SU1310425A1

SU1310425A1 - Способ получени селективной питательной среды без аденина или урацила,или лейцина

Info

Publication number: SU1310425A1
Application number: SU833611730A
Authority: SU
Inventors: Амин Ибрагимович Ибрагимов
Original assignee: Дагестанский Научно-Исследовательский Институт По Производству Питательных Сред
Priority date: 1983-06-27
Filing date: 1983-06-27
Publication date: 1987-05-15

Abstract

Изобретение относитс к области биотехнологии и конструировани микробиологических питательных сред. Дл получени минимальной питательной среды без аденина, урацила или лейцина на питательной среде, из состава которой нужно удалить или сни зить концентрацию определенного компонента , культивируют мутант дрожжей Saccharomyces cerevisiae, ауксотроф- ный по данному веществу. На среде с содержанием гидролизата кормовых дрожжей, содержащей аминный азот 3000 мг %, в течение 48 ч на качалке культивируют ауксотроф по аденину (р192-15В-П4). После этого центрифугированием удал ют биомассу ауксотро- фа, в культуральную жидкость добавл ют агар (25 г/л), глюкозу (15 г/л), среду раздел ют на две части и в одну часть добавл ют аденин (10 мкг/мл) стерилизуют, разливают по чашкам и производ т посевы прото- и ауксотроф- ных штаммов дрожжей (по 220+50 колоний на чашку) дл установлени селективности среды, полученной предлагаемым Способом. с (Л

Description

Изобретение относитс к биотехнологии и конструированию микробиологических питательных сред.

Способ заключаетс в том, что дл получени селективной среды дл изби- рательного культивировани прототрос)- ных клеток дрожжей Saccharomyces cerevisiae на питательной основе, из состава которой нужно удалить или снизить концентрацию определен- ного компонента, культивируют мутант дрожжей Saccharomyces cerevisiae аук- сотрофный по данному веществу.

Изобретение иллюстрируетс следующими примерами.

Пример 1. Дл удалени биотехнологическим способом аденина из состава гидролизата кормовых дрожжей (ГКД), полученного ферментативным

примен ют среду следующе20

25

30

гидролизом, го состава:

Жидкий гидролизат кормовых дрожжей (аминный азот 3000 мг%), мл .200

Глюкоза, г15

Дистиллированна вода, мг рН 5,0800

Среду стерилизуют при 0,5 атм в течение 30 мин.

На этой среде в течение 48 ч культивируют ауксотроф по аденину (штамм р192-15В-П4), Затем центрифугированием удал ют биомассу ауксотрофа, в культуральную жидкость добавл ют агар (25 г/л), глюкозу (15 г/л), среду раздел ют на две части и в одну часть добавл ют аденин (10 мкг/мп), стерилизуют, разливают по чаткам и производ т посевы прото- и ауксотроф- ных штаммов дрожжей (по 200+50 колоний на чашку) дл установлени селективности среды, полученной предлагаемым способом. Результаты приведены

в табл. 1. .

Пример 2, Удаление урацила .

Процедура получени культуральной жидкости без урацила така же, как и

35

45

Нужна степень очищени среды, т.е. селективности, достигаетс тем, что культивирование ауксотрофных кле ток ведетс до момента выхода криво го роста культуры на плато, что означает доступный дл данного ауксотрофа ресурс компонента (по которо му ауксотрофен данный штамм) в питательной основе исчерпан.

Предлагаемый способ очистки питательных основ позвол ет получать минимальные среды селективные по отношению к штаммам ауксотрофным по какому-то определенному биохимическому соединению.

Claims

Формула изобретени

Способ получени селективной пита тельной среды без аденина или урацила , или лейцина дл избирательного культивировани ауксотроф1« 1х клеток дрожжей Sacchoromyces cerevisiae, , отличающийс тем, что на питательной среде, содержащей гид ролизат биологического сырь с содер жанием аминного азота от 1500 до 3000 мг%, глюкозу и воду культивируют исходную культуру ауксотрофного по аденину или урацилу, или лейцину мутанта дрожжей Sacchoromyces cerevi siae до достижени стационарной фазы

в примере 1. Дл удалени урацила ис-50 роста с последующим отделением куль- пользуют ауксотроф по урацилу

туральной жидкости,

5

5

0

5

0

5

5

1Г-П188. Результаты приведены в табл. 2.

Пример 3. Удаление лейцина.

Процедура получени культуральной жидкости без лейцина така же, как и в примерах 1 и
2. Дл удалени лейцина используют штамм 7А-П192 ауксотрофный по лейцину. Результаты приведены в тйбл. 3.

Предлагаемый способ обеспечивает нужную глубину очистки питательной ос- основы от нежелательного компонента, т.е. отпадает необходимость в дополнительной проверке степени очищени среды сложными биохимическими или другими методами.

Нужна степень очищени среды, т.е. селективности, достигаетс тем, что культивирование ауксотрофных клеток ведетс до момента выхода кривого роста культуры на плато, что означает доступный дл данного ауксотрофа ресурс компонента (по которому ауксотрофен данный штамм) в питательной основе исчерпан.

Предлагаемый способ очистки питательных основ позвол ет получать минимальные среды селективные по отношению к штаммам ауксотрофным по какому-то определенному биохимическому соединению.

Формула изобретени

Способ получени селективной питательной среды без аденина или урацила , или лейцина дл избирательного культивировани ауксотроф1« 1х клеток дрожжей Sacchoromyces cerevisiae, , отличающийс тем, что на питательной среде, содержащей гид- ролизат биологического сырь с содержанием аминного азота от 1500 до 3000 мг%, глюкозу и воду культивируют исходную культуру ауксотрофного по аденину или урацилу, или лейцину мутанта дрожжей Sacchoromyces cerevisiae до достижени стационарной фазы

0 роста с последующим отделением куль-

роста с последующим

туральной жидкости,

15B-IT4 (прототроф)

+1.5-2,0

р192-15В-П4 (ауксотроф

по аденину)

1Г-П188.(ауксотроф

по урацилу)

7A-II192 (ауксотроф по лейцину)

Примечание. (+)

(-) (2,0)

Штаммы Saccharomyces cerevisiae

15В-П4 1Г-П188 р192-15В-П4 7А-П192

Штаммы

Saccharomyces cerevisiae

15В-П4 7А-П192 р192-15В-П4 1Г-П188

ВНИИПИ Заказ 1866/25

Произв.-полигр. пр-тие, г. Ужгород, ул. Проектна , 4

Т а б л и ц а 1

1-,0-1,5 +1,5-2,0

-0,0

+1,0-1,5

+ 1,0

+1,0-1,5

+ 1,0

+1,0-1,5

Наличие роста. Отсутствие роста. Диаметр колоний, мм

Таблица 2

онтроль

Среда без урацила, полученна предлагаемым способом

Среда без урацила, полученна предлагаемым способом + + урацил

,0

+1,0-1,5 -0,0 + 1,0 + 1,0

+1,5-2,0 +1,0-1,5 +1,0-1,5 +1,0-1,5

Таблица

онтроль

Среда без лейцина, полученна предлагаемым способом

Среда без лейцина, полученна предлагаемым Способом + + лейцин

+1,5-2,0 +1,0-1,5 +1,5-2,0 +1,5 -0,0 +1,0-1,5 +1,5 +1,0 +1,0-1,5

+ 1,5

+ 1 ,0

- лО- А

Тираж 500 Подписное