SU444376A1 - Реактив дл определени фосфатаз - Google Patents
Реактив дл определени фосфатазInfo
- Publication number
- SU444376A1 SU444376A1 SU1197398A SU1197398A SU444376A1 SU 444376 A1 SU444376 A1 SU 444376A1 SU 1197398 A SU1197398 A SU 1197398A SU 1197398 A SU1197398 A SU 1197398A SU 444376 A1 SU444376 A1 SU 444376A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- reagent
- salt
- acid
- substrate
- serum
- Prior art date
Links
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 title claims description 32
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 19
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 15
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 10
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 10
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 claims description 9
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M buffer Substances [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 7
- XZKIHKMTEMTJQX-UHFFFAOYSA-N 4-Nitrophenyl dihydrogen phosphate Chemical compound OP(O)(=O)OC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 XZKIHKMTEMTJQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 claims description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 4
- 239000012190 activator Substances 0.000 claims description 3
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 claims description 3
- XBPCUCUWBYBCDP-UHFFFAOYSA-N Dicyclohexylamine Chemical compound C1CCCCC1NC1CCCCC1 XBPCUCUWBYBCDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- BAVYZALUXZFZLV-UHFFFAOYSA-N methylamine Chemical compound NC BAVYZALUXZFZLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 102000004160 Phosphoric Monoester Hydrolases Human genes 0.000 claims 1
- 108090000608 Phosphoric Monoester Hydrolases Proteins 0.000 claims 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 claims 1
- 210000002966 Serum Anatomy 0.000 description 13
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 13
- FBPFZTCFMRRESA-KAZBKCHUSA-N D-Mannitol Natural products OC[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KAZBKCHUSA-N 0.000 description 8
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 8
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 8
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 8
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 6
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 4
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 4
- -1 amine salt Chemical class 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 159000000003 magnesium salts Chemical class 0.000 description 4
- 230000003287 optical Effects 0.000 description 4
- BTJIUGUIPKRLHP-UHFFFAOYSA-N 4-Nitrophenol Chemical compound OC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 BTJIUGUIPKRLHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 3
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- IQUPABOKLQSFBK-UHFFFAOYSA-N 2-nitrophenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1[N+]([O-])=O IQUPABOKLQSFBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000013563 Acid Phosphatase Human genes 0.000 description 1
- 108010051457 Acid Phosphatase Proteins 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N Ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005261 Aspartic Acid Drugs 0.000 description 1
- 235000008733 Citrus aurantifolia Nutrition 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 229940063886 MAGNESIUM GLUTAMATE Drugs 0.000 description 1
- 241001024304 Mino Species 0.000 description 1
- 235000015450 Tilia cordata Nutrition 0.000 description 1
- 235000011941 Tilia x europaea Nutrition 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive Effects 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910000288 alkali metal carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000008041 alkali metal carbonates Chemical class 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 230000000875 corresponding Effects 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000005712 crystallization Effects 0.000 description 1
- PAFZNILMFXTMIY-UHFFFAOYSA-O cyclohexylammonium Chemical class [NH3+]C1CCCCC1 PAFZNILMFXTMIY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- QXNVGIXVLWOKEQ-UHFFFAOYSA-N disodium Chemical class [Na][Na] QXNVGIXVLWOKEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000004571 lime Substances 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 235000013918 magnesium diglutamate Nutrition 0.000 description 1
- WNPYNOGQURLHSF-DFWYDOINSA-L magnesium;(2S)-2-aminopentanedioate Chemical compound [Mg+2].[O-]C(=O)[C@@H](N)CCC([O-])=O WNPYNOGQURLHSF-DFWYDOINSA-L 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 238000000034 method Methods 0.000 description 1
- 235000013923 monosodium glutamate Nutrition 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid Substances OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 239000012047 saturated solution Substances 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- POECFFCNUXZPJT-UHFFFAOYSA-M sodium;carbonic acid;hydrogen carbonate Chemical compound [Na+].OC(O)=O.OC([O-])=O POECFFCNUXZPJT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
Description
1
Предлагаетс реактив дл обнаружеии и количественного определеип щелочных и кислотных фосфатаз в биологических жидкост х, например в сыворотке.
Известен реактив дл анализа фосфатаз, который включает субстрат - двунатриевую соль л-иитрофеиилфосфориой кислоты, сухой буфер дл иоддержани рН 4-И и активатор - соль магни . Эта соль в сухом состо нии нестабильна и иолучение ее затруднено. Кроме того, чувствительность известного реактива недостаточна, особенно при определении щелочных фосфатаз.
С целью повыщени стабильности реактива и чувствительности анализа, предлагаетс реактив , в который в качестве субстрата введена аминна соль п-нитрофенилфосфорной кислоты .
Желательно в качестве субстрата использовать соль гу5ыс-(оксиметил) аминометана и л-нитрофенилфосфорной кислоты .или соль дицИКлогексиламиНа и л-нитрофенилфосфорной кислоты. Целесообразно также в состав реаътива добавл ть маннит.
Сухой порощкообразиый реактив содержит а.минную соль /г-нитрофенилфосфорной кислоты , буфер (карбоиат щелочного металла, например карбонат натри и бикарбонат натри ), металлсодержащий активатор, предпочтительно глютамат магни или магниевую соль аспаргиновой кислоты, и маннит.
Обычно в зависимости от того, какую фосфатазу определ ют, кислую или щелочную, рН
поддерживают в пределах 4-11, соответствующим образом выбира один нли несколько известиых буферов.
В сухо.м виде этот порошок стабилен и может долго сохран тьс . Он может быть разделен на отдельные небольщие порции дл образовани водного раствора, пригодного дл проведени одного анализа сыворотки. Каждую из этих порций можно затем расфасовывать в виде таблеток или капсул.
Указанные субстраты в сухом виде бо.тее стабильны, чем двуиатриева соль «-нитрофеиилфосфорной кислоты. Маннит также увеличивает стабильность субстрата. Кроме того, он активен в энзиматнческой реакции. Количество
добавл емого манннта можно измен ть в щироких пределах, так как положительное вли ние маннита приблизительно пропорционально его количеству. Верхним предело.м, по-видимому , вл етс растворимость этого индивидуального вещества в воде при температуре проведени испытани , т. е. около 37°С. Точны.ми экспериментами было установлено, что заметные результаты можно получить при концентрации добавки несколько мнллиграммов на 1 мл растворенного в воде аналитичеСКОРО реактива. Пределы конструкции маннита составл ют 25-180 мг на 1 мл разбавленного водой реактива.
Реактив можно раствор ть в стандартном количестве воды и смешивать затем его с биологической пробой дл проведени энзиматической реакции. Количество субстрата, содержащегос в реактиве, должно быть достаточным дл того, чтобы реакци происходила с посто нной скоростью. В результате онредел ют .количество или величину активности неизвестного фермента.
Аминные соли п-нитрофенилфосфорной кислоты (п-НФФ) могут быть нолучены реакцией соответствующего амина с солью щелочного металла /г-нитрофенилфосфорной «ислоты. Эти соли могут быть осаждены концентрированием или же добавлением органического растворител . Кроме того, свободную п-нитрофенилфосфорную кислоту можно нейтрализовать соответствующим амином в растворе и осадить соль добавлением органического растворител или унариванием до начала кристаллизации, затем соль отдел ют, промывают и сушат.
Пример 1. Определение активности солей /г-иит рофенилфосфорной кйслоты (п-НФФК).
Компоненты реактива.
Буфер (рН 10,2). Раствор ют 8 г Ка2СОз 2 г NaHCOs и 300 мг глютамата магни в 1 л воды.
Анормальна клиническа химическа контрольна сыворотка Хиланда.
0,03 М растворы амииных солей п-НФФК.
0,03 М pacTBOip двунатриевой соли л-НФФК (в качестве контрольного).
Расчет.
Скорость реакции аминнойсоли/г-НФФК, %: ДЛ405/МИН (амин)х100
ДЛоб/МИН (МЗг)
Свободный п-нитрофенол(вес. %) определ ют цри 405 MiMK.
Свободный /г-нитрофенол
.Л405 (ДДЯ пробы)
406 (дл стандарта)
В табл. 1 нриведена энзиматическа активность аминных солей.
Таблица 1
Перед доВавлением сыворотки.
Определение образовани п-нитрофенола из солей п-НФФК нри различных внешних услови х .
Методика. Взвешивают 3 пробы каждой соли по 100 мг. Помещают первую нробу каждой соли п-НФФК в сухой эисикатор, кладут вторую пробу в эксикатор с насыщенным раствором сульфата аммони дл выдерживани ее при посто нной влажности, третью пробу выдерживают при комнатных услови х.
Выдерживают все образцы в этих услови х по крайней мере в течение 48 час. Раствор ют каждую пробу в 5 мл воды (свободный /г-нитрофенол раствор етс в 5 мл воды, если нет
полного растворени , то твердый осадок удал ют ).
В кювету отбирают пипеткой 0,05 мл образца и добавл ют 2,5 мл буферного раствора (рН 10,2). Определ ют светопоглощение при 405 ммк на любом подход щем спектрофотометре ,.
Расчет.
Свободный ft-нитрофенол (вес. %) Л405ХО,228.
В табл. 2 приведены результаты определени свободного п-нитрофенола после обработки реагента фосфатазой.
Растворим не полностью.
Пример 2. Методика определени щелочной фосфатазы. Реактивы.
Раствор А. В 100 мл дистиллированной воды раствор ют следующие вещества, мг: NaaCOg850
ЫаНСОз250
Магниева соль аопарагиновой кислоты50
Ди- (циклогексиламмонийна ) соль /г-НФФ315
Раствор Б. В 10 мл свежеприготовленного раствора раствор ют 1000 мг маннита.
Растворы А и Б смешивают вместе дл получени четырех аналитических реагентов, как описано ниже.
Реагент 1 :3 мл дистиллированной воды.
Реагент 2:3 мл раствора А+О мл раствора
Таблица 2
Б (концентраци маинита в реагенте равна О мг/мл).
Реагент 3:2 мл раствора А+1 мл раствора Б (концентраци маннита в реагенте равна 33 мг/мл).
Реагент 4 :0 мл раствора А+З мл раствора Б (концентраци маннита в реагенте равна 100 мг/мл).
Реагенты помещают в кюветы, выдерживают в течение 10 мин при 37°С, после чего определ ют п записывают оптиче скую плотность при 415 ммк.
Энзиматическую реакцию инициируют добавлением 20 К анормальной сыворотки Хиланда (серийный номер 368А16).
Показани снимают спуст 10 мин после того, как реагент смешали с сывороткой (Лю) и через 15 мин (Лis). Результаты приведены в табл. 3.
Таблица 3
Таким образом,
Д )0
5 (мин)
) Эту серию сыворотки предварительно калибруют хорошо известными методами дл оиределени соответствующего числа Международных единиц (М. Е.) следующим образом. Оптическа плотность раствора «-нитрофенола с концентрацией 1 мкмоль/мл равна 17,7. 415 - оптическа плотность При длине волны 4IP ммк.
М. Е./ сыворотки ДЛ415 ммк X общий объем1000
X
17,7
мл Сыворотки
где Л,, ММК/МИН 415 ммк (при 10 мин)
5 мин
ммк (при 5 мин)
5 мин
Общий объем 3,0 мл.
Количество сыворотки 0,020 мл (20 К).
Расчет.
М.Е./л сыворотки - ММК/МИН X 3,0 1000 17,7 о,020
М. Е./л сыворотки - 8450.
Дл изготовлени реактива сухие ингредиенты смещивают и смесь таблетируют или капсулируют известными методами. Состав таблетки реактива дл 3 мл щелочной фосфатазы:
Ма2СОз, мл Магниева соль аснарагииовой .кислоты, мг грмс-(Оксиметил) ампиометан л-НФФ, мг
Маииит, мг
Карбовакс 4000, мг
В оптической кювете раствор ют одпу таблетку (или кацсулу), содержащую указанные ингредиенты, в 3,0 мл воды, добавл ют 20 л анализируемого образца сыворотки. Как только реагент и образец перемещаютс , происходит следующа реакци :
рН 8Аминна соль- Щелочна -НФФ фосфатаза
рН 8-10 (Оуфер)
Нитрофенол -f Соль фосфорной
.. .р
кислоты.
Кювету выдерживают при 37°С и измер ют скорость изменени оптической плотности в течение 10 мин. Так как это - скорость реакции , температура и определ емые интервалы доллсны быть точно соблюдены.
Предмет изобретени
Claims (4)
1.Реактив дл определени фосфатаз, включающий субстрат - соль л-нитрофенилфосфориой кислоты, - сухой буфер дл поддержани рН 4-11 и активатор - соль магни , отличающийс тем, что, с целью повыщени стабильности реактива и чувствительности анализа, в качестве субстрата использована аминна соль и-питрофенилфосфорной кислоты .
2.Реактив по п. 1, отличающийс тем, что в качестве субстрата применена соль трис (оксиметил) аминометана и /г-нитрофенилфосфорной кислоты.
3.Реактив по н. 1, отличающийс тем, что в качестве субстрата использована соль дициклогексиламина и п-нитрофенилфосфорной кислоты.
-
4. Реактив по п. 1, отличающийс тем, что в его состав вве.ен маииит.
Приоритет 14.11.66 установлен по пп. 1,2иЗ; приоритет 31.03.67-ло п. 4.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US59374066A | 1966-11-14 | 1966-11-14 | |
| US62743067A | 1967-03-31 | 1967-03-31 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SU444376A1 true SU444376A1 (ru) | 1974-09-25 |
| SU444376A3 SU444376A3 (ru) | 1974-09-25 |
Family
ID=27081784
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU1197398A SU444376A3 (ru) | 1966-11-14 | 1967-11-14 | Реактив для определения фосфатаз |
Country Status (10)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US3425912A (ru) |
| CA (1) | CA930655A (ru) |
| CH (1) | CH497702A (ru) |
| DE (1) | DE1673047C2 (ru) |
| DK (1) | DK140267B (ru) |
| GB (2) | GB1211721A (ru) |
| IL (1) | IL28842A (ru) |
| NL (1) | NL6715288A (ru) |
| SE (2) | SE375384B (ru) |
| SU (1) | SU444376A3 (ru) |
Families Citing this family (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3791929A (en) * | 1968-09-08 | 1974-02-12 | Searle & Co | Phosphatase assay using lyophilized aryl phosphate monesters |
| US3723579A (en) * | 1969-09-08 | 1973-03-27 | Searle & Co | Lyophilized aryl phosphate monoesters and process therefor |
| US3926735A (en) * | 1971-10-20 | 1975-12-16 | Mallinckrodt Inc | Alkaline phosphatase assay |
| US3896008A (en) * | 1971-10-28 | 1975-07-22 | Owens Illinois Inc | Electrochemical potentiometric method for selectively determining alkaline phosphatase content in aqueous fluids |
| IT1065125B (it) * | 1975-08-20 | 1985-02-25 | Boehringer Mannheim Gmbh | Processo per mantenere costante l attivita di fosfatasi alcalina e siero di controllo contenente tale fosfatasi |
| ZA756003B (en) * | 1975-09-22 | 1977-04-27 | Chembro Holdings Pty Ltd | Measurement of alkaline phophatase levels in body fluids |
| US4206280A (en) * | 1975-12-24 | 1980-06-03 | Hoffmann-La Roche Inc. | Determination of acid phosphatase |
| CH625833A5 (en) * | 1975-12-24 | 1981-10-15 | Hoffmann La Roche | Method for the determination of acid phosphatase |
| JPS5377015A (en) * | 1976-12-16 | 1978-07-08 | Asahi Glass Co Ltd | Preparation of fluorine-containing phosphoric acid ester |
| US4132598A (en) * | 1977-06-03 | 1979-01-02 | Modrovich Ivan Endre | Stabilized liquid phosphate containing diagnostic compositions and method of preparing same |
| IT1108964B (it) * | 1978-01-20 | 1985-12-16 | Sclavo Inst Sieroterapeut | Composizione adatta all'analisi della fosfatasi alcalina e metodo utilizzante la stessa |
| US4472499A (en) * | 1982-01-22 | 1984-09-18 | American Hoechst Corporation | Reagents for the determination of enzymes |
| US4555484A (en) * | 1983-07-25 | 1985-11-26 | Eastman Kodak Company | Analytical element and method for alkaline phosphatase assay |
| CN102297962B (zh) * | 2011-05-23 | 2014-01-08 | 董理 | 一种检测碱性磷酸酶的试剂盒 |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US2359052A (en) * | 1940-07-01 | 1944-09-26 | Scharer Harry | Method for detecting enzyme activity |
| US3002893A (en) * | 1958-11-13 | 1961-10-03 | Warner Lambert Pharmaceutical | Method for the determination of serum acid phosphatase and diagnostic preparation therefor |
| US3069330A (en) * | 1960-08-30 | 1962-12-18 | Warner Lambert Pharmaceutical | Method of determining glutamic-oxal-acetic transaminase and composition therefor |
-
1966
- 1966-11-14 US US593740A patent/US3425912A/en not_active Expired - Lifetime
-
1967
- 1967-10-29 IL IL28842A patent/IL28842A/xx unknown
- 1967-11-01 GB GB49698/67A patent/GB1211721A/en not_active Expired
- 1967-11-01 GB GB35174/69A patent/GB1211722A/en not_active Expired
- 1967-11-07 DK DK554067AA patent/DK140267B/da not_active IP Right Cessation
- 1967-11-10 SE SE7006732A patent/SE375384B/xx unknown
- 1967-11-10 SE SE15439/67A patent/SE336687B/xx unknown
- 1967-11-10 NL NL6715288A patent/NL6715288A/xx unknown
- 1967-11-13 CA CA004851A patent/CA930655A/en not_active Expired
- 1967-11-13 DE DE1673047A patent/DE1673047C2/de not_active Expired
- 1967-11-14 SU SU1197398A patent/SU444376A3/ru active
- 1967-11-14 CH CH1587567A patent/CH497702A/de not_active IP Right Cessation
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| SU444376A1 (ru) | Реактив дл определени фосфатаз | |
| Kezdy et al. | [1] Principles of active site titration of proteolytic enzymes | |
| Walter et al. | Acid and alkaline phosphatase in serum | |
| Case et al. | Physical properties of biological membranes determined by the fluorescence of the calcium ionophore A23187 | |
| Bazelyansky et al. | Fractional diffusion-limited component of reactions catalyzed by acetylcholinesterase | |
| US3950226A (en) | Novel reagent and method for the determination of urea in biological fluids | |
| US3425912A (en) | Laboratory reagent for assay of alkaline phosphatase | |
| CA1073328A (en) | Fluorimetric demonstration and determination of a reduced coenzyme or derivative in an aqueous system | |
| US2359052A (en) | Method for detecting enzyme activity | |
| US3527674A (en) | Reagent material and method for urea assay | |
| JPS61247969A (ja) | カルシウムの分析方法およびその分析用試薬 | |
| US3447905A (en) | Test formulation and device and method for creating an acid ph environment therein | |
| Damle et al. | Studies on the role of metaphosphate in molds. I. Quantitative studies on the metachromatic effect of metaphosphate | |
| US3938954A (en) | Determination of calcium | |
| Bender et al. | Phosphate and carbonate ester aging reactions with. alpha.-chymotrypsin. Kinetics and mechanism | |
| Wilhelm | Determination of human plasma cholinesterase activity by adapted Ellman's method | |
| US3595756A (en) | Laboratory reagent for assay of alkaline phosphatase | |
| JPH0154997B2 (ru) | ||
| Salomon et al. | Assay of Phosphatase Activity by Direct Spectrophotometric Determination of Phenolate Ion. | |
| Hynie et al. | Determination of phosphodiesterase I activity in human blood serum | |
| RU2122740C1 (ru) | Способ определения мочевины в биологических жидкостях и набор реактивов для его осуществления | |
| US4206280A (en) | Determination of acid phosphatase | |
| US3527331A (en) | Reagent for assaying aldolase | |
| JP2681635B2 (ja) | 分析感度及び分析精度を向上させる方法 | |
| US3546074A (en) | Reagent for assaying glutamate oxaloacetate transaminase |