TH23816A3 - ชุดไพร์เมอร์และกรรมวิธีการตรวจเชื้อ Tilapia lake virus ที่ก่อโรคในปลานิลและปลานิลแดง ด้วยเทคนิคแลมป์ร่วมกับการใช้ตัวตรวจจับดีเอ็นเอที่ติดฉลากอนุภาคทองคำนาโน - Google Patents
ชุดไพร์เมอร์และกรรมวิธีการตรวจเชื้อ Tilapia lake virus ที่ก่อโรคในปลานิลและปลานิลแดง ด้วยเทคนิคแลมป์ร่วมกับการใช้ตัวตรวจจับดีเอ็นเอที่ติดฉลากอนุภาคทองคำนาโนInfo
- Publication number
- TH23816A3 TH23816A3 TH2003001151U TH2003001151U TH23816A3 TH 23816 A3 TH23816 A3 TH 23816A3 TH 2003001151 U TH2003001151 U TH 2003001151U TH 2003001151 U TH2003001151 U TH 2003001151U TH 23816 A3 TH23816 A3 TH 23816A3
- Authority
- TH
- Thailand
- Prior art keywords
- tilapia
- primer
- lake virus
- detecting
- red
- Prior art date
Links
- 241001601305 Tilapia lake virus Species 0.000 title claims abstract 17
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract 15
- 241000647380 Oreochromis sp. YCC-2008 Species 0.000 title claims abstract 7
- 201000010099 disease Diseases 0.000 title claims abstract 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 title claims abstract 5
- 241000276707 Tilapia Species 0.000 title claims abstract 4
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract 4
- 239000010931 gold Substances 0.000 title claims abstract 4
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 title claims abstract 4
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 title claims abstract 4
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims abstract 2
- 241000276703 Oreochromis niloticus Species 0.000 claims 4
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 claims 3
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 claims 3
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims 2
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims 2
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 claims 2
- KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-N Betaine Natural products C[N+](C)(C)CC([O-])=O KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 108010014303 DNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 claims 1
- 102000016928 DNA-directed DNA polymerase Human genes 0.000 claims 1
- 102100034343 Integrase Human genes 0.000 claims 1
- KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-O N,N,N-trimethylglycinium Chemical compound C[N+](C)(C)CC(O)=O KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-O 0.000 claims 1
- 108010092799 RNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 claims 1
- 229960003237 betaine Drugs 0.000 claims 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 claims 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims 1
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 claims 1
- 210000001508 eye Anatomy 0.000 claims 1
- 210000002816 gill Anatomy 0.000 claims 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 claims 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 claims 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 claims 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 claims 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 claims 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 claims 1
- 125000003396 thiol group Chemical class [H]S* 0.000 claims 1
- 235000011178 triphosphate Nutrition 0.000 claims 1
- 239000001226 triphosphate Substances 0.000 claims 1
- UNXRWKVEANCORM-UHFFFAOYSA-N triphosphoric acid Chemical compound OP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O UNXRWKVEANCORM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 abstract 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 abstract 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 abstract 1
Abstract
หน้า 1 ของจำนวน 1 หน้า บทสรุปการประดิษฐ์ กรรมวิธีการตรวจเชื้อ Tilapia lake virus ที่ก่อโรคในปลานิลและปลานิลแดง ด้วยเทคนิคแลมป์ร่วมกับ การใช้ตัวตรวจจับดีเอ็นเอที่ติดฉลากอนุภาคทองคำนาโน สามารถใช้ตรวจเพื่อยืนยันการติดเชื้อ Tilapia lake virus ที่ก่อโรคในปลานิลและปลานิลแดงได้อย่างจำเพาะ ด้วยชุดไพรเมอร์และตัวตรวจจับดีเอ็นเอมีความจำเพาะ ต่อลำดับเบสของเชื้อ Tilapia lake virus ในบริเวณเซ็คเมนท์ที่ 9 (segment 9) และมีความไวในการตรวจโดย สามารถตรวจหาจำนวนการสร้างอาร์เอ็นเอในหลอดทดลอง (RNA in vitro transcripts) ที่มีชิ้นส่วนอาร์เอ็นเอ ของเช็คเมนท์ที่ 9 (segment 9) ของเชื้อ Tilapia lake virus ได้น้อยที่สุดถึง 1 สำเนา ใช้เวลาในการตรวจ วิเคราะห์น้อยกว่า 1 ชั่วโมง และสามารถอ่านผลได้ทันทีจากการเปลี่ยนแปลงสีของสารละลาย ซึ่งสีของผลบวก และผลลบแตกต่างกันอย่างชัดเจนสามารถอ่านผลได้ด้วยตาเปล่า ไม่ต้องใช้เครื่องมือเพิ่มเติมและผู้เชี่ยวชาญทำให้ สามารถนำมาใช้งานได้อย่างมีประสิทธิภาพ
Claims (10)
1.หน้า 1 ของจำนวน 2 หน้า ข้อถือสิทธิ 1. ชุดไพรเมอร์สำหรับตรวจเชื้อ Tilopio lake virus ที่ก่อโรคในปลานิลและปลานิลแดง ประกอบด้วย ก. ฟอร์เวิร์ด เอาท์เตอร์ไพรเมอร์ (F3): 5’TTCCGTGCTCCGTTACTA3’ ข. แบ็คเวิร์ด เอาท์เตอร์ไพรเมอร์ (B3): 5’TTGACAGAGATGAGTCGGT3’ ค. ฟอร์เวิร์ด อินเนอร์ ไพรเมอร์ (FIP): 5’GAGTTAATGACACTGAGTCAGCCA/TTTT/GGACCCAGCTCCCTATC3’ ง. แบ็คเวิร์ด อินเนอร์ ไพรเมอร์ (BIP): 5’CAGACTTGACCAGGTTGTGATGT/TITT/TCACTTTGTGCCATTACCC3’ จ. ฟอร์เวิร์ด ลูป ไพรเมอร์ (LF): 5’GCAGGAGAGTGCAATGGT3’ และ ฉ. แบ็คเวิร์ด ลูป ไพรเมอร์ (LB): 5’AGCACAAGCTCCAAGGG3’
2. กรรมวิธีการตรวจเชื้อ Tilapia take virus ที่ก่อโรคในปลานิลและปลานิลแดงจากตัวอย่างที่ต้องการ ทดสอบด้วยเทคนิคแลมป์โดยใช้ชุดไพรเมอร์สำหรับตรวจเชื้อ Tilapia lake virus ตามข้อถือสิทธิ 1 กรรมวิธี ประกอบด้วย ก. การนำอาร์เอ็นเอที่สกัดได้จากตัวอย่างที่ต้องการทดสอบมาทำปฏิกิริยาแลมป์ด้วยชุดไพรเมอร์ที่ จำเพาะต่อลำดับของเชื้อ Tilapia lake virus ที่ประกอบด้วย ฟอร์เวิร์ด เอาท์เตอร์ ไพรเมอร์ (F3): 5’TTCCGTGCTCCGTTACTA3’, แบ็คเวิร์ด เอาท์เตอร์ ไพรเมอร์ (B3): 5’TTGACAGA GATGAGTCGGT3’, ฟอร์เวิร์ด อินเนอร์ไพรเมอร์ (FIP): 5’GAGTTAATGACACTGAGTCAG CCA/TTTT/GGACCCAGCTCCCTATC3’, แบ็คเวิร์ด อินเนอร์ ไพรเมอร์ (BIP): 5’CAGACTT GACCAGGTTGTGATGT/ TTTT/TCACTTTGTGCCATTACCC3’, ฟอร์เวิร์ด ลูป ไพรเมอร์ (LF): 5’GCAGGAGAGTGCAATGGT3’ และแบ็คเวิร์ด ลูป ไพรเมอร์ (LB): 5’AGCACAAGCT CCAAGGG3’ เพื่อให้ได้ผลิตภัณฑ์แลมป์ และ ข. การวิเคราะห์ผลผลิตแลมป์ที่ได้ด้วยตัวตรวจจับดีเอ็นเอที่ติดฉลากอนุภาคทองคำนาโน
3. กรรมวิธีการตรวจเชื้อ Tilapia lake virus ตามข้อถือสิทธิ 2 ที่ซึ่ง ตัวอย่างที่ต้องการทดสอบ เลือกได้ อย่างน้อยหนึ่งชนิดจาก ตับ ตา สมอง ไต เหงือก ม้าม และเนื้อเยื่อเกี่ยวพันของกล้ามเนื้อ
4. กรรมวิธีการตรวจเชื้อ Tilapia lake virus ตามข้อถือสิทธิ 2 ที่ซึ่ง น้ำยาทดสอบแลมป์ ประกอบด้วย ก. เอาท์เทอร์ไพรเมอร์ (F3 และ B3) ที่มีลำดับนิวคลิโอไทด์ ดังนี้ ฟอร์เวิร์ด เอาท์เตอร์ไพรเมอร์ (F3): 5’TTCCGTGCTCCGTTACTA3’ แบ็คเวิร์ด เอาท์เตอร์ไพรเมอร์ (B3): 5’TTGACAGAGATGAGTCGGT 3’ ข. อินเนอร์ไพรเมอร์ (FIP และ BIP) ที่มีลำดับนิวคลิโอไทด์ ดังนี้ ฟอร์เวิร์ด อินเนอร์ ไพรเมอร์ (FIP): 5’G AGTTAATGACACTGAGTCAGCCA/TTTT/GGACCCAGCT CCCTATC3 ’ แบ็คเวิร์ด อินเนอร์ ไพรเมอร์ (BIP): 5’CAG ACTTGACCAGGTTGTGATGT/TTTT/TCACTTTGTGCCATTACCC3’ หน้า 2 ของจำนวน 2 หน้า ค. ลูปไพรเมอร์ (LF และ LB) ที่มีลำดับนิวคลิโอไทด์ ดังนี้ ฟอร์เวิร์ด ลูป ไพรเมอร์ (LF): 5’GCAGGAGAGTGCAATGGT3’ แบ็คเวิร์ด ลูป ไพรเมอร์ (LB): 5’AGCACAAGCTCCAAGGG3’ ง. บัฟเฟอร์ จ. สารดีออกซีนิวคลีโอไทด์ไตรฟอสเฟต ฉ. สารเบตาอีน ช. สารละลายแมกนีเซียมซัลเฟต ซ. บีเอสที ดีเอ็นเอพอลิเมอเรส ฌ. เอเอ็มวี รีเวิสทรานสคริปเตรส และ ญ. สารละลายอาร์เอ็นเอจากตัวอย่างที่ต้องการทดสอบ
5. กรรมวิธีการตรวจเชื้อ Tilapia lake virus ตามข้อถือสิทธิ 2 ที่ซึ่ง ปฏิกิริยาแลมป์ถูกทำภายใต้สภาวะที่ มีอุณหภูมิ 60 65 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 30 60 นาที
6. กรรมวิธีการตรวจเชื้อ Tilapia lake virus ตามข้อถือสิทธิ 2 ที่ซึ่ง การวิเคราะห์ผลิตภัณฑ์แลมป์ เป็น ผลบวก แสดงถึงการมีอยู่ของเชื้อ Tilapia lake virus ที่ก่อโรคในปลานิลและปลานิลแดง
7. กรรมวิธีการตรวจเชื้อ Tilapia lake virus ตามข้อถือสิทธิ 2 ที่ซึ่ง การวิเคราะห์ผลิตภัณฑ์แลมป์ เป็น ผลลบ แสดงถึงการไม่มีอยู่ของเชื้อ Tiiapia lake virus ที่ก่อโรคในปลานิลและปลานิลแดง
8. กรรมวิธีการตรวจเชื้อ Tilapia lake virus ตามข้อถือสิทธิ 7 ที่ซึ่ง ผลลบ ถูกแสดงด้วยการเปลี่ยนจากสี แดงเป็นสีม่วงอมเทา
9. กรรมวิธีการตรวจเชื้อ Tilapia lake virus ตามข้อถือสิทธิ 2 ที่ซึ่ง ตัวตรวจจับดีเอ็นเอโดยมีลำดับเบส คือ 5’ACAATGTTTTCGATCCAGGA3’
10. กรรมวิธีการตรวจเชื้อ Tilapia lake virus ตามข้อถือสิทธิ 2 ที่ซึ่ง ตัวตรวจจับดีเอ็นเอที่ติดฉลาก อนุภาคทองคำนาโนโดยมีลำดับเบส คือ 5’thiol (SH C6)AAAAAAAAAAACAATGTTTTCGATCCAG GA3’
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| TH23816A3 true TH23816A3 (th) | 2024-06-05 |
| TH23816Y TH23816Y (th) | 2024-06-05 |
| TH23816U TH23816U (th) | 2024-06-05 |
Family
ID=
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Nolan et al. | Quantitative real-time PCR (qPCR) for Eimeria tenella replication—implications for experimental refinement and animal welfare | |
| CN107557493B (zh) | 一种肠道病毒分型检测试剂盒 | |
| CN110295255B (zh) | 一种基于rt-lamp-lfd检测猕猴桃褪绿环斑相关病毒的快速检测方法 | |
| KR102004951B1 (ko) | 말라리아 감염 진단을 위한 Direct LAMP용 키트 및 방법 | |
| CN102952896A (zh) | 一种检测甲型流感病毒的环介导等温扩增通用试剂盒及其应用 | |
| CN111455094A (zh) | 检测深部感染真菌的组合物、试剂盒、用途及其方法 | |
| TH23816U (th) | ชุดไพร์เมอร์และกรรมวิธีการตรวจเชื้อ Tilapia lake virus ที่ก่อโรคในปลานิลและปลานิลแดง ด้วยเทคนิคแลมป์ร่วมกับการใช้ตัวตรวจจับดีเอ็นเอที่ติดฉลากอนุภาคทองคำนาโน | |
| TH23816Y (th) | ชุดไพร์เมอร์และกรรมวิธีการตรวจเชื้อ Tilapia lake virus ที่ก่อโรคในปลานิลและปลานิลแดง ด้วยเทคนิคแลมป์ร่วมกับการใช้ตัวตรวจจับดีเอ็นเอที่ติดฉลากอนุภาคทองคำนาโน | |
| CN115927742B (zh) | 基于环介导等温扩增技术检测猴痘病毒的组合物及其应用 | |
| Koiwai et al. | Rapid diagnosis of three shrimp RNA viruses using RT-PCR-DNA chromatography | |
| CN102154523B (zh) | 检测人bk病毒核酸的引物与荧光探针及其应用 | |
| CN101984068B (zh) | 一种布鲁氏菌诊断试剂盒 | |
| KR102076343B1 (ko) | 실시간 lamp법을 이용한 아데노바이러스 55형 검출용 조성물 및 이의 용도 | |
| CN108842001A (zh) | 用于检测猪德尔塔冠状病毒的引物及探针、荧光定量pcr试剂盒及方法和应用 | |
| CN116732246A (zh) | 一种检测流行性出血热病毒的试剂盒及其应用 | |
| Jyothy et al. | REAL-TIME PCR OR QUANTITATIVE PCR (QPCR)–A REVOLUTION IN MODERN SCIENCE | |
| Wang et al. | Combining reverse-transcription multiplex PCR and microfluidic electrophoresis to simultaneously detect seven mosquito-transmitted zoonotic encephalomyelitis viruses | |
| CN101545008B (zh) | 马铃薯金线虫检测用引物及探针 | |
| CN116064965B (zh) | 恒温扩增检测猴痘病毒的组合物、试剂盒及其用途 | |
| US20250388960A1 (en) | Composition for detecting cdna synthesis-based target gene using ligation method that does not use reverse transcription, and method for amplifying multiple ligation-assisted recombinase polymerase | |
| KR102941684B1 (ko) | 환경시료로부터 e형 간염 바이러스검출용 이중역전사중합효소연쇄반응프라이머 세트 개발 및 이를 이용한 진단키트 | |
| RU2744665C1 (ru) | Способ выявления рнк вируса луйо методом обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции с учетом результатов в режиме реального времени | |
| Lee et al. | Development of in-field-diagnosis of Aspergillus flavus by Loop-Mediated Isothermal Amplification in Honeybee | |
| JP2019180351A (ja) | 蛍光ｌａｍｐ法を用いた牛白血病ウイルス遺伝子の迅速検出法 | |
| TH19897Y (th) | ชุดไพร์เมอร์ (primer) และตัวตรวจจับ (DNA probe) สำหรับการตรวจหาเชื้อทิลาเปียเลคไวรัสในสัตว์น้ำ |