SU1659483A1 - Способ получени 1,2-диацил-S @ -глицерина - Google Patents
Способ получени 1,2-диацил-S @ -глицерина Download PDFInfo
- Publication number
- SU1659483A1 SU1659483A1 SU894680101A SU4680101A SU1659483A1 SU 1659483 A1 SU1659483 A1 SU 1659483A1 SU 894680101 A SU894680101 A SU 894680101A SU 4680101 A SU4680101 A SU 4680101A SU 1659483 A1 SU1659483 A1 SU 1659483A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- phosphatidylcholine
- diacyl
- phospholipase
- silica gel
- ethanol
- Prior art date
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
Abstract
Изобретение относитс к биотехнологии , конкретно к способу получени 1,2-ди- ацил-Зп-глицерина из фосфатидилхолина (ФХ) природного происхождени . Цель изобретени - упрощение процесса. Способ получени 1,2-диацил-5п-глицерина включает ферментативное расщепление фосфатидилхолина фосфолипазой С из Bacillus cereus ВКПМ В-2492, иммобилизованной на силикагеле. Процесс ведут в этаноле при 35-38°С и концентрации ФХ 7-12 % с последующим выделением целевого продукта с сорбента промывкой хлороформом. 1 з.п.ф- лы, 1 табл.
Description
Изобретение относитс к биотехнологии и представл ет собой способ получени 1,2-диацил-Зп-глицерина (ДАГ) из фосфатидилхолина (ФХ) природного происхождени .
Цель изобретени - упрощение способа получени ДАГ.
Способ заключаетс в обработке фосфатидилхолина фосфолипазой С из Bacillus cereus ВКПМ В-2492, иммобилизованной на силикагеле, в среде этанола с последующим выделением целевого продукта промывкой силикагел хлороформом. Способ обеспечивает получение 1,2-диацил-Зп-глицерина почти с количественным выходом.
Получение ДАГ по предлагаемому способу осуществл етс следующим образом .
,
RjCOO-Cll
фОСФОЛИПОЮ С
LRjCOO-CII
CH2-OCORi
I
С11г-0-Р-О СНг)(С113)з
о
+HO-P-0(CH,)2N
СИ,-ОН
фосфатидилхолин
где RI, R2 - остатки жирных кислот.
Фосфолипазу С инкубируют в верона- ловом буфере с силикагелем. После отделени от буфера иммобилизованный фермент перенос т в раствор фосфатидилхолина в этаноле (96%). Образовавшийс ДАГ выдел ют путем промывки силикагел хлороформом . Выход целевого продукта 92-94%.
П р и м е р. В работе использованы 10%-ный ичный фосфатидилхолин, выпускаемый Харьковским предпри тием по производству бактерийных препаратов, препарат фосфолипазы С (фосфатидилхоО
ел о
ь
00
со
лин-холинфосфогидролазы, К.Ф.3.1.4,3) из Bacillus cereus ВКПМ В-2492 в 0,01 М веро- наловом буфере, содержащем 0,001 М ZnCIa, выпускаемый НПО Фермент (Вильнюс ) с удельной активностью 280 ед/мг.
1 мл препарата фосфолипазы С (120 ед) инкубируют с 1 г силикагел L 40/100 (ChemafcH ЧССР) в течение 1 сут при 4°С. Через 1 сут на силикагеле св зываетс до 35% активного фермента. После отделени буфера полученную иммобилизованную ФЛС смешивают с 0,5 мл раствора 56 мг Ф в 96% этаноле и инкубируют 3 ч при 37°С, После этого всю реакционную смесь перенос т на стекл нный фильтр № 4 (пор. 16) и удал ют этанол, содержащий фосфохолин, Силикагель на фильтре промывают хлороформом (3x5 мл), Соединенные промывки экстрагируют водой дл удалени остатков фосфохолина. Полученный раствор ДАГ в хлороформе упаривают и досушивают при 30°С в вакууме. Получено 42 мг ДАГ (93%). Содержание фосфора в продукте реакции 0,4 мкг/мг, что соответствует содержанию ФХ не более 0,8%. Rf 0,65 на силуфоле UV- 254 в системе петролейный эфир - эфир 1:2. Силикагель с фильтра, содержащий иммобилизованную ФЛС, предварительно промытый этанолом,- водой и вероналовым буфером, пригоден дл повторного использовани .
В таблице представлены примеры получени ДАГ по предлагаемому способу при различной концентрации ФХ и температуре процесса.
Предлагаемый метод вл етс новым способом получени ДАГ из наиболее доступного природного фосфоглицерида-фос- фатидилхолина. Благодар обнаруженной
высокой каталитической активности, иммобилизованной на силикагеле фосфолипазы С из В,cereus, про вл емой в этаноле, удалось получить с высоким (почти количественным ) выходом оптически активный ДАГ, При применении синтетических приемов выход оптически активного ДАГ составл ет 10-35%.
Применение иммобилизованной ФЛС в
среде спирта позвол ет получить нужное вещество в одну стадию и существенно упростить его выделение, использу минимальное количество растворителей. Используемые реагенты - фосфатидилхолин и фермент фосфолипаза С из В, cereus - вл ютс легкодоступными и производ тс в СССР.
Таким образом, предлагаемый способ позвол ет значительно упростить и удешевить метод получени оптически активного ДАГ,
Claims (1)
1.Способ получени 1,2-диацил-5п-гли- церина путем ферментативного расщеплени фосфатидилхолина фосфолипазой С с последующим выделением целевого продукта , отличающийс тем, что, с целью упрощени процесса, используют фосфатидилхолин фосфолипазу С из Bacillus cereus ВКПМ В-2492, иммобилизованную на силикагеле , и процесс ведут в этаноле при температуре 35-38°С и концентрации фосфатидилхолина 7-12%, а выделение целевого продукта осуществл ют промывкой сорбента хлороформом.
2,Способ по п.1, о т л и ч а ю щ и и с тем, что используют 10%-ный раствор фосфатидилхолина .
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU894680101A SU1659483A1 (ru) | 1989-03-30 | 1989-03-30 | Способ получени 1,2-диацил-S @ -глицерина |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU894680101A SU1659483A1 (ru) | 1989-03-30 | 1989-03-30 | Способ получени 1,2-диацил-S @ -глицерина |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SU1659483A1 true SU1659483A1 (ru) | 1991-06-30 |
Family
ID=21442271
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU894680101A SU1659483A1 (ru) | 1989-03-30 | 1989-03-30 | Способ получени 1,2-диацил-S @ -глицерина |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| SU (1) | SU1659483A1 (ru) |
-
1989
- 1989-03-30 SU SU894680101A patent/SU1659483A1/ru active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Евстигнеева Р.П., Звонкова Е.Н., Серебреникова Г.А., Швец В,И. Хими липидов. М.; Хими , 1983, с. 17-24. Кейтс М. Техника липидологии. М.: Мир, 1975, с. 284. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4329302A (en) | Synthetic phosphoglycerides possessing platelet activating properties | |
| Kates et al. | pH-dissociation characteristics of cardiolipin and its 2′-deoxy analogue | |
| DE69738648T2 (de) | Formulierungen vernetzter proteinkristalle und ihre verwendung als katalysatoren in organischen lösungsmitteln | |
| CH638241A5 (de) | Enzympraeparat mit l-alpha-aminoacylamidase-aktivitaet. | |
| HU219850B (hu) | Eljárás foszfolipidek átészterezésére | |
| KR100468306B1 (ko) | 스핑고지질 및 스핑고지질 유도체의 제조방법 | |
| Keith et al. | Synthesis of L-2-amino-4-methoxy-trans-but-3-enoic acid | |
| DE2365610A1 (de) | Neue substituierte propan- oder butanderivate | |
| US5387514A (en) | Acylation of alcohols with Pseudomonas lipase immobilized on a polystyrene resin | |
| Baer et al. | L-α-(Dioleoyl) lecithin.* An Alternate Route to Its Synthesis | |
| SU1659483A1 (ru) | Способ получени 1,2-диацил-S @ -глицерина | |
| Baer | The synthesis of glycerolphosphatides | |
| Keraly et al. | Effect of structural analogues of PAF‐acether on platelet desensitization | |
| IL26147A (en) | Deazapurine d-ribofuranoside cyclic 3',5'-phosphates and a process for their production | |
| Bergström et al. | On the isolation and structure of hydroxylysine | |
| EP0288255B1 (en) | Method of producing phospholipid derivatives | |
| Kindel et al. | Distribution of carbon-14 in polysaccharide after photosynthesis in carbon dioxide labelled with carbon-14 by Anacystis nidulans | |
| JP3625244B2 (ja) | リゾスフィンゴ脂質の製造方法 | |
| US4985366A (en) | Process for the enzymatic resolution of the optical isomers of racemic ester derivatives of 3-mercapto-2-alkyl-propionic acid | |
| US4504474A (en) | Synthetic phosphoglycerides possessing platelet activating properties | |
| JPS63123389A (ja) | 酵素法リン脂質−ｄ−セリン誘導体の製造法 | |
| JPH08182498A (ja) | 光学活性化合物の製造法 | |
| JPH0533995B2 (ru) | ||
| JPH0710233B2 (ja) | 固定化酵素およびその製造方法 | |
| US4897357A (en) | (S) α-cyano-3-phenoxy-benzyl acetate |