TH74141B - การผลิตแบบรีคอมบิแนนท์ของโปรตีนที่ยึดเหนี่ยวเฮปปาริน - Google Patents

การผลิตแบบรีคอมบิแนนท์ของโปรตีนที่ยึดเหนี่ยวเฮปปาริน

Info

Publication number
TH74141B
TH74141B TH601006472A TH0601006472A TH74141B TH 74141 B TH74141 B TH 74141B TH 601006472 A TH601006472 A TH 601006472A TH 0601006472 A TH0601006472 A TH 0601006472A TH 74141 B TH74141 B TH 74141B
Authority
TH
Thailand
Prior art keywords
heparin
support
binding proteins
binding protein
buffer solution
Prior art date
Application number
TH601006472A
Other languages
English (en)
Other versions
TH89903A (th
Inventor
แอลคลีแลนด์ เจฟฟรี่ย์
เอชชเมลเซอร์ ชาร์ลส
ไพซาร์โร่ เชลลี่
ดับเบิลยูคาห์น เดวิด
อีวิงเคลอร์ มาร์โจรี่
ดี บัทเลอร์ มิเชลล์
Original Assignee
เจเนนเทค
นางดารานีย์ วัจนะวุฒิวงศ์
นางดารานีย์ วัจนะวุฒิวงศ์ นายธเนศ เปเรร่า นางวรนุช เปเรร่า
นางวรนุช เปเรร่า
นายธเนศ เปเรร่า
Filing date
Publication date
Application filed by เจเนนเทค, นางดารานีย์ วัจนะวุฒิวงศ์, นางดารานีย์ วัจนะวุฒิวงศ์ นายธเนศ เปเรร่า นางวรนุช เปเรร่า, นางวรนุช เปเรร่า, นายธเนศ เปเรร่า filed Critical เจเนนเทค
Publication of TH89903A publication Critical patent/TH89903A/th
Publication of TH74141B publication Critical patent/TH74141B/th

Links

Abstract

DC60 (11/04/50) กระบวนการสำหรับการแยกและทำให้บริสุทธิ์ของโปรตีนที่ยึดเหนี่ยวเฮปปารินที่ พับตัวใหม่และที่ได้รับการผลิตขึ้นในเฮทเทอโรโลกัสโฮสต์เซล รวมถึงขั้นตอนของการบ่มโปรตีนที่ ทำให้ละลายแล้วกับสารโพลีแอนไอออนิคเช่น เดกซ์แตรนซัลเฟต กระบวนการสำหรับการแยกและทำให้บริสุทธิ์ของโปรตีนที่ยึดเหนี่ยวเฮปปารินที่ พับตัวใหม่และที่ได้รับการผลิตขึ้นในเฮทเทอโรโลกัสโฮสต์เซล รวมถึงขั้นตอนของการบ่มโปรตีนที่ ทำให้ละลายแล้วกับสารโพลีแอนไอออนิคเช่น เดกซ์แตรนซัลเฟต

Claims (23)

แก้ไข 5 ส.ค. 2562 หน้า 1 ของจำนวน 3 หน้า ข้อถือสิทธิ 1. กระบวนการสำหรับนำกลับคืนโปรตีนที่ยึดเหนี่ยวเฮปปารินจากเซล โปรคารีโอทที่เลี้ยงไว้ ซึ่งโปรตีนที่ยึดเหนี่ยวเฮปปาริน คือ แฟคเตอร์ของการเจริญของเยื่อบุในเส้น เลือด (VEGF) ซึ่งยึดเหนี่ยวเฮปปาริน ซึ่งกระบวนการประกอบด้วยขั้นตอนของ (a) การแยกโปรตีนที่ยึดเหนี่ยวเฮปปารินดังกล่าวออกจากเพอริพลาสซึมของ เซลโปรคารีโอทที่เลี้ยงไว้ดังกล่าว; (b) การดีเนเจอร์โปรตีนที่ยึดเหนี่ยวเฮปปารินดังกล่าวในสารละลายบัฟเฟอร์ที่ หนึ่งที่ประกอบด้วยสารเปลี่ยนแปลงการเรียงตัว (chaotropic agent) และสารรีดิวซ์ (c) การบ่มโปรตีนที่ยึดเหนี่ยวเฮปปารินดังกล่าวในสารละลายบัฟเฟอร์ที่สองที่ ประกอบด้วย สารเปลี่ยนแปลงการเรียงตัว และสารโพลีแอนไอออนิคที่เติมหมู่ซัลเฟตแล้ว เป็นเวลาที่และใน สภาพที่การพับตัวใหม่ของโปรตีนที่ยึดเหนี่ยวเฮปปารินเกิดขึ้น และ (d) การนำกลับคืนโปรตีนที่ยึดเหนี่ยวเฮปปารินที่พับตัวใหม่แล้วดังกล่าว ซึ่งมี การเพิ่มโปรตีนที่ยึดเหนี่ยวเฮปปารินที่พับตัวใหม่แล้วที่นำกลับคืนได้ 2 ถึง 5 เท่าเมื่อเทียบกับการบ่ม ที่ไม่มีสารโพลีแอนไอออนิคที่เติมหมู่ซัลเฟตแล้ว --------------------------------------------------------------------------
1. กระบวนการสำหรับแยกเอาโปรตีนที่ยึดเหนี่ยวเฮปปารินจากเซลโปรคารีโอทที่ เลี้ยงไว้กระบวนการประกอบด้วยขั้นตอนของ (a) การแยกโปรตีนที่ยึดเหนี่ยวเฮปปารินดังกล่าวออกจากเพอริพลาสซึมของ เซลโปรคารีโอทที่เลี้ยงไว้ดังกล่าว; (b) การดีเนเจอร์โปรตีนที่ยึดเหนี่ยวเฮปปารินที่แยกได้ดังกล่าวในสารละลาย บัฟเฟอร์ที่หนึ่งที่ประกอบด้วยสารเปลี่ยนแปลงการเรียงตัวและสารรีดิวซ์ (c) การบ่มโปรตีนที่ยึดเหนี่ยวเฮปปารินที่ดีเนเจอร์แล้วดังกล่าวในสารละลาย บัฟเฟอร์ที่สองที่ประกอบด้วย สารเปลี่ยนแปลงการเรียงตัว และสารโพลีแอนไอออนิคที่เติมหมู่ ซัลเฟตแล้วเป็นเวลาที่และในสภาพที่การพับตัวใหม่ของโปรตีนที่ยึดเหนี่ยวเฮปปารินเกิดขึ้น และ (d) การแยกเอาโปรตีนที่ยึดเหนี่ยวเฮปปารินที่พับตัวใหม่แล้วดังกล่าว ซึ่งมีการ เพิ่มโปรตีนที่ยึดเหนี่ยวเฮปปารินที่พับตัวใหม่แล้วที่แยกได้ประมาณ 2 ถึง 5 เท่าเมื่อเทียบกับการบ่มที่ ไม่มีสารโพลีแอนไอออนิคที่เติมหมู่ซัลเฟตแล้ว
2. กระบวนการของข้อถือสิทธิที่ 1 ซึ่งโปรตีนที่ยึดเหนี่ยวเฮปปารินคือ แฟคเตอร์ ของการเจริญที่ยึดเหนี่ยวเฮปปาริน
3. กระบวนการของข้อถือสิทธิที่ 2 ซึ่งแฟคเตอร์ของการเจริญที่ยึดเหนี่ยวเฮปปาริน คือ แฟคเตอร์ของการเจริญของเยื่อบุในเส้นเลือด (VEGF)
4. กระบวนการของข้อถือสิทธิที่ 3 ซึ่ง VEGF คือ VEGF165
5. กระบวนการของข้อถือสิทธิที่ 1 ซึ่งสารโพลีแอนไอออนิคที่เติมหมู่ซัลเฟตแล้ว มีน้ำหนักโมเลกุลระหว่างประมาณ 3,000 ดาลตัน ถึง 10,000 ดาลตัน
6. กระบวนการของข้อถือสิทธิที่ 3 ซึ่งสารละลายบัฟเฟอร์ที่สองดังกล่าว ประกอบด้วย เดกซ์เตรนซัลเฟต
7. กระบวนการของข้อถือสิทธิที่ 3 ซึ่งสารละลายบัฟเฟอร์ที่สองดังกล่าว ประกอบด้วย โซเดียมซัลเฟต
8. กระบวนการของข้อถือสิทธิที่ 3 ซึ่งสารละลายบัฟเฟอร์ที่สองดังกล่าว ประกอบด้วย เฮปปาริน
9. กระบวนการของข้อถือสิทธิที่ 6 ซึ่งเดกซ์แตรนซัลเฟตมีน้ำหนักโมเลกุลระหว่าง ประมาณ 8,000 ถึง 10,000 ดาลตัน
10. กระบวนการของข้อถือสิทธิที่ 3 ซึ่งสารละลายบัฟเฟอร์ที่หนึ่งและที่สอง ดังกล่าวประกอบด้วย HEPPS pH 8.0
11. กระบวนการของข้อถือสิทธิที่ 1 ซึ่งสารละลายบัฟเฟอร์ที่สองดังกล่าวมีส่วน เพิ่มเติมที่ประกอบด้วย สารรีดิวซ์
12. กระบวนการของข้อถือสิทธิที่ 1 ซึ่งสารละลายบัฟเฟอร์ที่สองดังกล่าวมีส่วน เพิ่มเติมที่ประกอบด้วย ซิสเตอีนและ DTT ร่วมกัน
13. กระบวนการของข้อถือสิทธิที่ 1 ซึ่งสารละลายบัฟเฟอร์ที่สองดังกล่าวมีส่วน เพิ่มเติมที่ประกอบด้วย ดีเทอร์เจนท์ที่ไม่ถือประจุ
14. กระบวนการของข้อถือสิทธิที่ 1 ซึ่งสารละลายบัฟเฟอร์ที่สองดังกล่าวมีส่วน เพิ่มเติมที่ประกอบด้วย อาร์จินีน และ/หรือ ไลซีน
15. กระบวนการของข้อถือสิทธิที่ 1 ซึ่งขั้นตอนของการแยก (d) ดังกล่าว ประกอบด้วย การสัมผัสตามลำดับระหว่างโปรตีนที่ยึดเหนี่ยวเฮปปารินที่พับตัวใหม่แล้วดังกล่าวกับ สารรองรับทางโครมาโตกราฟีที่เป็นไฮดรอกซีอาปาไทท์, สารรองรับทางโครมาโตกราฟีแบบ อันตรกิริยาของส่วนที่ไม่ชอบน้ำที่หนึ่ง, สารรองรับทางโครมาโตกราฟีแบบแลกเปลี่ยนไอออนประจุ บวก, และสารรองรับมาโครมาโตกราฟีแบบอันตรกิริยาของส่วนที่ไม่ชอบน้ำที่สอง และการชะ โปรตีนที่ยึดเหนี่ยวเฮปปารินออกอย่างเลือกสรรจากสารรองรับแต่ละชนิด
16. กระบวนการของข้อถือสิทธิที่ 15 ซึ่งสารรองรับทางโครมาโตกราฟีแบบ อันตรกิริยาของส่วนที่ไม่ชอบน้ำที่หนึ่งดังกล่าวเลือกได้จากกลุ่มที่ประกอบด้วย บิวทิล, โปรปิล-, ออดทิล- และอาริล-อากาโรสเรซิน
17. กระบวนการของข้อถือสิทธิที่ 15 ซึ่งสารรองรับทางโครมาโตกราฟีแบบ อันตรกิริยาของส่วนที่ไม่ชอบน้ำที่หนึ่งดังกล่าวคือ สารรองรับที่เป็นบิวทิล-อากาโรสเรซิน และ สารรองรับทางโครมาโตกราฟีแบบอันตรกิริยาของส่วนที่ไม่ชอบน้ำที่สองดังกล่าวคือ สารรองรับ ที่เป็นเฟนนิลอากาโรสเรซิน
18. กระบวนการของข้อถือสิทธิที่ 1 ซึ่งขั้นตอนของการแยก (d) ดังกล่าว ประกอบด้วย การสัมผัสตามลำดับระหว่างโปรตีนที่ยึดเหนี่ยวเฮปปารินที่พับตัวใหม่แล้วดังกล่าวกับ สารรองรับที่แลกเปลี่ยนไอออนประจุบวก, สารรองรับทางโครมาโตกราฟีแบบอันตรกิริยาของส่วนที่ ไม่ชอบน้ำ และสารรองรับทางโครมาโตกราฟีที่แลกเปลี่ยนไอออน และการซะโปรตีนที่ยึดเหนี่ยว เฮปปารินออกอย่างเลือกสรรจากสารรองรับแต่ละชนิด
19. วิธีการสำหรับแยกเอาโปรตีนที่ยึดเหนี่ยวเฮปปารินจากเซลโปรคารีโอทที่เลี้ยง ไว้วิธีการประกอบด้วยขั้นตอนของ (a) การแยกโปรตีนที่ยึดเหนี่ยวเฮปปารินดังกล่าวออกจากเพอริพลาสซึมของ เซลโปรคารีโอทที่เลี้ยงไว้ดังกล่าว; (b) การดีเนเจอร์โปรตีนที่ยึดเหนี่ยวเฮปปารินที่แยกได้ดังกล่าวในสารละลาย บัฟเฟอร์ที่หนึ่งที่ประกอบด้วยสารเปลี่ยนแปลงการเรียงตัวและสารรีดิวซ์ (c) การบ่มโปรตีนที่ยึดเหนี่ยวเฮปปารินที่ดีเนเจอร์แล้วดังกล่าวในสารละลาย บัฟเฟอร์ที่สองที่ประกอบด้วย สารเปลี่ยนแปลงการเรียงตัว และสารโพลีแอนไอออนิคที่เติมหมู่ ซัลเฟตแล้วเป็นเวลาที่และในสภาพที่การพับตัวใหม่ของโปรตีนที่ยึดเหนี่ยวเฮปปารินเกิดขึ้น ซึ่งมี การเพิ่มโปรตีนที่ยึดเหนี่ยวเฮปปารินที่พับตัวใหม่แล้วที่แยกได้ประมาณ 2 ถึง 5 เท่า เมื่อเทียบกับการ บ่มที่ไม่มีสารโพลีแอนไอออนิคที่เติมหมู่ซัลเฟตแล้ว และ (d) การสัมผัสตามลำดับระหว่างโปรตีนที่ยึดเหนี่ยวเฮปปารินที่พับตัวใหม่แล้ว ดังกล่าวกับสารรองรับทางโครมาโตกราฟีที่เป็นไฮดรอกซีอาปาไทท์, สารรองรับทางโครมาโตกราฟี แบบอันตรกิริยาของส่วนที่ไม่ชอบน้ำที่หนึ่ง, สารรองรับทางโครมาโตกราฟีแบบแลกเปลี่ยนไอออน ประจุบวก และสารรองรับทางโครมาโตกราฟีแบบอันตรกิริยาของส่วนที่ไม่ชอบน้ำที่สองและการชะ โปรตีนที่ยึดเหนี่ยวเฮปปารินออกอย่างเลือกสรรจากสารรองรับแต่ละชนิด
20. วิธีการสำหรับทำให้โปรตีนที่ยึดเหนี่ยวเฮปปารินบริสุทธิ์ วิธีการประกอบด้วย ขั้นตอนของการสัมผัสตามลำดับระหว่างโปรตีนที่ยึดเหนี่ยวเฮปปารินที่พับตัวใหม่แล้วกับสารรองรับ ทางโครมาโตกราฟีที่เป็นไฮดรอกซีอาปาไทท์, สารรองรับทางโครมาโตกราฟีแบบอันตรกิริยาของ ส่วนที่ไม่ชอบน้ำที่หนึ่ง, สารรองรับทางโครมาโตกราฟีแบบแลกเปลี่ยนไอออนประจุบวก และสาร รองรับทางโครมาโตกราฟีแบบอันตรกิริยาของส่วนที่ไม่ชอบน้ำที่สอง และการชะโปรตีนที่ยึดเหนี่ยว เฮปปารินออกอย่างเลือกสรรจากสารรองรับแต่ละชนิด
21. วิธีการสำหรับแยกเอาโปรตีนที่ยึดเหนี่ยวเฮปปารินจากเซลโปรคารีโอทที่เลี้ยง ไว้วิธีการประกอบด้วยขั้นตอนของ (a) การแยกโปรตีนที่ยึดเหนี่ยวเฮปปารินดังกล่าวออกจากเพอริพลาสซึมของ เซลโปรคารีโอทที่เลี้ยงไว้ดังกล่าว; (b) การดีเนเจอร์โปรตีนที่ยึดเหนี่ยวเฮปปารินที่แยกได้ดังกล่าวในสารละลาย บัฟเฟอร์ที่หนึ่งที่ประกอบด้วยสารเปลี่ยนแปลงการเรียงตัวและสารรีดิวซ์ (c) การบ่มโปรตีนที่ยึดเหนี่ยวเฮปปารินที่ดีเนเจอร์แล้วดังกล่าวในสารละลาย บัฟเฟอร์ที่สองที่ประกอบด้วย สารเปลี่ยนแปลงการเรียงตัว และสารโพลีแอนไอออนิคที่เติมหมู่ ซัลเฟตแล้วเป็นเวลาที่และในสภาพที่การพับตัวใหม่ของโปรตีนที่ยึดเหนี่ยวเฮปปารินเกิดขึ้น ซึ่งมีการ เพิ่มโปรตีนที่ยึดเหนี่ยวเฮปปารินที่พับตัวใหม่แล้วที่แยกได้ประมาณ 2 ถึง 3 เท่าเมื่อเทียบกับการบ่มที่ ไม่มีสารโพลีแอนไอออนิคที่เติมหมู่ซัลเฟตแล้ว และ (d) การสัมผัสตามลำดับ ระหว่างโปรตีนที่ยึดเหนี่ยวเฮปปารินที่พับตัวใหม่แล้ว ดังกล่าวกับสารรองรับที่แลกเปลี่ยนไอออนประจุบวก; สารรองรับทางโครมาโตกราฟีแบบอันตร กิริยาของส่วนที่ไม่ชอบน้ำ และสารรองรับทางโครมาโตกราฟีที่แลกเปลี่ยนไอออน และการชะ โปรตีนที่ยึดเหนี่ยวเฮปปารินออกอย่างเลือกสรรจากสารรองรับแต่ละชนิด
22. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 19 หรือ 21 ซึ่งสารโพลีแอนไอออนิคมีน้ำหนักโมเลกุล อยู่ระหว่างประมาณ 3,000 ดาลตันถึง 10,000 ดาลตัน
23. วิธีการสำหรับทำให้โปรตีนที่ยึดเหนี่ยวเฮปปารินบริสุทธิ์ วิธีการ ประกอบด้วย ขั้นตอนของการสัมผัสตามลำดับระหว่างโปรตีนที่ยึดเหนี่ยวเฮปปารินที่พับตัวใหม่แล้ว กับสารรองรับที่แลกเปลี่ยนไอออนประจุบวก; สารรองรับทางโครมาโตกราฟีแบบอันตรกิริยาของ ส่วนที่ไม่ชอบน้ำและสารรองรับทางโครมาโตกราฟีที่แลกเปลี่ยนไอออน และการชะโปรตีนที่ ยึดเหนี่ยวเฮปปารินออกอย่างเลือกสรรจากสารรองรับแต่ละชนิด
TH601006472A 2006-12-21 การผลิตแบบรีคอมบิแนนท์ของโปรตีนที่ยึดเหนี่ยวเฮปปาริน TH74141B (th)

Publications (2)

Publication Number Publication Date
TH89903A TH89903A (th) 2008-05-30
TH74141B true TH74141B (th) 2020-01-31

Family

ID=

Similar Documents

Publication Publication Date Title
WO2023154822A3 (en) Methods of purifying a product
EP1786273B1 (en) Sequential protein isolation and purification schemes by affinity chromatography
RU2009105080A (ru) Рефолдинг рекомбинантных белков
RU2011137030A (ru) Способы очистки малых модулярных иммунофармацевтических белков
JP6416738B2 (ja) エリスロポエチンの精製
IE862211L (en) Purification and solubilisation of proteins from transformed¹microbes
CN104540846B (zh) 重新折叠来自包涵体的g‑csf的方法
JP2023502335A (ja) スプリットインテインシステムを使用したタンパク質精製
EP1444249B1 (en) Method of protein purification
KR20170026521A (ko) 단백질의 정제를 위한 방법 및 시약
CA2708291A1 (en) Production of recombinant interferon proteins
Feng et al. Rapid and high recovery isolation of mRNA from in vitro transcription system by ammonium sulphate precipitation at room temperature
US20190330269A1 (en) Method for purifying antibodies using pbs
CA2633554A1 (en) Recombinant production of heparin binding proteins
TH89903A (th) การผลิตแบบรีคอมบิแนนท์ของโปรตีนที่ยึดเหนี่ยวเฮปปาริน
CN103172727A (zh) 重组人胰岛素原的复性与纯化方法
CN103789321A (zh) 一种重组人胸腺肽α1的制备方法
JP2016535071A5 (th)
JP2009536821A5 (th)
US20040229330A1 (en) Integrated method for capture and purification of tagged proteins
Wang et al. Refolding of denatured/reduced lysozyme at high concentrations by artificial molecular chaperone‐ion exchange chromatography
Hochuli Interrelations of Chemistry and Biotechnology-III. Purification techniques for biological products (Technical Report)
CN106317227A (zh) 亲和配基、构建方法、亲和层析介质、制备方法及应用
WO2011151716A1 (en) Process for the purification of recombinant human il-11
AU2004313698B2 (en) Process for the purification of bacterially expressed proteins