TH75294A - หน่วยแสดงออก p ef-tu - Google Patents

Abstract

DC60 (14/03/48) การประดิษฐ์นี้เกี่ยวข้องกับการใช้ลำดับกรดนิวคลีอิคสำหรับการควบคุมการถอดรหัสและการ แสดงออกของจีน โปรโมเตอร์และหน่วยแสดงออกชนิ ดใหม่โดยตัวมันเอง วิธีสำหรับแปรเปลี่ยน หรือก่ออัตราการถอดรหัสและ /หรือ อัตราการแสดงออกของจีน แคสเสทแสดงออกซึ่งประกอบรวม ด้วยจุลินทรี ย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมที่มีการแปรเปลี่ยนหรือก่ออั ตราการถอดรหัส และ/ หรืออัตราการแสดงออก และวิธีสำหรับเตรียมผ ลิตภัณฑ์การสังเคราะห์ทางชีวภาพโดยการเพาะเลี้ยง จุลินทรีย์ที่ไ ด้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรม การประดิษฐ์นี้เกี่ยวข้องกับการใช้ลำดับกรดนิวคลีอิคสำหรับการควบคุมการถอดรหัสและการ แสดงออกของจีน โปรโมเตอร์และหน่วยแสดงออกชนิ ดใหม่ตัวมันเอง วิธีสำหรับแปรเปลี่ยน หรือก่ออัตราการถอดรหัสและ /หรือ อัตราการแสดงออกของจีน แคสเสทแสดงออกซึ่งประกอบรวม ด้วยจุลินทรี ย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมที่มีการแปรเปลี่ยนหรือก่ออั ตราการถอดรหัส และ/ หรืออัตราการแสดงออก และวิธีสำหรับเตรียมผ ลิตภัณฑ์การสังเคราะห์ทางชีวภาพโดยการเพาะเลี้ยง จุลินทรีย์ที่ไ ด้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรม

Claims (54)

1. การใช้กรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตี ซึ่งประกอบรวมด้วย A) ลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ. ID. NO. 1 หรือ B) ลำดับที่อนุพัทธ์จากลำดับนี้โดยการแทนที่การสอดใส่หรือการตั ดออกของ นิวคลีโอไทด์และมีความเหมือนของอย่างน้อย 90% ที่ระดับ กรดนิวคลีอิคกับลำดับ SEQ. ID. NO. 1 หรือ C) ลำดับกรดนิวคลีอิคที่ไฮบริไดซ์กับลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ. ID . NO. 1 ภายใต้ภาวะ เข้มงวด หรือ D) ชิ้นส่วนที่เทียบเท่าทางฟังค์ชันนอลของลำดับของ A), B) หรือ C) สำหรับการถอดรหัสจีน

2. การใช้หน่วยแสดงออกซึ่งประกอบรวมด้วยกรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเ ตอร์แอคติวิตีตาม ข้อถือสิทธิที่ 1 และเพิ่มเติมด้วยลำดับกรดนิว คลีอิคที่เชื่อมในลักษณะทำงานได้เพื่อให้มั่นใจการ แปลรหัสของไรโบ นิวคลีอิคแอซิดสำหรับการแสดงออกของจีน

3. การใช้ตามข้อถือสิทธิท ี่ 2 โดยที่หน่วยแสดงออกประกอบรวมด้วย: E) ลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ. ID. NO. 2 หรือ F) ลำดับที่อนุพัทธ์จากลำดับนี้ โดยการแทนที่การสอดใส่หรือการตัดออ กของ นิวคลีโอไทด์และมีความเหมือนของอย่างน้อย 90% ที่ระดับกรด นิวคลีอิคกับลำดับ SEQ. ID. NO. 2 หรือ G) ลำดับกรดนิวคลีอิคที่ไฮบริไดซ์กับลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ. ID. NO. 2 ภาวะใต้ภาวะ เข้มงวด หรือ H) ชิ้นส่วนที่เทียบเท่าทางฟังค์ชันนอลของลำดับของ E), F) หรือ G)

4. การใช้ตามข้อถือสิทธิที่ 3 โดยที่หน่วยแสดงออกประกอบด้วยกรด นิวคลีอิคของลำดับ SEQ. ID. NO. 2

5. กรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตี ซึ่งประกอบรวมด้วย A) ลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ. ID. NO. 1 หรือ B) ลำดับที่อนุพัทธ์จากลำดับนี้โดยการแทนที่การสอดใส่หรือการตั ดออกของ นิวคลีโอไทด์และมีความเหมือนของอย่างน้อย 90% ที่ระดั บกรดนิวคลีอิคกับลำดับ SEQ. ID. NO. 1 หรือ C) ลำดับกรดนิวคลีอิคที่ไฮบริไดซ์กับลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ. ID. NO. 1 ภายใต้ภาวะ เข้มงวด หรือ D) ชิ้นส่วนที่เทียบเท่าทางฟังค์ชันนอลของลำดับขอ A), B) หรือ C ) โดยมีข้อแม้ว่าไม่รวมกรดนิวคลีอิคที่มีลำดับ SEQ. ID. NO. 1

6. หน่วยแสดงออกซึ่งประกอบรวมด้วยกรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แ อคติวิตีตาม ข้อถือสิทธิที่ 5 และเพิ่มเติมด้วยลำดับกรดนิวคลีอิค ที่เชื่อมในลักษณะทำงานได้เพื่อให้มั่นใจการ แปลรหัสของไรโบนิวค ลีอิคแอซิด

7. หน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 6 ซึ่งประกอบรวมด้วย E) ลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ. ID. NO. 2 หรือ F) ลำดับอนุพัทธ์จากลำดับนี้โดยการแทนที่การสอดใส่หรือการตัดออ กของ นิวคลีไอไทด์และมีความเหมือนของอย่างน้อย 90% ที่ระดับกรดน ิวคลีอิคกับลำดับ SEQ. ID. NO. 2 หรือ G) ลำดับกรดนิวคลีอิคที่ไฮบริไดซ์กับลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ. ID. NO. 2 ภายใต้ภาวะ เข้มงวด หรือ H) ชิ้นส่วนที่เทียบเท่าทางฟังค์ชันนอลของลำดับของ E), F) หรือ G) โดยมีข้อแม้ว่าไม่รวมกรดนิวคลีอิคที่มีลำดับ SEQ. ID. NO. 2

8. วิธีสำหรับแปรเปลี่ยนหรือก่ออัตราการถอดรหัสของจีนในจุลินทรี ย์เมื่อเทียบกับ ไวลด์ไทพ์โดย a) แปรเปลี่ยนแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะในจุลินทรีย์ของกรดนิวคล ีอิคจากภายในของ การประดิษฐ์ที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข้อถือส ิทธิที่ 1 ที่ควบคุมการถอดรหัสของ จีนจากภายในเมื่อเทียบกับไวลด ์ไทพ์ หรือ b) ควบคุมการถอดรหัสของจีนในจุลินทรีย์โดยกรดนิวคลีอิคของการปร ะดิษฐ์ที่มี โปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือโดยกรดน ิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์ แอคติวิตีตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่มีการ แปรเปลี่ยนโปรโมเตอร์แอคติวิตีจำเพาะตามการ แสดงรายละเอียด a) โด ยที่จีนนั้นเฮเทอโรโลกัสในความสัมพันธ์ต่อกรดนิวคลีอิคที่ มีโปร โมเตอร์แอคติวิตี

9. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 8 โดยที่การควบคุมการถอดรหัสของจีนใน จุลินทรีย์โดยกรดนิวคลีอิค ที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข้อถือส ิทธิที่ 1 หรือโดยกรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีตาม ข้อถ ือสิทธิที่ 1 ที่มีการแปรเปลี่ยนโปรโมเตอร์แอคติวิตีจำเพาะตามก ารแสดงรายละเอียด a) นั้นได้โดย b1) ใส่กรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข้อถือสิทธิที่ 1 หนึ่งสายหรือมากกว่า เข้าไป ในกรณีที่เหมาะสมที่มีแอคติวิตีข องโปรโมเตอร์ที่จำเพาะที่ได้รับการแปร เปลี่ยนเข้าไปในจีโนมของจ ุลินทรีย์เพื่อว่าการถอดรหัสของจีนภายในหนึ่งตัวหรือ มากกว่าเกิ ดภายใต้การควบคุมของกรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีตาม ข้ อถือสิทธิที่ 1 ที่ให้เข้าไป ในกรณีที่เหมาะสมด้วยโปรโมเตอร์แอ คติวิตีจำเพาะที่มี การแปรเปลี่ยน หรือ b2) ใส่จีนหนึ่งตัวหรือมากกว่าเข้าไปในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อ ว่ากการถอดรหัสของจีนที่ใส่ เข้าไปหนึ่งตัวหรือมากกว่าเกิดภายใต ้การควบคุมของกรดนิวคลีอิคภายในที่มี โปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข้อ ถือสิทธิที่ 1 ในกรณีที่เหมาะสมด้วยแอคติวิตีของ โปรโมเตอร์ที่จ ำเพาะที่มีการแปรเปลี่ยน หรือ b3) ในส่วนสร้างกรดนิวคลีอิคหนึ่งสายหรือมากกว่าซึ่งประกอบรวมด ้วยกรดนิวคลีอิคที่ มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข้อถือสิทธิที่ 1 เ ข้าไป ในกรณีที่เหมาะสมที่มีแอคติวิตี ของโปรโมเตอร์จำเพาะที่มีก ารแปรเปลี่ยนและเชื่อมในลักษณะที่ทำงานได้กับกรด นิวคลีอิคหนึ่ง สายหรือมากกว่าที่จะถอดระหัสเข้าไปในจุลินทรีย์

10. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 8 หรือ 9 โดยที่การเพิ่มหรือก่ออัตร าการถอดรหัสของจีนใน จุลินทรีย์เมื่อเทียบกับไวลด์ไทพ์ ah) แอคติวิตีโปรโมเตอร์ที่จำเพาะในจุลินทรีย์ของกรดนิวคลีอิคจ ากภายในที่มี โปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือที่คว บคุมการถอดรหัสของจีนจากภาย ในได้รับการเพิ่มเมื่อเทียบกับไวลด์ ไทพ์ หรือ bh) การถอดรหัสของจีนในจุลินทรีย์ได้รับการควบคุมโดยกรดนิวคลีอ ิคที่มีโปรโมเตอร์ แอคติวิตีตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือโดยกรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีจำเพาะที่ ได้รับการเพิ่มตามการแส ดงรายละเอียด a) โดยที่จีนนั้นเฮเทอโรโลกัสในความ สัมพันธ์ต่อกร ดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตี

11. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 10 โดยที่การควบคุมการถอดรหัสของจีน ในจุลินทรีย์โดยกรด นิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข้อถือ สิทธิที่ 1 หรือโดยกรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตี ตามข้อ ถือสิทธิที่ 1 ที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีจำเพาะที่ได้รับการเพิ่ มตามการแสดงรายละเอียด a) นั้น ทำได้โดย bh1) ใส่กรดนิวคลีอิคหนึ่งสายหรือมากกว่าที่มีโปรโมเตอร์แอคติว ิตีตามข้อถือสิทธิที่ 1 ในกรณีที่เหมาะสมที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิ ตีที่ได้รับการเพิ่มเข้าไปในจีโนมของ จุลินทรีย์เพื่อว่าเกิดการ ถอดรหัสของจีนจากภายในหนึ่งตัวหรือมากกว่าภายใต้การ ควบคุมของกร ดนิวคลีอิคของการประดิษฐ์ที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข้อถือสิท ธิที่ 1 ที่ใส่เข้าไปในกรณีที่เหมาะสมด้วยโปรโมเตอร์แอคติวิตีจ ำเพาะที่ได้รับการเพิ่ม หรือ bh2) ใส่จีนหนึ่งตัวหรือมากกว่าเข้าไปในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่ อว่าเกิดการถอดรหัสของ จีนที่ใส่เข้าหนึ่งตัวหรือมากกว่าภายใต้ก ารควบคุมของกรดนิวคลีอิคจากภายในที่มี โปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข ้อถือสิทธิที่ 1 ในกรณีที่เหมาะสมที่มีโปรโมเตอร์ แอคติวิตีจำเพ าะที่เพิ่มขึ้น หรือ bh3) ใส่ส่วนสร้างกรดนิวคลีอิคหนึ่งตัวหรือมากกว่าซึ่งประกอบรวมด ้วยกรดนิวคลีอิคที่มี โปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข้อถือสิทธิที่ 1 ใ นกรณีที่เหมาะสมที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตี จำเพาะที่ได้รับการเพ ิ่มและเชื่อมในลักษณะที่ทำงานได้กับกรดนิวคลีอิคที่จะถอด รหัสหน ึ่งสายหรือมากกว่าเข้าไปในจุลินทรีย์

12. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 8 หรือ 9 โดยที่การลดอัตราการถอดรหั สของจีนในจุลินทรีย์เมื่อ เทียบกับไวลด์ไทพ์ ar) โปรโมเตอร์แอคติวิตีจำเพาะในจุลินทรีย์ของกรดนิวคลีอิคจากภ ายในที่มี โปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ควบคุมการ ถอดรหัสของจีนจากภายใน ลดลงเมื่อเทียบกับไวลด์ไทพ์ หรือ br) ใส่กรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีจำเพาะที่ลดลงอย่า งที่ไห้ไว้ในการแสดง รายละเอียด a) เข้าไปในจีโนมของจุลินทรีย์เ พื่อว่าการถอดรหัสของจีนจากภายใน เกิดภายใต้การควบคุมของกรดนิวค ลีอิคที่ใส่เข้าที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีที่ลดลง

13. วิธีสำหรับแปรเปลี่ยนหรือก่ออัตราการแสดงออกของจีนในจุลินท รีย์เมื่อเทียบกับ ไวลด์ไทพ์โดย c) แปรเปลี่ยนแอคติวิตีการแแสดงออกจำเพาะในจุลินทรีย์ของหน่วยแ สดงออก ตาม ข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่ควบคุมการแสดงออกของจีนจา กภายในเมื่อเทียบกับ ไวด์ไทพ์ หรือ d) ควบคุมการแสดงลักษณะของจีนในจุลินทรีย์โดยหน่วยแสดงออกตามข้ อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หรือโดยหน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ด้วยแอคติวิตีการแสดง ออกที่ได้รับการแปรเปลี่ยนอย่างที่ให้ไว้ในการแสดงรายละเอียด c) โดยที่จีนนั้น เฮเทอโรโลกัสในควา มสัมพันธ์กับหน่วยแสดงออก

14. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 13 โดยที่การควบคุมการแสดงออกของจีน ในจุลินทรีย์โดยหน่วย แสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หรือโด ยหน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิ 2 หรือ 3 ที่มีแอคติวิตี การแสดงออ กที่ได้รับการแปรเปลี่ยนตามการแสดงรายละเอียด a) ทำได้โดย d1) ใส่หน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หนึ่งหน่วยหรือ มากกว่าเข้าไป ในกรณี ที่เหมาะสมที่มีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะ ที่ได้รับการแปรเปลี่ยนเข้าไปในจีโนม ของจุลินทรีย์เพื่อว่การแส ดงออกของจีนที่ใส่เข้าไปหนึ่งตัวหรือมากกว่าเกิดภายใต้ การควบคุมของหน่วยแสดงออกที่ให้เข้าไป หรือ d2) ใส่จีนหนึ่งตัวหรือมากกว่าเข้าไปในจีโนมของจุลินทร์เพื่อว่ าการแแสดงออกของจีนที่ใส่ เข้าไปหนึ่งตัวหรือมากกว่าเกิดภายใต้ก ารควบคุมของหน่วยการแสดงออกภายใน ตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ใน กรณีที่เหมาะสมด้วยแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่มี การแปรเปลี่ย น หรือ d3) ใส่ส่วนสร้างกรดนิวคลีอิคซึ่งประกอบรวมด้วยหน่วยแสดงออกตามข้อถ ือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ในกรณีที่เหมาะสมที่มีแคติวิตีจำเพาะที่ไ ด้รับการแปรเปลี่ยนและเชื่อมใน ลักษณะที่ทำงานได้กับกรดนิวคลีอิค หนึ่งสายหรือมากกว่าที่จะแสดงออก เข้าไปใน จุลินทรีย์

15. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 13 หรือ 14 โดยที่การเพิ่มหรือการก่ ออัตราการแสดงออกของจีนใน จุลินทรีย์เมื่อเทียบกับไวลด์ไทพ์ ch) เพิ่มแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะในจุลินทรีย์ของหน่วยแสดงออ กภายในตาม ข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่ควบคุมการแสดงออกของจีนจา กภายในเมื่อเทียบกับ ไวลด์ไทพ์ หรือ dh) ควบคุมการแสดงออกของจีนในจุลินทรีย์โดยหน่วยแสดงออกตามข้อถ ือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หรือโดยหน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 ห รือ 3 ที่มีแอคติวิตีการแสดง ออกจำเพาะที่ได้รับการเพิ่มอย่างที่ให้ไว้ในการแสดงรายละเอียด a) โดยที่จีนนั้น เฮเทอโรโลกัสเมื่อ เทียบกับหน่วยแสดงออก

16. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 15 โดยที่การควบคุมการแสดงออกของจี นในจุลินทรีย์โดยหน่วย แสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หรือโ ดยหน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่มีแอคติวิตี การแส ดงออกจำเพาะที่ได้รับการเพิ่มขึ้นตามการแสดงรายละเอียด a) นั้น ทำได้โดย dh1) ใส่หน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หนึ่งอันหรือม ากกว่าในกรณีที่ เหมาะสมที่มีแอคติวิตีการแแสดงออกจำเพาะที่ได้รั บการเพิ่มเข้าไปในจีโนมของ จุลินทรีย์เพื่อว่าการแสดงออกของจีนจ ากภายในหนึ่งตัวหรือมากกว่เกิดภายใต้การ ควบคุมของหน่วยแสดงลักษ ณะที่ให้เข้าไป ในกรณีที่เหมาะสมที่มีแอคติวิตีการ แสดงออกจำเพา ะที่ได้รับการเพิ่ม หรือ dh2) ใส่จีนหนึ่งตัวหรือมากกว่าเข้าไปในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่ อว่าเกิดการแสดงออกของ จีนที่ใส่เข้าหนึ่งตัวหรือมากว่าภายใต้กา รควบคุมของหน่วยแสดงออกภายในตาม ข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ในกรณี ที่เหมาะสมที่มีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่เพิ่ม ขึ้น หรือ dh3) ใส่ส่วนสร้างกรดนิวคลีอิคหนึ่งตัวหรือมากกว่าซึ่งประกอบรว มด้วยหน่วยแสดงออก ตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ในกรณีที่เหมาะส มที่มีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่ได้ รับการเพิ่มและเชื่อมในลั กษณะที่ทำงานได้กับกรดนิวคลีอิคที่จะแสดงออกหนึ่งสาย หรือมากกว่ าเข้าไปในจุลินทรีย์

17. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 13 หรือ 14 โดยที่การลดอัตราการแสดงอ อกของจีนในจุลินทรีย์เมื่อ เทียบกับไวลด์ไทพ์ cr) ลดแอดติวิตีการแสดงออกจำเพาะในจุลินทรีย์ของหน่วยแสดงออกภายในตาม ข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่ควบคุมการแสดงออกของจีนจากภายในเมื่อเทียบกับ ไวลด์ไทพ์ หรือ dr) ใส่หน่วยแสดงออกที่มีแอดติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่ลดลงอย่างที่ให้ไว้ในการ แสดงรายละเอียด cr) เข้าไปในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการแสดงออกของจีนจาก ภายในเกิดภายใต้การควบคุมของหน่วยแสดงออกที่ใส่เข้าที่มีแอดติวิตีการแสดงออก ที่ลดลง

18. วิธีตามข้อถือสิทธิข้อใดข้อหนึ่งของข้อถือสิทธิที่ 8 ถึง 17 โดยที่จีนนั้นได้รับการเลือก จากกลุ่มของกรดนิวคลีอิคที่ประมวล รหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของกรดอะมิโนที่ มาจากโ ปรตีนและที่ไม่ได้มาจากโปรตีน กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีน จากวิถีการสังเคราะห์ ทางชีวภาพของนิวคลีโอไทด์และนิวคลีโอไซด์ กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการ สังเคราะห์ทางชีวภาพ ของกรดอินทรีย์ กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสังเ คราะห์ทาง ชีวภาพของลิปิดและกรดไขมัน กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัส โปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพ ของไดออล กรดนิวคลีอิคที่ป ระมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของคาร์โบไฮเดรท ก รดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของสารประกอบอะโรมาติค กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีทางการสังเคราะห์ทางชีวภาพของไวตามิน กรดนิวคลีอิคที่ ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีกา รสังเคราะห์ทางชีวภาพของโคแฟคเตอร์และกรดนิวคลีอิคท ี่ประมวล รหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของเอนไซม์โดย ที่จีนอาจเลือกประกอบรวมด้วยหน่วย ควบคุมเพิ่มเติม

19. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 18 โดยที่โปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ ทางชีวภาพของกรดอะมิโน ได้รับการเลือกจากกลุ่มของแอสปาร์เตทไคเน ส แอสปาร์เตท-เซมิแอลดีไฮด์ดีไฮโดรจีเนส ไดอะมิโนไพมีเลทดีไฮโด รจีเนส ไดอะมิโนไพมีเลทดีคาร์บอกซิเลส ไดไฮโดรไดพิโคลิเนทซินธี เทส ไดไฮโรไดพิโคลิเนทรีดักเทส กลีเซอรัลดีไฮด์-3- ฟอสเฟตดีไฮ โดรจีเนส 3- ฟอสโฟกลีเซอเรทไคเนส ไพรูเวทคาร์บอกซิเลส โทรโอสฟอส เฟตไอโวเมอเรส หน่วยควบคุมการถอดรหัส LuxR หน่วย ควบคุมการถอดรห ัส LysR1 หน่วยควบคุมการถอดรหัส LysR2 มาเลท-ควิโนนออกซิโดรีด ักเทส กลูโลส -6- ฟอสเฟตดีไฮโดรจีนเนส 6- ฟอสโฟกลูโคเนทดีไฮโดรจ ีเนส ทรานสคีโตเลส ทรานสแอลโดแลส โฮโมซีรีน O-แอเซทิลทรานสเฟอเ รส ซิสตาไธโอนีนแกมมา-ซินเธส ซิสตาไธโอนีนบีตา-ไลเอส ซีรีนไฮโ รอกซีเมธิลทรานสเฟอเรส O-แอเซทิลโฮโมซีรีน ซัลฟ์ไฮดริเลส เมธิลี นเททราไฮโดรโฟเลทรีดักเทส ฟอสโฟซีรีนอะมิโนทรานสเฟอเรส ฟอสโฟซี รีนฟอสฟาเทส ซีรีนแอเซทิลทรานสเฟอเรส โฮโมซีรีนดีไฮโดรจีเนส โฮโ มซีรีนไคเนส ธรีโอนีนซินเธส ตัวพา สำหรับการขนส่งธรีโอนีน ธรีโอ นีนดีไฮดราเทส ไพรูเวทออกซิเดส ตัวขนส่งไลซีน ไบโอตินไลเกส ซิส เตอีนซินเธส I ซิสเตอีนซินเธส II เมธิโอนีนซินเธสที่ขึ้นกับโคเ อนไซม์ B12 เมธิโอนีนซินเธสที่ไม่ ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12 หน่วยย่ อย 1 และ 2 ของซัลเฟตอะดีนิลอัลทรานสเฟอเรส ฟอสโฟอะดีโนซีน-ฟอ สโฟซัลเฟตรีดักเทส เฟอร์รีดอกซิน-ซัลโฟท์รีดักเทส เฟอร์รีดอกซ ิน NADP รีดักเทส 3-ฟอสโฟกลีเซอเรทดีไฮโดรจีเนส ตัวควบคุม RX A00655 ตัวควบคุม RXN2910 อาร์จีนิล- tRNA ซินเธส ฟอสโฟอีนอลไพ รูเวทคาร์บอกซิเลส โปรตีนเอฟฟลักซ์ของธรีโอนีน ซีรีนไฮดรอกซีเม ธิลทรานสเฟอเรส ฟรุคโตส-1,6-บิสฟอสฟาเทส โปรตีนของการรีดิวซ์ซัลเ ฟต RXA077 โปรตีนของการรีดิวซ์ซัลเฟต RXA248 โปรตีนของการรีดิวซ์ซัล เฟต RXA247 โปรตีน OpcA 1- ฟอสโฟฟรุคโตไคเนส และ 6-ฟอสโฟฟรุคโ คโคเนส

20. แคสเสทแสดงออกซึ่งประกอบรวมด้วย a) อย่างน้อยหน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หนึ่งอัน และ b) อย่างน้อยกรดนิวคลีอิคเพิ่มเติมหนึ่งอันที่จะถูกแสดงออก และ c) ในกรณีที่เหมาะสมหน่วยควบคุมทางพันธุกรรมเพิ่มเติม โดยที่อย่างน้อยหน่วยแสดงออกหนึ่งอันและลำดับกรดนิวคลีอิคต่อไป ที่จะแสดงออกนั้น เชื่อมในลักษณะที่ทำงานได้ต่อกันและนอกจากนี้ล ำดับกรดนิวคลีอิคที่จะแสดงออกนั้นเฮเทอโรโลกัส ในความสัมพันธ์ต่อห น่วยแสดงออก

21. แคสเสทแสดงออกลักษณะตามข้อถือสิทธิที่ 20 โดยที่ลำดับกรดนิว คลีอิคเพิ่มเติมที่จะ แสดงออกนั้นเลือกจากกลุ่มที่ของกรดนิวคลีอิ คที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทาง ชีวิภาพของกรดอะมิ โนที่มาจากโปรตีนและที่ไม่ได้มาจากโปรตีน กรดนิวคลีอิคที่ประม วลรหัส โปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของนิวคลีโอไทด์และน ิวคลีโอไซด์ กรดนิวคลีอิคที่ประมวล รหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคร าะห์ทางชีวภาพของกรดอินทรีย์ กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีน จ ากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของลิปิดและกรดไขมัน กรดนิวคลีอิค ที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถี การสังเคราะห์ทางชีวภาพของไดออล กรด นิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทาง ชีวภาพของ คาร์โบไฮเดรท กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคร าะห์ทางชีวภาพของ สารประกอบอะโรมาติค กรดนิวคลิอิคที่ประมวลรหัสโป รตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของ ไวตามิน กรดนิวคลีอิคที่ป ระมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของโคแฟคเตอร์แล ะ กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภา พของเอนไซม์

22. แคสเสทแสดงออกลักษณะตามข้อถือสิทธิที่ 21 โดยที่โปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทาง ชีวภาพของกรดอะมิโนนั้นเลือกจากกลุ่มของแอสปาร์เตทไรเนส แอสปาร์เตท-เซมิแอลดีไฮด์ ดีไฮโดรจีเนส ไดอะมิโนไพมีเลทดีไฮโดรจีเนส ไดอะมิโนไพมีเลทดีคาร์บอกซิเลส ไดไฮโดรไดพิโคลิเนทซินธีเทส ไดไฮโดรไดพิโคลิเนทรีดักเทส กลีเซอรัลดีไฮด์-3-ฟอสเฟต ดีไฮโดรจีเนส 3-ฟอสโฟกลีเซอเรทไคเนส ไพรูเวทคาร์บอกซิเลส ไทรโอสฟอสเฟตไอโซเมอเรส หน่วยควบคุมการถอดรหัส LuxR หน่วยควบคุมการถอดรหัส LysR1 หน่วยควบคุมการถอดรหัส LysR2 มาเลท-ควิโนนออกซิโดรีดักเทส กลูโคส-6-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส 6-ฟอสโฟกลูโคเนท ดีไฮโดรจีเนส ทรานสคีโตเลส ทรานสแอลโดเลส โฮโมซีรีน O-แอเซทิลทรานสเฟอเรส ซิสตาไธโอนีนแกมมา-ซินเธส ซิสตาไธโอนีนบีตา-ไลเอส ซีรีนไฮดรอกซีเมธิลทรานสเฟอเรส O-แอเซทิลโฮโมซีรีน ซัลฟ์ไฮดริเลส เมธิลีนเททราไฮโดรโฟเลทรีดักเทส ฟอสโฟซีรีนอะมิโน ทรานสเฟอเรส ฟอสโฟซีรีนฟอสฟาเทส ซีรีนแอเซทิลทรานสเฟอเรส โฮโมซีรีนดีไฮโดรจีเนส โฮโมซีรีนไคเนส ธรีโอนีนซินเทธ ตัวพาสำหรับการขนส่งธรีโอนีน ธรีโอนีนดีไฮดราเทส ไพรูเวทออกซิเดส ตัวขนส่งไลซีน ไบโอตินไลเกส ซิสเตอีนซินเธส I ซิสเตอีนซินเธส II เมธิโอนีน ซินเธสที่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12 เมธิโอนีนซินเธสที่ไม่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12 หน่วยย่อย 1 และ 2 ของ ซัลเฟตอะดีนิลอิลทรานสเฟอเรส ฟอสโฟอะดีโนซีน-ฟอสโฟซัลเฟตรีดักเทส เฟอร์รีดอกซิน-ซัลไฟท์ รีดักเทส เฟอร์รีดอกซิน NADP รีดักเทส 3-ฟอสโฟกลีเซอเรทดีไฮโดรจีเนส ตัวควบคุม RXA00655 ตัวควบคุม RXN2910 อาร์จีนิล-tRNA ซินเธส ฟอสโฟอีนิลไพรูเวทคาร์บอกซิเลส โปรตีนเอฟฟลักซ์ ของธรีโอนีน ซีรีนไฮดรอกซีเมธิลทรานสเฟอเรส ฟรุคโตส-1,6-บิสฟอสเฟสเทส โปรตีนของการรีดิวซ์ ซัลเฟต RXA077 โปรตีนของการรีดิวซ์ซัลเฟต RXA248 โปรตีนของการรีดิวซ์ซัลเฟต RXA247 โปรตีน OpcA 1-ฟอสโฟฟรุคโตไคเนส และ 6-ฟอสโฟฟรุคโตไคเนส

23. เวกเตอร์แสดงออกซึ่งประกอบรวมด้วยแคสเสทแสดงออกตามข้อถือสิท ธิข้อใดข้อหนึ่ง ของข้อถือสิทธิที่ 20 ถึง 22

24. จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมโดยที่การดัดแปลงท างพันธุกรรมนำไปสู่การ แปรเปลี่ยนหรือก่ออัตราการถอดรหัสของอย่า งน้อยหนึ่งจีนเมื่อเทียบกับไวลด์ไทพ์และโดยขึ้นกับ a) แปรเปลี่ยนแอตติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะในจุลินทรีย์ของกรดนิวคลีอิคจากภายในที่มี โปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ควบคุมการถอดรหัสของจีนจากภายใน อย่างน้อยหนึ่งตัว หรือ b) ควบคุมการถอดรหัสของจีนในจุลินทรีย์โดยกรดนิวคลีอิคตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่มี โปรโมเตอร์แอคติวิตีหรือโดยกรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข้อถือสิทธิ ที่ 1 ที่ได้รับการแปรเปลี่ยนไปอย่างที่ให้ไว้ในการแสดงรายละเอียด a) โดยที่จีนนั้น เฮเทอโรโลกัสในความสัมพันธ์ต่อกรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตี

25. จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 24 โดยที่การควบคุมการ ถอดรหัสของจีนในจุลินทรีย์โดยกรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือโดย กรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีที่แปรเปลี่ยนไป ตามการแสดงรายละเอียด a) นั้นทำได้โดย b1) ใส่กรดนิวคลีอิคของการประดิษฐ์นี้ที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีหนึ่งสายหรือมากกว่า ตามข้อถือสิทธิที่ 1 เข้าไป ในกรณีที่เหมาะสมที่มีแอคติวิตีของโปรโมเตอร์ที่ จำเพาะที่ได้รับการแปรเปลี่ยนเข้าไปในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการถอดรหัสของ จีนภายในหนึ่งตัวหรือมากกว่าเกิดภายใต้การควบคุมของกรดนิวคลีอิคที่มี โปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข้อถือสิทธิที่ 1 ในกรณีที่เหมาะสมด้วยแอคติวิตีของ โปรโมเตอร์ที่จำเพาะที่มีการแปรเปลี่ยน หรือ b2) ใส่จีนหนึ่งตัวหรือมากกว่าเข้าในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการถอดรหัสของจีนที่ ใส่เข้าไปหนึ่งตัวหรือมากกว่าเกิดภายใต้การควบคุมของกรดนิวคลีอิคภายในที่มี โปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข้อถือสิทธิที่ 1 ในกรณีที่เหมาะสมด้วยแอคติวิตีของ โปรโมเตอร์ที่จำเพาะที่มีการแปรเปลี่ยน หรือ b3) ใส่ส่วนสร้างกรดนิวคลีอิคซึ่งประกอบรวมด้วยกรดนิวคลีอิคตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีหนึ่งสายหรือมากกว่าเข้าไป ในกรณีที่เหมาะสมที่มีแอคติวิตี ของโปรโมเตอร์ที่จำเพาะที่มีการแปรเปลี่ยนและเชื่อมในลักษณะที่ทำงานได้กับ กรดนิวคลีอิคหนึ่งสายหรือมากกว่าที่จะถอดรหัสเข้าไปในจุลินทรีย์

26. จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 24 หรือ 25 ที่มีอัตราการ ถอดรหัสที่เพิ่มขึ้นหรือก่ออัตราการถอดรหัสของอย่างน้อยหนึ่งจีนเมื่อเทียบกับไวลด์ไทพ์โดยที่ ah) แอคติวิตีโปรโมเตอร์ที่จำเพาะในจุลินทรีย์ของกรดนิวคลีอิคจากภายในที่มี โปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ควบคุมการถอดรหัสของจีนจากภายในได้ รับการเพิ่มเมื่อเทียบกับไวลด์ไทพ์ หรือ bh) การถอดรหัสของจีนในจุลินทรีย์ได้รับการควบคุมโดยกรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์ แอคติวิตีตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือโดยกรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีจำเพาะที่ ได้รับการเพิ่มตามการแสดงรายละเอียด ah) โดยที่จีนนั้นเฮเทอโรโลกัสในความ สัมพันธ์ต่อกรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตี

27. จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 26 โดยที่การควบคุมการ ถอดรหัสในจุลินทรีย์โดยกรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือโดยกรด นิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีจำเพาะที่ได้รับการเพิ่ม ตามการแสดงรายละเอียด a) นั้นทำได้โดย bh1) ใส่กรดนิวคลีอิคหนึ่งสายหรือมากกว่าที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข้อถือสิทธิที่ 1 ในกรณีที่เหมาะสมที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีที่ได้รับการเพิ่มเข้าไปในจีโนมของ จุลินทรีย์เพื่อว่าเกิดการถอดรหัสของจีนจากภายในหนึ่งตัวหรือมากกว่าภายใต้การ ควบคุมของกรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตี ที่ใส่เข้าไปในกรณีที่เหมาะสม ด้วยโปรโมเตอร์แอคติวิตีจำเพาะที่ได้รับการเพิ่ม หรือ bh2) ใส่จีนหนึ่งตัวหรือมากกว่าเข้าไปในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าเกิดการถอดรหัสของ จีนที่ใส่เข้าหนึ่งตัวหรือมากกว่าภายใต้การควบคุมของกรดนิวคลีอิคจากภายในที่มี โปรโมเตอร์แอคติวิตี ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ในกรณีที่เหมาะสมที่มีโปรโมเตอร์ แอคติวิตีจำเพาะที่เพิ่มขึ้น หรือ bh3) ใส่ส่วนสร้างกรดนิวคลีอิคหนึ่งตัวหรือมากกว่าซึ่งประกอบรวมด้วยกรดนิวคลีอิคที่มี โปรโมเตอร์แอคติวิตี ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ในกรณีที่เหมาะสมที่มีโปรโมเตอร์ แอคติวิตีจำเพาะที่ได้รับการเพิ่มและเชื่อมในลักษณะที่ทำงานได้กับกรดนิวคลีอิคที่ จะถอดรหัสหนึ่งสายหรือมากกว่าเข้าไปในจุลินทรีย์

28. จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 24 หรือ 25 ที่มีอัตราการ ถอดรหัสลดลงของอย่างน้อยหนึ่งจีนในจุลินทรีย์เมื่อเทียบกับไวลด์ไทพ์ โดยที่ ar) โปรโมเตอร์แอคติวิตีจำเพาะในจุลินทรีย์ของกรดนิวคลีอิคจากภายในอย่างน้อยหนึ่ง สายที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตี ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ซึ่งควบคุมการถอดรหัสของจีนจาก ภายในลดลงเมื่อเทียบกับไวลด์ไทพ์ หรือ br) ใส่กรดนิวคลีอิคหนึ่งตัวหรือมากกว่าที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีจำเพาะที่ลดลงอย่างที่ ให้ไว้ในการแสดงรายละเอียด a) เข้าไปในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการถอดรหัส ของจีนจากภายในเกิดภายใต้การควบคุมของกรดนิวคลีอิคที่ใส่เข้าที่มีโปรโมเตอร์ แอคติวิตีที่ลดลง

29. จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรม โดยที่การดัดแปลงทางพันธุกรรมนำไปสู้ การแปรเปลี่ยนหรือก่ออัตราการแสดงออกของจีนอย่างน้อยหนึ่งตัวในจุลินทรีย์เมื่อเทียบกับ ไวลด์ไทพ์และขึ้นกับ c) แปรเปลี่ยนแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะในจุลินทรีย์ของหน่วยแสดงออกอย่างน้อย หนึ่งหน่วยตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่ควบคุมการแสดงออกของจีนจากภายในเมื่อ เทียบกับไวลด์ไทพ์ หรือ d) ควบคุมการแสดงออกลักษณะของจีนในจุลินทรีย์โดยหน่วยแสดงออกตาม ข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หรือโดยหน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ด้วย แอดติวิตีการแสดงออกที่ได้รับการแปรเปลี่ยนอย่างที่ให้ไว้ในการแสดงรายละเอียด a) โดยที่จีนนั้น เฮเทอโรโลกัสในความสัมพันธ์กับหน่วยแสดงออก

30. จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 29 โดยที่การควบคุมการ แสดงออกของจีนในจุลินทรีย์โดยหน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หรือโดยหน่วยแสดง ออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่มีแอดติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่ได้รับการแปรเปลี่ยนตามการ แสดงรายละเอียด a) ซึ่งทำได้โดย d1) ใส่หน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หนึ่งหน่วยหรือมากกว่าเข้าไป ในกรณี ที่เหมาะสมที่มีแอดติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่ได้รับการแปรเปลี่ยนเข้าไปใน ในกรณี ของจุลินทรีย์เพื่อว่าการแสดงออกของจีนที่ใส่เข้าไปหนึ่งตัวหรือมากกว่าเกิดภายใต้ การควบคุมของหน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ในกรณีที่เหมาะสมด้วย แอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่มีการแปรเปลี่ยน หรือ d2) ใส่จีนหนึ่งตัวหรือมากกว่าเข้าในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการแสดงออกของจีนที่ใส่ เข้าไปหนึ่งตัวหรือมากกว่าเกิดภายใต้การควบคุมของหน่วยการแสดงออกภายใน ตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ในกรณีที่เหมาะสมด้วยแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่มี การแปรเปลี่ยน หรือ d3) ใส่ส่วนสร้างกรดนิวคลีอิคซึ่งประกอบรวมด้วยหน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ในกรณีที่เหมาะสมที่มีแอคติวิตีจำเพาะที่ได้รับการแปรเปลี่ยนและเชื่อมใน ลักษณะที่ทำงานได้กับกรดนิวคลีอิคหนึ่งสายหรือมากกว่าที่จะแสดงออกเข้าไปใน จุลินทรีย์

31. จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 29 หรือ 30 ที่มีการเพิ่ม หรือก่ออัตราการถอดรหัสแสดงออกของจีนในจุลินทรีย์เมื่อเทียบกับไวลด์ไทพ์ โดยที่ ch) เพิ่มแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะในจุลินทรีย์ของหน่วยแสดงออกภายในตาม ข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่ควบคุมการแสดงออกของจีนจากภายในเมื่อเทียบกับ ไวลด์ไทพ์ หรือ ch) ควบคุมการแสดงออกของจีนในจุลินทรีย์โดยหน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หรือโดยหน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่มีแอดติวิตีการแสดง ไวลด์ไทพ์ หรือ dh) ควบคุมการแสดงออกของจีนในจุลินทรีย์โดยหน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หรือโดยหน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่มีแอคติวิตีการแสดง ออกจำเพาะที่ได้รับการเพิ่มอย่างที่ให้ไว้ในการแสดงรายละเอียด a) โดยที่จีนนั้น เฮเทอโรโลกัสเมื่อเทียบกับหน่วยแสดงออก

32. จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิท ี่ 31 โดยที่การควบคุมของ การแสดงออกของจีนในจุลินทรีย์โดยหน่วย แสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 โดยหน่วยแสดง ออกตามข้อถือสิ ทธิที่ 2 หรือ 3 ที่มีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่ได้รับการเพ ิ่มอย่างที่ให้ไว้ในการ แสดงรายละเอียด a) ทำได้โดย dh1) ใส่หน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หนึ่งอันหรือม ากกว่าในกรณีที่ เหมาะสมที่มีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่ได้รับกา รเพิ่มเข้าไปในจีโนมของ จุลินทรีย์เพื่อว่าการแสดงออกของจีนจากภ ายในหนึ่งตัวหรือมากกว่าเกิดภายใต้การ ควบคุมของหน่วยแสดงลักษณะ ตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่ให้เข้าไป ในกรณีที่ เหมาะสมที่มีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่ได้รับการเพิ่ม หรือ dh2) ใส่จีนหนึ่งตัวหรือมากกว่าเข้าไปในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อ ว่าเกิดการแสดงออกของ จีนที่ใส่เข้าหนึ่งตัวหรือมากกว่าภายใต้กา รควบคุมของหน่วยแสดงออกภายในตาม ข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ในกรณีที่เหมาะสมที่มีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่เพิ่ม ขึ้น หรือ dh3) ใส่ส่วนสร้างกรดนิวคลีอิคหนึ่งตัวหรือมากกว่าซึ่งประกอบรว มด้วยหน่วยแสดงออก ตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ในกรณีที่เหมาะส มที่มีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่ได้ รับการเพิ่มและเชื่อมในลัก ษณะที่ทำงานได้กับกรดนิวคลีอิคที่จะแสดงออกหนึ่งสาย หรือมากกว่า เข้าไปในจุลินทรีย์

33. จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิท ี่ 29 หรือ 30 ที่มีอัตราการ ถอดรหัสที่ลดลงของอย่างน้อยหนึ่งจีนเมื่อเทียบกับไวลด์ไทพ์โดยที่ cr) ลดแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะในจุลินทรีย์ของหน่วยแสดงออกภา ยในตาม ข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่ควบคุมการแสดงออกของจีนจากภา ยในอย่างน้อยหนึ่งตัว เมื่อเทียบกับไวลด์ไทพ์ หรือ dr) ใส่หน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่มีแอคติวิตี การแสดงออกจำเพาะที่ ลดลงเข้าไปในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการแส ดงออกของจีนอย่างน้อยหนึ่งตัวเกิด ภายใต้การควบคุมของหน่วยแสดงอ อกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่ใส่เข้าที่มี แอคติวิตีการแสดง ทออกที่ลดลง

34. จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมซึ่งประกอบรวมด้ วยหน่วยแสดงออกตาม ข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 และเชื่อมในลักษณะท ี่ทำงานได้กับจีนที่จะแสดงออกโดยที่จีนนั้น เฮเทอโรโลกัสในความ สัมพันธ์กับหน่วยแสดงออก

35. จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 34 ซึ่งประกอบรวมด้วย แคสเสทแสดงออกตามข้อถือสิทธิข้อใดข้อหนึ่ งของข้อ 20 ถึง 22

36. จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิข้อ ใดข้อหนึ่งของข้อ 24 ถึง 35 โดยที่จีนนั้นได้รับการเลือกจา กกลุ่มของกรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ ทาง ชีวภาพของกรดอะมิโนที่มาจากโปรตีนและที่ไม่ได้มาจากโปรตีน กรดน ิวคลีอิคที่ประมวลรหัส โปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของน ิวคลีโอไทด์หรือนิวคลีโอไซด์ กรดนิวคลีอิคที่ประมวล รหัสโปรตีนจ ากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของกรดอินทรีย์ กรดนิวคลีอิคที่ปร ะมวลรหัสโปรตีน จากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของลิปิดและกรดไขม ัน กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถี การสังเคราะห์ทางชีว ภาพของไดออล กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสังเครา ะห์ทาง ชีวภาพของคาร์โบไฮเดรท กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจ ากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของ สารประกอบอะโรมาติค กรดนิวคลีอ ิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของ ไวตามิน กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภา พของโคแฟคเตอร์และ กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสั งเคราะห์ทางชีวภาพของเอนไซม์โดยที่จีนอาจเลือก ประกอบรวมด้วยหน่ วยควบคุมเพิ่มเติม

37. จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 36 โดยที่โปรตีนจากวิถี การสังเคราะห์ทางชีวภาพของกรดอะมิโนมนั้ นเลือกจากกลุ่มของแอสปาร์เตทไคเนส แอสปาร์เตท- เซมิแอลดีไฮด์ดีไ ฮโดรจีเนส ไดอะมิโนไพมีเลทดีไฮโดรจีเนส ไดอะมิโนไพมีเลทดีคาร์บอ กซิเลส ไดไฮโดรไดพิโคลิเนทซินธีเทส ไดไฮโดรไดพิโคลิเนทรีดักเทส กลีเซอรัลดีไฮด์-3- ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส 3-ฟอสโฟกลีเซอเรทไคเน ส ไพรูเวทคาร์บอกซิเลส ไทรโอสฟอสเฟตโอโซเมอเรส หน่วยควบคุมการถอด รหัส LuxR หน่วยควบคุมการถอดรหัส LysR1 หน่วยควบคุมการถอดรหัส L ysR2 มาเลท-ควิโนนออกซิโดรีดักเทส กลูโคส-6-ฟอสเฟตดีไฮโดรจี เนส 6-ฟอสโฟกลูโคเนทดีไฮโดรจีเนส ทรานสคีโตเลส ทรานสแอลโดเลส โ อโมซีรีน O-แอเซทิลทรานสเฟอเรส ซิสตาไธโอนีนแกมมา-ซินเธส ซิส ตาไธโอนีนบีตา-ไลเอส ซีรีนไฮดรอกซีเมธิลทรานสเฟอเรส O-แอเซทิ ลโฮโมซีรีน ซัลฟ์ไฮดริเลส เมธิลีนเททราไฮโดรโฟเลท รีดักเทส ฟอสโ ฟซีรีนอะมิโนทรานสเฟอเรส ฟอสโฟซีรีนฟอสฟาเทส ซีรีนแอเซทิลทรานส เฟอเรส โฮโมซีรีนดีไฮโดรจีเนส โฮโมซีรีนไคเนส ธรีโอนีนซินเธส ต ัวพาสำหรับการขนส่งธรีโอนีน ธรีโอนีนดีโอดราเทส ไพรูเวทออกซิเดส ตัวขนส่งไลซีน ไบโอตินไลเกส ซิสเตอีนซินเธส I ซิสเตอีนซินเธ ส II เมธิโอนีนซินเธสที่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12 เมธิโอนีนซินเธส ที่ไม่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12 หน่วยย่อย 1 และ 2 ของซัลเฟตอะดีน ิลอิลทรานสเฟอเรส ฟอสโฟอะดีโนซีน- ฟอสโฟซัลเฟตรีดักเทส เฟอร์รีด อกซิน-ซิลโฟท์รีดักเทส เฟอร์รีดอกซิน NADP รีดักเทส 3-ฟอสโฟก ลีเซอเรทดีไฮโดรจีเนส ตัวควบคุม RXA00655 ตัวควบคุม RXN2910 อ าร์จีนิล-tRNA ซินเธส ฟอสโฟอีนอลไพรูเวทคาร์บอกซิเลส โปรตีนเอ ฟฟลักซ์ของธรีโอนีน ซีรีนไฮดรอกซีเมธิลทรานสเฟอเรส ฟรุคโตส-1, 6-บิสฟอสฟาเทส โปรตีนของการรีดิวซ์ซัลเฟต RXA077 โปรตีนของการ รีดิวซ์ซัลเฟต RXA248 โปรตีนของการรีดิวซ์ซัลเฟต RXA247 โปรตีน OpcA 1-ฟอสโฟฟรุคโตไคเนส และ 6-ฟอสโฟฟรุคโตไคเนส

38. วิธีสำหรับการเตรียมผลิตภัณฑ์การสังเคราะห์ทางชีวภาพโดยการเ พาะเลี้ยงจุลินทรีย์ที่ได้รับ การดัดแปลงทางพันธุกรรมตามข้อถือส ิทธิข้อใดข้อหนึ่งของข้อ 24 ถึง 37

39. วิธีสำหรับเตรียมไลซีนโดยการเพาะเลี้ยงจุลินทรีย์ที่ได้รับก ารดัดแปลงทางพันธุกรรม ตามข้อถือสิทธิข้อใดข้อหนึ่งของข้อ 24, 25 , 31 หรือ 32 โดยที่จีนได้รับการเลือกจากกลุ่มของกรด นิวคลีอิคท ี่ประมวลรหัสแอสปาร์เตทไคเนส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสแอสปาร์ เตท-เซมิแอลดีไฮด์ ดีไฮโดรจีเนส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสไดอะ มิโนไพมีเลทดีไฮโดรจีเนส กรดนิวคลีอิคที่ประมวล รหัสไดอะมิโนไพม ีเลทดีคาร์บอกซิเลส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสไดไฮโดรไดพิโคลิเ นทซินธีเทส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสไดไฮโดรไดพิโคลิเนทรีดักเ ทส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสกลีเซอรัส ดีไฮด์-3- ฟอสเฟตดีไฮโ ดรจีเนส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัส 3-ฟอสโฟกลีเซอเรทไคเนส กรด นิวคลีอิคที่ประมวลรหัสไพรูเวทคาร์บอกซิเลส กรดนิวคลีอิคที่ประ มวลรหัสไทรโอสฟอสเฟต ไอโซเมอรเรส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสหน่ว ยควบคุมการถอดรหัส LuxR กรดนิวคลีอิคที่ประมวล รหัสหน่วยควบคุมก ารถอดรหัส LysR1 กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสหน่วยควบคุมการถอดรห ัส LysR2 กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสมาเลท-ควิโนนออกซิโดรีดักเ ทส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัส กลูโคส-6- ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส กรด นิวคลีอิคที่ประมวลรหัส 6-ฟอสโฟกลูโคเนทดีไฮโดรจีเนส กรดนิวคลี อิคที่ประมวลรหัสทรานสคีโตเลส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสทรานสแอ ลโดเลส กรด นิวคลีอิคที่ประมวลรหัสตัวขนส่งไลซีน กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสไบโอตินไลเกส กรดนิวคลีอิคที่ ประมวลรหัสอาร์จีนิล- tRNA ซินธีเทส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสฟอสโฟอีนอลไพรูเวท คาร์ บอกซิเลส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสฟรุคโตส-1,6-บิสฟอสฟาเทส ก รดนิวคลีอิคที่ประมวล รหัสโปรตีน OpcA กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหั ส 1-ฟอสโฟฟรุคโตไคเนส และกรดนิวคลีอิคที่ ประมวลรหัส 6-ฟอสโฟฟรุค โตไคเนส

40. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 39 โดยที่จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแ ปลงทางพันธุกรรมมีเมื่อเทียบกับ ไวลด์ไทพ์แอคติวิตีที่ได้รับการ เพิ่มเป็นการเพิ่มเติมของอย่างน้อยหนึ่งแอคติวิตีที่เลือกจากกล ุ่มของ แอสปาร์เตทไคเนสแอคติวิตี แอสปาร์เตท-เซมิแอลดีไฮด์ดีไฮ โดรจีเนสแอคติวิตี ไดอะมิโนไพมีเลท ดีไฮโดรจีเนสแอคติวิตี ไดอ ะมิโน ไพมีเลทดีคาร์บอกซิเลสแอคติวิตี ไดไฮโดรไดพิโคลิเนทซินธี เทส แอคติวิตี ไอไฮโดรไดพิโคลิเนทรีดักเทสแอคติวิตี กลีเซอรัลดี ไฮด์-3-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนสแอคติวิตี 3-ฟอสโฟกลีเซอเรทไคเนสแอคต ิวิตี ไพรูเวทคาร์บอกซิเลสแอคติวิตี ไทรโอสฟอสเฟตไอโซเมอเรส แอค ติวิตี แอคติวิตีของหน่วยควบคุมการถอดรหัส LuxR แอคติวิตีของหน่ วยควบคุมการถอดรหัส LysR1 แอคติวิตีของหน่วยควบคุมการถอดรหัส L ysR2 มาเลท-ควิโนนออกซิโดรีดักเทสแอคติวิตี กลูโคส-6-ฟอสเฟตด ีไฮโดรจีเนสแอคติวิตี 6-ฟอสโฟกลูโคเนทดีไฮดดรจีเนสแอคติวิตี ทรา นสคีโตเลสแอคติวิตี ทรานสแอลโดเลสแอคติวิตี แอคติวิตีตัวขนส่งไ ลซีน อาร์จีนิล-tRNA ซินธีเทสแอคติวิตี ฟอสโฟอีนอลไพรูเวทคาร์บ อกซิเลสแอคติวิตี ฟรุคโตส-1,6-บิสฟอสฟาเทส แอคติวิตี แอคติวิตี ของโปรตีน OpcA 1-ฟอสโฟฟรุคโตไคเนตแอคติวิตี 6-ฟอสโฟฟรุคโคไค เนส แอคติวิตี และไบโอตินไลเกสแอคติวิตี

41. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 39 หรือ 40 โดยที่จุลินทรีย์ทีมีการ ดัดแปลงทางพันธุกรรมมีเมื่อเทียบ กับไวลด์ไทพ์แอคติวิตีที่ลดลงเ ป็นการเพิ่มเติมของอย่างน้อยหนึ่งแอคติวิตีที่เลือกจากกลุ่มของ ธรีโอนีนดีไฮดราเทสแอคติวิตี โฮโมซีรีน O-แอเซทิลทรานสเฟอเรสแอคต ิวิตี O-แอเซทิล-โฮโมซีรีน ซัลฟ์ไฮดริเลสแอคติวิตี ฟอสโฟอีนอลไ พรูเวทคาร์บอกซีไคเนสแอคติวิตี ไพรูเวทออกซิเดสแอคติวิตี โฮโมซี รีนไคเนสแอคติวิตี โฮโมซีรีนดีไฮโดรจีเนสแอคติวิตี แอคติวิตีขอ งตัวขนส่งธรีโอนีน ธรีโอนีน เอฟฟลักซ์โปรตีนแอคติวิตี แอสปาราจีเน สแอคติวิตี แอสปาร์เตทดีคาร์บอกซิเลสแอคติวิตี และ ธรีโอนีนซิน เธสแอคติวิตี

42. วิธีสำหรับเตรียมเมธิโอนีนโดยการเพาะเลี้ยงจุลินทรีย์ที่ได้ รับการดัดแปลงทางพันธุกรรม ตามข้อถือสิทธิข้อใดข้อหนึ่งของข้อ 2 4, 25, 31 หรือ 32 โดยที่จีนได้รับการเลือกจากกลุ่มของกรด นิวคลีอ ิคที่ประมวลรหัสแอลปาร์เตทไคเนส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสแอสป าร์เตท-เซมิแอลดีไฮด์ ดีไฮโดรจีเนส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโ ฮโมซีรีนดีไฮโดรจีเนส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัส กลีเซอรัลดีไฮด ์-3-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัส 3-ฟอสโฟ กลีเซอเรทไคเนส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสไพรูเวทคาร์บอกซิเลส ก รดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสไทรโอสฟอสเฟต ไอโซเมอเรส กรดนิวคลีอิคท ี่ประมวลรหัสโฮโมซีนรีน O-แอเซทิลทรานสเฟอเรส กรดนิวคลีอิคที่ ประม วลรหัสซิสตาไธโอนีนแกมมา-ซินเธส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสซิ สตาไธโอนีนบีตา-ไลเอส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสซีรีนไฮดรอกซีเ มธิลทรานสเฟอเรส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัส O-แอเซทิลโฮโมซีรีน ซัลฟ์ไฮดริเลส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสเมธิลีนเททราไฮโดรโฟเล ทรีดักเทส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสฟอสโฟซีรีนอะมิโนทรานสเฟอเร ส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัส ฟอสโฟซีรีนฟอสฟาเทส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสซีรีนแอเซทิลทรานสเฟอเรส กรดนิวคลี อิคที่ ประมวลรหัสซิสเตอีนซินเธส I กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสซิ สเตอีนซินเธส II กรดนิวคลีอิคที่ ประมวลรหัสเมธิโอนีนซินเธสที่ข ึ้นกับโคเอนไซม์ B12 กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสเมธิโอนีน ซินเธสที่ไ ม่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12 กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสซัลเฟตอะดีนิ ลอิลทรานสเฟอเรส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสฟอสโฟอะดีโนซีนฟอสโฟซ ัลเฟตรีดักเทส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัส เฟอร์รีดอกซิน-ซัลโฟท ์รีดักเทส กรดนิวคลีอิคที่ปะมวลรหัสเฟอร์รีดอกซิน NADPH-รีดักเ ทส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสเฟอร์รีดอกซินดอกซินแอคติวิตี กรดนิ วคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนของ ซัลเฟตรีดักชัน RXA077 กรดนิวคลี อิคที่ประมวลรหัสโปรตีนของซัลเฟตรีดักชัน RXA248 กรด นิวคลีอิคที่ ประมวลรหัสโปรตีนของซัลเฟตรีดักชัน RXA247 กรดนิวคลีอิคที่ประมวล รหัสตัวควบคุม RXA0655 และกรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสตัวควบคุม R XN2910

43. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 42 โดยที่จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัด แปลงทางพันธุกรรมเมื่อเทียบกับ ไวลด์ไทพ์แอคติวิตีที่ได้รับการเ พิ่มเป็นการเพิ่มเติมของแอคติวิตีที่เลือกจากกลุ่มของแอสปาร์เตท ไ คเนสแอคติวิตี แอสปาร์เตท-เซมิแอลดีไฮด์ดีไฮโดรจีเนสแอคติวิตี โฮโมซีรีนดีไฮโดรจีเนสแอคติวิตี กลีเซอรัลดีไฮด์-3- ฟอสเฟตดีไ ฮโดรจีเนสแอคติวตี 3-ฟอสโฟกลีเซอเรทไคเนสแอคติวิตี ไพรูเวทคาร ์บอกซิเลสแอคติวิตี ไทรโอสฟอสเฟตไอโซเมอเรสแอคติวิตี โอโมซีรีน O-แอเซทิลทรานสเฟอเรสแอคติวิตีซิสตาไธโอนีนแกมมา-ซินเธสแอคติว ิตี ซิสตาไธโอนีนบีตา- ไลเอสแอคติวิตี ซีรีนไฮดรอกซีเมธิลทรานสเ ฟอเรสแอคติวิตี O-แอเซทิลโฮโมซีรีนซัลฟ์ไฮดริเลส แอคติวิตี เมธ ิลีนเททราไฮโดรโฟเลทรีดักเทสแอคติวิตี ฟอสโฟซีรีนอะมิโนทรานสเฟ อเรสแอคติวิตี ฟอสโฟซีรีนฟอสฟาเทสแอคติวิตี ซีรีนแอเซทิลทรานสเฟ อเรสแอคติวิตี ซิสเตอีนซินเธส I แอคติวิตี ซิสเตอีนซินเธส II แอ คติวิตี เมธิโอนีนซินเธสแอคติวิตีที่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12 เมธิ โอนีนซินเธส แอคติวิตีที่ไม่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12 ซัลเฟตอะดีนิล ทรานสเฟอเรสแอคติวิตี ฟอสโฟอะดีไนซีน- ฟอสโฟซัลเฟตรีดักเทสแอคติ วิตี เฟอร์รีดอกซิน-ซัลโฟท์รีดักเทสแอคคิวิตี เฟอร์รีดอกซิน N ADPH- รีดักเทสแอคติวิตี เฟอร์รีดอกซินแอคติวิตี แอคติวิตีของโ ปรตีนของซัลเฟตรีดักชัน RXA077 แอคติวิตี ของโปรตีนของซัลเฟตรีด ักชัน RXA248 แอคติวิตีของโปรตีนของซัลเฟตรีดักชัน RXA247 แอคต ิวิตี ของตัวควบคุม RXA655 และแอคติวิตีของตัวควบคุม RXN2910

44. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 42 หรือ 43 โดยที่จุลินทรีย์ที่ได้ร ับการดัดแปลงทางพันธุกรรมเมื่อ เทียบกับไวลด์ไทพ์แอคติวิตีที่ได ้รับการลดลงเป็นการเพิ่มของแอคติวิตีที่เลือกจากกลุ่มของ โฮโมซี รีนไคเนสแอคติวิตี ธรีโอนีนดีไฮดราเทสแอคติวิตี ธรีโอนีนซินเธส แอคติวิตี มีโซ-ไดอะมิดนไพมีเลท D-ดีไฮโดรจีเนสแอคติวิตี ฟอสโฟอ ีนอลไพรูเวทคาร์บอกซีไคเนสแอคติวิตี ไพรูเวทออกซิเดสแอคติวิตี ไดไฮโดรไดพิโคลิเนทซินเธสแอคติวิตี ไดไฮโดรไดพิโคลิเนทรีดักเทส แอคต ิวิตี และไดอะมิโนพิโคลิเนทดีคาร์บอกวิเลสแอคติวิตี

45. วิธีสำหรับเตรียมธรีโอนีนโดยการเพาะเลี้ยงจุลินทรีย์ที่ได้ร ับการดัดแปลงทางพันธุกรรม ตามข้อถือสิทธิข้อใดข้อหนึ่งของข้อ 24 , 25, 31 หรือ 32 โดยที่จีนนั้นเลือกจากกลุ่มของกรดนิวคลีอิคที่ ป ระมวลรหัสแอสปาร์เตทไคเนส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสแอสปาร์เตท -เซมิแอลดีไฮด์ ดีไฮโดรจีเนส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสกลีเซอร ัลดีไฮด์-3-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส กรดนิวคลีอิคที่ ประมวลรหัส 3- ฟอสโฟกลีเซอเรทไคเนส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสไพรูเวทคาร์บอ กซิเลส กรด นิวคลีอิคที่ประมวลรหัสไทรโอสฟอสเฟตไอโซเมอเรส กรดนิ วคลีอิคที่ประมวลรหัสโฮโมซีรีน ไคเนส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัส ธรีโอนีนซินเธส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสตัวพาของตัว ขนส่งธรีโอนี น กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสกลูโคส-6-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส กรด นิวคลีอิคที่ ประมวลรหัสทรานสแอลโดเลส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหั สทรานสคีโตเลส กรดนิวคลีอิคที่ ประมวลรหัสมาเลท-ควิโนนออกซิโดร ีดักเทส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัส 6-ฟอสโฟกลูโคเนท ดีไฮโดรจี เนส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสตัวขนส่งไลซีน กรดนิวคลีอิคที่ปร ะมวลรหัสไบโอติน ไลเกส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสฟอสโฟอีนอลไพรู เวทคาร์บอกซิเลส กรดนิวคลีอิคที่ประมวล รหัสธรีโอนีนเอฟฟลักซ์โป รตีน กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสฟรุตโตส-1,6-บิสฟอสฟาเทส กรด น ิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีน OpcA กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัส 1 -ฟอสโฟฟรุคโตไคเนส กรด นิวคลีอิคที่ประมวลรหัส 6-ฟอสโฟฟรุคโคไ คเนส และกรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโอโมซีรีน ดีไฮโดรจีเนส

46. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 45 โดยที่จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัด แปลงทางพันธุกรรมมีเมื่อเทียบกับ ไวลด์ไทพ์แอคติวิตีที่ได้รับกา รเพิ่มเป็นการเพิ่มเติมของแอคติวิตีอย่างน้อยหนึ่งอย่างที่เลือก จากกลุ่ม ของแอสปาร์เตทไคเนสแอคติวิตี แอสปาร์เตท-เซมิแอลดีไฮด ์ดีไฮโดรจีเนสแอคติวิตี กลีเซอรัลดีไฮด์- 3-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนสแ อคติวิตี 3-ฟอสโฟกลีเซอเรทไคเนสแอคติวิตี ไพรูเวทคาร์บอกซิเลส แอคติวิตี ไทรโอสฟอสเฟตไอโซเมอเรสแอคติวิตี ธรีโอนีนซินเธสแอค ติวิตี แอคติวิตีของตัวพาของ ตัวขนส่งธรีโอนีน ทรานสแอลโดเลสแอค ติวิตี ทรานสคีโตเลสแอคติวิตี กลูโคส-6-ฟอสเฟต ดีไฮโดรจีเนสแอค ติวิตี มาเลท-ควิโนนออกซิโดรีดักเทสแอคติวิตี โฮโมซีรีนไคเนสแ อคติวิตี ไบโอตินไลเกสแอคติวิตี ฟอสโฟอีนอลไพรูเวทคาร์บอกซิเลสแ อคติวิตี ธรีโอนีนแอฟฟลักซ์โปรตีน แอคติวิตี แอคติวิตีของโปรตีน OpcA 1-ฟอสโฟฟรุคโตไคเนสแอคติวิตี 6-ฟอสโฟฟรุคโตไคเนส แอคติ วิตี ฟรุคโตส-1,6-บิสฟอสฟาเทสแอคติวิตี 6-ฟอสโฟกลูโคเนทแอคต ิวิตี และโฮโมซีรีน ดีไฮโดรจีเนสแอคติวิตี

47. วิธีตามข้อข้อถือสิทธิที่ 45 หรือ 46 โดยที่จุลินทรีย์ที่มี การดัดแปลงทางพันธุกรรมมีเมื่อเทียบ กับไวลด์ไทพ์แอคติวิตีที่ลด ลงเป็นการเพิ่มเติมของอย่างน้อยหนึ่งแอคติวิตีที่เลือกจากกลุ่ม ของ ธรีโอนีนดีไฮดราเทสแอคติวิตี โอโมซีรีน O-แอเซทิลทรานสเฟอเร สแอคติวิตี ซีรีนเมธิลทรานสเฟอเรสแอคติวิตี O-แอเซทิลโฮโมซีรีนซัลฟ์ไอดริเ ลสแอคติวิตี มีโซ- ไดอะมิโนไพมีเลท D-ดีไฮโดรจีเนส แอคติวิตี ฟ อสโฟอีนอลไพรูเวทคาร์บอกซีไคเนสแอคติวิตี ไพรูเวทออกซิเดสแอคติ วิตี ไดไฮโดรไดพิโคลิเนทซินธีเทสแคติวิตี ไดไฮโดรไดพิโคลิเนทรี ดักเทส แอคติวิตี แอสปาราจีเนส แอคติวิตี แอสปาร์เตทดีคาร์บอกซิ เลสแอคติวิตี แอคติวิตีของตัวขนส่งไลซีน แอเซโทแลคเตทซินเธสแอค ติวิตี คีทอล-แอซิดรีดำโตไฮโซเมอเรสแอคติวิตี แอคติวิตีของ อะ มิโนทรานสเฟอเรสชนิดสายข้าง เมธิโอนีนซินเธสแอคติวิตีที่ขึ้นกั บโคเอนไซม์ B12 เมธิโอนีนซินเธสแอคติวิตีที่ไม่ขึ้นกับโคเอนไซ ม์ B12 ไดไฮดรอกซีแอซิดดีไฮดราเทสแอคติวิตี และ ไดอะมิโนพิโคลิเ นทดีคาร์บอกซิเลสแอคติวิตี

48. วิธีตามข้อถือสิทธิข้อใดข้อหนึ่งของข้อ 38 ถึง 47 โดยที่ผลิตภัณฑ์ การสังเคราะห์ทาง ชีวภาพได้รับการแยกและกรณีที่เหมาะสมทำบริสุทธ ิ์จากอาหารเพาะเลี้ยงหลังและ/หรือระหว่าง ขั้นตอนการเพาะเลี้ยง

49. การใช้ลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ. ID. NO. 42 เป็นบริเวณจับเกาะข องไรโบโซมในหน่วย แสดงออกที่ทำให้จีนสามารถแสดงออกในแบคทีเรียของ สกุล Corynebacterium หรือ Brevibacterium

50. การใช้ลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ. ID. NOs. 39, 40 หรือ 41 เป็นบร ิเวณ -10 ในหน่วย แสดงออกที่ทำให้จีนสามารถแสดงออกในแบคทีเรียขอ งสกุล Corynebacterium หรือ Brevibacterium

51. หน่วยแสดงออกที่ทำให้จีนสามารถแสดงออกในแบคทีเรียของสกุล C orynebacterium หรือ Brevibacterium ซึ่งประกอบรวมด้วยลำดับกรด นิวคลีอิค SEQ. ID. NO. 42

52. หน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 51 โดยที่ลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ. ID. NO. 42 ได้รับ การใช้เป็นบริเวณจับเกาะของไรโบโซม

53. หน่ว ยแสดงออกที่ทำให้จีนสามารถแสดงออกในแบคทีเรียของสกุล Corynebacterium หรือ Brevibacterium ซึ่งประกอบรวมด้วยอย่างน้ อยหนึ่งลำดับของลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ. ID. NOs. 39, 40 หรือ 41

54. หน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 53 โดยที่สายหนึ่งของลำดับก รดนิวคลีอิค SEQ. ID. NOs. 39, 40 หรือ 41 ได้รับการใช้เป็นบริเวณ -10