TH80515A - หน่วยการแสดงออกpef-ts - Google Patents

Abstract

DC60 (04/05/49) การประดิษฐ์นี้เกี่ยวข้องกับการใช้ลำดับกรดนิวคลีอิคสำหรับการควบคุมการถอดรหัส และการ แสดงออกของจีน, โปรโมเตอร์ชนิดใหม่และหน่วยการแสดงออกมันเอง วิธีสำหรับการเปลี่ยนแปลงหรือ การทำให้เกิดอัตราการถอดรหัส และ/หรือ อัตราการแสดงออกของจีน, แคสเสต การแสดงออกซึ่ง ประกอบรวมด้วยหน่วยการแสดงออก, จุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรม โดยมีอัตราการถอดรหัส และ/หรือ อัตราการแสดงออกที่เปลี่ยนแปลงหรือทำให้เกิดขึ้น และวิธีสำหรับการเตรียมผลิตภัณฑ์ ชีวสังเคราะห์โดยการเลี้ยงจุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรม การประดิษฐ์นี้เกี่ยวข้องกับการใช้ลำดับกรดนิวคลีอิกสำหรับการควบคุมการถอดรหัส และการ แสดงออกของจีน, โปรโมเตอร์ชนิดใหม่และหน่วยการแสดงออกมันเอง วิธีสำหรับการเปลี่ยนแปลงหรือ การทำให้เกิดอัตราการถอดรหัส และ/หรือ อัตราการแสดงออกของจีน, แคสเสต การแสดงออกซึ่ง ประกอบรวมด้วยหน่วยการแสดงออก, จุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรม โดยมีอัตราการถอดรหัส และ/หรือ อัตราการแสดงออกที่ถูกเปลี่ยนแปลงหรือทำให้เกิดขึ้น และวิธีสำหรับการเตรียมผลิตภัณฑ์ ชีวสังเคราะห์ โดยการเลี้ยงจุลินทรีย์ที่ถูกดัดแปรทางพันธุกรรม

Claims (54)

1. การใช้กรดนิวคลีอิกซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ ซึ่งประกอบรวมด้วย A) ลำดับกรดนิวคลีอิก SEQ ID NO: 1 หรือ B) ลำดับที่อนุพัทธ์จากลำดับนี้โดยการแทนที่, การสอดแทรก หรือการตัดออกของ นิวคลีโอไทด์ และซึ่งมีความเหมือนกันอย่างน้อย 90% ที่ระดับกรดนิวคลีอิกกับ SEQ ID NO: 1 หรือ C) ลำดับกรดนิวคลีอิกซึ่งไฮบริไดซ์กับลำดับกรดนิวคลิอิก SEQ ID NO: 1 ภายใต้ภาวะ เข้มงวด หรือ D) ชิ้นส่วนที่เทียบเท่าหน้าที่ของลำดับของ A), B) หรือ C) สำหรับการถอดรหัสของจีน

2. การใช้หน่วยการแสดงออกที่ประกอบรวมด้วยกรดนิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ ตามข้อถือสิทธิที่ 1 และโดยเพิ่มเติมที่ถูกเชื่อมต่อทางหน้าที่กับลำดับกรดนิวคลีอิคหนึ่ง ซึ่งทำให้แน่ใจ ได้ถึงการแปลรหัสของกรดไรโบนิวคลีอิค สำหรับการแสดงออกของจีน

3. การใช้ตามข้อถือสิทธิที่ 2 ในที่ซึ่งหน่วยการแสดงออกประกอบรวมด้วย E) ลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ ID NO: 2 หรือ F) ลำดับที่อนุพัทธ์จากลำดับนี้โดยการแทนที่, การสอดแทรก หรือการตัดออกของ นิวคลีโอไทด์ และซึ่งมีความเหมือนกันอย่างน้อย 90% ที่ระดับกรดนิวคลีอิคกับ SEQ ID NO: 2 หรือ G) ลำดับกรดนิวคลีอิกซึ่งไฮบริไดซ์กับลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ ID NO: 2 ภายใต้ภาวะ เข้มงวด หรือ H) ชิ้นส่วนที่เทียบเท่าหน้าที่ของลำดับของ E), F) หรือ G)

4. การใช้ตามข้อถือสสิทธิที่ 3 ในที่ซึ่งหน่วยการแสดงออกประกอบด้วยกรดนิวคลีอิคของ ลำดับ SEQ ID NO: 2

5. กรดนิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ ซึ่งประกอบรวมด้วย A) ลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ ID NO: 1 หรือ B) ลำดับที่อนุพัทธ์จากลำดับนี้โดยการแทนที่, การสอดแทรก หรือการตัดออกของ นิวคลีโอไทด์ และซึ่งที่มีความเหมือนกันอย่างน้อย 90% ที่ระดับกรดนิวคลีอิกกับ SEQ ID NO: 1 หรือ C) ลำดับกรดนิวคลีอิคซึ่งไฮบริไดซ์กับลำดับกรดนิวคลิอิค SEQ ID NO: 1 ภายใต้ภาวะ เข้มงวด หรือ D) ชิ้นส่วนที่เทียบเท่าทางหน้าที่ของลำดับของ A), B) หรือ C) โดยเงื่อนไขว่า กรดนิวคลีอิคที่มีลำดับ SEQ ID NO: 1 ได้ถูกกันออกไป

6. หน่วยการแสดงออกซึ่งประกอบรวมด้วยกรดนิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ ตาม ข้อถือสิทธิที่ 5 และโดยเพิ่มเติมที่ถูกเชื่อมต่อทางหน้าที่กับลำดับกรดนิวคลีอิคหนึ่ง ซึ่งทำให้แน่ใจได้ ถึงการแปลรหัสของกรดไรโบนิวคลีอิค

7. หน่วยการแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 6 ซึ่งประกอบรวมด้วย E) ลำดับกรดนิวคลีอิก SEQ ID NO: 2 หรือ F) ลำดับที่อนุพัทธ์จากลำดับนี้โดยการแทนที่, การสอดแทรก หรือการตัดออกของ นิวคลีโอไทด์ และซึ่งมีความเหมือนกันอย่างน้อย 90% ที่ระดับกรดนิวคลีอิคกับ SEQ ID NO: 2 หรือ G) ลำดับกรดนิวคลีอิคซึ่งไฮบริไดซ์กับลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ ID NO: 2 ภายใต้ภาวะ เข้มงวด หรือ H) ชิ้นส่วนที่เทียบเท่าทางหน้าที่ของลำดับของ E), F) หรือ G) โดยมีเงื่อนไขว่า กรดนิวคลีอิคที่มีลำดับ SEQ ID NO: 2 ได้ถูกกันออกไป

8. วิธีสำหรับการเปลี่ยนแปลงหรือการทำให้เกิดอัตราการถอดรหัสของจีนในจุลินทรีย์โดย เปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์โดย a) การเปลี่ยนแปลงแอคติวีตีโปรโมเตอร์จำเพาะในจุลินทรีย์ของกรดนิวคลีอิคจากภายในซึ่ง มีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ซึ่งควบคุมการถอดรหัสของจีนจากภายในโดย เปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ หรือ b) การควบคุมการถอดรหัสของจีนในจุลินทรีย์โดยกรดนิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือโดยกรดนิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ มีแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลงตามการแสดงรายละเอียด a) ที่ซึ่งจีนเป็น ชนิดเฮเทอโรโลคัสตามที่เกี่ยวข้องกับกรดนิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวีตีโปรโมเตอร์

9. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 8 ในที่ซึ่งการควบคุมการถอดรหัสของจีนในจุลินทรีย์โดยกรด นิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือโดยกรดนิวคลีอิกที่มีแอคติวิตี โปร โมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่มีแอคติวีตีโปรโมเตอร์จำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลงตามการแสดง รายละเอียด a) บรรลุได้โดย b1) การนำเข้าไปของกรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่าซึ่งมีแอคติวีตีโปรโมเตอร์ตามข้อ ถือสิทธิที่ 1 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลง สู่ใน จีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการถอดรหัสของจีนจากภายในหนึ่งหรือมากกว่าได้เกิดขึ้น ภายใต้การควบคุมของกรดนิวคลีอิคที่นำเข้าไปซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิ ที่ 1 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลง หรือ b2) การนำเข้าไปของจีนหนึ่งจีนหรือมากกว่าสู่ในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อการรถอดรหัสของ จีนที่นำเข้าไปหนึ่งหรือมากกว่าได้เกิดขึ้นภายใต้การควบคุมของกรดนิวคลีอิคจากภาย ในซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตีโปรโม เตอร์จำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลง หรือ b3) การนำเข้าส่วนสร้างกรดนิวคลีอิคหนึ่งชนิดหรือมากกว่า ซึ่งประกอบรวมด้วยกรด นิวคลีอิคที่มีแอคติวีตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตี โปรโมเตอร์จำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลง และเชื่อมต่อทางหน้าที่กับกรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือ มากกว่าที่จะถูกถอดรหัส สู่ในจุลินทรีย์

10. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 8 หรือ 9 ในที่ซึ่งเพื่อเพิ่มหรือทำให้เกิดอัตราการถอดรหัสของจีนใน จุลินทรีย์โดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ ah) แอคติวีตีโปรโมเตอร์จำเพาะในจุลินทรีย์ของกรดนิวคลีอิคจากภายในซึ่งมีแอคติวิตี โปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือซึ่งควบคุมการถอดรหัสของจีนจากภายใน ได้ถูกทำ ให้เพิ่มขึ้น โดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ หรือ bh) การถอดรหัสของจีนในจุลินทรีย์ได้ถูกควบคุมโดยกรดนิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตี โปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือ โดยกรดนิวคลีอิคที่มีแอคติวีตีโปร โมเตอร์จำเพาะที่ เพิ่มขึ้นตามการแสดงรายละเอียด a) ที่ซึ่งจีนเป็นชนิดเฮเทอโร โลกัสตามที่เกี่ยวข้องกับ กรดนิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปร โมเตอร์

11. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 10 ในที่ซึ่งการควบคุมการถอดรหัสของจีนในจุลินทรีย์โดยกรด นิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปร โมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือโดยกรดนิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตี โปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 โดยมีแอคติวิตีโปร โมเตอร์จำเพาะที่เพิ่มขึ้นตามการแสดงรายละเอียด a) ได้บรรลุถึง โดย bh1) การนำเข้าไปของกรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่าซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือ สิทธิที่ 1 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะที่เพิ่มขึ้น สู่ในจีโนมของ จุลินทรีย์เพื่อว่าการถอดรหัสของจีนจากภายในหนึ่งหรือมากกว่าได้เกิดขึ้นภายใต้การ ควบคุมของกรดนิวคลีอิคที่นำเข้าไปซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หาก เหมาะสมโดยมีแอคติวิตี โปร โมเตอร์จำเพาะ ที่เพิ่มขึ้น หรือ bh2) การนำเข้าไปของจีนหนึ่งหรือมากกว่าสู่ในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการถอดรหัสของ จีนที่นำเข้าไปหนึ่งหรือมากกว่าได้เกิดขึ้นภายใต้การควบคุมของกรดนิวคลีอิคจากภาย ในซึ่งมีแอคติวิตีโปร โมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หากเหมาะสม โดยมีแอคติวิตี โปร โม เตอร์จำเพาะที่เพิ่มขึ้น หรือ bh3) การนำเข้าไปของส่วนสร้างกรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่า ซึ่งประกอบรวมด้วยกรด นิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปร โมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตี โปรโมเตอร์จำเพาะเพิ่มขึ้น และเชื่อมต่อทางหน้าที่กับกรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่า ที่จะถูกถอดรหัส สู่ในจุลินทรีย์

12. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 8 หรือ 9 ในที่ซึ่งเพื่อการลดอัตราการถอดรหัสของจีนในจุลินทรีย์โดย เปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ ar) แอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะในจุลินทรีย์ของกรดนิวคลีอิคจากภายในซึ่งมีแอคติวิตี โปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ซึ่งควบคุมการถอดรหัสของจีนภายใน ได้ถูกลดลง โดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ หรือ br) นำกรดนิวคลีอิคที่มีแอคติวิตี โปร โมเตอร์จำเพาะที่ลดลงตามการแสดงรายละเอียด a) ได้ถูก นำเข้าไปสู่ในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการถอดรหัสของจีนจากภายในได้เกิดขึ้นภายใต้ การควบคุมกรดนิวคลีอิคที่นำเข้าไปโดยมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ที่ลดลง

13. วิธีสำหรับการเปลี่ยนแปลงหรือการทำให้ทำให้กิดอัตราการแสดงออกของจีนในจุลินทรีย์โดย เปรียบเทียบกับ ไวลด์ไทป์โดย c) การเปลี่ยนแปลงแอคติวีตีการแสดงออกจำเพาะในจุลินทรีย์ของหน่วยการแสดงออกจาก ภายในตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ซึ่งควบคุมการแสดงออกของจีนจากภายใน โดยเปรียบ เทียบกับไวลด์ไทป์ หรือ d) การควบคุมการแสดงออกของจีนในจุลินทรีย์โดยหน่วยการแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หรือโดยหน่วยการแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 โดยมีแอคติวิตีการแสดง ออกจำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลงตามการแสดงรายละเอียด c) ที่ซึ่งจีนเป็นเฮเทอโร โลกัสตามที่เกี่ยวข้องกับ หน่วยการแสดงออก

14. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 13 ในที่ซึ่งการควบคุมการแสดงออกของจีนในจุลินทรีย์โดยหน่วย การแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หรือโดยหน่วยการแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่มี แอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลงตามการแสดงรายละเอียด a) ได้บรรลุโดย d1) การนำเข้าไปของหน่วยการแสดงออกหนึ่งหรือมากกว่าตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หาก เหมาะสมโดยมีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลง สูในจีโนมของ จุลินทรีย์เพื่อว่าการแสดงออกของจีนจากภายในหนึ่งหรือมากว่าได้เกิดขึ้นภายใต้การ ควบคุมของหน่วยการแสดงออกที่นำเข้าไป หรือ d2) การนำเข้าไปของจีนหนึ่งหรือมากกว่าสู่ในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการแสดงออกของ จีนที่นำเข้าไปหนึ่งหรือมากกว่าเกิดขึ้นภายใต้การควบคุมของหน่วยการแสดงออก จากภายในตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะ ที่ถูกเปลี่ยนแปลง หรือ d3) การนำเข้าไปของส่วนสร้างกรดนิวคลีอิคหนึ่งชนิดหรือมากกว่า ซึ่งประกอบรวมด้วยหน่วย การแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตีการแสดงออก จำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลง และเชื่อมต่อทางหน้าที่กับกรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่าที่จะ ถูกแสดงออก สู่ในจุลินทรีย์

15. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 13 หรือ 14 ในที่ซึ่งเพื่อเพิ่มหรือทำให้เกิดอัตราการแสดงออกของจีน ในจุลินทรีย์โดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ ch) แอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะในจุลินทรีย์ของหน่วยการแสดงออกภายในตามข้อถือ สิทธิที่ 2 หรือ 3 ซึ่งควบคุมการแสดงออกของจีนจากภายใน ได้ถูกทำให้เพิ่มขึ้นโดย เปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ หรือ dh) การแสดงออกของจีนในจุลินทรีย์ได้ถูกควบคุมโดยหน่วยการแสดงออกตามข้อถือสิทธิ ที่ 2 หรือ 3 หรือโดยหน่วยการแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่มีแอคติวิตีการ แสดงออกจำเพาะที่เพิ่มขึ้นตามการแสดงรายละเอียด a) ที่ซึ่งจีนเป็นชนิดเฮเทอโรโลกัส ตามที่เกี่ยวข้องกับหน่วยการแสดงออก

16. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 15 ในที่ซึ่งการควบคุมการแสดงออกของจีนในจุลินทรีย์โดยหน่วย การแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หรือโดยหน่วยการแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่มี แอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่เพิ่มขึ้นตามการแสดงรายละเอียด a) ได้บรรลุโดย dh1) การนำเข้าไปของหน่วยการแสดงออกหนึ่งหรือมากกว่าตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หาก เหมาะสมโดยมีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่เพิ่มขึ้น สู่ในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่า การแสดงออกของจีนจากภายในหนึ่งหรือมากกว่าได้เกิดขึ้นภายใต้การควบคุมของ หน่วยการแสดงออกที่นำเข้าไป ถ้าเหมาะสมโดยมีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่ เพิ่มขึ้น หรือ dh2) การนำเข้าไปของจีนหนึ่งจีนหรือมากกว่าสู่ในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการแสดงออกของ จีนที่นำเข้าไปหนึ่งหรือมากกว่าได้เกิดขึ้นภายใต้การควบคุมของหน่วยการแสดงออก จากภายในตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตีการแสดงออก จำเพาะที่เพิ่มขึ้น หรือ dh3) การนำเข้าไปของส่วนสร้างกรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่า ซึ่งประกอบรวมด้วยหน่วย การแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวีตีการแสดงออก จำเพาะที่เพิ่มขึ้น และเชื่อมต่อทางหน้าที่กับกรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่าที่จะถูก แสดงออก สู่ในจุลินทรีย์

17. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 13 หรือ14 ในที่ซึ่งเพื่อลดอัตราการแสดงออกของจีนในจุลินทรีย์ โดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ cr) แอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะของหน่วยการแสดงออกจากภายในตามข้อถือ สิทธิที่ 2 หรือ 3 ซึ่งควบคุมการแสดงออกของจีนจากภายใน ได้ถูกลดลงโดยเปรียบเทียบ กับไวลด์ไทป์ หรือ dr) หน่วยการแสดงออกที่มีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่ลดลงตามการแสดงรายละเอียด cr) ได้ถูกนำเข้าไปสู่ในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการแสดงออกของจีนจากภายในได้เกิด ขึ้นภายใต้การควบคุมของหน่วยการแสดงออกที่ได้นำเข้าไปโดยมีแอคติวีตีการแสดงออกที่ ลดลง

18. วิธีตามข้อใดข้อหนึ่งของข้อถือสิทธิที่ 8 ถึง 17 ในที่ซึ่งจีน ได้ถูกคัดเลือกจากกลุ่มของกรด นิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของกรดอะมิโนชนิดโปรตีโนเจนิค และ นอน- โปรตีโนเจนิค, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของนิวคลีโอไทด์ และ นิวคลีโอไซด์, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของกรดอินทรีย์, กรด นิวคลีอิค ซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของลิพิดและกรดไขมัน, กรดนิวคลีอิคซึ่ง ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ของไดออล, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถี ชีวสังเคราะห์ของคาร์โบไฮเดรต, กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของสาร ประกอบอะโรมาติค, กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของวิตามิน, กรด นิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ของโคแฟกเตอร์ และกรดนิวคลิอิคซึ่งประมวล รหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของแอนไซม์ ที่ซึ่งหากเหมาะสมจีนอาจประกอบรวมด้วยส่วนควบ คุมอื่นต่อไปอีก

19. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 18 ในที่ซึ่งโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของกรดอะมิโนได้ถูกคัด เลือกจากกลุ่มของแอสปาร์เตตไคเนส, แอสปาร์เตต-เซมิแอลดีไฮด์ดีไฮโดรจีเนส, ไดอะมิโนพิมีเลต ดีไฮโดรจีเนส, ไดอะมิโนพิมีเลตดีคาร์บอกซิเลส, ไดไฮโดรไดพิโคลิเนตซินธีเทส, ไดไฮโดรไดพิโค ลิเนตรีดัคเทส, กลีเซอรัลดีไฮต์-3-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส, 3-ฟอสฟอกกลีเซอเรตไคเนส, ไพรูเวต คาร์บอกซิเลส, ไทรโอสฟอสเฟตไอโซเมอเรส, ตัวควบคุมการถอดรหัส LuxR, ตัวควบคุมการถอด รหัส LysR1, ตัวควบคุมการถอดรหัส LysR2, มาเลต-ควิโนนออกซิโดรีดัคเทส, กลูโคส-6-ฟอสเฟต ดีไฮโดรจีเนส, 6-ฟอสโฟกลูโคเนตดีไฮโดรจีเนส, ทรานสคีโทเลส, ทรานสแอลโดเลส, ฮอมอเซรีน O-อะเซทิลทรานสเฟอเรส, ซิสตาไธโอนีนแกมมา-ซินเธส, ซิสตาไธโอนีนบีตา-ไลเอส, เซรีน ไฮดรอกซีเมทิลทรานสเฟอเรส, O-อะเซทิลฮอมอเซรีนซัลฟ์ไฮดริเลส, เมธิลีนเททราไฮโดรฟอเลต รีดัคเทส, ฟอสฟอเซรีนอะมิโนทรานสเฟอเรส, ฟอสฟอเซรีนฟอสฟาเทส, เซรีนอะเซทิลทราน สเฟอเรส, ฮอมอเซรีนดีไฮโดรจีเนส, ฮอมอเซรีนไคเนส, ธรีโอนีนซินเธส, ตัวพาขนส่งธรีโอนีนออก, ธรีโอนีน ดีไฮดราเทส, ไพรูเวตออกซิเดส, ตัวขนส่งไลซีนออก, ไบโอทินไลเกส, ซิสเตอีนซินเธส I, ซิสเตอีนซินเธส II, เมไธโอนีนซินเธสชนิดที่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12, เมไธโอนีนซินเธสชนิดที่ไม่ขึ้น กับ โคเอนไซม์ B12, ซัลเฟตอะดีนิลิลทรานสเฟอเรสหน่วยย่อย 1 และ 2, ฟอสฟออะดีโนซีนฟอสฟอ ซัลเฟตรีดักเทส, เฟอร์รีดอกซิน-ซัลไฟต์รีดัคเทส, เฟอร์รีดอกซิน NADP รีดักเทส, 3-ฟอสฟอกลีเซอ เรตดีไฮโดรจีเนส, ตัวควบคุม RXA00655, ตัวควบคุม RXN2910, อาร์จินิล-tRNA ซินธีเทส, ฟอสฟอ อีนอล ไพรูเวตคาร์บอกซิเลส, โปรตีนการไหลออกของธรีโอนีน, เซรีนไฮดรอกซีเมธิลทรานสเฟอเรส, ฟรุคโทส-1,6-บิสฟอสฟาเทส, โปรตีนเกี่ยวกับรีดัคชันของซัลเฟต RXA077, โปรตีนเกี่ยวกับรีดัคชัน ของซัลเฟต RXA248, โปรตีนเกี่ยวกับรีดัคชันของซัลเฟต RXA247, โปรตีน OpcA, 1-ฟอสฟอ ฟรุคโทไคเนส และ 6-ฟอสฟอฟรุคโทไคเนส

20. แคสเสตการแสดงออกซึ่งประกอบรวมด้วย a) อย่างน้อยหน่วยการแสดงออกหนึ่งตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 และ b) อย่างน้อยกรดนิวคลีอิคอื่นต่อไปหนึ่งที่จะถูกแสดงออก และ c) ส่วนควบคุมทางพันธุกรรมอื่นต่อไป หากเหมาะสม ที่ซึ่งอย่างน้อยหน่วยการแสดงออกหนึ่งและลำดับกรดนิวคลีอิคอื่นต่อไปที่จะถูกแสดงออก ได้ถูกเชื่อมต่อทางหน้าที่เข้าด้วยกัน และลำดับกรดนิวคลีอิคอื่นต่อไปที่จะถูกแสดงออกเป็นชนิด เฮเทอโรโลกัสตามที่เกี่ยวข้องกับหน่วยการแสดงออก

21. แคสเสตการแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 20 ในที่ซึ่งลำดับกรดนิวคลีอิคอื่นต่อไปที่จะถูก แสดงออก ได้ถูกคัดเลือกจากกลุ่มของกรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของ กรดอะมิโนชนิดโปรตีโนเจนิคและนอน-โปรตีโนเจนิค, กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถี ชีวสังเคราะห์ของนิวคลีโอไทด์และนิวคลีโอไซด์, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถี ชีวสังเคราะห์ทางกรดอินทรีย์, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของลิพิด และกรดไขมัน, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของไดออล, กรดนิวคลีอิค ซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของคาร์โบไฮเดรต, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัส โปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของสารประกอบอะโรมาติค, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจาก โคแฟกเตอร์ และกรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของเอนไซม์

22. แคสเสตการแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 21 ในที่ซึ่งโปรตีนตจากวิถีชีวสังเคราะห์ของกรด อะมิโนได้ถูกคัดเลือกจากกลุ่มของแอสปาร์เตตไคเนส, แอสปาร์เตต-เซมิแอลดีไฮด์ดีไฮโดรจีเนส, ไดอะมิโนพิมีเลตดีไฮโดรจีเนส, ไดอะมิโนพิมีเลตดีคาร์บอกซิเลต, ไดไฮโดรไดพิโคลิเนตซินธีเทส, ไดไฮโดรไดพิโคลิเนตรีดักเทส, กลีเซอรัลดีไฮด์-3-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส, 3-ฟอสฟอกลีเซอเรต ไคเนส, ไพรูเวตคาร์บอกซิเลส, ไทรโอสฟอลเฟต ไอโซเมอเรส, ตัวควบคุมการถอดรหัส LuxR, ตัว ควบคุมการถอดรัหส LysR1, ตัวควบคุมการถอดรหัส LysR2, มาเลต-ควิโนออกซิโดรีดัคเทส, กลูโคส-6-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส, 6-ฟอสฟอกลูโคเนตดีไฮโดรจีเนส, ทรานสคีโทเลส, ทรานสแอล โดเลส, ฮอมอเซรีน O-อะเซทิลทรานสเฟอเรส, ซิสตาไธโอนีนแกมมา-ซินเธส, ซิสตาไธโอนีนบีตา- ไลเอส, เซรีนไฮดรอกซีเมทิลทรานสเฟอเรส O-อะเซทิลฮอมอเซรีซัลฟ์ไฮดริเลส, เมธิลีนเททรา ไฮโดรฟอเลตรีดัคเทส, ฟอสฟอเซรีนอะมิโนทรานสเฟอเรส, ฟอสฟอเซรีนฟอสฟาเทส, เซรีน อะเซทิลทรานสเฟอเรส, ฮอมอเซรีนดีไฮโดรจีเนส, ฮอมอเซรีนไคเนส, ธรีโอนีนซินเธส, ตัวพาขน ส่งธรีโอนีนออก, ธรีโอนีนดีไฮดราเทส, ไพรูเวตออกซิเดส, ตัวขนส่งไลซีนออก, ไบโอทินไลเกส, ซิสเตอีนซินเธส I, ซินเตอีนซินเธส II, เมไธโอนีนซินเธสชนิดที่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12, แอคติวิตีเมไธ โอนีนซินเธสชนิดที่ไม่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12, ซัลเฟตอะดีนิลิลทรานสเฟอเรสหน่วยย่อย 1 และ 2, ฟอสฟออะดีโนซีนฟอสฟอซัลเฟตรีดัคเทส, เฟอร์รีดอกซิน-ซัลโฟต์รีดัคเทส, เฟอร์รีดอกซิน NADP รีดัคเทส, 3-ฟอสฟอกลีเซอเรตดีไฮโดรจีเนส, ตัวควบคุม RXA00655, ตัวควบคุม RXN2910, อาร์จินิล-tRNA ซินธีเทส, ฟอสฟออีนอลไพรูเวตคาร์บอกซิเลส, โปรตีนการไหลออกของธรีโอนีน, เซรีนไฮดรอกซี เมธิลทราน สเฟอเรส, ฟรุคโทส-1,6-บิสฟอสฟาเทส, โปรตีนเกี่ยวกับรีดัคซันของ ซัลเฟต RXA077, โปรตีนเกี่ยวกับรีดัคชันของซัลเฟต RXA248, โปรตีนเกี่ยวกับรีดัคชันของซัลเฟต RXA247, โปรตีน OpcA, 1-ฟอสฟอฟรุคโทไคเนส และ 6-ฟอสฟอฟรุคโทไคเนส

23. เวกเตอร์เพื่อการแสดงออกที่ประกอบรวมด้วยแคสเสตการแสดงออกตามข้อใดข้อหนึ่งของ ข้อถือสิทธิที่ 20 ถึง 22

24. จุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรม ที่ซึ่งการดัดแปรทางพันธุกรรมได้นำไปสู่การเปลี่ยน แปลงหรือการทำให้เกิดขึ้นของอัตราการถอดรหัสของอย่างน้อยจีนหนึ่ง โดยเปรียบเทียบกับไวลด์ ไทป์ และได้ขึ้นกับ a) การเปลี่ยนแปลงแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะในจุลินทรีย์ของอย่างน้อยกรดนิวคลีอิคจาก ภายในหนึ่งซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอรน์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ซึ่งควบคุมการถอดรหัสของ อย่างน้อยจีนจากภายในหนึ่ง หรือ b) การควบคุมการถอดรหัสของจีนในจุลินทรีย์โดยกรดนิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวีตีโปรโมเตอร์ ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือโดยกรดนิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 โดยมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลงตามการแสดงรายละเอียด a) ที่ซึ่งจีน เป็นชนิดเฮเทอโรโลกัสตามที่เกี่ยวข้องกับกรดนิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์

25. จุลทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 24 ในที่ซึ่งการควบคุมการถอดรหัส ของจีนในจุลินทรีย์โดยกรดนิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือโดยกรด นิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 โดยมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะที่ถูก เปลี่ยนแปลงตามการแสดงรายละเอียด a) ได้บรรลุถึงโดย b1) การนำเข้าไปของกรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่าซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือ สิทธิที่ 1 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตีโปร โมเตอร์จำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลง สู่ในจีโนม ของจุลินทรีย์เพื่อว่าการถอดรหัสของจีนจากภายในหนึ่งหรือมากว่าได้เกิดขึ้นภายใต้ การควบคุมของกรดนิวคีอิคที่นำเข้าไปซีงมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลง หรือ b2) การนำเข้าไปของจีนหนึ่งหรือมากกว่าสู่ในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการถอดรหัสของ จีนที่นำเข้าไปหนึ่งมากกว่าได้เกิดขึ้นภายใต้การควบคุมของกรดนิวคลีอิคจากภายใน ซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ จำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลง หรือ b3) การนำเข้าไปของส่วนสร้างกรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่า ซึ่งประกอบรวมด้วยกรด นิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตี โปรโมเตอร์จำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลง และเชื่อมต่อทางหน้าที่กับกรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือ มากกว่าที่จะถูกถอดรหัส สู่ในจุลินทรีย์

26. จุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 24 หรือ 25 ซึ่งมีอัตราการถอดรหัสที่ เพิ่มขึ้นหรือทำให้เกิดขึ้นอย่างน้อยจีนหนึ่งโดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ ในที่ซึ่ง ah) แอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะในจุลินทรีย์ของกรดนิวคลีอิคจากภายในซึ่งมีแอคติวิตี โปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ซึ่งควบคุมการถอดรหัสของจีนจากภายใน ได้ถูกทำให้ เพิ่มขึ้นโดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ หรือ bh) การถอดรหัสของจีนในจุลินทรีย์ได้ถูกควบคุมโดยกรดนิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตี โปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือโดยกรดนิวคลีอิคที่มีแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะที่ เพิ่มขึ้นตามการแสดงรายละเอียด ah) ที่ซึ่งจีนเป็นชนิดเฮเทอโรโลกัสตามที่เกี่ยวข้องกับ กรดนิวคลีอิคซึ่งมี แอคติวิตีโปรโมเตอร์

27. จุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 26 ในที่ซึ่งการควบคุมการถอดรหัส ของจีนในจุลินทรีย์โดยกรดนิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือโดยกรด นิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 โดยมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะที่เพิ่มขึ้นตาม การแสดงรายละเอียด a) ได้บรรลุถึงโดย bh1) การนำเข้าไปของกรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่าซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อ ถือสิทธิที่ 1 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะที่เพิ่มขึ้น สู่ในจีโนมของ จุลินทรีย์เพื่อว่าการถอดรหัสของจีนจากภายในหนึ่งหรือมากกว่าได้เกิดขึ้นภายใต้การ ควบคุมของกรดนิวคลีอิคที่นำเข้าไปซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ หากเหมาะสมโดยมี แอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะที่เพิ่มขึ้น หรือ bh2) การนำเข้าไปของจีนหนึ่งหรือมากกว่าสู่ในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการถอดรหัสของ จีนที่นำเข้าไปหนึ่งหรือมากกว่าได้เกิดขึ้นภายใต้การควบคุมของกรดนิวคลีอิคจากภาย ในซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตีโปรโม เตอร์จำเพาะที่เพิ่มขึ้น หรือ bh3) การนำเข้าไปของส่วนสร้างกรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่า ซึ่งประกอบรวมด้วยกรด นิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตี โปรโมเตอร์จำเพาะที่เพิ่มขึ้น และเชื่อมต่อทางหน้าที่กับกรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่า ที่จะถูกถอดรหัส สู่ในจุลินทรีย์

28. จุลินทรีย์ที่ถูกดัดแปรทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 24 หรือ 25 ซึ่งมีอัตราการถอดรหัสที่ ลดลงของอย่างน้อยจีนหนึ่งโดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ ในที่ซึ่ง ar) แอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะในจุลินทรีย์ของอย่างน้อยกรดนิวคลีอิคจากภายในหนึ่งซึ่งมี แอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ซึ่งควบคุมการถอดรหัสของอย่างน้อยจีนจาก ภายในหนึ่ง ได้ถูกลดลงโดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ หรือ br) กรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่าที่มีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ที่ลดลงตามการแสดงรายละเอียด a) ได้ถูกนำเข้าไปสู่ในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการถอดรหัสของอย่างน้อยจีนจากภาย ในหนึ่งได้เกิดขึ้นภายใต้การควบคุมของกรดนิวคลีอิคที่นำไปโดยมีแอคติวิตีโปรโม เตอร์ที่ลดลง

29. จุลินทรีย์ที่ถูกดัดแปรทางพันธุกรรม ที่ซึ่งการดัดแปรทางพันธุกรรมได้นำไปสู่การเปลี่ยน แปลงหรือการทำให้เกิดขึ้นของอัตราการแสดงออกของอย่างน้อยจีนหนึ่งโดยเปรียบเทียบกับไวลด์ ไทป์ และ ได้ขึ้นกับ c) การเปลี่ยนแปลงแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะในจุลินทรีย์ของอย่างน้อยหน่วยการ แสดงออกภายในหนึ่งตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ซึ่งควบคุมการแสดงออกของอย่าง น้อยจีนจากภายในหนึ่งโดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ หรือ d) การควบคุมการแสดงออกของจีนในจุลินทรีย์โดยหน่วยการแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หรือ โดยหน่วยการแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 โดยมีแอคติวิตีการแสดง ออกจำเพาะที่เปลี่ยนแปลงตามการแสดงรายละเอียด a) ที่ซึ่งจีนเป็นชนิดเฮเทอโร โลกัสตามที่เกี่ยวข้องกับหน่วยการแสดงออก

30. จุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 29 ในที่ซึ่งการควบคุมการแสดงออก ของจีนในจุลินทรีย์โดยหน่วยการแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 โดยมีหน่วยการแสดงออก ตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 โดยมีแอคติวิการแสดงออกจำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลงตามการแสดงราย ละเอียด a) ได้บรรลุถึงโดย d1) การนำเข้าของหน่วยการแสดงออกหนึ่งหรือมากกว่าตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หาก เหมาะสมโดยมีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลง สู่ในจีโนมของจุลินทรีย์ เพื่อว่าการแสดงออกของจีนจากภายในหนึ่งหรือมากกว่าได้เกิดขึ้นภายใต้การควบคุม ของหน่วยการแสดงออก ที่นำเข้าไปตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หากเหมาะสมโดยมี แอตติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่เปลี่ยนแปลง หรือ d2) การนำเข้าไปของจีนหรือมากกว่าสู่ในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการแสดงออกของ จีนที่นำเข้าไปหนึ่งหรือมากกว่าได้เกิดขึ้นภายใต้การควบคุมของหน่วยการแสดงออกจาก ภายในตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่ ถูกเปลี่ยนแปลง หรือ d3) การนำเข้าไปของส่วนสร้างกรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่า ซึ่งประกอบรวมด้วยหน่วย การแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตีการแสดงออก จำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลง และเชื่อมต่อแบบทำหน้าที่กับกรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่าที่จะ ถูกแสดงออก เข้าในจุลินทรีย์

31. จุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 29 หรือ 30 โดยมีอัตราการแสดงออก ที่เพิ่มขึ้นหรือทำให้เกิดขึ้นของอย่างน้อยจีนหนึ่ง โดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ ในที่ซึ่ง ch) แอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะในจุลินทรีย์ของอย่างน้อยหน่วยการแสดงออกจากภายใน หนึ่งตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ซึ่งควบคุมการแสดงออกของจีนภายใน ได้ถูกทำให้ เพิ่มขึ้นโดยเปรีบบเทียบกับไวลด์ไทป์ หรือ dh) การแสดงออกของจีนในจุลินทรีย์ได้ถูกควบคุมโดยหน่วยการแสดงออกตามข้อถือสิทธิ ที่ 2 หรือ 3 หรือโดยหน่วยการแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่มีแอคติวิตีการ แสดงออกจำเพาะที่เพิ่มขึ้นตามการแสดงรายละอียด a) ที่ซึ่งจีนเป็นชนิดเฮเทอโร โลกัสตามที่เกี่ยวข้องกับหน่วยการแสดงออก

32. จุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 31 ในที่ซึ่งการควบคุมการแสดงออก ของจีนในจุลินทรีย์โดยหน่วยการแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หรือโดยหน่วยการแสดงออก ตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 โดยมีแอคติวิการแสดงออกจำเพาะที่เพิ่มขึ้นตามการแสดงรายละเอียด a) ได้บรรลุได้โดย dh1) การนำเข้าไปของหน่วยการแสดงออกหนึ่งหรือมากกว่าตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หาก เหมาะสมโดยมีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่เพิ่มขึ้น สู่ในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่า การแสดงออกของจีนภายในหนึ่งหรือมากกว่าได้เกิดขึ้นภายใต้การควบคุมของ หน่วยการแสดงออกที่ได้นำเข้าไปตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตี การแสดงออกจำเพาะที่เพิ่มขึ้น หรือ dh2) การนำเข้าไปของจีนหรือมากกว่าสู่ในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการแสดงออกของ จีนที่ได้นำเข้าหนึ่งหรือมากกว่าได้เกิดขึ้นภายใต้การควบคุมของหน่วยการแสดงออก จากภายในตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตีการแสดงออก จำเพาะที่เพิ่มขึ้น หรือ dh3) การนำเข้าไปของส่วนกรดนิวคลีอิกหนึ่งหรือมากกว่า ซึ่งประกอบรวมด้วยหน่วย การแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตีการแสดงออก จำเพาะที่เพิ่มขึ้น และเชื่อมต่อทางหน้าที่กับกรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่าที่จะถูก แสดงออก สู่ในจุลินทรีย์

33. จุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 29 หรือ 30 โดยมีอัตราการแสดงออก ที่ลดลงของอย่างน้อยจีนหนึ่งโดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ ในที่ซึ่ง cr) แอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะ ในจุลินทรีย์ของอย่างน้อยหน่วยการแสดงออกจากภายใน หนึ่งตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ซึ่งควบคุมการแสดงออกของอย่างน้อยจีนจากภายในหนึ่ง ได้ถูกลดลงโดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ หรือ dr) หน่วยการแสดงออกหนึ่งชนิดหรือมากกว่าตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่มีแอคติวิตีการแสดง ออกที่ลดลงได้ถูกนำเข้าไปสู่ในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการแสดงออกของอย่างน้อยจีน หนึ่งได้เกิดขึ้นภายใต้การควบคุมของหน่วยการแสดงออกที่นำเข้าไปตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 โดยมีแอคติวิตีการแสดงออกที่ลดลง

34. จุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมซึ่งประกอบรวมด้วยหน่วยการแสดงออกตามข้อถือ สิทธิที่ 2 หรือ 3 และเชื่อมต่อทางหน้าที่กับจีนที่จะถูกแสดงออก ที่ซึ่งจีนเป็นชนิดเฮเทอโรโลกัสตามที่ เกี่ยวข้องกับ หน่วยการแสดงออก

35. จุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 34 ซึ่งประกอบรวมด้วยแคสเสตการ แสดงออกตามข้อใดข้อหนึ่งของข้อถือสิทธิที่ 20 ถึง 22

36. จุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมตามข้อใดข้อหนึ่งของข้อถือสิทธิที่ 24 ถึง 35 ในที่ซึ่งจีน ได้ถูกคัดเลือกจากกลุ่มของกรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของกรดอะมิโน ชนิดโปรตีนโนเจนิคและนอน-โปรตีโนเจนิค, กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีว สังเคราะห์ของนิวคลีโอไทด์และนิวคลีโอไซด์, กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีว สังเคราะห์ของกรดอินทรีย์, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ทางของลิพิดและ กรดไขมัน, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของไดออล, กรดนิวคลีอิคซึ่ง ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของคาร์โบไฮเดรต, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีน จากวิถีชีวสังเคราะห์ขชองสารประกอบอะโรมาติค, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีว สังเคราะห์ของวิตามิน, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของโคแฟกเตอร์ และกรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของเอนไซม์ ที่ซึ่งหากเหมาะสมจีนอาจ ประกอบรวมด้วยส่วนควบคุมอื่นต่อไปอีก

37. จุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 36 ในที่ซึ่งโปรตีนจากวิถีชีว สังเคราะห์ของกรดอะมิโนได้ถูกคัดเลือกจากกลุ่มของแอสปาร์เตตไคเนส, แอสปาร์เตต-เซมิ แอลดีไฮด์ดีไฮโดรจีเนส, ไดอะมิโนพิมีเลตดีไฮโดรจีเนส, ไดอะมิโนพิมีเลตดีคาร์บอกซิเลส, ไดไฮโดรไดพิโคลิเนตซินธีเทส, ไดไฮโดรไดพิโคลิเนตรีดัคเทส, กลีเซอรัลดีไฮด์-3-ฟอสโฟดีไฮโดร จีเนส, 3-ฟอสฟอกลีเซอเรตไคเนส, ไพรูเวตคาร์บอกซิเลส, โทรโอสฟอสเฟตโอโซเมอเรส, ตัวควบ คุมการถอดรหัส LuxR, ตัวควบคุมการถอดรหัส LysR1, ตัวควบคุมการถอดรหัส LysR2, มาเลต- ควิโนนออกซิโดรีดัคเทส, กลูโคส-6-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส, 6-ฟอสฟอกลูโคเนตดีไฮโดรจีเนส, ทรานสคีโทเลส, ทรานสแอลโดเลส, ฮอมอเซรีน O-อะเซทิลทรานสเฟอเรส, ซิสตาไธโอนีนแกมมา- ซินเธส, ซิสตาไธโอนีนบีตา-ไลเอส, เซรีนไฮดรอกซีเมทิลทรานสเฟอเรส, O-อะซีทิลฮอมอเซรีนซัลฟ์ ไฮดริเลส, เมธิลีนเททราไฮโดรฟอเลตรีดัคเทส, ฟอสฟอเซรีนอะมิโนทรานสเฟอเรส, ฟอสโฟเซรีน ฟอสฟาเทส, เซรีนอะซีทิลทรานสเฟอเรส, ฮอมอเซรีนดีไฮโดรจีเนส, ฮอมอเซรีนไคเนส, ธรีโอนีน ซัลเธส, ตัวพาขนส่งธรีโอนีนออก, ธรีโอนีนดีไฮดราเทส, ไพรูเวตออกซิเดส, ตัวขนส่งไลซีนออก, ไบโอทินไลเกส, ซิสเตอีนซินเธส I, ซิสเตอีนซินเธส II, เมไธโอนีนซินเธสชนิดที่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12, เมไธโอนีนซินเทสชนิดที่ไม่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12, ซัลเฟตอะดีนิลิลทรานสเฟอเรสหน่วยย่อย 1 และ 2, ฟอสฟออะดีโนซีนฟอสฟอซัลเฟตรีดักเทส, เฟอร์รีดอกซิน-ซัลไฟต์รีดักเทส, เฟอร์รีดอกซิน NADP รีดักเทส, 3-ฟอสฟอกลีเซอเรตดีไฮโดรจีเนส, ตัวควบคุม RXA00655, ตัวควบคุม RXN2910, อาร์จินิล-tRNA ซินธีเทส, ฟอสฟออีนอลไพรูเวตคาร์บอกซิเลส, โปรตีนการไหลออกของธรีโอนีน, เซรีนไฮดรอกซีเมธิลทรานสเฟอเรส, ฟรุคโทส-1,6- บิสฟอสฟาเทส, โปรตีนเกี่ยวกับรีดักชันของ ซัลเฟต RXA077, โปรตีนเกี่ยวกับรีดัคชันของซัลเฟต RXA248, โปรตีนเกี่ยวกับรีดัคชันของซัลเฟต RXA248, โปรตีน OpcA, 1-ฟอสฟอฟรุคโทไคเนส และ 6-ฟอสฟอฟรุคโทไคเนส

38. วิธีสำหรับการเตรียมผลิตภัณฑ์ชีวสังเคราะห์โดยการเลี้ยงจุลินทรีย์ที่ดัดแปรทาง พันธุกรรมตามข้อใดข้อหนึ่งของข้อถือสิทธิที่ 24 ถึง 37

39. วิธีสำหรับการเตรียมไลซีนโดยการเพาะเลี้ยงจุลินทรีย์ที่ถูดดัดแปรทางพันธุกรรมตามข้อใด ข้อหนึ่งของข้อถือสิทธิที่ 24, 25, 31 หรือ 32 ในที่ซึ่งจีนได้ถูกคัดเลือกจากกลุ่มของกรดนิวคลีอิคซึ่ง ประมวลรหัสแอสปาร์เตตไคเนส, กรดนิวคลีอิคซึ่งที่ประมวลรหัสแอปาร์เตต-เซมิแอลดีไฮด์ดีไฮโดร จีเนส, กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสไดอะมิโนพิมีเลตดีไฮโดรจีเนส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัส ไดอะมิโนพิมีเลตดีคาร์บอกซิเลส, กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสไดโฮโดรไดพิโคลิเนตซินธีเทส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสไดไฮโดรไดพิโคลิเนตรีดักเทส, กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัส กลีเซอรัลดีไฮด์-3-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส, กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัส 3-ฟอสฟอกลีเซอเรตไคเนส, กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสไพรูเวตคาร์บอกซิเลส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสไทรโอสฟอสเฟต ไอโซเมอเรส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสตัวควบคุมการถอดรหัส LuxR, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวล รหัสตัวควบคุมการถอดรหัส LysR1, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสตัวควบคุมการถอดรหัส LysR2, กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสมาเลต-ควิโนนออกซิโดรีดัคเทส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัส กลูโคส-6-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส, กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัส 6-ฟอสฟอกลูโคเนตดีไฮโดรจีเนส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสทรานสคีโทเลส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสทรานสแอลไดเลส, กรด นิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสตัวขนส่งไลซีนออก, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสไบโอทินไลเกส, กรด นิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสอาร์จินิล-tRNA ซินธีเทส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสฟอสฟออีนอล ไพรูเวตคาร์บอกซิเลส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสฟรุคโทส-1,6-บิสฟอสฟาเทส, กรดนิวคลีอิคซึ่ง ประมวลรหัสโปรตีน OpcA, กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัส 1-ฟอสฟอฟรุคโทไคเนส และกรดนิวคลีอิคซึ่ง ประมวลรหัส 6-ฟอสฟอฟรุคโทไคเนส

40. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 39 ในที่ซึ่งจุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมซึ่งนอกจากนี้ยังมี แอคติวิตีที่เพิ่มขึ้นโดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ ของอย่างน้อยแอคติวิตีหนึ่งที่คัดเลือกจากกลุ่มของ แอคติวิตีแอสปาร์เตตไคเนส, แอคติวิตีแอสปาร์เตต-เซมิแอลดีไฮด์ดีไฮโดรจีเนส, แอคติวิตีไดอะมิโน พิมีเลตดีไอโดรจีเนส, แอคติวิตีไดอะมิโนพิมีเลตดีคาร์บอกซิเลส, แอคติวิตีไดไฮโดรพิโคลิเนต ซินธีเทส, แอคติวิตีไดไฮโดรไดพิโคลิเนตรีดัคเทส, แอคติวิตีกลีเซอรัลดีไฮด์-3-ฟอสเฟตดีไฮโดร จีเนส, แอคติวิตี 3-ฟอสฟอกลีเซอเรตไคเนส, แอคติวิตีไพรูเวตคาร์บอกซิเลส, แอคติวิตีไทรโอสฟอส เฟตไอโซเมอเรส, แอคติวิตีของตัวควบคุมการ LuxR, แอคติวิตีของตัวควบคุมการถอดรหัส LysR1, แอคติวิตีของตัวควบคุมการถอดรหัส LysR2, แอคติวิตีมาเลต-ควิโนนออกซิโดรีดักเทส, แอคติวิตีกลูโคส-6-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส, แอคติวิตี-6-ฟอสฟอกลูโคเนตดีไฮโดรจีเนส, แอคติวิตี ทรานสคีโทเลส, แอคติวิตีทรานสแอลโดเลส, แอคติวิตีตัวขนส่งไลซีนออก, แอคติวิตี อาร์จินิล-tRNA ซินธีเทส, แอคติวิตีฟอสฟออีนอลไพรูเวตคาร์บอกซิเลส, แอคติวิตีฟรุคโทส-1,6-บิสฟอสฟาเทส, แอคติวิตีโปรตีน OpcA, แอคติวิตี 1-ฟอสฟอฟรุคโทไคเนส, แอคติวิตี 6-ฟอสฟอ ฟรุคโทไคเนส และ แอคติวิตีไบโอทินไลเกส

41. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 39 หรือ 40 ในที่ซึ่งจุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมซึ่งนอกจากนี้ ยังมีแอคติวิตีที่ลดลงโดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ ของอย่างน้อยแอคติวิตีหนึ่งที่คัดเลือกจากกลุ่มของ แอคติวิตีธรีโอนีนดีไฮดราเทส, แอคติวิตีฮอมอเซรีน O-อะเซทิลทรานสเฟอเรส, แอคติวิตี O-อะเซทิล ฮอมอเซรีนซัลฟ์ไฮดริเลส, แอคติวิตีฟอสฟออีนอลไพรูเวตคาร์บอกซีไคเนส, แอคติวิตีไพรูเวตออกซิ เดส, แอคติวิตีฮอมอเซรีนไคเนส, แอคติวิตีฮอมอเซรีนดีไอโดรเจนีเนส, แอคติวิตีตัวขนส่งออกธรีโอนีนออก, แอคติวิตีโปรตีนการไหลออกธรีโอนีน, แอคติวิตีแอสปาราจิเนส, แอคติวิตีแอสปาร์เตตดีคาร์บอก ซิเลส และแอคติวิตีธรีโอนีนซินเธส

42. วิธีสำหรับการเตรียมเมไธโอนีนโดยการเลี้ยงจุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมตามข้อใด ข้อหนึ่งของข้อถือสิทธิที่ 24, 25, 31 หรือ 32 ในที่ซึ่งจีนได้ถูกคัดเลือกจากกลุ่มของกรดนิวคลีอิคซึ่ง ประมวลรหัสแอสปาร์เตตไคเนส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสแอสปาร์เตต-เซมิแอลดี ไฮด์ดีไฮโดร จีเนส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสฮอมอเซรีนดีไฮโดรจีเนส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสกลีเซอ รัลดีไฮด์-3-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส, กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัส 3-ฟอสฟอกลีเซอเรตไคเนส, กรด นิวคลีอิคที่ประมวลรหัสไพรูเวตคาร์บอกซิเลส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสไทรโอสฟอสเฟต ไอโซเมอเรส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสฮอมอเซรีน O-อะเซทิลทรานสเฟอเรส, กรดนิวคลีอิคซึ่ง ประมวลรหัสซิสตาไธโอนีนแกมมา-ซินเธส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสซิสตาไธโอนีนบีตา- ไลเอส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสเซรีนไฮดรอกซีเมธิลทรานสเฟอเรส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวล รหัส O-อะเซทิลฮอมอเซรีนซัลฟ์ไฮดริเลส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสเมธิลีนเททราไฮโดรฟอเลต รีดัคเทส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสฟอสฟอเซรีนอะมิโนทรานสเฟอเรส, กรดนิวคลีอิคซึ่ง ประมวลรหัสฟอสฟอเซรีนฟอสฟาเทส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสเซรีนอะเซทิลทรานสเฟอเรส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสซิสเตอีนซินเธส I, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสซิสเตอีนซินเธส II, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสเมไธโอนีนซินเธสชนิดที่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12, กรดนิวคลีอิคซึ่ง ประมวลรหัสเมไธโอนีนซินเธสชนิดที่ไม่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัส ซัลเฟตอะดีนิลิลทรานสเฟอเรส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสฟอสฟออะดีโนซีนฟอสโฟซัลเฟต รีดักเทส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสเฟอร์รีดอกซิน-ซัลโฟต์รีดัคเทส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวล รหัสเฟอร์รีดอกซิน NADPH-รีดักเทส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสแอคติวิตีเฟอร์รีดอกซิน, กรด นิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนเกี่ยวกับรีดักชันของซัลเฟต RXA077, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัส โปรตีนเกี่ยวกับรีดัคชันของซัลเฟต RXA248, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนเกี่ยวกับรีดัคชัน ของซัลเฟต RXA247, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสตัวควบคุม RXA0655 และกรดนิวคลีอิคซึ่ง ประมวลรหัสตัวควบคุม RXN2910

43. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 42 ในที่ซึ่งจุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมซึ่งนอกจากนี้ยังมี แอคติวิตีที่เพิ่มขึ้นโดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ ของอย่างน้อยแอคติวิตีหนึ่งที่คัดเลือกจากกลุ่มของ แอคติวิตีแอสปาร์เตตไคเนส, แอคติวิตีแอสปาร์เตต-เซมิแอลดีไฮด์ดีไฮโดรจีเนส, แอคติวิตีฮอมอเซรีน ดีไฮโดรจีเนส, แอคติวิตีกลีเซอรัลดีไฮด์-3-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส, แอคติวิตี 3-ฟอสฟอกลีเซอเรต ไคเนส, แอคติวิตีไพรูเวตคาร์บอกซิเลส, แอคติวิตีไทรโอสฟอสเฟตไอโซเมอเรส, แอคติวิตีฮอมอ เซรีน O-อะเซทิลทรานสเฟอเรส, แอคติวิตีซิสตาไธโอนีนแกมมา-ซินเธส, แอคติวิตีซิสตาไธโอนีน บีตา-ไลเอส, แอคติวิตีเซรีนไฮดรอกซีเมทิลทรานสเฟอเรส, แอคติวิตี O-อะเซทิลฮอมอเซรีนซัลฟ์ ไฮดริเลส, แอคติวิตีเมธิลีนเททรา ไฮโดรฟอเลตรีดักเทส, แอคติวิตีฟอสฟอเซรีนอะมิโนทราส เฟอเรส, แอคติวิตีฟอสฟอเซรีนฟอสฟาเทส, แอคติวิตีเซรีนอะซีทิลทรานสเฟอเรส, แอคติวิตีซิสเตอีน ซินเธส I, แอคติวิตีซิสเทอีนซินเธส II, แอคติวิตีเมธิโอนีนซินเธสชนิดที่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12, แอคติวิตีเมไธโอนีนซินเธสที่ไม่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12, แอคติวิตีซัลเฟตอะดีนิลิลทราน สเฟอเรส, แอคติวิตีฟอสฟออะดีไนซีน-ฟอสฟอซัลเฟตรีดักเทส, แอคติวิตีเฟอร์รีดอกซิน-ซัลไฟต์ รีดัคเทส, แอคติวิตีเฟอร์รีดอกซิน NADPH-รีดักเทส, แอคติวิตีเฟอร์รีดอกซิน, แอคติวิตีของโปรตีน เกี่ยวกับ รีดัคชันของซัลเฟต RXA077, แอคติวิตีของโปรตีนเกี่ยวกับรีดัคชันของซัลเฟต RXA248, แอคติวิตีของโปรตีนเกี่ยวกับรีดัคชันของซัลเฟต RXA247, แอคติวิตีของตัวควบคุม RXA655 และ แอคติวิตีของตัวควบคุม RXN2910

44. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 42 หรือ 43 ในที่ซึ่งจุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมซึ่งนอกจากนี้ ยังมีแอคติวิตีที่ลดลงโดยเปรียบเทียบกับไลด์ไทป์ ของอย่างน้อยแอคติวิตีหนึ่งที่คัดเลือกจากกลุ่มของ แอคติวิตีฮอมอเซรีนไคเนส, แอคติวิตีธรีโอนีนดีไฮดราเทส, แอคติวิตีธรีโอนีนซินเธส, แอคติวิตี เมโซไดอะมิโนพิมีเลต D-ดีไฮโดรจีเนส, แอคติวิตีฟอสฟออีนอลไพรูเวตคาร์บอกซีไคเนส, แอคติวิตี ไพรูเวตออกซิเดส, แอคติวิตีไดไฮโดรไดพิโคลิเนตซินเธส, แอคติวิตีไดไฮโดรไดพิโคลิเนตรีดัคเทส และแอคติวิตีไดอะมิโนพิโคลิเนตดีคาร์บอกซิเลส

45. วิธีสำหรับการเตรียมธรีโอนีน โดยการเพาะเลี้ยงจุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมตามข้อใดข้อ หนึ่งของข้อถือสิทธิที่ 24, 25, 31 หรือ 32 ในที่ซึ่งจีนได้ถูกคัดเลือกจากกลุ่มของกรดนิวคลีอิคซึ่ง ประมวลรหัสแอสปาร์เตตไคเนส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสแอสปาร์เตต-เซมิแอลดีไฮด์ดีไฮโดร จีเนส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสกลีเซอรัลดีไฮด์-3-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส, กรดนิวคลีอิคซึ่ง ประมวลรหัส 3-ฟอสฟอกลีเซอเรตไคเนส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสไพรูเวตคาร์บอกซิเลส, กรด นิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสไทรโอสฟอสเฟตไอโซเมอเรส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสฮอมอเซรีน ไคเนส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสธรีโอนีนซินเธส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสตัวพาขนส่ง ธรีโอนีนออก, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสกลูโคส-6-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส, กรดนิวคลีอิคซึ่ง ประมวลรหัสทานสแอลโดเลส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสทรานสคีโทเลส, กรดนิวคลีอิคซึ่ง ประมวลรหัสมาเลต-ควิโนนออกซิโดรีดัคเทส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัส 6-ฟอสฟอกลูโคเนต ดีไฮโดรจีเนส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสตัวขนส่งไลซีนออก, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัส ไบโอทินไลเกส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสฟอสฟออีนอลไพรูเวตคาร์บอกซิเลส, กรดนิวคลีอิคซึ่ง ประมวลรหัสโปรตีนการไหลออกของธรีโอนีน, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสฟรุคโทส-1,6-บิส ฟอสฟาเทส, กรดนิวคลีอิกซึ่งประมวลโปรตีน OpcA, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัส 1- ฟอสฟอฟรุคโทไคเนส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัส 6-ฟอสฟอฟรุคโทไคเนส และกรดนิวคลีอิคซึ่ง ประมวลรหัสฮอมอเซรีนดีไฮโดรจีเนส

46. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 45 ในที่ซึ่งจุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมซึ่งนอกจากนี้ยังมี แอคติวิตีที่เพิ่มขึ้นโดยเปรีบบเทียบกับไวลด์ไทป์ ของอย่างน้อยแอคติวิตีหนึ่งที่ตคัดเลือกจากกลุ่มของ แอคติวิตีแอสปาร์เตตไคเนส, แอคติวิตีแอสปาร์เตต-เซมิแอลดีไฮดีไฮโดรจีเนส, แอคติวิตีกลีเซอรัล ดีไฮด์-3-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส, แอคติวิตี 3-ฟอสฟอกลีเซอเรตไคเนส, แอคติวิตีไพรูเวต คาร์บอกซิเลส, แอคติวิตีไทรโอสฟอสเฟตไอโซเมอเรส, แอคติวิตีธรีโอนีนซินเธส, แอคติวิตีของตัว พาขนส่งธรีโอนีนออก, แอคติวิตีทรานสแอลโดเลส, แอคติวิตีทรานสคีโทเลส, แอคติวิตีกลูโคส-6- ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส, แอคติวิตีมาเลต-ควิโนนออกซิโดรีดัคเทส, แอคติวิตีฮอมอเซรีนไคเนส, แอคติ วิตีไบโอทินไลเกส, แอคติวิตีฟอสฟออีนอลไพรูเวตคาร์บอกซิเลส, แอคติวิตีโปรตีนการไหลออกของ ธรีโอนีน, แอคติวิตีโปรตีน OpcA แอคติวิตี 1-ฟอสฟอฟรุคโทไคเนส, แอคติวิตี 6-ฟอสฟอฟรุคโท ไคเนส, แอคติวิตีฟรุคโทส-1,6- บิสฟอสฟาเทส, แอคติวิตี 6-ฟอสฟอกลูโคเนตดีไฮโดรจีเนส และ แอคติวิตีฮอมอเซรีนดีไฮโดรจีเนส

47. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 45 หรือ 46 ในที่ซึ่งจุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมซึ่งนอกจากนี้ ยังมีแอคติวิตีที่ลดลงโดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ ของอย่างน้อยแอคติวิตีหนึ่งที่คัดเลือกจากกลุ่มของ แอคติวิตีธรีโอนีนดีไฮดราเทส, แอคติวิตีฮอมอเซรีน O-อะเซทิลทรานสเฟอเรส, แอคติวิตีเซรีน ไฮดรอกซีเมธิลทรานสเฟอเรส, แอคติวิตี O-อะเซทิลฮอมอเซรีนซัลฟ์ไฮดริเลส, แอคติวิตีเมโซ- ไดอะมิโนพิมีเลต D-ดีไฮโดรจีเนส, แอคติวิตีฟอสฟออีนอลไพรูเวตคาร์บอกซีไคเนส, แอคติวิตี ไพรูเวตออกซิเดส, แอคติวิตีไดไฮโดรไดพิโคลิเนตซินเธส, แอคติวิตีไดไฮโดรไดพิโคลิเนตรีดัคเทส, แอคติวิตีแอสปาราจิเนส, แอคติวิตีแอสปาร์เตตดีคาร์บอกซิเลส, แอคติวิตีตัวขนส่งไลซีนออก, แอคติวิตีอะซีโตแลคเทตซินเธส, แอคติวิตีคีทอล-แอซิดรีดัคไทโอไซเมอเรส, แอคติวิตีอะมิโน ทรานสเฟอเรสสายกิ่งก้าน, แอคติวิตีเมไธโอนีนซินเธสชนิดที่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12, แอคติวิตี เมไธโอนีนซินเธสชนิดที่ไม่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12, แอคติวิตีไดไฮดรอกซี-แอซิดดีไฮดราเทส และ แอคติวิตีไดอะมิโนพิโคเนตดีคาร์บอกซิเลส

48. วิธีตามข้อใดข้อหนึ่งของข้อถือสิทธิที่ 38 ถึง 47 ในที่ซึ่งผลิตภัณฑ์ชีวสังเคราะห์ได้ถูก แยก และที่ซึ่งเหมาะสม ได้ถูกทำให้บริสุทธิ์จากตัวกลางเลี้ยงหลัง และ/หรือ ระหว่างขั้นตอนการเลี้ยง

49. การใช้ลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ ID NO: 21 เป็นตำแหน่งจับเกาะสำหรับไรโบโซมใน หน่วยการแสดงออกซึ่งทำให้จีนสามารถถูกแสดงออกได้ในแบคทีเรียของสกุล Corynebacterium หรือ Brevibacterium

50. การใช้ลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ ID NO: 19 หรือ 20 เป็นบริเวณ -10 ในหน่วยการแสดง ออกซึ่งทำให้จีนสามารถถูกแสดงออกได้ในแบคทีเรียของสกุล Corynebacterium หรือ Brevibacterium

51. หน่วยการแสดงออกซึ่งทำให้จีนสามารถถูกแสดงออกได้ในแบคทีเรียของสกุล Corynebacterium หรือ Brevibacterium ซึ่งประกอบรวมด้วยลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ ID NO: 21

52. หน่วยการแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 51 ในที่ซึ่งลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ ID NO: 21 ได้ถูกใช้เป็นตำแหน่งจับเกาะสำหรับไรโบโซม

53. หน่วยการแสดงออกซึ่งทำให้จีนสามารถถูกแสดงออกได้ในแบคทีเรียของสกุล Corynebacterium หรือ Brevibacterium ซึ่งประกอบรวมด้วยลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ ID NO: 19 หรือ 20

54. หน่วยการแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 53 ในที่ซึ่งลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ ID NO: 19 หรือ 20 ที่นิยมได้ถูกใช้เป็นบริเวณ -10