TH17537C3 - กระบวนการเตรียมกล้าเชื้อยีสต์Pichiapastorisสำหรับกระบวนการหมักแบบเหลวในระดับขยายขนาด - Google Patents

Abstract

บทสรุปการประดิษฐ์ซึ่งจะปรากฏบนหน้าประกาศโฆษณาReadFile:------29/01/2563------(OCR)หน้า1ของจำนวน1หน้าบทสรุปการประดิษฐ์การประดิษฐ์นี้เกี่ยวกับการพัฒนากระบวนการการเตรียมกล้ายีสต์Pichiapostorisด้วยวิธีการปรับกิจกรรมการเจริญเติบโตของเซลล์ที่ประกอบด้วยขั้นตอนการเพาะเลี้ยงเซลล์ยีสต์ขั้นต้นการเพาะเลี้ยงเซลล์แบบความหนาแน่นสูงและการเตรียมคลังกล้าเชื้อที่มีความหนาแน่นของเซลล์สูงในรูปสารละลายแช่แข็งโดยกระบวนการดังกล่าวทำให้ได้กล้าเชื้อที่มีประสิทธิภาพโดยไม่มีระยะการปรับตัวของเซลล์ในการปลูกลงในอาหารเลี้ยงเชื้อชนิดต่างๆซึ่งจะช่วยลดระยะเวลาในการหมักและลดต้นทุนในส่วนค่าดำเนินการในระบบการผลิตชีวมวลเซลล์หรือสารชีวภัณฑ์ด้วยกระบวนการหมักนอกจากนี้กล้าเชื้อยีสต์ที่ได้จากกระบวนการดังกล่าวยังเหมาะสำหรับนำไปใช้ในการเตรียมคลังกล้าเชื้อในรูปแช่แข็งที่มีประสิทธิภาพสำหรับเก็บไว้ใช้ในการหมักแบบเหลวหรือนำกล้าเชื้อดังกล่าวไปใช้โดยตรงในการหมักแบบเหลวอีกทั้งยังเหมาะสำหรับใช้เป็นกล้าเชื้อในการหมักยีสต์แบบความหนาแน่นเซลล์สูงในระดับขยายและระดับอุตสาหกรรมเพื่อผลิตสารชีวภัณฑ์เป้าหมายจากยีสต์P.postorisสำหรับใช้ในอุตสาหกรรมอาหารอาหารสัตว์และเอนไซม์------------หน้า1ของจำนวน1หน้าบทสรุปการประดิษฐ์การประดิษฐ์นี้เกี่ยวกับการพัฒนากระบวนการการเตรียมกล้ายีสต์Pichiapastorisด้วยวิธีการปรับกิจกรรมการเจริญเติบโตของเซลล์ที่ประกอบด้วยขั้นตอนการเพาะเลี้ยงเซลล์ยีสต์ขั้นต้นการเพาะเลี้ยงเซลล์แบบความหนาแน่นสูงและการเตรียมคลังกล้าเชื้อที่มีความหนาแน่นของเซลล์สูงในรูปสารละลายแช่แข็งโดยกระบวนการดังกล่าวทำให้ได้กล้าเชื้อที่มีประสิทธิภาพโดยไม่มีระยะการปรับตัวของเซลล์ในการปลูกลงในอาหารเลี้ยงเชื้อชนิดต่างๆซึ่งจะช่วยลดระยะเวลาในการหมักและลดต้นทุนในส่วนค่าดำเนินการในระบบการผลิตชีวมวลเซลล์หรือสารชีวภัณฑ์ด้วยกระบวนการหมักนอกจากนี้กล้าเชื้อยีสต์ที่ได้จากกระบวนการดังกล่าวยังเหมาะสำหรับนำไปใช้ในการเตรียมคลังกล้าเชื้อในรูปแช่แข็งที่มีประสิทธิภาพสำหรับเก็บไว้ใช้ในการหมักแบบเหลวหรือนำกล้าเชื้อดังกล่าวไปใช้โดยตรงในการหมักแบบเหลวอีกทั้งยังเหมาะสำหรับใช้เป็นกล้าเชื้อในการหมักยีสต์แบบความหนาแน่นเซลล์สูงในระดับขยายและระดับอุตสาหกรรมเพื่อผลิตสารชีวภัณฑ์เป้าหมายจากยีสต์p.pastorisสำหรับใช้ในอุตสาหกรรมอาหารอาหารสัตว์และเอนไซม์

Claims (3)

ข้อถือสิทธฺ์(ทั้งหมด)ซึ่งจะไม่ปรากฏบนหน้าประกาศโฆษณา:------29/01/2563------(OCR)หน้า1ของจำนวน2หน้าข้อถือสิทธิ 1.กระบวนการเตรียมกล้าเชื้อยีสต์P.pastorisสำหรับกระบวนการหมักแบบเหลวในระดับขยายขนาดประกอบด้วยขั้นตอนดังนี้ก)การเพาะเลี้ยงเซลล์ยีสต์ขั้นต้นโดยเลี้ยงเซลล์ยีสต์ในอาหารเลี้ยงเชื้อเหลวชนิดวายพีดีที่อุณหภูมิ28-30องศาเซลเซียสอัตราการเขย่า150-250รอบต่อนาทีเป็นเวลา14-18ชั่วโมงจากนั้นนำเซลล์ยีสต์ที่ได้มาเลี้ยงในอาหารเลี้ยงเชื้อสูตรดัดแปลงไฮ-อินนอคบีเอสเอ็มที่อุณหภูมิ28-30องศาเซลเซียสอัตราการเขย่า150-250รอบต่อนาทีเป็นเวลา72-96ชั่วโมงหรือจนกว่าเซลล์จะเข้าสู่ระยะการเติบโตลดข)การเพาะเลี้ยงเซลล์แบบความหนาแน่นสูงโดยนำเซลล์ยีสต์ที่ได้จากข้อก)มาถ่ายลงในถังปฏิกรณ์ชีวภาพที่มีอาหารเลี้ยงเชื้อสูตรดัดแปลงไฮ-อินนอคบีเอสเอ็มที่อุณหภูมิ28-30องศาเซลเซียสอัตราการกวน300-400รอบต่อนาทีอัตราการให้อากาศ1.0-1.5ลิตรต่อลิตรต่อนาทีค่าการละลายของออกซิเจนในน้ำหมักที่ร้อยละ15-25ของค่าการละลายของออกซิเจนอิ่มตัวค่าพีเอช5.5-6.5เป็นเวลา16-18ชั่วโมงจากนั้นเติมสารละลายกลูโคสเข้มข้นร้อยละ50-70โดยน้ำหนักต่อปริมาตรและเติมสารละลายพีทีเอ็ม1ดัดแปลงในอัตรา13มิลลิลิตรต่อชั่วโมงเลี้ยงไปจนกระทั่งได้เซลล์ที่มีความเข้มข้น35-40กรัมเซลล์แห้งต่อลิตรแล้วเก็บเกี่ยวเชื้อด้วยวิธีปลอดเชื้อค)การเตรียมคลังกล้าเชื้อยีสต์ที่มีความหนาแน่นของเซลล์สูงในรูปสารละลายแช่แข็งด้วยสารละลายกลีเซอรอล 2.กระบวนการเตรียมกล้าเชื้อยีสต์P.pastorisตามข้อถือสิทธิที่1ที่ซึ่งอาหารเลี้ยงเชื้อสูดดัดแปลงไอ-อินนอคบีเอสเอ็มมีองค์ประกอบดังนี้คือกลูโคส8-20กรัม,สารละลายกรดฟอสฟอริก(ความเข้มข้น85เปอร์เซ็นต์โดยน้ำหนักต่อปริมาตร)26.7มิลลิลิตร,แคลเซียมซัลเฟต0.93กรัม,โพแทสเซียมซัลเฟต18.2กรัม,แมกนีเซียมซัลเฟตเฮปตะซัลเฟต14.9กรัม,โพแทสเซียมไฮดรอกไซด์4.13กรัม,กรดอะมิโนฮีสทีดีน2.5-5.0มิลลิกรัม,กรดอะมิโนกลูตามิก2.5-5.0มิลลิกรัม,กรดอะมิโนลิวซีน2.5-5.0มิลลิกรัม,กรดอะมิโนไอโซลิวซีน2.5-5.0มิลลิกรัมและสารละลายสูตรดัดแปลงพีทีเอ็ม16.67มิลลิลิตร 3.กระบวนการเตรียมกล้าเชื้อยีสต์P.pastorisตามข้อถือสิทธิที่2ที่ซึ่งสารละลายพีทีเอ็ม1ดัดแปลงประกอบด้วยคอปเปอร์ซัลเฟตเพนตะไอเดรท6.0กรัม,โพแทสเซียมไอโดไดด์0.08กรัม,แมงกานีสซัลเฟตโมโนไฮเดรท3.0กรัม,โซเดียมโมลิบเดตไดไอเดรท0.2กรัม,กรดบอริค0.02กรัม,ซิงค์คลอไรด์20.0กรัม,ไอออนไตรคลอไรด์13.7กรัม,โคบอลทีคลอไรด์เอกซะไอเดรท0.9กรัม,สารละลายกรดซัลฟุริก2มิลลิลิตร,กรดอะมิโนรีสทีดีน0.375กรัม,กรดอะมิโนกลูตามิก0.375กรัม,กรดอะมิโนลิวซีน0.375กรัม,กรดอะมิโนไอโซลิวซีน0.375กรัมและไบโอติน0.3กรัมและถูกปรับปริมาตรด้วยน้ำเป็น1ลิตรหน้า2ของจำนวน2หน้า 4.กระบวนการเตรียมกล้าเชื้อยีสต์P.pastorisตามข้อถือสิทธิที่1ที่ซึ่งกล้าเชื้อยีสต์P.postorisดังกล่าวถูกเก็บในรูปสารละลายแช่แข็งโดยผสมกับสารละลายกลีเซอรอลที่ความเข้มข้น15-30เปอร์เซ็นต์โดยน้ำหนักต่อปริมาตรโดยผสมกันในอัตราส่วนระหว่างน้ำหมักที่มีเซลล์ยีสต์ต่อสารละลายกลีเซอรอลเท่ากับ1ต่อ1------------หน้า1ของจำนวน2หน้าข้อถือสิทธิ

1.กระบวนการเตรียมกล้าเชื้อยีสต์ p.pastorisสำหรับกระบวนการหมักแบบเหลวในระดับขยายขนาดประกอบด้วยขั้นตอนดังนี้ก)การเพาะเลี้ยงเซลล์ยีสต์ขั้นต้นโดยเลี้ยงเซลล์ยีสต์ในอาหารเลี้ยงเชื้อเหลวชนิดวายพีดีที่อุณหภูมิ28-30องศาเซลเซียสอัตราการเขย่า150-250รอบต่อนาทีเป็นเวลา14-18ชั่วโมงจากนั้นนำเซลล์ยีสต์ที่ได้มาเลี้ยงในอาหารเลี้ยงเชื้อสูตรดัดแปลงไฮ-อินนอคบีเอสเอ็มที่อุณหภูมิ28-30องศาเซลเซียสอัตราการเขย่า150-250รอบต่อนาทีเป็นเวลา72-96ชั่วโมงหรือจนกว่าเซลล์จะเข้าสู่ระยะการเติบโตลดข)การเพาะเลี้ยงเซลล์แบบความหนาแน่นสูงโดยนำเซลล์ยีสต์ที่ได้จากข้อก)มาถ่ายลงในถังปฏิกรณ์ชีวภาพที่มีอาหารเลี้ยงเชื้อสูตรดัดแปลงโฮ-อินนอคบีเอสเอ็นที่อุณหภูมิ28-30องศาเซลเซียสอัตราการกวน300-400รอบต่อนาทีอัตราการให้อากาศ1.0-1.5ลิตรต่อลิตรต่อนาทีค่าการละลายของออกซิเจนในน้ำหมักที่ร้อยละ15-25ของค่าการละลายของออกซิเจนอิ่มตัวค่าพีเอซ5.5-6.5เป็นเวลา16-18ชั่วโมงจากนั้นเติมสารละลายกลูโคสเข้มข้นร้อยละ50-70โดยน้ำหนักต่อปริมาตรและเติมสารละลายพีทีเอ็ม1ดัดแปลงในอัตรา13มิลลิลิตรต่อชั่วโมงเลี้ยงไปจนกระทั่งได้เซลล์ที่มีความเข้มข้น35-40กรัมเซลล์แห้งต่อลิตรแล้วเก็บเกี่ยวเชื้อด้วยวิธีปลอดเชื้อค)การเตรียมคลังกล้าเชื้อที่มีความหนาแน่นของเซลล์สูงในรูปสารละลายแช่แข็งนำน้ำหมักที่มีเซลล์ยีสต์ที่ได้จากข้อข)มาผสมกับสารละลายกลีเซอรอลที่ความเข้มข้น15-30เปอร์เซ็นต์โดยน้ำหนักต่อปริมาตรโดยผสมถันในอัตราส่วนระหว่างน้ำหมักที่มีเซลล์ยีสต์ต่อสารละลายกลีเซอรอลเท่ากับ1ต่อ1

2.กระบวนการเตรียมกล้าเชื้อยีสต์ p.pastorisตามข้อถือสิทธิที่1ที่ซึ่งอาหารเลี้ยงเชื้อสูดดัดแปลงไฮ-อินนอคบีเอสเอ็มมีองค์ประกอบดังนี้คือกลูโคส8-20กรัม,สารละลายกรดฟอสฟอริก(ความเข้มข้น85เปอร์เซ็นต์โดยน้ำหนักต่อปริมาตร)26.7มิลลิลิตร,แคลเซียมซัลเฟต0.93กรัม,โพแทสเซียมซัลเฟต18.2กรัม,แมกนีเซียมซัลเฟตเฮปตะซัลเฟต14.9กรัม,โพแทสเซียมไฮดรอกไซด์4.13กรัม,กรดอะมิโนฮีสทิตีน2.5-5.0มิลลิกรัม,กรดอะมิโนกลูตามิก2.5-5.0มิลลิกรัม,กรดอะมิโนลิวซีน2.5-5.0มิลลิกรัม,กรดอะมิโนโอโซลิวซีน2.5-5.0มิลลิกรัมและสารละลายสูตรดัดแปลงพีทีเอ็ม16.67มิลลิลิตรหน้า2ของจำนวน2หน้า

3.กระบวนการเตรียมกล้าเชื้อยีสต์ p.pastorisตามข้อถือสิทธิที่2ที่ซึ่งสารละลายพีทีเอ็ม1ดัดแปลงประกอบด้วยคอปเปอร์ซัลเฟตเพนตะไฮเดรท6.0กรัม,โพแทสเซียมไอโดไดด์0.08กรัม,แมงกานีสซัลเฟตโมโนไฮเดรท3.0กรัม,โซเดียมโมสิบเดตไดไฮเดรท0.2กรัม,กรดบอริค0.02กรัม,ซิงค์คลอไรต์20.0กรัม,ไอออนไตรคลอไรต์13.7กรัม,โคบอลท์คลอไรต์เฮกซะไฮเดรท0.9กรัม,สารละลายกรดซีลฟุริก2มิลลิลิตร,กรดอะมิโนรีสทิดีน0.375กรัม,กรดอะมิโนกลูตามิก0.375กรัม,กรดอะมิโนสิลิซีน0.375กรัม,กรดอะมิโนไอโซลิวซีน0.375กรัมและไบโอติน0.3กรัมและถูกปรับปริมาตรด้วยน้ำเป็น1ลิตร