SU1469468A1 - Способ определени гиперфибриногенолитической активности крови - Google Patents

Abstract

Изобретение относитс  к медицине , в частности к гематологии. Целью изобретени   вл етс  повьшение точности и ускорение способа. Дл  этого в исследуемой цитратнор плаз-- не определ ют количество фибриногена одновременно, в даух пробах: в присутствии ингибитора фибринолиза и без ингибитора„ В качестве ингибитора фибринолиза используют 1,3%- ньй раствор эпсилон-аминокапроновой кислоты. Учет количества фибриногена ведут по полученным на вод ной бане при 3 С в течение 5 кии сгусткам фибрина, количество которых пропорционально исходному количеству фибриногена . При снижении содержани  фибриногена во второй пробе от-гаси- тельно первой определ ют гиперфибри- ногеНОЛитическую активность крови. с S

Description

1

Изобретение относитс  к медицине и может бьггь использовано дл  экспресс-диагностики состо ний острого фибриногенолиза при неотложных состо ни х терапевтического и хирургического профил , особенно во врем  операциий и в реанимационной практике .

Целью изобретени   вл етс  повышение точности и ускорение способа.

Цель- достигаетс  тем, что в исследуемой цитратной плазме количество фибриногена определ ют через 10 мин от момента вз ти  крови одновременно в двух пробах: в присутствии ингиби-. тора фибринолиза в 1,3%-ном растворе эпсилон-аминокапроновой кислоты и без этого ингибитора, и при снижении содержани  фибриногена в пробе без ,

ингибитора относиттельного такового в пробе с ингибитором определ ют гиперфибриногеполитическую активность крови.

Способ осуществл ют следующим образом.

Кровь у больного забирают из вены, не сдавлива  м гких тканей, силико- нированной иглой в силиконированную пробирку в 3,8%-ньй раствор цитрата натри  в соотношении 9:1, во вторую пробирку кровь забирают в 1,3%-ньй раствор эпсилон-аминокапроновой кислоты , приготовленной на 3,8%-ном растворе цитрата натри . Точно фик- сируют врем  вз ти  крови в обе пробирки . Обе пробы крови сразу став т центрифугировать при 1500 об/мин в течение 7 мин дл  получени  плазмы.

Из обеих проб отсасьгеают плазму в разные пробирки. В обеих пробах строго через 10 мин, от момента вз ти  1 крови из сосудистого русла провод т определение количества фибриногена. Фибриноген определ ют так: в одну пробирку к 0,5 мл цитратной плазмы добавл ют 0,1 мл 0,227%-ного хлористого кальци  дл  нейтрализации цит- рата натри  и 0,1 мл раствора тромбина активностью 20 ± 3 с. Во вторую пробирку к 0,5 мл плазмы крови,вз - той в 1,3% раствор эпсилон-аминокап- ;роковой кислоты, приготовленной на :3, растворе цитрата натри , добавл ют 0,1 мл 0,227%-ного раствора хлористого кальци  дл  нейтрализации цитрата натри  и О,1 мл раствора тромбона активностью 20 t 3 с. Обе пробирки став т на вод ную баню 37°С на 5 мин дл  свертывани  фибриногена . Получаемые сгустки фибрина пропорциональны исходному количеству фибриногена. Следовательно, дл  по- лучени  количества фибриногена и выражени  его в г/д получаемые сгустки фибрина быстро высушивают на фильтровальной бумаге, взвешивают на торсионных весах. Вес сгустка умно- жают на 2, на коэффициент 22,2 согласно способу Рутбегр и дел т на 100. Провод т сравнение концентраций фибриногена, .определенного в. присутствии стабилизатора фрбриноли- за в 1,3%-ном растворе эпсилон-аминокапроновой кислоты и без этого стабилизатора , только в 3,8%-ном растворе цитрата натри , вычисл ют разницу количеств фибриногена, котора , в свою оче- редь, соответствует количеству лизиро- анного за 10 мин фибриногена. При снижении количества фибриногена в 3,8%- ном растворе цитрата натри  относительно количества фибриногена, определенного в 1,3%-ном растворе эпси лон-аминокапроновой кислоты, диагностируют как гиперфибриногенолитическу активность крови.

Раствор 1,3% эпсилон-аминокапроно вой кислоты готов т предварительно, до вз ти  крови, 1,3 г сухой эпсклон аминокапроновой кислоты раствор ют в 3,8%-ном растворе цитрата натри .

:

Осуществление предлагаемого способа занимает 20 мин. По преддагае- мому способу проведено 27 исследот ваний и результаты их представлены в табл.1. По способу-прототипу провеQ 5 0 5 О

0

5

5

дено 48 исследований. Результаты параллельных исследований способа- прототипа и предлагаемого приведены в табл.2.

Количество лизированного фибриногена различно, колеблетс  от 0,45 до 6,67 г/л и не зависит от исходного общего количества фибриногена. № проб дл  табл.2 вз ты из табл.1. По способу-прототипу увеличение активности лизиса вы влетс  не всегда в сравнении с за вл емым способом. В примере 3 наблюдаетс  по способу- прототипу завышение активности лизиса до 67%. Диагностическа  информативность гиперфибриногенолитичес- кой активности крови предлагаемого способа точнее способа-прототипа. Пример 1. Больной М., 49 лет. Диагноз: Сотр сение мозга. Травматический шок. Перелом по сничного отдела позвоночника. Состо ние больного т желое, требующее интенсивной терапии.

Дл  вы влени  наличи  гиперфибри- ногенолитической активности крови у больного, не сдавлива  м гких тканей, забирают кровь путем пункции вень силиконированной иглой, В первую силикомироваиную пробирку приливают 4,5 мл крови к -0,5 мл 3,8%- ного раствора цитрата натри , что соотноситс  как 9:1. Во вторую си- ликонированную пробирку приливают 4,5 мл крови ужё к другому раствору к 0,5 мл 1,3%-ного раствора эпсилон- аминокапроновой кислоты, приготов- ленной на 3,8%-ном рас т воре цитрата нат- , ри  также в соотношении 9:1. Раствор 1,3% эпсилон-аминокапроновой кислоты готов т предварительно до вз ти  крови: 1,3 г сухой эпсилон-аминокапроновой кислоты раствор ют в 3,8%- ном растворе цитрата натри .

Данные гиперфибриногенолитической

активности крови, полученные по пред- пагаемому способу, представлены в

табл.1.

Количество лизированного фибриногена различно, колеблетс  от 0,45 до 6,67 г/л и не зависит от его общего количества.

Диагностическа  информативность предлагаемого способа вьш1е и точнее способа-прототипа.

Точно фиксируют врем  вз ти  крови в обе пробирки, в нашем опыте равным 10ч. Обе пробы крови сразу

став т центрифугировать, а именно в to часов 02 мин при 1500 об/мик в течение 7 мин. После центрифугировани  в 10ч 09 мик и.-з первой пробирки отбирают 0,5 МП цнтратной плазмы автоматической пипеткой и добавл ют к О,1 МП 0,227%-кого раствора хлористого кальци . Б эту же пробирку добавл ют О,1 мл раствора тромбина, активностью 20 с, В то же самое врем из второй пробирки с раствором 1,3% эпсилон-аминокапроновой кислоты на 3,8%-ном цитрате натри  отбирают авг томатической пипеткой 0,5 мл плазмы и приливают к 0,1 мл 0,227%-ному раствору хлористого кальци  и О,1 мл раствора тромбина активностью 20 с. В 10ч 10 мин обе пробы став т на вод ную баню при 37°С на 5 мин. В 10 ч 15 мин обе пробы достают из бани, полученные сгустки высушивают на фильтровальной бумаге под контролем зрени  так, чтобы бумага бьша сухой после промокани  в ней сгустка . Сгусток сразу же взвешивают на торсионных весах: вес сгустка в присутствии ингибитора равен 8 мгх2 22,2:100 3,55 г/л, при отсутствии ингибитора вес равен 6 ,2: 100 2,67 г/л. Количество лизиро- ванного фибриногена равно 3,55 г/л - - 2,67 г/л 0,88 г/л.

Заключение: диагностирована гипер фибриногеполитическа  активность крови . Даны рекомендации к проведению коррегиру)ощей терапии.

Пример 2. Больной А., 58 лет. Диагноз: Острое нарушение мозгового кровообращени . Состо ние больного т желое, требующее реанимационных меропри тий и интенсивной терапии.

Кровь дл  исследовани  у больного забирают, не сдавлива  м гких тканей путем пункции вены силиконированной иглой в две силиконированные пробирки по 4,5 мл крови к 0,5 мп 3,8% цитрата натри  и к 0,5 мл 1,3%-ного раствора эпсилон-аминокапроновой кис лоты на 3,8%-ном растворе цитрата натри , в первую и вторую пробирки соответственно, что соотноситс  как 9:1. Точно фиксируют врем  вз ти  крови в обе пробирки, которые тот

10

15

4694686

час став т центрифугировать при 1500 об/мин в течение 7 мин. Затем к 0,1 мл 0,227%-ного раствора хлористо , го кальци  приливают О, 5 кп цитратной плазмы в первую пробирку и 0,1 t-m раствора тромбина активностью 20 с. Во вторую пробирку к 0,1 мл О,227%-ного раствора хлористого кальци  приливают 0,5 мл плазмы крови, вз той с раствором 1,3% эпсилон-аминокапроновой кислоты на 3,8%-ном растворе цитрата натри , и О,1 мл раствора тромбина активностью 20 с. Обе пробирки тот час став т на вод ную баню при 37 С на 5 мин. Затем сгустки извлекают и высушивают на фильтровальной бумаге так, чтобы бумага бьша сухой. Сгуток сразу же взвешивают на торсионных весах: вес сгустка в присутствии ингибитора равен 9 мгх2 22,2:100 4,0 г/л, при отсутствии ингибитора вее равен 7,5 мгх2 22,2: :100 3,33 г/л. Количество лизиро- ванного фибриногена равно: количество фибриногена в 1,3%-ном растворе эпсилон-аминокапроновой кислоты - - количество фибриногена без этого ингибитора фибринолиза, а именно: 4,0 - 3,33 0,67 г/л.

Заключение: диагностирована гипер- фибриногенолитическа  активность крови. Дань соответствук дие рекомендации к проведению коррегирующей терапии .

Claims (1)

1. Врем , затрачиваемое на осуществление способа, равно 20 мин, что в 9 раз быстрее способа-прототипа. Формула изобретени 

   20

   25

   30

   35

   Способ определени  гиперфибрино- генолитической активности крови путем регистрации фибриногена в исследует мой пробе, отличающийс  тем, что, с целью повьгоени  точности и ускорени  способа, определ ют содержание фибриногена через 10 мин от момента вз ти  крови одновременно в двух пробах в присутствии 1,3%- ного раствора эпсилоь-аминокапроно- вой кислоты и без нее и при снижении содержани  фибриногена во второй пробе относительно первой определ ют гиперфибриногенолитическую активность крови.

   Таблица 1

   5,33

   6,22

   вм«чаш«в: про ва ты из табл..

   По способу-прототипу увеличевм вктив-  оети лизиса вы вл етс  ив всегда в сраваеими с за вл емии cnocotkM. В примере 3 ваблюдаетс  завьаетм ак- ТЯВ80СТЯ лизиса до 67% по свособу- прототипу по сравнению с прсдпагаемм слосовом 0,89 г/л. В то эрем  как в . примере to ахтнвиость лканса по сво- собу-орототилу равиа ОХ, а по аа в- л емому спосову активиость также высока    рвава 5,3 Г/л.

   Гиперф О- р  огмо- л т ческа  акттвость кроп