SU761559A1

SU761559A1 - ШТАММ ΑδΡΕΚΟΙΙΛυδ АХУАМОП1 22-ЗМ — ПРОДУЦЕНТ МАЛЬТАВАМОРИНА 1 2

Info

Publication number: SU761559A1
Application number: SU782674611A
Authority: SU
Inventors: Vitautas-Vintsentas B Marazas; Ignas Kyudulas; Ionas Yu Galvidis; Yuozas F Vasilyauskas; Veronika Yu Gribauskene; Mariya M Yamontene; Gene Yu Gudelite
Original assignee: Vnii Prikladnoj Enzimologii
Priority date: 1978-10-11
Filing date: 1978-10-11
Publication date: 1980-09-07

Description

Изобретение относится к микробиологической промышленности, точнее к получению нового штамма — продуцента комплекса ферментов для меховой промышленности.

Известный штамм Азрег§Шиз ахуатоп 22 более приспособлен для поверхностного культивирования [1]. Недостаток его состоит в том, что он является недостаточно активным в отношении комплекса ферментов при глубинном культивировании, выход ферментного препарата невысок. Сама культура чувствительная бактериальной инфекцией. Длительность ферментации —· 7— 8 суток, что резко снижает интенсивность производства. Культуральная жидкость, при глубинном культивировании, получена из гриба АзрегдШиз ахуатоп 22, отмечается густой, что осложняет дальнейшие этапы технологического процесса.

Целью настоящего изобретения является получение продуцента мальтаваморина с активным комплексом ферментов при глубинном культивировании за более короткое время.

Эта цель достигнута тем, что штамм Азрег§Шиз ахуатоп 22-ЗМ выделили из гриба Азрег^Шиз ахуатоп 22 как спонтанный мутант в результате многократного пасажа через жидкую питательную среду и последующей селекции высевом отдельных колоний на агаризованной среде.

Полученный штамм АзрегдШиз ахуатоп 22-ЗМ хранится в коллекции лаборатории чистых микробных культур Всесоюзного научно-исследовательского института при5 кладной энзимологии. Регистрационный номер ИПЭ-134.

Штамм Азрег^Шиз ахуатоп 22-ЗМ обладает следующими морфологическими и культурально-физиологическими свойствами. Мицелий состоит из коротких разветвленных гифов с поперечными перегородками. Клетки мицелия короткие, толстые, с извилистыми стенками. Ширина клеток мицелия 3,9-5,6 мк, длина 11,2—28,0 км. Конидии крупные, круглой формы. Диаметр конидий 4,5—5,6 мк. Клетки гифов мицелия содержат большое количество жировых включений и вакуоли, зернистые. Мицелий врастает в агар.

Культуральные признаки.

При выращивании на сусло-агаре при 30°С в течение 5—7 суток штамм образует крупные колонии диаметром 10—16 мм с плотным компактным воздушным мицелием. Поверхность колоний складчатая, бугристая, серовато-коричневого цвета, Края колонии более светлые, неровные. После длительного хранения на суслоагаре, среда окрашивается темно-бурым цветом.

3

На среде Чапека при 30°С в течение 5— 7 суток образует колонии неправильной формы, выпуклые, серовато-зеленого цвета, врастают в агар. Поверхность колоний морщинистая. Среда окрашивается зеленоватобурым цветом.

Физиологические признаки. Оптимальный рост культуры 30°С. На жидкой питательной среде при рН 3,5—3,7. При засеве суспензий в молоко гриб растет на поверхность в виде пристенного кольца. Молоко пептонизирует, желатину разжижает. Нитраты до нитритов не восстанавливает.

Пример. Для выращивания нового штамма Азрег§Шиз ахуатоп 22-ЗМ— продуцента малтаваморина служила питательная среда следующего состава (г/л): крахмал картофельный — 40,0; БВК — 5,0; натрий азотнокислый — 9,0; калий хлористый— 1,0; магний сернокислый — 0,5; железо сернокислое — 0,005; цинк сернокислый—0,025; натрий фосфорнокислый двузам. — 2,0; ка761559

4

лий фосфорнокислый однозам. — 2,2; рН среды 3,5—3,7.

Культура хранится на сусле—агаре, под слоем стерильного вазелинового масла, а

5 также в лиофилизированном виде.

С целью проверки активности.комплекса

ферментов штамм Азрег^Шиз ахуатоп 22-ЗМ выращивали на вышеуказанной среде при 30°С на круговых качалках

0 (180 об/мин), а также на бродильных установках типа «Биолафит» и в ферментерах емкостью 1,5 м³. На 48 часу роста в культуральной жидкости определяли активность комплекса ферментов. Мальтазу определя5 ли глюкозооксидазиым методом, глюкоамилазную активность определяли по ГОСТу 20264.—74, кислопротеиназную по ГОСТу

20264.2—74.

Результаты испытания штамма Азрег3 §В1из ахуатоп 22-ЗМ — продуцента мальтаваморина и прототипа Азрег^Пиз ахуатоп 22 приведены в таблице.

№ штампа	Способ культивирования	К-во опытов	Активность, ед/мл
мальтазная	глюкоамилазная	кислопротеиназная
22-ЗМ	в колбах	12	3,5±0,4	4,1±0,4	0,03
22		12	1,9 ± 0,5	2,4±0,5	—
22—ЗМ	в биолафитах	10	2,8±0,3	4,0±0,4	0,03
22		10	1,5±0,2	2,2±0,4	—
22—ЗМ	в ферментерах	10	4,3±0,5	6,8±0,6	0,06
22		10	1,1 ±0,6	1,8±0,6	—

При использовании штамма Азрег^Шиз ахуатоп 22-ЗМ для производства ферментного препарата мальтаваморина Г10Х, в культуральной жидкости уровень активности ферментов мальтазы, глюкоамилазы, кислой протеиназы значительно выше, чем прототипа Азрег§П1из ахуатоп 22. Рядом с другими ферментами общими с Азрег^П1из ахуатоп 22, штамм АзрегдШиз ахуатоп 22-ЗМ в полученном готовом продукте — мальтаваморине — содержит фермент липазу (70—80 ед/гр по методике О1а Л., Латаба Л. А§пс. ΒίοΙ. СЬет., 1966, 4, 351), который необходим для обезжиривания меха.

Кроме того, выделенный штамм Азрег^И1из ахуатоп 22-ЗМ при глубинном культивировании отмечается коротким сроком ферментации, продолжительность которой составляет 2—3 суток. Предъявляемый штамм растет в кислой среде рН 3,5-3,7, что обеспечивает исключение бактериальной инфекции. Так как Азрег^Шиз ахуатоп 22-ЗМ образует короткий мицелий, это способствует хорошей аэрации во время глубинного культивирования и облегчает дальнейшие технологические процессы.

Ожидаемый годовой экономический эффект, который может быть получен при использовании данного изобретения в системе Главмикробиопрома по сравнению с изготовляемым в последнее время ферментом пектофоетидином, применяемым в меховой промышленности, составит 0,5 млн. руб.

Промышленное производство ферментного препарата мальтаваморина ГЮх на основе штамма Азрег§Шиз ахуатоп 22-ЗМ планируется на Вильнюсском опытно-промышленном заводе ферментных препаратов в 1980 году.

Claims

Формула изобретения

Штамм АзрегдШиз ахуатоп 22-ЗМ — продуцент мальтаваморина, хранится в коллекции лаборатории чистых микробных культур Всесоюзного научно-исследовательского института прикладной энзимологии. Регистрационный номер ИПЭ-134. ' Морфологические признаки. Мицелий состоит из коротких разветвленных гифов с поперечными перегородками. Клетки мицелия короткие, толстые, с извилистыми стенками. Ширина клеток мицелия 3,9—5,6 мк,

761559

5

длина 11,2—28,0 мк. Конидии крупные, круглой формы. Диаметр конидий 4,5—'
5,6 мк. Клетки гифов мицелия содержат большое количество жировых включений и вакуоли, зернистые. Мицелий врастает в 5 агар.

Культуральные признаки. При выращивании на сусло-агаре при 30°С в'течение

5—7 суток штамм образует крупные колонии диаметром 10—16 мм с плотным ком- щ пактным мицелием. Поверхность колоний складчатая, бугристая, серовато-коричневого цвета. Края колоний более светлые, неровные. После длительного хранения на сус^ ю-агаре среда окрашивается в темно-бу- 15 рый цвет.

На среде Чапека при 30°С в течение 5—
7 суток образует колонии неправильной формы, выпуклые, серовато-зеленого цвета, врастают в агар. Поверхность колоний мор- 20

⁶

щинистая, среда окрашивается в зеленовато-бурый цвет.

Физиологические признаки. Оптимальный рост культуры 30°С на жидкой питательной среде, при рН 3,5—3,7. При засеве суспензией конидий в молоко гриб растет на поверхность в виде пристенного кольца. Молоко пептонизирует, желатину разжижает. Нитриты до нитратов не восстанавливает.

Культура хранится на сусло-агаре, под слоем стерильного вазелинового масла, а также в лиофилизированном виде.