SU1486519A1 - Способ дифференциации холерных вибрионов от негазообразующих аэромонад - Google Patents

Description

Изобретение относится к медицинской микробиологии и касается диф· ференциации холерных вибрионов от Ηβгаз о образующих аэромонад III группы Хейберга. Цель изобретения - ускорение и упрощение способа. Чистую культуру микроорганизмов засевают петлей г виде полости 1-2 см длины или бляшки в чашки Петри на поверхность среды, состоящей из 2%-ного агара, рН 7,6-7,8, с добавлением в него 2-5 г/л среды додецилсульфата натрия, посевы инкубируют при 37 С в течение 16-24 ч. При наличии сульфатазы, которая выявляется по зоне помутнения вокруг посева, дифференцируют холерные вибрионы.

Изобретение относится к медицине- кой микробиологии и может быть использовано для диагностики бактериальных инфекций.

Цель изобретения - ускорение и упрощение способа.

Способ осуществляется следующим образом.

Микроорганизмы засевают петлей в виде полости длиной 1-2 см или бляшкой в чашки Петри на поверхность среды, состоящей из 2%-ного агара из настоя сердечной мышцы, рН 7,6-7,8, с добавлением в него 2-5 г/л среды соли додецилсульфата натрия

(С,_гН^₅БО₄Ма) , инкубируют посевы при 37° С - температура, оптимальная для рода νΐΒι-ΐο, в течение 16-24 ч и при наличии сульфатазы, которая выявляется по зоне помутнения вокруг посева, дифференцируют холерные вибрионы.

Способ иллюстрируется следующим примером.

Пр им е р. Используют 116 штаммов холерных вибрионов биоваров холера. и эльтор и 78 штаммов, не образующих газ аэромонад. Предварительно готовят среду для дифференциации.

В 2%-ный агар из сердечной мышцы добавляли додецилсульфат натрия

4^

(X)

05

СП

со

3

1486½19

4

(С ^Н₁₅ 50₄Ла) в конечной концентрации 3,5 г на 1 л среды. Поверхность среды на чашках хорошо подсушивают. 24-часовую агаровую культуру изучае- $ мого штамма петлей пересевают полоской или бляшкой на поверхность 'дифференциальной среды на чашки Петри.

На одной чашке с агаром можно посеять 4-6 различных штаммов. Поселы ю инкубируют 18 ч при 37°С. После инкубации учитывают результаты при просмотре чашек в проходящем свете. Холерные вибрионы обладают сульфатазной активностью и по мере расщепле- 15 ния додецилсульфата натрия образуют додециловые спирты, осаждение и диффузия которых приводит к образованию мутной зоны вокруг посева культуры. Размеры зоны помутнения колеб- 20 лютея от 1 до 10 мм.

Негазообразующие аэромонады не разлагают в указанных концентрациях додецилсульфат натрия, в результате 25 чего не образуется зона помутнения вокруг посева,

16-часовая инкубация приводит к значительному росту культур, у 70/! штаммов вокруг посева четко выделя- 30 ется зона помутнения размером 1-2.мм.

Аналогичные результаты получены через 18 ч инкубации, но. в этом случае все (100%) штаммы дают зону помутнения. Наиболее четкие результаты наблюдают через 24 ч. Увеличение времени инкубации до 32 и 48 ч не приводит к повышению четкости результатов.

Использование предпагаемо’го способа позволяет ускорить на 12-24 ч дифференциацию, а также упростить способ за счет упрощения среды и сохранить растущую культуру для дальнейших исследо ваний.

Claims (1)

1. Формула изобретения

   Способ дифференциации холерных вибрионов от негазообразующих аэромонад путем выращивания чистой культуры на плотной питательной среде с последующим учетом результатов, о т л и ч а ю щ и й с я тем, что, с целью ускорения и упрощения способа, культуру выращивают на среде в присутствии 2-5 г/л.среды додецилсульфата натрия в течение 16-24 ч и· дифференцируют холерный вибрион по наличию зоны помутнения вокруг выросшей культуры.