TW200534845A - Platinum carboxylate anticancer compounds - Google Patents

Description

200534845 九、發明說明： L發明所屬之技術領域3 發明領域 本發明係相關於一種鉑羧酸鹽類化合物、包含此化合 5 物之組成物，以及使用此化合物治療癌症之方法。 【先前才支4 标U 發明背景 順鉑（cisplatin)，順-[PtCIJNH3)2]，為目前最廣泛使用 之抗癌藥物之一。順翻為平面四邊形之Pt(II)錯合物，特徵 10 為具有兩個惰性Pt_N鍵結以及兩個相對不穩定之pt_ci鍵結 。中心鉑原子的親電子特性使得順_[PtCl2(NH3)2]可進入細 胞，與細胞成分之親核基團作用。數種觀察已指出，順鈾 之抗癌活性係與其可結合至DNA之能力有關，經由氣離子 配位基依序置換脈嘧啶（guanine)或腺嘌呤（adenine)之驗基 15 而達成。

The Physician Desk Reference—書中指出順鉑（商業名 稱為Platinol)可用於治療睪丸癌、卵巢癌或膀胱癌。治療方 法係使用順鉑及順鉑類似物，描述於美國專利號4，177,263 ，在其他文獻中。順鉑係以靜脈注射，並透過血流傳送至 20全身。順鉑到達癌細胞時主要為中性，並相信可經由被動 運輸進入細胞。在細胞内，水解反應會使水分子取代一或 一個氯（水合作用）。單水合中間產物，[ptCl(H2〇)(NH3)2] + ，為活性/反應性最強，相對應的順鉑細胞毒性也最強。順 翻水解的最終產物[Pt(〇H)2(NH3)2]則不具活性。 5 200534845 順鉑，雖然藥效相當強且可成功抗新生腫瘤，卻非常 毒。腎毒性與耳毒性為劑量限制因素，而其他的毒性現2 包括嚴Μ心触吐。順㈣嚴重纽，以及會隨著時間 產生抗順鈾之腫瘤等缺點，使得我們必須再繼續發展或改 5良含始之藥物。新一代以及改良式含翻藥物所希望之特性 包括具有較廣的活性光譜，尤其是對於抗順始之腫瘤（如肺 癌、乳癌與直腸癌）；經改善之治療指數，不論是具有較好 的藥效或是較低的毒性；以及/或經修飾之藥理學特性，以 改善藥物傳送。 10 數種第二代含鉑抗癌藥物，如卡鉑（順-二胺[U_環丁 烧二叛酸基(2-)]-0, 〇，·始⑽、奥沙力麵（Qxaiipiatin)、1 丙翻(ipr〇platin)與四師etraplatin)已被發展。柏為第二代 含銘抗癌藥物’已於臨床使用，毒性較順鈾低。但卡始對 抗腫瘤的活! 生較低，需要較高的劑量，也同樣會受到抗藥 15機制之影響。異丙銘與喊具有與卡銘相同之活性但較 毒。奥沙力銘較卡銘毒，但對於腸胃腫瘤、已先接受過順 翻之卵巢在病心’以及，更進一步地，抗順銘之非小細胞 肺癌病患具有較好之活性。 第-代順翻藥物之限制使得科學家繼續發展第三代含 20始藥物，包括含有U-二胺環己院(dach)之鉗合劑，以及 有希望的非典型(反式_與多核)銘錯合物。 夕核始化合物代表了—種新賴的結構，設計與研究之 目標為發展新義化合物，其結構上與賴不相似 ，而可 月b有新#。數種具有抗癌活性之多核翻錯合 6 200534845 物為已知，並已進行臨床試驗。多核始錯合物範例之一為 BBR3464 (請見美國專利號6,011，166 ; Manzotti等人發表於 Cancer Res. 6 : 2626，2000)。在臨床前試驗中，BBR3464 對於抗-順始之腫瘤細胞株具有相當高的生物活性，但毒性 5 副作用卻是劑量限制因素。在過去20年來，臨床前具有抗 癌活性之鉑錯合物只有小於1 %可進入臨床試驗(P e r e z等人 發表於Curr. Med. Chem.-Anti-Cancer Agents 2 (4): 539-551， 2002) 〇 因此，儘管前面已描述多種含鉑化合物之發展，目前 10仍需要發展新的含翻化合物，具有與順麵類似的活性，但 毒性較低，並可有效對抗抗-順鉑之腫瘤。

C發明内容；J 發明概要 本發明提供翻化合物、包含鉑化合物之組成物、製 15造此翻化合物之方法，以及投予此鉑化合物治療癌症之 方法。 本發明之一觀點為提供鉑化合物。該鉑化合物為鉑羧 酸鹽類’其中麵與一或多個羧酸基共價結合。在一實施例 中’本發明之麵化合物為雙核鉑化合物。在另一實施例中 ° 本發明之鉑化合物為單核鉑化合物。 在一實施例中，本發明提供具式⑴之二鉑C4-C7環烷二 胺四醋酸化合物 7 200534845

在式(I)中，义1與又2分別為氨、胺基、硝基、C1-C6烷 5 氧基、羥基、氣、溴或碘；¥1與¥2分別環烷基環狀物與氮 原子形成之直接鍵結，或選自於由C1-C6直鏈或分支烷基組 成之族群；其中其中1與112分別為氫或C1-C6 直鏈或分支烷基；其中Z2為C(R3)R4，其中R3與R4分別為氫 或C1-C6直鏈或分支烷基；以及其中m=0、1、2、3、4或5 10 ，n=0、1、2、3、4或5，戶斤提供之m+n —2，以及m+nS5。 在另一實施例中，本發明提供具式(II)之單鉑C4-C7環 烷二胺四醋酸化合物 15

(Π) 8 200534845 在式(II)中，Μ為氳與金屬離子，如鈉或鉀；丫1與丫2相 同且為環烷基環狀物與氮原子形成之直接鍵結，或甲基（即 -CH2-);以及η = 0、1、2或3 〇 在另一實施例中，本發明提供具式(III)之二鉑C4-C7環 烷四羧酸鹽類化合物

式（III)中，Χι、Χ2、Χ3、Χ4分別選自於由氨、胺基、 硝基、C1-C6烷氧基、羥基、氯、溴與碘組成之族群；Zi 為C(R〇R2，其中心與尺2分別為氫或C1-C6直鏈或分支烷基 ;Z2為C(R3)R4，其中R3與R4分別為氳或C1-C6直鏈或分支 烷基；以及其中m = 0、1、2或3，n=0、1、2或3，所提供 之m + η — 0，以及m + η $ 3。 在另一實施例中，本發明提供具式(IV)之單鉑C4-C7環 烷四羧酸鹽類化合物 9 200534845

(IV) • 式(IV)中，Μ為氫或金屬離子，如鈉或鉀；X^X2分別 5 選自於由氨、胺基、硝基、C1-C6烷氧基、羥基、氯、溴與 碘組成之族群；其中仏與112分別為氳或C1-C6 直鏈或分支烷基；Z2為C(R3)R4，其中R3與R4分別為氫或 C1-C6直鏈或分支烷基；以及其中m = 0、1、2或3，n=0、 1、2或3，所提供之m + η $ 0，以及m + n S 3。 10 在另一觀點中，本發明提供一種製造鉑化合物之方法。 ^ 在另一觀點中，本發明提供包含本發明化合物（如式 • (I)-(IV)之化合物）之組成物。該組成物包含一或多個鉑化合 物，醫藥上可接受之載體或稀釋劑，以及，選擇性地，一 或多個額外的醫療試劑。該組成物可用於投予鉑化合物以 15 治療癌症。 本發明之另一觀點為提供投予本發明之鉑化合物（如 式（IHIV)之化合物），以治療癌症之方法。在此方法中，具 醫療有效劑量之本發明鉑化合物係投予所需主體。 圖式簡單說明 10 200534845 前述觀點與本發明所述之各項優點皆以下面詳細說明 與圖示作進一步陳述，使其更臻具體與明白，其中： 第1圖為本發明具代表性之二含麵化合物示意圖，為雙 核鉑化合物與單核鉑化合物。 I：實施方式3 較佳實施例之詳細說明 本發明提供翻化合物、包含此翻化合物之組成物、製 造此鉑化合物之方法，以及投予此鉑化合物治療癌症之方 法0 0 本發明之一觀點為提供鉑化合物。本發明提供單核與 雙核鉑（II)化合物。術語“單核化合物，，指稱包含一個鉑原子 之化合物，術語“雙核化合物，，指稱包含兩個鉑原子之化合 物。本發明之鉑化合物為鉑羧酸鹽類，其中鉑原子與一或 多個羧酸基共價結合。 15 本發明提供單與二鉑C4-C7環烧四醋酸鹽類化合物。於 此所述之“單鉑C4-C7環烷四醋酸鹽類化合物，，指稱該化合 物含有一個鉑原子與具有兩個胺基二醋酸（即_n(CH2C〇2)2) 之C4-C7環烧基（即，環丁基、環戊基、環己基與環庚基）片 ^又’其中鉑原子與一或多個胺基二醋酸基配位。術語“二鉑 20 C4_C7環烷四醋酸鹽類化合物”指稱該化合物含有兩個鉑原 子與具有兩個胺基二醋酸（即-N(CH2C〇2)2)之C4-C7環烧基（ 即，環丁基、環戊基、環己基與環庚基）片段，其中鉑原子 與一或多個胺基醋酸基配位。 在一實施例中，本發明提供具式(I)之二鉑C4-C7環烷二 11 200534845 胺四醋酸化合物

0 0

(I) 5 在式⑴中，乂1與又2分別為氨(NH3)、胺基(NR2)、硝基 (N〇3)、C1-C6烷氧基(OR)、羥基(OH)、氯(C1)、溴(Βι〇或碘 (I)，其中R為C1-C6直鏈或分支烷基；丫1與¥2分別環烷基環 狀物與氮原子形成之直接鍵結，或選自於由C1-C6直鏈或分 支烷基組成之族群；其中，其中心與112分別為 10 氫或C1-C6直鏈或分支烷基；其中Z2為C(R3)R4，其中R3與 分別為氫或C1-C6直鏈或分支烷基；以及其中m=0、1、2 、3、4或5，11=0、1、2、3、4或5，戶斤提供之111 + 11 — 2 ，以及 m + n S 5。 在式(I)之一實施例中，义1與乂2分別選自氨與羥基。 15 在式⑴之另一實施例中，乂1與乂2為氨，丫1與丫2為直接 鍵結，m = 0，η = 4，以及冗2為-(：112-(請見第1圖）。 在另一實施例中，本發明提供具式(II)之單鉑C4-C7環 烷二胺四醋酸化合物 12 20 200534845

(ιι) # 在式(II)中，Μ為氩與金屬離子，如鈉或鉀；Υ#Υ2相 5 同且為環烷基環狀物與氮原子形成之直接鍵結，或曱基（即 -CH〗-)，以及^11 = 0、1、2或 3 〇 在式(II)之一實施例中，Μ為氫與金屬離子，¥1與¥2為 直接鍵結，以及η = 2 (請見第1圖）。 本發明代表性翻二胺四酷酸鹽化合物包括具有式(I)與 10 式(II)之化合物。應可體認到式(I)化合物具有各種取代情況 (即胺基取代基之位置異構物）。代表性取代情況包括，如經 * ® 1，2-二胺四醋酸取代之環丁基、環戊基、環己基與環庚基 化合物（即m=0，η=2, 3, 4, 5，或η=0以及m=2, 3, 4, 5);經 1，3-二胺四醋酸取代之環丁基、環戊基、環己基與環庚基 15 化合物（即m=l，n=l，2, 3，或n=l 以及m=l，2, 3, 4);以及 經1，4-二胺四醋酸取代環己基與環庚基化合物（即m=2, n=2與3，或n=2以及m=2與3)。應可了解到其空間上異構物 亦落於本發明範疇中。空間上異構物包含順式與反式異構 物。就1，2-取代基而言，該化合物為反式異構物。就1，3- 13 200534845 與1，4-取代基而言，該化合物為可為順式或反式異構物。 本發明之代表性化合物為環己二胺四醋酸-二銘（ 式⑴.Yl與Y2為具反式關係之直接鍵結；m = 〇，n = 4,以 及Z2為-CH2·;請見第1圖）。 5 柄明麵化合物之環燒基部份(如式(I)與(II)被選擇性 取代）適田之取代基不會干擾麵配位，且不會與韵產生化 學反應(如被翻還原）。代表性取代基為C1-C6直鏈或分支烧 基。 在灵施例中，本發明提供環己m，2-二胺四醋酸 H)-二純合物⑽）：Yl|^Y2為具反式㈣之直接鍵結；m = 〇，π心以及Z為-叫），由二當量之順_二胺基二确基始 d、胃里之％己1反]，2_二胺四酷酸之四納鹽反應而 得裒己烧S 1，2-一胺四酸·二鈾之製備描述於範例工。 第1IU兒明J衣己HL2-二胺四醋酸-二翻化合物之結 15構f己燒反1，2、胺四醋酸-二鈾之紅外線㈣)光譜具 N-H (3279 cm·1)，與羧酸配位基（1638 cm_^i4〇〇⑽力且 不/、（1：0011伸直（17〇〇_175〇(^11)。叛酸基的頻率與已知的 草酸好結構相容。環己垸-反二胺四醋酸-二翻化合物 之刀子里係利用電噴灑離子化質譜卿_MS)決定。質譜上 20始之同位素豐富度特徵顯示該化合物具有兩健原子。 在另一實施例中，本發明係提供環己烷_反_丨，孓二胺四 酿酸-單始化合物（式⑼：M為氫，γ^Υ2為具反式關係之 直接鍵、、Ό，η 2，凊見第1圖），由一當量之順_二胺基二硝 基韵(11)與§ $之環己m，2二胺四酷酸之四納鹽反 14 200534845 應而得。環己烧-反-1，2-二胺四醋酸-單鉑之製備描述於範例 2 ° 在另一實施例中，本發明提供單與二鉑C‘C7環烷四羧 酸鹽類化合物。於此所述之“單鉑C4-C7環烷四羧酸鹽類化 5 合物，，指稱該化合物含有一個鉑原子與具有四個羧酸基之 C4-C7環烷基（即，環丁基、環戊基、環己基與環庚基）片段 ，其中鉑原子與一或多個羧酸基配位。術語“二鉑C4-C7環 烷四羧酸鹽類化合物，，指稱該化合物含有兩個鉑原子與具 有四個羧酸基之C4-C7環烷基（即，環丁基、環戊基、環己 1〇基與環庚基）片段，其中鉑原子與一或多個羧酸基配位。 在另一實施例中，本發明提供具式(III)之二鉑C4-C7環 烷四羧酸鹽類化合物

χ’3 \χ4 (III) 式(III)中’ x!、χ2、x3、心分別選自於由氨、胺基、 硝基、C1-C6烷氧基、羥基、氯、溴與碘組成之族群；Ζι 為C(R〇R2,其中&與r2分別為氫或^^^直鏈或分支烷基 ;心為c(R3)iu ’其中汉3與R4分別為氫或cl-c6直鏈或分支 15 200534845 烷基；以及其中m = 0、1、2或3，η =0、1、2或3，所提供 之m + η — 0，以及m + η $ 3。 在式(III)之一實施例中，XpXrXs與χ4分別選自於 由氨與經基組成之族群，以及m == 0，η=0。 5 在式（III)之另一實施例中，X!、Χ2、Χ3與Χ4分別選自 於由氨與經基組成之族群，以及m =1，η=0。 在式(III)之另一實施例中，與Χ4分別選自 於由氨與經基組成之族群，以及m = 0，η=2。 # 在另一實施例中，本發明提供具式(IV)之單鉑C4-C7環 10 烷四羧酸鹽類化合物

式(IV)中，Μ為氫或金屬離子，如鈉或鉀；义1與义2分別 15 選自於由氨、胺基、硝基、C1-C6烷氧基、羥基、氯、溴與 埃組成之族群；Ζι為C(Ri)R2 ’其中Ri與R2分別為鼠或 C1-C6直鏈或分支烷基；Z2為C(R3)R4，其中R3與R4分別為 氫或C1-C6直鏈或分支烷基；以及其中m = 0、卜2或3，n=0 、1、2或3，所提供之m + η ^ 0，以及m + η $ 3。 16 200534845 本發明代表性鉑環己烷四羧酸鹽化合物包括具有式 (III)與式(IV)之化合物。應可體認到式(III)與式(IV)化合物 具有各種取代情況（即羧基鹽類取代物之位置異構物）。代表 性取代情況包括，如經1，2, 3, 4-四羧酸取代之環丁基、環 5 戊基、環己基與環庚基化合物（即m=0，n=0, 1，2,3,或n=〇 以及m=0, 1，2, 3);經1，2, 4, 5-四魏酸取代之環己基與環庚 基化合物（即m=l，n=l，2，或n=l以及m=l，2)。代表性取代 基包括雙取代(如U-)，例如1,1，2,2-，1，1，3,3,…以及u，4,4_ 四羧酸鹽取代。連取代(如1，2-)與雙取代(如3,3-)之組合亦落 10於本發明範疇内。應可了解到其空間上異構物亦落於本發 明範疇中。空間上異構物包含順式與反式異構物。 本發明麵化合物之環烧基部份(如式(III)與(IV))可被選 擇性取代。適當之取代基不會干擾鉑配位，且不會與始產 生化學反應（如被鉑還原）。代表性取代基為C1-C6直鏈戋分 15 支烷基。 在一實施例中，本發明提供環戊烷_丨，2,3,4•四羧酸-二 鉑化合物，由二當量之順-二胺基二硝基鉑（π)與一當量之環 戊烷-1，2,3,4-四羧酸之四鈉鹽反應而得。環戊烷_ 四羧酸-二鉑之製備描述於範例3。 20 在另一實施例中，本發明提供環戊烧-1，2,3,4_四賴_ 單鉑化合物，由一當量之順·二胺基二硝基鉑（11)與一當量之 環戊烧-1，2,3,4-四幾酸之四鈉鹽反應而得。環戊my-四羧酸-單鉑之製備描述於範例4。 ’ ’ ’ 在另一實施例中，本發明提供環丁烧-u，3,4,__ 17 200534845 二麵化合物，由一當量之順-二胺基二確基始（II)與一當量之 環丁烧-I，2,3,4·四魏酸之四鈉鹽反應:而得。環丁燒_ 1，2,3,4_ 四幾酸-二顧之製備描述於範例5。 在另/實施例中，本發明提供環丁烷_丨，2,3,‘四羧酸_ 5單麵化合物，由一當1之順-二胺基二硝基始（II)與一當量之 環丁烧-I，2,3,4-四叛酸之四鈉鹽反應而得。環丁烧_ 1，2,3,4-四羧酸-單麵之製備描述於範例6。

本發明之另觀點為提供一種製備單核與雙核翻化合 物之方法。本發明之鉑化合物係由適當之反應性鉑化合物 10與聚羧酸（或其鹽類）反應而製備。適當之反應性鉑化合物係 為對叛酸（或其鹽類）具反應性者。適當之始化合物包括，例 如，順-二胺二氯始（II)(順鉑），以及衍生自順始之化合物， 例如順-二胺二硝基麵(II)與順-二胺基單氯單頌基糾π)。適 當之聚羧酸包括，例如，環己烷_反_二胺四醋酸；環戊烷 15 -1，2,3,4-四羧酸；以及環丁烷-1,2,3,4_四羧酸。 本發明之一觀點為提供由適當之反應性鉑化合物與二 胺四醋酸化合物結合之雙核鉑化合物（如順_二胺基二硝基 鉑（II)與二胺四醋酸化合物）。 在一實施例中’該雙核鉑化合物係由環己烷_反-；[,2-二 20胺四醋酸之四鈉鹽與順-二胺基二硝基鉑（II)反應而得 。在此 方法中，一當i之環己烧_反_1，2_二胺四醋酸之四鈉鹽係與 一當1之順-二胺基二硝基鉑（11)反應而得該雙核鉑化合物 在貫&例中，環己垸-反-1，2-二胺四醋酸之四鈉鹽溶液 (P约6·5)係以順_二胺基二硝基鉑（η)水溶液處理，該水溶 18 200534845 液係由川頁· -日立I 一〆 、一妝|二氣鉑（II)與硝酸銀在水中反應而得，並經 匕;慮乂矛夕除氯化銀。反應混合物係攪拌並加熱(如60。〇,以 το成反應。该雙核鉑化合物產物可經由加入甲醇產生白色 Π體^^而分離出，以過濾收集，以水清洗後以丙酮清洗 上乾燥。製備雙核鉑化合物之代表性流程係描述 _ 於範例1。 本t明之另一觀點為提供由適當之反應性鉑化合物（ 如順胺基二硝基鉑（ιι))與二胺四醋酸化合物結合之單核 ^ 翻化合物。 ^在汽施例中，該單核鉑化合物係由環己烷-反_1，2_二 ==酸之四鈉鹽與順二胺基二硝基鈾⑼反應而得。在此 ^ ^ *里之J展己烷反-1，2-二胺四醋酸之四鈉鹽係與 田里=順·一胺基二磺基師D反應而得該單核始化合物 ^例中’ ％己院-反_1，2-二胺四醋酸之四納鹽溶液 ^ )係以順-一胺基二硝基鉑（II)水溶液處理 ，該水溶 '· ^係由顺·二胺基二氣舶⑻與俩銀在水中反應而得，並經 : 以移除氯化銀。反應混合物係攪拌並加熱(如6叱），以 成反應4單核麵化合物產物可經由加入甲醇產生白色 如固體沉搬而分離出，以過濾收集，以水清洗後再以丙喊 之後真空乾。製備單核麵化合物之代表性流程係描 述於範例2。 本t明之另-觀點為提供由適當之反應性翻化合物（ 如順-二胺基二確基麵⑽與環院基四敌酸（如環庚烧_ U’3,4-四紐’環丁垸_ u，3,4•四紐)結合之雙核翻化合 19 200534845 物。 在一實施例中，該雙核鉑化合物係由環戊烷-1，2,3，‘ 四觀酸之四鈉鹽與順-二胺基二硝基鉑（π)反應而得。在此方 法中’一當量之環戊烷-12,3,4-四羧酸之四鈉鹽係與二當 5 里之順-一fe:基一硝基翻（II)反應而得該雙核始化合物。在一 實施例中，環戊烷-；l，2,3,4-四羧酸之四鈉鹽溶液(pH約6·5)係 以順-二胺基二硝基翻(11)水溶液處理，該水溶液係由順_二胺 基二氯翻（II)與硝酸銀在水中反應而得，並經過濾以移除氯 化銀。反應混合物係攪拌並加熱(如6〇它），以完成反應。該 10雙核翻化合物產物可經由加入甲醇產生淡綠色固體沉澱而 分離出，以過濾收集，以水清洗後以丙酮清洗，之後真空乾 燥。製備雙核鉑化合物之代表性流程係描述於範例3。 本發明之另一觀點為提供由環丁烷-1，2,3,‘四羧酸與 順-二胺基二硝基鉑（II)結合之雙核鉑化合物。在此方法中， 15 一當量之環丁烧-四羧酸之四鈉鹽係與二當量之順_ 二胺基二硝基鉑（η)反應而得該雙核鉑化合物。在一實施例 中’環丁烧-1，2,3,4-四羧酸之四鈉鹽溶液(pH約6.8)係以順-二胺基二硝基翻（II)水溶液處理，該水溶液係由順_二胺基二 氯鉑（II)與硝酸銀在水中反應而得，並經過濾以移除氯化銀 20 。反應混合物係攪拌並加熱(如60。〇，以完成反應。該雙核 翻化合物產物可經由加入甲醇產生淡白色固體沉澱而分離 出’以過渡收集，以水清洗後以丙酮清洗，之後真空乾燥 。製備雙核始化合物之代表性流程係描述於範例5。 本發明之另一觀點為提供由適當之反應性鉑化合物（ 20 200534845 如順-二胺基二硝基鉑（II))與環烷基四羧酸結合形成之單核 I白化合物。 在一貫施例中，該單核鉑化合物係由環戊烷—nn 四羧酸之四鈉鹽與順·二胺基二硝基鉑（11)反應而得。在此方 5法中，一當量之環戊烷四羧酸之四鈉鹽係與一當量 之順-二胺基二硝基鉑（11)反應而得該單核鉑化合物。在一實 施例中，裱戊烷-1，2,3,4-四羧酸之四鈉鹽溶液(pH約6·5)係以 順-二胺基二硝基鉑（11)水溶液處理，該水溶液係由順_二胺 基二氯鉑（II)與硝酸銀在水中反應而得，並經過濾以移除氣 10化銀。反應混合物係攪拌並加熱(如6〇。〇，以完成反應。該 單核鉑化合物產物可經由加入甲醇產生淡綠色固體沉澱而 分離出，以過濾收集，以水清洗後以丙酮清洗，之後真空 乾燥。製備單核鉑化合物之代表性流程係描述於範例4。 在另一實施例中，該單核鉑化合物係由環丁烷_ 15 I，2,3,4·四羧酸之四鈉鹽與順-二胺基二硝基鉑（II)反應而得 。在此方法中，^ ®之環丁燒_ 1，2,3,4-四緩酸之四納鹽 係與一當量之順-二胺基二硝基鉑（H)反應而得該單核鉑化 合物。在一貫施例中，環丁烷_ 1，2,3,4-四羧酸之四鈉鹽溶 液(pH約6.8)係以順-二胺基二硝基鉑（η)水溶液處理，該水 20溶液係由順-一胺基二氯鉑（11)與硝酸銀在水中反應而得，並 經過濾以移除氯化銀。反應混合物係授拌並加熱（如6〇。〇) ，以完成反應。該單核鉑化合物產物可經由加入甲醇產生 白色固體沉澱而分離出，以過濾收集，以水清洗後以丙酮 清洗，之後真空乾燥。製備單核鉑化合物之代表性流程係 21 200534845 描述於範例6。 本發明之另一觀點為提供治療患有細胞增生疾病，如 癌症，之人體或動物之方法。可以本發明化合物治療之代 表性細胞增生疾病包括血液癌如白血病、淋巴癌與骨髓癌 5 ，以及非血液癌，如固體腫瘤癌（如乳癌、卵巢癌、胰臟癌 、大腸癌、大腸直腸癌、非小細胞肺癌與膀胱癌），肉瘤與 神經膠質瘤。本發明提供治療所需人體或動物體之方法， 包含投予主體醫療有效劑量之一或多種本發明鉑化合物， • 單獨投予或與一或多種其他藥劑及/或抗癌試劑結合。 10 本發明之鉑化合物具有對抗癌細胞之細胞毒殺活性。 在某實施例中，本發明之代表性鉑化合物具有增進的對抗 癌細胞之細胞毒殺活性，與順鉑與卡鉑相較，結果列於表1 與表2。 在另一觀點中，本發明提供治療所需人體或動物之細 15 胞增生疾病之方法，包含投予主體某一劑量之一或多種本 發明鉑化合物，可有效降低或防止主體之細胞增生或腫瘤 •生長。 在另一觀點中，本發明提供治療所需人體或動物之細 胞增生疾病之方法，包含投予主體某一劑量之一或多種本 20 發明鉑化合物，以及至少一種額外的癌症治療試劑，有效 降低或防止主體之細胞增生或腫瘤生長。 本發明之鉑化合物，不論是單獨投予或與其他抗癌試 劑結合，可用於預防與治療癌症，如原生或轉移之黑色素 瘤、胸腺瘤、诗木巴瘤、肉瘤、肺癌（NSCLC與SCLC)、胃癌 22 200534845 、肝癌、非Hodgkin淋巴癌、H〇dg]dn淋巴癌、白血病、筆丸 1、子宮癌、子宮邮、膀胱癌、㈣癌、大職、大腸直 腸癌，以及腺癌如乳癌、前列腺癌、印巢癌、胰臟癌。 $ 係投予包含本發明之一或多種化合物之組成物，以傳 适有效劑量之鉑化合物。醫療有效劑量之鉑化合物通常可 上推至可忍受的最大量，但濃度並非決定性，且通常範圍 彼大西師所使用之準確劑量可依據化合物種類、投藥方 $、病患之生理狀況及其他因素而決定。可為每曰單一劑 量或分成多次劑量投藥。 本發明之鉑化合物實際投藥量為醫療有效劑量，於此 了述之術語為產生實質上有助益效果所需之量。有效劑量 可由體外或動物試驗系統之劑量_反應曲線外推而得。通常 使用動物試驗決定理想的劑量範圍以及投藥途徑。之後可 1利用此f訊決定在人體中及其他哺乳動物中之有效劑量與 才又某返徑。有效劑量之決定為習知技藝已知。因此，實際 才又藥之劑^係依據待治療之個體情況而定，較佳為可達到 希望之藥效且不會有明顯副作用之最佳化劑量。 本發明翻化合物之藥效與可能毒性可以標準藥理學流 &決定’以細胞培養或實驗動物決定（如ED5G，對於50%的 族群有效之劑量；以及LD5G，對於50%的族群致死之劑量） 。療效與毒性影響之比例為療效指數，可以LD5G比ED50之 比例表示。具較大療效指數之鉑化合物特別適用於本發明 之方法。由細胞培養試驗與動物試驗所得之資料可用於規 聋已出用於人體或其他哺乳動物體之劑量範圍。此種鉑化合 23 200534845 物之較佳劑量係落於包含EDs◦之循環濃度之範圍内，且具 少許或不具毒性。該劑量通常依據所使用之藥劑形式、病 患敏感度，以及投樂途徑而不同。因此，最佳之劑量會依 據投藥方法而不同，但通常會依據一般相同或類似投藥形 5 式之藥物劑量。 本發明之鉑化合物可單獨投藥，或與一或多種額外的 醫療活性試劑結合。例如，在治療癌症時，可與治療試劑 如’但不限制於’雄性激素抑制劑如氟他邁⑺utamide)與利 普胺(leuprolide);抗雌激素如泰莫西芬(tam〇xifen);抗代謝 10物與細胞毋性试劑如紅保黴素（daunorubicin)、I脲σ密口定 (fluorouradl)、氟脲嘧啶脫氧核苷（fl〇xuridhie)、干擾素一脉 、甲氣蝶呤片（methotrexate)、普卡黴素(plicamycin)、疏σ票 呤（mercaptopurine)、硫代鳥嘌呤（thioguanine)、阿黴素 (adriamycin)、卡莫司汀（carmustine)、洛莫司 15 、阿糖胞苷(cytarabine)、環磷醯胺、多柔比星(doxorubicin) 、雌莫司汀(estramustine)、六甲蜜胺(altretamine)、羥基尿 素、異壞碟醯胺（ifosfamide)、甲基节肼(procarbazine)、絲 裂黴素（mutamycin)、白消安（busulfan)、米托蒽醌 (mitoxantrone)、鏈佐星（streptozocin)、平陽黴素(bleomycin) 20 、放線菌素(dactinomycin)與伊達比星(idamycin);贺爾蒙， 如醋酸曱經孕酸I (medroxyprogesterone)、雌莫司汀 (estramustine)、乙炔雌二醇(ethinyl estradiol)、雌二醇、亮 丙立得（leuprolide)、醋酸甲地孕蒙I (megestrol)、奥曲肽 (octreotide)、乙烯雌紛（diethylstilbestrol)、氯烯雌驗 24 200534845 (chlorotrianisene)、etoposide、鬼臼毒素（p〇d〇phyll〇t〇xin) 與戈舍瑞林（goserelin);氮芥子氣衍生物如美法侖 (melphalan)、苯丁 酸氮芬（chl〇rambucil)、甲基乙胺 (methlorethamine)與塞替派(thiotepa);類固醇如倍他米松 5 (betamethasone);以及其他抗腫瘤新生試劑，如活性牛分支 桿菌（Mycobacterium bo vis)、達卡巴嗪(dicarbazine)、門冬 醯胺酶（asparaginase)、甲酰四氫葉酸(leucovorin)、mit〇tane 、長春新驗(vincristine)、長春驗(vin|3iastine)與太平洋紫杉 醇(taxanes)(如paclitaxel、docetaxel)，一 同投藥。與特定試 10劑所搭配的適當劑量皆不同，但熟習此技術領域者可由一 般實驗立即得知。 本發明鉑化合物之投藥可以各種有效途徑而完成，如 非經腸胃或口服。投藥方法包括吸入、口服、骨髓内、靜 脈内、鼻内、直腸内、眼内、腹内、動脈内、關節内、滑 15囊内、子宮形内、顱内、管内、硬膜内、病灶内、肌内、 腰内、管壁内、眼内、手術期内、頂骨内、腹膜内、胸膜 内、肺内、椎管内、胸内、氣管内、鼓室内、子宮内、血 管内以及室内投藥，以及其他一般方法。本發明之始化合 物可直接注射於腫瘤内、腫瘤鄰近區域或供應腫瘤血液之 20 血管内。 在另一觀點中，本發明提供醫藥組成物，包含至少一 本發明含翻化合物，以及一適用於投予人體或動物體之醫 樂上可接受載體，不論是單獨投藥，或是與其他藥劑及/或 H式Μ起彳X藥。本發明之含純合物可被配製為組成 25 200534845 物’額外包含適當之醫藥上可接受載體，包括佐藥或其他 可幫助鉑化合物投藥至哺乳類主體之化合物。配製與投藥 技術細節請參照最新版Remington’s Pharmaceutical Science Maack Publishing Co, Easton PA 〇 5 用於口服投藥之組成物可使用已知之醫藥上可接受載

10 15 體配製，其劑量係適用於口服投藥。適用之載體可使含有 本發明翻化合物之組成物製成藥片、藥丸、糖衣藥丸、膠 囊、液體、凝膠、糖漿、漿液或懸浮液，適於讓主體攝入 。口服使用之組成物可與，例如，固體佐藥一起製備，選 擇性地研磨所得之混合物，並將該混合物加工成膠囊，在 加入適當之化合物後，若有需要，製成藥片或糖衣藥丸核 心。適用之佐藥包括碳水化合物或蛋白質填料。這些包括 ’但不限制於，糖類，包括乳糖、餘、甘辆、或山梨 糖醇；由玉米、麥片、米、馬鈴薯或其他植物而得之殿粉 ;纖維素如甲基纖維素、㈣丙基甲基纖維素、或甲 基纖維素鈉鹽；以及樹膠包括阿拉伯膠與黃老膠以1蛋 白質，如明膠與膠原蛋白。若有需要，亦可^分解或助 溶劑，如交聯式聚乙稀基轉_、填膠、海藻酸或里越類 如海藻酸納。糖衣藥鍵之核心係經適當包覆，如濃縮i溶 20 液，其可包含阿拉伯膠、滑石、平Γ γ * 來乙烯基口比咯酮、卡伯波 (Carbopol)樹膠、聚乙二醇，及/或二气 羊U匕鈦、漆溶液，以及 適當之有機溶劑或溶劑混合物。顏料或仇 乂木劑亦可加入藥片 或糖衣藥錠外衣中，用以辨認產品或 ” 曰 # ^不活性成份量（如劑 Ϊ)。口服投樂之鉑化合物可被配盔 衣馮，如由明膠製成之推 26 200534845 進式(push-fit)膠囊，以及由明膠製成之軟封膠囊，以及外 衣如甘油或山梨糖醇。推進式膠囊内可含有鉑化合物、填 料或黏著劑如乳糖或澱粉、潤滑劑如滑石或硬脂酸鎂，以 及，選擇性地包含穩定劑。在軟膠囊中，鉑化合物可溶於 5或懸浮於適當液體中，如脂肪油、液態石臘或液態聚乙二 醇，具有或不具穩定劑。 非經腸胃投藥之組成物包含本發明一或多種鉑化合物 之水溶液。若用於注射，鉑化合物可被配製為水溶液形式 ，如生理可相容之緩衝液，如漢克氏液、林格氏液，或葡 10萄糠溶液。水性注射懸浮液可包含增加懸浮液黏度之物質 ，如羧基甲基纖維素鈉鹽、山梨糖醇或葡聚糖。 含有本發明鉑化合物之組成物可以習知技藝中已知之 方法製備(如用一般混合、溶解、膠囊化、糖衣形成、研磨 、乳化、包裹、捕捉或冷凍乾燥製程）。該組成物可經修傅 15以提供適當之釋放特性’如持續釋放(sustained release)或乾 式釋放，由一般方法達成(如包覆）。 含有始化合物之組成物可提供為鹽類形式，且可與許 多酸，包括但不侷限於，鹽酸、硫酸、醋酸、乳酸、酒石 酸、頻果酸、琥拍酸，共同形成。鹽類可更溶於水溶液或 20 其他質子溶劑中，與自由驗形式相較。 在含有始化合物與可接受载體之組成物配製完成後， 可置於適當容器中標示使用。 在本發明之另-觀點中，可提供包含本發明一或多種 化合物於-或多種容器中之套組。代表性套組包括一可包 27 200534845 含本發明固定量化合物之容器，以及外包農或標示，載明 投以固定劑量之化合物可治療細胞增生疾病。 下列範例將提供進-步說明，並不限制本發明範脅。 範例 5 範例1 盪您-反-1,2-二胺四醋酸-二鉑之借 步驟1硝酸銀(Aldrich，USA)溶液(3.44g溶於100㈤水 中）係加入順始（Saiquest，印度固體(3 〇8克) •置於圓錐形瓶中並持續攪拌之。總溶液維持於6〇<t下攪拌 10直至氣化銀沉澱完全，且母液幾乎為無色（約1小時）。之後 使用0·45微米拋棄式過濾器過濾出該沉澱物。將濾液再度 加熱至60°C30分鐘，確保氣化銀沉澱完全。溶液再次以〇.45 微米拋棄式過濾器過濾。 步驟2環己烷-反-1，2_二胺四醋酸(TCI，usa)(1.86克） 15係使用1NNa0H中和PH値至6·5，產生澄清溶液。所得之環 _ 己烷_反-1，2_二胺四醋酸鈉鹽溶液係維持於6〇。(：，並加入由 ν驟1所传之順始琐酸銀溶液。反應混合物維持於6〇。〇授拌 1小牯。溶液經過濾移除殘餘之銀。反應混合物再維持於60 C攪拌1小時。一小時後，關掉熱源，溶液再繼續攪拌半小 20時。所得溶液為澄清黃色。 步驟3使用曱醇沉澱由步驟2所得之反應混合物，得白 色》儿澱。該沉澱離心（6〇〇〇 rpm)並萃取，最後以丙酮清洗。 產物在通風櫥中乾燥至隔日。次日該白色沉澱物係真空乾 餘至隔日以移除任何殘餘濕氣。 28 200534845 IRvmax KBrcm_1 : 3279、1638、1335、908。 MS(正電 ESI) : m/z 767 二鉑（M+H)+ ; m/z 540 單鉑 (M+H)+。 元素分析，計算値：C，21 ; Η，3·27 ; Ν，7·00 ; Pt，48.74 ; 5 觀測値：C，20.40 ; Η，3·61 ; Ν，7.30 ; Pt，48.6 上述方法之產物為環己烷-反-1，2-二胺四醋酸-二鉑與 環己烷-反-1，2·二胺四醋酸-單鉑之混合物，比例為1 ·· 1。 範例2 環己烧反-1,2-二胺四醋酸-簞鉑之芻備 10 步驟1硝酸銀(Aldrich，USA)溶液（1.72克溶於50 ml水 中）係加入順鉑（Saiquest，印度)([pt(NH3)2Cl2])固體（1.54克) 置於圓錐形瓶中並持續攪拌之。總溶液維持於60°C下攪拌 直至氣化銀沉澱完全，且母液幾乎為無色（約1小時）。之後 使用〇·45微米拋棄式過濾器過濾出該沉澱物。將濾液再度 15加熱至60°C3〇分鐘，確保氯化銀沉澱完全。溶液再次以0.45 微米抛棄式過濾器過濾。 步驟2環己烷—反-1，2-二胺四醋酸(TCI，USA)(1.86克） 係使用INNaOH中和pH値至6.5，產生澄清溶液。所得之環 己烧-反-1，2-二胺四醋酸鈉鹽溶液係維持於60。〇，並加入由 20步驟1所得之順鉑硝酸銀溶液。反應混合物維持於60°C攪拌 1小時。溶液經過濾移除殘餘之銀。反應混合物再維持於60 °C攪拌1小時。一小時後，關掉熱源，溶液再繼續攪拌半小 時。所得溶液為澄清黃色。 步驟3使用甲醇沉澱由步驟2所得之反應混合物，得白 29 200534845 色沉殿、。該沉麟心（6_rpm)並萃取，最後以丙酉同清洗。 產物在通風櫥中乾燥至隔曰。次曰該白色沉殿物係真空乾 燥至隔日以移除任何殘餘濕氣。 範例3 5 二鉑之•備 步驟1硝酸銀(Aldrich，USA)溶液(2.26克溶於100⑹水 中）係加入順鉑（Saiquest，印度固體(2克）置 於圓錐形瓶中並持續攪拌之。總溶液維持於6(TC下攪拌直 至氯化銀沉澱完全，且母液幾乎為無色（約丨小時卜之後使 1〇用〇·45微米拋棄式過濾器過濾出該沉澱物。將濾液再度加 熱至60C30分鐘，確保氯化銀沉澱完全。溶液再次以 微米拋棄式過濾器過濾。 步驟2環戊烧-1二3,4-四羧酸(TCI，USA)(0.8克)係使 用IN NaOH中和pH値至6.5，產生澄清溶液。所得之環戊烷 15 -四羧酸四醋酸鈉鹽溶液係維持於60°C，並加入由步驟}所 得之順鉑硝酸銀溶液，得淡綠白色沉澱。所得之混合物冷 卻至室溫，並冰至隔日確保沉澱完全。 步驟3隔日，由步驟2所得之沉澱物經離心（6000 rpm) 並以水(6x50 ml)萃取，最後以丙g同清洗。產物在通風櫥中 20 乾燥至隔日。次日該淡綠色沉澱物係真空乾燥至隔日以移 除任何殘餘濕氣。 環戊烷-U,3,4_四羧酸-單鉑之製備 步驟1硝酸銀(Aldrich，USA)溶液（1·13克溶於50 ml水 30 200534845 中）係加入順始（Saiquest，印度）([Pt(NH3)2C12D固體（j克）置 於圓錐形瓶中並持續攪拌之。總溶液維持於6〇。(：下攪拌直 至氯化銀沉澱完全，且母液幾乎為無色（約1小時）。之後使 用0.45微米拋棄式過濾器過濾出該沉澱物。將濾液再度加 5熱至C 30分知，確保氯化銀沉殿完全。溶液再次以ο # 微米拋棄式過濾器過濾。 步驟2環戊烷-1，2,3,4_四羧酸(TCI，USA)(0.8克）係使 用INNaOH中和pH値至6.5，產生澄清溶液。所得之環戊烷 -四羧酸鈉鹽溶液係維持於60°C，並加入由步驟1所得之順 10 鉑硝酸銀溶液，得淡綠白色沉澱。所得之混合物冷卻至室 溫，並冰至隔日確保沉澱完全。 步驟3隔日，由步驟2所得之沉澱物經離心（6000 rpm) 並以水(6x50 ml)萃取，最後以丙酮清洗。產物在通風櫥中 乾燥至隔日。次日該淡綠色沉澱物係真空乾燥至隔日以移 15 除任何殘餘濕氣。

MiMA 遺丁烷-1,2,3,4-四羧酸-二鉑 步驟1硝酸銀(Aldrich，USA)溶液（1·13克溶於50 ml水 中）係加入順鉑（Saiquest，印度)([Pt(NH3)2Cl2])固體（1克）置 20 於圓錐形瓶中並持續攪拌之。總溶液維持於60°C下攪拌直 至氯化銀沉澱完全，且母液幾乎為無色（約1小時）。之後使 用〇·45微米拋棄式過濾器過濾出該沉澱物。將濾液再度加 熱至60°C 30分鐘，確保氯化銀沉澱完全。溶液再次以0.45 微米拋棄式過濾器過濾。 31 200534845 步驟2環丁烷-ι，2,3,4-四羧酸(TCI, USA)(0.386克）係 使用IN NaOH中和pH値至6.8，產生澄清溶液。所得之環庚 烷-四羧酸鈉鹽溶液係維持於⑼它，並加入由步驟丨所得之 順鉑硝酸銀溶液，得淡白色沉殿。所得之混合物冷卻至室 5 溫，並冰至隔日確保沉澱完全。 步驟3隔日，由步驟2所得之沉澱物經離心（6〇〇〇 rpm) 並以水(6x50 ml)萃取，最後以丙酮清洗。產物在通風櫥中 乾燥至隔日。次日該淡灰白色沉澱物係真空乾燥至隔日， 以移除任何殘餘濕氣。 範例6 :¾ 丁烧-1，2,3,4-四藉酸-單翻 步驟1硝酸銀(Aldrich，USA)溶液(0.565克溶於50 ml水 中）係加入順鉑（Saiquest，印度)([Pt(NH3)2Cl2])固體(〇·5克) 置於圓錐形瓶中並持續授拌之。總溶液維持於⑼。〇下攪拌 15直至氯化銀沉澱完全，且母液幾乎為無色（約1小時）。之後 使用0.45微米拋棄式過濾器過濾出該沉澱物。將濾液再度 加熱至60 C 30分鐘’確保氯化銀沉澱完全。溶液再次以ο·# 微米拋棄式過濾器過濾。 步驟2環丁烷-l，2,3,4-四羧酸(TCI, USA)(0.386克）係 2〇使用1NNa0H中和PH値至6·8，產生澄清溶液。所得之環丁 燒·四叛酸納鹽溶液係維持於6〇。〇，並加入由步驟1所得之 順鉑硝酸銀溶液，得淡白色沉澱。所得之混合物冷卻至室 溫，並冰至隔日確保沉澱完全。 步驟3隔曰’由步驟2所得之沉殿物經離心（6〇〇〇 rpm) 32 200534845 並以水(6x50 ml)萃取，最後以丙酮清洗。產物在通風梅中 乾燥至隔日。次日該淡灰白色沉澱物係真空乾燥至隔日 以移除任何殘餘濕氣。 範例7 5 戈表性鉑化合物之毒性篩檢 ALARMER BLUE試驗：係測試下列四種化合物之細胞 毒性··順翻、卡銘、由範例1所製備之環己烧_反_1，2_二胺 四醋酸-二鉑（CDTA-二鉑），以及由範例2所製備之環己烷_ 反-1，2-二胺四醋酸-單鉑（CDTA-單鉑）。細胞毒性係以测量 10抑制細胞生長之化合物量（GI%)而決定。細胞毒性係以 兩種細胞株測試：大腸直腸癌細胞(HCT-116);以及非小細 胞肺癌細胞株(NCI-H460)。用以定量細胞生長抑制之標記 物為ALARMER BLUE，一種非螢光性藍色染料，活細胞可 將其還原成紅色螢光產物。螢光量係正比於存活細胞數。 15 jipT-116細胞篩選：HCT-116大腸直腸癌細胞(ATCC # CCL-247)係植於24盤96孔微滴定盤中，每孔含有100 μ1 McCoy 5Α培養液(HyClone，Logan，Utah)，細胞之分佈密度 為7500個每孔。在植入細胞後，微滴定盤係置於37^，5% C〇2，95%空氣以及1〇〇〇/0相對濕度中24小時。培養24小 20 時後，加入ALARMER BLUE試劑(Biosource，Camarillo, CA) 至兩盤中’最終》農度為每孔1 〇% v/v。該盤係置回培養箱中 4小時，之後以Perkin Elmer HTS 7000 Bio Assay Reader， 激發波長535 nm，發射波長590 nm，決定在藥物添加期間-零點之細胞數量。 33 200534845 順翻、卡顧、CDTA-工鉑，以及CDTA-單鉑皆溶於〇·9% 生理食鹽水中並稀釋至McCoy 5Α培養液中，濃度為8 X 1〇-6 Μ。係以培養液製備一系列1〇倍稀釋組合，提供每一藥物 五種濃度：8 X 1〇 6 Μ、8 x if μ、8 χ 10-8 μ、8 X ur9M 5 、8 x HT1G Μ。卡鉑溶於0·9%生理食鹽水中，並以培養液稀 釋至濃度為1·5 X ΙΟ3 Μ。以培養液製備一系列1〇倍稀釋組 合，提供每一藥物五種濃度：1β5χ 1〇-3Μ、υχ 1〇·4Μ、 1·5 χ 1〇_5 Μ ' 1·5 χ 1(Τ6 Μ、ΐ·5 χ 1〇_7 Μ。每種藥物濃度取 100 μΐ，每盤一種濃度，係加入上述含有HCT_UWs胞之微 10滴定盤中。亦製備兩個不含藥物控制組。 加入藥物之後，培養盤繼續在上述條件下培養48小時。 48小時後’移出培養盤並加入alarm BLUE試劑，最 終濃度為10% v/v每孔。培養盤置回培養箱中4小時，並以 上述Bio Assay Reader測量。 15 篩選NCI:H460細胞重複上述之篩選步驟，使用 NCI-H460非小細胞肺癌細胞(ATCC # HTB-177)，細胞密度為 10,000細胞每孔，培養於RPMI培養液中（Mediatech，Inc.，

Herndon, VA) ° 趁至係計算每一細胞株之GI%值，抑制5〇%細胞生長 20 所需之化合物濃度，並列於下表1。 表1 gi5G値摘要 翻化合物 HCT-116 Η_460 順鉑 4 μΜ 469 μΜ 卡紐 159 μΜ 9 μΜ CDTA-二鉑 550 μΜ 371 μΜ CDTA-單鉑 6.4 μΜ 9.71 μΜ 34 200534845 如表1所述’本發明代表性二翻化合物具有顯著的較低 GU值’與順始或卡麵相較，在大腸直腸癌或非小細胞肺癌 細胞株中。本發明代表性單翻化合物，在大腸直腸癌中， GIso值與順麵相近，但較卡鉑顯著較低；而在非小細胞肺癌 5中，GIso值與卡鉑相近，但較順鉑顯著較低。 MTS試驗· _試職、卡纟自、由範例丨所製備之環己 烷-反-1，2-二胺四醋酸_二鉑（CDTA-二鉑），以及由範例2所 製備之環己烷反-1，2-二胺四醋酸-單鉑（CDTA-單鉑）之細 胞毒性。細胞毒性係以測量抑制5〇%細胞生長之化合物量 10 (GI%)而決定。細胞毒性係以六種細胞株測試：兩種大腸直 腸癌細胞 HT29(ATCC # CCL-218)與 HCT-116(ATCC # CCL-247);兩種非小細胞肺癌細胞株NCI H69(ATCC # HTB-119)與 NCI-H69/AR(ATCC#CRL-11351);以及兩種 卵巢癌細胞株 A2780(ECACC # 93112519；^A2780/DPPt( 15為A2780 cis類似細胞株，得自ECACc # 93112517)。存活細 胞數係以MTS細胞存活率試驗測得（CELLTTTER 96水性 單一溶液細胞增生試驗組，得自Promega，USA)。細胞生長 抑制試驗係於490 nm測量吸收光，其正比於培養中細胞存 活數目。 2 0 鉑化合物係以含有5 %右旋醣之水溶液(D 5 W)配製為10 mM儲存液。劑量溶液係以培養液系列稀釋儲存液方式製備 ，提供最終濃度為0.006-100 μΜ。 所有腫瘤細胞株皆於無菌狀態下增殖，並於37t：， HEPA-過濾C02組織培養箱，5% C02，95%溼度下，培養於 35 200534845 含有5%胎牛血清之RPMI 1640培養液中（完整培養液 )(Mediatech，Heradon，VA)。卵巢與大腸癌細胞植於微滴定 盤中，密度為5,000細胞每孔。肺細胞植入之密度為1〇〇〇〇 細胞每孔。 5 存活細胞率係以MTS染料轉換試驗測量，在總處理時 間72小時之後。每樣品孔係加入2〇 μΐ已加熱至37。〇之MTS 溶液。該盤係置於37°C4小時。吸收值係於490腿下測量， 使用Coulter微盤讀取儀。 藥物之藥效係以GIso表示，並以非線性迴歸計算大於與 10 小於控制組50%者。結果摘錄於下表2。 表2生長抑制(Gh)値(μΜ) 紐化合物 HT29 HCT-116 NCI-H69 NCI-H69MJR， A2780 A2780/DDPT 順始 61 43 15 15 15 57 CDTA-二鉑 78 24 6.69 8.9 5.45 49 CDTA-單鉑 65 38 10 18 5.57 50 如表2所示，CDTA-二鉑與CDTA-單鉑在所有細胞株中 皆較順鉑具有類似或較大藥效。 範例8 邱値對於CDTA-二鉑/CDTA-單鉑合早肉鐘』奐之影響 環己烷-反-I，2·二胺四醋酸-:^(CDTA-二翻）係依照 範例1製備。製備三種CDTA-二鉑溶液：！ mg/ml水溶液 20 (pH〜6·5)(溶液 1) ; 1 mg/mi 〇·〇ι n NaOH溶液(pH〜9·5)(溶液 2) ; lmg/ml 〇·〇ΐ Ν HC1 溶液(ΡΗ〜2)(溶液3)。CDTA_二鉑 /CDTA-單翻之比例係以HPLC決定。結果如下：溶液1，54% 36 200534845 之CDTA-二鉑與45%之CDTA-單鉑；溶液2，1%之CDTA-二 鉑與99%之CDTA-單鉑；溶液3，2%之CDTA-二鉑與98%之 CDTA-單鉑。環己烷-反-1,2-二胺四醋酸-二鉑與環己烷-反 -1，2-二胺四醋酸-單鉑之轉換示意圖係如第1圖所示。 _ 5 雖然本發明已以上述較佳實施例作詳細說明，熟習此 - 領域者應可認知到可在不脫離本發明精神與範疇下，進行 各種變化。 【圖式簡單說明3 • 第1圖為本發明具代表性之二含鉑化合物示意圖，為雙 10 核始化合物與單核翻化合物。 【主要元件符號說明】 (無） 37

Claims (1)

1. 200534845 十、申請專利範圍： 1. 一種具有下式之化合物

   10

   15 其中乂丨與义:分別選自於由氨、胺基、硝基、C1-C6 烷氧基、羥基、氯、溴與碘組成之族群； 其中丫1與丫2分別選自於由環烷基環狀物與氮原子 形成之直接鍵結，以及C1-C6直鏈或分支烷基組成之族 群； 其中其中心與R2分別為氫或C1-C6 直鍵或分支烧基； 其中Z^C(R3)R4,其中R3與R4分別為氫或C1-C6 直鍵或分支烧基；以及 其中 m=0、1、2、3、4或 5，n=0、1、2、3、4或 5 ，所提供之m + η ^ 2，以及m + η $ 5。 2. 如申請專利第1項之化合物，其中X!與Χ2分別選自於由 氨與經基。 3. 如申請專利第1項之化合物，其中¥1與¥2為直接鍵結。 4. 如申請專利第1項之化合物，其中m = 0以及η = 4。 5. 如申請專利第1項之化合物，其中又丨與又]為氨，丫1與¥2 為直接鍵結，m=0，η=4，以及R!、R2、R3與R4為氫。 38 20 200534845 6. —種具有下式之化合物

   其中Μ選自於由氫與金屬離子組成之族群；

   其中丫1與丫2為相同，且選自於由環烷基環狀物與氮 原子形成之直接鍵結與-CH2-組成之族群；以及 其中η = 0、1、2或3。 7. 如申請專利第6項之化合物，其中Μ為氫。 8. 如申請專利第6項之化合物，其中丫丨與丫]為直接鍵結。 9. 如申請專利第6項之化合物，其中η = 2。 10. 如申請專利第6項之化合物，其中Μ為氫，丫1與丫2為直 接鍵結，以及η = 2。 11. 一種具有下式之化合物

   Pt X3 \4 39 200534845 其中X!、x2、χ3、x4分別選自於由氨、胺基、硝基 、C1-C6烷氧基、羥基、氯、溴與碘組成之族群； 其中其中仏與R2分別為氫或C1-C6 直鏈或分支烷基； 5 其中Z2為C(R3)R4，其中R3與R4分別為氫或C1-C6 直鏈或分支烷基；以及 其中m = 0、1、2或3，n=0、1、2或3，所提供之m + ng〇，以及m + n^3。 12. 如申請專利第11項之化合物，其中與X4分別 10 選自於由氨與羥基組成之族群。 13. —種具有下式之化合物 x2 x1 \ / /pt\

   其中Μ選自於由氫與金屬離子組成之族群； 其中义1與义2分別選自於由氨、胺基、硝基、C1-C6 15 烷氧基、羥基、氯、溴與碘組成之族群； 其中，其中心與化分別為氫或C1-C6直 鍵或分支烧基； 其中Z2為C(R3)R4，其中R3與R4分別為氫或C1-C6直 鏈或分支烷基；以及 40 200534845 其中m = 0、1、2或3，η二0、1、2或3，所提供之m + n^0，以及m + n^3。 14. 一種醫藥用組成物，包含如申請專利第1項、第6項、第 11項或第13項之化合物，以及一醫藥上可接受之載體。 5 15.如申請專利第14項之組成物，其更包含一第二抗癌試 劑。 16. —種治療細胞增生疾病之方法，包含投以醫療上有效劑 量之如申請專利第1項、第6項、第11項或第13項之化合 物於所需主體。 10 17.如申請專利第16項之組成物，其中該細胞增生疾病為血 液癌。 18.如申請專利第16項之組成物，其中該細胞增生疾病為非 血液癌。 19. 如申請專利第1項、第6項、第11項或第13項之化合物， 15

   係用於治療細胞增生疾病。 20. 利用如申請專利第1項、第6項、第11項或第13項之化合 物以製造用於治療細胞增生疾病之藥物之用途。 41