TH78151A - หน่วยแสดงออก Psod - Google Patents

Abstract

DC60 การประดิษฐ์นี้เกี่ยวข้องกับการใช้ลำดับกรดนิวคลีอิคสำหรับควบคุมการถอดรหัสและการ แสดงออกของจีน โปรโมเตอร์และหน่วยแสดงออกชนิดใหม่โดยตัวมันเอง วิธีสำหรับแปรเปลี่ยน หรือก่ออัตราการถอดรหัส และ/หรือ อัตราการแสดงออกของจีน แคสเสทแสดงออกซึ่งประกอบรวม ด้วย จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมที่มีการแปรเปลี่ยนหรือก่ออัตราการถอดรหัส และ/หรือ อัตราการแสดงออก และวิธีสำหรับเตรียมผลิตภัณฑ์การสังเคราะห์ทางชีวภาพ โดยการ เพาะเลี้ยงจุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรม การประดิษฐ์นี้เกี่ยวข้องกับการใช้ลำดับกรดนิวคลีอิคสำหรับควบคุมการถอดรหัสและการ แสดงออกของจีน โปรโมเตอร์และหน่วยแสดงออกชนิดใหม่โดยตัวมันเอง วิธีสำหรับแปรเปลี่ยน หรือก่ออัตราการถอดรหัสและ/หรืออัตราการแสดงออกของจีน แคสเสทแสดงออกซึ่งประกอบรวม ด้วย จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมที่มีการแปรเปลี่ยนหรือก่ออัตราการถอดรหัส และ/ หรือ อัตราการแสดงออก และวิธีสำหรับเตรียมผลิตภัณฑ์การสังเคราะห์ทางชีวภาพโดยการเพาะเลี้ยง จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรม

Claims (54)

1. การใช้กรดนิวคลีอิคที่มีโปโมเตอร์แอคติวีตีซึ่งประกอบรวมด้วย A) ลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ ID NO.1 หรือ B) ลำดับอนุพัทธ์จากลำดับนี้โดยการแทนที่ การสอดใส่หรือการตัดออกของนิวคลีโอไทด์และ มีความเหมือนของอย่างน้อย 90% ที่ระดับกรดนิวคลีอิคกับลำดับ SEQ ID NO.1 หรือ C) ลำดับกรดนิวคลีอิคที่ไฮบริไดซ์กับลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ IDNO.1 ภายใต้ภาวะเข้มงวด หรือ D) ชิ้นส่วนที่เทียบเท่าทางฟังค์ชันนอลของลำดับของ A), B) หรือ C) สำหรับการถอดรหัสจีน

2. การใช้หน่วยแสดงออกซึ่งประกอบด้วยกรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวีตีตามข้อถือ สิทธิข้อที่ 1 และเพิ่มเติมด้วยลำดับกรดนิวคลีอิคที่เชื่อมในลักษณะที่ทำงานได้เพื่อให้มั่นใจการแปลรหัส ของไรโบนิวคลีอิคแอซิดสำหรับการแสดงออกของจีน

3. การใช้ตามข้อถือสิทธิที่ 2 โดยที่หน่วยแสดงออกประกอบรวมด้วย E) ลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ ID NO.2 หรือ F) ลำดับที่อนุพัทธ์จากลำดับนี้โดยการแทนที่ การสอดใส่หรือการตัดออกของนิวคลีโอไทด์และ มีความเหมือนของอย่างน้อย 90% ที่ระดับกรดนิวคลีอิคกับลำดับ SEQ ID NO.2 หรือ G) ลำดับกรดนิวคลีอิคที่ไฮบริไดซ์กับลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ ID NO.2 ภายใต้ภาวะเข้มงวด หรือ H) ชิ้นส่วนที่เทียบเท่าทางฟังค์ชันนอลของลำดับของ E),F) หรือ G) สำหรับการถอดรหัสจีน

4. การใช้ตามข้อถือสิทธิที่ 3 โดยที่หน่วยแสดงออกประกอบด้วยกรดนิวคลีอิคของลำดับ SEQ ID NO.2

5. กรดนิวคลีอิกที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีซึ่งประกอบด้วย A) ลำดับกรดนิวคลีอิก SEQ ID NO.1 หรือ B) ลำดับที่อนุพันธ์จากลำดับนี้โดยการแทนที่ การสอดใส่หรือการตัดออกของนิวคลีโอไทด์และ มีความเหมือนของอย่างน้อย 90% ที่ระดับกรดนิวคลีอิคกับลำดับ SEQ ID NO.1 หรือ C) ลำดับกรดนิวคลีอิคที่ไฮบริไดซ์กับลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ IDNO.1 ภายใต้ภาวะเข้มงวด หรือ D) ชิ้นส่วนที่เทียบเท่าทางฟังค์ชันนอลของลำดับของ A),B) หรือ C) สำหรับการถอดรหัสจีน โดยมีข้อแม้ว่าไม่รวมกรดนิวคลีอิคที่มีลำดับ SEQ ID NO.1

6. หน่วยแสดงออกซึ่งประกอบรวมด้วยกรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข้อถือสิทธิที่ 5 และเพิ่มเติมด้วยลำดับกรดนิวคลีอิคที่เชื่อมในลักษณะที่ทำงานได้เพื่อให้มั่นใจการแปลรหัสของไร โบนิวคลีอิคแอซิด

7. หน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 6 ซึ่งประกอบรวมด้วย E) ลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ ID NO.2 หรือ F) ลำดับที่อนุพัทธ์จากลำดับนี้โดยการแทนที่ การสอดใส่หรือการตัดออกของนิวคลีโอไทด์ และ มีความเหมือนของอย่างน้อย 90% ที่ระดับกรดนิวคลีอิคกับลำดับ SEQ ID NO.2 หรือ G) ลำดับกรดนิวคลีอิคที่ไฮบริไดซ์กับสำหรับกรดนิวคลีอิค SEQ ID NO.2 ภายใต้ภาวะเข้มงวด หรือ H) ชิ้นส่วนที่เทียบเท่าทางฟังค์ชันนอลของลำดับของ E),F) หรือ G) โดยมีข้อแม้ว่าไม่รวมกรดนิวคลีอิคที่มีลำดับ SEQ ID NO.2

8. วิธีสำหรับแปรเปลี่ยนหรือก่ออัตราถอดรหัสของจีนในจุลินทรีย์เมื่อเทียบกับไวด์ไทพ์โดย a) แปรเปลี่ยนแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะในจุลินทรีย์ของกรดนิวคลีอิคจากภายในของการ ประดิษฐ์ที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ควบคุมการถอดรหัสของจีนจากภายในเมื่อ เทียบกับไวด์ไทพ์ หรือ b) ควบคุมการถอดรหัสของจีนในจุลินทรีย์โดยกรดนิวคลีอิคของการประดิษฐ์ที่มีโปรโมเตอร์ แอคติวิตีตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือโดยกรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีที่ได้รับการแปรเปลี่ยนไป อย่างที่ให้ไว้ในการแสดงรายละเอียด a) โดยที่จีนนั้นเฮเทอโรโลกัสในวามสัมพันธ์ต่อกรดนิวคลีอิค ที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตี

9. วิธีการตามข้อถือสิทธิที่ 8 โดยที่การควบคุมการถอดรหัสของจีนในจุลินทรีย์โดยกรดนิวคลีอิคมี โปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือโดยกรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข้อถือ สิทธิที่ 1 ที่มีการแปรเปลี่ยนโปรโมเตอร์แอคติวิตีจำเพาะตามการแสดงรายละเอียด a)นั้นได้โดย b1)ใส่กรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข้อถือสิทธิที่ 1 หนึ่งสายหรือมากกว่าเข้าไป ในกรณีที่เหมาะสมที่มีแอดติวิตีของโปรโมเตอร์ที่จำเพาะที่ได้รับการแปรเปลี่ยนเข้าไปในจีโนมของจุ ลินทรีย์เพื่อว่าการถอดรหัสของจีนภายในหนึ่งตัวหรือมากกว่าเกิดภายใต้การควบคุมของกรดนิวคลี อิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ให้เข้าไป ในกรณีที่เหมาะสมด้วยโปรโมเตอร์แอคติ วิตีจำเพาะที่มีการแปรเปลี่ยน หรือ b2) ใส่จีนหนึ่งตัวหรือมากกว่าเข้าในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าถอดรหัสของจีนที่ใส่ เข้าไปหนึ่งตัวหรือมากกว่าเกิดภายใต้การควบคุมของกรดนิวคลีอิคภายในของการประดิษฐ์ที่มีโปรโม เตอร์แอคติวิตีตามข้อถือสิทธิที่ 1 ในกรณีที่เหมาะสมด้วยแอคติวิตีของโปรโมเตอร์ที่จำเพาะที่มีการ แปรเปลี่ยน หรือ b3) ใส่ส่วนสร้างกรดนิวคลีอิคหนึ่งสายหรือมากกว่าซึ่งประกอบรวมด้วยกรดนิวคลีอิคที่มี โปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข้อถือสิทธิที่ 1เข้าไป ในกรณีที่เหมาะสมที่มีแอคติวิตีของโปรโมเตอร์ จำเพาะที่มีการเปลี่ยนแปลงและเชื่อมในลักษณะที่ทำงานได้กับกรดนิวคลีอิคหนึ่งสายหรือมากกว่าที่จะ ถอดรหัสเข้าไปในจุลินทรีย์

10. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 8 หรือ 9 โดยที่การเพิ่มหรือก่ออัตราการถอดรหัสของจีนในจุลินทรีย์เมื่อ เทียบกับไวด์ไทพ์ ah) แอคติวิตีโปรโมเตอร์ที่จำเพาะในจุลินทรีย์ของกรดนิวคลีอิคจากภายในที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตี ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือควบคุมการถอดรหัสของจีนจากภายนอกได้รับการเพิ่มเมื่อเทียบกับไวด์ ไทพ์ หรือ bh) การถอดรหัสของจีนในจุลินทรีย์ได้รับการควบคุมโดยกรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีตาม ข้อถือสิทธิที่ 1 หรือโดนกรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีจำเพาะที่ได้รับการเพิ่มเติมตามการแสดง รายละเอียด a)โดยที่จีนนั้นเฮเทอโรโลกัสในความสัมพันธ์ต่อกรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตี

11. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 10 โดยที่ควบคุมการถอดรหัสของจีนในจุลินทรีย์โดยกรดนิวคลีอิคที่ มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือโดยกรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข้อถือ สิทธิที่ 1 ที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีจำเพาะที่ได้รับการเพิ่มตามการแสดงรายละเอียด a) นั้นทำได้โดย bh1) ใส่กรดนิวคลีอิคของการประดิษฐ์นี้หนึ่งสายหรือมากกว่าที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีตาม ข้อถือสิทธิที่ 1 ในกรณีที่เหมาะสมที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีที่ได้รับการเพิ่มเข้าไปในจีโนมของจุลินท รีย์เพื่อว่าเกิดการถอดรหัสของจีนจากภายในหนึ่งตัวหรือมากกว่าภายใต้การควบคุมของกรดนิวคลีอิค ของการประดิษฐ์ที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ใส่เข้าไปในกรณีที่เหมาะสมด้วยโปร โมเตอร์แอคติวิตีจำเพาะที่ได้รับการเพิ่ม หรือ bh2) ใส่จีนหนึ่งตัวหรือมากกว่าเข้าไปในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าเกิดการถอดรหัสของ จีนที่ใส่เข้าหนึ่งตัวหรือมากกว่าภายใต้การควบคุมของกรดนิวคลีอิคจากภายในที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิ ตี ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ในกรณีที่เหมาะสมที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีจำเพาะที่เพิ่มขึ้น หรือ bh3) ใส่ส่วนสร้างกรดนิวคลีอิคหนึ่งตัวหรือมากกว่าซึ่งประกอบรวมด้วยกรดนิวคลีอิคของ การประดิษฐ์ทีมีโปรโมเตอร์แอคติวิตี ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ในกรณีที่เหมาะสมที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิ ตีจำเพาะที่ได้รับการเพิ่มเติมและเชื่อมในลักษณะที่ทำงานได้กับกรดนิวคลีอิคที่จะถอดรหัสหนึ่งสายหรือ มากกว่าเข้าไปในจุลินทรีย์

12. วิธีการตามข้อถือสิทธิที่ 8 หรือ 9 โดยที่การลดอัตราการถอดรหัสของจีนในจุลินทรีย์เมื่อเทียบกับ ไวด์ไทพ์ ar) โปรโมเตอร์แอคติวิตีจำเพาะในจุลินทรีย์ของกรดนิวคลีอิคจากภายในที่มีโปรโมเตอร์แอ คติวิตี ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ควบคุมการถอดรหัสของจีนจากภายในลดลงเมื่อเทียบกับไวด์ไทพ์ หรือ br) ใส่กรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตี จำเพาะที่ลดลงอย่างที่ให้ไว้ในการแสดง รายละเอียด a) เข้าไปในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการถอดรหัสของจีนจากภายในเกิดภายใต้การควบคุม ของนิวคลีอิคที่ใส่เข้าที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีที่ลดลง

13. วิธีสำหรับแปรเปลี่ยนหรือก่ออัตราการแสดงออกของจีนในจุลินทรีย์เมื่อเทียบกับไวด์ไทพ์ โดย c) แปรเปลี่ยนแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะในจุลินทรีย์ของหน่วยแสดงออก ตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่ควบคุมการแสดงออกของจีนจากภายในเมื่อเทียบกับไวด์ไทพ์ หรือ d) ควบคุมการแสดงลักษณะของจีนในจุลินทรีย์โดยหน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หรือ โดยหน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ด้วยแอคติวิตีการแสดงออกที่ได้รับการแปรเปลี่ยน อย่างที่ให้ไว้ในการแสดงรายละเอียด c) โดยที่จีนนั้นเฮเทอโรโลกัสในความสัมพันธ์กับหน่วยแสดง ออก

14. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 13 โดยที่การควบคุมการแสดงออกของจีนในจุลินทรีย์โดยหน่วยแสดง ออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่มีแอคติวิตีการแสดงออกที่ได้รับการแปรเปลี่ยนตามการแสดงราย ละเอียด a) ทำได้โดย d1)ใส่หน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หนึ่งหน่วยหรือมากกว่าเข้าไป ในกรณีที่ เหมาะสมที่มีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่ได้รับการแปรเปลี่ยนเจ้าไปในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่า การแสดงออกของจีนที่ใส่เข้าไปหนึ่งตัวหรือมากกว่าเกิดภายใต้การควบคุมของหน่วยแสดงออกที่ให้ เข้าไป หรือ d2)ใส่จีนหนึ่งตัวหรือมากกว่าเข้าในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อแสดงว่าการแสดงออกของจีโนมที่ใส่ เข้าไปหนึ่งตัวหรือมากกว่าเกิดภายใต้การควบคุมของหน่วยการแสดงออกภายในตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ในกรณีที่เหมาะสมด้วยแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่มีการแปรเปลี่ยน หรือ d3)ใส่ส่วนสร้างกรดนิวคลีอิคซึ่งประกอบรวมด้วยหน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ในกรณีที่เหมาะสมที่มีแอคติวิตีจำเพาะที่ได้รับการแปรเปลี่ยนและเชื่อมในลักษณะที่ทำงานได้กับกรด นิวคลีอิคหนึ่งสายหรือมากกว่าที่จะแสงออกเข้าไปในจุลินทรีย์

15. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 13 หรือ 14 โดยที่เพิ่มหรือการเพิ่มหรือการก่ออัตราการแสดงออกของจีนในจุลิน ทรีย์เมื่อเทียบกับไวด์ไทพ์ ch)เพิ่มแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะในจุลินทรีย์ของหน่วยแสดงออกภายในตามข้อถือ สิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่ควบคุมการแสดงออกของจีนจากภายในเมื่อเทียบกับไวด์ไทพ์ หรือ dh)ควบคุมการแสดงออกของจีนในจุลินทรีย์โดยหน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หรือโดยหน่วยแสดงออกที่มีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่ได้รับการเพิ่มอย่างที่ให้ไว้ในการแสดง รายละเอียด a) โดยที่จีนนั้นเฮเทอโรโลกัสเมื่อเปรียบเทียบกับหน่วยแสดงออก

16. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 15 โดยที่การควบคุมการแสดงออกของจีนในจุลินทรีย์โดยหน่วยแสดง ออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หรือโดยหน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่มีแอคติวิตีการ แสดงออกจำเพาะที่ได้รับการเพิ่มเติมขึ้นตามการแสดงออกรายละเอียด a) นั้นทำได้โดย dh1)ใส่หน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หนึ่งอันหรือมากกว่าในกรณีที่เหมาะสม ที่มีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่ได้รับการเพิ่มเข้าไปในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการแสดงออก ของจีนจากภายในหนึ่งตัวหรือมากกว่าเกิดภายใต้การควบคุมของหน่วยแสดงลักษณะที่ให้เข้าไป ใน กรณีที่เหมาะสมที่แอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่ได้รับการเพิ่ม หรือ dh2)ใส่จีนหนึ่งตัวหรือมากกว่าเข้าไปในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าเกิดการแสดงออกของ จีนที่ใส่เข้าหนึ่งตัวหรือมากกว่าภายใต้การควบคุมของหน่วยแสดงออกภายในตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ในกรณีที่เหมาะสมที่มีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่เพิ่มขึ้น หรือ dh3)ใส่ส่วนสร้างกรดนิวคลีอิคหนึ่งตัวหรือมากกว่าซึ่งประกอบรวมด้วยหน่วยแสดงออก ตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ในกรณีที่เหมาะสมที่มีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่ได้รับการเพิ่มและ เชื่อมในลักษณะที่ทำงานได้กับกรดนิวคลีอิคที่จะแสดงออกหนึ่งสายหรือมากกว่าเข้าไปในจุลินทรีย์

17. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 13 หรือ 14 โดยที่การลดอัตราการแสดงออกของจีนในจุลินทรีย์เมื่อเทียบ กับไวด์ไทพ์ cr) ลดแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะในจุลินทรีด์ของหน่วยแสดงออกภายในตามข้อถือ สิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่ควบคุมการแสดงออกของจีนจากภายในเมื่อเทียบกับไวด์ไทพ์ หรือ dr) ใส่หน่วยที่แสดงออกที่มีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่ลดลงอย่างที่ให้ไว้ในการ แสดงรายละเอียด cr) เข้าไปในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการแสดงออกของจีนจากภายในเกิดภายใต้ การควบคุมของหน่วยแสดงออกที่ใส่เข้าที่มีแอคติวิตีการแสดงออกที่ลดลง

18. วิธีการตามข้อถือสิทธิข้อใดข้อหนึ่งของข้อถือสิทธิที่ 8 ถึง 17 โดยที่จีน นั้นได้รับการเลือกจากกลุ่มของกรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพ ของกรดอะมิโนที่มาจากโปรตีนและที่ไม่ได้มาจากโปรตีน กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิธีการ สังเคราะห์ทางชีวภาพของนิวคลีโอไทด์หรือนิวคลีโอไซด์ กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัส โปรตีนจากวิธีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของกรดอินทรีย์ กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถี การสังเคราะห์ทางชีวภาพของลิปิดและกรดไขมัน กรนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการ สังเคราะห์ทางชีวภาพของไดออล กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทางชีว ภาพของคาร์โบไฮเดรต กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของ สารประกอบอะโรมาติค กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของ ไวตามิน กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของโคแฟคเตอร์และ กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของเอนไซม์โดยที่จีนอาจเลือก ประกอบรวมด้วยหน่วยควบคุมเพิ่มเติม

19. วิธีการตามข้อถือสิทธิที่ 18 โดยที่โปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของกรดอะมิโนนั้น เลือกจากกลุ่มของ แอสปาเตทไคเนส แอสปาเตท-เซมิแอลดีไฮด์ดีไฮโดรจีเนส ไดอะมิโนไพมีเลทดีไฮโดรจีเนส ไดอะ มิโนไพมีเลทดีคาร์บอกซีเลส ไดไฮโดรไดพิโคเนทซินธีเทส ไดไฮโดรไดพิโคเนทรีดักเทส กลี เซอรัลดีไฮด์-3-ฟอตเฟสดีไ/ฮโดรจีเนส 3-ฟอสโฟกลีเซอเรทไคเนส ไพรูเวทคาร์บอกซีเลส ไทรโอส ฟอสเฟตไอโซเมอเรส หน่วยควบคุมการถอดรหัส LuxR หน่วยควบคุมการถอดรหัส LysR1หน่วย ควบคุมการถอดรหัส LysR2 มาเลท-ควิโนนนอกซิโดรีดักเทส กลูโคส-6-ฟอตเฟสดีไฮโดรจีเนส 6- ฟอสโฟกลูโคเนทดีไฮโดรจีเนส ทรานสคีโตเลส ทรานแอลโดเลส โฮโมซีรีน O-แอแซทิลทรานส เฟอเรส ซิสตาไธโอนีนแกมมา-ซินเทส ซิสตาไธโอนีนบีตา-ไลเอส ซีนไฮโรออกซีเมธิลทรานสเฟอ เรส O-แอเซทิลโฮโมซีรีน ซัลฟ์ไฮดริเลส เมธิลีนเททราไฮโดรโฟเลทรีดักเทส ฟอสโฟซีรีนอะมิ โนทรานสเฟอเรส ฟอสโฟซีรีนฟอสฟาเทส ซีรีนแอเซทิลสเฟอเรส โฮโมซีรีนดีไฮโดรจีเนส โฮโมซีรีนไคเนส ธรีโอนีนซินเทส ตัวพาสำหรับการขนส่งธรีโอนีน ธรีโอนีนไฮดราเทส ไพรูเวท ออกซิเดส ตัวขนส่งไลซีน ไบโอตินไลเกส ซิสเตอีนเธ I ซิสเตอีนซินเธส II เมธิโอนีนซิน เทสที่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12 เมธิโอนีนซินเทสที่ไม่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12 หน่วยย่อย 1 และ 2 ของ ซัลเฟตอะดีนิลอิลทรานสเฟอเรส ฟอสโฟอะดีโนซีน-ฟอสโฟซัสเฟตรีดักเทส เฟอร์รีดอกซิน-ซัล ไฟท์รีดักเทส เฟอร์รีดอกซิน NADP รีดักเทส 3-ฟอสโฟกลีเรทดีไฮโดรจีเนส ตัวควบคุม RXA00655 ตัวควบคุม RXN2910 อาร์จีนิล-tRNA ซินเธส ฟอสโฟอีนอลไพรูเวทคาร์บอกซีเลส โปรตีนเอฟฟลักซ์ของธรีโอนีน ซีรีนไฮดรอกซีเมธิลทรานสเฟอเรส ฟรุกโตส-1,6-บิสฟอสฟาเทส โปรตีนของการรีดิวซ์ซัลเฟต RXA077 โปรตีนของการรีดิวซ์ซัลเฟต RXA248 โปรตีนของการรี ดิวซ์ซัลเฟต RXA247 โปรตีน OpcA 1-ฟอสโฟฟรุคโตไคเนส และ 6-ฟอตโฟฟรุคไคเนส

20. แคสเสทแสดงออกซึ่งประกอบรวมด้วย a) อย่างน้อยหน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หนึ่งอัน และ b) อย่างน้อยกรดนิวคลีอิคเพิ่มเติมหนึ่งอันที่จะถูกแสดงออก และ c) ในกรณีที่เหมาะสมหน่วยควบคุมทางพันธุกรรมเพิ่มเติม โดยที่อย่างน้อยหน่วยแสดงออกหนึ่งอันและสำหรับกรดนิวคลีอิคต่อไปที่จะแสดงออกนั้นเชื่อมใน ลักษณะที่ทำงานได้ต่อกันและนอกจากนี้ลำดับกรดนิวคลีอิคที่จะแสดงออกนั้นเฮเทอโรโลกัสในความ สัมพันธ์ต่อหน่วยแสดงออก

21. แคสเสทแสดงลักษณะตามข้อถือสิทธิที่ 20 โดยที่ลำดับกรดนิวคลีอิคเพิ่มเติมที่จะแสดงออก นั้นเลือกจากกลุ่มที่ของกรอนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของกรด อะมิโนที่มาจากโปรตีน และที่ไม่ได้มาจากโปรตีน กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการ สังเคราะห์ทางชีวภาพของนิวคลีโอไซด์ กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจาก วิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของกรดอินทรีย์ กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการ สังเคราะห์ทางชีวภาพของลิปิดและไขมัน กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการ สังเคราะห์ทางชีวภาพของไดออล กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทางชีว ภาพของคาร์โบไฮเดรท กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของ สารประกอบอะโนมาติก กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของ ไวตามิน กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของโคแฟคเตอร์ และ กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของเอนไซม์

22. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 21 โดยที่โปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของกรดอะมิโนนั้น เลือกจากกลุ่มของ แอสปาเตทไคเนส แอสปาเตท-เซมิแอลดีไฮด์ดีไฮโดรจีเนส ไดอะมิโนไพมีเลทดี ไฮโดรจีเนส ไดอะมิโนไพมีเลทคาร์บอกซีเลส ไดไฮโดรไดพิโคลิเนทซินธีเทส ไดไฮโดรไดพิโคลิ เนทรีดักเทส กลีเซอรัลดีไฮด์-3-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส 3-ฟอสโฟกลีเซอเรทไคเนส ไพรูเวทคาร์ บอกซีเลส ไทรโอสฟอสเฟตไอโซเมอเรส หน่วยควบคุมการถอดรหัส LuxR หน่วยควบคุมการถอด รหัส LysR1 หน่วยควบคุมการถอดรหัส LysR2 มาเลท-ควิโนนออกซิโดรีดักเทส กลูโคส-6- ฟอตเฟสดีไฮโดรจีเนส 6-ฟอสโฟกลูโคเนทดีไฮโดรจีเนส ทรานสคีโตเลส ทรานสแอลโดเลส โฮ โมซีรีน O-แอเซทิลทรานสเฟอเรส ซิสตาไธโอนีนแกมมา-ซินเทส ซิสตาไธโอนีนบีตา-ไลเอส ซีรีน ไฮโรอกซีทรานสเฟอเรส O-แอเซทิลโฮโมซีรีน ซัลฟ์ไฮดริเลส เมธิลีนเททราไฮโดรโฟเลทรี ดักเทส ฟอสโฟซีรีนอะมิโนทรานสเฟอเรส ฟอสโฟซีรีนฟอกฟาเทส ซีรีนแอเซทิลทรานสเฟอเรส โฮโมซีรีนดีไฮโดรจีเนส โฮโมซีรีนไคเนส ธรีโอนีนซินทส ตัวพาสำหรับการขนส่งธรีโอนีน ธรีโอ นีนดีไฮดราเทส ไพรูเวทออกซิเดส ตัวขนส่งไลซีน ไบโอตินไลเกส ซิสเตอีนซินเธส I ซิสเตอีน ซินเธส II เมธิโอนีนซินเทสที่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12 เมธิโอนีนซิสเทสที่ไม่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12 หน่วยย่อย 1 และ 2 ของซัลเฟตอะดีนิลอิลทรานสเฟอเรส ฟอสโฟอะดีโนซีน-ฟอสโฟซัตเฟตรีดักเทส เฟอร์รีดอกซิน-ซัลไฟท์รีดักเทส เฟอร์รีดอกซิน NADP รีดักเทส 3-ฟอสโฟกลีเซอเรทดีไฮโดรจีเนส ตัวควบคุม RXA00655 ตัวควบคุม RXN2910 อาร์จีนิล-tRNA ซินเธส ฟอสโฟอีนอลไพรูเวทคาร์ บอกซีเลส โปรตีนเอฟฟลักซ์ของธรีโอนีน ซีรีนไฮดรอกซีเมธิลทรานเฟอเรส ฟรุกโตส-1,6- บิสฟอสฟาเทส โปรตีนของการรีดิวซ์ซัลเฟต RXA077 โปรตีนของการรีดิวซ์ซัลเฟต RXA248 โปรตีนขงการรีดิวซ์ซัลเฟต RXA247 โปรตีน OpcA 1-ฟอสโฟฟรุคโตเนส และ 6-ฟอสโฟฟรุค โตไคเนส

23. เวกเตอร์แสดงออกซึ่งประกอบรวมด้วยแคสเสทแสดงออกตามข้อถือสิทธิข้อใดข้อหนึ่งของ ข้อถือสิทธิที่ 20 ถึง 22

24. จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมโดยที่การดัดแปลงทางพันธุกรรมนำไปสู่การ แปรเปลี่ยนหรือก่ออัตราการถอดรหัสของอย่างน้อยหนึ่งจีนเมื่อเทียบกับไวด์ไทพ์และโดยขึ้นกับ a) แปรเปลี่ยนแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะในจุลินทรีย์ของกรดนิวคลีอิคจากภายที่มีโปรโม เตอร์แอคติวิตีที่ควบคุมการถอดรหัสของจีนภายในเมื่อเทียบกับไวด์ไทพ์ หรือ b) ควบคุมการถอดรหัสของจีนในจุลินทรีย์โดยกรดนิวคลีอิคตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่โปรโมเตอร์ แอคติวิตีหรือโดยกรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีที่ได้รับการแปรเปลี่ยนไปอย่างที่ให้ไว้ในการ แสดงรายละเอียด a) โดยที่จีนนั้นเฮเทอโรโลกัสในความสัมพันธ์ต่อกรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอ คติวิตี

25. จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 24 โดยที่การควบคุมการถอด รหัสของจีนในจุลินทรีย์โดยกรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือโดยกรด นิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีที่แปรเปลี่ยนไปตาม การแสดงรายละเอียด a) นั้นทำได้โดย b1)ใส่กรดนิวคลีอิคของการประดิษฐ์นี้ที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีหนึ่งสายหรือมากกว่าเข้าไป ในกรณีที่เหมาะสมที่มีแอคติวีตีโปรโมเตอร์ที่จำเพาะที่ได้รับการแปรเปลี่ยนเข้าไปในจีโนมของจุ ลินทรีย์เพื่อว่าการถอดรหัสของจีนภายในหนึ่งตัวหรือมากกว่าเกิดภายใต้การควบคุมของกรดนิวคลี อิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีที่ให้เข้าไปในกรณีที่เหมาะสมด้วยแอคติวิตีของโปรโมเตอร์ที่จำเพาะที่มี การแปรเปลี่ยน หรือ b2)ใส่จีนหนึ่งตัวหรือมากกว่าในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการถอดรหัสของจีนที่ใส่ เข้าไปหนึ่งตัวหรือมากกว่าเกิดภายใต้การควบคุมของกรดนิวคลีอิคภายในของการประดิษฐ์ที่มีโปรโม เตอร์แอคติวิตี ในกรณีที่เหมาะสมด้วยแอคติวิตีของโปรโมเตอร์ที่จำเพาะที่มีการแปรเปลี่ยน หรือ b3)ใส่ส่วนสร้างกรดนิวคลีอิคซึ่งประกอบรวมด้วยกรดนิวคลีอิคของการประดิษฐ์นี้ที่มีโปร โมเตอร์แอคติวิตีหนึ่งสายหรือมากกว่าเข้าไป ในกรณีที่เหมาะสมที่มีแอคติวิตีของโปรโมเตอร์ที่ จำเพาะที่มีการเปลี่ยนแปลงและเชื่อมในลักษณะที่ทำงานได้กับกรดนิวคลีอิคหนึ่งสายหรือมากกว่าที่จะ ถอดรหัสเข้าไปในจุลินทรีย์

26. จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 24 หรือ 25 ที่มีอัตราการถอด รหัสเพิ่มขึ้นหรือก่ออัตราการถอดรหัสของอย่างน้อยหนึ่งจีนเมื่อเทียบกับไวด์ไทพ์โดยที่ ah)แอคติวิตีโปรโมเตอร์ที่จำเพาะในจุลินทรีย์ของกรดนิวคลีอิคจากภายในที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตี ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือควบคุมการถอดรหัสของจีนจากภายนอกได้รับการเพิ่มเมื่อเทียบกับไวด์ ไทพ์หรือ bh) การถอดรหัสของจีนในจุลินทรีย์ได้รับการควบคุมโดยกรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีตาม ข้อถือสิทธิที่ 1 หรือโดยกรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีจำเพาะที่ได้รับการเพิ่มตามการแสดง รายละเอียด a)โดยที่จีนนั้นเฮเทอโรโลกัสในความสัมพันธ์ต่อกรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตี

27. จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 26 โดยที่การควบคุมการถอด รหัสในจุลินทรีย์โดยกรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือโดยนิวคลีอิค ที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีจำเพาะที่ได้รับการเพิ่มเติมตามการ แสดงรายละเอียดa)นั้นทำได้โดย bh1)ใส่กรดนิวคลีอิคของการประดิษฐ์นี้หนึ่งสายหรือมากกว่าที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีตาม ข้อถือสิทธิที่ 1 กรณีที่เหมาะสมที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีที่ได้รับการเพิ่มเข้าไปในจีโนมของจุลินท รีย์เพื่อว่าเกิดการถอดรหัสของจีนจากภายในหนึ่งตัวหรือมากกว่าภายใต้การควบคุมของกรดนิวคลีอิค ของการประดิษฐ์ที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ใส่เข้าไปในกรณีที่เหมาะสมด้วยโปร โมเตอร์แอคติวิตีจำเพาะที่ได้รับการเพิ่ม หรือ bh2)ใส่จีนหนึ่งตัวหรือมากกว่าเข้าไปในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าเกิดการถอดรหัสของ จีนที่ใส่เข้าหนึ่งตัวหรือมากกว่าภายใต้การควบคุมของกรดนิวคลีอิคจากภายในที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิ ตี ตามข้อถือสิทธิที่ 1ในกรณีที่เหมาะสมที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีจำเพาะที่เพิ่มขึ้น หรือ bh3)ใส่ส่วนสร้างนิวคลีอิคหนึ่งตัวหรือมากกว่าซึ่งประกอบรวมด้วยกรดนิวคลีอิคของ การประดิษฐ์ที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตี ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ในกรณีที่เหมาะสมที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิ ตีจำเพาะที่ได้รับการเพิ่มและเชื่อมในลักษณะที่ทำงานได้กรดนิวคลีอิคที่จะถอดรหัสหนึ่งสายหรือ มากกว่าเข้าไปในจุลินทรีย์

28. จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 24 หรือ 25 ที่มีอัตราการถอด รหัสลดลงของอย่างน้อยหนึ่งจีนในจุลินทรีย์เมื่อเทียบกับไวด์ไทพ์ โดยที่ ar)โปรโมเตอร์แอคติวิตีจำเพาะในจุลินทรีย์ของกรดนิวคลีอิคจากภายในอย่างน้อยหนึ่งสาย ที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตี ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ซึ่งควบคุมการถอดรหัสของจีนจากภายในลดลงเมื่อเทียบ กับไวด์ไทพ์ หรือ br) ใส่กรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีจำเพาะที่ลดลงอย่างที่ให้ไว้ในการแสดง รายละเอียด a) เข้าไปในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการถอดรหัสของจีนจากภายในเกิดภายใต้การควบคุม ของกรดนิวคลีอิคที่ใส่เข้าที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีที่ลดลง

29. จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรม โดยที่การดัดแปลงทางพันธุกรรมนำไปสู่การ แปรเปลี่ยนหรือก่ออัตราการแสดงออกของจีนในจุลินทรีย์เมื่อเทียบไวด์ไทพ์และขึ้นกับ c) แปรเปลี่ยนแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะในจุลินทรีย์ของหน่วยแสดงออก ตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่ควบคุมการแสดงออกของจีนจากภายในเมื่อเทียบกับไวด์ไทพ์ หรือ d) ควบคุมการแสดงลักษณะของจีนในจุลินทรีย์โดยหน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หรือ โดยหน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ด้วยแอคติวิตีการแสดงออกที่ได้รับการแปรเปลี่ยน อย่างที่ให้ไว้ในการแสดงรายละเอียด c) โดยที่จีนนั้นเฮเทอโรโลกัสในความสัมพันธ์กับหน่วยแสดง ออก

30. จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 29 โดยที่โดยที่การควบคุมการ แสดงออกของจีนในจุลินทรีย์โดยหน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หรือโดยหน่วยแสดง ออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่มีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่ได้รับการแปรเปลี่ยนตามการ แสดงรายละเอียด a)ซึ่งทำได้โดย d1)ใส่หน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หนึ่งหน่วยหรือมากกว่าเข้าไป ในกรณีที่ เหมาะสมที่มีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่ได้รับการแปรเปลี่ยนเข้าไปในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่า การแสดงออกของจีนที่ใส่เข้าไปหนึ่งตัวหรือมากกว่าเกิดภายใต้การควบคุมของหน่วยแสดงออกที่ให้ เข้าไป หรือ d2) ใส่จีนหนึ่งตัวหรือมากกว่าเข้าในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการแสดงออกจีนที่ใส่ เข้าไปหนึ่งตัวหรือมากกว่าเกิดภายใต้การควบคุมของหน่วยการแสดงออกภายในตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ในกรณีที่เหมาะสมด้วยแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่มีการเปลี่ยนแปลง หรือ d3) ใส่ส่วนสร้างกรดนิวคลีอิคซึ่งประกอบรวมด้วยหน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ในกรณีที่เหมาะสมที่มีแอคติวิตีจำเพาะที่ได้รับการแปรเปลี่ยนและเชื่อมในลักษณะที่ทำงานได้กับกรด นิวคลีอิคหนึ่งสายหรือมากกว่าจะแสดงออก เข้าไปในจุลินทรีย์

31. จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 29 หรือ 30 ที่มีการเพิ่มหรือก่อ อัตราการถอดรหัสแสดงออกของจีนในจุลินทรีย์เมื่อเทียบกับไวด์ไทพ์ โดยที่ ch)เพิ่มแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะในจุลินทรีย์ของหน่วยแสดงออกภายในตามข้อถือ สิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่ควบคุมการแสดงออกของจีนจากภายในเมื่อเทียบกับไวด์ไทพ์ หรือ dh)ควบคุมการแสดงออกของจีนในจุลินทรีย์โดยหน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หรือโดยหน่วยแสดงออกที่มีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่ได้รับการเพิ่มอย่างที่ให้ไว้ในการแสดง รายละเอียด a) โดยที่จีนนั้นเฮเทอโรโลกัสเมื่อเทียบกับหน่วยแสดงออก

32. จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 31 โดยที่ควบคุมของการ แสดงออกของจีนในจุลินทรีย์โดยโดยหน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หรือโดยหน่วย แสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่มี dh1)ใส่หน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หนึ่งอันหรือมากกว่าในกรณีที่เหมาะสมที่มีแอคติ วิตีการแสดงออกจำเพาะที่ได้รับการเพิ่มเข้าไปในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการแสดงออกของจีนจาก ภายในหนึ่งตัวหรือมากกว่าภายใต้การควบคุมของหน่วยแสดงลักษณะตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่ให้เข้าไป ในกรณีที่เหาะสมที่มีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่ได้รับการเพิ่ม หรือ dh2) ใส่จีนหนึ่งตัวหรือมากกว่าเข้าไปในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าเกิดการแสดงออกของจีนที่ใส่ เข้าหนึ่งตัวหรือมากกว่าภายใต้การควบคุมของหน่วยแสดงออกภายในตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ใน กรณีที่เหมาะสมที่มีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่เพิ่มขึ้น หรือ dh3) ใส่ส่วนสร้างกรดนิวคลีอิคหนึ่งตัวหรือมากกว่าซึ่งประกอบรวมด้วยหน่วยแสดงออกตามข้อ ถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ในกรณีที่เหมาะสมที่มีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่ได้รับการเพิ่มและเชื่อมใน ลักษณะที่ทำงานได้กับกรดนิวคลีอิคที่จะแสดงออกหนึ่งสายหรือมากกว่าเข้าไปในจุลินทรีย์

33. จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 29 หรือ 30 ที่มีอัตราการถอด รหัสที่ลดลงของอย่างน้อยหนึ่งจีนเมื่อเยบกับไวด์ไทพ์โดยที่ cr) ลดแอคิติวิตีการแสดงออกจำเพาะในจุลินทรีย์ของหน่วยแสดงออกในตามข้อถือ สิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่ควบคุมการแสดงออกของจีนจากภายในอย่างน้อยหนี่งตัวเมื่อเทียบกับไวด์ไทพ์ หรือ dr) ใส่หน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่มีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่ลด ลงเข้าไปในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการแสดงออกของจีนอย่างน้อยหนึ่งตัวเกิดภายใต้การควบคุม ของหน่วยแสดงตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่ใส่เข้าที่มีแอคติวิตีการแสดงออกที่ลดลง

34. จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมซึ่งประกอบรวมด้วยหน่วยแสดงออกตามข้อถือ สิทธิที่ 2 หรือ 3 และเชื่อมในลักษณะที่ทำงานได้กับจีนที่จะแสดงออกโดยที่จีนนั้นเฮอเทอโรโลกัสใน ความสัมพันธ์กับหน่วยแสดงออก

35. จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 34 ซึ่งประกอบรวมด้วยแคส เสทแสดงออกตามข้อถือสิทธิข้อใดข้อหนึ่งของข้อ 20 ถึง 22

36. จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิข้อใดข้อหนึ่งของข้อ 24 ถึง 35 โดยที่จีนนั้นได้รับการเลือกจากกลุ่มของกรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ ทางชีวภาพของกรดอะมิโนที่มาจากโปรตีนและไม่ได้มาจากโปรตีน กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัส โปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของนิวคลีโอไทด์ หรือ นิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีน จากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของกรดอินทรีย์ กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถี การสังเคราะห์ทางชีวภาพของลิปิดและกรดไขมัน กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถี การสังเคราะห์ทางชีวภาพของไดออล กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทาง ชีวภาพของคาร์โบไฮเดรท กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของ สารประกอบอะโรมาติค กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของ ไวตามิน กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของโคแฟคเตอร์และ กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของเอนไซม์โดยที่จีนอาจเลือก ประกอบรวมด้วยหน่วยควบคุมเพิ่มเติม

37. จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 36 โดยที่ โปรตีนจากวิถีการ สังเคราะห์ทางชีวภาพของกรดอะมิโนนั้นเลือกจากกลุ่มของ แอสปาเตทไคเนส แอสปาเตท-เซมิแอล ดีไฮด์ดีไฮโดรจีเนส ไดอะมิโนไพมีเลทดีไฮโดรจีเนส ไดอะมิโนไพมีเลทดีไฮโดรจีเนส ไดไฮโดร ไดพิโคลิเนทซินธีเทส ไดไฮโดรพิโคลิเนทรีดักเทส กลีเซอรัลดีไฮด์-3-ฟอตเฟสดีไฮโดรจีเนส 3- ฟอสโฟกลีเซอเรทไคเนส ไพรูเวทคาร์บอกซีเลส ไทรโอสฟอสเฟตไอโซเมอเรส หน่วยควบคุมการ ถอดรหัส LuxR หน่วยควบคุมการถอดรหัส LysR1 หน่วยควบคุมการถอดรหัส LysR2 มาเลท-ควิ โนนออกซิโตรีดักเทส กลูโคส-6-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส 6-ฟอสโฟกลูโคเนทดีไฮโดรจีเนส ทรานส คีโตเลส ทรานสแอลโดเลส โฮโมซีรีน O-แอเซทิลทรานสเฟอเรส ซิสตาไธโอนีนแกมมา-ซินเทส ซิสตาไธโอนีนบีตา-ไลเอส ซีรีนไฮโรอกซีเมธิลทรานสเฟอเรส O-แอเซทิลโฮโมซีรีน ซัลฟ์ไฮดริเล ส เมธิลีนเททราไฮโดรโฟเลทรีดักเทส ฟอสโฟซีรีนอะมิโนทรานสเฟอเรส ฟอสโฟซีรีนฟอสฟาเทส ซีรีนแอเซทิลทรานฟอเรส โฮโมซีรีนดีไฮโดรจีเนส โฮโมซีรีนไคเนส ธรีโอนีนซินเทส ตัวพา สำหรับการขนส่งธรีโอนีน ธรีโอนีนโอนีนไฮดราเทส ไพรูเวทออกซิเดส ตัวขนส่งไลซีน ไบโอตินไล เกส ซิสเตอีนซินเธส I ซิสเตอีนซินเธส II เมธิโอนีนซินเทสที่ขึ้นกับเอนไซม์ B12 เมธิโอนีน ซินเทสที่ไม่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12 หน่วยย่อย 1 และ 2 ของซัลเฟตอะดีนิลอิลทรานสเฟอเรส ฟอส โฟอะดีโนซีน-ฟอสโฟซัลเฟตรีดักเทส เฟอร์รีดอกซิน-ซัลไฟตท์รีดักเทส เฟอร์รีดอกซิน NADP รีดัก เทส 3-ฟอสโฟกลีเซอเรทดีไฮโดรจีเนส ตัวควบคุม RXA00655 ตัวควบคุม RXN2910 อาร์จีนิล- tRNA ซินเธส ฟอสโฟอีนอลไพรูเวทคาร์บอกซีเลสโปรตีนเอฟฟลักซ์ของธรีโฮนีน ซีรีนไฮดรอก ซีเมธิลทรานสเฟอเรส ฟรุกโตส-1,6-บิสฟอสฟาเทส โปรตีนของการรีดิวซ์ซัลเฟต RXA077 โปรตีนของการรีดิวซ์ซัลเฟต RXA248 โปรตีนของการรีดิวซ์ซัลเฟท RXA247 โปรตีน OpcA 1-ฟอส โฟฟรุคโตไคเนส และ 6-ฟอสโฟฟรุคโตไคเนส

38. วิธีสำหรับเตรียมผลิตภัณฑ์การสังเคราะห์ทางชีวภาพโดยการเพาะเลี้ยงจุลินทรีย์ที่ได้รับ การดัดแปลงทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิข้อใดข้อหนึ่งของข้อ 24 ถึง 37

39. วิธีสำหรับเตรียมไลซีนโดยการเพาะเลี้ยงจุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมตามข้อ ถือสิทธิข้อใดข้อหนึ่งของข้อ 24,25,31 หรือ 32 โดยที่จีนได้รับการเลือกจากกลุ่มของกรดนิวคลีอิคที่ ประมวลรหัสแอสปาเตทไคเนส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสแอสปาเตท-เซมิแอลดีไฮด์โดรจีเน ส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสไดอะมิโนไพลีเลทดีไฮโดรจีเนส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสไดอะ มิโนไพรีเลทดีคาร์บอกซีเลส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสไอไฮโดรไดพิโคลิเนทซินธีเทส กรดนิว คลีอิคที่ประมวลรหัสไดไฮโดรไดพิโคลิเนทรีดักเทส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสกลีเซอรัลดีไฮด์-3- ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัส-3-ฟอสโฟกลีเซอเรทไคเนส กรดนิวคลีอิคที่ ประมวลรหัสไพรูเวทคาร์บอกซีเลส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสไทรโอสฟอตเฟตไอโซเมอเรส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสหน่วยควบคุมการถอดรหัส LuxR กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสหน่วย ควบคุมการถอดรหัส LysR1 กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสหน่วยควบคุมการถอดรหัส LysR2 กรด นิวคลีอิคที่ประมวลรหัสมาเลท-ควิโนนออกซีโดรีดักเทส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสกลูโคส-6- ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัส 6-ฟอสโฟกลูโคเนทดีไฮโดรจีเนส กรดนิวคลี อิคที่ประมวลรหัสตัวขนส่งไลซีน กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัส ไบโอตินไลเกส กรดนิวคลีดิคที่ประมวล รหัส อาร์จีนิล-tRNA ซินธีเทส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสฟอสโฟอีนอลไพรูเวทคาร์บอกซีเลส กรดนิวคลีดิคที่ประมวลรหัสฟรุกโตส-1,6-บิสฟอสฟาเทส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีน OpcA กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัส 1-ฟอสโฟฟรุคโตไคเนส และ กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัส 6- ฟอสโฟฟรุคโตไคเนส

40. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 39 โดยที่จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมมีเมื่อเทียบกับไวด์ ไทพ์แอคติวิตีที่ได้รับการเพิ่มเป็นการเพิ่มเติมของอย่างน้อยหนึ่งแอคติวิตีที่เลือกจากกลุ่มของแอสปา เตทไคเนส แอสปาเตท-เซมิแอลดีไฮด์ดีไฮโดรจีเนส ไดอะมิโนไพมีเลทดีไฮโนจีเนส ไดอะมิโนไพ มีเลทดีคาร์บอกซีเลส ไดไฮโดรไดพิโคลิเนทซินธีเทส ไดไฮโดรไดพิโตเนทรีดักเทส กลีเซอรัลดี ไฮด์-3-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส 3-ฟอตเฟสกลีเซอเรทไคเนส ไพรเวทคาร์บอกซีเลส ไทรโอสฟอสเฟต ไอโซเมอเรส หน่วยควบคุมการถอดรหัส LuxR หน่วยควบคุมการถอดรหัส LyaR1 หน่วยควบคุม การถอดรหัส LyaR2 มาเลท-ควิโนนออกซีโดรีดักเทส กลูโคส-6-ฟอตเฟตดีไฮโดรจีเนส 6-ฟอส โฟกลูโคเนทดีไฮโดรจีเนส ทรายเสคีโตเลส ทรานสแอลโดเลส ตัวขนส่งไลซีน อาร์จีนิล-tRNA ซิน ธีเทส ฟอสโฟอีนิลไพรูเวทคาร์บอกซีเลสแอคติวิตฟรุกโตส-1,6-บิสฟอสฟาเทสแอคติวิตี โปรตีน OpcA 1-ฟอสโฟฟรุคโตไคเนสแอคติวิตี 6-ฟอสโฟฟรุคโคไคเนสแอคติวิตี และไบโอ ตินไลเกสแอคติวิตี

41. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 39 หรือ 40 โดยที่จุลินทรีย์ที่มีการดัดแปลงทางพันธุกรรมมีเมื่อเทียบกับ ไวด์ไทพ์แอคติวิตีที่ลดลงเป็นการเพิ่มเติมของอย่างน้อยหนึ่งแอคติวิตีที่เลือกจากกลุ่มของธรีโอนีนดี ไฮดราเทสแอคติวิตี โฮโมซีรีน O-แอเซทิลทรานเฟอเรสแอคติวิตี O-แอเซทิล-โฮโมซีรีนซัลฟ์ไฮดริ เลสแอคติวิตี ฟอสโฟนีนอลไพรูเวทคาร์บอกซีไคนสแอคติววีตี ไพรูเวทออกซิเดสแอคติวิตี โฮโมซี รีนไคเนสแอคติวิตี โฮโมซีรีนดีไฮโดรจีเนสแอคติวิตี แอคติวิตีของตัวขนส่งธรีโอนีน เอฟฟลั๊กโปรตีนแอคติวิตี แอสปาราจีเนสแอคติวิตี แอสปาเตทดีคาร์บอกซิเลสแอคติวิตี และธรีโอ นีนซินเธสแอคติวิตี

42. วิธีสำหรับเตรียมเมธิโอนีนโดยการเพาะเลี้ยงจุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมตาม ข้อถือสิทธิข้อใดข้อหนึ่งของข้อ 24,25,31 หรือ 32 โดยที่จีนได้รับการเลือกจากกลุ่มของกรดนิวคลี อิคที่ประมวลรหัสแอสปาเตทไคเนส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสแอสปาเตท-เซมิแลดีไฮด์โดร จีเนส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโฮโมซีรีนดีไฮโดรจีเนส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสกลีเซอรัลดี ไฮด์-3-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัส 3-ฟอสโฟกลีเซอเรทไคเนสกรดนิวคลี อิคที่ประมวลรหัสไพรูเวทคาร์บอกซีเลส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสไทรโอสฟอสเฟตไอโซเมอ เรส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโฮโมซีรีน O-แอเซทิลทรานสเฟอเรส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัส ซิสตาไธโอนีนแกมมา-ซินเทส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสซิสตาไธโอนีนบีตา-ไลเอส กรดนิวคลี อิคที่ประมวลรหัสซีรีนไฮดรอกซีเมธิลทรานสเฟอเรส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัส O-แอเซทิลโฮโม ซีรีนซัลฟ์ไฮดริเลสกรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสเมธิลีนเททราไฮโดรโฟเลทรีดักเทส กรดนิวคลีอิคที่ ประมวลรหัสฟอสโฟซีรีนอะมิโนทรานสเฟอเรส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสฟอสโฟซีรีนฟอสฟา เทส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสซีรีนแอเซทิลทรานสเฟอเรส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสซิสเตอีน ซินเธส I กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสซิสเตอีนซินเธส II กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสเมธิโอนีน ซินเทสที่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12 กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสเมธิโอนีนซินเทสที่ไม่เกิดขึ้นกับโค เอนไซม์ B12 กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสซัลเฟตะอะดีนิลอิลทรานสเฟอเรส กรดนิวคลีอิคที่ ประมวลรหัสฟอสโฟอะดีโนซีน-ฟอสโฟซัลเฟตรีดักเทส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสเฟอร์รีดอก ซิน-ซันไฟท์รีดักเทส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสเฟอร์รีดอกซิน NADPH-รีดักเทส กรดนิวคลีอิคที่ ประมวลรหัสเฟอร์รีดอกซินแอคติวิตี กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนของซัลเฟตรีดักชัน RXA077 กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนของซัลเฟตรีดักชัน RXA248 กรดนิวคลีอิคที่ ประมวลรหัสโปรตีนของซัลเฟตรีดักชัน RXA247 กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสตัวควบคุม RXA00655 และกรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสตัวควบคุม RXN2910

43. วิธีการตามข้อถือสิทธิที่ 42 โดยที่จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมเมื่อเทียบกับไวด์ ไทพ์แอคติวิตีที่ได้รับการเพิ่มเป็นการเพิ่มเติมของแอคติวิตีที่เลือกจากกลุ่มของแอสปาเตทไคเนส แอสปาเตท-เซมิเอลดีไฮด์ดีไฮโดรจีเนสแอคติวิตี โฮโมซีรีนดีไฮโดรจีเนสแอคติวิตี กลีเซอรัลดีไฮด์- 3-ฟอสเฟตดีไฮโดนจีเนสแอคติวิตี 3-ฟอสโฟกลีเซอเรทไคเนสแอคติวิตี ไพรูเวทคาร์บอกซีเลสแอ คติวีตี ไทรโอสฟอสเฟตไอโซเมอเรสแอคติวิตี โฮโมซีรีน O-แอเซทิลทรานเฟอเรสแอคติวิตีซิสตา ไธโอนีนแกมมา-ซินเทสแอคติวิตี ซิสตาไธโอนีนบีตา-ไลเอสแอคติวิตี ซีรีนไฮดรอกซีเมธิลทรานส เฟอเรสแอคติวิตี O-แอเซทิลโฮโมซีรีนซัลฟ์ไฮดริเลสแอคติวิตี เมธิลีนเททราไฮโดรโฟเลททรีดักเทส แอคติวิตี ฟอสโฟซีรีนอะมิโนทรานสเฟอเรสแอคติวิตี ฟอสโฟซีรีนฟอสฟาเทสแอคติวีตี ซีรีนแอ เซทิลทรานสเฟอเรสแอคติวิตี ซิสเตอีนซินเธส I แอคติวิตี ซิสเตอีนซินเธสIIแอคติวิตี เมธิโอนีน ซินเทสแอคติวิตีที่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12 เมธิโอนีนซินเทสแอคติวิตีที่ไม่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12 ซัล เฟตอะดีนิลอิลทรานสเฟอเรสแอคติวิตี ฟอสโฟอะดีโนซีน-ฟอสโฟซัลเฟตรีดักเทสแอคติวิตี เฟอร์รี ดอกซิน-ซัลไฟท์รีดักเทสแอคติวิตี เฟอร์รีดอกซิน NADPH-รีดักเทสแอคติวิตี แอคติวิตีของโปรตีนของซัลเฟตรีดักชัน RXA077 แอคติวิตีของโปรตีนของซัลเฟตรีดักชัน RXA248 แอคติวิตีของโปรตีนของซัลเฟตรีดักชัน RXA247 แอคติวิตีของตัวควบคุม RXA00655 และแอคติวิ ตีของตัวควบคุม RXN2910

44. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 42 หรือ 43 โดยที่จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมเมื่อเทียบ กับไวด์ไทพ์แอคติวิตีที่ได้รับการลดลงเป็นการเพิ่มเติมของแอคติวิตีที่เลือกจากกลุ่มของโฮโมซีรันไค เนสแอคติวิตี ธรีโอนีนดีไฮด์ดราเทสแอคติวิตี มีโซ-ไดอะมิโนไพมีเลท D-ไฮโดรจีเนสแอคติวิตี ฟอส โฟอีนอลไพรูเวทคาร์บอกซีไคเนสแอคติวิตี ไพรูเวทออกซิเดสแอคติวิตี ไดไฮดดรพิโคลิเนทซิน เธสแอคติวิตี ไดไฮโดรพิโคลิเนทรีดักชันแอคติวิตี และไดอะมิโแนพิโคลิเนทดีคาร์บอกซิเลสแอคติวิตี

45. วิธีสำหรับเตรียมธรีโอนีนโดยการเพาะเลี้ยงจุลินทรีย์ที่ได้รับดัดแปลงทางพันธุกรรม ตาม ข้อถือสิทธิข้อใดข้อหนึ่งของข้อ 24,25,31 หรือ 32 โดยที่จีนนั้นเลือกจากกลุ่มของกรดนิวคลีอิคที่ ประมวลรหัสแอสปาเตทไคเนส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสแอสปาเตท-เซมิแอลดีไฮด์ดีไฮโดรจีเน ส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสกลีเซอรัลดีไฮด์-3-ฟอตเฟสดีไฮโดรจีเนส กรดนิวคลีอิคที่ประมวล รหัส 3-ฟอสโฟกลีเซอเรทไคเนส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสไพรูเวทคาร์บอกซีเลสกรดนิวคลีอิคที่ ประมวลรหัสไทรโอสฟอสเฟตไอโซเมอเรส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโฮโมซีรีนไคเนส กรดนิว คลีอิคที่ประมวลรหัสธรีโอนีนซินเทส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสตัวพาของตัวขนส่งธีโอนีน กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสกลูโคส-6-ฟอสเฟตดีไฮโดนจีเนส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสทรานส แอลโดเลส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสทราสคีโตเลส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสมาเลท-ควิ โนนออกซิโดรีเทส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัส 6-ฟอสโฟกลูโคเนทดีไฮโดรจีเนส กรดนิวคลี อิคที่ประมวลรหัสตัวขนส่งไลซีน กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสไบโอตินไลเกส กรดนิวคลีอิคที่ ประมวลรหัสฟอสโฟอีนอลไพรูเวทคาร์บอกซีเลส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสธรีโอนีนเอฟฟลั๊ก โปรตีน กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสฟรุกโตส-1,6-บิสฟอสฟาเทสกรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัส โปรตีน OpcA กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัส 1-ฟอสโฟฟรุคโตไคเนส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัส 6-ฟอสโฟฟรุคโตไคเนส และกรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโฮโมซีรีนดีไฮดรอกจีเนส

46. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 45 โดยที่จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมมีเมื่อเทียบกับไวด์ ไทพ์แอคติวิตีที่ได้รับการเพิ่มเติมของแอคติวิตีอย่างน้อยหนึ่งอย่างเลือกจากกลุ่มของ แอสปาเตทไคเนส แอคติวิตีแอสปาเตท-เซมิแอลดีไฮโดรจีเนสแอคติวิตี กลีเซอรัลดีไฮด์-3- ฟอตเฟสดีไฮโดรจีเนสแอคติวีตี 3-ฟอสโฟกลีเเซอเรทไคเนทแอคติวิตี ไพรูเวทคาร์บอกซีเลสแอคติ วิตี ไทรโอสฟอสเฟตไฮโซเมอเรสแอคติวิตี ธรีโอนีนซินเทสแอคติวิตี แอคติวิตีของตัวพาของตัว ขนส่งธรีโอนีน ทรานสแอลโดเลสแอคติวิตี ทรานสคีโตเลสแอคติวิตี กลูโคส-6-ฟอสเฟตดีไฮโดร จีเนสแอคติวิตี มาเลท-ควิโนนออกซิโดรีดักเทสแอคติวิตี โฮโมซีรีนไคเนสแอคติวิตี ไบโอตินไล เกสแอคติวิตี ฟอสโฟอีนอลไพรูเวทคาร์บอกซีเลสแอคติวิตี ธรีโอนีนเอฟฟลั๊กโปรตีนแอคติวิตี แอ คติวิตีของโปรตีน OpcA 1-ฟอสโฟฟรุคโตเนสแอคติวิตี 6-ฟอสโฟฟรุคโตเนสแอคติวิตี ฟรุกโตส-1,6-บิสฟอแสฟาเทสแอคติวิตี 6-ฟอสโฟกลูโคเนทแอคติวิตี แและโฮโมซีรีนดีไฮโดหรจีเนส แอคติวิตี

47. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 45 หรือ 46 โดยที่จุลินทรีย์ที่มีการดัดแปลงทางพันธุกรรมมีเมื่อเทียบกับ ไวด์ไทพ์แอคติวิตีที่ลดลงเป็นการเพิ่มเติมของอย่างน้อยหนึ่งแอคติวิตีที่เลือกจากกลุ่มของ ธรีโอนีนดี ไฮดราเทสแอคติวิตี โฮโมซีรีน O-แอเซทิลทรานสเฟอเรสแอคติวิตี ซีรีนเมทธิลทรานสเฟอเรสแอคติ วิตี O-แอเซทิล-โฮโมวีนวัลฟ์ไฮดริเลสแอคติวิตี มีโซ-ไดอะมิโนไพมีเลท D-ดีไฮโดรจีเนสแอคติวิตี ฟอสโฟอีนอลไพรูเวทคาร์บอกซีไคเนสแอคติวิตี ไพรูเวทออกซิเดสแอคติวิตี ไดไฮโดรไดพิโคลิเนท ซินธีเทสแอคติวิตี ไดไฮโดรไดพิโคลิเนทรีดักเทสแอคติวิตี แอสปาราจีเนสแอคติวิตี แอสปาเตทดี คาร์บอกซีเลสแอคติวิตี แอคติวิตีของตัวขนส่งไลซีน แอเซโทแลคเตทซินเทสแอคติวิตี คีทอล-แอซิด รีดักโตไอโวเมอเรสแอคติวิตี แอคติวิตีของอะมิโนทรานสเฟอเรสชนิดสายข้าง เมธิโอนีนซินเทสแอ คติวิตีที่ขึ้นกับโอเอนไซม์ B12 เมธิโอกนีนซินเทสแอคติวิตีที่ไม่ขึ้นกับโอเอนไซม์ B12 ไดไฮดรอก ซีแอซิดดีไฮดราเทสแอคติวิตี และไดอะมิโพโคลิเนทดีคาร์บอกซิเลสแอคติวิตี

48. วิธีตามข้อถือสิทธิข้อใดข้อหนึ่งของข้อ 38 ถึง 47 โดยที่ผลิตภัณฑ์การสังเคราะห์ทางชีว ภาพได้รับการแยกและในกรณีที่เหมาะสมทำบริสุทธิ์จากอาหารเพาะเลี้ยงหลังและ/หรือระหว่างขั้น ตอนการเพาะเลี้ยง

49. การใช้ลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ ID NO.44 เป็นบริเวณจับเกาะของไรโบโซมในหน่วย แสดงออกที่ทำให้จีนสามารถแสดงออกในแบคทีเรียของสกุล Corynebacterium หรือ Brevibacterium

50. การใช้ลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ ID NO.42 หรือ 43 เป็นบริเวณ-10 ในหน่วยแสดงออกที่ทำ ให้จีนสามารถแสดงออกในแบคทีเรียของสกุล Corynebacterium หรือ Brevibacterium

51. หน่วยแสดงออกที่ทำให้จีนสามารถแสดงออกในแบคทีเรียของสกุล Corynebacterium หรือ Brevibacterium ซึ่งประกอบรวมด้วยลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ ID NO.44

52. หน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 51 โดยที่ลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ ID NO.44 ได้รับการใช้ บริเวณจับเกาะของไรโบโซม

53. หน่วยแสดงออกที่ทำให้จีนสามารถแสดงออกในแบคทีเรียของสกุล Corynebacterium หรือ Brevibacterium ซึ่งประกอบด้วยอย่างน้อยหนึ่งลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ ID NO. 42 หรือ 43

54. หน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 53 โดยที่สายหนึ่งของลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ ID Nos.42 หรือ 43 ได้รับการใช้เป็นบริเวณ-10