TH23816U - ชุดไพร์เมอร์และกรรมวิธีการตรวจเชื้อ Tilapia lake virus ที่ก่อโรคในปลานิลและปลานิลแดง ด้วยเทคนิคแลมป์ร่วมกับการใช้ตัวตรวจจับดีเอ็นเอที่ติดฉลากอนุภาคทองคำนาโน - Google Patents

ชุดไพร์เมอร์และกรรมวิธีการตรวจเชื้อ Tilapia lake virus ที่ก่อโรคในปลานิลและปลานิลแดง ด้วยเทคนิคแลมป์ร่วมกับการใช้ตัวตรวจจับดีเอ็นเอที่ติดฉลากอนุภาคทองคำนาโน

Info

Publication number
TH23816U
TH23816U TH2003001151U TH2003001151U TH23816U TH 23816 U TH23816 U TH 23816U TH 2003001151 U TH2003001151 U TH 2003001151U TH 2003001151 U TH2003001151 U TH 2003001151U TH 23816 U TH23816 U TH 23816U
Authority
TH
Thailand
Prior art keywords
tilapia
primer
lake virus
detecting
red
Prior art date
Application number
TH2003001151U
Other languages
English (en)
Other versions
TH23816A3 (th
TH23816Y (th
Inventor
เกียรติปฐมชัย นางวรรณสิกา
คำภีระ นางสาวจันทนา
แดงติ๊บ นางสาวศิรินทิพย์
เสนาปิน นางสาวแสงจันทร์
สุวรรณกาศ นายระพีพัฒน์
Original Assignee
สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ
Filing date
Publication date
Application filed by สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ filed Critical สำนักงานพัฒนาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีแห่งชาติ
Publication of TH23816A3 publication Critical patent/TH23816A3/th
Publication of TH23816Y publication Critical patent/TH23816Y/th
Publication of TH23816U publication Critical patent/TH23816U/th

Links

Abstract

หน้า 1 ของจำนวน 1 หน้า บทสรุปการประดิษฐ์ กรรมวิธีการตรวจเชื้อ Tilapia lake virus ที่ก่อโรคในปลานิลและปลานิลแดง ด้วยเทคนิคแลมป์ร่วมกับ การใช้ตัวตรวจจับดีเอ็นเอที่ติดฉลากอนุภาคทองคำนาโน สามารถใช้ตรวจเพื่อยืนยันการติดเชื้อ Tilapia lake virus ที่ก่อโรคในปลานิลและปลานิลแดงได้อย่างจำเพาะ ด้วยชุดไพรเมอร์และตัวตรวจจับดีเอ็นเอมีความจำเพาะ ต่อลำดับเบสของเชื้อ Tilapia lake virus ในบริเวณเซ็คเมนท์ที่ 9 (segment 9) และมีความไวในการตรวจโดย สามารถตรวจหาจำนวนการสร้างอาร์เอ็นเอในหลอดทดลอง (RNA in vitro transcripts) ที่มีชิ้นส่วนอาร์เอ็นเอ ของเช็คเมนท์ที่ 9 (segment 9) ของเชื้อ Tilapia lake virus ได้น้อยที่สุดถึง 1 สำเนา ใช้เวลาในการตรวจ วิเคราะห์น้อยกว่า 1 ชั่วโมง และสามารถอ่านผลได้ทันทีจากการเปลี่ยนแปลงสีของสารละลาย ซึ่งสีของผลบวก และผลลบแตกต่างกันอย่างชัดเจนสามารถอ่านผลได้ด้วยตาเปล่า ไม่ต้องใช้เครื่องมือเพิ่มเติมและผู้เชี่ยวชาญทำให้ สามารถนำมาใช้งานได้อย่างมีประสิทธิภาพ

Claims (10)

หน้า 1 ของจำนวน 2 หน้า ข้อถือสิทธิ
1. ชุดไพรเมอร์สำหรับตรวจเชื้อ Tilopio lake virus ที่ก่อโรคในปลานิลและปลานิลแดง ประกอบด้วย ก. ฟอร์เวิร์ด เอาท์เตอร์ไพรเมอร์ (F3): 5’-TTCCGTGCTCCGTTACTA-3’ ข. แบ็คเวิร์ด เอาท์เตอร์ไพรเมอร์ (B3): 5’-TTGACAGAGATGAGTCGGT-3’ ค. ฟอร์เวิร์ด อินเนอร์ ไพรเมอร์ (FIP): 5’-GAGTTAATGACACTGAGTCAGCCA/TTTT/GGACCCAGCTCCCTATC-3’ ง. แบ็คเวิร์ด อินเนอร์ ไพรเมอร์ (BIP): 5’-CAGACTTGACCAGGTTGTGATGT/TITT/TCACTTTGTGCCATTACCC-3’ จ. ฟอร์เวิร์ด ลูป ไพรเมอร์ (LF): 5’-GCAGGAGAGTGCAATGGT-3’ และ ฉ. แบ็คเวิร์ด ลูป ไพรเมอร์ (LB): 5’-AGCACAAGCTCCAAGGG-3’
2. กรรมวิธีการตรวจเชื้อ Tilapia take virus ที่ก่อโรคในปลานิลและปลานิลแดงจากตัวอย่างที่ต้องการ ทดสอบด้วยเทคนิคแลมป์โดยใช้ชุดไพรเมอร์สำหรับตรวจเชื้อ Tilapia lake virus ตามข้อถือสิทธิ 1 กรรมวิธี ประกอบด้วย ก. การนำอาร์เอ็นเอที่สกัดได้จากตัวอย่างที่ต้องการทดสอบมาทำปฏิกิริยาแลมป์ด้วยชุดไพรเมอร์ที่ จำเพาะต่อลำดับของเชื้อ Tilapia lake virus ที่ประกอบด้วย ฟอร์เวิร์ด เอาท์เตอร์ ไพรเมอร์ (F3): 5’-TTCCGTGCTCCGTTACTA-3’, แบ็คเวิร์ด เอาท์เตอร์ ไพรเมอร์ (B3): 5’-TTGACAGA GATGAGTCGGT-3’, ฟอร์เวิร์ด อินเนอร์ไพรเมอร์ (FIP): 5’GAGTTAATGACACTGAGTCAG CCA/TTTT/GGACCCAGCTCCCTATC-3’, แบ็คเวิร์ด อินเนอร์ ไพรเมอร์ (BIP): 5’-CAGACTT GACCAGGTTGTGATGT/ TTTT/TCACTTTGTGCCATTACCC-3’, ฟอร์เวิร์ด ลูป ไพรเมอร์ (LF): 5’-GCAGGAGAGTGCAATGGT-3’ และแบ็คเวิร์ด ลูป ไพรเมอร์ (LB): 5’-AGCACAAGCT CCAAGGG-3’ เพื่อให้ได้ผลิตภัณฑ์แลมป์ และ ข. การวิเคราะห์ผลผลิตแลมป์ที่ได้ด้วยตัวตรวจจับดีเอ็นเอที่ติดฉลากอนุภาคทองคำนาโน
3. กรรมวิธีการตรวจเชื้อ Tilapia lake virus ตามข้อถือสิทธิ 2 ที่ซึ่ง ตัวอย่างที่ต้องการทดสอบ เลือกได้ อย่างน้อยหนึ่งชนิดจาก ตับ ตา สมอง ไต เหงือก ม้าม และเนื้อเยื่อเกี่ยวพันของกล้ามเนื้อ
4. กรรมวิธีการตรวจเชื้อ Tilapia lake virus ตามข้อถือสิทธิ 2 ที่ซึ่ง น้ำยาทดสอบแลมป์ ประกอบด้วย ก. เอาท์เทอร์ไพรเมอร์ (F3 และ B3) ที่มีลำดับนิวคลิโอไทด์ ดังนี้ ฟอร์เวิร์ด เอาท์เตอร์ไพรเมอร์ (F3): 5’-TTCCGTGCTCCGTTACTA-3’ แบ็คเวิร์ด เอาท์เตอร์ไพรเมอร์ (B3): 5’-TTGACAGAGATGAGTCGGT -3’ ข. อินเนอร์ไพรเมอร์ (FIP และ BIP) ที่มีลำดับนิวคลิโอไทด์ ดังนี้ ฟอร์เวิร์ด อินเนอร์ ไพรเมอร์ (FIP): 5’-G AGTTAATGACACTGAGTCAGCCA/TTTT/GGACCCAGCT CCCTATC-3 ’ แบ็คเวิร์ด อินเนอร์ ไพรเมอร์ (BIP): 5’-CAG ACTTGACCAGGTTGTGATGT/TTTT/TCACTTTGTGCCATTACCC-3’ หน้า 2 ของจำนวน 2 หน้า ค. ลูปไพรเมอร์ (LF และ LB) ที่มีลำดับนิวคลิโอไทด์ ดังนี้ ฟอร์เวิร์ด ลูป ไพรเมอร์ (LF): 5’-GCAGGAGAGTGCAATGGT-3’ แบ็คเวิร์ด ลูป ไพรเมอร์ (LB): 5’-AGCACAAGCTCCAAGGG-3’ ง. บัฟเฟอร์ จ. สารดีออกซีนิวคลีโอไทด์ไตรฟอสเฟต ฉ. สารเบตาอีน ช. สารละลายแมกนีเซียมซัลเฟต ซ. บีเอสที ดีเอ็นเอพอลิเมอเรส ฌ. เอเอ็มวี รีเวิสทรานสคริปเตรส และ ญ. สารละลายอาร์เอ็นเอจากตัวอย่างที่ต้องการทดสอบ
5. กรรมวิธีการตรวจเชื้อ Tilapia lake virus ตามข้อถือสิทธิ 2 ที่ซึ่ง ปฏิกิริยาแลมป์ถูกทำภายใต้สภาวะที่ มีอุณหภูมิ 60 - 65 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 30 - 60 นาที
6. กรรมวิธีการตรวจเชื้อ Tilapia lake virus ตามข้อถือสิทธิ 2 ที่ซึ่ง การวิเคราะห์ผลิตภัณฑ์แลมป์ เป็น ผลบวก แสดงถึงการมีอยู่ของเชื้อ Tilapia lake virus ที่ก่อโรคในปลานิลและปลานิลแดง
7. กรรมวิธีการตรวจเชื้อ Tilapia lake virus ตามข้อถือสิทธิ 2 ที่ซึ่ง การวิเคราะห์ผลิตภัณฑ์แลมป์ เป็น ผลลบ แสดงถึงการไม่มีอยู่ของเชื้อ Tiiapia lake virus ที่ก่อโรคในปลานิลและปลานิลแดง
8. กรรมวิธีการตรวจเชื้อ Tilapia lake virus ตามข้อถือสิทธิ 7 ที่ซึ่ง ผลลบ ถูกแสดงด้วยการเปลี่ยนจากสี แดงเป็นสีม่วงอมเทา
9. กรรมวิธีการตรวจเชื้อ Tilapia lake virus ตามข้อถือสิทธิ 2 ที่ซึ่ง ตัวตรวจจับดีเอ็นเอโดยมีลำดับเบส คือ 5’-ACAATGTTTTCGATCCAGGA-3’
10. กรรมวิธีการตรวจเชื้อ Tilapia lake virus ตามข้อถือสิทธิ 2 ที่ซึ่ง ตัวตรวจจับดีเอ็นเอที่ติดฉลาก อนุภาคทองคำนาโนโดยมีลำดับเบส คือ 5’-thiol (SH C6)-AAAAAAAAAA-ACAATGTTTTCGATCCAG GA-3’
TH2003001151U 2020-05-29 ชุดไพร์เมอร์และกรรมวิธีการตรวจเชื้อ Tilapia lake virus ที่ก่อโรคในปลานิลและปลานิลแดง ด้วยเทคนิคแลมป์ร่วมกับการใช้ตัวตรวจจับดีเอ็นเอที่ติดฉลากอนุภาคทองคำนาโน TH23816U (th)

Publications (3)

Publication Number Publication Date
TH23816A3 TH23816A3 (th) 2024-06-05
TH23816Y TH23816Y (th) 2024-06-05
TH23816U true TH23816U (th) 2024-06-05

Family

ID=

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Nolan et al. Quantitative real-time PCR (qPCR) for Eimeria tenella replication—implications for experimental refinement and animal welfare
CN112831598A (zh) 用于非洲猪瘟病毒鉴别检验的实时荧光pcr扩增引物对、探针引物、及制备的试剂盒
CN102952896A (zh) 一种检测甲型流感病毒的环介导等温扩增通用试剂盒及其应用
Takehana et al. Rapid and sensitive detection of elephant endotheliotropic herpesvirus 1 (EEHV1) in blood by loop-mediated isothermal amplification (LAMP)
Saduakassova et al. Development and evaluation of a novel real-time RT-PCR to detect foot-and-mouth disease viruses from the emerging A/ASIA/G-VII lineage
CN116622872B (zh) 一种鸡沙门氏菌分子检测试剂盒及其非诊断性检测方法
Vilanova-Cuevas et al. Design and validation of a PCR protocol to specifically detect the clade of Philaster sp. associated with Diadema antillarum scuticociliatosis
TH23816A3 (th) ชุดไพร์เมอร์และกรรมวิธีการตรวจเชื้อ Tilapia lake virus ที่ก่อโรคในปลานิลและปลานิลแดง ด้วยเทคนิคแลมป์ร่วมกับการใช้ตัวตรวจจับดีเอ็นเอที่ติดฉลากอนุภาคทองคำนาโน
TH23816Y (th) ชุดไพร์เมอร์และกรรมวิธีการตรวจเชื้อ Tilapia lake virus ที่ก่อโรคในปลานิลและปลานิลแดง ด้วยเทคนิคแลมป์ร่วมกับการใช้ตัวตรวจจับดีเอ็นเอที่ติดฉลากอนุภาคทองคำนาโน
CN115927742B (zh) 基于环介导等温扩增技术检测猴痘病毒的组合物及其应用
US20200115765A1 (en) In situ detection of multiple predominant species of asian carp
CN102154523B (zh) 检测人bk病毒核酸的引物与荧光探针及其应用
Doki et al. Development of rapid and simple FCoV RNA detection systems using RT-PCR and RT-RPA combined with STH-PAS to diagnose FIP in cats
Jyothy et al. REAL-TIME PCR OR QUANTITATIVE PCR (QPCR)–A REVOLUTION IN MODERN SCIENCE
CN116732246A (zh) 一种检测流行性出血热病毒的试剂盒及其应用
CN108842001A (zh) 用于检测猪德尔塔冠状病毒的引物及探针、荧光定量pcr试剂盒及方法和应用
CN101545008B (zh) 马铃薯金线虫检测用引物及探针
RU2663454C1 (ru) Набор синтетических олигонуклеотидов для количественного определения ДНК возбудителей вульвовагинального кандидоза в слизистой оболочке влагалища
JP2019180351A (ja) 蛍光lamp法を用いた牛白血病ウイルス遺伝子の迅速検出法
Bhakdeenuan et al. RESEARCH ARTICLE A colorimetric reverse transcription-loop mediated isothermal amplification (RT-LAMP) method for the rapid detection of SARS-CoV-2 in Thailand
RU2744665C1 (ru) Способ выявления рнк вируса луйо методом обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции с учетом результатов в режиме реального времени
RU2823069C1 (ru) Тест-система для идентификации ДНК ткани дальневосточной сардины, или иваси (Sardinops melanostictus), в рыбных продуктах, в мясокостной рыбной муке и кормах с помощью полимеразной цепной реакции в режиме реального времени
CN116064965B (zh) 恒温扩增检测猴痘病毒的组合物、试剂盒及其用途
KR102941684B1 (ko) 환경시료로부터 e형 간염 바이러스검출용 이중역전사중합효소연쇄반응프라이머 세트 개발 및 이를 이용한 진단키트
Rawnuck et al. Detection of Dengue Serotypes by Two Molecular Techniques, qPCR and LAMP