容許欲連接之二個ODN的3’-端間保有任何所欲之距離。寡核苷酸對降解具部分抗性（如：穩定化者）。”穩定之寡核苷酸分子”應指在活體內對降解（如：經由外-或內-核酸酶）具相當抗性者。穩定寡核苷酸可經由修改骨架來完成。具有硫代磷酸酯鍵之寡核苷酸可提供最大活性並防止寡核苷酸被細胞內之外-及內-核酸酶降解。其他經過修改之寡核苷酸包括磷酸二酯改質之寡核苷酸、磷酸二酯與硫代磷酸酯寡核苷酸之組合、甲基膦酸酯、甲基硫代 -47- (44) 200824696 磷酸酯、二硫代磷酸酯、對-乙氧基及其組合。在任一端或二端含有二醇（諸如四乙二醇或六乙二醇）之寡核苷酸亦顯示出對核酸酶降解具實質抗性。

免疫刺激性寡核苷酸亦可在核苷酸或核苷酸-類似物部分之間含有一或多種不尋常之鍵。常有之核苷間鍵爲 3’5’-鍵。所有其他鍵均被視爲不尋常之核苷酸間鍵，諸如 2*5’-、5f5’-、、2’2·-、2*3’-鍵。2’至 5’之命名係根據核糖之碳原子選擇。然而，若使用非天然糖部分（諸如環-擴展之糖類似物（如：己糖、環己烯或吡喃糖）或二-或三-環形糖類似物），則此命名係根據該單體之命名改變。在3’-脫氧基-β-D-核糖吡喃糖類似物（亦稱爲p-DNA )中，該單核苷酸係，如：經由4’2’-鍵連接。若寡核苷酸含有一 3’3’-鍵，則此寡核苷酸可具有二個未連接之5’-端。類似地，若該寡核苷酸含有一 5’5’-鍵，則此寡核苷酸可具有二個未連接之3’-端。核苷酸之未連接端的可接近性可能藉由其受體而更容易接近。二種不尋常之鍵的類型（3’3、及5’5〇均由 Ramalho Ortigao等人戶斤記述(Antisense Research and Development (1 9 92) 2, 129-46 )，據此，具有鍵之寡核苷酸被報導爲對核酸酶之裂解顯示出具有增加之穩定性。不同類型之鍵亦可合倂在一種分子內，此可能導致寡聚物分支。若寡核苷酸之一部分在3’-端經由3’3»-鍵連接第二個寡核苷酸部分且在2-端經由2(3’-鍵連接該分子之第三部分，如此將產生，如：具有三個5’-端分支（3」3’_ -48 - (45) 200824696 、2f3f -分支）的寡核苷酸。該鍵中之變化包括，但不限於下列：

3，-3’鍵其中X包括，但不限於：

或者，亦可考量下列變化： -49- (46) 200824696

3, 經由連接分支 3，-3'，2|-3，分支 X包括但不酿:

NH

Ο Y包括但不限於:

PF-3 5 12676爲一種類鐸受體-9 ( TLR-9 )激動劑，其藉由活化類漿細胞型樹狀細胞及B-淋巴細胞來提供具有作爲抗癌療法之潛在用途的經瞄準且特異之免疫治療型式。 PF-35 1 2 676爲一種寡去氧核苷酸（ODN)，其最適於特異 -50- (47) 200824696 結合TLR-9 ’以有效活化天然免疫反應及適應性免疫反應。PF-3 5 12676並非基因療法之反義odn且爲非基因毒性 PF-3 5 1 2676爲24個核苷酸長之合成的單股寡去氧核苷酸（ODN )分子，其在該提供活體內降解抗性之對核酸酶具抗性的硫代磷酸酯骨架上帶有天然DN A鹼基及糖。 . *5

PF-3 5 1 2676屬於一種其特徵爲胞嘧啶及鳥嘌呤之重複序列 (CpG再現單位）的〇DNs群。已知這些CpG再現單位可誘導免疫活化且PF-3 5 12676具有最適於強免疫調節作用的核苷酸序列。免疫系統逐漸發展，以偵查及辨識與病原相關之分子樣式，再誘導具有初始之天然免疫活化作用及接下去之適應性（抗原特異性）免疫活化作用之合適的Thl或Th2免疫反應。類鐸受體（TLR )族之成員顯示出係作爲天然免疫反應及適應性免疫反應的關鍵調節子。被TLR-9辨識爲與病原相關之分子樣式爲特定序列中之未甲基化CpG二核苷酸（CpG再現單位）。這些CpG再現單位常見於細菌或病毒DNA中，但在脊椎動物中則比例上低於平均値且爲甲基化者。TLR-9表現在類漿細胞型樹狀細胞（pDC )及淋巴細胞上，而具CpG再現單位之DNA誘導出由TLR-9促成之強天然及適應性Thl免疫反應以及較弱之Th2免疫反應。選擇性之由TLR-9傳介之免疫活化作用可藉由含有 CpG再現單位之合成的ODNs及具有最適於人類TLR-9之 -51 - (48) 200824696 配體激動作用之核苷酸序列的PF-3 5 1 2676來模擬。因此，PF-3 5 12676可提供經瞄準且特異之免疫治療型式，透過活化類漿細胞型樹狀細胞（PDC)及B-淋巴細胞，再刺激淋巴球、巨唑細胞、單核細胞、天然殺手細胞（NK )及T 細胞群來誘導免疫反應。

天然免疫反應及適應性免疫反應對以PF-3 5 1 2676爲基礎之癌症免疫療法的確實貢獻仍在硏究中。然而，臨床前硏究提出多種不同之以抗腫瘤機制爲基礎的免疫是可被誘出的，包括：（a )活化可瞄準腫瘤細胞之天然免疫細胞，諸如NK細胞及單核細胞；（b )誘導可能具有直接抗腫瘤作用之干擾素（INFs )及干擾素可誘導性基因產物，諸如IP -1 0 ;( c )改良腫瘤-特異性抗原對T細胞之呈現，刺激由腫瘤指導之細胞毒性T淋巴球的發展；及/或 (d )破壞對腫瘤特異性抗原之免疫耐受性並誘導天然腫瘤-特異性T細胞成熟。根據作用機制及支持性臨床前藥學資料，PF-3 5 1 2676提供經瞄準且特異之免疫治療型式，其可單獨投服或作爲組合抗癌療法之一部分。用於癌症治療之注射用HYB2055係稱爲IMOxine®，其係由麻薩諸薩州 Cambridge，Idera公司（前身爲

Hybridon公司）製造。IMOxine®爲含有CpRTM二核苷酸再現單位（其中R代表7-氮雜-鳥嘌呤）及新穎DNA構造之TLR9的第二代IMOtm激動劑。在以人類細胞爲基礎之分析中，IMOxine'顯示出可活化B細胞及樹狀細胞並誘導

Thl型細胞活素變化形廓。在臨床前動物模型中， -52- (49) 200824696 IMOxine®顯示出下列適合用於治療癌症之免疫刺激性變化

形廓：（a )刺激Thl免疫反應；（b )製造治療性細胞活素 IL-12、IFN-α/γ ; ( c )活化 NK 細胞；（d )誘導 CTL 反應；（e )提升腫瘤-特異性記憶反應；及/或（f)加強選定之化療劑、單株抗體、疫苗及抗原之抗腫瘤活性。

關於 IMOxine®可參考下歹！J文獻·· Agrawal，等人之 WO 98/49288，1 998 年 11 月 5 日出版；WO 01/1 2804， 2001 年 2 月 22 日出版；WO 0 1/553 70，200 1 年 8 月 2 日出版；PCT/US 0 1 / 1 3 682，2001年 4月 30日提出；及 PCT/US 0 1 /3 0 1 3 7 ， 200 1 年 9 月 26 日提出； US2005/0009773，2004年5月14日提出。亦可參考下列美國申請案及核發之美國專利，其揭示內容倂爲此文之參考資料:US20050130918，US20050054600，US200500 97 73, US20040198685， US 20040156825, US 6815429, US20040106570， US20040097719， US20040033980， US 6667293，US 6649596，US 6645943，US 6624293， US 5508035， US 6605708， US20030191078， US20030186911，US20030125287，US200 30109479， US20030032612， US 6531589， US 6509459， US 6509149, US 6489464， US 6489304， US 6485973， US 6476000， US 6458940， US 6440660， US 6426334， US 6399586， US 6383752， US 6372427， US 6346614， US 6335436，及 US 6306829 。因此，於一較佳體系中，該CpG ODN爲IMOxine®且 -53- (50) 200824696 其係與一或多種化療劑一起投服，該化療劑之劑量約 0.001毫克/公斤至約10毫克/公斤。於一較佳體系中， IMOxine®之投服劑量爲約〇.〇1毫克/公斤至約1毫克/公斤，且IMOxine®宜經由皮下途徑投服。

1018 ISS (由加州柏克萊Dynavax技術公司提供）爲一種分子量約7150道耳吞之單股、22個鹼基之免疫刺激性硫代磷酸酯寡核苷酸，其可藉由標準固相化學技術製備 (序列 55 TGACTGTGAACGTTCGAGA TGA 3’（SEQ ID NO: 2))。關於1018 ISS可參考美國專利第5,5 89,940號及美國專利第6,225,292號，其各倂爲此文之參考資料： US 6426336， US 6174872， US 5849719, US 5679647, US 6498 148，US 65 1 4948，US 6534062，US 6552006， US 6562798， US 6589940， US 6610661， US 6613751， US20030027782， US20020086839， US20030092663， US20030078223， US20030119773， US20030143213， US20030147870， US20020142977， US20030212028, US20040092468， US20040006034， US20020086839， US20040006010， US20030232780， US20020042387, US20030130217, US20030109469, US20020028784, US20010046967, US20020055477, US20030125284, US20030187389, US20030186921， US20020098199, US20040009942, US20030022852, US20030129251， US20030203861， US20030064064, US20030216340, US20020107212, US20030059773, US20030176373, -54- (51) 200824696 US20020142978? US200300492665 US20030078223, US20030092663, US2003 0 1 3 3 9885 US2003 0 1 7573 15 US2003022501 6，U S 2 0 0 3 0 1 9 9 4 6 6，及 U S 2 0 0 4 0 1 3 2 6 7 7。亦可參考下列美國專利申請案及核發之美國專利案，其揭示內容倂爲此文之參考資料。於某些較佳體系中，該CpG ODN爲1018 ISS且其係

與一或多種化療劑一起投服，該化療劑之劑量爲約0.0 0 1 毫克/公斤至約10毫克/公斤。於一較佳體系中，1018 ISS 之投服劑量爲約0.01毫克/公斤至約1毫克/公斤，於最佳之體系中，1018 ISS之投服劑量爲約0.01毫克/公斤至約0.5毫克/公斤。再者，1018 ISS宜經由皮下途徑投服。發展可調節TLR9受體之CpG ODN的另一種方法爲硏發以DNA爲基礎之免疫調節劑（稱爲dSLIMs)或雙莖-環 (stem-loop)免疫調節劑。這類分子爲啞鈴形，其係由中間部分之雙股、20個鹼基對片段及二個各含30個核苷酸之單股環（二端各一）所組成。這類分子含有CpG再現單位且其觸動多種不同之免疫調節劑，諸如干擾素α、γ、 IL-6及IL-12，但該分子係經共價閉合，因此，其可防止單股DNA結合及核酸外切酶分解，而不需藉硫代磷酸酯基因，等來穩定。美國專利第6,849,725號描述dSLIM技術’此專利之揭示內容倂爲此文之參考資料。最後，Genasense®爲由紐澤西州 Berkeley Heights之 Genta公司製造的藥物，其抑制稱爲BcI_2之蛋白質的製造。藉由減少癌細胞中BcI-2之製造，以Genasense進行 -55- (52) 200824696

治療係尋求回復基礎生物程序，藉此，可輕易地以目前之抗癌療法治療來殺死癌細胞。此過程稱爲設定之細胞死亡或細胞凋亡。Genasense通常係在進行抗癌療法前投服，以企圖加強治療之殺癌的效果。BcI-2廣泛表現於多種類型之癌症中，因此，Genasense可能用來治療一系列腫瘤類型，包括，但不限於：黑色瘤、多發性骨髓瘤、急性骨髓性白血病、慢性淋巴球性白血病、攝護腺癌及肺癌。其亦可與多種不同之化療劑及治療癌症之治療程式（諸如化療法、放射療法、單株抗體及免疫療法）協同作用。根據臨床前數據，Genasense可與太平洋紫杉醇、伊立替康、伊美特尼、利多西單抗、氟達拉濱、環磷醯胺、多烯紫杉酉f、Mylotarg® (吉特魯單抗歐柔嘉米辛（Gemtuzumab ozogamicin ) ; Wyeth-Ay erst公司）、胞嘧啶阿拉伯糖苷、Dexamethasone及其可能之組合一起使用。參考資料有美國專利第 6262036、6060545、5986083、5 8544 1 0 及 5783683號，其揭示內容倂爲此文之參考資料。 m.化療劑下述之各化療劑係欲根據下列治療指導方針與CpG ODN —起使用：

CpG ODN可在投服化療劑或化療劑組合之前、同時、大體上同時或之後（或其任何組合）投服。CpG ODN可在治療方案或維持期間每日（包括每日投服一或多次）、每隔一天、每三天、每四天、每五天、每六天或每週、每 -56- (53) 200824696 個月、每二個月、每三個月、每四個月、每五個月、每六個月、或每年投服。可投服一個或數個化療劑或化療劑組合之劑量。或者，可投服至少一個劑量、或至少三個、六個或1 2個劑量。CpG ΟDN及化療劑或化療劑組合可輪流投服

於一較佳體系中，先投服該化療劑或化療劑組合以阻斷將限制CpG ODN之效力的抑制作用。於此較佳體系中，宜在投服CpG ODN前之一個月至一天給予化療劑或化療劑組合。於較佳之體系中係在給予CpG ODN前至少1 週但不超過3週投服化療劑或化療劑組合，最佳爲，該化療劑或化療劑組合係在給予CpG ODN前約1週投服。於另一較佳體系中係先給予CpG ODN來起動免疫系統，以對該化療劑或化療劑組合或其他可能與此一起給予之療法 (如：腫瘤疫苗、外科手術、放射治療、其組合，等）產生較佳之免疫活化反應。於此較佳體系中，CpG ODN宜在給予該化療劑或化療劑組合前一個月至1天前投服。於一較佳體系中，該Cp G ΟDN係在給予該化療劑或化療劑組合前1週但不超過3週投藥，且最佳爲，該CpG ODN 係在給予該化療劑或化療劑組合前約1週投服。在數天或數週之週期或治療方案中可將化療劑或化療劑組合與CpG ODN —起投服。該數天之週期可爲2、3、 4、5、6、7、8、9、10或更多天之週期、或爲2、3、4或更多週之週期。化療劑或化療劑組合可在這類週期中的第

一天投藥，再在數週之週期中之各週的第1天投服CpG -57- (54) 200824696 ODN。例如··該CpG ODN可在三週之週期的第1、7及14 天投服。此三週之週期可重複一次、二次、三次或更多次。例如：在整個治療期之前可先單獨投服或化療劑或化療劑之組合，以起動免疫系統或使個體對接下去之治療更具反應性。 (Ο式1所代表之化合物5- ( 5-氟-2-合氧基-i，2-二氫亞吲哚-(3Z)-基甲基）-2,4-二甲基-1H-吡略-3-羧酸（

爲一種新穎之口服癌症藥物，其在多種不同之固態腫瘤類型中顯示出效力。化合物1 (由加州La Jolla輝瑞公司供 Φ 應）瞄準數種受體酪胺酸激酶抑制劑，包括PDGFR、KIT 及VEGFR，且爲一種有效之選擇性抗血管增生劑。化合物 1或其L-蘋果酸鹽亦稱爲SU1 1248、SU01124'8、舒你特尼 (sunitinib)蘋果酸鹽（USAN/WHO 命名）或 SUTENTtm (L-蘋果酸鹽）。此化合物、其合成方法及特殊之多晶型描述於美國專利第 6,573,293、美國專利刊物第 2003-0229229、2003-0069298 及 2005-0059824 號中且描述於 J.M· Manley，M.J· ί.

Kalman, B · G · Conway，C . C . B al 1，J · L · Havens 及 R. -58- (55) 200824696 V aidy anathan, "Early Amidation Appor ach to 3-[(4-a m i d o) p y r r o 1 - 2 - y 1 ] - 2 - i n d o 1 i η ο n e s 511 J. Or g. Chem, 68, 6447-6450(2003)中。化合物1及其L-蘋果酸鹽之較佳調和物描述於PCT刊物第WO 2004/024127號中。較佳之給藥方案描述於2004年11月17號提出之美國專利申請案第 107 991，244 號，標題丨’Method of Treating Abnormal

Cell Growth Using Indolinone Compounds 中。這些參考資

料之揭示內容全部倂爲此文之參考。數種參考資料描述化合物1與其他作用劑之組合，如··美國專利刊物第2003 -0216410號、美國專利刊物第2004-0 1 52759號及2005年 3月1 1日提出之美國臨時申請案序號60/660,624。這些參考資料之揭示內容全.部倂爲此文之參考資料。除非另外指出，此處所使用之"化合物1 "一詞係指爲其游離鹼型式之構造式1之化合物（亦稱爲5_ ( 5-氟-2-合氧基-1，2-二氫亞吲哚-(3Z)-基甲基）-2,4-二甲基-1H-吡咯-3-羧酸（2-二乙胺基乙基）-醯胺）及其藥學上可接受之鹽或溶劑化物（包括水合物）。特佳之鹽爲蘋果酸鹽，更佳地爲L-蘋果酸鹽。化合物1之量係指游離鹼當量之量。化合物1可很方便地以劑量爲12.5、25或5〇毫克（游離鹼當量）之口服劑型（諸如錠劑或膠囊）提供。這些劑量允許以12.5毫克之增加量進行簡單的給藥調整。雖然可能有其他劑量，通常給藥範圍係從每日1 2 · 5至7 5毫克，且更常爲每日25、37·5、50或62.5毫克（游離鹼當量）。每日劑量之服用頻率通常爲每日一次’不需考慮食 -59- (56) 200824696

物；即，飽食或空腹狀態。化合物1可以連續給藥方案給藥（即，治療期間每日投服）或以間歇給藥方案給藥（即，在治療期間每日給藥，之後’進入休息或非治療期，此期間不給予化合物1)。在間歇給藥方案中’該治療期通常爲從1 〇至3 0天，諸如2、3或4週且休息期通常係從3 至15天，諸如1或2週。任何從10至3 0天之治療期與任何從3至1 5天之休息期的組合均列入考量。目前較佳之間歇方案有數種，以治療期週數/休息期週數表示，較佳之方案包括4/2、4/1、3/2、3/1及2/1。吾人應進一步察知本技藝之技術熟習人士可調整給藥方案，以當這類調整爲治療上可接受時，使這類方案可更方便地協調化合物 1與額外之治療劑的給藥方案。於一特定之較佳體系中，本發明藉著給予患者至多每日約7 5毫克（如：約2 5至7 5毫克，宜爲3 7 · 5、5 0或 62.5毫克）之化合物1，並經由皮下途徑給予至多約5毫克 /公斤之 CpG ODN (宜爲 PF3 5 1 2676、1018 ISS、 Genasense或IMOxine® )來提供治療或預防患者（諸如人類）體內任何上述癌症的方法。於一較佳體系中，化合物 1係連續（即，非間歇性）給藥。於另一更佳體系中係投服約0.01至2.5毫克/公斤（更宜爲約〇·〇5至ι·〇毫克/公斤，最宜爲約〇·2毫克/公斤）之PF35 1 2676治療性劑量，且在上述該治療性組合方案後係隨意地接著給予至多約5 毫克/公斤之PF3 5 1 2676的維持劑量（宜爲約0.01至25 毫克/公斤’更宜爲約0.05至1.0毫克/公斤，最宜爲約 -60- (57) 200824696 0.2毫克/公斤）。於一特定之較佳體系中，該CpG ODN 爲PF3512676。本技藝之技術熟習人士可根據腫瘤反應及渋利情況之變化形廓而輕易地決定用於特殊患者之理想劑 (b )培米催塞（ALIMTA® )，注射用之培米催塞（其係由印第安那州Indianapolis之Eli Lilli公司供應）爲

一種抗葉酸鹽抗惡性腫瘤劑，其藉由擾亂細胞複製所必要之葉酸鹽倚賴性代謝過程來發揮其作用。培米催塞二鈉七水合物之化學名爲L-麩胺酸，N-[4-[2-(2-胺基- 4,7-二氫-4-合氧基吡咯並[2,3-d]嘧啶-5-基）乙基]苄醯基]，二鈉鹽，七水合物。培米催塞爲一種含有以吡咯並嘧啶爲底質之核心的抗葉酸鹽’其藉由擾亂細胞複製所必要之葉酸鹽倚賴性代謝過程來發揮其抗惡性腫瘤活性。爲了治療苦於上述癌症之患者，與經由皮下途徑投服之至多約5毫克/米2之CpG ODN (宜爲PF3512676、 1018 ISS、Genasense 或 iMOxine®) —起使用時，培米催塞之建議劑量爲至多約1000毫克/米2 (宜爲至多約750 耄克/米2，最宜爲約500毫克/米2)。於一較佳體系中係投服約0.01至2.5¾克/公斤（更宜爲約〇〇5至1〇毫克/ 公斤，最宜爲約0.2毫克/公斤）之PF3 5 1 2676治療性劑量 ’且在上述該治療性組合方案後係隨意地接著給予至多約 5毫克/公斤之P F 3 5 1 2 6 7 6的維持劑量（宜爲約0 · 〇 1至2.5 毫克/公斤，更宜爲約〇.〇5至10毫克/公斤，最宜爲約 0.2毫克/公斤）。 -61 - (58) 200824696 先驅給藥方案可用來緩和某些常與培米催塞治療相關之副作用。例如：在未以皮質類固醇預先治療之患者中較常出現皮疹。因此，以地塞米松（dexamethasone) (或同等物）預先治療可減少皮膚反應之發生率及嚴重性。在臨床試驗中係在投服培米催塞之前一天、當天及後一天，每日口服4毫克之地塞米松二次。再者，爲了減少毒性，以培米催塞治療之患者必須每日服用低劑量口服葉酸製劑或是多種維生素與葉酸。在投服第一個培米催塞之劑量之 ^ 前7天，每日至少服用5個劑量之葉酸；在治療全程及培米催塞之最後一個劑量後2 1天可持續給藥。患者亦可在培米催塞之第一個劑量的前一週期間及之後每3個週期接受一次肌肉內注射維生素B 1 2。接下去可在給予培米催塞之同一天注射維生素B 1 2。在臨床試驗中，硏究之葉酸劑量係從350至1 0 00微克且維生素B12之劑量爲1000微克。在臨床試驗中，最常用之口服葉酸劑量爲400微克。

(c)順鈾（PLATINOL®-AQ)係由紐澤西州普林斯敦之必治妥施貴寶（Bristol Myers Squibb )公司供應。活性成分（順鉑）爲一種黃色至橘色之結晶粉末，其分子式爲 PtCl2H6N2，分子量爲3 00· 1。順銷爲一種重金屬複合物，其含有在順位之鉑中心原子，此中心原子被二個氯原子及二個氨分子包圍。與至多約5毫克/公斤之CpG 0DN (宜爲PF3 5 12676 、1018 ISS、Genasense 或 IMOxine®，以 PF3512676 最佳 )——起使用時，順鉑之投服劑量至多約1 20毫克/米2，宜 -62- (59) 200824696 爲至多約100毫克/米2。此組合於NSCLC之第一線療法中之用途的非限定實例爲在治療方案中，順鉑係與至多約 5 毫克 / 公斤之 CpG ODN (宜爲 PF35 1 2676、1018 ISS、 Genasense 或 IMOxine®，最宜爲 PF3 5 1 2676 )及太平洋紫

杉醇、多烯紫杉醇、吉西他汀、長春瑞賓一起投服。在這類治療方案中，經由靜脈內投服之順鉑的治療劑量爲至多約100毫克/米2(如：50-100毫克/米2)，宜爲至多約 75毫克/米2，再加上至多約5毫克/米2(宜爲約〇·〇ΐ至 5.0毫克/公斤）之CpG ODN，及隨意地一或多種下列作用劑：（a)至多約250毫克/米2 (宜爲至多約225毫克/米 2)之太平洋紫杉醇，（b)至多約100毫克/米2(宜爲至多約7 5毫克/米2 )之多烯紫杉醇，（c ) 至多約1 5 00毫克/米2 (宜爲1 25 0毫克/米2)之吉西他汀，及/或（d) 至多約5〇毫克/米2(宜爲至多約30毫克/米2)之長春瑞賓。投服順鉑與一或多種上述作用劑之程序可以任何順序 (如：先CpG ODN，再化療劑或反過來）於每週一次之治療週期（如：3 -4週之治療週期）中完成，並在治療方案後隨意地包括一維持相（包括CpG ODN之維持劑量）。於一較佳體系中係投服約0.01至2.5毫克/公斤（更宜爲約〇·〇5至1.0毫克/公斤，最宜爲約0.2毫克/公斤）之 PF3 5 1 2676治療性劑量，且在上述該治療性組合方案後係隨意地接著給予至多約5毫克/公斤之PF3 5 1 2676的維持劑量（宜爲約〇·〇1至2.5毫克/公斤，更宜爲約0.05至 1.0毫克/公斤，最宜爲約0.2毫克/公斤）。 -63- (60) 200824696 在給予順鉑劑量前，建議注入1至2升流體進行水化預先治療8至12小時。然後，將藥物在2升之5%右旋糖 (在含有37.5克甘露醇之1/2或1/3生理食鹽水中）中稀釋，並在6至8小時期間內注入。在接下去之24時中必須維持適當之水化及排尿。直到血清肌胺酸酐低於1 ·5毫克/100毫升及/或BUN低於25毫克/100毫升後才可再重複順鉑之治療過程。直到循環血液成分在可接受之水準（血小板2 1〇〇,〇〇〇/毫米3、WBCS4,000/毫米3)時才可進 ^ 行重複之過程。直到聽力分析指出聽覺敏度在正常界限內才可給予接下去之順鉑劑量。 (d )吉西他汀（Gemzar®HCl，其係由印第安那州

I n d i a n a ρ ο 1 i s之E1 i L i 11 i公司供應）爲一種顯不抗腫瘤活性之核苷類似物。吉西他汀爲2’-去氧基-2’，2’-二氟胞嘧啶核苷一氫氯酸鹽（β -異構物）。吉西他汀顯示出細胞相特異性，主要殺死正合成DNA ( S-相）之細胞並阻斷細胞進入G1/S-相界限。吉西他汀在細胞內藉由核苷激酶代謝成活性二磷酸（dFdCDP )及三磷酸（dFdCTP )核苷。吉西他汀之細胞毒性作用係由於二磷酸及三磷酸核苷之二種作用的組合，其可抑制DNA合成。首先，吉西他汀二磷酸鹽抑制核糖核苷酸還原酶（其催化該產生用於合成DNA 之去氧核苷三磷酸的反應）。藉由二磷酸核苷抑制此酶將使去氧核苷酸（包括dCTP )之濃度降低。第二，吉西他汀三磷酸鹽與dCTP競爭倂入DNA中。胞內dCTP之濃度降低（藉由二磷酸鹽之作用）可增加倂入DNA之吉西他 -64- (61) 200824696 汀三磷酸鹽（自我實現）。將吉西他汀核苷酸倂入DNA 後，僅有一額外之核苷酸加入增大之DNA股中。加入額外之核苷酸後將抑制進一步合成DNA。DNA聚合酶ε無法移除吉西他汀核苷酸及修補增大之DNA股（隱蔽之鏈終止）。在CEM Τ類淋巴母細胞中，吉西他汀可誘導核小體間DNA片段化（此爲計劃性細胞死亡的特徵之一）

在玻管中，吉西他汀與順鉑顯示出劑量倚賴性之協同活性。在順鉑方面並未觀察到其對吉西他汀三磷酸鹽之累積或DNA雙股斷裂有影響。在活體內，吉西他汀加順鉑可顯示出抗LX-1及CALU-6人類肺臟異種移植物之活性，但對NCI-H460或NCI-H520異種移植物則僅有極微少之活性。吉西他汀與順鉑在路易斯（Lewis )肺老鼠異種移植物中具協同作用。在順鉑之前持續暴露於吉西他汀4 小時可產生最大之交互作用。

於一較佳體系中，與CpG ODN —起投服時，吉西他汀的劑量至多約1 500毫克/米2，宜爲至多約1 250毫克/ 米2。與吉西他汀一起使用時，經由皮下途徑投服之CpG ODN (宜爲 PF 3 5 1 2 6 7 6、 1 0 1 8 IS S 、 Genas ense 或 IMOxine®，最宜爲PF35 12676 )的劑量爲至多約5毫克/ 米2之CpG ODN。於一較佳體系中係投服約0.01至2.5 毫克/公斤（更宜爲約0.05至1.0毫克/公斤，最宜爲約〇·2毫克/公斤）之PF3 5 12676治療性劑量，且在上述該治療性組合方案後係隨意地接著給予至多約5毫克/公斤之 -65- (62) 200824696 PF35 12676的維持劑量（宜爲約o.oi至2.5毫克/公斤，更宜爲約0·05至1.0毫克/公斤，最宜爲約0.2毫克/公斤

於一非限定之較佳體系中，爲了治療NSCLC，可將吉西他汀與順鉑及CpG ODN —起投服。此三重療法可根據上述之任何治療方案，並參考吉西他汀與CpG ODN之雙重方案投服。於一較佳體系中，吉西他汀、順鉑及CpG ODN三重方案係根據下到非限定治療方案投服：在4週之計劃表中係於1小時內（宜爲約30分鐘）經由靜脈內途徑投服至多約1 250毫克/米2之吉西他汀且在整個治療方案中共投服數次，如：在3 -4週之方案中每週投服一次，在各28天之週期中宜在第1、8及15天投服。順鉛應在注入吉西他汀後，經由靜脈內途徑投服，其劑量至多約 1〇〇毫克/米2且宜在注入吉西他汀後第1天投服。CpG ODN (宜爲 PF3 5 1 2676、 1018 ISS 、 Genasense 或 IMOxine®，最宜爲PF35 12676 )係經由皮下途徑與吉西他汀及順鈷一起投服，CpG ODN之劑量至多爲約5毫克/米2 。於一較佳體系中，投服之PF3 5 1 2676的治療性劑量係約 0.01至2.5毫克/公斤（更宜爲約0.05至1.0毫克/公斤，最宜爲約0 · 2毫克/公斤），且在上述該治療性組合方案後係隨意地接著給予至多約5毫克/公斤之PF35 12676的維持劑量（宜爲約〇·〇1至2·5毫克/公斤，更宜爲約0.05至 1·〇毫克/公斤，最宜爲約〇·2毫克/公斤）。或者，在3週之計劃表中係在至多1小時內（宜爲至多約3 0分鐘）經 -66- (63) 200824696 由靜脈內途徑投服至多約1250毫克/米2之吉西他汀且在整個治療方案中共投服數次吉西他汀，如：在3-4週之方案中每週投服一次，宜在各21-天之週期中的第1及8天投服。順鉑應在注入吉西他汀後，經由靜脈內途徑投服至多約1〇〇毫克/米2之劑量且宜在注入吉西他汀後第1天投服。CpG ODN (宜爲 PF35 1 2676、101 8 ISS、Genasense 或 IMOxine®，最宜爲PF35 1 2676 )係經由皮下途徑與吉西他

汀及順鉑一起投服，CpG ODN之劑量至多爲約5毫克/米2 。於一較佳體系中，投服之PF3 5 12676的治療性劑量係約 0·0 1至2.5毫克/公斤（更宜爲約〇.〇5至1.0毫克/公斤，最宜爲約0.2毫克/公斤），且在上述該治療性組合方案後係隨意地接著給予至多約5毫克/公斤之PF3 5 1 2676的維持劑量（宜爲約0.01至2.5毫克/公斤，更宜爲約0.05至 1.0毫克/公斤，最宜爲約0.2毫克/公斤）。爲了血液學之毒性可能需要調整吉西他汀及順鉑之劑量。因血液學毒性之故所進行之劑量調整係以治療當天所取得之顆粒細胞及血小板計數爲根據。在各次給藥前應監控接受吉西他汀之患者的全血球計數（CBC )，包括分類計敷及血小板數量。 (e)吉菲特尼（11：^以@)係由德拉瓦州^\^111111^1〇11 之AstraZeneca公司供應，其化學名爲4-喹唑啉胺，N- ( 3-氯-4-氟苯基）-7-甲氧基-6-[( 3-4-嗎啉）-丙氧基]。吉菲特尼之臨床抗腫瘤作用機制特性並未完全定出。吉菲特尼抑制多種與透膜細胞表面受體相關之酪胺酸激酶（包括與 -67- (64) 200824696 表皮生長因子受體（EGFR-TK)聯結之酪胺酸激酶）之胞內磷酸化作用。EGFR表現在許多正常細胞及癌症細胞之細胞表面上。目前並無臨床硏究證實EGFR受體表現與對吉菲特尼之反應間的相關性。與經由皮下途徑投服之至多約5毫克/米2之CpG ODN (宜爲 PF3 5 1 2676、 1018 IS S、Genasense 或

IMOxine® ) —起使用時，吉菲特尼的每日建議劑量爲至多約10 00毫克（宜爲至多500毫克，最宜爲至多約250毫克）。於一較佳體系中係投服約〇 · 〇 1至2 · 5耄克/公斤（更宜爲約0.05至1.0毫克/公斤，最宜爲約0.2毫克/公斤 )之PF3 5 12676治療性劑量，且在上述該治療性組合方案後係隨意地接著給予至多約5毫克/公斤之PF3 5 12676的維持劑量（宜爲約〇·〇1至2.5毫克/公斤，更宜爲約〇.05 至1.0毫克/公斤，最宜爲約0.2毫克/公斤）。 (f)太平洋紫杉醇（Taxol®)注射液係由紐澤西州普林斯敦之必治妥施貴寶公司供應。太平洋紫杉醇爲具抗腫瘤活性之天然產物。太平洋紫杉醇係經由半合成方法從歐洲紫杉取得。太平洋紫杉醇之化學名爲具（2R，3R) -N-苄醯基-3-苯基異絲胺酸之5β，20-環氧基- l，2α，4,7β，10β313α-六羥基紫杉-ll-烯-9-酮 4，10-二醋酸 2-苯甲酸 13-酯。太平洋紫杉醇爲新穎之抗微小管劑，其促進微小管從導管素二聚體組合並藉由防止解聚作用來穩定微小管之新穎抗微小管劑。此穩定性可抑制微小管網路之正常動態重組，而此動態重組爲生命中期及有絲分裂細胞功能所必要者。 -68- (65) 200824696 另外，太平洋紫杉醇誘導整個細胞週期中微小管不正常排列或”成束”及有絲分裂期間微小管之多重星狀體。

與至多約5毫克/公斤之CpG ODN (宜爲PF3 5 1 2676 、1018 ISS、Genasense 或 IMOxine®) —起使用時，太平洋紫杉醇之投服量爲至多約250毫克7米2 (宜爲至多約 225毫克/米2)。於一較佳體系中係投服約0.01至2.5毫克/公斤（更宜爲約〇.〇5至1.0毫克/公斤，最宜爲約0.2 毫克/公斤）之PF3 5 12676治療性劑量，且在上述該治療性組合方案後係隨意地接著給予至多約5毫克/公斤之 PF3 5 1 2676的維持劑量（宜爲約0_01至2.5毫克/公斤，更宜爲約〇·〇5至1.0毫克/公斤，最宜爲約0.2毫克/公斤在罹患NSCLC之患者方面，每3週進行一次之治療方案的非限定實例爲在24小時內經由靜脈內途徑投服至多約1 3 5毫克/米2之劑量的太平洋紫杉醇，再給予至多約 100毫克/米2之順鉛並加上至多約5毫克/公斤之CpG ODN，此CpG ODN係在投服太平洋紫杉醇之前、同時、大致上同時或之後投服且該CpG ODN宜爲經由皮下途徑投月g 之 PF35 1 2676、1018 IS S、Genasense 或 IMOxine⑧。於一較佳體系中係投服約0·01至2·5毫克/公斤（更宜爲約0.05至1.0毫克/公斤，最宜爲約〇·2毫克/公斤）之 PF3 5 12676治療性劑量，且在上述該治療性組合方案後係隨意地接著給予至多約5毫克/公斤之PF3 5 1 2676的維持劑量（宜爲約〇·〇1至2.5毫克/公斤，更宜爲約〇·〇5至 -69- (66) 200824696 1.0毫克/公斤，最宜爲約0.2毫克/公斤）。

(g )貝伐單抗（AvastinTM )(由加州南舊金山 Genenteeh公司供應）爲重組之人類化單株IgGl抗體，其在活體外及活體內分析中結合人類血管內皮生長因子（ VEGF )並抑制其生物活性。貝伐單抗含有人類框構區及結合VEGF ( 1 )之老鼠抗體的互補決定區。貝伐單抗係在培養於含有正大黴素抗生素之營養介質中的中國大頰鼠卵巢哺乳動物細胞表現系統中製造且具有約1 49千道耳吞之分子量。貝伐單抗結合VEGF並防止VEGF與其在內皮細胞表面上之受體（Fit-1及KDR)交互作用。在活體外血管生成模型中，VEGF與其受體之交互作用可導致內皮細胞增生及新血管形成。在異種移植之大腸癌裸（無胸腺）鼠模型中投服貝伐單抗可減少微血管生長並抑制轉移疾病惡化。

與經由皮下途徑投服之至多約5毫克/米2之CpG 〇DN (宜爲 PF3 5 1 2676、 1018 ISS 、 Genasense 或 IMOxine® ) —起使用時，貝伐單抗的建議劑量爲至多約 15毫克/公斤。於一較佳體系中係投服約0.01至2.5毫克/ 公斤（更宜爲約0.05至1.0毫克/公斤，最宜爲約0.2毫克/公斤）之P F 3 5 1 2 6 7 6治療性劑量，且在上述該治療性組合方案後係隨意地接著給予至多約5毫克/公斤之 PF3 5 1 2676的維持劑量（宜爲約〇.〇1至2·5毫克/公斤，更宜爲約0.05至1.0毫克/公斤，最宜爲約0·2毫克/公斤 -70- (67) 200824696 (h )卡鉑（1&1^^111@水溶液）注射液係由紐澤西州Princeton之必治妥施貴寶公司供應。卡鉑爲一種鉑配位化合物。卡鉑之化學名爲鉑，二胺π，1-環丁院-二竣酸根 (2_ ) -0，(T]-，（ SP-4-2 )。卡鉛爲具分子式 C6Hi2N204Pt

且分子量爲37 1.25之結晶型粉末。卡鉑（類似順銷）’ 主要係製造DNA鏈間交聯而非DNA-蛋白質交聯。此作用顯然爲細胞週期非特異性。卡鉑之水合作用（其被認爲可產生活性種類）速度較順鉑緩慢。不管此差異’卡鉑及順鉑二者顯示出可誘導同等數目之藥物-DN A交聯，造成同等之損害及生物作用。卡鉑及順鉑之效力差異似乎與水化速度之差異直接相關。

Calvert曾提出根據患者之腎小球濾過率（GFR，以毫升/分計）及濃度時間曲線下卡鉑標靶面積（AUC，以毫克 /毫升•分計）計算卡鉑劑量之簡單公式。在這些硏究中係藉由51Cr-EDTA清除率測量GFR，但在臨床醫療中亦常使用計算出之肌胺酸酐清除率。根據Calvert之公式，卡鉛之總劑量（毫克）=(標靶 AUC ) X ( GFR + 25 )。標靶 AUC可至多約8，宜爲至多約6。此卡鉑劑量可與經由皮下途徑投服之至多約5毫克/公斤的CpG ODN (宜爲 PF3512676、1018 ISS、Genasense 或 IMOxine⑧，以 PF3 5 1 2676最佳）起使用。於一較佳體系中係投服約 0.01至2.5毫克/公斤（更宜爲約〇〇5至ι·〇毫克/公斤，最宜爲約〇 · 2毫克/公斤）之p F 3 5丨2 6 7 6治療性劑量，且在上述該治療性組合方案後係隨意地接著給予至多約5毫克 -71 - (68) 200824696 /公斤之PF35 1 2676的維持劑量（宜爲約〇.〇1至2.5毫克/ 公斤，更宜爲約0.05至1.0毫克/公斤，最宜爲約〇·2毫克/公斤）。於一非限定實例中，卡鉑® (卡鉑水溶液）注射液係在治療方案開始時（宜在治療方案之第1週內，最宜在每

4週之第1天），經由靜脈內途徑投服藉由Calvert公式 (見上述）測定之劑量並加上太平洋紫杉醇及經由皮下途徑投服之至多約 5毫克/公斤之 CpG ODN (宜爲 PF3512676、10 18 ISS、Genasense 或 IMOxine® ) 〇於—* 較佳體系中係投服約0.01至2.5毫克/公斤（更宜爲約〇·〇5至1.0毫克/公斤，最宜爲約0.2毫克/公斤）之 PF3 5 1 2676治療性劑量，且在上述該治療性組合方案後係隨意地接著給予至多約5毫克/公斤之PF3 5 1 2676的維持劑量（宜爲約0.01至2.5毫克/公斤，更宜爲約0.05至 1·〇毫克/公斤，最宜爲約0.2毫克/公斤）。 (i)由OSI製藥（紐約州Melville)供應之埃洛特尼 (Tarceva)爲人類表皮生長因子受體第1型/表皮生長因子受體（HER1/EGFR)酪胺酸激酶抑制劑。埃洛特尼爲一種喹唑啉胺，其化學名爲N- ( 3-乙炔苯基）-6,7-雙（2-甲氧基乙氧基）-4 -喹唑啉胺。Tarceva含有爲氫氯酸鹽之埃洛特尼。埃洛特尼之臨床抗腫瘤作用機制之特徵並未完全決定出。埃洛特尼抑制與表皮生長因子受體（EGFR )相聯結之酪胺酸激酶的胞內磷酸化作用。關於其他酪胺酸激酶受體之抑制特異性的特徵並未完全決定出。EGFR係表 -72- (69) 200824696 現在正常及癌細胞的細胞表面上。〇DN (宜爲 PF35 12676、 1018 ISS、Genasense 或 IMOxine®)—起使用時，埃洛特尼之每日建議劑量爲至多約2 0 0毫克（宜爲至多1 5 〇毫克）。於一較佳體系中係投服約0.01至2.5毫克/公斤（更宜爲約〇.〇5至1.〇毫克/公斤’最宜爲約0.2毫克/公斤）之PF3512676治療性劑量，

且在上述該治療性組合方案後係隨意地接著給予至多約5 毫克/公斤之PF3 5 1 2676的維持劑量（宜爲約〇.01至2.5 毫克/公斤’更宜爲約0·05至1.0毫克/公斤，最宜爲約〇·2毫克/公斤）。 (j )伊美特尼（GleevecTM )爲自紐澤西州East Hanover之諾華（Novartis)公司取得之錠劑型化合物，其含有在100或400毫克游離驗當量中之伊美特尼甲擴酸鹽。伊美特尼甲磺酸鹽之化學命名爲4-[(4-甲基-1-六氫吡井基）甲基]-N-[4-甲基-3-[[4-(3-吡啶基）-2-嘧啶基] 胺基]-苯基]苯醯胺）甲磺酸鹽。伊美特尼甲磺酸鹽爲一種蛋白質酪胺酸激酶抑制劑，其抑制bcr-abl酪胺酸激酶（由慢性骨髓性白血病（CML )中費城染色體異常所產生之構造性酪胺酸激酶）。其抑制bcr-abl陽性細胞株及來自費城染色體陽性之慢性骨髓性白血病之新鮮白血病細胞增生並誘導細胞凋亡。在利用活體外周圍血液及骨髓樣本的株落形成分析中，伊美特尼顯示出可抑制來自 CML患者之bcr-abl陽性株落。活體內，其抑制經bxr-abl轉染之老 -73- (70) 200824696 鼠骨髓性細胞及衍生自急性轉化期之CML患者的bcr-abl 陽性白血病細胞株的腫瘤生長。伊美特尼亦爲自血小板衍生之生長因子（PDGF)及幹細胞因子（SCF) 、c-kit的受體酪胺酸激酶抑制劑，且其抑制由PDGR-及SCF-傳介之細胞事項。在玻管中，伊美特尼抑制腸胃道基質腫瘤（ GIST)細胞（其表現活化之c-kit突變）之增生並誘導細胞凋亡。

與經由皮下途徑投服之至多約5毫克/米2之CpG ODN (宜爲 PF3512676、 1018 ISS、 Genasense 或 IMOxine® ) —起使用時，伊美特尼的建議劑量爲至多約 8 00毫克（如：600毫克/天，如：400毫克/天或600毫克 /天）。於一較佳體系中係投服約0.01至2.5毫克/公斤（更宜爲約0.05至1.0毫克/公斤，最宜爲約0.2毫克/公斤 )之PF3 5 1 2676治療性劑量，且在上述該治療性組合方案後係隨意地接著給予至多約5毫克/公斤之PF35 12676的維持劑量（宜爲約0.01至2.5毫克/公斤，更宜爲約0.05 至1·〇毫克/公斤，最宜爲約0.2毫克/公斤）。 (k)索拉非尼（BAY 43-9006; Ν-[4-氯- 3-(三氟甲基）苯基]-Ν’-[4-[2- ( N-甲基胺甲醯基）-4-吡啶氧基]苯基]尿素）係來自加州Emeryville之Onyx製藥及康乃廸克州West Haven之拜爾製藥的新穎硏究候選藥物，其係瞄準腫瘤細胞及腫瘤血管中之絲胺酸/蘇胺酸及受體酪胺酸激酶的第一種口服多重激酶抑制劑。在臨床前模型中，索拉非尼係瞄準已知涉及腫瘤細胞增生（腫瘤生長）及腫瘤 -74- (71) 200824696 血管生成（腫瘤血液供應）（此爲二種重要之癌症生長活性）之二種激酶類型的成員。這些激酶包括RAF激酶、 VEGFR-2、VEGFR-3、PDGFR-β、KIT、FLT-3 及 RET 〇與經由皮下途徑投服之至多約5毫克/公斤之CpG ODN (宜爲 PF3 5 1 2676、 1018 ISS、 Genasense 或 IMOxine® ) —起使用時，索拉非尼的建議劑量爲至多約

1500毫克（宜爲至多約1〇〇〇毫克，且宜爲每日二次400 毫克）。於一較佳體系中係投服約〇 · 〇 1至2 · 5毫克/公斤 (更宜爲約0.05至1.0毫克/公斤，最宜爲約〇·2毫克/公斤）之PF3 5 1 2676治療性劑量，且在上述該治療性組合方案後係隨意地接著給予至多約5毫克/公斤之PF3512676 的維持劑量（宜爲約〇·〇1至2.5毫克/公斤，更宜爲約〇.〇5至1.0毫克/公斤，最宜爲約0.2毫克/公斤）。 (1)多儲紫杉醇（Taxotere® )係由 S an o f i - A v ent i s 供應。多烯紫杉醇爲屬於紫杉醇類之抗惡性腫瘤劑。其可藉由半合成法從來自可回復之紫杉樹針葉生物團之先質萃取物開始製備。多烯紫杉醇之化學名爲具5万_20_環氧基_ 1，2α，4,7/3，10/3，13α -六羥基紫杉-11-烯-9·酮 4 -醋酸酯 2-苄酸酯三水合物之（2R，3S ) -Ν-羧基-3-苯基異絲胺酸，Ν-第三丁酯，1 3 -酯。多烯紫杉醇爲抗惡性腫瘤劑，其藉由擾亂細胞中之微小管網路（其爲有絲分裂及中期細胞功能所必要者）來作用。多烯紫杉醇結合游離導管素並促進導管素組合成穩定之微小管，且同時抑制其解聚。此可產生不具正常功能之微小管束並穩定微小管，如此可抑 -75- (72) 200824696 制細胞中之有絲分裂。多烯紫杉醇與微小管結合並不會改變結合之微小管中的微管蛋白原纖維的數目（此爲與目前臨床中所使用之大部分紡錘體毒物不同的特性）。爲了治療乳癌，與經由皮下途徑投服之至多約5毫克 / 公斤之 CpG ODN (宜爲 PF35 12676、1018 ISS、

Genasense或IMOxine®) —起使用時，多烯紫杉醇的建議劑量爲至多約120毫克/米2(宜爲至多約1〇〇毫克/米2，例如60- 1 00毫克/米2)。此劑量可根據治療設定修改，如：在可手術之結節-陽性之乳癌的輔助治療中係每3週 ’投服多柔比星（至多約5 0毫克/米2 )及環磷醯胺（至多約1 0 50毫克/米2)後丨小時，再投服建議劑量爲至多約75毫克/米2之多烯紫杉醇，共6個療程，並加上經由皮下途徑投服至多約5毫克/公斤之CpG ODN (宜爲 PF3 5 1 2676、1018 ISS、Genasense 或 IMOxine®)。預防性G-CSF可用來減輕血液學毒性之風險。於一較佳體系中係投服約0·01至2.5毫克/公斤（更宜爲約0.05至1.0毫克/公斤’最宜爲約0.2毫克/公斤）之pF3 5 1 2676治療性劑量’且在上述該治療性組合方案後係隨意地接著給予至多約5毫克/公斤之PF3 5 12676的維持劑量（宜爲約〇〇1 至2.5毫克/公斤，更宜爲約〇〇5至1〇毫克/公斤，最宜爲約0.2毫克/公斤）。，並經由皮下途徑投服至例如’在治療NSCLC時，多烯紫杉醇之建議劑量爲每3週在1小時內經由靜脈內途徑投服至多約‘〗〇〇毫克/ 米2 (宜爲至多約75毫克/米2 ) -76- (73) 200824696 多約5毫克/公斤之CpG ODN (宜爲PF3512 676、1018 ISS 、Genasense或IMOxine®)。於一較佳體系中係投服約 0.01至2.5毫克/公斤（更宜爲約〇.〇5至1.0毫克/公斤，最宜爲約〇·2毫克/公斤）之PF3512676治療性劑量，且在上述該治療性組合方案後係隨意地接著給予至多約5毫克 /公斤之PF3 5 1 2676的維持劑量（宜爲約0.01至2.5毫克/ 公斤，更宜爲約〇·〇5至1.0毫克/公斤，最宜爲約0.2毫克/公斤）。

(m)長春瑞賓酒石酸鹽（Navelbine;以下稱爲長春瑞賓）係由葛蘭素史克公司（北卡羅來納州，Triangle

Park，GlaxoSmithkline，Research)供應。長春瑞賓酒石酸鹽爲一種具抗腫瘤活性之半合成長舂花鹼類。其化學名爲 3'，4’-二脫氫-4’-去氧基-C’-正長春鹼（ norvincaleukoblastine ) [R- ( R*，R* ) -2,3-二羥基丁二酸鹽（1 : 2 )(鹽）]。長春瑞賓爲一種干擾微小管組合之長春花鹼類。長春花鹼類爲由 2個多環形單位（ multiringed unit )(長春花朵靈（vindoline)及卡沙倫辛 (catharanthine ))所組成之構造上類似之化合物。不像其他長春花鹼類，卡沙倫辛單位爲長春瑞賓之構造修改部位。長舂瑞賓之抗腫瘤活性被認爲主要係透過其與導管素之交互作用來抑制中期之有絲分裂。如同其他長春花鹼類，長春瑞賓亦可干擾：1)胺基酸，環形AMP及麩胱甘肽之代謝，2)攜鈣素（calmodulin)倚賴性Ca + + -轉運ATP 酶活性，3 )細胞呼吸，及4 )核酸及脂質之生物合成。在 -77- (74) 200824696 來自老鼠胚胎之完整四疊體板（tectal Plates)中’長春瑞賓、長春新鹼及長春花鹼係在同樣濃度（2)下抑制有絲分裂之微小管形成’誘導細胞被阻斷在中期。5 μΜ之長春新鹼造成軸突微小管解聚，但濃度分別爲30μΜ及 40 μΜ之長春花鹼及長春瑞賓才具有此種作用。這些數據顯示長春瑞賓對有絲分裂之微小管的相關選擇性。

與經由皮下途徑投服之至多約5毫克/米2之CpG ODN (宜爲 PF 3512 676、 10 18 ISS、 Genasense 或

IMOxine® ) —起使用時，單一作用劑長春瑞賓的常用起始劑量係至多每週投服約50毫克/米2 (宜爲至多約30毫克 /米2)。長春瑞賓可藉由任何合適之方法以單一大九劑投服或在限定期間內投服。例如：長春瑞賓係在一段時間內 (至多1小時，宜爲至多30分鐘，最宜爲至多10分鐘）經由靜脈內注射投服。在控制之試驗中係每週給予單劑之長春瑞賓直到惡化或劑量之上限毒性。或者，與經由皮下途徑投服之至多約 5毫克/米2之 CpG ODN (宜爲 PF3 5 1 2676、1018 ISS、Genasense 或 IMOxine® ) 一起使用時，可每週投服至多約25毫克/米2之劑量的長春瑞賓並每4週投服至多約1 〇〇毫克/米2之劑量的順鉑。於一較佳體系中係投服約0.01至2.5毫克/公斤（更宜爲約0.05 至1.0毫克/公斤，最宜爲約0.2毫克/公斤）之PF3 5 1 2676 治療性劑量，且在上述該治療性組合方案後係隨意地接著給予至多約5毫克/公斤之PF3 5 1 2676的維持劑量（宜爲約0·0 1至2.5毫克/公斤，更宜爲約0.05至1.0毫克/公斤 -78- (75) 200824696 ，最宜爲約0.2毫克/公斤）。

(η )伊立替康（Camptosar® ;伊立替康氫氯酸鹽）係由紐約州紐約市輝瑞（Pfizer )公司供應。伊立替康氫氯酸鹽注射液爲拓撲異構酶（topoisomerase) I抑制劑類之抗惡性腫瘤劑。伊立替康氫氯酸鹽係以CPT-11在臨床上進行硏究。伊立替康氫氯酸鹽爲喜樹鹼（camptothecin alkaloid )(此爲來自植物，諸如：喜樹（camptothecin acuminata )之生物鹼萃取物）之半合成衍生物。其化學名爲（S) -4，11-二乙基-3,4，12，14-四氫-4-羥基-3，14-二合氧基1H-吡喃並[3’，4、6,7]-吲井並[l，2-b]喹啉-9-基-[1，4’聯六氫吡啶]羧酸酯，單氫氯酸鹽三水合物。伊立替康爲喜樹鹼之衍生物。喜樹鹼與拓撲異構酶1(其藉由誘導可逆性單股破裂來釋出DNA中之扭轉張力）特異地交互作用。伊立替康及其活性代謝物SN-38結合拓撲異構酶I-DNA 複合物並防止這些單股破裂物再連結。目前的硏究指出伊立替康之細胞毒性係來自DNA合成期間，複製酶與拓撲異構酶I、DNA及伊立替康或SN-38所形成之三元複合物交互作用時所產生之雙股DNA損壞。哺乳動物細胞不能有效地修復這些雙股破裂。伊立替康係作爲親脂性代謝物 SN-38之水溶性先質。SN-38係藉由羧基酯酶促成喜樹鹼部分及聯六氫吡啶側鏈間之胺基甲酸酯鍵裂解，從伊立替康形成。SN-38在作爲從人類及齧齒動物腫瘤細胞株純化之拓撲異構酶I的抑制劑方面約爲伊立替康效力之1 000 倍。玻管中之細胞毒性分析顯示SN-38相對於伊立替康之 -79- (76) 200824696 效力係在2至2000倍間變化。然而，SN-38之濃度對時間曲線下血漿面積（AUC)爲伊立替康之2%至8%且SN-38有95 %與血漿蛋白質結合，相較下，伊立替康約有50% 與血漿蛋白質結合（見藥物動力學）。因此，SN-38對伊立替康®活性之確實貢獻仍未知。伊立替康與SN-38二者係以活性內酯形式及無活性羥基酸陰離子形式存在。此二種形式間存有pH-倚賴性平衡，如此，酸性pH値可促成內酯形成，而較鹼性之pH値則有利於羥基酸陰離子形式與經由皮下途徑投服之至多約5毫克/米2之CpG ODN (宜爲 P F 3 5 1 2 6 7 6 、 1018 ISS 、 Genasense 或

IMOxine®) —起使用時，給予患者之伊立替康的劑量至多約5 00毫克/米2 (宜爲至多約3 75毫克/米2)。於一較佳體系中係投服約〇.〇1至2.5毫克/公斤（更宜爲約0.05至 1.0毫克/公斤，最宜爲約0.2毫克/公斤）之PF3512676治療性劑量，且在上述該治療性組合方案後係隨意地接著給予至多約5毫克/公斤之PF3 5 1 2676的維持劑量（宜爲約 0.01至2·5毫克/公斤，更宜爲約0.05至1.0毫克/公斤，最宜爲約〇·2毫克/公斤）。 (〇) 依托伯苷（亦通稱爲VP-16)爲用於治療某些惡性腫瘤疾病之鬼白毒素（podophyllotoxin)的半合成衍生物。其爲去甲基表鬼臼毒素9-[4,6-0-(R)-亞乙基-β-D-葡糖卩比喃甘]。依托伯苷係由加州Irvine之Gensia Sicor 製藥公司供應。依托伯苷在小雞纖維母細胞中顯示出引起 -80- (77) 200824696 中期休止。然而，其主要作用顯示出係在哺乳動物細胞中之細胞週期的G2部分。觀察到之不同劑量倚賴性反應有二種。在高濃度（10微克/毫升或更多）下可觀察到進入有絲分裂期之細胞溶解。在低濃度（0.3至10微克/毫升 )下細胞被阻止進入前期。其不會干擾微小管組合。依托伯苷之主要巨分子作用顯示出爲抑制DNA合成。

與經由皮下途徑投服之至多約5毫克/米2之CpG ODN (宜爲 PF 3 5 1 2 6 7 6、 1 〇 1 8 IS S、Genasense 或 IMOxine®) —起使用時，依托伯苷注射液劑量至多約250 毫克/米2 (宜爲至多約1〇〇毫克/米2 )。於一較佳體系中係投服約〇 · 〇 1至2 · 5毫克/公斤（更宜爲約〇 · 〇 5至1.0毫克/公斤，最宜爲約〇·2毫克/公斤）之PF35 1 2676治療性劑量，且在上述該治療性組合方案後係隨意地接著給予至多約5毫克/公斤之PF3 5 1 2676的維持劑量（宜爲約〇.〇1 至2.5毫克/公斤，更宜爲約0.05至1·0毫克/公斤，最宜爲約0.2毫克/公斤）。 (Ρ)長春花鹼、長春驗、VLB、Velb an (硫酸鹽）係由加州聖地牙哥之伊頓生物醫療（Eton Biomedical)公司供應。長春花鹼爲在長春花中找到之生物鹼。其結合導管素，防止細胞製造其在有絲分裂中期分裂時用來移動其染色體時所需要的紡錘體。其似乎亦可干擾細胞合成DNA 及RNA之能力。與經由皮下途徑投服之至多約5毫克/米2之CpG ODN (宜爲 PF3 5 1 2676、 1018 ISS 、 Genasense 或 -81 - (78) 200824696

IMOxine® ) —起使用時，投服之長春花驗的劑量至多約 10毫克/米2(宜爲至多約5毫克/米2，最宜爲至多約3毫克/米2 )。於一較佳體系中係投服約0 · 0 1至2.5毫克/公斤（更宜爲約0.05至1.0毫克/公斤，最宜爲約〇·2毫克/ 公斤）之P F 3 5 1 2 6 7 6治療性劑量，且在上述該治療性組合方案後係隨意地接著給予至多約5毫克/公斤之PF3 5 1 2676 的維持劑量（宜爲約0 · 0 1至2 · 5毫克/公斤，更宜爲約 0.05至1.0毫克/公斤，最宜爲約〇.2毫克/公斤）。 (q)伊弗法醯胺（IFEX®，注射用之伊弗法醯胺）係由紐澤西州Princeton之必治妥施貴寶公司供應。伊弗法醯胺爲一種與氮芥在化學上相關之化療劑且爲合成之環磷醯胺類似物。伊弗法醯胺爲3- ( 2-氯乙基）-2- [( 2-氯乙基）胺基]四氫-2H-1，3,2 -氧氮磷環（oxazaphosphorine) -2-氧化物。伊弗法醯胺顯示出需要藉原漿微粒肝臟酶進行代謝活化作用，以製造生物活性代謝物。活化作用係藉由環碳原子4處之羥基化作用產生，以形成不穩定之中間物，4-羥基伊弗法醯胺。此代謝物快速降解成穩定之尿代謝物，4-酮基伊弗法醯胺。打開環可形成穩定之尿代謝物， 4-羧基伊弗法醯胺。這些尿代謝物並未發現具細胞毒性。亦發現N，N-雙（2-氯乙基）-磷酸二醯胺（伊弗法醯胺）及丙烯醛（acrolein )。將氯乙基側鏈進行酶性氧化，再接著去烷基化可產生主要之尿代謝物，去氯乙基伊弗法醯胺及去氯乙基環磷醯胺。伊弗法醯胺之烷基化代謝物顯示出與DNA交互作用。將DNA與活化之伊弗法醯胺一起在 -82- (79) 200824696 玻管內培育可製造磷酸三酯。處理完整之細胞核亦可形成 DNA-DNA交聯。DNA修復最可會艮發生在G-1及G-2期之細胞。與經由皮下途徑投服之至多約5毫克/米2之CpG ODN (宜爲 PF351 2676、 1018 ISS、Genasense 或

IMOxine® ) —起使用時，IFEX應經由靜脈內途徑投服至多約3克/米2 (宜爲至多約1.2克/米2 )之劑量。在非限定之實例中，於治療方案中係每天投服IFEX (如：3 -7天 (宜爲連續5天），且治療係隨意地每3週或從血液學毒性（血小板g 1 00,000/微升，WBC g 4,000/微升）恢復後重複進行。於一較佳體系中係投服約0.01至2.5毫克/公斤（更宜爲約0.05至1.0毫克/公斤，最宜爲約0.2毫克/ 公斤）之PF3 5 1 2676治療性劑量，且在上述該治療性組合方案後係隨意地接著給予至多約5毫克/公斤之PF3512676 的維持劑量（宜爲約0.01至2.5毫克/公斤，更宜爲約 0.05至1.0毫克/公斤，最宜爲約0.2毫克/公斤）。 (r ) 托波.替康（Hycamtin® ;托波替康氫氯酸鹽）

係由葛蘭素史克公司（北卡羅來納州，Triangle Park， Glaxo Smithkline，Research )供應。托波替康爲半合成之喜樹驗（此爲來自東方紫杉，喜樹（camptothecin acuminata )之作用劑）類似物。據信，喜樹鹼之細胞毒性係與其作爲拓撲異構酶I ( 一種涉及細胞核DNA之複製及修復的酶）抑制劑之活性有關。當DNA在分裂之細胞中複製時，拓撲異構酶I藉由結合超螺旋DNA，使該DNA -83- (80) 200824696 中之單股破裂來作用。因此，拓撲異構酶I可在複製複合物或移動複製叉前釋出被引入DNA中之扭轉張力。托波替康藉由穩定酶與股-裂解之DNA的共價複合物（其爲催化機制之中間物）來抑制拓撲異構酶I，以藉此誘導與蛋白質結合之單股DNA斷裂，使細胞死亡。

與經由皮下途徑投服之至多約5毫克/米2之CpG ODN (宜爲 PF35 12676、 1018 ISS、Genasense 或

IMOxine®) —起使用時，托波替康之建議劑量爲至多約5 毫克/米2 (宜爲至多約3毫克/米2，最宜爲至多約1.5毫克/米2)。在投服第一個療程之托波替康前，患者應具有中性細胞數>1，5 00細胞/毫米3及血小板數>100,〇0〇細胞/ 毫米3之基線；且托波替康之劑量應在限定時間內（如：至多3小時，宜爲至多1小時，最宜爲至多約3 0分鐘），經由靜脈內注入投服，且在治療方案（如：2 1天之療程 )起始時開始（如：第1天）每天投藥，至多連續5天。於一較佳體系中係投服約〇·〇1至2.5毫克/公斤（更宜爲約0.05至1.0毫克/公斤，最宜爲約0.2毫克/公斤）之 PF3 5 1 2676治療性劑量，且在上述該治療性組合方案後係隨意地接著給予至多約5毫克/公斤之PF3 5 1 2676的維持劑量（宜爲約〇.〇1至2.5毫克/公斤，更宜爲約0.05至 1.0毫克/公斤，最宜爲約〇·2毫克/公斤）。 (s )環磷醯胺（Cytoxan® ;注射用之環磷醯胺錠劑 )係由紐澤西州普林斯敦之必治妥施貴寶公司供應。環磷醯胺爲一種合成之與氮芥化學上相關的抗惡性腫瘤藥物。 -84- (81) 200824696 環磷醯胺之化學名爲2-[雙（2-氯乙基）胺基]四氫-2H-1，3,2-氧氮磷環2-氧化物一水合物。環磷醯胺主要在肝臟中藉由混合功能之微粒氧化酶系統，經生物轉形成活性烷基化代謝物。這些代謝物干擾敏感性快速增生之惡性細胞的生長。其作用機制被認爲係涉及腫瘤細胞DNA之交聯

與經由皮下途徑投服之至多約5毫克/米2之CpG ODN (宜爲 PF35 1 2676、 1018 ISS、Genasense 或 IMOxine®) —起使用時，環磷醯胺係經由靜脈內途徑投服包括至多約7克/米2 (例如：至多約750毫克/米2)之劑量，每7至1 〇天給藥一次。於一較佳體系中係投服約〇·〇1至2.5毫克/公斤（更宜爲約0.05至1.0毫克/公斤，最宜爲約0.2毫克/公斤）之PF3 5 12676治療性劑量，且在上述該治療性組合方案後係隨意地接著給予至多約5毫克 /公斤之PF35 1 2676的維持劑量（宜爲約〇·〇1至2.5毫克/ 公斤，更宜爲約〇·〇5至1.0毫克/公斤，最宜爲約〇.2毫克/公斤）。 (t )長春新驗（Oncovin® )係由 AM Pharm Partners 供應。長舂新鹼屬於一般之化療藥物，稱爲植物（長春）鹼。長春新鹼終止細胞分裂，造成細胞死亡。與經由皮下途徑投服之至多約5毫克/米2之CpG 〇DN (宜爲 PF3 5 1 2676、 1018 ISS、Genasense 或 IM〇xine® ) —起使用時，長春新鹼之投服劑量係至多約 3 〇毫克/米2(如：10-30毫克/米2)。於一較佳體系中係 -85- (82) 200824696 投服約〇·〇1至2.5毫克/公斤（更宜爲約0.05至1.0毫克/ 公斤，最宜爲約〇·2毫克/公斤）之PF3512676治療性劑量，且在上述該治療性組合方案後係隨意地接著給予至多約 5毫克/公斤之PF3 5 12676的維持劑量（宜爲約〇.〇 i至2.5 毫克/公斤，更宜爲約〇.〇5至1.0毫克/公斤，最宜爲約〇·2毫克/公斤）。 (u)甲胺喋玲（正式名稱爲 Amethopterin)爲用於

治療某些惡性腫瘤疾病、嚴重牛皮癬及成人類風濕性關節炎之抗代謝物。甲胺喋呤係由俄亥俄州Bedford之Ben Venue實驗室供應。化學上，甲胺喋呤爲N-[4-[[(2,4-二胺基-6-喋啶基）甲基]甲胺基]苯甲醯基]-L-麩胺酸。甲胺喋呤抑制二氫葉酸還原酶。二氫葉酸鹽必須藉由此酶還原成四氫葉酸鹽，才能在合成p.r.n.核苷酸及胸苷酸鹽之過程中作爲一碳基團之載體。因此，甲胺喋呤干擾DNA合成、修復及細胞複製。活躍之增生組織（諸如惡性細胞、骨髓、胚胎細胞、口腔及小腸黏膜程膀胱細胞）對此甲胺喋呤之作用通常更敏感。當惡性組織中之細胞增生較大部分正常組織來得多時，甲胺喋呤可損害惡性細胞生長而對正常組織不會有無法回復之損害。

與經由皮下途徑投服之至多約5毫克/米2之CpG ODN (宜爲 PF3 5 1 2 67 6、 1 0 1 8 IS S、Genasens e 或 IMOxine® ) —起使用時，甲胺喋呤之投服劑量係至多約 12克/米2(宜爲至多約50毫克/米2，更宜爲至多約30毫克/米2)。於一較佳體系中係投服約0.01至2.5毫克/公 -86- (83) 200824696 斤（更宜爲約0·05至1.0毫克/公斤，最宜爲約〇·2毫克/ 公斤）之PF3 5 12676治療性劑量，且在上述該治療性組合方案後係隨意地接著給予至多約5毫克/公斤之PF3512 676 的維持劑量（宜爲約0.01至2·5毫克/公斤，更宜爲約 0.05至1.0毫克/公斤，最宜爲約〇.2毫克/公斤）。 (ν)氟尿嘧啶（5-氟尿嘧啶或5-FU)爲可系統或局部投服之抗代謝物。

與經由皮下途徑投服之至多約5毫克/米2之CpG 〇DN (宜爲 PF3 5 1 2676、 1018 ISS、Genasense 或 IMOxine® ) —起使用時，氟尿嘧啶之投服劑量係至多約 26 00毫克/米2 (宜爲至多約500毫克/米2)。於一較佳體系中係投服約0.01至2.5毫克/公斤（更宜爲約0.05至 1·〇毫克/公斤，最宜爲約〇_2毫克/公斤）之PF3512676治療性劑量，且在上述該治療性組合方案後係隨意地接著給予至多約5毫克/公斤之PF3 5 12676的維持劑量（宜爲約〇·〇1至2.5毫克/公斤，更宜爲約0.05至1 ·〇毫克/公斤，最宜爲約0.2毫克/公斤）。 (w )卡倍他濱（X e 1 〇 d a ® )係由紐澤西州N u 11 e y之 Η o f f m a n L a R o c h e供應。卡倍他濱爲具抗惡性腫瘤活性之氟嘧啶胺基甲酸酯。其爲轉化成5-氟尿嘧啶之5’-去氧基-5 -氟尿嘧啶（5 | -D FUR )的口服系統性前藥。卡倍他濱之化學名稱爲5，-去氧基-5-氟-N-[(戊氧基）羰基]-胞嘧啶核苷。正常及腫瘤細胞均將5-FU代謝成5-氟-2’-去氧尿嘧啶單磷酸鹽（FdUMP)及5-氟尿嘧啶三磷酸鹽（FUT]p)。 -87- (84) 200824696 這些代謝物藉由二種不同機制使細胞受損。首先，FdUMP 及葉酸鹽輔因子（ N5·1、伸甲基四氫葉酸鹽）結合胸苷酸

合成酶（TS)，以形成共價結合之三元複合物。此結合抑制從2’-去氧尿苷酸鹽形成胸苷酸鹽。胸苷酸鹽爲胸腺核苷三磷酸鹽（其爲合成DNA所必要者）之必要先質，因此，缺乏此化合物時可抑制細胞分裂。再者，細胞核轉錄酶可在合成RNA時誤將FUTP倂入，以取代尿核苷三磷酸鹽（UTP )。此代謝錯誤可干擾RNA處理及蛋白質合成。與經由皮下途徑投服之至多約5毫克/米2之CpG ODN (宜爲 PF3 5 1 2676、 1018 ISS、 Genasense 或 IMOxine® ) —起使用時，卡倍他濱之建議劑量爲至多約 25 00毫克/米2 (宜爲至多約125〇毫克/米2)。於一非限定實例中係每日口服卡倍他濱二次（早上及晚上；等於至多約25 00毫克/米2之每日總劑量）共二週，再休息一週，此爲3_週之週期。與多烯紫杉醇一起給藥時，卡倍他濱之建議劑量爲每日投服二次，至多約1 5 00毫克/米2 (宜爲至多約1 250毫克/米2 )，共二週，再休息一週，並每3 週經由靜脈內途徑在1小時內注入至多約7 5毫克/米2之多烯紫杉醇，再加上經由皮下途徑投服至多約5毫克/公斤之 CpG ODN (宜爲 PF351267 6、1018 ISS、Genasense 或IMOxine®)。於一較佳體系中係投服約0.01至2.5毫克/公斤（更宜爲約0.05至1.0毫克/公斤，最宜爲約0.2 毫克/公斤）之PF3 5 12676治療性劑量，且在上述該治療性組合方案後係隨意地接著給予至多約5毫克/公斤之 -88- (85) 200824696 PF3 5 12676的維持劑量（宜爲約0·01至2·5毫克/公斤，更宜爲約〇·〇5至1·0毫克/公斤，最宜爲約0.2毫克/公斤 (X )多柔比星（Adriamycin® ;羥基柔紅黴素（ Hydroxyl daunorubicin))係由 Pharmacia & Upjohn 提供

。柔紅黴素及其1 4-羥基衍生物，多柔比星，爲波賽鏈黴菌（Streptomyces peucetius )所製造之蒽環黴素抗生素。多柔比星係藉由插入蒽環部分、金屬離子螯合或產生游離基來傷害DNA。多柔比星亦顯示出可抑制DNA拓撲異構酶Π (其對DNA功能具關鍵性）。細胞毒性之活性爲細胞週期相-非特異性。與經由皮下途徑投服之至多約5毫克/米2之CpG ODN (宜爲 PF3 5 1 2676、 1 〇 1 8 IS S、Genasense 或 IMOxine® ) —起使用時，多柔比星之投服劑量爲至多約 75毫克/米2(宜爲至多約50毫克/米2)。於一較佳體系中係投服約〇·〇1至2.5毫克/公斤（更宜爲約0.05至i.o 毫克/公斤，最宜爲約0.2毫克/公斤）之PF3512676治療性劑量，且在上述該治療性組合方案後係隨意地接著給予至多約5毫克/公斤之PF3 5 1 2676的維持劑量（宜爲約 0.01至2.5毫克/公斤，更宜爲約〇〇5至ι·〇毫克/公斤，最宜爲約〇 · 2毫克/公斤）。 . (y)表阿黴素（Ellenee®;表阿黴素氫氯酸鹽注射液 )係由Pharmacia & Upjohn提供。表阿黴素氫氯酸鹽爲多柔比星之4-差位異構物且爲半合成之柔紅黴素衍生物。其 -89- (86) 200824696 化學名爲（8S-順）-l〇-[(3-胺基-2,3,6-三去氧基-a-L-阿拉伯-己吡喃糖基）氧基]-7,8，9,10-四氫-6,8，11_三羥基- 8- (羥乙醯基）-1-甲氧基-5,12-萘二酮氫氯酸鹽。

與經由皮下途徑投服之至多約5毫克/米2之CpG ODN (宜爲 PF3 5 1 2676、 1018 ISS、Genasense 或

IMOxine®) —起使用時，表阿黴素之投服劑量爲至多約 150毫克/米2 (宜爲至多約135毫克/米2或至多約120毫克/米2)。表阿黴素係在重複進行之3-至4-週的週期中隨意地經由靜脈內注入給予患者。表阿黴素之總劑量可在各週期之第1天給予患者或可均分並在各週期之第1天及第 8天給予患者。於一較佳體系中係投服約0.01至2.5毫克/ 公斤（更宜爲約0.05至1.0毫克/公斤，最宜爲約0.2毫克/公斤）之PF3 5 12676治療性劑量，且在上述該治療性組合方案後係隨意地接著給予至多約 5毫克/公斤之 PF3 5 1 2676的維持劑量（宜爲約0.01至2.5毫克/公斤，更宜爲約〇.〇5至1 ·0毫克/公斤，最宜爲約0.2毫克/公斤 )° (z)曲妥珠單抗（Herceptin)係由 Genentech公司提供。曲妥珠單抗（Trastuzumab )爲一種自重組DNA衍生的人類化單株抗體，其在以細胞爲基礎之分析中以高親和力（Kd = 5nM)選擇性地結合人類表皮生長因子受體2 蛋白質，HER2之胞外結構區。該抗體爲含有人類框構區的IgGiK，此人類框構區具有結合HER2之老鼠抗體的互補決定區（4D5) °HER2(或c-erbB2)原始致癌基因係 -90 - (87) 200824696 編碼185kDa之透膜受體蛋白質（其與表皮生長因子受體爲構造上相關）。：HER2蛋白質過度表達可在25%-30%之原發性乳癌中觀察到。

與經由皮下途徑投服之至多約5毫克/米2之CpG 〇DN (宜爲 PF3 5 1 2676、 1018 ISS 、 Genasense 或 IMOxine®)——起使用時，曲妥珠單抗之建議劑量爲至多約

8毫克/米2。於一較佳體系中係投服約0 · 0 1至2.5毫克/公斤（更宜爲約0.05至1.0毫克/公斤，最宜爲約0.2毫克/ 公斤）之PF3 5 12676治療性劑量，且在上述該治療性組合方案後係隨意地接著給予至多約5毫克/公斤之PF3 5 1 2676 的維持劑量（宜爲約0.01至2.5毫克/公斤，更宜爲約〇· 05至1.0毫克/公斤，最宜爲約0.2毫克/公斤）。 (aa )塔莫西芬（Nolvadex® ;塔莫西芬檸檬酸鹽錠劑）係由德拉瓦州 Wilmington之阿斯利康（AstraZeneca )製藥提供。塔莫西芬爲一種非類固醇抗動情激素。其化學名爲（Z ) 2-[4- ( 1，2-聯苯基-卜丁烯基）苯氧基]-N，N 二甲基乙胺 2 -經基-1，2,3 -丙三殘酸酯（1:1) 。Nolvadex® 爲一種非類固醇作用劑，其在動物試驗系統中顯示強出抗動情激素性質。該抗動情激素作用可能與其具有與動情激素競爭標靶組織（諸如乳房）中之結合部位的能力有關。塔莫西芬抑制二甲基苯蒽（DMBA )誘導之大鼠乳房惡性腫瘤並使已證實之由DMBA引起的腫瘤消退。在此大鼠模型中’塔莫西芬顯示出藉由結合動情激素受體來發揮其抗腫瘤作用。在自人類乳房腺癌衍生之胞質中，塔莫西芬與 -91 - (88) 200824696 雌二醇競爭動情激素受體蛋白質。

在罹患乳癌之患者中，每曰之建議劑量爲至多約80 毫克/米2(例如：20-40毫克）。每日高於20毫克之劑量應以分割劑量給藥（早上及晚上）。塔莫西芬可與經由皮下途徑投服之至多約5毫克/公斤的CpG ODN (宜爲 PF3 5 12676、1018 ISS、Genasense 或 IMOxine®) —起使用。於一較佳體系中係投服約0.01至2.5毫克/公斤（更宜爲約0.05至1.0毫克/公斤，最宜爲約0.2毫克/公斤）之PF3 5 126 76治療性劑量，且在上述該治療性組合方案後係隨意地接著給予至多約5毫克/公斤之PF3 5 1 2676的維持劑量（宜爲約〇.〇1至2.5毫克/公斤，更宜爲約0.05至 1.0毫克/公斤，最宜爲約0.2毫克/公斤）。 (bb )來曲唑（Femara® ;來曲唑錠劑）係由紐澤西州EastHanover之諾華公司提供。來曲唑爲一種非類固醇芳香酶抑制劑，其化學名稱爲4,4f- ( 1H-1，2,4-三唑-1-基

與經由皮下途徑投服之至多約5毫克/米2之CpG 〇DN (宜爲 PF3 5 1 2676、 1018 ISS、Genasense 或 IMOxine®) —起使用時，來曲唑之投服劑量爲至多5毫克 (無需考慮進餐時間）。於一較佳體系中係投服約〇.〇1 至2.5毫克/公斤（更宜爲約〇.〇5至1.0毫克/公斤，最宜爲約〇·2毫克/公斤）之PF3 5 1 2676治療性劑量，且在上述該治療性組合方案後係隨意地接著給予至多約5毫克/公斤之PF3 5 1 2676的維持劑量（宜爲約〇.〇 i至2.5毫克/公 -92 - (89) 200824696 斤，更宜爲約0.05至1.0毫克/公斤，最宜爲約0.2毫克/ 公斤）。 (cc)阿那曲唑（Arimidex®;阿那曲唑錠劑）係由德拉瓦州 Wilmington之阿斯利康製藥提供。阿那曲唑爲一種非類固醇芳香酶抑制劑，化學上稱爲1，3-苯二乙腈，〇1，〇1.〇1’，〇1’-四甲基-5-(111-1，2,4-三唑-1-基甲基）。

與經由皮下途徑投服之至多約5毫克/米2之CpG ODN (宜爲 PF35 1 2676、 1018 ISS、Genasense 或

IMOxine® )-起使用時，阿那曲唑之劑量爲至多2毫克，每天服用一次。於一較佳體系中係投服約0.01至2.5毫克 /公斤（更宜爲約0.05至1.0毫克/公斤，最宜爲約0.2毫克/公斤）之PF3 5 12676治療性劑量，且在上述該治療性組合方案後係隨意地接著給予至多約5毫克/公斤之 PF3 5 1 2676的維持劑量（宜爲約〇.〇1至2.5毫克/公斤，更宜爲約〇·〇5至1.0毫克/公斤，最宜爲約0.2毫克/公斤 )° (dd )伊西美坦（Aromasin® ;伊西美坦鏡劑）係由紐約州紐約市之輝瑞公司提供。伊西美坦爲一種不可逆之類固醇芳香酶去活化劑，其化學上稱爲6-伸甲基雄脂烷-1，4-二烯-3,17二酮。伊西美坦爲一種不可逆之類固醇芳香酶去活化劑’構造上與天然物質雄烯二酮相關。其爲芳香酶之錯誤受質且係經處理成一種中間物，此中間物以不可逆方式結合酶的活化部位，使酶去活化（此作用亦稱爲" 自殺抑制”）。伊西美坦顯著降低停經婦女體內之循環動 -93- (90) 200824696 情激素濃度，但對腎上腺生物合成皮質類固醇或醛固酮則不具可偵測到之效果。伊西美坦之濃度需至少爲其抑制芳香酶之濃度的600倍才能對其他涉及類脂醇生成之通路的酶產生效果。與經由皮下途徑投服之至多約5毫克/米2之CpG ODN (宜爲 PF3 5 1 2676、 1018 ISS、 Genasense 或

IMOxine® ) —起使用時，伊西美坦之建議劑量爲至多約 5〇毫克。於一較佳體系中係投服約〇.〇1至2.5毫克/公斤 (更宜爲約0.05至1.0毫克/公斤，最宜爲約〇.2毫克/公斤）之PF3 5 1 2676治療性劑量，且在上述該治療性組合方案後係隨意地接著給予至多約5毫克/公斤之PF3 5 1 2676 的維持劑量（宜爲約〇·〇1至2.5毫克/公斤，更宜爲約 0 · 0 5至1 · 0毫克/公斤，最宜爲約〇 · 2毫克/公斤）。 (dd ) BiCNU (注射用之卡沐汀（

Carmustine ))係由紐澤西州普林斯敦之必治妥施貴寶公司供應。其爲1，3 _ 雙（2-氯乙基）-1-亞硝基尿素。雖然一般同意卡沐汀可將 DN A及RN A烷基化，但其與其他烷化劑並不具交互抗藥性。當與其他亞硝基尿素一起使用時，其亦可藉由將蛋白質中之胺基酸胺甲醯基化來抑制數種關鍵之酶性過程。

BiCNU®之建議齊!I量爲至多約200毫克/米2 (例如·· 150至200毫克）。BiCNU可與經由皮下途徑投服之至多約 5 毫克 / 公斤之 CpG ODN (宜爲 PF3512676、1018 ISS、 Genasense或IMOxine®) —起使用。於一較佳體系中係投服約〇.〇1至2.5毫克/公斤（更宜爲約〇·〇5至1.0毫克/公 -94- (91) 200824696 斤，最宜爲約0.2毫克/公斤）之PF3 5 1 2676治療性劑量，且在上述該治療性組合方案後係隨意地接著給予至多約5 毫克/公斤之PF35 12676的維持劑量（宜爲約〇·〇1至2·5 毫克/公斤，更宜爲約0.05至1.0毫克/公斤，最宜爲約〇_2毫克/公斤）。 (ee ) 替莫哩胺（Temodar® ) 係由紐澤西州

Kenilworth 之仙靈公司（Schering Corporation)供應。其爲3,4-二氫-3-甲基-4-合氧基咪唑並[5,1-d]-as-四哄-8-羧醯胺。替莫唑胺在生理pH値下並不直接活化，但發生快速之非酶性轉化反應，而轉化成反應性化合物MTIC。 MTIC之細胞毒性被認爲主要係由於DNA烷基化。烷基化 (甲基化）主要係發生在鳥嘌呤之06及N7位置處。替莫唑胺之投服劑量爲至多約200毫克/米2，其可單獨投服或與a-干擾素（5MU/米2 )經由皮下途徑投服，並經由皮下途徑投服至多約5毫克/公斤之CpG ODN (宜爲 PF3 5 12676、101 8 ISS、Genasense 或 IMOxine⑧）。於一較佳體系中係投服約0.01至2.5毫克/公斤（更宜爲約 0.05至1.0毫克/公斤，最宜爲約〇·2毫克/公斤）之 PF 3 5 1 2 6 7 6治療性劑量，且在上述該治療性組合方案後係隨意地接著給予至多約5毫克/公斤之pF3 5 12676的維持劑量（宜爲約〇·〇1至2.5毫克/公斤，更宜爲約〇.〇5至 1·〇毫克/公斤，最宜爲約0.2毫克/公斤）。 (ff)瘤克寧（Leukeran)(氯胺布西（chlorambucil ))係由葛蘭素史克公司（北卡羅來納州，Triangle Park -95- (92) 200824696 ，GlaxoSmithkline，Research)供應。其爲氮芥型之雙官能烷基化作用劑，此作用劑被發現對選定之人類惡性腫瘤疾病具活性。氯胺布西在化學上稱爲4-[雙（2_氯乙基）胺基]苯丁酸。

氯胺布西之常用口服劑量爲至多約0.2毫克/米2 (例如：0.1至0.2毫克/公斤）。一般患者之常用量爲每日約 4-1 0毫克。每日之全部劑量可一次給予。這些劑量係用於起始療法或短期治療。該劑量必須根據患者之反應小心調整，且當白血球數快速減少時必須儘快降低劑量。罹患何杰金氏症之患者通常需要每日約0.2毫克/公斤之劑量，然而罹患其他淋巴瘤或慢性淋巴性白血病之患者通常每曰僅需要〇. 1毫克/公斤之劑量。氯胺布西可與經由皮下途徑投服之至多約5毫克/公斤之CpG ODN (宜爲PF3 5 1 2676、 1018 ISS、Genasense 或 IMOxine®) — 起使用。於一較佳體系中係投服約〇·〇1至2.5毫克/公斤（更宜爲約〇.〇5至 1·〇毫克/公斤，最宜爲約0.2毫克/公斤）之PF3512676治療性劑量，且在上述該治療性組合方案後係隨意地接著給予至多約5毫克/公斤之PF3 5 1 2676的維持劑量（宜爲約 0.01至2.5毫克/公斤，更宜爲約〇·〇5至1 .〇毫克/公斤，最宜爲約〇·2毫克/公斤）。 (gg )氟達拉濱（Fludara ;氟達拉濱磷酸鹽）可從 Berlex實驗室取得。氟達拉濱爲一種抗病毒劑（維達拉濱 (vidarabine ))之氟化核苷類似物。氟達拉濱磷酸鹽之化學名爲9H-嘌呤-6-胺，2_氟-9- ( 5-0-膦酸基-_-D-阿拉伯 -96- (93) 200824696 呋喃糖基）。氟達拉濱磷酸鹽經快速去磷酸化成2_氟-阿拉伯腺苷，然後再藉去氧胞嘧11定核苷激酶進行胞內磷酸化作用成爲活性三磷酸鹽，2-氟-阿拉伯腺苷三磷酸鹽。此代謝物顯示出藉由抑制DNAoi-聚合酶、核糖核苷酸還原酶及 DNA引物酶作用，以抑制DNA合成。此抗代謝物之作用機制的特性並未被完整決定出且可能爲多面向的。

與經由皮下途徑投服之至多約5毫克/米2之CpG

ODN (宜爲 PF3512676 、 1018 ISS 、 Genasense 或 IMOxine® ) —起使用時，氟達拉濱之建議劑量爲至多約 25毫克/米2。於一較佳體系中係投服約0.01至2.5毫克/ 公斤（更宜爲約0.05至1.0毫克/公斤，最宜爲約0.2毫克/公斤）之PF3 5 1 2676治療性劑量，且在上述該治療性組合方案後係隨意地接著給予至多約 5毫克/公斤之 PF3 5 1 2676的維持劑量（宜爲約0.01至2.5毫克/公斤，更宜爲約0.05至1.0毫克/公斤，最宜爲約0.2毫克/公斤

(h h )利多西單抗（利多生（R i t u X a η ))可從加州南舊金山Genentech公司取得。利多生爲瞄準Β細胞之單株抗體。在前3個劑量內，Β細胞被快速消除，一般係在治療完成後的5至1 2個月內回復至治療前的水準。利多西單抗可與經由皮下途徑投服之至多約5毫克/ 公斤的 CpG ODN (宜爲 PF3 5 126 76、1018 ISS、Genasense 或IMOxin^) 一起使用。於一較佳體系中係投服約0·01 至2 · 5毫克/公斤（更宜爲約〇 . 〇 5至丨· 〇毫克/公斤，最宜 -97- (94) 200824696 爲約0.2毫克/公斤）之PF35 12676治療性劑量，且在上述該治療性組合方案後係隨意地接著給予至多約5毫克/公斤之PF3512676的維持劑量（宜爲約0.01至2.5毫克/公斤，更宜爲約0.05至1.0毫克/公斤，最宜爲約0.2毫克/ 公斤）。 (ii )西妥昔單抗（Erbitux® )係由紐澤西州普林斯

敦之必治妥施貴寶公司供應。西妥昔單抗爲重組之人類/ 老鼠嵌合性單株抗體，其特異結合人類表皮生長因子受體 (EGFR)之胞外結構區。西妥昔單抗係由帶有人類IgGl 重鏈及κ輕鏈恆定區之老鼠抗-EGFR抗體的Fv區組成且具有約152kD a之分子量。西妥昔單抗係在哺乳動物（老鼠骨髓瘤）細胞培養中製造。西妥昔單抗特異結合正常及腫瘤細胞上之表皮生長因子受體（EGFR、HER1、c-ErbB-1)並以競爭方式抑制表皮生長因子（EGF)與其他配體（諸如轉形生長因子-α)結合。西妥昔單抗與EGFR結合阻斷與受體聯結之激酶磷酸化及活化，以抑制細胞生長，造成細胞凋亡並減少基質金屬蛋白質酶及血管內皮生長因子製造。EGFR爲一種透膜糖蛋白，其爲第I型受體酪胺酸激酶次族（包括 EGFR ( HER1 ) 、HER2、HER3 及 HER4 )的一員。EGFR係組成上表現於許多正常表皮組織（包括皮膚及毛囊）上。在許多人類癌症（包括大腸及直腸癌 )中亦可偵測到EGFR過度表達。玻管內分析及在動物活體內之硏究顯示出西妥昔單抗抑制過度表現EGFR之腫瘤細胞的生長及存活。在缺乏EGFR表現之人類腫瘤異種移 -98- (95) 200824696 植物中並未觀察到西妥昔單抗之抗腫瘤作用。在動物硏究中，與單獨之化療相較下，將西妥昔單抗加入伊立替康或伊立替康加5-氟尿嘧啶中可增加抗腫瘤效果。

西妥昔單抗可單獨使用或可與伊立替康一起使用，其中伊立替康之劑量如上述，西妥昔單抗之劑量爲至多約 400毫克/公斤。在西妥昔單抗單一療法或與伊立替康之組合療法中可加入經由皮下途徑投服之至多約5毫克/公斤之 CpG ODN (宜爲 PF3 5 12676、1018 ISS、Genasense 或 IMOxine®)。於一較佳體系中係投服約〇.〇1至2.5毫克/ 公斤（更宜爲約0.05至1.0毫克/公斤，最宜爲約0.2毫克/公斤）之PF3 5 1 2676治療性劑量，且在上述該治療性組合方案後係隨意地接著給予至多約5毫克/公斤之 PF3 5 1 2676的維持劑量（宜爲約〇.〇1至2.5毫克/公斤，更宜爲約0.05至1.0毫克/公斤，最宜爲約〇·2毫克/公斤在治療癌症方面，於一較佳體系中，爲了治療SCLC ，可將 CpG ODN (宜爲 PF3512676、1018 ISS、奧利默森 (oblimersen) (Genasense®)或 IMOxine®)單獨投服或作爲治療方案之一部分而與任何下列化療劑（其可單獨投服或作爲化療組合方案之一部分）組合投服： -99- (96) 200824696 表1 作用劑劑量 CpG ODN 至多約5毫克/公斤順鉑至多約120毫克/米2 卡鉑根據Calvert公式給藥，AUC至多約8 (見上述）依托伯苷至多約250毫克/米2 環磷醯胺至多約7克/米2 (宜爲至多約750毫克/米2或500毫克/米2 ) 多柔比星至多約1〇〇毫克/米2 (宜爲至多約75毫克/米2) 長春新鹼至多約30毫克/公斤（如：10-30毫克/公斤或約2毫克/米2) 伊立替康至多約500毫克/米2 (宜爲至多約350毫克/米2 )

在治療癌症方面，於一較佳體系中，爲了治療黑色瘤，可將 CpG ODN (宜爲 PF3512676、1018 ISS、奧利默森 (oblimersen) ( Genasense® )或 IMOxine ⑧）單獨投月艮或作爲治療方案之一部分而與任何下列化療劑（其可單獨投服或作爲化療組合方案之一部分）組合投服：表2 作用劑劑量 CpG ODN 至多約5.0毫克/公斤達卡巴肼至多約500毫克/米2 (宜爲至多約250毫克/米2 ) 卡沐汀至多約200毫克/米2 順銷至多約120毫克/米2 長春花鹼至多約50毫克/米2 (宜爲至多約30毫克/米2 ) 塔莫西芬至多約80毫克（宜爲至多約40毫克)

在治療癌症方面，於一較佳體系中，爲了治療NSCLC -100- (97) 200824696 ’可將 CpG ODN (宜爲 PF35 12676、1018 ISS、奧利默森 (oblimersen ) ( Genasense® )或 IMOxine® )單獨投服或作爲.治療方案之一部分而與任何下列化療劑（其可單獨投服或作爲化療組合方案之一部分）組合投服：表3 作用劑劑量 CpGODN 至多約5毫克/公斤順鉑至多約120毫克/米2 吉西他汀至多約2500毫克/米2 (宜爲至多約1250毫克/米2 ) 卡鉬根據Calvert公式給藥，AUC至多約8 (見上述）太平洋紫杉醇至多約250毫克/米2 (宜爲至多約225毫克/米2 ) 貝伐單抗（Awstin⑧）至多約15毫克/公斤 — 多烯紫杉醇至多約12〇毫克/米2 (宜爲至多約1〇〇毫克/米2 ) 培米催塞至多約1000毫克/米2 (宜爲至多約750毫克/米2，最宜爲至多約500毫克/米2) 長春瑞賓至多約50毫克/米2 (宜爲至多約30毫克/米2 ) —

在治療癌症方面，於一較佳體系中，爲了治療乳癌，可將 CpG ODN (宜爲 PF3512676、1018 ISS、奧利默森（ oblimersen ) ( Genasense®)或 IMOxine®)單獨投服或作爲治療方案之一部分而與任何下列化療劑（其可單獨投服或作爲化療組合方案之一部分）組合投服： -101 - (98) 200824696 表4 作用劑劑量 CpG ODN 至多約5毫克/公斤多柔比星至多約100毫克/米2(宜爲至多約75毫克/米2) 表阿黴素至多約150毫克/米2(宜爲至多約135毫克/米2或120毫克/ 米2) 環磷醯胺至多約7克/米2(宜爲至多約750毫克/米2或500毫克/米2) 甲胺喋呤至多約20毫克/米2 5-FU 至多約2600毫克/米2(宜爲至多約600毫克/米2) 太平洋紫杉醇至多約2S0毫克/米2(宜爲至多約225毫克/米2) 多烯紫杉醇至多約120毫克/米2(宜爲至多約100毫克/米2) 吉西他汀至多約25〇0毫克/米2(宜爲至多約mo毫克诛2) 順鋁至多約120毫克/米2 卡鈾根據Calvert公式給藥，AUC至多約8(見上述）長春瑞賓至多約5〇毫克/米2(宜爲至多約30毫克/米2) 貝伐單抗(Avastin⑧）至多約15毫克/公斤

爲了治療癌症（宜爲大腸直腸癌），可將CpG ODN ( 宜爲 PF3 5 1 2676、101 8 ISS、奧利默森（oblimersen )( Genasense®)或IMOxine®)單獨投服或作爲治療方案之一部分而與任何下列化療劑（其可單獨投服或作爲化療組合方案之一部分）組合投服： -102- (99) 200824696 表5 作用劑劑量 CpG ODN 至多約5.0毫克/公斤伊立替康至多約500毫克/米2 (宜爲至多約350毫克/米2 ) 奧沙利鉑至多約130毫克/米2 (宜爲至多約85毫克/米2 ) 5-FU 至多約2600毫克/米2 (宜爲至多約600毫克/米2 ) 西妥昔單抗（Erbitux, 至多約400毫克/米2 貝伐單抗（Avastin®) 至多約15毫克/公斤

爲了治療癌症（宜爲NHL )，可將CpG ODN (宜爲 PF3 5 1 2676、1018 ISS、奧利默森（oblimersen )( Genasense®)或11^0^11一）單獨投服或作爲治療方案之一部分而與任何下列化療劑（其可單獨投服或作爲化療組合方案之一部分）組合投服：表6 作用劑劑量 CpG ODN 至多約5.0毫克/公斤利多西單抗至多約500毫克/米2 (宜爲至多約375毫克/米2 ) 環磷醯胺至多約7克/米2 (宜爲至多約750毫克/米2或500毫克/米2) 潑尼松龍至多約5毫克/公斤（宜爲至多約1毫克/公斤）長春新鹼至多約30毫克/公斤（如:10-30毫克/公斤或約2毫克/米2)

其他化療劑= 一般而言，本發明之CpG ODN(尤其是PF3512676、 1018 ISS或IMOxine®)可與任何數目之化療劑一起使用 -103- (100) 200824696 ，以治療多種不同癌症。上述之任何作用劑可與CpG ODNs及，隨意地，一或多種額外之化療劑一起投服。根據大略之作用機制整理出之化療劑的非限制性列表如下： (1 )抗血管生成劑，其包括但不限於下列作用劑，諸如：EGF抑制劑、EGFR抑制劑、VEGF抑制劑、 VEGFR 抑帋!J 齊！J 、TIE2 抑制齊U 、IGF1R 抑希!f 齊!f 、CΟΧ-Π ( 環氧化酶Π )抑制劑、MMP-2 (基質-金屬蛋白質酶2)抑

制劑及MMP-9 (基質-金屬蛋白質酶9 )抑制劑。抗血管生成劑，諸如：MMP-2 (基質-金屬蛋白質酶2 )抑制劑、 MMP-9 (基質-金屬蛋白質酶9)抑制劑及COX-Π (環氧化酶Π )抑制劑可與免疫刺激性ODN —起用於此文所描述之方法及藥學組成物。有用之COX- E抑制劑的實例包括希樂葆 TM(CELEBREXTM)(希樂可比（celecoxib)) 、Bextra (維地可比（valdecoxib))、貝拉可比（ paracoxib ) 、Vioxx(洛非可比（rofecoxib))及 Arcoxia (伊托的可比（etoricoxib ))。有用之基質-金屬蛋白質酶抑制劑實例描述於下列文獻中：W0 96/33 172 ( 1 996年 1〇月24日出版）、W0 96/2 7583(1996年3月7日出版 )、歐洲專利申請案第97304971.1號（1997年7月8日提出）、歐洲專利申請案第993086 1 7.2號（1 999年10月 29日提出）、W0 98/07697(1998年2月26日出版）、 W0 98/035 1 6 ( 1 998 年 1 月 29 日出版）、WO 98/349 1 8 (1 998 年 8 月 13 日出版）、W0 98/3491 5 ( 1 998 年 8 月 13日出版）、w〇 98/33 768(1998年8月6日出版）、 -104- (101) 200824696 WO 98/30566(1998年7月16日出版）、歐洲專利文獻第606,046號（1 994年7月13日出版）、歐洲專利文獻第 93 1，788 號（1999 年 7 月 28 日出版）、WO 90/057 1 9 (1990 年 5 月 31 日出版）、WO 9 9/52910(1999 年 10 月 21 日出版）、WO 9 9/52889(1999 年 10 月 21 日出版）、

WO 99/29667 ( 1 999年6月17日出版）、PCT國際申請案第PCT/IB 9 8/01 1 13號（1998年7月21日提出）、歐洲專利申請案第99302232.1號（1999年3月25日提出）、大布列顛專利申請案第9912961.1號（1999年6月3日提出）、美國臨時申請案第6 0/148,4 64號（1999年8月12 日提出）、美國專利案第5,863,949號（1999年1月26 日核發）、美國專利案第5,861，510號（1999年1月19 日核發）及歐洲專利文獻第780,386號（ 1997年6月25 曰出版），其全文倂爲此文之參考資料。較佳之MMP-2 及MMP-9抑制劑爲那些對MMP-1僅有一點或無抑制活性者。更佳者爲那些相對於其他基質-金屬蛋白質酶（即， ΜΜΡ·1、MMP，3、MMP-4、MMP-5、MMP-6、MMP-7、 Μ Μ P _ 8、Μ Μ P -1 〇、Μ Μ P _ 1 1、Μ Μ P -1 2 及 Μ Μ P -1 3 )選擇性地抑制ΜΜΡ-2及/或ΜΜΡ-9者。可與本發明之CpG ODN 一起使用之MMP抑制劑的一些特殊實例爲AG-3 340、RO 32·3 5 55、RS 1 3-0 83 〇及列舉於下表中之化合物：3_[[仁（ 4-氣-苯氧基)-苯磺醯基]-(1-羥基胺甲醯基-環戊基）-胺基]-丙酸；3-外- 3-[4- ( 4-氟_苯氧基）_苯磺醯胺基；氧雜-一環[3 5 2，1 ]半烷-3 -羧酸羥基醯胺；（2 R，3 R ) 1 - [4-(2- -105- (102) 200824696 氯-4-氟-苄氧基）-苯磺醯基]-(3-羥基-3-甲基-六氫吡啶_ 2- 羧酸羥基醯胺；4- [4- ( 4-氟-苯氧基）-苯磺醯胺基;μ四氫-吡喃-4-羧酸羥基醯胺；3- [[4- ( 4-氟-苯氧基）-苯磺醯基]-(1-羥基胺甲醯基-環丁基）-胺基]-丙酸；4-[4-(4-氯-苯氧基）-苯礦釀胺基]-四氨-啦喃-4 -竣酸經基醒胺； 3- [4- ( 4 -氯-苯氧基）-苯礦釀胺基]-四氯-D比喃-3-竣酸經

基醯胺；（2R，3R) 1-[4- ( 4-氟-2-甲基-苄氧基）-苯磺醯基]-3-羥基-3-甲基-六氫吡啶-2-羧酸羥基醯胺；3-[ [4-(4-氟-苯氧基）-苯磺醯基]-(1-羥基胺甲醯基-1-甲基-乙基 )-胺基]-丙酸；3-[[4-(4-氟-苯氧基）-苯磺醯基]-(4-羥基胺甲醯基-四氫-吡喃-4-基）-胺基]-丙酸；3-外-3-[4-( 4-氯-苯氧基）-苯磺醯胺基]-8-氧雜-二環[3，2，1]辛-3-羧酸羥基醯胺；3-內-3-[4- ( 4-氟-苯氧基）-苯磺醯胺基]-8-氧雜-二環[3,2，1]辛-3-羧酸羥基醯胺；及3-[4- ( 4-氟-苯氧基 )-苯磺醯胺基]-四氫-呋喃-3-羧酸羥基醯胺；及該化合物之藥學上可接受之鹽、溶劑化物及先驅藥物。其他VEGF抑制劑包括CP-547,632 (美國紐約州輝瑞公司）、AG 1 3 73 6 (輝瑞公司）、ZD-6474 (阿斯利康）、AEE788 (諾華公司）、AZD-2171、VEGF Trap ( Regeneron/Aventis )、維他來尼（Vatalanib )(亦稱爲 PTK-787、ZK-222584 :諾華 & 仙靈 AG )、馬庫金（ Macugen )(派嘉特尼入鈉（pegaptanib octasodium)、 NX-1838、EYE-001，輝瑞公司 /Gilead/Eyetech) 、IM862 (美國華盛頓州Kirkland之Cytran公司）：及血管酶（ -106- (103) 200824696 angiozyme )(此爲一種來自 Ribozyme (科羅拉多州 Boulder )之合成核酶）和凱龍（Chiron )(加州 Emeryville)及其組合。可用於執行本發明之VEGF抑制劑揭示於美國專利第6,534,524和6,235,764號中，其全部內容倂爲本發明任一方面之參考資料。特佳之VEGF抑制劑包括CP-547,632、AG13736、維他來尼、馬庫金及其組合。其他 VEGF抑制劑描述於，如：WO 99/24440 (

1 999 年 5月 20日出版）、PCT 國際申請案第 PCT/IB99/00797 號（1 9 9 9 年5月3日提出）'冒0 95/2 1613(1995 年 8 月 17 日出版）、WO 99/61422(1999 年12月2日出版）、美國專利案第6,534,524號（揭示 AG1 3 73 6 )、美國專利案第5,834,504號（1998年11月 10 日核發）、WO 9 8/5 0356(1998 年 11 月 12 日出版）、美國專利案第5,883,113號（1999年3月16曰核發）、美國專利案第5,886，02 0號（1999年3月23日核發）、美國專利案第5,792,78 3號（1 998年8月1 1曰核發）、美國專利案第6,653,308號（2003年11月25曰核發）、 WO 99/1 0349 ( 1 999 年 3 月 4 日出版）、WO 97/32856 ( 1 997 年 9 月 12 日出版）、WO 97/22596 ( 1 997 年 6 月 26 日出版）、WO 9 8/5 4 093(199 8年12月3日出版）、WO 98/0243 8 ( 1 998 年 1 月 22 日出版）、WO 99/1 6755 ( 1 999 年4月8日出版）及WO 98/0 24 37(1998年1月22曰出版），其全部內容倂爲此文之參考資料。其他可與本發明之化合物一起使用之抗增生劑包括法 -107- (104) 200824696 尼基蛋白質轉移酶抑制劑及受體酪胺酸激酶PD GFr抑制劑，包括下列美國專利申請案中所揭示及申請專利之化合物 :09/22 1 946 ( 1 998 年 12 月 28 日提出）；09/454058 ( 199 9年12月2日提出）；09/501163(2000年2月9曰提出）；09/53993 0 ( 2000 年 3 月 31 日提出）； 09/202796 ( 1 997 年 5 月 22 日提出）；09/3 84339 ( 1 999

年8月26日提出）；及09/383755 ( 1 999年8月26日提出）；及下列美國臨時專利申請案中所揭示及申請專利之化合物：60/1 68207 ( 1 999 年 11月 30 日提出）； 60/170119 ( 1999 年 12 月 10 日提出）；60/177718 (20 00 年1月21日提出）；60/168217(1999年11月30日提出 )及60/20083 4 ( 2000年5月1日提出）。前述各專利申請案及臨時專利申請案之全部內容倂爲此文之參考資料。 PDGRr抑制劑包括，但不限於揭示於下列文獻中者：國際專利申請文獻第WO01/4 0217號（2001年7月7日出版）及國際專利申請文獻第W02004/020431號（ 2004年 3月1 1日出版），其全部內容倂爲此文各方面之參考資料。較佳之PDGFr抑制劑包括輝瑞之CP-673,45 1和CP-868,596 以及其藥學上可接受之鹽。較佳之 GARF 抑制劑包括輝瑞之AG-2037 (沛利特醇（pelitrexol )及其藥學上可接受之鹽）。可用來執行本發明之GARF抑制劑揭示於美國專利案第5,608,082號中，其全部內容倂爲此文各方面之參考資料。 (2 )酪胺酸激酶抑制劑，包括與CpG ODN —起使用 -108- (105) 200824696

之標靶作用劑及此文所描述之藥學組成物，包括EGFr抑制劑，諸如Iressa® (吉菲特尼，阿斯利康公司）、 Tarceva (埃洛特尼或 OSI-774，OSI 製藥公司）、Erbitux (西妥昔單抗，Imclone製藥公司）、EMD-7200 (默克公司）、ABX-EGF ( Amgen 公司及 Abgenix 公司）、HR3 ( 古巴政府）、IgA 抗體（Erlangen-Nuremberg) 、TP-38 ( IVAX) 、EGFR融合蛋白質、EGF-疫苗、抗-EGFr免疫脂粒（Hermes生物科學公司）及其組合。較佳之EGFr抑制劑包括吉菲特尼、西妥昔單抗、埃洛特尼及其組合。本發明亦關於包含選自pan erb受體抑制劑或ErbB2 受體抑制劑之抗腫瘤劑的組合物，諸如CP-724,7 14 (輝瑞公司）、CI- 1 03 3 (肯納替尼（canertinib )，輝瑞公司）、Herceptin (曲妥珠單抗，Genentech 公司）、Omitarg ( 2C4，普妥珠單抗（pertuzumab ) ，Genentech 公司）、 TAK-165 ( Takeda) 、G W-5 720 1 6 (歐那法尼（Ionafarnib )，葛蘭素史克公司）、GW-2 82974 (葛蘭素史克公司）、EKB_569 (惠氏）、PKI-166 (諾華公司）、dHER2 ( HER2疫苗，Corixa及葛蘭素史克）、APC8024 ( HER2疫苗，Dendreon)、抗 HER2/neu雙特異性抗體（Decof癌症中心）、B7.her2.IgG3 ( Agensys ) 、AS HER2 (

Research Institute for Rad Biology & Medicine)、三官會S 雙特異性抗體（Munich大學）及mAB AR-209 ( Aronex製藥公司）和mAB 2B-1 (凱龍（Chiron))及其組合。較佳之erb選擇性抗腫瘤劑包括曲妥珠單抗、TAK-1 65、CP- -109- (106) 200824696 724,714、ABX-EGF、HER3 及其組合。較佳之 pan erbb 受體抑制齊！I 包括 GW572016、CI-1033、PF-299804、EKB-569 和Omitarg及其組合。其他erbB2包括那些描述於下列文獻中者：WO 9 8/02434(19 98年 1月 22日出版）、WO 99/35146(1999 年 7 月 15 日出版）、W099/35132(1999 年7月15日出版）、WO 98/02437 ( 1 998年1月22日出

版）、WO 97/1 3760 ( 1 997 年 4 月 17 日出版）、WO 95/1 9970 ( 1 995年 7月 27日出版）、美國專利案第 5，5 8 7，45 8號（1 996年12月24日核發）及美國專利案第 5，877,305號（1999年3月2日核發），其全部內容各倂爲此文之參考資料。可用於本發明之ErbB2受體抑制劑亦描述於美國專利案第6,465,449號和6,284,764號及國際申請案WO 200 1/98277號中，其全部內容各倂爲此文之參考資料。

ErbB2受體抑制劑（諸如GW-282974 (葛蘭素-衞爾康 (Glaxo-Wellcome)公司）及單株抗體 AR-209 (美國德州 Woodlands之 Aronex製藥公司）及 2B-1 (凱龍（ Chiron )))亦包括在酪胺酸激酶抑制劑類別中，其可與 CpG ODN —起投服。這類erbB2抑制劑包括2C4及普妥珠單抗。這類erbB2抑制劑包括那些描述於下列文獻中者：WO 98/02434 ( 1 99 8 年 1 月 22 日出版）、WO 99/35146(1999 年 7 月 15 曰出版）、WO 99/35132(1999 年7月15曰出版）、WO 98/02437 ( 1 998年1月22曰

出版）、WO 97/1 3 7 60 ( 1 997 年 4 月 17 日出版）、WO -110- (107) 200824696 95/19970(1995年7月27日出版）、美國專利案第 5,5 87,45 8號（1 996年12月24日核發）及美國專利案第 5，8 7 7，3 0 5號（1 9 9 9年3月2日核發），其全部內容各倂

爲此文之參考資料。可用於本發明之erbB2受體抑制劑亦描述於美國臨時申請案第60/117,341號（1 999年1月27 日提出）及美國臨時申請案第60/1 1 7,3 46號（1 999年1 月27日提出），此二者之全部內容倂爲此文之參考資料。其他erbB2受體抑制劑包括TAK-165 ( Takeda)及GW-572016 (葛蘭素-衞爾康公司）。多種不同之其他化合物（諸如苯乙烯衍生物）亦顯示出擁有酪胺酸激酶抑制性質且某些酪胺酸激酶抑制劑係被鑑定爲erbB2受體抑制劑。最近，5篇歐洲專利文獻，即 ·· EP 0 5 66 226 Al ( 1 9 9 3 年 10 月 2 0 日出版）、EP 0 602 851 Al(1 9 94 年 6 月 22 日出版）、EP 0 635 5 07 Al( 1 995 年 1 月 25 日出版）、EP 0 63 5 498 A1 ( 1 995 年 1 月 25日出版）及EP 0 520 72 2 Al(1992年12月30日出版 )，提及某些二環衍生物，尤其是喹唑啉衍生物爲擁有來自其酪胺酸激酶抑制性質之抗癌性質。再者，世界專利申請案WO 9 2/2 0 64 2 (19 92年11月26日出版）提及某些雙-單及二環芳基及雜芳基化合物爲可用於抑制異常細胞增生的酪胺酸激酶抑制劑。世界專利申請案WO 9 6/ 1 6 9 6 0 (1 996 年 6 月 6 日出版）、WO 96/09294 ( 1 996 年 3 月 6 日出版）、WO 97/30034(199 7年8月21日出版）、WO 98/02434 ( 1 998 年 1 月 22 日出版）、WO 98/0243 7 ( 1 998 -111 - (108) 200824696 年1月22日出版）及WO 98/0243 8 ( 1 998年1月22日出

版）亦提及經取代之二環雜芳族衍生物爲可用於相同目的之酪胺酸激酶抑制劑。其他提及抗癌化合物之專利申請案爲世界專利申請案第WO 00/44728 (2000年8月3日出版 )、EP 1 02985 3A1 ( 2000 年 8 月 23 日出版）及 WO 01/9827 7 (2 001年12月12日出版），其全部內容倂爲此文之參考資料。

其他可與本發明之CPG ODN —起使用的抗增生劑包括法尼基蛋白質轉移酶抑制劑及受體酪胺酸激酶PDGFr抑制劑，包括下列美國專利申請案所揭示及申請專利之化合物：09/22 1 946 ( 1 998 年 12 月 28 日提出）；09/45405 8 ( 1 999 年 12 月 2 日提出）：09/501163(2000 年 2 月 9 日提出）；09/5 3 993 0 ( 2000年 3月 3 1日提出）； 09/202796 ( 1 997 年 5 月 22 日提出）；09/3 843 3 9 ( 1 999 年8月26日提出）；及097 3 8 3755(1999年8月26曰提出）·，及下列美國臨時專利申請案所揭示及申請專利之化合物：60/168207 ( 1999 年 11 月 30 日提出）；60/17 0 1 19 ( 1999 年 12 月 10 日提出）；60/1 77 7 18 (20 00 年 1 月 21 日提出）；60/168217(1999年11月30日提出）及 60/2 00834 (2000年5月1日提出）。前述各專利申請案及臨時專利申請案之全部內容倂爲此文之參考資料。

CpG ODN亦可與細胞毒性劑一起使用，該細胞毒性劑係，如，一或多種選自下列之作用劑：喜樹鹼、伊立替康氫氯酸鹽（Camptosar )、伊朵提卡林（edotecarin )、表 -112- (109) 200824696 阿黴素（Ellence )、多烯紫杉醇（Docetaxel )、利多西單抗（Rituxan )、西妥昔單抗及其組合。 (3 )烷化作用劑包括，但不限於：氮芥N-氧化物、環磷醯胺、伊弗法醯胺、馬法蘭、布舒方（busulfan )、

邁特布洛尼托（mitobronitol)、卡波奎（carboquone)、噻替哌、雷尼沐汀（ranimustine)、尼沐汀（nimustine) 、替莫哩胺、AMD-473、歐崔塔胺（altretamine) 、AP-52 80、艾帕斯奎（apaziquone)、布洛塔辛（brostallicin )、本達沐汀（bendamustine )、卡沐汀、伊特沐汀（ estramustine )、佛替沐汀（fotemustine)、葛佛法醯胺 (glufosfamide )、伊弗法醯胺、KW-2170、美佛法醯胺 (mefosfamide)及邁特來托（mitolactol);鉑配位院基化化合物包括，但不限於：順鉑、卡鉑、伊塔鉑（ eptaplatin )、洛巴銷（lobaplatin )、尼達鉑（nedaplatin )、奧沙利鉑或沙特鉑（satrplatin ); (4 )抗代謝物，包括，但不限於：甲胺喋呤、6-毓基嘌呤、利波塞（riboside)、锍基嘌呤、5-氟尿嘧啶（5-FU)，其可單獨使用或與下列作用劑一起使用：白弗林（ leiicovorin )、塔嘉弗（tegafur ) 、UFT、多西氟利汀（ doxifluridine )、卡莫弗（carmofur )、塞塔利賓（ cytarabine)、塞塔利賓歐弗費特（cytarabine ocfosfate) 、伊諾西他賓（enocitabine ) 、S -1、吉西他汀、氟達拉濱、5-氮雜西替汀（5-azacitidine )、卡倍他濱、克雷利賓（cladribine )、克洛法拉賓（clofarabine )、德西他賓 -113- (110) 200824696

(decitabine )、伊佛尼辛（efiornithine )、乙炔基胞嘧啶核苷（ethynylcytidine )、胞核嘧啶阿拉伯糖苷、羥基尿素、TS-1、馬法蘭、尼來拉濱（nelarabine )、諾拉特塞（nolatrexed)、歐雜費特（〇efosfate)、貝美崔塞二鈉（disodium premetrexed )、本托史汀（p ento statin )、倍利特梭（pelitrexol )、雷替崔塞（raltitrexed )、三亞賓（triapine )、三美崔塞（trimetrexate )、維達拉濱、長春新鹼、長春瑞賓；或者，例如：一種歐洲專利申請案第23 93 62號中所揭示之較佳抗代謝物，諸如N- ( 5-[N-( 3,4 - 一氯-2 -甲基-4-合氧基喹哗啉-6-基甲基）-N-甲胺基]- 2-噻吩甲醯基）-L-麩胺酸； (5 )抗生素，包括，但不限於：艾克拉比星（ a c 1 a r u b i c i n )、放線黴素 D、胺柔比星（a m r u b i c i η )、脂質體蒽環黴素（annamycin )、平陽黴素、柔紅黴素（ daunorubicin )、多柔比星、伊沙盧星（615&11111^11(^11)、表阿黴素、嘉洛比星（galarubicin)、伊達比星（ idarubicin)、絲裂黴素 C、奈馬黴素（nemorubicin)、新抗癌素（neocarzinoststin )、培洛黴素（peplomycin ) 、比柔比星（pirarubicin )、蝴喋黴素（rebeccamycin ) 、替馬拉美（stimalamer)、鍵脲佐菌素（streptozocin) 、維比星（valrubicin)或淨司他丁（zinostatin); (6 )荷爾蒙療法作用劑，例如：伊西美坦（

Aromasin)、路普翁（Lupron)、阿那曲 Π坐（anastrozole )(Arimidex )、度骨化醇（doxercalciferol )、費卓哩 -114- (111) 200824696 (fadrozole )、福美司坦（formestane )，抗動情激素，諸如檸檬酸塔莫西芬（Nolvadex )及氟維斯川（ fulvestrant)、崔史塔（Trelstar)、托利米芬、拉洛西芬、雷索弗西芬（lasofoxifene)、來曲哇（letrozole)(

Femara)或抗雄激素，諸如拜卡路醯胺（bicalutamide) 、氟塔醯胺（flutamide )、米費普斯通（mifepristone ) 、奈路醯胺（nilutamide) 、Casodex® ( 4·-氰基-3- ( 4 -氟

苯基磺醯基）-2-羥基-2-甲基(三氟甲基）丙醯苯胺）、亮丙瑞林（lueoprorelin )(路普翁（Luprone ))、高斯瑞林（gosrelin)、度骨化醇、艾瑞利斯（Abr aelix )、崔史塔及其組合； (7 )自植物衍生之抗腫瘤物質，包括，如，選自有絲分裂抑制劑者，例如：長春瑞賓、多烯紫杉醇（ Docetaxel )及太平洋紫杉醇® ; (8 )細胞毒性拓撲異構酶抑制劑包括一或多種選自下列之作用劑：艾克拉比星（aclarubicin )、艾蒙那法（ amonafide)、貝洛替康（belotecan)、喜樹驗、10-經基喜樹鹼、9-胺基喜樹鹼、二氟莫替康（diflomotecan)、伊立替康氫氯酸鹽（Camptosar )、伊朵提卡林（ edotecarin )、表阿黴素（Ellence)、依托伯苷（ etoposide )、吉美替康（gimatecan )、路托替康（ lurtotecan )、邁朵山托（mitoxantrone )、比柔比星（ pirarubicin )、比山托（pixantrone )、路比替康（ rubitecan )、舒布沙山（sobuzoxane ) 、SN-38、塔氟波 -115- (112) 200824696 塞（tafluposide)及托波替康（topotecan)、歐拉利羊（ orathecin ) ( Supergen)、伊沙替康（exatecan )(第一製藥）、BN-80915 (羅氏藥廠）及其組合。 (9 )免疫作用劑包括：干擾素及多種其他免疫增強劑。干擾素包括干擾素α、干擾素a-2a、干擾素a-2b、干擾素β、干擾素γ-la或干擾素γ-ηΐ。其他作用劑包括非高斯汀（filgrastim )、蘭替南（lentinan )、斯柔非蘭（ sizofilan ) 、TheraCys、尤本尼邁(ubenimex) 、WF-10

、歐狄留金（aldesleukin)、歐蘭托單抗（alemtuzumab) 、BAM-002、達卡巴肼（Dacarbazine )、達利舒單抗（ daclizumab )、丹尼留金（denileukin)、吉特魯單抗歐柔嘉米辛（Gemtuzumab ozogamicin )、伊布利莫單抗（ ibritumomab )、伊米克莫（imiquimod)、利諾葛斯汀（ lenograstim)、蘭替南（lentinarx)、黑色瘤疫苗（Corixa )、莫葛莫斯汀（molgramostim) 、OncoVAX-CL、沙葛莫斯汀（sargramostim)、他舒諾明（tasonermin)、泰克留金（tecleukin)、塞馬拉辛（thymalasin)、托西突莫單抗（tositumomab)、維路利辛（Virulizin) 、Z-100、伊普突舒單ί几（epratuzumab)、米突莫單抗（mitumomab )、歐利高弗單抗（oregovomab)、沛突莫單抗（ pemtumomab)、普羅文吉（Provenge)及其組合； (1 0 )生物反應修改劑爲修改存活有機體之防禦機制或生物反應（諸如組織細胞之存活、生長或分化），以指導其具抗腫瘤活性的作用劑。這類作用劑包括：克利汀（ -116- (113) 200824696 krestin )、蘭替南（lentinan )、西柔非倫（siZ0firan )、比西班尼（pieibanil)或優本尼美（ubenimex)。 (11)其他抗腫瘤劑包括：艾利特諾因（alitretinoin )、安比利金（am pli gen)、歐特山坦貝沙洛汀（ atrasentan bexarotene)、波替舒米（bortezomib)、波森坦（Bosentan)、卡西三醇（calcitriol)、艾西舒林（ exisulind )、芬那斯特來（finasteride)、弗坦慕汀（

fotemustine )、伊本膦酸（ibandronic acid )、來替弗辛 (miltefosine)、邁朵山托（mitoxantrone) 、L-天門冬酿胺酶（Ι-asparaginase)、丙卡巴胼（procarbazine)、達卡巴胼（dacarbazine )、經基碳醯胺（ hy droxycarbamide )、培門冬酶（pegaspargase )、噴司他丁（pentostatin)、他沙羅尼（tazarotne) 、TLK-286、維卡德（Velcade)或維生素A酸（tretinoin)。另外，可自下列作用劑選出其他抗腫瘤劑：BAY-4 5-9006 ( Onyx製藥公司）、Genasense (歐默洛森（augmerosen) ，Genta 公司）、潘尼突美（Panitumumab) (Abgenix/Amgen)、瑞瓦林（Zevalin)(仙靈製藥公司）、貝沙（Bexxar)( Corixa/葛蘭素史克公司）、艾巴瑞利（Abarelix )、貝美崔塞（？〇111以^乂^(1)、£?0 9 06 (諾華公司）、廸可德莫里（discodermolide) ( XAA-296 ) 、ABT-510 (亞培）、黨癌靈（Neovastat ) ( Aeterna)、因沙陶林（enzastau.rin )(禮來公司）、康布斯汀 A4P ( Combrestatin A4P )( Oxigene )、ZD-6126 (阿斯利康公司）、弗比利多（ -117- (114) 200824696 flavopiridol )(安萬特（Aventis )公司）、CYC-202 ( Cyclacel ) 、A VE-8 0 62 (安萬特公司）、DMX A A (羅氏 /Antisoma)、塞米達（Thymitaq) ( Eximias )、替摩達 (Temodar )(替莫唑胺，仙靈公司）及瑞維利（ Revilimd) ( C e 1 e g ene )及其組合。其他抗腫瘤劑可選自下列作用劑：CyPat (醋酸環丙孕酮）、Histerelin (醋酸組胺瑞林（histrelin acetate))

、Plenaixis (艾巴瑞利（abarelix )貯藥庫）、艾特森坦 (Atrasentan) ( ABT-627 )、沙特銷（Satraplatin)( J Μ - 2 1 6 )、沙洛米（t h a 1 〇 m i d )(沙利竇邁（T_h a 1 i d 〇 m i d e ))、塞拉托（Theratope)、坦米芬（Temilifene)( DPPE) 、AB I-0 07 (太平洋紫杉醇㊣）、E vista (拉洛西芬 )、Operia (雷索費西芬（lasofaxifene))、艾他美坦（ Atamestane ) ( Biomed-7 77 ) 、Xyotax (聚變胺酸酯太平洋紫杉醇® ) 、Targetin (貝沙洛汀（bexarotine ))及其組合。另外，抗腫瘤劑可選自下列作用劑：Trizaone (替拉巴沙明（tirapaz amine ) ) 、Aposyn (艾西舒林（ exisulind ) ) 、Nevastat ( AE-941 ) 、Ceplene (組織胺二氫氯酸鹽）、Orathecin (路比替康（rubitecan))、維路利辛（Virulizin)、嘉利沐（Gastrimmune) (G17DT)、 DX-895 1 f (伊沙替康甲磺酸鹽（exatecan mesylate))、 Onconase(雷普酶（ranpirnase) ) 、BEC2(米突莫（ mitumoab ) ) 、Xcytrin (莫特沙芬乱（motexafin gadolinium ))及其組合。其他抗腫瘤劑可選自下列作用 -118- (115) 200824696 劑：CeaVac ( CEA ) 、NeuTrexin (三美崔塞葡糖醛酸酯 (trimetresate gluxuronate ))及其組合。其他抗腫瘤劑可選自下列作用劑：0vaRex (歐利高美（oreg〇vomab )) 、歐西丹（Osidem) ( IDM-1 )及其組合。其他抗腫瘤劑可選自下列作用劑：Advexin ( ING 201 ) 、Tiirazone (替拉帕沙胺（tirapazamine ))及其組合。其他抗腫瘤劑可選自下列作用劑：RSR13 (伊法普西洛（efaproxiral )) 、Cotara ( 1311chTNT 1/b) 、NBI-3 001 ( IL-4)及其組合

。其他抗腫瘤劑可選自下列作用劑：肯華辛（Canvaxin )

、GMK 疫苗、安可費(Oncophage ) ( HSPPC-96 ) 、PEG 干擾素A、塔索培辛（Taxoprexin) ( DHA/太平洋紫杉醇 )及其組合。其他較佳之抗腫瘤劑包括：輝瑞製藥公司之 MEK1/2 抑制劑 PD3 25 90 1、Array Biopharm 之 MEK 抑制劑 ARRY- 1 42 8 86、必治妥公司之 CDK2抑制劑 BMS -3 87,032、輝瑞製藥公司之CDK抑制劑PD03 3299 1和阿斯利康公司之AXD-543 8及其組合。另外，亦可使用mTOR 抑制劑，諸如 CCI-779 (惠氏藥廠）及雷帕黴素衍生物 RAD001 (諾華公司）及 AP-23 573 ( Ariad ) 、HD AC 抑制劑SAHA (默克公司/Aton製藥公司）及其組合。其他抗腫瘤劑包括極光（aurora ) 2抑制劑 VX-6 8 0 ( Vertex )、

Chkl/2 抑制劑 XL844 ( Exilixis ))。 (1 2 )其他抗血管生成化合物，包括：艾西特汀（ acitretin )、芬利替尼（fenretinide )、沙利竇邁、哩來膦酸（zoledronic acid)、血管抑素（angiostatin)、艾 -119- (116) 200824696 普利汀（aplidine )、西倫泰（cilengtide )、康布他汀八-4 ( combretastatin A-4 )、血管內皮抑素（endostatin )、鹵夫酮（halofuginone )、瑞比美它（rebimastat )、利莫維（removab) 、Revlimid、鯊胺（squaiainine)、優克蘭 (ukrain)及 Vitaxin ； (1 3 )鉑-配位化合物，包括，但不限於：順鉑、卡鉑、奈達鉛（nedaplatin )或奧沙利鉛；

(1 4 )喜樹鹼衍生物，包括，但不限於：喜樹鹼、 10 -經基喜樹驗、9 -胺基喜樹鹼、伊立替康、SN-38、伊朵提卡林（edotecarin)及托波替康； (1 5 )抗體，包括：曲妥珠單抗：西妥昔單抗、貝伐單抗TM、普妥珠單抗或利多西單抗。可用於本發明中之特異性IGF 1 R抗體包括那些描述於國際專利申請案第WO 2002/053 596號（其全部內容倂爲此文之參考資料）中者。可用於本發明之特殊CD40抗體包括那些描述於國際專利申請案第WO 2003/0401 70號其全部內容倂爲此文之參考資料（）中者。 (1 6 )基因療法作用劑亦可作爲抗腫瘤劑，諸如 TNFerade(GeneVec)，其在回應放射治療時會表現TNF- (17 )其他抗腫瘤劑包括：邁朵山托（mitoxantrone )、L -天門冬醯胺酶（1-asparaginase)、丙卡巴肼（ procarbazine )、達卡巴肼（dacarbazine )、經基碳醯胺 (hydroxycarbamide )、噴司他丁（ pentostatin)或維生 -120- (117) 200824696 素 A 酸（tretinoin)。 (1 8 )緩和劑：本發明亦包含除了投服第一及第二種成分外，還投服其他治療劑（不論是與一或多種那些成分同時或依序投服）。這類治療劑包括止痛劑、癌症疫苗、抗血管劑、抗增生劑、抗嘔吐劑及抗腹瀉劑。較佳之抗嘔吐劑包括：鹽酸奧丹西隆（ondansetron hydrochloride) 、鹽酸葛蘭尼西隆（granisetron hydrochloride)及美托克

羅普邁（metoclopramide )。較佳之抗腹瀉劑包括：地芬諾酯（diphenoxylate )及阿托品（atropine ) ( LOMOTIL )、洛派丁胺（loperamide ) ( IMODIUM )及奧曲肽（ octreotide ) ( SANDOSTATIN )。再者，本發明提供單獨之本發明的CpG ODN或加上一或多種支持性照護產品，例如，選自下列之產品：非高斯汀（Filgrastim )(

Neupogen )、奧丹西隆（Zofran)、法安明（Fragmin) 、普克利（Procrit )、阿洛西（Aloxi )、伊美德（Emend )或其組合。這類聯合治療可藉由同時、依序或分別給予個別治療成分來達成。前述之一或多種化療劑可與 CpG ODN (諸如 PF3 5 1 2676、10 18 IS S 或 IMOxine® ) —起使用並加上一或多種額外之治療方案，諸如放射治療或以幹細胞爲基礎之療法。放射治療可與CpG 0DN/化療劑組合療法一起投服。放射治療之劑量及方案可由本技藝之技術熟習人士根據疾病之期別及其他本技藝所熟知之因子輕易地測定。放射治 -121 - (118) 200824696 療可以多種方式給予。例如，輻射可爲電磁輻射或者是天然顆粒輻射。可用於執行本發明之電磁輻射包括，但不限於：X-射線及γ-射線。於一較佳體系中’高壓X-射線（X-射線> =4 MeV )可用來執行本發明。可用於執行本發明之顆粒輻射包括，但不限於：電子束、質子束、中子束、α 粒及負π介子。輻射可利用習知之放射治療裝置和方法，以及術中和立體定向法遞送。其他關於適合用於執行本發

明之放射治療的討論可在 steven A. Leibel et al·， Textbook of Radiation Oncology (1998) (publ. W. B. Saunders Company)全文中找到，尤其是第13和14章。輻射亦可藉其他方法遞送，諸如標靶遞送，例如：藉由放射活性’’源粒’’遞送或藉由標靶放射活性共軛物之系統遞送。 J . Padawer et al. 5 Combined Treatment with Radioestradiol lucanthone in Mouse C3HBA Mammary Adenocarcinoma and with Estradiol lucanthone in an Estrogen Bio assay,

Int. J. Radiat. Oncol· Biol. Phys· 7:3 47-3 5 7 ( 1 9 8 1 )。其他放射遞送方法亦可用於執行本發明。遞送至所需治療體積之輻射量可有不同。於較佳之體系中，給予之輻射量爲加上式1之化合物及此文所描述之藥學組成物後足夠遏制癌症或使癌症消退之量。於更佳之體系中，至少每隔一天給予治療體積至少約1格雷部分（ Gray (Gy) fractions)之輻射，更佳地，至少每天給予治療體積至少約2格雷（Gy )部分之輻射，再更佳地，至少每天給予治療體積至少約2格雷部分（Gy )之輻射，每 -122- (119) 200824696 週連續5天。於更佳之體系中，每隔一天給予治療體積3 Gy部分之輻射，每週3次。而於另一更佳之體系中，給予有此需要之宿主共至少約20 Gy之輻射，更佳地，至少約30 Gy，最佳地，至少約60 Gy。於本發明之更佳體系中係給予1 4Gy之輻射。於本發明之另一更佳體系中係給予l〇Gy之輻射。再於本發明之另一更佳體系中係給予 7Gy之輻射。

此文所揭示之化療劑-CpG ODN療法組合可與幹細胞移植合倂，以提供受癌症折磨之患者治療效益。幹細胞移植可根據本技藝所已知之方法進行。某些這類方法描述於

Appelbaum in Harrison’s Principles of Internal Medicine,

Chapter 14，Braunwald et al·，Eds” 15th ed·，McGraw-Hill Professional (200 1 )中，其倂爲此文之參考資料。因此，本發明之方法係關於治療已接受幹細胞移植之哺乳動物之癌症，這些方法包含給予哺乳動物一人類化療劑量與CpG 0DN，該化療劑-CpG 0DN治療組合與幹細胞移植進一步組合時可有效治療癌症。當該方法包含幹細胞移植時，化療劑-CpG ΟΙ?Ν治療劑組合之第1個劑量可在哺乳動物之免疫系統已從移植恢復後（如：移植後1至12個月之間）才給藥。在某些較佳體系中，第1個劑量可在移植後1至3個月或1至4個月之間給予。該患者可接受幹細胞移植及預備治療。本發明亦關於用於治療哺乳動物之癌症的方法，其包含下列步驟：（i )在哺乳動物體內進行幹細胞移植，及 -123- (120) 200824696 (π )投服有效量之人類化療劑與有效量之CpG ODN。較佳地，該哺乳動物爲人類。幹細胞移植可爲同質異基因或自體幹細胞移植。再者’細胞移植包含淋巴球之過繼轉移 (來自相同患者及/或從HLA-配合之捐贈者）。再者，本發明之方法可與放射治療及幹細胞移植，及任何此文所描述之治療（本技藝所已知或未來將硏發者）組合倂用。 ®癌症類型化療劑及CpG ODN之組合可用來治療原發性及次發性（即，轉移的）癌症。更具體地說，在許多有效之治療選擇中，CpG ODN及化療劑組合療法可用來治療，尤其是，腎細胞癌、乳癌、大腸直腸癌、卵巢癌、非小細胞肺

癌、黑色瘤、皮膚T-細胞淋巴瘤及NHL (包括無痛的及侵襲性的）。雖然這些癌症爲較適宜者，本發明係關於多種不同惡性細胞增生疾病（包括，但不限於：癌症及肉瘤 )的治療。其他實例包括：卡波西氏肉瘤、母紅血球瘤、間皮瘤、肝膽的（肝與膽道）瘤、原發性及次發性腦瘤、肺癌（NSCLC及SCLC)、骨癌、皮膚癌、頭或頸之癌、皮膚或眼內黑色瘤、骨癌、肛門區之癌、胃癌、胃腸（胃、大腸直腸及十二指腸）癌、結腸癌、子宮癌、法洛皮氏管（fallopian tubes )癌、內膜癌、子宮頸癌、陰道癌、女陰癌、.何杰金氏症、食道癌、小腸癌、內分泌系統癌、甲狀腺癌、副甲狀腺癌、腎上腺癌、軟組織肉瘤、尿道癌 -124 - (121) 200824696 、攝護腺癌、陰莖癌、睾九癌、慢性或急性骨髓白血病、慢性或急性淋巴白血病、淋巴性淋巴瘤、囊癌、腎臟或輸尿管癌、腎盂癌、胰臟癌、中樞神經系統（CNS )之惡性腫瘤（包括原發性及次發性CNS腫瘤）、原發性CNS淋巴瘤、脊索腫瘤、腦幹神經膠瘤、神經膠母細胞瘤、腦膜瘤、肌母細胞瘤、星細胞瘤、腦下腺瘤、腎上腺皮質癌、膀胱癌、多重骨髓瘤、膽管癌、纖維肉瘤、神經母細胞瘤、視網膜母細胞瘤或一或多種前述癌之組合。

於一較佳體系中，本發明之組合療法係用於治療選自 NSCLC、SCLC、黑色瘤、NHL、CTCL及乳癌之癌症。於另一較佳體系中，本發明提供治療或預防需要這類治療之患者的癌症（包括，但不限於：NSCLC、SCLC、黑色瘤、NHL、CTCL及乳癌）之方法，其中該方法包含同;時、半同時、分別或依序給予患者治療上有效量之CpG ODN與治療上有效量之化療劑，該化療劑係選自下列：5 -(5-氟-2-合氧基-1，2-二氫亞吲哚-(3Z)-基甲基）-2,4-二甲基-1H-吡咯-3-羧酸（2-二乙胺基乙基）-醯胺、培米催塞、吉西他汀、太平洋紫杉醇、貝伐單抗、卡鉑、埃洛特尼及其組合；及，選擇性地’ （b )給予患者包含CpG ODN之維持劑量的維持方案。於一較佳體系中，該CpG ODN 係選自下歹U : PF 3 5 1 2676、1018 ISS 及 IMOxine®，最佳地，該CpG ODN爲PF 3 5 12676。再者，本發明亦提供治療或預防此文所描述之癌症的方法’其中該化療劑係選自下列·· 5- (5 -氯-2-合氧基-1，2 - 一氫亞卩引P朵-(3Z)-基 -125- (122) 200824696 甲基）-2,4-二甲基-1H-吡咯-3-羧酸（2-二乙胺基乙基）-醯胺、培米催塞、吉西他汀、貝伐單抗TM、卡鉑、埃洛特尼及其組合，且該治療方案進一步包含投服順鉑。本發明亦特別考量涉及化療法及使用如上述之CpG ODN的免疫療法的治療方法，其中該治療方法亦包括一或多種外科手術、放射治療或其組合。

具體地說，本發明提供治療或預防需要治療非小細胞肺癌（NSCLC)之患者的非小細胞肺癌（NSCLC)之方法，其中該方法包含（a)包含同時、半同時、分別或依序給予患者治療上有效量之CpG ODN與治療上有效量之化療劑的治療方案，該化療劑係選自下列：：5- ( 5-氟-2-合氧基-1，2 - 一>氨亞D引除-(3Z)-基甲基）-2,4 - 一^甲基-1H -口比咯-3-羧酸（2-二乙胺基乙基）-醯胺、太平洋紫杉醇、多烯紫杉醇、吉西他汀、長春瑞賓、伊立替康、培米催塞、絲裂黴素、長春新鹼、長春花鹼、長春地辛、順鉑、卡鉑、奧沙利鉑、吉菲特尼、埃洛特尼、TLK-2 86、西妥昔單抗、貝伐單抗、依托伯苷、平陽黴素、5-FU、馬法蘭、 ZD 6474、ZD 2171、UFT、S1、伊弗法醯胺、噻替哌、替莫唑胺、塔拉伯泰、干擾素及其組合；及選擇性地，（b ) 給予患者包含CpG ODN之維持劑量的維持方案。於一

較佳體系中，該 CpG ODN係選自下列：PF 3 5 1 2676、 1018 ISS、Genazense 及 IMOxine®，最佳地，該 CpG ODN 爲 PF 3512676 。較佳地，本發明提供治療NSCLC之方法，其中該化 -126 - (123) 200824696 療劑係選自下列：5- ( 5 -氟-2 -合氧基-1，2 -二氧亞n引哚-( 3Z)-基甲基）-2,4-二甲基-1H-吡咯-3-羧酸（2-二乙胺基乙基）-醯胺、培米催塞、吉西他汀、貝伐單抗、卡鉑、埃洛特尼及其組合，且該治療方案進一步包含投服順鉑。本發明亦特別考量涉及化療法及使用如上述之CpG ODN的免疫療法的治療方法，其中該治療方法亦包括一或多種外科手術、放射治療或其組合。

再者，本發明提供治療或預防需要治療乳癌之患者的乳癌之方法，其中該方法包含（a)包含同時、半同時、分別或依序給予患者治療上有效量之C p G Ο D N與治療上有效量之化療劑的治療方案，該化療劑係選自下列：5 -( 5-氟-2-合氧基-1，2-二氫亞吲哚-(3Z)-基甲基）_2,4-二甲基-1H-吡咯-3-羧酸（2-二乙胺基乙基）-醯胺、表阿黴素、多柔比星、太平洋紫杉醇、多烯紫杉醇、卡倍他濱、長春新鹼、吉西他汀、5 - F U、環磷醯胺、甲胺喋呤、亞葉酸鈣、曲妥珠單抗、貝伐單抗、拉倍特尼、埃洛特尼、吉菲特尼、培米催塞、塔莫西芬、拉洛西芬、伊西美坦、阿那曲唑、諾雷德、來曲唑、美可治、艾布雷森、雙膦酸鹽、替莫唑胺、法安明、法斯洛德、伊立替康、順鉑、卡鉑、奧沙利鉑及其組合；及’選擇性地’ （b )給予患者包含

CpG ODN之維持劑量的維持方案。較佳地，該CpG ODN 係選自下列·· PF 3 5 12676、1018 ISS 及 IM〇xine®，且，最佳地，該CpG ODN爲PF 35 12676。本發明亦特別考量涉及化療法及使用如上述之CpG ODN之免疫療法的治療 -127- (124) 200824696 方法’其中該治療方法亦包括一或多種外科手術、放射治療或其組合。再者’本發明提供治療或預防需要治療黑色瘤之患者之黑色瘤的方法，其中該方法包含（a)包含同時、半-同時、分別或依序給予患者治療上有效量之CpG ODN與治療上有效量之化療劑的治療方案，該化療劑係選自下列·· DTIC、長春花鹼、長春新鹼、長春地辛、替莫唑胺、干擾

素、介白素及其組合；及，選擇性地，（b )給予患者包含CpG ODN之維持劑量的維持方案。較佳地，該CpG ODN 係選自下歹IJ : PF 3 5 1 2676、1018 IS S 及 IMOxine®，且，最佳地，該CpG ODN爲PF 3 5 1 2676。本發明亦特別考量涉及化療法及使用如上述之CpG ODN之免疫療法的治療方法，其中該治療方法亦包括一或多種外科手術、放射治療或其組合。本發明提供治療或預防需要治療腎細胞癌之患者之腎細胞癌之方法，其中該方法包含（a )包含同時、半-同時、分別或依序給予患者治療上有效量之CpG ODN與治療

上有效量之化療劑的治療方案，該化療劑係選自下列：5 _ (5_氟-2 —合氧基-1，2-二氫亞吲哚-(3Z)-基甲基）-2,4-二甲基-1H -吡咯-3-羧酸（2 -二乙胺基乙基）-醯胺、索拉非尼、IL-2、伊美特尼（imatinib )、貝伐單抗、吉西他汀、順鉑、卡鉑、太平洋紫杉醇、多烯紫杉醇及其組合；及，選擇性地，（b )給予患者包含CpG ODN之維持劑量的維持方案。較佳地，該CpG ODN係選自下列：PF -128- (125) 200824696

35 12676、1018 ISS 及 IMOxine®，且，最佳地，該 CpG ODN爲PF 3 5 1 2676。本發明亦特別考量涉及化療法及使用如上述之CpG ODN之免疫療法的治療方法，其中該治療方法亦包括一或多種外科手術、放射治療或其組合。欲治療之癌症可爲難治之癌症。此文所使用之難治的癌症爲對一般處方之標準照護具有抗性的癌症。這些癌症初始可能對治療有反應（然後再復發），或者，其可能對

治療完全無反應。一般之標準照護將根據個體之癌症類型及進展而有不同。其可爲化療法、免疫療法、外科手術或放射治療或其組合。本技藝之一般技術人士了解這類標準照護。因此，根據本發明方法來治療難治之癌症的個體可能已接受其他對其癌症的治療。或者，若該癌症可能爲難治之癌症（如：根據對該個體之癌症細胞或病史進行分析 )，則該個體可能尙未接受其他治療。難治之癌症的實例包括，但不限於··血癌、黑色瘤、腎細胞癌、大腸癌、肝（肝臟的）癌、胰臟癌、非-何杰金氏淋巴瘤及肺癌。療法類型

一旦提供此處所揭示之教示內容，本技藝之技術熟習人士可察知本發明包含CpG ODN療法與化療劑，或依序進行（之前或之後）外科手術、放射治療或此二者，以治療癌症。亦即，當提供此處所揭示之教示內容時，本技藝之技術熟習人士即知許多不同之治療可與化療劑-CpG -129- (126) 200824696 ODN組合療法合倂。

在某些情況中，本發明方法可用來取代現有之外科手術程序或藥物治療，而在其他情況中，本發明可用來改良現有之治療這類病況之療法的效力。因此，組合療法可用來治療正接受或將接受，尤其是癌症治療的個體。例如·· 可將作用劑與其他抗增生（如：抗癌）療法一起給予個體。合適之抗癌療法包括外科手術程序以去除腫瘤塊、化療或局部之放射治療。其他抗增生療法可在以本發明之C p G ODN/化療劑組合治療之前、同時或之後投用。投用不同療法之間亦可延遲數小時、數天，且，在某些情況中，數週，如此，該CpG ODN/化療劑組合可在其他治療之前或之後投用。本發明還考量在外科手術、放射治療或化療之前及之後，在癌症個體中使用CpG ODN/化療劑組合。因此，本發明包含化療劑與CpG ODN於癌症之緩解誘導或維持療法中作爲新輔助、輔助、第一線治療、第二線及/或第三線治療中的用途。亦即，於一較佳體系中，該化療劑-CpG ODN組合可在，例如：外科切除腫瘤（如 :攝護腺癌、乳癌及肺癌）之前，作爲新輔助療法一起投用。於另一較佳體系中，化療劑-CpG ODN組合可作爲新輔助療法（如：在手術前），及在手術後作爲輔助療法投用。該組合可取代其他作用劑（例如：干擾素-α)作爲第一線治療。本發明之方法及組成物不僅可用於未接受過治療之患者，亦可用於治療對其他抗癌治療（諸如，但不限於’·單 -130- (127) 200824696 獨投服CpG ODN或單獨投服化療劑）部分反應或完全無反應之患者。於不同之較佳體系中，本發明提供用於治療那些顯示出或可能爲難治或對治療無反應之患者的疾病或病症的方法及組成物，其包含投服化療劑及/或CpG 0DN (任一種或此二種），且其中係藉由增強免疫反應來改良治療。於一較佳體系中，該方法包含合倂CpG ODN及化療劑。

CpG ODN可與化療劑一起使用（如上述）以誘導緩解，再單獨投服CpG ODN以用於維持療法。因此，緩解誘導療法可能需要一或多次重複之組合CpG ODN/化療劑療法的週期。然而，一旦觀察到緩解（對醫護人員可清楚知道），則可給予該個體維持療法。這類維持療法可能涉及以CpG ODN單獨治療。在維持治療方面，CpG ODN可每週或每二週投服一次或二次，宜經由皮下途徑投服。雖然本發明係藉與輔助、第一線治療、第二線及/或第三線治療相關之方法（包含一起投服CpG ODN與化療劑之組合）示範，本技藝之技術熟習人士藉由此文所提供之教示內容可了解本發明並不限於任何特殊之療法。而是 ’包含合倂CpG ODN及化療劑療法的方法係包含在疾病及治療的整段持續時間中使用該組合。因此’本發明並不限於僅將本發明之組合用於新輔助療法中；而是，本發明包含整個治療系列，包括，但不限於：癌症之輔助、第一線治療、第二線及/或第三線治療。這是由於此處所揭示之數據顯示出包含化療劑之免疫療 -131 - (128) (128)

200824696 法可單獨或與至少一種其他作用劑組合以在治療期間一時點提供治療效益。亦即，促成腫瘤特異性抗原釋方法（諸如其中將這類抗原暴露於免疫系統之細胞毒法，如：放射治療、化療，等）的效力可藉由投服本之化療劑來增加。確實，此文所揭示之數據進一步表同效果係由組合投服用於治療癌症（尤其是攝護腺癌癌、CRC、黑色瘤、胰臟癌、肺癌、NSCLC、NHL、，等）之化療劑與CpG ODN來促成。因此，本發明用於治療癌症之重要新穎治療劑，以藉此增強患者之系統來提供抗腫瘤作用。於另一較佳體系中，CpG ODN及化療劑組合係一服以增加及/或延長對腫瘤之免疫反應。這是由於本之作爲TLR9激動劑之CpG ODN的抗腫瘤作用及由療劑促成之細胞傳訊阻斷作用間可能存在著交互作用產生較單獨之作用劑更有效之抗腫瘤作用。因此， ODN與化療劑之組合可提供可能之加成或協同作用，此提供對癌症之重要新穎的治療性處置。於一較佳體系中，本發明提供利用化療劑-CpG 組合產生或增加抗腫瘤反應的組成物及方法，其中 ODN藉由一定量之化療劑增加抗腫瘤反應，而該化療單獨使用時對誘導相同程度之抗腫瘤反應而言爲次最。於某些較佳體系中，當CpG ODN不與化療劑一起引出抗腫瘤反應時，單獨投服CpG ODN不會產生或抗腫瘤反應。於替換之較佳體系中，CpG ODN及化之任出之性療發明示協、乳 RCC 提供免疫起投發明該化，而 CpG 以藉 ODN CpG 劑當佳的用來增加療劑 -132- (129) 200824696 二者可單獨投服及/或一起投服來引出抗腫瘤反應。於某些較佳體系中，CpG ODN可以加成方式增強化療劑之效果（反之亦然）。於較佳之體系中，CpG ODN係以協同方式增強化療劑之效果（反之亦然）。於另一較佳體系中，該化療劑係以加成方式增強CpG ODN之效果。較佳地，該效果係以協同方式增強。因此，於某些較佳體系中，本發明包含疾病之治療或預防方法，該方法可提供較單獨投服CpG ODN或化療劑更佳之治療變化形廓。

本發明包含具有加成效力或加成療效，但可減少或避免不欲有或不良效果之組合療法。本發明亦包含協同組合，其中該療效較加成療法爲佳，但可減少或避免不欲有或不良作用。於某些較佳體系中，本發明之方法可治療或預防疾病及病症，其中該治療係藉由增強之抗腫瘤反應來改良，此抗腫瘤反應係使用較低及/或頻率較少之化療劑及/ 或CpG ODN劑量，以減少由單獨投服化療劑及/或CpG ODN所引起之不欲有或不良作用，但仍可維持或增加療效，宜爲增加患者之順從性、改良療法及/或減少不欲有或不良之效果。給藥方案給藥方案可經過調整，以提供理想之所欲反應。例如 :可投服單一大九劑或可在一段時間內投服數個分割劑量，或可將劑量依治療狀況之迫切需要的指示成比例減少或增加。將經由腸胃道外途徑投服之組成物調製成容易投服 -133- (130) 200824696 且劑量均勻之劑量單位型式特別有利。此處所使用之劑量單位型式係指適合作爲欲治療之哺乳動物個體的單位劑量的生理上不連續單位，各單位含有預定量之活性化合物，此預定量之化合物係經過計算以與所需之藥學載體產生所欲之療效。本發明之劑量單位型式的規格係由下列a、b 二項規定且直接取決於此：（a )化療劑之獨特特徵及欲取得之特殊療效或預防效果，及（b )合成這類用於治療

個體之敏感性的活性化合物之技藝中所固有的限制。因此，本技藝之技術熟習人士根據此文所提供之揭示內容可察知該劑量及給藥方案係根據治療技藝中所熟知之方法調整。亦即，可輕易地設立該最大耐受劑量，且亦可決定該提供患者可偵測到之治療效益的有效量，並可建立投服各作用劑以提供患者可偵測到之治療效益的暫時性需求。因此，雖然此處示範某些劑量及給藥方案，這些實例並不在任一方面限制該可在執行本發明時提供給患者的劑量及給藥方案。再者，本技藝之技術熟習人士了解：藉著此處所提供之教示內容的協助可藉由多種本技藝中已知之用於評估癌症之療效的方法（這些方法包含在本發明中）以及未來將硏發之方法來評估治療效益（諸如，但不限於 :可偵測到之腫瘤大小及/或轉移減少，以及復發時間延

需注意，劑量數値可能根據欲緩和之病況的類型及嚴重性而有不同，且可包括單一或數個劑量。尙需了解的是，對任何特殊個體而言，特殊之給藥方案應根據個體需要 -134- (131) 200824696 及該給予組成物或監督投服組成物之人士的專業判斷隨著時間調整，此處所提出之給藥範圍僅供示範而不欲限制該申請專利之組成物的範圍或實行。例如：劑量可根據藥物動力學或藥效參數（其可包括臨床效果，諸如毒性作用及 /或實驗室數値）調整。因此，本發明包含由本技藝之技術熟習人士所決定之將患者體內之劑量逐步提高。投服化療劑時之合適劑量及給藥方案的測定方法爲相關技藝所熟知且本技藝之技術熟習人士由此文所揭示之教示內容將可

CpG ODN可以二種劑量類型（此文稱爲治療劑量及維

持劑量）的其中之一投服。治療劑量係指在治療週期中給予患者之CpG ODN劑量，其中係在治療週期中投服一或多種額外之化療劑。例如：若患者展開6次化療週期（稱爲”治療方案”），其中一個週期包含數次之每週投服CpG ODN、化療劑或其組合，在此治療方案之過程中，給予患者之CpG ODN劑量稱爲治療劑量。相反地，維持劑量係指完成治療方案後給予患者之CpG ODN劑量。維持劑量係在"維持相"期間投服，此維持方案與治療方案在時間上分隔且目標上有所區別。在治療持續進行期間之任何時點的治療劑量與維持劑量可相同或相異。例如：患者最初之維持劑量可與治療劑量相同，但經過某一段時間後，維持劑量可根據多種因子 (包括’但不限於··治療方案完成之前及之後的疾病期別、治療方案完成後患者的總體安康、伴隨之疾病病況，等 -135- (132) 200824696 )相對於治療劑量增加或減少。

CpG ODN可根據本技藝所熟知之標準給藥方案投服。用於黏膜或局部遞送之CpG ODN的治療性或維持劑量通常係每次投服約1微克至1 〇〇毫克，此投服之劑量係根據每曰、每週或每月及任何相隔之時間期中所允許之施用情況而定。較常爲，黏膜或局部遞送之治療性或維持劑量爲每次投服約1〇〇微克至50毫克，最常爲，約1至1〇毫克，共投服2-4次，其間間隔數天或數週。

此文所描述之用於腸胃道外遞送以引起系統性免疫反應之化合物的治療及維持劑量通常可能較有效之黏膜劑量高2至1 000倍，更常爲高2至100倍且最常爲5至50倍於一較佳體系中，當將CpG ODN與其他治療劑（諸如本發明之化療劑）或在限定之遞送載劑中一起投服時，用於腸胃道外（包括皮下）遞送以引起免疫反應之CpG ODN的治療及維持劑量通常係每次投服約10微克至1000 毫克’此投服之劑量係根據每日、每週或每月及任何相隔之時間期中所允許之施用情況而定。較常爲，用於這些目的之經由腸胃道外投服之劑量爲每次投服約1微克至500 毫克，最常爲5至100毫克，宜爲約5至50毫克，共投服2-4次’其間間隔數天或數週。然而，於某些較佳體系中’用於這些目的之經由腸胃道外投服之劑量的用量可較上述之典型劑量高5至1000倍。於某些較佳體系中，該CpG ODN之治療或維持劑量 -136 - (133) 200824696 係每週投服一次，共10-40毫克。通常，CpG ODN之投服劑量可爲每次5或10毫克，而根據欲投服之總量產生數個大九劑或注射劑量。例如：若欲投服之總量爲1 0毫克，則可藉由，如：2 X 5毫克注射劑量在相同或不同之注射部位投服。另一實例爲，若欲投服之總量爲40毫克，則可藉由，如：4x 1 0毫克注射劑量投服。

另外，維持劑量可根據多種因子單獨投服或與一或多種其他作用劑（包括，但不限於··化療劑及/或治標劑）一起投服，這些因子包括，但不限於··患者之健康、疾病之期別及伴隨之疾病狀態。在維持相期間，CpG ODN之維持劑量可大致上與一或多種其他作用劑同時或依序投服。在大致上同時或依序投服方面，CpG ODN與該一或多種其他作用劑可在相同或分別之調和物或套組中。在治療方案或維持相期間，CpG ODN可與本發明之化療劑大致上同時或依序投服。不管治療持續期之階段，當同時投服時，雖然ODN及化療劑係在相同時間投服，但其可在相同或分別之調和物中。”大致上同時"一詞意指化合物彼此係在數分鐘內投服（如：彼此在1 0分鐘內投服 )，且欲包含聯合投服及連續投服，但若爲連續投服，則其在時間上僅短期分隔（如：醫療人員分別給予二種化合物所花費之時間）。此文所使用之同時投服或大致上同時投服可交換使用。依序投服係指時間上分開（一個接一個，不意圖延遲）投服ODN及化療劑。投服這些化合物間所分隔之時間係較分開投服二種藥物所花費之時間長得多 -137- (134) 200824696 。因此，共同投服係包含任何暫時性組合投服化療劑及 CpG ODN，如此，投服此二種化合物可促成較單獨投服任一作用劑更佳之對患者的治療效益。

CpG ODN可在投服化療劑之前、同時或之後.（或其任何組合）投服，反之亦然。CpG ODN可每日（包括每曰投藥一或多次）、每隔一天、每三天、每四天、每五天、每六天或每週、每個月、每二個月、每三個月、每四個月、每五個月、每六個月、或每年投服。化療劑可每日、每隔一天、每三天、每四天、每五天、每六天、每週、每二週、每個月、或每20天、每25天、每28天、每30天、每40天、每50天、每二個月、每70天、每80天、每三個月、每六個月、或每年投服。可投服一個或數個化療劑之劑量。或者，可投服至少一個劑量、或至少三個、六個或12個劑量。CpG ODN與化療劑可輪流投服。於一較佳體系中，CpG ODN與化療劑係一起投服，其中係投服此文所提出之CpG ODN的劑量，宜經由腸胃道外途徑（如··皮下或IV途徑）投服。於另一較佳體系中 ’先投服化療劑以阻斷將限制該CpG ODN之效力的抑制作用。於此較佳體系中，宜在投服CpG ODN前之一個月至一天投服化療劑。於較佳之體系中係在給予CpG ODN 前至少1週但不超過3週投服化療劑；最佳爲，該化療劑係在給予CpG ODN前約1週投服。於另一較佳體系中，先投服CpG ODN來起動免疫系統，以對與此一起投服之化療劑及任何其他免疫療法（如 -138- (135) 200824696 :腫瘤疫苗’等）具較佳之免疫活化反應。於此較佳體系中，宜在給予化療劑前1個月至1天給予CpG ODN。於一較佳體系中，宜在給予化療劑前至少1週但不超過3週給予CpG ODN，最佳地，宜在給予化療劑前約1週給予

CpG ODN。雖然投服CpG ODN及化療劑之間可使用任何合適之

休息期，但本發明不需要等待期，且化療劑及CpG ODN 可大致上同時投服。因此，於一較佳體系中，化療劑係以單一注射劑之型式投服且CpG ODN係在投服化療劑之前或之後約1-7天投服。在數天或數週之週期或治療方案中，可將該化療劑與 CpG ODN —起投服。該數天之週期可爲2、3、4、5、6、 7、8、9、10或更多天之週期、或爲2、3、4或更多週之週期。化療劑可在這類週期中的第一天投服，再在數週之週期中之各週的第1天投服CpG ODN。例如：可在三週之週期的第1、7及14天投服CpG ODN。此三週之週期可重複一次、二次、三次或更多次。例如：在整個治療期之前可先單獨投服ODN或化療劑，以起動免疫系統或使個體對接下去之治療更具反應性。化療劑及CpG ODN之額外週期可依藉由本技藝所察知之方法所測定者提供。然而，本發明並不限於這些或任何特殊劑量或用於投服CpG ODN與化療劑之投服方案。而是，相關技藝之一般技術人士可利用爲人熟知之方法輕易地決定化療劑及Cp G ODN之理想劑量及投服途徑和方 -139- (136) 200824696 案。化療劑-CpG ODN組合可在外科手術、放射治療或任何其他治療前以非輔助療法之型式投服，以將腫瘤細胞敏感化或提供患者治療效益。另外，可在局部治療（如：外科手術、放射治療，或此二者）後將該組合以非輔助療法之型式一起投服。

再者，該組合可在，諸如，但不限於：第一線治療一旦失敗時，以第二線治療之型式給予。或者，該組合可與第一線治療同時投用或在第一線治療（其可於初次治療後投用）進行期間之任何時點投服。此係由於化療劑與CpG ODN之組合可在第一線治療一旦失敗、系統性輔助治療一旦失敗時提供治療效益。因此，本技藝之技術熟習人士可根據此文所提供之揭示內容察知本發明包含投服化療劑與 CpG ODN，並加上或不加上其他療法，包括，但不限於：荷爾蒙（如：抗雄性激素、芳香酶抑制劑，等）、放射治療及任何其他治療劑（化療、單一抑制療法，等），等。藥學組成物本發明亦關於包含足夠治療癌症之量（如：至少1毫克/公斤、至少3毫克/公斤、至少5毫克/公斤、至少1〇毫克/公斤、至少15毫克/公斤或至少20毫克/公斤）的人類化療劑及治療上有效量之CpG ODN的製品（如··適合用於i.v·投服之劑型）。於某些較佳體系中，該製品包含容器（其中包含人類化療劑、CpG ODN )和標示及/或用 -140- 200824696 (137) 於治療癌症之指示。

本發明包含藥學組成物（其包含作爲活性成分之本發明的人類化療劑並加上或不加上CpG ODN )之製備方法及用途。這類藥學組成物可僅由各活性成分所組成、爲至少一活性成分（如：有效劑量之化療劑、有效劑量之CpG ODN)之組合，以適合投服之型式投給個體，或者，該藥學組成物可包含活性成分及一或多種藥學上可接受之載體、一或多種其他（活性及/或去活性）成分或某些這類組合。

CpG ODN可直接給予個體或可與核酸遞送複合物一起投服。核酸遞送複合物應指與標靶裝置（如··可產生高親和力結合標靶細胞之分子）相聯結（如··以離子力結合或共價結合；或包囊在其中）之核酸分子。核酸遞送複合物之實例包括與脂醇（如：膽固醇）、脂質（如：陽離子性脂質、病毒脂蛋白體或脂粒）或標靶細胞特異結合劑（如 φ :可被標靶細胞特殊受體識別之配體）相聯結之寡核苷酸。較佳之複合物在活體內可足夠穩定，以防止在被標靶細胞內化前明顯解開。然而，該複合物在細胞內於合適之條件下可分裂，使核酸以功能型式釋出。用於將抗原及寡核苷酸遞送至表面的遞送載劑或遞送裝置已有記述。CpG ODN及/或抗原及/或其他治療劑可單獨投服（如：在生理食鹽水或緩衝液中）或利用本技藝所已知的任何遞送載劑投服。例如，下列遞送載劑已有記述 :Cochleates ； Emulsomes、ISCOMs ；月旨粒(Liposomes ) (138) 200824696 :活細菌載體（如：沙門氏菌、大腸桿菌、卡介菌、志賀氏菌、乳桿菌）；活病毒載體（如：牛痘、腺病毒、單純性疱疹）；微球（Microspheres ):寡核苷酸疫苗；聚合物；聚合物環；蛋白酶體（Proteosomes );氟化鈉；基因轉殖植物；仿病毒顆粒佐劑（Virosomes );似病毒顆粒及陽離子性脂質；肽或與聚陰離子性寡核苷酸具有電荷交互作用之其他載體。本技藝亦知其他遞送載劑且一些額外之實例提供於下列關於載體之討論中。

於一較佳體系中，化療劑係在水溶液中經由腸胃道外途徑（例如：靜脈內途徑）投服，而CpG ODN係經由皮下注射投服。CpG ODN之較佳調合物及劑型描述於美國專利申請案第US2004/0 198680號中，其揭示內容全部倂爲此文之參考資料。然而，根據此處所提供之揭示內容，本技藝之技術熟習人士將可了解本發明並不限於這些或任何其他調合物、劑量、投服途徑，等。而是，本發明包含任何調合物或投服化療劑與CpG ODN之方法，包括，但不限於：將各作用劑分別於不同調合物中經由不同投服途徑投服（如：經由靜脈內途徑投服化療劑，但經由皮下途徑一起投服CpG ODN，等）。因此，下列討論說明用於執行本發明之方法（包含投服任何化療劑與CpG ODN ) 的多種不同調合物，但本發明並不限於這些調合物，而是包含任何可由本技藝之技術熟習人士藉由此處所提供之用於本發明方法的教示內容而輕易決定的調合物。本發明所使用之抗體可倂入適合投給個體之藥學組成 -142- (139) 200824696

物中。典型地，該藥學組成物包含化療劑及藥學上可接受之載體。此文所使用之"藥學上可接受之載體”包括任何及所有生理學上相容之溶劑、分散介質、塗覆層、抗細菌及抗黴菌劑、等張及吸收延遲劑，等。藥學上可接受之載體的實例包括一或多種水、生理食鹽水、磷酸鹽緩衝之生理食鹽水、右旋糖、海藻糖、甘油、乙醇，等及其組合。在許多情況中，組成物宜包括等張劑，例如：糖類、多元醇 (諸如甘露醇、山梨醇或氯化鈉）。藥學上可接受之物質包括可增加化療劑之架上期限或有效性的濕潤或少量之輔助物質，諸如濕潤劑或乳化劑、防腐劑或緩衝液。抗體可爲多種不同之型式。這些包括，例如：液體、半固體及固體劑型，諸如液態溶液（如：注射及注入液）、分散液或懸浮液、錠劑、藥九、粉末、脂粒及栓劑。較佳型式係根據所欲之投服及治療應用模式而定。典型之較佳組成物爲注射或注入液之型式，諸如：類似於那些用於以其他抗體爲人類進行被動免疫之組成物。較佳之投服模式爲經由腸胃道外途徑（例如：靜脈內、皮下、腹膜內、肌肉內）投服。於一較佳體系中，該化療劑係經由靜脈內注入及注射投服。於另一較佳體系中，該化療劑係經由肌肉內或皮下注射投服。通常，治療組成物在製造及貯存條件下必須爲無菌且穩定。組成物可配製成溶液、微乳劑、分散液、脂粒或其他適合高藥物濃度之指定構造。無菌注射液可經由將需要量之化療劑與上述之一種成分或其組合（依需要而定）倂 -143- (140) 200824696

入適當之溶劑中，再進行無菌過濾來製備。一般而言，分散液係經由將活性化合物倂入含有基礎分散介質及上述之所需其他成分的無菌載劑中來製備。在用於製備無菌注射液之無菌粉末的情況中，較佳之製備方法爲真空乾燥及冷凍乾燥法，其可從加有任何其他所需成分之活性成分的無菌過濾液產生其粉末。溶液之適當流動性可經由，例如：使用塗覆層（諸如卵磷脂）、（在分散液的情況中）維持所需之顆粒大小及使用表面活性劑來維持。延長可注射之組成物的吸收可藉由在組成物中包含延遲吸收之作用劑（例如：一硬脂酸鹽及明膠來達成）。化療劑及/或CpG ODN可藉本技藝中已知之多種不同的方法投服，包括，但不限於：口服、非經腸胃道、黏膜、吸入、局部、口腔、鼻及直腸途徑投服。對許多治療應用而言，較佳之投服途徑/模式爲皮下、肌肉內、靜脈內或注入。若需要時可使用非-注射針注射。本技藝之技術熟習人士可察知，投服之途徑及/或模式將根據所需結果 77TT l-x~r 而疋。給藥方案可經過調整以提供理想之所需反應。例如：可投服單一大九劑、在一段時間內投服數個分割之劑量或可依治療情況之當務需要的指示依比例減少或增加劑量。將經由腸胃道外途徑投服之組成物調配成容易投服且劑量均勻之劑量單位型式特別有利。此文所使用之劑量單位型式係指適合作爲欲治療之哺乳動物個體的單位劑量的生理上不連續單位；各單位含有預定量之活性化合物，此預定 -144- (141) 200824696 量之化合物係經過計算以與所需之藥學載體產生所欲之療效。本發明之劑量單位型式的規格係由下列a、b二項規定且直接取決於此：（a )化療劑之獨特特徵及欲取得之特殊療效或預防效果，及（b )合成這類用於治療個體之敏感性的活性化合物之技藝中所固有的限制。需注意，劑量數値可根據欲緩和之病況的類型及嚴重

性而改變且可包括單一或複數劑量。對任一特定個體而言需進一步了解的是，特殊給藥方案應根據個別需要及給予或監督投服組成物之人士的專業判斷，隨著時間調整，此處所列出之劑量範圍僅作爲示範並不欲限制該申請專利之組成物的範圍或實行。於一較佳體系中，該化療劑係在靜脈內調合物中，以包含5或10毫克/毫升化療劑與醋酸鈉、聚山梨醇酯80 及氯化鈉，pH値爲約5至6的無菌水溶液型式給予個體。較佳地，該靜脈內調合物爲包含5或1 0毫克/毫升化療劑與20mM醋酸鈉、0.2毫克/毫升聚山梨醇酯 80及 1 4 OmM氯化鈉，pH値爲約5.5的無菌水溶液。於一較佳體系中，部分劑量係經由靜脈內大九劑投服，剩餘部分則藉由注入化療劑調合物投服。例如：0.01毫克/公斤之化療劑的靜脈內注射液可以大九劑之型式給藥，剩餘之預定的化療劑劑量則可藉由靜脈內注射液投服。化療劑之預定劑量可，例如：在1 %小時至2小時到5小時內投服。此文所描述之藥學組成物的調合物可藉由藥學技藝中 -145- (142) 200824696 已知或以後硏發的任何方法製備。一般而言，這類製備方法包括將活性成分與載體或一或多種其他輔助成分結合之步驟，然後，若需要或想要時，將產品塑形或包裝成所需之單一或複數劑量單位。

本發明之藥學組成物可大量、以單一單位劑量或數個單一單位劑量之型式製備、包裝或販售。此處所使用之” 單位劑量’’爲包含預定量之活性成分的不連續藥學組成物之量。通常，活性成分之量係等於將給予個體之活性成分的劑量或爲這類劑量之合宜部分，諸如一半或三分之一的劑量。本發明之藥學組成物中之活性成分、藥學上可接受之載體及任何其他成分之相對量將根據受治療之個體的特性、大小及病況有所不同’並進一步根據投服組成物之途徑而改變。例如··該組成物可包含0·1 %至100% (重量/重量）之活性成分。除了活性成分外，本發明之藥學組成物可進一步包含一或多種額外之藥學活性成分。特別考量之額外作用劑包括抗嘔吐劑、抗-腹瀉劑、化療劑、細胞活素，等。本發明之藥學組成物的經控制或持續釋出之調合物可利用習知技術製造。此文所使用之"經由腸胃道外途徑投服π藥學組成物包括任何投服途徑，其特徵爲個體組織之生理缺口並透過此組織缺口投服藥學組成物。因此，經由腸胃道外途徑投服包括，但不限於：經由注射該組成物來投服藥學組成物、 -146 - (143) 200824696 透過外科手術切開來施放組成物、透過組織-滲透性非外科手術傷口來施放組成物，等。尤其是，經由腸胃道外途徑投服被認爲包括，但不限於：皮下、腹膜內、肌肉內、胸骨內注射及腎臟透析注入技術。

適合經由腸胃道外途徑投服之藥學組成物的調合物包含與藥學上可接受之載體（諸如水或無菌之等張生理食鹽水）合倂之活性成分。這類調合物可製備成、包裝成適合大九劑投服或持續投藥之型式。注射調合物可製備成、包裝成單位劑量型式（諸如在含有防腐劑之安瓿或複數劑量之容器中）或以此型販售。用於經由腸胃道外途徑投服之調合物包括，但不限於：在油性或水性載劑中之懸浮液、溶液、乳劑、糊狀物及如下述討論之可植入的持續-釋出或生物降解的調合物。這類調合物可進一步包含一或多種額外之成分，包括，但不限於：懸浮劑、安定劑或分散劑。於一種用於經由腸胃道外途徑投服之調合物的較佳體系中，該活性成分係以乾燥（即，粉末或顆粒）型式提供，此乾燥型式係在經由腸胃道外途徑投服前以合適載劑（例如：無菌之不含病原的水）重構成。本發明之組成物可藉由本技藝所已知之多種不同的方法投服。投服之途徑及/或模式係根據所需結果而改變。活性化合物可與能防止該化合物快速釋出之載體一起製備成，諸如經控制釋出之調合物，包括：植入物、透皮貼布及微膠囊遞送系統。可使用生物可降解、生物相容之聚合物，諸如乙烯醋酸乙烯酯、聚酐、聚乙醇酸、膠原蛋白、 -147- (144) 200824696 聚原酸酯及聚乳酸。許多用於製備這類調合物之方法描述於，如：Sustained and Controlled Release Drug Delivery

Systems，J. R. Robinson，ed·，Marcel Dekker，Inc·，New

York，（1 97 8)中。藥學組成物宜在GMP條件下製造。

藥學組成物可可製備成、包裝成無菌注射之水性或油性懸浮液或溶液或以此型販售。此懸浮液或溶液可根據已知技藝配製，且除了活性成分外還可包含其他成分，諸如 :此文所描述之分散劑、濕潤劑或懸浮劑。這類無菌注射調合物可利用非-毒性之經由腸胃道外途徑上可接受的稀釋劑或溶劑（諸如水或1，3-丁二醇）。其他可接受的稀釋劑及溶劑包括，但不限於：林格氏液、等張氯化鈉溶液及固定之油，諸如合成之單-或二-甘油酯。其他可用之經由腸胃道外途徑投服之調合物包括那些包含在脂粒製品中之微晶型活性成分，或者，該活性成分爲生物可降解之聚合物系統的一種成分。用於持續釋出或植入之組成物可包含藥學上可接受之聚合或疏水物質，諸如乳劑、離子交換樹脂、難溶之聚合物或難溶之鹽。本發明之化療劑/CpG ODN活性成分組合物可給予動物（宜爲人類）。然而，投服之各活性成分的精確劑量將根據多種因子而有不同，這些因子包括，但不限於：欲治療之動物類型、疾病狀態之類型、動物之年齡及投服途徑本發明之化療劑-CpG ODN組合物可與多種其他化合物（抗荷爾蒙治療劑、細胞活素、化療及/或抗病毒藥， -148- (145) (145)

200824696 等）一起投服。或者，化合物可在投服化療劑-CpG 組合物或任何其交換組合前1小時、1天、1週、1個甚至更久前投服。再者，化合物可在給予放射治療、胞移植或投服任何化療劑（如：細胞活素、化療化合等）或任何其交換組合後1小時、1天、1週或甚至後投服。本技藝之技術熟習人士清楚明白投服之頻率案且可根據任何數目之因子決定，諸如，但不限於：療之疾病的類型及嚴重性、動物之年齢及健康狀態、之化合物的特性、不同化合物之投服途徑，等。本發供數種示範一起投服化療劑-CpG ODN，以治療癌症法的教導實例，但本發明之任一方面並不限於這些實這些實例僅用來說明本發明所包含之方法。套組本發明包括用於治療癌症之多種不同套組。該套含治療上有效量之本發明的人類化療劑及治療上有效 CpG ODN與給藥器和描述該組合於執行本發明方法途的教示資料。雖然下文中描述示範之套組，但本技技術熟習人士鑑於本揭示內容可清楚明白其他可用套成分。這些套組係包括在本發明中。本發明包括用於治療有需要治療腎細胞癌之患幸症的套組。該套組包括本發明之人類化療劑及C p G 。該套組進一步包含給藥器（其包括，但不限於用东組之成分投給患者的針筒）。再者，該套組包含提技 ODN 月或幹細物，更久及方受治投服明提之方例，組包量之之用藝之組之此癌 ODN 將套使用 -149- (146) 200824696 該套組治療患者之乳癌的相關資訊的教示資料。

本發明包含含有化療劑與CPG ODN之任何組合的套組。雖然這類套組爲較佳者，但本發明並不限於此特定組合。再者，該套組可包含很多種用於治療癌症之其他作用劑。這類作用劑先前已提出且包括化療化合物、癌症疫苗、除CpG ODN外之TLR激動劑、其他CpG ODN、受體酪胺酸激酶抑制劑（諸如，但不限於SU1 1248 )、用於治療癌症之異常細胞生長、藉由結合IGF-1R(此爲一種化療劑（紫杉烷、長春花生物鹼、鉑化合物、嵌入抗生素，等 ))抑制腫瘤生長之抗體或其他配體及細胞活素，等以及用於治療，如：任何在治療期間產生之毒性的治標劑，諸如，但不限於：抗腹瀉、抗嘔吐，等。本發明藉由參考下列實驗實例進一步詳細描述。除非另外指出，這些實例僅用於說明，而非用於限制。因此，本發明不應在任一方面侷限於下列實例，而應包含任何及所有變化，這些變化在參考此文所提供之教示內容後變得清楚明白。【實施方式】實例實例1.太平洋紫杉醇卡鈾/PF 3 5 1 2676

進行臨床試驗以評估將PF 35 1 2676與作爲患者之第一線治療之太平洋紫杉醇卡鉑化療一起投給罹患局部之末期（第Π[期，具肋膜積液）或轉移（第IV期）之NSCLC -150- (147) 200824696

的患者時的效力及安全性’並將其與單獨之太平洋紫杉醇 ⑧/卡鉬化療的效力及安全性相比較。本臨床試驗之主要目標係比較隨機接受太平洋紫杉醇卡鉑+PF 3 5 1 2676 (硏究治療臂（Investigational Treatment Arm ))之患者對隨機接受單獨之太平洋紫杉醇”卡鉛（對照治療臂（Control Treatment Arm))之患者的總存活時間（〇S )。本臨床試驗之第二個目標係比較隨機接受太平洋紫杉醇”卡鉑 + PF 35 1 2676之患者對隨機接受單獨之太平洋紫杉醇”卡鉑之患者的其他效力、安全性，以及與健康相關之生活品質和疾病/治療-相關症狀的測量値。此試驗亦（a )評估 PF 3 5 1 2676對太平洋紫杉醇及卡鈾之藥物動力學的作用；及（b )評估當PF 3 5 1 2676與太平洋紫杉醇/卡鉑一起投服時，PF 3512676之藥物動力學。試驗之主要指標（p r i m a r y e n d ρ 〇 i n t )爲總存活時間’ 此總存活時間之定義爲從隨機試驗開始至因任何原因死亡之曰期之間的時間。次要指標包括總確認之客觀反應速率 (ORR)，其定義爲具確認之最佳反應（其特徵爲完全反應（CR)或部分反應（PR)(根據RECIST指導原則定義之標靶病害及腫瘤反應））之患者的比例。確認之反應爲那些在提供反應之最初客觀證據後於追蹤造影術評估中持續2 4週的反應。其他次要指標包括：（a )反應期（DR )，其定義爲從提供反應之初次證明後至惡化或由於首先發作之疾病惡化而死亡之日期之間的時間；（b )腫瘤惡化之時間（TTP )，其定義爲從隨機試驗開始至惡化或由 -151 - (148) 200824696

於首先發作之疾病惡化而死亡之日期之間的時間；（c ) 總安全性變化形廓，其特徵爲類型、頻率、嚴重性（如利用 NCI (國家癌症協會）Common Terminology Criteria for Adverse Events ( CTCAE)，第 3·0 版分級者）及與不良事項及實驗室異常之硏究治療的關係；（d )患者回報 (Patient Reported Outcome)之與健康相關之生活品質中的變化及根據EORTC QLQ-C30及QLQ-LC-13之疾病/治療-相關症狀；（e )藥物動力學參數包括，但不限於：太平洋紫杉醇' 卡鉑及PF 3 5 12676之Cmax及AUC。臨床試驗中所登記之患者將隨機（1 · 1)分爲硏究治療臂（A臂）或對照治療臂（B臂）。隨機分至A臂之患者將接受：標準之以鉑爲基礎的雙重化療’其包含在3 -週之週期中投服太平洋紫杉醇及卡鉑加PF 35 12676。化療處置最多將持續6個週期。完成或中斷化療後，除爲了疾病惡化之原因外，患者將持續每週接受單一之PF 35〗2676 維持劑。隨機分至B臂之患者將接受：標準之以鉑爲基礎的雙重化療，其包含在3-週之週期中投服太平洋紫杉醇及卡鉑。化療處置最多將持續6個週期。當疾病惡化、無法接受之與治療相關的毒性或患者拒絕持續硏究治療時將中斷化療及/或PF 35 1 2676。各治療臂之患者接受至多6個週期之化療。在各治療週期時，硏究治療之劑量係根據患者之確實體重（與基線高度一起計算出身體表面積）及腎臟功能（利用未修正之Cockcroft & Gault公式從血清肌胺酸酐估算GFR)。 -152- (149) 200824696 A臂（硏究治療臂）：太平洋紫杉醇+卡鉑+ PF-3 5 12676 硏究治療係在3-週之週期中給藥。在各週期之第1天，患者接受：太平洋紫杉醇-200毫克/米2，第1天經由靜脈內途徑在3小時內投服；卡鉑-AUC 6，完全注入太平洋紫杉醇後第1天經由靜脈內途徑在1 5 - 3 0分鐘內投服。各治療週期中係根據Calvert公式，以6毫克/毫升X分鐘之標靶AUC計算卡鉑之劑量。

術前給藥：（a )過敏預防：根據下列建議之預先處置方案，在投服太平洋紫杉醇各劑量前投用標準之以皮質類固醇爲基礎的術前給藥，將與氫化蓖麻油（cremophor )相關之過敏風險降至最低。在給予太平洋紫杉醇前約1 2 及6小時口服20毫克之地塞米松（dexamethasone);若未經口服給藥，則在給予太平洋紫杉醇前1小時內，以20 毫克劑量之IV地塞米松治療患者；在給予太平洋紫杉醇前30-60分鐘，經由靜脈內途徑投服50毫克之二苯安明 (diphenhydramine )(或同等之抗組織胺）；在給予太平洋紫杉醇前3 0-60分鐘，經由靜脈內途徑投服3 00毫克之西咪替丁（cimetidine)或50毫克之雷尼替丁（ranitidine )(或同等之H2阻斷劑）；（b )抗嘔吐預防：建議在給予化療前或後至多4天，或依患者之需要以5-HT3拮抗劑 (如··葛蘭尼西隆（Granisetron)、奧丹西隆（ Ondansetron )、沛隆西通（pal〇nosetron ))做預防治療。伴隨使用美托克羅普邁（metoclopramide)或艾普列坦 -153- (150) 200824696 (aprepitant )可被視爲化療後之替代藥。若噁心及嘔吐需要使用皮質類固醇，則根據局部制度實務給藥，但建議在給予化療後限制使用類固醇至多3天。

在各週期之第 8天及第 15天，患者接受：PF-3 5 12676-其係經由皮下途徑投服 0.20毫克/公斤。PF-3 5 1 2676之劑量係在各治療週期開始時根據患者之確實重量而定。注射部位可在手臂、大腿、臀部、背部或腹壁，但上軀體部位爲較佳者。各次給藥之注射部位應改變，以限制局部注射反應之影響。若總劑量超過1 .〇毫升（1 5毫克），則將注射液平分在二個部位（如：在各手臂中注射一半劑量）。最大劑量將爲平分在2個注射部位之30毫克（2.0毫升）。皮下注射PF-3512676時建議使用27號或更細之注射針。注射針長度應根據患者體重及注射部位調整，以避.免意外之皮內或肌肉內注射。術前給藥：若投服PF-3 5 1 2676後出現似流感症狀，則考慮在投服？？-3 5 1 267 6之劑量前及後預防性地給予對位乙醯胺基酚/醋胺酚，以將與PF-3 5 1 2676相關之似流感症狀減至最少。單一 PF-3 5 1 2676維持劑：完成6個化療週期之患者或那些除了因疾病惡化而早期中斷化療外之患者將持續每週接受單一 PF-3 5 1 2676維持劑。單一 PF-35 12676維持劑將以4-週之週期投服並持續給藥直到疾病惡化、無法接受之與PF-35 12676相關的毒性或患者拒絕持續硏究治療時。PF-3 5 1 2676之劑量係在各治療週期開始時根據患者之確實重量而定。 -154- (151) 200824696 B臂（對照治療臂）：太平洋紫杉醇+卡鉑

硏究治療係在3-週之週期中給藥。在各週期之第1天，患者接受：太平洋紫杉醇-200毫克/米2，第1天經由靜脈內途徑在3小時內投服；；卡銷-A U C 6，完全注入太平洋紫杉醇後第1天經由靜脈內途徑在15-30分鐘內投服。。各治療週期中係根據Calvert公式，以6毫克/毫升X 分鐘之標靶AUC計算卡鉑之劑量。依上述A臂之描述，在投服太平洋紫杉醇各劑量前給予標準之以皮質類固醇爲基礎的術前給藥。實例2. 吉西他汀®/順鉑/PF 3 5 1 2676 進行臨床試驗以評估將PF 35 12676與作爲患者之第一線治療之吉西他汀®/順鉑化療一起投給罹患局部之末期 (第瓜B期，具肋膜積液）或轉移（第IV期）NSCLC的患者時的效力及安全性，並將其與單獨之吉西他汀”順鈾化療的效力及安全性相比較。本臨床試驗之主要目標係比較隨機接受吉西他汀順鉑+PF 35 1 2676 (硏究治療臂）之患者對隨機接受單獨之吉西他汀”順鉑（對照治療臂）之患者的總存活時間（OS)。本試驗之第二個目標係比較隨機接受吉西他汀”順鋁+PF 3 5 12676之患者對隨機接受單獨之吉西他汀”順鉑之患者的其他效力、安全性’以及與健康相關之生活品質和疾病/治療-相關症狀的測量値。其他第二目標包括：（a)評估PF 3 5 1 2676對吉西他汀⑧及 -155- (152) 200824696 順鉑之藥物動力學的作用；及（b)評估當PF 3 5 1 2676與吉西他汀®及順鉑一起投服時，PF 35 12676之藥物動力學〇試驗之主要指標爲總存活時間，此總存活時間之定義爲從隨機試驗開始至因任何原因死亡之日期之間的時間。次要指標包括：（a )總確認之客觀反應速率（ORR )，其定義爲具確認之最佳反應（其特徵爲完全反應（CR )或部分反應（PR)(根據RECIST指導原則定義之標靶病害 ^ 及腫瘤反應））之患者的比例。確認之反應爲那些在提供反應之最初客觀證據後於追蹤造影術評估中持續2 4週的反應。（b )反應期（DR )，其定義爲從提供反應之初次證據後至惡化或由於首先發作之疾病惡化而死亡之日期之間的時間。（c )腫瘤惡化之時間（TTP )，其定義爲從隨機試驗開始至惡化或由於首先發作之疾病惡化而死亡之曰期之間的時間。（d )總安全性變化形廓，其特徵爲類型、頻率、嚴重性[如利用NCI .(國家癌症協會）Common Terminology Criteria for Adverse Events ( CTCAE)，第 3.0版分級者]及與不良事項及實驗室異常之硏究治療的關係。（e )患者回報（P atient Reported Outcome )之與健康相關的生活品質中的變化及根據EORTC QLQ-C30及 QLQ-LC-13之疾病/治療-相關症狀。（f)藥物動力學參數包括，但不限於：吉西他汀®、順鉑及PF 3 5 12676之 Cmax 及 AUC。試驗中所登記之患者將隨機（1 : 1 )分爲硏究治療臂 -156- (153) 200824696

(A臂）或對照治療臂（B臂）。隨機分至A臂之患者將接受：標準之以鉑爲基礎的雙重化療，其包含在3-週之週期中投服吉西他汀⑧及順鉑加PF 35 1 2676。化療處置最多將持續6個週期。完成或中斷化療後，除爲了疾病惡化之原因外，患者將持續每週接受單一之PF 3 5 1 2676維持劑。隨機分至B臂之患者將接受：標準之以鉑爲基礎的雙重化療，·其包含在3 -週之週期中投服吉西他汀®及順鉑。化療處置最多將持續6個週期。當疾病惡化、無法接受之與治療相關的毒性、醫師決定或患者拒絕持續硏究治療時將中斷化療及/或PF 3512676。 A臂（研究治療臂）：吉西他汀® +順鉑+ PF-3 5 1 2676

硏究治療係在3 -週之週期中給藥。在各週期之第1天，依需要進行術前給藥法且硏究治療包含吉西他汀1250 毫克/米2，經由靜脈內途徑在約3 0分鐘內投服，順鉬-7 5 毫克/米2，完全注入吉西他汀®後經由靜脈內途徑在1-2 小時內投服。各治療週期之第8天依需要進行術前給藥，再進行硏究治療，其包含吉西他汀® : 1 250毫克/米2，經由靜脈內途徑在約30分鐘內投服，再給予PF-3 5 1 2676: 0.2G毫克/公斤，其係經由皮下途徑投服。注射部位可在手臂、大腿、臀部、背部或腹壁，但上軀體部位爲較佳者。各次給藥之注射部位應改變，以限制局部注射反應之影響。若總劑量超過1 .〇毫升（1 5毫克），則將注射液平分在二個部位（如：在各手臂中注射一半劑量）。最大劑量 -157- (154) 200824696

將爲平分在2個注射部位之30毫克（2.0毫升）。皮下注射PF-3512676時建議使用27號或更細之注射針。注射針長度應根據患者體重及注射部位調整，以避免意外之皮內或肌肉內注射。若投服PF-3 5 1 2676後出現似感冒症狀，則考慮在投服PF-3 5 1 2676之劑量前及後預防性地給予對位乙醯胺基酚/醋胺酚，以將與PF-35 1 2676相關之似感冒症狀減至最少。投服PF-3 5 1 2676後觀察患者之臨床硏究部位至少1小時。在各週期之第1 5天依需要進行術前給藥，再進行硏究治療，其包含PF-3 5 1 2676: 0.20毫克/公斤，經由皮下途徑投服。單一 PF-3 5 1 2676維持劑：完成化療之患者或那些除了因疾病惡化而早期，中斷化療外之患者將持續每週接受單一之PF-3 5 1 2676維持劑；第1個週期係在化療之最後一個週期的第1天後3週開始。單一 PF-3 5 1 2676維持劑將在4-週之週期中投服並持續給藥直到疾病惡化、無法接受之與PF-3 5 1 2676相關的毒性或患者拒絕持續硏究治療時。PF-3 5 1 2676之劑量係在各治療週期開始時根據患者之確實重量而定。 B臂（對照治療臂）··吉西他汀⑧+順鉑硏究治療係在3-週之週期中給藥。在各週期之第〗天，依需要進行術前給藥法，再進行硏究治療，其包含吉西他汀® : 1 2 5 0毫克/米2，經由靜脈內途徑在約3 0分鐘內投服，順鉛：75毫克/米2，完全注入吉西他汀⑧後經由靜脈 -158- (155) 200824696 內途徑在1-2小時內投服。在各週期之第8天，依需要進行術前給藥，再進行硏究治療，其包含吉西他汀® : 1250 毫克/米2，經由靜脈內途徑在約3 0分鐘內投服。術前給藥包括，但不限於藉由下列治療計劃治療表來治療與順鉑相關之嘔吐的抗嘔吐預防法：第1天（急性嘔吐）：在化療1小時內給予一次5HT3拮抗劑（見下列5HT3拮抗劑列表）加20毫克地塞米松（在5 -1 5分鐘內經由口或靜脈內途徑投服）。

•多拉塞特龍（Dolasetron) 100毫克，口服或IV •葛蘭尼西隆（Granisetron) 1或2毫克口服或0·1

毫克/公斤或1毫克IV

•奧丹西隆（Ondansetron) 24毫克口服或0.15毫克/ 公斤IV或8毫克IV •亦可使用艾普列坦（Aprepitant ) ，125毫克口服在第2-4天（延遲之嘔吐）：延遲嘔吐之醫療應在第 2天早上開始且每天2次（bid )持續3天。建議口服地塞米松8毫克（bid)加口服美托克羅普邁30至40毫克（ bid)共3天。5HT3拮抗劑或艾普列坦（80毫克口服）可替代美托克羅普邁。第8天··硏究者斟酌抗嘔吐預防法並可根據標準局部處置進行。若投服PF-3 5 1 2676後出現似流感症狀，則考慮在投服PF-3 5 1 2676之劑量前及後預防性地給予對位乙醯胺基酚/醋胺酚，以將與彳!7-” 12676相關之似流感症狀減至最少。強制進行前及後順鉑水合作用以將順鉑之腎臟毒性降至最少。水化應根據標準局部處置 -159- (156) 200824696 或下列計劃進行：前順鉑水合作用：在化療前一天口服 22升之任何流體且在化療當天早上口服升，加上在順鉑治療當天早上經由靜脈內途徑投服最少500毫升之流體（該500毫升之IV流體可爲吉西他汀@注入液之一部分 )。後順鋁水合作用：在順鉑治療之後立即在4-6小時內經由靜脈內途徑注入200-250毫升/小時之在1/2生理食鹽水（D5 1/2NS )中的5%右旋糖、在生理食鹽水（〇5”8) 中的5%右旋糖或生理食鹽水（NS)及30毫當量KCL/升實例3-4及5-6係分別關於1〇18 ISS及IMOxine在上述實例1及2中所描述之組合硏究中，如同CPG ODN的用途。因此，硏究大部分係以同於上述實例1及2中所

描述之方法進行並摘要於讧表_中。表9.實例3-6 ·· CpG ODNs 1018ISS及iMOxine於組合療法中之用途實例 CpG ODN A臂 B臂 3 1018 ISS 太平洋紫杉醇⑧/卡鉑/1018 ISS 太平洋紫杉醇/卡鉑硏究治療係在3-週之週期中給硏究治療係在3-週之週期中給藥藥。在各週期之第1天，患者。在各週期之第1天，患者接受接受：太平洋紫杉醇-2GG毫克 :太平洋紫杉醇-200毫克/米2， /米2，第1天經由靜脈內途徑第1天經由靜脈內途徑在3小時在3小時內投服；卡鉑-AUC 內投服；卡鉑-AUC ό，完全注入 6，完全注入太平洋紫杉醇後太平洋紫杉醇後第1天經由靜脈第1天經由靜脈內途徑在15- 內途徑在15-30分鐘內投服。各 30分鐘內投服。各治療週期中治療週期中係根據Calvert公式，係根據Calvert公式，以6毫以ό毫克/¾升X分鐘之標靶AUC 克/毫升X分鐘之標靶AUC計計算卡鉑之劑量。依上述A臂之篡卡鉑之劑量。描述，在投服太平洋紫杉醇各劑 -160- (157)200824696

在各週期之第8天及第15天，患者接受：1018 ISS-0.20毫克讼斤，其係經由皮下途徑投服。1018 ISS之劑量係在各治療週期開始時根據患者之確實重量而定。注射部位之選擇及注射部位之給藥係依上述實例 1之描述。投服1018 ISS之術前給藥法：依上述實例1之描述。單一 1018 ISS維持劑：完成6 個化療週期之患者或那些除了因疾病惡化而早期中斷化療外之患者將持續每週接受單一 1018 ISS 維持劑。單一 1018 ISS維持劑將在4-週之週期中投服並持續給藥直到疾病惡化、無法接受之與1018 ISS相關的毒性或患者拒絕持續硏究治療時。1018 ISS之劑量係在各治療週期開始時根據患者之確實體重而定。量前進行標準之以皮質類固醇爲基礎的術前給藥法。 4 IMOxine 吉西他汀⑧順鉑"MOxine 硏究治療係在 >週之週期中給藥。在各週期之第1天，依需要進行術前給藥，且硏究治療包含吉西他汀（1250毫克/米2 ，經由靜脈內途徑在約30分鐘內投服，順鉑-75毫克/米2 ，完全注入吉西他汀®後經由靜脈內途徑在1-2小時內投服 °在各治療週期之第8天依需要進行術前給藥法，再進行硏究治療，其包含吉西他汀® : 1250毫克/米2，經由靜脈內途吉西他汀⑧顯鉑硏究治療係在3-週之週期中給藥。在各週期之第1天，依需要進行術前給藥法，再進行硏究治療，其包含吉西他汀® : 1250毫克/ 米2，經由靜脈內途徑在約30分鐘內投服，順鉑：75毫克/米2，完全注入吉西他汀®後經由靜脈內途徑在1-2小時內投服。在各週期之第8天依需要進行術前給藥，再進行硏究治療，其包含吉西他汀® : 1250毫克/米2，經由靜脈內途徑在約30分鐘內投服。 -161 - (158) 200824696 (158)

涇在約30分鐘內投服，再給> 予1018 ISS : 0.20毫克/公斤，其係經由皮下途徑投服。注射部位之選擇及注射方式係根據上述實例2中所槪述之方法選擇。在各週期之第15天依需要進行術前給藥法，再進行硏究治療，其包含1018 ISS : 0.20毫克/公斤，經由皮下途徑投服。單一 1018 ISS維持齊!f :完成化療之患者或那些除了因疾病惡化而早期中斷化療外之患者將持續每週接受單一 1018 ISS維持劑;第1個週期係在化療之最後一個週期的第1天後3週開始。單一 1018 ISS維持劑將在4-週之週期中投服並持續給藥直到疾病惡化、無法接受之與 1018ISS 相關的毒性或患者拒絕持續硏究治療時° 1018 ISS之劑量係在各治療週期開始時根據患者之確實體重而定。依上述實例2之描述進行術前給變〇 5 IMOxine 太平洋紫杉醇，卡鈾/ IMOxine ⑥ 硏究治療係在3-週之週期中給藥。在各週期之第1天，患者接受：太平洋紫杉醇-200毫克 /米2，第1天經由靜脈內途徑在3小時內投服；卡銷-AUC 6，完全注入太平洋紫杉醇後第1天經由靜脈內途徑在15-30分鐘內投服。各治療週期中係根據Calvert公式，以ό毫太平洋紫杉醇/卡鉑硏究治療係在3-週之週期中給藥。在各週期之第1天，患者接受 :太平洋紫杉醇-200毫克/米2，第1天經由靜脈內途徑在3小時內投服；卡鉑-AUC 6，完全注入太平洋紫杉醇後第1天經由靜脈內途徑在15-30分鐘內投服。各 •治療週期中係根據Calvert公式，以6毫克/毫升X分鐘之標靶AUC :計筧卡鉑之劑量。依上述實例1 -162- (159) 200824696 (159)

克/毫升x分鐘之標靶AUC計算卡鉛之劑量。依上述實例1之描述進行術前給藥。在各週期之第8天及第15天，患者接受·· IMOxine® -0.20 毫克/公斤，其係經由皮下途徑投服。IMOxine®之劑量係在各治療週期開始時根據患者之確實體重而定。注射部位及注射方式係依上述實例1之描述決定。單一 IMOxine®維持劑：完成ό 個化療週期之患者或那些除了因疾病惡化而早期中斷化療外之患者將持續每週接受單一 IMOxine®維持劑。單一 IMOxine⑧維持劑將在4_週之週期中投服並持續,給藥直到疾病惡化、無法接受之與 IMOxine®相關的毒性或患者拒絕持續硏究治療時。IMOxine® 之劑量係在各治療週期開始時根據患者之確實體重而定。之描述進行術前給藥。 6 IMOxine 吉西他汀⑧/順鉑/ IMOxine® 研究治療係在3-週之週期中給藥。在各週期之第1天，依需要進行術前給藥，且硏究治療包含吉西他汀®-1250毫克/米2 ，經由靜脈內途徑在約30分鐘內投服，順鉛-75毫克/米2 ，完全注入吉西他汀®後經由靜脈內途徑在1-2小時內投服 °在各治療週期之第8天依需要進行術前給藥，再進行硏究吉西他汀⑧/順鉑硏究治療係在3-週之週期中給藥。在各週期之第1天，依需要進行術前給藥法，再進行硏究治療，其包含吉西他汀® : 1250毫克/ 米2，經由靜脈內途徑在約30分鐘內投服，順鉑：75毫克/米2，完全注入吉西他汀®後經由靜脈內途徑在1-2小時內投服。在各週期之第8天依需要進行術前給藥，再進行硏究治療，其包含吉西 -163- (160)200824696

治療，其包含吉西他汀® :他汀® : 1250毫克/米2，經由靜 1250毫克/米2，經由靜脈內途脈內途徑在約30分鐘內投服。依徑在約30分鐘內投服，再給予IMOxine⑧：0.20毫克/公斤，其係經由皮下途徑投服。注射部位及注射方式係根據上述實例2中所描述之方法決定。在各週期之第15天依需要進行術前給藥，再進行硏究治療，其包含IMOxine : 0.20毫克/ 公斤，經由皮下途徑投服。上述實例2之描述進行術前給藥單一 IMOxine®維持劑：完成化療之患者或那些除了因疾病惡化而早期中斷化療之患者將持續每週接受單一之 IMOxine®維持劑；第1個週期係在化療之最後一個週期的第 1天後3週開始。單一 IMOxine⑧維持劑將在4.之週期中投服並持續給藥直到疾病惡化、無法接受之、與 IMOxine®相關的毒性或患者拒絕持續硏究治療時。IMOxine® 之劑量係在各治療週期開始時根據患者之確實體重而定。 -164- 200824696 (161) 參考資料 1. Jemal A., Murray T., Ward E.f et al., Cancer Statistics, 2005. CA 55: 10-30, 2005. 2. Non-small Cell Lung Cancer Collaborative Group. BMJ 311: 899-909,1995. 3. Kelly K.t Crowley J., Bunn P., et al., J. Clin. Oncol., 19: 3210-8, 2001. 4. Schiller J.H., Harrington D.f Belani C.P., et alM N. Engl. J. Med., 346: 92-98, 2002. 5. Scagliotti G., De Marinis F., Rinaldi M.f et al., J. Clin. Oncol., 20: 4285-91, 2002. 6. Smit E.F., van Meerbeeck J.P., Lianes P., et aL J. Clin. Oncol., 21(21): 3909-17, November 1, 2003.

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17. Sandier A.R., Gray R.J., Brahmer J., et al., A. Proc. Am. Soc. Clin. Oncol., 23:LBA4, 2005. 18. Butts, et al., 3INa. ESMO Meeting, 2004. Ann. Oncol., Vol, 15(S3), 2004. 19. Krieg A.M., Yi A.K., Matson S., et a!.t Nature, 6:374(6522):546-9, April 1995. 20. Krieg A.M., Annu Rev Immunol., 2002; 20:709-60. 21. American Society of Clinical Oncology, JCO 1996; 14 (6): 1957-1960. -165- 200824696 (162) 22. Reece PA, Stafford I, Abbott RL, et al., J.CIin.Oncol., 7:270-275,1989. 23. Dy G.Km Suri A.t Reid J.M., et al., Cancer Chemother Pharmacol., 55:522-530, 2005. 24. Crockcroft DW, Gault H, Nephron 16:31-41, 1976. 25. Calvert AH, Newell DR, Gumbrell LA, et al. J Clin Onco! 7:1748-1756,1989.

The present invention is not to be limited in scope by the specific embodiments described herein. Indeed, various modifications of the invention in addition to those described herein will become apparent to those skilled in the art from the foregoing description and the accompanying figure. Such modifications are intended to fall within the scope of the appended claims.

All patents, applications, publications, test methods, literature, and other materials cited herein are hereby incorporated herein by reference in their entireties. 本發明並不限於此文所描述之特定較佳體系的範圍。確實，除了此文所描述者外，從前述內容及所附圖形，本技藝之技術熟習人士將可清楚明白本發明之多種不同改良。這類改良係意圖包含在本發明所附之申請專利範圍內。此處所列出之所有專利、申請案、刊物、試驗方法、論文及其他資料之全部內容倂爲此文之參考資料【圖式簡單說明】第1圖示爲PF 3 5 1 2676之構造，此爲本發明所使用之較佳CpG ODN 〇 -166-

Claims

200824696 (1) 十、申請專利範圍 1. 一種CpGODN與化療劑於製備用於治療或預防患者之非小細胞肺癌（NSCLC)之藥物上之用途，其中該化療劑包含（a)選自下列之第一化療劑：5- ( 5-氟-2-合氧基-1，2-二氫亞吲哚-(3Z )-基甲基）-2,4-二甲基-1H-吡咯-3-羧酸（2-二乙胺基乙基）-醯胺、太平洋紫杉醇（ paclitaxel)、多烯紫杉醇（docetaxel)、吉西他汀（ gemcitabine )、長春瑞賓（vinorelbine )、伊立替康（ irinotecan )、培米催塞（pemetrexed )、絲裂黴素（ mitomycin )、長春新驗（vincristine)、長春花鹼（ vinblastine )、長春地辛（vindesine)、順鉑（cisplatin )、卡銷（carboplatin )、奧沙利鉛（oxalip 1 atiη )、吉菲特尼（ge fit ini b )、埃洛特尼（erlotinib ) 、TLK-286、西妥昔單抗（cetuximab )、貝伐單抗（bevacizumab )、依托伯苷（etoposide)、平陽黴素（bleomycin) 、5-FU 、馬法蘭（melphalan) 、ZD 6474、ZD 2171、UFT、SI、伊弗法醯胺（ifosfamide)、噻替哌（thiotepa)、替莫口坐胺（temozolomide )、塔拉伯泰（talabostat )及干擾素；及（b )選自下列之第二化療劑：5- ( 5-氟-2-合氧基-1，2-二氫亞吲哚-(3Z)-基甲基）-2,4-二甲基-1H-吡咯-3-羧酸 (2-二乙胺基乙基）-醯胺、太平洋紫杉醇、多烯紫杉醇、吉西他汀、長舂瑞賓、伊立替康、培米催塞、絲裂黴素、長舂新鹼、長春花鹼、長春地辛、順鉑、卡鉑、奧沙利鉑、吉菲特尼、埃洛特尼、TLK-2 86、西妥昔單抗、貝伐單 -167- 200824696 (2) 抗、依托伯苷、平陽黴素、5-FU、馬法蘭、ZD 6474、ZD 2171、UFT、S1、伊弗法醯胺、噻替哌、替莫唑胺、塔拉伯泰及干擾素；其中該第一及第二化療劑不相同；及選擇性地，（c ) CpG ODN之維持劑量；唯其若該第一化療劑係選自順鉑或卡鉑時，則該第二化療劑不爲太平洋紫杉醇或多烯紫杉醇。 2.如申請專利範圍第1項之用途，其中該CpG ODN

係選自下列 IMOxine®。 PF3512676 、 1018 ISS 、 Genazense 及 3·如申請專利範圍第2項之用途，其中該CpG ODN 爲 PF3512676 ° 4.如申請專利範圍第1項之用途，其中該CpG ODN 之投服量係約〇 · 〇 1至5 · 0毫克/公斤。 5·如申請專利範圍第4項之用途，其中該CpG ODN 之投服量係約0.01至2·5毫克/公斤。

6·如申請專利範圍第5項之用途，其中該CpG 〇dn 之投服量係約〇·〇5至1·〇毫克/公斤。 7·如申請專利範圍第6項之用途，其中該CpG ODN 之投服量係約〇·2毫克/公斤。 8·如申請專利範圍第1項之用途，其中該CpG 〇dn 係在投服化療劑之前投服。 9·如申請專利範圍第1項之用途，其中該CpG ODN 係在投服化療劑之後投服。 10. 如申請專利範圍第1項之用途，其中該CpG -168-

200824696 (3) 0DN係在投服化療劑前約1週至3週給予患者。 11 ·如申請專利範圍第1 0項之用途，其中該 ODN係在投服化療劑前約1週給予患者。 12.如申請專利範圍第1項之用途，其中該 ODN係在投服化療劑後約1週至3週給予患者。 I3·如申請專利範圍第12項之用途，其中該 ODN係在投服化療劑後約1週給予患者。 1 4 ·如申請專利範圍第1項之用途，其係與選自 ®之療法組合：外科手術、放射療法或其組合。 15 ·如申請專利範圍第1項之用途，其中該〇 DN之維持劑量係約〇 . 〇1至5 · 0毫克/公斤。 16·如申請專利範圍第15項之用途，其中該 ODN之維持劑量係約0·01至2·5毫克/公斤。 17·如申請專利範圍第16項之用途，其中該 ODN之維持劑量係約〇·〇5至1 ·〇毫克/公斤。 18·如申請專利範圍第17項之用途，其中該cpG 之維持劑量係約0.2毫克/公斤。 CpG CpG CpG 下列 CpG CpG CpG ODN -169-