TH22063Y - ชุดไพรเมอร์สำหรับการตรวจหาเชื้อ Enterocytozoon hepatopenaei และกรรมวิธีการตรวจหาเชื้อดังกล่าวด้วยเทคนิคแลมป์ด้วยชุดไพรเมอร์ดังกล่าว - Google Patents
ชุดไพรเมอร์สำหรับการตรวจหาเชื้อ Enterocytozoon hepatopenaei และกรรมวิธีการตรวจหาเชื้อดังกล่าวด้วยเทคนิคแลมป์ด้วยชุดไพรเมอร์ดังกล่าวInfo
- Publication number
- TH22063Y TH22063Y TH2103000912U TH2103000912U TH22063Y TH 22063 Y TH22063 Y TH 22063Y TH 2103000912 U TH2103000912 U TH 2103000912U TH 2103000912 U TH2103000912 U TH 2103000912U TH 22063 Y TH22063 Y TH 22063Y
- Authority
- TH
- Thailand
- Prior art keywords
- enterocytozoon
- swp7
- detecting
- primer
- lamp
- Prior art date
Links
Abstract
การประดิษฐ์นี้เป็นการออกแบบและพัฒนาชุดไพรเมอร์สำหรับการตรวจหาเชื้อ Enterocytozoon hepatopenoei (EHP) และกรรมวิธีการตรวจหาเชื้อดังกล่าวด้วยเทคนิคแลมป์ด้วยชุดไพรเมอร์ดังกล่าว โดย ชุดไพรเมอร์ตามการประดิษฐ์นี้ได้ออกแบบให้มีความจำเพาะต่อลำดับเบสบนยีนสปอร์ วอลล์ โปรตีน 7 (spore wall protein 7; SWP7) ของเชื้อ EHP นอกจากนี้ ยังได้พัฒนากรรมวิธีในการตรวจหาเชื้อ EHP ด้วย เทคนิคแลมป์ร่วมกับเทคนิคอื่นๆ โดยเฉพาะอย่างยิ่งการตรวจสอบผลการทดสอบด้วยแผ่นทดสอบแบบจุ่ม (Lateral flow dipstick; LFD) ซึ่งจะใช้เวลาในการทำปฏิกิริยาและตรวจผลการปนเปื้อนของเชื้อ EHP ทั้งสิ้น เพียง 70 นาที ทำให้กรรมวิธีตามการประดิษฐ์นี้มีความสะดวก รวดเร็วและง่ายต่อการตรวจหาเชื้อ EHP ใน ตัวอย่างที่ต้องการทดสอบ เช่น สัตว์นํ้า เช่น กุ้ง กุ้งทะเล หรือในอาหารสัตว์เพื่อตรวจการปนเปื้อนของเชื้อ เป็น ต้น นอกจากนี้ กรรมวิธีดังกล่าวยังมีความไวและความจำเพาะสูง ง่ายต่อการวิเคราะห์ผล ไม่เป็นอันตรายต่อ ผู้ใช้ และมีราคาถูก ไม่ต้องใช้เครื่องมืออุปกรณ์ที่ยุ่งยากซับซ้อน สะดวกต่อการนำไปใช้ตรวจหาเชื้อ EHP ใน งานภาคสนาม ทั้งยังสามารถอ่านผลการทดสอบได้ด้วยตาเปล่าบนแผ่นทดสอบแบบจุ่ม (Lateral flow dipstick; LFD) ด้วยหลักการอิมมูโนโครมาโทกราฟี (Immuno-chromatography)
Claims (10)
1. ชุดไพรเมอร์สำหรับการตรวจหาเชื้อ Enterocytozoon hepatopenoei มีลำดับนิวคลีโอไทด์ที่เลือกได้ จาก ก. อินเนอร์ไพรเมอร์ SWP7-FIP: 5’-CTG ATG TTC TTG ACT TAA GCG CAT TTT TTG GAC CAC ATT GGA AAG GTA-3’ ข. อินเนอร์ไพรเมอร์ SWP7-BIP: 5’-ไบโอทิน-CTG CTT TTG ACA TGT TGT CTG AAA TTT TAT CCT GCG ATA TTG GAC AT-3' ค. เอาท์เตอร์ไพรเมอร์ SWP7-F3: 5’-TCT TGT TTT GGA CCC ACA A-3’ ง. เอาท์เตอร์ไพรเมอร์ SWP7-B3: 5’-CAG AAA CTT CAA TTG GAG ACT T-3’ จ. ลูปไพรเมอร์ SWP7-LB : 5’-ATG TTG GCA ACC ACC TTT ATC TTG-3’
2. ชุดไพรเมอร์สำหรับการตรวจหาเชื้อ Enterocytozoon hepatopenoei ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ซึ่ง ลำดับ นิวคลีโอไทด์ดังกล่าวมีความจำเพาะต่อยีนสปอร์ วอลล์ โปรตีน 7
3. กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อ Enterocytozoon hepatopenoei ด้วยไพรเมอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ซึ่ง มี ขั้นตอนดังนี้ ก. การทดสอบตัวอย่างสารละลายดีเอ็นเอด้วยเทคนิคแลมป์ ทำได้โดย นำตัวอย่างสารละลายดีเอ็นเอผสม กับสารละลายแลมป์ที่มีชุดไพรเมอร์สำหรับการตรวจหาเชื้อ Enterocytozoon hepatopenoei เป็น องค์ประกอบ แล้วทำปฏิกิริยาแลมป์ที่อุณหภูมิ 63 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 60 นาที ข. การตรวจสอบผลทดสอบแลมป์ เลือกได้จาก การตรวจสอบด้วยแผ่นทดสอบแบบจุ่ม หรือ การแยก ด้วยกระแสไฟฟ้า อย่างใดอย่างหนึ่งหรือหลายอย่างรวมกัน
4. กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อ Enterocytozoon hepatopenoei ตามข้อถือสิทธิที่ 3 ที่ซึ่ง ตัวอย่างสารละลาย ดีเอ็นเอ เตรียมได้จาก การนำตัวอย่างที่ต้องการทดสอบมาบดในสารละลายกัวนิดีนไธโอไซยาเนต ที่ความ เข้มข้น 2 โมลาร์ จากนั้นให้ความร้อนที่อุณหภูมิ 95 - 100 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 5 - 10 นาที แล้วนำ หลอดตรวจไปแช่ในนํ้าแข็ง 5 - 10 นาที และนำมาปั่นเหวี่ยงที่ความเร็ว 10,000 - 12,000 เท่าของแรง โน้มถ่วงโลก เป็นเวลา 1-5 นาที เก็บเฉพาะส่วนใส
5. กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อ Enterocytozoon hepatopenoei ตามข้อถือสิทธิที่ 3 ที่ซึ่ง สารละลายแลมป์ ประกอบรวมด้วย ก. อินเนอร์ไพรเมอร์ SWP7-FIP และ SWP7-BIP อย่างละ 2 ไมโครโมลาร์ ข. เอาท์เตอร์ไพรเมอร์ SWP7-F3 และ SWP7-B3 อย่างละ 0.2 ไมโครโมลาร์ ค. ลูปไพรเมอร์ SWP7-LB 2 ไมโครโมลาร์ ง. สารดีเอ็นทีพี 1.4 มิลลิโมลาร์ จ. สารเบตาอีน 0.6 โมลาร์ ฉ. สารแมกนีเซียมซัลเฟต 8 มิลลิโมลาร์ ช. เอนไซม์บีเอสที ดีเอ็นเอ โพลีเมอร์เรส 8 หน่วย ซ. บัฟเฟอร์ที่ความเข้มข้น 1 เท่า
6. กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อ Enterocytozoon hepotopenoei ตามข้อถือสิทธิที่ 3 ที่ซึ่ง การตรวจสอบ ผลทดสอบแลมป์ที่เหมาะสม คือ การตรวจสอบด้วยแผ่นทดสอบแบบจุ่ม
7. กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อ Enterocytozoon hepotopenoei ตามข้อถือสิทธิที่ 6 ที่ซึ่ง การตรวจสอบ ผลทดสอบแลมป์ที่ได้ด้วยแผ่นทดสอบแบบจุ่ม ทำได้โดย การเติมตัวตรวจจับดีเอ็นเอที่ติดฉลากด้วยสาร เรืองแสงฟลูออเรสซีน ไอโซไทโอซายาเนส 0.5 ไมโครโมลาร์ ลงผลิตภัณฑ์แลมป์ที่ได้จากขั้นตอนการ ทดสอบตัวอย่างสารละลายดีเอ็นเอด้วยเทคนิคแลมป์ โดยทำปฏิกิริยาที่อุณหภูมิ 60 - 65 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 5 นาที จากนั้นนำส่วนผสมที่ได้เติมลงในบัพเฟอร์ ในสัดส่วน 1:12 ทีอุณหภูมิ 25 องศาเซลเซียส และจุ่มแผ่นทดสอบในส่วนผสมดังกล่าวเป็นเวลา 5 นาที
8. กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อ Enterocytozoon hepotopenoei ตามข้อถือสิทธิที่ 7 ที่ซึ่ง ตัวตรวจจับดีเอ็นเอ ที่ติดฉลากด้วยสารเรืองแสงฟลูออเรสซีน ไอโซไทโอซายาเนส มีลำดับนิวคลีโอไทด์ ดังนี้ FITC-5’-ATC CTT CAT GTG AAA TTG GA-3’
9. กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อ Enterocytozoon hepotopenoei ตามข้อถือสิทธิที่ 7 ที่ซึ่ง แผ่นทดสอบมี อินเนอร์ไพรเมอร์ที่ติดฉลากด้วยสารไบโอทินเป็นองค์ประกอบ
10. กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อ Enterocytozoon hepotopenoei ตามข้อถือสิทธิที่ 9 ที่ซึ่ง อินเนอร์ไพรเมอร์ที่ ติดฉลากด้วยสารไบโอทิน มีลำดับนิวคลีโอไทด์ ดังนี้ ไบโอทิน- 5’-CTG CTT TTG ACATGTTGT CTG AAA TTT TAT CCT GCG ATA TTG GAC AT-3’
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| TH22063Y true TH22063Y (th) | 2023-07-12 |
| TH22063A3 TH22063A3 (th) | 2023-07-12 |
| TH22063U TH22063U (th) | 2023-07-12 |
Family
ID=
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Gioia et al. | Highly sensitive multiplex PCR for simultaneous detection and discrimination of Dirofilaria immitis and Dirofilaria repens in canine peripheral blood | |
| Veronesi et al. | Comparison of PCR assays targeting the multi-copy targets B1 gene and 529 bp repetitive element for detection of Toxoplasma gondii in swine muscle | |
| CN106520971A (zh) | 用于快速检测hla‑b*1502等位基因的核酸、试剂盒及方法 | |
| ATE130045T1 (de) | Quantitative dns-polymerasebestimmung und testkit dafür. | |
| TH22063U (th) | ชุดไพรเมอร์สำหรับการตรวจหาเชื้อ Enterocytozoon hepatopenaei และกรรมวิธีการตรวจหาเชื้อดังกล่าวด้วยเทคนิคแลมป์ด้วยชุดไพรเมอร์ดังกล่าว | |
| CN103993076B (zh) | 一种人染色体基因il28b位点多态性检测试剂盒及其检测方法和用途 | |
| Chen et al. | Reverse transcription polymerase chain reaction and electrospray ionization mass spectrometry for identifying acute viral upper respiratory tract infections | |
| TH22063A3 (th) | ชุดไพรเมอร์สำหรับการตรวจหาเชื้อ Enterocytozoon hepatopenaei และกรรมวิธีการตรวจหาเชื้อดังกล่าวด้วยเทคนิคแลมป์ด้วยชุดไพรเมอร์ดังกล่าว | |
| JP2025096350A (ja) | 前立腺がんを検査する方法 | |
| CN101984068B (zh) | 一种布鲁氏菌诊断试剂盒 | |
| US20200115765A1 (en) | In situ detection of multiple predominant species of asian carp | |
| CN103923981B (zh) | Hla-b*27等位基因检测方法及其试剂盒 | |
| Erlichster et al. | Rapid, Loop-mediated isothermal amplification detection of celiac disease risk alleles | |
| TH23646U (th) | ชุดไพรเมอร์สำหรับการตรวจหาเชื้อ Vibrio parahaemolyticus สายพันธุ์ก่อโรคตับวายเฉียบพลัน และกรรมวิธีการตรวจหาเชื้อดังกล่าวด้วยเทคนิคแลมป์ด้วยชุดไพรเมอร์ดังกล่าว | |
| TH23646Y (th) | ชุดไพรเมอร์สำหรับการตรวจหาเชื้อ Vibrio parahaemolyticus สายพันธุ์ก่อโรคตับวายเฉียบพลัน และกรรมวิธีการตรวจหาเชื้อดังกล่าวด้วยเทคนิคแลมป์ด้วยชุดไพรเมอร์ดังกล่าว | |
| CN103525906A (zh) | 速度或爆发力相关基因-actn3多态性速测试剂盒及检测方法 | |
| KR950701391A (ko) | T세포 항원 리셉터 유전자 발현의 검출방법 | |
| TH23646A3 (th) | ชุดไพรเมอร์สำหรับการตรวจหาเชื้อ Vibrio parahaemolyticus สายพันธุ์ก่อโรคตับวายเฉียบพลัน และกรรมวิธีการตรวจหาเชื้อดังกล่าวด้วยเทคนิคแลมป์ด้วยชุดไพรเมอร์ดังกล่าว | |
| CN108929902B (zh) | 用于检测等位基因hla-b*5801的肽核酸引物组合物、试剂盒及方法 | |
| TH23816U (th) | ชุดไพร์เมอร์และกรรมวิธีการตรวจเชื้อ Tilapia lake virus ที่ก่อโรคในปลานิลและปลานิลแดง ด้วยเทคนิคแลมป์ร่วมกับการใช้ตัวตรวจจับดีเอ็นเอที่ติดฉลากอนุภาคทองคำนาโน | |
| Merza et al. | Comparison of the efficiency of different techniques for the detection of Blastocystis hominis in patients attending hospitals of duhok city, kurdistan region, Iraq. | |
| TR202006162A2 (tr) | Primer ve Prob Setlerinin Kullanıldığı Yarı-Multipleks Koronavirüs Gerçek Zamanlı Polimeraz Zincir Reaksiyonu Tespit Kiti | |
| TH27643U (th) | ชุดตรวจหาเชื้อไวรัสโคเวิร์ท มอแทลลิที โนดาไวรัส (Covert mortality nodavirus หรือ CMNV) | |
| CN100374564C (zh) | 一段乙型肝炎病毒特异性dna序列的应用 | |
| Tipu et al. | Validity of human leukocyte antigen class II typing in-house assay in comparison with commercial kit |