TH80513A - หน่วยการแสดงออก p180 - Google Patents

Abstract

DC60 (20/04/49) การประดิษฐ์นี้เกี่ยวข้องกับการใช้ลำดับกรดนิวคลีอิคสำหรับการควบคุมการถอดรหัส และ การแสดงออกของจีน, โปรโมเตอร์ชนิดใหม่ และหน่วยการแสดงออกมันเอง, วิธีสำหรับการเปลี่ยน แปลง หรือการทำให้เกิดอัตราการถอดรหัส และ/หรือ อัตราการแสดงออกของจีน, แคสเสตการแสดง ออกซึ่งประกอบรวมด้วยหน่วยการแสดงออก, จุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมโดยมีอัตราการถอด รหัส และ/หรือ อัตราการแสดงออกที่เปลี่ยนแปลงหรือทำให้เกิดขึ้น และวิธีสำหรับการเตรียม ผลิตภัณฑ์ชีวสังเคราะห์โดยการเลี้ยงจุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรม การประดิษฐ์นี้เกี่ยวข้องกับการใช้ลำดับกรดนิวคลีอิคสำหรับการควบคุมการถอดรหัส และ การแสดงออกของจีน, โปรโมเตอร์ชนิดใหม่ และหน่วยการแสดงออกมันเอง, วิธีกสำหรับการเปลี่ยน แปลง หรือการทำให้เกิดอัตราการถอดรหัส และ/หรือ อัตราการแสดงออกของจีน, แคสเสตการแสดง ออกซึ่งประกอบรวมด้วยหน่วยการแสดงออก, จุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมโดยมีอัตราการถอด รหัส และ/หรือ อัตราการแสดงออกที่เปลี่ยนแปลงหรือทำให้เกิดขึ้น และวิธีสำหรับการเตรียม ผลิตภัณฑ์ชีวสังเคราะห์โดยการเลี้ยงจุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรม

Claims (48)

1. การใช้กรดนิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ ซึ่งประกอบรวมด้วย A) ลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ. ID. NO. 1 หรือ B) ลำดับที่อนุพัทธ์จากลำดับนี้โดยการแทนที่, การสอดแทรก หรือการตัดออก ของนิวคลีโอไทด์ และซึ่งมีความหมายเหมือนกันอย่างน้อย 90% ที่ระดับกรด นิวคลีอิคกับ SEQ. ID. NO. 1 หรือ C) ลำดับกรดนิวคลีอิค ซึ่งไฮบริไดซ์กับลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ. ID. NO. 1 ภายใต้ภาวะเข้มงวด หรือ D) ชิ้นส่วนที่เทียบเท่าทางหน้าที่ของลำดับของ A), B) หรือ C) สำหรับการถอดรหัสของจีน

2. การใช้หน่วยการแสดงออกซึ่งประกอบรวมด้วยกรดนิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตี โปร โมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 และ โดยเพิ่มเติมที่ถูกเชื่อมต่อทางหน้าที่กับลำดับกรดนิวคลีอิคหนึ่ง ซึ่งทำให้แน่ใจ ได้ถึงการแปลรหัสของกรดไรโบนิวคลีอิค สำหรับการแสดงออกของจีน

3. การใช้ตามข้อถือสิทธิที่ 2 ในที่ซึ่งหนึ่งการแสดงออกประกอบรวมด้วย : E) ลำดับกรดนิคลีอิค SEQ. ID. NO. 2 หรือ F) ลำดับที่อนุพัทธ์จากลำดับนี้โดยการแทนที่, การสอดแทรก หรือการตัดออก ของนิวคลีโอไทด์ และซึ่งมีความเหมือนกันอย่างน้อย 90% ที่ระดับกรด นิวคลีอิคกับ SEQ. ID. NO. 2 หรือ G) ลำดับกรดนิวคลีอิคซึ่งไฮบริไดซ์กับลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ. ID. NO. 2 ภายใต้ภาวะเข้มงวด หรือ H) ชิ้นส่วนที่เทียบเท่าทางหน้าที่ของลำดับของ E), F) หรือ G)

4. การใช้ตามข้อถือสิทธิที่ 3 ในที่ซึ่งหน่วยการแสดงออกประกอบด้วยกรดนิวคลีอิค ของลำดับ SEQ. ID. NO. 2

5. กรดนิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ ซึ่งประกอบรวมด้วย A) ลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ. ID. NO. 1 หรือ B) ลำดับที่อนุพัทธ์จากลำดับนี้โดยการแทนที่, การสอดแทรก หรือการตัดออกของ นิวคลีโอไทด์ และซึ่งมีความเหมือนกันอย่างน้อย 90% ที่ระดับกรดนิวคลีอิคกับ SEQ. ID. NO. 1 หรือ C) ลำดับกรดนิวคลีอิคซึ่งไฮบริไดซ์กับลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ. ID. NO. 1 ภายใต้ ภาวะเข้มงวด หรือ D) ชิ้นส่วนที่เทียบเท่าทางหน้าที่ของลำดับของ A), B) หรือ C) โดยมีเงื่อนไขว่า กรดนิวคลีอิคซึ่งมีลำดับ SEQ. ID. NO. 1 ได้ถูกกันออกไป

6. หน่วยการแสดงออกซึ่งประกอบรวมด้วยกรดนิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตาม ข้อถือสิทธิที่ 5 และโดยเพิ่มเติมที่ถูกเชื่อมต่อทางหน้าที่กับลำดับกรดนิวคลีอิคหนึ่ง ซึ่งทำให้แน่ใจได้ ถึงการแปลรหัสของกรดไรโบนิวคลีอิค

7. หน่วยการแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 6 ซึ่งประกอบรวมด้วย E) ลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ. ID. NO. 2 หรือ F) ลำดับที่อนุพัทธ์จากลำดับนี้โดยการแทนที่, การสอดแทรก หรือการตัดออกของ นิวคลีโอไทด์ และซึ่งมีความเหมือนกันอย่างน้อย 90% ที่ระดับกรดนิวคลีอิคกับ SEQ. ID. NO. 2 หรือ G) ลำดับกรดนิวคลีอิคซึ่งไฮบริไดซ์กับลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ. ID. NO. 2 ภายใต้ ภาวะเข้มงวด หรือ H) ชิ้นส่วนที่เทียบเท่าทางหน้าที่ของลำดับของ E), F) หรือ G) โดยมีเงื่อนไขว่า กรดนิวคลีอิคซึ่งมีลำดับ SEQ. ID. NO. 2 ได้ถูกกันออกไป

8. วิธีการสำหรับการเปลี่ยนแปลงหรือการทำให้เกิดอัตราการถอดรหัสของจีนในจุลินทรีย์ โดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์โดย a) การเปลี่ยนแปลงแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะในจุลินทรีย์ของกรดนิวคลีอิคจาก ภายในซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ซึ่งควบคุมการถอดรหัสของ จีนจากภายในโดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ หรือ b) การควบคุมการถอดรหัสของจีนในจุลินทรีย์โดยกรดนิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตี โปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือโดยกรดนิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่มีแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลงตามการ แสดงรายละเอียด a) ที่ซึ่งจีนเป็นชนิดเฮเทอโรโลกัสตามที่เกี่ยวข้องกับกรด นิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์

9. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 8 ในที่ซึ่งการควบคุมการถอดรหัสของจีนในจุลินทรีย์โดยกรด นิวคลิอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือโดยกรดนิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตี โปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่มีแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลงตามการแสดงราย ละเอียด a) บรรลุได้โดย b1) การนำเข้าไปของกรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่าซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตาม ข้อถือสิทธิที่ 1 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะที่ถูกเปลี่ยน แปลง สู่ในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการถอดรหัสของจีนจากภายในหนึ่งหรือ มากกว่าได้เกิดขึ้นภายใต้การควบคุมของกรดนิวคลีอิคที่นำเข้าไปซึ่งมี แอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตี โปรโมเตอร์จำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลง หรือ b2) การนำเข้าไปของจีนหนึ่งหรือมากกว่าสู่ในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการถอด รหัสของจีนที่นำเข้าไปหนึ่งหรือมากกว่าได้เกิดขึ้นภายใต้การควบคุมของกรด นิวคลีอิคจากภายในซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หาก เหมาะสมโดยมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลง หรือ b3) การนำเข้าไปของส่วนสร้างกรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่า ซึ่งประกอบรวมด้วย กรดนิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หากเหมาะสมโดย มีแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลง และเชื่อมต่อทางหน้าที่กับ กรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือมากก่าที่จะถูกถอดรหัส สู่ในจุลินทรีย์

10. วิธีการข้อถือสิทธิที่ 8 หรือ 9 ในที่ซึ่งเพื่อเพิ่มหรือทำให้เกิดอัตราการถอดรหัสของ จีนในจุลินทรีย์โดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ ah) แอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะในจุลินทรีย์ของกรดนิวคลีอิคจากภายในซึ่งมี แอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือซึ่งควบคุมการถอดรหัสของจีนจาก ภายใน ได้ถูกทำให้เพิ่มขึ้นโดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ หรือ bh) การถอดรหัสของจีนในจุลินทรีย์ได้ถูกควบคุมโดยกรดนิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตี โปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือโดยกรดนิวคลีอิคที่มีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ จำเพาะที่เพิ่มขึ้นตามการแสดงรายละเอียด a) ที่ซึ่งจีนเป็นชนิดเฮเทอโรโลกัสตาม ที่เกี่ยวข้องกับกรดนิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์

11. วิธีการตามข้อถือสิทธิที่ 10 ในที่ซึ่งการควบคุมการถอดรหัสของจีนในจุลินทรีย์โดยกรด นิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือโดยกรดนิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตี โปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 โดยมีแอคติวิตีโปร โมเตอร์จำเพาะที่เพิ่มขึ้นตามการแสดงรายละเอียด a) ได้บรรลุถึงโดย ah1) การนำเข้าไปของกรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่าซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตาม ข้อถือสิทธิที่ 1 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะที่เพิ่มขึ้น สู่ใน จีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการถอดรหัสของจีนภายในหนึ่งหรือมากกว่าได้ เกิดขึ้นภายใต้การควบคุมของกรดนิวคลีอิคที่นำเข้าไปซึ่งมีแอคติวิตีโปรโม เตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะที่ เพิ่มขึ้น หรือ bh2) การนำเข้าไปของจีนหนึ่งหรือมากกว่าสู่ในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการถอด รหัสของจีนที่นำเข้าไปหนึ่งหรือมากกว่าได้เกิดขึ้นภายใต้การควบคุมของกรด นิวคลีอิคจากภายในซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หาก เหมาะสมโดยมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะที่เพิ่มขึ้น หรือ bh3) การนำเข้าไปของส่วนสร้างกรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่า ซึ่งประกอบรวม ด้วยกรดนิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หากเหมาะสม โดยมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะที่เพิ่มขึ้น และเชื่อมต่อทางหน้าที่กับกรด นิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่าที่จะถูกถอดรหัส สู่ในจุลินทรีย์

12. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 8 หรือ 9 ในที่ซึ่งเพื่อลดอัตราการถอดรหัสของจีนในจุลินทรีย์ โดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ ar) แอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะในจุลินทรีย์ของกรดนิวคลีอิคจากภายในซึ่งมี แอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ซึ่งควบคุมการถอดรหัสของจีนจากภาย ใน ได้ถูกลดลงโดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ หรือ br) กรดนิวคลีอิคที่มีแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะที่ลดลงตามการแสดงรายละเอียด a) ได้ถูกนำเข้าไปสู่ในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการถอดรหัสของจีนจากภายใน ได้เกิดขึ้นภานใต้การควบคุมของกรดนิวคลีอิคที่นำเข้าไปโดยมีแอคติวิตี โปรโมเตอร์ที่ลดลง

13. วิธีสำหรับการเปลี่ยนแปลงหรือการทำให้เกิดอัตราการแสดงออกของจีนในจุลินทรีย์ โดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์โดย d) การเปลี่ยนแปลงแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะในจุลินทรีย์ของหน่วยการแสดง ออกจากภายในตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ซึ่งควบคุมการแสดงออกของจีนจาก ภายใน โดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ หรือ e) การควบคุมการแสดงออกของจีนในจุลินทรีย์โดยหน่วยการแสดงออกตามข้อถือ สิทธิที่ 2 หรือ 3 หรือโดยหน่วยการแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 โดยมี แอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลงตามการแสดงรายละเอียด c) ที่ ซึ่งจีนเป็นชนิดเฮเทอโรโลกัสตามที่เกี่ยวข้องกับหน่วยการแสดงออก

14. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 13 ในที่ซึ่งการควบคุมการแสดงออกของจีนในจุลินทรีย์โดย หน่วยการแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หรือโดยหน่วยการแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่มีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลงตามการแสดงรายละเอียด a) ได้บรรลุโดย d1) การนำเข้าไปของหน่วยการแสดงออกหนึ่งหรือมากกว่าตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลง สู่ใน จีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการแสดงออกของจีนจากภายในหนึ่งหรือมากกว่าได้ เกิดขึ้นภายใต้การควบคุมของหน่วยการแสดงออกที่นำเข้าไป หรือ d2) การนำเข้าไปของจีนหนึ่งหรือมากกว่าสู่ในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการแสดง ออกของจีนที่นำเข้าไปหนึ่งหรือมากกว่าได้เกิดขึ้นภายใต้การควบคุมของหน่วย การแสดงออกจากภายในตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หากเหมาะสมโดยมี แอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลง หรือ d3) การนำเข้าไปของส่วนสร้างกรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่า ซึ่งประกอบรวมด้วย หน่วยการแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตี การแสดงออกจำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลง และเชื่อมต่อทางหน้าที่กับกรด นิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่าที่จะถูกแสดงออก สู่ในจุลินทรีย์

15. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 13 หรือ 14 ในที่ซึ่งเพื่อเพิ่มหรือทำให้เกิดอัตราการแสดงออก ของจีนในจุลินทรีย์โดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ ch) แอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะในจุลินทรีย์ของหน่วยการแสดงออกจากภายใน ตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ซึ่งควบคุมการแสดงออกของจีนจากภายใน ได้ถูก ทำให้เพิ่มขึ้นโดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ หรือ dh) การแสดงออกของจีนในจุลินทรีย์ได้ถูกควบคุมโดยหน่วยการแสดงออกตามข้อ ถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หรือโดยหน่วยการแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่ มีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่เพิ่มขึ้นตามการแสดงรายละเอียด a) ที่ซึ่งจีน เป็นชนิดเฮเทอโรโลกัสตามที่เกี่ยวข้องกับหน่วยการแสดงออก

16. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 15 ในที่ซึ่งการควบคุมการแสดงออกของจีนในจุลินทรีย์โดย หน่วยการแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หรือโดยหน่วยการแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่มีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่เพิ่มขึ้นตามการแสดงรายละเอียด a) ได้บรรลุโดย dh1) การนำเข้าไปของหน่วยการแสดงออกหนึ่งหรือมากกว่าตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่เพิ่มขึ้น สู่ใน จีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการแสดงออกของจีนจากภายในหนึ่งหรือมากกว่า ได้เกิดขึ้นภายใต้การควบคุมของหน่วยการแสดงออกที่นำเข้าไป หาก เหมาะสมโดยมีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่เพิ่มขึ้น หรือ dh2) การนำเข้าไปของจีนหนึ่งหรือมากกว่าสู่ในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการแสดง ออกของจีนที่นำเข้าไปหนึ่งหรือมากกว่าได้เกิดขึ้นภายใต้การควบคุมของ หน่วยการแสดงออกจากภายในตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หากเหมาะสมโดย มีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่เพิ่มขึ้น หรือ dh3) การนำเข้าไปของส่วนสร้างกรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่า ซึ่งประกอบรวม ด้วยหน่วยการแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หากเหมาะสมโดยมี แอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่เพิ่มขึ้น และเชื่อมต่อทางหน้าที่กับกรด นิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่าที่จะถูกแสดงออก สู่ในจุลินทรีย์

17. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 13 หรือ 14 ในที่ซึ่งเพื่อลดอัตราการแสดงออกของจีนใน จุลินทรีย์โดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ cr) แอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะในจุลินทรีย์ของหน่วยการแสดงออกจากภายใน ตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ซึ่งควบคุมการแสดงออกของจีนจากภายใน ได้ถูก ลดลงโดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ หรือ dr) หน่วยการแสดงออกที่มีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่ลดลงตามการแสดงราย ละเอียด cr) ได้ถูกนำเข้าไปสู่ในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการแสดงออกของ จีนจากภายในได้เกิดขึ้นภายใต้การควบคุมของหน่วยการแสดงออกที่นำเข้าไป โดยมีแอคติวิตีการแสดงออกที่ลดลง

18. วิธีตามข้อใดข้อหนึ่งของข้อถือสิทธิที่ 8 ถึง 17 ในที่ซึ่งจีนได้ถูกคัดเลือกจากกลุ่มของ กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของกรดอะมิโนชนิด โปรตีโนเจนิค และ นอน-โปรตีโนเจนิค, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของกรดนิวคลีโอไทด์และ นิวคลีโอไซด์, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของกรดอินทรีย์, กรด นิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของลิพิด และกรดไขมัน, กรดนิวคลีอิคซึ่ง ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของไดออล, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจาก วิถีชีวสังเคราะห์ของคาร์โบไฮเดรต, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของ สารประกอบอะโรมาติค, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของวิตามิน, กรด นิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของโคแฟกเตอร์ และกรดนิวคลีอิคซึ่งประมวล รหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของเอนไซม์ ที่ซึ่งหากเหมาะสมจีนอาจประกอบรวมด้วยส่วน ควบคุมอื่นต่อไปอีก

19. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 18 ในที่ซึ่งโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของกรดอะมิโน ได้ถูกคัด เลือกจากกลุ่มของแอสปาร์เตตไคเนส, แอสปาร์เตต-เซวมิแอลดีไฮด์ดีไฮโดรจีเนส, ไดอะมิโนพิมีเลต ดีไฮโดรจีเนส, ไดอะมิโนพิมีเลตดีคาร์บอกซิเลส, ไดไฮโดรไดพิโคลิเนตซินธีเทส, ไดไฮโดร ไดพิโคลิเนตรีดัคเทส, กลีเซอรัลดีไฮด์-3-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส, 3-ฟอสฟอกลีเซอเรตไคเนส, ไพรูเวตคาร์บอกซิเลส, ไทรโอสฟอสเฟตไอโซเมอเรส, ตัวควบคุมการถอดรหัส LuxR, ตัวควบคุมการ ถอดรหัส LysR1, ตัวควบคุมการถอดรหัส LysR2, มาเลต-ควิโนนออกซิโดรีดัคเทส, กลูโคส-6- ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส, 6-ฟอสฟอกกลูโคเนตดีไฮโดรจีเนส, ทรานสคีโทเลส, ทรานสแอลโดเลส, ฮอมอเซรีน O-อะเซทิลทรานสเฟอเรส, ซิสตาไธโอนีนแกมมา-ซินเธส, ซิสตาไธโอนีนบีตา-ไลเอส, เซรีนไฮดรอกซีเมธิลทรานสเฟอเรส, O-อะเซทิลฮอมอเซรีนซัลฟ์ไฮดริเลส, เมธิลีนเททราไฮโดร ฟอเลตรีดัคเทส, ฟอสฟอเซรีนอะมิโนทรานสเฟอเรส, ฟอสฟอเซรีนฟอสฟาเทส, เซรีนอะเซทิล ทรานสเฟอเรส, ฮอมอเซรีนดีไฮโดรจีเนส, ฮอมอเซรีน ไคเนส, ธรีโอนีนซินเธส, ตัวพาขนส่ง ธรีโอนีนออก, ธรีโอนีนดีไฮดราเทส, ไพรูเวตออกซิเดส, ตัวขนส่งไลซีนออก, ไบโอทินไลเกส, ซิสเตอีนซินเธส I. ซิสเตอีนซินเธส II, เมไธโอนีนซินเธสชนิดที่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12, เมไธโอนีน ซินเธสชนิดที่ไม่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12, ซัลเฟตอะดีนิลิลทรานสเฟอเรสหน่วยย่อย 1 และ 2, ฟอสฟออะดีโนซีนฟอสฟอซัลเฟตรีดัคเทส, เฟอร์รีดอกซิน-ซัลไฟต์รีดัคเทส, เฟอร์รีดอกซิน NADP รีดัคเทส, 3-ฟอสฟอกลีเซอเรตดีไฮโดรจีเนส, ตัวควบคุม RXA00655, ตัวควบคุม RXN2910, อาร์จินิล-tRNA ซินธีเทส, ฟอสฟออีนอลไพรูเวตคาร์บอกซิเลส, โปรตีนการไหลออกของธรีโอนีน, เซรีนไฮดรอกซีเมธิลทรานสเฟอเรส, ฟรุคโทส-1,6-บิสฟอสฟาเทส, โปรตีนเกี่ยวกับรีดัคชันของ ซัลเฟต RXA077, โปรตีนเกี่ยวกับรีดัคชันของซัลเฟต RXA248, โปรตีนเกี่ยวกับรีดัคชันของซัลเฟต RXA247, โปรตีน OpcA, 1-ฟอสฟอฟรุคโทไคเนส และ 6-ฟอสฟอฟรุคโทไคเนส

20. แคสเสตการแสดงออกซึ่งประกอบรวมด้วย a) อย่างน้อยหน้วยการแสดงออกหนึ่งตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 และ b) อย่างน้อยกรดนิวคลีอิคอื่นต่อไปหนึ่งที่จะถูกแสดงออก และ c) ส่วนควบคุมทางพันธุกรรมอื่นต่อไป หากเหมาะสม ที่ซึ่งอย่างน้อยหน่วยการแสดงออกหนึ่งและลำดับกรดนิวคลีอิคอื่นต่อไปที่จะถูก แสดงออกได้ถูกเชื่อมต่อทางหน้าที่เข้าด้วยกัน และลำดับกรดนิวคลีอิคอื่นต่อไปที่จะ ถูกแสดงออกเป็นชนิดเฮเทอโรโลกัสตามที่เกี่ยวข้องกับหน่วยการแสดงออก

21. แคสเสตการแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 20 ในที่ซึ่งลำดับกรดนิวคลีอิคอื่นต่อไปที่จะ ถูกแสดงออก ได้ถูกคัดเลือกจากกลุ่มของกรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ ของกรดอะมิโนชนิดโปรตีนโนเจนิคและนอน-โปรตีโนเจนิค, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีน จากวิถีชีวสังเคราะห์ของนิวคลีโอไทด์และนิวคลีโอไซด์, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจาก วิถีชีวสังเคราะห์ของกรดอินทรีย์, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของลิพิด และกรดไขมัน, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของไดออล, กรดนิวคลีอิค ซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของคาร์โบไฮเดรต, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัส โปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของสารประกอบอะโรมาติค, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจาก วิถีชีวสังเคราะห์ของวิตามิน, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของ โคแฟกเตอร์ และกรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของเอนไซม์

22. แคสเสตการแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 21 ในที่ซึ่งโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของ กรดอะมิโนได้ถูกเลือกจากกลุ่มของแอสปาร์เตตไคเนส, แอสปาร์เตต-เซมิแอลดีไฮด์ดีไฮโดรจีเนส, ไดอะมิโนพิมีเลตดีไฮโดรจีเนส, ไดอะมิโนพิมีเลตดีคาร์บอกซิเลส, ไดไฮโดรไดพิโคลิเนตซินธีเทส, ไดไฮโดรไดพิโคสิเนตรีดัคเทส, กลีเซอรัลดีไฮด์-3-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส, 3-ฟอสฟอกลีเซอเรต ไคเนส, ไพรูเวตคาร์บอกซิเลส, ไทรโอสฟอสเฟตไอโซเมอเรส, ตัวควบคุมการถอดรหัส LuxR, ตัว ควบคุมการถอดรหัส LysR1, ตัวควบคุมการถอดรหัส LysR2, มาเลต-ควิโนนอออกซิโดรีดัคเทส, กลูโคส-6-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส, 6-ฟอสฟอกลูโคเนคดีไฮโดรจีเนส, ทรานสคีโทรเลส, ทรานสแอลโดเลส, ฮอมอเซรีน O-อะเซทิลทรานสเฟอเรส, ซิสตาไธโอนีนแกมมา-ซินเธส, ซิสตาไธโอนีนบีตา-ไลเอส, เซรีนไฮดรอกซีเมธิลทรานสเฟอเรส, O-อะเซทิลฮอมอเซรีน ซัลฟ์ไฮดริเลส, เมธิลีนเททราไฮโดรฟอเลตรีดัคเทส, ฟอสฟอเซรีนอะมิโนทรานสเฟอเรส, ฟอสฟอเซรีนฟอสฟาเทส, เซรีนอะเซทิลทรานสเฟอเรส, ฮอมอเซรีนดีไฮโดรจีเนส, ฮอมอเซรีน ไคเนส, ธรีโอนีนซินเธส, ตัวพาขนส่งธรีโอนีนออก, ธรีโอนีนดีไฮดราเทส, ไพรูเวตออกซิเดส, ตัวขนส่งไลซีนออก, ไบโอทินไลเกส, ซิสเตอีนซินเธส I, ซิสเตอีนซินเธส II, เมไธโอนีนซินเธสชนิด ที่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12, แอคตีวิตีเมไธโอนีนซินเธสชนิดที่ไม่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12, ซัลเฟต อะดีนิลิลทรานสเฟอเรสหน่วยย่อย 1 และ 2, ฟอสฟออะดีโนซีนฟอสฟอซับเฟตรีดัคเทส, เฟอร์รีดอกซิน-ซัลไฟต์รีดัคเทส, เฟอร์รีดอกซิน NADP รีดัคเทส, 3-ฟอสฟอกลีเซอเรตดีไฮโดรจีเนส, ตัวควบคุม RXA006655, ตัวควบคุม RXN2910, อาร์จินิล-tRNA ซินธีเทส, ฟอสฟออีนอลไพรูเวต คาร์บอกซิเลส, โปรตีนการไหลออกของธรีโอนีน, เซรีนไฮดรอกซีเมธิลทรานสเฟอเรส, ฟรุคโทส- 1,6-บิสฟอสฟาเทส, โปรตีนเกี่ยวกับรีดัคชันของซัลเฟต RXA077, โปรตีนเกี่ยวกับรีดัคชันของซัลเฟต RXA248, โปรตีนเกี่ยวกับรีดัคชันของซัลเฟต RXA247, โปรตีน OpcA, 1-ฟอสฟอฟรุคโทไคเนส และ 6-ฟอสฟอฟรุคโทไคเนส

23. เวกเตอร์การแสดงออกซึ่งประกอบรวมด้วยแคสเสตการแสดงออกตามข้อใดข้อหนึ่ง ของข้อถือสิทธิที่ 20 ถึง 22

24. จุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรม ที่ซึ่งการดัดแปรทางพันธุกรรมได้นำไปสู่การ เปลี่ยนแปลงหรือการทำให้เกิดขึ้นของอัตราการถอดรหัสของอย่างน้อยจีนหนึ่ง โดยเปรียบเทียบกับ ไวลด์ไทป์ และได้ขึ้นกับ a) การเปลี่ยนแปลงแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะในจุลินทรีย์ของอย่างน้อยกรด นิวคลีอิคจากภายในหนึ่งซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ซึ่ง ควบคุมการถอดรหัสของอย่างน้อยจีนจากภายในหนึ่ง หรือ b) การควบคุมการถอดรหัสของจีนในจุลินทรีย์โดยกรดนิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตี โปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือโดยกรดนิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ ตามข้อถือสิทธิที่ 1 โดยมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลงตามการ แสดงรายละเอียด a) ที่ซึ่งจีนเป็นชนิดเฮเทอโรโลกัสตามที่เกี่ยวข้องกับกรด นิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์

25. จุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 24 ในที่ซึ่งการควบคุมการถอด รหัสของจีนในจุลินทรีย์โดยกรดนิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือโดยกรด นิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 โดยมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะที่ถูกเปลี่ยน แปลงตามการแสดงรายละเอียด a) ได้บรรลุถึงโดย b1) การนำเข้าไปของกรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่าซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตาม ข้อถือสิทธิที่ 1 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะที่ถูกเปลี่ยน แปลง สู่ในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการถอดรหัสของจีนจากภายในหนึ่งหรือ มากกว่าได้เกิดขึ้นภายใต้การควบคุมของกรดนิวคลีอิคที่นำเข้าไปซึ่งมี แอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตี โปรโมเตอร์จำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลง หรือ b2) การนำเข้าไปของจีนหนึ่งหรือมากกว่าสู่ในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการถอด รหัสของจีนที่นำเข้าไปหนึ่งหรือมากกว่าได้เกิดขึ้นภายใต้การควบคุมของกรด นิวคลีอิคจากภายในซึ่งมีแอคติวิตีโปร โมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หาก เหมาะสมโดยมีแอคติวิตีโปร โมเตอร์จำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลง หรือ b3) การนำเข้าไปของส่วนสร้างกรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่า ซึ่งประกอบรวมด้วย กรดนิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หากเหมาะสมโดย มีแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลง และเชื่อมต่อทางหน้าที่กับ กรดนิวคลีหนึ่งหรือมากกว่าที่จะถูกถอดรหัส สู่ในจุลินทรีย์

26. จุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 24 หรือ 25 ซึ่งมีอัตราการถอด รหัสที่เพิ่มขึ้นหรือทำให้เกิดขึ้นของอย่างน้อยจีนหนึ่งโดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ ในที่ซึ่ง ah) แอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะในจุลินทรีย์ของกรดนิวคลีอิคจากภายในซึ่งมี แอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ซึ่งควบคุมการถอดรหัสของจีนจาก ภายใน ได้ถูกทำให้เพิ่มขึ้นโดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ หรือ bh) การถอดรหัสของจีนในจุลินทรีย์ได้ถูกควบคุมโดยกรดนิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตี โปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือโดยกรดนิวคลีอิคที่มีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ จำเพาะที่เพิ่มขึ้นตามการแสดงรายละเอียด ah) ที่ซึ่งจีนเป็นชนิดเฮเทอโรโลกัส ตามที่เกี่ยวข้องกับกรดนิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์

27. จุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 26 ในที่ซึ่งกรมควบคุมการถอด รหัสของจีนในจุลินทรีย์โดยกรดนิวคลีอิคลซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือโดยกรด นิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 โดยมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะที่ถูกเปลี่ยน แปลง ตามการแสดงรายละเอียด a) ได้บรรลุถึงโดย bh1) การนำเข้าไปของกรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่าซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตาม ข้อถือสิทธิที่ 1 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะที่เพิ่มขึ้น สู่ใน จีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการถอดรหัสของจีนจากภายในหนึ่งหรือมากกว่าได้ เกิดขึ้นภายใต้การควบคุมของกรดนิวคลีอิคที่นำเข้าไปซึ่งมีแอคติวิตี โปรโมเตอร์ หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตีโปรโมเตอ์จำเพาะที่เพิ่มขึ้น หรือ bh2) การนำเข้าไปของจีนหนึ่งหรือมากกว่าสู่ในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการถอด รหัสของจีนที่นำเข้าไปหนึ่งหรือมากกว่าได้เกิดขึ้นภายใต้การควบคุมของกรด นิวคลีอิคจากภายในซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หาก เหมาะสมโดยมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะที่เพิ่มขึ้น หรือ bh3) การนำเข้าไปของส่วนสร้างกรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่า ซึ่งประกอบรวม ด้วยกรดนิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หากเหมาะสม โดยมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะที่เพิ่มขึ้น และเชื่อมต่อทางหน้าที่กับกรด นิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่าที่จะถูกถอดรหัส สู่ในจุลินทรีย์

28. จุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 24 หรือ 25 ซึ่งมีอัตราการถอด รหัสที่ลดลงของอย่างน้อยจีนหนึ่งโดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ ในที่ซึ่ง ar) แอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะในจุลินทรีย์ของอย่างน้อยกรดนิวคลีอิคจากภายใน หนึ่งซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ซึ่งควบคุมการถอดรหัสของ อย่างน้อยจีนจากภายในหนึ่ง ได้ถูกลดลงโดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ หรือ br) กรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่าที่มีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ที่ลดลงตามการแสดงราย ละเอียด a) ได้ถูกนำเข้าไปสู่ในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการถอดรหัสของ อย่างน้อยจีนจากภายในหนึ่ง ได้เกิดขึ้นภายใต้การควบคุมของกรดนิวคลีอิคที นำเข้าไปโดยมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ที่ลดลง

29. จุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรม ที่ซึ่งการดัดแปรทางพันธุกรรมได้นำไปสู่การ เปลี่ยนแปลงหรือการทำให้เกิดขึ้นของอัตราการแสดงออกของอย่างน้อยจีนหนึ่งโดยเปรียบเทียบ ไวลด์ไทป์ และได้ขึ้นกับ c) การเปลี่ยนแปลงแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะในจุลินทรีย์ของอย่างน้อยหน่วย การแสดงออกจากภายในหนึ่งตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ซึ่งควบคุมการแสดง ออกอย่างน้อยจีนจากภายในหนึ่งโดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ หรือ d) การควบคุมการแสดงออกของจีนในจุลินทรีย์โดยหน่วยการแสดงออกตามข้อถือ สิทธิที่ 2 หรือ 3 หรือโดยหน่วยการแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 โดยมี แอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลงตามการแสดงรายละเอียด a) ที่ ซึ่งจีนเป็นชนิดเฮเทอโรโลกัสตามที่เกี่ยวข้องกับหน่วยการแสดงออก

30. จุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 29 ในที่ซึ่งการควบคุมการแสดง ออกของจีนในจุลินทรีย์โดยหน่วยการแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หรือโดยหน่วยการแสดง ออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 โดยมีแอคติวิการแสดงออกจำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลงตามการแสดงราย ละเอียด a) ได้บรรลุถึงโดย d1) การนำเข้าไปของหน่วยการแสดงออกหนึ่งหรือมากกว่าตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลง สู่ใน จีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการแสดงออกของจีนจากภายในหนึ่งหรือมากกว่าได้ เกิดขึ้นภายใต้การควบคุมของหน่วยการแสดงออกที่นำเข้าไปตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลง หรือ d2) การนำเข้าไปของจีนหนึ่งหรือมากกว่าสู่ในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการแสดง ออกของจีนที่นำเข้าไปหนึ่งหรือมากกว่าได้เกิดขึ้นภายใต้การควบคุมของหน่วย การแสดงออกจากภายในตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หากเหมาะสมโดยมี แอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลง หรือ d3) การนำเข้าไปของส่วนสร้างกรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่า ซึ่งประกอบรวมด้วย หน่วยการแสดงออกตามข้อถือสิทธที่ 2 หรือ 3 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตี การแสดงออกจำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลง และเชื่อมต่อทางหน้าที่กับกรด นิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่าที่จะถูกแสดงออก สู่ในจุลินทรีย์

31. จุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 29 หรือ 30 โดยมีอัตราการแสดง ออกที่เพิ่มขึ้นหรือทำให้เกิดขึ้นของอย่างน้อยจีนหนึ่งโดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ ในที่ซึ่ง ch) แอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะในจุลินทรีย์ของอย่างน้อยหน่วยการแสดงออก จากภายในหนึ่งตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ซึ่งควบคุมการแสดงออกของจีนจาก ภายใน ได้ถูกทำให้เพิ่มขึ้นโดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ หรือ dh) การแสดงออกของจีนในจุลินทรีย์ได้ถูกควบคุมโดยหน่วยการแสดงออกตามข้อ ถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หรือโดยหน่วยการแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่มี แอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่เพิ่มขึ้นตามการแสดงรายละเอียด a) ที่ซึ่งจีน เป็นชนิดเฮเทอโรโลกัสตามที่เกี่ยวข้องกับหน่วยการแสดงอออก

32. จุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 31 ในที่ซึ่งการควบคุมการแสดง ออกของจีนในจุลินทรีย์โดยหน่วยการแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หรือโดยหน่วยการแสดง ออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 โดยมีแอคติวิการแสดงออกจำเพาะที่เพิ่มขึ้นตามการแสดงรายละเอียด a) ได้บรรลุถึงโดย dh1) การนำเข้าไปของหน่วยการแสดงออกหนึ่งหรือมากกว่าตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หากเหมาะสม โดยมีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่เพิ่มขึ้น สู่ใน จีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการแสดงออกของจีนจากภายในหนึ่งหรือมากกว่า ได้เกิดขึ้นภายใต้การควบคุมของหน่วยการแสดงออกที่นำเข้าไปตามข้อถือ สิทธิที่ 2 หรือ 3 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่เพิ่มขึ้น หรือ dh2) การนำเข้าไปของจีนหนึ่งหรือมากกว่าสู่ในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการแสดง ออกของจีนที่นำเข้าไปหนึ่งหรือมากกว่าได้เกิดขึ้นภายใต้การควบคุมของ หน่วยการแสดงออกจากภายในตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หากเหมาะสมโดย มีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่เพิ่มขึ้น หรือ dh3) การนำเข้าไปของส่วนสร้างกรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่า ซึ่งประกอบรวม ด้วยหน่วยการแสดงออกตามข้อถือสิทธที่ 2 หรือ 3 หากเหมาะสมโดยมี แอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่เพิ่มขึ้น และเชื่อมต่อทางหน้าที่กับกรด นิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่าที่จะถูกแสดงออก สู่ในจุลินทรีย์

33. จุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 29 หรือ 30 โดยมีอัตราการแสดง ออกที่ลดลงของอย่างน้อยจีนหนึ่งโดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ ในที่ซึ่ง cr) แอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะในจุลินทรีย์ของอย่างน้อยหน่วยการแสดงออกจาก ภายในหนึ่งตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ซึ่งควบคุมการแสดงออกของอย่างน้อย จีนจากภายในหนึ่ง ได้ถูกลดลงโดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ หรือ dr) หน่วยการแสดงออกหนึ่งหรือมากกว่าตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่มีแอคติวิตีการ แสดงออกที่ลดลงได้ถูกนำเข้าไปสู่ในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการแสดงออก ของอย่างน้อยจีนหนึ่งได้เกิดขึ้นภายใต้การควบคุมของหน่วยการแสดงออกที่นำ เข้าไปตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 โดยมีแอคติวิตีการแสดงออกที่ลดลง

34. จุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมซึ่งประกอบรวมด้วยหน่วยการแสดงออกตามข้อถือ สิทธิที่ 2 หรือ 3 และเชื่อมต่อกทางหน้าที่กับจีนที่จะถูกแสดงออก ที่ซึ่งจีนเป็นชนิดเฮเทอโรโลกัสตามที่ เกี่ยวข้องกับหน่วยการแสดงออก

35. จุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 3 ซึ่งประกอบรวมด้วยแคสเสต การแสดงออกตามข้อใดข้อหนึ่งของข้อถือสิทธิที่ 20 ถึง 22

36. จุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมตามข้อใดข้อหนึ่งของข้อถือสิทธิที่ 24 ถึง 35 ในที่ ซึ่งจีนได้ถูกคัดเลือกจากกลุ่มของกรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของกรด อะมิโนชนิดโปรตีโนเจนิคและนอน-โปรตีโนเจนิค, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจาก วิถีชีวสังเคราะห์ของนิวคลีโอไทด์และนิวคลีโอไซด์, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจาก วิถีชีวสังเคราะห์ของกรดอินทรีย์, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของลิพิด และกรดไขมัน, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของไดออล, กรดนิวคลีอิค ซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของคาร์โบไฮเดรต, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัส โปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของสารประกอบอะโรมาติค, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจาก วิถีชีวสังเคราะห์ของวิตามิน, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของ โคแฟกเตอร์ และกรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของเอนไซ์ ที่ซึ่งหาก เหมาะสมจีนอาจประกอบรวมด้วยส่วนควบคุมอื่นต่อไปอีก

37. จุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 36 ในที่ซึ่งโปรตีนจาก วิถีชีวสังเคราะห์ของกรดอะมิโน ได้ถูกคัดเลือกจากกลุ่มของแอสปาร์เตตไคเนส, แอสปาร์เตต- เซมิแอลดีไฮด์ไฮโดรจีเนส, ไดอะมิโนพิมีเลตดีไฮโดรจีเนส, ไดอะมิโนพิมีเลตดีคาร์บอกซิเลส, ไดไฮโดรไดพิโคลิเนตซินธีเทส, ไดไฮโดรไดพิโคลิเนตรีดัคเทส, กลีเซอรัลดีไฮด์-3-ฟอสเฟต ดีไฮโดรจีเนส, 3-ฟอสฟอกลีเซอเรตไคเนส, ไพรูเวตคาร์บอกซิเลส, ไทรโอสฟอสเฟตไอโซเมอเรส, ตัวควบุคมการถอดรหัส LuxR, ตัวควบคุมการถอดรหัส LysR1, ตัวควบคุมการถอดรหัส LysR2, มาเลต-ควิโนนออกซิโดรีดัคเทส, กลูโคส-6-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส, 6-ฟอสฟอกลูโคเนต ดีไฮโดรจีเนส, ทรานสคีโทเลส, ทรานสแอลโดเลส, ฮอมอเซรีน O-อะเซทิลทรานสเฟอเรส, ซิสตาไธโอนีนแกมมา-ซินเธส, ซิสตาไธโอนีนบีตา-ไลเอส, เซรีนไฮดรอกซีเมธิลทรานสเฟอเรส, O-อะเซทิลฮอมอเซรีนซัลฟ์ไฮดริเลส, เมธิลีนเททราไฮโดรฟอเลตรีดัคเทส, ฟอสฟอเซรีนอะมิโน ทรานสเฟอเรส, ฟอสฟอเซรีนฟอสฟาเทส, เซรีนอะเซทิลทรานสเฟอเรส, ฮอมอเซรีนดีไฮโดรจีเนส, ฮอมอเซรีนไคเนส, ธรีโอนีนซินเธส, ตัวพาขนส่งธรีโอนีนออก, ธรีโอนีนดีไฮดราเทส, ไพรูเวต ออกซิเดส, ตัวขนส่งไลซีนออก, ไบโอทินไลเกส, ซิสเตอีนซินเธส I, ซิสเตอีนซินเธส II, เมไธโอนีน ซินเธสชนิดที่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12, แอคติวิตีเมไธโอนีนซินเธสชนิดที่ไม่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12, ซัลเฟตอะดีนิลิลทรานสเฟอเรสหน่วยย่อย 1 และ 2, ฟอสฟออะดีโนซีน-ฟอสฟอซัลเฟตรีดัคเทส, เฟอร์รีดอกซิน-ซัลไฟต์รีดัคเทส, เฟอร์รีดอกซิน NADP รีดัคเทส, 3-ฟอสฟอกลีเซอเรตดีไฮโดรจีเนส, ตัวควบคุม RXA00655, ตัวควบคุม RXN2910, อาร์จินิล-tRNA ซินธีเทส, ฟอสฟออีนอลไพรูเวต คาร์บอกซิเลส, โปรตีนการไหลออกของธรีโอนีน, เซรีนไฮดรอกซีเมธิลทรานสเฟอเรส, ฟรุคโทส- 1,6-บิสฟอสฟาเทส, โปรตีนเกี่ยวกับรีดัคชันของซัลเฟต RXA077, โปรตีนเกี่ยวกับรีดัคชันของซัลเฟต RXA248, โปรตีนเกี่ยวกับรีดัคชันของซัลเฟต RXA248, โปรตีน OpcA, 1-ฟอสฟอฟรุคโทไคเนส และ 6-ฟอสผอฟรุคโทไคเนส

38. วิธีสำหรับการเตรียมผลิตภัณฑ์ชีวสังเคราะห์โดยการเลี้ยงจุลินทรีย์ที่ดัดแปรทาง พันธุกรรมตามข้อใดข้อหนึ่งของข้อถือสิทธิที่ 24 ถึง 37

39. วิธีสำหรับการเตรียมไลซีนโดยการเลี้ยงจุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมตามข้อใด ข้อหนึ่งของข้อถือสิทธิที่ 24, 25, 31 หรือ 32 ในที่ซึ่งจีน ได้ถูกคัดเลือกจากกลุ่มของกรดนิวคลีอิคซึ่ง ประมวลรหัสแอสปาร์เตตไคเนส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสแอสปาร์เตต-เซมิแอลดี ไฮด์ ดีไฮโดรจีเนส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสไดอะมิโนพิมีเลตดีไฮโดรจีเนส, กรดนิวคลีอิคซึ่ง ประมวลรหัสไดอะมิโนพิมีเลตดีคาร์บอกซิเลส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสไดไฮโดรไดพิโคลิเนต ซินธีเทส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสไดไฮโดรไดพิโคลิเนตรีดัคเทส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวล รหัสกลีเซอรัลดีไฮด์-3-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัส 3-ฟอสฟอกลีเซอเรต ไคเนส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสไพรูเวตคาร์บอกซิเลส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสไทรโอส ฟอสเฟตไอโซเมเรส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสตัวควบคุมการถอดรหัส LuxR, กรดนิวคลีอิคซึ่ง ประมวลรหัสตัวควบคุมการถอดรหัส LysR1, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสตัวควบคุมการถอดรหัส LysR2, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสมาเลต-ควิโนนออกซิโดรีดัคเทส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวล รหัสกลูโคส-6-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัส 6-ฟอสฟอกลูโคเนต ดีไฮโดรจีเนส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสทรานสคีโทเลส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัส ทรานสแอลโดเลส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสตัวขนส่งไลซีนออก, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัส ไบโอทินไลเกส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสอาร์จินิล-tRNA ซินธีเทส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวล รหัสฟอสฟออีนอลไพรูเวตคาร์บอกซิเลส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสฟรุคโทส-1,6- บิสฟอสฟาเทส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีน OpcA, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวล 1-ฟอสฟอฟรุคโทไคเนส และกรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัส 6-ฟอสฟอฟรุคโทไคเนส

40. วิธีตามข้อถือสิทธที่ 39 ในที่ซึ่งจุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมซึ่งนอกจากนี้ยังมี แอคติวิตีที่เพิ่มขึ้นโดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ ของอย่างน้อยแอคติวิตีหนึ่งที่ดัคเลือกจากกลุ่มของ แอคติวิตีแอสสปาร์เตตไคเนส, แอคติวิตีแอสปาร์เตต-เซมิแอลดีไฮด์ดีไฮโดรจีเนส, แอคติวิตีไดอะมิโน พิมีเลตดีไฮโดรจีเนส, แอคติวิตีไดอะมิโนพิมีเลตดีคาร์บอกซิเลส, แอคติวิตีไดไฮโดรไดพิโคลิเนต ซินธีเทส, แอคติวิตีไดไฮโดรไดพิโคสิเนตรีดัคเทส, แอคติวิตีกลีเซอรับดีไฮด์-3-ฟอสเฟต ดีไฮโดรจีเนส, แอคติวิตี 3-ฟอสฟอกลีเซอเรตไคเนส, แอคติวิตีไพรูเวตคาร์บอกซิเลส, แอคติวิตี ไทร โอสฟอสเฟตไอไซเมอเรส, แอคติวิตีของตัวควบคุมการถอดรหัส LuxR, แอคติวิตีของตัวควบคุม การถอดรหัส LysR1, แอคติวิตีของตัวควบคุมการถอดรหัส LysR2. แอคติวิตีมาเลต-ควิโนนออกซิโด รีดัคเทส, แอคติวิตีกลูโคส-6-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส, แอคติวิตี 6-ฟอสฟอกลูโคเนตอีไฮโดรจีเนส, แอคติวิตีทรานสคีโทเลส, แอคติวิตีทรานสแอลโดเลส, แอคติวิตีตัวขนส่งไลซีนออก, แอคติวิตี อาร์จินิล-tRNA ซินธีเทส, แอคติวิตีฟอสฟออีนอลไพรูเวตคาร์บอกซิเลส, แอคติวิตีฟรุคโทส-1,6- บิสฟอสฟาเทส, แอคติวิตีโปรตีน OpcA, แอคติวิตี 1-ฟอสฟอฟรุคโทไคเนส, แอคติวิตี 6-ฟอสฟอฟรุคโทไคเนส และแอคติวิตีไบโอทินไลเกส

41. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 39 หรือ 40 ในที่ซึ่งจุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมซึ่งนอกจาก นี้ยังมีแอคติวิตีที่ลดลงโดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ ของอย่างน้อยแอคติวิตีหนึ่งที่คัดเลือกจากกลุ่ม ของแอคติวิตีธรีโอนีนดีไฮดราเทส, แอคติวิตีฮอมอเซรีน O-อะเซทิลทรานสเฟอเรส, แอคติวิตี O-อะเซทิลฮอมอเซรีนซัลฟ์ไฮดริเลส, แอคติวิตีฟอสฟออีนอลไพรูเวตคาร์บอกซีไคเนส, แอคติวิตี ไพรูเวตออกซิเดส, แอคติวิตีฮอมอเซรีนไคเนส, แอคติวิตีฮอมอเซรีนดีไฮโดรจีเนส, แอคติวิตีตัว ขนส่งธรีโอนีนออก, แอคติวิตรีโปรตีนการไหลออกของธรีโอนีน, แอคติวิตีแอสปาราจิเนส, แอคติวิตี แอสปาร์เตตดีคาร์บอกซิเลส และแอคติวิตีธรีโอนีนซินเธส

42. วิธีสำหรับการเตรียมเมไธโอนีนโดยการเลี้ยงจุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมตาม ข้อใดข้อหนึ่งของข้อถือสิทธิที่ 24, 25, 31 หรือ 32 ในที่ซึ่งจีนได้ถูกคัดเลือกจากกลุ่มของกรดนิวคลีอิค ซึ่งประมวลรหัสแอสปาร์เตตไคเนส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสแอสปาร์เตต-เซมิแอลดีไฮด์ ดีไฮโดรจีเนส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสฮอมอเซรีนดีไฮโดรจีเนส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวล รหัสกลีเซอรัลดีไฮด์-3-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัส 3-ฟอสฟอกลีเซอเรต ไคเนส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสไพรูเวตคาร์บอกซิเลส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัส ไทรโอสฟอสเฟตไอโซเมอเรส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสฮอมอเซรีน O-อะเซทิลทรานสเฟอเรส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสซิสตาไธโอนีนแกมมา-ซินเธส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัส ซิสตาไธโอนีนบีตา-ไลเอส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสเซรีนไฮดรอกซีเมธิลทรานสเฟอเรส, กรด นิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัส O-อะเซทิลฮอมอเซรีนซัลฟ์ไฮดริเลส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสเมธิลีน เททราไฮโดรฟอเลตรีดัคเทส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสฟอสฟอเซรีนอะมิโนทรานสเฟอเรส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสฟอสฟอเซรีนฟอสฟาเทส, กรดนิวคลิอิคซึ่งประมวลรหัสเซรีนอะเซทิล ทรานสเฟอเรส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสซิสเตอีนซินเธส I, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัส ซิสเตอีนซินเธอ II, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสเมไธโอนีนซินเธสชนิดที่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสเมไธโอนีนซินเธสชนิดที่ไม่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12, กรดนิวคลีอิคซึ่ง ประมวลรหัสซัลเฟตอะดีนิลิลทรานสเฟอเรส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสฟอสฟออะดีโนซีน ฟอสฟอซัลเฟตรีดัคเทส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสเฟอร์รีดอกซิน-ซัลไฟต์รีดัดเทส, กรดนิวคลีอิค ซึ่งประมวลรหัสเฟอร์รีดอกซิน NADPH-รีดัคเทส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสแอคติวิตี เฟอร์รีดอกซิน, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนเกี่ยวกับรีดัดชันของซัลเฟต RXA077, กรด นิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนเกี่ยวกับรีดัคชันของซัลเฟต RXA248, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัส โปรตีนเกี่ยวกับรีดัคชันของซัลเฟต RXA247, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสตัวควบคุม RXA0655 และกรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสตัวควบคุม RXN2910

43. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 42 ในที่ซึ่งจุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมซึ่งนอกจากนี้ยังมี แอคติวิตีที่เพิ่มขึ้น โดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ ของอย่างน้อยแอคติวิตีหนึ่งที่คัดเลือกจากกลุ่มของ แอคติวิตีแอสปาร์เตตไคเนส, แอคติวิตีแอสปาร์เตต-เซมิแอลดีไฮด์ดีไฮโดรจีเนส, แอคติวิตีฮอมอเซรีน ดีไฮโดรจีเนส, แอคติวิตีกลีเซอรัลดีไฮด์-3-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส, แอคติวิตี 3-ฟอสฟอกลีเซอเรต ไคเนส, แอคติวิตีไพรูเวตคาร์บอกซิเลส, แอคติวิตีไทรโอสฟอสเฟตไอโซเมเรส, แอคติวิตี ฮอมอเซรีน O-อะเซทิลทรานสเฟอเรส, แอคติวิตีซิสตาไธโอนีนแกมมา-ซินเธส, แอคติวิตีซิสตา ไธโอนีนบีตา-ไลเอส, แอคติวิตีเซรีนไฮดรอกซีเมธิลทรานสเฟตเรส, แอคติวิตี O-อะเซทิลฮอมอเซรีน ซัลฟ์ไฮดริเลส, แอคติวิตีเมธิลีนเททราไฮโดรฟอเลตรีดัคเทส, แอคติวิตีฟอสฟอเซรีนอะมิโน ทรานสเฟอเรส, แอคติวิตีฟอสฟอเซรีนฟอสฟาเทส, แอคติวิตีเซรีนอะเซทิลทรานสเฟอเรส, แอคติวิตี ซิสเตอีนซินเธส I, แอคติวิตีซิสเตอีนซินเธส II, แอคติวิตีเมไธโอนีนซินเธสชนิดที่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12, แอคติวิตีเมไธโอนีนซินเธสชนิดที่ ไม่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12, แอคติวิตีซัลเฟตอะดีนิลิล ทรานสเฟอเรส, แอคติวิตีฟอสฟออะดีโนซีน-ฟอสฟอซัลเฟตรีดัคเทส, แอคติวิตีเฟอร์รีดอกซิน- ซัลไฟต์รีดัคเทส, แอคติวิตีเฟอร์รีดอกซิน NADPH-รีดัดเทส, แอคติวิตีเฟอร์รีดอกซิน, แอคติวิตีของ โปรตีนเกี่ยวกับรีดัคชันของซัลเฟต RXA077, แอคติวิตีของโปรตีนเกี่ยวกับรีดัคชันของซัลเฟต RXA248, แอคติวิตีของโปรตีนเกี่ยวกับรีดัคชันของซัลเฟต RXA247, แอคติวิตีของตัวควบคุม RXA655, และแอคติวิตีของตัวควบคุม RXN2910

44. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 42 หรือ 43 ในที่ซึ่งจุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมซึ่งนอกจาก นี้ยังมีแอควติวิตีที่ลดลงโดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ ของอย่างน้อยแอคติวิตีหนึ่งที่คัดเลือกจากกลุ่ม ของแอคติวิตีฮอมอเซรีนไคเนส, แอคติวิตีธรีโอนีนดีไฮดราเทส, แอคติตวิตีธรโอนีนซินเธส, แอคติวิตี เมโซ-ไดอะมิโนพิมีเลต D-ดีไฮโดรจีเนส, แอคติวิตีฟอสฟออีนอลไพรูเวตคาร์บอกซีไคเนส, แอคติวิตี ไพรูเวตออกซิเดส, แอคติวิตีไดไฮโดรไดพิโคลิเนตซินเธส, แอคติวิตีไดไฮโดรพิโคลิเนตรีดัดเทส และแอคติวิตีไดอะมิโนพิโคลิเนตดีคาร์บอกซิเลส

45. วิธีสำหรับการเตรียมธรีโอนีนโดยการเลี้ยงจุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมตามข้อ ใดข้อหนึ่งของข้อถือสิทธิที่ 24, 25, 31 หรือ 32 ในที่ซึ่งจีนได้ถูกคัดเลือกจากกลุ่มของกรดนิวคลีอิคซึ่ง ประมวลรหัสแอสปาร์เตตไคเนส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสแอสปาร์เตต-เซมิแอลดีไฮด์ ดีไฮโดรจีเนส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสกลีเซอรัลดีไฮด์-3-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส, กรดนิวคลีอิค ซึ่งประมวลรหัส 3-ฟอสฟอกลีเซอเรตไคเนส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสไพรูเวตคาร์บอกซิเลส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสไทรโอสฟอสเฟตไอโซเมอเรส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัส ฮอมอเซรีนไคเนส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสธรีโอนีนซินเธส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัส ตัวพาขนส่งธรีโอนีนออก, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสกลูโคล-6-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส, กรด นิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสทรานสแอลโคเลส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสทรานสคีโทเลส, กรด นิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสมาเลต-ควิโนนออกซิโดรีดัคเทส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัส 6-ฟอสฟอกลูโคเนตดีไฮโดจีเนส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสตัวขนส่งไลซวีนออก, กรดนิวคลีอิค ซึ่งประมวลหรัสไบโอทินไลเกส, กรดนิวอิคซึ่งประมวลรหัสฟอสฟออีนอลไพรูเวตคาร์บอกซิเลส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนการไหลออกของธรีโอนีน, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัส ฟรุคโทส-1,6-บิสฟอสฟาเทส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีน OpcA, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวล รหัส 1-ฟอสฟอฟรุคโทโคเนส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัส 6-ฟอสฟอฟรุคโทไคเนส และกรด นิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสฮอมอเซรีนดีไฮโดรจีเนส

46. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 45 ในที่ซึ่งจุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธ์กรรมซึ่งนอกจากนี้ยังมี แอคติวิตีที่เพิ่มขึ้นโดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ ของอย่างน้อยแอตติวิตีหนึ่งที่คัดเลือกจากกลุ่มของ แอตติวิตีแอสปาร์เตตไคเนส, แอตติวิตีแอสปาร์เตต-เซมิแอลดีไฮด์ไฮโดรจีเนส, แอตติวิตี กลีเซอรัลดีไฮด์-3-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส, แอคติวิตี 3-ฟอสฟอกลีเซอเรตไคเนส, แอตติวิตีไพรูเวต คาร์บอกซิเลส, แอคติวิตีไทรโอสฟอสเฟตไอโซเมอเรส, แอคตีวิตีธรีโอนีนซินเธส, แอคติวิตีของ ตัวพาขนส่งธรีโอนีนออก, แอคติวิดีทรานสแอลโดเลส, แอคติวิตีทรานสคีโทเลส, แอคติวิตีกลูโคส-6- ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส, แอคติวิตีมาเลต-ควิโนนออกซิโดรีดัคเทส, แอคติวิตีฮอมอเซรีนไคเนส, แอคติวิตีไบโอทินไลเกส, แอคติวิตีฟอสฟออีนอลไพรูเวตคาร์บอกซิเลส, แอคติวิตีโปรตีนการไหล ออกของธรีโอนีน, แอคตีวิตีโปรตีน OpcA, แอคติวิตี 1-ฟอสฟอฟรุคโทรไคเนส, แอคติวิตี 6-ฟอสฟอฟรุคโทไคเนส, แอคติวิตีฟรุคโทส-1,6-บิสฟอสฟาเทส, แอคติวิตี 6-ฟอสฟอกลูโคเนต ดีไฮโดรจีเนส และแอคติวิตีฮอมอเซรีนดีไฮโดรจีเนส

47. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 45 หรือ 46 ในที่ซึ่งจุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมซึ่งนอกจาก นี้ยังมีแอคติวิตีที่ลดลงโดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ ของอย่างน้อยแอคติวิตีหนึ่งที่คัดเลือกจากกลุ่ม ของแอคติวิตีธรีโอนีนดีไฮดราเทส, แอคติวิตีฮอมอเซรีน O-อะเซทิลทรานสเฟอเรส, แอคติวิตีเซรีน ไฮดรอกซีเมธิลทรานสเฟอเรส, แอคติวิตี O-อะเซทิลฮอมอเซรีนซัลฟ์ไฮดริเลส, แอคติวิตีเมโซ- ไดอะมิโนพิมีเลต D-ดีไฮโดรจีเนส, แอคติวิตีฟอสฟออีนอลไพรูเวตคาร์บอกซีไคเนส, แอคติวิตี ไพรูเวตออกซิเดส, แอคติวิตีไดไฮโดรไดพิโคลิเนตซินเธส, แอคติวิตีไดไฮโดรไดพิโคลิเนตรีดัคเทส, แอคติวิตีแอสปาราจิเนส, แอคตีวิตีแอสปาร์เตตดีคาร์บอกซิเลส, แอคติวิตีตัวขนส่งไลซีนออก, แอคติวิตีอะซีโตแลคเทตซินเธส, แอคติวิตีคีทอล-แอซิดรีดัคโทไอโซเมอเรส, แอคติวิตีอะมิโน ทรานสเฟอเรสสายกิ่งก้าน, แอคติวิตีเมไธโอนีนซินเธสชนิดที่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12, แอคติวิตี เมไธโอนีนซินเธสชนิดที่ไม่ขึ้นกับ โคเอนไซม์ B12, แอคติวิตีไดไฮดรอกซี-แอซิดดีไฮดราเทส และ แอคติวิตีไดอะมิโนพิโคลิเนตดีคาร์บอกซิเลส

48. วิธีตามข้อใดข้อหนึ่งของข้อถือสิทธิที่ 38 ถึง 47 ในที่ซึ่งผลิตภัณฑ์ชีวสังเคราะห์ได้ ถูกแยก และที่ซึ่งเหมาะสมได้ถูกทำให้บริสุทธิ์จากตัวกลางเลี้ยงหลัง และ/หรือ ระหว่างขั้นตอนการ เลี้ยง