SU907067A1

SU907067A1 - Способ получени биомассы еSснеRIснIа coLI м-17

Info

Publication number: SU907067A1
Application number: SU802949304A
Authority: SU
Inventors: Борис Александрович Клюшин; Владимир Анатольевич Жирнов; Григорий Андреевич Угодчиков; Людмила Владимировна Кривушкина; Александр Сергеевич Нелюбин
Original assignee: Предприятие П/Я В-8657; Горьковский Научно-Исследовательский Институт Эпидемиологии И Микробиологии
Priority date: 1980-04-25
Filing date: 1980-04-25
Publication date: 1982-02-23

Description

(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ БИОМАССЫ ESCHERICHIA COLI М-17

Изобретение относитс к микробиологии и касаетс производства биомассы Escherichia coli М-17.

Известен способ получени биомассы Escherichia coli М-17 дл производства колибактерина путем посева исходной культуры в питательную среду с последующим культивированием в глубинньпс услови х при интенсивном перемешивании и непрерывной аэрации и вьщелением целевого продукта 1.

Однако известный способ не позвол ет увеличить выход живой биомассы Е, соП М-17 (выход живой бцомассы из расчета на 1 таблетку весом 0,25 г составл ет 10,5 млрд. клеток ) .

Цель изобретени - повьшение выхода живой биомассы.

Эта цель достигаетс тем, что согласно способу получени биомаосы Escherichia coli М-17 дл производства колибактерина осуществл ют путем посева исходной культуры в питательную среду с последующим культиБ ированием в глубинных услови х при интенсивном перемешивании и непрерывной аэрации и выделением целевого продукта, культивирование ведут в присутствии,ионов двухвалентного железа в концентрации

Г5.

8-10 М при посевной дозе исходной культуры 250-700 млн, микробных клеток на 1 мл среды.

Способ осуществл ют следующим образом.

Claims

Подготовку ферментера осуществл ют , известным путем. Затем в ферментер ввод т стерильный казеиновый бульон, содержшций 1,25% желатины с содержанием аминного азота в пределах 220-270 мг и пептона 0,5-0,6%, ,6-7,7. После этого в ферментер добавл ют маточную культуру бактерий Е. соП М-17 до концентрации 250-700 млн. микробных тел на 1 мл среды в ферментере. Затем в ферментер ввод т необходимую дозу стериль ного раствора ионов двухвалентного железа.; которую рассчитывают с учетом того, чтобы ее концентраци в ферментере была 210 -8-10 М. Культивирование ведут 7 ч при темпе ратуре , скорости вращени мешалки 500-700 об/мин, аэрации стерильным воздухом, поддержива рН в пределах 7,6-7,9, Причем дл коррегировани рН среды используют 40% раствор глюкозы, ноддерлшва рН в начале выращивани (первые 2,5 ч) в пределах 7,6-7,7 и 7,8-7,9 в конце выращивани , не допуска резких колебаний рН. Общее количество бактерий М-17 в процессе культивировани определ ют обычными способами но оптической плотности, а количество жи вых, например, путем высева на чашки Петри с агаром Эндо. Пример. В ферментер рабочей емкостью 2 л ввод т стерильный казе иновый бульон в количестве 1,8 л, содержащий 1,25% желатины, 250 мг аминного азота, 0,5% пептона, , После установлени температуры 37 в ферментер добавл ют маточную куль туру бактерий Е. coii М-I7 до конце трации 250 млн, микробных TejJ на 1 мл среды. Затем в ферментер добав л ют 0,2 мл стерильного раствора FeS04 7Н,0 с концентрацией 5Ш М, при этом концентраци ионов двухва лентного железа в ферментере будет /V 5- . Культивирование ведут 7 ч при те пературе 37°С,, скорости вращени ме шалки 700 об/мин, аэрации стерильным воздухом, поддержива рН в пред лах 7,6-7,7 первые 2,5 ч и в пределах 7,8-7,9 в конце выращивани путем подачи 40% раствора глюкозы, не допуска резких колебаний рН. Увеличение к концу культивировани выхода живых бактерий Е, coll М-17 по хфедлагаемому способу по сравнению с контролем составл ет 21%, Применение предлагаемого способа показало, что после 7 ч культивкровани среднее увеличение выхода живых бактерий Е, coli М-17 по сравнению с контролем составл ет 24%, Внедрение пре,цлагаемого способа только в производстве бактерийных препаратов, в частности сухого колибактерина , позволит существенно увеличить выход целевого продукта без дополнительных затрат сырь (в среднем на 18%), что даст значительный экономический эффект. Формула изобретени Способ получени биомассы Escherichia coli М-17 дл производства колибактерина путем посева исходной культуры в питательную среду с последующим культивированием Б глубинных услови х при интенсивном перемешивании и непрерывной аэрации и выделением целевого продукта, о т „Г: и ч а ю щ и и с тем5 что, с целью повышени выхода живой био массь „ культивирование ведут в присутствии ионов двухвалентного железа концентрации 210 -8-10 М при посевной дозе исходной культуры 250-/00 млн о микробных клеток на 1 мл. среды, Источники информации.; прин тые во внимание при экспертизе 1 . Авторское свид,етельство СССР № 324771, кл. А 61 К 23/00, С 12 К 3/00. 1971.