TH80512A - หน่วยการแสดงออก p2-10 - Google Patents

Abstract

DC60 (21/04/49) การประดิษฐ์นี้เกี่ยวข้องกับการใช้ลำดับกรดนิวคลีอิคสำหรับการควบคุมการถอดรหัสและ การแสดงออกของจีน, โปรโมเตอร์ชนิดใหม่และหน่วยการแสดงออกมันเอง, วิธีสำหรับการเปลี่ยน แปลงหรือการทำให้เกิดอัตราการถอดรหัส และ/หรือ อัตราการแสดงออกของจีน, แคสเสตการแสดง ออกซึ่งประกอบรวมด้วยหน่วยการแสดงออก, จุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมโดยมีอัตราการถอด รหัส และ/หรือ อัตราการแสดงออกที่เปลี่ยนแปลงหรือทำให้เกิดขึ้น และวิธีสำหรับการเตรียม ผลิตภัณฑ์ชีวสังเคราะห์โดยการเลี้ยงจุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรม การประดิษฐ์นี้เกี่ยวข้องกับการใช้ลำดับกรดนิวคลีอิคสำหรับการควบคุมการถอดรหัสและ การแสดงออกของจีน, โปรโมเตอร์ชนิดใหม่และหน่วยการแสดงออกมันเอง, วิธีสำหรับการเปลี่ยน แปลงหรือการทำให้เกิดอัตราการถอดรหัส และ/หรือ อัตราการแสดงออกของจีน, แคสเสตการแสดง ออกซึ่งประกอบรวมด้วยหน่วยการแสดงออก, จุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมโดยมีอัตราการถอด รหัส และ/หรือ อัตราการแสดงออกที่เปลี่ยนแปลงหรือทำให้เกิดขึ้น และวิธีสำหรับการเตรียม ผลิตภัณฑ์ชีวสังเคราะห์โดยการเลื้ยงจุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรม

Claims (48)

1. การใช้กรดนิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ ซึ่งประกอบรวมด้วย A) ลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ ID NO:1 หรือ B) ลำดับที่อนุพัทธ์จากลำดับนี้โดยการแทนที่, การสอดแทรก หรือการตัดออกของนิวคลีโอ ไทด์ และซึ่งมีความเหมือนกันอย่างน้อย 90% ที่ระดับกรดนิวคลีอิคกับ SEQ ID NO:1 หรือ C) ลำดับกรดนิวคลีอิคซึ่งไฮบริไดซ์กับลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ ID NO:1 ภายใต้ภาวะเข้ม งวด หรือ D) ชิ้นส่วนที่เทียบเท่าทางหน้าที่ของลำดับของ A), B) หรือ C) สำหรับการถอดรหัสของจีน

2. การใช้หน่วยการแสดงออกซึ่งประกอบรวมด้วยกรดนิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ ตามข้อ ถือสิทธิที่ 1 และโดยเพิ่มเติมที่ถูกเชื่อมต่อทางหน้าที่กับลำดับกรดนิวคลีอิคหนึ่ง ซึ่งทำให้แน่ใจได้ถึง การแปลรหัสของกรดไรโบนิวคลีอิค สำหรับการแสดงออกของจีน

3. การใช้ตามข้อถือสิทธิที่ 2 ในที่ซึ่งหน่วยการแสดงออกประกอบรวมด้วย E) ลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ ID NO:2 หรือ F) ลำดับที่อนุพัทธ์จากลำดับนี้โดยการแทนที่, การสอดแทรก หรือการตัดออกของนิวคลีโอ ไทด์ และซึ่งมีความเหมือนกันอย่างน้อย 90% ที่ระดับกรดนิวคลีอิคกับ SEQ ID NO:2 หรือ G) ลำดับกรดนิวคลีอิคซึ่งไฮบริไดซ์กับลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ ID NO:2 ภายใต้ภาวะเข้ม งวด หรือ H) ชิ้นส่วนที่เทียบเท่าทางหน้าที่ของลำดับของ E), F) หรือ G)

4. การใช้ตามข้อถือสิทธิที่ 3 ในที่ซึ่งหน่วยการแสดงออกประกอบด้วยกรดนิวคลีอิคของลำดับ SEQ ID NO:2

5. กรดนิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ ซึ่งประกอบรวมด้วย A) ลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ ID NO:1 หรือ B) ลำดับที่อนุพัทธ์จากลำดับนี้โดยการแทนที่, การสอดแทรก หรือการตัดออกของนิวคลีโอ ไทด์ และซึ่งมีความเหมือนกันอย่างน้อย 90% ที่ระดับกรดนิวคลีอิคกับ SEQ ID NO:1 หรือ C) ลำดับกรดนิวคลีอิคซึ่งไฮบริไดซ์กับลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ ID NO:1 ภายใต้ภาวะเข้ม งวด หรือ D) ชิ้นส่วนที่เทียบเท่าทางหน้าที่ของลำดับของ A), B) หรือ C) โดยมีเงื่อนไขว่า กรดนิวคลีอิคซึ่งมีลำดับ SEQ ID NO:1 ได้ถูกกันออกไป

6. หน่วยการแสดงออกซึ่งประกอบรวมด้วยกรดนิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ ตามข้อถือสิทธิ ที่ 5 และโดยเพิ่มเติมที่ถูกเชื่อมต่อทางหน้าที่กับลำดับกรดนิวคลีอิคหนึ่ง ซึ่งทำให้แน่ใจได้ถึงการแปล รหัสของกรดไรโบนิวคลีอิค

7. หน่วยการแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 6 ซึ่งประกอบรวมด้วย E) ลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ ID NO:2 หรือ F) ลำดับที่อนุพัทธ์จากลำดับนี้โดยการแทนที่, การสอดแทรก หรือการตัดออกของนิวคลีโอ ไทด์ และซึ่งมีความเหมือนกันอย่างน้อย 90% ที่ระดับกรดนิวคลีอิคกับ SEQ ID NO:2 หรือ G) ลำดับกรดนิวคลีอิคซึ่งไฮบริไดซ์กับลำดับกรดนิวคลีอิค SEQ ID NO:2 ภายใต้ภาวะเข้ม งวด หรือ H) ชิ้นส่วนที่เทียบเท่าทางหน้าที่ของลำดับของ E), F) หรือ G) โดยมีเงื่อนไขว่า กรดนิวคลีอิคซึ่งมีลำดับ SEQ ID NO:2 ได้ถูกกันออกไป

8. วิธีสำหรับการเปลี่ยนแปลงหรือการทำให้เกิดอัตราการถอดรหัสของจีนในจุลินทรีย์โดยเปรียบ เทียบกับไวลท์ไทป์โดย a) การเปลี่ยนแปลงแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะในจุลินทรีย์ของกรดนิวคลีอิคจากภายในซึ่ง มีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ซึ่งควบคุมการถอดรหัสของจีนจากภายในโดย เปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ หรือ b) การควบคุมการถอดรหัสของจีนในจุลินทรีย์โดยกรดนิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือโดยกรดนิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ มีแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลงตามการแสดงรายละเอียด a) ที่ซึ่งจีนเป็น ชนิดเฮเทอโรโลกัสตามที่เกี่ยวข้องกับกรดนิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์

9. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 8 ในที่ซึ่งการควบคุมการถอดรหัสของจีนในจุลินทรีย์โดยกรดนิวคลีอิคซึ่งมี แอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือโดยกรดนิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อ ถือสิทธิที่ 1 ที่มีแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลงตามการแสดงรายละเอียด a) บรรลุได้ โดย b1) การนำเข้าไปของกรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่าซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อ ถือสิทธิที่ 1 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลง สู่ใน จีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการถอดรหัสของจีนจากภายในหนึ่งหรือมากกว่าได้เกิดขึ้น ภายใต้การควบคุมของกรดนิวคลีอิคที่นำเข้าไปซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิ ที่ 1 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลง หรือ b2) การนำเข้าไปของจีนหนึ่งหรือมากกว่าสู่ในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการถอดรหัสของ จีนที่นำเข้าไปหนึ่งหรือมากกว่าได้เกิดขึ้นภายใต้การควบคุมของกรดนิวคลีอิคจากภาย ในซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตี โปรโมเตอร์จำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลง หรือ b3) การนำเข้าไปของส่วนสร้างกรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่า ซึ่งประกอบรวมด้วยกรด นิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตี โปรโมเตอร์จำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลง และเชื่อมต่อทางหน้าที่กับกรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือ มากกว่าที่จะถูกถอดรหัส สู่ในจุลินทรีย์

10. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 8 หรือ 9 ในที่ซึ่งเพื่อเพิ่มหรือทำให้เกิดอัตราการถอดรหัสของจีนในจุลินทรีย์ โดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ ah) แอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะในจุลินทรีย์ของกรดนิวคลีอิคจากภายในซึ่งมีแอคติวิตี โปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือซึ่งควบคุมการถอดรหัสของจีนจากภายใน ได้ถูกทำ ให้เพิ่มขึ้นโดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ หรือ bh) การถอดรหัสของจีนในจุลินทรีย์ได้ถูกควบคุมโดยกรดนิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตี โปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือโดยกรดนิวคลีอิคที่มีแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะที่ เพิ่มขึ้นตามการแสดงรายละเอียด a) ที่ซึ่งจีนเป็นชนิดเฮเทอโรโลกัสตามที่เกี่ยวข้องกับ กรดนิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์

11. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 10 ในที่ซึ่งการควบคุมการถอดรหัสของจีนในจุลินทรีย์โดยกรดนิวคลีอิคซึ่งมี แอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือโดยกรดนิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อ ถือสิทธิที่ 1 ที่มีแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะที่เพิ่มขึ้นตามการแสดงรายละเอียด a) ได้บรรลุถึงโดย bh1) การนำเข้าไปของกรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่าซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือ สิทธิที่ 1 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะที่เพิ่มขึ้น สู่ในจีโนมของ จุลินทรีย์เพื่อว่าการถอดรหัสของจีนจากภายในหนึ่งหรือมากกว่าได้เกิดขึ้นภายใต้การ ควบคุมของกรดนิวคลีอิคที่นำเข้าไปซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หาก เหมาะสมโดยมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะที่เพิ่มขึ้น หรือ bh2) การนำเข้าไปของจีนหนึ่งหรือมากกว่าสู่ในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการถอดรหัสของ จีนที่นำเข้าไปหนึ่งหรือมากกว่าได้เกิดขึ้นภายใต้การควบคุมของกรดนิวคลีอิคจากภาย ในซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตี โปรโมเตอร์จำเพาะที่เพิ่มขึ้น หรือ bh3) การนำเข้าไปของส่วนสร้างกรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่า ซึ่งประกอบรวมด้วยกรด นิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตี โปรโมเตอร์จำเพาะที่เพิ่มขึ้น และเชื่อมต่อทางหน้าที่กับกรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่า ที่จะถูกถอดรหัส สู่ในจุลินทรีย์

12. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 8 หรือ 9 ในที่ซึ่งเพื่อลดอัตราการถอดรหัสของจีนในจุลินทรีย์โดยเปรียบ เทียบกับไวลด์ไทป์ ar) แอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะในจุลินทรีย์ของกรดนิวคลีอิคจากภายในซึ่งมีแอคติวิตี โปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ซึ่งควบคุมการถอดรหัสของจีนจากภายใน ได้ถูกลดลง โดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ หรือ br) กรดนิวคลีอิคที่มีแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะที่ลดลงตามการแสดงรายละเอียด a) ได้ถูก นำเข้าไปสู่ในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการถอดรหัสของจีนจากภายในได้เกิดขึ้นภายใต้ การควบคุมของกรดนิวคลีอิคที่นำเข้าไปโดยมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ที่ลดลง

13. วิธีสำหรับการเปลี่ยนแปลงหรือการทำให้เกิดอัตราการแสดงออกของจีนในจุลินทรีย์โดยเปรียบ เทียบกับไวลด์ไทป์โดย c) การเปลี่ยนแปลงแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะในจุลินทรีย์ของหน่วยการแสดงออกจาก ภายในตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ซึ่งควบคุมการแสดงออกของจีนจากภายใน โดยเปรียบ เทียบกับไวลด์ไทป์ หรือ d) การควบคุมการแสดงออกของจีนในจุลินทรีย์โดยหน่วยการแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หรือโดยหน่วยการแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 โดยมีแอคติวิตีการแสดง ออกจำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลงตามการแสดงรายละเอียด c) ที่ซึ่งจีนเป็นชนิดเฮเทอโร โลกัสตามที่เกี่ยวข้องกับหน่วยการแสดงออก

14. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 13 ในที่ซึ่งการควบคุมการแสดงออกของจีนในจุลินทรีย์โดยหน่วยการแสดง ออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หรือโดยหน่วยการแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่มีแอคติวิตี การแสดงออกจำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลงตามการแสดงรายละเอียด a) ได้บรรลุโดย d1) การนำเข้าไปของหน่วยการแสดงออกหนึ่งหรือมากกว่าตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หาก เหมาะสมโดยมีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลง สู่ในจีโนมของ จุลินทรีย์เพื่อว่าการแสดงออกของจีนจากภายในหนึ่งหรือมากกว่าได้เกิดขึ้นภายใต้การ ควบคุมของหน่วยการแสดงออกที่นำเข้าไป หรือ d2) การนำเข้าไปของจีนหนึ่งหรือมากกว่าสู่ในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการแสดงออกของ จีนที่นำเข้าไปหนึ่งหรือมากกว่าได้เกิดขึ้นภายใต้การควบคุมของหน่วยการแสดงออก จากภายในตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตีการแสดงออก จำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลง หรือ d3) การนำเข้าไปของส่วนสร้างกรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่า ซึ่งประกอบรวมด้วยหน่วย การแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตีการแสดงออก จำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลง และเชื่อมต่อทางหน้าที่กับกรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่าที่จะ ถูกแสดงออก สู่ในจุลินทรีย์

15. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 13 หรือ 14 ในที่ซึ่งเพื่อเพิ่มหรือทำให้เกิดอัตราการแสดงออกของจีนใน จุลินทรีย์โดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ ch) แอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะในจุลินทรีย์ของหน่วยการแสดงออกจากภายในตามข้อ ถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ซึ่งควบคุมการแสดงออกของจีนจากภายใน ได้ถูกทำให้เพิ่มขึ้นโดย เปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ หรือ dh) การแสดงออกของจีน ในจุลินทรีย์ได้ถูกควบคุมโดยหน่วยการแสดงออกตามข้อถือสิทธิ ที่ 2 หรือ 3 หรือ โดยหน่วยการแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่มีแอคติวิตีการ แสดงออกจำเพาะที่เพิ่มขึ้นตามการแสดงรายละเอียด a) ที่ซึ่งจีนเป็นชนิดเฮเทอโรโลกัส ตามที่เกี่ยวข้องกับหน่วยการแสดงออก

16. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 15 ในที่ซึ่งการควบคุมการแสดงออกของจีนในจุลินทรีย์โดยหน่วยการแสดง ออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หรือโดยหน่วยการแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่มีแอคติวิตี การแสดงออกจำเพาะที่เพิ่มขึ้นตามการแสดงรายละเอียด a) ได้บรรลุโดย dh1) การนำเข้าไปของหน่วยการแสดงออกหนึ่งหรือมากกว่าตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หาก เหมาะสมโดยมีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่เพิ่มขึ้น สู่ในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่า การแสดงออกของจีนจากภายในหนึ่งหรือมากกว่าได้เกิดขึ้นภายใต้การควบคุมของ หน่วยการแสดงออกที่นำเข้าไป หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่ เพิ่มขึ้น หรือ dh2) การนำเข้าไปของจีนหนึ่งหรือมากกว่าสู่ในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการแสดงออกของ จีนที่นำเข้าไปหนึ่งหรือมากกว่าได้เกิดขึ้นภายใต้การควบคุมของหน่วยการแสดงออก จากภายในตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตีการแสดงออก จำเพาะที่เพิ่มขึ้น หรือ dh3) การนำเข้าไปของส่วนสร้างกรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่า ซึ่งประกอบรวมด้วยหน่วย การแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตีการแสดงออก จำเพาะที่เพิ่มขึ้น และเชื่อมต่อทางหน้าที่กับกรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่าที่จะถูก แสดงออก สู่ในจุลินทรีย์

17. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 13 หรือ 14 ในที่ซึ่งเพื่อลดอัตราการแสดงออกของจีนในจุลินทรีย์โดยเปรียบ เทียบกับไวลด์ไทป์ cr) แอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะในจุลินทรีย์ของหน่วยการแสดงออกจากภายในตามข้อ ถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ซึ่งควบคุมการแสดงออกของจีนจากภายใน ได้ถูกลดลงโดยเปรียบ เทียบกับไวลด์ไทป์ หรือ dr) หน่วยการแสดงออกที่มีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่ลดลงตามการแสดงรายละเอียด cr) ได้ถูกนำเข้าไปสู่ในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการแสดงออกของจีนจากภายในได้เกิด ขึ้นภายใต้การควบคุมของหน่วยการแสดงออกที่นำเข้าไปโดยมีแอคติวิตีการแสดงออกที่ ลดลง

18. วิธีตามข้อใดข้อหนึ่งของข้อถือสิทธิที่ 8 ถึง 17 ในที่ซึ่งจีนได้ถูกคัดเลือกจากกลุ่มของกรด นิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของกรดอะมิโนชนิดโปรตีโนเจนิค และ นอน-โปรตีโนเจนิค, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของนิวคลีโอไทด์ และนิวคลีโอไซด์, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของกรดอินทรีย์, กรด นิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของลิพิดและกรดไขมัน, กรดนิวคลีอิคซึ่ง ประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของไดออล, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถี ชีวสังเคราะห์ของคาร์โบไฮเดรต, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของสาร ประกอบอะโรมาติค, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของวิตามิน, กรด นิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของโคแฟกเตอร์ และกรดนิวคลีอิคซึ่งประมวล รหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของเอนไซม์ ที่ซึ่งหากเหมาะสมจีนอาจประกอบรวมด้วยส่วนควบ คุมอื่นต่อไปอีก

19. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 18 ในที่ซึ่งโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของกรดอะมิโนได้ถูกคัดเลือกจาก กลุ่มของแอสปาร์เตตไคเนส, แอสปาร์เตต-เซมิแอลดีไฮด์ดีไฮโดรจีเนส, ไดอะมิโนพิมีเลตดีไฮโดร จีเนส, ไดอะมิโนพิมีเลตดีคาร์บอกซิเลส, ไดไฮโดรไดพิโคลิเนตซินธีเทส, ไดไฮโดรไดพิโคลิเนต รีดัคเทส, กลีเซอรัลดีไฮด์-3-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส, 3-ฟอสฟอกลีเซอเรตไคเนส, ไพรูเวต คาร์บอกซิเลส, ไทรโอสฟอสเฟตไอโซเมอเรส, ตัวควบคุมการถอดรหัส LuxR, ตัวควบคุมการถอด รหัส LysR1, ตัวควบคุมการถอดรหัส LysR2, มาเลต-ควิโนนออกซิโดรีดัคเทส, กลูโคส-6-ฟอสเฟต ดีไฮโดรจีเนส, 6-ฟอสฟอกลูโคเนตดีไฮโดรจีเนส, ทรานสคีโทเลส, ทรานสแอลโดเลส, ฮอมอเซรีน O-อะเซทิลทรานสเฟอเรส, ซิสตาไธโอนีนแกมมา-ซินเธส, ซิสตาไธโอนีนบีตา-ไลเอส, เซริน ไฮดรอกซีเมธิลทรานสเฟอเรส, O-อะเซทิลฮอมอเซรีนซัลฟ์ไฮดริเลส, เมธิลีนเททราไฮโดรฟอเลต รีดัคเทส, ฟอสฟอเซรีนอะมิโนทรานสเฟอเรส, ฟอสฟอเซรีนฟอสฟาเทส, เซรีนอะเซทิลทราน สเฟอเรส, ฮอมอเซรีนดีไฮโดรจีเนส, ฮอมอเซรีนไคเนส, ธรีโอนีนซินเธส, ตัวพาขนส่งธรีโอนีนออก, ธรีโอนีนดีไฮดราเทส, ไพรูเวตออกซิเดส, ตัวขนส่งไลซีนออก, ไบโอทินไลเกส, ซิสเตอีนซินเธส I, ซิสเตอีนซินเธส II, เมไธโอนีนซินเธสชนิดที่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12, เมไธโอนีนซินเธสชนิดที่ไม่ขึ้น กับโคเอนไซม์ B12, ซัลเฟตอะดีนิลิลทรานสเฟอเรสหน่วยย่อย 1 และ 2, ฟอสฟออะดีโนซีนฟอสฟอ ซัลเฟตรีดัคเทส, เฟอร์รีดอกซิน-ซัลไฟต์รีดัคเทส, เฟอร์รีดอกซิน NADP รีดัคเทส, 3-ฟอสฟอ กลีเซอเรตดีไฮโดรจีเนส, ตัวควบคุม RXA00655, ตัวควบคุม RXN2910, อาร์จินิล-tRNA ซินธีเทส, ฟอสฟออีนอลไพรูเวตคาร์บอกซิเลส, โปรตีนการไหลออกของธรีโอนีน, เซรีนไฮดรอกซีเมธิลทราน สเฟอเรส, ฟรุคโทส-1,6-บิสฟอสฟาเทส, โปรตีนเกี่ยวกับรีดัคชันของซัลเฟต RXA077, โปรตีนเกี่ยว กับรีดัคชันของซัลเฟต RXA248, โปรตีนเกี่ยวกับรีดัคชันของซัลเฟต RXA247, โปรตีน OpcA, 1- ฟอสฟอฟรุคโทไคเนส และ 6-ฟอสฟอฟรุคโทไคเนส

20. แคสเสตการแสดงออกซึ่งประกอบรวมด้วย a) อย่างน้อยหน่วยการแสดงออกหนึ่งตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 และ b) อย่างน้อยกรดนิวคลีอิคอื่นต่อไปหนึ่งที่จะถูกแสดงออก และ c) ส่วนควบคุมทางพันธุกรรมอื่นต่อไป หากเหมาะสม ที่ซึ่งอย่างน้อยหน่วยการแสดงออกหนึ่งและลำดับกรดนิวคลีอิคอื่นต่อไปที่จะถูกแสดงออก ได้ถูกเชื่อมต่อทางหน้าที่เข้าด้วยกัน และลำดับกรดนิวคลีอิคอื่นต่อไปที่จะถูกแสดงออกเป็นชนิด เฮเทอโรโลกัสตามที่เกี่ยวข้องกับหน่วยการแสดงออก

21. แคสเสตการแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 20 ในที่ซึ่งลำดับกรดนิวคลีอิคอื่นต่อไปที่จะถูกแสดง ออก ได้ถูกคัดเลือกจากกลุ่มของกรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของกรด อะมิโนชนิดโปรตีโนเจนิคและนอน-โปรตีโนเจนิค, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถี ชีวสังเคราะห์ของนิวคลีโอไทด์และนิวคลีโอไซด์, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถี ชีวสังเคราะห์ของกรดอินทรีย์, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของลิพิด และกรดไขมัน, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของไดออล, กรดนิวคลีอิค ซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของคาร์โบไฮเดรต, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัส โปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของสารประกอบอะโรมาติค, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจาก วิถีชีวสังเคราะห์ของวิตามิน, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของ โคแฟกเตอร์ และกรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของเอนไซม์

22. แคสเสตการแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 21 ในที่ซึ่งโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของกรดอะมิโน ได้ถูกคัดเลือกจากกลุ่มของแอสปาร์เตตไคเนส, แอสปาร์เตต-เซมิแอลดีไฮด์ดีไฮโดรจีเนส, ไดอะมิโน พิมีเลตดีไฮโดรจีเนส, ไดอะมิโนพิมีเลตดีคาร์บอกซิเลส, ไดไฮโดรไดพิโคลิเนตซินธีเทส, ไดไฮโดร ไดพิโคลิเนตรีดัคเทส, กลีเซอรัลดีไฮด์-3-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส, 3-ฟอสฟอกลีเซอเรตไคเนส, ไพรูเวตคาร์บอกซิเลส, ไทรโอสฟอสเฟตไอโซเมอเรส, ตัวควบคุมการถอดรหัส LuxR, ตัวควบคุมการ ถอดรหัส LysR1, ตัวควบคุมการถอดรหัส LysR2, มาเลต-ควิโนนออกซิโดรีดัคเทส, กลูโคส-6- ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส, 6-ฟอสฟอกลูโคเนตดีไฮโดรจีเนส, ทรานสคีโทเลส, ทรานสแอลโดเลส, ฮอมอเซรีน O-อะเซทิลทรานสเฟอเรส, ซิสตาไธโอนีนแกมมา-ซินเธส, ซิสตาไธโอนีนบีตา-ไลเอส, เซรินไฮดรอกซีเมธิลทรานสเฟอเรส, O-อะเซทิลฮอมอเซรีนซัลฟ์ไฮดริเลส, เมธิลีนเททราไฮโดร ฟอเลตรีดัคเทส, ฟอสฟอเซรีนอะมิโนทรานสเฟอเรส, ฟอสฟอเซรีนฟอสฟาเทส, เซรีนอะเซทิล ทรานสเฟอเรส, ฮอมอเซรีนดีไฮโดรจีเนส, ฮอมอเซรีนไคเนส, ธรีโอนีนซินเธส, ตัวพาขนส่ง ธรีโอนีนออก, ธรีโอนีนดีไฮดราเทส, ไพรูเวตออกซิเดส, ตัวขนส่งไลซีนออก, ไบโอทินไลเกส, ซิสเตอีนซินเธส I, ซิสเตอีนซินเธส II, เมไธโอนีนซินเธสชนิดที่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12, แอคติวิตี เมไธโอนีนซินเธสชนิดที่ไม่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12, ซัลเฟตอะดีนิลิลทรานสเฟอเรสหน่วยย่อย 1 และ 2, ฟอสฟออะดีโนซีนฟอสฟอซัลเฟตรีดัคเทส, เฟอร์รีดอกซิน-ซัลไฟต์รีดัคเทส, เฟอร์รีดอกซิน NADP รีดัคเทส, 3-ฟอสฟอกลีเซอเรตดีไฮโดรจีเนส, ตัวควบคุม RXA00655, ตัวควบคุม RXN2910, อาร์จินิล-tRNA ซินธีเทส, ฟอสฟออีนอลไพรูเวตคาร์บอกซิเลส, โปรตีนการไหลออกของธรีโอนีน, เซรีนไฮดรอกซีเมธิลทรานสเฟอเรส, ฟรุคโทส-1,6-บิสฟอสฟาเทส, โปรตีนเกี่ยวกับรีดัคชันของ ซัลเฟต RXA077, โปรตีนเกี่ยวกับรีดัคชันของซัลเฟต RXA248, โปรตีนเกี่ยวกับรีดัคชันของซัลเฟต RXA247, โปรตีน OpcA, 1-ฟอสฟอฟรุคโทไคเนส และ 6-ฟอสฟอฟรุคโทไคเนส

23. เวกเตอร์การแสดงออกซึ่งประกอบรวมด้วยแคสเสตการแสดงออกตามข้อใดข้อหนึ่งของข้อ ถือสิทธิที่ 20 ถึง 22

24. จุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรม ที่ซึ่งการดัดแปรทางพันธุกรรมได้นำไปสู่การเปลี่ยนแปลงหรือ การทำให้เกิดขึ้นของอัตราการถอดรหัสของอย่างน้อยจีนหนึ่ง โดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ และได้ ขึ้นกับ a) การเปลี่ยนแปลงแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะในจุลินทรีย์ของอย่างน้อยกรดนิวคลีอิคจาก ภายในหนึ่งซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ซึ่งควบคุมการถอดรหัสของ อย่างน้อยจีนจากภายในหนึ่ง หรือ b) การควบคุมการถอดรหัสของจีนในจุลินทรีย์โดยกรดนิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือโดยกรดนิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 โดยมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลงตามการแสดงรายละเอียด a) ที่ซึ่งจีน เป็นชนิดเฮเทอโรโลกัสตามที่เกี่ยวข้องกับกรดนิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์

25. จุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 24 ในที่ซึ่งการควบคุมการถอดรหัสของจีนใน จุลินทรีย์โดยกรดนิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือ โดยกรดนิวคลีอิคซึ่งมี แอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่มีแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลงตามการ แสดงรายละเอียด a) ได้บรรลุถึงโดย b1) การนำเข้าไปของกรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่าซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อ ถือสิทธิที่ 1 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลง สู่ใน จีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการถอดรหัสของจีนจากภายในหนึ่งหรือมากกว่าได้เกิดขึ้น ภายใต้การควบคุมของกรดนิวคลีอิคที่นำเข้าไปซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิ ที่ 1 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลง หรือ b2) การนำเข้าไปของจีนหนึ่งหรือมากกว่าสู่ในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการถอดรหัสของ จีนที่นำเข้าไปหนึ่งหรือมากกว่าได้เกิดขึ้นภายใต้การควบคุมของกรดนิวคลีอิคจากภาย ในซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตี โปรโมเตอร์จำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลง หรือ b3) การนำเข้าไปของส่วนสร้างกรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่า ซึ่งประกอบรวมด้วยกรด นิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตี โปร โมเตอร์จำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลง และเชื่อมต่อทางหน้าที่กับกรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือ มากกว่าที่จะถูกถอดรหัส สู่ในจุลินทรีย์

26. จุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 24 หรือ 25 ซึ่งมีอัตราการถอดรหัสที่เพิ่มขึ้น หรือทำให้เกิดขึ้นของอย่างน้อยจีนหนึ่งโดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ ในที่ซึ่ง ah) แอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะในจุลินทรีย์ของกรดนิวคลีอิคจากภายในซึ่งมีแอคติวิตี โปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ซึ่งควบคุมการถอดรหัสของจีนจากภายใน ได้ถูกทำให้ เพิ่มขึ้นโดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ หรือ bh) การถอดรหัสของจีนในจุลินทรีย์ได้ถูกควบคุมโดยกรดนิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตี โปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือโดยกรดนิวคลีอิคที่มีแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะที่ เพิ่มขึ้นตามการแสดงรายละเอียด ah) ที่ซึ่งจีนเป็นชนิดเฮเทอโรโลกัสตามที่เกี่ยวข้องกับ กรดนิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์

27. จุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 26 ในที่ซึ่งการควบคุมการถอดรหัสของจีนใน จุลินทรีย์โดยกรดนิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หรือ โดยกรดนิวคลีอิคซึ่งมี แอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 โดยมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะที่เพิ่มขึ้นตามการแสดงราย ละเอียด a) ได้บรรลุถึงโดย bh1) การนำเข้าไปของกรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่าซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อ ถือสิทธิที่ 1 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะที่เพิ่มขึ้น สู่ในจีโนมของ จุลินทรีย์เพื่อว่าการถอดรหัสของจีนจากภายในหนึ่งหรือมากกว่าได้เกิดขึ้นภายใต้การ ควบคุมของกรดนิวคลีอิคที่นำเข้าไปซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ หากเหมาะสมโดยมี แอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะที่เพิ่มขึ้น หรือ bh2) การนำเข้าไปของจีนหนึ่งหรือมากกว่าสู่ในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการถอดรหัสของ จีนที่นำเข้าไปหนึ่งหรือมากกว่าได้เกิดขึ้นภายใต้การควบคุมของกรดนิวคลีอิคจากภาย ในซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตีโปรโม เตอร์จำเพาะที่เพิ่มขึ้น หรือ bh3) การนำเข้าไปของส่วนสร้างกรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่า ซึ่งประกอบรวมด้วยกรด นิวคลีอิคซึ่งมีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตี โปรโมเตอร์จำเพาะที่เพิ่มขึ้น และเชื่อมต่อทางหน้าที่กับกรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่า ที่จะถูกถอดรหัส สู่ในจุลินทรีย์

28. จุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 24 หรือ 25 ซึ่งมีอัตราการถอดรหัสที่ลดลงของ อย่างน้อยจีนหนึ่งโดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ ในที่ซึ่ง ar) แอคติวิตีโปรโมเตอร์จำเพาะในจุลินทรีย์ของอย่างน้อยกรดนิวคลีอิคจากภายในหนึ่งซึ่งมี แอคติวิตีโปรโมเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ซึ่งควบคุมการถอดรหัสของอย่างน้อยจีนจาก ภายในหนึ่ง ได้ถูกลดลงโดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ หรือ br) กรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือมากว่าที่มีแอคติวิตีโปรโมเตอร์ที่ลดลงตามการแสดงรายละเอียด a) ได้ถูกนำเข้าไปสู่ในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการถอดรหัสของอย่างน้อยจีนจากภาย ในหนึ่งได้เกิดขึ้นภายใต้การควบคุมของกรดนิวคลีอิคที่นำเข้าไปโดยมีแอคติวิตี โปรโมเตอร์ที่ลดลง

29. จุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรม ที่ซึ่งการดัดแปรทางพันธุกรรมได้นำไปสู่การเปลี่ยนแปลงหรือ การทำให้เกิดขึ้นของอัตราการแสดงออกของอย่างน้อยจีนหนึ่งโดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ และได้ ขึ้นกับ c) การเปลี่ยนแปลงแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะในจุลินทรีย์ของอย่างน้อยหน่วยการ แสดงออกจากภายในหนึ่งตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ซึ่งควบคุมการแสดงออกของอย่าง น้อยจีนจากภายในหนึ่ง โดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ หรือ d) การควบคุมการแสดงออกของจีนในจุลินทรีย์โดยหน่วยการแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หรือ โดยหน่วยการแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 โดยมีแอคติวิตีการแสดง ออกจำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลงตามการแสดงรายละเอียด a) ที่ซึ่งจีนเป็นชนิดเฮเทอโร โลกัสตามที่เกี่ยวข้องกับหน่วยการแสดงออก

30. จุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 29 ในที่ซึ่งการควบคุมการแสดงออกของจีนใน จุลินทรีย์โดยหน่วยการแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หรือโดยหน่วยการแสดงออกตามข้อถือ สิทธิที่ 2 หรือ 3 โดยมีแอคติวิการแสดงออกจำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลงตามการแสดงรายละเอียด a) ได้ บรรลุถึงโดย d1) การนำเข้าไปของหน่วยการแสดงออกหนึ่งหรือมากกว่าตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หาก เหมาะสมโดยมีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลง สู่ในจีโนมของ จุลินทรีย์เพื่อว่าการแสดงออกของจีนจากภายในหนึ่งหรือมากกว่าได้เกิดขึ้นภายใต้การ ควบคุมของหน่วยการแสดงออกที่นำเข้าไปตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หากเหมาะสม โดยมีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลง หรือ d2) การนำเข้าไปของจีนหนึ่งหรือมากกว่าสู่ในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการแสดงออกของ จีนที่นำเข้าไปหนึ่งหรือมากกว่าได้เกิดขึ้นภายใต้การควบคุมของหน่วยการแสดงออก จากภายในตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตีการแสดงออก จำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลง หรือ d3) การนำเข้าไปของส่วนสร้างกรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่า ซึ่งประกอบรวมด้วยหน่วย การแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตีการแสดงออก จำเพาะที่ถูกเปลี่ยนแปลง และเชื่อมต่อทางหน้าที่กับกรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่าที่จะ ถูกแสดงออก สู่ในจุลินทรีย์

31. จุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 29 หรือ 30 โดยมีอัตราการแสดงออกที่เพิ่มขึ้น หรือทำให้เกิดขึ้นของอย่างน้อยจีนหนึ่ง โดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ ในที่ซึ่ง ch) แอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะในจุลินทรีย์ของอย่างน้อยหน่วยการแสดงออกจากภายใน หนึ่งตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ซึ่งควบคุมการแสดงออกของจีนจากภายใน ได้ถูกทำให้ เพิ่มขึ้นโดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ หรือ dh) การแสดงออกของจีนในจุลินทรีย์ได้ถูกควบคุมโดยหน่วยการแสดงออกตามข้อถือสิทธิ ที่ 2 หรือ 3 หรือโดยหน่วยการแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่มีแอคติวิตีการ แสดงออกจำเพาะที่เพิ่มขึ้นตามการแสดงรายละเอียด a) ที่ซึ่งจีนเป็นชนิดเฮเทอโรโลกัส ตามที่เกี่ยวข้องกับหน่วยการแสดงออก

32. จุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 31 ในที่ซึ่งการควบคุมการแสดงออกของจีนใน จุลินทรีย์โดยหน่วยการแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หรือโดยหน่วยการแสดงออกตามข้อถือ สิทธิที่ 2 หรือ 3 โดยมีแอคติวิการแสดงออกจำเพาะที่เพิ่มขึ้นตามการแสดงรายละเอียด a) ได้บรรลุถึง โดย dh1) การนำเข้าไปของหน่วยการแสดงออกหนึ่งหรือมากกว่าตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หาก เหมาะสมโดยมีแอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่เพิ่มขึ้น สู่ในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่า การแสดงออกของจีนจากภายในหนึ่งหรือมากกว่าได้เกิดขึ้นภายใต้การควบคุมของ หน่วยการแสดงออกที่นำเข้าไปตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หากเหมาะสม โดยมี แอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะที่เพิ่มขึ้น หรือ dh2) การนำเข้าไปของจีนหนึ่งหรือมากกว่าสู่ในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการแสดงออกของ จีนที่นำเข้าไปหนึ่งหรือมากกว่าได้เกิดขึ้นภายใต้การควบคุมของหน่วยการแสดงออก จากภายในตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตีการแสดงออก จำเพาะที่เพิ่มขึ้น หรือ dh3) การนำเข้าไปของส่วนสร้างกรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่า ซึ่งประกอบรวมด้วยหน่วย การแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 หากเหมาะสมโดยมีแอคติวิตีการแสดงออก จำเพาะที่เพิ่มขึ้น และเชื่อมต่อทางหน้าที่กับกรดนิวคลีอิคหนึ่งหรือมากกว่าที่จะถูก แสดงออก สู่ในจุลินทรีย์

33. จุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 29 หรือ 30 โดยมีอัตราการแสดงออกที่ลดลง ของอย่างน้อยจีนหนึ่งโดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ ในที่ซึ่ง cr) แอคติวิตีการแสดงออกจำเพาะในจุลินทรีย์ของอย่างน้อยหน่วยการแสดงออกจากภายใน หนึ่งตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ซึ่งควบคุมการแสดงออกของอย่างน้อยจีนจากภายใน หนึ่ง ได้ถูกลดลงโดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ หรือ dr) หน่วยการแสดงออกหนึ่งหรือมากกว่าตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 ที่มีแอคติวิตีการแสดง ออกที่ลดลงได้ถูกนำเข้าไปสู่ในจีโนมของจุลินทรีย์เพื่อว่าการแสดงออกของอย่างน้อยจีน หนึ่งได้เกิดขึ้นภายใต้การควบคุมของหน่วยการแสดงออกที่นำเข้าไปตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 โดยมีแอคติวิตีการแสดงออกที่ลดลง

34. จุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมซึ่งประกอบรวมด้วยหน่วยการแสดงออกตามข้อถือสิทธิที่ 2 หรือ 3 และเชื่อมต่อทางหน้าที่กับจีนที่จะถูกแสดงออก ที่ซึ่งจีนเป็นชนิดเฮเทอโรโลกัสตามที่เกี่ยวข้อง กับหน่วยการแสดงออก

35. จุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 34 ซึ่งประกอบรวมด้วยแคสเสตการแสดงออก ตามข้อใดข้อหนึ่งของข้อถือสิทธิที่ 20 ถึง 22

36. จุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมตามข้อใดข้อหนึ่งของข้อถือสิทธิที่ 24 ถึง 35 ในที่ซึ่งจีนได้ถูก คัดเลือกจากกลุ่มของกรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของกรดอะมิโนชนิด โปรตีโนเจนิคและนอน-โปรตีโนเจนิค, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ ของนิวคลีโอไทด์และนิวคลีโอไซด์, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของ กรดอินทรีย์, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของลิพิดและกรดไขมัน, กรด นิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของไดออล, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัส โปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของคาร์โบไฮเดรต, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีว สังเคราะห์ของสารประกอบอะโรมาติค, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ ของวิตามิน, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของโคแฟกเตอร์ และกรด นิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของเอนไซม์ ที่ซึ่งหากเหมาะสมจีนอาจ ประกอบรวมด้วยส่วนควบคุมอื่นต่อไปอีก

37. จุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมตามข้อถือสิทธิที่ 36 ในที่ซึ่งโปรตีนจากวิถีชีวสังเคราะห์ของ กรดอะมิโนได้ถูกคัดเลือกจากกลุ่มของแอสปาร์เตตไคเนส, แอสปาร์เตต-เซมิแอลดีไฮด์ดีไฮโดรจีเนส, ไดอะมิโนพิมีเลตดีไฮโดรจีเนส, ไดอะมิโนพิมีเลตดีคาร์บอกซิเลส, ไดไฮโดรไดพิโคลิเนตซินธีเทส, ไดไฮโดรไดพิโคลิเนตรีดัคเทส, กลีเซอรัลดีไฮด์-3-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส, 3-ฟอสฟอกลีเซอเรต ไคเนส, ไพรูเวตคาร์บอกซิเลส, ไทรโอสฟอสเฟตไอโซเมอเรส, ตัวควบคุมการถอดรหัส LuxR, ตัว ควบคุมการถอดรหัส LysR1, ตัวควบคุมการถอดรหัส LysR2, มาเลต-ควิโนนออกซิโดรีดัคเทส, กลูโคส-6-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส, 6-ฟอสฟอกลูโคเนตดีไฮโดรจีเนส, ทรานสคีโทเลส, ทรานสแอล โดเลส, ฮอมอเซรีน O-อะเซทิลทรานสเฟอเรส, ซิสตาไธโอนีนแกมมา-ซินเธส, ซิสตาไธโอนีนบีตา- ไลเอส, เซรีนไฮดรอกซีเมธิลทรานสเฟอเรส, O-อะเซทิลฮอมอเซรีนซัลฟ์ไฮดริเลส, เมธิลีนเททรา ไฮโดรฟอเลตรีดัคเทส, ฟอสฟอเซรีนอะมิโนทรานสเฟอเรส, ฟอสฟอเซรีนฟอสฟาเทส, เซรีน อะเซทิลทรานสเฟอเรส, ฮอมอเซรีนดีไฮโดรจีเนส, ฮอมอเซรีนไคเนส, ธรีโอนีนซินเธส, ตัวพาขน ส่งธรีโอนีนออก, ธรีโอนีนดีไฮดราเทส, ไพรูเวตออกซิเดส, ตัวขนส่งไลซีนออก, ไบโอทินไลเกส, ซิสเตอีนซินเธส I, ซิสเตอีนซินเธส II, เมไธโอนีนซินเธสชนิดที่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12, เมไธโอนีน ซินเธสชนิดที่ไม่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12, ซัลเฟตอะดีนิลิลทรานสเฟอเรสหน่วยย่อย 1 และ 2, ฟอสฟอ อะดีโนซีนฟอสฟอซัลเฟตรีดัคเทส, เฟอร์รีดอกซิน-ซัลไฟต์รีดัคเทส, เฟอร์รีดอกซิน NADP รีดัคเทส, 3-ฟอสฟอกลีเซอเรตดีไฮโดรจีเนส, ตัวควบคุม RXA00655, ตัวควบคุม RXN2910, อาร์จินิล-tRNA ซินธีเทส, ฟอสฟออีนอลไพรูเวตคาร์บอกซิเลส, โปรตีนการไหลออกของธรีโอนีน, เซรีนไฮดรอกซี เมธิลทรานสเฟอเรส, ฟรุคโทส-1,6-บิสฟอสฟาเทส, โปรตีนเกี่ยวกับรีดัคชันของซัลเฟต RXA077, โปรตีนเกี่ยวกับรีดัคชันของซัลเฟต RXA248, โปรตีนเกี่ยวกับรีดัคชันของซัลเฟต RXA247, โปรตีน OpcA, 1-ฟอสฟอฟรุคโทไคเนส และ 6-ฟอสฟอฟรุคโทไคเนส

38. วิธีสำหรับการเตรียมผลิตภัณฑ์ชีวสังเคราะห์โดยการเลี้ยงจุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมตามข้อ ใดข้อหนึ่งของข้อถือสิทธิที่ 24 ถึง 37

39. วิธีสำหรับการเตรียมไลซีนโดยการเลี้ยงจุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมตามข้อใดข้อหนึ่งของ ข้อถือสิทธิที่ 24, 25, 31 หรือ 32 ในที่ซึ่งจีนได้ถูกคัดเลือกจากกลุ่มของกรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัส แอสปาร์เตตไคเนส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสแอสปาร์เตต-เซมิแอลดีไฮด์ดีไฮโดรจีเนส, กรด นิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสไดอะมิโนพิมีเลตดีไฮโดรจีเนส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสไดอะมิโน พิมีเลตดีคาร์บอกซิเลส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสไดไฮโดรไดพิโคลิเนตซินธีเทส, กรดนิวคลีอิค ซึ่งประมวลรหัสไดไฮโดรไดพิโคลิเนตรีดัคเทส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสกลีเซอรัลดีไฮด์-3- ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัส 3-ฟอสฟอกลีเซอเรตไคเนส, กรดนิวคลีอิคซึ่ง ประมวลรหัสไพรูเวตคาร์บอกซิเลส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสไทรโอสฟอสเฟตไอโซเมอเรส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสตัวควบคุมการถอดรหัส LuxR, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสตัวควบ คุมการถอดรหัส LysR1, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสตัวควบคุมการถอดรหัส LysR2, กรดนิวคลีอิค ซึ่งประมวลรหัสมาเลต-ควิโนนออกซิโดรีดัคเทส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสกลูโคส-6-ฟอสเฟต ดีไฮโดรจีเนส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัส 6-ฟอสฟอกลูโคเนตดีไฮโดรจีเนส, กรดนิวคลีอิคซึ่ง ประมวลรหัสทรานสคีโทเลส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสทรานสแอลโดเลส, กรดนิวคลีอิคซึ่ง ประมวลรหัสตัวขนส่งไลซีนออก, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสไบโอทินไลเกส, กรดนิวคลีอิคซึ่ง ประมวลรหัสอาร์จินิล-tRNA ซินธีเทส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสฟอสฟออีนอลไพรูเวตคาร์บอก ซิเลส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสฟรุคโทส-1,6-บิสฟอสฟาเทส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัส โปรตีน OpcA, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวล 1-ฟอสฟอฟรุคโทไคเนส และกรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัส 6-ฟอสฟอฟรุคโทไคเนส

40. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 39 ในที่ซึ่งจุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมซึ่งนอกจากนี้ยังมีแอคติวิตีที่เพิ่ม ขึ้นโดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ ของอย่างน้อยแอคติวิตีหนึ่งที่คัดเลือกจากกลุ่มของแอคติวิตี แอสปาร์เตตไคเนส, แอคติวิตีแอสปาร์เตต-เซมิแอลดีไฮด์ดีไฮโดรจีเนส, แอคติวิตีไดอะมิโนพิมีเลต ดีไฮโดรจีเนส, แอคติวิตีไดอะมิโนพิมีเลตดีคาร์บอกซิเลส, แอคติวิตีไดไฮโดรไดพิโคลิเนตซินธีเทส, แอคติวิตีไดไฮโดรไดพิโคลิเนตรีดัคเทส, แอคติวิตีกลีเซอรัลดีไฮด์-3-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส, แอคติวิตี 3-ฟอสฟอกลีเซอเรตไคเนส, แอคติวิตีไพรูเวตคาร์บอกซิเลส, แอคติวิตีไทรโอสฟอสเฟตไอโซเมอเรส, แอคติวิตีตัวควบคุมการถอดรหัส LuxR, แอคติวิตีของตัวควบคุมการถอดรหัส LysR1, แอคติวิตี ของตัวควบคุมการถอดรหัส LysR2, แอคติวิตีมาเลต-ควิโนนออกซิโดรีดัคเทส, แอคติวิตีกลูโคส-6- ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส, แอคติวิตี 6-ฟอสฟอกลูโคเนตดีไฮโดรจีเนส, แอคติวิตีทรานสคีโทเลส, แอคติวิตีทรานสแอลโดเลส, แอคติวิตีตัวขนส่งไลซีนออก, แอคติวิตีอาร์จินิล-tRNA ซินธีเทส, แอคติวิตีฟอสฟออีนอลไพรูเวตคาร์บอกซิเลส, แอคติวิตีฟรุคโทส-1,6-บิสฟอสฟาเทส, แอคติวิตี โปรตีน OpcA, แอคติวิตี1-ฟอสฟอฟรุคโทไคเนส, แอคติวิตี 6-ฟอสฟอฟรุคโทไคเนส และแอคติวิตี ไบโอทินไลเกส

41. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 39 หรือ 40 ในที่ซึ่งจุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมซึ่งนอกจากนี้ยังมี แอคติวิตีที่ลดลงโดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ ของอย่างน้อยแอคติวิตีหนึ่งที่คัดเลือกจากกลุ่มของ แอคติวิตีธรีโอนีนดีไฮดราเทส, แอคติวิตีฮอมอเซรีน O-อะเซทิลทรานสเฟอเรส, แอคติวิตี O- อะเซทิลฮอมอเซรีนซัลฟ์ไฮดริเลส, แอคติวิตีฟอสฟออีนอลไพรูเวตคาร์บอกซีไคเนส, แอคติวิตี ไพรูเวตออกซิเดส, แอคติวิตีฮอมอเซรีนไคเนส, แอคติวิตีฮอมอเซรีนดีไฮโดรจีเนส, แอคติวิตีตัวขน ส่งธรีโอนีนออก, แอคติวิตีโปรตีนการไหลออกของธรีโอนีน, แอคติวิตีแอสปาราจิเนส, แอคติวิตี แอสปาร์เตตดีคาร์บอกซิเลส และแอคติวิตีธรีโอนีนซินเธส

42. วิธีสำหรับการเตรียมเมไธโอนีนโดยการเลี้ยงจุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมตามข้อใดข้อหนึ่ง ของข้อถือสิทธิที่ 24, 25, 31 หรือ 32 ในที่ซึ่งจีนได้ถูกคัดเลือกจากกลุ่มของกรดนิวคลีอิคซึ่งประมวล รหัสแอสปาร์เตตไคเนส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสแอสปาร์เตต-เซมิแอลดีไฮด์ดีไฮโดรจีเนส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสฮอมอเซรีนดีไฮโดรจีเนส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสกลีเซอรัล ดีไฮด์-3-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัส 3-ฟอสฟอกลีเซอเรตไคเนส, กรด นิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสไพรูเวตคาร์บอกซิเลส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสไทรโอสฟอสเฟต ไอโซเมอเรส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสฮอมอเซรีน O-อะเซทิลทรานสเฟอเรส, กรดนิวคลีอิคซึ่ง ประมวลรหัสซิสตาไธโอนีนแกมมา-ซินเธส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสซิสตาไธโอนีนบีตา- ไลเอส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสเซรินไฮดรอกซีเมธิลทรานสเฟอเรส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวล รหัส O-อะเซทิลฮอมอเซรีนซัลฟ์ไฮดริเลส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสเมธิลีนเททราไฮโดรฟอเลต รีดัคเทส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสฟอสฟอเซรีนอะมิโนทรานสเฟอเรส, กรดนิวคลีอิคซึ่ง ประมวลรหัสฟอสฟอเซรีนฟอสฟาเทส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสเซรีนอะเซทิลทรานสเฟอเรส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสซิสเตอีนซินเธส I, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสซิสเตอีนซินเธส II, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสเมไธโอนีนซินเธสชนิดที่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12, กรดนิวคลีอิคซึ่ง ประมวลรหัสเมไธโอนีนซินเธสชนิดที่ไม่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัส ซัลเฟตอะดีนิลิลทรานสเฟอเรส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสฟอสฟออะดีโนซีนฟอสฟอซัลเฟตรี ดัคเทส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสเฟอร์รีดอกซิน-ซัลไฟต์รีดัคเทส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัส เฟอร์รีดอกซิน NADPH-รีดัคเทส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสแอคติวิตีเฟอร์รีดอกซิน, กรด นิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนเกี่ยวกับรีดัคชันของซัลเฟต RXA077, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัส โปรตีนเกี่ยวกับรีดัคชันของซัลเฟต RXA248, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีนเกี่ยวกับรีดัคชัน ของซัลเฟต RXA247, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสตัวควบคุม RXA0655 และกรดนิวคลีอิคซึ่ง ประมวลรหัสตัวควบคุม RXN2910

43. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 42 ในที่ซึ่งจุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมซึ่งนอกจากนี้ยังมีแอคติวิตีที่เพิ่ม ขึ้นโดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ ของอย่างน้อยแอคติวิตีหนึ่งที่คัดเลือกจากกลุ่มของแอคติวิตี แอสปาร์เตตไคเนส, แอคติวิตีแอสปาร์เตต-เซมิแอลดีไฮด์ดีไฮโดรจีเนส, แอคติวิตีฮอมอเซรีนดีไฮโดร จีเนส, แอคติวิตีกลีเซอรัลดีไฮด์-3-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส, แอคติวิตี 3-ฟอสฟอกลีเซอเรตไคเนส, แอคติวิตีไพรูเวตคาร์บอกซิเลส, แอคติวิตีไทรโอสฟอสเฟตไอโซเมอเรส, แอคติวิตีฮอมอเซรีน O- อะเซทิลทรานสเฟอเรส, แอคติวิตีซิสตาไธโอนีนแกมมา-ซินเธส, แอคติวิตีซิสตาไธโอนีนบีตา- ไลเอส, แอคติวิตีเซรินไฮดรอกซีเมธิลทรานสเฟอเรส, แอคติวิตี O-อะเซทิลฮอมอเซรีนซัลฟ์ไฮดริเลส, แอคติวิตีเมธิลีนเททราไฮโดรฟอเลตรีดัคเทส, แอคติวิตีฟอสฟอเซรีนอะมิโนทรานสเฟอเรส, แอคติวิตีฟอสฟอเซรีนฟอสฟาเทส, แอคติวิตีเซรีนอะเซทิลทรานสเฟอเรส, แอคติวิตีซิสเตอีนซินเธส I, แอคติวิตีซิสเตอีนซินเธส II, แอคติวิตีเมไธโอนีนซินเธสชนิดที่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12, แอคติวิตี เมไธโอนีนซินเธสชนิดที่ไม่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12, แอคติวิตีซัลเฟตอะดีนิลิลทรานสเฟอเรส, แอคติวิตีฟอสฟออะดีโนซีน-ฟอสฟอซัลเฟตรีดัคเทส, แอคติวิตีเฟอร์รีดอกซิน-ซัลไฟต์รีดัคเทส, แอคติวิตีเฟอร์รีดอกซิน NADPH-รีดัคเทส, แอคติวิตีเฟอร์รีดอกซิน, แอคติวิตีของโปรตีนเกี่ยวกับ รีดัคชันของซัลเฟต RXA077, แอคติวิตีของโปรตีนเกี่ยวกับรีดัคชันของซัลเฟต RXA248, แอคติวิตี ของโปรตีนเกี่ยวกับรีดัคชันของซัลเฟต RXA247, แอคติวิตีของตัวควบคุม RXA655 และแอคติวิตีของ ตัวควบคุม RXN2910

44. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 42 หรือ 43 ในที่ซึ่งจุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมซึ่งนอกจากนี้ยังมี แอคติวิตีที่ลดลงโดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ ของอย่างน้อยแอคติวิตีหนึ่งที่คัดเลือกจากกลุ่มของ แอคติวิตีฮอมอเซรีนไคเนส, แอคติวิตีธรีโอนีนดีไฮดราเทส, แอคติวิตีธรีโอนีนซินเธส, แอคติวิตีเมโซ- ไดอะมิโนพิมีเลต D-ดีไฮโดรจีเนส, แอคติวิตีฟอสฟออีนอลไพรูเวตคาร์บอกซีไคเนส, แอคติวิตี ไพรูเวตออกซิเดส, แอคติวิตีไดไฮโดรไดพิโคลิเนตซินเธส, แอคติวิตีไดไฮโดรไดพิโคลิเนตรีดัคเทส และแอคติวิตีไดอะมิโนพิโคลิเนตดีคาร์บอกซิเลส

45. วิธีสำหรับการเตรียมธรีโอนีนโดยการเลี้ยงจุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมตามข้อใดข้อหนึ่ง ของข้อถือสิทธิที่ 24, 25, 31 หรือ 32 ในที่ซึ่งจีนได้ถูกคัดเลือกจากกลุ่มของกรดนิวคลีอิคซึ่งประมวล รหัสแอสปาร์เตตไคเนส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสแอสปาร์เตต-เซมิแอลดีไฮด์ดีไฮโดรจีเนส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสกลีเซอรัลดีไฮด์-3-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวล รหัส 3-ฟอสฟอกลีเซอเรตไคเนส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสไพรูเวตคาร์บอกซิเลส, กรดนิวคลีอิค ซึ่งประมวลรหัสไทรโอสฟอสเฟตไอโซเมอเรส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสฮอมอเซรีนไคเนส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสธรีโอนีนซินเธส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสตัวพาขนส่งธรีโอนีน ออก, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสกลูโคส-6-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวล รหัสทรานสแอลโดเลส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสทรานสคีโทเลส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวล รหัสมาเลต-ควิโนนออกซิโดรีดัคเทส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัส 6-ฟอสฟอกลูโคเนตดีไฮโดร จีเนส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสตัวขนส่งไลซีนออก, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสไบโอทิน ไลเกส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสฟอสฟออีนอลไพรูเวตคาร์บอกซิเลส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวล รหัสโปรตีนการไหลออกของธรีโอนีน, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสฟรุคโทส-1,6-บิสฟอสฟาเทส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัสโปรตีน OpcA, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัส 1-ฟอสฟอฟรุคโท ไคเนส, กรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัส 6-ฟอสฟอฟรุคโทไคเนส และกรดนิวคลีอิคซึ่งประมวลรหัส ฮอมอเซรีนดีไฮโดรจีเนส

46. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 45 ในที่ซึ่งจุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมซึ่งนอกจากนี้ยังมีแอคติวิตีที่เพิ่ม ขึ้นโดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ ของอย่างน้อยแอคติวิตีหนึ่งที่คัดเลือกจากกลุ่มของแอคติวิตี แอสปาร์เตตไคเนส, แอคติวิตีแอสปาร์เตต-เซมิแอลดีไฮด์ดีไฮโดรจีเนส, แอคติวิตีกลีเซอรัลดีไฮด์-3- ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส, แอคติวิตี 3-ฟอสฟอกลีเซอเรตไคเนส, แอคติวิตีไพรูเวตคาร์บอกซิเลส, แอคติ วิตีไทรโอสฟอสเฟตไอโซเมอเรส, แอคติวิตีธรีโอนีนซินเธส, แอคติวิตีของตัวพาขนส่งธรีโอนีนออก, แอคติวิตีทรานสแอลโดเลส, แอคติวิตีทรานสคีโทเลส, แอคติวิตีกลูโคส-6-ฟอสเฟตดีไฮโดรจีเนส, แอคติวิตีมาเลต-ควิโนนออกซิโดรีดัคเทส, แอคติวิตีฮอมอเซรีนไคเนส, แอคติวิตีไบโอทินไลเกส, แอคติวิตีฟอสฟออีนอลไพรูเวตคาร์บอกซิเลส, แอคติวิตีโปรตีนการไหลออกของธรีโอนีน, แอคติวิตี โปรตีน OpcA, แอคติวิตี1-ฟอสฟอฟรุคโทไคเนส, แอคติวิตี 6-ฟอสฟอฟรุคโทไคเนส, แอคติวิตี ฟรุคโทส-1,6-บิสฟอสฟาเทส, แอคติวิตี 6-ฟอสฟอกลูโคเนตดีไฮโดรจีเนส และแอคติวิตีฮอมอเซรีน ดีไฮโดรจีเนส

47. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 45 หรือ 46 ในที่ซึ่งจุลินทรีย์ที่ดัดแปรทางพันธุกรรมซึ่งนอกจากนี้ยังมี แอคติวิตีที่ลดลงโดยเปรียบเทียบกับไวลด์ไทป์ ของอย่างน้อยแอคติวิตีหนึ่งที่คัดเลือกจากกลุ่มของ แอคติวิตีธรีโอนีนดีไฮดราเทส, แอคติวิตีฮอมอเซรีน O-อะเซทิลทรานสเฟอเรส, แอคติวิตีเซรีน ไฮดรอกซีเมธิลทรานสเฟอเรส, แอคติวิตี O-อะเซทิลฮอมอเซรีนซัลฟ์ไฮดริเลส, แอคติวิตีเมโซ- ไดอะมิโนพิมีเลต D-ดีไฮโดรจีเนส, แอคติวิตีฟอสฟออีนอลไพรูเวตคาร์บอกซีไคเนส, แอคติวิตี ไพรูเวตออกซิเดส, แอคติวิตีไดไฮโดรไดพิโคลิเนตซินเธส, แอคติวิตีไดไฮโดรไดพิโคลิเนตรีดัคเทส, แอคติวิตีแอสปาราจิเนส, แอคติวิตีแอสปาร์เตตดีคาร์บอกซิเลส, แอคติวิตีตัวขนส่งไลซีนออก, แอคติวิตีอะซีโตแลคเทตซินเธส, แอคติวิตีคีทอล-แอซิดรีดัคโทไอโซเมอเรส, แอคติวิตีอะมิโนทรานส เฟอเรสสายกิ่งก้าน, แอคติวิตีเมไธโอนีนซินเธสชนิดที่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12, แอคติวิตีเมไธโอนีนซิน เธสชนิดที่ไม่ขึ้นกับโคเอนไซม์ B12, แอคติวิตีไดไฮดรอกซี-แอซิดดีไฮดราเทส และแอคติวิตี ไดอะมิโนพิโคลิเนตดีคาร์บอกซิเลส

48. วิธีตามข้อใดข้อหนึ่งของข้อถือสิทธิที่ 38 ถึง 47 ในที่ซึ่งผลิตภัณฑ์ชีวสังเคราะห์ได้ถูกแยก และที่ ซึ่งเหมาะสมได้ถูกทำให้บริสุทธิ์จากตัวกลางเลี้ยงหลัง และ/หรือ ระหว่างขั้นตอนการเลี้ยง