TR201815872T4 - Oksitosin analoglarının hazırlanması için prosesler. - Google Patents
Oksitosin analoglarının hazırlanması için prosesler. Download PDFInfo
- Publication number
- TR201815872T4 TR201815872T4 TR2018/15872T TR201815872T TR201815872T4 TR 201815872 T4 TR201815872 T4 TR 201815872T4 TR 2018/15872 T TR2018/15872 T TR 2018/15872T TR 201815872 T TR201815872 T TR 201815872T TR 201815872 T4 TR201815872 T4 TR 201815872T4
- Authority
- TR
- Turkey
- Prior art keywords
- fmoc
- gly
- resin
- asn
- tyr
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 29
- XNOPRXBHLZRZKH-DSZYJQQASA-N oxytocin Chemical class C([C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](N)C(=O)N1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(N)=O)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 XNOPRXBHLZRZKH-DSZYJQQASA-N 0.000 title claims abstract description 16
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 8
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 20
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims abstract description 20
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical group N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 18
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims abstract description 16
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- 229910052799 carbon Chemical group 0.000 claims abstract description 11
- 150000002367 halogens Chemical group 0.000 claims abstract description 9
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 9
- 229910052736 halogen Chemical group 0.000 claims abstract description 7
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 claims abstract description 5
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims description 105
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims description 105
- -1 1-adamantyl Chemical group 0.000 claims description 57
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 42
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 claims description 32
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 claims description 26
- 230000007017 scission Effects 0.000 claims description 26
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 24
- UBQKCCHYAOITMY-UHFFFAOYSA-N pyridin-2-ol Chemical compound OC1=CC=CC=N1 UBQKCCHYAOITMY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 22
- 238000007363 ring formation reaction Methods 0.000 claims description 22
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-diisopropylethylamine Substances CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 21
- SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N N-Methylmorpholine Chemical compound CN1CCOCC1 SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N imidazole Natural products C1=CNC=N1 RAXXELZNTBOGNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 12
- 125000003903 2-propenyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])=C([H])[H] 0.000 claims description 9
- RWRDLPDLKQPQOW-UHFFFAOYSA-N Pyrrolidine Chemical group C1CCNC1 RWRDLPDLKQPQOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 9
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 8
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims description 8
- VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 4-Dimethylaminopyridine Chemical compound CN(C)C1=CC=NC=C1 VHYFNPMBLIVWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 claims description 7
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 claims description 7
- ZGYICYBLPGRURT-UHFFFAOYSA-N tri(propan-2-yl)silicon Chemical compound CC(C)[Si](C(C)C)C(C)C ZGYICYBLPGRURT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- BMTZEAOGFDXDAD-UHFFFAOYSA-M 4-(4,6-dimethoxy-1,3,5-triazin-2-yl)-4-methylmorpholin-4-ium;chloride Chemical compound [Cl-].COC1=NC(OC)=NC([N+]2(C)CCOCC2)=N1 BMTZEAOGFDXDAD-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 6
- HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 8-[3-(1-cyclopropylpyrazol-4-yl)-1H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-methyl-3,8-diazabicyclo[3.2.1]octan-2-one Chemical class C1(CC1)N1N=CC(=C1)C1=NNC2=C1N=C(N=C2)N1C2C(N(CC1CC2)C)=O HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 101800001442 Peptide pr Proteins 0.000 claims description 6
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 150000001408 amides Chemical group 0.000 claims description 6
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 claims description 6
- 125000000959 isobutyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])* 0.000 claims description 5
- 125000004108 n-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims description 5
- IMNIMPAHZVJRPE-UHFFFAOYSA-N triethylenediamine Chemical compound C1CN2CCN1CC2 IMNIMPAHZVJRPE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- KWYHDKDOAIKMQN-UHFFFAOYSA-N N,N,N',N'-tetramethylethylenediamine Chemical compound CN(C)CCN(C)C KWYHDKDOAIKMQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 4
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 claims description 4
- DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N ethanethiol Chemical compound CCS DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 4
- 239000002516 radical scavenger Substances 0.000 claims description 4
- AQRLNPVMDITEJU-UHFFFAOYSA-N triethylsilane Chemical compound CC[SiH](CC)CC AQRLNPVMDITEJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- UZOFELREXGAFOI-UHFFFAOYSA-N 4-methylpiperidine Chemical compound CC1CCNCC1 UZOFELREXGAFOI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims description 3
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229910052770 Uranium Inorganic materials 0.000 claims description 3
- RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N anisole Chemical compound COC1=CC=CC=C1 RDOXTESZEPMUJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 230000008878 coupling Effects 0.000 claims description 3
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 claims description 3
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- GPDHNZNLPKYHCN-DZOOLQPHSA-N [[(z)-(1-cyano-2-ethoxy-2-oxoethylidene)amino]oxy-morpholin-4-ylmethylidene]-dimethylazanium;hexafluorophosphate Chemical compound F[P-](F)(F)(F)(F)F.CCOC(=O)C(\C#N)=N/OC(=[N+](C)C)N1CCOCC1 GPDHNZNLPKYHCN-DZOOLQPHSA-N 0.000 claims description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 2
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 claims description 2
- ILMRJRBKQSSXGY-UHFFFAOYSA-N tert-butyl(dimethyl)silicon Chemical group C[Si](C)C(C)(C)C ILMRJRBKQSSXGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- HNKJADCVZUBCPG-UHFFFAOYSA-N thioanisole Chemical compound CSC1=CC=CC=C1 HNKJADCVZUBCPG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N methoxybenzene Substances CCCCOC=C UZKWTJUDCOPSNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-O pyridinium Chemical compound C1=CC=[NH+]C=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-O 0.000 claims 1
- JFALSRSLKYAFGM-UHFFFAOYSA-N uranium(0) Chemical compound [U] JFALSRSLKYAFGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 150000001721 carbon Chemical group 0.000 abstract description 6
- 208000012902 Nervous system disease Diseases 0.000 abstract description 2
- 208000025966 Neurological disease Diseases 0.000 abstract description 2
- 125000006701 (C1-C7) alkyl group Chemical group 0.000 abstract 1
- 239000000018 receptor agonist Substances 0.000 abstract 1
- 229940044601 receptor agonist Drugs 0.000 abstract 1
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 69
- NDKDFTQNXLHCGO-UHFFFAOYSA-N 2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)acetic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)NCC(=O)O)C3=CC=CC=C3C2=C1 NDKDFTQNXLHCGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 26
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 25
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 24
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 19
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 18
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 13
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- BZLVMXJERCGZMT-UHFFFAOYSA-N Methyl tert-butyl ether Chemical compound COC(C)(C)C BZLVMXJERCGZMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 12
- JAUKCFULLJFBFN-VWLOTQADSA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-3-[4-[(2-methylpropan-2-yl)oxy]phenyl]propanoic acid Chemical compound C1=CC(OC(C)(C)C)=CC=C1C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)OCC1C2=CC=CC=C2C2=CC=CC=C21 JAUKCFULLJFBFN-VWLOTQADSA-N 0.000 description 11
- KJYAFJQCGPUXJY-UMSFTDKQSA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-4-oxo-4-(tritylamino)butanoic acid Chemical compound C([C@@H](C(=O)O)NC(=O)OCC1C2=CC=CC=C2C2=CC=CC=C21)C(=O)NC(C=1C=CC=CC=1)(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 KJYAFJQCGPUXJY-UMSFTDKQSA-N 0.000 description 11
- QXVFEIPAZSXRGM-DJJJIMSYSA-N (2s,3s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-3-methylpentanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(O)=O)C3=CC=CC=C3C2=C1 QXVFEIPAZSXRGM-DJJJIMSYSA-N 0.000 description 11
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 11
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 11
- WDGICUODAOGOMO-DHUJRADRSA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-5-oxo-5-(tritylamino)pentanoic acid Chemical compound C([C@@H](C(=O)O)NC(=O)OCC1C2=CC=CC=C2C2=CC=CC=C21)CC(=O)NC(C=1C=CC=CC=1)(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 WDGICUODAOGOMO-DHUJRADRSA-N 0.000 description 10
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 10
- JMTMSDXUXJISAY-UHFFFAOYSA-N 2H-benzotriazol-4-ol Chemical compound OC1=CC=CC2=C1N=NN2 JMTMSDXUXJISAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 8
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 8
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 8
- GQHTUMJGOHRCHB-UHFFFAOYSA-N 2,3,4,6,7,8,9,10-octahydropyrimido[1,2-a]azepine Chemical compound C1CCCCN2CCCN=C21 GQHTUMJGOHRCHB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 108010069514 Cyclic Peptides Proteins 0.000 description 7
- 102000001189 Cyclic Peptides Human genes 0.000 description 7
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 7
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 7
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- JWUJQDFVADABEY-UHFFFAOYSA-N 2-methyltetrahydrofuran Chemical compound CC1CCCO1 JWUJQDFVADABEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 6
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 6
- NFHFRUOZVGFOOS-UHFFFAOYSA-N palladium;triphenylphosphane Chemical compound [Pd].C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1.C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1.C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1.C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 NFHFRUOZVGFOOS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 6
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 5
- 125000003630 glycyl group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 5
- CBPJQFCAFFNICX-IBGZPJMESA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-4-methylpentanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C3=CC=CC=C3C2=C1 CBPJQFCAFFNICX-IBGZPJMESA-N 0.000 description 4
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N Palladium Chemical compound [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- XBGGUPMXALFZOT-UHFFFAOYSA-N glycyl-L-tyrosine hemihydrate Natural products NCC(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 XBGGUPMXALFZOT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 108010087823 glycyltyrosine Proteins 0.000 description 4
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 4
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 4
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 4
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 4
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 4
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 4
- 108010004034 stable plasma protein solution Proteins 0.000 description 4
- RIOQSEWOXXDEQQ-UHFFFAOYSA-N triphenylphosphine Chemical compound C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 RIOQSEWOXXDEQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- LRBARFFNYOKIAX-FQEVSTJZSA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-5-oxo-5-prop-2-enoxypentanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)N[C@@H](CCC(=O)OCC=C)C(=O)O)C3=CC=CC=C3C2=C1 LRBARFFNYOKIAX-FQEVSTJZSA-N 0.000 description 3
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XBGGUPMXALFZOT-VIFPVBQESA-N Gly-Tyr Chemical compound NCC(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 XBGGUPMXALFZOT-VIFPVBQESA-N 0.000 description 3
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 3
- SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N N-Methylpyrrolidone Chemical compound CN1CCCC1=O SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 3
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 3
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 150000003147 proline derivatives Chemical class 0.000 description 3
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- CJEQUGHYFSTTQT-XIKOKIGWSA-N (2s,4r)-1-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonyl)-4-fluoropyrrolidine-2-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H]1C[C@@H](F)CN1C(=O)OCC1C2=CC=CC=C2C2=CC=CC=C21 CJEQUGHYFSTTQT-XIKOKIGWSA-N 0.000 description 2
- FDKXTQMXEQVLRF-ZHACJKMWSA-N (E)-dacarbazine Chemical compound CN(C)\N=N\c1[nH]cnc1C(N)=O FDKXTQMXEQVLRF-ZHACJKMWSA-N 0.000 description 2
- BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 1,3-diisopropylcarbodiimide Chemical compound CC(C)N=C=NC(C)C BDNKZNFMNDZQMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZFPGARUNNKGOBB-UHFFFAOYSA-N 1-Ethyl-2-pyrrolidinone Chemical compound CCN1CCCC1=O ZFPGARUNNKGOBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 1-Hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XXMFJKNOJSDQBM-UHFFFAOYSA-N 2,2,2-trifluoroacetic acid;hydrate Chemical compound [OH3+].[O-]C(=O)C(F)(F)F XXMFJKNOJSDQBM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZHKQIADIIYMFOZ-UHFFFAOYSA-N 2-[9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonyl(methyl)amino]acetic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)N(CC(O)=O)C)C3=CC=CC=C3C2=C1 ZHKQIADIIYMFOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960000549 4-dimethylaminophenol Drugs 0.000 description 2
- 208000019901 Anxiety disease Diseases 0.000 description 2
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 2
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N Hydrazine Chemical compound NN OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N L-norleucine Chemical compound CCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- 239000002841 Lewis acid Substances 0.000 description 2
- YNAVUWVOSKDBBP-UHFFFAOYSA-N Morpholine Chemical compound C1COCCN1 YNAVUWVOSKDBBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102400000050 Oxytocin Human genes 0.000 description 2
- XNOPRXBHLZRZKH-UHFFFAOYSA-N Oxytocin Natural products N1C(=O)C(N)CSSCC(C(=O)N2C(CCC2)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C1CC1=CC=C(O)C=C1 XNOPRXBHLZRZKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101800000989 Oxytocin Proteins 0.000 description 2
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PBCJIPOGFJYBJE-UHFFFAOYSA-N acetonitrile;hydrate Chemical compound O.CC#N PBCJIPOGFJYBJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 2
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 2
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 2
- 239000012973 diazabicyclooctane Substances 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 125000001153 fluoro group Chemical group F* 0.000 description 2
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 2
- 150000007517 lewis acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 229960001723 oxytocin Drugs 0.000 description 2
- 229910052763 palladium Inorganic materials 0.000 description 2
- YJVFFLUZDVXJQI-UHFFFAOYSA-L palladium(ii) acetate Chemical compound [Pd+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O YJVFFLUZDVXJQI-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 2
- PARWUHTVGZSQPD-UHFFFAOYSA-N phenylsilane Chemical compound [SiH3]C1=CC=CC=C1 PARWUHTVGZSQPD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 239000010948 rhodium Substances 0.000 description 2
- FSYKKLYZXJSNPZ-UHFFFAOYSA-N sarcosine Chemical compound C[NH2+]CC([O-])=O FSYKKLYZXJSNPZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GWQWBFBJCRDINE-UHFFFAOYSA-M sodium;carbamodithioate Chemical compound [Na+].NC([S-])=S GWQWBFBJCRDINE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 2
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 2
- DNYWZCXLKNTFFI-UHFFFAOYSA-N uranium Chemical compound [U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U][U] DNYWZCXLKNTFFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZPGDWQNBZYOZTI-SFHVURJKSA-N (2s)-1-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonyl)pyrrolidine-2-carboxylic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)OCC1C2=CC=CC=C2C2=CC=CC=C21 ZPGDWQNBZYOZTI-SFHVURJKSA-N 0.000 description 1
- VZQHRKZCAZCACO-PYJNHQTQSA-N (2s)-2-[[(2s)-2-[2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-amino-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]amino]propanoyl]amino]prop-2-enoylamino]-3-methylbutanoyl]amino]propanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)C(=C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N VZQHRKZCAZCACO-PYJNHQTQSA-N 0.000 description 1
- RSWGJHLUYNHPMX-UHFFFAOYSA-N Abietic-Saeure Natural products C12CCC(C(C)C)=CC2=CCC2C1(C)CCCC2(C)C(O)=O RSWGJHLUYNHPMX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 description 1
- 208000000044 Amnesia Diseases 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010003805 Autism Diseases 0.000 description 1
- 208000020706 Autistic disease Diseases 0.000 description 1
- 125000006538 C11 alkyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 206010012335 Dependence Diseases 0.000 description 1
- 208000020401 Depressive disease Diseases 0.000 description 1
- YCKRFDGAMUMZLT-UHFFFAOYSA-N Fluorine atom Chemical compound [F] YCKRFDGAMUMZLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Natural products NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 125000000174 L-prolyl group Chemical group [H]N1C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[C@@]1([H])C(*)=O 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000026139 Memory disease Diseases 0.000 description 1
- MSPCIZMDDUQPGJ-UHFFFAOYSA-N N-methyl-N-(trimethylsilyl)trifluoroacetamide Chemical compound C[Si](C)(C)N(C)C(=O)C(F)(F)F MSPCIZMDDUQPGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004279 Oxytocin receptors Human genes 0.000 description 1
- 108090000876 Oxytocin receptors Proteins 0.000 description 1
- KHPCPRHQVVSZAH-HUOMCSJISA-N Rosin Natural products O(C/C=C/c1ccccc1)[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 KHPCPRHQVVSZAH-HUOMCSJISA-N 0.000 description 1
- 108010077895 Sarcosine Proteins 0.000 description 1
- 208000013200 Stress disease Diseases 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 1
- 208000029650 alcohol withdrawal Diseases 0.000 description 1
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 description 1
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 230000036506 anxiety Effects 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 1
- 125000004369 butenyl group Chemical group C(=CCC)* 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- YNHIGQDRGKUECZ-UHFFFAOYSA-N dichloropalladium;triphenylphosphanium Chemical compound Cl[Pd]Cl.C1=CC=CC=C1[PH+](C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1.C1=CC=CC=C1[PH+](C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 YNHIGQDRGKUECZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- GUVUOGQBMYCBQP-UHFFFAOYSA-N dmpu Chemical compound CN1CCCN(C)C1=O GUVUOGQBMYCBQP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003187 heptyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000004051 hexyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000001909 leucine group Chemical group [H]N(*)C(C(*)=O)C([H])([H])C(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 230000006984 memory degeneration Effects 0.000 description 1
- 208000023060 memory loss Diseases 0.000 description 1
- 238000003032 molecular docking Methods 0.000 description 1
- 125000004123 n-propyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000001181 organosilyl group Chemical group [SiH3]* 0.000 description 1
- 150000002941 palladium compounds Chemical class 0.000 description 1
- 125000001147 pentyl group Chemical group C(CCCC)* 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- VTGOHKSTWXHQJK-UHFFFAOYSA-N pyrimidin-2-ol Chemical compound OC1=NC=CC=N1 VTGOHKSTWXHQJK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 1
- 230000003252 repetitive effect Effects 0.000 description 1
- 229910052703 rhodium Inorganic materials 0.000 description 1
- MHOVAHRLVXNVSD-UHFFFAOYSA-N rhodium atom Chemical compound [Rh] MHOVAHRLVXNVSD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003284 rhodium compounds Chemical class 0.000 description 1
- QBERHIJABFXGRZ-UHFFFAOYSA-M rhodium;triphenylphosphane;chloride Chemical compound [Cl-].[Rh].C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1.C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1.C1=CC=CC=C1P(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 QBERHIJABFXGRZ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 201000000980 schizophrenia Diseases 0.000 description 1
- 125000002914 sec-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KHPCPRHQVVSZAH-UHFFFAOYSA-N trans-cinnamyl beta-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC=CC1=CC=CC=C1 KHPCPRHQVVSZAH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BDZBKCUKTQZUTL-UHFFFAOYSA-N triethyl phosphite Chemical compound CCOP(OCC)OCC BDZBKCUKTQZUTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000391 vinyl group Chemical group [H]C([*])=C([H])[H] 0.000 description 1
- 229920002554 vinyl polymer Polymers 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/50—Cyclic peptides containing at least one abnormal peptide link
- C07K7/54—Cyclic peptides containing at least one abnormal peptide link with at least one abnormal peptide link in the ring
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/16—Oxytocins; Vasopressins; Related peptides
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
Abstract
Mevcut buluş, formül I'in oksitosin analoglarının hazırlanması için yeni bir prosesi içermekte olup burada R1, hidrojen veya C1-7-alkil'dir ve R1, hidrojen veya C1-7-alkil'dir; veya R1 ve R2, eklendikleri nitrojen ve karbon atomu ile birlikte, tercihe göre hidroksi veya halojen ile ornatılan 5 üyeli bir heterosikl oluşturur; R3, C1-7-alkil'dir. Formül I'in oksitosin analogları, reseptör agonistleri olarak hareket eder ve nörolojik bozuklukların tedavisinde kullanılmak üzere potansiyele sahiptir.
Description
TARIFNAME
OKSITOSIN ANALOGLARININ HAZIRLANMASI IÇIN PROSESLER
Mevcut bulus, formül I'in oksitosin analoglari hazirlanmasi
için yeni bir proses ile ilgili olup,
R1, hidrojen veya er-alkil'dir ve
R2, hidrojen veya Crn-alkil'dir; veya
Rl ve R2, eklendikleri nitrojen ve karbon atomu ile birlikte,
tercihe göre hidroksi veya halojen ile ornatilan 5 üyeli bir
heterosikl olusturur;
R3, CLJ-alkil
ve bunun karsilik gelen enantiyomerler ve/veya optik
izomerleridir.
Formül I'in oksitosin analoglari, oksitosin reseptörü
agonistleri gibi davranir ve otizm, stres, travma sonrasi
stres bozuklugu, anksiyete bozukluklari ve depresyon dahil
olmak, üzere anksiyete, Sizofreni psikiyatrik, bozukluklar ve
hafiza kaybi, alkol yoksunlugu, uyusturucu Hadde bagimliligi
gibi nörolojik bozukluklarin tedavisinde ve Prader-Willi
Sendromu'nun tedavisinde kullanilma potansiyeline sahiptir
edilen sekilde hazirlanmasi asagidaki adimlarla karakterize
X1) formül X'in reçine bagli bir peptid prekürsöründen Fmoc
klevaji
X2) sonraki bir adimda allil grubunun klevaji
X3) reçine üzerinde halka siklizasyonu
X4) global korumanin kaldirilmasi ve reçineden klevaj
X5) saflastirma ve izolasyon.
Teknikte bilinen bu prosesin, düsük genel verim ve ürün
seçiciliginden muzdarip oldugu bulunmustur.
Bu nedenle mevcut bulusun amaci, istenen Oksitosin
analoglarinin verimi ve seçiciligi ile ilgili sentezi
gelistirmek olmustur.
Amaca, asagida asagida açiklandigi gibi mevcut bulusun
prosesiyle ulasilabilir.
Formül I'in oksitosin analoglarinin hazirlanmasi için proses
R1, hidrojen veya Ciqýalkil'dir ve
R2, hidrojen veya Ciw-alkil'dir; veya
Rl ve R2, eklendikleri nitrojen ve karbon atomu ile birlikte,
tercihe göre hidroksi veya halojen ile ornatilan 5 üyeli bir
heterosikl olusturur;
R3, C1-Týalkil
Ve bunun karsilik gelen enantiyomerleri ve/Veya optik
izomerleri olup, formül II'in bir reçine bagli peptid
prekürsörünün islenmesini içerir
Rh E# ve R3, yukaridaki gibidir ve
R4, bir hidroksi koruyucu grubudur;
R5, Fmoc'tur;
R5, t-butil, l-adamantil veya fenilizopropil'dir;
R7, bir amit koruyucu grubudur; ve
ve bunun karsilik gelen enantiyomerler ve/Veya optik
izomerleridir,
yönteme göre
b) burada R6 , t-butil, l-adamantil veya fenilizopropil'dir ve
bl), b2), b3) ve b4) adimlari ekli istemlerde tanimlanmistir.
Asagidaki tanimlamalar buradaki mevcut bulusu tarif etmek için
kullanilan çesitli terimlerin anlamini ve kapsamini betimlemek
ve tanimlamak için önerilmistir.
Burada kullanilan “Clqýalkil” terimi, bir ila yedi, tercihen
bir ila dört, daha tercihen bir ila iki karbon atomuna sahip,
dalli veya düz zincirli tek degerli doymus alifatik bir
hidrokarbon radikali ile ilgilidir. Bu terim ayrica metil,
etil, n-propil, i-propil, n-butil, s-bütil, i-butil, veya t-
butil, pentil ve izomerleri, heksil ve izomerleri ve heptil ve
izomerleri gibi radikallerle de örneklendirilmektedir.
Benzer sekilde, “Ckq-alkil" terimi, yukarida belirtilen
tercihler` ve ilgili örneklerle birlikte ;bir ila dört karbon
atomlu dalli veya düz Zincirli tek degerli bir doymus alifatik
hidrokarbon kökü ilgilidir.
zinciri ile ilgilidir; Bu terinu ayrica, metoksi, etoksi, n-
propoksi, i-propoksi, n-butoksi, i-butoksi ve t-butoksi olarak
radikallerle Örneklenir.
bir Cia-alkoksi zinciri ile ilgilidir ve ayrica bir karbonil
grubuna eklenen yukarida açiklanan özel alkoksi kökleri ile
örneklenir.
atomu içeren doymamis bir düz- veya dalli-karbon zinciri ile
ilgilidir. Bu terim, ayrica Vinil, allil ve butenil ve
izomerleri olarak köklerle örneklendirilir.
Eklendikleri nitrojen Ve karbon atomu ile birlikte R4 ve R2 ile
olusan “5-üyeli heterosikl" terimi, hidroksi veya flor ile
ornatilmis prolinin pirolidin halkasi için tercihe göre
hidroksi veya halojen ile ornatilmis bir pirolidin halkasi
anlamina gelir.
engellemek için geleneksel olarak kullanilan bir asit veya
Lewis asidine duyarli bir ornatigi ifade eder. Uygun asit veya
Lewis aside duyarli amid koruyucu gruplar, lsidro-Llobet A.,
Alvarez, M. ve Albericio F., “Amino Acid-Protecting Groups”,
ve Green T., “Protective Groups in Organic Synthesis”, 4'üncü
Baski, Wiley lnterscience, 2007, Bölüm 7, sf. 696 belgelerinde
tarif' edilmektedir. Uygun amit koruyucu gruplari, bu yüzden
tritel, Tmob (2,4,6-trimetoksibenzil), Ksan (9-ksantenil), de
(siklopropildimetilkarbinil), Mbh (4,4'-dimetoksibenzhidril)
veya Mtt (4-metiltritel)'den seçilebilir,
R4 ornatigi için kullanilan “hidroksi koruyucu grubu” terimi,
hidroksi grubunun reaktivitesini engellemek için geleneksel
olarak kullanilan herhangi bir ornatiga karsilik gelir. Uygun
hidroksi koruyucu gruplar, Isidro-Llobet A., Alvarez, M. ve
Albericio F., “Amino Acid-Protecting Groups”, Chem. Rev. 2009,
Peptide Synthesis”, Oxford University Press, Green T.,
and Sons, Inc.,l99l, 10-142 belgelerinde tarif edilmekte ve
tercihe göre fenil veya halojenli fenil ile ornatilan
Clq-alkil; ng-alkenil; tercihe göre Ola-alkil veya fenil ile
ornatilan silil veya cia-alkiloksikarbonilden seçilebilir.
Spiral bag,
kiralitesini gösterir.
Kimyasal bir yapida kiral bir karbon mevcutsa, bu kiral karbon
ile baglantili olan tüm stereoizomerlerin yapi tarafindan saf
stereoizomerler ve bunlarin karisimlari tarafindan kapsandigi
kastedilmistir.
Mevcut bulusun özel bir uygulamasinda oksitosin analoglari
formül la'ya sahip olup,
0 5 0 N \)IkN
burada R1, R2 ve R3 yukarida tanimlandigi gibidir.
R1, özellikle hidrojen veya Cia-alkil, daha özel olarak
hidrojen veya metildir.
R2, özellikle hidrojen veya Cia-alkil, daha özel olarak
hidrojendir.
R1 ve R2, eklendikleri nitrojen ve karbon atomu ile birlikte,
tercihe göre hidroksi veya halojen. ile ornatilan, özellikle
ile hidroksi veya flor ile ornatilan özellikle prolinin
pirrolidin halkasini olusturur;
R3 özellikle n-butil veya i-butil anlamina gelir;
Daha da özel oksitosin analoglari asagida sayilmistir:
c[Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu]-Gly-Leu-Gly-NHZ (1)
c[Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu]-Pro-Leu-Gly-NHz (2)
c[Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu]-Sar-Leu-Gly-NH2 (3)
c[Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu]-Sar-Nle-Gly-NH2 (4)
c[Gly-Tyr-lle-Gln-Asn-Glu]-trans-4-floro-Pro-Leu-Gly-NH2 (5)
c[Gly-Tyr-lle-Gln-Asn-Glu]-trans-4-hidroksi-Pro-Leu-Gly-NHQ
Formül II'ye ait reçine bagli peptid öncüsü asagidaki formüle
sahiptir:
Oî/NNjE/O Ila
burada R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7 ve R5, yukaridaki gibidir.
R1, Özellikle hidrojen veya Ciu-alkil, daha Özel olarak
hidrojen veya metildir.
R2, özellikle hidrojen veya C1%*alkil, daha özel olarak
hidrojendir.
R1 ve R2, eklendikleri nitrojen ve karbon atomu ile birlikte,
tercihe göre hidroksi veya halojenr ile ornatilan, özellikle
ile hidroksi veya flor ile ornatilan özellikle prolinin
pirrolidin halkasini olusturur;
R3 özellikle n-butil veya i-butil anlamina gelir;
R4 özellikle, t-butil, allil, tritel, 2-klorotritel, t-
butiloksikarbonil, t-butildifenilsilil veya t-
butildimetilsilildir, ancak daha özel olarak t-butildir;
R5, Fmoc'tur;
R6 özellikle, l-adamantil, fenilizopropil veya t-butildir,
R7 özellikle, tritel, 2-klorotritel, 4-metiltritel, ama daha
Özel olarak triteldir; ve
R8 özellikle, tritel, 2-klorotritel, 4-metiltritel, ama daha
özel olarak triteldir.
Formül Il'nin reçine bagli peptit prokürsörü, kati fazli
peptit sentezi tekniginde uzman kisilerce bilinen yöntemler
kullanilarak, genellikle tekrarlanmis bir Fmoc ayrilmasi ve
istenen Fmoc korumali amino asitlerin tekrarli bir baglanmasi
ile hazirlanabilir.
Kural olarak, kati fazli peptid sentezi için, özellikle Fmoc
kati fazli peptid sentezi için uygun ticari olarak temin
edilebilir amid reçineleri kullanilabilir. Yararli reçineler
örnegin Chan W. C. ve White P. D. “Fmoc Solid Phase Peptide
Synthesis”, Oxford University Press yayininda tarif
edilmektedir. Örnegin Agilent Technology'den temin edilen PL-
Rink reçinesi (4-[(2,4-Dimetoksifenil)Fmoc-
aminometil]fenoksiasetamido metil reçinesi), mevcut bulusun
prosesi için uygun bulunmustur.
Fmoc ayrilmasi, uygun bir organik çözücü içinde bir piperidin
türevleri çözeltisi ile gerçeklesebilir. Avantajli sekilde
N,N-dimetilformamit veya N-metilpirrolidon içindeki bir
piperidin veya 4-metil piperidin çözeltisi uygulanabilir.
Fmoc korumali amino asitlerle reçinenin baglanmasi,
benzotriazol-l-il-oksitripirrolidinofosfonyum heksaflorofosfat
(PyBOP), (7-azabenzotriazol-l-iloksi)tripirrolidinofosfonyum
heksaflorofosfat (PyAOP), bromotripirrolidinofosfonyum
heksaflorofosfat (PyBroP), hidroksibenzotriazol (HOBt) ve
N,N'-diizopropilkarbodiimit (DIC), N,N,N',N'-tetrametil-O-
(benzotriazol-l-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronyum
heksaflorofosfat (HBTU), O-(7-azabenzotriazol-l-il)-N,N,N',N'-
tetrametiluronyum heksaflorofosfat (HATU), O-(6-
klorobenzotriazol-l-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronyum
heksaflorofosfat (HCTU), (1-siyano-2-etoksi-2-
Oksoetilidenaminooksi)dimetilamino-morfolino-karbenyum
heksaflorofosfat (COMU), tetrametilfloroformamidinyum
heksaflorofosfat (TFFH), 2-hidroksi-piridin (HOPy) veya 4-
(4,6-dimetoksi-l,3,5-triazin-2-il)-4-metilmorfolinyum klorür
(DMTMM)'den seçilen bir kenetleme maddesi ile bir organik amin
bazi ve uygun bir organik çözücü varliginda gerçeklesebilir.
HOBt, HOPy ve DIC'in piridin varliginda organik amin baz
olarak ve organik çözücü olarak NyN'-dimetlyformamidin tercih
edilen bir kenetleme maddesi oldugu bulunmustur.
Formül X'in Fmoc-Gly-Tyr(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asn(Trt)-Glu(OAll)-
Gly-Leu-Gly-reçinesi,
örnegin tekrarlanan Fmoc klevaji ve asagidaki Fmoc korumali
amino asitlerin tarif edilen sirayla tekrarlanan kenetlenmesi
ile bir PL-Rink reçinesi üzerine olusturulabilir: Fmoc-Gly-OH,
Fmoc-Leu-OH, Fmoc-Gly-OH, Fmoc-Glu(OAll)-OH, Fmoc-Asn(Trt)-OH,
Fmoc-Gln(Trt)-OH, Fmoc-Ile-OH, Fmoc-Tyr(tBu)-OH ve FmOC-Gly-
Yukarida açiklandigi gibi, proses, yöntemi a)'yi izleyebilir,
burada R6, allil veya 4-{N-[l-(4,4-dimetil-2,6-
dioksosikloheksiliden)-3-metilbutil]amino}benzil'dir. Bu
durumda yöntem, asagidaki adimlar ile karakterize edilir:
al) allil veya 4-{N-[l-(4,4-dimetil-2,6-
dioksosikloheksiliden)-3-metilbutil]aminö}benzil grubu R6,
yarilir, sonraki bir adimda
a2) Fmoc grubu R5, yarilir, ondan sonra
a3) halka siklizasyonu, reçine üzerine etkir, ayri bir adimda
a4) global koruma kaldirilmasi ve reçineden ayrilma
gerçeklesir ve tercihe göre
a5) formül I'in bu sekilde elde edilen oksitosin analogu
aritilir ve izole edilir.
Allil veya 4-{N-[l-(4,4-dimetil-2,6-dioksosikloheksiliden)-3-
metilbutil]amino}benzil grubu al) adiminda ayrilir, genellikle
bir paladyum. veya rodyum. bilesigi veya hidrazin varliginda
gerçeklestirilir. Uygun paladyum veya rodyum bilesikleri,
tetrakis(trifenilfosfin)paladyum, paladyum
asetat/trifenilfosfin, paladyum asetat/trietilfosfit,
bis(trifenilfosfin)paladyum diklorür veya
tris(trifenilfosfin)rodyum klorürden seçilebilir. Terciheh
paladyum bilesikleri, daha da tercihen
tetrakis(trifenilfosfin)paladyum kullanilir.
Ayrica, bir süpürücü, örnegin fenilsilan, pirrolidin, morfolin
veya N-metil-N-trimetilsilil-trifloroasetamit, özellikle
fehilsilan, genellikle mevcuttur.
Tepkime, bir kural olarak, metilen klorür, asetonitril veya
tetrahidrofuran gibi uygun bir organik çözücü içinde oda
sicakliginda gerçeklesebilir.
a2) adimindaki Fmoc klevaji, uygun bir organik Çözücü içindeki
yukarida Özetlenen sekilde piperidin veya 4-metil-piperidin
ile gerçeklestirilebilir.
Halka siklizasyonu a3) adiminda, benzotriazol-l-il-
oksitripirrolidinofosfonyum heksaflorofosfat (PyBOP), (7-
azabenzotriazol-l-iloksi)tripirrolidinofosfonyum
heksaflorofosfat (PyAOP), N,N,N',N'-tetrametil-O-(lH-
benzotriazol-l-il)uranyum heksaflorofosfat (HBTU), l-
3-oksid heksaflorofosfat (HATU), O-(6-klorobenzotriazol-l-il)-
N,N,N',N'-tetrametiluronyum heksaflorofosfat (HCTU), (l-
siyano-Z-etoksi-Z-oksoetilidenaminooksi)dimetilamino-
morfolino-karbenyum heksaflorofosfat (COMU), 2-hidroksi-
piridin (HOPy) veya 4-(4,6-dimetoksi-1,3,5-triazin-2-il)-4-
metilmorfolinywn klorür (DMTMM)'den uygun olarak seçilen bir
siklizasyon ajani kullanarak bir organik amin bazi varliginda
reçine üzerine etkir.
Uygun organik amin bazlari, piridin, imidazol, N,N-
diizopropiletil amin, trietilamin, N-metilmorfolin, N,N-
dimetil-4-aminopiridin, l,8-diazabisiklo[5.4.0]undek-7-en veya
l,4-diazabisiklo[2.2.2]oktandan seçilebilir.
a3) siklizasyon adimi, N,N-diizopropiletil amin, imidazol veya
N-metilmorfolinr varliginda organikr amin ;bazlari olarak (3 0C
ila 25°C arasindaki sicakliklarda PyBOP veya PyAOP ile
gerçeklestirilebilir.
Global korumanin kaldirilmasi ve reçineden ayrilma,
trifloroasetik asit/su ve uygun bir süpürücü örnegin
tiyoanizol, anizol, fenol, triizopropilsilan, trietilsilan,
etanditiyol veya ditiyotreitol varliginda genellikle 0 °C ila
°C arasindaki sicakliklarda a4) adiminda gerçeklesebilir.
Triizopropilsilanin tercih edilen bir süpürücü oldugu
bulunmustur.
Adini a5)'te, nami oksitosinr analogu, reçineninr filtrelenmesi,
çözücünün filtrattan Çikarilmasi ve ayrica kalintinin gibi
uygun bir organik çözücü içine örnegin metil t-butil eter, 2-
metiltetrahidrofuran veya bunlarin karisimlari içine alinmasi
Ve nihai filtrasyon Ve kurutma ile izole edilebilir.
Ham oksitosin analogu, uygun bir organik çözücü ile, örnegin
sulu asetonitril ve uygun katki maddeleri örnegin
trifloroasetik asit, asetik asit veya amonyum asetatli çözelti
içinde preparatif HPLC marifetiyle aritilabilir.
Elde edilen fraksiyonlar, ardindan formül I'in saf oksitosin
analogunu elde etmek üzere liyofilize edilebilir.
Mevcut bulusun prosesi, yöntem b)'yi izler, burada R5, t-butil,
l-adamantil veya fenilizopropil'dir. Bu durumda yöntenu ekli
istemlerce tanimlanan adimlarla karakterize edilir.
bl) adimindaki Fmoc klevaji, yukarida adim az) için tarif
edilen sekilde gerçeklesebilir.
Global korumasinin kaldirilmasi ve yukarida a4) adiminda tarif
edilen sekilde reçineden ayrilma b& adiminda
gerçeklestirilebilir. Adim a4 için tercih edilen uygulamalar,
benzer sekilde b2) adimi için de geçerlidir.
b3) adimindaki halka siklizasyonu çözelti içinde yapilir ama
a3) adimi için yukarida sayilan siklizasyon maddeler ve organik
amin bazlari ile meydana gelebilir. Adim a3 için tercih edilen
uygulamalar, benzer sekilde b3) adimi için de geçerlidir.
Izolasyon ve saflastirma b4) adiminda, adim a5)'te tarif
edildigi sekliyle ayni tarzda gerçeklestirilebilir. Adim a5
için tercih edilen uygulamalar, benzer sekilde b4) adimi için
de geçerlidir.
Örnekler
Kisaltmalar:
SPPS = kati-faz peptid sentezi, PL-Rink reçinesi = 4-[(2,4-
Dimetoksifenil)Fmoc-aminometil]fenoksiasetamido metil
Gly = glisin, Leu = lösin, Glu(OAll) = allil-korumali glutamik
asit, Glu(tBu) = tert butil-korumali glutamik asit, Asn(Trt) =
Tritel-korumali asparagin, Gln(Trt) : Tritel-korumali
glutamin, Ile : izolösin, Tyr(tBu) : tert butil-korumali
tirozin, Sar == N-metilglisin, Pro == prolin, Nle == Norlösin,
DMF = N,N-Dimetilformamit, HOBt = l-hidroksibenzotriazol, HOPy
= 2-hikroksi-piridin, DIC = N,N'-Diizopropilkarbodiimit, NEP =
N-etilpirrolidon, PyBOP = (Benzotriazol-l-
iloksi)tripirrolidinofosfonyum heksaflorofosfat, DIPEA :
Diizopropiletil amin, MeOH == metanol, CH2C12 = diklorometan,
MTBE == Metil tert-butil eter, MetF = 2-Metiltetrahidrofuran,
TFA : Trifloroasetik asit, MeCN : asetonitril, PyAOP : (7-
Azabenzotriazol-l-iloksi)tripirrolidinofosfonyum
heksaflorofosfat, HBTU = N,N,N',N'-Tetrametil-O-(1H-
benzotriazol-l-il)uranyum heksaflorofosfat, HATU : 1-
3-oksid heksaflorofosfat, HCTU = O-(6-klorobenzotriazol-1-il)-
N,N,N',N'-tetrametiluronyumr heksaflorofosfat, COMU = (1-
siyano-Z-etoksi-Zý oksoetilidenaminooksi)dimetilamino-
morfolino-karbenyum heksaflorofosfat, DMTMM = 4-(4,6-
Dimetoksi-l,3,5-triazin-2-il)-4-metilmorfolinyum klorür, NMP :
l-Metil-Z-pirrolidinon, DMSO == Dimetil sülfoksit, DMI == 1,3-
Dimetil-Z-imidazolidinon, DMPU = 1,3-Dimetil-3,4,5,6-
tetrahidro-Z(lH)-pirimidinon, NMM = N-Metilmorfolin, DMAP =
N,N-Dimetil-4-aminopiridin, DIPEA = N,N-Diizopropiletilamin,
DBU - l,8-diazabisiklo[5.4.0]undek-7-en, DABCO : 1,4-
diazabisiklo[2.2.2]oktan.
Karsilastirma Örnegi
Asagidakinin hazirlanmasi için karsilastirmali bir deney
çalistirilmistir:
c[Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu]-Gly-Leu-Gly-NH2 (1)
WOZOl4/O95773 (kati faz siklizasyon) tarifine Ibenzer sekilde
ve asagida Sema 1'de özetlenen sekilde:
a) Fmoc ayrilmasi
b) Fmoc-AA-lürevleririin
kenetlenmesl
a) ve b) adimlari 8 kez tekrarlanir
c) Fmnc ayrilmasi
d) All'il ayrilmasi
F'L-Ririk reçinesi
.: , .w _giy rs
î] Global korumanin
kaldirilmasi ve reçine n
ayrilmasi l i
g) saflaslirma ve ' w.
Sentez performansi, ürün (1)'in asagidaki sema 2'de gösterilen
formülün dimer yan ürününe orani ve verimi temelinde
ölçülmüstür:
HgN-Gly-Leu-Gly-C [Glu-Asn-Gln-Ile-Tyr-Gly-Glu (Gly-Leu-Gly-NHg) -
Asn-Gln-le-Tyr-Gly] dimer
a) Fmoc Klevaji:
A SPPS reaktörüne (100 mL; peptid sentezleyici C5136XT eks
CSBio) PL-Rink reçinesi yüklenmistir (yük. 0,55 mmol/g, 5,00
g, içinde %20 piperidin ile
doldurulmustür. Karisim sonra 10 dakika süreyle 25 oC'de
karistirilmistir, Ardindan çözücü tahliye edilmis, bir baska
DMF ( içinde 20% piperidin porsiyonü ilave edilmis ve
karisim, 30 dakika süreyle 25 oC'de karistirilmistir. Daha
sonra çözücü drene edilmis, ortaya çikan reçine DMF ile (8 x
deFmoc-PL-Rink reçinesi elde etmek üzere yikanmistir.
b) Fmoc-AA-türevleri ile kenetleme:
deFmoc-PL-Rink reçinesine, bir 0,35M HOBt/DMF (32,0 mL,11,2
mmol) içinde Fmoc-Gly-OH, DMF içinde (
çözeltisi ilave edilmis ve 3 saat süreyle 25 °C'de
karistirilmistir. Çözücünün drene edilmesinden sonra, ortaya
çikan reçine DMF ile (4 x Fmoc-Gly-reçinesi elde
etmek üzere yikanmistir.
Fmoo-Gly-OH kullanmak yerine, Fmoc klevaji ve Fmoc-AA türevi
kenetleme adimlari 8 kez tekrarlanmistir, asagidaki Fmoç-amino
asit türevleri: Fmoc-Gly-Tyr(tBu)-lle-Gln(Trt)-Asn(Trt)-
Glu(OAll)-Gly-Leu-Gly-reçinesi elde etmek üzere Fmoc-Leu-OH,
Fmoc-Gly-OH, Fmoc-Glu(OAll)-OH, Fmoc-Asn(Trt)-OH, Fmoc-
Gln(Trt)-OH, Fmoc-Ile-OH, Fmoc-Tyr(tBu)-OH, Fmoc-Gly-OH. Dogru
kütleyi teyit etmek üzere bir örnek reçineden (asagiya
bakiniz) ayrilmistir. MS (m/z): +
c) Fmoc Klevaji:
Terminal Gly'nin Fmoc klevaji, yukarida tarif edilen sekilde
H-Gly-Tyr(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asn(Trt)-Glu(OAll)-Gly-Leu-Gly-
reçinesi elde etmek üzere gerçeklestirilmistir. Dogru kütleyi
teyit etmek üzere bir örnek reçineden (araç asagida)
ayrilmistir. MS (m/z): +
d) Allil Klevaji:
H-Gly-Tyr(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asn(Trt)-Glu(OAll)-Gly-Leu-Gly-
reçinesine, CH2C12 ( içinde bir tetrakis trifenilfosfin
mmol) çözeltisi ilave edilmis ve 30 dakika süreyle 25 °C'de
karistirilmistir. Çözücünün drene edilmesinden sonra, bu adim
bir kez daha tekrarlanmis ve DMF (2 X ile
yikanmistir. DMF ( içindeki bir sodyum ditiyokarbamat
( çözeltisi ilave edilmis ve
karisim 15 dakika süreyle 25 °C'de karistirilmistir. Çözücünün
drene edilmesinden sonra, bu adim bir kez daha
tekrarlanmistir. Çözücünün çikarilmasindan sonra, ortaya çikan
reçine, H-Gly-Tyr(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asn(Trt)-Glu-Gly-Leu-Gly-
reçinesi elde etmek üzere DMF (4 x ile yikanmistir.
Dogru kütleyi teyit etmek üzere bir örnek reçineden (araç
asagida) ayrilmistir. MS (m/z): +
e) Reçine üzerinde siklizasyon:
NEP ( ve DIPEA
Asn(Trt)-Glu-Gly-Leu-Gly-reçinesine ilave edilmis ve karisim 4
saat süreyle 25 ”C'de karistirilmistir, Çözücünün
çikarilmasindan sonra, ortaya çikan reçine DMF (4 x ,
(EhClz (3 X ile yikanmistir.
Reçine, 10 Hbar'da 25°C'de 1. gün süreyle c[Gly-Tyr(tBu)-Ile-
Gln(Trt)-Asn(Trt)-G1u]-Gly-Leu-Gly-reçinesi (8,60 9) elde
etmek üzere kurutulmustur.
f) Global korumanin kaldirilmasi ve reçine ayrilmasi:
TFA ( içinde önceden sogutulmus (10-
°C) bir triizopropilsilan ( Çözeltisine, c[G1y-
Tyr(tBu)-lle-Gln(Trt)-Asn(Trt)-Glu]-Gly-Leu-Gly-reçinesi (8,60
g) i1ave edilmis ve 3 saat süreyle 25 °C'de karistirilmistir.
Reçine filtre edilmis ve filtrat vakum ortaminda konsantre
edilmistir. Kalinti, MTBE'ye ( ileve edilmis ve karisim
saat süreyle 25 °C'de karistirilmistir. Karisim filtre
edilmis ve kek MTBE ( ile yikanmis, daha sonra %15,9
saflikta beyaz bir kati seklinde ham c[G1y-Tyr-ne-G1n-Asn-
Glu]-Gly-Leu-Gly-NH2 1 (2,01 g, test agirlikça %1l,3, toplam %9
verim) elde etmek üzere kurutulmustur (HPLC alan-%, HPLC
yöntemi, Örnek 1). l/dimer orani 8,5 olmustur.
Örnek Siklizasyon Toplam Ham siklik l/dimerinin
yöntemi verim (%) peptidinin orani
safligi
(HPLC alan-
Karsilastirma Kati faz 9 15,9 8,5
1 (bulus) Kati faz 38 62,7 21,9
2 (bulus) Sivi faz 31 56,6 15,1
Örnek 1 (kati faz siklizasyonu)
c[Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu]-Gly-Leu-G1y-NH2 (1)
c'Giy-hv 'tEJi-Iü-;îi'i 'IM-A: 'Jul-L!`;I-*SIf-Lüi-gîß-Iüü'
a) Fmoc Klevaji:
A SPPS reaktörüne (100 mL; peptidi sentezleyici C8136XT eks
CSBio) PL-Rink reçinesi yüklenmistir (yük. 0,55 mmOl/g, 5,00
9, içinde %20 piperidin ile
doldurulmüstur. Karisim sonra 10 dakika süreyle 25 °C`de
karistirilmistir, Ardindan çözücü tahliye edilmis, bir baska
DMF ( içinde 20% piperidin porsiyonu ilave edilmis ve
karisim 30 dakika süreyle 25 °C'de karistirilmistir. Daha
sonra çözücü drene edilmis, ortaya Çikan reçine DMF ile (8 x
deFmoc-PL-Rink reçinesi elde etmek üzere yikanmistir.
b) Fmoc-AA-türevleri ile kenetleme:
deFmoc-PL-Rink reçinesine, bir 0,35M HOBt/DMF (32,0 mL,ll,2
mmol) içinde Fmoc-Gly-OH, DMF içinde (
çözeltisi ilave edilmis ve 3 saat süreyle 25 °C'de
karistirilmistir. Çözücünün drene edilmesinden sonra, ortaya
çikan reçine DMF ile (4 x Fmoc-Gly-reçinesi elde
etmek üzere yikanmistir.
Fmoc-Gly-OH kullanmak yerine, Fmoc klevaji ve Fmoc-AA türevi
kenetleme adimlari 8 kez tekrarlanmistir, asagidaki Fmoo-amino
asit türevleri: Fmoç-Leu-OH, Fmoc-Gly-OH, Fmoc-Glu(OAll)-OH,
Fmoc-Asn(Trt)-OH, Fmoc-Gln(Trt)-OH, Fmoc-Ile-OH, Fmoc-
Tyr(tBu)-OH, Fmoc-Gly-OH; X (Fmoc-Gly-Tyr(tBu)-lle-Gln(Trt)-
Asn(Trt)-Glu(OAll)-Gly-Leu-Gly-reçinesi elde etmek üzere).
Dogru kütleyi teyit etmek üzere bir örnek reçineden (asagiya
bakiniz) ayrilmistir. MS (m/z): lZll,8 (MH-1)+
c) Allil Klevaji:
X'e (Fmoc-Gly-Tyr(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asn(Trt)-Glu(OAll)-Gly-
Leu-Gly-reçinesi), (HhCIz ( içinde bir tetrakis
trifenilfosfin paladyum (159 mg, 0,138 mmol) ve fenilsilan
( çözeltisi ilave edilmis ve 30 dakika
süreyle 25 °C'de karistirilmistir. Çözücünün drene
edilmesinden sonra, bu adim bir kez daha tekrarlanmis ve DMF
(2 x içindeki bir
sodyum ditiyokarbamat ( çözeltisi
ilave edilmis ve karisini 15 dakika süreyle 25 °C'de
karistirilmistir. Çözücünün drene edilmesinden sonra, bu adim
bir kez daha tekrarlanmistir. Çözücünün çikarilmasindan sonra,
ortaya çikan reçine, Fmoc-Gly-Tyr(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asn(Trt)-
Glu-Gly-Leu-Gly-reçinesi elde etmek ;üzere DMF (4 2( 50,0 AmL)
ile yikanmistir. Dogru kütleyi teyit, etmek üzere bir örnek
reçineden (araç asagida) ayrilmistir. MS (m/z): ll7l,8 (M+H)+
d) Fmoc Klevaji:
Terminal Gly'nin Fmoo klevaji, yukarida tarif edilen sekilde
H-Gly-Tyr(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asn(Trt)-Glu-Gly-Leu-Gly-reçinesi
elde etmek üzere gerçeklestirilmistir. Dogru kütleyi teyit
etmek üzere bir örnek reçineden (araç asagida) ayrilmistir. MS
e) Reçine üzerinde siklizasyon:
NEP ( ve DIPEA
Asn(Trt)-Glu-Gly-Leu-Gly-reçinesine ilave edilmis ve karisim 4
saat süreyle 25 °C'de karistirilmistir, Çözücünün
çikarilmasindan sonra, ortaya çikan reçine DMF (4 x ,
(EüClz (3 x ile yikanmistir.
Reçine, 10 Umar'da 25°C'de ]. gün süreyle c[Gly-Tyr(tBu)-Ile-
Gln(Trt)-Asn(Trt)-Glul-Gly-Leü-Gly-reçinesi (9,17 9) elde
etmek üzere kurutulmustur.
f) Global korumanin kaldirilmasi ve reçine ayrilmasi:
TFA ( içinde Önceden sogutülmüs (10-
°C) bir triizopropilsilan ( çözeltisine, c[Gly-
Tyr(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asn(Trt)-Glu]-Gly-Leu-Gly-reçinesi (9,17
g) ilave edilmis ve 3 saat süreyle 25 oC'de karistirilmistir.
Reçine filtre edilmis ve filtrat vakum ortaminda konsantre
edilmistir. Kalinti, MTBE'ye ( ilave edilmis ve karisim
saat süreyle 25 DC'de karistirilmistir. Karisim filtre
edilmis ve kek MTBE ( ile yikanmis, daha sonra %62,7
saflikta beyaz bir kati seklinde ham C[Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-
Glü]-Gly-Leu-Gly-NH2 1 (2,39 9, test agirlikça %40,9, toplam
hareketli faz, A: Su içinde %0,05 TFA, B: MeCN içinde %0,05
TFA; akis: 40 dakika süreyle 0,13 mL/dk, 15 dakika süreyle
içerisinde gradyani, 10 dakika
süreyle izokratik .
l/dimer orani 21,9 olmustur.
Alikonma süresi: 23,2 dk (c[Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu]-Gly-Leu-
Gly-NHz), 18,8 dk (H-Gly-Tyr-lle-Gln-Asn-Glu-Gly-Leu-Gly-NHQ,
26,1 dk (dimer)
g) Saflastirma ve izolasyon:
Ham c[Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu]-Gly-Leu-Gly-NH; su-MeCN (10-1)
içinde çözülmüs ve filtre edilmistir. Piltrat, ayni hacimdeki
su ile seyreltilmistir. Çözelti, preparatif HPLC marifetiyle
bir Kromasil-Cl8-100 kolonu üzerinde saflastirilmistir (250 x
80 mm, 10 um parçacik boyutu, A: %0,1 TFA-su, B: MeCN; akis:
ila arasindaki gradyan 1 dk içerisinde, izokratik
arasindaki gradyan 1 dk içerisinde, izokratik 6 dk
süreyle. Fraksiyonlar toplanmis ve beyaz bir toz seklinde
NH21 (0,708 g) elde etmek üzere liyofilize edilmistir' (HPLC
alan-%, HPLC yöntemi, Örnek 1). Saf 1 içinde herhangi bir
dimer görülmemistir. MS (m/z): +
Örnek 2 (Çözelti fazi siklizasyonu)
c[Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu]-Gly-Leu-Gly-NHZ (1)
aiFrm :lem ge
SIIEm '5953 .ABE ::lan 3
PL-R di. re: n
a) Fmoc Klevaji:
Bir SPPS reaktörü ( PL-Rink reçinesiyle (yük. 0,55
mmol/g, içinde %20 piperidin
ile deldurulmustür. Karisim sonra 10 dakika süreyle 25 °C'de
karistirilmistir, Ardindan çözücü tahliye edilmis, bir baska
DMF ( içinde 20% piperidin porsiyonu ilave edilmis ve
karisimi 30 dakika süreyle 25 °C'de karistirilmistir. Daha
sonra çözücü drene edilmis, ortaya çikan reçine DMF ile (8 x
deFmoc-PL-Rink reçinesi elde etmek üzere yikanmistir.
b) Emoc-AA-türevlerinin kenetlenmesi:
deFmoc-PL-Rink reçinesine, bir 0,35M HOBt/DMF (32,0 mL,ll,2
mmol) içinde Fmöc-Gly-OH, DMF içinde (
çözeltisi ilave edilmis ve 3 saat süreyle 25 °C'de
karistirilmistir. Çözücününr drene edilmesinden, sonra, ortaya
çikan reçine DMF ile (4 x Fmoc-Gly-reçinesi elde
etmek üzere yikanmistir.
Fmoc-Gly-OH kullanmak yerine, Fmoc klevaji ve Fmoç-AA türevi
kenetleme adimlari 8 kez tekrarlanmistir, asagidaki Fmoc-amino
asit türevleri: Fmoc-Leu-OH, Fmoc-Gly-OH, Fmoc-Glü(tBü)-OH,
Fmoc-Asn(Trt)-OH, Fmoc-Gln(Trt)-OH, Fmoc-Ile-OH, Fmoc-
Tyr(tBu)-OH, Fmoc-Gly-OH; X (Fmoc-Gly-Tyr(tBü)-Ile-Gln(Trt)-
Asn(Trt)-Glu(tBu)-Pro-Leü-Gly-reçinesi elde etmek üzere).
Dogru kütleyi teyit etmek üzere bir örnek reçineden (asagiya
bakiniz) ayrilmistir. MS (m/z): +
c) Fmoc Klevaji:
Terminal Gly'nin Fmoc-Ayrilmasi yukarida tarif edilen sekilde
gerçeklestirilmistir. Çözücü drene edildikten sonra, ortaya
çikan reçine DMF (8 x ve MeOH (3
x ile yikanmistir. Reçine, 10 mbar'da 25°C'de 1 gün
süreyle H-Gly-Tyr(tBü)-Ile-Gln(Trt)-Asn(Trt)-Glü(tBü)-Gly-Leü-
Gly-reçinesi (10,8 9) elde etmek üzere kurutulmüstür.
d) Global korumanin kaldirilmasi ve reçine ayrilmasi:
TFA ( içinde önceden sogütülmüs (10-
°C) bir triizopropilsilan ( çözeltisine, H-Gly-
Tyr(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asn(Trt)-Glu(tBü)-Gly-Leu-Gly-reçinesi
(10,8 g) ilave edilmis ve 3 saat süreyle 25 °C`de
karistirilmistir. Reçine filtre edilmis ve filtrat vakum
ortaminda konsantre edilmistir. Kalinti, MeTHF'ye (
ilave edilmis ve karisim 15 saat süreyle 25 °C'de
karistirilmistir. Karisini filtre edilmis ve kek› MeTHF ( ile yikanmis, daha, sonra, beyaz bir kati seklinde %67,4
saflikta (H-Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu-Gly-Leu-Gly-NHM LPl (3,60
9) elde etmek üzere kürütülmüstür (HPLC alan-%, HPLC yöntemi,
Örnek 1). MS (m/z): +
e) Çözeltide siklizasyon:
NEP ( içindeki bir LPl
(H-Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu-Gly-Leu-Gly-NH2) (3,50 g) karisimina
PyBOP (1,92 g, 3,69 mmol) ilave edilmis ve 1 saat süreyle 25
”C'de karistirilmistir. Tani dönüsüme kadar, bir baska PyBOP
(0,960 g, 1,84 mmol) porsiyonü ilave edilmis ve ayni
sicaklikta 1 saat süreyle karistirilmistir. Ortaya çikan
karisim, bir MTBE/MetF çözeltisi ( çözeltisine
ilave edilmistir ve 15 saat süreyle 25 oC'de karistirilmistir.
Karisim, filtre edilmis ve kek, MTBE ( ile yikanmis,
daha sonra %56,6 saflikta beyaz bir kati seklinde ham c[Gly-
Tyr-Leu-Gln-Asn-Glu]-Gly-Leü-Gly-NH2 1 (4,30 g, test agirlikça
alan-%, HPLC yöntemi, örnek 1). 1/dimer orani 15,1 olmustur.
f) Saflastirma ve izolasyon:
Ham c[Gly-Tyr-Leü-Gln-Ãsn-Glü]-Gly-Leu-Gly-NH2 su-MeCN (10-1)
içinde çözülmüs ve çözünmemis malzeme filtrelenmistir.
Filtrat, ayni hacimdeki su ile seyreltilmistir. Çözelti,
preparatif HPLC marifetiyle bir Kromasil-C18-100 kolonü
üzerinde saflastirilmistir (250 X 80 mm, 10 um parçacik
boyutu, A: %0,1 TFA-su, B: MeCN; akis: 300 mL/dk; izokratik
arasinda
gradyan 1 dk içerisinde,
arasindaki gradyan 17 dk içerisinde, ila arasindaki gradyan 1 dk içerisinde, izokratik arasindaki
gradyan ]. dk içerisinde, izokratik 63 dk süreyle.
Fraksiyonlar toplanmis ve beyaz bir toz seklinde %99,7 saflik
ile saf c[Gly-Tyr-Leu-Gln-Asn-Glu]-Gly-Leu-Gly-NHgl (444 mg)
elde etmek üzere liyofilize edilmistir (HPLC alan-%, HPLC
yöntemi, Örnek 1). Saf 1 içinde herhangi bir dimer mevcut
olmamistir. MS (m/z): 931,0
Örnek 3 a-g (Kenetleme ayiraçlarinin optimizasyonu):
c[Gly-Tyr-ne-Gln-Asn-Glu]-Gly-Leu-Gly-NHz (l)
Örnek Z'ye benzer bir sekilde, siklizasyonlar Tablo 2'de
listelendigi gibi birlestirme ayiraçlari kullanilarak
gerçeklestirilmistir.
Örnek Kenetleme Tepkime Tepkime l/dimerinin
ayiraCi karisiminda karisimindaki orani
verim (%) saflik (HPLC
3a PyBOP 63 54,9 l3,4
3b PyAOP 63 52,7 23,2
3c HBTU 45 51,0 l2,4
3d HATU 5l 47,l lO,6
3e HCTU 55 l0,6 l3,8
3f COMU 26 ll,5 28,0
3g DMTMM 17 l8,5 34,9
Örnek 4 a-g (Çözücülerin Optimizasyonu):
c[Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu]-Gly-Leu-Gly-NH2 (1)
Örnek 2'ye benzer bir sekilde, siklizasyonlar Tablo 3'te
listelendigi gibi çözücüler kullanilarak gerçeklestirilmistir.
Örnek Çözücü Tepkime l/dimerinin
(Konsantrasyon) Tepkime karisiminda orani
karisiminda saflik
verim (HPLC
Örnek 5 a-g (Bazlarin Optimizasyonu):
c[Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu]-Gly-Leu-Gly-NH2 (1)
Örnek Z'ye benzer bir sekilde, siklizasyonlar Tablo 4'te
listelendigi gibi bazlar kullanilarak gerçeklestirilmistir.
Örnek Baz Tepkime Tepkime l/dimerinin
karisiminda karisiminda orani
verim (%) saflik
(HPLC alani-
5a Imidazol 63 55,7 10,6
5b NMM 68 57,7 22,0
5G DABCO 47 46,4 15,4
5d DMAP 43 47,8 13,6
5e DIPEA 63 54,9 13,4
5f DBU 25 27,0 19,4
:; NMM, O°C 66 54,5 20,0
Örnek 6 a-d (Reçine yüklemesi/amino asit esdegerinin
karsilastirilmasi):
c[Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu]-Pro-Leu-Gly-NHZ (2)
asitleri
OH, Fmoc-
Gln(Trt)-OH, Fmoc-Ile-OH, Fmoc-Tyr(tBu)-OH,
Y 5 Y 15%
HYSlyYTy'rlle-YG"rAsanurP'oimrGls/NF:
sekilde,
kullanilarak sentezlenmistir:
Fmoc-Glu(tBu)-OH,
siklik peptid 2
Fmoc-Asn(Trt)-OH
Fmoc-Gly-OH,
Fmoc-Leu-
Fmoc-Gly-OH
Sentez ölçegi: 9,60 mmol (yük: bakiniz örnek 6a-d; reçine 30,0
Verim: %40 (saflastirmadan sonra)
Saflik: %
Alikonma süresi:
LP2 (H-Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu-Pro-Leu-Gly-NHz) ara ürününün
saflik ve verimi, Tablo 5'te listelenen reçine
yüklemeleri/amino asit esdegerleri kullanilarak
belirlenmistir.
Örnek Reçine Amino asit Ham LP2 `nin Ham LP2 `nin
yüklemesi (esd.) safligi (HPLC verimi (%)
(mmol/g) alan-%)
c[Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glü]-Pro-Leu-Gly-NH2 (2)
Örnek 7, siklizasyonlarin baz olarak N-metilmorfolin
kullanilarak gerçeklestirilmesi haricinde, Örnek 2'ye benzer
bir sekilde gerçeklestirilmistir.
a) Fmoc Klevaji:
A SPPS reaktörüne (250 mL; peptid sentezleyici C8536XT eks
CSBio) PL-Rink reçinesi yüklenmistir (yük. 0,55 mmol/g, 10,0
9, içinde %20 piperidin ile
doldurulmüstür. Karisim sonra 10 dakika süreyle 25 oC`de
karistirilmistir, Ardindan, çözücür tahliye edilmis, bir` baska
DMF ( içinde 20% piperidin porsiyonu ilave edilmis ve
karisim 30 dakika süreyle 25 °C'de karistirilmistir. Daha
sonra çözücü drene edilmis, ortaya çikan reçine DMF ile (8 x
deFmoc-PL-Rink reçinesi elde etmek üzere yikanmistir.
b) Fmoc-AA-türevlerinin kenetlenmesi:
deFmoc-PL-Rink reçinesine, bir 0,35M HOBt/DMF (64,0 mL,22,4
mmol) içinde Fmoc-Gly-OH, DMF içinde (
çözeltisi ilave edilmis ve 3 saat süreyle 25 °C`de
karistirilmistir. Çözücünün drene edilmesinden sonra, ortaya
çikan reçine DMF ile (4 x Fmoc-Gly-reçinesi elde etmek
üzere yikanmistir.
Fmoc-Gly-OH kullanmak yerine, Fmoc klevaji ve Emoc-AA türevi
kenetleme adimlari 8 kez tekrarlanmistir, asagidaki Fmoc-amino
asit türevleri: Fmoc-Leu-OH, Fmoc-Pro-OH, Fmoc-Glü(tBü)-OH,
Fmoc-Asn(Trt)-OH, Fmoc-Gln(Trt)-OH, Fmoc-Ile-OH, Fmoc-
Tyr(tBu)-OH, Fmoc-Gly-OH; Fmoc-Gly-Tyr(tBü)-Ile-Gln(Trt)-
Asn(Trt)-Glü(tBü)-Pro-Leü-Gly-reçinesi elde etmek üzere. Dogru
kütleyi teyit etmek üzere bir örnek reçineden (araç asagida)
ayrilmistir. MS (m/Z): l2ll,l (M+H)+
c) Fmoc Klevaji:
Terminal Gly'nin Fmoc-Ayrilmasi yukarida tarif edilen sekilde
gerçeklestirilmistir. Çözücü drene edildikten sonra, ortaya
çikan reçine DMF (8 x ve MeOH (3 x
ile yikanmistir. Reçine, 10 mbar altinda 25°C'de 1 gün
süreyle H- Gly-Tyr(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asn(Trt)-Glu(tBu)-Pro-
Leü-Gly-reçinesi (18,6 g) elde etmek üzere kurutulmustur.
Dogru kütleyi teyit etmek üzere bir örnek reçineden (araç
asagida) ayrilmistir. MS (m/z): +
d) Global korumanin kaldirilmasi ve reçine ayrilmasi:
TFA ( içinde önceden sogutülmus (10-
°C) bir triizopropilsilan ( çözeltisine, H-Gly-
Tyr(tBu)-Ile-Gln(Trt)-Asn(Trt)-Glu(tBü)-Pro-Leu-Gly-reçinesi
(6,00 g) ilave edilmis ve 3 saat süreyle 25 °C'de
karistirilmistir. Reçine filtre edilmis ve filtrat vakum
ortaminda konsantre edilmistir. Kalinti, MeTHF'ye (
ilave edilmis ve karisim. 15 saat süreyle 25 °C'de
karistirilmistir. Karisim, filtre edilmis ve kek, MeTHF ( ile yikanmis, daha sonra beyaz bir kati seklinde %87,3
saflikta H-Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu-Pro-Leu-Gly-NHZ LP2 (1,84 g)
elde etmek üzere kurutulmüstür (HPLC alan-%, HPLC yöntemi,
Örnek 1). Alikonma süresi: ; MS
e) Çözeltide siklizasyon:
N-etilpirrolidon (
içindeki bir H-Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu-Pro-Leu-Gly-NH2 LP2 (300
mg) karisimina PyBOP (237 mg, 0,455 mmol) ilave edilmis ve 1
saat süreyle 25 °C'de karistirilmistir. Tamr dönüsüme kadar,
bir baska PyBOP (47,4 mg, 0,0910 mmol) porsiyonu ilave edilmis
ve ayni sicaklikta 1 saat süreyle karistirilmistir. Ortaya
çikan karisim bir MTBE ( çözeltisine
ilave edilmis ve ardindan 15 saat süreyle 25 °C'de
karistirilmistir. Karisim filtre edilmis ve kek MTBE (
ile yikanmistir. Kek su/MeCN (10/1, içerisinde
çözündürülmüs ve Çözülmemis materyallerden süzülmüstür.
Filtrat beyaz bir kati seklinde %71,4 saflik ile ham c[Gly-
Tyr-Leu-Gln-Asn-Glu]-Pro-Leu-Gly-NHZ 2(3l3 mg, test agirlikça
(HPLC alan-%, HPLC yöntemi, Örnek 1).MS (m/z): +
c[Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu]-Sar-Leu-Gly-NHz (3)
c[GlyýTyrýlleýGlnýAsnýG lu]ISarýLeuýG MNHB
Örnek Z'ye benzer sekilde, saf siklik peptid 3 Fmoc-AA-
asitleri kullanilarak sentezlenmistir: Fmoc-Gly-OH, Fmoc-Feu-
OH, Fmoc-Sar-OH, Fmoc-Glu(tBu)-OH, Fmoc-Asn(Trt)-OH, Fmoc-
Gln(Trt)-OH, Fmoc-Ile-OH, Fmoc-Tyr(tBu)-OH, Fmoc-Gly-OH
Sentez ölçegi: 9,60 mmol (yük. 0,32 mmol/g, reçine 30,0 g)
Verim: %41 (saflastirmadan sonra)
Saflik: %
Alikonma süresi:
c[Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu]-Sar-Nle-Gly-NH2 (4)
<:[Gty›Tyr~He-Glr'i~Asn-GIu]-Sar-NIe-GIy-NH2
Örnek Z'ye benzer sekilde, saf siklik peptid 4 Fmoc-AA-
asitleri kullanilarak sentezlenmistir: Fmoc-Gly-OH, Fmoc-Nle-
OH, Fmoc-Sar-OH, Fmoc-Glu(tBu)-OH, Fmoc-Asn(Trt)-OH, Emoc-
Gln(Trt)-OH, Fmoc-Ile-OH, Fmoc-Tyr(tBu)-OH, Fmoc-Gly-OH
Sentez ölçegi: 9,60 mmol (yük. 0,32 mmol/g, reçine 30,0 g)
Verim %41 (saflastirmadan sonra)
Saflik: %
Alikonma süresi:
c[Gly-Tyr-He-Gln-Asn-Glu]-trans-4-floro-Pro-Leu-Gly-NH2 (5)
c[G\5,!-Tyr-lle-GIn-Asn-Glu]-trr=ir15.-4-fîuorc›-F>rc›-Leu-Gly-NH._`
Örnek Z'ye benzer sekilde, saf siklik peptid 5 Fmoc-AA-
asitleri kullanilarak sentezlenmistir: Emoc-Gly-OH, Fmoc-Leu-
OH, Fmoc-trans-4-floro-Pro-OH, Fmoc-Glu(tBu)-OH, Fmoc-
Asn(Trt)-OH, Fmoc-Gln(Trt)-OH, Fmoc-Ile-OH, Fmoc-Tyr(tBu)-OH,
Fmoc-Gly-OH
Sentez ölçegi: 9,60 mmol (yük. 0,32 mmOl/g, reçine 30,0 g)
Verim: %39 (saflastirmadan sonra)
Saflik: %
Alikonma süresi:
c[Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu]-trans-4-hidroksi-Pro-Leu-Gly-NH2 (6)
Örnek Z'ye benzer sekilde, saf siklik peptid 6 Fmoc-AA-
asitleri kullanilarak sentezlenmistir: Fmoc-Gly-OH, Fmoc-Feu-
OH, Fmoc-trans-4-tertbutoksi-Pro-OH, Fmoc-Glu(tBu)-OH, Fmoc-
Asn(Trt)-OH, Fmoc-Gln(Trt)-OH, Fmoc-Ile-OH, Fmoc-Tyr(tBu)-OH,
Fmoc-Gly-OH
Sentez ölçegi: 9,60 mmol (yük. 0,32 mmol/g, reçine 30,0 g)
Verim: %22 (saflastirmadan sonra)
Saflik: %
Alikonma süresi:
Örnek 12 (kati faz sikiizasyonu)
c[Gly-Tyr-lle-Gln-Asn-Glu]-trans-4-floro-Pro-Feu-Gly-NH2 *(5)
c[GIy-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu]-trans-4-flu0ro-P ro-Leu-GIy-NHQ
Örnek 1'e benzer sekilde, CSBio'dan bir CS536XT peptid
sentezleyici kullanilarak, saf siklik peptidi 5, Fmoc-AA-
asitleri kullanilarak sentezlenmistir: Fmoç-Gly-OH, Fmoc-Leu-
OH, Fmoç-trans-4-floro-Pro-OH, Fmoç-Glu(OA11)-OH, Fmoc-
Asn(Trt)-OH, Fmoc-Gln(Trt)-OH, Fmoc-Ile-OH, Fmoc-Tyr(tBu)-OH,
Fmoc-Gly-OH. Tüm sentez boyunca, Fmoc klevaji için DMF içinde
kullanilmis ve lineer dizideki tüm amino asit baglari, HOBt
yerine HOPy kullanilarak gerçeklestirilmistir. Reçine
basamaginda. nihai PyBOP destekli siklizasyonda, DIPEA. yerine
4-meti1morfolin, baz olarak kullanilmis ve siklizasyon, çözücü
olarak NEP yerine DMF içerisinde gerçeklestirilmistir. Ham
c[Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu]-trans-4-floro-Pro-Leu-Gly-NH2'nin
preparatif HPLC saflastirmasi, bir Kromasil-C18-100 kolonu
üzerinde yapilmistir (250 x 4,6 mm, 10 um parçacik boyutu, A:
mM ANH4OÃC pH5, B: MeCN; akis: 1 mL/dk; izokratik gradyan 1 dk
içerisinde, gradyan 10 dk
içerisinde, gradyan 1 dk
içerisinde,
ila gradyan 0,1 dk içerisinde, izokratik 6,9 dk süreyle. Toplanan fraksiyonlar su ile
seyreltilmis (
konsantre edilmis/tuzdan arindirilmis ve sonrasinda su ile/ACN
(1:1) elüte edilmistir. Toplanan fraksiyonlar (UV 280 nm, esik
seviyesi 1000mAu), ACN'yi çikarmak için dönüsel olarak
buharlastirilmis ve daha sonra beyaz liyo ürünü seklinde saf
peptidi vermek üzere liyofilize edilmistir.
Sentez ölçegi: 5,50 mmol (yükleme 0,55 mmol/g, reçine 10,0 g)
Verim: %34 (saflastirmadan sonra)
Saflik: %
Alikonma süresi:
Örnek 13 (kati faz siklizasyonu)
C[Gly-Tyr-Ile-Gln-Asn-Glu]-trans-4-floro-Pro-Leu-Gly-NH2 _(5)
c[Gly-Tyr-lle-Gln-Asn-Glu]-1rans-4-1Iuoro-Pro-Leu-GIy-NHL,
Örnek 13'e benzer` bir sekilde, saf siklik peptid. 5, reçine
üzerindeki lineer` peptidin sentezi boyunca HOPy yerine HOBt
kullanilarak sentezlenmistir.
Sentez ölçegi: 5,50 mmol (yükleme 0,55 mmol/g, reçine l0,0 g)
Verim: %25 (saflastirmadan sonra)
Claims (2)
1. Formül I'in oksitosin analoglarinin hazirlanmasi için proses olup, özelligi; N :1: R3 H 0 0 o o o o N/Lîr NH2 NH2 NH2 o 10 Ri'in, hidrojen veya Cin-alkil olmasi ve RQ'nin, hidrojen veya Clqýalkil olmasi; veya R1 ve Rz'nin, eklendikleri nitrojen. ve karbon atomu ile birlikte, tercihe göre hidroksi veya halojen ile ornatilan 5 üyeli bir heterosikl olusturmalari; 15 R3'ün, C1_7-alkil ve bunun karsilik gelen enantiyomerleri ve/Veya optik izomerleri olmasi, formül II'in bir reçine bagli peptid prekürsörünün islenmesini içermesidir N 1 R H G o\ o o o o H/LTrN\VJLR$m Rl, R2 ve R3'ün, yukaridaki gibi olmasi ve R5'in, Fmoc olmasi; Rê'nin, t-butil, l-adamantil veya fenilizopropil olmasi; Rî'nin, bir amit koruyucu grubu olmasi; ve Rs'in, bir amit koruyucu grubu olmasi ve bunun karsilik gelen enantiyomerler ve/Veya optik izomerleri olmasidir, yönteme göre bl) Fmoc grubu Rs'in, uygun bir organik çözücü içinde bir piperidin çözeltisi veya 4-metil-piperidin ile ayrilmasi; bz) global korumanin kaldirilmasi ve reçine ayrilmasinin, trifloroasetik asit ve uygun bir süpürücü örnegin tiyoanizol, anizol, fenol, triizopropilsilan, trietilsilan, etanditiyol veya ditiyotreitol varliginda gerçeklesmesidir; b3) halka siklizasyonunun, benzotriazol-l-il- oksitripirrolidinofosfonyumr heksaflorofosfat (PyBOP), (7- azabenzotriazol-l-iloksi)tripirrolidinofosfonyum heksaflorofosfat (PyAOP), N,N,N',N'-tetrametil-O-(lH- benzotriazol-l-il)uranyum heksaflorofosfat (HBTU), l- b]piridinyum 3-oksid heksaflorofosfat (HATU), O-(6- klorobenzotriazol-l-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronyum heksaflorofosfat (HCTU), (l-siyano-Z-etoksi-Z- oksoetilidenaminooksi)dimetilamino-morfolino-karbenyum heksaflorofosfat (COMU), 2-hidroksi-piridin (HOPy) veya 4- (4,6-dimetoksi-l,3,5-triazin-2-il)-4-metilmorfolinyum klorür (DMTMM)'den seçilen bir siklizasyon maddesi kullanilarak piridin, imidazol, N;N-diizopropiletil amin, trietilamin, N-metilmorfolin, N,N-dimetil-4-aminopiridin, l,8-diazabisiklo[5.4.0]undek-7-en veya 1,4- diazabisiklo[2.2.2]oktandan seçilen bir organik amin bazi varliginda çözelti içinde gerçeklestirilmesidir; 5 b4), tercihe göre bu sekilde elde edilen formül I'in oksitosin analogunun, izole edilmesi ve aritilmasidir.
2. Istem l'in prosesi olup, özelligi; burada oksitosin analogunun formül la'ya sahip olmasidir burada EF, R2 ve R3'ün, yukaridaki gibi olmasir ve burada formül Il'nin reçine bagli peptid prekürsörünün su formüle 15 sahip olmasidir: ”H ONRS in HKNAN Ni R3 H 0 osrj o &Wýo 0 o HJ\WN\VJLR%m NR7 NRß o burada RÃ, R2, R3, R4, R5, R6, R7 ve Rs'in, yukaridaki gibi 20 olmasidir. Istemler 1 veya 2'nin prosesi olup, Özelligi; burada RÃ'in, hidrojen veya Cy4-alkil olmasi ve RÂ'nin, hidrojen veya Ciq-alkil olmasi; veya R1 ve RZ'nin, eklendikleri nitrojen. ve karbon atomu ile birlikte, tercihe göre hidroksi veya halojen ile ornatilan prolinin bir pirrolidin halkasini olusturmalari; Rß'ün n-butil veya i-butil anlamina gelmesi; Rß'ün, t-butil, allil, tritel, 2-klorotritel, t- butiloksikarbonil, t-butildifenilsilil veya t- butildimetilsilil olmasi; R5'in, Fmoc olmasi; Rê'nin, il, l-adamantil, fenilizopropil veya t-butil olmasi; RI'nin, tritel, 2-klorotritel, 4-metiltritel olmasi; ve Rs'in, tritel, 2-klorotritel, 4-metiltritel olmasidir. Istemler 1 ila 3'ün herhangi birinin prosesi olup, özelligi; burada formül II'nin reçine bagli peptid prekürsörünün, tekrarli Fmoc klevaji ve ilgili Fmoc korumali amino asitlerinin kenetlenmesi yoluyla reçine üzerinde hazirlanmasidir. Istemler 1 ila 4'ün herhangi birine göre proses olup, özelligi, burada reçinenin, bir 4-[(2,4-Dimetoksifenil)Fmoc- aminometiljfenoksiasetamido metil reçinesi olmasidir. Istem l'in prosesi olup, özelligi; formülün la'nin oksitosin analoglarinin hazirlanmasina yönelik olmasidir. NH2 NH2 O 5 Rl'in, hidrojen veya Ciaýalkil olmasi ve Rß'nin, hidrojen veya Cia-alkil olmasi; veya R1 ve RZ'nin, eklendiklerir nitrojenr ve karbon atomu ile birlikte, tercihe göre hidroksi veya halojen ile ornatilan prolinin bir pirrolidin halkasini olusturmalari; 10 R3”ün n-butil veya i-butil ve bunun karsilik gelen enantiyomerleri ve/Veya optik izomerleri olmasidir.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| EP14180161 | 2014-08-07 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| TR201815872T4 true TR201815872T4 (tr) | 2018-11-21 |
Family
ID=51298582
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| TR2018/15872T TR201815872T4 (tr) | 2014-08-07 | 2015-08-04 | Oksitosin analoglarının hazırlanması için prosesler. |
Country Status (19)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20170174725A1 (tr) |
| EP (1) | EP3177635B1 (tr) |
| JP (1) | JP6744293B2 (tr) |
| KR (1) | KR20170040231A (tr) |
| CN (1) | CN106573958A (tr) |
| AU (1) | AU2015299118B2 (tr) |
| CA (1) | CA2954228A1 (tr) |
| ES (1) | ES2700586T3 (tr) |
| HK (1) | HK1231495A1 (tr) |
| HR (1) | HRP20181916T1 (tr) |
| IL (1) | IL248981B (tr) |
| MX (1) | MX369345B (tr) |
| MY (1) | MY178266A (tr) |
| PL (1) | PL3177635T3 (tr) |
| RU (1) | RU2696276C2 (tr) |
| SG (1) | SG11201700877PA (tr) |
| SI (1) | SI3177635T1 (tr) |
| TR (1) | TR201815872T4 (tr) |
| WO (1) | WO2016020349A1 (tr) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| MX365465B (es) | 2013-03-21 | 2019-06-04 | Sanofi Aventis Deutschland | Sintesis de productos peptidicos que contienen imida ciclica. |
| SG11201506804VA (en) | 2013-03-21 | 2015-09-29 | Sanofi Aventis Deutschland | Synthesis of hydantoin containing peptide products |
| LT3666258T (lt) | 2014-09-19 | 2024-01-10 | Ferring Bv | Praderio-vilio sindromo gydymo būdas |
| WO2020061414A1 (en) | 2018-09-20 | 2020-03-26 | Levo Therapeutics, Inc. | Stable intranasal formulations of carbetocin |
| CN112969450B (zh) | 2018-09-20 | 2023-05-30 | 阿卡蒂亚药品公司 | 卡贝缩宫素药物产品及用于制备其的方法 |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2063979C1 (ru) * | 1992-02-24 | 1996-07-20 | Всесоюзный научно-исследовательский институт технологии кровезаменителей и гормональных препаратов | Пептиды последовательности окситоцина |
| WO1995008566A1 (fr) * | 1993-09-21 | 1995-03-30 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | Nouveau peptide |
| FI20021763A0 (fi) * | 2002-10-03 | 2002-10-03 | Karyon Oy Ab Ltd | Uusia terapeuttisesti aktiivisia aineita ja niiden käyttö |
| JP4564375B2 (ja) * | 2004-08-18 | 2010-10-20 | 太陽化学株式会社 | テアニンの製造方法 |
| MY176398A (en) * | 2012-12-21 | 2020-08-05 | Hoffmann La Roche | Peptides as oxytocin agonists |
-
2015
- 2015-08-04 SI SI201530502T patent/SI3177635T1/sl unknown
- 2015-08-04 AU AU2015299118A patent/AU2015299118B2/en not_active Ceased
- 2015-08-04 CA CA2954228A patent/CA2954228A1/en not_active Abandoned
- 2015-08-04 ES ES15745209T patent/ES2700586T3/es active Active
- 2015-08-04 WO PCT/EP2015/067881 patent/WO2016020349A1/en active Application Filing
- 2015-08-04 KR KR1020177003094A patent/KR20170040231A/ko not_active Application Discontinuation
- 2015-08-04 RU RU2017105184A patent/RU2696276C2/ru active
- 2015-08-04 EP EP15745209.5A patent/EP3177635B1/en active Active
- 2015-08-04 MY MYPI2016002054A patent/MY178266A/en unknown
- 2015-08-04 SG SG11201700877PA patent/SG11201700877PA/en unknown
- 2015-08-04 PL PL15745209T patent/PL3177635T3/pl unknown
- 2015-08-04 CN CN201580035667.8A patent/CN106573958A/zh active Pending
- 2015-08-04 MX MX2016016050A patent/MX369345B/es active IP Right Grant
- 2015-08-04 TR TR2018/15872T patent/TR201815872T4/tr unknown
- 2015-08-04 JP JP2017506865A patent/JP6744293B2/ja not_active Expired - Fee Related
-
2016
- 2016-11-15 IL IL248981A patent/IL248981B/en active IP Right Grant
-
2017
- 2017-02-07 US US15/426,550 patent/US20170174725A1/en not_active Abandoned
- 2017-05-24 HK HK17105259.6A patent/HK1231495A1/zh unknown
-
2018
- 2018-11-16 HR HRP20181916TT patent/HRP20181916T1/hr unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO2016020349A1 (en) | 2016-02-11 |
| JP2017527545A (ja) | 2017-09-21 |
| MX369345B (es) | 2019-11-06 |
| CA2954228A1 (en) | 2016-02-11 |
| RU2017105184A3 (tr) | 2019-02-15 |
| US20170174725A1 (en) | 2017-06-22 |
| MX2016016050A (es) | 2017-02-28 |
| EP3177635A1 (en) | 2017-06-14 |
| CN106573958A (zh) | 2017-04-19 |
| MY178266A (en) | 2020-10-07 |
| JP6744293B2 (ja) | 2020-08-19 |
| ES2700586T3 (es) | 2019-02-18 |
| IL248981A0 (en) | 2017-01-31 |
| SI3177635T1 (sl) | 2019-01-31 |
| RU2017105184A (ru) | 2018-09-07 |
| AU2015299118B2 (en) | 2020-07-09 |
| HK1231495A1 (zh) | 2017-12-22 |
| HRP20181916T1 (hr) | 2019-01-11 |
| RU2696276C2 (ru) | 2019-08-01 |
| AU2015299118A1 (en) | 2016-12-01 |
| IL248981B (en) | 2021-02-28 |
| PL3177635T3 (pl) | 2019-02-28 |
| KR20170040231A (ko) | 2017-04-12 |
| SG11201700877PA (en) | 2017-03-30 |
| EP3177635B1 (en) | 2018-10-03 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| TR201815872T4 (tr) | Oksitosin analoglarının hazırlanması için prosesler. | |
| ES2864924T3 (es) | Método de síntesis peptídica | |
| SG175744A1 (en) | Method for the manufacture of degarelix | |
| EP3932899A1 (en) | Method for producing peptide compound, protecting group-forming reagent, and fused polycyclic aromatic hydrocarbon compound | |
| Hollósi et al. | β‐Turns in bridged proline‐containing cyclic peptide models | |
| ES2954660T3 (es) | Método para preparación de liraglutida usando un grupo de unión de BAL | |
| EP3974410A1 (en) | Method for producing peptide compound, reagent for forming protecting group, and condensed polycyclic aromatic hydrocarbon compound | |
| US20220112234A1 (en) | Method for producing peptide compound, protective group-forming reagent, and condensed polycyclic compound | |
| AU2013277637B2 (en) | Synthesis of beta-turn peptidomimetic cyclic compounds | |
| EP3935072A1 (en) | Process for the preparation of degarelix | |
| US11692007B2 (en) | Amino deprotection using 3-(diethylamino)propylamine | |
| WO2023033017A1 (ja) | ガニレリクス又はその塩の製造法 | |
| WO2006105199A2 (en) | Compositions and methods for synthesis of peptide and related conjugate | |
| CN116507763A (zh) | 抑制由二酮哌嗪形成导致的缺损的肽合成方法 | |
| JP2020529472A (ja) | ペプチド化合物の環化放出関連する出願の相互参照 | |
| JP4593284B2 (ja) | 二環式ヘキサペプチド、ネパデュタントの製造方法 | |
| WO2023156849A2 (en) | Method of producing peptide derived from chaperonin 60.1 | |
| EP4011902A1 (en) | Method for producing peptide compound, reagent for forming protecting group, and hydrazine derivative | |
| CN116724022A (zh) | 肽的制造方法、保护基形成用试药及缩合多环化合物 | |
| EP4310094A1 (en) | Method for producing amino acid or peptide, reagent for forming protecting group, and compound | |
| CN105102427A (zh) | 含有环状酰亚胺的肽产物的合成 | |
| TW201305188A (zh) | 萃取胜肽之方法及其於液相胜肽合成之應用 |