SU448649A3 - Способ получени винбластина, винлейрозина и винкристина - Google Patents

Description

1

Изобретение относитс  к области медицины , а именно к производству лекарственных препаратов.

Известен способ получени  алкалоидов из растительного сырь  (Vinca rosen), согласно которому сырье предварительно обрабатывают кислотой, экстрагируют 50-70%-ным водным раствором метанола, упаривают, подкисл ют , фильтруют, повторно обрабатывают несмешивающимс  с водой растворителем, выпаривают . Остаток, содержащий сумму алкалоидов , обрабатывают бензолом, хроматографируют на окиси алюмини , элюируют смесью бензол-метилепхлорид, фракционируют с последующей перекристаллизацией целевых продуктов из этанола.

Однако технологи  такого способа сложна, а выход целевых продуктов недостаточно высок .

Целью изобретени   вл етс  разработка способа, позвол ющего упростить технологию получени  винбластина, винлейрозина и винкристина и повысить выход целевых продуктов .

Достигаетс  это тем, что сырье экстрагируют 90%-ным метанолом с последующей обработкой суммы алкалоидов, например, этанолом , содержащим серную кислоту (рН 4-5), кристаллизацией, растворением в смеси хлористый метилен-хлороформ (2:1), хроматографированием и элюированием тем же растворителем и дальнейшим ведением процесса известными приемами. Пример 1. 100 кг высушенного, состо щего в основном из листьев, измельченного растени  Vinca rosea L. Cantharanthus roseus G. Don выщелачивают три раза 90%-ным водным раствором метанола: один раз - порцией 600 л, и дважды - порци ми по 400 л. 0тфильтрованные и объединенные метанольные экстракты сгущают при пониженном давлении до 140-150 л, после чего подкисл ют одинаковым объемом 5%-ного раствора серной кислоты в воде до рН-2 и отфильтровывают

образовавшийс  осадок темного цвета. Отфильтрованный кислый водный раствор трижды выщелачивают бензолом порци ми по 500 л. После этого при помощи концентрированного водного раствора гидроокиси аммони  устанавливают рН 8,5-9,0. Затем выщелачивают щелочной водный раствор три-четыре раза бензолом порци ми по 600 л. Соединенный бензольный раствор сушат на безводном сульфате натри  или карбонате кальци , отфильтровывают и выпаривают при пониженном давлении . Получают около 700 г коричневой смеси алкалоидов с рыхлой структурой. Алкалоидную смесь раствор ют в этаноле,

содержащем 10% серной кислоты, величина

рН раствора должна быть 4,0-5,0. Раствор выпаривают, выпадение кристаллов сульфата винОластина начинаетс  после обработки щеткой стенки сосуда. Кристаллизацию продолжают в течение двух дней при комнатной температуре , а затем отфильтровывают осажденные кристаллы на стекл нном фильтре.

В зависимости от качества лекарственного растительного сырь  выход составл ет 20- шО г смеси кристаллов, состо щей из сульфата випбластина, винлейрозина, винкристпна и сульфатов сопутствующих алкалоидов. Смесь кристаллов сырых алкалоидных сульфатов раствор ют в смеси, содержащей хлористый метилен и хлороформ в соотнощепии 2 : 1, а именно 7 мл на 1 г. Этот раствор хроматографируют на колонке, наполненной стократным количеством AlgOa, частично дезактивированной водой, и после этого элюируют смесью, содержащей хлористый метилен и хлороформ Е соотнощении 2:1. Улавливают фракции по 30-50 мл. Первые три фракции содержат преобладающую часть сопутствующих алкалоидов . Винбластин и виплейрозин получают во второй-дев той фракци х. Винкристин начинает по вл тьс  в 9-й фракции и элюируетс  до 18-й фракции. Содержащие винбластин , винлейрозин и винкристин фракции, идентифицированные методом хроматографии па бумаге и тонкослойной хроматографии, отдельно выпаривают досуха. Выход 15-75 г винбластина и винлейрозина и 0,6-3,0 г винкрпстина в аморфном сухом остатке.

Содержащий винбластин и винлейрозин сухой остаток раствор ют в 15-кратном количестве водного этанола. Винлейрозин выкристаллизовывают и отфильтровывают, промывают и сущат. Выход в зависимости от качества сырого продукта 5-17 г винлейрозина. Точка текучести 202-205°С +72

(CHCls).

Маточный раствор винлейрозипа, который содержит только випбластин, разбавл ют безводным этанолом до двукратного объема и рН раствора устанавливают 4 при помощи раствора серной кислоты в этаноле. Кристаллизацию сульфата винбластина начинают во врем  добавки раствора серной кислоты в этаноле . Затем провод т кристаллизацию 16 час в холодильном щкафу. Выход, в зависимости от качества сырь , 15-70 г сырого сульфата винбластина.

Высущенный и распыленный сырой сульфат винбластина раствор ют при комнатной температуре в 20-кратном количестве безводного метанола и к фильтрованному раствору добавл ют четырехкратный объем безводного этанола. Дл  полной кристаллизации винбластина раствор выдерживают в течение 16 час в холодильнике. При перекристаллизации MOiKHO достигнуть 90%-ного выхода. Выход, в зависимости от качества сырь , 13-63 г сульфата винбластина; а -28° (СНСЬ).

С целью идентифицировани  виноластин перевод т в оспоьание, и из него перекристаллизацией из эфира получают эфират винбластина . Точка текучести: 201-21 ГС; aJ J5j+42 (СНС1з).

Отделенный методом хроматографии, содержащий винкристин аморфный сухой остаток ((J,ti-3,0 г) раствор ют в iO-кратном количестве безводного этанола и при помощи раствора серной кислоты в этаноле устанавливают рП раствора 4. Дл  полной кристаллизации сульфата винкристина раствор выдерживают 1Ь час в холодильнике. Количество отфильтрованного сырого сульфата винкристина

составл ет 60-707о от растворенного, содержащего винкристин, аморфного сухого остатка .

Дл  перекристаллизации раствор ют сырой сульфат винкристина в небольшом количестве

этанола, добавл ют затем четырехкратное количество этанола, выдерживают раствор дл  выкристаллизовывани  16 час в холодильнике и фильтруют. Выход 0,3-1,5 г сульфата винкристина . Точка текучести 218-220С.

Пример 2. Полученную по примеру 1 сырую кристаллическую смесь, состо щую, в зависимости от качества лекарственного растительного сырь , из 20-100 г сульфатов винлейрозина, випбластина, винкристина и

сопутствующих алкалоидов, раствор ют в воде , и рН раствора довод т до 8-9 при помощи аммиака. Алкалоиды четыре раза экстрагируют из раствора встр хиванием каждый раз с 1 л хлороформа. Соединенные растворы

ххлороформа сушат на безводном сульфате натри  и фильтруют, а затем выпаривают при понижепном давлении досуха. Выход 16-80 г смеси алкалоидпых оснований. Эту массу раствор Ют в 3-4-кратном количестве смеси,

состо щей из бензола и хлороформа в соотношении 1 : 1, и после этого хроматографируют на колонке, наполненной 40-кратным количеством , частично дезактивированной водой. В качестве элюирующей смеси примен ют бензол-хлороформ в соотношении 1:1. После сливани  первых 2-10 л элюата улавливают фракции 0,6-3,0 л. Фракции 1- Ю содержат випбластин и винлейрозин, фракции 11 и 12 не содержат винбластина и винлейрозппа . После этого, в зависимости от количества поданной смеси кристаллов, производ т дальнейшее элюирование с 3-18 л смеси , состо щей из бензола и хлороформа в соотношении 1 : 1, причем улавливают фракции

0,6-3,6 л. Фракции 13-17 содержат винкристин .

Переработку фракций, содержащих винбластин , винлейрозин и випкристин, идентифицированных методом хроматографии иа бумаге и методом тонкослойной хроматографии, производ т способом, описанным в примере 1.

Предмет изобретени 

Способ получени  винбластина, винлейрозина и винкристина путем экстракции растительного сырь  (Vinca rosea) водным раствором метанола, сгущением экстракта, подкислени , повторной обработки несмешивающимс  с водой органическим растворителем, выпаривани , обработки остатка, содержащего сумму алкалоидов, органическим растворителем , хроматографировани , фракционировани  и нерекристаллизацией целевых нродуктов из этанола, отличающийс  тем, что, с целью повышени  выхода целевых нродуктов

и упрощени  технологии, сырье экстрагируют 90%-ным метанолом с последующей обработкой суммы алкалоидов, например, этанолом, содержащим серную кислоту (рН 4-5), кристаллизацией , растворением в смеси хлористого метилена-хлороформа (2 : 1), хроматографированием и элюированием тем же растворителем и дальнейшим ведением процесса известными приемами.