54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ГАЛОГЕЯПРОИЗВОДНЫХ АНТИБИОТИКА ИЗО-ЛАЗАЛОЦИДА А плитках. Бромпроиэводное показало более высокое относительное действи по сравнению с лазалоцидом А (75:1) С другой стороны, бромпроизводное изо-лазалоцида А показывает значительно уменьшенную токсичность у мы поскольку ЛД 50 составл ет выше 2000 мг/кг перорально, по сравнению с 150 мг/кг перорально дл лазалоци да А. Согласно изобретению галЬгенпрои водные антибиотика изо-лазалоцида А указанной общей формулы (1) предлагаетс получать соответствующим гал текированием солей соединени общей формулы II путем обработки N-бром-или К-хлорсукцинимидом или бромом, хлором, йодом или монохлоридом йода в среде соответствующего рй.створител с последующим внщелением соединени формулы (I) в свободном виде или в виде соли, Изо-лазалоцид А или соединение формулы П получают ферментацией подход щей питательной среды при помощи Streptomyces Х-537 в подводных услови х с проветриванием, причем значение рН бродильного раствор довод т примерно до нейтральной реа ции, т.е. до 6,5-7,5. Примен ема питательна среда содержит источник азота, например дрожжи или продукт дрожжей, кукурузную муку, бобовую муку или т.п., предпочтительно соевую муку; соли, например фосфат кали , карбонат кальци и микроэлементы .; источник углевода, например сахар, мелассу и т.п., предпочтител но крахмал; и растительное или животное масло, например соевое масло ИЛИ топленое масло, в качестве исто ника углерода и в качестве пеногаси тел . Брожение провод т при повышен ной температуре (25-35с), предпочтительно примерно при 31°С. После инкубационного периода в 4-9 дней фильтруют бродильный раствор и антибиотик получают экстракцией. После окончани ферментации можно прим н ть много различных методов дл вйделени и очистки изо-лазалоцида А. подход щими методами вл ютс : экйУракци растворител ми, наприМёр , йнте рмитирующа экстракци или экстракци способом противоточмЬгб распределени , а также гёльпермеационна хроматографи в безводной системе. .---,-,-.-..-....-Соли изо-лазалоцида А получают общеизвестньзм методом, исход из свободной кислоты антибиотика, на Вример , Путем промывки подход щим основанием или подход щей солью. Подход щими, основани ми дл этой цели вл ютс , например, основани . щелочных металлов, в частности гидроокись натри , гидроокись кали и т.п.; основани щелочноземельных металлов, например гидроокись , кальци , бари -или т. п., и „окись аммони . Соли щелочных и щелочноземельных металлов, которые можно примен ть дл получени фармацевтически совместимых солей согласно изобретению, представл ют собой, например, карбонаты, бикарбонаты и сульфаты. В качестве растворител при получении соединений формулы 1 согласно изобретению используют, например, хлороформ; тётрахлорметан или метиленхлорид . Температуру целесообразно выбирать в пределах между комнатной и температурой кипени реакционной смеси, причем соответственно варьируют длительность реакции, например примерно 12 ч при комнатной температуре или от 10 мин до 2 ч при температуре дефлегмации. Согласно другому варианту выполнени способа примен ют бром, например, в одном из указанных галогенированных растворителей или сероуглерод или хлор, например в тетрахлорметане . Дл этих реагентов целесообразно выбирать температуру (-10) (+10)с, а длительность 1-6 ч. Йодирование провод т, например, при помощи монохлорида йода в лед ной уксусной кислоте при комнатной температуре в течение 15 мин - 2 ч или при помощи йода в органическом основании, например морфолине, при комнатной температуре в течение 5-7 дней. Пример 1.К раствору 3,672 г натриевой соли изо-лазалоцида А в 500 мл метиленхлорида прибавл ют при медленно в течение 1 ч 0,323 мл брома в 50 мл метиленхлорида . Раствор после 1 ч медленно нагревают до 15С и прибавл ют 1 л воды . Слой растворител отдел ют и промывают воднкгм раствором бисульфита натри ,водным раствором карбоната натри и водой.Раствор сушат сульфатом натри и концентрируют,получа масло, из которого после прибавлени ацетона/гексана получают 2,1 г кристаллов . Кристаллический материал раствор ют в метйленхлориде и промывают 1 н. водным раствором сол ной кислоты . Слой растворителей концейтрируют до маленького объема и после прибавлени ацетона/гексана перекристаллизовывают из водного метанола. Получают бромпроизводное изо-лазалоцида А с т.пл. 185-186°С. ПрийёНйёиую в качестве исходного материала натриевую соль изо-лазалоцида А получают следуквдим образом. Получение изо-лазалоцида А. Организм Streptomyces инкубируют и подводных услови х с проветриванием в качалка;х. Значение рЯ бродильного раствора довод т до 6,5-7,5 прибавл нием водного раствора гидроокиси йали , после этого стерилизуют бродил ный раствор. Провод т брожение в ба где примен ют 5-10%-ный прививочный материал, состо щий из 3-дневной подводной культуры. Питательна сред содержит 2% расщепленного желтого го роха, 1% кукурузного крахмала, 0,1% фосфата дикали и 2% топленого масла Брожение провод т при 28°С на воздухе , причем через раствор пропускают 150-300 л воздуха.. Брожение прекращают через 6 дней, бродильный раство фильтруют и антибиотик получают экс ракцией.. Экстракцию провод т следующим образом. 204 л бродильного раствора фильтруют . Мокрый остаток на фильтре взму чивают в 100 л этилацетата и смесь перемешивают в, течение 10-15 ч при комнатной температуре. После фильтрации отдел ют водный слой и выбрасываю его. Раствор этилацетата, содержащий концентрацию антибиотика, соответствующую 30 млн.ед. бациллы Е, концентрируют до 3 л при уменьшен ном давлении, промывают 10%-ным водным раствором карбоната натри и суш безводным сульфатом натри . После концентрировани до 300 мл и разбавлени 350 мл петролейного эфира (т.кип.50-60°С) выдел ют 41 г твердого вещества, которое при проверке дает 25 млн.ед. бациллы Е. Это твердое вещество экстрагируют в аппа ратуре Сокслета с 4 л петролейного эфира (т.кип.50-60°С) в течение 40 ч Экстракт выпаривают досуха при умень шенном давлении и получаемый кристаллический осадок суспендируют в .петролейном эфире. Полученный раствор фильтруют. Фильтрат содержит изо лазалоцид А. Выделение изо-лазалоцида А. Порцию концентрированного фильтрата из указанного процесса хромато графируют в аппаратуре противоточно го распределени , снабженной 200 трубками (кажда емкостью в 80 мл). Пробу раствор ют в 160 мл смешанных фаз (гептан:этилацетат:метанол:вода5 27:18:18:2 ) и раствор помещают в две первые трубки. После 380 шагов распределени получают следующие фракции после упаривани растворител : A,Смесь з омологов лазалоцида Б,В,Г и Д, эти гомологи имеют отлич от лазалоцида А и изо-лазалоцида А структуру. Б. Лазалоцид А B.Сырой изо-лазалоцид А Фракци В находитс в сыром виде и содержит натрий и калий в виде солей. Ее раствор ют в метиленхлори де и промывают 0,1 н.водной сол ной ислотой, причем получают очищенный зо-лазалоцид А в виде свободной ислоты. Вьвделенный таким образом зо-лазалоцид А плавитс при 18385°С . Получение натриевой соли изоазалоцида А. 100 мг изо-лазалоцида А раствор ют в метиленхлориде и обрабатыва-. ют насыщенным раствором карбоната натри . Слой растворител концентрируют гексаном, причем получают 104 мг кристаллической натриевой соли изо-лазалоцида А, котора плавитс при 183-183,. Другие соли изо-лазалоцида А, которые также можно использовать дл получени галогенпроизводных формулы Т, можно получать следующим образом . Получение калиевой соли изолазалоцида А. 387 мг изо-лазалоцида А раствор ют в 200 мл этилацетата и обрабатывают 0,2 н.водным раствором гидроокиси кали . Слой .растворител сушат карбонатом кали и концентрируют при уменьшенном давлении. Получают 360 мг калиевой соли изо-лазалоцида А в виде бесцветной пены. Получение бариевой соли изолазалоцида А. 0,77 г изо-лазалоцида А раствор ют в метиленхлориде и обрабатывают насыщенным водным раствором гидроокиси бари . Слой растворител отдел ют и концентрируют при уменьшенном давлении. Получают примерно 0,62 г бариевой соли изо-лазалоцида А в виде пены. Пример2, Получение натриевой соли йодпроизводного изо-лазалоцида А. Раствор 1,8 г натриевой соли изолазалоцида А в 50 мл смеси лед ной уксусной кислоты и хлороформа обрабатывают 980 мг монохлорида йода (свежедистиллированна фракци 97-99 С). Монохлорид йода смешивают с 5 мл уксусной кислоты, и добавл ют медленно, в течение 15 мин, к реакционной смеси . По окончании прибавлени медленно добавл ют воду (100 мл) и смесь экстрагируют эфиром. Слой растворител отдел ют и тщательно промывают водным раствором бисульфита натри , бикарбоната натри и карбоната натри . Растворитель высушивают сульфатом натри . После концентрировани и кристаллизации продукт получают путем фильтрации . Перекристаллизаци из этилового эфира уксусной кислоты дает натриевую соль йод производного изо-лазайоцидаXCo4-Hf5 ,3NaOa) в виде белых крис таллой-с . 189-191° С сСд 45,5° (6,/рМ, СЯСе)„ Продукт содержит око лф 25% высшего гомолога (С Я 3NaOg П р и м е р 3, Получение натриевой соли хлорпроизводного йзо-лазалоцида А. К холодному раствору (приблизительно 3°С) из 6,12 г натриевой соли изо-лазалоцида А в 50 мл хлороформа , 3 мл четыреххлористого углерода медленно прибавл ют 34 мл насыщённого четыреххлФристого углерода с 10 ммолъ хлоргаза,. Продолжительность реакции 1/2 ч, после чего раст вор фильтруют- и фильтрат обрабатывают насыщенным водным раствором NagCOj. Слой растворител высушивают сульфатом натри и концентрируют до малого объема, из которого после добавлени гексана получают кристаллический продукт. Кристаллический продукт дважды перекристаллизовывают из метиленхлорида/эфира и ацетона/ге сана. Получают соль натри хлор производного изо-лазалоцида А (С,. Н се NaQ) в виде белых кристаллов ст .пл„ 183-184С, oi.33 (-)60,77 ( 0,99%, CHCS). Продукт содержит око ло 25% высшего гомолога С,-,-Я... КаО„се 5 д4-о Формула изобретени Способ получени галогенпроизводых .антибиотика изо-лазалоцида А обей формулы I СвгН fu / ЪИд sr а J «о ц ( н( 1г где X хлору бром или йод, или их солей, отличающийс тем, что соли соединени общей формулы И ЙОгИ О Я подвергают соответствующему галогенированию путем обработки N -бром-, или N -хлорсукцинимидом или бромом, хлором , йодом или монохлоридом йода в среде соответствующего растворител с последующим выделением соединени формулы (I) в свободном виде или в виде соли. Источники информации, прин тые во внимание при экспертизе: l.a. isoEation of three new Criistae Antibiotics, 3-.Am.Cfiem.Soc.,-f95,T.73, c.5295-ff 98.