SU1452462A3 - Способ получени вакцины дл профилактики и лечени инфекции мочевых путей - Google Patents

Способ получени вакцины дл профилактики и лечени инфекции мочевых путей Download PDF

Info

Publication number
SU1452462A3
SU1452462A3 SU853946994A SU3946994A SU1452462A3 SU 1452462 A3 SU1452462 A3 SU 1452462A3 SU 853946994 A SU853946994 A SU 853946994A SU 3946994 A SU3946994 A SU 3946994A SU 1452462 A3 SU1452462 A3 SU 1452462A3
Authority
SU
USSR - Soviet Union
Prior art keywords
vaccine
bacteria
hours
strains
strain
Prior art date
Application number
SU853946994A
Other languages
English (en)
Inventor
Стойкович Любинко
Павич Радмила
Спасоевич Вера
Original Assignee
Золько Базель Аг (Фирма)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Золько Базель Аг (Фирма) filed Critical Золько Базель Аг (Фирма)
Application granted granted Critical
Publication of SU1452462A3 publication Critical patent/SU1452462A3/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A61K39/025—Enterobacteriales, e.g. Enterobacter
    • A61K39/0266—Klebsiella
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A61K39/025—Enterobacteriales, e.g. Enterobacter
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A61K39/025—Enterobacteriales, e.g. Enterobacter
    • A61K39/0258—Escherichia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/02—Bacterial antigens
    • A61K39/09—Lactobacillales, e.g. aerococcus, enterococcus, lactobacillus, lactococcus, streptococcus
    • A61K39/092—Streptococcus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55505—Inorganic adjuvants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/70—Multivalent vaccine
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
    • Y10S435/848—Escherichia
    • Y10S435/849—Escherichia coli
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
    • Y10S435/852—Klebsiella
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
    • Y10S435/873—Proteus
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
    • Y10S435/885—Streptococcus

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Изобретение относитс  к области медицинской микробиологии, в частности к получению лечебных вакцин. Сущность способа сводитс  к тому, что дес ть уропатогенных штаммов, вьщелеиных от больных,«в число которых входит 6 штаммов Е. coli и по 1-му штамму К1. pneumoniae, Р. mor- ganis, P. mirobilis и S. faecalis, раздельно культивирзтот в жвдкой или на плотной питательной среде, полученные биомассы инактивируют различ- . ньми способами (теплова  обработка, J-облучение или химическа  обработка). Затем обработанные биомассы смешивают до конечной концентрации 2- 10 клеток/мл. Смесь бактерий сорбируют на фосфате алюмини  при концен-. трации последнего 1,5-10 мг/мл вакцины . Дл  сохранени  свойств вакцины добавл ют тиомерсаль и при необходимости лиофилизируют. 9 табл. СО

Description

ел
tc
Изобретение относитс  к медицине- кой микробиологии, а именно к способам получени  лечебных вакцин.
Пример. Сначала от пациентов : которые страдали от инфекции .мбчевых путей, получают пробы мочи (средне- струйна  моча) и сразу делают пересе на агар MacConkey. После засевани  пластины с агаром инкубируют в точе ние 16-18 ч при 37 С, затем вьиал гот образованные колонии и идентифицирую определением их биохимических и биологических свойств.
Индентифицирование Streptococcus faecalis (энтерококка) с использованием метода окраски по Г раму характерных небольших КОЛОНИ11 и следующих испытаний:
каталаза (в присутствии -- подогретой крови) + гемолиз-/б
рост при
рост при рН 9,6 + рост в 6,5%-ном растворе NaCl. -f
р( zT на 40% желчи + . определение полисахарида - антигена D ,+
В табл. 1 приведены критерии, при мен емые дл  идентификации штаммов Escherichia coli, Proteus и Klebsie la
Идент1фицированные таким образом колонии оставл ют на пластинах с агаром в течение 24 ч при 37 С дл  /дальнейшего роста, затем суспендируют в физиологическом растворе хлористог натри , испытьюают на чистоту при помощи метода окраски по Граму и за- мораживают в сухом виде.
Полученные отдельные штаммы Escherichia coli характеризуютс  признаками, приведенными в табл. 2.
В табл. 3 приведены биохимические свойства штаммов Escherichia coli. . В табл. 4 представлены признаки, характеризующие штаммы Proteus и Klebsiella.
Биохимические свойства штаммов Proteus и Klebsiella представлены в
табл. 5.
. В табл. 6 представлены признаки, характеризующие штамм Streptococcus
faecalis.
--
Биохимические свойства штамма Streptoco.ccus faecalis приведены в табл. 7.
- Q
5
0
0
-
Морфологические свойства выделенных штаммов можно обобщить следующим образом.
Escherichia coli: грамотрицатель- ные налочки, 1,1-1,5 2,0-6,ОЦ( м (жива  форма), подвижны благодар  жгутикам.
Proteus rairabilis и Proteus mor- ganii: грамотрицательные палочки, 0,4-0,60,1-3,0 без оболочки, подвижны , со жгутиками (не все).
Klebsiella pneumoniae: грамотрицательные , неподвижные палочки, 0,3- 1,5-0,6-6,0|UM.
Strept,ococcus faecalisi грамотрицательные шарообразные кокки, 0,5- 1,0 HIM, неподвижные.
Штаммы Escherichia coli исследуют затем на их серологические свойства, и дл  этой цели сначала на предметном стекле провод т тест на склеивание с многовалентными ОК-сьшоротками А, В, С, D, Е. Данные приведены в табл. 8, Указанные 10 штаммов депонированы в Центральном Бюро плесневых культур (Нвдерланды) под названи ми CBS 516.84 до CBS 525. переведены в немецкую коллекцию микгоорганизмов (ФРГ) под вход щими номерами DSM 3229-DSM 3238.
Дл  получени  вакцины штаммы отдельно культивируют на твердой или жидкой питательной ст)еде; предпочтительно примен ют твердую пита- . тельную среду, например питательный агар, который имеет следующий состав , г/л:
М сной экстракт (Difco Beef Extract )3 Бакто-пептон5 Хлористый натрий 5 Бакто-агар15 Среду стерилизуют в течение 15 мин при 121 С, она имеет рН около 7,2.
Дл  промьшшенного получени  примен ют Roux-баллоны, дл  получени  в лаборатории примен ют чашки Петри. Инокул цию осуществл ют при помощи посевного материала, несколько миллиметров которого равномерно распредел ют по всей поверхности. Roux-баллоны закрывают бумажной пробкой и среду хран т на складе инокулирован- ной поверхностью вниз. Инокулирован- ные культуры инкубиру5 зт в течение 24 ч при 37°С.
Поверхность разрастани  колонии бактерий смьЕвают необходимьгм количеством (в зависимости от плотности роста культуры в сосуде) буферного раствора фосфата - раствора хлористого натри  (PBS) при легком раскачивании , не наруша  поверхности агара.
Из каждого баллона или из каждой чашки Петри берут мазок, окрашивают по методу Грама и провер ют на чистоту . Баллоны или чашки Петри, которые окажутс  загр зненными, выбраго 2,5-10, всего 1,5-10 микробо.-;
Proteus mirabilis 1 штамм, 7,5-10
микробов; Proteus morganii . I штамм.
7,510
moniae
Stregtococcus faecali.s 1 штамм.
микробов; Klebsiella pneu- 1 штамм, 310 микробов;
10
5-10 микробов. Вместе - 2-10 микробов /мл.
Так как добавл ют алюминийфосфат- ный гель, концентраци  соответственно должна быть выше. Апюминийфосфат- ный гель получают следующим образом.
854 г калийалюминийсульфата «
сьшают. Суспензии, .которые происход т 15 х12 Н,0 раствор ют в 6л воды и филътот одного штамма или от сбора, смешивают с помощью стерильного сита из нейлоновой ткани.
Инактивирование, как и само культивирование , дл  каждого штамма провод т отдельно. Его можно осуществл ть нагреванием при температуре около 55-60 С в течение приблизительно I ч, обработкой раствором
руют. Затем раствор ют 685 г три- натрийфосфата 12 в 6 л воды. Раствор алюмини  выдерживают при 37 С. Оба раствора одновременно вы- 20 ливают в 21 л воды. Осадок центрифугируют , повторно суспендируют в 13 л воды и суспензию -снова центрифугируют .
Далее осадок повторно суспендим . - JCг-1 «« V «-. J.X i rnj V-.J IJ ИСГ1.ЦИ
формальдегида ипи облучением -лучами, 25 руют, довод т до общего объема 8,1
Полученные ЙИПМЯГ Г КТ ППО TTtlucrtrtfriггтлт-тчоtmr« t
Полученные биомассы соедин ют, инактивируют на вод ной бане при 6 С в течение 1 ч и после теплового инактивировани  добавл ют фенол (предельна  концентраци  0,35%).
Пробу суспензии берут дл  опыта на стерильность и дл  испытани  на идентичность и концентрированное запасное количество хран т в холодильном шкафу.
Если опыты на стерильность через ,3 дн  не показали никаких загр знений , процесс получени  ведут дальше . За опытом на стерильность наблюдают в течение 14 дней и если проба на стерильность показьшает рост каких-нибудь организмов, этот сбор устран ют.
Содержимые сборников (инактиви- рованные суспензии, которые происход т от одного щтамма) центрифугируют при 3000 об/мин в течение 1 ч в охлажденной центрифуге (Sorval 4 CR, центробежный ротор 2000), супернатант удал ют, и осадок бактерий суспендируют в растворе хлористого натри , который содержит 0,01% тиомерсал . Суспензию хран т при 4° (+2 с).
Концентрированные суспензии 10 штаммов Е. coli, Proteus mirabilis , Proteus morganis, Klebsiella pneumoniae. Streptococcus faecalis смешивают таким образом, что в 1 мл содержитс  Е. coli 6 штаммов, каждо30
литра, устанавливают при помощи 5 н. NaOH величину рН 6,0 и вьщержи- вают в автоклаве в течение 1 ч при 121 С. Этого количества достаточно.
35
40
45
50
чтобы получить 66 л вакцины с 3 мг А1Р04/МЛ или 0,66 мг А1/МЛ.
Адсорбированную вакцину после проверки величины рН, котора  должна составл ть 6,2-7,0, разливают в стерильные не содержащие пирогена ампулы емкостью 1 мл в количестве 0,5 мл на дозу. Вакцину во врем  разливани  взбалтьюают.
Общее число инактивированных микроорганизмов в одной дозе, т.е. 0,5 мл, составл ет около 1-10.
Наконец, вакцину испытывают:
на стерильность по Европейской фармакопее;
на токсичность по предписани м Всемирной организации здравоохранени  (прирост веса у мьш1и) ;
на ненормальную токсичность по Европейской фармакопее.
Вакцина может быть получена в лио- филизированной форме.
Концентрированную инактивированную. суспензию, полученную аналогично опи- gg санному, разбавл ют таким образом, чтобы она в 0,5 мл содержала около I lO инактивированных бактерий указанного состава. Дл  разбавлени  примен ют 1%-ный раствор гуманальбумина
52462
го 2,5-10, всего 1,5-10 микробо.-;
Proteus mirabilis 1 штамм, 7,5-10
микробов; Proteus morganii . I штамм.
7,510
moniae
Stregtococcus faecali.s 1 штамм.
микробов; Klebsiella pneu- 1 штамм, 310 микробов;
10
5-10 микробов. Вместе - 2-10 микробов /мл.
Так как добавл ют алюминийфосфат- ный гель, концентраци  соответственно должна быть выше. Апюминийфосфат- ный гель получают следующим образом.
854 г калийалюминийсульфата «
15 х12 Н,0 раствор ют в 6л воды и филътх12 Н,0 раствор ют в 6л воды и филътруют . Затем раствор ют 685 г три- натрийфосфата 12 в 6 л воды. Раствор алюмини  выдерживают при 37 С. Оба раствора одновременно вы- ливают в 21 л воды. Осадок центрифугируют , повторно суспендируют в 13 л воды и суспензию -снова центрифугируют .
Далее осадок повторно суспендиг-1 «« V «-. J.X i rnj V-.J IJ ИСГ1.ЦИ
руют, довод т до общего объема 8,1
ггтлт-тчоtmr« t
0
литра, устанавливают при помощи 5 н. NaOH величину рН 6,0 и вьщержи- вают в автоклаве в течение 1 ч при 121 С. Этого количества достаточно.
5
0
5
0
чтобы получить 66 л вакцины с 3 мг А1Р04/МЛ или 0,66 мг А1/МЛ.
Адсорбированную вакцину после проверки величины рН, котора  должна составл ть 6,2-7,0, разливают в стерильные не содержащие пирогена ампулы емкостью 1 мл в количестве 0,5 мл на дозу. Вакцину во врем  разливани  взбалтьюают.
Общее число инактивированных микроорганизмов в одной дозе, т.е. 0,5 мл, составл ет около 1-10.
Наконец, вакцину испытывают:
на стерильность по Европейской фармакопее;
на токсичность по предписани м Всемирной организации здравоохранени  (прирост веса у мьш1и) ;
на ненормальную токсичность по Европейской фармакопее.
Вакцина может быть получена в лио- филизированной форме.
Концентрированную инактивированную. суспензию, полученную аналогично опи- gg санному, разбавл ют таким образом, чтобы она в 0,5 мл содержала около I lO инактивированных бактерий указанного состава. Дл  разбавлени  примен ют 1%-ный раствор гуманальбумина
или заменител  плазмы с 0,01% тиомер- сал  в 0,85 н. растворе ЫаС1.
Флакончики объемом 2 мл наполн ют при стерильных услови х 0,5 мл описанной разбавленной суспензии, замораживают приблизительно при -45°С, после этого сушат в вакууме в лиофи- лизационном аппарате. Температура
штаммов бактерий сус1тендируют с 9 мл питательной среды и инкубируют культуру при 37°С в течение 24 ч. Вторую вспомогательную культуру примен  ют дл  приготовлени  антигенов. 600 мл питательной среды инокули- руют при помощи посевной культуры (каждый штамм отдельно). Культуры
сушки не должна превьш1ать +3б с. Весь 10 -инкубируют jipH З7 с в течение 36 ч. процесс лиофипизации продолжаетс  После этого добавл ют формалин до 24 ч. После лиофилизации флакончики закрьшают резиновыми пробками в атмосфере азота и алюминиевыми колпач15
ками.
Дл  введени  алюмиг..лйфосфата, одновременно используемого в качестве растворител  дл  повторного растворени , перед назначением примен ют водный алюминийфосфатный гель с концентрацией AlPG 2 мг/мл. Алюминий- фосфатный гель, прежде чем его разливают в ампулы, разбавл ют раствором хлористого натри  до такой степени (около 12 раз), чтобы конечна  концентраци  была 2 мг/мл.
Разливаемое количество в ампулы емкостью 1 мл составл ет 0,5 мл.
Дл  испытани  вакцины на стой- кость при хранении дважды определ ют ее способность к образованию антител
у МЬШ1И.
Иммунизаци  мышей.
Шести группам по 10 мышей кажда  (мужского пола, NMRl-штамм, вес 16- 20 г) провод т иммунизацию интрапери- тонеальным введением вакцины. Две дозы (0,5 мл вакцины) впрыскивают с интервалом в две недели. 20 мьшам из того же выращивани  и с таким же весом, которые служат в качестве контрольной группы, бпрыскивают только алюминийфосфатный гель (0,5 мл). Через две недели после второй инъек-. ции берут стерильно кровь и объедин ют по группам. После свертывани  получают сьшоротку от каждого объединени  центрифугированием и хран т при глубоком замораживании при -22°С до серологического испытани .
Приготовление антигенов (агглюти- ногенов).
Дев ть гомологических щтаммов бактерий, которые содержатс  в вакцине , примен ют дл  получени  антигенов; штамм ЕС 654 нельз  бьто агглютинировать (R-форма) и его нельз  примен ть в качестве агглютй- ногена. Лиофилизированные культуры
конечной концентрации 0,1%. Культуры инкубируют при 37°С в течение 7 дней Каждую культуру испытьшают после этого на отсутствие живых бактерий и на стерильность. Инактивированную суспензию бактерий центрифугируют в охлаждающей центрифуге в течение 1 ч при 3000 об/мин. Осадок повторно
20 суспендируют в буферном растворе фос фата - растворе хлористого натри  (рН 7,2) - так, чтобы достигнуть концентрации около 20-Ю бакте- рий/мл. Дл  пробы на агглютинацию
25 примен ют около 2-10 .бактерий/мл в качестве агглютиногена.
Опыт на агглютинацию.
Сыворотки мышей в 1:2-стади х разбавлени  развод т буферным раство30 ром фосфата - физиологическим раствором хлористого натри  с рН 7,2. По прошествии 1У ч при 37°С и остальных 24 ч при 4 С снимают показани  реакции. В качестве титра соответст2g вующей сыворотки принимают максимальное разбавление, при котором еще можно было установить видимую агглютинацию бактерий.
Дл  агглютининовых титров сьшоро40 ток мьшей были, найдены геометрические средние значени , приведенные в табл. 9.
Из этих результатов следует, что вакцина при хранении при 4°С сохран 45 ет свою полную эффективность по меньшей мере в течение двух лет.
Показани ми вакцины  вл ютс  особенно цистит, простатит, цистопиелит и пиелонефрит. .
5Q Пациенты, которью не имеют острого лихорадочного состо ни  (противопоказание ), получают с интервалами от 1 до 2 мес цев всего 3 внутримышечные инъекции по 0,5 мл вакцины.
gg При по влении сильных реакций на вакцину лечение следует прекратить.
Через год после этого следует провести ревакцинацию в той же дозе.
штаммов бактерий сус1тендируют с 9 мл питательной среды и инкубируют культуру при 37°С в течение 24 ч. Вторую вспомогательную культуру примен ют дл  приготовлени  антигенов. 600 мл питательной среды инокули- руют при помощи посевной культуры (каждый штамм отдельно). Культуры
инкубируют jipH З7 с в течение 36 ч. После этого добавл ют формалин до
-инкубируют jipH З7 с в течение 36 ч. После этого добавл ют формалин до
конечной концентрации 0,1%. Культуры инкубируют при 37°С в течение 7 дней, Каждую культуру испытьшают после этого на отсутствие живых бактерий и на стерильность. Инактивированную суспензию бактерий центрифугируют в охлаждающей центрифуге в течение 1 ч при 3000 об/мин. Осадок повторно
суспендируют в буферном растворе фосфата - растворе хлористого натри  (рН 7,2) - так, чтобы достигнуть концентрации около 20-Ю бакте- рий/мл. Дл  пробы на агглютинацию
примен ют около 2-10 .бактерий/мл в качестве агглютиногена.
Опыт на агглютинацию.:
Сыворотки мышей в 1:2-стади х разбавлени  развод т буферным раствором фосфата - физиологическим раствором хлористого натри  с рН 7,2. По прошествии 1У ч при 37°С и остальных 24 ч при 4 С снимают показани  реакции. В качестве титра соответствующей сыворотки принимают максимальное разбавление, при котором еще можно было установить видимую агглютинацию бактерий.
Дл  агглютининовых титров сьшороток мьшей были, найдены геометрические средние значени , приведенные в табл. 9.
Из этих результатов следует, что вакцина при хранении при 4°С сохран ет свою полную эффективность по меньшей мере в течение двух лет.
Показани ми вакцины  вл ютс  особенно цистит, простатит, цистопиелит и пиелонефрит. .
Пациенты, которью не имеют острого ихорадочного состо ни  (противопоказание ), получают с интервалами от 1 до 2 мес цев всего 3 внутримышечные инъекции по 0,5 мл вакцины.
При по влении сильных реакций на вакцину лечение следует прекратить.
Через год после этого следует проести ревакцинацию в той же дозе.

Claims (1)

  1. Формула изобретени 
    Способ получени  вакцины дл  профилактики и лечени  инфекции мочевых путей, заключающийс  в том, что используют дес ть уропатогенных штаммов бактерий, из которых шесть штаммов Escherichia coli Ее 455 UB, Ее 525 UB, ЕС 560 ив, ЕС 616 ив, ЕС 654 UB и ЕС 719 ив и по одному штамму Klebsi- ella pneumoniae 16В, Proteus mirabi- lis 63B, Proteus morganis 58B и
    Streptococcus faecalis 676, при этом все штаммы выращивают раздельно, ин- активируют тепловой обработкой при 55-60 С, или формальдегндом, или гамма-облучением, затем культуры смешивают, при этом конечна  концентраци  всех бактерий в вакцине составл ет 2-10 клеток/мл, полученную смесь бактерий сорбируют на фосфате алюмини  при концентрации его 1,5- 10 мг/мл вакцины и затем в целевой продукт добавл ют тиомерсаль.
    Таблица 1
    Подвижность Рост в KCN-среде Цитрат как С-источник
    Газообразный углевод глюкозы
    Кислота лактозы сахарозы мальтозы маннита треалозы ксилозы
    Желатиновый гидролиз Индол Уреаза
    Hj,S TS1
    (тройной агар сахара- железа)
    Лизиндегидрокарбокс шаза
    +
    - (d)
    + (d)
    + +
    (d)
    + +
    1452462
    Ферментаци  углеводов
    10 Таблица 2
    Штамм Escherichia coli
    Опыт
    455 ив 525 UB 560 UB 616 UB j 654 UB I 719 UB
    ро
    ечай
    О
    О О
    О
    О О
    I- + О О + +
    о о
    +
    о
    +
    о о
    о
    о
    о
    и е: + - положительна  за 24 ч;
    О - отрицательна  после 72 ч.
    Таблица 4 Ферментаци  углеводов
    О
    о о
    о
    о
    о
    о о
    +
    о
    +
    Галактоза
    Сорбит
    Арабиноза
    Глюкоза
    Манноза
    Фруктоза
    Адонит (рибит)
    примечание : + - кислота.
    Таблица 5
    Мочевина
    Гемолиз на пластинах крови с агаром
    Желатиновый гццролиз
    Цитрат Индол
    H,S
    о о
    О О + О
    о о
    + О О
    О
    о
    15
    Подвижность
    о
    ечание: + - положительна  за 24 ч; О -отрицательна  после 72 ч.
    Таблица Ферментаци  углеводов
    Лактоза
    Сахароза
    Маннит Мальтоза
    Мелибио- за
    Рафиноза
    Раьшоза
    Треалоза
    Салицин
    Рибоза
    Амигда- лин
    Галактоза
    Сорбит
    Араби- ноза
    Глюкоза Манкоза
    Фруктоза
    Адонит (рибит)
    Инозит Дульцит
    1452462
    Продолжение табл.5
    16
    + +
    О О
    + + + +
    + +
    о
    + +
    о
    о о
    17
    Целлоби- оза
    Ксилоза
    Примечание: + - кислота„
    Таблица 7
    Опыт
    Мочевина Тип гемолиза
    Желатиновый гидролиз
    Восстановление лакмусового молока
    Индол
    Эскулин
    Рост на питательной
    40% желчи
    6,5% хлористого
    натри рН 9,6 Теплостойкость
    60 С в течение
    30 мин
    Примечание: + О
    I
    1452462 18
    Продолжение табл.б
    + О
    Streptococcus faeca- lis 676
    О Негемолитический
    О
    положительный;
    отрицательный .
    не определен
    19
    145246220
    Таблица 9
SU853946994A 1984-08-31 1985-08-30 Способ получени вакцины дл профилактики и лечени инфекции мочевых путей SU1452462A3 (ru)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CH4181/84A CH664497A5 (de) 1984-08-31 1984-08-31 Vakzine zur behandlung der harnwegsinfektionen.

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SU1452462A3 true SU1452462A3 (ru) 1989-01-15

Family

ID=4271298

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SU853946994A SU1452462A3 (ru) 1984-08-31 1985-08-30 Способ получени вакцины дл профилактики и лечени инфекции мочевых путей

Country Status (16)

Country Link
US (1) US4606919A (ru)
EP (1) EP0173241B1 (ru)
JP (1) JPS6160618A (ru)
KR (1) KR890004019B1 (ru)
AT (1) ATE65409T1 (ru)
CA (1) CA1252722A (ru)
CH (1) CH664497A5 (ru)
DE (1) DE3583562D1 (ru)
DK (1) DK397085A (ru)
ES (1) ES8700939A1 (ru)
MX (1) MX7573E (ru)
PH (1) PH21873A (ru)
PL (1) PL145565B1 (ru)
PT (1) PT81063B (ru)
SU (1) SU1452462A3 (ru)
ZA (1) ZA856675B (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2020139311A1 (ru) * 2018-12-27 2020-07-02 Игорь Семёнович МАРКОВ Ешерихиозно-энтерококковая инактивированная жидкая вакцина «екопримавак» против кишечной палочки и энтерококков, способ ее изготовления, способ лечения и профилактики ею

Families Citing this family (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4736017A (en) * 1984-04-30 1988-04-05 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Chemically defined vaccine against urinary infections
US4740585A (en) * 1984-07-30 1988-04-26 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Synthetic vaccine against urinary infections
US4705686A (en) * 1986-05-09 1987-11-10 American Cyanamid Process for the preparation of acellular Bordetalla pertussis vaccine
US4762710A (en) * 1986-06-16 1988-08-09 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Novel method of preparing toxoid by oxidation and metal ions
US4725435A (en) * 1986-06-18 1988-02-16 Bactex, Inc. Vaccine composition for immunization against urinary tract infection caused by E. coli
IT1199301B (it) * 1986-11-21 1988-12-30 Belfanti Ist Sieroterap Milan Lisato antigenico batterico,procedimento per la sua preparazione e composizioni farmaceutiche che lo contengono
GB2261372A (en) * 1991-11-15 1993-05-19 Gregor Reid Lactobacillus and skim milk compositions for prevention of urogenital infection
US7135191B2 (en) 1997-09-04 2006-11-14 Zsolt Istvan Hertelendy Urogenital or anorectal transmucosal vaccine delivery system
US6099853A (en) * 1997-09-04 2000-08-08 Protein Express Vaginal suppository vaccine for urogenital infections
DE19933094A1 (de) 1999-07-15 2001-01-18 Herberts Gmbh & Co Kg Pigmentpasten, deren Herstellung und diese enthaltende kathodisch abscheidbare Überzugsmittel
AU2001264669A1 (en) * 2000-05-22 2001-12-03 Xin Li Proteus mirabilis-based vaccine
JP4672743B2 (ja) 2008-03-01 2011-04-20 株式会社東芝 誤り訂正装置および誤り訂正方法
WO2010124085A2 (en) * 2009-04-23 2010-10-28 Cornell University Compositions and methods for preventing and treating uterine disease
CA2879272A1 (en) 2012-07-16 2014-01-23 Robert G.K. DONALD Saccharides and uses thereof

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3183161A (en) * 1955-05-02 1965-05-11 Parke Davis & Co Aqueous resuspension vaccine product of aluminum phosphate-adsorbed poliomyelitis virus antigen, and production process
US3501770A (en) * 1967-04-13 1970-03-17 Lilly Co Eli Shipping fever vaccine
US3634198A (en) * 1968-02-27 1972-01-11 Andrew Truhan Detection of urinary tract infections
FR7461M (ru) * 1968-06-19 1970-01-05
FR2397839A1 (fr) * 1977-07-18 1979-02-16 Grimberg Georges Compose donnant un vaccin oral intestinal
US4298597A (en) * 1979-09-04 1981-11-03 University Of Saskatchewan Vaccine for diarrhea caused by E. coli
US4338298A (en) * 1980-04-04 1982-07-06 Endowment And Research Foundation At Montana State University Vaccine for passive immunization against enteric colibacillosis and method of use
DE3172030D1 (en) * 1980-09-15 1985-10-03 Bactex Inc Immunization of humans against enterotoxogenic infection by escherichia coli

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Аналогов в патентной и научно- технической литературе не обнаружено, *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2020139311A1 (ru) * 2018-12-27 2020-07-02 Игорь Семёнович МАРКОВ Ешерихиозно-энтерококковая инактивированная жидкая вакцина «екопримавак» против кишечной палочки и энтерококков, способ ее изготовления, способ лечения и профилактики ею

Also Published As

Publication number Publication date
DK397085D0 (da) 1985-08-30
CA1252722A (en) 1989-04-18
PT81063A (en) 1985-09-01
MX7573E (es) 1989-11-09
ATE65409T1 (de) 1991-08-15
DK397085A (da) 1986-03-01
CH664497A5 (de) 1988-03-15
PH21873A (en) 1988-03-25
PL255193A1 (en) 1986-07-15
PL145565B1 (en) 1988-10-31
ZA856675B (en) 1986-04-30
EP0173241A3 (en) 1988-07-27
DE3583562D1 (de) 1991-08-29
JPS6160618A (ja) 1986-03-28
PT81063B (pt) 1988-01-22
EP0173241B1 (de) 1991-07-24
EP0173241A2 (de) 1986-03-05
KR890004019B1 (ko) 1989-10-16
ES8700939A1 (es) 1986-11-16
ES546584A0 (es) 1986-11-16
US4606919A (en) 1986-08-19
KR870002254A (ko) 1987-03-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
SU1452462A3 (ru) Способ получени вакцины дл профилактики и лечени инфекции мочевых путей
Rimler Studies of the pathogenic avian haemophili
Blackall The avian haemophili
Carter A serological study of Pasteurella haemolytica
US4472378A (en) Live vaccine for the prevention of salmonellosis in water fowl, a process for making and applying the same
US3401219A (en) Moraxella bovis infectious bovine keratoconjunctivitis steam-killed bacterin
Schade et al. The preparation of a polyvalent dysentery bacteriophage in a dry and stable form: I. Preliminary investigations and general procedures
GB2023420A (en) Preparations containing antigen from pasteurella haemolytica
Corbel Microbiological aspects
CN116983419B (zh) 一种通用型耐热冻干保护剂及其制备方法
US4770875A (en) Process for preparation of improved mutant strain of Bordetella bronchiseptica useful for live attenuated vaccine for protection of B. bronchiseptica infection and live attenuated AR vaccine produced therefrom
CN114042153B (zh) 一种奶牛乳房炎多联灭活疫苗及其制备方法和应用
Simmons et al. Partial characterization of the hemagglutinin of Alcaligenes faecalis
RU2799603C1 (ru) Штамм "SA-21" бактерии рода Streptococcus вида Streptococcus agalactiae для изготовления биопрепаратов для специфической профилактики мастита коров
RU2818959C1 (ru) Штамм бактерии Pasteurella multocida "РМ - В" для изготовления биопрепаратов для специфической профилактики пастереллеза (геморрагической септицемии) крупного рогатого скота, вызванного пастереллой серогруппы В
CN107523529B (zh) 一种利用大肠杆菌生产肠杆菌肽的工艺及其应用
SU1669980A1 (ru) Штамм бактерий VIвRIо сноLеRае сноLеRае - продуцент дермонекротического фактора
CN118599697A (zh) 一株绵羊支原体菌株及其应用
CA1189790A (en) Process and a substrate for the aerobic fermentation of haemophilus pleuropneumoniae
Preston Influence of challenge strain on potency of pertussis vaccines in mice
SU1668387A1 (ru) Штамм бактерий VIвRIо NaG серовара 079, используемый дл приготовлени моноварной диагностической сыворотки
KR800001361B1 (ko) 용연균제제(溶連菌製劑)의 제법
RU2096042C1 (ru) Способ получения поливалентной вакцины против лептоспироза животных
SU1726510A1 (ru) Штамм бактерий VIвRIо NaG 083 серовара, используемый дл приготовлени моноварной диагностической сыворотки
CN117338916A (zh) 猪a型塞内卡病毒、猪水泡性口炎病毒二联灭活疫苗及其制备方法