SU1405691A3 - Способ получени человеческого гамма-интерферона - Google Patents
Способ получени человеческого гамма-интерферона Download PDFInfo
- Publication number
- SU1405691A3 SU1405691A3 SU833624508A SU3624508A SU1405691A3 SU 1405691 A3 SU1405691 A3 SU 1405691A3 SU 833624508 A SU833624508 A SU 833624508A SU 3624508 A SU3624508 A SU 3624508A SU 1405691 A3 SU1405691 A3 SU 1405691A3
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- interferon
- gamma
- leukocytes
- alpha
- cells
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/52—Cytokines; Lymphokines; Interferons
- C07K14/555—Interferons [IFN]
- C07K14/57—IFN-gamma
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
(21) (86) (22) (31) (32) (33) (46) (71) (72)
3624508/28-14 РСТ/Ни 82/00064 26.07,83 3594/81 01.12.81
ни
23.06.88.
(30.11.82)
Бюл. № 23
Эдьт Дьёдьсерведьесети Дь р (HU) Илона Белади, Миклош Тот, Ишт- ван Ростоци, Шандор Тот и Валериа Эн- дрес (ни)
(53) 615.45(088.8) (56) J. Immunol, 1980, 10, 877. Virology, Т961, 14, 359.
(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЧЕЛОВЕЧЕСКОГО ГАММА-ШТЕРФЕРОНА
(57) Изобретение относитс к медици- .не, точнее к фармацевтической промышленности , а именно к получению v-интерферона . Цель изобретени - повышение выхода целевого продукта путем дополнительной обработки лейкоцитов или -интерфероном в количестве 500-5000 IE/мл в течение 1-12 ч. Затем обрабатывают лейкоциты митогене- ,. тическим агентом И центрифугируют. Удал ют эритроциты 0,83-0,89%-ным водным р-ром хлористого аммони , Суспендируют лейкоциты в питательной среде, содержащей хлористый кальций, нитрат железа, хлористый калий, сульфат магни , гептагидрат, хлористый натрий, кислый углекислый натрий, дигидрат однозамещенного фосфата натри и глюкозу.
О)
с
ел
Од СО
СМ
; Изобретение относитс к области медицины, в частности к фармацевти- 1ческой промышленности гамма-интерферона . I Целью изобретени вл етс повы- иение выхода целевого продукта за счет дополнительной обработки лейког, цитов альфа- или бета-интерфероном.
Способ осуществл етс следующим образом.
Пример 1, Кровь, полученную в растворе ЛКД (водньй раствор, содержащий лимонную кийлоту и декстрозу ) ,хран т в течение 3 ч при тем- пературе , Фракцию лейкоцитов отдел ют центрифугированием и оставл - ;от сто ть в течение ночи при темпе- эатуре . Затем одну съемную часть полученного таким образом концентра- га лейкоцитов смешивают с 5 мае,ч, ),89%-ного водного раствора хлористого аммони при температуре 4°С л вьщерживают суспензию до полного ;застворени эритроцитов (обычно этот лроцесс заканчиваетс через 5-10 мин 1осле чего лейкоциты отдел ют центри ( )угированием Ич суспендируют в питательной среде следующего состава, мг/л:
Хлористый кальций 265 Нитрат железаО,1
Хлористый калий 400 Сульфат магни ,
.гептагидрат200
Хлористый натрий 6400 1 Кислый углекислый I натрий2750
Дигидрат однозамещенного фосфата
натри 140
Глюкозл4500
После этого вновь провод т удале- i|iHe эритроцитов, использу при этом |0 . 0,83%-ного водного раствора :|шористого аммони . Лейкоциты. суспен ;(щруют в питательном растворе, довод Концентрацию клеток в нем до 0 кле фок/мл, В питательный раствор, кроме }|пказанных ингредиентов, добавл ют i мг/мл агамной сыворотки человека и :И мкг/мл неомицина. Полученные кает |си подвергают обработке в течение 4 ч при температуре 37°С и посто нг перемешивании альфа-интерфероном количестве 1500 IE, обработанным Предварительно при рН 2,0 дл удале- ) из него вируса Sendai, Затем ьфа-интерферон удал ют путем двухкратного промывани клеток раствором Хзнкса и добавл ют к ним конкавалин в количестве 15 мкг/мл, выдержива их при температуре в течение 12 ч. После этого клетки отдел ют от надосадочного сло центрифугированием Выхдд гамма-интерферона в неочищенном надосадочном слое равен 1666 IE/МП.
Дл сравнени процесс проводили таким же образом, но перед добавлением индуктора лейкоциты не подвергали предварительной обработке альфа- интерфероном. В этом случае выход гамма-интерферона равен 216 lE/ivui,
Пример 2, Процесс провод т по примеру 1 с той лишь разницей, что в качестве питательного раствора используют среду MEM типа Hasgow (Virology, J4, 359, 1961), при этом выход гамма-интерферона в неочищенном виде составл ет 1600 IE/мл,
Описанньй процесс повтор ют за исключением стадии обработки альфа- интерфероном. Содержание активного вещества в неочищенном интерфероне, получевном таким образом, равно лишь 206 IE/мл,
Пример 3. Процесс.провод т по примеру 1 с той разницей, что используемый дл дополнительной обработки альфа-интерферон не удал ют. Обработанные альфа-интерфероном клетки выдерживают в присутствии конка- валина А (концентраци 15 мкг/мп) при 37 С в течение 12 ч при посто нном перемешивании. Содержание интерферона в надосадочной жидкости составл ет 1733 IE/мл,
Полученный в результате продукт, содержащий альфа- и гамма-интерферон раздел ют на отдельные компоненты с помощью хрЬматографии. Дл этого сырой продукт ввод т в колонку, заполненную насадкой из CPG-стекла. Альфа интерферон и примеси проход т через колонку, а гамма-интерферон задерживаетс , Элюирование гамма-интерферона осуществл ют с помощью водного раствора, содержащего 20 об,ч« эти- ленгликол , 150 ммоль хлористого натри и 20 ммоль фосфатного буфера.
Пример 4, Процесс провод т аналогично примеру 1 с той разницей, что дл предварительной обработки вместо альфа-интерферона используют 2500 IE/мл бета-интерферона. Содержание гамма-интерферона в пЬлучаемом
при этом сыром продукте составл ет 1866 IE/МП.
Повтор ют описанный процесс за исключением стадии предварительной обработки бета-интерфероном. Содержание активного вещества в неочищенном интерфероне, полученном таким образом, составл ет 226 IE/мл.
Пример 5. Получение гамма- интерферона провод т по примеру 1 с той лишь разницей, что предваритель ную обработку провод т альфа-интерфероном в концентрации 500 1Е/мп, при этом гамма-интерферона получено в количестве 700 IE/мл.
Пример 6. Процесс провод т по примеру 1, только дл предварителной обработки использунзт бета-интерферон в концентрации 500 IE/мл, при этом выход гамма-интерферона составл ет 1000 IE/мл.
Пример 7. Процесс провод т по примеру 1 с той лишь разницей, что дл обработки лейкоцитов используют альфа-интерферон в концентрации 5000 IE/МП, при этом выход гамма-интерферона составл ет 300 IE/мл.
Пример 8. Получение гамма- интерферона провод т по примеру 1, при этом обработку лейкоцитов провод т бета-интерфероном .концентрации 5000 IE/мл. Выход гамма-интерферона в данном случае составл ет 1000 IE/м
При проведении обработки лейкоцитов альфа- или бета-интерферонов в течение 30 мин, а не 4 ч как в примере 1, производство гамма-интерферона снижаетс при этом от 1500 до
1А05691
250 IE/МП, а проведение ее в течение 15 ч не превьшает выхода гамма-интер- . .ферона, равного 1550 IE/мл.
Преимущество предлагаемого способа заключаетс в том, что благодар предварительной обработке . или бета-интерфероном, выход гамма- интерферона возрастает в 5-10 раз. ич По своим физико-химическим свойствам (чувствительности при рН 2,0; стабильности , определенной при 56 и ) и биологической активности (антивирусное и противоклеточное действие), полученный предлагаемым способом гамма-интерферон полностью эквивалентен гамма-интерферону, полученному известным способом.
Claims (1)
- Формула изобретениСпособ получени человеческого гамма-интерферона путем вьщелени з крови фракции лейкоцитов, удалени эритроцитов, суспендировани ейкоцитов в питательной среде, с последующей обработкой их митогене- тическим агентом и отделением клеток центрифугированием, о т л и - чающийс тем, что, с целью повышени выхода целевого продукта, удаление эритроцитов провод т 0,83 - 0,89%-ным водным раствором хлористого аммони , а перед обработкой мито- генетическим агентом лейкоциты.обрабатывают альфа- или бета-интерфероном в количестве 500-5000 IE/мл в течение 1-12 ч.
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
HU813594A HU184972B (en) | 1981-12-01 | 1981-12-01 | Process for preparing human gamma interferone |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
SU1405691A3 true SU1405691A3 (ru) | 1988-06-23 |
Family
ID=10964703
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SU833624508A SU1405691A3 (ru) | 1981-12-01 | 1983-07-26 | Способ получени человеческого гамма-интерферона |
Country Status (9)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPS58502032A (ru) |
AU (1) | AU551964B2 (ru) |
CH (1) | CH658391A5 (ru) |
DE (1) | DE3249215C2 (ru) |
FI (1) | FI74978C (ru) |
GB (1) | GB2123007B (ru) |
HU (1) | HU184972B (ru) |
SU (1) | SU1405691A3 (ru) |
WO (1) | WO1983001899A1 (ru) |
Families Citing this family (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP0145775B1 (en) * | 1983-06-13 | 1989-02-08 | Ragnvald Erik Lindblom | A METHOD OF TREATING INTERFERON SENSITIVE DISEASES, AND A METHOD AND A DEVICE FOR PREPARING A $g(g)-INTERFERON CONTAINING PREPARATION |
HU192254B (en) * | 1983-12-13 | 1987-05-28 | Egyt Gyogyszervegyeszeti Gyar | Process for producing human leucocite and human gamma interferons in consecutive steps |
DE3482092D1 (de) * | 1984-09-21 | 1990-06-07 | Vnii Osobo Cistych Biopreparat | Verfahren zur gewinnung menschlichen leukozyten-interferons. |
JP2969461B2 (ja) * | 1988-07-23 | 1999-11-02 | 株式会社林原生物化学研究所 | ヒトγ−インターフェロンとその製造方法並びに用途 |
HU201100B (en) * | 1988-03-04 | 1990-09-28 | Egyt Gyogyszervegyeszeti Gyar | Process for large-scale production of high purity human leukocyte alpha interferon with reduced endotoxin content and with improved therapeutic effect |
DE102012209673A1 (de) | 2012-06-08 | 2013-12-24 | Artcline Gmbh | Verfahren zum Herstellen einer Leukozytenpräparation und Leukozytenpräparation |
Family Cites Families (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3970749A (en) * | 1973-04-03 | 1976-07-20 | Baugh Clarence L | Interferon production |
FR2244543B1 (ru) * | 1973-07-27 | 1977-07-01 | Inst Nl Sante Rech Medica | |
GB1464939A (en) * | 1974-01-11 | 1977-02-16 | Anvar | Process for the production of interferon |
CS215108B2 (en) * | 1977-07-15 | 1982-07-30 | Wellcome Found | Method of making the interferrone |
SU839547A1 (ru) * | 1979-04-06 | 1981-06-23 | Всесоюзный Научно-Исследовательскийинститут Биологического Приборострое-Ния | Способ получени лейкоцитарногоиНТЕРфЕРОНА |
-
1981
- 1981-12-01 HU HU813594A patent/HU184972B/hu not_active IP Right Cessation
-
1982
- 1982-11-30 DE DE19823249215 patent/DE3249215C2/de not_active Expired - Lifetime
- 1982-11-30 WO PCT/HU1982/000064 patent/WO1983001899A1/en active IP Right Grant
- 1982-11-30 CH CH4287/83A patent/CH658391A5/de not_active IP Right Cessation
- 1982-11-30 JP JP83500009A patent/JPS58502032A/ja active Pending
- 1982-11-30 GB GB08320371A patent/GB2123007B/en not_active Expired
- 1982-11-30 AU AU10174/83A patent/AU551964B2/en not_active Ceased
-
1983
- 1983-07-08 FI FI832508A patent/FI74978C/fi not_active IP Right Cessation
- 1983-07-26 SU SU833624508A patent/SU1405691A3/ru active
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
FI832508L (fi) | 1983-07-08 |
HU184972B (en) | 1984-11-28 |
WO1983001899A1 (en) | 1983-06-09 |
CH658391A5 (de) | 1986-11-14 |
FI832508A0 (fi) | 1983-07-08 |
DE3249215C2 (de) | 1990-06-13 |
GB2123007B (en) | 1985-01-30 |
FI74978B (fi) | 1987-12-31 |
AU551964B2 (en) | 1986-05-15 |
FI74978C (fi) | 1988-04-11 |
AU1017483A (en) | 1983-06-17 |
DE3249215T1 (de) | 1983-11-17 |
GB8320371D0 (en) | 1983-09-01 |
GB2123007A (en) | 1984-01-25 |
JPS58502032A (ja) | 1983-12-01 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Broome | Evidence that the L-asparaginase of guinea pig serum is responsible for its antilymphoma effects: I. Properties of the L-asparaginase of guinea pig serum in relation to those of the antilymphoma substance | |
US4376821A (en) | Production of human IFN-gamma (immune) interferon | |
US4465669A (en) | Angiotropins of leukocytes and inflamed tissue, process for their biotechnical preparation, and pharmaceutical compositions thereof | |
EP0061141B1 (en) | Chemokinesins and chemotaxins of leukocytes and inflamed tissues: natural mediator proteins for reversible promotion of random and directional locomotion (chemokinesis and chemotaxis) for accumulation of specific leukocyte types, process of their biotechnical preparation and pharmaceutical compositions | |
SU1405691A3 (ru) | Способ получени человеческого гамма-интерферона | |
US3800035A (en) | Production of interferon from human leukocytes in the absence of serum | |
JPH0112760B2 (ru) | ||
JPS6154040B2 (ru) | ||
SU1713591A1 (ru) | Способ получени человеческого лейкоцитарного интерферона | |
JPS6079000A (ja) | ヒトγ型インタ−フエロン単量体の製造法 | |
DE69232259T2 (de) | Verfahren zur Herstellung von Interleukin-6 Zusammensetzungen | |
US4512971A (en) | Mitogens of leukocytes and inflamed tissues | |
CS251766B2 (en) | Method of interferon production | |
Abrams et al. | Effect of ascorbic acid on rheumatoid synovial fluid | |
Tamura et al. | Induction of human γ interferon by Sarcophaga peregrina humoral lectin | |
EP0197149B1 (de) | Verfahren zur gewinnung menschlichen leukozyten-interferons | |
Wislöff et al. | Studies on the cytotoxic activity of human lymphoid cells activated by concanavalin A | |
EP0260497A2 (en) | Lectin like protein substance having anti-tumor action | |
Astrup et al. | Haemostatic mechanisms in the animal arterial wall | |
OHNISHI | Interaction between adenosine triphosphate and potassium chloride-soluble proteins of sea urchin eggs | |
GB1253328A (en) | PURIFICATION OF gamma GLOBULIN | |
DE4133707A1 (de) | Verfahren zur reinigung von streptolysin o, intaktes streptolysin o erhaeltlich nach diesem verfahren und seine verwendung | |
AT391482B (de) | Verfahren zur industriellen herstellung von hochreinem menschlichem leukozyteninterferon | |
JD | Evidence that the L-asparaginase of guinea pig serum is responsible for its antilymphoma effects. I. Properties of the L-asparaginase of guinea pig serum in relation to those of the antilymphoma substance. | |
Reuter et al. | Strain and sex dependency of pre-albumin in mice |