TH19713A3 - กรรมวิธีการผลิตแอนติเจน(Antigen)สำหรับใช้วิเคราะห์โรคเมลิออยโดสิส(Melioidosis) - Google Patents
กรรมวิธีการผลิตแอนติเจน(Antigen)สำหรับใช้วิเคราะห์โรคเมลิออยโดสิส(Melioidosis)Info
- Publication number
- TH19713A3 TH19713A3 TH1803002662U TH1803002662U TH19713A3 TH 19713 A3 TH19713 A3 TH 19713A3 TH 1803002662 U TH1803002662 U TH 1803002662U TH 1803002662 U TH1803002662 U TH 1803002662U TH 19713 A3 TH19713 A3 TH 19713A3
- Authority
- TH
- Thailand
- Prior art keywords
- cells
- melioidosis
- red blood
- sheep
- prepared
- Prior art date
Links
- 206010069748 Burkholderia pseudomallei infection Diseases 0.000 title claims abstract 27
- 201000004015 melioidosis Diseases 0.000 title claims abstract 27
- 239000000427 antigen Substances 0.000 title claims abstract 23
- 102000038129 antigens Human genes 0.000 title claims abstract 23
- 108091007172 antigens Proteins 0.000 title claims abstract 23
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims abstract 8
- 210000003743 Erythrocytes Anatomy 0.000 claims abstract 29
- 210000004027 cells Anatomy 0.000 claims abstract 28
- 210000002966 Serum Anatomy 0.000 claims abstract 27
- 241000283898 Ovis Species 0.000 claims abstract 25
- 210000003324 RBC Anatomy 0.000 claims abstract 21
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract 16
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract 15
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims abstract 10
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract 7
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N Ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract 6
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 claims abstract 6
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 claims abstract 6
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract 6
- 230000035931 haemagglutination Effects 0.000 claims abstract 6
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract 6
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract 6
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 claims abstract 5
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 claims abstract 4
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 claims abstract 4
- 210000004369 Blood Anatomy 0.000 claims abstract 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims abstract 3
- 230000001954 sterilising Effects 0.000 claims abstract 3
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims abstract 3
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 claims 5
- 239000010802 sludge Substances 0.000 claims 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims 4
- 229940044197 Ammonium Sulfate Drugs 0.000 claims 3
- 102000004965 antibodies Human genes 0.000 claims 3
- 108090001123 antibodies Proteins 0.000 claims 3
- 238000003115 checkerboard titration Methods 0.000 claims 3
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims 3
- MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N oxygen Chemical compound O=O MYMOFIZGZYHOMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 3
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims 3
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 claims 3
- 230000000268 renotropic Effects 0.000 claims 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims 3
- 210000000601 Blood Cells Anatomy 0.000 claims 2
- 238000009007 Diagnostic Kit Methods 0.000 claims 2
- CUHVTYCUTYWQOR-UHFFFAOYSA-N O=C.O=C Chemical compound O=C.O=C CUHVTYCUTYWQOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 claims 2
- 230000000249 desinfective Effects 0.000 claims 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 claims 2
- 238000004448 titration Methods 0.000 claims 2
- 241001272996 Polyphylla fullo Species 0.000 claims 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K [O-]P([O-])([O-])=O Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 claims 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 abstract 4
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M buffer Substances [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 abstract 4
- 235000011299 Brassica oleracea var botrytis Nutrition 0.000 abstract 3
- 235000017647 Brassica oleracea var italica Nutrition 0.000 abstract 3
- 240000003259 Brassica oleracea var. botrytis Species 0.000 abstract 3
- 230000000890 antigenic Effects 0.000 abstract 3
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 abstract 2
- 239000001963 growth media Substances 0.000 abstract 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 abstract 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 abstract 1
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N Glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 abstract 1
- 229960003180 Glutathione Drugs 0.000 abstract 1
- 108010024636 Glutathione Proteins 0.000 abstract 1
- 241001101808 Malia Species 0.000 abstract 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 abstract 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 abstract 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 abstract 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract 1
- 229940079593 drugs Drugs 0.000 abstract 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
Abstract
บทสรุปการประดิษฐ์ซึ่งจะปรากฏบนหน้าประกาศโฆษณาReadFile:------25/09/2563------(OCR)กรรมวิธีการผลิตแอนติเจน(Antigen)สำหรับใชเวิเคราะห์โรคเมลิออยโดสิส(Melioidosis)มีขั้นตอนดังนี้การเตรียมแอนติเจของเชื้อบล็อกโคเรียสูโดเมลิอายโดยการเลี้ยงเชื้อแล้วแยกส่วนของโปรตีนของเชื้อโดยใช้แอมโมเนียมซัลเฟตนำมาปั่นแยกส่วนของตะกอนเป็นแอนติเจนที่นำมาเคลือบบนเม็ดเลือดแดงแกะเพื่อเป็นชุดทดสอบในการวินิจฉัยโรค------------------09/08/2562------(OCR)หน้าที่1ของจำนวน1หน้าบทสรุปการประดิษฐ์ชุดนํ้ายาตรวจวิเคราะห์โรคเมลิออยโดลิส(Melioidosis)โดยเทคนิคอินไดเร็กซ์ฮีแมกกลูติเนชั่น(IndirectHemagglutination)ประกอบด้วยเมลิออยโดลิสเทสต์เซลล์,5เปอร์เซ็นต์อันโค๊ทเตทเซลล์,ไดลูเอนท์บัฟเฟอร์,เน็คกาทีฟคอนโทรลเซลล์,โพสิทีฟคอนโทรลซีรั่ม,เน็คกาทีฟคอนโทรลซีรั่มและกรรมวิธีการผลิตดังนี้ก)การเตรียมแอนติเจนโดยการเลี้ยงเชื้อบล็อกโคเดอเรียสูโดมานิอายในอาหารเลี้ยงเชื้อนำมาต้มฟอร์มัลดีไฮด์โดยการฆ่าเชื้อทำการตกตะกอนโปรตีนด้วยแอมโมเนียมซัลเฟตจะมีคุณสมบัติเป็นแอนติเจนข)เตรียมเม็ดเลือดแดงของแกะที่เก็บไว้ในอัลลิเวอร์โซลูชั่นนำมาปั่นล้างให้เลือดสะอาดปรับระดับความเข้มข้นด้วยPBSตามอัตราส่วนการใช้งานค)เตรียมชุดนํ้ายาโดยใช้แอนติเจนของเชื้อบล็อกโคเดเรียสูโดมานิอายเคลือบบนเม็ดเลือดแดงของแกะโดยการตรวจระดับของแอนติเจนที่เหมาะสมต้มกลูต้าดีไฮด์เพื่อให้เกิดการเกาะกันของแอนติเจนและเม็ดเลือดแดงของแกะเก็บรักษาให้คงทนด้วยโซเดียมอะไซด์ชุดนํ้ายาตรวจนี้เป็นเมลิออยโดสิสเทสต์เซลล์ง)เตรียมส่วนประกอบชุดนํ้ายาตรวจอื่นๆได้แก่ไดลูแอนท์บัฟเฟอร์,5เปอร์เซ็นต์อันโค๊ทเตทเซลล์,เน็คกาทีฟคอนโทรลเซลล์,โพลิทีฟคอนโทรลซีรั่ม,เน็คกาทีฟคอนโทรลซีรั่มชุดนํ้ายาตรวจจะเก็บไว้ที่4องศาเซลเซียสได้นาน1ปี------------------09/08/2562------(OCR)หน้าที่1ของจำนวน1หน้าบทสรุปการประดิษฐ์ชุดนํ้ายาตรวจวิเคราะห์โรคเมลิออยโดลิส(Melioidosis)โดยเทคนิคอินไดเร็กซ์ฮีแมกกลูติเนชั่น(IndirectHemagglutination)ประกอบด้วยเมลิออยโดลิสเทสต์เซลล์,5เปอร์เซ็นต์อันโค๊ทเตทเซลล์,ไดลูเอนท์บัฟเฟอร์,เน็คกาทีฟคอนโทรลเซลล์,โพสิทีฟคอนโทรลซีรั่ม,เน็คกาทีฟคอนโทรลซีรั่มและกรรมวิธีการผลิตดังนี้ก)การเตรียมแอนติเจนโดยการเลี้ยงเชื้อบล็อกโคเดอเรียสูโดมานิอายในอาหารเลี้ยงเชื้อนำมาต้มฟอร์มัลดีไฮด์โดยการฆ่าเชื้อทำการตกตะกอนโปรตีนด้วยแอมโมเนียมซัลเฟตจะมีคุณสมบัติเป็นแอนติเจนข)เตรียมเม็ดเลือดแดงของแกะที่เก็บไว้ในอัลลิเวอร์โซลูชั่นนำมาปั่นล้างให้เลือดสะอาดปรับระดับความเข้มข้นด้วยPBSตามอัตราส่วนการใช้งานค)เตรียมชุดนํ้ายาโดยใช้แอนติเจนของเชื้อบล็อกโคเดเรียสูโดมานิอายเคลือบบนเม็ดเลือดแดงของแกะโดยการตรวจระดับของแอนติเจนที่เหมาะสมต้มกลูต้าดีไฮด์เพื่อให้เกิดการเกาะกันของแอนติเจนและเม็ดเลือดแดงของแกะเก็บรักษาให้คงทนด้วยโซเดียมอะไซด์ชุดนํ้ายาตรวจนี้เป็นเมลิออยโดสิสเทสต์เซลล์ง)เตรียมส่วนประกอบชุดนํ้ายาตรวจอื่นๆได้แก่ไดลูแอนท์บัฟเฟอร์,5เปอร์เซ็นต์อันโค๊ทเตทเซลล์,เน็คกาทีฟคอนโทรลเซลล์,โพลิทีฟคอนโทรลซีรั่ม,เน็คกาทีฟคอนโทรลซีรั่มชุดนํ้ายาตรวจจะเก็บไว้ที่4องศาเซลเซียสได้นาน1ปี------------ หน้า1ของจำนวน1หน้า บทสรุปการประดิษฐ์ ได้เปิดเผยวิธีการเตรียมแอนติเจนของเชื้อบล็อกโคเรียสูโดมาลิอายชุดทดสอบประกอบด้วยและกรรมวิธีผลิตชุดสอบที่ใช้ในการตรวจวินิจฉัยโรคเมลิออยโดสิสต่อจากกรรมวิธีการผลิตที่ให้ผลรวดเร็วมีความถูกต้องแม่นยำสูงสะดวกและง่ายต่อการทดสอบสามารถนำไปใช้ในห้องปฏิบัติการทั่วไป
Claims (6)
1.เมลิออยโดสิสเทสต์เซลล์(Melioidosistestcells)จำนวน60ซีซี
2.ไดลเอนท์บัพเฟอร์(Diluentbuffer)จำนวน60ซีซี
3.เน็คกาทีฟคอนโทรลเซลล์(Negativecontrolcells)จำนวน30ซีซี4.5เปอร์เซ็นต์อันโค๊ทเตทเซลล์(5%uncoatedcells)จำนวน30ซีซี 5.โพสิทีฟคอนโทรลซีรั่ม(Positivecontrolserum)จำนวน0.5ซีซี 6.เน็คกาทีฟคอนโทรลซีรั่ม(Negativecontrolserum)จำนวน0.5ซีซีข้อถือสิทธิที่2 2.กรรมวิธีการผลิตชุดน้ำยาตรวจวิเคราะห์โรคเมลิออยโดสิส(Melioidosis)โดยเทคนิคอินไดเร็กซ์ฮีแมกกลุติเนชั่น(IndirectHemagglutination)ตามชื่อถือสิทธิ1มีขั้นตอนดังนี้ก)การเตรียมแอนติเจน(Antigen)ประกอบด้วยขั้นตอนดังนี้คือเลี้ยงเชื้อบล็อกโคเดอเรียสูโดมาลิอายในอาหารเหลวมูเลอร์ฮิตดันมีเดียม(Mullerhintonmedium)1ลิตรในขวดเลี้ยงเชื้อประมาณ2ลิตรอบที่อุณหภูมิ37องศาเซลเซียสสภาวะที่มีออกซิเจนเป็นเวลา2วันเติมฟอร์มัลดีไฮด์(Formaldehyde)ให้มีความเข้มข้น1%เพื่อฆ่าเชื้อนำไปปั่นที่4,000รอบต่อนาทีนาน30นาทีนำส่วนใสข้างบนมาเติมแอมโมเนียมซัลเฟต(Ammoniumsulfate)อย่างช้าๆและคนเบาๆให้ความเข้มข้นสุดท้าย50%ที่ลดลงนำไปปั่นที่4,000รอบต่อนาทีนาน30นาทีจะได้ส่วนของตะกอนโปรตีนเก็บไว้ที่อุณหภูมิ4องศาเซลเซียสข)วิธีการเตรียมเม็ดเลือดแดงของแกะประกอบด้วยขั้นตอนดังนี้เม็ดเลือดแดงของแกะใส่อัลสีเวอร์โซลูชั่น(Alsever'ssolution)ปริมาตรเท่ากันนำมาล้างด้วยน้ำเกลือปั่นที่2,000รอบต่อนาทีนาน5นาทีทำการปั่นล้างซํ้า3ครั้งผสมเม็ดเลือดแดงของแกะในฟอสเฟตบัฟเฟอร์เซไลน์(Phosphatebufferedsaline)(PBS)อัตราส่วน1:9ของ10%ชี๊พเรดบลัดเซลล์(SheepRedBloodCell)(SRBC)เติม2.5%กลูตาดีไฮด์(Glutadehide)ลงในเม็ดเลือดแดงของแกะที่เตรียมไว้ในอัตราส่วน1:5ผสมให้เข้ากันโดยการเขย่าบนเครื่องเขย่าที่อุณหภูมิห้องนาน2ชั่วโมงปั่นล้างSRBC3ครั้งด้วยPBSนำส่วนตะกอนของSRBCมาเตรียมเป็นความเข้มข้น10%เวลาใช้งานจะเตรียมความเข้มข้นดังนี้0.5%,1%และ5%SRBหน้าที่2ของจำนวน2หน้า2. 1.การเตรียมเมลิออยเทสต์เซลล์(Melioidosistestcells)นำแอนติเจนของเชื้อบล็อกโคเดอเรียที่เตรียมไว้จากข้อกทำให้เป็นระดับเจือจางทดสอบกับแอนติบอดีในซีรั่มควบคุมที่ให้ผลบวกมีค่ากำหนดของไตเตอร์(Titer)โดยวิธีเช็คคอร์บอร์ดไตเตชั่น(Checkerboardtitration)เลือกใช้แอนติเจนที่เจือจางสูงที่สุดที่ให้ไตเตอร์(titer)สูงสุดในการเกิดปฏิกิริยากับซีรั่มที่ให้ผลบวกและแยกจากผลลบชัดเจนเมื่อได้ความเข้มข้นของแอนติเจนที่เหมาะสมแล้วนำมาผสมกับ1.5%เทร็ดเตทชี๊พเรดบลัดเซลล์(treatedSRBC)ด้วยกลูต้าดีไฮด์(glutaraldehyde)ในPBSที่มี0.1%โซเดียมอะไซด์(Sodiumazide)เก็บไว้ที่อุณหภูมิ4องศาเซลเซียส2. 2.การเตรียมไดลูเอนท์บัฟเฟอร์ฟอสเฟสบัฟเฟอร์เซไลน์(PBS)สั่งชื้อจากบริษัทแปซิฟคไซเอ็นซ์2.3.5เปอร์เซ็นต์อันโค๊ทเตทเซลล์ใช้เม็ดเลือดแดงของแกะที่เตรียมจากข้อขมีความเข้มข้น0.5%เม็ดเลือดแดงของแกะ2.
4.การเตรียมเน็คกาทีฟคอนโทรลเซลล์ใข้เม็ดเลือดแดงของแกะ5%2. 5.โพสิทีฟคอนโทรลซีรั่มใช้ซีรั่มของผู้ป่วยที่เป็นโรคเมลิอยโดสิสนำมาทดสอบความเข้มข้นไตเตอร์1:320ตามที่กำหนด2. 6.เน็คกาทีฟคอนโทรลซีรั่มใช้ซีรั่มของคนปกติที่ไม่เป็นโรคเมลิออยโดสิส------------หน้า1ของจำนวน2หน้าข้อถือสิทธิ 1.ชุดน้ำยาประกอบด้วย 1.เมลิออยโดสิสเทสต์เซลล์(Melioidosistestcells)จำนวน60ซีซี 2.ไดลเอนท์บัฟเฟอร์(Diluentbuffer)จำนวน60ซีซี 3.เน็คกาทีฟคอนโทรลเซลล์(Negativecontrolcells)จำนวน30ซีซี4.5เปอร์เซ็นต์อันโค๊ทเตทเซลล์(5%uncoatedcells)จำนวน30ซีซี
5.โพสิทีฟคอนโทรลซีรั่ม(Positivecontrolserum)จำนวน0.5ซีซี
6.เน็คกาทีฟคอนโทรลซีรั่ม(Negativecontrolserum)จำนวน0.5ซีซี
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
TH19713C3 TH19713C3 (th) | 2022-05-12 |
TH19713A3 true TH19713A3 (th) | 2022-05-12 |
Family
ID=
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN107942069A (zh) | 一种ngal胶乳免疫比浊法检测试剂盒及其制备方法 | |
CN108508196A (zh) | 一种检测人调节性t细胞亚型的试剂盒及检测方法 | |
CN109541241A (zh) | 一种脂蛋白(a)的测定试剂盒 | |
DK174032B1 (da) | Sæt samt fremgangsmåde til immunometrisk dosering, der kan anvendes på hele celler | |
CN103760345B (zh) | 一种利用外周血检测结核分枝杆菌感染的试剂盒及其应用 | |
JPH02501948A (ja) | 粒子含有試料中の分析物の検出 | |
CN106970226A (zh) | 一种测定人血清中her‑2 ecd浓度水平的试剂盒 | |
O'neill et al. | Treponema pallidum haemagglutination assay in the routine serodiagnosis of treponemal disease. | |
TH19713C3 (th) | กรรมวิธีการผลิตแอนติเจน(Antigen)สำหรับใช้วิเคราะห์โรคเมลิออยโดสิส(Melioidosis) | |
TH19713A3 (th) | กรรมวิธีการผลิตแอนติเจน(Antigen)สำหรับใช้วิเคราะห์โรคเมลิออยโดสิส(Melioidosis) | |
CN109142743A (zh) | 一种自免肝抗体的多项检测试剂盒 | |
JPS5871457A (ja) | 梅毒検査用試薬の製造法 | |
Stamm et al. | Evaluation of a latex agglutination test for amoebiasis | |
RU2305842C1 (ru) | Гемагглютинационный тест на основе рекомбинантного антигена для серодиагностики сифилиса | |
CN105652006A (zh) | 梅毒螺旋体总抗体Dot-ELISA检测方法 | |
RU2203499C1 (ru) | Способ постановки диагностической реакции при бруцеллезе | |
CN117801110B (zh) | 抗犬红细胞抗原dea1的单克隆抗体、检测试剂及其应用 | |
RU2195666C2 (ru) | Способ комплексной диагностики аллергии у детей с инфекционной патологией | |
RU2754465C1 (ru) | Способ получения эритроцитарного диагностикума для реакции непрямой гемагглютинации (рнга) при клостридиозах животных | |
RU1789927C (ru) | Способ иммунодиагностики инфекции | |
Metroka et al. | Killifish" Hemagglutinogens" | |
JPS58216123A (ja) | 抗血清 | |
Iwakata et al. | The use of trypsin-treated human group 0 erythrocytes in rubella hemagglutination-inhibition test | |
Weinstein et al. | Blood Typing and Cross‐Matching | |
Garabedian et al. | A simple haemagglutination drop test for human hydatidosis |