SU1405691A3 - Способ получени человеческого гамма-интерферона - Google Patents

Способ получени человеческого гамма-интерферона Download PDF

Info

Publication number
SU1405691A3
SU1405691A3 SU833624508A SU3624508A SU1405691A3 SU 1405691 A3 SU1405691 A3 SU 1405691A3 SU 833624508 A SU833624508 A SU 833624508A SU 3624508 A SU3624508 A SU 3624508A SU 1405691 A3 SU1405691 A3 SU 1405691A3
Authority
SU
USSR - Soviet Union
Prior art keywords
interferon
gamma
leukocytes
alpha
cells
Prior art date
Application number
SU833624508A
Other languages
English (en)
Inventor
Белади Илона
Тот Миклош
Ростоци Иштван
Тот Шандор
Эндрес Валериа
Original Assignee
Эдьт Дьедьсерведьесети Дьяр (Инопредприятие)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Эдьт Дьедьсерведьесети Дьяр (Инопредприятие) filed Critical Эдьт Дьедьсерведьесети Дьяр (Инопредприятие)
Application granted granted Critical
Publication of SU1405691A3 publication Critical patent/SU1405691A3/ru

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K14/00Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/52Cytokines; Lymphokines; Interferons
    • C07K14/555Interferons [IFN]
    • C07K14/57IFN-gamma

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Description

(21) (86) (22) (31) (32) (33) (46) (71) (72)
3624508/28-14 РСТ/Ни 82/00064 26.07,83 3594/81 01.12.81
ни
23.06.88.
(30.11.82)
Бюл. № 23
Эдьт Дьёдьсерведьесети Дь р (HU) Илона Белади, Миклош Тот, Ишт- ван Ростоци, Шандор Тот и Валериа Эн- дрес (ни)
(53) 615.45(088.8) (56) J. Immunol, 1980, 10, 877. Virology, Т961, 14, 359.
(54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ЧЕЛОВЕЧЕСКОГО ГАММА-ШТЕРФЕРОНА
(57) Изобретение относитс  к медици- .не, точнее к фармацевтической промышленности , а именно к получению v-интерферона . Цель изобретени  - повышение выхода целевого продукта путем дополнительной обработки лейкоцитов или -интерфероном в количестве 500-5000 IE/мл в течение 1-12 ч. Затем обрабатывают лейкоциты митогене- ,. тическим агентом И центрифугируют. Удал ют эритроциты 0,83-0,89%-ным водным р-ром хлористого аммони , Суспендируют лейкоциты в питательной среде, содержащей хлористый кальций, нитрат железа, хлористый калий, сульфат магни , гептагидрат, хлористый натрий, кислый углекислый натрий, дигидрат однозамещенного фосфата натри  и глюкозу.
О)
с
ел
Од СО
СМ
; Изобретение относитс  к области медицины, в частности к фармацевти- 1ческой промышленности гамма-интерферона . I Целью изобретени   вл етс  повы- иение выхода целевого продукта за счет дополнительной обработки лейког, цитов альфа- или бета-интерфероном.
Способ осуществл етс  следующим образом.
Пример 1, Кровь, полученную в растворе ЛКД (водньй раствор, содержащий лимонную кийлоту и декстрозу ) ,хран т в течение 3 ч при тем- пературе , Фракцию лейкоцитов отдел ют центрифугированием и оставл - ;от сто ть в течение ночи при темпе- эатуре . Затем одну съемную часть полученного таким образом концентра- га лейкоцитов смешивают с 5 мае,ч, ),89%-ного водного раствора хлористого аммони  при температуре 4°С л вьщерживают суспензию до полного ;застворени  эритроцитов (обычно этот лроцесс заканчиваетс  через 5-10 мин 1осле чего лейкоциты отдел ют центри ( )угированием Ич суспендируют в питательной среде следующего состава, мг/л:
Хлористый кальций 265 Нитрат железаО,1
Хлористый калий 400 Сульфат магни ,
.гептагидрат200
Хлористый натрий 6400 1 Кислый углекислый I натрий2750
Дигидрат однозамещенного фосфата
натри  140
Глюкозл4500
После этого вновь провод т удале- i|iHe эритроцитов, использу  при этом |0 . 0,83%-ного водного раствора :|шористого аммони . Лейкоциты. суспен ;(щруют в питательном растворе, довод Концентрацию клеток в нем до 0 кле фок/мл, В питательный раствор, кроме }|пказанных ингредиентов, добавл ют i мг/мл агамной сыворотки человека и :И мкг/мл неомицина. Полученные кает |си подвергают обработке в течение 4 ч при температуре 37°С и посто нг перемешивании альфа-интерфероном количестве 1500 IE, обработанным Предварительно при рН 2,0 дл  удале- )  из него вируса Sendai, Затем ьфа-интерферон удал ют путем двухкратного промывани  клеток раствором Хзнкса и добавл ют к ним конкавалин в количестве 15 мкг/мл, выдержива  их при температуре в течение 12 ч. После этого клетки отдел ют от надосадочного сло  центрифугированием Выхдд гамма-интерферона в неочищенном надосадочном слое равен 1666 IE/МП.
Дл  сравнени  процесс проводили таким же образом, но перед добавлением индуктора лейкоциты не подвергали предварительной обработке альфа- интерфероном. В этом случае выход гамма-интерферона равен 216 lE/ivui,
Пример 2, Процесс провод т по примеру 1 с той лишь разницей, что в качестве питательного раствора используют среду MEM типа Hasgow (Virology, J4, 359, 1961), при этом выход гамма-интерферона в неочищенном виде составл ет 1600 IE/мл,
Описанньй процесс повтор ют за исключением стадии обработки альфа- интерфероном. Содержание активного вещества в неочищенном интерфероне, получевном таким образом, равно лишь 206 IE/мл,
Пример 3. Процесс.провод т по примеру 1 с той разницей, что используемый дл  дополнительной обработки альфа-интерферон не удал ют. Обработанные альфа-интерфероном клетки выдерживают в присутствии конка- валина А (концентраци  15 мкг/мп) при 37 С в течение 12 ч при посто нном перемешивании. Содержание интерферона в надосадочной жидкости составл ет 1733 IE/мл,
Полученный в результате продукт, содержащий альфа- и гамма-интерферон раздел ют на отдельные компоненты с помощью хрЬматографии. Дл  этого сырой продукт ввод т в колонку, заполненную насадкой из CPG-стекла. Альфа интерферон и примеси проход т через колонку, а гамма-интерферон задерживаетс , Элюирование гамма-интерферона осуществл ют с помощью водного раствора, содержащего 20 об,ч« эти- ленгликол , 150 ммоль хлористого натри  и 20 ммоль фосфатного буфера.
Пример 4, Процесс провод т аналогично примеру 1 с той разницей, что дл  предварительной обработки вместо альфа-интерферона используют 2500 IE/мл бета-интерферона. Содержание гамма-интерферона в пЬлучаемом
при этом сыром продукте составл ет 1866 IE/МП.
Повтор ют описанный процесс за исключением стадии предварительной обработки бета-интерфероном. Содержание активного вещества в неочищенном интерфероне, полученном таким образом, составл ет 226 IE/мл.
Пример 5. Получение гамма- интерферона провод т по примеру 1 с той лишь разницей, что предваритель ную обработку провод т альфа-интерфероном в концентрации 500 1Е/мп, при этом гамма-интерферона получено в количестве 700 IE/мл.
Пример 6. Процесс провод т по примеру 1, только дл  предварителной обработки использунзт бета-интерферон в концентрации 500 IE/мл, при этом выход гамма-интерферона составл ет 1000 IE/мл.
Пример 7. Процесс провод т по примеру 1 с той лишь разницей, что дл  обработки лейкоцитов используют альфа-интерферон в концентрации 5000 IE/МП, при этом выход гамма-интерферона составл ет 300 IE/мл.
Пример 8. Получение гамма- интерферона провод т по примеру 1, при этом обработку лейкоцитов провод т бета-интерфероном .концентрации 5000 IE/мл. Выход гамма-интерферона в данном случае составл ет 1000 IE/м
При проведении обработки лейкоцитов альфа- или бета-интерферонов в течение 30 мин, а не 4 ч как в примере 1, производство гамма-интерферона снижаетс  при этом от 1500 до
1А05691
250 IE/МП, а проведение ее в течение 15 ч не превьшает выхода гамма-интер- . .ферона, равного 1550 IE/мл.
Преимущество предлагаемого способа заключаетс  в том, что благодар  предварительной обработке . или бета-интерфероном, выход гамма- интерферона возрастает в 5-10 раз. ич По своим физико-химическим свойствам (чувствительности при рН 2,0; стабильности , определенной при 56 и ) и биологической активности (антивирусное и противоклеточное действие), полученный предлагаемым способом гамма-интерферон полностью эквивалентен гамма-интерферону, полученному известным способом.

Claims (1)

  1. Формула изобретени 
    Способ получени  человеческого гамма-интерферона путем вьщелени  з крови фракции лейкоцитов, удалени  эритроцитов, суспендировани  ейкоцитов в питательной среде, с последующей обработкой их митогене- тическим агентом и отделением клеток центрифугированием, о т л и - чающийс  тем, что, с целью повышени  выхода целевого продукта, удаление эритроцитов провод т 0,83 - 0,89%-ным водным раствором хлористого аммони , а перед обработкой мито- генетическим агентом лейкоциты.обрабатывают альфа- или бета-интерфероном в количестве 500-5000 IE/мл в течение 1-12 ч.
SU833624508A 1981-12-01 1983-07-26 Способ получени человеческого гамма-интерферона SU1405691A3 (ru)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
HU813594A HU184972B (en) 1981-12-01 1981-12-01 Process for preparing human gamma interferone

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SU1405691A3 true SU1405691A3 (ru) 1988-06-23

Family

ID=10964703

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SU833624508A SU1405691A3 (ru) 1981-12-01 1983-07-26 Способ получени человеческого гамма-интерферона

Country Status (9)

Country Link
JP (1) JPS58502032A (ru)
AU (1) AU551964B2 (ru)
CH (1) CH658391A5 (ru)
DE (1) DE3249215C2 (ru)
FI (1) FI74978C (ru)
GB (1) GB2123007B (ru)
HU (1) HU184972B (ru)
SU (1) SU1405691A3 (ru)
WO (1) WO1983001899A1 (ru)

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0145775B1 (en) * 1983-06-13 1989-02-08 Ragnvald Erik Lindblom A METHOD OF TREATING INTERFERON SENSITIVE DISEASES, AND A METHOD AND A DEVICE FOR PREPARING A $g(g)-INTERFERON CONTAINING PREPARATION
HU192254B (en) * 1983-12-13 1987-05-28 Egyt Gyogyszervegyeszeti Gyar Process for producing human leucocite and human gamma interferons in consecutive steps
DE3482092D1 (de) * 1984-09-21 1990-06-07 Vnii Osobo Cistych Biopreparat Verfahren zur gewinnung menschlichen leukozyten-interferons.
JP2969461B2 (ja) * 1988-07-23 1999-11-02 株式会社林原生物化学研究所 ヒトγ−インターフェロンとその製造方法並びに用途
HU201100B (en) * 1988-03-04 1990-09-28 Egyt Gyogyszervegyeszeti Gyar Process for large-scale production of high purity human leukocyte alpha interferon with reduced endotoxin content and with improved therapeutic effect
DE102012209673A1 (de) 2012-06-08 2013-12-24 Artcline Gmbh Verfahren zum Herstellen einer Leukozytenpräparation und Leukozytenpräparation

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3970749A (en) * 1973-04-03 1976-07-20 Baugh Clarence L Interferon production
FR2244543B1 (ru) * 1973-07-27 1977-07-01 Inst Nl Sante Rech Medica
GB1464939A (en) * 1974-01-11 1977-02-16 Anvar Process for the production of interferon
CS215108B2 (en) * 1977-07-15 1982-07-30 Wellcome Found Method of making the interferrone
SU839547A1 (ru) * 1979-04-06 1981-06-23 Всесоюзный Научно-Исследовательскийинститут Биологического Приборострое-Ния Способ получени лейкоцитарногоиНТЕРфЕРОНА

Also Published As

Publication number Publication date
FI832508L (fi) 1983-07-08
HU184972B (en) 1984-11-28
WO1983001899A1 (en) 1983-06-09
CH658391A5 (de) 1986-11-14
FI832508A0 (fi) 1983-07-08
DE3249215C2 (de) 1990-06-13
GB2123007B (en) 1985-01-30
FI74978B (fi) 1987-12-31
AU551964B2 (en) 1986-05-15
FI74978C (fi) 1988-04-11
AU1017483A (en) 1983-06-17
DE3249215T1 (de) 1983-11-17
GB8320371D0 (en) 1983-09-01
GB2123007A (en) 1984-01-25
JPS58502032A (ja) 1983-12-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Broome Evidence that the L-asparaginase of guinea pig serum is responsible for its antilymphoma effects: I. Properties of the L-asparaginase of guinea pig serum in relation to those of the antilymphoma substance
US4376821A (en) Production of human IFN-gamma (immune) interferon
US4465669A (en) Angiotropins of leukocytes and inflamed tissue, process for their biotechnical preparation, and pharmaceutical compositions thereof
EP0061141B1 (en) Chemokinesins and chemotaxins of leukocytes and inflamed tissues: natural mediator proteins for reversible promotion of random and directional locomotion (chemokinesis and chemotaxis) for accumulation of specific leukocyte types, process of their biotechnical preparation and pharmaceutical compositions
SU1405691A3 (ru) Способ получени человеческого гамма-интерферона
US3800035A (en) Production of interferon from human leukocytes in the absence of serum
JPH0112760B2 (ru)
JPS6154040B2 (ru)
SU1713591A1 (ru) Способ получени человеческого лейкоцитарного интерферона
JPS6079000A (ja) ヒトγ型インタ−フエロン単量体の製造法
DE69232259T2 (de) Verfahren zur Herstellung von Interleukin-6 Zusammensetzungen
US4512971A (en) Mitogens of leukocytes and inflamed tissues
CS251766B2 (en) Method of interferon production
Abrams et al. Effect of ascorbic acid on rheumatoid synovial fluid
Tamura et al. Induction of human γ interferon by Sarcophaga peregrina humoral lectin
EP0197149B1 (de) Verfahren zur gewinnung menschlichen leukozyten-interferons
Wislöff et al. Studies on the cytotoxic activity of human lymphoid cells activated by concanavalin A
EP0260497A2 (en) Lectin like protein substance having anti-tumor action
Astrup et al. Haemostatic mechanisms in the animal arterial wall
OHNISHI Interaction between adenosine triphosphate and potassium chloride-soluble proteins of sea urchin eggs
GB1253328A (en) PURIFICATION OF gamma GLOBULIN
DE4133707A1 (de) Verfahren zur reinigung von streptolysin o, intaktes streptolysin o erhaeltlich nach diesem verfahren und seine verwendung
AT391482B (de) Verfahren zur industriellen herstellung von hochreinem menschlichem leukozyteninterferon
JD Evidence that the L-asparaginase of guinea pig serum is responsible for its antilymphoma effects. I. Properties of the L-asparaginase of guinea pig serum in relation to those of the antilymphoma substance.
Reuter et al. Strain and sex dependency of pre-albumin in mice