SU1686346A1

SU1686346A1 - Method for quantitative estimation of azathioprine

Info

Publication number: SU1686346A1
Application number: SU894763973A
Authority: SU
Inventors: Алик Иванович Сичко; Вера Анатольевна Тоболкина; Татьяна Алексеевна Кобелева
Original assignee: Тюменский медицинский институт
Priority date: 1989-12-04
Filing date: 1989-12-04
Publication date: 1991-10-23

Abstract

Изобретение касаетс аналитической химии, в частности количественного определени азатиоприна, примен емого в медицине препарата. Цель - повышение чувствительности и точности анализа. Его ведут растворением пробы в растворе NaOH с последующим титрованием раствором СиЗОз в присутствии серной кислоты при рН 6,5-7,5. Эти услови повышают точность анализа в 2,1-2,5 раза при снижении времени его в 2-4 раза и повышении чувствительности с 0,01 до 3,1 -10 5 г/мл 7 таблThe invention relates to analytical chemistry, in particular, the quantitative determination of azathioprine, a drug used in medicine. The goal is to increase the sensitivity and accuracy of the analysis. It is carried out by dissolving the sample in a solution of NaOH, followed by titration with a SIOZ3 solution in the presence of sulfuric acid at pH 6.5-7.5. These conditions increase the accuracy of the analysis by 2.1-2.5 times while decreasing its time by 2-4 times and increasing the sensitivity from 0.01 to 3.1 -10 5 g / ml 7 table

Description

Изобретение относитс к аналитической химии, а именно к способам количественного определени азатиоприна - 6-{1-метил-4-нитроимидазолил-5)-меркапто- пурин. и может быть использовано контрольно-аналитическими лаборатори ми.The invention relates to analytical chemistry, and specifically to methods for the quantitative determination of azathioprine — 6- {1-methyl-4-nitroimidazolyl-5) -mercaptopurine. and can be used by control and analytical laboratories.

Целью изобретени вл етс повышение чувствительности и точности определени .The aim of the invention is to increase the sensitivity and accuracy of the determination.

Пример 1. В мерную колбу на 100 мл помещают около 0,03 г (точна масса) порошка азатиоприна, прибавл ют 10 мл 1 М раствора гидроокиси натри (кали ), раствор перемешивают и объем водой довод т до метки. В стакан дл титровани помещают 5 мл полученного раствора, прибавл ют 0,5 мл 0,5 М раствора серной кислоты (рН 7,0) и водой довод т общий объем анали-зируемой смеси до 30 мл. Стакан помещают в титратор Т-107 и при включенной магнитной мешалке титруют анализируемый раствор 0,01 М раствором сульфата меди (II) и измер ют величину светопропускани при светофильтре № 1. Титрованный раствор добавл ют к смеси по 0,1 мл через 10 с.Example 1. In a volumetric flask of 100 ml, about 0.03 g (exact mass) of azathioprine powder is placed, 10 ml of 1 M sodium hydroxide (potassium hydroxide) solution is added, the solution is stirred, and the volume is made up to the mark with water. 5 ml of the resulting solution is placed in a titration dish, 0.5 ml of a 0.5 M solution of sulfuric acid (pH 7.0) is added, and the total volume of the analyzed mixture is brought to 30 ml with water. The beaker was placed in a T-107 titrator, and with the magnetic stirrer switched on, the analyzed solution was titrated with a 0.01 M solution of copper (II) sulfate and the light transmittance was measured at a light filter No. 1. The titrated solution was added to the mixture at 0.1 ml every 10 seconds.

По полученным данным стро т кривую титровани в координатах: г - V раствора,According to the data obtained, the titration curve is constructed in the coordinates: g - V of the solution,

мл, где г - величина светопропускани , %; V - объем раствора сульфата меди (II), мл.ml, where g is the amount of light transmittance,%; V is the volume of copper (II) sulfate solution, ml.

Точку эквивалентности наход т графически экстрапол цией двух пр мых линий кривой титровани . Концентрацию исследуемого вещества в процентах наход т по формулеThe equivalence point is found graphically by extrapolation of two straight lines of the titration curve. The concentration of the analyte in percent is found by the formula

V-T-V2-100 V-T-V2-100

LFRfi Lfrfi

где Н - масса препарата, вз та дл анализа , г;where H is the mass of the preparation taken for analysis, g;

Т - титр стандартного раствора по исследуемому веществу, г/мл;T is the titer of the standard solution for the test substance, g / ml;

V - объем стандартного раствора, пошедший на титрование, мл;V is the volume of the standard solution, followed by titration, ml;

Vi - объем испытуемого раствора, вз тый дл анализа, мл;Vi is the volume of the test solution taken for analysis, ml;

V2 - объем мерной колбы, мл.V2 is the volume of the volumetric flask, ml.

1 мл 0,01 М раствора сульфата меди (II) соответствует 0,002773 г азатиоприна.1 ml of a 0.01 M solution of copper (II) sulfate corresponds to 0.002773 g of azathioprine.

Результаты анализа азатиоприна (рН 7) и статическа обработка приведены в табл. 1.The results of the analysis of azathioprine (pH 7) and static treatment are given in Table. one.

В табл. 1 видно, что относительна ошибка определени азатиоприна предлагаемым способом +0,57%. Количественное определение азатиоприна при данной отноС/In tab. 1 that the relative error in the determination of azathioprine by the proposed method is + 0.57%. Quantitative determination of azathioprine at a given ratio

СWITH

оabout

ОСOS

i0i0

осwasp

&&

ОABOUT

сительной ошибке можно проводить при содержании его в пробе от 1,109 до 3,050 мг. Таким образом, нижний предел определени исследуемого вещества 1,109 мг, верхний 3,05 мг.significant error can be carried out with its content in the sample from 1.109 to 3.050 mg. Thus, the lower limit of the test substance is 1.109 mg, the upper 3.05 mg.

Аналогичные результаты получают при введении в исследуемый раствор препарата 0,4 - 0,6 мл (рН 6,5 - 7,5) 0,5 М раствора сол ной кислоты.Similar results are obtained when a 0.4–0.6 ml (pH 6.5–7.5) 0.5 M hydrochloric acid solution is injected into the test solution.

Пример 2. Анализ азатиоприна в таблетках по 0,05 г (табл. 2).Example 2. Analysis of azathioprine tablets of 0.05 g (table. 2).

Точную массу (около 0,06 г) порошка растертых таблеток помещают в мерную колбу на 100 мл. Азатиоприн раствор ют в 10 мл 1 М раствора гидроксида натри (кали ) и водой довод т до метки. Раствор фильтруют. В стакан дл титровани помещают 5 мл фильтрата и далее поступают аналогично примеру 1. Содержание азатиоприна в таблетках рассчитывают по формулеThe exact mass (about 0.06 g) of the powder of the pounded tablets is placed in a 100 ml volumetric flask. Azathioprine is dissolved in 10 ml of 1 M sodium hydroxide (potassium) solution and made up to the mark with water. The solution is filtered. 5 ml of the filtrate is placed in the titration dish, and then proceed as in Example 1. The content of azathioprine in the tablets is calculated by the formula

V Т V2 Р ТГГЧЛ V T V2 P THGL

С где Р - вес таблетки азатиоприна, г,C where P is the weight of the azathioprine tablet, g,

Н - масса порошка растертых таблеток, г.H - the mass of the powder pounded tablets,

В табл. 3 представлены результаты анализа азатиоприна за границей оптимального значени рН среды раствора при рН 8.In tab. 3 shows the results of the analysis of azathioprine beyond the optimum pH of the solution at pH 8.

Установлено, что ошибка количественного определени анализируемого вещества при этом увеличиваетс до ±9,44% и получаютс завышенные результаты, кроме того, на кривых титровани точка эквивалентности выражена нечетко, что и обуславливает большую погрешность анализа, При создании рН раствора менее 6,5 реакци практически не протекает.It was found that the quantitative determination error of the analyte increases to ± 9.44% and results are overestimated. Moreover, the equivalence point is not clearly expressed on the titration curves, which causes a large error in the analysis. does not leak.

Исследование азатиоприна за границами концентрации титрованного раствора сульфата меди (II) представлено в табл. 4.The study of azathioprine beyond the concentration of the titrated solution of copper (II) sulfate is presented in Table. four.

Установлено, что при концентрации реактива 0,015 М анализ препарата можно проводить при содержании его в пробе от 1,797 до 2,501 мг с относительной ошибкой ±0,91%. При 0,02 М концентрации титрованного раствора светопропускание продукта реакции с азатиоприном невозможно измерить прибором (зашкаливание стрелки гальванометра). При концентрации сульфатаIt was established that when the concentration of the reagent is 0.015 M, the analysis of the preparation can be carried out with its content in the sample from 1.797 to 2.501 mg with a relative error of ± 0.91%. At 0.02 M of the concentration of the titrated solution, the light transmission of the reaction product with azathioprine cannot be measured by the instrument (off scale of the galvanometer needle). At sulphate concentration

меди(Н) 0,005 М анализ азатиоприна проводить нельз , так как реакци протекает медленно и незначительно, а точка эквивалентности не фиксируетс . Таким образом, дл количественного определени азатиоприна можноcopper (H) 0.005 M analysis of azathioprine cannot be performed, since the reaction proceeds slowly and slightly, and the equivalence point is not fixed. Thus, to quantify azathioprine,

использовать 0,010 - 0,015 М раствор сульфата меди (II).use 0,010 - 0,015 M solution of copper (II) sulfate.

В табл. 5 и 6 представлены результаты анализа азатиоприна за границами концентраций исследуемого вещества в анализируемых пробах.In tab. Figures 5 and 6 show the results of the analysis of azathioprine beyond the concentration limits of the test substance in the analyzed samples.

Установлено, что ошибка количественного определени при этом увеличиваетс до +4,19 - 13,34%. Причем получают сильно заниженные или завышенные результатыIt is established that the quantitative error increases in this case to +4.19 - 13.34%. And get very low or too high results.

анализа, что можно объ снить их невоспроизводимостью (табл. 5) и неподчин емостью раствора основному закону светопоглоще- ни (табл. 6).analysis, which can be explained by their irreproducibility (Table 5) and the insubordination of the solution to the basic law of light absorption (Table 6).

Сравнительные данные по затрате времени исследуемого вещества на один анализ , чувствительности и относительной ошибке приведены в табл.7Comparative data on the time spent by the analyte on one analysis, sensitivity and relative error are given in Table 7.

Из табл. 7 видно, что предлагаемый способ позвол ет повысить точность анализа вFrom tab. 7 that the proposed method allows to increase the accuracy of the analysis in

2,1 -2,5 раза, уменьшить врем одного анализа в 2 - 4 раза по сравнению с прототипом и базовым объектом. Кроме того, предлагаемый способ позвол ет значительно повысить чувствительность определени и сократить2.1 -2.5 times, reduce the time of one analysis in 2-4 times compared with the prototype and the basic object. In addition, the proposed method allows to significantly increase the detection sensitivity and reduce

затрату исследуемого вещества.cost of the test substance.

Claims

The Invention Method for the Quantitative Determination of Azathioprine by Dissolving an Analyzed Sample and Titrating a Reagent Solution, characterized in that, in order to increase the sensitivity and accuracy of the determination, the analyzed sample is dissolved in sodium hydroxide solution, the titration is carried out in the presence of sulfuric acid at pH

6.5-7.5 and a copper (II) sulfate solution is used as a reagent.

Table 1

Table 2

Table3

Table