TW200302080A - Metabolites of (3-{[(4-tert-butyl-benzyl)-(pyridine-3-sulfonyl)-a mino]-methyl}-phenoxy)-acetic acid - Google Patents

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200302080 (1) 玖、發明說明 【發明所屬之技術領域】 本發明係有關（3 — {[(4 一第三丁基一苄基）一（吡 B定一 3 -磺醯基）一胺基]一甲基苯氧基）一乙酸的代 謝物。本發明亦有關使用一種（3 - {[(4 一第三丁基一苄 基）一（吡啶一 3 -磺醯基）一胺基]一甲基} 一苯氧基） -乙酸的代謝物以治療骨質疏鬆和幫助骨折痊癒之方法。 此外’本發明亦有關一種檢測是否（3 一 {[( 4 一第三丁基 一苄基）一（吡啶一 3 -磺醯基）一胺基]—甲基} 一苯氧 基）-乙酸已投服於患者之方法。 【先前技術】 化合物（3 - {[( 4 一第三丁基—苄基）一（吡啶—3 一磺驢基）一胺基]一甲基}—苯氧基）一乙酸是一種選擇 性的EP2激動劑，其係用於治療骨質疏鬆、幫助骨折痊癒 、及治療其他與骨骼流失相關的病症。化合物（3 一 {[( 4 一第三丁基—苄基）一（吡啶一3一磺醯基）一胺基]一甲 基}—苯氧基）—乙酸已揭示於WO 99/19300 (PCT/ IB9 8 / 0 1 54〇 )。此化合物亦可用於治療切骨術 、兒童期特發性骨骼流失、與牙周炎相關的骨骼流失、糖 皮質激素引發的骨質疏鬆、甲狀腺機能亢進引發的骨質疏 鬆、固定術引發的骨質疏鬆、肝素引發的骨質疏鬆、免疫 抑制引發的骨質疏鬆，及周於增強和維持骨質、臉部重建 -6- (2) (2)200302080 後的骨豁疫癒、上領骨重建後的骨髂痤癒、顎骨重建後的 骨髓痊癒、脊椎骨性結合的引發、長期骨豁伸展的增強、 骨骼移植的痊癒率的增強、和義肢向內生長的增強。 本發明係有關（3 — {[(4 —第三丁基一苄基）—（吼 啶一 3 -磺醯基）一胺基]一甲基}—苯氧基）一乙酸的代 謝物、或代謝物之藥學上可接受的鹽或前驅物、或前驅物 的鹽類。該代謝物可用於治療與（3 一 { [( 4 一第三丁基一 苄基）〜（吡啶一 3 -磺醯基）一胺基]一甲基} 一苯氧基 )-乙酸相同的病症、或可用於檢測是否化合物（3 一 {[ (4 一第三丁基一苄基）_ (吡啶_3一磺醯基）一胺基] 一甲基} 一苯氧基）一乙酸已投服於患者。 發明總論 本發明係有關下列化合物： 2 一 （4 一 {[(3 -羧甲氧基—苄基）一（吡啶—3 —磺 醯基） 〜胺基] — 曱基 } -苯 基 ) -2 一甲基- -丙酸； ( 3 - {[[4 — (2 - 羥基· — 1,1 ——^甲基― 乙基）一 苄 基 ]- (叶 t 啶一 3 - -礦釀基）— 胺 基 ]-1 甲基卜 苯氧基） — 乙 酸； ( 3 - {[( 4 -第1 三丁基 一 苄 基） 一（吡 啶—Ν- 氧 化 物- 3 -磺醯基 ) 一胺 基]一 甲 基 笨氧基） 一乙酸 ， ( 5 - ί [( 4 -第: 三丁基 — 苄 基〕 丨—（咐 :口定一 3 - 擴 醯 基） — 月女基]一 甲 基}- -羥基 — 苯 氧基 )一乙 酸； 一 { 4 一 [(吡啶—N -氧化物—3 —磺醯胺基）—甲基 (3) (3)200302080 ]一苯基}一2—甲基—丙酸； (3 — {[[4— (2 —羥基—1，1—二甲基—乙基）—苄基 ]一（吡啶一 3 —磺醯基）一胺基]一甲基} 一苯氧基）一乙 酸葡糖苷酸； 口比U定一 N -氧化物—3 -礦酸4 — ( 2 —經基—1，1 — 一. 甲基-乙基）一苯甲醯胺之共軛硫酸酯； (3— {[[4— (2 —羥基一 1，1 一二甲基—乙基）一苄基 ]一（吡啶一 3 —磺醯基）一胺基]—甲基} 一苯氧基）一乙 酸之共軛硫酸酯； 吡啶—3 —磺酸4 — ( 2 —羥基一 1，1 —二甲基—乙基） -苯甲醯胺之共軛硫酸酯； 2 —甲基一 2 — { 4 - [(吡啶一 3 —磺醯胺基）一甲基] 一苯基} 一丙酸； (3 - {[[4 一（1，2 —二羥基—1 一甲基—乙基）一苄基 ]一（吡啶一 3 -磺醯基）一胺基]—甲基} 一苯氧基）一乙 酸； (3— {[[4 - （1—羥基一 1—甲基一乙基）一苄基]一 (口比卩定一 3 -礦醯基）一胺基]一甲基} 一苯氧基）一乙酸 (3 — {[[4— ( 1,1 —二甲基—2—酮基一乙基）一苄基 ]一（吡啶一 3 —磺醯基）一胺基]—甲基} 一苯氧基）一乙 酸；及 (3 - {[( 4 一異丙烯基一苄基）一（吡啶一 3 -磺醯 基）一胺基]一甲基}一苯氧基）一乙酸； -8- (4) (4)200302080 或其藥學上可接受之鹽。 本發明亦有關一種檢測是否（3 - {[( 4 -第三丁基一 苄基）一（吡啶一 3 -磺醯基）一胺基]一甲基} 一苯氧基 )-乙酸已投服於患者之方法，該方法包含檢測由患者所 得之血漿、尿液、膽汁或排泄物樣品是否顯示存在有一或 多種選自下列化合物： 2— (4 — {[(3 —羧甲氧基一苄基）—（吡啶一 3 —磺 醢基）一胺基]一甲基} 一苯基）一 2-甲基一丙酸； (3— {[[4 — （2—羥基—1，1一二甲基一乙基）一苄基 ]一（吡啶一 3 —磺醯基）-胺基]一甲基} 一苯氧基）一乙 酸； 2 - { 4 —[(吡啶一 N -氧化物一 3 -磺醯胺基）一甲基 ]一苯基}— 2—甲基—丙酸； (3— {[[4 - （ 2-羥基—1，1 —二甲基—乙基）—苄基 ]一（吡啶一 3 —磺醯基）一胺基]—甲基}—苯氧基）一乙 酸葡糖苷酸； 吡啶一 N -氧化物—3 —磺酸4 一（ 2 -羥基一 1 , 1 —二 甲基-乙基）一苯甲醯胺之共軛硫酸酯； (3 - {[[4 一 （2 -羥基一 1，1—二甲基一乙基）一苄基 ]一（吡啶一 3 —磺醯基）—胺基]一甲基} 一苯氧基）一乙 酸之共軛硫酸酯； 吡啶一 3 —磺酸4 一（ 2 —羥基一 1 ,] 一二甲基一乙基） -苯甲醯胺之共軛硫酸酯； 2 —曱基一 2 - {4 一 [(吡啶一 3 -磺醯胺基）一曱基] -9- (5) (5)200302080 一苯基} 一丙酸； (3 — {[(4 一第三丁基一苄基）一（吡啶一 N-氧化 物一 3 -磺醯基）一胺基]—甲基}一苯氧基）一乙酸； (5 — {[( 4 一第三丁基一苄基）一（吡啶一 3 -磺醯 基）一胺基]一甲基}一羥基一苯氧基）一乙酸； (3 — {[[4 一（1，2 —二羥基—1 一甲基一乙基）一苄基 ]—(吡啶一 3 —磺醯基）一胺基]一甲基}—苯氧基）一乙 酸； (3 — {[[4— (1—羥基—1 一甲基—乙基）一苄基]— (口比卩定一 3 —擴釀基）一胺基]一甲基}一苯氧基）一乙酸 (3— {[[4— (1，1 一二甲基—2 —酮基一乙基）一苄基 ]一（吡啶一 3 -磺醯基）一胺基]一甲基}—苯氧基）一乙 酸；及 (3 — {[( 4 一異丙烯基一苄基）一（吡啶一 3 —磺醯 基）一胺基]一曱基}一苯氧基）一乙酸。 此外，本發明亦提供一種治療骨質疏鬆或幫助骨折痊 癒之方法，該方法包含予患者投服以治療有效量之選自下 列的化合物： 2 — ( 4 — {[ ( 3 —羧甲氧基—苄基）—（吡啶一3 —磺 醯基）—胺基]—甲基}—苯基）—2 —甲基一丙酸； (3 - {[[4- (2 —羥基—1，1一二甲基—乙基）一苄基 ]—(吼卩定—3 —碌醯基）一胺基]一甲基} 一苯氧基）一乙 酸； -10- (6) (6)200302080 (3 — {[(4 一第三丁基一苄基）一（吡啶一N-氧化 物一 3 —磺醯基）一胺基]一甲基} 一苯氧基）一乙酸； (5 — {[( 4 一第三丁基一苄基）一（吡啶一 3 -磺醯 基）—胺基]一甲基}一經基一苯氧基）一乙酸； (3 — {[[4— (1，2 —二羥基—1—甲基—乙基）一苄基 ]一（吡啶—3 -磺醯基）一胺基]一甲基} 一苯氧基）一乙 酸； (3 — {[[4— (1—羥基—1—甲基—乙基）一苄基]— (口比B定一 3 —礦醯基）一胺基]一甲基} 一苯氧基）一乙酸 (3— {[[4 —（1，1—二曱基—2 —酮基一乙基）—苄基 ]—(吡啶一 3 -磺醯基）—胺基]一甲基} 一苯氧基）一乙 酸；或 (3 — {[( 4 —異丙烯基一苄基）一（吡啶一 3 -磺醯 基）一胺基]一甲基苯氧基）一乙酸； 或其藥學上可接受之鹽。 此外，本發明亦有關一種藥學組成物，其包含一或多 種選自下列的化合物·_ 2 — （ 4 一 {[( 3 —羧甲氧基一苄基）—（吡啶一 3 —磺 醯基）一胺基]一甲基}—苯基）一 2 —甲基一丙酸； (3— {[[4— (2 —經基一1，1— _«甲基一乙基）一+ 基 ]一（吡啶一 3 -磺醯基）—胺基]一甲基} 一苯氧基）一乙 酸； 2 — {4—[(吡啶一 N —氧化物一 3 -磺醯胺基）一曱基 -11 - (7) (7)200302080 ]一苯基2 -甲基一丙酸； (3— {[[4— (2—羥基一1，1一二甲基一乙基）—苄基 ]一（吡啶一 3 -磺醯基）一胺基]—甲基} 一苯氧基）—乙 酸葡糖苷酸； 吼D定—N -氧化物一 3 —擴酸4 — ( 2 —經基—1，1 — 一. 甲基一乙基）一苯甲醯胺之共軛硫酸酯； (3 — {[[4— (2—羥基—1，1—二甲基一乙基）—苄基 ]一（吡啶—3 -磺醯基）一胺基]—甲基} 一苯氧基）一乙 酸之共軛硫酸酯； 吡啶一 3 —磺酸4— (2 —羥基—1，1 一二甲基—乙基） -苯甲醯胺之共軛硫酸酯； 2 -甲基—2— {4 - [(D比卩定一 3 —擴醯胺基）一甲基] 一苯基} 一丙酸； (3— {[(4-第三丁基一苄基）—（吡啶一 N —氧化 物一 3 —磺醯基）一胺基]一甲基} 一苯氧基）一乙酸； (5 — {[( 4 一第三丁基一苄基）一（吡啶一 3 —磺醯 基）一胺基]一甲基}一羥基一苯氧基）一乙酸； (3— {[[4 — （1，2 —二羥基一 1 一甲基一乙基）一苄基 ]一（吡啶一 3 —磺醯基）一胺基]一甲基}—苯氧基）一乙 酸； (3— {[[4— (1—羥基—1—甲基一乙基）一苄基]— (1]!土 II定一 3 -磺醯基）一胺基]一甲基} 一苯氧基）一乙酸 (3— {[[4— （1，1 一二基一 2-酮基—乙基）—苄基 (8) (8)200302080 ]一（吡啶一 3 -磺醯基）一胺基]一甲基} 一苯氧基）—乙 酸；或 (3 — {[( 4 一異丙烯基一苄基）一（吡啶一 3 -磺醯 基）一胺基]—甲基}一苯氧基）—乙酸； 或其藥學上可接受之鹽。 【發明內容】 發明之詳細說明 化合物2 - （4 一 {[(3 -羧甲氧基一苄基）—（吡啶 一 3 -磺醯基）一胺基]一甲基} 一苯基）一 2—甲基一丙酸 ;(3— {[[4— (2-羥基—1,1—二甲基一乙基）—苄基] 一（吼D定一 3 -擴醯基）一胺基]一甲基} 一苯氧基）一乙 酸；2 — { 4 - [(吡啶一 N —氧化物—3 -磺醯胺基）一甲基 ]一苯基} 一 2 —甲基—丙酸；（3 — {[[4— ( 2-羥基—1，1 —二甲基一乙基）一苄基]一（吡啶一 3 -磺醯基）—胺基 ]一甲基} 一苯氧基）—乙酸葡糖苷酸；吡啶一 N —氧化物 一 3 —磺酸4— (2 —羥基—1，1—二甲基—乙基）一苯曱醯 胺之共軛硫酸酯；（3 — {[[4 -（ 2 -羥基一 1，1 一二甲基一 乙基）一苄基]一（吡啶一 3 -磺醯基）一胺基]—甲基} 一 苯氧基）一乙酸之共輛硫酸酯；吼症一 3 —擴酸4 一（ 2 -羥基一]，1 一二甲基一乙基）一苯甲醯胺之共軛硫酸酯；2 一甲基一 2 - { 4 —[(吡啶一 3 —磺醯胺基）一甲基]一苯基 } 一丙酸；（3 - { [ ( 4 一第三丁基一苄基）一（吡啶一 N -氧化物一 3 -磺醯基）一胺基_] 一甲基} 一苯氧基）一乙酸 -13- (9) (9)200302080 ;(5 - {[(4 一第三丁基一苄基）一（吡啶一 3 -磺醯基 )一胺基]—甲基}—羥基—苯氧基）一乙酸；（3— {[[4 —(1，2 —二羥基—1—甲基一乙基）一苄基]一（吡啶—3 一磺醯基）一胺基]一甲基} 一苯氧基）一乙酸；（3 -{[[4 一 （ 1 一羥基一 1 —甲基一乙基）一苄基]一（吡啶一 3 一磺醯基）一胺基]一甲基} 一苯氧基）一乙酸；（3-{[[4 一 （1，1 一二甲基一 2 —酮基一乙基）—苄基]一（吡啶 一 3 -磺_基）一胺基]—甲基}一苯氧基）一乙酸；及（3 一 {[(4 一異丙烯基—；基）一（批[1 定—3 —擴醯基）一胺 基]一甲基} 一苯氧基）一乙酸係爲（3 - {[(4 一第三丁基 —苄基）一（吡啶—3 -磺醯基）一胺基]一甲基} 一苯氧 基）一乙酸的代謝物。 上述代謝物或其藥學上可接受之鹽或前驅物或前驅物 的鹽亦可用於治療他種EP2激動劑（特別是（3 - {[ ( 4 — 第三丁基一苄基）一（吡啶一 3 -磺醯基）一胺基]一甲基 } 一苯氧基）-乙酸）可治療的疾病或病症。可由EP2激 動劑治療的疾病或病症的例子已揭示於國際專利申請案 WO " / 1 93 00，其包含切骨術、兒童期特發性骨骼流失 、與牙周炎相關的骨骼流失、糖皮質激素引發的骨質疏鬆 、甲狀腺機能亢進引發的骨質疏鬆、固定術引發的骨質疏 鬆、肝素引發的骨質疏鬆、免疫抑制引發的骨質疏鬆，及 用於增強和維持骨質、臉部重建後的骨骼痊癒、上頜骨重 建後的骨骼痊癒、顎骨重建後的骨骼痊癒、脊椎骨性結合 的引發、長期骨骼伸展的增強、骨骼移植的痊癒率的增強 -14- (10) 200302080 、和義肢向內生長的增強。較佳的治療包含骨質疏鬆的治 療和幫助骨折痊癒。

熟悉此項技術人士將了解到本發明之化合物可與抗骨 質再吸收劑一起倂用，例如黃體素、多膦酸鹽、雙膦酸鹽 、雌激素激動劑/拮抗劑[亦稱爲SERMs (選擇性雌激 素受體調節劑）]、雌激素、雌激素/黃體素組合劑、 Premarin ® (共軛雌激素）、雌酮、雌三醇、或17α -或1 7沒一乙炔雌二醇。

黃體素是可由市面購買得的，其例子包含醋苯阿爾孕 酮(algestone acetophenide )、烯丙孕酮(altrenogest ) 、馬孕酮醋酸酯（amadinone acetate)、阿那孕酮醋酸酯 (anagestone acetate)、氯地孕酮醋酸酯（chlormadinone acetate )、辛孕醇（cingestol)、氯孕酮醋酸酯（ clogestone acetate )、氯美酉音酸酉旨（clomegestone acetate )、代馬孕酮醋酸酯（delmadinone acetate)、去氧孕烯 (desogestrel)、二甲炔孕酮（dimethisterone)、地屈孕 酮（dydrogesterone)、乙炔諾酮（ethynerone)、炔諾醇 二醋酸酯（ethynodiol diacetate)、依托孕燒（ etonogestrel )、観孕酮酉昔酸酉旨（flurogestone acetate )、 孕克酮（gestaclone)、孕二烯酮（gestdene)、孕諾酮 己酸酉旨（gestonorone caproate )、孕三儀酮（gestrinone )、鹵黃體孕酮（haloprogesterone )、羥黃體孕酮己酸 酉旨（hydroxyprogesterone caproate ) 、左亲斤孕烯( levonorgestrel)、利奈孕酮（lynestrenol)、美屈孕酮（ -15- (11) 200302080 medrogestone)、甲羥孕酮醋酸酯（medroxyprogesterone

acetate)、美侖孕酮醋酸酯（melengestrol acetate)、美 諾酮醋酸酯 （methynodiol acetate )、炔諾酮 （ norethindrone)、炔諾酮醋酸酯（norethindrone acetate) 、異炔諾酮（norethynodrel)、諾孕酯（norgestimate) 、諾孕美（norgestomet)、炔諾孕酮（norgestrel)、氧 孕酮苯丙酸酯（oxogestone phenpropionate)、黃體孕酮 (progesterone )、喹孕焼醇醋酸酯（quingestanol acetate) 、D奎孕酮（quingestrone)、及惕孕酮（tigestol )。較佳的黃體素是甲羥孕酮醋酸酯 （ medroxyprogesterone )、炔諾酮(norethindrone )、和異 炔諾酮（norethynodrel)。

骨質吸收抑制性多膦酸鹽的例子包含US 3,68 3,〇8〇 所揭示之類型的多膦酸鹽。較佳的多膦酸鹽是孿（ geminal )二膦酸鹽（亦稱爲雙膦酸鹽）。替魯酸二鈉（ tiludronate disodium)是特別合宜的多膦酸鹽。伊本酸（ ibandronic acid)是特別合宜的多膦酸鹽。阿冷酸鹽（ alendronate )是特別合宜的多膦酸鹽。佐拉酸（ zoledronic acid)是特別合宜的多膦酸鹽。其他合宜的多 膦酸鹽是6 -胺基一 1 一羥基-亞己基一雙膦酸和1 一羥基 - 3 -（甲基戊基胺基）-亞丙基-雙膦酸。多膦酸鹽可 以酸的形式投服，或以可溶性鹼金屬鹽或鹼土金屬鹽的形 式投服。多膦酸鹽之可水解的酯同樣地亦包含在內。特歹朱 的例子包含乙烷—1 -羥基-1，1 —二膦酸、甲烷二膦酸、 -16- (12) (12)200302080 戊烷—1 一羥基一 131 -二膦酸、甲烷二氯二膦酸、甲烷羥 基二膦酸、乙烷一 1 —胺基—1，1 —二膦酸、乙烷一 2 -胺 基—1，1一二膦酸、丙烷—3 —胺基—1 一羥基—1，1一二膦 酸、丙烷一 N，N —二胺基一 3 —胺基—1 —羥基—1，1 —二膦 酸、丙烷—3,3 —二甲基—3 —胺基—1—羥基一 1，1—二膦 酸、苯基胺基甲烷二膦酸、N，N -二甲胺基甲烷二膦酸、 N — （2 -經乙基）胺基甲院二酸、丁院一 4 一胺基一 1 —經基一 1,1— 一鱗酸、戊院一 5 —胺基—1—經基一 1,1 — 二膦酸、己烷一 6 -胺基一 1 一羥基一 1，1 一二膦酸、及其 藥學上可接受之酯和鹽。 另一體系中，本發明之化合物可與雌激素激動劑/拮 抗劑倂用。較佳的雌激素激動劑/拮抗劑是揭示於 US 5,047,43 1 之 droloxifene :(苯酚，3 — ( 1 — ( 4 — ( 2 一二甲胺基）乙氧基）苯基）一 2-苯基—1 一丁烯基）一 ，（E ) —）和相關的化合物。 另一較佳的雌激素激動劑/拮抗劑是揭示於Willson et al.，Endocrinology，1997，138，3901— 3911 之 3— ( 4 — (1，2 -二苯基一丁一 1 一烯基）一苯基一丙烯酸。 另一較佳的雌激素激動劑/拮抗劑是揭示於 US 4,536,516 之 tamoxifen (乙胺，2— (― 4— （1，2 — 二苯基一 1 一丁烯基）苯氧基）—N，N-二甲基，（Z)— 2 —，2 -羥基一 1，2,3 —丙烷三羧酸鹽（1 : 1 ))和相關化 合物。 另一相關的化合物是揭示於US 4,62 3,660之4 —羥基 (13) 200302080 tamoxifen 〇 一種較佳的雌激素激動劑/拮抗劑是揭示於US 4,418,068 之 raloxifene (甲酮，（6 —經基一2— (4 — 羥苯基）苯並[b]噻吩—3 -基）（4 — ( 2 - （ 1 一哌啶基 )乙氧基）苯基）-，鹽酸鹽）和其他化合物。 另一較佳的雌激素激動劑/拮抗劑是揭示於 US 4,996,225 之 toremifene (乙胺，2 — ( 4 — ( 4 —氯—

1，2 -二苯基—1 一丁烯基）苯氧基）—N，N-二甲基一， (Z) -，2 —羥基_1，2,3 —丙烷三羧酸鹽（1: 1))。 另一較佳的雌激素激動劑/拮抗劑是揭示於US 3,8 22,287 之 centchroman: 1— (2— ( (4—(―甲氧基 —2,2— 一^甲基—3 —苯基—色滿—4 —基）一苯氧基）— 乙基）—哦略院。Levormeloxifene亦是合宜的。 另一較佳的雌激素激動劑/拮抗劑是揭示於 US 4,839，155 之 idoxifene: (E) -1— (2- (4- (1 —

(4 一職苯基）—2 —苯基一丁 — 1—儲基）一苯氧基）一 乙基）一吡咯烷酮。 另一較佳的雌激素激動劑/拮抗劑揭示於 US 5，488,058 之 2— (4 —甲氧基—苯基）一3— [4— (2 —哌 啶一 1 —基一乙氧基）—苯氧基]一苯並[b]噻吩—6—醇。 另一較佳的雌激素激動劑/拮抗劑是揭示於 US 5，484,795 之 6— (4 —羥基—苯基）—5— (4— (2 — 哌卩定一 1 一基一乙氧基）—节基）—萘—2 —醇。 另一較佳的雌激素激動劑/拮抗劑是揭示於國際專利 -18- (14) (14)200302080 公開案 WO 95/10513之（4— (2— (2 —氮雜—雙環 [2.2.1]庚一 2-基）一乙氧基）—苯基）一 （6 -羥基—2 一 （4 —羥基一苯基）—苯並[b]噻吩一 3 —基）一甲酮， 包含其製法。 其他較佳的雌激素激動劑/拮抗劑包含揭示於同一申 請人的US 5,5 5 2,4 1 2之化合物，其中特別合宜的化合物 是如下所示： 順—6— (4- 氟一苯基）—5— (4 — （2 —哌啶—1 — 基一乙氧基）—苯基）一 5,6,7,8 —四氫一萘—2 —醇； (一）—順—6 —苯基一 5 -（4— (2-吡咯烷—1 一 基—乙氧基）—苯基）—5,6,7,8-四氫一萘—2—醇； 順—6 -苯基一 5 -（4— (2 —吡咯烷—1—基—乙氧 基）一苯基）—5,6,7,8 —四氫一萘—2 —醇； 川頁一 1 一 （ 6 3 - D比略院乙氧基一 3 ’ 一吼卩定基）一 2 -苯 基—6—羥基—1，2,3,4—四氫萘； 1— (4’ 一吼略院乙氧苯基）一 2— (4” 一氟苯基）一 6-羥基—1，2,3，4 一四氫異喹啉； 順—6 一 （ 4 —羥基苯基）—5 — ( 4 — ( 2 —哌啶—1 — 基一乙氧基）一苯基）一 5,6,7,8 —四氫—萘一 2—醇；及 1 一 （4，—吡咯烷乙氧苯基）一 2-苯基—6—羥基一 1，2,3,4 一四氫異咱啉。 特別合宜的化合物是揭示於US 5,94 8,8 09之（—） —順—6 —苯基—5— (4— (2 — D比略院—1—基—乙氧基 )—苯基）—5,6,7,8 -四氫—萘一 2 —醇，D-酒石酸酯 -19- (15) 200302080 US 4, 133,8 14揭示其他的雌激素激動劑/拮抗劑。US 4,133,814揭不 2 —苯基一 3 —芳酸基—苯並嚷吩和2 —苯 基一 3 -芳醯基苯並噻吩一 1 一氧化物之衍生物。 其他較佳的雌激素激動劑/拮抗劑包含TSE - 424 ( US 5,99 8,402 ) > arozoxifene ( US 5,723,474 ) > EM -

652、EM — 800、GW 5638和 GW 7604，或其光學或幾何 異構物；或其藥學上可接受之鹽、N -氧化物、酯、四級 鏡鹽、或前驅物。 其他較佳的雌激素激動劑/拮抗劑包含下式V或VI 所示之化合物：

- 20- (VI) (16) (16)200302080 其中：

Rib 是選自 H、OH、一 〇— C (Ο) — Ci— Ci2 院基（ 直鏈或支鏈）、一 〇—山一（：12烷基（直鏈或支鏈或環狀 )、或鹵素或CpC#鹵化醚； R2B、R3B、R4B、R5B、和 R6B 是分別選自 Η、OH、 一 〇 - C(〇) 一 Ci— C12烷基（直鏈或支鏈）、 —〇 - Ci—Cu焼基（直鏈或支鏈或環狀）、鹵素、

Cl— C4鹵化釀、氯基、Cl — C6院基（直鍵或支鍵）、二 氟甲基； XA是選自 H'Ci — C6烷基、氰基、硝基、三氟甲基 、和鹵素； s是2或3 ;

I ^βΒ ΥΑ是下式所示之基團·’ 其中： a ) R7B和R8B是分別選自Η、C i 一 C6烷基或苯基（ 任意經CN、C6烷基（直鏈或支鏈）、Ci— C6烷氧_ (直鏈或支鏈）、鹵素、—OH、— CF3、或一 〇CF3所取 代）；或 b ) R7B和R8B是連結而成含有一個氮雜原子之5員 飽和雜環，而該雜環任意地經〗至3個分別選自氫、羥_ 、鹵基、d— C4烷基、三鹵甲基、C〗—C4烷氧基、三_ 甲氧基、Cl—c4醯氧基、C4烷硫基、烷亞擴 -21 - (17) 200302080 醯基、c4烷磺醯基、羥基（Cl — c4)烷基、-C02H 、一 CN、— CONHR1B、一 NH2、— NHCCi— C4 烷基）、 —NCCi— c4 烷基）2、一 NHS02Rib、— NHCOR1B、 —N〇2、或任意經1至3個（G — C4)烷基所取代的苯基 之取代基所取代；或

c) R7b和R8B是連結而成含有一個氮雜原子之6員 飽和雜環’而該雜環任意地經1至3個分別選自氫、羥基 、鹵基、（^一（：4烷基、三鹵甲基、Cl— C4烷氧基、三鹵 甲氧基、Cl — C4醯氧基、Cl— C4院硫基、Cl— C4院亞磺 醯基、Ci — c4烷磺醯基、羥基（Cl — c4)烷基、—co2h 、-CN、— C〇NHR1B、— NH2、— NHKCi— C4 烷基）、 一 NCCi— c4 烷基）2、— NHS02R1B、— NHCOR1B、 —N〇2 '或任意經1至3個（Ci — c4)烷基所取代的苯基 之取代基所取代；或

d) R7B和R8B是連結而成含有一個氮雜原子之7員 會包和I雜環’而該雜環任意地經1至3個分別選自氫、羥基 、齒基、q — C4烷基、三鹵甲基、Cl— C4烷氧基、三鹵 甲氧基、C4醯氧基、Cl— C4烷硫基、Cl— C4烷亞磺 酸基、C4烷磺醯基、羥基（Ci—c4)烷基、—C02H CN、-CONHRib、- NH2、- NH(Ci - C4 院基）、 —烷基）2、— NHS02R1B、— NHCOR1B、 ^2 或任意經1至3個（C1 — C 4 )院基所取代的苯基 之取代基所取代；或 e ) R7b和R8B是連結而成含有一個氮雜原子之8員 -22- (18) (18)200302080 飽和雜環，而該雜環任意地經1至3個分別選自氫、羥基 、鹵基、Ci—Cq院基、三鹵甲基、Cl—燒氧基、三鹵 甲氧基、Ci— C4釀氧基、Ci— C4院硫基、Ci— C4院亞石舆 醯基、q〜c4烷磺醯基、羥基（Ci — c4)烷基、一 co2h 、—CN、— CONHRib、一 NH2、— NHCCi— C4 院基）、 —烷基）2、一 NHS02Rib、— NHCOR1B、 —N02、或任意經i至3個（山—C4 )烷基所取代的苯基 之取代基所取代；或 Φ f) R7B和Rsb是連結而成含有6 - 12個橋接或稠合 的碳原子和一個氮雜原子之飽和雙環雜環，而該雜環任意 地經1至3個分別選自氫、羥基、鹵基、Cp C4烷基、 三鹵甲基、Cp C4烷氧基、三鹵甲氧基、Ci— C4醯氧基 、Ci— C4烷硫基、Ci— C4烷亞磺醯基、Ci— c4烷磺醯基 、羥基（（^一<：4)烷基、—C02H、— CN、— CONHR1B、 —NH2、— NHCC! — C4 烷基）、—NCCi— C4 烷基）2、 —NHSO2R1B、— NHCORib、— N〇2、或任意經 1 至 3 個（

Ci - c4)烷基所取代的苯基之取代基所取代； 或其光學或幾何異構物；或其藥學上可接受之鹽、N -氧化物、酯、四級銨鹽、或前驅物。 另一較佳的雌激素激動劑/拮抗劑係如下式Va所示 之化合物： -23- (19)200302080

(Va) 或其光學或幾何異構物；或其藥學上可接受之鹽、N -氧化物、酯、四級銨鹽、或前驅物。 其他較佳的雌激素激動劑/拮抗劑包含下式III所示 之化合物（EM — 652 )或下式IV所示之化合物（EM — 800 )：

-24· (20) 200302080

(IV)

或其光學或幾何異構物；或其藥學上可接受之鹽、N -氧化物、酯、四級銨鹽、或前驅物。

熟悉此項技術人士均知其他的骨骼合成代謝劑（亦指 骨質增強劑）可與本發明之化合物倂用。骨質增強劑係爲 一種增強骨質至高於骨折底限點的程度之化合物，其細節 請參照 World Health Organization Study World Health Organization, “Assessment of Fracture Risk and its Application to Screening for Postmenopausal Osteoporosis (1 994 ) . Report of a WHO Study Group. World Health Organization Technical Series 843 ”。 本發明之化合物亦可與其他的EP2激動劑倂用，較佳 的EP 2激動劑包含揭示於U S 6，2 8 8 , 1 2 0之7 — [ ( 4 — 丁基 -苄基）-甲磺醯基-胺基]-庚酸單鈉鹽及其他化合物 熟悉此項技術人士將了解到IGF - 1、氟化鈉、副甲 狀腺激素C PTH )、副甲狀腺激素的活性片斷分子、生長 -25- (21) (21)200302080 激素或生長激素促分泌素亦可與本發明之化合物倂用。 本發明之化合物亦可與前列腺素倂用，下文將說明及 引用各種前列腺素。然而，其他的前列腺素亦爲熟悉此項 技術人士所知悉。前列腺素的例子揭示於u S 4，1 7 1，3 3 1 和 3,927,1 97。Norrdin 等人之 The Role of Pr〇stagiaildins in Bone In Vivo，Prostaglandins Leukotriene Essential Fatty Acids 41，139 - 150，1990爲骨骼合成代謝的前列腺 素之評論。 其他可與本發明之化合物倂用的化合物包含 US 3,93 2,3 8 9所揭示之具骨骼形成活性之2一脫羧基_2 一（四唑—5 -基）—1 1 一脫氧基一 1 5 -經取代的—φ 一 戊烷前列腺素；US 4,018, S92所揭示之具骨骼形成活性之 16 —芳基—13, 14 —二氫—PGE2對—聯苯酉旨； US 4,2 1 9,483所揭示之具骨骼形成活性之2,3,6 —經取代 的—4—吡喃酮；US 4，1 3 2,847所揭示之具骨骼形成活性 之2，3，6 —經取代的—4 —吡喃酮；U S 4，0 0 0，3 0 9所揭示之 具骨骼形成活性之1 6 -芳基—1 3，1 4 —二氫—P GE 2對一聯 苯酯；US 3,98 2,0 1 6所揭示之具骨骼形成活性之16—芳 基—1 3，1 4 —二氫—p GE2 對—聯苯酯；U S 4，6 2 1 5 1 0 0 所揭 示之具骨骼形成活性之經取代的環戊烷；和U S 5，2 1 6，1 8 3 所揭示之具骨骼形成活性之經取代的環戊酮。 氟化鈉亦可與本發明之化合物倂用。“氟化鈉”乙辭意 指各種形式的氟化鈉（例如緩釋型氟化鈉、持釋型氟化鈉 )。持釋型氟化鈉揭示於U S 4,9 0 4,4 7 8，其內容在此倂入 (22) 200302080 本文以爲參考。氟化鈉的活性是可爲熟悉生物流程的技術 之人士所立即測定的（例如，參考Eriksen E. F. et al., Bone Histomorphometry, Raven Press, New York， 1 994, pages 1—74; Grier S. J. et al., The Use of Dual— Energy X— Ray Absorptiometry in Animals，Inv. Radiol.， 1 996, 3 1 ( 1 ) :5 0 - 62; Wahner H. W. and Fogelman I.，The

Evaluation of Osterporosis: Dual Energy X-Ray Absorptiometry in Clinical Practice. 5 Martin Dunitz Ltd.， London 1994， pages 1—296)。 骨骼形態形成蛋白亦可與本發明之化合物倂用（例如 ，參 見 Ono 等人之 Promotion of the Osteogenetic A c t i v ity of Recombinant Human Bone Morphogenetic Protein by Prostaglandin El，Bone, 1996， 19(6) 5 581- 5 8 8 ) o

所有的副甲狀腺激素（PTH )亦可與本發明之化合物 倂用。“副甲狀腺激素”意指副甲狀腺激素、其片斷分子或 代謝物、及其可刺激骨骼形成和增加骨質之之結構類似物 。與副甲狀腺激素相關的肽及與副甲狀腺激素相關的肽之 活性片斷分子和類似物亦包含在內（參見P C T公開案 WO 94〆〇146〇 )。此類骨骼合成代謝功能活性可由熟悉 標準分析技術之人士所立即測定（例如，參見E r i k s e η E . F. et al.， Bone Histomorphometry, Raven Press， New

York，1 994，pages 1—74; Grier S. J· et al.，The Use of

Dual-Energy X-Ray Absorptiometry in Animals, Inv. -27- (23) 200302080

Radiol., 1 9 9 6， 3 1 ( 1 ) : 5 0 - 6 2 ; W a h n e r Η . W . an d

Fogelman I·，The Evaluation of Osteoporosis: Dual Energy X-Ray Absorptiometry in Clinical Practice.， Martin Dunitz Ltd.，London 1994, pages 1-296)。上述化合物將 揭示及引用於下文中。然而，其他的副甲狀腺激素係爲熟 悉此項技術人士所知悉。副甲狀腺激素的例子揭示於下列 參考文獻：

“Human Parathyroid Peptide Treatment of Vertebral Osteoporosis’’，Osteoporosis Int.，3， ( Supp 1 ) :1 9 9-203 “PTH 1-34 Treatment of Osteoporosis with Added Hormone Replacement Therapy: Biochemical, Kinetic and Histological Response” Osteoporosis I n t. 1:162-170 ° 所有的生長激素或生長激素促分泌素亦可與本發明之 化合物倂用。“生長激素促分泌素”意指一種刺激生長激素 的釋放或摹擬生長激素（例如增進骨骼形成而導致骨質增 加）之化合物。此種作用可爲熟悉標準分析技術之人士所 立即測定。下列公開的pct專利案揭示多種上述的化合 物：WO 95/14666; WO 95/13069; WO 94/19367; WO 94/13696和WCT95/34311。然而，其他的生長激素 或生長激素促分泌素亦爲熟悉此項技術人士所知悉。 特別合宜的生長激素促分泌素是N - [ 1 ( R ) - [ 1，2 — 二氫一 1 一甲磺醯基螺[3H -吲哚一 3,4, 一哌啶]一 1’ —基羰 基]—2—(苯甲氧基）乙基]一 2 —胺基一 2 —甲基丙醯胺 -28- (24) (24)200302080 ：MK- 6 77。 其他較佳的生長激素促分泌素包含： 2 —胺基—N— (2— (3a— (R)—〒1 基一 2 —甲基― 3 —酮—2,3, 3a,4,6,7 —六氫一吡唑並[4,3 — c]吡啶—5-基 )一1 一 （R)—爷氧甲基—2-酮一乙基）一異丁醯胺（ US 6, 1 07,3 06 )或其L—酒石酸鹽； 2-胺基—N— {1(R) -苄氧甲基一 2 - [1，3 —二酮— 8a— (S) — D比D定—2 —基甲基—2— (2,2,2—三氟—乙基 )一六氫一咪唑並[1，5a]吡嗪一 7-基]一 2 —酮一乙基}— 2 —甲基—丙醯胺（US 6,251，902)或其鹽酸鹽； 2 —胺基—N— (1— （R)—苄氧甲基—2— (3a—( R) — （4 — 爷基）一2 —甲基—3 —酮一2,3,3a，4,6,7 一六氫—吡唑並[4,3 — c]吡啶一 5 —基）一 2-酮一乙基） 異丁醯胺； 2 —胺基—N— (2— (3a— (R)—;基—3 —酮— 2,3,3&，4,6,7-六氫—哦11坐並[4,3—(：]卩比卩定—5—基）一1一 (R)—苄氧甲基一 2—酮一乙基）一異丁醯胺；及 2 —胺基—N- （1— (2,4 —二氟—节氧甲基）—2 — 酮一2 -（3 —酮—3a —吡啶—2 —基甲基一 2— (232,2 —三 氟一乙基）一 2,3,3a，4,6,7 —六氫一 D比P坐並[4,3 — c]D比卩定— 5 —基）—乙基）—2 —甲基—丙醯胺（US 6, 110,932)或 其L 一酒石酸鹽。 本發明之化合物通常係以含有至少一種本發明化合物 和藥學上可接受之載體或稀釋劑之藥學組成物的形式投服 -29- (25) (25)200302080 。經口投服時，藥學組成物可爲溶液、懸浮液、錠劑、九 劑、膠囊、粉劑等形式。可使用含有下列成份之錠劑：各 種賦形劑（例如檸檬酸鈉、碳酸鈣和磷酸鈣）以及各種崩 散劑（例如澱粉’宜爲馬鈴薯或木薯澱粉和一些複合型矽 酸鹽）與結合劑（例如聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖、明膠和金 合歡膠）。此外’爲了製錠的目的通常可使用潤滑劑，例 如硬脂酸鐘、月桂基硫酸鈉和滑石。亦可使用類似型態的 固體組成物作爲軟或硬塡式明膠膠囊的塡充物，較佳的此 類物質亦包含乳糖或奶糖和高分子量聚乙二醇。當使用水 性懸浮液及/或酏劑經口投服時，本發明化合物可與多種 增甜劑、調味劑、色料、乳化劑及/或懸浮劑、以及稀釋 劑（例如水、乙醇、丙二醇、甘油和其組合物）一起倂用 〇 當用於非經腸投服時，可使用於芝麻油或花生油或於 水性丙二醇所形成的溶液或其對應的水溶性鹽之無菌水溶 液。該水溶液必要時應適當地加以緩衝，且液體稀釋劑應 事先以足量的鹽水或葡萄糖使等滲透。上述特定的水溶液 特別適合於供靜脈內、肌內、皮下和腹膜內注射投服。因 此’所用之無菌水性介質均是可由熟悉此項技術人士所習 知的標準技術立即獲致者。 爲了經皮投服（例如局部投服）的目的，製備稀的無 菌水性或部份水性溶液（通常濃度爲約0. 1 %至5% ) ( 其他部份類似於上述之非經腸投服用溶液）。 膠囊係藉由混合化合物與適合的稀釋劑及將適量的混 -30- (26) (26)200302080 合物塡入膠囊中而製得。常用的稀釋劑包含惰性粉末狀物 質，例如各種不同種類的澱粉；粉末狀纖維素，特別是結 晶狀纖維素和微晶狀纖維素；糖類，例如果糖、甘露糖醇 和蔗糖；榖類粉末和類似的可食性粉末。 錠劑係藉由直接壓錠、濕式造粒或乾式造粒而製得。 其調合物通常含有稀釋劑、結合劑、潤滑劑和崩散劑以及 化合物。典型的稀釋劑包含，例如，各種形式的澱粉、乳 糖、甘露糖醇、高嶺土、磷酸鈣或硫酸鈣、無機鹽例如氯 · 化鈉、和糖粉。亦可使用粉末狀纖維素衍生物。典型的錠 劑結合劑是例如澱粉、明膠、和糖類（例如乳糖、果糖、 葡萄糖等）之物質。天然和合成膠亦是便利的，包含金合 歡膠、藻酸鹽、甲基纖維素、聚乙烯吡咯烷等。聚乙二醇 '乙基纖維素和鱲亦可用作爲結合劑。 爲了防止錠劑和衝壓機黏在壓模上，潤滑劑於錠劑調 合物可能是必要的。潤滑劑係選自滑動性固體，例如滑石 、硬脂酸鎂和硬脂酸鈣、和氫化植物油。 · 錠劑崩散劑是當錠劑弄濕時有利於錠劑釋放化合物之 物質’其包含澱粉、黏土、纖維素、藻膠和樹膠、玉米和 馬鈴薯澱粉、甲基纖維素、瓊脂、膨潤土、木質纖維素、 粉末狀天然海綿、陽離子交換樹脂、藻酸、瓜耳膠（guar gum)、柑橘果泥和羧甲基纖維素，例如，亦可使用月桂 基硫酸鈉。 錠劑通常塗覆以作爲甜味劑和密封劑的糖，或塗覆以 膜形成劑以改變錠劑的溶解性質。化合物亦可藉由於調合 -31 - (27) (27)200302080 物中使用大量味道愉悅的物質（例如甘露糖醇）而調製成 可咀嚼的錠劑，此類技術已普見於先前技藝。 當化合物須以栓劑的形式投服時，可使用常用的基質 。椰子油爲傳統的栓劑基質，而其可藉由添加蠟而緩緩地 升高其熔點。水互溶性栓劑基質包含，特別是，各種不同 分子量之聚乙二醇，目前已廣泛地被使用。 化合物的功效可藉由適當的調合物而被延緩或延長。 例如，可製備化合物之緩溶性九劑並將之倂入錠劑或膠囊 中。可藉由製備具各種不同溶解速率的九劑並將九劑混合 物塡入膠囊中而改良製備技術。錠劑或膠囊可被塗覆以抗 溶解一段預定時間之薄膜。即使非經腸製劑可藉由將化合 物溶解或懸浮在油性或乳化的載體中（使化合物只緩緩地 釋放至血淸中）而製成長效型。 本發明之藥學組成物可含有例如0 . 1 %至9 5 % (宜爲 1 %至7 0% )之本發明的化合物。在任何情況下，待投服 之組成物或調合物將含有量足以有效治療疾病/症狀之本 發明的化合物。 下列實施例將例示供非人類的動物所用之調合物和劑 量。本發明之化合物可以經口或非經口的方式投服，例如 利用注射的方式投服。本發明之化合物的投服量是使得到 有效劑量者，通常爲〇.〇1至1〇〇 mg/kg體重，宜爲οι 至50 mg/kg體重。須明白的是，可能每天需要投服超過 一劑，而獸醫可根據特定的狀況而決定有效的投服劑量。 傳統上，化合物可置於飮用水中使得治療劑量的化合 -32- (28) (28)200302080 物與每日供水一起飮用。化合物可直接計量置入飮用水中 ，宜以液態之水溶性濃縮劑形式（例如水溶性鹽之水溶液 )。通常，化合物亦可以本身的形式直接加入飼料中，或 以動物飼料補充劑的形式加入飼料中，亦可爲預混物或濃 縮劑的形式。爲了將藥劑包括在飼料中，較爲普遍使用的 是由化合物與載體所形成之預混物或濃縮劑。根據所需， 適合的載體是液體或固體，例如水、各種榖粉例如紫花苜 蓿粉、大豆粉、棉籽油粉、亞麻子油粉、玉米穗軸粉和玉 米粉、糖蜜、尿素、骨粉和礦物混合物（例如家禽飼料中 常用者）。特別有效的載體是個別動物飼料本身，即小量 的上述飼料。載體有利於化合物均勻分佈於混有預混物之 最終飼料中。重要的是，化合物充份地混入預混物及接著 充份地混入飼料中。關於此點，化合物可分散或溶解於適 合的油性載體例如大豆油、玉米油、棉籽油等，或分散或 溶解於揮發性有機溶劑並接著與載體相混合。適當的話， 化合物於濃縮劑中的比率可廣泛地變化，因爲活性化合物 於最終飼料中的含量可藉由混合適當的比例之預混物與飼 料而得到所欲之化合物含量。 飼料製造商可混合高效力濃縮劑與蛋白性載體例如大 豆油榖粉和其他如上所述的穀粉而得到濃縮的補充劑，而 適合於直接餵食於動物。在此種情況下，動物容許攝取曰 常飲食。或者，此濃縮補充劑可直接加至飼料中以得到含 有治療有效量之含有本發明化合物之營養均衡的最終飼料 。混合物經由標準步驟（例如於雙殼混合器中）充份地混 -33- (29) (29)200302080 合以確保均勻性。 如果補充劑是以舖陳在飼料上的方式使用，同樣地可 幫助舖陳於整個飼料上之活性物質之分佈的均勻性。 當非經腸投服於動物時，本發明化合物可製成糊或九 劑及以植入物的方式投服，通常投服於動物的頭或耳部皮 膚下。 糊劑調合物可經由將本發明之化合物分散於藥學上可 接受之油例如花生油、芝麻油、玉米油等中而製得。 着 含有有效量之本發明化合物之九劑可經由將本發明化 合物與稀釋劑（例如carbowax、carnauba wax)混合而製 得，且可加入潤滑劑（例如硬脂酸鎂或硬脂酸鈣）以改善 九化過程。 當然，須明白的是，可投服一顆以上的九劑於動物以 達到所欲的劑量。此外，亦已經發現在動物治療期間可定 期置入植入物以維持動物體內正確的劑量。 本文中“治療（treatment ) ”乙辭包含防止性（例如預 導 防性）及減輕性的治療。本文中“治療（treating )，，乙辭 意指提供防止性及/或減輕性的治療之行爲。 本文中“治療有效量”乙辭意指可改善疾病或病狀之一 或多種症候或者防止或延遲疾病或病狀之一或多種症狀的 發生之本發明之化合物或本發明之化合物與其他化合物所 形成的組合物的量。 本文中“患者”意指哺乳動物，特別是人類。 “葡糖醛酸（glucuronic acid) ”是爲在葡糖醛酸化反 -34- (30) (30)200302080 應之第二期共軛反應中可轉換成代謝物或可轉換成母體化 合物並進而形成代謝物之替代物。葡糖醛酸與代謝物或母 體化合物中之酸或醇或苯酚基團反應而形成“葡糖苷酸（ glucuronide) ”。葡糖脊酸替代物於下文之化學式中縮寫 爲” Gin”或“葡糖苷酸（Glucuronide) ”。 “硫酸”是爲在硫酸化反應之共軛反應中可轉換成代謝 物或可轉換成母體化合物並進而形成代謝物之替代物。硫 酸與代謝物或母體化合物中之醇或苯酚基團反應而形成“ 硫酸酯”或“共軛硫酸酯”。 投服本發明之化合物與一或多個額外的化合物之組合 意指上述化合物可以組成物的形式一起投服或以相同的單 位劑型之一部份的形式或以不同劑型的形式於同一時間或 不同時間投服。 熟悉此項技術之化學家均知部份本發明之化合物將含 有一或多個可形成特殊立體化學、互變或幾何組態的原子 ，因而產生立體異構物、互變異構物、位相異構物（ r e g i 〇 i s 〇 m e r s )和組態異構物。所有上述的異構物及其混 合物均涵蓋在本發明的範圍內。本發明之化合物的水合物 和溶劑化物亦涵蓋在本發明的範圍內。 本發明亦包含同位素標記的化合物，其與本發明之化 合物相同，惟其中一或多個原子爲具有與天然發現的原子 量或質量數不同的原子量或質量數之原子所取代。可倂入 本發明化合物之同位素的例子包含氫 '碳、氮、氧、磷、 硫、氟和氯的同位素，分別例如2H、3H、13C、14C、 - 35- (31) (31)200302080 、〇、17〇、31P、32p、35s、18F 和 36C1。含有上述同位 或其他原子的其他同位素之本發明之化合物、其前 % '或該化合物或該前驅藥物之藥學上可接受之鹽均 在本發明的範圍內。一些本發明之同位素標記的化合物（ 例如含有放射性同位素（例如3H和14C )之化合物）可 用於藥物及/或受體組織分佈分析。氚化的同位素（即 3H)和I碳一 14同位素（即He)由於其容易製備及易偵測 性因而特別適宜。此外，由於較重同位素（例如氘，即 2H )具有較大的代謝安定性（例如較長的活體內半生期或 較低的劑量需求），因而較重同位素的取代可提供一些治 療上的優點，並因此在某些情況可能較爲適宜。本發明之 同位素標記的化合物及其前驅藥物通常可藉由下文中所例 示之步驟或先前技藝中已知的步驟而加以製備。 本發明之化合物可於活體外或活體內代謝硏究中用作 爲分析標準物或作爲新化學主體的化學合成或生物合成之 中間物。代謝物可以固體或溶液的形式單離。本發明之化 合物亦可用於鑑別已經被投服以（3 - {[( 4 -第三丁基一 卡基）一 （Dltn定一 3 -礦醯基）—胺基]一甲基}—苯氧基 )-乙酸或其藥學上可接受之鹽或前驅藥物或該前驅藥物 的鹽之患者。爲了鑑別已經被投服以（3 - {[( 4 一第三丁 基一韦1基）一 （D比卩定—3 —磺醯基）一胺基]一甲基} 一苯 氧基）-乙酸或其藥學上可接受之鹽或前驅藥物或該前驅 藥物的鹽之患者，自該患者取得血淸、尿液、排泄物或膽 汁樣品，及分析該樣品是否存在有一或多種本發明之化合 (32) (32)200302080 物。分析本發明之化合物的方法之一是利用層析或質譜法 。其他分析法係爲熟悉此項技術人士所習知者。血淸、尿 液、排泄物或膽汁樣品中存在有一或多種本發明之化合物 表示該患者已經被投服以（3 - {[( 4 一第三丁基一；基） 一 （1:1比卩定一3 —磺驢基）一胺基]一甲基苯氧基）一乙 酸或其藥學上可接受之鹽或前驅藥物或該前驅藥物的鹽。 於本發明之治療方法中，本發明之化合物可以例如錠 劑的形式直接投服於患者，或者化合物可經由新陳代謝作 用於患者體內而生成。此外，化合物（藉由新陳代謝而生 成本發明之化合物者）之投服途徑和劑量可根據所需而加 以變化以得到所欲之本發明化合物之活體內濃度和製造速 率。 本發明之化合物之藥學上可接受的酸加成鹽可由化合 物本身形成或由其任何酯形成，且包含藥物化學中常用之 藥學上可接受的鹽。例如，鹽可由無機或有機酸形成，例 如鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、磺酸（包含萘磺酸、甲磺酸和 甲苯磺酸）、硫酸、硝酸、磷酸、酒石酸、焦硫酸、偏磷 酸、琥珀酸、甲酸、酞酸、乳酸等，最宜爲與鹽酸、檸檬 酸、苯甲酸、順丁烯二酸、乙酸和丙酸所形成的鹽。 當用作爲藥物時，本發明之化合物之投服於患者的劑 量可相當廣泛地變化，且決定於主治醫師或獸醫的判斷。 須明白的是，當以鹽的形式（例如月桂酸鹽）投服時，化 合物的劑量可能必須加以調整，因形成鹽的基團具有相當 的分子量。本發明之化合物之有效投服速率的範圍通常是 -37- (33) (33)200302080 約〇·001 mg/天至約200 mg/天，較佳的投服速率是約 0·01 mg/天至約1〇〇 mg/天。當然，通常是將化合物的 每B齊!J量在~天內於不同的時間點分批投服。然而，任何 白勺情況下’投服之化合物的量將決定於許多因素，例如活 性化合物的溶解度、所用的調合物和投服途徑。 前驅藥物乙辭意指在活體內會轉換形成本發明化合物 之化合物。轉換作用可藉由各種機制而發生，例如於血液 中藉由水解作用。前驅藥物的使用之討論參見T. Higuchi and W. Stella，“Pro — drugs as Novel Delivery Systems”， Vo 1. 14 of the ACS. Symposium Series, and in B i o r e v e r s i b 1 e Carriers in Drugs Design, ed. Edward B. Roche, American Pharmaceutical Association and

Pergamon Press, 1 987 〇 例如，當本發明之化合物含有羧酸官能基時’前驅藥 物可含有經以下列基團取代酸基氫原子而形成的酯··例如 ，（Cl— C8)烷基、（C2— C12)烷醯氧甲基、具有4至 9個碳原子之1 一（院醯氧基）乙基、具有5至10個碳原 子之1—甲基一 (烷醯氧基）—乙基、具有3至6個 碳原子之烷氧羰氧甲基、具有4至7個碳原子之1 一（院 氧羰氧基）乙基、具有5至8個碳原子之丨―甲基一 1 一 (院氧鑛氧基）乙基、具有3至9個碳原子之N—（院氧 羰基）胺甲基、具有4至10個碳原子之1 一（N—(院氧 羰基）胺基）乙基、3 一酞基、4 一巴豆內酯基、γ 一丁內 酯—4 —基、二一 N，N— (Cl—C2)烷胺基（C2 一 C3)烷 -38- (34) 200302080 基（例如α —二甲胺基乙基）、胺甲醯基—（Ci— C2)烷 基、N，N —二（Ci — C2)烷基胺甲醯基-(Ci — C2)烷基 和哌啶基—、吡咯烷基一、或嗎啉基（C2 — C3 )烷基。

同樣地，當本發明之化合物含有醇官能基時，前驅藥 物可經由以下列基團取代醇基的氫原子而形成：例如，（ C! — c6)烷醯氧甲基、1 一（ （c〗 —c6)烷醯氧基）乙基 、1 一甲基一1— ( (Ci— C6)烷醯氧基）乙基、（Ci — c6 )烷氧羰氧甲基、N— (Ci— C6)烷氧羰胺甲基、琥拍隨 基、（Ci— C6)烷醯基、α —胺基（Ci — C4)烷醯基、芳 醯基、和α-胺醯基或α一胺醯基一 α-胺醯基，其中各個 α -胺醯基分別選自天然的L 一胺基酸、Ρ ( Ο ) ( 〇Η) 、—Ρ(〇) (〇((^-（：6)烷基）2或葡基（藉由除去半 縮醛型碳水化合物之羥基而得之基團）。

當本發明之化合物含有胺官能基時，前驅藥物可終由 以下列基團取代胺基的氫原子而形成：例如，Rx〜壤其 RX〇 —羰基、NRXRX’ —羰基（其中Rx和Rx，分別是 (Q— C1G)烷基、（c3— C7)環烷基、苄基，或RX m 基是天然α —胺醯基或天然α —胺醯基-天然α〜胺㈣其） 、—C ( OH) C ( 0) 0Yx (其中 Υχ 是 H、（ Cl〜Γ Γ 、— 6)烷 基或；基）、一 C(〇YX0) γΧΐ (其中 是 院基及YX1是（Ci—C6)烷基、羧基（d— c6)烷_、月〜 基（C!— C4)烷基或單 — N—或二一 N，N— (Cl〜r ) 院 胺烷基）、一 Y ( YX2) YX3 (其中γΧ2是Η或甲基及 ΥΛ3是單—Ν —或二—ν,Ν—(匕―C6)烷胺基）、嗎啉其 -39- (35) (35)200302080 、哌啶一 1 一基或吡咯烷一 1 一基。 有利的是，本發明亦提供一種可供消費者使用於治療 疾病用之套組。該套組包含a )含有本發明之化合物和藥 學上可接受之載體、載劑或稀釋劑之藥學組成物；及b) 描述使用該藥學組成物以治療特定疾病的方法之使用說明 書。 本發明所用之“套組”包含一個容納不同單位劑型之容 器，例如分裝的瓶子或分裝的鋁箔包。容器可爲任何先前 技藝中習用的形狀或型式，利用藥學上可接受的材料而製 得者，例如紙盒或硬紙板盒、玻璃或塑膠瓶或廣口瓶、可 再密封式袋子（例如，用於盛裝塡充包的錠劑以供分配於 不同的容器內）、或具有個別劑量而供根據療程而壓製出 包裝容器之成形包裝（blister pack)。所用之容器可決定 於實際使用的藥劑型式，例如傳統的硬紙板盒通常不用於 盛裝液體懸浮液。於單一包裝內使用一種以上的容器而以 單一劑量的型式上市是可行的。例如，錠劑可塡裝於瓶子 內，接著瓶子是包裝於盒子內。 上述套組的一例是所謂的成形包裝（b 1 i s t e r p a c k )。 成形包裝（blister pack)爲包裝工業所習知的，且已廣泛 地用於藥物單位劑型（例如錠劑、膠囊等）的包裝。成形 包裝（blister pack)通常是由一覆蓋有薄片（宜爲透明的 塑膠材料）之相當硬的材質薄片所組成。在包裝過程中， 在塑膠薄片中形成凹穴。凹穴具有待包裝之個別錠劑或膠 囊的形狀和大小或者具有特包裝之數個錠劑或膠囊的形狀 (36) (36)200302080 和大小。接著將錠劑或膠囊置於凹穴中，將上述相當硬的 材質薄片與塑膠薄片（與形成凹穴的方向相反的一面）密 封在一起’使得錠劑或膠囊根據所需個別或數個地密封於 塑膠薄片和薄片間的凹穴內。薄片的強度宜爲可經由手壓 凹穴而在凹穴處的薄片上形成一個開口而自成形包裝（ blister pack)取出錠劑或膠囊者。接著經由該開口處取出 錠劑或膠囊。 値得考慮的是在套組上提供一個書面的記憶輔助工具 ，其中該書面的記憶輔助工具含有供醫師、藥師或患者用 之資訊及/或指示，例如在錠劑或膠囊旁編列數字的形式 ，如此數字對應於每日應攝取之錠劑或膠囊，或爲含有相 同資訊的卡片的形式。該記憶輔助工具的另一個例子是印 在卡片上的日曆，例如第一週、星期一、星期二、...... 等、第二週、星期一、星期二.......等。其他的記憶輔 助工具的變化將是容易明白的。“每日劑量，，可爲在指定的 曰子內服用單一錠劑或膠囊或數顆錠劑或膠囊。 本發明之套組的另一個特殊體系是一種經設計用於依 照服用的順序一次分配每日劑量之分配器。分配器宜配備 有記億輔助工具使更便利於按用藥指示攝取藥物。該記憶 輔助工具的一例是可顯示每日已經分配（服用）的數量之 機械計數器。該記憶輔助工具的另一例是電池起動之具有 液晶顯示或聽得見的提醒訊號（例如讀出最近一次服用每 曰劑量的日期及/或提醒下一次服用的日期）之微電腦晶 片記憶裝置。 -41 - (37) (37)200302080 套組的另一體系中，藥學組成物亦可包含可與本發明 之化合物倂用之額外的成份，或套組可含有二種藥學組成 物：一藥學組成物含有本發明之化合物；另一藥學組成物 含有可與本發明之化合物倂用之額外的成份。 本文中所引用的文獻（包含所有的專利案和專利申請 案）均倂入本文以爲參考。 本文中所呈現的實施例係用於說明本發明之特殊的體 系，但決不用於限制本說明書和申請專利範圍。 · 【實施方式】 實施例 MC— ( 3 — {[ ( 4一第三丁基一苄基）一（吡啶一 3—磺醯 基）—胺基]—甲基}—苯氧基）—乙酸於Sprague Dawley 鼠中之放射標記的物質平衡和代謝量變曲線 目的 · 爲了檢測S p r a g u e D a w 1 e y鼠在經靜脈投服單一劑（ 15 nig/kg)之 mc— (3—U(4 —第三丁基—苄基）一（ D比啶一 3 —磺醯基）一胺基]一甲基} 一苯氧基）一乙酸後 其尿液、排泄物、膽汁和血漿樣品中之（3 - {[( 4 一第三 丁基一苄基）一（吡啶一 3 -磺醯基）一胺基]一甲基}一 苯氧基）一乙酸的放射標記的物質平衡和代謝量變曲線。 材料和方法 -42- (38) (38)200302080 放射標記的化合物 14C — ( 3 - {[ ( 4 一第三丁基—苄基）—（吡啶—3 — 磺醯基）-胺基]-甲基} -苯氧基）-乙酸顯示放射純度 >9 9% °

* 14C 一標記的位置 14C 一（3 — {[(4 —第二 丁基—卡基）一（D比卩定—3 -磺醯基）一胺基]-曱基} -苯氧基）-乙酸係根據下列反 應圖而製備。

-43- (39) 200302080

f^WS〇2C，

B

S02

放射標記的 (ChemSyn Laboratories, Lenexa, KS) 和胺A於二氯甲烷中在室溫下攪拌一夜（期間以NaBH4 使一部份的反應混合物之反應驟停並以HPLC分析而監視 亞胺的生成）接著以NaBH4處理而得化合物B，接著以過 量的吡啶- 3 -磺醯氯和H u n i g氏鹼處理以形成化合物C ，接著與三氟乙酸於二氯甲烷中反應以形成14C 一 （ 3 - {[ (4 一第三丁基一苄基）一（吡啶一 3 -磺醯基）一胺基] -44- (40) 200302080 酸。 一甲基}—苯氧基）〜乙 化 合 物A可由下列方法製備 步驟1

OHC

Br^^COO-t-Bu

• 1 eq (當量）醛、1 eq碳酸鹽、1.25 eq溴乙酸第 三丁酯，於丙酮中反應。 •回流20至24小時。 •以水使反應驟停。 •以乙酸乙酯萃取，置換成2 —丙醇（IP 0 )以供下 一步驟反應用。 步驟2

• 1 eq化合物D、2 eq羥基胺·Η(：1、2 eq吡啶（Py ) ，於IPO中反應。 •加熱回流3至4小時。 •以乙酸乙酯和水性HC1收拾反應。 •換成2 B乙醇（經甲苯使變性）以供下一步驟反應 -45· (41) (41)200302080 步驟3

•化合物E於2B乙醇中，置入30°/。RaNi ( Rainey 鎳），28%銨。 籲 •以異丙醚萃取，濃縮至油狀物。 •加入異丙醚以析出鹽。 動物模式 將由3隻雄性和3隻雌性頸靜脈插管的Sprague — Dawley鼠（23 0 — 24〇 g)所組成的試驗組分別關在經設 計可收集尿液和排泄物之不銹鋼代謝籠中，並經靜脈投服 以單一劑（15 mg/kg)之 14C— (3 - {[(4 —第三 丁基一 节基）一 （D比B定一 3 —礦醯基）—胺基]—甲基}一苯氧基 )一乙酸。 爲了藥物動力學分析和血漿鑑定，二組動物（3隻雄 鼠和3隻雌鼠供動力學分析，2隻雄鼠和2隻雌鼠供血漿 鑑定）分別經靜脈投服以劑量爲15 mg/ kg之14C— ( 3 〜{[ ( 4 一第三丁基一苄基）一（吡啶一 3 —磺醯基）—胺 基]一甲基丨—苯氧基）一乙酸。 第4組動物（膽管和頸靜脈被插管，每種性別之n = 2 -46- (42) (42)200302080 )經投藥後收集膽汁和尿液以供分析排泄途徑和膽汁代謝 物。 樣品的收集 在投劑後之第 〇— 24、24-48、48—72、72 - 96、96 —120、1 20 — 144、和1 44 — 1 68小時收集第r組動物之尿 液和膽汁達7天。在投劑後之第5分鐘、丨5分鐘、1、2 、4、6、8、2 4和4 8小時收集全血以供動力學分析，及 在投劑後第1和4小時收集全血以供鑑定循環代謝物。利 用離心法自全血分離出血漿。膽管被插管之動物於投劑後 之第0 - 8、8 — 24、和24 - 4 8小時收集其膽汁和尿液。 樣品的分析 放射活性的測定 尿液、膽汁和血漿中的放射活性係由液體閃爍計數器 測定。尿液（〇 . 1 g )、膽汁（0.0 2 5 g )、或血獎（0.0 2 5 g)與Ecolite (+)閃爍混合物相混合，並以 Wallac # 1 409液體閃燦計數器（Gaithersburg，MD)計算放射量 。加水至各個時間點收集的排泄物樣品使均質化，記錄排 泄物勻漿的總重。在以閃爍計數器計算放射量之前將一份 勻漿（0.1 — 0.3 g )置於 Packard 氧化器（Packard Instrument Co.，Downer’s Grove，IL)中以使之氧化。 劑量中之放射活性定義爲1 〇〇%總放射活性。尿液和 排泄物之各個採樣時間點的放射活性定義爲個別母體之排 -47- (43) (43)200302080 泄劑量百分比。 血漿中所測得的放射活性轉換成（3 - {[( 4 -第三丁 基一苄基）一（吡啶一 3 -磺醯基）一胺基]一甲基} 一苯 氧基）-乙酸之ng當量値（以投劑載體之比活性（ specific activity)爲 19.75 dpm/ng 爲基準）。 代謝物排泄之定量分析 代謝物的定量分析係藉由使用Θ - RAM ( IN/ US， Win - flow)測量個別不同的HPLC譜線的面積而得。/3 - RAM於CPM中提供積分的譜線圖像列印資料以及放射 標記的物質之百分比。/9 - RAM係使用固態閃爍槽進行 生物樣品之代謝物的萃取 在氮氣下使尿液樣品（約1 0 ml )蒸發一夜，再將樣 品殘餘物置於1 ml之0.1 %甲酸/乙腈（5 0 ·· 5 0 )中以使 恢復成液體。將溶液渦流混合約1分鐘，移至1 .5 ml微 量管（eppendorf)內，接著在14000 rpm下離心約2分鐘 。直接將一部份上淸液（10 — 20 μΐ)注入HPLC管柱內， 無須再純化。 合倂含有最高量之排泄的放射活性之排泄物勻漿（〇 一 4 8小時）。自合倂的樣品（約8 0 — 1 3 5 g )取出一部份 (約5 g)並懸浮於15 m 1乙腈。懸浮液超音波振盪（約 30分鐘），渦流混合及在3 200 rpm下離心10分鐘。將 -48- (44) (44)200302080 上清液移至乾淨的1 5 ml圓錐形瓶中後，再根據上述方法 以1 5 ml乙腈萃取殘餘物二次。各個萃取液之一部份（ 2 00 μΐ )於閃爍計數器中計算放射量。萃取的放射活性回 收率爲92至96%。在氮氣下使上淸液於Turbo Vap LV蒸 發器（Zymark，Hopkinton, ΜΑ)中蒸發至乾燥，殘餘物 於2 m 1移動相中恢復成液體，將一部份濃縮的排泄物萃 取液（10 — 20 μΐ )注入HPLC管柱上。 利用2倍體積的乙腈沉澱用於鑑定循環的代謝物之血 漿。懸浮液經超音波振盪（約3 0分鐘），渦流混合及在 3 2〇0 rpm下離心10分鐘。將上淸液移至乾淨的15 ml圓 錐形瓶中後，再根據上述方法以2 X 1 5 ml乙腈萃取殘餘 物。合倂上淸液，並在氮氣下使上淸液於Turbo Vap LV 蒸發器（Zymark, Hopkinton，ΜΑ)中蒸發至乾燥，殘餘 物於〇 . 5 m 1移動相中恢復成液體，將一部份濃縮的血漿 萃取液（50— 100 μ1)注入HPLC管柱上。 膽汁直接注射於Η P L C / M S系統上以供分析無須再 純化。 高效能液相層析法 HPLC系統包含HP — 1 1 00溶劑輸送系統、HP — 1 1 00 薄膜除氣器、HP — 1100自動注射器（Hewlett Packard) 和IN / U S放射活性監測器（β — r am )。層析法係於 YMCAQ (C— 18)管柱（4.6mm x 1 5 0 mm, 3 μηι )( Waters，Milford，ΜΑ)上進行。移動相先爲i〇 mM甲酸 (45) 200302080 銨ρ Η 5.0 (溶劑A)和乙腈（溶劑Β)。溶劑輸送的階 式梯度程式如下所示： 時間（分鐘） %，溶劑A %，溶劑B 0-3 90 10 3-25 3 5 65 25-26 10 90 26—29 10 90 29-31 90 10 3 1-35 90 10

在下一次注射之前令系統平衡1 〇分鐘。在全部的分 析過程中維持流速爲1.0 ml /分。爲了定量血漿代謝物， 直接將HPLC流出物導入β - ram放射活性監測器之流動 槽內。當計數低量的放射活性時，利用 ARC (放射性同 位素精確計數）系統由外部控制β — r a m和Η P L C。 質譜法 代謝物的鑑定係利用配備有 API - 2電灑界面（ Finnigan，San Jose，CA)之 Finnigan TSQ 7000 三重式四 極質譜儀。分離出約50 μΐ/ min之HPLC管柱流出物並 將之導入API界面，將其餘的流出物導入β — ram的流動 槽。利用M S數據收集系統以真實時間類比訊號的形式記 錄β - ram的反應。利用由MS至放射活性檢測器之流體的 -50- (46) (46)200302080 閉鎖體積（相當於約0.2分鐘之閉鎖時間）而區分由放射 活性和MS檢測器所收集的數據。當質譜儀於正離子模式 中收集數據時，電灑電壓爲一 4.5 eV。撞擊引發的游離（ C ID)硏究係在撞擊能量爲3 0 — 3 5 eV和撞擊氣體厚度爲 約2. 1 mTorr的情況下於Q2 ( Q2是第二組四極棒）中 以氬氣進行。 結果和g寸論 代謝物的鑑定 代謝物M8 代謝物M8的遲滯時間爲1 0:26 - 1 1:3 5 (分：秒）， 並在m/ z 3 5 1顯示質子化的分子離子。其係於尿液（雄 性）和膽汁中檢測得到。M8之CID片斷圖中的主要片斷 爲m/z 305、146和131。m/z 305的離子（比分子離子 少46 amu (原子質量單位））顯示羧酸基團的存在。m / z 1 3 1和1 4 6的離子可能係分別由羧基異丙基苄基和羧 ® 基異丙基苄胺基基團所造成，且伴隨著甲酸的脫離。根據 片斷圖和分子離子，顯示M8係由苯氧基乙酸基團之N -脫苄基作用及繼之第三丁基之氧化成羧酸的作用和吡啶環 的羥基化作用而獲致。此代謝物與三氯化鈦（20%的磷酸 溶液）的反應導致此代謝物的遲滯時間增加約1分鐘，而 所得之M + H +離子減少16 amu，表示此代謝物爲一 N —氧 化物。根據上述數據，M8經鑑定爲2 - {4 —[(吡啶—N 一氧化物一 3 -磺醯胺基）甲基]一苯基} 一 2 -甲基一丙酸 -51 - (47) (47)200302080

M8 代謝物Μ 1 3 代謝物Μ 1 3於HP L C的遲滯時間爲約1 0 : 4 7 (分·· 秒），且只於膽汁（雄性）中檢測出。質子化的分子離子 爲m/z 661，比母體化合物高出192 amu。CID產物離子 光譜圖中的主要片斷爲m/z 485、467、342、324、165 和1C。m/ z 485的離子係由於分子離子脫去葡糖醛酸所 致。m/ z 4 6 7的離子係由於m/ z 4 8 5的離子脫去水所致 。m/z 3 42和3 24的離子係由連續脫去磺醯吡啶基團和 水所致。m/ Z 1 65的離子（類似於母體化合物的離子） 係由質子化的甲基苯氧基乙酸基團所致。m/z 145的離 子顯示羥基第三丁基苄基基團脫去水。根據上述數據， M13經鑑定爲（3— {[[4 -（2 -羥基〜i，〗 —二曱基—乙基 )一苄基]一（吡啶—3 —磺醯基）一胺基]一甲基苯氧 基）-乙酸葡糖苷酸。 -52- (48) (48)200302080

M13 代謝物M9 代謝物M9的質子化的分子離子爲m/ z 4 1 7，且只於 雌性鼠的尿液中檢測出。其HPL C的遲滯時間爲約π : 3 5 (分：秒）。質子化的分子離子爲m/ z 4 1 7，比母體化 合物少52 amu，顯示M9爲一斷裂的產物。M9之CID產 物離子光譜圖中的主要片斷爲m/z 319、160和145。m / z 3 1 9的離子（比母體化合物少9 8 a m u )顯示係由分子 脫除一個水分子和硫酸分子所致。m / z 1 4 5的離子（比 m/ z 417的母體化合物的離子少2 amu )顯示在斷裂期間 第三丁基苄基被羥基化且一個水分子被脫除。此外，此代 謝物與三氯化鈦（20%的磷酸溶液）的反應導致此代謝物 的遲滯時間增加約2分鐘，而所得之M + H +離子減少16 amu，表示此代謝物爲一 N -氧化物。根據上述數據，建 議Μ 9爲吡啶一 N -氧化物—3 -磺酸4 一（ 2 -羥基一 1，1 一一甲基一乙基）一苄醯胺之共軛硫酸酯。 •53- (49) (49)200302080

M9 代謝物M6 代謝物M6於HPLC的遲滯時間爲約11:23—12:37 (分：秒），且於排泄物、膽汁和血漿中檢測出。其質子 化的分子離子爲m/ z 5 6 5 (比母體化合物高出96 amu ) 顯示增加一個氧原子和硫酸基團。M6之CID產物離子光 譜圖中的主要片斷爲m/ z 48 5、467、3 42、3 24、165和 1 4 5。m / z 4 8 5和4 6 7的離子係由於分子離子連續脫去硫 酸和水所致。m / z 1 6 5的離子類似於母體化合物的離子 顯示甲基苯氧基乙酸基團未改變。z 3 42的離子（比 母體化合物所觀察到的離子高出1 6 amu )顯示第三丁基 苄基基團增加一個氧原子。z 3 24和145的離子比母 體化合物的光譜之對應的離子少2 amu，再次顯示第三丁 基苄基基團增加一個氧原子，且在裂斷時失去一個水分子 。根據上述數據，M6經鑑定爲（3 - {[[4 一（ 2-羥基— 1，1 一二曱基一乙基）一苄基]—(吡啶一 3 —磺醯基）一 胺基]一甲基} 一苯氧基）-乙酸之共軛硫酸酯。 -54- (50) (50)200302080

代謝物Μ 1 0 代謝物Μ10的質子化的分子離子爲m / ζ 401，且只 於排泄物和雌性鼠尿液中檢測出。其HPLC的遲滯時間爲 約13:26 (分：秒）。分子離子爲m/ ζ 401，比母體化 合物少68 amu，顯示其爲一斷裂的產物。M10之CID產 物離子光譜圖中的主要片斷爲m/z 303、160和145。m / ζ 3 0 3的離子（比質子化的分子離子少98 amu )顯示係 由分子脫除一個硫酸分子所致。ζ 1 45的離子（比m / z 4 1 7的母體化合物的離子少2 amu )顯示在斷裂期間 第三丁基苄基被羥基化且一個水分子被脫除。根據上述數 據，建議Μ 1 0的結構爲11比卩定—3 -磺酸4 一（ 2 —羥基— 1，1 一二甲基一乙基）一苄醯胺之共軛硫酸酯。

Μ10 55- (51) 200302080 代謝物Μ 1 1 代謝物Mil的遲滯時間爲約12:04 - 1 4:20 (分：秒

)，且發現於尿液和膽汁中，顯示其質子化的分子離子爲 m / z 3 3 5。m / z 3 3 5的離子（比母體化合物少 134 daltons )顯示其爲一斷裂的產物。Ml 1之CID片斷圖中 的主要片斷爲m/Z 289' 146和131。m/z 289的離子（ 比質子化的分子離子少46 amu )顯示存在有羧酸基團。m / z 1 3 1和1 46的離子可能分別係由羧基異丙基苄基和羧 基異丙基苄胺基基團所造成，且伴隨著甲酸的脫離。根據 上述數據，建議Μ 1 1的結構爲2 -甲基一 2 - { 4 —[(吡啶 一 3-礦_胺基）一甲基]—苯基丨—丙酸。

s

Μ11 代謝物M3 代謝物M3於HPLC的遲滯時間爲約12:33— 14:21 (分：秒）’且於膽汁（雄性）中檢測出。在m / ζ 4 9 9 顯示質子化的分子離子（比母體化合物高出30 amu)。 CID產物離子光譜圖中的主要片斷爲m/ z 4 53、3 5 6、 3 1 0、1 6 5和1 3 1。m/ z 1 6 5的離子類似於母體化合物的 離子顯示甲基苯氧基乙酸基團未改變。m / z 3 5 6的離子 -56- (52) (52)200302080 (比母體化合物所觀察到的離子高出3 0 amu )顯示增加2 個氧原子且失去2個氫原子。m/z 310和131係分別比 m / z 3 5 6和1 7 7的離子少4 6 amu，顯示羧酸基團的存在 。根據上述數據，M3經鑑定爲2 -（ 4 一 {[( 3 -羧甲氧 基一苄基）一（吡啶一 3 -磺醯基）—胺基]一甲基}苯基 )一 2-甲基—丙酸。

M3 代謝物M4 代謝物M4於HPLC的遲滯時間爲約13:2 0— 15:00 (分：秒），且於排泄物、膽汁、血漿和雌性尿液中檢測 出。其質子化的分子離子爲m/ z 48 5 (比母體化合物高 出16 amn) 。m/z 485的離子之CID產物離子光譜圖中 的主要片斷爲 m/z 467、342、324、165 和 145。m/z 467的離子係由於分子離子脫去水所致。m/ z 3 42的離子 顯示係由損失一個磺醯吡啶基團所致，接著失去一個水而 形成m/ z 3 24的離子。m/ z 165的離子類似於母體化合 物的離子係由質子化的曱基苯氧基乙酸基團所致。m / z 1 4 5的離子係由羥基第三丁基苄基基團失去一個水分子所 致。根據上述數據，M4經鑑定爲（3 — { [[4 -（ 2 -羥基 -57- (53) 200302080 一 1，1 一二甲基一乙基）一爷基]一 （D比β定一 3 -磺驢基） 一胺基]一甲基}一苯氧基）一乙酸。

/'ο M4 代謝物Μ 5 代謝物Μ 5於HP L C的遲滯時間爲約1 5 : 2 3 (分：秒 )，且發現於血漿和膽汁中。其質子化的分子離子爲m/ z 4 8 5 (比母體化合物高出16 amu) 。M5之CID產物離 子光譜圖中的主要片斷爲m/z 439、326、165和147。m / z 43 9的離子係由母體分子失去一個甲酸所致。z 3 26、I65和I47的離子類似於母體化合物的離子顯示甲 基苯氧基乙酸基團和第三丁基苄基基團未改變。根據上述 數據，M5經鑑定爲（3 - {[(4 一第三丁基一苄基）一（ 吡啶一 N -氧化物一 3 -磺醯基）一胺基]一甲基丨一苯氧基 )—乙酸。

-58- (54) 200302080 代謝物Μ 1 4 代謝物Ml 4於HPLC的遲滯時間爲約16:90 (分：

秒），且只發現於膽汁中。其質子化的分子離子爲m/ z 64 5 (比母體化合物高出I76 daltons)，顯示其爲葡糖 脊酸共轭物。m/z 645之CID產物離子光譜圖中的主要 片斷爲 m/z 469、423、413、326、165 和 147。m/z 469的離子係由母體分子失去一個葡糖醛酸所致。m/ z 423的離子係由母體分子失去一個甲酸所致。失去一個第 三丁基形成m/z 413的離子。m/z 326的離子係由失去 一個磺醯基吡啶基團所致。m / z 1 6 5的離子係由質子化 的甲基苯氧基乙酸基團所致。根據上述數據，Μ 1 4經鑑定 爲（3 - {[(4 一第三丁基一苄基）一（吡啶一 3 一磺醯基 )一胺基]一甲基} 一苯氧基）一乙酸葡糖普酸。

Μ14

代謝物Μ 1 2 代謝物Μ12於HPLC的遲滯時間爲約ι5:5〇 — ι7:5〇 (分：秒）’且發現於排泄物和膽汁中^其質子化的分子 離子爲m / ζ 48 5 (比母體化合物高出16 amu )。代謝物 M〗2之CID產物離子光譜圖中的主要片斷爲4 8 5、 -59- (55) (55)200302080 342、305、181、162 和 147。m/z 162 和 147 的離子類 似於母體化合物的離子’顯不第二丁基节基基團未改變。 m / z 1 8 1和3 4 2的離子比母體化合物光譜之對應的離子 (分別爲m / z 165和326)高出16 amu，顯示甲基苯氧 基乙酸基團增加一個氧原子。m/z 305係由失去羥基苯 甲基乙酸基團所致。根據上述數據，Μ 1 2經鑑定爲（5 -{[(4 一第二丁基一苄基）一（吼卩定一 ν -氧化物—3 -磺 醯基）一胺基]—甲基}一苯氧基）一乙酸。須明白的是， 當於申請案中使用此化學名稱時，苯環上之羥基的位置並 未指定’且此化學名稱係用以涵蓋所有經基的可能位置。

Μ12 (3— {[(4-第三丁基一苄基）一（吡啶__Ν一氧化 物—3 -磺醯基）一胺基]一甲基} 一苯氧基）一乙酸之代 謝途徑係總述於下列反應圖丨中。主要的氧化途徑係由於 第三丁基氧化形成羥基甲基代謝物Μ4 (雄性19.7%，雌 性6.5% ) 。Μ4進一步氧化成羧酸代謝物Mg (雄性 32·8%，雌性I.66%)或與硫酸共軛而形成代謝物Μ6 ( 雄性I2.7%，雌性36.2%)。其他次要的代謝物係由於吡 Π定環的Ν -氧化作用（MS )和甲基〜苯氧基乙酸基團之 -60- (56) (56)200302080 羥基化作用和N -脫烷基作用及繼之第二期共軛作用所致 。除了母體化合物之外，循環代謝物亦包含Μ4、M5和 M6。

反應圖 1: Sprague— Dawley 鼠（ 230— 240 g)經靜 脈投服以單一劑（15 mg/kg)之14C 一（ 3 — {[ ( 4 —第三 丁基一节基）一（吼卩定一 3 —擴醯基）一胺基]一甲基}一 苯氧基）一乙酸後之（3 - {[(4 一第三丁基一苄基）一（ 吡啶- N —氧化物一 3 -磺醯基）一胺基]一甲基} 一苯氧基 )一乙酸的代謝途徑。 -61 - (57) (57)200302080 鼠、狗、猴和人類之肝微粒體和肝細胞中的（3 — {[ ( 4 -弟二丁基一卡基）一（吼卩定一 N-氧化物一 3 -礦釀基） 一胺基]-甲基} -苯氧基）-乙酸之活體外代謝物的鑑定 (3 — {[(4 一第三丁基一苄基）—（吡啶一 N-氧化 物一 3 -磺醯基）_胺基]一甲基}一苯氧基）一乙酸廣泛 地於鼠、狗、猴和人類之肝微粒體和肝細胞中代謝。主要 的代謝途徑是第三丁基之氧化成醇的作用、吡啶基團的氧 化作用、及/或甲基苯氧基乙酸基團之N-脫烷基作用。 醇代謝物M4進一步地氧化成對應的羧酸M3。於肝細胞 中，M4與硫酸共軛。於狗的肝細胞中，甲基苯氧基乙酸 基團之芳族氧化反應形成一種代謝物M12。 目的 爲了檢測（3 - {[( 4 一第三丁基—苄基）一（吡啶一 N —氧化物—3 —磺醯基）一胺基]一甲基} 一苯氧基）一乙 酸於人、鼠、狗、和猴之肝微粒體和肝細胞中的代謝途徑 材料 放射標記的化合物 14C— (3 - {[(4 —第二丁基—卡基）一 （D 比 B定一 3-磺醯基）-胺基]-甲基} 一苯氧基）一乙酸（比活性（ specific activity) 4 · 3 6 m C i / m m ο 1 )顯示放射純度 > 9 9 % ，其合成方法如上所述。 -62- (58) (58)200302080

微粒體的培育 人類（HL — mix 12 )、鼠、狗、和猴之肝微粒體係利 用標準步驟藉由差別離心而製備。在使用前，將肝微粒體 置於冰上解凍，並以100 mM磷酸鉀（pH 7,4 )恢復成溶 液。將[14C]— (3— {[(4 -第三丁基一苄基）—（（3比卩定— 3 - fe醯基）一胺基]—甲基}—苯氧基）—乙酸溶於1〇〇 mM磷酸鉀（PH 7.4 )使最終濃度爲20 μΜ。樣品與微粒 體（CYP 4 5 0; 0.5 μΜ)於搖動的水浴中在37°C下培育3 分鐘。藉由在每1 ml培育混合物中加入1〇〇 μί輔因子（ 1 . 1 mM NADPH，1 0 mM MgCl2 )而開始進行培育。在30 分鐘後加入等體積量的冰乙腈而終止培育。 肝細胞的培育 人類肝細胞係爲3個肝的混合物。鼠和猴和狗肝細胞 係得自 Sprague Dawley 鼠（12 個肝）、Cynomolgus 猴（ 1個肝）和獵狗（2個肝）。將低溫保存的肝細胞懸浮於 含10% FBS之William氏E培養基中以使每ml含有2百 萬之活的細胞，並在開始培育時及之後的每一個小時供應 95/5 02/C02 氣體。將 20 μΜ (3— {[(4- 第三丁基 —爷基）一（唯II定—3 -礦釀基）一胺基]一甲基} 一本興 -63- (59) (59)200302080 基）一乙酸加至2 5 m 1錐形燒瓶後，加入2.5 m 1肝細胞懸 浮液，並於搖動的水浴中在3 7 °C下培育4小時。 樣品分析 定量評估 代謝物的定量分析係藉由使用β - RAM ( IN/ US， W i η — f 1 o w )測量個別不同的HP L C譜線的面積而得。β — RAM於CPM中提供積分的譜線圖像列印資料以及放射標 馨 記的物質之百分比。β - RAM係使用固態閃爍槽進行。 活體外組織之代謝物的萃取 藉由於培養基內加入等體積量的冰乙腈而終止培育， 進行超音波振盪及在3 2 0 0 rp m下離心1 0分鐘。移出上淸 液並在氮氣下蒸發至乾燥。殘餘物於乙腈：水（5 0 : 5 0 ) 中恢復成液體，將一部份液體（5 0 — 90 μΐ )注入HPLC管 柱上以進行分析。 _ 高效能液相層析法 HPLC系統包含HP — 1 100溶劑輸送系統、HP — 1 100 薄膜除氣器' HP — 1 100自動注射器（Hewlett Packard ) 和IN / U S放射活性監測器（β 一 R AM )。層析法係於 YMC AQ (C— 18)管柱（4.6 mm X 150 mm，3 μηι) (

Waters，Milford, ΜΑ)上進行。移動相先爲含甲酸之10 mM醋酸銨pH 3 . 5 (溶劑A )和乙腈（溶劑B )。溶劑 -64- (60) 200302080 輸送的階式梯度程式如下所示： 時間（分鐘） 0-3 3-25 25— 26 26- 29 29—31 3 1-35 溶劑A ( % ) 90 3 5 10 10 90 90 溶劑B ( % ) 10 65 90 90 10 10

在下一次注射之前令系統平衡1 〇分鐘。在全部的分 析過程中維持流速爲1 .〇 ml/分。 質譜法 代謝物的鑑定係利用配備有 API - 2電灑界面之 Finnigan TSQ 7 000三重式四極質譜儀。分離出約50 μΐ/ min之HPLC管柱流出物並將之導入API界面，將其餘的 流出物導入β - RAM的流動槽。利用MS數據收集系統以 真實時間類比訊號的形式記錄β - RAM的反應。利用由 M S至放射活性檢測器之流體的閉鎖體積（相當於約〇. 2 分鐘之閉鎖時間）而區分由放射活性和M S檢測器所收集 的數據。當質譜儀於正離子模式中收集數據時，電灑電壓 爲—4.5 eV。撞擊引發的游離（CID )硏究係在撞擊能量 爲3 0 - 3 5 eV和撞擊氣體厚度爲約2. 1 m To rr的情況下於 -65- (61) (61)200302080 Q 2中以氬氣進行。 結果和討論 微粒體的轉換率 (3— {[(4-第三丁基一苄基）—（吡啶—3 -磺醯 基）-胺基]-甲基苯氧基）-乙酸於肝微粒體的轉換 率最大爲老鼠（94.3%)、其次是人類（92.8%)、猴（ 74.9% )和狗（41.6% )。微粒體培養基之代表性HPLC放 射層析圖示於圖1。代謝物係利用線上放射活性計數而定 量，相對百分比示於表1。 肝細胞的轉換率 (3 - {[(4 一第三丁基一苄基）一（吡啶一 3 —磺醯 基）一胺基]一甲基}一苯氧基）一乙酸與老鼠、狗、猴和 人類的肝細胞一起培育，四個物種之相對的轉換率是老鼠 =猴 >人類 >狗。肝細胞培養基中之代謝物的相對百分比示 於表2。肝細胞培養基之代表性HPLC放射層析圖示於圖 2 ° 利用LC/MS/MS分析（3 - {[(4 —第三丁基一苄 基）一（吡啶一 3 -磺醯基）一胺基]一甲基} 一苯氧基） -乙酸的裂斷作用 (3 — {[(4~~第三丁基一韦：基）—（哦卩定一 3 —礦酿 基）一胺基]—甲基}—苯氧基）一乙酸於HPLC的遲滯時 間爲1 7 — 1 7 : 2 8 (分：秒），且其質子化的分子離子爲 -66- (62) (62)200302080 m/z 469。m/z 469的離子之C ID產物離子光譜圖中的 主要片斷爲 m/z 423、413、326、165 和 147 (圖 3) 。m/ z 423的離子係由分子失去一個甲酸所致。失去一 個第三丁基形成m/z 413的離子。m/z 326的離子係由 失去一個磺醯基吡啶基團所致。m / z 1 6 5的離子係由質 子化的甲基苯氧基乙酸基團所致，而m/z 147的離子係 由第三丁基罩鑰（tropolium)離子所致。（3— {[ ( 4一第 二丁基一；基）一 （D比陡一 3 -磺醯基）—胺基]一甲基} 一苯氧基）-乙酸之建議的裂斷作用係如下所示：

代謝物的鑑定 β 代謝物Μ21 代謝物Μ2 1之質子化的分子離子爲m/ ζ 3 21，其於 HPLC的遲滯時間爲約1〇:58 (分：秒），發現於鼠、狗 和猴的肝細胞中。m / z 3 2 1的分子離子建議母體化合物 被N-脫苄基化及羥基化。M2 1之CID產物離子光譜圖中 的主要的離子爲m / ζ 178、160、145、133和78 (圖4 )。m / ζ 1 7 8的離子係由裂斷磺醯胺鍵所致。m / ζ 1 7 8 的離子失去水而形成ζ 160的離子。m/ ζ 145的離子 -67- (63) 200302080 比m / z 147的母體化合物少2 amu，表示母體分子之第 三丁基被羥基化。m / z 1 7 8的離子係由吡啶環之電核安 定作用所致。根據上述數據’ 的結構經鑑定爲吡啶一 3 —磺酸4— (2 —羥基—1，1—二甲基〜乙基）—苄醯胺。

__/ OH

Λ Μ21 代謝物Μ 1 1 代謝物Mil於HPLC的遲滯時間爲約9:48— 10:48 (分：秒），其質子化的分子離子爲m/ z 3S5。發現於 鼠和猴的肝微粒體中。m/ z 3 3 5的分子離子（比母體化 合物少134 dal tons )顯示其爲一斷裂的產物。Ml 1之CID 片斷圖中的主要片斷爲m/z289、146和131 (圖5)

。m/ z 289的離子（比質子化的分子離子少46 amu )顯 示存在有羧酸基團。m/ z 131和 的離子可能係由改 質的苄基和第三丁基苄胺基團所造成，且同時伴隨著甲酸 的脫離。根據上述裂斷圖案和分子離子的數據’建議Μ 1 1 係由苯氧基乙酸基團的Ν-脫苄基反應及繼之第三丁基氧 化成羧酸的作用而形成。因此，其結構經鑑定爲2 -甲基 一 2— {4—[(吡啶—3 一磺醯胺基）一甲基]—苯基丙 酸。 - 68- (64) (64)200302080

M11 代謝物M2 代謝物M2於HPLC的遲滯時間爲約12:24 (分：秒 )，其質子化的分子離子爲m/ z 501 (比母體化合物少 書 3 2 amu ) 。Μ2發現於鼠和狗的肝細胞中。Μ2主要片斷爲 m/z483、342、324、165 和 145 (圖 6) °m/z483 的 離子係由於分子脫去水所致。m / z 3 4 2的離子係由脫去 磺醯吡啶基團所致，繼之脫去水而形成m/ z 3 24的離子 。m / z 1 6 5的離子（類似於母體化合物的離子）係由甲 基苯氧基乙酸基團所致。m / z 1 4 5的離子係由改良的第 三丁基苄基基團脫水所致。根據上述數據，M2經鑑定爲 二羥基C 3 — {[( 4 一第三丁基苄基）一（吡啶一 3 一磺醯 · 基）一胺基]一甲基}一苯氧基）一乙酸。須明白的是，當 此化學名用於本案時，吡啶環上的羥基的位置並未指定， 且其化學名包含羥基之所有可能的位置。

M2 -69- (65) (65)200302080 代謝物M3 代謝物M3於HPLC的遲滯時間爲約11:55— ]3:54 (分：秒），其質子化的分子離子爲m/z 499 (比母體 化合物多3 〇 amu )。發現於鼠、猴和人類的肝微粒體及 全部物種的肝細胞內。M3之 CID片斷圖中的主要片斷爲 m/z 453、356、310、 177、165 和 131 (圖 7) 〇m/z 1 6 5的離子（類似於母體化合物的離子）顯示其甲基苯氧 基乙酸基團未改變。m / z 3 5 6的離子比母體分子所觀察 到的離子高出3 0 amu，表示增加2個氧原子和失去2個 氫原子。m / z 3 1 0和1 3 1的離子係分別由m / z 3 5 6和 177的離子失去46 amu所致，表示竣酸基團的存在。根 據上述數據，代謝物M3經鑑定爲羧基（3 - {[( 4 一第三 丁基苄基）—（吡啶—3 —磺醯基）一胺基]一甲基} 一苯 氧基）—乙酸。

代謝物M4 代謝物M4於HPLC的遲滯時間爲約13:29 (分：秒 )，其質子化的分子離子爲m/z 485 (比母體化合物高 出1 6 amu )。發現於鼠、猴、狗和人類的肝微粒體及人 類肝細胞內。其C ID片斷圖中的主要片斷爲m / z 4 6 7、 -70- (66) (66)200302080 3 4 2、3 3 5、3 2 4、1 6 5 和！ 4 5 (圖 8 ) 。m / z 4 6 7 係由分 子失去水所致。z 3 42的離子係由脫去磺醯吡啶基團 所致，繼之脫去水而形成m / z 3 2 4的離子。m / z 1 6 5的 离隹子（類似於母體化合物的離子）係由質子化的甲基苯氧 基乙酸基團所致。m / z 1 4 5的離子係由改良的第三丁基 ;基基團脫水所致。根據上述數據，M4經鑑定爲羥基（3 一 {[( 4 一第三丁基苄基）一（吡啶一 3 一磺醯基）一胺基 ]一甲基}—苯氧基）一乙酸。須明白的是，當此化學名用 於本案時’吡啶環上的羥基的位置並未指定，且其化學名 包含羥基之所有可能的位置。

代謝物Μ 1 9 代謝物Ml 9於HPLC的遲滯時間爲約14:40 (分： 秒），其質子化的分子離子爲m / z 3 2 1 (比母體化合物 少M8 amu )。發現於全部物種的微粒體內。Ml 9之CID 片斷圖中的主要片斷爲m / z 321、265、162和147 (圖 9)。母體分子的CID片斷圖中觀察到m/z 162和147 的離子，表示苯基第三丁基基團未改變，且母體分子已進 行N -脫烷基化反應。m/z 265的離子係由失去第三丁 基基團所致，表示吡啶基團發生氧化反應。根據上述數據 -71 - (67) (67)200302080 ，Μ 1 9經鑑定爲5 —經基—哦D定—3 —擴酸4 —第二丁基— 苄醯胺。須明白的是，當此化學名用於本案時，吡啶環上 的羥基的位置並未指定，且其化學名包含羥基之所有可能 的位置。

M19 代謝物M6 代謝物M6於HPLC的遲滯時間爲約1 1 :52 (分：秒 )，顯示其質子化的分子離子爲Π1 / Z 5 6 5，比母體化合 物局96 amu，表示多一個氧原子和和硫酸基團。M6發現 於鼠、猴和人類的肝細胞內。M6之CID片斷圖中的主要 片斷爲 m/z 485、46 7、342、324、165 和 145 (圖 10 )。m / z 4 8 5和4 6 7的離子係由於質子化的分子離子脫 去硫酸和水所致。m / z 1 6 5的離子類似於母體化合物的 離子顯示甲基苯氧基乙酸基團未改變。m/z 342的離子 (比母體化合物所觀察到的離子高出1 6 amu )顯示第三 丁基苄基基團增加一個氧原子。m/z 324和145的離子 比母體化合物的光譜之對應的離子少2 amii，再次顯示第 三丁基苄基基團增加一個氧原子，且在裂斷時失去一個水 分子。根據上述數據，M6經鑑定爲羥基一（3 一 { [( 4 一 弟二丁基一卡基）一（卩比卩定一 3 -磺醯基）一胺基]一甲基 - 72- (68) 200302080 } -苯氧基）-乙酸之共軛硫酸酯。

代謝物M5於HPLC的遲滯時間爲約15:29 (分：秒 )，其質子化的分子離子爲m/ z 485 (比母體化合物高 出1 6 a m u ) 。Μ 5發現於鼠、狗、猴和人類的肝微粒體。 m/z 4 8 5之CID產物離子光譜圖中的主要片斷爲m/z 439、 326、 165 和 147 (圖 11) °m/z 326、165 和 14 7

的離子類似於母體化合物的C ID光譜之離子，顯示苯基 第三丁基和苯氧基乙酸基團未改變。m/z 439的離子比 母體化合物所觀察到的離子高1 6 a m u，顯示吡啶基團被 羥基化。此外，以三氯化鈦處理此代謝物導致在1 5 . 3分 鐘之譜線消失，導致光譜圖中之（3 - {[( 4 一第三丁基一 苄基）一（吡啶—3 -磺醯基）一胺基]一甲基} 一苯氧基 )-乙酸之相對面積增加，顯示M5爲母體分子的N -氧 化物。根據上述數據，Μ 5經鑑定爲（3 - {[( 4 一第三丁 基一苄基）一（吡啶一 3 -磺醯基）一胺基]一甲基} 一苯 氧基）一乙酸Ν —氧化物。 -73- (69) 200302080

代謝物Μ 1 2 代謝物Ml 2於HPLC的遲滯時間爲約16:01 ( 秒），且只發現於狗的肝微粒體中。其質子化的分3 爲 m/z 485 (比母體化合物高出16 amu )。代 M12之CID產物離子光譜圖中的主要片斷爲m/z 342、305、181' 162 和]47 (圖 12) 。m/z 162 习 的離子類似於母體化合物所觀察到的離子，顯示第三 苄基基團未改變。m/z 181和 342的離子比母體仙 所觀察到的離子（分別爲m / z 1 6 5和3 2 6 )高出]< ，顯示甲基苯氧基乙酸基團增加一個氧原子。m / 係由失去苯氧基乙酸基團所致。根據上述數據，Μ 1 2 定爲羥基（3 — {[(4 一第三丁基一苄基）—（吡啶 石Η釀基）一胺基]—甲基}一苯氧基）一乙酸。須明白 ，當於申請案中使用此化學名稱時，苯環上之羥基的 並未指定，且此化學名稱係用以涵蓋所有羥基的可能 :分： 1離子 :謝物 48 5、 Ώ 147 ΐ 丁基 :合物 5 amu z 3 05 經鑑 —3 — I的是 ί位置 !位置 -74- (70) 200302080

代謝物M20 代謝物Μ 2 0於H P L C的遲滯時間爲約1 9 : 4 5 (分：

秒），其質子化的分子離子爲m / z 3 0 5 (比母體化合物 少1 64 amu )。代謝物M2〇之CID產物離子光譜圖中的 主要片斷爲m/ z 162和147 (圖13 )。母體化合物的 C ID產物離子光譜圖中可觀察到上述離子，因此，顯示（ 3 — {[(4 —第三丁基一干：基）—（吼卩定—3 —礦醯基）一 胺基]一甲基} 一苯氧基）-乙酸進行N -脫烷基反應如此 而形成m/ z 3 0 5的裂斷代謝物。根據上述數據，M20經 鑑定爲吡啶- 3 -磺酸4 一第三丁基-苄醯胺。

(3 - {[(4 一第三丁基一苄基）一（吡啶一 3 —磺醯 基）—胺基]一甲基} 一苯氧基）一乙酸廣泛地於鼠、狗、 猴和人類之肝微粒體和肝細胞中代謝。主要的代謝途徑是 第三丁基之氧化成醇的作用、吡啶基團的氧化作用、及/ -75- (71) 200302080 或甲基苯氧基乙酸基團之N -脫烷基作用。醇代謝物M4 進一步地氧化成對應的羧酸M3。於肝細胞中，M4與硫酸 共軛。於狗的肝細胞中，甲基苯氧基乙酸基團之芳族氧化 反應形成一種代謝物Μ 1 2。 表1 .鼠、狗、猴和人類之肝微粒體中之（3 - {[( 4 -第三丁基一苄基）一（吡啶一 3 -磺醯基）一胺基]一甲基 } -苯氧基）-乙酸的代謝物的百分比

代謝物 放射活性百分比 編號 RT Μ/ ζ 鼠 狗 猴 人類 Mil 9:48 Λ Λ Γ J J J 20.7 — 7.97 — M3 11:55 499 56.2 — 8.80 50.0 M4 13:29 485 4.38 11.5 47.3 26.5 Μ 1 9 14:40 3 2 1 3.26 3.61 4.37 7.06 Μ5 15:29 485 7.80 20.1 5.2 1 — 母體分子 17:00 469 5.70 5 8.4 25.2 7.16 Μ20 19:45 3 05 — 1.96 — — 母體分子是 (3 - {[ (4- -第三丁基 -苄基 )一（ 吡啶一 3 一擴醯基） 一胺基] -甲 基} 一苯氧基）一 乙酸； RT是遲 滯時間，以分：秒表示。 -76- (72) 200302080 表2.鼠、狗、猴和人類之肝細胞中之（3 - {[ ( 4 一第 三丁基一苄基）一（吡啶—3 -磺醯基）一胺基]一甲基} -苯氧基）-乙酸的代謝物的百分比 代謝物 放射活性百分比 編號 RT Μ/ ζ £3 風 狗 猴* 人類* M2 1 10:58 32 1 8.91 7.92 4.53 — M6 11:52 565 9.55 — 52.9 29.6 M2 12:24 5 0 1 15.1 6.59 — — M3 13:54 499 5 7.3 12.3 29.9 17.8 M4 13:29 485 — — — 4 1.2 Μ 1 2 16:01 485 — 15.0 — — 母體分子 17:28 469 — 5 1.4 — 5.68

*猴和人類肝細胞樣品係在使用相同的梯度和管柱的情況 下以HPLC分析，惟移動相含有醋酸銨（10 mM ) ，pH 5.0。遲滯時間係在上述特定梯度的情況下所得者。 -77- (73) (73)200302080

反應圖2，活體外培育後1 4 C 一 （ 3 - {[ ( 4 —第三丁 基一苄基）一（吡啶—3 -磺醯基）一胺基]一甲基丨一苯 氧基）-乙酸於肝微粒體和肝細胞中的可能代謝途徑。 利用重組合的人類P - 4 5 0製備代謝物的方法 重組合的人類細胞色素P — 4 5 0異構型r C YP 3 A4、 rC YP3 A5 和 rCYP2C8 係購自 Gentest ( Woburn, Mass ) 。各個培養基中所用之表現的rCYP的量爲約1 mg蛋白 質/毫升培養基。在使用前，將肝微粒體置於冰上解凍， 並以含有（3— {[(4 —第三丁基—苄基）一（吡啶—3-磺醯基）一胺基]一甲基}一苯氧基）—乙酸（50 μΜ)之 100 mM磷酸鉀（ρΗ 7.4 )恢復成溶液。樣品與各個重組 -78- (74) (74)200302080 合的CYP於搖動的水浴中在37°C下培育3分鐘。藉由在 每1 ml培育基中加入1〇〇 pL輔因子（1.1 mM NADPH， 1 0 m Μ M g C 12 )而開始進行培育。培育6 0分鐘後，以醋 酸將樣品酸化至pH 3.0，並以等量的甲基第三丁基醚（ MTBE )萃取。在氮氣下蒸發MTBE層直到乾燥，以1〇 m Μ醋酸銨：乙腈（1 : 1 )使恢復成溶液以供L C / M S分析 Ρ - 4 5 0代謝物之LC / MS結構鑑定 HPLC系統包含HP — 1 100溶劑輸送系統、HP - 1 100 薄膜除氣器、HP — 1100自動注射器（Hewlett Packard) 和IN / U S放射活性監測器（β - R AM )。層析法係於 YMC ODS AQ (C 一 18)管柱（4.6 mm x 150 mm，3 μηι )上進行。移動相先爲含10 mM醋酸銨pH 5.0之醋酸（ 溶劑A )及乙腈（溶劑B )。代謝物的鑑定係利用配備有 電灑界面之 Micromass Q — Tof 2 ( Beverly，ΜΑ)質譜儀 。分離出約50 μΐ/ min之HPLC管柱流出物並將之導入 API界面，將其餘的流出物導入β - RAM的流動槽。利用 M S數據收集系統以真實時間類比訊號的形式記錄β - RAM 的反應。利用由M S至放射活性檢測器之流體的閉鎖體積 (相當於約〇. 1分鐘之閉鎖時間）而區分由放射活性和 M S檢測器所收集的數據。當質譜儀於正離子模式中收集 數據時，電灑電壓爲一 3 eV。撞擊引發的游離（CID )硏 究係在撞擊能量爲2 0 — 3 0 eV和開口壓力爲約5 X 1 0一 5 -79- (75) 200302080 t 〇 rr的情況下於Q 2中以氬氣進行。在整個分析過程中使 用內部鎖定質量（奎尼定（quinidine) ，m/z 325.1916 )，其係藉由一指引的Lock spray而使每隔5分鐘將校正 物導入質譜儀中。 代謝物M22; (3— {[[4 - （1,2 —二羥基一 1—甲基一乙基

)一苄基]一（吡啶一 3 -磺醯基）一胺基]一甲基}—苯氧 基）一乙酸 代謝物M2 2於HPLC的遲滯時間爲14分鐘，其質子 化的分子離子爲m/ z 4 8 7 (比母體化合物高出18 amu)

。M22之CID產物離子光譜圖中的主要片斷爲m/z 469 、451、423、395、335、326、165 和 147 (圖 14) 〇 m / z 1 6 5的離子類似於母體化合物的離子顯示苯氧基乙酸 基團未改變。m/ z 469和451的離子係由母體分子連續 失去二個1 8 a m u所致，表示失去2個水分子。由高解析 質譜光譜（Q - Tof )所得之經驗式數據暗示經驗式爲 C24H27N2 07 S。根據上述數據及LC-NMR數據的支持， M22經鑑定爲（3 - {[[4— (1，2 -二經基—1—甲基一乙基 )一节基]一（哦卩定一 3 —擴醯基）一胺基]一甲基} 一苯氧 基）一乙酸。 -80- (76) 200302080

OH 代謝物M23; (3 - {[[4— (1—羥基一 1—甲基—乙基） 一苄基]一（吡啶一 3 -磺醯基）一胺基]—甲基} 一苯氧基 )—乙酸 代謝物M2 3於HPLC的遲滯時間爲I6.9分鐘，其質 子化的分子離子爲hi/ z 47 1 (比母體化合物高出2 amu )。M2 3之 CID產物離子光譜圖中的主要片斷爲m / z 453、335、310、165 和 131 (圖 15) 165 的離 子類似於母體化合物的離子顯示苯氧基乙酸基團未改變。 m/z 453的離子係由母體分子失去18 a mu所致，表示失 去1個水分子。m/ z 3 10和13 1的離子比母體化合物所 觀察到的離子少1 6 amii，顯示一個甲基基團被一個水分 子取代而接者在裂斷的過程中失去該水分子。根據上述數 據及LC 一 NMR數據的支持，M23經鑑定爲（3 — {[[4 —( 1 一羥基—1 一甲基一乙基）一苄基]一（吡啶一3一磺醯基 )一胺基]一甲基}一苯氧基）一乙酸。 -81 - (77) 200302080

代謝物M24; (3— {[[4— (1，1 一二甲基—2—酮基—乙基 )一苄基]一（吡啶一 3 —磺醯基）—胺基]一甲基}—苯氧 基）—乙酸 _ 代謝物M24於HPLC的遲滯時間爲18.6分鐘，其質 子化的分子離子爲z 48：3 (比母體化合物少14 amn ) 。M24之CID產物離子光譜圖中的主要片斷爲m/ z 483 、437、409、340、 165 和 161 (圖 16) 〇m/z 423、

3 4 0和1 6 1的離子比母體化合物所觀察到的離子高出1 4 a m u，顯示增加一個氧原子且同時失去2個氫原子。此代 謝物之高解析質譜光譜得分子量爲4 8 3 . 1 5 9 0及經驗式爲 C25H27N2〇6S。根據上述數據及 LC — NMR數據的支持， M24經鑑定爲（3—{[[4— (1，1—二甲基—2 —酮基—乙基 )—;基]一（吼n定一 3 -擴醯基）一胺基]一甲基}一苯氧 基）—乙酸。

-82- (78) 200302080 代謝物Μ 2 6 ; C 3 — {[ ( 4 —羁丙烯基—苄基）（吡啶一 3 -磺醯基）一胺基]一甲基}一苯氧基）一乙酸

代謝物M26於HPLC的遲滯時間爲22分鐘，其質子 化的分子離子爲πι/ z 4 5 3 (比母體化合物少1 6 amu )。 M26之CID產物離子光譜圖中的主要片斷爲m/ z 4 5 3、 407、310、165 和 131 (圖 17) °m/z 165 的離子類似 於母體化合物所觀察到的離子顯示苯氧基乙酸基團未改變 。m/ z 4 07、3 10和13 1的離子比母體化合物所觀察到的 離子低16 amu，暗示該16 amu單位係由於失去第三丁基 基團所致。此代謝物之高解析質譜光譜得分子量爲 4 5 3.1 4 7 8及建議的經驗式爲C”H27N205 S。上述數據和此 代謝物之LC - NMR數據與末端烯基之形成相符合，爲（ 3 — {[( 4 -異丙烯基一苄基）一（吡啶一 3 -磺醯基）一 胺基]一甲基} 一苯氧基）一乙酸。

合成流程 下列製備例係爲製備實例1和2化合物時所用之中間 物的合成方法。 製備例1 -83- (79) (79)200302080 { 3 - [(吡啶一 3 -磺醯基胺基）一甲基]一苯氧基} 一 乙酸第三丁酯

步驟A (3 -甲醯基-苯氧基）一乙酸第三丁酯 將羥基苯甲醛（5.00 g5 40.9 mmol )於 DMF (40 m L )所形成的溶液加至1 Μ之第三丁醇鉀的第三丁醇溶 液（40.9 mL，40.9 mmol)中。攪拌反應2分鐘及加入溴 乙酸第三丁酯（6.61 mL，40.9 mmol)。攪拌反應1小時 ，及加入2 0 0 m L水使反應驟停。產物以e t Ο A c萃取，以 水沖洗有機層，以硫酸鎂乾燥，過濾及在真空下濃縮。於 矽膠上經快速層析純化（9 : 1己烷：Et Ο Ac )，得標題化 合物，爲透明油狀物（3 . 5 3 g )。 ]H NMR ( 400MHz ^ CDC13) 5 9.94 ( s，1H)， 7.48(m，2H) ，7.32(S，1H) ，7.21(m，lH)， 4.56 ( s，2H ) ，1 .45 ( s，9H )。

步驟B

[3 -（羥亞胺基一甲基）-苯氧基]一乙酸第三丁酯 於由（3 —甲醯基—苯氧基）—乙酸第三丁酯（2〇5 g，8.68 mmol)於MeOH (30 mL)所形成的溶液中加入 N Η 2 Ο Η * HC1 (0.66 g， 9.54 mmol)和吼啶（3.5 mL5 43.4 mmol )，並攪拌反應2小時。在真空下除去甲醇， 殘餘物以E t Ο A c和1 N H C 1稀釋。分層並以e t Ο A c沖洗 -84- (80) (80)200302080 水層。合倂的有機層以硫酸鎂乾燥、過濾及在真空下濃縮 ，得標題化合物（1 .99 g )。 ]H NMR ( 400MHz ^ CDC13) δ 8.07 ( s，1 Η )， 7.2 3 — 7.2 8 ( m，2H ) ，7. 12 ( s，1H )，

6.93(d，lH) ，4.51(s，2H) ，1.46(s，9H) 0 步驟C (3 —胺甲基一苯氧基）一乙酸第三丁酯 在由[3 — （羥亞胺基一甲基）一苯氧基]—乙酸第三 丁酯（2.25 g，5.96 mmol)於 EtOH (10 mL)所形成的 溶液中加入由Raney鎳（約1 g，先以水再以EtOH沖洗 )於100 mL乙醇所形成的溶液。移置時需要額外的EtOH (90 mL )。加入氫氧化錢（10 mL)，混合物在45 psi H2下振盪4小時。利用Celite® (矽藻土）過濾而除去 觸媒，濃縮溶液至得澄淸的油狀物。於矽膠上快速層析純 化（96.5/3.5/0.1 至 9/1/0.1 CH2Cl2/MeOH/ NH4〇H )，得標題化合物，爲黃色油狀物。 ]H NMR ( 4 00MHz ^ CDC13) 5 7.23 ( m ? 1H )， 6.92(m，2H) ，6.72(d，lH) ，4.50(s，2H)， 3.82(s，2H) ，：1.96(m，2H) ，1.46(s，9H)；

MS 2 3 8 ( M + 1 ) 0 步驟D { 3 - [(吡啶—3 -磺醯基胺基）—甲基]—苯氧基}—乙酸 -85 - (81) 200302080 第三丁酯 在0 °C下於由（3 -胺甲基一苯氧基 酯（ 296 mg5 1.25 mmol)於 CH2C12 所开 吡啶—3 —磺醯氯鹽酸鹽（279 mg，1.31 入 Et3N (0.36 ml, 2.6 mmol )。反應在 時，接著於反應中加入水和飽和碳酸氫鉀 液以使反應驟停。水溶液經CH2C12沖汐 有機溶液經硫酸鎂乾燥，過濾及濃縮，箱 化（1 : 1己烷：EtO Ac )得標題化合物爲 mg )。 lH NMR ( 400MHz ^ CDC13) 5 9.04 8.75(m，lH) ，8.09(d，lH) J 7.44 i 7.15(m，lH) ，6.76(m，3H) 5 5.23 4.44(s，2H) ，1.46(d，2H) ，1.47( M S 3 7 9 ( M + 1 ) 〇 製備例2 2 - （4 —溴甲基一苯基）一 2一甲基一丙

步驟A 2 一甲基一2_對甲苯基一丙酸乙酯

NaH (60重量。/。，於油中，9 g DMF沖洗，並加入新鮮的DMF (175 冷卻至（TC，先加入Mel (6.1 mL，98 )一乙酸第三丁 3成的溶液中加入 m m ο 1 )及繼之加 室溫下攪拌24小 I水溶液之1 : 1溶 i ( 3 X )，合倂的 【中等壓力層析純 白色固體（3 69.5 (s，1H )， m，1 Η )， (b s，1 Η )， s，9H ); 酸乙酯 ，9 8.2 m m ο 1 )經 mL )。將混合物 2 m m ο 1 )及繼之 -86- (82) (82)200302080 加入由對甲苯乙酸乙酯（5_0 g, 2 8.0 5 mmol )於DMF ( 1 5 mL )所形成的溶液。反應在室溫下攪拌4 8小時。加入 水，水層以E t Ο A c ( 3 x )沖洗。合倂的有機溶液經水（ 4x )和飽和碳酸氫鈉水溶液（lx )沖洗。有機溶液經乾燥 (MgS04 )、過濾及濃縮。經中等壓力層析純化（95:5己 烷：EtOAc)得2 —甲基—2 —對甲苯基—丙酸乙酯（i.2g )° NMR ( 400MHz ^ CDC13 ) δ 7.21 ( d，2H)， 7.11 (d，2H) ，4.10(q，2H) ，2.31(s，3H)， 1 . 54 ( s，6H ) ，1 . 17 ( t，3H ) 〇

步驟B 2 — （4 —溴甲基一苯基）—2—甲基一丙酸乙酯 在由2 —甲基一 2 —對甲苯基—丙酸乙酯（263 1.27 mmol)和 N—溴琥珀醯亞胺（272 mg，153 mm〇1) 於CC14 ( 1 5 mL· )所形成的溶液中加入i〗，—偶氮雙（ 環己烷甲腈）（1 5·5 mg，〇.〇6 mmol )。反應經回流加熱 1小時’並以水和ClCh稀釋。分層後，水層以CH2C12 沖洗（3 X ) ’合倂的有機溶液經乾燥（Mg S 04 )、過濾及 濃縮。經中等壓力層析純化（95 : 5己烷：EtO Ac )得2 — (4 一溴甲基一苯基）—2 —甲基—丙酸乙酯（354 mg)。 NMR ( 400MHz，CDC13) 5 7.31 ( m，4H)， 4.47(s’2H) ’4.1〇(q，2H)，i.54(s，6H)， 1 . 1 7 ( t，3H ) 〇 -87- (83) (83)200302080 製備例3 [2 - （4 —溴甲基一苯基）一2-甲基一丙氧基]一第三丁 基一二甲基一甲矽烷

步驟A 2-甲基一2 —對甲苯基一丙一 1 一醇 在〇°C下，在由2 —甲基一 2 —對甲苯基一丙酸乙酯（ 510 mg，2.47 mmol)於THF ( 1 〇 m L )所形成的溶液中 加入氫化鋁鋰（1 Μ之Et20溶液，2.6 mL，2.6 mmol )。 反應經攪拌〇. 5小時，於反應中連續加入水（〇. 1 mL )、 15% N a Ο Η ( 〇 . 1 m L )和水（0.3 m L )而使反應驟停。反 應經Et 0 Ac稀釋、乾燥（Mg S04 )、過濾及濃縮，得2 — 甲基一 2—對甲苯基—丙一1—醇（405 mg)。 】H NMR ( 400MHz，CDC13 ) 5 7.27 ( d，2H)， 7.15(d，2H) ，3.58(s，2H) ，2.32(s，3H)， 1 .3 1 ( s，6H )； M S 1 6 5 ( M + 1 ) 〇

步驟B 第二丁基—一甲基一 （2 —甲基一 2—對甲苯基一丙氧基） 一甲矽烷 在由2 —甲基一 2 —對甲苯基一丙—1—醇（405 mg， 2.4 6 mmol )於DMF ( 5 mL )所形成的溶液中加入咪唑 ( 3 3 5 mg, 4.92 mmol )，及繼之加入第三丁基二甲基甲矽 -88- (84) (84)200302080 院基氯（4 6 5 m g，3.0 8 m m ο 1 )。反應經攪拌2 4小時後加 入水，水層溶液經以EtOAc沖洗（。合倂的有機溶 液經水沖洗（4x )。有機溶液經乾燥（MgS〇4 )、過濾及 濃縮。經中等壓力層析純化（己烷）得第三丁基一二甲基 —(2-甲基—2 -對甲苯基—丙氧基）—甲矽烷（619 mg )° 'H NMR ( 400MHz，CDC13 ) δ 7·26 ( d，2H)， 7.1〇(d，2H) ，3.49(s，2H) ，2.31(S，3H)， 1.27(s，6H) ，0.85(s’9H) ，-0.06(s，6H) 〇

步驟C

[2 - （4 一溴甲基—苯基）一 2-甲基一丙氧基]—第三丁 基一二甲基一甲矽烷 標題化合物係根據製備例2步驟B所揭示的方法以第 三丁基一二甲基一 （2 -甲基一 2-對甲苯基—丙氧基）一 甲矽烷（3 9 8 mg，I·42 mmol)爲起始物而製得。反應時間 爲24小時，化合物係藉由中等壓力層析法純化，以己烷 爲洗提液。 】H NMR ( 400MHz，CDC13 ) δ 7.31 ( m，4H)， 4.46(s，2H) ，3.48(s，2H) ，1.26(s，6H)， 〇 · 8 1 ( s，9H ) ，-0 . 1 〇 ( s，6H ) 0 實例1 2〜（4 — {[ ( 3 -羧甲氧基一苄基）一（吡啶—3 -磺醯基 -89- (85)200302080 步驟 2 — 一 3 -乙酯 DMF 混合 基]-DMF 由2 (1 °c下 倂的 及濃 {[( 基） mg ) 8.76 7.19 6.76 4.10 (m，1H ) ，7.97 ( m， (d，2H ) ，7. 1 3 ( m， (m 5 1H ) ，6.67(m， (q，2H) ，] ·52 ( s， 胺基]—甲基} 一苯基）一 2-甲基一丙酸 (4 一 {[(3 -第三丁氧羰基甲氧基一；基）一 （D比口定 -磺醯基）一胺基]一甲基} 一苯基）—2-甲基—丙酸

NaH (60 重量。/〇，於油中，23 mg，0.55 mmol)經 (5 mL )沖洗，並加入新鮮的DMF (5 mL )。將 物冷卻至〇 ° C，加入{ 3 - [ ( D比陡—3 —磺基）一甲 苯氧基}一乙酸第三丁酯（184 mg，0.486 mmol)於 (1 mL )所形成的溶液。反應經攪拌1小時後加入 一 （4 —溴甲基—苯基）一 2-甲基一丙酸乙酯於Dmf mL )所形成的溶液。將反應升溫至室溫，並在1 〇〇 力口熱2小時。加水，水層以Et0Ac沖洗（3χ )。合 有機溶液經水沖洗（5x)，經乾燥（MgS〇4)、過濾 縮。快速層析純化（2 : 1己院：e t Ο A c )得2 — ( 4 — 3 —第三丁氧羰基甲氧基一苄基）一（吡啶一 3 一擴醯 —胺基]一甲基} 一苯基）—2-甲基—丙酸乙酯（138 】H NMR ( 400MHz，CDC13 ) 5 9.01 ( 1H) ’ 7·40 ( m ，1 H ) 1H ) ，7.02 ( d ， 2H )， 2H ) ，4.4 1 ( s 丨 ，2H )， 6H )， 1 .49 ( s， 9H )， -90- (86) (86)200302080 1 · 1 7 ( t，3H ) 〇

步驟B 2 一 （ 4 一 { [ ( 3 —羧甲氧基一苄基）一（吡啶一 3 一磺醯基 ) I女基]甲基}—本基）一 2-甲基一丙酸乙酉旨 在由2 一 （4— {[(3 一第三丁氧羰基甲氧基一苄基） 一（吡啶一 3 —磺醯基）—胺基]一甲基} 一苯基）一 2〜甲 基丙酸乙酯（138 mg5 0.237 mmol)於 MeOH ( 5 mL) 所形成的溶液中加入Na〇H水溶液（2N，〇 36 mL, 〇 η mmol)。反應在i〇〇°c下加熱1小時，接著冷卻至室溫。 反應在真空下濃縮，以水和Et0Ac稀釋。以1 N HC1調整 反應混合物的pH値至約5。水溶液經EtOAc沖洗（3〇 ’合倂的有機溶液經乾燥（Mg SCU )、過濾及濃縮。於水 溶液中加入氯化鈉，並以EtOAc沖洗水溶液（3χ)，合 倂的有機溶液經乾燥（MgSCU )、過濾及濃縮。合倂的標 題化合物（1 04 mg )直接用於下一步驟無須純化。

步驟C 2 - （4 一 {[(3 -羧甲氧基—苄基）一（吼卩疋一 3 -磺醯基 )一胺基]—甲基} 一苯基）一 2-甲基一丙酸 在由2— (4 — {[(3 —羧甲氧基一苄基）一（吡啶〜3 一磺醯基）一胺基]—甲基} 一苯基）一 2 一甲基一丙酸乙 酯（83 mg，0.157 mmol)於 THF (1〇 mL)所形成的溶 液中加入水（1 mL)和 LiOH. H2 0 ( 66 mg5 1.58 mm〇i (87) (87)200302080 )。反應經回流加熱24小時後’另外再加入由 Li0H· Η 2 〇 ( 6 6 m g，1 · 5 8 m m ο 1 )於水（2 m L )所形成的溶液， 反應並再回流加熱3 0小時。混合物在真空下濃縮，並於 殘餘物中加入THF ( 3 mL )和水（1 .5 mL )。反應經回 流加熱2 4小時’並冷卻至室溫。溶液經水稀釋，並於反 應中加入1 N H c 1以調節Ρ Η値至約5。於水溶液中加入 氯化鈉，並以E t 〇 Ac沖洗水溶液（3 X )，合倂的有機溶 液經乾燥（M g S 04 )、過濾及濃縮，得標題化合物（7 4 肇 mg )。 lH NMR ( 400MHz ^ CDC13)占 8·94 ( s，1H)， 8.73(s，1H) ，8.13(d，lH) ，7.55(m，1H)， 7.23 (d，2H) ，7.U(m，3H) ，6.78(d，lH)， 6.73(d，lH)6.68(s，lH) ，4.90(S，2H)， 4.39(s，2H) ，3.30(s，2H) ，1.5〇(s，6H); MS 4 97 ( M — 1 )。 ❿ 實施例2 (^一{[[4 一 （2 —經基—1，1—二甲基—乙基）；基]一 (吡啶一 3 -磺醯基）一胺基]一甲基} 一苯氧基）—乙酸

步驟A (3— {[{4 — [2—(第三丁基一二甲基一甲矽烷氧基）一 1，1 一一甲基一乙基]一卡基}一 （D比卩定一 3 一磺醯基）—胺 基]一甲基} 一苯氧基）一乙酸第三丁酯 -92- (88) 200302080 標題化合物係根據實施例1步驟A之方法，以[2 -（ 4 一溴甲基一苯基）—2 —甲基一丙氧基]一第三丁基一二 甲基—甲石夕院（121 mg5 0.339 mmol)院化{3— [(D比淀一 3 —磺醯基）—甲基]一苯氧基}—乙酸第三丁酯（I22 mg, 0.3 2 2 mmol )而製得。反應時間爲]小時。粗產物（238 m g )直接用於下〜步驟無須純化。M S 6 5 5 ( Μ+ 1 )。

步驟Β (3— {[[4— (2 —羥基—1，1—二甲基一乙基）—苄基]一 (吡啶一 3 -磺醯基）一胺基]一甲基} 一苯氧基）一乙酸 第三丁酯

在由（3— {[{4— [2 — （第三丁基一二甲基一甲矽烷 氧基）—1，1—二甲基—乙基]—苄基}一（吡啶一 3 —磺醯 基）—胺基]—甲基丨—苯氧基）—乙酸第三丁酯（210 mg，0.321 mmol)於THF ( 2 m L )所形成的溶液中加入 氟化四丁銨（1 Μ 之 THF 溶液，0.34 mL，0.34 mmol)。 反應經回流加熱1小時後，另外再加入氟化四丁銨（1 Μ 之THF溶液，0.34 mL，0.34 mmol)，反應並再回流加熱 45分鐘，及冷卻至室溫。加入水和CH2C12並分層。水溶 液經以 CH2C12沖洗（3x )，合倂的有機溶液經乾燥（ MgS04 )、過濾及濃縮，經中等壓力層析純化（1:1己烷 :EtOAc 至 3:2 己烷·· EtOAc)，得（3— {[[4— (2 —羥 基一 一二甲基一乙基）一节基]一 （D比卩定—3 —磺醯基 )—胺基]一甲基}—苯氧基）—乙酸第三丁酯（108 mg) -93- (89) (89)200302080 0 MS 54 1 ( M+ 1 ) o

步驟C (3 — {[[4— (2 —經基一1，1—二甲基一乙基）一节基]一 (口比D定一 3 —磺醯基）一胺基]一甲基}一苯氧基）一乙酸 將由（3— {[[4— (2 —羥基一 1，1 一二甲基—乙基）— 苄基]—(吡啶—3 -磺醯基）一胺基]一甲基} 一苯氧基） —乙酸第三丁酯（108 mg，〇. 199 mmol )於 CH2C12 (2 mL )所形成的溶液冷卻至〇 t，加入三氟醋酸（1 mL )。 反應在室溫下攪拌1小時，溶液藉由與CH2C12共沸蒸餾 (3 X )的方式而在真空下濃縮。將殘餘物溶於THF並於 其中加入IN HC1 ( 0.4 mL)。溶液藉由與C H 2 C12共沸 蒸餾（3 X )的方式而在真空下濃縮。經徑向層析純化，以 溶劑梯度洗提（CH2C12至20% CH2C12/ MeOH)，得標題 化合物（3 4 m g )。 NMR ( 4 00MHz，CDC13 ) δ 8.7 9 ( s，1 Η )， 8.69 ( s ^ 1H ) ，8.11(d，lH) ，7.52(m，lH)， 7_21(d，2H) ，7.09(m，lH) ，7.02(d，2H)， 6.76(d，lH) ，6.70(m，2H) ，4.86(s，2H)， 4.32(m，4H) ，3.48(s，2H) ，1.22(s，6H)； MS 485_2(M+1) ，483.4(M— 1) 〇 N M R光譜係利用 V a r i a n U n i t y 4 0 0光譜儀（V a r i a η Co.，Palo Alto, California)在約 23 °C 下對氫核而言爲 400 (90) (90)200302080 MHz的情況下測得。化學位移係以ppm (百萬分之幾份 )表示。譜線的形狀表示之說明如下：s單一譜線；d雙 重譜線；t三重譜線；q四重譜線；m多重譜線；bs寬譜 線。大氣壓力化學游離（APCI )質譜係以 Fisons Platform II Spectrometer ( Micromass Inc., Beverly, Massachusetts)測量。當得到含氯或溴的離子的強度時’ 可觀察到預期的強度比（含35C1/ 37C1的離子的比値爲約 3 : 1，含79Βι*/ 81Βγ的離子的比値爲約1 : 1 )，且只顯示較 低質量的離子的強度。 中等壓力層析法係利用Biotage純化系統（Biotage， Dyax Corporation，Charlottesville，Virginia)在氮氣下進 行。快速層析法係利用B ak er S i 1 i ca Ge 1 ( 4 0 μm ) ( J.

T. Baker, Philipsburg，N.J.)或 Silica Gel 60 ( EM

Sciences，Gibbstown，N.J.)於玻璃管柱中在低氮氣壓下 進行。徑向層析法係利用 C h r o m a t o t r ο η ( 7 9 2 4 T型，

Harrison Research，Palo Alto，California)進行。作爲反 應溶劑之二曱基甲醯胺（DMF )、四氫呋喃（THF )、和 —*氯甲院（C Η 2 C12 )均係無水等級，購自 Aldrich Chemical Company ( Milwaukee, Wisconsin )。“濃縮，，乙 辭意指在水流抽氣器的壓力下以旋轉蒸發器除去溶劑。 “EtO Ac”乙辭意指乙酸乙酯。在本文之說明以及實施例和 製備例中交互出現之”dichloromethane”和“methylene chloride”含意相同，均指二氯甲烷。 -95- (91) (91)200302080 鼠之ep2受體結合分析 與前列腺素E2受體結合之分析 全長的 EP2 受體係根據 Nemoto et al.5 Prostaglandins and other Lipid Mediator，1997，54，713 — 725 所揭示之內 容而製備。此全長的受體係用於製備表現EP2受體之 2 9 3 S細胞。 表現鼠之EP2前列腺素E2受體的2 9 3 S細胞係根據熟 悉此項技術人士所習知的方法製備。通常，對應於已知的 全長受體之5’至3’端之PCR (聚合酶鏈反應）引子係根 據上述已知的方法製備，並將其應用於RT - PCR反應， 同時使用由老鼠腎臟取得之全部的RNA作爲來源。利用 TA懸突（overhang )法而將PCR產物選殖於pCR2. 1 (

Invitrogen, Carlsbad，CA)，而選殖的受體的鑑定經DNA 定序法而加以確認。爲了表現，將經確認的cDNA次選殖 於哺乳動物表現載體PURpCI (—種經由將所擇之具耐 嘌呤黴素性的標記次選殖於哺乳動物表現載體PCI ( Promega，Madison, WI)而得之載體）。 利用脂質媒介轉染法將PURpCi中之選殖的受體轉染 於293 S細胞。在以嘌呤黴素選取經轉染的細胞後，確認 表現該受體之安定的細胞系。 在使用未標記的PGE2作爲競爭者而進行全細胞3H -pge2結合分析之後，選取表現最多數量受體之選殖的細 胞系。 -96- (92) (92)200302080 細胞膜的製備

所有的步驟係在4 °C下操作。取出表現前列腺素E2第 二型（EP2 )受體之經轉染的細胞，並將之懸浮於緩衝液 A [50 m Μ T r i s — Η C1 (pH 7.4) ? 10m M MgCl2J 1 mM ED T A j 1 mM Pefabloc 多肽（Boehringer Mannheim Corp.，Indianapolis，IN) ，10 μΜ Phosphoramidon 多肽( Sigma, St. Louis, MO) ，1 μΜ胃蛋白酶抑制素A多肽（ Sigma, St. Louis, MO) ，10 μΜ elastatinal 多肽（Sigma， St. Louis, MO ) ，100 μΜ antipain 多肽（Sigma，St.

Louis，MO )]至每毫升中含有 2百萬個細胞。利用 Branson Sonifier ( Branson Ultrasonics Corporation, D a n b u r y 5 C T )以每1 5秒中斷一次連續二次中斷的方式進 行超音波振盪而溶解細胞。在1 0 0 X g下離心1 〇分鐘而 除去未溶解的細胞和碎片。接著在4 5 0 0 0 X g下離心3 0 分鐘而取出細胞膜。將形成團塊的細胞膜再懸浮使每毫升 中含有3— 10 mg蛋白質，蛋白質的濃度係由Bradford法 測定[Bradford，M.，Anal. Biochem.，72，248 ( 1976)]。 接著再將懸浮的細胞膜在一 8 0 °C下冰凍貯存直到使用。 結合分析 使根據上述的方法製得之冰凍的細胞膜解凍並以上述 的緩衝液A稀釋至使每毫升含有1 mg蛋白質。將1體積 的細胞膜製備液與0.05體積的測試化合物或緩衝液及1 體積的 3 nM 3H —前列腺素 e2 ( Amersham, Arlington -97- (93) 200302080

Heights, IL )混合於緩衝液 A中。混合物（絲 μι)在25°C下培育1小時。接著利用Tomtec (Tomtec，Organe，TC)以 GF/C 型玻璃纖 W a 11 a c，G a i t h e r s b u r g，M D )過濾、而回收細胞膜 c 捕獲具有結合的3H 一前列腺素E2之細胞膜，葡 結合的3H -前列腺素e2通過濾器而爲廢液。ii 品以 3 ml [50 mM Tris — HC1 (pH 7.4) ，：10 ，：1 mM EDTA]沖洗三次。而後於微波爐中加素 器。爲了測定與細胞膜結合之3H -前列腺素E: 經乾燥的濾器置於內有閃爍計數液之塑膠袋中， 1205 β 板 g買取器（Wallac，Gaithersburg，MD) I C 5 ο値係由置換5 〇 %專一性結合的3 η —前列腺 之測試化合物的濃度而測得。 實施例1之鼠Ε Ρ 2結合I C 5。値=7 5 0 η Μ。 實施例2之鼠Ε Ρ 2結合I C 5。値=1 7 0 η Μ。 I體積2 0 5 Harvester 維濾器（ >利用濾器 I衝液和未 !著各個樣 mM MgCh ^以乾燥濾 i的量，將 並以LKB 計數之。 素E2所需 -98- (94) (94)200302080 本文中所用之縮寫如下所示： IV. 靜脈內 HPLC 高壓液相層析法 CPM 每分鐘轉數 min 分鐘 MS 質譜 CID 撞撃引發的游離 AMU 原子質量單位 FB S 牛胚胎血淸 LC 液相層析法 DMF 二甲基甲醯胺 E t 0 A c 乙酸乙酯 MeOH 甲醇 NMR 核磁共振 Et3N 三乙胺 THF 四氫咲喃 H 小時 【圖式簡單說明】 圖1爲（3 - {[(4 一第三丁基—苄基）一（吡啶一 3 一磺醯基）—胺基]一甲基} 一苯氧基）一乙酸於老鼠、狗 、猴和人類肝的微粒體中之代謝物的代表性HP LC放射層 析圖。 圖2爲（3— {[(4 —第三丁基一苄基）一（吡啶—3 -99- (95) (95)200302080 一磺醯基）一胺基]一甲基} 一苯氧基）一乙酸於老鼠、狗 、猴和人類肝細胞中之代謝物的代表性HPLC放射層析圖 〇 圖3爲（3 - {[(4 一第三丁基一苄基）一（吡啶一 3 一磺醯基）一胺基]—甲基}—苯氧基）一乙酸（πι/ζ 469 )之CID產物離子光譜。 圖4爲代謝物M2 1 ( m / z 321 )之CID產物離子光 譜。 _ 圖5爲代謝物Ml 1 ( m / z 3 3 5 )之CID產物離子光 譜。 圖6爲代謝物M2 (m/z501)之CID產物離子光 譜。 圖7爲代謝物M3 ( m/ z 4 9 9 )之CID產物離子光 譜。 圖8爲代謝物M4 ( m / Z 4 8 5 )之CID產物離子光 譜。 · 圖9爲代謝物Ml 9 ( m / z 321 )之CID產物離子光 譜。 圖10爲代謝物M6 ( m / z 5 6 5 )之CID產物離子光 譜。 圖1 1爲代謝物M5 ( m/ z 4 8 5 )之CID產物離子光 譜。 圖12爲代謝物Ml 2 ( m / z 4 8 5 )之CID產物離子 光譜。 -100- (96) (96)200302080 圖13爲代謝物M2 0 ( m / z 3 0 5 )之CID產物離子 光譜。 圖14爲代謝物M2 2 ( m / z 48 7 )之CID產物離子 光譜和1H NMR。 圖1 5爲代謝物M2 3 ( m / z 471 )之CID產物離子 光譜和iH NMR。 圖16爲代謝物M2 4 ( m / z 48 3 )之CID產物離子 光譜和4 NMR。 _ 圖1 7爲代謝物M2 6 ( m / z 45 3 )之CID產物離子 光譜和NMR。

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Claims (1)

1. (1) (1)200302080 拾、申請專利範圍 1. 一種化合物，其爲2 — ( 4 — {[( 3 —羧甲氧基—苄 基）一（吡啶一 3 -磺醯基）一胺基]一甲基} 一苯基）一 2 一甲基-丙酸，或其藥學上可接受之鹽。 2. 一種化合物，其爲（3 — {[[4— ( 2 —羥基—1，1 — 二甲基一乙基）一干：基]一 （¾卩定一 3 -磺醯基）—胺基] 一甲基}一苯氧基）-乙酸，或其藥學上可接受之鹽。 3. 一種化合物，其爲（3— {[(4 —第三丁基一苄基 )一（D比陡一 N-氧化物一 3 —擴醯基）—胺基]一甲基}一 苯氧基）-乙酸，或其藥學上可接受之鹽。 4. 一種化合物，其爲（5— {[(4-第三丁基—苄基 )一（吡啶一 3 -磺醯基）一胺基]一甲基} 一羥基一苯氧 基）-乙酸，或其藥學上可接受之鹽。 5. 一種化合物，其爲： 2 — { 4 —[(吡啶一 N -氧化物—3 -磺醯胺基）一甲基 ]一苯基}一 2 —甲基一丙酸； (3 — {[[4— (2 —羥基一 1，1—二甲基一乙基）—苄基 ]一（啦卩定一 3 -擴釀基）—胺基]一甲基} 一苯氧基）一乙 酸葡糖苷酸； 吼陡一 N —氧化物一 3 —礦酸 4 — ( 2 —經基—1，1 — 一 甲基-乙基）一苯甲醯胺之共軛硫酸酯； (3— {[[4— (2—羥基—1，1—二甲基一乙基）—苄基 ]一（吡啶一 3 -磺醯基）—胺基]一甲基}—苯氧基）一乙 酸之共軛硫酸酯； -102- (2) (2)200302080 吡啶一 3 -磺酸4 一 （ 2 -羥基一 1 5 1 —二甲基一乙基） -苯甲醯胺之共軛硫酸酯； 2 —甲基一 2— {4 - [(吡啶—3 —磺醯胺基）—甲基] 一苯基} 一丙酸； (3 - {[[4— (1，2 —二羥基一 1—甲基—乙基）—苄基 ]一（吡啶一 3 -磺醯基）一胺基]一甲基}—苯氧基）一乙 酸； (3 - {[[4- (1—羥基—1—甲基—乙基）—苄基]— (吡啶一 3 —磺醯基）一胺基]一甲基} 一苯氧基）一乙酸 (3 — {[[4 - （ 1，1 —二曱基—2—酮基—乙基）一苄基 ]一（吡啶一 3 —磺醯基）一胺基]—甲基} 一苯氧基）—乙 酸；或 (3 — {[( 4 -異丙烯基一苄基）—（吡啶—3 -磺醯 基）一胺基]一甲基}—苯氧基）一乙酸； 或其藥學上可接受之鹽。 6. 一種用於檢測是否（3 - {[( 4 一第三丁基一苄基 )一（啦卩定一 3 - 5黃釀基）一胺基]一甲基}一苯氧基）一 乙酸已投服於患者之方法，該方法包含檢測由患者所得之 血漿、尿液、膽汁或排泄物樣品是否顯示存在有一或多種 選自下列化合物： 2 — （ 4 — {[( 3 —羧甲氧基—苄基）一（吡啶—3 -磺 醯基）—胺基]一甲基} 一苯基）一 2-甲基一丙酸； (3 - {[[4— (2—羥基—1，1 一二甲基—乙基）—苄基 -103- (3) (3)200302080 ]一（吡啶一 3 -磺醯基）一胺基]一甲基} 一苯氧基）一乙 酸； 2 - { 4 —[(吼卩定一 N -氧化物一 3 —磺釀胺基）一甲基 ]一苯基}一 2 —甲基—丙酸； (3 — {[[4 — （2 —羥基一 1，1 一二甲基一乙基）一苄基 ]一（吼卩定一 3 -礦釀基）一胺基]一甲基} 一苯氧基）一乙 酸葡糖苷酸； 吡啶—N —氧化物—3 —磺酸 4 — ( 2 —羥基—1，1 —二 甲基一乙基）-苯甲醯胺之共軛硫酸酯； (3— {[[4— (2 —羥基—151 -二甲基一乙基）一苄基 ]一（吡啶—3 —磺醯基）—胺基]一甲基} 一苯氧基）一乙 酸之共軛硫酸酯； 口比卩定—3 -擴酸4一 （2-經基—1,1— 一^甲基—乙基） -苯甲醯胺之共軛硫酸酯； 2 —甲基—2 — {4— [(D比D定—3 —礦釀胺基）一甲基] 一苯基} 一丙酸； (3 - {[(4 一第三丁基一苄基）一（吡啶一 N-氧化 物一 3 -磺醯基）一胺基]一甲基苯氧基）—乙酸； (5 - {[(4 一第三丁基一苄基）一（吡啶一 3 -磺醯 基）一胺基]一甲基} 一羥基—苯氧基）一乙酸； (3— {[[4— (1,2 —二羥基—1—甲基一乙基）—苄基 ]一（吡啶一 3 -磺醯基）一胺基]一甲基} 一苯氧基）一乙 酸； (3— {[[4 - （1 一羥基一1 一甲基—乙基）一苄基]— -104- (4) (4)200302080 (吡啶一 3 -磺醯基）一胺基]一甲基} 一苯氧基）一乙酸 (3 — {[[4 一 （1，1 一二甲基一2—酮基—乙基）一苄基 ]—(D比卩定一 3 -礦醯基）—胺基]一甲基}一苯氧基）一乙 酸；及 (3 — {[( 4 —異丙烯基—苄基）一（吡啶—3 —磺醯 基）一胺基]一甲基}—苯氧基）一乙酸。 7 . —種用於治療骨質疏鬆或幫助骨折痊癒之藥學組 · 成物，其包含一或多種選自下列的化合物： 2 — （ 4 — {[( 3 -羧甲氧基—苄基）一（吡啶一 3 —磺 醯基）一胺基]—甲基} 一苯基）—2 —甲基一丙酸； (3— {[[4— (2 —羥基—1，1—二甲基一乙基）—苄基 ]一（吡啶一 3 —磺醯基）—胺基]—甲基} 一苯氧基）一乙 酸； 2 - { 4 一 [(吡啶一 N —氧化物—3 —磺醯胺基）—甲基 ]一苯基}— 2 —甲基—丙酸； Φ (3— {[[4 — （2 —羥基—1，1—二甲基一乙基）—苄基 ]一（吡啶一 3 —磺醯基）一胺基]一甲基} 一苯氧基）一乙 酸葡糖苷酸； 口比ϋ定—N —氧化物一 3 —礦酸 4 — ( 2 —經基—1，1 — 一. 甲基一乙基）一苯甲醯胺之共軛硫酸酯； (3— {[[4— (2 —羥基一 1，1—二甲基一乙基）一苄基 ]一（吡啶一 3 -磺醯基）一胺基]一甲基} 一苯氧基）一乙 酸之共軛硫酸酯； -105- (5) (5)200302080 吡啶一 3 -磺酸4 一 （ 2 -羥基一 1，1 一二甲基—乙基） -苯甲醯胺之共軛硫酸酯； 2 -甲基—2 — {4一[(吼卩定一 3 —礦釀胺基）一甲基] 一苯基} 一丙酸； (3 - {[(4 一第三丁基一苄基）一（吡啶一 N —氧化 物一 3 -磺醯基）一胺基]一甲基丨一苯氧基）一乙酸； (5 - {[( 4 一第三丁基一苄基）一（吡啶一 3 -磺醯 基）—胺基]一甲基} 一羥基一苯氧基）一乙酸； (3— {[[4 — （1，2 —二羥基—1 一甲基—乙基）—苄基 ]一（吡啶一 3 -磺醯基）一胺基]一甲基} 一苯氧基）一乙 酸； (3— {[[4— (1—羥基—1—甲基—乙基）—苄基]— (吡啶一 3 -磺醯基）一胺基]—甲基} 一苯氧基）一乙酸 ， (3 — {[[4— (1，1 一二甲基一 2 —酮基—乙基）一苄基 ]一（吡啶一 3 -磺醯基）一胺基]一甲基} 一苯氧基）一乙 酸；或 (3 - {[( 4 一異丙烯基—苄基）一（吡啶—3 -磺醯 基）一胺基]一甲基}—苯氧基）一乙酸； 或其藥學上可接受之鹽。 -106-