RU2122740C1 - Способ определения мочевины в биологических жидкостях и набор реактивов для его осуществления - Google Patents
Способ определения мочевины в биологических жидкостях и набор реактивов для его осуществления Download PDFInfo
- Publication number
- RU2122740C1 RU2122740C1 RU95121678A RU95121678A RU2122740C1 RU 2122740 C1 RU2122740 C1 RU 2122740C1 RU 95121678 A RU95121678 A RU 95121678A RU 95121678 A RU95121678 A RU 95121678A RU 2122740 C1 RU2122740 C1 RU 2122740C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- hydroxycoumarin
- urease
- sodium hypochlorite
- urea
- sodium
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Способ предназначен для определения мочевины в биологических жидкостях. В исследуемой пробе биологической жидкости осуществляют гидролиз мочевины уреазой до аммиака. Образующиеся в водном растворе ионы аммония определяют по их реакции со щелочным раствором гипохлорита натрия в присутствии акцептора аммиака и катализатора. В качестве акцептора аммиака используют 4-оксикумарин в виде водного раствора концентрацией 270-540 мг/л. Образующиеся в результате гидролиза ионы аммония могут быть определены по их реакции с реагентом, состоящим из щелочного раствора гипохлорита натрия и 4-оксикумарина, или по их реакции с реагентом, состоящим из щелочного раствора гипохлорита натрия, 4-оксикумарина и феррицианида калия в качестве дополнительного катализатора. Набор готовых форм реактивов для определения мочевины в биологических жидкостях содержит уреазу, нитропруссид натрия в качестве катализатора, щелочь, раствор гипохлорита натрия и дополнительно в качестве акцептора аммиака 4-оксикумарин в виде смеси с феррицианидом калия, являющимся дополнительным катализатором. Уреаза, нитропруссид натрия и смесь 4-оксикумарина и феррицианида калия содержатся в составе набора в таблетированном виде, а щелочь и гипохлорит натрия в виде их концентрированных растворов. Способ позволяет сократить количество стадий определения, более технологичен, удобен для практического применения. 2 с. и 2 з.п. ф-лы, 5 табл.
Description
Изобретение относится к области биохимии, а именно к биохимическим методам анализа мочевины в биологических жидкостях, и может быть использовано как в клинико-диагностических, так и в научных целях.
Так как в клинической и научной практике определение мочевины в крови, моче и других биологических жидкостях является актуальной задачей, фармацевтические и научные центры соответствующего профиля разрабатывают не только новые методы определения мочевины, но и специальные наборы готовых форм реактивов для такого определения ("диагностикумы").
Наиболее перспективными методами анализа мочевины в биологических жидкостях являются ферментативные способы, основанные на гидролизе мочевины уреазой до ионов аммония и их дальнейшем определении. Для ряда способов предлагаются и соответствующие диагностикумы.
Так, известен способ определения мочевины в биологических жидкостях, включающий ее гидролиз уреазой и дальнейшее определение образующихся ионов аммония в присутствии катализатора [1].
Определение ионов аммония основывается также на ферментативной реакции, требующей присутствия фермента глутаматдегидрогеназы и кофакторов - НАДН и АТФ, что делает способ и набор реактивов сложными достаточно дорогими. Кроме того, регистрация цветовой реакции происходит в коротковолновой области (при 340 нм), что снижает точность измерений из-за поглощения и рассеяния света при данной длине волны исследуемыми биологическими жидкостями [1].
Наиболее широко распространены уреазно-гипохлоритные методы анализа мочевины, являющиеся более простыми и технологичными по сравнению с описанными выше. Как следует из самого названия этих способов, определение ионов аммония, образующихся в результате гидролиза, основывается на их реакции в щелочных условиях с гипохлоритом натрия в присутствии акцептора аммиака и катализатора.
Для дальнейшего изложения особенностей предлагаемого в качестве изобретения способа особенно следует отметить следующее, что касается всех уреазно-гипохлоритных методов анализа: реальная последовательность добавления реагентов при проведении анализа не совпадает с описанной выше схемой способа и определяется химической совместимостью добавляемых реагентов, так, например, при проведении гидролиза в исследуемой биологической жидкости к уреазе может быть добавлен катализатор, который с ней не взаимодействует и не принимает участия в гидролизе, но необходим для второй стадии в реакции ионов аммония с гипохлоритом и т.д.
На практике в качестве акцептора аммиака используют фенол, а катализатором всегда является нитропруссид натрия (иногда вместе с феррицианидом калия). Способ включает в себя варианты добавления реагентов, описанные в Схеме 1.
Схема 1.
1. Разбавляют биологическую жидкость (например, сыворотку крови - в 10 раз, мочу - в 100 раз).
2. К разбавленной биологической жидкости, содержащей мочевину, добавляют Реагент 1:
а) уреазу или
б) уреазу с катализатором (нитропруссидом натрия).
а) уреазу или
б) уреазу с катализатором (нитропруссидом натрия).
3. К реакционной среде добавляют Реагент 2:
а) раствор фенола (1б) или
б) раствор фенола с нитропруссидом натрия (1а).
а) раствор фенола (1б) или
б) раствор фенола с нитропруссидом натрия (1а).
4. После непродолжительной инкубации туда же приливают Реагент 3 - щелочной раствор гипохлорита натрия или щелочной раствор гипохлорита натрия с феррицианидом калия.
В результате химической реакции образуются окрашенные продукты. Оптическая плотность реакционной среды, измеряемая при 500-560 нм, пропорциональна концентрации мочевины, содержащейся в исследуемой пробе.
В настоящее время существует достаточно много наборов готовых форм реактивов, разработанных различными фирмами, которые используются для осуществления данного способа (например, набор, выпускаемый фирмой RANDOX (Ирландия), описанный в [2]). Как правило, все эти наборы включают стандартный набор реагентов: уреазу, нитропруссид натрия, фенол, щелочной раствор гипохлорита натрия, которые используются в стандартных концентрациях, близких к тем, что описаны в [1], и находятся в виде растворов в отдельных флаконах. В большинство наборов входит также флакон с калибратором - раствором мочевины с известной концентрацией.
Существует также другой способ определения мочевины в биологических жидкостях, принятый нами за прототип, включающий ее гидролиз уреазой и определение образующихся ионов аммония в реакции с гипохлоритом натрия в щелочной среде в присутствии акцептора аммиака и катализатора, где в качестве акцептора аммиака используется соединение, являющееся производным фенола - салициловая кислота. Определение мочевины этим способом производится, как описано в Схеме 1, исключая п. 1 для сыворотки крови. Набор реактивов для осуществления этого способа выпускается фирмой "Синтэко" (Россия) [3] принят авторами за прототип. Набор включает уреазу, нитропруссид натрия, щелочь, гипохлорит натрия, причем указанные реагенты находятся в виде растворов в тех же стандартных концентрациях, что и в предыдущем наборе. Салицилат натрия используется в концентрациях, что и в предыдущем наборе. Салицилат натрия используется в концентрации около 20 г на литр рабочего реагента. В состав набора также входит и калибратор.
Единственным существенным отличием и преимуществом этого способа и набора, его осуществляющего, является использование в них в качестве акцептора аммиака производного фенола - салициловой кислоты (в форме салицилата натрия), которая в отличие от фенола не является токсичным соединением, менее летуча и гигроскопична, что значительно облегчает приготовление реактивов как непосредственно в лабораторных условиях, так и при промышленном производстве наборов реактивов. Надо также отметить, что этот способ не требует разбавления биологических жидкостей (кроме мочи). Общим недостатком этих технических решений является то, что используемые в них акцепторы аммиака (как фенол, так и салициловая кислота), во-первых, легко окисляются кислородом воздуха и другими окислителями, в том числе, используемыми в описанных способах, во-вторых, оказывают дезактивирующее действие на уреазу и, в-третьих, имеют сравнительно низкое сродство в реакции с аммиаком и гипохлоритом натрия. Как следствие этого, наблюдается недостаточная технологичность способа и набора. Так, первый из указанных недостатков не позволяет производить таблетирование акцептора аммиака и объединять его с щелочным раствором гипохлорита натрия, второй приводит к несовместимости акцептора аммиака с уреазой, третий - к необходимости использования акцептора в высоких концентрациях. Все недостатки вместе создают технологические трудности при производстве готовых форм реактивов, а многоступенчатость добавления реагентов усложняет анализ и снижает его точность путем увеличения систематической ошибки.
Предлагаемый способ и набор реактивов направлен на устранение указанных недостатков и, таким образом, позволяет сделать способ и набор более технологичными и удобными для практического применения.
В связи с этим предлагается способ определения мочевины в биологических жидкостях, включающий ее гидролиз уреазой и последующее определение образующихся ионов аммония в реакции с гипохлоритом натрия в щелочной среде в присутствии акцептора аммиака и катализатора, отличительной особенностью которого является то, что в качестве акцептора аммиака используется 4-оксикумарин. Следует подчеркнуть, что во всех известных уреазно-гипохлоритных способах мочевины используется либо фенол, либо его производные. Предлагаемый нами акцептор аммиака не относится к фенольным соединениям.
Разработка нового способа анализа, в том числе предпочтительного варианта осуществления способа и создание на его основе набора готовых форм реактивов, стала возможной в результате обнаружения авторами нового свойства 4-оксикумарина - его высокого сродства к аммиаку в реакции с гипохлоритом натрия. Обычно это соединение используется в качестве антикоагулянта и для измерения Δ pH в клетках из-за его способности проникать через клеточную мембрану.
Даже использование предлагаемого акцептора по описанному выше многостадийному варианту (Схема 1) дает свою выгоду за счет уменьшения стоимости анализа в 1,2-1,5 раза, так как количество используемого акцептора уменьшается с 1,7 г для салициловой кислоты до 30-60 мг для 4-оксикумарина при проведении 200 анализов, а также расширяет арсенал средств того же назначения. Однако высокая стабильность 4 оксикумарина по отношению к окислителям (в данном случае - к гипохлориту натрия и феррицианиду калия в щелочной среде) позволили упростить способ - сделать его не трех-, а двухстадийным, так как определение ионов аммония становится возможным с помощью реагента, объединяющего в себе щелочной раствор гипохлорита натрия, 4-оксикумарин и феррицианид калия в качестве дополнительного катализатора. В данном случае Схема 1 преобразуется в Схему 2.
Схема 2.
1. К неразбавленной биологической жидкости (мочу разбавляют в 10 раз) добавляют Реагент 1:
а) раствор уреазы с нитропруссидом натрия;
б) раствор уреазы с нитропруссидом натрия и 4-оксикумарином.
а) раствор уреазы с нитропруссидом натрия;
б) раствор уреазы с нитропруссидом натрия и 4-оксикумарином.
2. К реакционной среде добавляют Реагент 2:
а) щелочной раствор гипохлорита натрия (1б);
б) щелочной раствор гипохлорита натрия и 4-оксикумарина (1а).
а) щелочной раствор гипохлорита натрия (1б);
б) щелочной раствор гипохлорита натрия и 4-оксикумарина (1а).
Феррицианид калия был введен в реагент 2 с целью улучшения характеристик способа - интенсивности и стабильности окраски и увеличения диапазона определяемых концентрации мочевины.
Для наиболее технологичного варианта осуществления способа, когда используются два катализатора - нитропруссид натрия и феррицианид калия - был разработан набор готовых форм реактивов, включающий уреазу, нитропруссид натрия, акцептор аммиака, щелочь, гипохлорит натрия, феррицианид калия, отличием которого является то, что в качестве акцептора аммиака он содержит 4-оксикумарин, причем уреаза, нитропруссид натрия и смесь 4-оксикумарина с феррицианидом калия находятся в виде таблеток, а щелочь и гипохлорит натрия - в виде концентрированных растворов. В состав набора также входит калибратор - раствор мочевины с концентрацией 10 ммоль/л. Уреаза, нитропруссид натрия, щелочь и гипохлорит натрия находятся в концентрациях, близких к тем, что используются в вышеописанных наборах реактивов, а 4 оксикумарин - в концентрации на три порядка меньше, чем стандартная концентрация акцептора аммиака.
Для иллюстрации доказательства практической применимости данного набора ниже приведены следующие примеры: Пример 1 показывает осуществление способа по Схеме 1; Пример 2 - по Схеме 2 (1б); Пример 3 посвящен определению по предпочтительному варианту осуществления способа по Схеме 2 (1а); Примеры 4 и 5 - определению по предпочтительному варианту с использованием набора готовых форм реактивов.
Пример 1.
1. Приготовление Реагента 1. В ЭДТА-буфере (0,04 М, pH 6,4 - 7,4) растворяют уреазу (1600 ед./л), нитропруссид натрия (600 мг/л).
2. Приготовление Реагента 2. В дистиллированной воде растворяют 4-оксикумарин (540 мг/л).
3. Приготовление реагента 3. К 150 частям раствора NaOH (2 г/л) приливают 1 часть раствора гипохлорита натрия (16 г активного хлора на литр дистиллированной воды).
Ход определения.
Реагент 1 разливают в пробирке по 250 мкл, затем вносят по 20 мкл исследуемой сыворотки крови, встряхивают и инкубируют 15 минут при температуре 37oC. Параллельно инкубируют холостую пробу (250 мкл Реагента 1 и 20 мкл дистиллированной воды) и пробу, содержащую 250 мкл Реагента 1 и 20 мкл калибратора (мочевина, 10 ммоль/л). После окончания инкубации во все пробирки добавляют по 250 мкл Реагента 2, встряхивают и инкубируют 1 минуту при комнатной температуре. Затем во все пробирки вносят по 1,5 мл Реагента 3, встряхивают и инкубируют еще 15 минут при 37oC. Окрашенные пробы фотометрируют при 620-780 нм. Концентрацию мочевины в исследуемых пробах рассчитывают по формуле (1):
C=(Eо/Eк) 10 ммоль/л,
где
Eо и Eк - оптические плотности исследуемых проб и проб с калибратором соответственно, 10 ммоль/л - концентрация мочевины в калибраторе. Результаты для сыворотки с разным содержанием мочевины представлены в табл. 1.
C=(Eо/Eк) 10 ммоль/л,
где
Eо и Eк - оптические плотности исследуемых проб и проб с калибратором соответственно, 10 ммоль/л - концентрация мочевины в калибраторе. Результаты для сыворотки с разным содержанием мочевины представлены в табл. 1.
Пример 2.
1. Приготовление Реагента 1. В ЭДТА-буфере (0,02 М, pH 6,4 - 7,4) растворяют уреазу (800 ед./л), нитропруссид натрия (300 мг/л) и 4-оксикумарин (270 мг/л).
2. Приготовление Реагента 2. К 150 частям раствора NaOH (2 г/л) приливают 1 часть раствора гипохлорита натрия (16 г активного хлора на литр дистиллированной воды).
Ход определения.
Реагент 1 разливают в пробирке по 0,5 мкл, затем вносят по 20 мкл исследуемой сыворотки крови, встряхивают и инкубируют 15 минут при температуре 37oC. Параллельно инкубируют холостую пробу (0,5 мл Реагента 1 и 20 мкл дистиллированной воды) и пробу, содержащую 0,5 Реагента 1 и 20 мкл калибратора (мочевина, 10 ммоль/л). После окончания инкубации во все пробирки добавляют по 1,5 мл Реагента 2, встряхивают и инкубируют еще 15 минут при 37oC. Далее проводят определение, как описано в Примере 1. Результаты для сывороток с разным содержанием мочевины представлены в табл. 2.
Пример 3.
1. Приготовление Реагента 1. В ЭДТА-буфере (0,02 М, pH 6,4 - 7,4) растворяют уреазу (800 ед./л), нитропруссид натрия (300 мг/л).
2. Приготовление Реагента 2. Растворяют в реагенте 3, приготовленном, как описано в Примере 1, феррицианид калия (300 мг/л) и 4-оксикумарин (400 мг/л). Далее проводят определение, как описано в Примере 2. Результаты представлены в табл. 3.
Пример 4.
Готовят следующие смеси сухих реактивов. 1. Хлористый калий - 400 г, лиофилизированный препарат уреазы с активностью фермента 30,0 ед./мг - 75 мг. 2. Цитратно-фосфатный-натриевый буфер, высушенный при температуре 70oC, pH 6,7 - 50 г, хлористый калий - 750 г, нитропрусид натрия - 22 г. 3. Хлористый калий - 791 г, 4-оксикумарин - 5 г, феррицианид калия - 4 г. Смеси реактивов перемешивают и перетирают в фарфоровых ступках до гомогенного состояния, после этого таблетируют для получения таблеток весом 400 мг. Готовят раствор гипохлорита натрия, содержащий 16 г/л активного хлора и концентрированный раствор едкого натра 20 г/л. Для выполнения определения готовят рабочие реагенты следующим образом. Реагент 1. В 100 мл дистиллированной воды растворяют 4 таблетки с уреазой и 8 таблеток с нитропруссидом натрия. Реагент 2. Концентрированный раствор едкого натра разводят в 10 раз дистиллированной водой, в 300 мл разбавленного раствора растворяют 8 таблеток, содержащих 4-оксикумарин и феррицианид калия, приливают туда же 2 мл раствора гипохлорита натрия. Далее проводят определение в исследуемых пробах сыворотки крови, как описано в Примере 1. Результаты представлены в табл. 4.
Пример 5.
Готовят рабочие реагенты, как описано в Примере 3. Пробы мочи перед анализом разводят в 10 раз. Проводят определение, как описано в Примере 2, результат умножают на 10. Результаты представлены в табл. 5.
Список литературы.
1. Балаховский И.С. В кн. Лабораторные методы исследования. Справочник. (Под ред. Мельшикова В.В.), М.: Медицина, 1987.
2. Инструкция по применению наборов для определения мочевины Urease-Berthelot Method Colorimetric (RANDOX).
3. Инструкция по применению набора реактивов для определения мочевины уреазным методом с салицилатно-гипохлоритным реактивом в сыворотке или плазме крови (Диаком М.). Рекомендована к утверждению экспертной комиссией по лабораторным реактивам Комитета по новой Медицинской технике Минздрава РФ. Протокол N 5 от 27.09.93.
Claims (4)
1. Способ определения мочевины в биологических жидкостях, включающий ее гидролиз уреазой и определение образующихся ионов аммония по их реакции со щелочным раствором гипохлорита натрия в присутствии акцептора аммиака и катализатора, отличающийся тем, что в качестве акцептора аммиака используют 4-оксикумарин в концентрации 270 - 540 мг/л.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что образующиеся в результате гидролиза ионы аммония определяют по их реакции с реагентом, состоящим из щелочного раствора гипохлорита натрия и 4-оксикумарина.
3. Способ по п.1 или 2, отличающийся тем, что образующиеся в результате гидролиза ионы аммония определяют по их реакции с реагентом, состоящим из щелочного раствора гипохлорита натрия, 4-оксикумарина и феррицианида калия в качестве дополнительного катализатора.
4. Набор готовых форм реактивов для определения мочевины в биологических жидкостях, содержащий уреазу, нитропруссид натрия в качестве катализатора, щелочь, раствор гипохлорита натрия, отличающийся тем, что набор дополнительно содержит в качестве акцептора аммиака 4-оксикумарин в виде смеси с феррицианидом калия, являющимся дополнительным катализатором, при этом указанный набор содержит уреазу, нитропруссид натрия и смесь 4-оксикумарина и феррицианида калия в таблетированном виде, а щелочь и гипохлорит натрия в виде их концентрированных растворов.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU95121678A RU2122740C1 (ru) | 1995-12-21 | 1995-12-21 | Способ определения мочевины в биологических жидкостях и набор реактивов для его осуществления |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU95121678A RU2122740C1 (ru) | 1995-12-21 | 1995-12-21 | Способ определения мочевины в биологических жидкостях и набор реактивов для его осуществления |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2122740C1 true RU2122740C1 (ru) | 1998-11-27 |
RU95121678A RU95121678A (ru) | 1998-12-27 |
Family
ID=20174987
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU95121678A RU2122740C1 (ru) | 1995-12-21 | 1995-12-21 | Способ определения мочевины в биологических жидкостях и набор реактивов для его осуществления |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2122740C1 (ru) |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2563834C2 (ru) * | 2010-08-20 | 2015-09-20 | Цитонет Гмбх Унд Ко. Кг | Способ выделения мочевины с удалением нежелательного со2 |
RU2597777C1 (ru) * | 2015-07-02 | 2016-09-20 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Тверской государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО Тверской ГМУ Минздрава России) | Способ определения уреазной активности ротовой жидкости для скрининга обсемененности полости рта уреазопозитивной микробиотой |
CN111830023A (zh) * | 2019-08-19 | 2020-10-27 | 杭州爱光医疗器械有限公司 | 巯基化合物检测试剂、检测试纸、试剂盒、试纸盒及其制备方法 |
WO2021161307A1 (en) * | 2020-02-13 | 2021-08-19 | Harlev Ilana | Methods for removing biuret from a liquid |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2710268C2 (ru) * | 2018-04-27 | 2019-12-25 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт теоретической и экспериментальной биофизики РАН (ИТЭБ РАН) | Диагностическая пластина для определения концентраций мочевины |
-
1995
- 1995-12-21 RU RU95121678A patent/RU2122740C1/ru active
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Инструкция по применению набора реактивов для определения мочевины уреазным методом с салицилатно-гипохлоритным реактивом в сыворотке или плазме крови ("Диаком М"). Рекомендована к утверждению экспертной комиссией по лабораторным реактивам Комитета по новой Медицинской технике Минздрава РФ. Протокол N 5 от 27.09.93. * |
Cited By (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2563834C2 (ru) * | 2010-08-20 | 2015-09-20 | Цитонет Гмбх Унд Ко. Кг | Способ выделения мочевины с удалением нежелательного со2 |
US10266872B2 (en) | 2010-08-20 | 2019-04-23 | Cytonet Gmbh & Co. Kg | Method for isolating urea while removing objectionable CO2 |
RU2597777C1 (ru) * | 2015-07-02 | 2016-09-20 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Тверской государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО Тверской ГМУ Минздрава России) | Способ определения уреазной активности ротовой жидкости для скрининга обсемененности полости рта уреазопозитивной микробиотой |
CN111830023A (zh) * | 2019-08-19 | 2020-10-27 | 杭州爱光医疗器械有限公司 | 巯基化合物检测试剂、检测试纸、试剂盒、试纸盒及其制备方法 |
WO2021161307A1 (en) * | 2020-02-13 | 2021-08-19 | Harlev Ilana | Methods for removing biuret from a liquid |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Barham et al. | An improved colour reagent for the determination of blood glucose by the oxidase system | |
Schloss | Colorimetric determination of glucosamine | |
JPH01503596A (ja) | 体液中のカリウムイオンを測定する方法及びそのための組成物 | |
SU1554765A3 (ru) | Реактив дл определени глицерина фотометрическим методом | |
Berti et al. | Enzymatic colorimetric method for the determination of inorganic phosphorus in serum and urine | |
JPWO2010010881A1 (ja) | 溶血させた全血を用いる血中成分の測定方法及びそのキット | |
US4001089A (en) | Method for determination of triglycerides and glycerol | |
Pinto et al. | Aldolase: I. colorimetric determination | |
JPS61247969A (ja) | カルシウムの分析方法およびその分析用試薬 | |
US3862012A (en) | Quantitative determination of uric acid | |
RU2122740C1 (ru) | Способ определения мочевины в биологических жидкостях и набор реактивов для его осуществления | |
US3938954A (en) | Determination of calcium | |
CA1089338A (en) | Creatinine assay and reagent system | |
US3888739A (en) | Reagents and methods for determining amylase concentrations | |
JPH0612999B2 (ja) | 塩素イオン定量用試薬 | |
Fossati | Phosphate determination by enzymatic colorimetric assay | |
Asp | Improved method for the assay of phenylglycosidase activity with a 4-aminoantipyrine reagent | |
US4142938A (en) | Determination of triglycerides and glycerol | |
US3542649A (en) | Color developing composition consisting of an enzyme,a salicylate and a hypochlorite donor | |
Kuan et al. | An alternative method for the determination of uric acid in serum | |
Perez-Bendito et al. | Nonenzymatic stopped-flow fluorimetric method for direct determination of uric acid in serum and urine. | |
US6818415B2 (en) | Sodium activation of amylase | |
Helman | Emergency screening of urine, plasma, or gastric contents for barbiturates | |
Li et al. | One-step enzyme immunochromatographic assay for theophylline | |
SU1505444A3 (ru) | Способ определени глюкозы в биологических жидкост х |