SU584802A3 - Способ получени -галактозидазы - Google Patents
Способ получени -галактозидазыInfo
- Publication number
- SU584802A3 SU584802A3 SU7502191452A SU2191452A SU584802A3 SU 584802 A3 SU584802 A3 SU 584802A3 SU 7502191452 A SU7502191452 A SU 7502191452A SU 2191452 A SU2191452 A SU 2191452A SU 584802 A3 SU584802 A3 SU 584802A3
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- mycelium
- galactosidase
- activity
- raffinose
- solution
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C13—SUGAR INDUSTRY
- C13B—PRODUCTION OF SUCROSE; APPARATUS SPECIALLY ADAPTED THEREFOR
- C13B35/00—Extraction of sucrose from molasses
- C13B35/005—Extraction of sucrose from molasses using microorganisms or enzymes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/24—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
- C12N9/2402—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
- C12N9/2465—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1) acting on alpha-galactose-glycoside bonds, e.g. alpha-galactosidase (3.2.1.22)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/14—Preparation of compounds containing saccharide radicals produced by the action of a carbohydrase (EC 3.2.x), e.g. by alpha-amylase, e.g. by cellulase, hemicellulase
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C13—SUGAR INDUSTRY
- C13B—PRODUCTION OF SUCROSE; APPARATUS SPECIALLY ADAPTED THEREFOR
- C13B20/00—Purification of sugar juices
- C13B20/002—Purification of sugar juices using microorganisms or enzymes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C13—SUGAR INDUSTRY
- C13K—SACCHARIDES OBTAINED FROM NATURAL SOURCES OR BY HYDROLYSIS OF NATURALLY OCCURRING DISACCHARIDES, OLIGOSACCHARIDES OR POLYSACCHARIDES
- C13K13/00—Sugars not otherwise provided for in this class
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/911—Microorganisms using fungi
- Y10S435/912—Absidia
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
вают 4-8, предпочтительно 5-7. Температура культивировани и период завис т от рода микроорганизма и состава культуральной среды, в случае культивировани при перемешивании достаточно 40-60 час при
По окончании культивировани ми .целий отдел ют фильтрованием, промывают водой и измельчают или обрабатывают автголизом. Извлеченный из мицели энзим можно примен ть как энзимный препарат
Отфи}1ьтрованный мицелий можно добавл ть к свекловичной мелассе дл разложени содержащейс в ней рафинозы . Кроме того, можно мицелий набивать в сосуд и пропускать через него свекловичную мелассу дл разло жени рафинозы.
Пример 1. Сахариды (ксилоза арабиноза, рамноза, глюкоза. г манноза фруктоза, галактоза, мальтоза, целлабиоза , лактоза, мелибиоза, сахароза, рафиноза, растворенный крахмал, дек1 стрин) в количестве 1% добавл ют к различным порци м культургшьной среды , содержащей компоненты (вес.%} глюкоза 1f кукурузный настой 1 г i;KKjW), 8,3; ,0 O.i;
NaCe 0,2 i CaCO, 0,3. i
Культураль%ую засевают спорами вида fasidla « е«ееха ИФО 5874 и культивируют при взбалтывании 72 час при со скоростью 140 об/мин о Затем отдел ют мицелий, промывают ег водой и растирают в ступке с морским
Углевод
Галактоза Лактоза Мелибиоза Рафиноза
песком до получени пасты. После этого суспендируют в воде такого же объема, как культуральна жидкость.
Далее суспензию, принимаемую за раствор энзима, испытывают на еС-галактозную активность, котора представл ет собой энзиматическую активность мицели , полученного из 1 л культуральной среды Энзиматическую активность суспензии мицели опреде0 л ют путем добавлени , мл суспензии и смеси 0,06 м мелибкозы и 0,5 мл 0,1 М фосфатного буферного раствора при рН 5,2 и реагировани в течение 2 час при 4ОС, последующего нагре5 вани смеск в кип щей вод ной бане дл инактивировани энзима, добавлени к реакционному раствору 1 мл 1,8%-ного Ba(OH)j.eHjO и 1 мл 2%-ного ZnSO -7HjO дл удалени протеина, центрифугировани раствора и испытани его верхнего сло на содержание глюкозы. С учетом пропорциональной зависимости содержани глюкозы, освобождаемой из мелибиозы, и концентраци энзима от содержани 1000 мкг глюкозы суспензию заранее разбавл ют дл попадани в предел измерени , удовлетвор ющий этой зависимости. Количество свободной глюкозы умножёцот на число разбавлени , сС -галактозидазную активность, освобождающую 1 мкг глюкозы в указанных услови х, принимают за единицу.
Данные определени продуцировани -галактозидазы приведены в табл.1
Таблица 1 Единицы А.-галактозидазы
14900 53800 14340 37240
Результаты, приведенные в табл. 1, показывают, что при продуцировании -талактозидазы лактоза дает лучпшй-показатель ,
Пример 2о Спорами штаммов Absidia указанными выше, засевают различные, порции культуральной среда, .содержащей следующие компоненты, Bec,%s лактоза 1} глюкоза 1/( кукурузный настой 1 К НРО 0,3; Mg&0,THjO 0,2; j4ece Q.a и CaCOg 0,J, Культивируют согласно примеру 1
Полученные культуральные растворы испытывёиот на еС-галактозидазную и инвертазную активность мнцели . Инвертазную активность определ ют путем смешивани 1 кш суспензии мицели с 0,5 мл 0,06 Мсахарозы и 0,5 мл фосфатного буфера при рН 5 и реагировани при тех же услови х, как при определении вС-галактозидазной активности . Затем раствор центрифугируют дл удалени протеина и в верхнем слое определ ют содержание инверторного сахара по методу Сомолжи-Пельсоыа .
Инвертазную активность, продуцирующую 1 мкг сахара в указанных успови х , принимают за единицу.
Сухой вес мицели опредэл ют после сушки при 105С количества мицели .
раствор испытывали, при этом установили , что штамм рода Absidia обладает большей et -галактоэидазной активностью и более низкой инвертазной активностью.
Дл штамма AbeldHa cd-галактозидазна активность, которой обладает 1 г сухого мицели , больше инвертазной активности, адл штаммаAtepliepeWa vifjacce - инвертазна активность больше оС -галактоэидазной.
Пример 3. ВЮл воды раствор ют (г) 120 глюкозы; 3 20 ;
в 100 мл культуральной среопределени приведены в
Таблица
Раствор помещают в ферментатор и стерилизуют 30 мин при , затем охлаждают до 30 С и разбавл ют стерилизованной дистиллированной водой до
общего объема 12 л. В растворе культивируют штамм Jlbsidtb ИФО 5874 при перемешивании со скоростью ЗОР об/мин и пропускании воздуха 3 л/мин. Затем отбирают образцы проб
и испытывают на «d-галактозидазную активность и рн культурального раствора .
Данные испытаний приведены в табл.3
Таблица 3
Из результатов табл, 3 видно, что дл штамма bsidia pefbexo МФО 5874 достаточно 42 час культивировани . Во окончании 42 час культивировани вес сухого мицели , полученного из 100 мл культуральной среды, составл ет 1,36 г.
рН культурального
Врем культивировани , мин
6
12 18 24 30 36 42 -48 54 57
Иэ данных табЛо 4 видно, ) дл JbsicHa httafe&p&t ИФО 8082 дойтаточно 54 час культивировани , при этом вес сухого мицели , полученного ИЗ 100 мл культуральной среды, сое тавл ет 1,35 г«
Следующие далее приме{ карактёризуют применение энзима дл разложени рафиноэы.
Пример 5, Мелассу Стеффена) разбавл ют водой до 30 Брикса и добавкой серной кислоты рН довод т до .
В 200 г полученного раствора, содержащего 5,8 г рафЬнозы, добавл ют мицелий b&idia r eieeiM . ИФО 5874 с сухим весом 2,9 г и 174|10 ед галактозидазной активности, полученный согласно примеру 2, дают реагировать при 50°С и перем&1швании в течение 2 час 30 мин. По окончании реакции 1«1ицелий отдел ют фильтрованием и про шлвакп; водой, фильтрат и промывные воды объедин ют.
Определенный объем этой смеси испытывают хроматографией на бумаге на
Пример 4. Штамм Ab&idia hyo. Eospofo ИФО 8082 культивируют согласно примеру 3, затем определ ют зависимость между длительностью культивировани и количеством образовавшейс сС -галактозидазы.
Данные опытов приведены в табл.4.
Таблица 4 ЕДИНИЦЫ Л-галактозидазы
раствора
О О О
. 134
1240
4030
19360
51360
68500
69000
содержание остаточной рафинозы и сахарозы , дл чего образцы про вл ют в растворителе, содержащем:.(ч) 6 н-бУ таНолЗ; 4 пиридина и 3 вода. Фракции рафинозы и сахарозы П1зомывают и испытывают по цистеинкарбазольному прог. цессу, при этом устанавливгивт, что 78% от первоначсшьного содержани рафинозы разлагаетс , а содержание сахарозы увеличиваетс на 2,41 г.
Пример 6. Мицелию Abfiidta .re/eexd ИФО 5874 с 174-10 ед оС-галактозидазной активности, полученному согласно примеру 5, дают реагировать
с 200 г мелассы, разбавленной ДО Брикса и приготовленной согласно примеру 5 „ После реакции мицелий проксывают водой и добавл ют к новой порции мелассы. Таким образом мицелий используют дл п ти обработок. Полученные разложенные растворы испытывгиот на содержание остаточной рафинозы и на содержание сахарозы.
Данные испытаний приведены в
табл. 5.
Пример 7. Мелассу Стеффена разбавл ют до Брикса и Довод т серной кислотой рН до 5,2.
В 200 г этого раствора, содержащего 9,66 г рафинозы, добавл ют мицелий wieexa ИФО 5874 с сухим весом 6,5 г и 2898-Ю ед .-галактозидазной активности, полученный согласно примеру 2, По окончании реакции определ ют степень разложени рафинозы и увеличение содержани сахарозы , которые равны соответственно 56,2% и 3,03 г.
Пример 8.В 100 мл мелассы, содержащей 3.87 г рафинозы и разбавленной до 50 Брикса, с рН 5,2 добавл ют мицелий bsJd-ia пеЛехд ИФО 5874
Из данных табл. 6 следует, что в случае применени двух родов мицели с одинаковой -галактозидазной активностью дл разложени рафинозы количество компонента, выдел емого мицел.ием, меньше в случае Bbsidia t eftexc( . ИФО 5874.
Предлагаемый способ получени л-галактозидазы по сравнению с известТаблица 5
с сухим весом 1,74 г и 775-10 ед tf. -галактозидазной активности при в течение Ю час.
По окончании разложени компонент, выделенный мицелием, разбавл ют водой 1:1000 и испытывают при длине волн 260 и 280 нм на оптическую плотность.
В таком же растйоре мелассы при аналогичных услови х подвергают реакции мицелий Atenfteretta vinaccd сухим весом 3,730 г и 77410 ед rtl-галактозидазной активности. Разложенный раствор испытывают на оптическую плотность при 260 и 280 нм. Контрольным образцов служит меласса с неизменными свойствами.
Данные испытаний приведены в табл.
Таблица 6
ным решением той же задачи обеспечивает получение энзимного препарата с достаточно высокой .-галактозидазной активностью и пониженной инвертазной активностью на единицу веса энзимного препарата дл разложени рафинозы, содержащейс в свеклови чной мелассе/ на гсшактозу и сахарозу, и
увеличение выхода сахарозы.
11
Claims (1)
1. Патен-г США 3647625, кл. 195-11, 07.03.72.
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US00239741A US3832284A (en) | 1972-03-30 | 1972-03-30 | Method for manufacture of alpha-galactosidase by microorganisms |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
SU584802A3 true SU584802A3 (ru) | 1977-12-15 |
Family
ID=22903520
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SU7502191452A SU584802A3 (ru) | 1972-03-30 | 1975-11-21 | Способ получени -галактозидазы |
Country Status (9)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US3832284A (ru) |
BE (1) | BE787430A (ru) |
CA (1) | CA1004617A (ru) |
CS (1) | CS194667B2 (ru) |
DE (1) | DE2239210C3 (ru) |
ES (1) | ES405697A1 (ru) |
FR (1) | FR2177680B1 (ru) |
PL (1) | PL88470B1 (ru) |
SU (1) | SU584802A3 (ru) |
Families Citing this family (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3957578A (en) * | 1975-01-03 | 1976-05-18 | Hokkaido Sugar Co., Ltd. | Method for manufacture of α-galactosidase by microorganism |
US4263052A (en) * | 1979-10-12 | 1981-04-21 | American Crystal Sugar Company | Production of fructose and useful by-products |
CA2203811A1 (en) * | 1994-10-27 | 1996-05-09 | Bertus Noordam | A method for improved raw material utilization in fermentation processes |
Family Cites Families (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
FR1555370A (ru) * | 1967-04-05 | 1969-01-24 |
-
1972
- 1972-03-30 US US00239741A patent/US3832284A/en not_active Expired - Lifetime
- 1972-08-01 PL PL1972157057A patent/PL88470B1/pl unknown
- 1972-08-02 CA CA148,516A patent/CA1004617A/en not_active Expired
- 1972-08-09 DE DE2239210A patent/DE2239210C3/de not_active Expired
- 1972-08-09 ES ES405697A patent/ES405697A1/es not_active Expired
- 1972-08-10 BE BE787430A patent/BE787430A/xx not_active IP Right Cessation
- 1972-08-22 FR FR7229951A patent/FR2177680B1/fr not_active Expired
- 1972-09-05 CS CS726074A patent/CS194667B2/cs unknown
-
1975
- 1975-11-21 SU SU7502191452A patent/SU584802A3/ru active
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CS194667B2 (en) | 1979-12-31 |
FR2177680A1 (ru) | 1973-11-09 |
DE2239210B2 (de) | 1978-03-23 |
CA1004617A (en) | 1977-02-01 |
FR2177680B1 (ru) | 1975-01-03 |
ES405697A1 (es) | 1975-07-16 |
PL88470B1 (ru) | 1976-09-30 |
BE787430A (fr) | 1972-12-01 |
US3832284A (en) | 1974-08-27 |
DE2239210A1 (de) | 1973-10-11 |
DE2239210C3 (de) | 1978-11-23 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
SU1635905A3 (ru) | Способ получени сукралозы | |
Suzuki et al. | α-Galactosidase from Mortierella vinacea: CRYSTALLIZATION AND PROPERTIES | |
FI106265B (fi) | Menetelmä ksylitolin valmistamiseksi ksyloosia sisältävistä seoksista | |
DE69118869T2 (de) | Verfahren zur gleichzeitigen herstellung von xylit und ethanol | |
Norkrans | Influence of Cellulolytic Enzymes from Hymenomycetes on Cellulose Preparations of Different Crystallinity. | |
Catley | Utilization of carbon sources by Pullularia pullulans for the elaboration of extracellular polysaccharides | |
SU606554A3 (ru) | Способ получени -галактозидазы | |
Edelman et al. | Transfructosidation in extracts of the tubers of Helianthus tuberosus L | |
Adda et al. | Effect of nitrate on growth and production of cell-wall polysaccharide by the unicellular red alga Porphyridium | |
US20090155860A1 (en) | Process for the Production of Oligosaccharides | |
FR2601385B1 (fr) | Procede de preparation a partir de saccharose d'un melange de sucres a haute teneur en isomaltose par voie enzymatique et produits obtenus | |
EP0109009B1 (de) | Verfahren zur Herstellung von 1-0-alpha-D-Glucopyranosido-D-fructose | |
JPS5820598B2 (ja) | 蔗糖からフラクト−スポリマ−および高フラクト−スシラツプの製造方法 | |
DE2712007A1 (de) | Stabilisiertes glucoseisomerase- enzymkonzentrat und verfahren zu seiner herstellung | |
SU584802A3 (ru) | Способ получени -галактозидазы | |
SU1230469A3 (ru) | Способ получени содержащего фруктозу продукта из сахарозы | |
US2174475A (en) | Enzymatic manufacture of nucleotides | |
Ho Park et al. | A new method for the preparation of crystalline L-arabinose from arabinoxylan by enzymatic hydrolysis and selective fermentation with yeast | |
Sacher et al. | Effects of auxins on membrane permeability and pectic substances in bean endocarp | |
FI95811B (fi) | Menetelmä D-glukopyranosyyli-sokerialkoholiyhdisteen valmistamiseksi | |
Emiliani et al. | Induced Autolysis of Aspergillus oryzae (A. niger group) IV. Carbohydrates | |
KR100340735B1 (ko) | 치커리올리고당의 제조방법 | |
Okuda | Different biochemical activities of the D-glucose anomers | |
DE2107148A1 (de) | Verfahren zur Herstellung von Polynucleo tiden auf mikrobiologischem Wege | |
IIZUKA et al. | MICROBIOLOGICAL STUDIES ON PETROLEUM AND NATURAL GAS VII. MONOSACCHARIDE COMPONENTS OF A HYDROCARBON-ASSIMILATING YEAST |