SU1748643A3 - Способ получени производных феноксиуксусной кислоты - Google Patents

Abstract

Изобретение относитс  к замещенным амидам арилсульфокислот, конкретно к способу получени  производных феноксиуксус- ной кислоты общей формулы RsS02NH - C(Ri)(R3) C(R2)(P/i)-A-OCH2COOR6 или их фармацевтически приемлемых солей, где один или два Ru R2, Ra и R/j - низший алкил, а другие - водород; А - фенилен, который может иметь один или два заместител , выбранных из групп; галоген, низший алкил; RS - фенил, который может иметь один или два заместител , выбранных из группы: галоген , нитро, тригалогенметил, низший алкил, низший алкокси; Re - водород, низший алкил , которые про вл ют агрегационную активность . Синтез ведут взаимодействием соответствующего замещенного амина с ре- акционноспособным остатком арилсульфо- нила. Целевые продукты более чем в три раза эффективнее по агрегационной активности обладаюг максимальной толерантной дозой 1000 мг/кг. 13 табл. v Ё

Description

Изобретение относитс  к замещенным амидам арилсульфокислот, а именно к способу получени  производных феноксиуксус- ной кислоты общей формулы

R 2 R5S02NH-C- C- -OCH COOfy

Яз ty -,

или их фармацевтически-приемлемых солей, где один или два Ri, Ra, Яз, Ri - низший алкил, а другие - водород;

кольцо А - фенилен, котора  может иметь один или два заместител , выбранных из группы: галоген, низший алкил;

RS - фенил, который может иметь один или два заместител , выбранных из группы: галоген, нитро тригалогенметил, низший алкил, низший алкокси;

Re - водород, низший алкил.

Соединени  формулы I про вл ют агрегационную активность и могут найти применение в медицине.

Целью изобретени   вл етс  разработка способа получени  новых соединений, про вл ющих бепее пысокую агрегационную активность и обладающих низкой токсичностью .

П р и м е р 1. (1) Смесь 4,64 г гидробромида (±Н-(2-аг/ин-1-м(ггилэтил)фенола, 100

2

00 Os JV GO

СО

мл этилацетата, 6,92 г карбоната кали , 40 мл воды и 3,75 г хлорида бензилоксикарбо- нила перемешивают при комнатной температуре в течение ночи, после чего отдел ют слой этилацетата, промывают, высушивают и выпаривают при пониженном давлении дл  удалени  растворител . Получают 4,82 г (±)-4-(2-бензилоксикарбониламин-1-метил- этил)фенола в виде бледно-желтого масла. Выход 85%.

Масса (м/э): 285 (М44)

ИК v чистый макс, см 1: 3350, 1690.

(2)Смесь 4,72 г продукта, полученного выше, 2,53 г метилбромацетата, 50 мл ацетона и 3,43 г карбоната кали  перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. По окончании реакции смесь выпаривают дл  удалени  ацетона и к остатку добавл ют воду, Водную смесь экстрагируют с хлороформом, а затем экстракт высушивают и выпаривают при пониженном давлении и получают 5,68 г метил (±)-4-(2- бензилоксикарбонил-амин-1-метил этил)фе- ноксиацетата в виде масла.

Выход 96% Масса (м/э): 357 (М4) ИК v чистый макс, 3200-3500, 1755, 1712.

(3)5,36 г полученного вещества раствор ют в 60 мл метанола и добавл ют 2 мл концентрированной хлористоводородной кислоты . Смесь подвергают каталитической гидрогенизации в присутствии 0,6 г 10%-ного Pd/C при комнатной температуре при пониженном давлении, По окончании реакции ката- лизатор отфильтровывают и фильтрат выпаривают при пониженном давлении. Остаток перекристаллизовывают из смеси изопро- пилового спирта и эфира и получают 3,06 г гидрохлорида метил (±)-4(2-амин-1-метилэ- тил) феноксиацетата в виде бесцветных кристаллов .

Выход 79%,

Т.пл.99-104°С.

Масса (м/э): 223 (М4)

ИК v макс (см 1): 2400-2800, 1732,

(4)Смесь 2,0 г полученного выше продукта , 60 мл этилацетата, 2,06 г карбоната кали , 20 мл воды и 2,05 г 4-нитрофенил- сульфонилхлорида перемешивают при комнатной .температуре 2,5 ч. По окончании реакции отдел ют слой этилацетата, высушивают и выпаривают при пониженном давлении. Остаток растирают с изопро- пиловым эфиром и получают 2,95 г метил (±)(4-нитрофенил) сульфониламин-1- метилэтил феноксиацетата в виде бледно- желтого твердого вещества. Выход 94%, Т.пл. 128,5-130,5°С. Раствор ют в 20 мл метанола и добавл ют 15 мл 11 1-водного раствора гидроокиси натри , Смесь оставл ют на 1 ч. Затем смесь выпаривают дл  удалени  метанола, довод т рН до 1 10%-ной хлористоводородной кислотой и экстрагируют с хлороформом. Экстракт хлороформа высушивают и выпаривают дл  удалени  растворител  получают2,82г(±)(4-нит- рофенил) сульфониламин-1-метилэтил фё- ноксиуксусной кислоты в виде в зкого масла.

Выход 100%. Масса (м/э): 394 (М4), HKv CHCIa макс, (см 1): 1730. Натриева  соль: призма Т.пл. 226- 228,5°С (перекристаллизаци  из воды и изо- пропилового спирта).

Пример 2-4 (получение исходных соединений общей формулы II). ч (1) Соответствующие исходные соединени  реагируют как указано в примере 1 - (1), (2) и (3) и получают соединени , указанные в табл. 1.

(2) Соответствующие исходные соедине-,

ни  реагируют, как указано в примере 1 - (4) и

,(5), получают соединени , указанные в табл. 2,

| Примеры 5-48. Соответствующие

i исходные соединени  реагируют, как указано в примере 1, и получают соединени , .указанные в табл. 2.. -

П ри мер49. Смесь 1,56 г гидрохлорида метил (±)-4-(2-аминопропил)-феноксиацета- та, 48 мл этилацетата, 2,07 г карбоната кали , 16 мл воды и 1,6 г хлорида 4-нитрофе- нилсульфонила перемешивают при комнатной температуре в течение ночи Отдел ют слой этилацетата, высушивают и выпарива- ют при пониженном давлении дл  удалени  растворител . Остаток перекристаллиэовы- вают из смеси этилацетата и н-гексана и получают 2,14 г метил (±)(4-нитрофе- нил)сульфониламинопропил(Ьеноксиацета та в виде бледно-желтой призмы.

Выход 87%.

Т.пл. 127,5-128°С,

Масса (м/э): 408 (М4)

ИК v нуйол макс, 3320, 3280, 1740.

ЯМР (CDCb, 5): 1,21 (ЗН, д, J 6,4 Гц);

2,5-2,7 (2Н, м); 3,3-3,7 (1Н, м), 3,81 (ЗН, с);

4,58 (2Н, с); 6,67 (2Н, д, J 8,3 Гц); 6,91 (2Н. д,

J 8,3 Гц); 7,78 (2Н, д, J 8,7 Гц): 8,22 (2Н, д,

J 8,7 Гц).

Примеры 50-57. Соответствующие исходные соединени  реагируют, как описано в примере 49, и получают соединени , указанные в табл. 3.

П р и м е р 58. (1) 23,1 г (±)-4-(2-ацетила- мин-1-метилэтил)фенола раствор ют в 400 мл ацетона, добавл ют 19,9 г метилброма- цетата и 18 г карбоната кали  и смесь перемешивают в течение ночи. Добавл ют еще 7,96 г метилбромацетата и 7,2 г карбоната кали  и смесь перемещивают 3 дн . По окончании реакции смесь выпаривают при пониженном давлении и к остатку добавл ют воду. Затем остаток экстрагируют с помощью этилацетата, промывают насыщенным водным раствором хлорида «атри , высушивают, конденсируют до сухости, пол- учают31,б гметил (±)-4-(2-ацетиламин-1-ме- тилэтил)феноксиацетата в виде желтого масла.

Масса (м/э): 265 (М4).

ИК Унуйол макс, см 1: 3310, 1760, 1650.

(2)Полученное выше вещество раствор ют в 200 мл 6М-хлористоводородной кислоты и раствор нагревают с обратным холодильником 7,5 ч, По окончании реакции отфильтровывают растворитель и остаток кристаллизуют с тетрагидрофураном и получают 19 г гидрохлорида (±)-4-(2-амин-1-ме- тилэтил) феноксиуксусной кислоты в виде бесцветных твердых веществ.

Т.пл. 220,5-223°С. Масса (м/э): 209 (М 179. ИК vнуйол макс, см 1: 1730,

(3)Смесь 2,95 г полученного вещества, 3,65 г карбоната кали , 30 мл воды и 2,45 г хлорида 4-фторфенилсульфонила перемешивают при 80°С 2 ч. После охлаждени  рН довод т до 1 бМ-хлористоводородной кислотой и экстрагируют с помощью этилацетата . Экстракт конденсируют до сухости и полученную (±)(4-фторфенил)сульфо- ниламин-1-метилэтил феноксиуксусную кислоту в качестве остатка обрабатывают Ш-водным раствором гидроокиси натри  дл  преобразовани  в соль натри . Затем указанную соль натри  очищают колоночной хроматографией с НР-20 и получают 2,82 г натрий (±)(4-фторфенил)сульфо- нил&мин-1-метилэтил феноксиацетата в виде порошка.

Выход 60%.

Т.пл. 213-214,5°С (бесцветна  призма, перекристаллизированна  из смеси воды и изопропилового спирта),

(4)1,95 г полученного вещества раствор ют в 30 мл воды и рН довод т до 1 с помощью 10%-ной хлористоводородной кислоты. Смесь экстрагируют хлороформом . Экстракт хлороформа высушивают и выпаривают дл  удалени  растворител . Полученный остаток перекристаллизовыва- ют из смеси этилацетата и н-гексана и получают 1,65 г (±)(4-фторфенил)сульфо- ниламин-1-метилэтил феноксиуксусной кислоть в виде бесцветной призмы.

Выход 111,5-114°С.

5Н1-ЯМР(СОС(з, 5):1.19(ЗН,д,,2Гц),

2,6-3,3 (ЗН, м); 4,63 (2Н, с); 6,6-7,3 (7Н, м) 7,6-7,9 (2Н, м).

ИК v нуйол макс, см 1: 3300, 1740. Масса (м/э):367 (М4).

10 Примеры 59-61, Соответствующие исходные соединени  реагируют, как указано в примере 58, и получают соединени , указанные в табл. 4.

Пример 62. Смесь 2,95 г гидрохлорида 15 (±)-4-(2-амин-1-метилэтил)феноксиуксусной кислоты, 3,82 г карбоната натри , 30 мл воды и 3,1 г хлорида 2,5-дихлорфенилсуль- фонила перемешивают при 80°С 3 ч. Реагирующую смесь обрабатывают тем же 0 способом, что и в примере 43, после чего получают (±)(2,5-дихлорфенил)сульфо- ниламин-1-метилэтил феноксиуксусную кислоту.

Т.пл, 111,5-116,5°С (разлож.) (перекри- 5 сталлизаци  из смеси этилацетата и н-гексана ).

ИК V нуйол макс, 3320, 1740, 1710.

Н1-ЯМР(СОС1з,(5):1,20(ЗН,д б,4Гц);

2,7-3,3 (ЗН, м); 4,65 (2Н, с); 4,95 (1Н. м); 6,82

0 (2Н, д, J 9 Гц); 7,04 (2Н, д, J 9 Гц); 7,3-7,5

(2Н, м); 7,9-8,1 (1Н м).

Примеры 63-65. Соответствующие исходные соединени  подвергают реакции, описанной в примере 58 - (1) и (2). Пол- 5 ученные свободные карбоновые кислоты реагируют с метанолом дл  получени  соответственных метиловых эфиров, которые затем реагируют, как описано в примере 1 - (3). Получают соединени , указанные в табл. 5. 0 Приготовление исходных соединений. Приготовление 1

(1)Раствор диметоксибутана 5,25 г трет- бутоксида кали  добавл ют по капл м к раствору диметоксиэтана, содержащего 3,23 г

5 2-фтор-4-метоксиацетофенона и 4,57 г пара- толуолсульфонилметиизоцианида. Это добавление по капл м осуществл ют при температуре ниже 10°С. По окончании реакции смесь добавл ют к лед ной воде и экс0 трагируют эфиром. Экстракт промывают, высушивают и конденсируют до сухости. Остаток очищают силикэгелевой колоночной хроматографией, что дает 3,83 г 2-(2-фтор-4- метоксифенил)-2-метилэтаннитрила в виде

5 бесцветного масла. Выход 83%. ИК v чистый макс 2250.

(2)15 мл скелетного никелевого катализатора гидрировани  добавл ют к раствору

этанола из 5,05 г вышеполучеш-гого раствора и при температуре 40-50°С по капл м добавл ют 30 г моногидрата гидразина, после чего отфильтровывают катализатор и выпаривают фильтрат. Остаток добавл ют к 15%-уксусной и хлористоводородной кислот и смесь выпаривают дл  удалени  растворител . Остаток перекристаллизовы- вают из смеси метанола и изопропилового эфира, получают 4,23 г гидрохлорида 1- амин-2- 2-фтор-4-метоксифенилЗпропана в виде бесцветных кристаллов.

Выход 75%.

Т.пл. 147-149°С.

Приготовление 2. Соответствующие йс- ходные соединени  реагируют, как описано в приготовлении 1, и получают 1-амкн-2- 3- фтор-4-метоксифенил -пропан.

Выход 99%.

ИК v чистый макс, см : 3270.

Приготовление 3,

(1)504 мг 60% гидрида натри  добавл ют к тетрагидрофурану, а затем добавл ют раствор 2,47 г триэтилфосфоноацетата при атмосфере аргона. Смесь перемешивают при комнатной температуре. Затем добавл ют раствор 1,85 г З-хлор-4-метокси-ацето- фенона в тетрагидрофуране и смесь перемешивают при комнатной температуре .

По окончании реакции к смеси добавл ют воду и отдел ют органический слой. Водный слой экстрагируют с помощью этилацетата. Соедин ют органические растворы и выпаривают дл  удалени  растворител . Остаток очищают силикагелевой колоночной хроматографией и получают 1.47 г 3-(3-хлор-4-метоксифенил)изокрото- ната и 0,18 г 3-(3-хлор-4-метоксифенил)кро- тоната.

3-(3-хлор-4-метрксифенил)изокротона- та

Выход 57,7%.

Т.пл. 67-68°С.

ИК V макс, см- 1: 1700.

3-(3-хлор-4-метоксифенил)кротонат

Выход 7,1%.

Масло

MKV чистый макс, 1710.

(2)0,3 г 10% Pd/C добавл ют к раствору уксусной кислоты, содержащему 1,41 г 3-(3- хлор-4-мето ксифенил)изокротоната и смесь подвергают каталитической гидрогенизации при комнатной температуре при атмосферном давлении. После завершени  реакции отфильтровывают катализатор, а фильтрат подвергают конденсации, К остатку добавл ют метанол и водный раствор гидроокиси натри  и смесь перемешивают.

0

5

5

0 5

0

5

0

5

0

Затем отгон ют растворитель и остаток делают кислотным хлористоводородной кислотой . Водную смесь экстрагируют с помощью этилацетата. Экстракт промывают водой, высушивают и конденсируют до сухости. Остаток чист т колоночной хроматографией на силикагеле, перекристаллизо- вывают из н-гексана, получают 807 мг 3-(3-хлор-4-метоксифенил)масл ной кислоты в виде бесцветного масла.

Выход 64%.

Т.пл. 73,5-75°С.

(3)Раствор 12,23 г полученного выше вещества, 6,49 г триэтиламина и 17,66 г ди- фенилфосфорилазида в толуоле перемешивают при комнатной температуре, а затем нагревают с обратным холодильником. Добавл ют 11,58 г бензилового спирта и смесь снова нагревают с обратным холодильником . К реагирующей смеси добавл ют эти- лацетат и смесь промывают, высушивают и конденсируют до сухости. Получают 17,85 г 1-бензилоксикарбониламин-2-(3-хлор-4-ме- токсифенил)пропана в виде масла.

Выход 100%,

(4)33 мл водного раствора 25%-ной гид- робромидуксусной кислоты добавл ют по капл м к раствору уксусной кислоты, содержащей 16,42 г полученного выше вещества, После перемешивани  к смеси добавл ют эфир, фильтруют выделившиес  кристаллы. Получают 10,33 г гидробромида 1-амин-2- (3-хлор-4-метоксифенил)пропана.

Выход 78%.

Т.пл. 163,5-165°С

Приготовление 4.

4,19 г гидрохлорида 1-амин-2-(2-фтор-4- метоксифенил)пропана нейтрализуют смесью хлороформа и водного раствора бикарбоната натри . Отдел ют слой хлороформа и конденсируют до сухости. К остатку добавл ют бромистоводородную кислоту и смесь нагревают с обратным холодильником . Затем реагирующую смесь выпаривают и остаток перекристаллизовывают из смеси изопропилового спирта и изопропилового эфира. Получают 4,53 г гидробромида 3-фтор-4-(2-амин-1 -метилэтил)фенола.

Выход 95%.

Т.пл. 182-183,5°С.

Приготовление 5

Гидрохлорид 1-амин-2-(3-фтор-4-меток- си-фенйл)пропана обрабатывают, как описано в приготовлении 4, и получают бромгидрат2-фтор-4-(2-1-метилэтил)фенола в виде бесцветных игл.

Выход 85%.

I/IK v чистый макс, 3190, 1590.

Приготовление 6.

(1)Смесь 19,8 г(±)-1-амин-2-(4-метокси- фенил)пропана, 200 мл этилацетата, 200 мл воды и 84 г бикарбоната натри  охлаждают до 5-10°С при перемешивании и добавл ют по капл м 18,8 г хлористого ацетила в 100 мл этилацетата при той же температуре, после чего отдел ют слой этилацетата, промывают , высушивают и конденсируют до сухости при пониженном давлении, получают 24,8 г (±)-1-ацетиламин-2-(4-метоксифе- нил)пропана в виде масла.

Масса (м/э): 207 ().

ИК v чистый макс, 3290, 1650.

(2)Полученное выше вещество раствор ют в 750 мл хлорида метилена. После охлаждени  до -60°С добавл ют, перемешивают по капл м в течение 1,5 ч при той же температуре раствор хлорида метилена из 69 г трибромида бора. После перемешивани  смеси при комнатной температуре ее оп ть охлаждают от -50 до -60°С.

К смеси добавл ют воду и хлорид метилена . Затем отдел ют органический слой и промывают водным раствором бикарбоната натри  и насыщенным раствором хлорида натри . Соедин ют водные слои, нейтрализуют водным раствором бикарбоната натри  и выпаривают при пониженном давлении. Полученный масл ный остаток экстрагируют с помощью этилацетата. Экстракт высушивают и выпаривают при пониженном давлении, что дает 23,1 г (±)-4-(2-ацетиламин-1-метилэтил)фенола в виде масла.

Выход 100%. Масса (м/э): 193 (М4).

ИК V чистый макс, см 1: 3290, 3020, 1655.

Приготовлени  7-9.

Соответствующие исходные соединени  обрабатывают, как указано в приготовлении 6, и получают соединени , указанные в табл. 6.

Испытани  по биологической активности .

Эксперимент 1,

Воздействие на скопление тромбоцита, вызванного коллагеном (in vitro).

Дев ть объемов крови, вз тых у здорового человека, смешивают с одним объемом 3,13% (вес/объем) раствора цитрата тринат- ри  и смесь центрифугируют дл  получени  богатой тромбоцитом плазмы (БТП) в качестве плавающей на поверхности. Нижний слой еще раз центрифугируют и получают ненасыщенную тромбоцитом плазму (НТП) в качестве плавающей на поверхности. БТП разбавл ют НТП и число тромбоцита составл ет около 4 х 10 клеток/мм . 25 мл

раствора испытываемого соединени , содержащего эквимол рное количество би- карЗоната натри , добавл ют к 200 мл указанной разбавленной БТП. После пере- 5 мешивани  смеси в течение 2 мин при температуре 37°С добавл ют раствор коллагена (25-29 мг/мл) раствора, чтобы вызвать скопление тромбоцита. Степень скоплени  тромбоцита определ ют мето- 0 дом Борна и определ ют активность сдерживани  скоплени  тромбоцита испытываемого соединени . Активность сдерживани  скоплени  тромбоцита испытываемого соединени  выражают как Сво. 5 т.е. концентраци  соединени , требуемого дл  вызывани  50% сдерживани  скоплени  тромбоцита, вызванного коллагеном. Результаты приведены в табл. 7. Эксперимент 2.

0 Воздействие на эмболию легочной артерии , вызванную арахидоновой кислотой (in vivo).

Опытное соединение (суспендированное или растворение в водном бикарбонате

5 натри  и 0,25%-ном растворе карбоксиме- тилцеллюлозы) орально ввод т самцам мышей (возраст которых 5 недель, 10 мышей на группу), не кормленных в течение ночи. Через три часа ввод т в хвостовую вену инъек0 цию арахидоновой кислоты (125 мг/2,5 мл 1 %-ного раствора NaHCOa + 7,5 мл 0,9%-но- го водного хлорида натри  кг) дл  того, чтобы вызвать эмболию легочной артерии, и врем  (минуты) восстановлени  способно5 сти передвигатьс  у мышей (т.е. период от инъекции арахидоновой кислоты до момента , когда мыши отошли от расстройства дыхани  и стали ходить) было сравнено с временем восстановлени  контрольной

0 группы мышей, которым был введен водный 0,25%-ный раствор CMC вместо опытного соединени . Эффект торможени  каждого опытного соединени  эмболии легочной артерии , вызванной арахидоновой кислотой,

5 определ ют с учетом минимальной дозы, т.е. доза, необходима  дл  сокращени  времени восстановлени , по крайней мере на 15% по сравнению с контрольной группой. Результаты приведены в табл. 8.

0 Эксперимент 3.

Воздействие на врем  кровотечени  (in vivo).

Соединение опыта (суспендированное или растворенное в водном 0,25%-ном рас5 творе карбоксиметилцеллюлозы) орально ввод т самцам мышей (возраст которых 5 недель, 10 мышей в группе), не кормленных в течение ночи. Через три часа отрезают кончик хвоста (2 мм) псд действием эфира и хвост немедленно погружают в физиологический раствор хлористого наГри  (37°С). Врем  кровотечени  (секунды) подопытной группы сравнивают с временем кровотечени  контрольной группы мышей, которой ввод т вместо опытного соединени  водный 0,25%- ный раствор CMC. Длительность воздействи  каждого опытного соединени  на врем  кровотечени  определ ют с учетом минимально эффективной дозы, т.е. необходимой дозы, чтобы вызвать по крайней мере 50% увеличение времени кровотечени  по сравнению с контрольной группой.

А, Действие на эмболию легких, вызываемую арахидоновой кислотой (в стекл нной посуде ).

Испытуемое соединение (суспендированное или растворенное в водном бикарбонате натри  и 0,25%-ном растворе карбоксиметилцеллюлозы) ввод т через рот самцу мыши (возрастом 5 недель, по 10 мышей в группе), закрепленных на всю ночь. Трем  часами позже арахидоновую кислоту (125 мг/2,5 мл 1 %-ного раствора МаНСОз + 7,5 мл 0,9%-ного водного хлорида/1 кг) ввод т инъекцией в хвостовую вену мыши дл  возбуждени  эмболии легких. Далее врем  восстановлени  (мин) двигательной активности мыши (т.е. продолжительность промежутка времени от иньекции арахидоновой

кислоты до времени восстановлени , счита  от расстройства дыхани  до ходьбы) сравнивают с таковым у контрольной группы мышей , которым ввод т 0,25%-ный водный раствор карбоксиметилцеллюлозы взамен

раствора испытуемого соединени . Ингиби- рующее действие каждого испытуемого соединени  на эмболию легких, вызванную арахидоновой кислотой, определ ют на основании полученных данных соответственно следующих критериев.

D г Врем  восстановлени  (среднее значение) лекарственной группы. .QQ L Врем  восстановлени  (среднее значение) контрольной группы J

Если значение показател  D составл ет не менее, чем 15, испытуемое соединение оценивают как эффективное. С другой стороны , если значение показател  D составл ет менее 15, то испытуемое соединение оценивают как неэффективное.

В. Действие на агрегирование пластинок , вызываемое коллагеном.

9 объемов крови, собранной у здорового человека, смешиваютс 1 объемом 3,13%-но- го (по весу на объем) раствора тринатрий фосфата и смесь центрифугируют, что приводит к плазме, обогащенной пластинками (PRP) в виде всплывшего сло . Нижний слой дополнительно центрифугируют, что дает плазму, обедненную пластинками (РРР) в виде всплывшего сло . PRP разбавл ют РРР таким образом, чтобы счет пластинок составил около 4 х 105 клеток/мм3. 25 мкл раствора испытуемого соединени , содержащего эквимолекул рное количество бикарбоната натри , добавл ют к 200 мкл упом нутого разбавленного РРР. После перемешивани  смеси 2 мин при 37°С добавл ют раствор коллагена (25-29 мкг/мл) к смеси, чтобы вызвать агрегирование пластинок , Степень агрегировани  пластинок исследуют по методу Борна.

-F

:Врем  кровотечени  (среднее значение) у лекарственной группы Врем  кровотечени  (среднее значение)чу контрольной группы I

Активность испытуемого соединени  в части ингибировани  агрегировани  пластинок выражают как ICso, т.е. концентраци  испытуемого соединени , требуемого

дл  возбуждени  50%-ного ингибировани  агрегировани  пластинок, возбуждаемого коллагеном.

С. Действие на длительность кровотечени  (на живом организме).

Испытуемое соединение (суспендированное или растворенное в водном 0,25%- ном растворе карбоксиметилцеллюлозы) ввод т с лечебной целью через рот самцу мыши (возраст 5 недель, 10 мышей в группе),

закрепл ют на всю ночь. Трем  часами позже отрезают кончик хвоста (около 2 мм) при анестезии эфиром, и упом нутый хвост погружают в физиологический солевой раствор (37°С) сразу же.

Длительность кровотечени  (секунды) обработанной лекарством группы мышей сравнивают с таковой у контрольной группы мышей, которым дают 0,25%-ный раствор

CMC взамен раствора испытуемого соединени . Пролонгированное действие каждого испытуемого соединени  на врем  кровотечени  определ ют по времени кровотечени  (секунды) соответственно следующим критери м.

Если значени  показател  D превышает 1,5, то испытуемое соединение оцениваетс  как эффективное. С другой стороны, если значение показател  D составл ет менее 1,5, то испытуемое соединение оценивают как неэффективное

м

D. Выносливость по отношению к максимальной дозе.

Испытуемое соединение, растворенное или суспендированное в физиологическом солевом растворе или в вод ном растворе, содержащем поверхностно-активное вещество , ввод т с лекарственной целью внутривенно самцу мыши (около 20 г). Выносливость по отношению к максимальной дозе испытуемого соединени  определ ют в единицах максимальной дозы, не вызывающей гибель мышей за 2-суточный период наблюдени  (таблицы 9-12)

Соединени , примененные в данных экспериментах, показаны в табл. 13

Таким образом, предлагаемый способ позвол ет получать соединени  формулы I более, чем в 3 раза эффективнее, чем известные соединени  в единицах ингибирую- щего действи  на легочный эмболизм, вызываемый архидоновой кислотой на агрегирование кров ных пластинок, вызываемое коллагеном. При этом соединени  обладают низкой токсичностью.

Т а б л и ц а 1

9 Р

Y-C- C- -OCH2COORtf/ R3RV

А - фениленова  группа; R,- H; R - Н;

Rsr mz

CtH f

Claims (1)

1. Формула изобретени  Способ получени  производных фенок сиуксусной кислоты общей формулы

   2

   %S02NH-C- )-ОСН2СОО

   з fy

   или их фармацевтически приемлемых солей где один или два Ri, R2, Ra и R4 - низший алкил, а другие - водород,

   кольцо А - фенилен, который может иметь один или два заместител , выбранных из группы: галоген, низший алкил;

   Нб - фенил, который может иметь один или два заместител , выбранных из группы галоген, нитро, тригалогенметил, низший алкил, низший алкокси,

   Re водород, низший алкил, отличающийс  тем, что соединение общей формулы { Ј2

   H2N-C-C- -oCH2COOR R5 Rf

   или его соль, где Ri-R4, А и Re приведены выше, подвергают взаимодействию с соединением общей формулы RsSOaZ, где RS приведено выше,

   Z - реакционноспособный остаток, с последующим выделением целевого продукта в свободном виде или в виде фармацевтически приемлемой соли

   53%

   98-100flC (оксалат)

   R,S02NH-C C-®™OCH2COOR

   У||

   Таб

   Таблица

   17

   12 CF3-O

   Ооль натри 

   100%

   99-Ю2°С (разл.этилацетат-н-гексан )f

   ИК нуйол макс, см : 3280, 1730,

   1730

   Т. пл. 226,5 -229 С

   13 - Н

   сн.

   iif У- сн.

   Н Н

   ,- Масло

   ИК- чистый макс, см 1: 3280, 1730

   ЦН7 Масло,

   ИК чистый макс, см : 3280,1730

   CJU Масло1

   ИК чистый макс, см : 3280,1730

   С Ит 137-138 (этилацетат-н-гексан) 3 ИК нуйол макс, см 1:3300,

   СН а Масло

   (-)(оС) - 11 2б (с 1,039, метанол)

   СН з Масло

   (+)(OOZ° +11,10 (с 1,020, метанол)

   174864318

   Продолжение табл.2 5

   Бесцветна  карамель

   ИКл) СНС1Э макс, см : 1780

   Т.пл. 131 -132 С (ацетон-нгексан )

   ИК нуйол макс, : 3285,

   Т. пл. 92 -93°С

   (изопропил-эфир-метилен-хлорид ИК нуйол, 3315, 3215, то. 1705 (bi )Ј- 12,01 (с 1,

   Т.пл. 89 -91°С и

   ИК нуйол макс, см : 3315,

   3215, то, 1705

   +11,90 (с 1,008, метанол)

   Масло

   И|О СНС13 макс, см

   Пасло

   ИК} СНС13 макс, см : 3380, 1

   132 (хлорофорй-н-гексан ИК ) нуйол макс, , 32 1730

   13 -137 (этилацетат-н-гексан) ИК нуйол макс, 3290,

   Масло

   ИК СНСЦ макс, 1730

   2Э

   tl-f

   30Br-O

   31Br-f

   снэ

   (+)

   1725, 1700

   (eOJ,°-17,33 (с 1,027, метанол)

   Н 132,5-133 (изопропиловый эфир- хлороформ)

   ИК V нуйол макс, см : 3300, 3275, 1725, 1700 Ы)+17,Ь7 (с - 1,007, метанол)

   СН3 ,5 -150 (изопропиловый (-) хлороформ)

   (hO|°- 7,8А ( с 0,790, метанол)

   СМ з 150,5-152 (изопропиловый спирт - (+) хлороформ)

   (ftЈ )|.0+8,07 (с 1,016, метанол)

   Часть 2 Кольцо А - группа фенилена, R,- Н, H

   32

   , масло

   ИК ) нуйол макс, 1738

   33

   С1Ч

   Ч

   СН3

   Часть k Rt- Н, Rg- CH3: R - Н: H

   Пример

   Соединение I

   R г 2уг оснгсо(жб

   -О-ОСН2СООН

   У i р

   35 СГ

   HQbOCH2cooH

   Т.пл. 177-178 (этилацетат-н-гексан) ИК V нуйол макс, сми : 3300, 1730, Т/10

   Выход

   Т.пл. (растворитель перекристалли-,

   зации) ИК и/или оптическое вращение

   90%

   9-51 (изопропиловый спирт - вода)

   ИКV нуйол макс,

   90

   106,5 -108,5 (этилацетат-н-гексан)

   ИК нуйол макс,

   45

   ОСН2СООН 62%

   f« (. h

   148

   46

   У

   Г

   л

   « «Ю-

   F

   W CF5-t « (. h

   148-150 (этилацетат-изопропиловы

   эфир - н-гексан)

   ИК у нуйол макс., см ; 1740

   721

   130,5 132Э5 (хлороформ)

   ИК нуйол макс, см г 1720

   77

   138-141 (этилацетат-изопропиловый эфир). ИК ) нуйол макс, см : 1740

   74

   1бЗ - 164 (этилацетат - изопропилов

   эфир)

   ИК нуйол макс., см : 1720

   Г Г

   R3S02NH-C-C- J-OCH2COOR

   R Н ; R H

   R3R,

   R6- CH3

   50

   NO,-fV н

   2

   51 , СН

   52

   ct

   Ci СН5

   С

   СН,

   55 МЗ

   С1

   Л

   56

   Cl

   57 С1-/Л

   kCl

   R nТ а б л и ц а 3

   Г Г

   C-C- J-OCH2COOR

   R3R,

   9

   128,5-130,5 (изо- пропиловый эфир) ИКу нуйол макс, см-1: 3250,

   77%

   (метанол- изопропиловый эфир-нтексан) ИК нуйол макс., 3260, 1750

   83, масло

   ИК чистый макс 3320, 1760

   §3«, масло

   ИК-0 чистый, макс, 3310,1760

   , масло

   MKv чистый макс, см- : , 1760

   86, масло

   ИК нуйол,макс, см- : 3320, 1755

   Э0%, масло

   ИК} чистый макс, 3330, 1760

   85%, масло

   ИК нуйол макс, см-1: 3315, 1755

   Таблица

   ; R 02NH-C-C- §VOCH2COORЈ

   I I . R R

   A - группа фенилена, - H, R- H, H)

   60

   C1-T

   61

   Вг-П

   RTJТаб

   1 Кг

   КЈ02МН-С - C-®-OCH2COOR 6 ij

   Rj Ry

   Часть 1 (кольцо А - группа фенилена, Rt - Н; Нг - H; R6 - Н)

   HlO нуйол макс, см 3270,

   118 - 119,5 (разлож. этилацетат-н-гексан) ИК1)) нуйол, см 3263,

   .,

   131 -133 (этилацетат-н- гексан)

   И«9 нуйол макс, см 3280, 1750

   -1

   137-138 (этилацетат-н- гексан) ИК V нуйол макс, см : 3280,

   («)§ -.8,63 (с 1,019, метанол)

   Лг- С1Ц; Кэ- Н; H

   Соединение I

   - -OCH2COORЈ ИК

   f -OCH2COOH 92j, масло f

   1ИК ) чистый макс, см

   R/ RI г i д

   Таблица 6

   Yf-C-C- -OH R3Ry

   Н, R3 Н, % Н, Y,

   NHCOCH

   Пример

   п

   -он

   СН3 (-)

   fVOH

   С1

   гексан)

   ИК

   нуйол макс, см

   3280. 1740

   (eOi% 8,92 (с 1,003,

   метанол)

   Выход, Т.пл.

   .1

   ИК- чист.макс. ,см :

   3290. 1650

   (fif)J5- Mt,60 {с 1,009 Метанол)

   Используют дл  последующ реакций без выделени  из реакционного раствора

   80%, масло

   ИК -0 чист.макс.см :

   3300,3100,1650

   Таблица

   Активность поглощени  скоплени  тромбоцита, вызванного коллагеном (in vitro)

   Химическое название каждого соединени : соединение 1: (Ј}-4-t2- (4-хлорфенил) сульфониламинопропил}феноксиуксусна  кислота;

   соединение 2: (t-)-4-C2-(4 хлорфенил/ суль фенилам ин-1 -метилэтигОфенокси- уксусна  кислота;

   соединение 3: (Ј)- |-2-{ |-бромфенкл) сульфониламин- -метилэтил фенокси- уксуснэ  кислота;

   известное соединение: Ц- (2-бенэол- сульфониламиноэтил)фекоксиуксуна  кислота.

   Таблицав

   Эффект торможени  эмболии легочной артерии, вызванной арэхидоновой кислотой

   Опытные соединени 

   Химическое название каждого опытного соедиени :

   соединение 4: (±)-4-(2-бензолсульфонил- амин-1 -метилэтил)-2-фторОеноксиуксусна  кислота;

   соединение 5: (±)- (-12-((-хлорОенил) сульфониламин--1-метилэтил }-2-фторОенил- уксусна  кислота;

   соединени  1-3 и известное соединение - соединени , указанные в эксперименте 1.

   Минимально эффективна  доза, мг/кг

   ТаблицаЭ

   Ингибирукидее действие на эмболию легких, вызванную арахидоновой кислотой

   + - эффективно; - - неэффективно.

   Таблица 10

   Ингибиторна  активность - агрегирование тромбоцитов,вызванное колла геном

   t

   Соединение I И.К., мкг/мл формулы I I

   2- 0,7

   50,6

   110,5

   120,5

   130,5

   140,5 Аналог-2 2

   1

   Таблица 11 Действи  на врем  кровотечени 

   оедине-Доза, мг/кгМинимальи р-Н-1«к-- но эффек0 ,3131030тивна  доза ,мг/кг

   - -- ------ --- ---U..(. J..

   2--++3

   11-+3

   12-+з

   13-f+з

   14---f4-3

   на лог- 2fr

   +,- те же, что определены в сноске табл.10

   Таблица 12 Максимальна  толерантна  доза

   Соединение формулы I

   1 2

   3 Аналог-2

   мг/кг

   1000 1000 1000 ; 1000

   tyRa RjS02NH -С- f- -OCH2COORf

   j

   Таблица 13