TH83891A - หน่วยแสดงออก Pgro - Google Patents

Abstract

DC60 (26/04/49) การประดิษฐ์นี้เกี่ยวข้องกับการใช้ลำดับกรดนิวคลีอิคสำหรับควบคุมการถอดรหัสและการ แสดงออกของจีน โปรโมเตอร์และหน่วยแสดงออกชนิดใหม่โดยตัวมันเอง วิธีสำหรับแปรเปลี่ยน หรือก่ออัตราการถอดรหัส และ/หรือ อัตราการแสดงออกของจีน แคสเสทแสดงออกซึ่งประกอบรวม ด้วย จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมที่มีการแปรเปลี่ยนหรือก่ออัตราการถอดรหัส และ/หรือ อัตราการแสดงออก และวิธีสำหรับเตรียมผลิตภัณฑ์การสังเคราะห์ทางชีวภาพโดยการ เพาะเลี้ยงจุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรม การประดิษฐ์นี้เกี่ยวข้องกับการใช้ลำดับกรดนิวคลีอิคสำหรับควบคุมการถอดรหัสและการ แสดงออกของจีน โปรโมเตอร์และหน่วยแสดงออกชนิดใหม่โดยตัวมันเอง วิธีสำหรับแปรเปลี่ยน หรือก่ออัตราการถอดรหัส และ/หรือ อัตราการแสดงออกของจีน แคสเสทแสดงออกซึ่งประกอบรวม ด้วย จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมที่มีการแปรเปลี่ยนหรือก่ออัตราการถอดรหัส และ/หรือ อัตราการแสดงออก และวิธีสำหรับเตรียมผลิตภัณฑ์การสังเคราะห์ทางชีวภาพโดยการ เพาะเลี้ยงจุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรม

Claims (54)

1. การใช้กรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีซึ่งประกอบรวมด้วย A) ลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ. ID. NO. 1 หรือ B) ลำดับที่อนุพัทธ์จากลำดับนี้โดยการแทนที่ การสอดใส่หรือการตัดออกของนิวคลีโอไทด์ และมีความเหมือนของอย่างน้อย 90 % ที่ระดับกรดนิวคลีอิคกับลำดับ SEQ. ID NO. 1 หรือ C) ลำดับกรดนิวคลีอิคที่ไฮบริไดซ์กับลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ. ID. NO. 1 ภายใต้ภาวะ เข้มงวด หรือ D) ชิ้นส่วนที่เทียบเท่าทางฟังค์ชันนอลของลำดับของ A) , B) หรือ C สำหรับการถอดรหัสจีน

2. การให้หน่วยแสดงออกซึ่งประกอบรวมด้วยกรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข้อ ถือสิทธิที่ 1 และเพิ่มเติมด้วยลำดับกรดนิวคลีอิคที่เชื่อมในลักษณะที่ทำงานได้เพื่อให้มั่นใจการแปล รหัสของโรโบนิวคลีนิคแอซิดสำหรับการแสดงออกของจีน

3. การใช้ตามข้อถือสิทธิที่ 2 โดยที่หน่วยแสดงออกประกอบรวมด้วย: E) ลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ. ID NO. 2 หรือ F) ลำดับที่อนุพันธ์จากลำดับนี้โดยการแทนที่ การสอดใส่หรือการตัดออกของนิวคลีโอไทด์ และมีความเหมือนของอย่างน้อย 90 % ที่ระดับคลีอิคกับลำดับกรด SEQ ID NO. 2 หรือ G) ลำดับกรดคลีอิคที่ไฮบริไดซ์กับลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ. ID. NO. 2 ภายใต้ภาวะ เข้มงวด หรือ H) ชิ้นส่วนที่เทียบเท่าทางฟังค์ชันนอลของลำดับของ E) , F) หรือ G)

4. การใช้ตามข้อถือสิทธิที่ 3 โดยที่หน่วยแสดงออกประกอบรวมด้วยกรดคลีอิคของลำดับ SEQ. ID. NO. 2

5. กรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีซึ่งประกอบด้วย A) ลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ. ID. NO. 1 หรือ B) ลำดับที่อนุพันธ์จากลำดับนี้โดยการแทนที่ การสอดใส่หรือการตัดออกของ นิวคลีโอไทด์และมีความเหมือนของอย่างน้อย 90% ที่ระดับกรดนิวคลีอิคกับ ลำดับกรด SEQ. ID. NO. 1 หรือ C) ลำดับกรดนิวคลีอิคที่ไฮบริไดซ์กับลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ. ID. NO.1 ภายใต้ ภาวะเข้มงวด หรือ D) ชิ้นส่วนที่เทียบเท่าทางฟังค์ชันนอลของลำดับของ A) , B) หรือ C) โดยมีข้อแม้ว่าไม่รวมกรดนิวคลีอิคที่มีลำดับ SEQ. ID. NO. 1

6. หน่วยแสดงออกซึ่งประกอบรวมด้วยกรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอควิตีตามข้อถือ สิทธิที่ 5 และเพิ่มเติมด้วยลำดับกรดนิวคลีอิคที่เชื่อมในลักษณะที่ทำงานได้เพื่อให้มั่นใจการแปลรหัส ของไรโบรนิวคลีอิคแอซิด

7. หน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 6 ซึ่งประกอบรวมด้วย E) ลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ. ID. NO. 2 หรือ F) ลำดับที่อนุพันธ์จากลำดับนี้โดยการแทนที่ การสอดใส่หรือการตัดออกของ นิวคลีโอไทด์และมีความเหมือนของอย่างน้อย 90% ที่ระดับกรดนิวคลีอิคกับ ลำดับ SEQ. ID. NO. 2 หรือ G) ลำดับกรดนิวคลีอิคที่ไฮบริไดซ์กับลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ. ID. NO.2 ภายใต้ ภาวะเข้มงวด หรือ H) ชิ้นส่วนที่เทียบเท่าทางฟังค์ชันนอลของลำดับของ E) , F) หรือ G) โดยมีข้อแม้ว่าไม่รวมกรดนิวคลีอิคที่มีลำดับ SEQ. ID. NO. 2

8. วิธีสำหรับแปรเปลี่ยน หรือก่ออัตราการถอดรหัสของจีนในจุลินทรีย์เมื่อเทียบกับไวด์ไทพ์ โดย a) แปรเปลี่ยนแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะในจุลินทรีย์ของกรดนิวคลีอิคจาก ภายในของการประดิษฐ์ที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ควบคุม การถอดรหัสของจีนจากภายในเมื่อเทียบกับไวด์ไทพ์ หรือ b) ควบคุมการถอดรหัสของจีนในจุลินทรีย์โดยกรดนิวคลีอิคของการประดิษฐ์ที่มี โปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือโดยกรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์ แอคติวิตีที่ไดรับการแปรเปลี่ยนไปตามข้อถือสิทธิที่ 1 a ) โดยที่จีนนั้น เฮเทอโรโลกัสในความสัมพันธ์ต่อกรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตี

9. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 8 โดยที่การควบคุมการถอดรหัสของจีนในจุลินทรีย์โดยกรดนิวคลีอิค ที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือโดยกรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข้อถือ สิทธิที่ 1 ที่มีการแปรเปลี่ยนโปรโมเตอร์แอคตวิตีจำเพาะตามการแสดงรายละเอียด a) นั้นได้โดย b1) ใส่กรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข้อถือสิทธิที่ 1 หนึ่งสายหรือ มากกว่าเข้าไป ในกรณีที่เหมาะสมที่มีแอคติวิตีของโปรโมเตอร์ที่จำเพาะที่ ไดรับการแปรเปลี่ยนเข้าไปในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการถอดรหัสของจีน ภายในหนึ่งตัวหรือมากกว่าเกิดภายใต้การควบคุมของกรดนิวคลีอิคที่มี โปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ให้เข้าไป ในกรณีที่เหมาะสมด้วย โปรโมเตอร์แอคติวิตีจำเพาะที่มีการแปรเปลี่ยน หรือ b2) ใส่จีนหนึ่งตัวหรือมากกว่าเข้าในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการถอดรหัสของจีน ที่ใส่เข้าไปหนึ่งตัวหรือมากกว่าเกิดภายใต้การควบคุมของกรดนิวคลีอิคภายใน ของการประดิษฐ์ที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข้อถือสิทธิที่ 1 ในกรณีที่ เหมาะสมด้วยแอคติวิตีของโปรโมเตอร์ที่จำเพาะที่มีการแปรเปลี่ยนหรือ b3) ใส่ส่วนสร้างกรดนิวคลีอิคหนึ่งสายหรือมากกว่าซึ่งประกอบรวมด้วยกรด นิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข้อถือสิทธิที่ 1 เข้าไป ในกรณีที่ เหมาะสมที่มีแอคติวิตีของโปรโมเตอร์จำเพาะที่มีการแปรเปลี่ยนและเชื่อมใน ลักษณะที่ทำงานได้กับกรดนิวคลีอิคหนึ่งสายหรือมากกว่าที่จะถอดรหัสเข้าไป ในจุลินทรีย์

10. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 8 หรือ 9 โดยที่การเพิ่มหรือก่ออัตราการถอดรหัสของจีนใน จุลินทรีย์เมื่อเทียบกับไวด์ไทพ์ ah) แอคติวิตีโปรโมเตอร์ที่จำเพาะในจุลินทรีย์ของกรดนิวคลีอิคจากภายในที่มีโปรโมเตอร์ แอคติวิตีตามข้อืถอสิทธิที่ 1 หรือที่ควบคุมการถอดรหัสของจีนจากภายนอกได้รับการ เพิ่มเมื่อเทียบกับไวด์ไทพ์ หรือ bh) การถอดรหัสของจีนในจุลินทรีย์ได้รับการควบคุมโดยกรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์ แอคติวิตีตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือ โดยกรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีจำเพาะที่ ได้รับการเพิ่มตามการแสดงรายละเอียด a) โดยที่จีนนั้นเฮเทอโลกัสในความสัมพันธ์ ต่อกรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตี

11. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 10 โดยที่การควบคุมการถอดรหัสของจีนในจุลินทรีย์โดยกรด นิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข้อืถอสิทธิที่ 1 หรือโดยกรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตี ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีจำเพาะที่ได้รับการเพิ่มตามการแสดงรายละเอียด a)นั้น ทำได้โดย bh1) ในกรดนิวคลีอิคของการประดิษฐ์นี้หนึ่งสายหรือมากกว่าที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีตาม ข้อถือสิทธิที่ 1ในกรณีที่เหมาะสมที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีที่ได้รับการเพิ่มเข้าไปใน จีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าเกิดการถอดรหัสของจีนจากภายในหนึ่งตัวหรือมากกว่า ภายใต้การควบคุมของกรดนิวคลีอิคของการประดิษฐ์ที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข้อ ถือสิทธิที่ 1 ที่ใส่เข้าไปในกรณีที่เหมาะสมด้วยโปรโมเตอร์แอคติวิตีจำเพาะที่ได้รับการ เพิ่ม หรือ bh2) ใส่จีนหนึ่งตัวหรือมากกว่าเข้าไปในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าเกิดการถอดรหัสของ จีนที่ใส่เข้าหนึ่งตัวหรือมากกว่าภายใต้การควบคุมของกรดนิวคลีอิคจากภายในที่มี โปรโมเตอร์แอคติวิตี ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ในกรณีที่เหมาะสมที่มีโปรโมเตอร์ แอคติวิตีจำเพาะที่เพิ่มขึ้น หรือ bh3) ใส่ส่วนสร้างกรดนิวคลีอิคหนึ่งตัวหรือมากกว่าซึ่งประกอบรวมด้วยกรดนิวคลีอิคของ การประดิษฐ์ที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตี ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ในกรณีที่เหมาะสมที่มี โปรโมเตอร์แอคติวิตีจำเพาะที่ได้รับการเพิ่มและเชื่อมในลักษณะที่ทำงานได้รับกรด นิวคลีอิคที่จะถอดรหัสหนึ่งสายหรือมากกว่าเข้าไปในจุลินทรีย์

12. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 8 หรือ 9 โดยที่การลดอัตราการถอดรหัสของจีนในจุลินทรีย์เมื่อ เทียบกับไวด์ไทพ์ ar) โปรโมเตอร์แอคติวิตีจำเพาะในจุลินทรีย์ของกรดนิวคลีอิคจากภายในที่มี โปรโมเตอร์แอคติวิตี ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ควบคุมการถอดรหัสของจีนจากภายใน ลดลงเมื่อเทียบกับไวด์ไทพ์ หรือ br) ใส่กรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีจำเพาะที่ลดลงอย่างที่ให้ไว้ในการแสดง รายละเอียด a) เข้าไปในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการถอดรหัสของจีนจากภายใน เกิดภายใต้การควบคุมของกรดนิวคลีอิคที่ใส่เข้าที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีที่ลดลง

13. วิธีสำหรับแปรเปลี่ยนหรือก่ออัตราการแสดงออกของจีนในจุลินทรีย์เมื่อเทียบกับ ไวด์ไทพ์โดย c) แปรเปลี่ยนแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะในจุลินทรีย์ของหน่งแสดงออก ตามข้อ ถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่ควบคุมการแสดงออกของจีนจากภายในเมื่อเทียบกับไวด์ไทพ์ หรือ d) ควบคุมการแสดงลักษณะของจีนในจุลินทรย์โดยหน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หรือโดยหน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ด้วยแอคติวิตีการ แสดงออกที่ได้รับการแปรเปลี่ยนอย่างที่ให้ไว้ในการแสดงรายละเอียด c) โดยที่จีน นั้นเฮเทอโรดลกัสในความสัมพนธ์กับหน่วยแสดงออก

14. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 13 โดยที่การควบคุมการแสดงออกของจีนในจุลินทรีย์โดยหน่วย แสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่มีแอคติวิตีการแสดงออกที่ได้รับการแปรเปลี่ยนตามการแสดง รายละเอียด a) ทำได้โดย d1) ใส่หน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิ ที่ 2 หรือ 3 หนึ่งหน่วยหรือมากกว่าเข้าไป ใน กรณีที่เหมาะสมที่มีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่ได้รับการแปรเปลี่ยนเข้าไปใน จีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการแสดงออกของจีนที่ใส่เข้าไปหนึ่งตัวหรือมากกว่าเกิด ภายใต้การควบคุมของหน่วยแสดงออกที่ให้เข้าไป หรือ d2) ใส่จีนหนึ่งตัวหรือมากกว่าเข้าในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการแสดงออกของจีนที่ใส่ เข้าไปหนึ่งตัวหรือมากกว่าเกิดภายใต้การควบคุมของหน่วยการแสดงออกภายใน ตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ในกรณีที่เหมาะสมด้วยแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่มี การแปรเปลี่ยน หรือ d3) ใส่ส่วนสร้างกรดนิวคลีอิคซึ่งประกอบรวมด้วยหน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ในกรณีที่เหมาะสมที่มีแอคติวิตีจำเพาะที่ได้รับการแปรเปลี่ยนและเชื่อมใน ลักษณะที่ทำงานได้กับกรดนิวคลีอิคหนึ่งสายหรือมากกว่าที่จะแสดงออก เข้าไปใน จุลินทรีย์

15. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 13 หรือ 14 โดยที่การเพิ่มหรือการก่ออัตราการแสดงออกของจีนใน จุลินทรีย์เมื่อเทียบกับไวด์ไทพ์ ch) เพิ่มแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะในจุลินทรีย์ของหน่วยแสดงออกภายในตามข้อถือ สิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่ควบคุมการแสดงออกของจีนจากภายในเมื่อเทียบกับไวด์ไทพ์ หรือ dh) ควบคุมการแสดงออกของจีนในจุลินทรีย์โดยหน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หรือโดยหน่วยแสดงออกที่มีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่ได้รับการเพิ่ม อย่างที่ให้ไว้ในการแสดงรายละเอียด a) โดยที่จีนนั้นเฮเทอโรโลกัสเมื่อเทียบกับ หน่วยแสดงออก

16. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 15 โดยที่การควบคุมการแสดงออกของจีนในจุลินทรีย์โดยหน่วย แสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หรือ โดยหน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่มีแอคติวิตี การแสดงออกจำเพาะที่ได้รับการเพิ่มเติมขึ้นตามการแสดงรายละเอียด a ) นั้นทำได้โดย dh1) ใส่หน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หนึ่งอันหรือมากกว่าในกรณีที่ เหมาะสมที่มีแอนติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่ได้รับการเพิ่มเข้าไปในจีโนมของ จุลินทรีย์เพื่อว่าการแสดงออกของจีนจากภายในหนึ่งตัวหรือมากกว่าเกิดภายใต้การ ควบคุมของหน่วยแสดงลักษณะที่ให้เข้าไป ในกรณีที่เหมาะสมที่มีแอคติวิตีการ แสดงออกจำเพาะที่ได้รับการเพิ่ม หรือ dh2) ใส่จีนหนึ่งตัวหรือมากกว่าเข้าในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าเกิดการแสดงออกของ จีนที่ใส่เข้าไปหนึ่งตัวหรือมากกว่าภายใต้การควบคุมของหน่วยการแสดงออกภายในตาม ข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ในกรณีที่เหมาะสมที่มีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่เพิ่ม ขึ้น หรือ dh3) ใส่ส่วนสร้างกรดนิวคลีอิคหนึ่งตัวหรือมากกว่าซึ่งประกอบรวมด้วยหน่วยแสดงออก ตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ในกรณีที่เหมาะสมที่มีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่ ได้รับการเพิ่มและเชื่อมในลักษณะที่ทำงานได้กับกรดนิวคลีอิคที่จะแสดงออกหนึ่ง สายหรือมากกว่าเข้าไปในจุลินทรีย์

17. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 13 หรือ 14 โดยที่การลดอัตราการแสดงออกของจีนในจุลินทรีย์เมื่อ เทียบกับไวด์ไทพ์ cr) ลดแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะในจุลินทรีย์ของหน่วยแสดงออกภายในตามข้อถือ สิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่ควบคุมการแสดงออกของจีนจากภายในเมื่อเทียบกับไวด์ไทพ์ หรือ dr) ใส่หน่วยแสดงออกที่มีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่ลดลงอย่างที่ให้ไว้ในการ แสดงรายละเอียด Cr) เข้าไปในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการแสดงออกของจีนจาก ภายในเกิดภายใต้การควบคุมของหน่วยแสดงออกที่ใส่เข้าที่มีแอคติวิตีการแสดงออก ที่ลดลง

18. วิธีตามข้อถือสิทธิข้อใดข้อหนึ่งของข้อถือสิทธิที่ 8 ถึง 17 โดยที่จีนนั้นได้รับการเลือก จากกลุ่มของกรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของกรดอะมิโน ที่มาจากโปรตีนและที่ไม่ได้จากโปรตีน กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ ทางชีวภาพของนิวคลีโอไทด์หรือนิวคลีโอไซด์ กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการ สังเคราะห์ทางชีวภาพของกรดอินทรีย์ กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวถีการสังเคราะห์ทาง ชีวภาพของลิปิดและกรดไขมัน กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทาง ชีวภาพของไดออล กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของ คาร์โบไฮเดรท กรดนิคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของสาร ประกอบอะโรมาติค กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของ ไวตามิน กรดนิวคลิอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของโคแฟคเตอร์ และ กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของเอนไซม์โดยที่จีนอาจเลือก ประกอบรวมด้วยหน่วยควบคุมเพิ่มเติม

19. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 18 โดยที่โปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของกรดอะมิโน นั้นเลือกจากกลุ่มของแอสปาเตทไคเนส แอสปาเตท-เซมิแอลดีไฮด์ดีไฮโดรจีเนส ไดอะมิโน ไพมีเลท ดีไฮโดรจีเนส ไดอะมิโน ไพมีเลทดีคาร์บอกซีเลส ไดไฮโดรไดพิโคลิเนทซินธีเทส ไดไฮโดรไดพิโคลิเนทรีดักเทส กลีเซอรัลดีไฮด์-3-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส 3- ฟอสโฟกลีเซอเรท ไคเนส ไพรูเวทคาร์บอกซีเลส ไทรโอสฟอสเฟตไอโซเมอเรส หน่วยควบคุมการถอดรหัส LuxR หน่วยควบคุมการถอดรหัส LysR1 หน่วยควบคุมการถอดรหัส LysR2 มาเลท -ควิโนนออกซิโด ริดักเทส กลูโคส -6- ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส 6- ฟอสโฟกลูโคเนทดีไฮโดรจีเนส ทรานสคีโตเลส ทรานสแอลโดเลส โฮโมซีรีน O-แอเซทิลทรานสเฟอเรส ซิสตาไธโอนีนแกมมา -ซินเทส ซิสตาไธโอนีนบีตา-ไลเอส ซีรีนไฮดรอกซีเมธิลทรานสเฟอเรส O-แอเซทิลโฮโมซีรีน ซัลฟ์ไฮดริเลส เมธิลีนเททราไฮโดรโฟเลทรีดักเทส ฟอสโฟซีรีนอะมิโนทรานสเฟอเรส ฟอสโฟซีรีนฟอสฟาเทส ซีรีนแอเซทิลทรานสเฟอเรส โฮโมซีรีนดีไฮโดรจีเนส โฮโมซีรีนไคเนส ธรีโอนีนซินเทส ตัวพาสำหรับการขนส่งธรีโอนีน ธรีโอนีนดีไฮดราเทส ไพรูเวทออกซิเดส ตัวขนส่งไลซีน ไบโอตินไลเกส ซิสเตอีนซินเธส I ซิสเตอีนซินเธส II เมธิโอนีนซินเทสที่ขึ้นกับ โคเอนไซม์ B12 เมธิโอนีนซินเทสที่ไม่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12 หน่วยย่อย 1 และ 2 ของ ซัลเฟตอะดีนิลอิลทรานสเฟอเรส ฟอสโฟอะดีโนซีน-ฟอสโฟซัลเฟตรีดักเทส เฟอร์รีดอกซิน - ซัลโฟท์รีดักเทส เฟอร์รีดอกซิน NADP รีดักเทส 3-ฟอสโฟกลีเซอเรทดีไฮโดรจีเนส ตัวควบคุม RXA 00655 ตัวควบคุม RXN2910 อาร์จีนิล -tRNA ซินเธส ฟอสโฟอีนอลไพรูเวทคาร์บอกซีเลส โปรตีนเอฟฟลักซ์ของธรีโอนีน ซีรีนไฮดรอกซีเมธิลทรานสเฟอเรส ฟรุกโตส-1, 6-บิสฟอสฟาเทส โปรตีนของการรีดิวซ์ซัลเฟส RXA077 โปรตีนของการรีดิวซ์ซัลเฟต RXA248 โปรตีนของการ รีดิวซ์ซัลเฟต RXA247 โปรตีน OpcA 1-ฟอสโฟฟรุคโตไคเนส และ 6- ฟอสโฟฟรุคโตไคเนส

20. แคสเสทแสดงออกซึ่งประกอบรวมด้วย a) อย่างน้อยหน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หนึ่งอัน และ b) อย่างน้อยกรดนิวคลีอิคเพิ่มเติมหนึ่งอันที่จะถูกแสดงออก และ c) ในกรณีที่เหมาะสมหน่วยควบคุมทางพันธุกรรมเพิ่มเติม โดยที่อย่างน้อยหน่วยแสดงออกหนึ่งอันและลำดับกรดนิวคลีอิคต่อไปที่จะแสดงออกนั้น เชื่อมในลักษณะที่ทำงานได้ต่อกันและนอกจากนี้ลำดับกรดนิวคลีอิคที่จะแสดงออกนั้นเฮเทอโรโลกัส ในความสัมพันธ์ต่อหน่วยแสดงออก

21. แคสเสทแสดงลักษณะตามข้อถือสิทธิที่ 20 โดยที่ลำดับกรดนิวคลีอิคเพิ่มเติมที่จะ แสดงออกนั้นเลือกจากกลุ่มที่ของกรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทาง ชีวภาพของกรดอะมิโนที่มาจากโปรตีนและที่ไม่ได้มาจากโปรตีน กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัส โปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของนิวคลีโอไทด์หรือนิวคลีโอไซด์ กรดนิวคลีอิคที่ประมวล รหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของกรดอินทรีย์ กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีน จากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของลิปิดและกรดไขมัน กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถี การสังเคราะห์ทางชีวภาพของไดออล กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทาง ชีวภาพของคาร์โบไฮเดรท กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของ สารประกอบอะโรมาติก กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของ ไวตามิน กรดนิวคลิอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของโคแฟคเตอร์ และ กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของเอนไซม์

22. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 21 โดยที่โปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของกรดอะมิโน นั้นเลือกจากกลุ่มของ แอสปาเตทไคเนส แอสปาเตท-เซมิแอลดี ไฮด์ดีไฮโดรจีเนส ไดอะมิโนไพมีเลทดีไฮโดรจีเนส ไดอะมิโนไพมีเลทดีคาร์บอกซีเลส ไดไฮโดรไดพิโคลิเนท ซินธีเทส ไดไฮโดรไดพิโคลิเนทรีดักเทส กลีเซอรัลดีไฮด์ -3- ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส 3- ฟอสโฟกลีเซอเรทไคเนส ไพรูเวทคาร์บอกซีเลส ไทรโอสฟอสเฟตไอโซเมอเรส หน่วยควบคุม การถอดรหัส LuxR หน่วยควบคุมการถอดรหัส LysR1 หน่วยควบคุมการถอดรหัส LysR2 มาเลท -ควิโนนออกซิโดริดักเทส กลูโคส -6- ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส 6-ฟอสโฟกลูโคเนท ดีไฮโดรจีเนส ทรานสคีโตเลส ทรานสแอลโดเลส โฮโมซีรีน O-แอเซทิลทรานสเฟอเรส ซิสตาไธโอนีนแกมมา - ซินเทส ซิสตาไธโอนีนบีตา-ไลเอส ซีรีนไฮดรอกซีเมธิลทรานสเฟอเรส O-แอเซทิลโฮโมซีรีน ซัลฟ์ไฮดริเลส เมธิลีนเททราไฮโดรโฟเลทรีดักเทส ฟอสโฟซีรีน อะมิโนทรานสเฟอรเส ฟอสโฟซีรีนฟอสฟาเทส ซีรีนแอเซทิลทรานสเฟอเรส โฮโมซีรีน ดีไฮโดรจีเนส โฮโมซีรีนไคเนส ธรีโอนีนซินเทส ตัวพาสำหรับการขนส่งธรีโอนีน ธรีโอนีนดีไฮดราเทส ไพรูเวทออกซิเดส ตัวขนส่งไลซีน ไบโอตินไลเกส ซิสเตอีนซินเธส I ซิสเตอีนซินเธส II เมธิโอนีนซินเทสที่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12 เมธิโอนีนซินเทสที่ไม่ขึ้นกับ โคเอนไซม์ B12 หน่วยย่อย 1 และ 2 ของซัลเฟตอะดีนิลอินทรานสเฟอรเส ฟอสโฟอะดีโนซีน - ฟอสโฟซัลเฟตรีดักเทส เฟอร์รีดอกซิน -ซัลโพท์รีดักเทส เฟอร์รีดอกซิน NADP รีดักเทส 3-ฟอสโฟกลีเซอเรทดีไฮโดรจีเนส ตัวควบคุม RXA00655 ตัวควบคุม RXN2910 อาร์จีนิล -tRNA ซินเธส ฟอสโฟอีนอลไพรูเวทคาร์บอกซีเลส โปรตีนเอฟฟลักซ์ของธรีโอนีน ซีรีนไฮดรอกซี เมธิลทรานสเฟอเรส ฟรุกโตส-1, 6-บิสฟอสฟาเทส โปรตีนของการรีดิวซ์ซัลเฟส RXA077 โปรตีน ของการรีดิวซ์ซัลเฟต RXA248 โปรตีนของการรีดิวซ์ซัลเฟต RXA247 โปรตีน OpcA 1- ฟอสโฟ ฟรุคโตไคเนส และ 6- ฟอสโฟฟรุคโตไคเนส

23. เวกเตอร์แสดงออกซึ่งประกอบรวมด้วยแคสเสทแสดงออกตามข้อถือสิทธิข้อใดข้อหนึ่ง ของข้อถือสิทธิที่ 20 ถึง 22

24. จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมโดยที่การดัดแปลงทางพันธุกรรมนำไปสู่ การแปรเปลี่ยนหรือก่ออัตราการถอดรหัสของอย่างน้อยหนึ่งจีนเมื่อเทียบกับไวด์ไทพ์และโดยขึ้นกับ a) แปรเปลี่ยนแอคติวิตีโปรโมเตอร์ที่จำเพาะของกรดนิวคลีอิคจุลินทรีย์จาก ภายในที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตี ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ควบคุมการถอดรหัสของ จีนอย่างน้อยหนึ่งตัวจากภาย หรือ b) ควบคุมการถอดรหัสของจีนในจุลินทรีย์โดยกรดนิวคลีอิคตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ มีโปรดมเตอร์แอคติวิตีหรือโดยกรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตี ตามข้อ ถือสิทธิที่ 1 ที่ได้รับการแปรเปลี่ยนไปอย่างที่ให้ไว้ในการแสดงรายละเอียด a ) โดยที่จีนนั้นเฮเทอโรโลกัสในความสัมพันธ์ต่อกรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์ แอคติวิตี

25. จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 24 โดยที่การควบคุมการ ถอดรหัสของจีนในจุลินทรีย์โดยกรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือโดย กรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีที่แปรเปลี่ยนไป ตามการแสดงรายละเอียด a) นั้นทำได้โดย b1) ใส่กรดนิวคลีอิคของการประดิษฐ์นี้ที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตี ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หนึ่งสายหรือมากกว่าเข้าไป ในกรณีที่เหมาะสมที่มีแอคติวิตีของโปรโมเตอร์ที่ จำเพาะที่ได้รับการแปรเปลี่ยนเข้าไปในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการถอดรหัสของ จีนภายในหนึ่งตัวหรือมากกว่าเกิดภายใต้การควบคุมของกรดนิวคลีอิคที่มี โปรโมเตอร์แอคติวิตี ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ให้เข้าไปในกรณีที่เหมาะสมด้วย แอคติวิตีของโปรโมเตอร์ที่จำเพาะที่มีการแปรเปลี่ยน หรือ b2) ใส่จีนหนึ่งตัวหรือมากกว่าเข้าในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการถอดรหัสของจีนที่ใส่ เข้าไปหนึ่งตัวหรือมากกว่าเกิดภายใต้การควบคุมของกรดนิวคลีอิคภายในของการ ประดิษฐ์ที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตี ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ในกรณีที่เหมาะสมด้วย แอคติวิตีของโปรโมเตอร์ที่จำเพาะที่มีการเแปรเปลี่ยน หรือ b3) ใส่ส่วนสร้างกรดนิวคลีอิคซึ่งประกอบรวมด้วยกรดนิวคลีอิคของการประดิษฐ์นี้ที่มี โปรโมเตอร์แอคติวิตี ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หนึ่งสายหรือมากกว่าเข้าไป ในกรณีที่ เหมาะสมที่มีแอคติวิตีของโปรโมเตอร์ที่จำเพาะที่มีการแปรเปลี่ยนและเชื่อมใน ลักษณะที่ทำงานได้กับกรดนิวคลีอิคหนึ่งสายหรือมากกว่าที่จะถอดรหัสเข้าไปใน จุลินทรีย์

26. จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 24 หรือ 25 ที่มีอัตราการ ถอดรหัสที่เพิ่มขึ้นหรือก่ออัตราการถอดรหัสของอย่างน้อยหนึ่งจีนเมื่อเทียบกับไวด์ไทพ์โดยที่ ah) แอคติวิตีโปรโมเตอร์ที่จำเพาะในจุลินทรีย์ของกรดนิวคลีอิคจากภายในที่มี โปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือที่ควบคุมการถอดรหัสของจีนจาก ภายนอกได้รับการเพิ่มเมื่อเทียบกับไวด์ไทพ์ หรือ bh) การถอดรหัสของจีนในจุลินทรีย์ได้รับการควบคุมโดยกรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์ แอคติวิตีตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือโดยกรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีจำเพาะที่ ได้รับการเพิ่มตามการแสดงรายละเอียด ah) โดยที่จีนนั้นเฮเทอโรโลกัสในความ สัมพันธ์ต่อกรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตี

27. จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 26 โดยที่การควบคุมการ ถอดรหัสในจุลินทรีย์โดยกรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข้อสิทธิที่ 1 หรือโดยกรด นิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีจำเพาะที่ได้รับการเพิ่ม ตามการแสดงรายละเอียด a) นั้นทำได้โดย bh1) ใส่กรดนิวคลีอิคของการประดิษฐ์นี้หนึ่งสายหรือมากกว่าที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตี ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ในกรณีที่เหมาะสมที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีที่ได้รับการเพิ่มเข้า ไปในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าเกิดการถอดรหัสของจีนจากภายในหนึ่งตัวหรือ มากกว่าภายใต้การควบคุมของกรดนิวคลีอิคของการประดิษฐ์ที่มีโปรโมเตอร์ แอคติวิตีที่ใส่เข้าไปในกรณีที่เหมาะสมด้วยโปรโมเตอร์แอคติวิตีจำเพาะที่ได้รับการ เพิ่ม หรือ bh2) ใส่จีนหนึ่งตัวหรือมากกว่าเข้าไปในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าเกิดการถอดรหัสของ จีนที่ใส่เข้าหนึ่งตัวหรือมากกว่าภายใต้การควมคุมของกรดนิวคลีอิคจากภายในที่มี โปรโมเตอร์แอคติวิตี ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ในกรณีที่เหมาะสมที่มีโปรโมเตอร์ แอคติวิตีจำเพาะที่เพิ่มขึ้น หรือ bh3) ใส่ส่วนสร้างกรดนิวคลีอิคหนึ่งตัวหรือมากกว่าซึ่งประกอบรวมด้วยกรดนิวคลีอิคของ การประดิษฐ์ที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตี ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ในกรณีที่เหมาะสมที่มี โปรโมเตอร์แอคติวิตีจำเพาะที่ได้รับการเพิ่มและเชื่อมในลักษณะที่ทำงานได้กับกรด นิวคลีอิคที่จะถอดรหัสหนึ่งสายหรือมากกว่าเข้าในจุลินทรีย์

28. จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 24 หรือ 25 ที่มีอัตราการ ถอดรหัสลดลงของอย่างน้อยหนึ่งจีนในจุลินทรีย์เมื่อเทียบกับไวด์ไทพ์ โดยที่ ar) โปรโมเตอร์แอคติวิตีจำเพาะในจุลินทรีย์ของกรดนิวคลีอิคจากภายในอย่างน้อยหนึ่ง สายที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตี ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ซึ่งควบคุมการถอดรหัสของจีนจาก ภายในลดลงเมื่อเทียบกับไวด์ไทพ์ หรือ br) ใส่กรดนิวคลีอิคที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีจำเพาะที่ลดลงอย่างที่ให้ไว้ในการแสดง รายละเอียด a) เข้าไปในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการถอดรหัสของจีนจากภายใน เกิดภายใต้การควบคุมของกรดนิวคลีอิคที่ใส่เข้าที่มีโปรโมเตอร์แอคติวิตีที่ลดลง

29. จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรม โดยที่การดัดแปลงทางพันธุกรรมนำไปสู่ การแปรเปลี่ยนหรือก่ออัตราการแสดงออกของจีนในจุลินทรีย์เมื่อเทียบกับไวด์ไทพ์และขึ้นกับ c) แปรเปลี่ยนแอคติวิตีการแสดงออกของจีนในจุลินทรีย์ของหน่วยแสดงออก ภายในอย่างน้อยหนึ่งอย่าง ตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่ควบคุมการแสดงออกของ จีนจากภายในอย่างน้อยหนึ่งหน่วยเมื่อเทียบกับไวด์ไทพ์ หรือ d) ควบคุมการแสดงลักษณะของจีนในจุลินทรีย์โดยหน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หรือโดยหน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ด้วยแอคติวิตีการ แสดงออกที่ได้รับการแปรเปลี่ยนอย่างที่ให้ไว้ในการแสดงรายละเอียด a) โดยที่จีน นั้นเฮเทอโรโลกัสในความสัมพันธ์กับหน่วยแสดงออก

30. จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 29 โดยที่การควบคุมการ แสดงออกของจีนในจุลินทรีย์โดยหน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หรือโดยหน่วยแสดง ออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่มีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่ได้รับการแปรเปลี่ยนตามการ แสดงรายละเอียด a) ซึ่งทำได้โดย d1) ใส่หน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หนึ่งหน่วยหรือมากกว่าเข้าไป ในกรณี ที่เหมาะสมที่มีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่ได้รับการแปรเปลี่ยนเข้าไปในจีโนม ของจุลินทรีย์เพื่อว่าการแสดงออกของจีนที่ใส่เข้าปหนึ่งตัวหรือมากกว่าเกิดภายใต้ การควบคุมของหน่วยแสดงออก ตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่ให้เข้าไป กรณีที่ เหมาะสมด้วยแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่ได้รับการแปรเปลี่ยน หรือ d2) ใส่จีนหนึ่งตัวหรือมากกว่าเข้าในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการแสดงออกของจีนที่ใส่ เข้าไปหนึ่งตัวหรือมากกว่าเกิดภายใต้การควบคุมของหน่วยการแสดงออกภายใน ตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ในกรณีที่เหมาะสมด้วยแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่มี การแปรเปลี่ยน หรือ d3) ใส่ส่วนสร้างกรดนิวคลีอิคซึ่งประกอบรวมด้วยหน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ในกรณีที่เหมาะสมที่มีแอคติวิตีจำเพาะที่ได้รับการแปรเปลี่ยนและเชื่อมใน ลักษณะที่ทำงานได้กับกรดนิคคลีอิคหนึ่งสายหรือมากกว่าที่จะแสดงออก เข้าไปใน จุลินทรีย์

31. จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 29 หรือ 30 ที่มีการเพิ่ม หรือก่ออัตราการถอดรหัสแสดงออกของจีนในจุลินทรีย์เมื่อเทียบกับไวด์ไทพ์ โดยที่ ch) เพิ่มแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะในจุลินทรีย์ของหน่วยแสดงออกภายในตามข้อ ถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่ควบคุมการแสดงออกของจีนจากภายในเมื่อเทียบกับไวด์ไทพ์ หรือ dh) ควบคุมการแสดงออกของจีนในจุลินทรีย์โดยหน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หรือโดยหน่วยแสดงออกที่มีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่ได้รับการเพิ่ม อย่างที่ให้ไว้ในการแสดงรายละเอียด a) โดยที่จีนนั้นเฮเทอโรโลกัสเมื่อเทียบกับ หน่วยแสดงออก

32. จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 31 โดยที่การควบคุมของ การแสดงออกของจีนในจุลินทรีย์โดยหน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หรือโดยหน่วยแสดง ออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่มีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่เพิ่มขึ้นตามการแสดงรายละเอียด a ) ซึ่งบรรลุโดย dh1) ใส่หน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หนึงหรือมากกว่าในกรณีที่ เหมาะสมที่มีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่ได้รับการเพิ่มเข้าไปในจีโนมของ จุลินทรีย์เพื่อว่าการแสดงออกของจีนจากภายในหนึ่งตัวหรือมากกว่าเกิดภายใต้การ ควบคุมของหน่วยแสดงลักษณะ ตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่ให้เข้าไป ในกรณีที่ เหมาะสมที่มีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่ได้รับการเพิ่ม หรือ dh2) ใส่จีนหนึ่งตัวหรือมากกว่าเข้าไปในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าเกิดการแสดงออกของ จีนที่ใส่เข้าหนึ่งตัวหรือมากกว่าภายใต้การควบคุมของหน่วยแสดงออกภายในตาม ข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ในกรณีที่เหมาะสมที่มีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่เพิ่ม ขึ้น หรือ dh3) ใส่ส่วนสร้างกรดนิวคลีอิคหนึ่งตัวหรือมากกว่าซึ่งประกอบรวมด้วยหน่วยแสดงออก ตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ในกรณีที่เหมาะสมที่มีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่ ได้รับการเพิ่มและเชื่อมในลักษณะที่ทำงานได้กับกรดนิวคลีอิคที่จะแสดงออกหนึ่ง สายหรือมากกว่าเข้าไปในจุลินทรีย์

33. จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 29 หรือ 30 ที่มีอัตราการ ถอดรหัสที่ลดลงของอย่างน้อยหนึ่งจีนเมื่อเทียบกับไวด์ไทพ์โดยที่ cr) แอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะในจุลินทรีย์ของหน่วยแสดงออกภายในอย่างน้อย หนึ่งหน่วยตามข้อถือสิทธิ 2 หรือ 3 ที่ควบคุมการแสดงออกของจีนจากภายใน อย่างน้อยหนึ่งหน่วยได้รับการลดลงเมื่อเทียบกับไวด์ไทพ์ หรือ dr) ใส่หน่วยแสดงออกหนึ่งหน่วยหรือมากกว่าตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่มีแอคติวิตี การแสดงออกที่ลดลงเข้าไปในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการแสดงออกของจีนอย่าง น้อยหนึงตัวเกิดภายใต้การควบคุมของหน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่ ใส่เข้าโดยมีแอคติวิตีการแสดงออกที่ลดลง

34. จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมซึ่งประกอบรวมด้วยหน่วยแสดงออกตามข้อ ถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 และเชื่อมในลักษณะที่ทำงานได้กับจีนที่จะแสดงออกโดยที่จีนนั้นเฮเทอโรโลกัส ในความสัมพันธ์กับหน่วยแสดงออก

35. จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 34 ซึ่งประกอบรวมด้วย แคสเสทแสดงออกตามข้อถือสิทธิข้อใดข้อหนึ่งของข้อ 20 ถึง 22

36. จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิข้อใดข้อหนึ่งของข้อ 24 ถึง 35 โดยที่จีนนั้นได้รับการเลือกจากกลุ่มของกรดนิวคลีที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ ทางชีวภาพของกรดอะมิโนที่มาจากโปรตีนและที่ไม่ได้มาจากโปรตีน กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัส โปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของนิวคิลโอไทด์และนิวคลีโอไซด์ กรดนิวคลีอิคที่ประมวล รหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของกรดอินทรีย์ กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีน จากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของลิปิดและกรดไขมัน กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถี การสังเคราะห์ทางชีวภาพของไดออล กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทาง ชีวภาพของคาร์โบไฮเดรท กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของ สารประกอบอะโรมาติค กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของ ไวตามิน กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของโคแฟคเตอร์ และ กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีการสังเคราะห์ทางชีวภาพของเอนไซม์โดยที่จีนอาจเลือก ประกอบรวมด้วยหน่วยควบคุมเพิ่มเติม

37. จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 36 โดยที่โปรตีนจากวิถี การสังเคราะห์ทางชีวภาพของกรดอะมิโนนั้นเลือกจากกลุ่มของ แอสปาเตทไคเนส แอสปาเตท- เซมิแอลดีไฮด์ดีไฮโดรจีเนส ไดอะมิโนไพมีเลทดีไฮโดรจีเนส ไดอะมิโนไพมีเลทดีคาร์บอกซีเลส ไดไฮโดรไดพิโคลิเนทซินธีเทส ไดไฮโดรไดพิโคนิเนทรีดักเทส กลีเซอรัลดีไฮด์ -3- ฟอสเฟต ดีไฮโดรจีเนส 3- ฟอสโฟกลีเซอเรทไคเนส ไพรูเวทคาร์บอกซีเลส โทรโอสฟอสเฟตไอโซเมอเรส หน่วยควบคุมการถอดรหัส LuxR หน่วยควบคุมการถอดรหัส LysR1 หน่วยควบคุมการถอดรหัส LysR2 มาเลท-ควิโนนออกซิโดรีดักเทส กลูโคส -6- ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส 6-ฟอสโฟกลูโคเนท ดีไฮโดรจีเนส ทรานสคีโตเลส ทรานสแอลโดเลส โฮโมซีรีน O-แอเซทิลทรานสเฟอเรส ซิสตาไธโอนีนแกมมา-ซินเนส ซิสตาไธโอนีนบีตา-ไลเอส ซีรีนไฮดรอกซีเมธิลทรานสเฟอเรส O-แอเซทิลโฮโมซีรีน ซัลฟ์ไฮดริเลส เมธิลีนเททราไฮโดรโฟเลทรีดักเทส ฟอสโฟซีรีน อะมิโนทรานสเฟอเรส ฟอสโฟซีรีนฟอสฟาเทส ซีรีนแอเซทิลทรานสเฟอเรส โฮโมซีรีน ดีไฮโดรจีเนส โฮโมซีรีนไคเนส ธรีโอนีนซินเทส ตัวพาสำหรับการขนส่งธรีโอนีน ธรีโอนีนดีไฮดราเทส ไพรูเวทออกซิเดส ตัวขนส่งไลซีน ไบโอตินไลเกส ซิสเตอีนซินเธส I ซิสเตอีนซิสเธส II เมธิโอนีนซินเทสที่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12 เมธิโอนีนซินเทสที่ไม่ขึ้นกับ โคเอนไซม์ B12 หน่วยย่อย 1 และ 2 ของซัลเฟตอะดีนิลอิลทรานสเฟอเรส ฟอสโฟอะดีโนซีน - ฟอสโฟซัลเฟตรีดักเทส เฟอร์รีดอกซิน-ซัลไฟท์รีดักเทส เฟอร์รีดอกซิน NADP รีดักเทส 3-ฟอสโฟกลีเซอเรทดีไฮโดรจีเนส ตัวควบคุม RXA00655 ตัวควบคุม RXN2910 อาร์จีนิล-tRNA ซินเธส ฟอสโฟอีนอลไพรูเวทคาร์บอกซีเลส โปรตีนเอฟฟลักซ์ของธรีโอนีน ซีรีนไฮดรอกซี เมธิลทรานสเฟอเรส ฟรุกโตส-1,6-บิสฟอสฟาเทส โปรตีนของการรีดิวซ์ซัลเฟต RXA077 โปรตีน ของการรีดิวว์ซัลเฟต RXA248 โปรตีนของการรีดิวซ์ซัลเฟต RXA247 โปรตีน OpcA 1- ฟอสโฟ ฟรุคโตไคเนส และ 6- ฟอสโฟฟรุคโตไคเนส

38. วิธีการสำหรับเตรียมผลิตภัณฑ์การสังเคราะห์ทางชีวภาพโดยการเพาะเลี้ยงจุลินทรีย์ที่ได้รับ การดัดแปลงทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิข้อใดข้อหนึ่งของข้อ 24 ถึง 37

39. วิธีสำหรับเตรียมไลซีนโดยการเพาะเลี้ยงจุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรม ตามข้อถือสิทธิข้อใดข้อหนึ่งของข้อ 24, 25, 31 หรือ 32 โดยที่จีนได้รับการเลือกจากกลุ่มของกรด นิวคลีอิคที่ประมวลรหัสแอสปาเตทไคเนส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสแอสปาเตท -เซมิแอลดีไฮด์ ดีไฮโดรจีเนส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสไดอะมิโนไพมีเลทดีไฮโดรจีเนส กรดนิวคลีอิคที่ ประมวลรหัสไดอะมิโนไพมีเลทดีคาร์บอกซีเลส กรดนิวคีอิคที่ประมวลรหัสไดไฮโดรไดพิโคนิเนท ซินธีเทส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสไดไฮโดรไดพิโคลิเนทรีดักเทส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัส กลีเซอรัลดีไฮด์ -3-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัส 3-ฟอสโฟกลีเซอเรทไคเนส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสไพรูเวทคาร์บอกซีเลส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสไทรโอสฟอสเฟต ไอโซเมอเรส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสหน่วยควบคุมการถอดรหัส LuxR กรดนิวคลีอิคที่ ประมวลรหัสหน่วยควบคุมการถอดรหัส LysR1 กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสหน่วยควบคุมการ ถอดรหัส LysR2 กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสมาเลท-ควิโนนออกซิโดรีดักเทส กรดนิวคลีอิคที่ ประมวลรหัสกลูโคส-6-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัส 6-ฟอสโฟกลูโคเนท ดีไฮโดรจีเนส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสทรานสคีโตเลส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัส ทรานสแอลโดเลส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสตัวขนส่งไลซีน กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัส ไบโอตินไลเกส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัส อาร์จีนิล -tRNAซินธีเทส กรดนิวคลีอิคที่ประมวล รหัสฟอสโฟอีนอลไพรูเวทคาร์บอกซีเลส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสฟรุกโตส-1,6- บิสฟอสฟาเทส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีน OpcA กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัส 1-ฟอสโฟฟรุคโตไคเนส และ กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัส 6-ฟอสโฟฟรุคโตไคเนส

40. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 39 โดยที่จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมมีเมื่อเทียบกับ ไวด์ไทพ์แอคติวิตีที่ได้รับการเพิ่มเป็นการเพิ่มเติมของอย่างน้อยหนึ่งแอคติวิตีที่เลือกจากกลุ่มของ แอสปาเตทไคเนส แอสปาเตท-เซมิเอลดีไฮด์ดีไฮโดรจีเนส ไดอะมิโนไพมีเลทดีไฮโดรจีเนส ไดอะมิโนไพมีเลทดีคาร์บอกซีเลส ไดไฮโดรไดพิโคลิเนทซินธีเทส ไดไฮโดรไดพิโคลิเนทรีดักเทส กลีเซอร์รัลดีไฮด์ -3-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส 3- ฟอสโฟกลีเซอเรทไคเนส ไพรูเวทคาร์บอกซีเลส ไทรโอสฟอสเฟตไอโซเมอเรส หน่วยควบคุมการถอดรหัส LuxR หน่วยควบคุมการถอดรหัส LysR1 หน่วยควบคุมการถอดรหัส LysR2 มาเลท-ควิโนนออกซิโดรีดักเทส กลูโคส -6- ฟอสเฟต ดีไฮโดรจีเนส 6-ฟอสโฟกลูโคเนทดีไฮโดรจเนส ทรานสคีโตเลส ทรานสแอลโดเลส ตัวขนส่ง ไลซีน อาร์จีนิล- tRNA ซินธีเทส ฟอสโฟอีนอลไพรูเวทคาร์บอกซีเลสแอคติวิตี ฟรุกโตส-1,6-บิส ฟอสฟาเทสแอคติวิตี โปรตีน OpcA 1-ฟอสโฟฟรุคโตไคเนสแอคติวิตี 6-ฟอสโฟฟรุคโตไคเนส แอคติวิตี และไบโอตินไลเกสแอคติวิตี

41. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 39 หรือ 40 โดยที่จุลินทรีย์ที่มีการดัดแปลงทางพันธุกรรมมีเมื่อเทียบ กับไวด์ไทพ์แอคติวิตีที่ลดลงเป็นการเพิ่มเติมของอย่างน้อยหนึ่งแอคติวิตีที่เลือกจากกลุ่มของ ธรีโอนีน ดีไฮดราเทสแอคติวิตี โฮโมซีรีน O-แอเซทิลทรานสเฟอเรสแอคติวิตี O-แอเซทิล-โฮโมซีรีนซัลฟ์ ไฮดริเลสแอคติวิตี ฟอสโฟอีนอลไพรูเวทคาร์บอกซีไคเนสแอคติวิตี ไพรูเวทออกซิเดสแอคติวิตี โฮโมซีรีนไคเนสแอคติวิตี โฮโมซีรีนดีไฮโดรจีเนสแอคติวิตี แอคติวิตีของตัวขนส่งธรีโอนีน ธรีโอนีนเอฟฟลั๊กโปรตีนแอคติวิตี แอสปาราจีเนสแอคติวิตี แอสปาเตทดีคาร์บอกซิเลสแอคติวิตี และธรีโอนีนซินเธสแอคติวิตี

42. วิธีสำหรับเตรียมเมธิโอนีนโดยการเพาะเลี้ยงจุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรม ตามข้อถือสิทธิข้อใดข้อหนึ่งของข้อ 24, 25,31 หรือ 32 โดยที่จีนได้รับการเลือกจากกลุ่มของกรด นิวคลีอิคที่ประมวลรหัสแอสปาเตทไคเนส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสแอสปาเตท -เซมิแอลดีไฮด์ ดีไฮโดรจีเนส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโฮโมซีรีนดีไฮโดรจีเนส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัส กลีเซอรัลดีไฮด์ -3-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัส 3- ฟสโฟกลีเซอเรทไคเนส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสไพรูเวทคาร์บอกซีเลส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสไทรโอสฟอสเฟต ไอโซเมอเรส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโฮโมซีรีน O-แอเซทิลทรานสเฟอเรส กรดนิวคลีอิคที่ ประมวลรหัสซิสตาไธโอนีนแกมมา-ซินเทส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสซิสตาไธโอนีนบีตา-ไลเอส กรดนิวคีอิคที่ประมวลรหัสซีรีนไฮดรอกซีเมธิลทรานสเฟอเรส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัส O-แอเซทิลไฮโมซีรีนซัลฟ์ไฮดริเลส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสเมธิลีนเททราไฮโดรไฟเลท รีดักเทส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสฟอสโฟซีรีนอะมิโนทรานสเฟอรเรส กรดนิวคลีอิคที่ประมวล รหัสฟอสโฟซีรีนฟอสฟาเทส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสซีรีนแอเซทิลทรานสเฟอเรส กรดนิวคลีอิคที่ประมาลรหัสซิสเตอีนซินเธส I กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสซิสเตอีนซินเธส II กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสเมธิโอนีนซินเทสที่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12 กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัส เมธิโอนีนซินเทสที่ไม่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12 กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสซัลเฟตอะดีนิลอิล ทรานสเฟอเรส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสฟอสโฟอะดีโนซึน -ฟอสโฟซัลเฟตรีดักเทส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสเฟอร์รีดอกซิน-ซัลไฟท์รีดักเทส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัส เฟอร์รีดอกซิน NADPH -รีดักเทส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสเฟอร์รีดอกซินแอคติวินตี กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนของซัลเฟตรีดักชัน RXA077 กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัส โปรตีนของซัลเฟตรีดักชัน RXA248 กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีนของซัลเฟตรีดักชัน RXA247 กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสควบคุม RXA00655 และกรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสตัว ควบคุม RXN2910

43. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 42 โดยที่จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมเมื่อเทียบกับ ไวด์ไทพ์แอคติวิตีที่ได้รับการเพิ่มเติมของแอคติวตีที่เลือกจากกลุ่มของแอสปาเตทไคเนส แอสปาเตท-เซมิแอลดีไฮด์ดีไฮโดรจีเนสแอคติวิตี โฮโมซีรีนดีไฮโดรจีเนสแอคติวิตี กลีเซอรัลดีไฮด์- 3-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนสแอคติวิตี 3-ฟอสโฟกลีเซอเรทไคเนสแอคติวิตี ไพรูเวทคาร์บอกซีเลส แอคติวิตี ไทรโอสฟอสเฟตไอโซเมอเรสแอคติวิตี โฮโมซีรีน O-แอเซทิลทรานสเฟอเรสแอคติวิตี ซิสตาไธโอนีนแกมมา-ซินเทสแอคติวิตี ซิสตาไธโอนีนบีตา-ไลเอสแอคติวิตี ซีรีนไฮดรอกซี เมธิลทรานสเฟอเรสแอคติวิตี O-แอเซทิลโฮโมซรีนซัลฟ์ไฮดริเลสแอคติวิตี เมธิลีนเททราไฮโดร โฟเลทรีดักเทสแอคติวิตี ฟอสโฟซีรีนอะมิโนทรานสเฟอเรสแอคติวิตี ฟอสโฟซีรีนฟอสฟาเทส แอคติวิตี ซีรีนแอเซทิลทรานสเฟอเรสแอคติวิตี ซิสเตอีนซินเธส I แอคติวิตี ซิสเตอีนซินเธส II แอคติวิตี เมธิโอนีนซินเทสแอคติวิตีที่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12 เมธิโอนีนซินเทสแอคติวิตีที่ไม่ขึ้นกับ โคเอนไซม์ B12 ซัลเฟตอะดีนัลอิลทรานสเฟอเรสแอคติวิตี ฟอสโฟอะดีโนซีน-ฟอสโฟซัลเฟต รีดักเทสแอคติวิตี เฟอร์รีดอกซิน -ซัลไพท์รีดักเทสแอคติวิตี เฟอร์รีดอกซิน NADPH- รีดักเทส แอคติวิตี เฟอร์รีดอกซินแอคติวิตี แอคติวิตีของโปรตีนของซัลเฟตรีดักชัน RXA077 แอคติวิตีของ โปรตีนของซัลเฟตรีดักชัน RXA248 แอคติวิตีของโปรตีนของซัลเฟตรีดักซัน RXA247 แอคติวิตี ของตัวควบคุม RXA655 และแอคติวิตีของตัวควบคุม RXN2910

44. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 42 หรือ 43 โดยที่จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมเมื่อ เทียบกับไวด์ไทพ์แอคติวิตีที่ได้รับการลดลงเป็นการเพิ่มเติมของแอคติวิตีที่เลือกจากกลุ่มของ ไฮโมซีรีนไคเนสแอคติวิตี ธรีโอนีนดีไฮดราเทสแอคติวิตี ธรีโอนีนซินเธสแอคติวิตี มีโซ-ไดอะมิโน ไพมีเลท D-ไฮโดรจีเนสแอคติวิตี ฟอสโฟอีนอลไพรูเวทคาร์บอกซีไคเนสแอคติวิตี ไพรูเวทออกซิ เดสแอคติวิตี ไดไฮโดรไดพิโคลิเนทซินเธสแอคติวิตี ไดไฮโดรไดพิโคลิเนทรีดักเทสแอคติวิตี และ ไดอะมิโนพิโคลิเนทดีคาร์บอกซิเลสแอคติวิตี

45. วิธีสำหรับเตรียมธรีโอนีนโดยการเพาะเลี้ยงจุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรม ตามข้อถือสิทธิข้อใดข้อหนึ่งของข้อ 24, 25, 31 หรือ 32 โดยที่จีนนั้นเลือกจากกลุ่มของกรดนิวคลีอิคที่ ประมวลรหัสแอสปาเตทไคเนส กรดนิวคลีอิคที่ประมาลรหัสแอสปาเตท-เซมิแอลดีไฮด์ ดีไฮโดรจีเนส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสกลีเซอรัลดีไฮด์-3-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส กรดนิวคลีอิค ที่ประมวลรหัส 3-ฟอสโฟกลีเซอเรทไคเนส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสไพรูเวทคาร์บอกซีเลส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสไทรโอสฟอสเฟตไอโซเมอเรส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโฮโมซีรีน ไคเนส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสธรีโอนีนซินเทส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสตัวพาของตัว ขนส่งธรีโอนีน กรดนิวคลีอิคที่ประมาลรหัสกลูโคส-6-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส กรดนิวคลีอิคที่ ประมวลรหัสทรานสแอลโดเลส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสทานสคีโตเลส กรดนิวคลีอิคที่ ประมวลรหัสมาเลท-ควิโนนออกซิโดรีดักเทส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัส 6-ฟอสโฟกลูโคเนท ดีไฮโดรจีเนส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสตัวขนส่งไลซีน กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสไบโอติน ไลเกส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสฟอสโฟอีนอลไพรูเวทคาร์บอกซีเลส กรดนิวคลีอิคที่ประมวล รหัสธรีโอนีนเอฟฟลั๊กโปรตีน กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสฟรุกโตส-1,6-บิสฟอสฟาเทสกรด นิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโปรตีน OpcA กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัส 1-ฟอสโฟฟรุคโตไคเนส กรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัส 6-ฟอสโฟฟรุคโตไคเนส และกรดนิวคลีอิคที่ประมวลรหัสโฮโมซีรีน ดีไฮดดรจีเนส

46. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 45 โดยที่จุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมมีเมื่อเทียบกับ ไวด์ไทพ์แอคติวิตีที่ได้รับการเพิ่มเป็นการเพิ่มเติมของแอคติวิตีอย่างน้อยหนึ่งอย่างที่เลือกจากกลุ่ม ของแอสปาเตทไคเนส แอคติวิตีแอสปาเตท-เซมิแอลดีไฮด์ดีไฮโดรจีเนสแอคติวิตี กลีเซอรัลดีไฮด์-3- ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนสแอคติวิตี 3-ฟอสโฟกลีเซอเรทไคเนสแอคติวิตี ไพรูเวทคาร์บอกซีเลส แอคติวิตี ไทรโอสฟอสเฟตไอโซเมอเรสแอคติวิตี ธรีโอนีนซินเทสแอคติวิตี แคติวิตีของตัวพา ของตัวขนส่งธรีโอนีน ทรานสแอลโดเลสแอคติวิตี ทรานสคีโตเลสแอคติวิตี กลูโคส-6-ฟอสเฟต ดีไฮโดรจีนเนสแอคติวิตี มาเลท-ควิโนนออกซิโดรีดักเทสแอคติวิตี โฮโมซีรีนไคเนสแอคติวิตี ไบโอตินไลเกสแอคติวิตี ฟอสโฟอีนอลไพรูเวทคาร์บอกซีเลสแอคติวิตี ธรีโอนีนเอฟฟลั๊กโปรตีน แอคติวิตี แอคติวิตีของโปรตีน OpcA 1-ฟอสโฟฟรุคโตไคเนสแอคติวิตี 6-ฟอสโฟฟรุคโตไคเนส แอคติวิตี ฟรุกโตส-1,6-บิสฟอสฟาเทสแอคติวิตี 6-ฟอสโฟกลูโคเนทแอคติวิตี และโฮโมซีรีน ดีไฮโดรจีเนสแอคติวิตี

47. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 45 หรือ 46 โดยที่จุลินทรีย์ที่มีการดัดแปลงทางพันธุกรรมมีเมื่อเทียบ กับไวด์ไทพ์แอคติวิตีที่ลดลงเป็นการเพิ่มเติมของอย่างน้อยหนึ่งแอคติวิตีที่เลือกจากกลุ่มของ ธรีโอนีน ดีไฮดราเทสแอคติวิตี โฮโมซีรีน O-แอเซทิลทรานสเฟอเรสแอคติวิตี ซีรีนไฮดรอกซีเมธิลทรานส เฟอเรสแอคติวิตี O-แอเซทิลโฮโมซีรีนซัลฟ์ไฮดริเลสแอคติวิตี มีโซ-ไดอะมิโนไพมีเลท D-ดีไฮโดร จีเนส แอคติวิตี ฟอสโฟอีนอลไพรูเวทคาร์บอกซีไคเนสแอตติวิตี ไพรูเวทออกซิเดสแอคติวิตี ไดไฮโดรไดพิโคลิเนทซินธีเทสแอคติวิตี ไดไฮโดรไดพิโคลิเนทรีดักเทสแอคติวิตี แอสปาราจีเนส แอคติวิตี แอสปาเตทดีคาร์บอกซิเลสแอคติวิตี แอคติวิตีของตัวขนส่งไลซีน แอเซโทแลคเตทซีน เทสแอคติวิตี คีทอล-แอซิดรีดักโตไอโซเมอเรสแอคติวิตี แอคติวิตีของอะมิโนทรานสเฟอเรสชนิด สายข้าง เมธิโอนีนซินเทสแอคติวิตีที่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12 เมธิโอนีนซินเทสแอคติวิตีที่ไม่ขึ้นกับ โคเอนไซม์ B12 ไดไฮดรอกซีแอซิดดีไฮดราเทสแอคติวิตี และไดอะมิโนพิโคลิเนทดีคาร์บอกซิเลส แอคติวิตี

48. วิธีตามข้อถือสิทธิข้อใดข้อหนึ่งของข้อ 38 ถึง 47 โดยที่ผลิตภัฑณ์การสังเคราะห์ทาง ชีวภาพได้รับการแยกและในกรณีที่เหมาะสมทำบริสุทธิ์จากอาหารเพาะเลี้ยงหลัง และ/หรือระหว่าง ขึ้นตอนการเพาะเลี้ยง

49. การใช้ลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ. ID. NO. 53 เป็นบริเวณจับเกาะของไรโบโซมในหน่วย แสดงออกที่ทำให้จีนสามารถแสดงออกในแบคทีเรียของสกุล Corynebacterium หรือ Brevibacterium

50. การใช้ลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ. ID. NO. 52 เป็นบริเวณ-10 ในหน่วยแสดงออกที่ทำให้ จีนสามารถแสดงออกในแบคทีเรียของสกุล Corynebacterium หรือ Brevibacterium

51. หน่วยแสดงออกที่ทำให้จีนสามารถแสดงออกในแบคที่เรียของสกุล Corynebacterium หรือ Brevibacterium ซึ่งประกอบรวมด้วยลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ. ID. NO. 53

52. หน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 51 โดยที่ลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ.ID. NO. 53 ได้รับ การใช้เป็นบริเวณจับเกาะของไรโบโซม

53. หน่วยแสดงออกที่ทำให้จีนสามารถแสดงออกในแบคที่เรียของสกุล Corynebacterium หรือ Brevibacterium ซึ่งประกอบรวมด้วยอย่างน้อยหนึ่งลำดับของลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ. ID. NO. 52

54. หน่วยแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 53 โดยที่สายหนึ่งของลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ.ID. NO. 52 ได้รับการใช้เป็นบริเวณ -10