SU463268A3 - Способ получени св занных носителем протеинов - Google Patents

Способ получени св занных носителем протеинов

Info

Publication number
SU463268A3
SU463268A3 SU1787934A SU1787934A SU463268A3 SU 463268 A3 SU463268 A3 SU 463268A3 SU 1787934 A SU1787934 A SU 1787934A SU 1787934 A SU1787934 A SU 1787934A SU 463268 A3 SU463268 A3 SU 463268A3
Authority
SU
USSR - Soviet Union
Prior art keywords
activity
units
acrylamide
solution
ester
Prior art date
Application number
SU1787934A
Other languages
English (en)
Inventor
Букамп Клаус (Фрг)
Ульрих Бергмайер Ханс (Фрг)
Боч Карл-Хейнц (Фрг)
Яворек Дитер (Фрг)
Нельбек-Хохштеттер Михаель (Австрия)
Original Assignee
Берингер Маннхайм Гмбх (Фирма)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from DE19712128743 external-priority patent/DE2128743C3/de
Application filed by Берингер Маннхайм Гмбх (Фирма) filed Critical Берингер Маннхайм Гмбх (Фирма)
Application granted granted Critical
Publication of SU463268A3 publication Critical patent/SU463268A3/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08F—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED BY REACTIONS ONLY INVOLVING CARBON-TO-CARBON UNSATURATED BONDS
    • C08F289/00—Macromolecular compounds obtained by polymerising monomers on to macromolecular compounds not provided for in groups C08F251/00 - C08F287/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N11/00—Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
    • C12N11/02—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier
    • C12N11/08—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a synthetic polymer
    • C12N11/082—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a synthetic polymer obtained by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds
    • C12N11/087—Acrylic polymers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N11/00—Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
    • C12N11/02—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier
    • C12N11/08—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a synthetic polymer
    • C12N11/089—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a synthetic polymer obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N11/00—Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
    • C12N11/02—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier
    • C12N11/08—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a synthetic polymer
    • C12N11/089—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a synthetic polymer obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds
    • C12N11/091—Phenol resins; Amino resins
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N11/00—Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
    • C12N11/02—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier
    • C12N11/08—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a synthetic polymer
    • C12N11/089—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a synthetic polymer obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds
    • C12N11/096—Polyesters; Polyamides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N11/00—Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
    • C12N11/02—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier
    • C12N11/08—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a synthetic polymer
    • C12N11/098—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier the carrier being a synthetic polymer formed in the presence of the enzymes or microbial cells
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
    • Y10S530/81—Carrier - bound or immobilized peptides or proteins and the preparation thereof, e.g. biological cell or cell fragment as carrier
    • Y10S530/812—Peptides or proteins is immobilized on, or in, an organic carrier
    • Y10S530/815—Carrier is a synthetic polymer

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
  • Addition Polymer Or Copolymer, Post-Treatments, Or Chemical Modifications (AREA)
  • Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)

Description

(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ СВЯЗАННЫХ НОСИТЕЛЕМ
ПРОТЕИНОВ
3
получен в салюм водном растворе полимериJruntoii вплор с 1,(1|)имых мономеров. Прн этом прсд1111|ти1слыи1 осуществл п, предлагаемый способ превращени  протеина с эпоксидным соединепнсм в присутствии полимеризующегос  мо 1омера (или мономеров), или полимеризую ннйс  лгономер (или смесь мономеров) добав;  т1)СЯ в реакционный раствор лишь пас.те )е,кннн между нротеином и эпоксидным спсдилепнем.
Д;1Я осуолествлени  предлагаемого способа прсдпочтите.тьпы эпоксидные соединени  общеь форлгулы
. :
C.
в KOTOpoii Ri означает алкиленовый радикал с одной или несколькими двойными св з ми, алкиленоксирадикал или ненасыщеннвш ацильиый радикал; п - 0,1 или 2; Rg - атом водорода илп низпла  алкильна  группа (под Hi-Bineii алкильной грунной понимаетс  пр ма  1-1ЛИ развствлспна  группа с 1-4 атомами углерода ). Группа RI содержит преимущественно 2-6 атомов углерода. Однако могут нримеп тъс  и более длинноценочные радикалы, поскольку при этом водорастворимость эпоксидного соедииени  уменьшаетс  незначительно .
Примерными групп Ri могут служить аллилОКСИ- , метилаллилокси, этилаллилокси-, диметилаллилокси- , метилэтилаллилокси, проиилаллилокси- и диэтилаллилоксигруппы, а также другие аллилоксигомологи, предпочтительна ацильна  группа, в которой оксигруппа находитс  в сопр жении с двойной св зью. Подобные группы RI образуютс , например, от а,3-ненасыщенных кислот таких, как акрилова , метакрилова , фумарова  и малеинова  ккслоты.
Примерами соединений общей формулы I  вл ютс  2,3-эпоксипропиловый сложный эфир акриловой и метакриловой кислот, 2,3-эпоксиироппловый сложный моноэфир и диэфир малеиповой кислоты, 2,3-эпоксипропиловый сложный мопоэфир и диэфир фумаровой кислоты , 2,3-эпоксибутиловый эфир акриловой кислоты, 2,3-эпоксипентиловый сложный эфир акриловой кислоты, 2,3-эпоксигексилсвый СЛОЖНВ1Й эфир акриловой кислоты, соответствуюпще эфиры метакриловой, (|)умарово1 | и малеиновой кислот, 1-(аллилoi;cn )-2,3-Э11оксибута11 и т. п.
Особенно предпочтительны в качестве мономеров водорастворимые нроизводные акрилоHoii плп метакриловой кислоты, например амнды п сложпые эфиры этих соединений. Соединени5 с ограниченной водорастворимостью нл-еют преимущество в том случае, когда примен етс  св занный носителем фермент в нечисто водной системе, например в водно-оргаiiH4ecKoii среде. Пригоды также соответствую4
щие производные малеиновой или фумаровой кислоты.
В зависимости or требуемо консистенции конечного нродукта к мономеру добавл ют
сшивающий агент, содержащий более одной нолимеризующейс  груипы, например N,N-Meтиленбисакриламид и диэтиленакрилат, которые предпочитают при работе с водным раствором . Если полимеризацию ведут в гетерогепной фазе, т. е. в суснепзии, могут нримеп тьс  такие водонерастворимые еп:ивающие агенты, как дивппилбензол п зтилендиметакрилат и др. Полученные по предлагаемому способу протеипы, св занные носителе:м, не
образующим сшивки, можно сшивать дополнительно .
Взаи.модействие протеипа с эпоксидным соединением не требует особых меропри тий: нротеин и эпоксидное соединение можно вводить вместе при нор.лшльной температуре в водный раствор, целесообразно в буферный водный раствор с величиной рП, приемлемой дл  соответствующего JipOTenna. Продолжительность взаимодействи  протеина и эпоксидкого соединени  зависнт от примен емых веществ и колеблетс  от 5 мин до 1 час, ио в отдельных случа х может быть более продолжительной или более короткой. Взаимодействие нротенна и эпоксидного соединени  можно вести в нрисутствии носител  или исходных продуктов дл  получени  носител . В последнем случае нецелесообразно начинать реакцию полимеризации добавкой ицициатора после образовани  промежуточного продукта протеина с эноксидным соедипепием . В качестве инициаторов могут примеп тьс  употребл емые обычпо в химии полимеров инициаторы и катализаторы, так как они не оказывают отрицательного вли ни  на
активность протеина. В качестве инициаторов или катализаторов при применении мономеров с ненаевшденными олефиновыми св з .ми или форполимеров используют, например, неорганические или органические нерекиеи, азосоединени  и т. д. Могут примен тьс  также ускорители реакцпп, в частности амины и т. н. Использование инициаторов в комбинации из перекисного сульфата и амина, нанример 3-диметила .мииопронионитрила, нредпочтительно.
При применении нпициаторов в этой комбинацпи целесообразно вести процесс в ипертной атмосфере, например в атмосфере азота. Продукт получают ii)ocTijiM отфпльтровыванпем п 1громывкой.
По предлагаемому сцособу чувствительные протеииы и протеиновые соединени , наприме ) ферме1ггы, люжно св зывать без большой нотери их активности. При фиксации на носи1ел х подобных чуветвительпых протеинов но
известным методам ночтн во всех случа х они дезактивируютс  или получаемые препараты имеют небольшую стойкость и ограниченную активность. Преимущество получаемых по изобретению продуктов состоит в том, что во
врем  прон,ессов их пабухапп  и другнх проueccoB ферментное или протеиновое соединение сохран етс . Это иро вл ете , например, в том, что при фиксации фермента уреазы на ДЕАЕ-целлюлозе по известному триазиновому способу нолучают продукт с активностью 4,9 ед./г, а но нредлагаемому - с активностью 1200 ед./г при той же ферментативной активности . Причем и после хранени  в течение нескольких недель при температуре 34°С продукт не тер ет активности. Аналогично по известному способу можно фермент глюкозаоксидазу с активностью 300 ед./г лиофилизата св зывать с целлюлозой. Но после 11 дней хранени  активность снижаетс  менее чем на половину. По предлагаемому способу, использу  одинаковые количества фермента, можно нолучать продукты почти с удвоенной активностью. Такие продукты сохран ютс  более 6 мес цев в готовой форме как катализаторы без существенного уменьшени  активности.
Продукты, получаемые по изобретению, стойки к поражению микроорганизмами, режим набухани  их управл емый, что важпо, если продукты примен ют дл  насадки колонны , кроме того, они обеспечивают легкое регулирование требуемого зар да или отсутствие зар да. Преимущество способа состоит также в простоте его осуществлени .
Пример I. Исходные вещества: глюкозаоксидаза (GOD, 220 ед./мг) акриламид, 2,3эпоксипропиловый слолсный эфир акриловой кислоты, М,Ы-метиленбисакриламид, 3-диметиламинопропионитрил , перекисный сульфат аммони .
0,1 г GOD раствор ют в 2 мл. 0,5 М буферного раствора триэтаноламина (рН 8,0) в атмосфере азота при 30°С, смещивают с 0,25 мл 2,3-эпоксипропилового сложного эфира акриловой кислоты и перемещивают 30 мин. Затем охлаждают до 10°С, смещивают с 3 г акриламида и 0,1 г К,Н-метиленбисакриламида, растворенного в 18 мл дистиллированной воды.
В атмосфере азота приблизительно через 15 мин начинаетс  полимеризаци  при помощи 0,5 мл 5%-ного 3-диметиламинонропионитрила и 3 мл 5%-ного перекисного сульфата аммони . Раствор приблизительно через 5 мин становитс  в зким, затем он нолимеризуетс  в желтьп прозрачный и твердый гель. Блок полимеризации оставл ют на 18 час в холодильном П1кафу. Далее полимеризат нродавлипают сквозь металлическое сито с отверсти ми диаметром 0,5 мм и промывают 2000 мл дистиллированной воды. Частички гел  помещают в колонну внутренним диаметром 2 см с 0,2 М буферным раствором фосфата кали  (рП 7,5), промывают адсорбционно св занной GOD, пока активность элюата не будет равна нулю. Ферментативна  активность св занного носителем фермента (лиофилизата) 500 ед./г.
Пример 2 (сравнительный пример). Повтор ют пример 1, однако не внос т эпоксидное соединение.
3,0 г акриламида и 0,1 г N,N-мeтилeпбиcaкриламида в 18 мл дистиллировагпюй воды
смешивают, перелгешива  и заморажива  с 0,1 г GOD, раствореипой в 2 гл 0,05 М буферного раствора триэтанолампна (рП 8,0). Затем , как в примере I. в атмосфере азота добавл ют раствор инициатора, п продукт обрабатывают , как описапо в прпмере 1. Активпость элюата около 40% от активности введеппого GOD. После лиофилизагши полученного продукта актиБПОсть лпофилпзата составл ет от 9dдо 100 ед./г.
Пример 3. 1-1с.ходпые вещества: GOD-1, 220 ед./мг, акриламид, 2,3-эпоксппропиловый сложный эфир акриловой кислоты, Х,Х-метилеибисакрпламид , 3-диметиламинонроппонитрил , нерекпсны) сульфат аммони .
0,15 г GOD в 1,5 л днстиллпрова1пкп 1 воды и 1.5 мл 1,0 М буферного раствора триэтаиолампна (рН 8,0) охлаждают в атмосфере азота до 10°С. Этот раствор разбавл ют 3,0 г акриламида и 0,1 г К,Х-метпленбисакрплампда, растворенного в 14 мл воды. При добавке в реакционный раствор 0.25 л 2,3-эпоксппропилового сложного эфира акриловой кислоты, 0,5 мл 5%-ного З-диметиладгинопроппопитрила и 0,2 мл 5%-ного перекнсного сульфата аммопп  начинаетс  реакци  полимеризации. Врем  иолимернзации около 10 мин. Полимеризационный блок продавливают сквозь металлическое сито и обрабатывают, как оиисано в примере 1. Определенпе активпостн элюата показывает, что св зываетс  ковалептно 100% протеииа. Активность лиофилпзата 140 ед./г.
Пример 4. Псходные вещества: GOD-1, 200 ед./г, акриламид, 1-(аллилокси)-2.3-эпоксинропан , ,1 -метпленбпсакриламид, 3-диметилампнопрогпюнитрил , нерекисньи су,чьфат аммони .
50 мг GOD в 0,5 .мл дистиллировапной воды и 0,5 мл 1 М буферного раствора триэтаполампна (рП 8,0), раствореппые в атмосфере азота при 30°С, и 0,1 мл 1-(аллнлокси)-2,3эпоксипронана выдерживают 40 мин, зате: 1
охлаждают до , смешивают с 3 г акриламида и 0,1 г N.N-метиленбпсакрилампда, растворенного в 20 мл бпдистиллнрованпой воды. Дальне1п1 ую обработку ведут, как описано в 1. Активность элюата составл ет 10% от активности использованного фер ieптa . Активность лиофилизата 210 ед./г.
Пример 5. Псходпые вещества: урпказа, 4,5 ед./мг, раствореппа  в 50%, глицерина. 0,05 М глицин п 0.13 Д раствор Ха2СОз, акрнламид , 2.3-эпоксппроп ловьп | сложны эфир акрил OBofi кислоты. Х.Х-метиле б1 Сакриламид , 3-ди eтнлaмнпoпpo П oнптp л, ерекис ЬП1 сульфат аммони .
10 уриказы подвергают диализу i 1 л
0,01 лМ буферного раствора гл1П1И 1а (рН 10) при 4°С около 4 час. Дпалпзат смешива от с 1 мл 1 М буферного раствора тр)этанолам 1па (рП 8,0). При в атмосфере азота выдержива от получеп 1ую смес с добавлением
0,1 мл 2.3-э110ксп рО П5лового эфира
7
акриловой кислоты при перемегпиваини в течение 30 мни. Обработку ведут по 1. Активиоеть лиофилизата 3,5 од./г.
Пример 6. 1--1сходиые вещеетва: гекеокипаза , 140 ед./мг, акриламид, 2,3-эпоксипрои 1ловый сложный эфир акриловой кислоты, ,Nметилепбисакриламид , З-диметиламиноиропионитрил , иерекисный суль(1)ат лмиони .
20 мг суспсизии кристаллов гексокииаз1 ; раствор ют в 5 мл воды и иодвергают диализу в 1 л 0,01 М буфериого раствора триэтаиоламииа (рН 8,0) при 4°С, В присутствии 2,3эиоксииропилового сложного эфира акриловой кислоты выдерживают иолучеииую смесь в атмосфере азота ири 10°С с охлаждеиие, после 30 мии выдерживани  до 10°С. Раствор фермеита смешивают с 3 i акриламида и 0,1 г Ы,Ы-метилеибисакриламида, раствореииого в 20 мл диcтиллиpoвaIИIoi воды. Дальне1 пиую обработку ведут ио иримеру 1. Лктивиость лиофилизата 12 ед,/г,
Пример 7. Пеходиые вещества: глюкозаоксидаза , 220 ед,/мг (GOD), 1,2-эиоксибутеи3 ,4, акриламид, N,N-метил енбисакрил амид, 3-диметиламииоироииоиитрил,1герекисиый
су.аьфат аммоии .
100 мг GOD в 2 мл 0,5 М буфериого раствора триэтаиоламипа (рП 8,0), раствореипоГ в атмосфере азота ири 30°С, и 0,05 -мл 1,2-Э110ксибутена-3 ,4 выдерживают в течеиие 30 мии. Затем охлаждают до 0°С, смешивают с 3 г акриламида и 0,125 г .N-мeтилeибиcaкpиламида , раствореииы л- в 18 .мл бидистилли)ованпой ВОДВ1. ДалвиеГииую обработку ведут ио примеру 1. Активность элюата 37% «т исрвоначальиой активности исходного фермента. Активность лиофилизата 540 ед./г.
Пример 8. Исходные вещества: глюкозаоксидаза , 220 ед./мг, эноксииронилоиый елож8
ный эфир акриловой кислоты, акриламид, Х ,М-метилеибисакриламид, 3-диметиламиионроииоиитрил , иерекисиый сульфат аммони .
100 .мг глюкозаокеидазы, растворенной в атмосфере азота ири 30°С в 2 мл 0,5 М буфериого раствора триэтаиоламина (рП 8,0), и 0,25 мл 2,3-эноксинронилового сложного эфира акриловой кислопз выдерживают 30 мии. Затем раствор иеревод т в диализную камеру диализна  трубка (Калле-целлофан) и дважды иодвергают диализу в 1000 мл 0,05М буферио1ч-) раетвора трнэтаиоламина, рН 8,0. Предзарительио иикубироваинви раствор ферл;ента (объе.м 10 мл) охлаждают до , объем дополн ют до 20 лгл бидистиллироваииой водой, сл еи1ивают е 3 г акриламида и 0,15 г ,К-метилснбисакриламида. Далее процесс ведут ио примеру 1.
Активность элюата 5% от первоначальной aKiTiiiHOCTH 1:еиользоваииого фермента. АктивHocii ) лиофилизата 305 ед./г.
Ире ;1, е т :i.-; о б р е т е н и  
Liiocoo Ч)лучеии  ев загщых носителем протеинов иутел 1 заимоде| 1етви  нротет-гов с сое ,ini-ienne: i. содержанлим эпоксидную грунпу и способную к сополимеризаини двойиую св зь, о т л и ч а К) щ н 11 е   тем, что, с целью иолучеии  бпологическп активиых иродуктов, в качестве 1)о1еиног) исиользуют биологичееки активные п|к)теппы и процесс осуществл ют в водной среде, а нолучеииый иродукт иодвергают с;пнвап по нутс.м взаимоде11етви  с акриламндом н.ли дпфуикциональным спп-гваюшим агеп iOAi.
SU1787934A 1971-06-09 1972-05-24 Способ получени св занных носителем протеинов SU463268A3 (ru)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE19712128743 DE2128743C3 (de) 1971-06-09 Verfahren zur Herstellung von trägergebundenen Proteins

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SU463268A3 true SU463268A3 (ru) 1975-03-05

Family

ID=5810350

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SU1787934A SU463268A3 (ru) 1971-06-09 1972-05-24 Способ получени св занных носителем протеинов

Country Status (15)

Country Link
US (1) US3806417A (ru)
JP (1) JPS5631950B1 (ru)
AR (1) AR194231A1 (ru)
AT (1) AT317424B (ru)
CH (1) CH581663A5 (ru)
DK (1) DK133009C (ru)
FR (1) FR2140541B1 (ru)
GB (1) GB1357861A (ru)
HU (1) HU166074B (ru)
IL (1) IL39339A (ru)
IT (1) IT951435B (ru)
NL (1) NL172874C (ru)
SE (1) SE415660B (ru)
SU (1) SU463268A3 (ru)
ZA (1) ZA723168B (ru)

Families Citing this family (23)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3925157A (en) * 1972-07-12 1975-12-09 Pfizer Immobilized enzymes
CA1023287A (en) * 1972-12-08 1977-12-27 Boehringer Mannheim G.M.B.H. Process for the preparation of carrier-bound proteins
US4081329A (en) * 1972-12-08 1978-03-28 Boehringer Mannheim Gmbh Preparation of carrier-bound macromolecular compounds
US4070348A (en) * 1973-07-25 1978-01-24 Rohm Gmbh Water-swellable, bead copolymer
US3957580A (en) * 1974-03-27 1976-05-18 Pfizer Inc. Immobilized microbial cells
US4144131A (en) * 1974-05-23 1979-03-13 Wisconsin Alumni Research Foundation Immobilization of enzymes on human tissue or erythrocytes
IT1008202B (it) * 1974-07-31 1976-11-10 Lostia Onofrio Fibre inglobanti anticorpi antige ni antisieri procedimento per la loro preparazione e loro impieghi
US3966580A (en) * 1974-09-16 1976-06-29 The University Of Utah Novel protein-immobilizing hydrophobic polymeric membrane, process for producing same and apparatus employing same
JPS5247983A (en) * 1975-10-09 1977-04-16 Kyowa Yuka Kk Method of immobilizing yeast or microbial cells
US4108804A (en) * 1975-12-23 1978-08-22 Toru Seita Process for preparation of chromatography solid supports comprising a nucleic acid base-epoxy group containing porous gel
DE2603319C3 (de) * 1976-01-29 1979-08-23 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Verfahren zur Fixierung von biologisch aktiven Proteinen an Trägern
US4210723A (en) * 1976-07-23 1980-07-01 The Dow Chemical Company Method of coupling a protein to an epoxylated latex
US4203892A (en) * 1978-04-17 1980-05-20 The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture Method of protecting proteins for animal feed
SE414509B (sv) * 1979-05-17 1980-08-04 Kockums Chem Pulverformig substratkomposition i vilken ingar hydrofobt enzymsubstrat adsorberat pa en partikelformig bevare jemte anvendning av kompositionen i tid-temperatur integrerande indikatoranordning av enzymatisk typ
US4596777A (en) * 1983-08-10 1986-06-24 E. R. Squibb & Sons, Inc. Process for preparing (3S)-3-[[[2-(protected or unprotected amino)-4-thiazolyl]acetyl]amino]-2-oxo-1-azetidinesulfonic acid and 4-substituted derivatives thereof
JPS61191700A (ja) * 1984-12-28 1986-08-26 ジエネツクス・コ−ポレイシヨン エポキシ−ポリアルキレンイミン共重合体による生体物質の固定
EP0257758B1 (en) * 1986-08-07 1993-03-10 Minnesota Mining And Manufacturing Company Stable biologically active fluorochemical emulsions
US4885250A (en) * 1987-03-02 1989-12-05 E. I. Du Pont De Nemours And Company Enzyme immobilization and bioaffinity separations with perfluorocarbon polymer-based supports
US5492821A (en) * 1990-11-14 1996-02-20 Cargill, Inc. Stabilized polyacrylic saccharide protein conjugates
DE4210334A1 (de) * 1992-03-30 1993-10-07 Stoess & Co Gelatine Biologisch abbaubares, wasserresistentes Polymer-Material
US5473034A (en) * 1994-03-18 1995-12-05 Hyogo Prefectural Government Method for producing protein-synthetic polymer conjugate and said conjugate produced thereby
US5807942A (en) * 1995-06-09 1998-09-15 Nof Corporation Polymerized product of protein and process for producing it
WO2005039641A2 (en) * 2003-10-15 2005-05-06 The Regents Of The University Of California Biomacromolecule polymer conjugates

Also Published As

Publication number Publication date
DE2128743A1 (de) 1972-12-21
GB1357861A (en) 1974-06-26
AR194231A1 (es) 1973-06-29
DK133009B (da) 1976-03-08
IL39339A0 (en) 1972-07-26
HU166074B (ru) 1975-01-28
DE2128743B2 (de) 1975-11-27
IT951435B (it) 1973-06-30
DK133009C (da) 1976-08-09
IL39339A (en) 1975-06-25
AT317424B (de) 1974-08-26
FR2140541B1 (ru) 1977-12-23
CH581663A5 (ru) 1976-11-15
NL172874B (nl) 1983-06-01
NL172874C (nl) 1983-11-01
US3806417A (en) 1974-04-23
SE415660B (sv) 1980-10-20
ZA723168B (en) 1973-03-28
FR2140541A1 (ru) 1973-01-19
JPS5631950B1 (ru) 1981-07-24
NL7207183A (ru) 1972-12-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
SU463268A3 (ru) Способ получени св занных носителем протеинов
SU524521A3 (ru) Способ получени водонерастворимого ферментного комплекса
US4248786A (en) Hydroxy-succinimide ester compounds
SU576959A3 (ru) Способ получени водонерастворимых протеиновых препаратов
SU608479A3 (ru) Способ иммобилизации микробных клеток
JPS5923791B2 (ja) 固定化微生物の製造法
SU499813A3 (ru) Способ получени водонерастворимого ферментного препарата
Turková [6] Immobilization of enzymes on hydroxyalkyl methacrylate gel
DE2334900C3 (de) Verfahren zur Herstellung eines immobilisierten Enzyms
US4097470A (en) Preparation of biogically active substances bearing -NH2 groups in a form releasable by enzymatic cleavage
GB1265818A (ru)
Zezin et al. Interpolyelectrolyte complexes as a new family of enzyme carriers
US6689836B2 (en) Process for the preparation of thermoprecipitating affinity polymers
DE3033030C2 (de) Thermostabiles Derivat der Urokinase und Verfahren zu dessen Herstellung
CA1036746A (en) Water-insoluble preparations of peptide materials, their production and their use
US4081329A (en) Preparation of carrier-bound macromolecular compounds
JPH1045794A (ja) 蛋白質の安定化方法および組成物
GB1436529A (en) Process for preparing a blood fraction
SU922141A1 (ru) Способ иммобилизации амилоризина Г 10х
US3536587A (en) Enzyme resin and a process for the preparation thereof
US3969436A (en) Carriers for biologically active compounds and methods for the production thereof
US4087487A (en) Carriers for biologically active compounds and methods for the production thereof
Qian et al. Chemical modification of E. coli L‐asparaginase with polyethylene glycol grafted vinylpyrrolidone–maleic anhydride copolymer
Tereshin et al. Modification of Enzymes with Water Soluble Polymers
CA1059694A (en) Method for manufacturing of substances with -nh2 group which are released from polymers by enzymes