TH11510C3 - "กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อฟลาโวเบคทีเรี่ยม คอลัมนาเร่ ในปลานิลและปลาทับทิม" - Google Patents
"กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อฟลาโวเบคทีเรี่ยม คอลัมนาเร่ ในปลานิลและปลาทับทิม"Info
- Publication number
- TH11510C3 TH11510C3 TH1403000057U TH1403000057U TH11510C3 TH 11510 C3 TH11510 C3 TH 11510C3 TH 1403000057 U TH1403000057 U TH 1403000057U TH 1403000057 U TH1403000057 U TH 1403000057U TH 11510 C3 TH11510 C3 TH 11510C3
- Authority
- TH
- Thailand
- Prior art keywords
- tilapia
- reaction
- lamp
- sequence
- columnar
- Prior art date
Links
- 241000276707 Tilapia Species 0.000 title claims abstract 10
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract 9
- 241000589565 Flavobacterium Species 0.000 title claims abstract 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract 4
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 claims abstract 2
- 241000219991 Lythraceae Species 0.000 claims 2
- 235000014360 Punica granatum Nutrition 0.000 claims 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims 1
- KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-N Betaine Natural products C[N+](C)(C)CC([O-])=O KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims 1
- 241001141128 Flavobacteriales Species 0.000 claims 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-O N,N,N-trimethylglycinium Chemical compound C[N+](C)(C)CC(O)=O KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-O 0.000 claims 1
- 229920005601 base polymer Polymers 0.000 claims 1
- 229960003237 betaine Drugs 0.000 claims 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 claims 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 claims 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 claims 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 238000004040 coloring Methods 0.000 abstract 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 abstract 2
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 abstract 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 abstract 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 abstract 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 abstract 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 abstract 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 abstract 1
Abstract
DC60 การประดิษฐ์นี้พัฒนากรรมวิธีการตรวจหาเชื้อฟลาโวแบคทีเรี่ยม คอลัมนาเร่ ในปลานิล และปลา ทับทิม โดยผนวกเทคนิคแลมป์เข้ากับการผสมสีแคลซีนลงในส่วนผสมแลมป์ก่อนทำปฏิกิริยา โดยมี ความจำเพาะเจาะจงอยู่ที่ การออกแบบไพร์เมอร์ที่มีความจำเพาะต่อลำดับเบสในจีโนมของ ฟลาโวแบคที เรี่ยม คอลัมนาเร่ 8 ตำแหน่ง และสภาวะที่เหมาะสมในการทำปฏิกิริยา เพื่อสร้างต้นแบบของวิธีการตรวจ วินิจฉัยโรคให้มีความไวและความจำเพาะยิ่งขึ้น ง่ายต่อการวิเคราะห์ผล ไม่ต้องใช้เครื่องมือที่ยุ่งยากซับซ้อน และไม่ต้องใช้เวลาการตรวจนานเหมือนเทคนิคอื่น การประดิษฐ์นี้พัฒนากรรมวิธีการตรวจหาเชื้อฟลาโวแบคทีเรี่ยม คอลัมนาเร่ ในปลานิล และปลา ทับทิม โดยผนวกเทคนิคแลมป์เข้ากับการผสมสีแคลซีนลงในส่วนผสมแลมป์ก่อนทำปฏิกิริยา โดยมี ความจำเพาะเจาะจงอยู่ที่ การออกแบบไพร์เมอร์ที่มึความจำเพาะต่อลำดับเบสในจีดนมของ วิธีการตรวจ วินิจฉัยโรคให้มีความไวและความจำเพาะยิ่งขึ้น ง่ายต่อการวิเคราะห์ผล ไม่ต้องใช้เครื่องมือที่ยุ่งยากซับซ้อน และไม่ต้องใช้เวลาการตรวจนานเหมือนเทคนิคอื่น
Claims (1)
1. กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อฟลาโวแบคทีเรี่ยม คอลัมนาเร่ ในปลานิลและปลาทับทิม ประกอบด้วย 1.1 เตรียมสารละลายเอ็นเอที่สกัดได้จากตัวอย่างอวัยวะปลานิลและทับทิมที่ต้องการทดสอบ 1.2 ทำปฏิกิริยาแลมป์ที่ 65 องศาเซลเซียส 45 นาที ในกล่องให้ความร้อน โดยมีสวนประกอบ ของปฏิกิริยา และสารละลายดีเอ็นเอที่สกัดได้จากตัวอย่างสิ่งมีชีวติที่ต้องการทดสอบ ใน สัดส่วนดังนี้ ก. เทอร์ไพร์เมอร์ F3 ลำดับเบส (5\'3\') CGTTGTATACACATCCGAAGT และ เอาท์ เทอร์โพร์เมอร์ B3 บำดับเบส (5\'3\') CCTGTACCTAATTGGGGAA อย่างละ 0.2 ไมโคร โมลาร์ ข. อินเนอร์ไพรเมอร์ FIP ลำดับเบส (5\'3\') GGCATAACCGCTAATAAATCATGGT-TTTT- TCCATTCGTTTGAGATATTTCTGA และ อินเตอร์ไพรเมอร์ BIP ลำดับเบส (5\'3\') CATAGATCATAGCTGATGCTCCATT-TTTT-AAGAGGGTAAAAACAACAATGA อย่าง ละ 2 ไมโครโมล่าร์ ค. ลูปไพร์เมอร์ LF ลำดับ เบน (5\'3\') CTAATGCAAGTACTAGAT และลูปไพร์เมอร์ LB ลำดับเบส (5\'3\') GTAGTCTATGAGGAGGA อย่างละ 2 ไมโครโมลาร์ ง. สาร dNTPs 1.2 มิลลิโมลาร์ จ. สารเบตาอีน 0.6 โมลาร์ ฉ. สารละลายแมกนีเซียมซัลเฟส 6 มิลลิโมล่าร์ ช. สารละลายแคลซีน (ร่วมกับ 0.5 มิลลิโมล่าร์ แมกกานีสคลอไล) 25ไมโครโมลาร์ ซ. เอ็นไซม์ Bst อีเอ็นเอ โพลีเมอเรส 8 หน่วย ฒ. บัฟเฟอร์ที่ความเข้มข้น 1 เท่า ญ . สารละลายดีเอ็นเอที่สกัดได้จากตัวอย่างอวัยวะปลานิลหรือทับทิมที่ต้องการทดสอบ 2 ไมโครลิตรและ ฎ. น้ำกลั่นเพื่อปรับปริมาตรรวมให้ได้ 25 ไมโครลิตร 1.3 อ่านผลด้วยตาเปล่าได้ทันที ถ้าตัวอย่างมีเชื้อปลาโวแลคทีเรียม คอลัมนาเร่ สีของส่วนผสม แลมป์หลังเสร็จปฏิกิริยาจะเปลี่ยนเป็นสีเขียว หากตัวอย่างเป็นลบ (ไม่มีเชื้อแบคทีเรีย ) สีของ ส่วนผสมของแลมป์ ยังคงสีเดิม คือสีส้ม หลังเสร็จปฏิกิริยา ที่มีลักษณะเฉพาะคือ ไพร์เมอร์มีความจำเพาะต่อลำดับเบสในจีโนมของ ฟลาโวแบคทีเรียม คอลัม นาเร่ 8 ตำแหน่ง และสภาวะที่เหมาะสมในการทำปฏิกิริยาแลมป์
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| TH11510A3 TH11510A3 (th) | 2016-05-19 |
| TH11510C3 true TH11510C3 (th) | 2016-05-19 |
Family
ID=
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Di Bella et al. | High throughput sequencing methods and analysis for microbiome research | |
| CN105154530B (zh) | 一种检测食品中致病菌的八重pcr扩增试剂盒及其扩增引物 | |
| CN105039541A (zh) | 用于河流弧菌lamp-lfd检测的引物和探针序列及引物和探针的应用 | |
| CN106893764A (zh) | 一种青枯菌的lamp检测引物组合及其lamp检测试剂盒和lamp方法 | |
| EP3878979A3 (en) | Molecular detection of enterovirus and parechovirus | |
| TH11510C3 (th) | "กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อฟลาโวเบคทีเรี่ยม คอลัมนาเร่ ในปลานิลและปลาทับทิม" | |
| CN105400902A (zh) | 一种检测小反刍兽疫病毒的逆转录环介导等温扩增试剂盒 | |
| TH11510A3 (th) | "กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อฟลาโวเบคทีเรี่ยม คอลัมนาเร่ ในปลานิลและปลาทับทิม" | |
| RU2550257C2 (ru) | СПОСОБ ДИФФЕРЕНЦИАЦИИ ТИПИЧНЫХ И АТИПИЧНЫХ ШТАММОВ Yersinia pestis СРЕДНЕВЕКОВОГО БИОВАРА МЕТОДОМ ПЦР С ГИБРИДИЗАЦИОННО-ФЛУОРЕСЦЕНТНЫМ УЧЕТОМ РЕЗУЛЬТАТОВ | |
| Russell et al. | Rapid on-site detection of the huanglongbing/citrus greening causal agent “Candidatus Liberibacter asiaticus” by AmplifyRP, a novel rapid isothermal nucleic acid amplification platform | |
| CN107916294B (zh) | 一种用于检测哈维弧菌多重毒力基因的引物组、试剂盒及其应用 | |
| RU2012139719A (ru) | Способ количественного определения фиксированного вируса бешенства штамма "москва 3253" при производстве гетерологичного антирабического иммуноглобулина | |
| CN103361445A (zh) | 用于检测狂犬病病毒的lamp引物及其试剂盒 | |
| RU2012144762A (ru) | Способ тестирования вируса лейкоза крупного рогатого скота с использованием пцр-диагностики с флуоресцентной формой детекции | |
| RU2011120790A (ru) | Способ диагностики коклюша и определения авирулентных мутантов возбудителя и диагностический набор | |
| TH11509A3 (th) | "กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อแบคทีเรีย Shewanella spp. ในปลานิลและปลาทับทิม" | |
| TH11509C3 (th) | "กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อแบคทีเรีย Shewanella spp. ในปลานิลและปลาทับทิม" | |
| EP3245297A1 (en) | Method and kit for identification of nematodes, forest plant pests, by real-time pcr | |
| WO2016011086A3 (en) | Method and kit for protozoa characterization | |
| WO2015185982A3 (en) | Primers, probes and test kit for the detection of salmonella | |
| EA201401195A1 (ru) | Набор реагентов для выявления днк chlamydia trachomatis и его применение | |
| MY187887A (en) | Strongyloides stercoralis protein and/or corresponding dna and rna sequences for application in diagnosis | |
| Fathy et al. | Comparison of PCR for Detection of tcdA and tcdB in Stool Samples and Direct Toxin Testing Versus Stool Culture for Diagnosis of Toxigenic Clostridium difficile from Hospitalized Patients in Egypt | |
| Alamian et al. | OPTIMIZATION OF REAL TIME PCR FOR DETECTION OF BRUCELL ABORTUS | |
| TH2003001838C3 (th) | กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อไวรัสก่อโรคติดเชื้อไวรัสโคโรนา 2019 |