SU457342A1 - Способ получени антибиотиков - Google Patents

Description

Изобретение относитс  к медицинской промышленности, в частности к получению антибиотиков.

Известен способ стимулировани  биосинтеза леворина путем совместного культивировани  продуцента а 1тибиотика и дрожжеподобных грибов.

Дл  повьндени  выхода целевого продакта предлаетс  к ферментационной среде добавл ть фильтрат культуральной жидкости дрожжеподобных грибов, например, Candida или Rhodotorula . Можно также использовать предвари- тельно лиофильно высушенный фильтрат

Предлагаемый способ получени  антибиотиков включает два этапа: первый заключаетс  в приготовлении биостимул тора , а второй - в проведении ферментации продуцентов антибиотиков на средах, содержащих биостимул тор.

Дл  получени  биостимул тора.примен ют один из видов дрожжеподобных грибов родов: Candida, Rhodotorula, например Candida tropicalis, Candida utilis, Candida lypolytica, Rhodotorula aurantica Rhodotorula mucilaginosa , или какой-либо другой организм этих родов. Один из указанных кмкроорганизмов выращивают на суслоагаре в пробирках или бактериологических матрацах при 37вС в течение 24 ч и затем смывают физиологическим

раствором дл  получени  суспензии, содержащей 10 млрд. микробных клеток , в 1 мл. Приготовленную суспензию внос т в количестве 1-2% в качгшочные колбы со средой рН 6,8-7,0 следующего состава, г:

Кукурузна  мука20 Соева  мука10 Гидфол (по редуцирующим веществам )10 Хлорид натри 5 Углекислый каль ций1 вода, л1

Колбы -устанавливают на качалку

и инкубируют 24-48 ч при 27-28 С. Полученную культуральную жидкость сливают и отдел ют фильтрованием или

центрифугированием от взвешенных час тиц. Дп  Лучшей фильтрации или центрифугировани  культуральную жидкость предварительно з 1мораживают при минус 10-15®С и оттаивают при комнатной температуре. Дл  удалени  пигментов фильтрат обрабатывают активир ванным углем. Дл  этого к нему доба л ют 1% осветлйющего угл  марки А и перемешивают его с помощью мешалк в течение 30 мин, после чего уголь отфильтровывают на плотной фильтровальной бумаге. Получают осветленный фильтрат, содержащий в растворе ном виде биостимул тор (продукт 1). Осветленный фильтрат разливают по Ьроби кам или флаконам и лиофилирую Остаток после лиофильной сушки, выход которого составл ет 12-14 г на 1л культуральной жидкости- (продукт 2), используют как биостимул тор. Лиофильно высушенный остаток  вл етс  многокомпонентной смесью/ .и содержит, %:. Редуцирующие вещества20-23 Неорганический фосфор30-35 Белок2,25-2,5 Органические кислоты4-5 Зола30-40 Влажность порошка8-10 Важной особенностью биостимул тора  вл етс  его термостабильность благодар  чему свойства вещества со хран ютс  после добавлени  его в ер ды и их стерилизации. Дл  проведени  ферментации испол зуют регламентные Культуры и среды а также известные способы подготовк посевного материала, выращивани  микроорганизмов и стерилизации сред Пример 1. Ферментаци  Acti norayces levoris штамм 28 продуцента .леворина. В качалочные колбы емкостью 5 л, содержащие 1 л соево-кукурузно-гидрольной среды внос т 10 м 10 млрд-ед.взвеси Candida tropical Колбы устанавливают на качалку и культивируют при 27-2В С в течение 2сут. Затем клетки отдел ют центрифугированием и получают биостимул тор в виде продукта 1. В качалочные колбы на 750 мл, кажда  из которых содержит 50 мл соево-кукурузно-гид рольной среды следующего состава, Кукурузна  мука20 Соева  мука10 Гидрол (по редуцирующим веществам )10 Хлорид натри  5 Углекислый кальций1 Биостимул тор (продукт 1)600 мл : Вода, л .До 1 рН до стерилизации7,3-7,4 После стерилизации и охлаждени  среды в нее внос т 5 мл двусуточно инокулюма культуры Actinomyces everis, выращенного при 27-28с на реде следующего состава, г: Соева  мука10 Глюкоза10 Хлорид натри 5 Углекислый кальций1 Вода, л1 Затем провод т ферментацию при бычном режиме в течение 120 ч. Активность культуральной жидкости по окончании процесса ферментации составл ет 61000 ед/мл, при ферментации на той же среде без биостимул тора активность культуральной жидкости составл ет 452DO ед/мл. Пример 2. Ферментаци  Actinomyces nodosus штамм 510/13 продуцента амфотерицина в. В качалочные колбы емкостью 5 л, содержащие 1 л соево-кукурузно-гидрольной среды, внос т 10 мл 10 млрд. ед. взвеси Rhodotorula aurantica. Колбыустанавливают на качалку и выращивают культуру при 27-28с в течение 2 сут. Затем центрифугируют и из недостаточной жидкости получают биостимул тор (продукт 1). После этого готов т ферментационную среду следующего состава , -г: Кукурузна  мука 50 Глюкоза10 Сернокислый аммоний5 Кукурузный экст5 (по весу) ракт Углекислый кальций Биостимул тор (продукт 1) 600 мл До 1 вода, л рН среды до.стерилилизации6 ,9-7,1 . Среду разливают в качалочные колбы емкостью 750 мл по 50 мл. После стерилизации и охлаждени  среды в нее внос т 5 мл двусуточного посевного материала Actinomyces nodosus, выращенного при 27-28С на среде, rs Соева  мука30 Глюкоза .20 Углекислый кальций2 ,5 Хлорид натри Г Вода, л-1 рН 7,2-7,3. до стерилизации Ферментацию при обычном режиме провод т в течение 96 ч. Активность культуральной жидкости по окончании процесса ферментации СОставл ет 5500 мкг/мл против 41UO мкг/мл в контрольной ферментации без биостимул тора.

54573426

Claims (2)

1. Формула изобретени фильтрат культуральной жидкости дрож1 , Способ получени  антибиотиковCandida или Rhodotorula.

   путем глубинного биосинтеза, о т -
2. 2. Способ по п.1, отличаю -

   личаюцийс  тем, что, с целью,щ и и с   тем, что ( {льтрат культуповьвиени  выхода целевого продукта,5 ральной жидкости предварительно лиок ферментационной среде добавл ютфильно высушивают.

   жеподобных грибов, например / рода